genética de populações de peixes migratórios da bacia do rio grande orientador: evanguedes...

Genética de Populações de peixes migratórios da bacia do Rio Grande

Orientador: Evanguedes KalapothakisAluno: Artur Botelho Veloso

Instituto de Ciências BiológicasDepartamento de Biologia Geral

Laboratório de Biotecnologia e Marcadores Moleculares

1 2 3 4 5 6

TH01

CSFPO

Linhas de pesquisa do laboratório

Laboratório de Biotecnologia e Marcadores

Moleculares

Laboratório de Biotecnologia e Marcadores Moleculares

DNA repetitivo:• Taxa de renaturação

elevada• Composição

nucleotídica diferente

• Muito susceptível a erros de alinhamento

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Separação desigual• Gradiente de CsCl = 1,660 + 0,00098 (% G•C)

g/cm3

• Picos – diferenças no conteúdo GC

• Satélites crípticos

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DNA satélite nos cromossomos• Hibridização in situ• Sondas radioativas

• Heterocromatina• Centrômeros

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Mapeamento genético• Loci multivariáveis

• Taxa de mutação 10X maior

• Estudos de genética de populações

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Bacias Hidrográficas de Minas Gerais

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FURNAS• 51% dos

domicílios• 61% do PIB• 12% da energia• 10 hidrelétricas• 2 termoelétricas

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Bacia do Rio Grande• 60% em MG• 67% da energia de

MG• 12 UHE

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Problemas

• Barragens Artificiais X Barragens Naturais

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Peixamentos

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Objetivo Geral:• Encontrar loci de microssatélites e utilizá-los em

estudos de populações de peixes de piracema da bacia do Rio Grande.

DouradoSalminus maxillosus

MandiPimelodus macultus

Curimba

Prochilodus lineatus

Jaú

Paulicea luetkeni

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Objetivo específico• Encontrar regiões de microssatélites em

Prochilodus lineatus

Curimba

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Materiais e Métodos• Biblioteca genômica• Sau3AI• Fragmentos: 500pb

CA(12)

TC(13)

CTT(9)

ACGA(6)

TA(12)

GGA(7) AAAG(6)

TATC(7)

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Seleção das colônias

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Seqüenciamento dos microssatélites• M 13-20: 5’ GTAAAACGACGGCCAGT 3’• M 13 VER:5’ GGAAACAGCTATGACCATG 3’

Laboratório de Evolução e Diversidade Molecular

Laboratório de Biotecnologia e Marcadores Moleculares

Eletroforese• Desenho dos primers• Padronização da PCR• Padronização do gel(acrilamida 6,5% ou 10%)• Construção de escada

alélica

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Resultados prévios• 32 clones seqüenciados• 7 regiões de microssatélites• 2 regiões foram usadas em estudos populacionais• 11 clones sem seqüências repetitivas

Laboratório de Biotecnologia e Marcadores Moleculares

Resultados prévios• AMOVA das populações

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Perspectivas• Padronização de novos loci de microssatélites• Utilização de mtDNA• Estudo de outras espécies