M. tuberculosisM. tuberculosis RD RDRioRio está está distribuído internacionalmente e distribuído internacionalmente e parece parece ser mais transmissível que ser mais transmissível que

outras familias.outras familias.

Descoberta das cepas RDDescoberta das cepas RDRioRio

• Painel de PCR para diferenciar MtbCPainel de PCR para diferenciar MtbC

• 3ª coluna: IS3ª coluna: IS15611561´́

Wildtype (não-RDWildtype (não-RDRioRio)) (70%) (70%)

Cepas RDCepas RDRioRio (30%)(30%)

IS1561

PE-PGRS50 Rv3346c PPE 55 Rv3348 IS1561 PPE 56 Rv3351c Rv3352c Rv3353c Rv3354 Rv3355c folD

PE-PGRS50 folDRv3346c/3355c

Todos os elementos entre estes genes foram excluídos durante o processo de recombinação Todos os elementos entre estes genes foram excluídos durante o processo de recombinação recíproca (recíproca (compreendendo um tamanho de >26 kbcompreendendo um tamanho de >26 kb). ).

Genotipagem do RDGenotipagem do RDRioRio

• SpoligotypingSpoligotyping – todos os RD – todos os RDRioRio pertencem a pertencem a família Latin-American Mediterranean (LAM)família Latin-American Mediterranean (LAM)

RDRDRio Rio N-RD N-RDRioRio

Árvore filogenética pelo SpoligotypingÁrvore filogenética pelo Spoligotyping

RDRio

Não-RDRio

MIRU-VNTRMIRU-VNTR

• RDRio apresenta padrão típico: • 2 2 X X 2 X 1 X X X X 1

RDRio WT817/03 - 223126142321 (LAM9) 494/03 - 124326153222 (LAM9) 309/03 - 223226143321 (LAM4) 612/03 - 124326143324 (LAM4) 434/03 - 223226152331 (LAM6) 593/03 - 122325133224 (LAM6)

Marcador que uma cepa seja Marcador que uma cepa seja RDRDRioRio: : Cepa da Cepa da família LAM com 1º MIRU (MIRU 2 = 2família LAM com 1º MIRU (MIRU 2 = 2 cópias cópias) e ) e o último MIRU (MIRU 40 = 1o último MIRU (MIRU 40 = 1 cópia cópia))

Árvore filogenética pelo Árvore filogenética pelo MIRU-VNTRMIRU-VNTR

Não-RDRio

RDRioRDRio

Não-RDRio

Dados Clínicos-EpidemiológicosDados Clínicos-EpidemiológicosClinical characteristic RDrio WT p value

Mean age ± SD (yrs) 38 ± 15 36 ± 15 0,36Gender (M/F) % 36 (50%)/ 36(50%) 108 (61%)/ 69(39%) 0,11HIV+ (%, n ) 24% (6/25) 28% (18/63) 0,66PPD mm 11 ± 8 10 ± 11 0,54Fever (%, n ) 57% (25/44) 68% (66/96) 0,16Nights sweats (%, n ) 23% (10/44) 31% (30/96) 0,3Cough (%, n ) 73% (33/45) 78% (75/96) 0,53Sputum (%, n ) 50% (22/44) 51% (49/96) 0,9Hemoptysis (%, n ) 26% (12/45) 12% (12/96) 0.04*Weight loss (%, n ) 73% (33/45) 57% (55/96) 0,06Duration of symptoms (days) 92 ± 113 89 ± 109 0,95Extrapulmonary TB (%, n ) 43% (21/49) 40% (41/103) 0,72<1 lung lobe involved in CXR(%, n ) 39% (16/41) 39% (35/90)>1 lung lobe involved in CXR(%, n ) 46% (19/41) 42% (38/90)Cavitation(%, n ) 36% (15/41) 33% (30/90) 0,71Interstitial infiltrates 27% (10/36) 15% (12/80) 0,39AFB in smears (%, n ) 52% (59/114) 57% (15/272) 0,28

No. of colonies on plate:up to 19 colonies(%, n ) 32% (36/110) 29% (79/270)20-100 colonies (%, n ) 35% (39/110) 37% (10/270)101-200 colonies (%, n ) 14% (15/110) 23% (63/270)201-500 colonies (%, n ) 18% (20/110) 10% (28/270)<200/>200 colonies (%, n ) 18% (20/112) 10% (28/268) 0.04*Sensitivity to anti-TB drugs:Rifampin (%, n ) 90% (67/74) 94% (169/180) 0,34Isoniazid (%, n ) 87% (90/103) 91% (225/247) 0,29Ethambutol (%, n ) 94% (97/103) 95% (235/247) 0,7Etionamide (%, n ) 99% (84/85) 99% (206/208) 0,86Streptomicin (%, n ) 100% (79/79) 97% (185/191) 0,11

0,81

0.05*

PCR multiplex RDPCR multiplex RDRioRio/WT/WT

RDRDRioRioWTWT RDRDRioRio/WT/WT

Proporção de RDProporção de RDRioRio em vários países em vários países

A distribuicao de RDRio na populacao, marcadores moleculares e quadro clinico

podem ser extrapolados para outras localidades?

• Coorte de 105 pacientes com TB

• Casos de tuberculose complicada ( doença avançada, não aderentes, MDR)

• Belo Horizonte e cidades vizinhas

• Responderam questionário

• Genotipados pelo spoligotyping e RDRio PCR multiplex - 37% foram RDRio, todos LAM

Dados clínicos, demográficos, radiológicos e laboratoriais

Dados epi-clínicos regressão logística múltipla

Acompanhamento dos casos de Acompanhamento dos casos de Mtb em NYMtb em NYCC 2001-2005 2001-2005

• 8% de todos os casos de Mtb em NY8% de todos os casos de Mtb em NYC é C é RDRDRioRio • RDRDRioRio foi restrito a família LAM foi restrito a família LAM• RDRDRioRio foi m foi mais encontrado em hispânicos, nascidos ais encontrado em hispânicos, nascidos

na América-latina e Caribe.na América-latina e Caribe.• RDRDRioRio teve maior taxa de clusters (50.7%) teve maior taxa de clusters (50.7%)

comparado a LAM não-comparado a LAM não-RDRDRioRio (40.6%) (p=0.02) e (40.6%) (p=0.02) e Beijing (34.3%) (p=0,0001).Beijing (34.3%) (p=0,0001).

• RDRDRioRio foi mais prevalente ≤10 anos, sugerindo foi mais prevalente ≤10 anos, sugerindo transmissão recente (p= 0.04)transmissão recente (p= 0.04)

• RDRDRioRio foi m foi mais associado à doença ais associado à doença cavitáriacavitária

Epidemiologia do RDEpidemiologia do RDRioRio no mundo no mundo

• Confirmada transmissão de cepa RDConfirmada transmissão de cepa RDRioRio entre entre mão e filho e desenvolvimento de resistência à mão e filho e desenvolvimento de resistência à drogas nos EUAdrogas nos EUA

• Confirmada transmissão de cepa RDConfirmada transmissão de cepa RDRioRio entre entre homem e chihomem e chimmpanzé em zoológico da Holandapanzé em zoológico da Holanda

• Confirmada TB linfonodal em criança Confirmada TB linfonodal em criança na na República deRepública de Djibouti (África) Djibouti (África)

Epidemiologia do RDEpidemiologia do RDRioRio no mundo no mundo

• RDRDRioRio foi identificado em todas as regiões foi identificado em todas as regiões brasileiras (exceto centro-oestebrasileiras (exceto centro-oeste – –não testadonão testado))

• RDRDRioRio foi identificado em 11 de 20 países testados foi identificado em 11 de 20 países testados em 4 continentesem 4 continentes ( (Ocêania não testadoOcêania não testado))

• Analíse pelo ISAnalíse pelo IS61106110-RFLP mostra similaridade -RFLP mostra similaridade entre entre a a cepa RDcepa RDRioRio e as famílias F9 e F13, principais e as famílias F9 e F13, principais causadoras de TB na África do Sul e com a família causadoras de TB na África do Sul e com a família SAF1, principaSAF1, principall causadora de TB em Zimbabwe e causadora de TB em Zimbabwe e ZâmbiaZâmbia

Epidemiologia do RDEpidemiologia do RDRioRio no mundo no mundo

• A cepa cluster mais prevalente em Madrid, A cepa cluster mais prevalente em Madrid, Espanha, denomina-se cepa 5. Esta cepa foi Espanha, denomina-se cepa 5. Esta cepa foi

provada ser provada ser RDRDRioRio ee permanece como a mais permanece como a mais prevalente enquanto outras diminuíramprevalente enquanto outras diminuíram

• As cepas LAM1 e LAM9 são causas freqüentes As cepas LAM1 e LAM9 são causas freqüentes de epidemias em presídios russosde epidemias em presídios russos (ambas (ambas

associadas ao associadas ao RDRDRioRio))

Cepas RDRio

LAM1 e LAM2 (prováveis RDRio)

ColaboradoresColaboradores

• Unidade de Pesquisa da TuberculoseUnidade de Pesquisa da Tuberculose. Universi. Universidadedade Federal Federal dodo Rio Rio dde Janeiroe Janeiro

José Roberto Lapa e Silva, Neio Boechat, José Roberto Lapa e Silva, Neio Boechat, Afranio Kritski, Afranio Kritski, Fernanda Mello, Ana Grazia Marsico.Fernanda Mello, Ana Grazia Marsico.

• Department of Medicine, Division of International Medicine Department of Medicine, Division of International Medicine and Infectious Diseases, Weill Medical College of Cornell and Infectious Diseases, Weill Medical College of Cornell University, New York, USAUniversity, New York, USA

John Ho, Richard Huard, Andrea Gibson, Scott Weisenberg.John Ho, Richard Huard, Andrea Gibson, Scott Weisenberg.

• Laboratório de Biologia Molecular das Micobactérias. Laboratório de Biologia Molecular das Micobactérias. Fundação Oswald CruzFundação Oswald Cruz

Philip Suffys, Maranibia Oelemann, Harrison Gomes, Milena Philip Suffys, Maranibia Oelemann, Harrison Gomes, Milena Juvenal. Juvenal.