canaletas 1 & 2 visíveis (seria pellet e raw extract?) 50 kda bate com banda no sds page?...

Canaletas 1 & 2 visíveis (seria pellet e raw extract?)

50 kDa

Bate com banda no SDS PAGE? Membrana grupo 2/3

(marcada)

Luz normal

quimioluminescência

Grupos 4,5

Grupos 2,3

P S F E PM P S F E

P, fração pellet, S, sobrenadante clarificado, F, sobrenadante após coluna , E, eluição fração 2 de 5

Resultado PCR amplificação arginase

PM 1 2 3 4 5

570

23002100

? Duas bandas?

107Primer-dimer

PM 1 2 neg

1: ~0,2 ug gDNA 3D72: 0,1 ug cDNA 14 h trofozoitasNeg: controle sem template

926487255

170/157

10755

PM: pcDNA3 Rsa1/Bgl2-EcoR1 digest

Teste realtime PCR-oligos arginase (amplicon de 80 nt)

Resultados arginase transcripts o-o

Resultados crús

Melting curve – curva de dissociação

4500

24181688926

487

12 Minipreps pASK/IBA3 arginase H218A, digestão com Nae3

PM * 1 2 3 4 5 6 7 8

9 10 11 12 PMGel de TAE agarose 1%PM: digestão pcDNA3 Rsa1/EcoR1-Bgl2 *É um dos plasmídeos sem enzima de restrição Nae3Note que o tampão HB1 acidentalmente não continha RNAse A.

Não tenho foto de um gel dos clones pASK/IBA3 com arginase wildtype clonado