Teste de Coombs

O teste de Coombs (nome dado em homenagem a um dos investigadores que desenvolveram o teste para uso laboratorial, Coombs, 1945), embora o princípio tenha sido descrito muito antes, em 1908, por Moreschi. Se baseia no princípio de que anticorpos específicos antiglobulina humana atuam como uma ponte que induz a aglutinação de eritrócitos revestidos com imunoglobina humana ou complemento.

Introdução

Robin Coombs graduou-se emmedicina veterinária na universidade De Edimburgo.Em 1947 obteve O doutorado no King’s College,em Cambridge.Foi durante o doutorado que desenvolveu e publicou o método de detecção de anticorpos.A Reação de Coombs (ou Teste da Antiglobulina) foi introduzida por meio de umestudo sobre anemias hemolíticas em 1945, com a finalidade de detectar tanto autoanticorpos quanto aloanticorpos antieritrocitários

Robert Coombs

O soro antiglobulina humana pode ser produzido através de hiperimunização animal, usualmente coelhos, com imunoglobina purificada ou complemento para produzir títulos elevados de anticorpos IgG com avidez alta.

SORO ANTIGLOBILINA

Atualmente, os reagentes poliespecíficos usualmente são uma mistura de anticorpos IgG policlonais contra o espectro de subclasses de IgG humana e anticorpos moniclonais contra os componentes do complemento C3b e C3d

Estima-se que 100 a 500 IgG ou moléculas de C3 ligadas por eritrócitos são necessárias para a detecção de anticorpos antiglobulina (Harmening, 1994); um número menor de moléculas ligadas pro eritrócitos dão uma reação negativa.

SENSIBILIDADE DO TESTE DE COOMBS

Dois tipos de células para o controle de qualidade são normalmente utilizados: as revestidas com IgG e as revestidas com C3b iu C3d.

As células para o controle de qualidade do teste de Coombs frequentemente são denominadas células de checagem, células controle de Coombs ou células sensibilizadas.

CONTROLE DE QUALIDADE DO TESTE DO COOMBS

Teste de Coombs direto: amostras de sangue devem ser coletadas em EDTA para prevenir a sensibilização de células com complemento in vitro. Uma suspensão salina a 3% até 5% de eritrócitos do paciente é preparada para a testagem. Uma gota dessa suspensão celular é posteriormente lavada pelo menos quatro vezes com solução salina, e em seguida, deve ser adicionada AHG poliespecífica contendo anti-IgG e anti-C3d de modo que a sensibilização in vitro, seja para a IgG ou para o complemento, possa ser detectada.

MÉTODOS

Teste de Coombs direto: Eritrócitos do paciente, do doador e reagente incuba-se com o soro apropriado ou anti-soros preparados comercialmente, usualmente a 37°C, durante o período de tempo indicado no procedimento de operação padrão para o ensaio participar que estiver sendo realizado. Dependendo do método, os tubos podem ser centrifugados e então examinados em busca de hemólise ou de aglutinação, o passo seguinte deve ser lavar os eritrócitos pelo menos quatro vezes para remover todas as globulinas séricas livres ou proteínas estranhas.

Ajuntamento de antígenos particulados tais como bactérias ou eritrócitos pela ação de anticorpos que pode resultar num precipitado visível a olho nu,sendo uma reação altamente específica em que cada antígeno reage com seu anticorpo.

O que é aglutinação

Investigação de reações homolíticas transfusionais Doenças hemolíticas do recém-nato

Investigação de auto-anticorpos Anticorpos induzidos por medicamentos

APLICAÇÕES DO TESTE DE COOMBS DIRETO

Detecção e identificação de anticorpos eritrocitários no soro Tipagem de antígenos eritrocitários

Prova cruzada

APLICAÇÕES DO TESTE DO COOMBS INDIRETO

http://www.uftm.edu.br/patolo/cpgp/imagem/Tese_VitorMAlvesME.pdf

Referencias