seminÁrio:
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SEMINÁRIO:
TRÁFEGO DE MEMBRANAS E ACIDIFICAÇÃO VESICULAR EM JUNÇÃO
NEUROMUSCULAR DE RÃ
Aluna: Luciana Ferreira Leite
Orientadora: Profª. Dra. Cristina Guatimosim Fonseca
Laboratório de Biologia da Neurotransmissão
ASPECTOS BÁSICOS DA NEUROTRANSMISSÃO
http://academic.wsc.edu/faculty/jatodd1/351/ch6outline.html
Ca++
ASPECTOS BÁSICOS DA NEUROTRANSMISSÃO
Abreu, B.J.
ASPECTOS BÁSICOS DA NEUROTRANSMISSÃO
http://www.standford.edu/group/Urchin/GIFS/exocyt.gifhttp://thalamus.wustl.edu/nonetlab/ResearchF/svcycle.html
ASPECTOS BÁSICOS DA NEUROTRANSMISSÃO
http://www.erin.utoronto.ca/~w3bio315/RME.htm
http://www.neuro.ki.se/molsyn/Brodin_home.html
?Cl-
ADP+Pi
2H+
ATP
Acetilcolina2H+
Acetilcolina
∆pH
∆Ψ
2H+
+ +++
---
-
7.4 6.8
TRANSPORTE DE ACETILCOLINA EM TRANSPORTE DE ACETILCOLINA EM VESÍCULAS SINÁPTICASVESÍCULAS SINÁPTICAS
∆∆μμH+ = H+ = ∆pH + ∆Ψ
Abreu, B.J. Adaptado de Ozkan & Ueda, 19982H+
VAChT
VH+-ATPase
+ Positivehead
Lypophilic tail
bridges
FM1-43 STAINING
Abreu, B.J.
FM1-43 STAINING
Marcação com estímulo elétrico de 20Hz por 10 min
FM1-43 STAINING
Marcação com estímulo elétrico de 20Hz por 10 min
FM1-43 DESTAINING
Abreu, B.J.
FM1-43 DESTAINING
Marcação com estímulo elétrico de 20Hz por 10 min
Desmarcação com estímulo elétrico de 20Hz por 10 min
A RECICLAGEM DE
VESÍCULAS COM
CONTEÚDO QUANTAL
REDUZIDO É NORMAL?
?Cl-
ADP+Pi
2H+
ATP
Acetilcolina2H+
Acetilcolina
∆pH
∆Ψ
2H+
+ +++
---
-
7.4 6.8∆∆μμH+ = H+ = ∆pH + ∆Ψ
Abreu, B.J. Adaptado de Ozkan & Ueda, 19982H+
VAChT
VH+-ATPase
NH4Cl: DEPLEÇÃO DO GRADIENTE ACÍDICO
RESULTADOS COM NH4Cl: MARCAÇÃO
Marcação Controle Marcação Teste
Comparação da Marcação de Controles e Testes(Cloreto de Amônio)
Flu
ore
scên
cia
0
50
100
150
200
250
ControleTeste(Cloreto de Amônio)
Controle: n = 46 spots/ 11 terminaçõesTeste: n = 26 spots/ 7 terminações
RESULTADOS COM NH4Cl: MARCAÇÃO
CONSIDERAÇÕES FINAIS:
Ciclo de Vesículas com conteúdo quantal reduzido
Perspectivas
?Cl-
ADP+Pi
2H+
ATP
Acetilcolina2H+
Acetilcolina
∆pH
∆Ψ
2H+
+ +++
---
-
7.4 6.8
VESAMICOL: INIBIÇÃO DO TRANSPORTE DE VESAMICOL: INIBIÇÃO DO TRANSPORTE DE ACETILCOLINAACETILCOLINA
∆∆μμH+ = H+ = ∆pH + ∆Ψ
Abreu, B.J. Adaptado de Ozkan & Ueda, 19982H+
VAChT
VH+-ATPase
OBRIGADA PELA
ATENÇÃO!
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