PROFA. MARCELA AZEVEDOREPLICAÇÃO DO DNA

REAÇÃO EM CADEIA PELA POLIMERASE - PCR

GENE X

DNA pol

PRIMERS

PRIMERS

Bases Nitrogenada

s

 Desoxirribonucleotídeos

Fosfatados dNTP's

Água

TampãoMagnésio

95°C

Primer (DNA)

Síntese (pol + dNTPs)

95°C

Primer

Síntese

Múltiplas cópias

REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE - PCR

Temperatura anelamento: 45-52°C

Temperatura extensão: 72°C

ELETROFORESE EM GEL DE AGAROSE

3000 pares de bases

Nitrogenadas (bp) 1000 bp

300 bp

Padrão

REAÇÃO EM CADEIA PELA POLIMERASE - PCR

• A Reação em Cadeia pela Polimerase é definida como uma técnica de amplificação do DNA;

• Foi descrita primeiramente por Kary Mullis, no ano de 1983 (Prêmio Nobel da Química dez anos depois).

TELOMERASE

Fita descontínua Primer

Exonuclease degrada o primer de RNA

Telomerase alonga fita contínua

Novo primer se anela à nova sequência

Porção final é reconstituída