tema 25. conjugación pilus pelo f o pelo sexual proceso unidireccional (hayes, 1953) donadora o...

Tema 25. Conjugación

piluspelo Fo pelo sexual

proceso unidireccional (Hayes, 1953)

donadorao macho

receptorao hembra

pelos o fimbrias

25. Conjugación• Conjugación: descubrimiento y el proceso

• Factor F o factor de fertilidad: tipos sexuales

• Tipos de conjugación:

F+ X F-, Hfr X F-, F’ X F-

• Mapa genético por conjugación interrumpida- mapa circular - distintas estirpes Hfr

• Mapa de ligamiento

conjugación

Lederberg y Tatum, 1946 (P. Nobel 1958)

108 células

pasa el mediopasan moléculasno pasan células

tubo en U

no nutrición cruzadano transformación (1944)

pareja específica pareja efectiva

Factor F (Hayes): - independiente de marcadores cromosómicos (se pierde y se transfiere en mayor proporción)- no un gen con dos alelos (aumentan F+ en función del tiempo)- F es un plásmido: círculo de DNA de doble cadena con replicación independiente del cromosoma

factor F o factor de fertilidadinserción

en el cromosoma

replicación

transferencia

sfa parte de F en cromosoma(afines al factor sexual)

5’

donadora receptora

F+ X F-

puente deconjugación

F+ pasa a Hfr

1/1000 células F+ pasan a ser Hfr

Hfr: alta frecuencia de recombinación (Cavalli-Sforza, 1950)

inserción de F: F+ pasa a Hfr

¡un únicosobrecruzamiento!

Hfr X F-

dossobrecruzamientos

recombinación homólogano recíproca

frecuencia de transferencia de material genético en conjugación

F+ X F+ o F+ X Hfr: no hay contacto

F+ X F- => genera un F+ (1/5) y baja recombinación (1/107)

Hfr (1/103) X F- => receptora F- y alta tasa de recombinación (1/104)

Hfr genera un F’

excisión: Hfr genera un F’

puede generarse también una estirpe sfa

F’ X F-

merodiploide o merocigoto o diploide parcial

Proceso: sexducción o F-ducción

Regulación génica: dominancia/recesividad en células n, cis/trans Cartografiado: dos genes en un F’, es porque están juntos en cromosoma

Mapa genéticopor gradiente de transferencia(conjugacióno apareamiento interrumpido,Jacob y Wollman1955)

a mayor tiempoentran marcadores(genes) nuevos

transferenciasecuencialy linealde genes de Hfr a F-

La conjugación es un proceso de transferencia de material genéticounidireccional y orientada

gradiente de transferencia

porcentajemáximo

mapa circular (Jacob y Wollman, 1957)

orden relativo de genes siempre igual

distintas estirpes Hfr

difieren en el lugar y orientación de la inserción de F(distinto origen y dirección de transferencia)

mapa genéticode E. coli

por conjugación interrumpida,

1963

hoy 100 min

Mapa de ligamiento: análisis de la frecuencia de recombinación

selección de Leu+ (marcador tardío) y entre estos determinar los diferentes tipos de recombinantes

ejemplo: problema 8.9

5% -> 5 um leu-arg

5% -> 5 um arg-met

≈90%

≈0,25%

a----------------b-c ó a ----------------c-b ???

orden de los genes

determinación del orden de genes cercanos:a partir de frecuencias relativas de recombinantes

en cruzamientos recíprocos

1. Partimos de dos estirpes: a+b+c- y a-b-c+2. Cruzamientos recíprocos, con ambas opciones (a-bc y a-cb)3. Determinar recombinantes a+b+c+4. Orden en función del número de recombinantes obtenidos

en los dos cruzamientos recíprocos

ejemplo: problema 8.7

aprox. 1h de clase

problemas

capítulo 8

problemas: 7-13