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Laboratório de Saúde Pública da Guarda
Ana Marília Bidarra Monteiro Dionísio
11 de Abril de 2018
Introdução de métodos
rápidos na rotina de
um Laboratório de
Saúde Pública
2
Localiza-se no edifício da
Unidade de Saúde Pública e
serviços centrais da ULS da
Guarda.
O Laboratório de Saúde Pública da Guarda
Para além das atividades inerentes ao apoio à vigilância e programas de saúde
pública, realiza também a prestação de serviços a clientes externos, outras
entidades públicas, empresas e a particulares.
3
O Laboratório de Saúde Pública da Guarda
12 14 15
2124
2731
0
10
20
30
40
2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016 2017
Núm
ero
de p
arâ
metr
os
acre
dit
ados
Ano
Evolução do número de parâmetrosAcreditados
É acreditado pelo IPAC segundo a norma NP EN ISO 17025:2005 desde 2011, com
o anexo técnico L0570-1, onde constam 31 parâmetros acreditados.
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Avaliação da qualidade da água nas vertentes Físico-química e Microbiológica,
de acordo com as exigências da legislação nacional e comunitária e com as
recomendações da OMS, numa abordagem de problemas ambientais que
representam risco para a saúde humana.
Planos de vigilância e monitorização de fatores de risco, em articulação
com os Serviços de Saúde e outros com âmbito alargado de utilização
pública.
O Laboratório de Saúde Pública da Guarda
Águas de consumo
Águas minerais naturais
e de nascente
Águas naturais
doces superficiais
Águas termais
Águas naturais
doces subterrâneas
Águas naturais
doces balneares
Águas de processo
(hemodiálise)
Águas de processo
(uso industrial)
5
Águas de piscina
Matrizes analisadas no Laboratório de Saúde Pública da Guarda
Realiza ainda análises para a execução e desenvolvimento dos programas deâmbito regional:
Vigilância de cantinas escolares e refeitórios públicos
Projeto «minorsal.saúde»
«pão.come»
«sopa.come»6
Projetos de pesquisa e investigação propostos pela DGS e ARS Centro e de
iniciativa da ULS e/ou em articulação com a UBI, IPG, IPCB – Escola Superior de
Saúde Dr. Lopes Dias, Instituto Piaget – Bragança e outras entidades públicas ou
privadas.
Programas em que o Laboratório de Saúde Pública da Guarda
está envolvido
7
0500
1000
1500
2000
2500
3000
3500
4000
2038
88 93
1434
54 16513
2 1162 11
846
6453 587
16
2502
704
3543
Núm
ero
de a
most
ras
Total por tipo de amostra
Volume de Amostras 2017
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Os métodos rápidos no Laboratório de Saúde Pública da Guarda
Colilert ® – ISO9308-2
Colilert ® 44ºC – Coliformes fecais
(Procedimento Interno)
Enterolert ® (E e DW) – Procedimento Interno
Pseudalert ® – Procedimento Interno
Legiolert® - Procedimento Interno (implementado e levado a
auditoria interna a 09-04-2018)
Incubar durante 18-22h a
(36±2)ºC
Leitura de resultados:
Reação positiva para coliformes
Contar os poços amarelos.
Reação positiva para
E.coli
Sob luz UV contar os
poços com
fluorescência.
Verter todo o
conteúdo do
frasco para
um Quanti-
Tray ou
Quanti-Tray
2000
Agitar de modo a dissolver todo o
substrato
A 100 mL de amostra adicionar o
substrato
1
2
3
4
5Expressão dos resultados:
Converter os poços em NMP/ 100 mL recorrendo às
respetivas tabelas incluídas na norma.
Fechar o Quanti-Tray usando o selador
Para quantificação de coliformes fecais, incubar durante 18-22h a (44±0,5)ºC.
Procedimento para Pesquisa e Quantificação de Coliformes e E. coli
(Método do Número Mais Provável – NMP)
Procedimento interno para Pesquisa e Quantificação de Enterococos fecais
(Método do Número Mais Provável – NMP)
A 100 mL de amostra adicionar o
substrato Enterolert- E / Enterolert
DW
Agitar de modo a dissolver
todo o substrato
Verter todo
o conteúdo
do frasco
para um
Quanti-Tray
ou Quanti-
Tray 2000
1
2
3
4
5
Incubar durante (41±0,5)ºC durante 24h-28h
Leitura de resultados:
Reação positiva para
Enterococos
Sob luz UV contar os
poços com fluorescência
azul
Reação positiva para
Enterococos Contar
os poços verdes
Enterolert - E
Enterolert - DW
Expressão dos resultados:
Converter os poços em NMP/ 100 mL recorrendo às tabelas
dos kits
Fechar o Quanti-Tray usando o selador.
12
13
1
A 100 mL de amostra adicionar o substrato
Verter todo
o conteúdo
do frasco
para um
Quanti-Tray
ou Quanti-
Tray 2000
Agitar de modo a dissolver
todo o substrato
2
3
4
Fechar o Quanti-Tray usando o selador
5
Incubar durante (38±0,5) ºC durante 24h
Leitura de resultados:
Reação positiva para Pseudomonas
aeruginosa
Sob luz UV contar os poços com
fluorescência azul
Expressão dos resultados:
Converter os poços em NMP/ 100 mL recorrendo à tabela
do kit
Procedimento interno para Pesquisa e Quantificação de Pseudomonas aeruginosa
(Método do Número Mais Provável – NMP)
14
Medir a dureza da amostra usando a
fita de teste da dureza Suplemento a adicionar a
100mL de amostra:
▪ Dureza baixa: 0.33 mL
▪ Dureza alta adicionar 1,0 mL
Colocar no Quanty-Tray e fechar
usando o selador.
Incubar a (39±0.5)ºC
Adicionar o substrato e agitar bem.2
3
Leitura de resultados:
Expressão dos resultados:
Converter os poços em NMP/ 100 mL recorrendo à tabela do kit
Reação positiva – qualquer cor
castanha e/ou turvação maior do que o
controlo negativo
Reação negativa– sem alteração de
cor e sem turvação
5
Nº quadrados rosa 0 1 2 3 4
CaCO3 < 3 > 4 > 7 > 14 > 21
Dureza Baixa Baixa Baixa Alta Alta
Protocolo para Águas potáveis
Pré tratamento para águas de consumo
Colocar 100 mL de amostra num frasco1
4
Procedimento interno para Pesquisa e Quantificação de Legionella pneumophila
(Método do Número Mais Provável – NMP)
Expressão dos resultados:
Converter os poços em NMP/ 100 mL recorrendo à
tabela do kit
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Protocolo para Águas não potáveis
Num frasco colocar 100 mL de água desionizada
estéril. Adicionar o substrato Legiolert e agitar bem.1
2 Pipetar 2mL de reagente de pré
tratamento para um tubo estéril
Adicionar 2mL de amostra
de água não potável
Deixar incubar à temperatura
ambiente durante 60 segundos
Homogeneizar e transferir 2mL para o frasco
de 100mL com Legiolert.
3
Colocar no Quanty-Tray e fechar usando o selador.
Incubar a (37±0.5)ºC
4
Leitura de resultados:
Reação positiva – qualquer cor castanha
e/ou turvação maior do que o controlo
negativo
Reação negativa– sem alteração de
cor e sem turvação
5
Procedimento interno para Pesquisa e Quantificação de Legionella pneumophila
(Método do Número Mais Provável – NMP)
Piscinas
AMNN e Termais
Processo (T. Refrigeração e HD)
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Legiolert e RT-PCR
O LSP está acreditado pelo IPAC para a Pesquisa e Quantificação de
Legionella spp e Legionella pneumophila segundo a norma ISO 12869
Não tem implementado método cultural pela técnica clássica
Legiolert como complemento da RT-PCR
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Legiolert versus Método Cultural Clássico
Facilidade de implementação e de execução
Rapidez dos resultados sem necessidade de testes confirmatórios
Especificidade para Legionella pneumophila
Espécie associada à maioria dos casos de doença (DDO)
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3 Técnicas Superiores
7 Técnicas de Análises Clínicas e de Saúde Pública
2 Assistentes Operacionais 1 Técnico Saúde Ambiental
A equipa do Laboratório de Saúde Pública da Guarda