coloraÇÃo de gram

COLORAÇÃO DE COLORAÇÃO DE GRAMGRAM

HISTÓRICOHISTÓRICO

• 1884, HANS CRISTIAN GRAM, DESCOBRUI QUE AS BACTÉRIAS PODIAM SER DIVIDIDAS EM DOIS GRANDES GRUPOS, PARTINDO DA CAPACIDADE QUE TÊM AS CÉLULAS CORADAS DE RESISTITEM OU NÃO A UMA DESCOLORAÇÃO PELO ÁLCOOL.

•ESSA AÇÃO, PROVAVELMENTE, OCORRE PELA MAIOR QUANTIDADE DE LIPÍDIOS NA PARADE CELULAR DAS BACTÉRIAS.

•A PAREDE DA CÉLULA GRAM NEGATIVA TÊM UM CONTEÚDO LIPÍDICO MAIS ELEVADO QUE AS CÉLULAS GRAM POSITIVAS.

FINALIDADEFINALIDADE

É UM MÉTODO USADO PARA DIFERENCIAR AS BACTÉRIAS:

• GRA-POSITIVA

• GRAM-NEGATIVAS

ESTRUTURA ESTRUTURA BACTERIANABACTERIANA

ESTRUTURA BACTERIANAESTRUTURA BACTERIANA

ESTRUTURA GRAM POSITIVAESTRUTURA GRAM POSITIVA

ESTRUTURA GRAM POSITIVAESTRUTURA GRAM POSITIVA

ESTRUTURA GRAM ESTRUTURA GRAM POSITIVAPOSITIVA

ESTRUTURA GRAM NEGATIVAESTRUTURA GRAM NEGATIVA

ESTRUTURA GRAM ESTRUTURA GRAM NEGATIVANEGATIVA

ESTRUTURA GRAM ESTRUTURA GRAM NEGATIVANEGATIVA

DIFERENÇA ENTRE GRAM POSITIVA E DIFERENÇA ENTRE GRAM POSITIVA E GRAM NEGATIVAGRAM NEGATIVA

CORANTES E REAGENTESCORANTES E REAGENTES

CRISTAL VIOLETA (VIOLETA DE METILA).

LUGOL.

ÁLCOOL.

SAFRANINA.

MÉTODO DA MÉTODO DA COLORAÇÃO DE COLORAÇÃO DE

GRAMGRAM

COLORAÇÃO PRIMÁRIACOLORAÇÃO PRIMÁRIA

ESFREGAÇO FIXADO COM SOLUÇÃO SOLUÇÃO DE CRISTAL VIOLETADE CRISTAL VIOLETA DURANTE 1 MINUTO.

LAVAR COM ÁGUA CORRENTE.

AS CÉLULAS NESTE ESTÁGIO ADQUIREM TONALIDADE AZUL-ESCURA OU PÚRPURA.

MORDENTEMORDENTE

ESFREGAÇO É COBERTO POR UMA SOLUÇÃO DE IODOSOLUÇÃO DE IODO.

CRISTAL VIOLETA É FIXADO À CÉLULA PELO MORDENTE.

COMPLEXO VIOLETA-IODO É FORTEMENTE RETIDO POR UM GRUPO DE BACTÉRIAS.

DESCOLORAÇÃODESCOLORAÇÃO

APLICAR ÁLCOOL ETILÍCOÁLCOOL ETILÍCO NO ESFREGAÇO.

A FUNÇÃO DO ÁLCOOL É DESIDRATAR OS CARBOITRADOS EXISTENTES NA PAREDE CELULAR DE BACTÉRIAS GRAM-POSITIVAS, RETENDO O CORANTE PRIMÁRIO.

AS GRAM-NEGATIVAS, ATRAVÉS DA DISSOLUÇÃO DOS LIPÍDIOS, TÊM A POROSIDADE OU PERMEABILIDADE DA PAREDE CELULAR AUMENTADA, EVITANDO QUE O COMPLEXO CORANTE SEJA RETIDO.

CONTRASTECONTRASTE

FUCSINA DILUÍDA OU SAFRANINAFUCSINA DILUÍDA OU SAFRANINA CONSTITUI O CORANTE SECUNDÁRIO.

SE AS CÉLULAS PERMITEM O DESCORAMENTO PELO ÁLCCOL, ELAS FIXAM O CORANTE SECUNDÁRIO NESTA SEGUNDA ETAPA.

COLORAÇÃO DAS BACTÉRIAS DE ROXO: GRAM-POSITIVAS.

COLORAÇÃO DAS BACTÉRIAS DE VERMELHO: GRAM-NEGATIVAS.

PASSOS PARA COLORAÇÃO DE PASSOS PARA COLORAÇÃO DE GRAMGRAM

RESULTADOSRESULTADOS

RESULTADORESULTADO

RESULTADORESULTADO

PRANCHAS PRANCHAS COLORIDASCOLORIDAS

GRAM POSITIVASGRAM POSITIVAS

GRAM NEGATIVASGRAM NEGATIVAS

CLASSIFICAÇÃO CLASSIFICAÇÃO DAS BACTÉRIASDAS BACTÉRIAS

AERÓBIOSAERÓBIOS

1) COCOS

GRAM-POSITIVOS: Staphylococcus, Streptococcus.

GRAM-NEGATIVOS: Neisseria.

2) BACILOS

GRAM-POSITIVOS: Corynebacterium, Lactobacillus, Listeria,etc.

GRAM-NEGATIVOS: Enterobactérias (Escherichia, Proteus, Klebsiella, Salmonella, Shigella), Pseudomonas, Bordetella, Haemophilus, etc.

ANAERÓBIOSANAERÓBIOS

1) COCOS

GRAM-POSITIVOS: Peptococcus, etc.

GRAM-NEGATIVOS: Veilonella, etc.

2)BACILOS

GRAM-POSITIVOS: Clostridium, etc.

GRAM-NEGATIVOS: Bacteroides, etc.

OBSERVAÇÃOOBSERVAÇÃO

REGRA GERAL:REGRA GERAL:

OS COCOS, COM EXCEÇÃO DA Neisseria, SÃO GERALMENTE GRAM (+).

OS BASTONETES, COM EXCEÇÃO DAS CORINEBACTÉRIAS, Listeria, Bacillus E CLOSTRÍDIOS, GRAM (-).

BIBLIOGRAFIABIBLIOGRAFIAANTUNES, G.S. MANUAL DE DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO. 2ªEDIÇÃO, PORTO ALEGRE, EDITORA UNIVERSIDADE/UFRGS, 1995.

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VALLADA, E.P. MANUAL DE COPROCULTURA. 2ª EDIÇÃO, SÃOPAULO, EDITORA ATHENEU, 1996.