anÁlise bioquÍmica de enzimas. enzimas presentes em todos os tecidos proteínas catalisadoras de...

ANÁLISE BIOQUÍMICA DE

ENZIMAS

ENZIMAS

Presentes em todos os tecidos Proteínas catalisadoras de reações químicas Especificidade quanto ao substrato e efeito Enzimas no soro:

função definida no soro (cascata de coagulação) constituintes celulares (lesão ou estresse – aumento da permeabilidade da membrana) produzidas nas células e secretadas (trato gastrintestinal)

ENZIMAS Elevação sérica:

aumento da permeabilidade da membrana (lesão celular ou necrose) aumento da síntese intracelular grau e extensão da lesão

ISOENZIMAS

Enzimas com estruturas diferentes mas com mesma função. Tecidos diferentes (indica local da lesão)

ENZIMAS ESPECÍFICAS

FOSFATASE ALCALINA

Fígado, osso, placenta e intestino. Elevação:

hepatopatias (tumores, hepatite viral, cirrose) doenças ósseas (aumento da atividade osteoblástica): raquitismo, osteomalacia, tumores, consolidação de fraturas gestantes (fisiológico)

Diminuição: hipofosfatemia (erro inato do metabolismo) má nutrição

FOSFATASE ÁCIDA

Próstata, eritrócitos, plaquetas, ossos (osteoblastose) Elevação:

carcinoma de próstata com metástase hemólise doenças ósseas cânceres com metástase óssea (mama, pulmão)

γ-GLUTAMIL TRANSFERASE (γGT)

Presente na membrana celular e retículo endoplasmático Rins, fígado e pâncreas: ricos em γGT Doença hepatobiliar Alcoolismo Usuários de drogas

AMINOTRANSFERASES

Interconversão de metabólitos de carboidratos. Vias catabólicas de proteínas Aspartato aminotransferase (AST ou TGO) Alanino aminotransferase (ALT ou TGP)

TRANSAMINAÇÃO

ASPARTATO AMINOTRANSFERASE (AST)

Transaminase glutâmica oxaloacética: TGO Coração > fígado > músculo esquelético > rins > cérebro > pâncreas > baço > pulmão > soro Elevação:

infarto do miocárdio (IM): valores aumentam 4 a 10 vezes após 12 h (pico após 48h) arritmias cardíacas, insuficiência cardíaca, pós-cirurgia e cateterismo recorrência e extensão do infarto

Hepatopatias: hepatite cirrose tumores

Infarto pulmonar (discreto a moderado) Músculo esquelético:

inflamação ou destruição distrofia muscular

Pancreatite aguda (associada com hepatopatia) Diminuição: gravidez

ALANINA AMINOTRANSFERASE (ALT)

Transaminase glutâmica pirúvica (TGP) Não está presente no IM Doença hepatocelular

DESIDROGENASE LÁTICA

Catalisa a oxidação reversível do lactato em piruvato. Amplamente distribuída: miocárdio, rins, fígado e músculos. IM e disfunções hepáticas

Valores mais elevados: anemia megaloblástica (DL1 e DL2)

grande número de megaloblastos destruição intramedular dessas células

Anemias hemolíticas: níveis elevados variados Infarto pulmonar Leucemia, linfoma Hodgkin, metástases (hepáticas), tumores abdominais e pulmonares (DL5) Hepatopatia (DL4 e DL5):

lesões invasivas (mais elevados) hepatite viralcirrose

Distúrbios musculares: distrofia muscular e abstinência IM: 24 h após o início com pico após 72h (DL1 e DL2)

CREATINO CINASE

Creatino fosfocinase Catalisa a reação de fosforilação da creatina Músculo esquelético e miocárdio Cérebro, pulmão e intestino Não é encontrada no fígado

Elevação: IM (24h após), crise de abstinência, distrofia muscular, miopatia alcoólica injeção intramuscular pós-operatório exercício físico traumatismo craniano

Isoenzimas CK: MM: músculo esquelético (99%) e cardíaco BB: cérebro MB: músculo cardíaco (20%)

ENZIMAS PANCREÁTICAS

Pâncreas (forma P) e glândulas salivares (forma S) Hidrolisa glicose em glicogênio e amilopectina Elevação:

pancreatite lesões nas glândulas salivares úlcera apendicite gravidez ectópica doença do trato biliar

AMILASE

Pode ser depurada pelos rins Clearance de amilase aumentado: pancreatite Insuficiência renal:

níveis plasmáticos elevados depuração diminuída

LIPASE

Pâncreas Hidrolisa triglicerídeos em monoglicerídeos Marcador específico de doença pancreática: aumenta após 12h do início da pancreatite

DETERMINAÇÃO DA ATIVIDADE ENZIMÁTICA

Detectadas quantitativamente: adição de substrato detecção da taxa de conversão em produto

Expressa em unidades aumento da concentração de um produto diminuição da concentração de substrato alteração na concentração de coenzima

Velocidade da reação

ENSAIOS ENZIMÁTICOS

Adição de substrato específico de modo que sua concentração seja saturada. Velocidade da reação (cinética – ler absorbância em vários tempos) Problemas:

hemólise – liberação de enzimas dos eritrócitos anticoagulante (dosagem sérica) armazenamento da amostra (-20C) controle do pH cronometragem

ENSIAOS IMUNOQUÍMICOS

Imunoensaios Determinação de isoenzima Diferenças na sequência de aa - anticorpos