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Obtención de mandarinos triploides sin semillas

L. NavarroCentro de Protección Vegetal y Biotecnología

Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias (IVIA) Instituto Valenciano de Investigaciones

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

SEPTIEMBRE OCTUBRE NOVIEMBRE DICIEMBRE ENERO FEBRERO MARZO ABRIL MAYO10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30

Fuente: Bono, R., Soler, J., Buj, A.

FORTUNEORTANIQUE

NADORCOTTMONCADA

HERNANDINA-CLTARDELLENDALE

TOMATERAFINA

NOVANOUR

CLAUSELLINACULTIFORTOROGROS

MARISOL

LORETINACAPOLA

IWASAKIBASOLCLEMENRUBI

OKITSU

NULESSIN

ARRUFATINA

ORONULESCLEMENPONS

SATSUMA OWARI

BEATRIZESBAL

OROVALCLEMENULES (OROGRANDE)

Periodos de recolección de mandarinos

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

Ventajas de los híbridos triploides

Las plantas triploides tienen muybaja fertilidad y generalmente no producen semillas ni inducen la formación de semillas en otras

variedades por polinización cruzada

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Hibridación convencional

X

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

Obtención de triploides

X

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

Obtención de triploides

X

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

Obtención de triploides

X

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

Problemas para obtener poblaciones elevadas de triploides

Obtención de plantas a partir de semillas abortadas

Análisis del nivel de ploidía de las plantas regeneradas

Inexistencia de parentales tetraploides de alta calidad

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Rescate de embrionesI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIASSemillas con embriones

triploides

Análisis de ploidía por citometría de flujo

Pico 1: Diploide

Pico 2: Triploide

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Pico 1: Diploide

Pico 2: Tetraploide

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Obtención de plantas autotetraploides estables de variedades poliembriónicas

Parentales masculinos tetraploides obtenidos

AnanaAfourerFairchildKaraKinnowMapoMinneolaMurcott

OrtaniquePageSunburstTardivo de CiaculliSanguinelliDuncanStar Ruby

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Obtención de plantas autotetraploides estables de variedades monoembriónicas

Microinjerto de 2 semanasAplicación de unagota de solución decolchicina al 0.1%

Clemenulesautotetraploide

estable

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Parentales femeninos tetraploides obtenidos

ClemenulesFinaMarisolMoncada

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Eficiencia de los métodos para obtenerhíbridos triploides de cítricos

2.74x X 2x

0.92x X 4x

0.12x X 2x

Nº plantas triploides por flor polinizadaCruzamientos

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Programa de triploides del IVIA

Obtención y evaluación de variedades triploides

Año 0: Polinización, cultivo embrionesAño 1: Análisis ploidía, trasplante a invernaderoAño 2: Injerto en campoAños 4 a 7: Inicio evaluación preliminar en el árbol originalAños 7-10: Inicio evaluación secundaria (sobreinjerto dos árboles en IVIA)Años 10- : Saneamiento y experimentación a gran escala

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Híbridos obtenidosCruzamientos 2x X 2x : más de 4.000

Parentales femeninosFortuneClemenulesHernandinaMarisolFinaMonrealBrunoGuillerminaLoretinaOrograndeSoymaTomateraEllendaleEncoreWilking

Parentales masculinosFortune ChandlerNova Kara Murcott DaisyM. Común SatsumaEllendale ValenciaAfourer Tangelo OrlandoOrtanique Tangelo Minneola HernandinaFinaClemenulesLoretinaFreemontN. Comuna

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Híbridos obtenidosCruzamientos 2x X 4x : más de 3.400

Parentales femeninosClemenulesHernandinaFinaMarisolBrunoTomateraMoncadaFortuneEllendale

Parentales masculinosTangelo OrlandoNaranjo PineappleNovaMandarino comúnMoncada

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

Híbridos obtenidosCruzamientos 4x X 2x : más de 3.000

Parentales femeninosClemenulesMarisolFina

Parentales masculinosAfourerMurcottSatsumaKaraRio RedMoncadaIokanAnanaEllendaleM. ComúnPummelo PinkI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

Más de 10.500 híbridos de 190 combinaciones parentales disponibles para evaluar

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Floración triploides

88.24

74.93

22.22

0.31

% de híbridos con flores

Años desde plantación en campo (2 años después de la

polinización)

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Triploides Clemenules 2n x Orlando tangelo 4n

Triploides Fortune 2n x mandarino Común 2n

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Mandarino Garbí (IVIA-Tri-1)ForMur 96-081

Parental femenino: Fortune diploideParental masculino: Murcott diploidePolinización : Abril 1996Plantación: Septiembre 1998Sobreinjerto: Abril 2004Primera floración: 2002Evaluación fruta: 2004-2008

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

Mandarino Garbí (IVIA-Tri-1)ForMur 96-081

Características del frutoÉpoca maduración óptima: 2ª-3ª semana de

MarzoCalibre: 65-75 mmEspesor de la corteza: 2.5 mmÍndice de color: 15Acidez: 19.2 g/lAzucares: 18º BrixÍndice de madurez: 9.4Zumo: 48%Semillas: 0-0.1 por fruto

No se han observado síntomas de Alternaria

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

Mandarino Garbí (IVIA-Tri-1)ForMur 96-081

Datos de cata frutosFruto atractivoFacilidad de pelado aceptableAroma de aceites esenciales agradableTextura pulpa fundenteResiduo gajo escasoValoración organoléptica buena

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

IVIA-Tri-1ForMur 96-081

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIASMandarino GarbíFortune Murcott

Mandarino Garbí (IVIA-Tri-1)ForMur 96-081

Características del árbolÁrbol vigoroso, con hojas grandes,

crecimiento erecto y buena compatibilidad con citrange Carrizo

Aparentemente con buena producción y sin vecería

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

Árbol madre

1999-2000 2000-2001 2001-2002 2002-2003 2003-2004 2004-2005 2005-2006 2006-2007 2007-2008

Floración Fructif icación

Abundant e

Int e rmedia

Esca sa

Nula

Mandarino Garbí (IVIA-Tri-1)

837.2888.21292230

% nudos

Long(mm)

% nudos

Long(mm)

Long(mm)

Long(mm)

Long(mm)

Long(mm)

Octubre 2008Octubre 2006Octubre 2005

Nov 2004

Octubre 2003Primeras

Evolución espinosidad ultimas brotaciones árbol madre

Mandarino Garbí (IVIA-Tri-1)Características del árbol

El 90% de los nudos de la última brotación de los árbolesde 2ª evaluación tienen espinas de una media de 5 mm de longitud

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

Mandarino Garbí (IVIA-Tri-1)

Mandarino Garbí (IVIA-Tri-1)

Mandarino Safor (IVIA-Tri-2)ForKar 96-037

Parental femenino: Fortune diploideParental masculino: Kara diploidePolinización : Abril 1996Plantación: Abril 1998Sobreinjerto: Abril 2004Primera floración: 2001Evaluación fruta: 2002-2008

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Mandarino Safor (IVIA-Tri-2) Características del fruto

Época maduración óptima: Finales febrero a principios de marzo

Calibre: 60-65 mmEspesor de la corteza: 2.6 mmÍndice de color: 18Acidez: 16.6 g/lAzucares: 16º BrixÍndice de madurez: 9.6Zumo: 52%Semillas: 0-0.05 por fruto

No se han observado síntomas de Alternaria

Mandarino Safor (IVIA-Tri-2)Datos de cata frutos

Fruto de color intenso atractivoFacilidad de pelado aceptableTextura pulpa fundenteSin residuo de gajoValoración organoléptica buena

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

Mandarino SaforFortune Kara

Mandarino Safor (IVIA-Tri-2)Características del árbol

Árbol vigoroso, con hojas grandes, crecimiento llorón y buena compatibilidad con citrange Carrizo

Aparentemente con buena producción y sin vecería

Árbol madre

1999-2000 2000-2001 2001-2002 2002-2003 2003-2004 2004-2005 2005-2006 2006-2007 2007-2008

Floración Fructif icación

Abundant e

Int e rmedia

Esca sa

Nula

Mandarino Safor (IVIA-Tri-2)

63.4203781116

% nudos

Long(mm)

% nudos

Long(mm)

Long(mm)

Long(mm)

Long(mm)

Long(mm)

Octubre 2008Octubre 2006Octubre 2005

Nov 2004

Octubre 2003Primeras

Evolución espinosidad ultimas brotaciones árbol madre

Mandarino Safor (IVIA-Tri-2)Características del árbol

El 8% de los nudos de la última brotación de los árbolesde 2ª evaluación tienen espinas de una media de 4 mm de longitud

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

Mandarino Safor (IVIA-Tri-2)

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

Mandarino Safor (IVIA-Tri-2)

AVASA Pri-43ForEll 96-058

Parental femenino: Fortune diploideParental masculino: Ellendale diploidePolinización : Abril 1996Plantación: Septiembre 1998Sobreinjerto: Mayo 2002Primera floración: 2001Evaluación fruta: 2002-2008

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

AVASA Pri-43 ForEll 96-058Características del fruto

Época maduración óptima: Finales de marzoCalibre: 60-70 mmEspesor de la corteza: 3.8 mmÍndice de color: 15Acidez: 20.5 g/lAzucares: 16º BrixÍndice de madurez: 7.8Zumo: 49%Semillas: 0-0.5 por fruto

Se han observado síntomas de Alternaria muy leves en cuatro frutos de 891 analizados (0.45%)

AVASA Pri-43 ForEll 96-058

Datos de cata frutosFruto atractivoFacilidad de pelado aceptableAroma aceites esenciales agradableTextura pulpa fundenteResiduo de gajo escasoValoración organoléptica buena

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

AVASA Pri-43Fortune Ellendale

1999-2000 2000-2001 2001-2002 2002-2003 2003-2004 2004-2005 2005-2006 2006-2007 2007-2008

Floración Fructif icación

Abundant e

Int e rmedia

Esca sa

Nula

AVASA Pri-43 ForEll 96-058Características del árbol

Árbol de vigor medio, crecimiento abierto y buena compatibilidad con citrange Carrizo

Aparentemente con buena producción y sin vecería

Árbol madre

AVASA Pri-43 ForEll 96-058

005231062020

% nudos

Long(mm)

% nudos

Long(mm)

Long(mm)

Long(mm)

Long(mm)

Long(mm)

Octubre 2008Octubre 2006Octubre 2005

Nov 2004

Octubre 2003Primeras

Evolución espinosidad ultimas brotaciones árbol madre

AVASA Pri-43 ForEll 96-058Características del árbol

Las ramas de la última brotación de los árboles de 2ª evaluación no tienen espinas

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

AVASA Pri-43 ForEll 96-058

AVASA Pri-43 ForEll 96-058

Comparación híbridos triploides disponibles

Ninguna8%, 4 mm90%, 5mmEspinas ramas terminalesAbiertoLlorónErectoCrecimiento árbol0-0.50-0.050-0.1Semillas por fruto

495248Zumo (%)60-7060-6565-75Calibre (mm)

Med. Feb-Med. Abril

Feb-Med. AbrilMed. Feb-Fin Abril

Periodo recolección7.89.69.4Índice maduración151618Azucares (º Brix)

20.516.619.2Acidez (g/l)151815Índice color

4ª Marzo4ª Feb-1ª Mar.2ª-3ª MarzoÉpoca optima maduración2002-20082002-20082004-2008Evaluación fruta

AVASA Pri-43SaforGarbí

SEPTIEMBRE OCTUBRE NOVIEMBRE DICIEMBRE ENERO FEBRERO MARZO ABRIL MAYO10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30

HERNANDINA-CLTARDELLENDALE

FORTUNEORTANIQUE

SAFORAVASA PRI-43

GARBÍ

GOLD NUGGETNOUR

NADORCOTTMONCADA

TOMATERAFINA

KIYOMINOVA

BEATRIZESBAL

OROVALCLEMENULES (OROGRANDE) - NULESSIN

CLAUSELLINACULTIFORTOROGROS

MARISOL

LORETINACAPOLA

IWASAKIBASOL

CLEMENRUBIOKITSU

ARRUFATINA

ORONULES

CLEMENPONSSATSUMA OWARI

PRIMOSOLE

SATSUMASCLEMENTINAS

HÍBRIDOSHÍBRIDOS TRIPLOIDES

Periodos de recolección de mandarinos

SEPTIEMBRE OCTUBRE NOVIEMBRE DICIEMBRE ENERO FEBRERO MARZO ABRIL MAYO10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30

IVIA TRI-5IVIA TRI-6

AVASA PRI-44

SAFORAVASA PRI-43

GARBÍ

AVASA PRI-46AVASA PRI-47

IVIA TRI-8AVASA PRI-48

IVIA TRI-3AVASA PRI-49

IVIA TRI-4IVIA TRI-7

Periodo de recolección de triploides seleccionados

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Identificación por marcadores moleculares

I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS

162 nt164 nt

160 nt

170 nt

Clemenules 2x

3x

Nul X OrlT3x

Nul X OrlT

3x

Fin X OrlT

3x

Fin X OrlT

Orlando 4x

Grupo de investigación sobre triploides del IVIADirección y Coordinación: L. NavarroPolinizaciones, cultivo in vitro: J. Juárez, P. Aleza,

C. Ortega, A. Navarro, M. Hernández, V. Ortega, J. M. Arregui, C. Martí

Caracterización molecular: P. AlezaCultivo invernadero y campo: J. A. Pina, J.F.

Ballester, P. Aleza, R. Montalt, D. Conchilla, F. Ahuir, R. López, A. Conchilla, J.D. Peris, F.J. Martí

Saneamiento: J. Juárez, P. Aleza, M.C. Vives, J. A. Pina

Evaluación: J. Cuenca, P. Aleza, M. Hernández, C. Ortega, V. Ortega, Panel catadores (J.M. Julve)