UESB - UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA. DEPARTAMENTO DE QUMICA E EXATAS.DISCIPLINA: BIOLOGIA BSICA.DOCENTE: ANA LCIA BIGGI.

Estudo dirigido IAspectos Gerais da Estrutura Celular e Microscopias.

Sayonara Lima Carib.

Jequi-BahiaOutubro/201301 - A Biologia Celular uma cincia que avanou muito nas ltimas dcadas. A que se deve tal desenvolvimento?

Ao processo metodolgico e instrumental, com isso o estudo da clula comeou a ser mais investigado e o entendimento sobre a vida mais consolidado. O desenvolvimento da microscopia tem sido fundamental para o desenvolvimento da biologia celular, constituindo se o microscpio como instrumento responsvel pelos maiores progressos.

02 - Quais organelas celulares podem ser visualizadas ao microscpio de luz?

As regies habitadas por mitocndrias, lisossomos, peroxissomos, cloroplasto, complexo de Golgi, centrolos, vacolos e grnulos de secreo. Foram vista a partir da utilizao de corantes especficos, exceto os cloroplastos.

03 - Existem diversos tipos de clulas que compem os organismos unicelulares e multicelulares. O que determina a existncia de diferentes formas celulares?

As diferentes molculas existentes na clula, a forma como interagem nos ambientes, a composio por redes de fibras ou filamentos proteicos, a organizao dos componentes, o citoesqueleto, a tenso superficial, da viscosidade do protoplasma, da ao mecnica e por fim da especializao funcional da clula.

04 - Existe relao entre a forma e a posio de um ncleo e a forma da clula da qual ele faz parte?

Sim, como nas clulas esfricas e cbicas, o seu ncleo geralmente apresenta a forma esfrica, nas prismticas e fusiformes o formato do ncleo elipsoidal ou alongado, nos leuccitos pode apresentar forma irregular e nos espermatozoides a forma nuclear pode ser alongada ou irregular a depender do grupo animal a que pertence.

05 - Existem vrios tipos de microscpios, sendo que cada aparelho apresenta sua particularidade e indicao. Defina, de forma resumida, cada uma das microscopias a seguir e mencione a sua aplicao:

a-) Microscopia de contraste de fase

Baseia-se no principio da difrao da Luz, o caminho do feixe luminoso sofre um retardo na formao da imagem, sendo possvel observar matrias biolgicas sem colorao. A utilizao deste microscpico se limita a analise de matrias sem colorao, como exames rpidos de cultura de clulas. b-) Microscopia de fluorescncia

Baseia-se nas propriedades fsicas de algumas substncias absorverem a luz, em um determinado comprimento de onda, e emitirem luz, com comprimento de onda maior e nveis de energia mais baixos. utilizado na identificao de compostos naturalmente fluorescentes, como a clorofila, a lignina das paredes celulares vegetais entre outros.

c-) Microscopia confocal a laser

Baseia-se na obteno de imagens em de planos focais especficos ou cortes pticos, que so estocados em um computador e podem ser utilizados na reconstruo tridimensional e visualizao da estrutura como um todo. utilizado para o maior detalhamento de estruturas subcelulares que no apresentam limite de resoluo compatvel microscopia de luz fluorescente, como microtbulos e outros elementos fibrilares do citoesqueleto.

06 - Compare a microscopia eletrnica de transmisso com a de varredura. Qual a aplicao de ambas?

A microscopia eletrnica de transmisso fornece informao a partir de cortes ultrafinos de clulas ou tecidos, pois a obteno da imagem depende da interao dos eltrons com o material. A microscopia de varredura pode revelar feies topogrficas de uma superfcie com grande riqueza de detalhes, pois fornece imagem tridimensional.

07 - Existem diversos tipos de preparaes citolgicas, cada uma indicada para determinado tipo celular e finalidade. Explique em que consistem as seguintes tcnicas e qual a aplicao das mesmas:

a-) Montagem total

Baseia-se na coleta do material que deve ser fino ou transparente o suficiente para ser colocado diretamente sobre a lmina e assim poder aplicar a tcnica de subsequente de fixao e colorao. aplicado no estudo de rgos de insetos, glndulas salivares.

b-) Esfregao

Baseia-se em colocar uma gota do material a ser analisado como, sangue, linfa, smen sobre lamina com o auxilio de uma lamina, promovendo assim um deslizamento do liquido sobre a primeira lamina, de forma com que faa uma camada do liquido com clulas sobre o vidro.

c-) Espalhamento

Baseia-se na raspagem de um das camadas superficiais de membranas mucosas com pequena esptula, e em seguida deslizar o material raspado sobre a superfcie de uma lmina limpa. Esta prtica muito utilizada para a avaliao de mucosas vaginais, no exame de preventivo de cncer papanicolau.

d-) Esmagamento

Consiste em esmagar, entre lmina e lamnula, o material a ser analisado. Esse mtodo de coleta muito eficiente para estudos de divises celulares em tecido com alta taxa de diviso (raiz de cebola, testculos e glndulas salivares de insetos).

e-) Decalque Baseia-se em colocar sobre a lmina devidamente limpa, ncleos inteiros de rgos com relativa consistncia mole, como o fgado, bao e rins. utilizada para o estudo de quantidade de DNA, interaes moleculares entre complexos DNA/protena, textura cromtica e anlise de imagem do fentipo nucleares.

f-) Corte histolgico

Baseia-se em cortes extremamente finos (na casa dos micrmetros de espessuras) e a sua colorao sobe a lmina. utilizado para os estudos em que a inter-relao entre as clulas e a topografia dos tipos celulares deve ser respeitada.

08 - Quais etapas so necessrias para o processamento de um material biolgico que servir para a preparao de uma lmina permanente? Mencione a funo de cada etapa.

I- Fixao = promover a preservao das caractersticas morfolgicas e macromoleculares dos tecidos e clulas utiliza-se a formalina ou outro agente fixador.II- Desidratao = retirar a gua do tecido utiliza-se o lcool etlico (70%, 80%, 95%, 100%). III- Clarificao = promover a retirada do lcool e permitir que a parafina penetre no tecido e remova gordura dos tecidos, deixando-os translcidos, utiliza-se xilol, benzeno ou tolueno.IV- Inclinao = promover a entrada da parafina na intimidade dos tecidos, para depois de solidificada, constituir o bloco histolgico, utiliza-se parafina lquida.V- Corte = promover cortes finos do tecido a ser estudado, utiliza-se navalha de ao com 3 a 7 de espessura.VI- Coleta de corte = distenso e pesca do corte em lmina histolgica.VII- Colorao = evidenciar seletivamente as estruturas teciduais e celulares utiliza-se corantes especficos.

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