instituto nacional de pesquisas da amazÔnia - inpa ... · pimentão, a pimenta de cheiro e o...

INSTITUTO NACIONAL DE PESQUISAS DA AMAZÔNIA - INPA

PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM AGRICULTURA NO

TRÓPICO ÚMIDO

BIOATIVIDADE DE EXTRATOS DE SEMENTES DE Pachyrhizus spp.

NO CONTROLE DE Sclerotium rolfsii Sacc.

RODRIGO GONÇALVES DE LIMA

Manaus, Amazonas

2019

2

RODRIGO GONÇALVES DE LIMA

BIOATIVIDADE DE EXTRATOS DE SEMENTES DE Pachyrhizus spp.

NO CONTROLE DE Sclerotium rolfsii Sacc.

DANILO FERNANDES DA SILVA FILHO

César Augusto Ticona Benavente

Manaus, Amazonas

2019

Dissertação apresentada ao Instituto

Nacional de Pesquisas da Amazônia, como

requisito para obtenção do título de Mestre

em Agricultura no Trópico Úmido.

i

http://lattes.cnpq.br/8917049917467336

4

iii

5

AGRADECIMENTOS

Primeiramente a Deus. Aos meus pais, Pedro Lima e Neuziana Lima. A minha Esposa,

Helledsen Lima. Ao Orientador Dr. Danilo Fernandes da Silva Filho, pela dedicação, paciência,

incentivo e confiança ao decorrer deste trabalho. Ao Co-Orientador Dr. Cesar Augusto Ticona

Benavente, grande intelectual que me conduziu nesse desafio com sua parceria e orientação

durante todo período de desenvolvimento deste trabalho. Ao técnico Jose Nilton E Aristides.

Aos colegas e amigos Leando Souza e Eliesio melo de Vasconcelos. Ao coordenador do

programa de pós-graduação Dr. Rogerio Hanada pelo compromisso de sempre buscar o melhor

para todos. Ao Programa de Pós-Graduação em Agricultura no Trópico Úmido do INPA, pela

possibilidade de realizar este trabalho. A turma de mestrado 2016/2, pelos estudos

compartilhados e novos e eternas amizades durante estes períodos de estudos. A Coordenação

de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), pelo auxílio de bolsa concedido

nos dois anos, sendo fundamental para conclusão do curso de Pós-graduação

iv

6

RESUMO

As sementes de feijão-macuco (Pachyrhizus) apresentam uso potencial dos seus metabólitos

secundários (rotenona, pachyrhizina) no controle fitopatológico. O objetivo deste trabalho foi

testar a eficiência dos extratos aquosos de 64 genótipos deste feijão com tempos de maceração

de 0, 48 e 72 h no controle de S. rolfsii. Para tanto, foi montado um experimento de crescimento

micelial em meio cultura desse fungo seguindo o delineamento completamente casualizado com

quatro repetições, sendo a unidade experimental constituída de uma placa de petri. Como

tratamentos adicionais se utilizaram Cabriotop® (4g/L) e apenas o meio de cultura sem extratos.

Foi avaliado o diâmetro do crescimento micelial após cinco dias. Os resultados mostraram que

os diâmetros do crescimento micelial variaram de 34,3 a 67mm às 0 h; de 23,5mm a 57,8 às

48h; e de 37,5mm a 63, 8mm às 72 h. O tratamento com Cabriotop ® variou de 0,05mm a

0,5mm, e o tratamento sem extratos variou de 73,2mm a 80,7mm. Os genótipos com menores

diâmetros médios de S. rolfsii foram P14, P1, P15 e P46 reduzindo de 47 a 48% o diâmetro. No

entanto, os genótipos com menores diâmetros per se foram P23, P5 e P14 às 48 h, reduzindo

em 66 a 68% o diâmetro . Também, observou-se que a maceração de 48 h tem maior eficiencia

que 0 e 72 h. Testes utilizando outros solventes serão precisos para verificar se a eficiencia dos

extratos aumenta, e testes de produtividade de grãos dos genótipos mais tóxicos auxiliarão na

avaliação de seu potencial económico.

Palavras-chave: jacatupé, metabólitos secundários, toxicidade, pesticidas, fungicidas

v

7

ABSTRACT

Yam bean (Pachyrhizus spp.) seeds are toxic for humans and animals. However, it can be used

for pest control. This work aims to determine aqueous extracts efficiency of 64 yam bean

genotypes to control S. rolfsii fungus in vitro and test macerating time of seed powder (0, 48

and 72 h) to prepare these extracts. The completely randomized design was adopted with four

replicates, being the experimental unit composed of one petri dish. Cabriotop® (4g / L) and

culture medium without extracts were the control treatments. After five days the mycelial

diameter was measured. The results showed the mycelial growth diameters of extracts ranging

from 34.3 to 67.0 mm for 0 h of maceration; 23.5 to 57.8 mm for 48h; and 37.5 to 63.8 mm for

72h. The Cabriotop ® treatment ranged from 0.05 to 0.5 mm, and the without extracts treatment

ranged from 73.2 to 80.7 mm. The more toxic genotypes were P14, P1, P15 and P46, in which

the diameter was reduced from 47 to 48%. Yet, considering maceration time the more toxic

genotypes were P23, P5 and P14 with 48h of maceration, reducing the diameter by 66 to 68%.

Also it was observed 48h of seed maceration increasing the extracts efficiency. Tests using

other solvents and grain yield tests will be necessary to assess economic potential of these

extracts.

Key words: jacatupé, secondary metabolites, toxicity, pesticides, fungicides

vi

8

SUMÁRIO

1 Introdução ............................................................................................................................... 9

2 Revisão de literatura............................................................................................................. .10

2.1.1 Taxonomia e origem do feijão-macuco............................................................. ..............10

2.1.2 Composição química das sementes de feijão-macuco...................................................... 11

2.1.3 Potêncial agronômico e nutricional do feijão-macuco.................................................... 12

2.1.4 Usos das sementes do feijão macuco no controle de pragas e doenças ......................... 14

2.1.5 Usos das sementes do feijão-macuco na medicina ........................................................ 14

2.2 Sclerotium rolfsii e sua importância na agricultura............................................................ 15

2.2.1 Controle de S. rolfsii......................................................................................................... 16

2.2.3 Modos de controle da doença........................................................................................... 16

3 Métodos tradicionais no controle de doenças ..................................................................... 16

3.1 Novos métodos de controle ................................................................................................ 17

4 Objetivos ............................................................................................................................... 19

4.1 Objetivo geral ..................................................................................................................... 19

4.2 Objetivo especifico ................................................................................................................................... 19

5 Material e métodos ................................................................................................................ 19

6. Resultados e discussão......................................................................................................... 20

7. Conclusão............................................................................................................................. 26

8 Referência bibliográfica.........................................................................................................28

vii

9

LISTA DE FIGURAS

Figura 1. Distribuição espacial das espécies do gênero de Pachyrhizus (Sorensen 1996)........10

Figura 2. BiPlot .......................................................................................................................25

viii

10

LISTA DE TABELAS E ANEXOS

Tabela 1. Variabilidade da composição química entre o genótipos de Pachyrhizus spp........13

Tabela 2. Composição química média dos de Pachyrhizus sp................................................13

Tabela 3: Tipos de controle alternativos utilizados nos cultivos...........................................17

Tabela 4. Alguns microrganismos registrados para controle biológico em doenças de plantas

..................................................................................................................................................18

Tabela 5. Alguns produtos comercializados para controle biológico de patógenos de plantas .

..................................................................................................................................................18

Tabela 6. Análise de variância do crescimento do diâmetro miscelial de S. rolfsii in vitro ..21

Tabela 7. Comaração do diâmetro e das medias do diametros ......................................22

Anexo .................Resultado da análise estatistica dos dados no programa sisvar diametro.dbf

ix

11

1 Introdução

A procura por pesticidas biodegradáveis ou menos nocivos ao ambiente tem se

intensificado nos últimos anos. Por isso, tratados internacionais como o tratado de Kyoto, o

acordo do clima COP 21 e a agenda 2030 da ONU vem forçando às nações assinantes a adotar

práticas menos poluidoras para o controle de doenças e pragas das culturas. (IPEA 2018)

Dentre as novas formas mais simples e sustentáveis, para o controle de doenças e pragas

das culturas têm sido usados extratos vegetais de óleos essenciais. Os extratos de tabaco foram

usados com eficiência no controle de pragas em hortaliças tais como: pulgão (Dactynotus

sonchi), mosca branca (Bemisia tabaci), tripes (Thrips sp), ácaro (Tetranychus urticae), traça-

das-crucíferas (Plutella xylostella) e as cochonilhas ( Barbosa et al. 2006: Silva et al. 2017).

Antes da introdução do DDT e dos inseticidas sintéticos no meio agrícola em 1946, as

raízes do timbó (Derris sp.) foram exploradas na Amazônia para extrair a rotenona, uma potente

substância com propriedades piscicida e inseticida (Costa et al.1999; Alécio 2007).

A qual se sabia ter propriedades piscicida e inseticidas e teores até 10% ou mais dessa

substancia, Lima 1987. Ainda não se tem a caracterização completa das substancia tóxicas das

sementes de feijão-macuco apenas tem-se reportado que teria vários isoflavanóides os quais a

rotenona e paquirrizina seriam os mais importantes Villar 1991; Villar e Válio 1994; Scramin

1994; Lautié et al. 2012; Lautie 2013.

Existem várias espécies vegetais promissoras com atividade fungicida, antiviral,

inseticida, bactericida e piscicida. Entre elas, o feijão-macuco (Pachyrhizus spp.) tem sido

estudada (Sorensen 1996; Béjar et al. 2000; Leuner et al. 2013; Andrade et al. 2014;

Basukriadi 2014). O principal princípio ativo encontrado nela é a rotenona Scramin 1994;

Lackhan 1994; Villar e Válio 1994; 1996), o qual tem a concentração de até 2.5 vezes a massa

seca. Essa substancia age na cadeia mitocondrial inibindo o complexo I, a produção de ATP,

causando a morte celular (Catteau el al. 2013).

Os indígenas utilizavam as sementes de feijão-macuco triturando-as e misturando-as em

água. O que indica que não seria preciso utilizar solventes orgânicos em primeira instancia.

Assim como timbó, diferentes espécies possuem diferentes concentrações de rotenona. Por isso,

é possível que as semente de feijão macuco apresente variabilidade genética para este caráter.

Assim, faz-se necessário caracterizar os genótipos disponíveis.

2

O Instituto Nacional de Pesquisa da Amazônia (INPA) desde 1976 mantem uma coleção

de 64 acessos de material genético deste feijão, de diferentes origens: Lavras-MG, Matogrosso,

México e Colômbia.

Vale a pena informar que uma doença de solo muito frequente na Amazônia é

Sclerotium rolfsii. Este fungo ataca várias espécies de hortaliças tais como: o tomate, o

pimentão, a pimenta de cheiro e o cubiu. O sintoma típico dessa enfermidade é o apodrecimento

do colo da planta, que ao impedir o transporte dos nutrientes à parte vegetativa da planta,

levando-a a morte.

Acredita-se que uma forma factível de controle deste patógeno poderia ser a aplicação

de extratos de feijão-macuco no colo da planta. Testes in vitro demostraram que os extratos

utilizados 0,1% de sementes maduras moídas e diluídas em água reduzem o crescimento

micelial deste agente patogênico (Martins e Ticona-Benaventes 2017).

Este trabalho teve o objetivo de analisar a eficiência de 64 genótipos de feijão-macuco

no controle do crescimento micelial de S. rolfsii in vitro.

2 Revisão de literatura

2.1.1 Taxonomia e origem do feijão-macuco

A família Fabaceae compreende aproximadamente 727 gêneros e 19.325 espécies, sendo

considerada a terceira maior família de angiosperma (Lewis et al. 2005). É a maior família

botânica do Brasil (Lima 2000) com 2.100 espécies e 188 gêneros (31 são endêmicos), o

hábito de crescimento varia desde ervas até árvores e encontra-se predominantemente nas

3

Figura 1. Distribuição espacial das espécies do gênero de Pachyrhizus (Sorensen 1996)

zonas tropicais subtropicais, representando quase 10% de todas as espécies de plantas

floríferas. (Barroso et al. 1991; Judd et al. 2007). A família Fabaceae está subdivida em três

subfamílias: Caesalpinoideae, Mimosoideae e Papilionoideae, (Lackey 1977). A Subfamília

Papilionoideae é a taxa mais evoluído dentre as subfamílias de leguminosa (Lackey 1980;

lachey 1981), distribui-se em regiões temperadas, florestas pluviais até bordas de desertos

(Scramin 194). É constituída por 440 gêneros, 12000 espécies e 30 tribos, isto equivale a 2/3

de todos os gêneros de Leguminosae, Polhill (1981; 1994) e Kirkbrid e Wiersema (1997). No

Brasil envolve 88 gêneros e 180 espécies nativas (Barroso et al. 1991). O gênero Pachyrhizus

spp., pertence à família Fabaceae, subfamília Papilionaceae, tribo Phaseolae e sub-tribo

Dioclenae, o qual compreende cinco espécies, das quais três espécies são cultivadas: P. erosus,

nativa do México, P. tuberosus, ocorrentes no Brasil e cultivadas no México, P.ahipa,

originária do Perú e duas espécies silvestres: P ferrugineu e P. panamensis, nativas do Perú

(Figura 1) (Bastidas 1998).

Este gênero inicialmente foi chamado de Dolichas com a espécie D. bulbosus. Lamark

aparece no livro Plantarum Americanum, Pl 220 e no livro flore des antilles (1829) volume

VIII, p12, Pl.554, na obra de Martius et al. 1859-1862 Flora Brasiliensis, Volume XV, p. 198-

199, que identifica este gênero com nome Pachyrhizus Rich., nesta mesma publicação mostra

ainda a espécie P.angulatus sendo sinônimo de Dolichos bulbosus Lim. Spec 1021, Dolichos

anticulatus e Taeniocarpum articulatum. Na Amazônia, Pachyrhizus spp. é conhecido como

feijão-macuco, é uma hortaliça adaptada às condições regionais, (Heider et al. 2011; Zanklan

et al. 2007). Dicotiledônea, MOBOT (2016), Sorensen (1988), herbáceas, formas, lianas. Raiz

a 30 cm de diâmetro e 20 cm ou mais de comprimento. As hastes variam de comprimento 2-7

m. Os folíolos laterais obliquamente romboide, muitas vezes inteiro, ocasionalmente com dois

lobos curtos, raramente dentata, Amplamente cultivada na Região Amazônica Colômbia,

Venezuela, Guiana Inglesa, Brasil, Bolívia, Peru, Equador, e cultivado no Paraguai (Bertoni

1910 apud Sorensen 1996), sementes de P. tuberosus de Trinidad e Tobago foram introduzidos

em algumas ilhas do Caribe: Porto Rico, Jamaica e Haiti, está espécie está adaptada a habitat

de florestas tropicais e subtropicais com uma precipitação anual de até 4100 mm, encontrado

em altitudes que variam de 0-1550 m.

4

2.1.2 Composição química das sementes de feijão-macuco

Em sementes de P. tuberosus foi encontrado rotenona e pachyrhizina (Upegui et al.

2014; Catteau el al. 2013; Villar e Válio 1994), segundo Silva Filho et al. (1997) o conteúdo

da rotenona nas sementes é de até 260 Mg.100g-1. Apesar de rotenona e a pachyrhizina serem

identificadas em diversas espécies de Pachyrhizus, P. erosus é a mais pesquisada, nela foi

encontrada 30% de óleo de boa qualidade (Jimenez 1994), mas também demasiada rotenona

(0,5%) para ser comestível Cruz (1950). No Brasil Scramin (1994) identificou e quantificou

rotenona e pachyrhizina em P. tuberosus, que após fracionamento e purificação oito substâncias

foram identificadas: um isofloveno, quatro rotenóides, uma isoflavanona, uma 3-fenilcumrina

e uma isofravona. Rotenona também podem estar presentes em pequenas quantidades no

tubérculo, folhas e galhos (Hansberry e Lee 1943) cuja as sementes podem apresentar 90% de

isoflavonoides (Sarker 2012), dentre estes a rotenona (C23H22O6). Tecnicas de produção pra

produção de rotenona e rotenoites in vitro foram avaliadas por Lackhan (1994) .

Segundo o Comité de Ação Sobre Resistência a Fungicidas (FRAC 2017), os fungicidas

podem ser classificados segundo 13 modos de ação bioquímica. Um deles (grupo C) está

relacionado à respiração celular mitocondrial. Dentro deste grupo oito sítios são os alvos dos

fungicidas, e entre esses sítios estão os complexos I, II e III. No complexo I os fungicidas que

agem são: diflumetorim e tolfenpyrad, os quais inibem à coenzima NADH oxido-reductase, a

qual oxida a NADH (nicotinamida adenina dinucleótido reducida) e reduz a NAD+. Embora

não se sabe com precisão onde se fixa a rotenona no complexo I, seu efeito como inibidor deste

complexo é bem conhecido, sendo chamado de inibidor Classe II ou B (Fato et al. 2009).

2.1.3 Potencial agronômico e nutricional do feijão-macuco

O feijão- macuco (Pachyrhizus spp.) é uma espécie adaptada às condições regionais

(Zanklan et al. 2007; Heider et al. 2011; Kisambira et al. 2015;), são rústicas, alto potencial

nutricional (Ayeh 2013) (Tabela 1 e 2), podendo ser consumido in natura ou diretamente às

vezes com sal, suco de limão e pimenta em pó (Lukitaningsih e Holzgrabe 2014) não

necessitam de solos com alta fertilidade( Silva Filho et al. 1997), ampla plasticidade quando

observado cenários de mudança climática (PBMC 2017) e a alta precipitação pluvial (Villar

1991; Silva 2015). Amostras de 64 genótipos compõem o Banco de Germoplasma do INPA, o

qual tem amostras de populações de diversos pontos da Amazônia, América Central e América

Latina, Pachyrhizus spp. compõe-se de três espécies cultivadas e duas silvestres. Entre as

cultivadas para a alimentação humana: Pachyrhizus tuberosus originário a montante do rio

5

Amazonas (Noda e Machado 1997). P. erosus e P. ahipa (Noda et al. 1984). Entre as silvestres,

Pachyrhizus ferrugineus (Piper) M. e Pachyrhizus panamensis Clausen, ambas originarias do

Peru (Bastidas 1998).

A espécie possui elevada capacidade de produção de sementes - média de 4 t/ha-1 (Sales

1985). Na Tailândia há relatos de 720 a 840 kg/ha-1 (Ratanadilok e Thanisawanyangkura 1994).

As sementes apresentam dois princípios tóxicos rotenona e pachyrhizina (Estrella-Parra et al.

2014), que após extração por processos simples, podem ser empregados como inseticida

biológico (Basukriadi 2014; Sorensen 1996). Possuindo elevado teor de isoflavonoides como a

isoflavona e rotenona (Leuner et al. 2013) apresentando propriedades fungicidas.

Assim como nas sementes, as raízes podem chegar a ter elevada produtividade, com a

vantagem de estabilidade de nutrientes. O feijão-macuco não é tido como uma cultura de

relevância comercial na Amazônia brasileira, no entanto ela está bem adaptada, podendo

produzir 50 a 108 t ha-1 (Silva et al. 2016).

Tabela 1. Variabilidade da composição química entre o genótipos de Pachyrhizus spp.

Tabela 2. Composição química média dos de Pachyrhizus sp

87,1% de Umidade

0,05% de Ácidos graxos

5,6% de Açucares

0,78% de Fibra

10 a 18% de Proteínas

(Noda et al. 1984; Zanklan et al. 2007).

As raízes tuberosas de feijão-macuco apresentam na sua composição química,elevados

teores de proteínas que podem variar de 10 a 18% (Silva Filho et al., 1997) quando comparados

P. ahipa P. tuberosus P. erosus

Ferro(mg/Kg) 24,1 (Heider et al. 2011). 37,0 (Heider et al. 2011). 21,8 (Heider et al. 2011).

Zinco (mg/Kg) 9,9 (Heider et al. 2011). 7,4((Heider et al. 2011). 11,2 (Heider et al. 2011).

Proteínas 20% e 57% (Ørting et al. 1996);

8,98 % e 9,09 % Balbin et al.

(2005) e Zanklan et al. (2007);

1%, Ramos-dela-Peña et al.

(2013)

10,68% a 10,76%, Ørting et al. (1996),

Balbin et al. (2005) e Zanklan et al.

(2007) 26,21% a 30,86% Kisambira et

al. (2015); 1,12 % Ramos-dela-Peña et

al. (2013)

10,97 % a 12,70 %, Balbin

et al. (2005) e Zanklan et al.

(2007.) 1,23 a 1,47 Ramos-

dela-Peña et al. (2013)

6

a outras raizes de importancia economica como: 6% batata portuguesa (Ipomoea batata): 2%

mandioca (Manihot sculenta Cranz) (Taco 2006; Vasconcelos 2018). Segundo a tabela o teor

de proteína varia de 1% a 57%. Isso indica que existe ampla variabilidade genética no c teor

de proteínas e aos minerais (Silva 2019)

2.1.4 Usos das sementes do feijão macuco no controle de pragas e doenças

A tintura feita a partir das sementes de feijão-macuco é eficaz contra piolho bovino

(Huart 1902). Yang e Tang (1988) descrevem o efeito de controle de cigarrinhas de arroz

Heliothis assulta e Aulacuphura femoralis-chinensis. Uma concentração de l/10 de semente e

enxofre molhável foi aplicado para tratar três espécies de piolhos bovinos com as seguintes

resultados: controle de 100% em Bovicola bovis L. e Linignathus vituli L., e controle de 90%

Em Solenopotes capillatus Enderlein (Matthysse e Schwardt 1943).

Em testes in vitro foi observado que extratos das sementes de Pachyrhizus erosus

(espécie de origem mexicana) em concentração de 0,5-10 mg.mL-1 têm eficiência no controle

de Colletotrichum gloeosporioides em (-36.4%), R. stolonifer (-64.97%), em F. oxysporum (-

37.8%), de inibição (Barrera-Necha et al. 2004). As sementes de Pachyrhizus spp. apresentaram

citotoxicidade e genotoxicidade (Estrella-Parra et al. 2014; Lautié et al. 2013; Lautié et al.

2012; Leuner et al. 2013), com propriedades inseticidas e acaricidas, além das fungicidas, e

com baixo efeito tóxico ao ser humano (Béjar et al. 2000).

2.1.5 Usos das sementes do feijão-macuco na medicina

Park e Han (2015) informaram tem propriedades Hiperglicêmico e regulação do açúcar

hepático (Park et a.l 2016), tradicionalmente usado na indonésia como cosméticos no

clareamento da pele (Lukitaningsih e Holzgrabe 2014). Em testes antimalárico, anti-

leishmaniose e biopesticidas e atividade citotóxica (Upegui et al. 2014). A tintura feita a partir

das sementes, é usada para tratar de pele infectada com prurido e sarna, e piolhos (Capitis

pediculus L.) (Escobar 1943), Martínez (1936) aconselha que o óleo de sementes pode ser usado

como purgante quando administrado em doses de 40 g. Pételot (1952) relata que as sementes

pulverizadas são usadas em um unguento para curar doenças de pele e que a ingestão de metade

de uma semente é prensada para ter um efeito laxante. Citando Balansa, Pételot (1952) relata

ainda que as sementes são consumidas como um vermífugo no Vietnã do Norte. Na medicina

tradicional se usa a decocção da raiz para curar febres, descamação da pele e fluxo diurético. A

7

pasta da polpa, fresca moída e esquentada no azeite de amêndoas para aliviar as infecções da

pele e a casca desidratada da raiz pulverizada se usa contra rinites e dor de cabeça. Os tubérculos

esmagados servem para curar prurido ou sarna. O uso da farinha obtida a partir das raízes é

recomendado no tratamento de disenteria e hemorroidas (Roig e Mesa 1988). Com 250-500 g

de tubérculos frescos descascados são consumidos todas as manhãs e à noite para tratar febre;

500 g do sumo de tubérculo fresco esmagado e espremido é tomada três vezes diariamente para

tratar a inflamação da garganta ou amígdalas; 250 g de tubérculo descascado é comido três

vezes ao dia como um laxante, e o suco fresco do tubérculo misturado com açúcar. Um remédio

para ressacas (Yin-fang e Cheng-jun 1987).

Outros uso são relatados como extração de óleo da semente de Pachyrhizus erosus para

produção de biodiesel (ésteres metílicos de ácidos graxos saturados) atendendo aos padrões

americano e europeu desse produto (Knothe et al. 2016).

A rotenona isolada de sementes de P. erosus apresentou citotoxicidade em células de

leucemia humana, induzindo-a à morte celular, sem no entanto, a atividade citotóxica apresentar

interação com o DNA (Estrella-Parra et al. 2014).

2.2 Sclerotium rolfsii e sua importância na agricultura

Sclerotium rolfsii Sacc. (telomorfo: Athelia rolfsii (Curzi) C.C. Reino: Fungi, Filo:

Basiciomycota, Classe: Agaricomycetes, Ordem: Atheliales, Família: Atheliaceae

(MYCOBANK 2017), fungo filamentoso, fitopatogênicos, que tem o solo como habitat e

importância econômica, é um patógeno disseminado no solo nas áreas de produção vegetal,

afeta diretamente 500 espécies de 100 famílias botânicas zonas tropical e subtropical (Punja e

Rahe 1992). Tem estruturas de resistência que ocorrem na ausência de hospedeiros e/ou em

condições climáticas desfavoráveis, chamadas de esclerócios, as quais podem sobreviver no

solo de alguns meses a vários anos, dependendo das condições ambientais (Punja 1985; Barreto

1997; Delgado et al. 2007).

Os escleródios de S. rolfsii são produzidos em grande número na base do caule das

plantas doentes, servindo de fonte primária de inóculo para iniciação da doença no campo

(Punja et al. 1985), são causadores de diversas doenças em diferentes culturas, como mofo

branco, murchas, tombamento das plantas, podridão das raízes, escurecimento do colo da

planta, entre outras, esse fungo pode atacar plantas em todos os seus estágios de

desenvolvimento, comprometendo a absorção de água e nutrientes (AGROFIT 2017), tem

8

ampla gama de plantas hospedeiras e afeta frequentemente o cultivo de Solanáceas dentre estas

o cubiu na região amazônica (Sousa et al. 2004; Monteiro 2014; INPA 2017).

2.2.1 Controle de S. rolfsii

O controle químico da doença de forma inadequada causa danos de ordem

socioambientais, necessitando de controles alternativos visa diminuir a dependência do uso

agrotóxico Monteiro (2014). O biocontrole equivale ao controle de um organismo sobre o outro,

induzindo a diminuição de inóculo por efeito fungistático das atividades que provocam doença

aumentando a resistência natural das plantas protegendo-as por maior tempo, possuindo

característica biodegradáveis, ou seja, quebras de moléculas em partículas menores em

exposição ao sol não deixando nos subprodutos residuais tóxicos prejudiciais ao homem e aos

animais (San-Lang et al. 2002; Fernando et al. 2005).

2.2.3 Modos de controle da doença

Plasmopora viticula, Ruta graveolens, Equisetum arvense, Allium sativum, Mentha sp

e Eucalyptus sp., apresentam efeitos fungistático em S. rolfsii. (Venturoso et al. 2011; Monteiro

(2014), Trichoderma spp. são antagonistas, produz de metabólitos secundários voláteis e não

voláteis, de amplo espectro antimicrobiana (Isaias et al. 2014), usam mecanismos de

competição por espaço e nutrientes, antibiose, o micoparasitismo, a fungistase, a indução de

resistência (Benítez et al. 2004). No controle químico são usados fungicidas protetores e

sistêmicos (Moraes 2006), os princípio ativo são: Tebuconazol® (triazol) (Duarte et al. 2006)

e Fluazinam, Boscalidam, Triophanatemethyl (AGROFIT 2017: ANVISA 2017; AGROLINK

2017).Fertilizante a base de ureia e bicarbonato de amónio podem inibir diretamente a

germinação dos escleródios e retardar o crescimento micelial de S. rolfsii, especialmente se

NH3 é liberado porque pode favorecer inimigos naturais antagônico à doença, minimizando a

susceptibilidade da planta hospedeira e limitando a doença (Punja 1985). Recomenda-se o uso

de sementes sadias, em solo bem drenado, realizar rotação de cultura por grandes períodos,

aração profunda com tombamento para enterrar o inóculo, calagem e queima e/ou enterro dos

restos culturais. Essas medidas são tomadas visando a diminuição do nível de inóculo no local

(AGROLINK 2017).

3 Métodos tradicionais no controle de doenças

Os vegetais se defendem pelo quimismo, que tem função de: proteção contra herbivoria

(deterrência, repelência e toxidez), proteção aos raios ultravioleta, alelopatia, como também

atração de polinizadores ou dispersores de sementes, as fitoalexinas são metabólitos

http://www.agricultura.gov.br/assuntos/insumos-agropecuarios/insumos-agricolas/agrotoxicos/agrofit

http://portal.anvisa.gov.br/noticias/-/asset_publisher/FXrpx9qY7FbU/content/consulta-publica-sobre-avaliacao-toxicologi-1/219201?p_p_auth=TkhJqdWq&inheritRedirect=false&redirect=http%3A%2F%2Fportal.anvisa.gov.br%2Fnoticias%3Fp_p_auth%3DTkhJqdWq%26p_p_id%3D101_INSTANCE_FXrpx9qY7FbU%26p_p_lifecycle%3D0%26p_p_state%3Dnormal%26p_p_mode%3Dview%26p_p_col_id%3Dcolumn-3%26p_p_col_count%3D3

https://www.agrolink.com.br/culturas/problema/mofo-cinzento_1564.html


9

sintetizados em resposta a estresses físicos, químicos ou biológicos, tornando-se um mecanismo

de resistência a microrganismos patogênicos, acumulam-se em torno do tecido após infecção

ou injúria e possuem atividade antimicrobiana ou controle a outras espécies vegetais, podendo

o uso destes compostos no controle fitossanitário ser direcionado ao uso na agricultura Taiz e

Zeiger (2004).

Fonte de moléculas ainda inexploradas, as plantas possuem potêncial para serem

utilizadas como fonte de princípios ativos de extratos e óleos essenciais contra fitopatógenos

Fonseca et al 2015.

Os produtos naturais foram utilizados até a metade do século XIX para o controle de

pragas e doenças agrícolas, os agricultores tradicionais praticavam a reciclagem da matéria

orgânica ao solo (adubação verde, rotação e o consórcio de culturas) e como forma de controle

de eventuais pragas e doenças utilizavam inseticidas e fungicidas à base de plantas na forma de

extratos, dentre estes Chrysantemum cinerariaefolium, Chrysantemum roseum, Chrysantemum

coccineum (fontes de piretro), Derris spp. e Lonchocarpus spp. (fontes de rotenona) e Nicotiana

(fonte de nicotina) eram utilizados, principalmente, como inseticidas e fungicidas (Morais

2009; Braibante e Zappe 2019). Atualmente frente ao uso do agroquímico a sociedade vem

exigindo a redução de seu uso: Bettiol 2006, de forma que os mais diversos produtos são

utilizados pelos agricultores há décadas (Tabela 3).

Tabela 3. Tipos de controle alternativos utilizados nos cultivos.

Fonte: Sousa et al. 2017: Sousa et al. 2012: Bettiol 2006

3.1 Novos métodos de controle

O desenvolvimento de biopesticidas, incluindo pesticidas microbiano, nematódios

entomopatológicos, baculovirus, pesticidas derivados de plantas e feromônios de insetos são

amplamente citados na literatura como alternativos a pesticidas químicos, estes são usados

contra alvos biológicos (fungos, insetos, plantas invasoras) e também pode ser usado como

controle integrado de doenças/pragas.

Controle

Alternativo

Principal

Aplicação

Frequência de

Aplicação

Controle Alternativo

Principal Aplicação

Frequência de Aplicação

Controle

Alternativo

Principal

Aplicação

Frequência

de

Aplicação

Soro de leite Oídio Mensal

Urina de vaca Mosca-branca Mensal

Óleo de neem Repelente Semanal

Calda sulfocálcica Inseticidas Semestral

Calda bordalesa

Fungicidas:

(Diversas) Semestral

Sabão de coco Diversas Mensal

extratos vegetais Diversos insetos-pragas Semanal

http://qnint.sbq.org.br/novo/index.php?hash=tema.55

10

A biotecnologia vem contribuindo no agronegócio apresentando cultivares com DNA

recombinante, culturas engeinheradas de plantas transgênicas expressando por exemplo do gene

da bactéria entomopatogênica Bacillus thuringiensis resistentes a insetos, representando uma

nova ferramenta na abordagem de controles de pragas ou doenças.

Outra tecnologia desenvolvida com sucesso (Tabela 4 e 5)como agente de biocontrole

é o uso de feromônios usado para ruptura do acasalamento em insetos, tendo bastante

especifidade, é uma dimensão promissora.

As interações sinérgicas - área relativamente nova, possibilita aumentar a

biofungicidade como foi demostrado combinando Fusarium oxiporum com Pseudomonas

fluorescens no controle de Fusarium wilts, assim como o antagosnismo de Trichoderma que

produz metabólitos voláteis e também não voláteis inibindo fungos fitopatogênicos. . (Martins-

Corder e Melo 2019)

Tabela 4. Alguns microrganismos registrados para controle biológico em doenças de plantas

(Hall and Menn 1999). Adaptado

Tabela 5. Alguns produtos comercializados para controle biológico de patógenos de plantas

(Hall and Menn 1999). Adaptado

Agente

Patógeno alvo

Agente Patógeno

alvo Streptomyces

griseoviridis

Fusarium spp, Alternaria, Pythium, Botrytis e outros patógenos

de solo Grafiose ou doença holandesa do ulmeiro

Verticiliumm dahlia Doenças fungicas no solo

Trichoderma harzianum Antogonista

Trichoderma viride Fomes annosus

Phlebiopsis

(=Peniophora)gigantea

Fusarium spp, Alternaria, Pythium, Botrytis e outros patógenos

de solo Grafiose ou doença holandesa do ulmeiro

Produto Nome comercial Fornecedor Patógeno alvo

Phlebiopsis(Peniophora)gigantea Rostop Kemira Agro Oy Fomes annosus

Gliocladium sp. GlioMix Kemira Agro Oy Promotor de

crescimento das plantas,

Compete com

microbios do solo

Fusarium e outros

patógenos de solos

Streptomyces gliseoviridis Mycostop Kemira Agro Oy Patógenos de solo

Bacillus subtilis Kodiak Gustafson Agrobacterium

tumefaciens Agrobacterium radiobacter Varius Varius Oídeo

Amoelomyces quisqualis AQ10 Ecogen Aplicacao pos colheita

de citrus Candida oleophila Aspire Ecogen Fusarium oxysporum,

F. moniliforme

11

4 Objetivos

4.1 Objetivo geral

-Avaliar a bioatividade e toxicidade de extratos de sementes de 64 genótipos de

achyrhizus spp. contra Sclerotium rolfsii.

4.2 Objetivo especifico

-caracterizar a bioatividade de extratos aquosos de 64 genótipos de feijão-macuco

(Pachyrhizus spp.) no controle de Sclerotium rolfsii

- determinar se o tempo de maceração influencia na eficácia dos extratos

- avaliar a interação genótipos tempos de maceração e selecionar os genótipos mais

promissores no controle de S. rolfsii

5 Material e métodos

O experimento in vitro foi realizado no Laboratório de fitopatologia no Instituto de

Pesquisa da Amazônia. Foram usadas sementes de 64 progênies do banco de germoplasma do

Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia (INPA) Para fazer o pó.

Os esclerótios de S. rolfsii foram obtidos de plantas infestadas de cubiu (Solanum

sessiflorum) os quais estavam sendo cultivados no Instituto Federal de Educação – IFAM. Estes

foram purificados (mergulhados em álcool 70% por 1 min; posteriormente mergulhados em

hipoclorito a 2% por 1 min; lavados com água destilada e esterilizada e secados em papel filtro,

e transferidos para placa de Petri em condições assépticas ao meio BDA.

Para o preparo do pó, sementes de cada genótipo foram desidratadas em estufa a 50 ºC

por 24 horas e posteriormente triturados em moinho de bolas por 5 minutos a fim de deixar o

material em tamanhos particulados homogeneizados.

Preparou-se extrato aquoso na concentração de 1 g de pó por Litro de Solvente (0,1%

massa/volume), segundo a recomendação de martim e Benavente (2017). Deixou-se macerar

por três tempos (tratamentos) diferentes - zero (0), 48 e 72 horas.

O preparo do meio de cultura BDA utilizou-se 1000 mL de água destilada e autoclavada,

200 g de batata, 10 g dextrose, 20g de ágar.

Foi misturado extrato+ meio BDA e vertido 25 mL em cada unidade experimental (placa

de petri de 90mm de diâmetro) em câmera de fluxo laminar. A inoculação foi realizada

Fusarium oxysporum FO47 Fusaclean N P P Tratamento de madeira

Trichoderma viride Varius Varios Fomes annosus

12

colocando um esclerócio foi colocado no centro da placa, e logo serão vedadas com filme

plástico e incubadas em BOD a uma temperatura ambiente (25-28ºC).

Para tanto foi montado um experimento em delineamento completamente casualizado

um tratamento de um esquema fatorial (genótipo e tempo de maceração) 64x3, e quatro

repetições sendo variedades experimental constituída de uma placa de petri. Também tiveram

dois tratamentos adicionais: Cabriotop® (4g/L) e apenas Meio de cultura BDA. Foi avaliado o

diâmetro do crescimento micelial após cinco dias.

Cada unidade experimental teve duas testemunhas de controle, uma positiva e outra

negativa – Cabriotop e meio BDA respectivamente. As leituras foram realizadas em cinco dias

a partir da inoculação. Foi medido o crescimento radial da colônia em dois eixos ortogonais,

sendo posteriormente calculada a média. A porcentagem de inibição do crescimento (PIC) dos

fitopatógenos foi obtida por meio da fórmula: PIC = [(diâmetro da testemunha negativa –

diâmetro do tratamento/diâmetro da testemunha negativa] x 100. A taxa de crescimento dos

fitopatógenos foi mensurada

Conforme Benício et al. (2003). Os dados foram plotados para obtenção de uma equação

de regressão linear simples (y = a + bx), sendo (x) os dias de incubação, (y) o diâmetro final da

colônia, (a) o diâmetro inicial da colônia e (b) a taxa de crescimento micelial, determinada pelo

coeficiente de regressão. Os dados serão submetidos a análise de variância, e as médias

Comparadas pelo teste de médias de Scott-Knott a 5% de probabilidade. Foi utilizado o

programa SISVAR.

6. Resultados e discussões

O uso acentuado de agroquímicos na agricultura vem trazendo danos ao ambiente, à

saúde humana e à economia (Lopes e Albuquerque 2018). Por esta razão a agricultura orgânica

está em crescimento. Para que ela possa ser aprimorada são necessários, entre outras coisas, o

uso de substancias biodegradáveis de baixa a média toxicidade. Uma opção adequada a este

objetivo é a preparação de extratos a partir de sementes do feijão-macuco, as quais possuem

tóxicos como a rotenona e pachyrhizina (Leuner et al. 2013).

Neste experimento se tomou como indicador do crescimento micelial o diâmetro (d) do

mesmo, por ser mais utilizado com fungos (Dias et al. 2005). O coeficiente de variação de

11,17% indica que houve precisão experimental, podendo se fazer inferências a partir do

mesmo. Os resultados mostraram que os tratamentos (extratos e controles) e os tempos (0, 48 e

72h) modificam o crescimento micelial (Tabela 6). Todavia, se observou que há interação entre

13

eles. O que indica que o comportamento dos extratos e tratamentos adicionais são diferentes

entre si nos diferentes tempos. Sendo preciso decompor a interação (Tabela 6).

Tabela 6. Análise de variância do crescimento do diâmetro miscelial de S. rolfsii in vitro

QM FV GL Diametro (mm) Tratamento(Tr) 65 9209,83 ** Tempo (T) 2 1577,37 ** Tr x T 130 163,35 **

BDA 2 907,71 ** CABRIOTOP 2 5,48 ns T/P1 2 73,08 ns T/P2 2 98,58 ns T/P3 2 51,58 ns T/P4 2 88,08* T/P5 2 1143,00** T/P6 2 15,08 ns T/P7 2 464,25** T/P8 2 57,58 ns T/P9 2 9,25 ns T/P10 2 21,33 ns T/P11 2 225,33* T/P12 2 49,00 ns T/P13 2 41,33 ns T/P14 2 865,08 ** T/P15 2 51,08 ns T/P16 2 35,58 ns T/P17 2 18,75 ns T/P18 2 98,58 * T/P19 2 739,08 ** T/P20 2 333,25 ** T/P21 2 146,33 ** T/P22 2 156,58 ** T/P23 2 1565,08** T/P24 2 116,58 * T/P25 2 68,08 ns T/P26 2 2,58 ns T/P27 2 67,00 ns T/P28 2 310,33 ** T/P29 2 123,58 ** T/P30 2 71,08 ns T/P31 2 293,58 ** T/P32 2 25,00 ns T/P33 2 110,08 * T/P34 2 157,75 ** T/P35 2 257,33 ** T/P36 2 306,75 ** T/P37 2 86,58 * T/P38 2 166,33 ** T/P39 2 186,33 ** T/P40 2 110,33 * T/P41 2 6,25 ns T/P42 2 224,08 ** T/P43 2 53,08 ns T/P44 2 17,30 ns T/P45 2 10,75 ns T/P46 2 321,33 ** T/P47 2 189,25 ** T/P48 2 20,58 ns T/P49 2 5,25 ns T/P50 2 76,00 * T/P51 2 63,08 ** T/P52 2 54,25 ns T/P53 2 30,08 ns T/P54 2 225,33 ** T/P55 2 25,75 ns T/P56 2 127,00 ** T/P57 2 10,75 ns T/P58 2 63,58 ns T/P59 2 160,33 ** T/P6 2 15,08 ns T/P60 2 39,08 ns T/P61 2 118,08 ** T/P62 2 152,33 ** T/P63 2 76,58 * T/P64 2 105,58 *

Erro 954 Total 1151 Média 45,12 CV (%) 11,17

14

Legenda: * e ** significativo com P <0,05 e P<0,01 respectivamente; ns: não significativo

Tabela 7. Comparação do diâmetro e das medias do diametros

As médias seguidas por letras minúsculas distintas na coluna diferem entre si pelo teste Scott-Knott a 5% de significância (P<0,05)

As médias seguidas por letras maiusculas distintas na linhas difere entre si pelo teste Scott-Knott a 5% de significância (P<0,05)

GENÓTIPO Diametro (mm)

0 HORAS 48 HORAS 72 HORAS Media

BDA 76,84 f 73,17 e 80,70 e 76,90 g CABRIOTOP 0,06 a 0 ,56 a 0,05 a 0,23 a P1 38,50 b 39,25 c 46,25 c 41,33 b P2 56,50 d 47,25 c 55,00 d 52,91 e P3 50,75 c 44,00 c 49,50 c 48,08 d P4 42,25 b 50,50 d 50,25 c 47,66 d P5 52,25 d 23,75 b 53,75 d 43,25 c P6 47,75 c 51,50 d 50,50 c 49,91 d P7 56,00 d 35,75 c 52,25 d 48,00 d P8 57,75 d 50,25 d 53,00 d 53,66 e P9 51,75 d 49,25 d 49,00 c 50,00 d P10 43,50 b 43,25 c 47,25 c 44,58 c P11 62,75 e 49,75 d 49,75 c 54,08 e P12 45,50 c 42,00 c 49,00 c 45,50 c P13 59,25 d 53,25 d 54,25 d 55,58 e P14 44,25 c 24,50 b 53,25 d 40,66 b P15 39,75 b 37,50 c 44,50 b 40,58 b P16 49,00 c 43,25 c 47,50 c 46,58 c P17 44,75 c 44,75 c 48,50 c 46,00 c P18 50,25 c 40,75 c 48,00 c 46,33 c P19 67,00 e 40,75 c 47,75 c 51,83 e P20 35,50 b 53,75 d 44,25 b 44,50 c P21 52,00 d 49,50 d 40,50 b 47,33 d P22 43,00 b 49,75 d 55,50 d 49,41 d P23 57,25 d 23,50 b 58,25 d 46,33 c P24 56,00 d 45,25 c 49,75 c 50,33 d P25 44,50 c 48,50 d 40,25 b 44,41 c P26 45,25 c 45,50 c 44,00 b 44,91 c P27 47,50 c 53,00 d 45,00 b 48,50 d P28 63,00 e 56,00 d 45,50 b 54,83 e P29 46,25 c 46,00 c 55,75 d 49,33 d P30 51,75 d 45,00 c 52,75 d 49,83 d P31 62,00 e 57,75 d 45,50 b 55,08 e P32 46,50 c 49,00 d 51,50 c 49,00 d P33 57,25 d 55,00 d 47,25 c 53,16 e P34 45,25 c 56,25 d 56,00 d 52,50 e P35 46,50 c 53,50 d 37,50 b 45,83 c P36 62,00 e 44,75 c 56,00 d 54,25 e P37 48,75 c 39,50 c 45,00 b 44,41 c P38 40,50 b 53,00 d 49,50 c 47,66 d P39 37,75 b 50,25 d 48,75 c 45,58 c P40 48,25 c 53,75 d 58,75 d 53,58 e P41 45,75 c 43,25 c 44,50 b 44,50 c P42 43,50 b 45,25 c 57,25 d 48,66 d P43 50,00 c 43,25 c 49,00 c 47,41 d P44 43,50 b 46,25 c 47,00 c 45,28 c P45 48,50 c 46,50 c 49,75 c 48,25 d P46 34,25 b 35,25 c 50,25 c 39,91 b P47 44,25 c 51,50 d 58,00 d 51,25 e P48 49,00 c 47,25 c 51,75 c 49,33 d P49 50,50 c 51,25 d 49,00 c 50,25 d P50 55,00 d 47,00 c 48,00 c 50,00 d P51 44,75 c 53,00 d 63,75 d 53,83 e P52 43,00 b 42,75 c 49,25 c 45,00 c P53 51,50 d 55,50 d 56,75 d 54,58 e P54 41,75 b 41,75 c 54,75 d 46,08 c P55 47,00 c 43,75 c 48,75 c 46,50 c P56 51,75 d 42,25 c 52,25 d 48,75 d P57 46,75 c 45,50 c 43,50 b 45,25 c P58 51,75 d 44,50 c 51,00 c 49,08 d P59 46,25 c 41,75 c 54,25 d 47,41 d P60 47,75 c 47,00 c 42,00 b 45,58 c P61 66,50 e 55,75 d 59,75 d 60,66 f P62 54,00 d 42,00 c 50,50 c 48,83 d P63 48,00 c 43,50 c 52,25 d 47,91 d P64 39,25 b 43,75 c 49,50 c 44,16 c Média 45,55 B 42,90 A 46,88 C

15

A decomposição da interação tratamento x tempo mostrou que aproximadamente a metade dos

genótipos dentro do tempo não apresentaram variação significativa (P>0,05) (Tabela 6).

Destancando-se os genótipos P1 (d=41,3 mm) e P15 (d=40,6 mm) os quais apresentaram

diâmetros abaixo da média e com desempenho estável nos três tempos. Esses resultados

indicam que o diâmetro foi reduzido em 46 e 47% respectivamente. Portanto, estes genótipos

poderiam ser utilizados para preparar extratos podendo ser armazenados por até 72 h sem perder

sua toxicidade. Outros testes, considerando tempos maiores de armazenamento, ajudariam a

determinar o tempo máximo de bioatividade destes extratos sobre S. rolfsii.

Por outro lado, os genótipos P14 e P46 controlaram o S. rolfsii, porém as médias

variaram significativamente entre os tempos de maceração. No caso de P14 o melhor

desempenho para o controle deste fungo foi com extratos macerados por 48 horas (d=24,5 mm)

que equivale a uma redução de 67%. No caso de P46, observou-se maior controle com extratos

macerados por 0 (d=34,2 mm) e 48 h (d=35,3 mm), reduzindo o diâmetro em 55 e 54 %

respectivamente.

Quando comparadas as medias de crescimento micelial dos diferentes tratamentos

dentro do tempo de maceração 0 horas (Tabela 7), observou-se que os tratamentos testemunha

tiveram diâmetros de 0,06 mm para Cabriotop e de 76,84 mm para BDA e que as médias dos

extratos variaram de 34,3 mm (P46) a 67,0 mm (P19). O que equivale a uma redução do

diâmetro micelial de 13 a 55 %. Destancando-se os genótipos P46, P20 e P39 os quais tiveram

o diâmetro do crescimento micelial abaixo de 38,50 mm (redução entre 50 a 55%) . Os

genótipos com elevado crescimento micelial foram P19, P61 e P28, os quais variaram de 63,0

a 67,0 mm (redução entre 12 a 18%). Estes resultados indicam que os extratos aquosos dos

genótipos P46, P20 e P39 deveriam ser testados no controle de S. rolfsii em campo, não

precisando tempo algum de maceração.

Quando comparadas as médias do crescimento miscelial às 48 horas observou-se que as

testemunhas tiveram o diâmetro de 73,2 mm para BDA e de 0,6 mm para Cabriotop (Tabela 7).

No entanto, as médias dos extratos variaram de 23,5 mm (P23) a 57,8 mm (P31) o que equivale

a uma redução de 21 a 68% do crescimento micelial. Isto indica que os extratos tem efeito

16

tóxico sobre S. rolfsii, mas não no nível do Cabriotop. Destacando-se os genótipos P23, P5 e

P14 que tiveram crescimento abaixo de 25 mm (redução entre 66 a 67%). O que indica que às

48 h de maceração estes genótipos controlam com maior eficiencia S. rolfsii. Os genótipos em

que o fungo teve maior crescimento micelial foram: P31 (57,8 mm), P34 (56,3 mm) e P28 (56,0

mm) o que equivale a uma redução de 21 a 23% do crescimento.

Extratos com 72 horas de maceração mostraram que os diâmetros variam desde 37,5

mm (P35) até 63,8 mm (P51). O que equivale a uma redução do diâmetro de 21 até 54%. Os

genótipos que controlaram eficientemente o fungo foram: P35 (37,5 mm); P25 (40,3 mm) e P21

(40,5 mm) (redução de 49 a 54%). Em consequência estes poderiam ser utilizados após 72h de

maceração. Contrariamente, os genótipos com menor eficiencia no controle do fungo foram:

P51, P61 e P40 com valores entre 58,8 a 63,8 mm.

Outras espécies vegetais tem sido utilizadas para controlar S. rolfsii. Por exemplo: i)

extratos aquosos de crajiru (Arrabidaea chica) na proporção de 20% e extratos de pimenta

inibiram 66,2 e 58,1% respectivamente a lesão no colo do tomateiro (Kamila et al. 2009); ii)

extratos aquosos de urtiga (Urtica sp.) nas concentrações de 10, 20 e 50% também foram

efetivas in vitro reduzindo em 90% o crescimento micelial (Soares 2013); iii) extratos aquosos

de alecrim (Helianthus annuus L.) nas concentrações de 15 e 20% foram reduziram 100% o

crescimento micelial (Araujo et al. 2014). Entretanto, os extratos de sementes de feijão-macuco

estiveram na proporção de 0,1% e reduziram o crescimento em até 67% o que indica que os

extratos deste feijão teriam maior toxicidade que o crajiru, pimenta, urtiga e alecrim. Também

foi encontrado que o extrato do feijão-macuco na concentração de 0,5% controla a

multiplicação de Ralstonia solanacearum reduzindo-a em até 50% (Martins e Ticona-

Benavente, 2017).

Comparando 0, 48 e 72 h em média de todos os tratamentos, observou-se que extratos

com 48 horas de maceração o crescimento micelial foi significativamente inferior (42,9 mm)

que os demais tempos de maceração (Tabela 7). Em contraste, nos extratos com 72 horas de

maceração o crescimento micelial foi maior (46,8 mm). Indicando que 48 horas de maceração

seria o mais recomendável para se fazer extratos aquosos.

Covariância ou variância conjunta é uma medida do grau de interdependência ou inter-

relação entre duas variáveis aleatórias. Baseada nela foi construído um biplot o qual explicou

17

88,5% da variação total (Figura 2), o que permite fazer interpretações geométricas do mesmo.

Os vetores representam os tempos (0 , 48 e 72 horas). A intersecção de retas na origem reune

os diâmetros médios, portanto, quanto mais próximo os genótipos estiverem desse ponto, mais

perto da média geral eles estarão. Por outro lado, diâmetros elevados estarão mais afastados da

origem no sentido dos vetores. Portanto, os genótipos que controlam S. rolfsii deverão estar no

sentido oposto dos três vetores e perto da testemunha Cabriotop.

O gráfico biplot demostrou que os vetores 48 e 72h, e 48 e 0 h tendem a formar um

ângulo de 90 graus o que indica que o crescimento micelial às 48h não está associado às 0 e

72h. O gráfico também mostra que 0 e 72 h estão associados. Estes resultados indicam que a

toxicidade aumenta a medida que aumenta o tempo de maceração até 48h, após este tempo a

toxicidade diminue.

Figura 2. Biplot baseado em componentes principais estimadas a partir de variâncias e

covariâncias entre os tempos de maceração dos extratos e os tratamentos (extratos, cabriotop e

sem extrato).

Em relação à distribuição dos tratamentos observou-se os extratos tiveram

comportamento intermediário entre o desempenho do Cabriotop e do BDA. Considerando

apenas os extratos observou-se que os genótipos tiveram variabilidade no controle de S. rolfsii,

18

no entanto ela se concentrou na origem dos vetores o que indica que o desempenho deles está

na média. Os genótipos P23, P5 e P14 se destacaram por seu poder fungicida às 48 horas, o que

foi confirmado pelas médias de 23,5; 23,8 e 24,5 mm respectivamente. Outros genótipos

promissores são aqueles que geometricamente estão mais perto do Cabriotop. Por exemplo:

P46, P15 e P1, os quais tiveram médias gerais de 39,9; 40,6 e 41,3 mm, respectivamente.

Considerando o uso imediato dos extratos aquosos se destaca o P20 (35,5 mm). A partir destes

resultados do biplot se poderiam recomendar os genótipos P23, P5, P14, P46, P15, P1 e P20

para fazer novos testes de toxicidade com outros patógenos ou artrópodes.

Considerando a análise geral entre os genótipos (Tabela 7) e os resultados do biplot

(Figura 2) se observaram que os genótipos com maior eficiência media no controle de S. rolfsii

foram P14, P1, P15 e P46. Em relação aos tempos de maceração dos extratos observou-se que

48h seria o mais recomendável. Os extratos se mostraram promissores no controle desta doença,

porém, para aumentar sua eficiência deveria se testar outros solventes. Os genótipos mais

promissores foram P23, P5 e P14 desde que seja feita maceração por 48h em água.

Neste experimento observou-se que outros metabólitos potêncialmente inibiram S.

rolfsii, uma vez que a rotenona é insolúvel em água (Sigma 2019) e se degrada parcialmente

com calor e pressão (Marangoni et al. 2014). Portanto, se sugere fazer uma caracterização dos

componentes tóxicos destas sementes.

Para produzir pesticidas a base deste feijão será preciso avaliar o potencial produtivo de

graõs dos genótipos P1, P5, P14, P15, P23 e P46. Assim como quantificar o teor de rotenona

nesses genótipos para depois tentar adaptar a extração industrial de alta performance com CO2

supercrítico utilizada em Derris elliptica (Baldino et al. 2018), a qual teve 93% de eficiência

na extração de rotenoides.

19

7. Conclusão

Extratos aquosos de sementes de feijão macuco na dose de 1g/L controlam Sclerotium

rolfsii in vitro, reduzindo o diâmetro do crescimento micelial em até 67,9%.

O tempo de maceração influencia a eficiência dos estratos aquosos, alcançando a

máxima eficiencia às 48 h. Os tempos de 0 h e 72 h tiveram baixas eficiências e desempenho

semelhante.

Os genótipos que tiveram maior eficiência no controle deste fungo foram: P23, P5, P14

após 48h de maceração reduzindo o crescimento micelial em 66 a 68%. Considerando a média

geral, os genótipos mais eficientes foram: P46, P15, P14 e P1 reduzindo o crescimento de 47 a

48%. Para uso imediato dos extratos o genótipo P20 reduziu o crescimento em 55%.

O uso de outros solventes tanto apolares como polares poderiam aumentar a eficiência

dos extratos, em consequência, sugere-se tastar varios solventes. Finalmente, para saber a

viabilidade agronômica e econômica de produzir extratos ou produtos derivados destes

genótipos testes de produtividade de grãos serão necessários.

20

8 Referência bibliográficas

Alécio, M. R. 2007. Toxicidade do Extrato de Derris amazonica Killip a adultos de Cerotoma

arcuatus Olivier, 1791 (Coleoptera: Chrysomelidae), Dissertação de Mestrado, Instituto

Nacional de Pesquisas da Amazônia. Manaus, Amazonas. 55p.

Aguiar-Menezes, E. E. 2005. Inseticidas botânicos: seus princípios ativos, modo de ação e uso

agrícola. Seropédica: Embrapa Agrobiologia. ISSN 1517-8498. 58 p.

Araújo, J. L.; Oliveira, E. S. de; Francisca, N. T.. 2014. Controle Alternativo “In Vitro” de

Sclerotium rolfsii em Girassol (Helianthus annuus L.) pelo Uso de Extratos Vegetais e

Trichoderma spp Essentia, Sobral, vol. 15, n° 2, p. 25-35.

Ayeh, E.S. 2013. Development and quality characteristics of yam bean (pachyrhizus erosus)

flour and its performance in bread. Dissertation Kwame Nkrumah University of Science and

Technology, Kumasi College Of Science, Gana. 114p.

AGROFIT - Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento 2017.

(http://agrofit.agricultura.gov.br/agrofit_cons/principal_agrofit_cons) Acesso em 20/08/2017

ANVISA – Agencia Nacional De Vigilância Sanitária. 2017. Listas de ingredientes ativos com

uso autorizado e banidos no Brasil (http://www.portal.anvisa.gov.br) Acesso em 20/08/2017

AGROLINK - Site Agropecuário, 2017.

(https://www.agrolink.com.br/culturas/problema/mofo-cinzento_1564.html) Acesso em

20/08/2017

Basukriadi, A.; Wilkins, R.M.; Oviposition Deterrent Activities of Pachyrhizus erosus Seed

Extract and Other Natural Products on Plutella xylostella (Lepidoptera: Plutellidae). 2014.

Journal of Insect Science, 14:244. https://doi.org/10.1093/jisesa/ieu106

Bastidas, C.G.T. 1998. Caracterizacion morfológica y molecular de la diversidad genética de la

coleccion de Pachyrhizus tuberosus (Lam.) Spreng. del CATIE. (Tese) Centro Agronómico

Tropical de investigación y enseñanza, Turrialba, 157p.

Barrera-Necha L.L.; Bautista-Banos, S.; Bravo-Luna, L.; García-Suárez, F.J.; Alavez-Solano,

D.; Reyes-Chilpa, R. 2004. Antifungal activity of seed powders, extracts, and secondary

metabolities of erosus L. against three postharvest fungi. Mexican Journal of Phytopatology

22: 356–361.

Barreto, M. 1997. Doenças do amendoim. In: Kimati, H.; Amorim, L.; Bergamin Filho, A.;

Camargo, L.E.A. Manual de fitopatologia. Doenças de plantas cultivadas. 4. ed. São Paulo:

Ceres. v.2. p.65-72.

http://www.agricultura.gov.br/assuntos/insumos-agropecuarios/insumos-agricolas/agrotoxicos/agrofit

http://agrofit.agricultura.gov.br/agrofit_cons/principal_agrofit_cons

http://agrofit.agricultura.gov.br/agrofit_cons/principal_agrofit_cons

http://portal.anvisa.gov.br/noticias/-/asset_publisher/FXrpx9qY7FbU/content/consulta-publica-sobre-avaliacao-toxicologi-1/219201?p_p_auth=TkhJqdWq&inheritRedirect=false&redirect=http%3A%2F%2Fportal.anvisa.gov.br%2Fnoticias%3Fp_p_auth%3DTkhJqdWq%26p_p_id%3D101_INSTANCE_FXrpx9qY7FbU%26p_p_lifecycle%3D0%26p_p_state%3Dnormal%26p_p_mode%3Dview%26p_p_col_id%3Dcolumn-3%26p_p_col_count%3D3


https://doi.org/10.1093/jisesa/ieu106

http://repositorio.educacionsuperior.gob.ec/bitstream/28000/427/1/T-SENESCYT-0196.pdf



http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=61222307





21

Baum, J.A., T.B. Johnson & B.C. Carlton. 1999. Bacillus thuringiensis: natural and

recombinant bioinsecticide products. p. 189-209. In: F.R. Hall & J.J. Menn (eds.),

Biopesticides: use and delivery. Totowa, NJ, Humana Press, 626p.

Barbosa, F.R.; Silva, C.S.B.; Carvalho, G.K.L. 2006. Uso de inseticidas alternativos no controle

de pragas agrícolas. Embrapa Semiárido, Petrolina-PE, Documentos da Embrapa Semiárido Nº

191, 48 p.

Bettiol, W. Controle Alternativo de Doenças de Plantas. 2006. Anais do III Congresso

Brasileiro de Defensivos Agrícolas Naturais (III COBRADAN) Palestras / Conferences, p. 43-

158.

Braibante, M. E. F.; Zappe, J. A. 2012. A Química dos Agrotóxicos. Química e

Sociedade: Química Nova na Escola, Santa Maria, v. 34, n. 1, p.10-15.

Béjar, E.; Reyes-Chilpa, R.; Jiménez-Estrada, M.2000. Bioactive Compounds from Selected

Plants used in the XVI Century Mexican Traditional Medicine. In: Atta Ur, R. (Ed.), Volume

24, Part E. Studies in Natural Products Chemistry. Mexico DF: Elsevier, p.799-844.

Benítez, T.; Rincón, A.M.; Limón, M.C.; Codón, A.C. 2004. Biocontrol mechanisms of

Trichoderma strains. International Microbiology, 7:249-260.

Catteau, L.; Lautié, E.; Koné, O.; Coppée.; Hell k.;Pomalegni,C.B.; Quetin-Leclercq, J. 2013.

Degradation of Rotenone in Yam Bean Seeds (Pachyrhizus sp.) through Food Processing

Journal of Agricultural and Food Chemistry, 61: 11173-11179. DOI: 10.1021/jf402584k

Costa, N. A. Da; Nascimento, C. N. B. Do Carvalho, L. O. D. De M.; Dutra, S.; Pimentel, E. S.

1986. Uso do timbó urucu (Derris urucu) no controle do piolho (Haematopinus tuberculatus)

em bubalinos, Boletim de Pesquisa, ISSN 01 00-81 02, 78: 1-17.

Costa, J.P. C, Alves, S.M. De; Bélo, M.1999. Teores de Rotenona em Clones de Timbó (Derris

spp. Fabaceae) de Diferentes Regiões da Amazônia e os seus Efeitos Na Emergência de imagos

em Musca domestica L.. Acta Amazonia 29(4). 563-573.

Correa, R. S. 2011. Toxicidade de extratos de timbós (Derris spp.) sobre Tetranychus

desertorum (Acari: Tetranychidae) em folhas de pimentão. Tese de Doutorado, Universidade

Federal do Amazonas. Manaus, Amazonas. 72p.

Cruz, A.O. 1950. Composition of Philippine Singkamas oil from the seeds of Pachyrhizus

erosus (Linn.) Urban. Philipp. Journal Science. 78:145-147.

Delgado, G.V.; Martins, I.; Menêzes, J.E; Macedo, M.A.; Mello, S.C.M. 2007. Inibição do

crescimento de Sclerotinia sclerotiorum por Trichoderma spp. in vitro. Brasília, DF: Embrapa

Recursos Genéticos e Biotecnologia

Dias, M. D.; Pozza, E. A.; Abreu, M. S.;Miranda, E. O.2005. Efeito da temperatura do

crescimento miscelial, Produção e germinação de conídios, de Colletotrichum spp. Isolados

de coffeae arábica. Ciencia agrotecnica, 29:3 p545-552

https://www.embrapa.br/busca-de-publicacoes/-/publicacao/list/autoria/nome/norton-amador-da-costa?p_auth=zwGgf9JN

https://www.embrapa.br/busca-de-publicacoes/-/publicacao/list/autoria/nome/saturnino-dutra?p_auth=zwGgf9JN

https://www.embrapa.br/busca-de-publicacoes/-/publicacao/list/autoria/citacao/delgado-g-v?p_auth=HB1XBhVH



22

Fato, R; Bergamini, C.; Bortolus, M.; Maniero, A.L.; Leoni, S.;Ohnishi, T.; Lenaz, G.; 2009.

Differential effects of mitochondrial Complex I inhibitors on production of reactive oxygen

species. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Bioenergetics, 1787:384-392.

Fernando,G.D, Ramarathnam R, Krishnamoorthy ,A. S, Savchuk S. C. 2005. Identification and

use of potential bacterial organic antifungal volatiles in biocontrol. Soil Biology &

Biochemistry, 37: 955-964.

Fonseca, M.C.M.; Lehner, M.S. 2015. Gonçalves, M.G.; Paula Júnior, T.J.; Silva, A.F.;

Bonfim, F.P.G.4; Prado, A.L. Potencial de óleos essenciais de plantas medicinais no controle

de fitopatógenos. Revista Brasileira de Plantas Medicinais. Campinas, v.17, n.1, p.45-50.

Costa, J.P.C.; Belo, M. 1999. Diferença entre as espécies de timbó (Derris spp., Fabaceae) de

diferentes regiões da Amazônia no controle da Musca domestica L. Acta Amazonica, 29 (3):

349-364.

Duarte, M.L.R.; Tabaranã, M.G.F.; Albuquerque, F.A.B.; Moraes, A.J.G. 2006. Comunicado

tecnico, Embrapa Amazônia Oriental Controle Químico da Podridão-das-estacas (Sclerotium

rolfsii) da Pimenteira-do-reino. ISSN 1517-2244.

Escobar, R. 1943. Jicama. Enciclopedia Agrícola y de Conocimientos Afines. Escuela Particular

de Agricultura. Cd. Juárez, Chihuahua, Mexico. 2:442-444 p.

Estrella-Parra, E. A.; Gomez-Verjan, J. C.; Gonzalez-Sanchez, I.; Vazquez-Martinez, E. R.;

Vergara-Castaneda, E.; Cerbon, M. A. et al. 2014. Rotenone isolated from Pachyrhizus erosus

displays cytotoxicity and genotoxicity in K562 cells. Natural Product Research, 28:1780-1785.

FRAC - Comité de Ação Sobre Resistência a Fungicidas. code list 2017: Fungicides sorted by

mode of action (including FRAC Code numering) (www.frac.info/.../frac-code-list/frac-code-

list-2017-final.pdf?.) Acesso em 15/04/2017

Gavrilescu M.;Chisti Y. 2005. Biotechnology-a sustainable alternative for chemical industry.

Biotechnol Adv. 23(7-8):471-99.

Garrett, R. 2019. Baseado no texto de Emma Castrique, School of Chemistry, University of

Bristol, UK. Originalmente publicado em:

http://www.chm.brisac.uk/motm/rotenone/startpageh.htm

Hall, F.R.; J.J. Menn. 1999. Biopesticides: use and delivery. Totowa, New Jersey, Humana.

626 p.

Hansberry, R..; Lee, C. 1943. The yam bean, Pachyrhizus erosus Urban, as a possible

insecticide. Journal of Economic Entomology, 39:351-352.

Heider, B.; Tumwegamire, S.; Tukamuhabwa, P.; Ndirigwe, J.; Bouwe, G.; Bararyenya, A.

2011. Nutritional improvement of yam bean and sustainability of farming systems in Central

and West Africa. African Crop Science, 10:93-95.

http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0005272808007093






http://www.frac.info/.../frac-code-list/frac-code-list-2017-final.pdf

http://www.frac.info/.../frac-code-list/frac-code-list-2017-final.pdf

23

Huart, A. 1902. La jicama, su classificación, su cultivo, sus usos. Bol. Soc. Agríc. Mex. 26:555-

558.

IPEA, 2018. ODS – Metas Nacionais dos Objetivos de Desenvolvimento Sustentável, 546p.

(www.ipea.gov.br) Acesso em 25/04/2019.

INPA – Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia. 2017. Cultivo e uso do Cubiu.

(https://www.inpa.gov.br/cpca/areas/cubiu.html) Acesso em 20/08/2017.

Isaias, C.O.; Martins, I.; Silva, J.B.T.; Silva, J.P.; Mello, S.C.M. 2014. Antagonistic action and

bioactive metabolites of Trichoderma spp. against the pathogens Sclerotium rolfsii and

Verticillium dahliae. Summa Phytopathologica, 40:34-41.

Kisambira, A., Muyonga, J.H., Byaruhanga, Y.B., Tukamuhabwa, P., Tumwegamire, S. and

Grüneberg, W.J. 2015. Composition and Functional Properties of Yam Bean (Pachyrhizus spp.)

Seed Flour. Food and Nutrition Sciences, 6:736-746. http://dx.doi.org/10.4236/fns.2015.68076

Knothe, G.; Razon. L.F.; Madulid, D.A.; Agoo, E.M.G.; Castro, M.E.G. 2016 Methyl esters

(biodiesel) from Pachyrhizus erosus seed oil Biofuels, page 1-6.

http://dx.doi.org/10.1080/17597269.2016.1275493

Jimenez, B.A.G. 1994. Extracción de rotenona a partir de las semillas de Pachyrhizus erosus

(jícama). M.Sc. Thesis Escuela de Ingeniería Química, Univ. Costa Rica.

Lautie, E.; Rozet, E.; Hubert, P.; Leclercq, J. Q. 2012. Quantification of rotenone in seeds of

different species of yam bean (Pachyrhizus sp.) by a SPE HPLC-UV method. Food Chemistry,

131:1531-1538.

Lautié, E.; Rozet, E.; Hubert, P.; Vandelaer, N.; Billard, F.; Zum Felde, T. et al. 2013. Fast

method for the simultaneous quantification of toxic polyphenols applied to the selection of

genotypes of yam bean (Pachyrhizus sp.) seeds. Talanta, 117:94-101.

Lima, R. R. 1987. Informações sobre duas espécies de timbó – Derris urucu (Killip Et Smith)

MACBR. Derris nicou (Killip Et Smith) MACBR., Como Plantas Inseticidas. Belém,

Embrapa-Cpatu, 23p.

Lima, D.M. et al. 2011. Tabela brasileira de composição de alimentos-TACO. NEPA-Unicamp.

T113. São Paulo. v. II. 2. ed. 113p.

Lackhan, N.K. 1994. Investigations on in vitro production of rotenone using Pachyrhizus

erosus (L.) Urban. M. Ph thesis, Dept. Plant Science, Fac. Nat. Sci., Univ. St. Augustine,

Trinidad. 115p.

Leuner, O.; Havlik, J.; Budesinsky, M.; Vrkoslav, V.; Chu, J.; Bradshaw, T. D. et al. 2013.

Cytotoxic constituents of Pachyrhizus tuberosus from Peruvian Amazon. Natural Product

Communications, 8:1423-1426.

Lima, R.G.; Silva, R.B.; Lima, H.R.S. 2017. Levantamento etnobotânico no entorno do Jardim

Botânico Adolpho Ducke, Manaus, Amazonas Disponível Scientia Amazonia, 6:63-73.

http://www.ipea.gov.br/

http://www.scielo.br/pdf/sp/v40n1/v40n1a05.pdf



http://dx.doi.org/10.4236/fns.2015.68076

http://www.tandfonline.com/doi/full/10.1080/17597269.2016.1275493

http://www.tandfonline.com/doi/full/10.1080/17597269.2016.1275493

http://dx.doi.org/10.1080/17597269.2016.1275493

24

Lopes, C. V. A.; Albuquerque, G. S. C. 2018Agrotóxicos e seus impactos na saúde humana e

ambiental: uma revisão sistemática. Saúde Debate V. 42, N. 117, P. 518-534

Lukitaningsih, E.; Holzgrabe, U. 2014. Bioactive compounds in bengkoang (Pachyrhizus

erosus) as antioxidant and tyrosinase inhibiting agents. Indonesian Journal of Pharmacy, 25:2-

68. DOI: 10.14499

Martins-Corder, M.P.; Melo, I.S. de. Antagonismo In Vitro de Trichoderma spp. A Verticillium

dahliae Kleb. Scientia agricola, Piracicaba, v. 55, n.1, p. 1-7.

Morais, L.A.S. de. 2009. Óleos Essenciais no Controle Fitossanitário. Bettiol, W. & Morandi,

M. A. B. (Eds.) Biocontrole de doenças de plantas: uso e perspectivas, ISBN: 978-85-85771-

47-8

Matthysse, J.G.; Schwardt. H.H. 1943. Substitutes for Rotenone in Cattle Louse control.

Journal of Economic Entomology, 34:718-720.

Martínez, M. 1936. Plantas utiles de México. 2nd ed. Ediciones Botas, Mexico. Pp. 244-247.

Monteiro, E.C. 2014. Controle alternativo do mofo branco (Sclerotium rolfsii) na cultura de

tomate através de extratos de planta. Universidade Federal De Santa Catarina Campus

Curitibanos Curso De Ciências Rurais.

Moraes, S. A. 2006. Amendoim: Principais doenças, manejo integrado e recomendações de

controle. (http://www.infobibos.com/Artigos/2006_2/amendoim/Index.htm) Acesso em

10/3/2017.

MYCOBANK 2017. S.clerotium rolfsii ( http://www.mycobank.org/name/Athelia%20rolfsii ).

Acesso em 31/01/17.

Noda, H.; Machado, F.M. 1997. Feijão-macuco (Pachyrhizus tuberosus (Lam.) Spreng.). In:

Cardoso, M.A (Coor.). Hortaliças não-convencionais da Amazônia. Brasília: Embrapa-SPI:

Manaus: Embrapa-CPAA. 150p.

Noda, H.; Paiva, W.O.; Bueno, C.R. 1984. Hortaliças da Amazônia. Ciência Hoje, 3:32-37.

PBMC – 2017. Painel Brasileiro de Mudanças Climáticas. 2017. Sumário executivo Base

Científica das Mudanças Climáticas Contribuição do Grupo de Trabalho 1 ao Primeiro

Relatório de Avaliação Nacional do Painel Brasileiro de Mudanças Climáticas.

(http://www.pbmc.coppe.ufrj.br/pt/publicacoes/relatorios-pbmc/item/sumario-executivo-base-

cientifica-das-mudancas-climaticas?category_id=18). Acesso em 31/10//2017.

Park, C.J.; Han,J.S. (2015). Hypoglycemic Effect of Jicama (Pachyrhizus erosus) Extract on

Streptozotocin-Induced Diabetic Mice. Preventive Nutrition and Food Science, 20:88–93.

http://doi.org/10.3746/pnf.2015.20.2.88

http://www.infobibos.com/Artigos/2006_2/amendoim/Index.htm

http://www.infobibos.com/Artigos/2006_2/amendoim/Index.htm

http://www.pbmc.coppe.ufrj.br/index.php/organizacao/o-pbmc

http://www.pbmc.coppe.ufrj.br/pt/publicacoes/relatorios-pbmc/item/sumario-executivo-base-cientifica-das-mudancas-climaticas?category_id=18

http://www.pbmc.coppe.ufrj.br/pt/publicacoes/relatorios-pbmc/item/sumario-executivo-base-cientifica-das-mudancas-climaticas?category_id=18

http://doi.org/10.3746/pnf.2015.20.2.88

25

Park, C.J.; Lee, H.A.; Han, JS. 2016. Jicama (Pachyrhizus erosus) extract increases insulin

sensitivity and regulates hepatic glucose in C57BL/Ksj-db/db mice. Journal of Clinical

Biochemistry and Nutrition, 58: 56–63. http://doi.org/10.3164/jcbn.15-59

Pételot, A. 1952. Les plantes médicinales du Cambodge, du Laos et du Vietnam. Arch.

Recherches Agronomic. Cambodge, Laos, Vietnam 14:1-408. (p. 267).

Punja, Z.K. 1985. Biologia, ecologia, e controle de Sclerotium rolfsii. Annual Review of

Phytopathology, 23:97-127.

Punja, Z.K., Smith, V.L.; Campbell, C.L.; Jenkins, S.F. 1985. Sampling and extraction

procedures to estimate numbers, spatial patterns, and temporal distribution of sclerotia of

Sclerotium rolfsii in soil. Plant Disease, 69: 469-474.

Punja, Z.K. e Rahe, J.E. 1992. Sclerotium. In: Singleton, L.L., Mihail, J.D. e Rush, C.M. (Eds.).

Methods for Research on Soilborne Phytopathogenic Fungi. St, Paul: APS Press. pp.166-170.

Ratanadilok, N.; Thanisawanyangkura, S. 1994. Yam Bean (Pachyrhizus erosus (L.)Urban)

status and its cultivation in Thailand. Pp. 305-314 in Proceedings of the FirstInternational

Symposiumon Tuberous Legumes; Guadeloupe, FWI, 21-24 April 1992.

Ribeiro, K.M.; Souza, R.F.; Santos, A.; Oliveira, A.M.; Amorim de Deus, R.J; Banna,

D.A.D.S.; Vasconcelos, N.C.V. 2008. Avaliação das Atividades Fungitóxicas a Partir do

Extrato Bruto e frações da Raíz de plantas pertencentes ao Gênero Derris (Urucu e Nicou). 48ͦ

Congresso Brasileiro de Química, Rio de Janeiro.

Roig.; Mesa, J.T. 1988. Plantas medicinales, aromáticas e venenosas de Cuba. (1st ed. 1945)

Editorial Cientifico-Tecnica, La Habana.

Saito, M L. 2004. As Plantas Praguicidas: Alternativa para o Controle de Pragas da

Agricultura. Informativo Embrapa Meio Ambiente, Jaguariuna, São Paulo, p.1-3.

Disponivel http://www.agencia.cnptia.embrapa.br/Repositorio/Saito_plantasID-

xWZZuffPN5.pdf

San-Lang W, Shih I.L, Wang C.H, Tseng K.C, Chang W.T, Twu Y.K, Ro J.J, Wang, C.L, 2002.

Production of antifungal compounds from chitin by Bacillus subtilis. Microbial Technology,

31:321-328.

Sarker S. D.; Nahar L. 2012. Natural Products Isolation, 3ra ed. Springer, New York, 217p.

Sales, A.M. 1985. O jacatupé (Pachyrhizus tuberosus): uma fonte potencial de proteína, óleo e

amido. Boletim do ITAL, 22:331-340.

Santana, K. F.A.; Dezordi, C.; Netto, R. C.; Hanada, R. E. Avaliação do controle da podridão

de Sclerotium rolfisii, em tomateiro (Solanum lycopersicum), Por Meio Do Uso de Extratos de

Planta. 2009. , XVllI Jornada de Iniciação Científica PIBIC CNPq/FAPEAM/INPA Manaus,

AM. https://repositorio.inpa.gov.br/bitstream/123/118/1/Kamila%20F.%20A.%20Santana.pdf




26

Silva, L.M.; Caldas, A.P.; A.L.M. Oliveira, J.S.; Simonetti, E.R.S. 2017. O uso do extrato de

Fumo (Nicotina Tabacum) Como Alternativa para o Controle de Pragas em Hortaliças, II

Congresso Internacional de Ciências Agrárias, Coiter-Pdvagro, 9p.

Sigma – sigmaaldrich (Merck). 2019. Rotenone, Disponível em:

(https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/r8875?lang=pt&region=BR)

Silva, E. S. da. 2019. Interação Genótipo X Ambiente de Componentes Agronômicos E Físico-

Químicos de Feijão-Macuco (Pachyrhizus spp.) em Terra Firme e Várzea na Região

Metropolitana de Manaus-Am. Doutorado de Mestrado, Universidade Federal do Amazonas,

Manaus, Amazonas. 93p.

Silva, M.S.M. 2011. Evaluation of the productive potential of two tomato cultivars aiming to

reduce the incidence of the bacterial wilt in Iranduba-Amazonas. 2011. Dissertação de

Mestrado em Agronomia Tropical, Universidade Federal do Amazonas, Manaus, Amazonas

110p.

Silva, E.S. 2015. Avaliação de progênies de feijão-macuco (Pachyrhizus tuberosus (Lam.)

Spreng.), Fabaceae, com base na nodulação natural, caracteres associados e processamento

de raízes tuberosas. Dissertação de mestrado, Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia –

INPA, Manaus, Amazonas. 82p.

Silva Filho, D.F.; Clement, C.R.; Noda, H. 1989. Variação fenotípica em frutos de doze

introduções de cubiu (Solanum sessiliflorum Dunal) avaliadas em Manaus, AM. Brasil. Acta

Amazonica, 19:9-18.

Silva Filho, D.F.; Machado, F.M. 1997. Cubiu (Solanum sessüiflorum Dunal). In: Cardoso,

M.O. (ed). Hortaliças não convencionais da Amazônia. Brasília: EMBRAPA-SPI. Manaus:

EMBRAPA/CPAA, 97-104.

Silva Filho, D.F.; Noda, H.; Paiva, W.O.; Yuyama, K.; Bueno, C.R. & Machado, F.M. 1997.

Hortaliças não convencionais nativas e introduzidas na Amazônia. In: Noda, H.; Souza, L.A.G.

& Fonseca, O.J.M. Duas décadas de contribuições do INPA à Pesquisa Agronômica no Trópico

Úmido. Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia. Ministério da Ciência e Tecnologia.

Manaus. 332p.

Silva Filho, D.F. 1998. Cocona (Solanum sessiliflorum Dunal) cultivo y utilización. Tratado de

Cooperación Amazónica. Secretaría pro tempore, Caracas, Venezuela. 105 pp.

Silva Filho, D.F.; Andrade, J.S.; Clement, C.R.; Machado, F.M.; Noda, H. 1999. Phenotypic,

genetic and environmental correlations between morphological and chemical descriptors in

fruits of cubiu (Solanum sessiliflorum Dunal) in Amazonia. Acta Amazonica, 29:503-511.

Silva Filho, D.F. 2002. Discriminação de etnovariedades de cubiu (Solanum sessiliflorum

Dunal Solanaceae) da Amazônia, com base em suas características morfológicas e químicas.

Tese de Doutorado. INPA/UFAM. Manaus, AM. 117p.

27

Silva Filho, D.F , Machado, M.F; Hirochi Noda; Yuyama, L.K.O; Aguiar, J.P.L; Souza, V.G.

2003 CUBIU (Solanum sessiliflorum Dunal): aspectos agronômicos e nutricionais.

(https://www.inpa.gov.br). Acesso em 05/06/2017.

Silva Filho, D. F.; Yuyama L.K. O.; Aguiar, J. P. L.; Oliveira, M. C.; Martins, L. H. P.; 2005.

Caracterização e avaliação do potencial agronômico e nutricional de etnovariedades de cubiu

(solanum sessiliflorum Dunal) da Amazônia. Acta amazonica 35:399-406.

Silva, R.F.S.; Pascholati, S.F., Ivan, P.B. 2007. Indução de resistência em tomateiro por extratos

aquosos de Lentinula edodes e Agaricus blazei contra Ralstonia solanacearum. Fitopatologia

Brasileira, 32:189-196.

Silva, J.R.; Pais, A.K.; Silva, A.M.F.;Souza, E.B.; Coelho Netto, R.A.; Mariano, R.L.R. 2017.

Variabilidade genética de Ralstonia solanacearum ecotipo moko no Estado do Amazonas. In

50º Congresso Brasileiro de Fitopatologia. ISBN 978-85-66836-16-5.

Sousa, F.M.G, Netto R.A.C.;Silva Flho, D.F. 2004. Problemas fitos sanitários do cubiu

(Solanum sessiliflorum Dunal.) No Estado Do Amazonas. XIII Jornada De Iniciação Científica

CNPQ FAPEAM/INPA, Manaus-AM

Sousa el al. 2012. Tipos de controle alternativo de pragas e doenças nos cultivos orgânicos no

estado de Alagoas, Brasil. Revista Brasileira de Agroecologia. ISSN: 1980-9735, 7(1): 132-

138.

Sousa, M. F. de; Silva, L.V.; Brito, M.D. de; Furtado, D. C. de Medeiro 2017. Tipos de controle

alternativo de pragas e doenças nos cultivos orgânicos no estado de Alagoas, Brasil. Revista

Brasileira de Agroecologia. ISSN: 1980-9735, 7(1):132-138.

Soares, J. Vitor C. 2013. Manejo da murcha de esclerócio (Sclerotium rolfsii Sacc) em pimentão

e seleção de acessos de Capsicum sp. Resistentes. Dissertação de Mestrado, Universidade

Federal do Amazonas, Manaus, Amazonas. 61p.

Sorensen, M. 1996. Yam bean (Pachyrhizus DC.). Promoting the conservation and use of

underutilized and neglected crops. 2. Institute of Plant Genetics and Crop Plant Research,

Gatersleben/ International Plant Genetic Resources Institute, Rome

Scramin, S. 1994. Estudo fitoquímico do gênero Pachyrhizus Rich. ex DC. Tese de Doutorado,

Universidade Estadual de Campinas, Campinas, Brazil. 170p.

Venturoso, D.R.; Bacchi, L.M.A.; Gavassoni, W. L.; Conus, L.A.; Pontim, B.C.A.; Bergamin,

A.C. 2011. Atividade antifúngica de extratos vegetais sobre o desenvolvimento de

fitopatógenos. Summa Phytopathologica Botucatu,37:18-23.

Villar, M.L.D. 1991. Conteúdo Endógeno de Rotenona e Pachyrhizina em Pachyrhizus

tuberosus (Lam.) Spreng. Tese de Doutorado, Campinas: Universidade Estadual de Campinas.

109p.

Villar, M.L.D. Valio, I. F. M. 1994. Rotenone and pachyrhizin in P. tuberosus: effect of

endogenous rotenone and pachyrhizin on early growth of Pachyrhizus tuberosus (Lam.)

Spreng. In: Sorensen M (Ed) Proceedings of the first international symposium on tuber

legumes. FWI, Guadalupe.

https://www.inpa.gov.br)/

28

Vasconcelos, E. M. de. 2018. Estudo da interação genótipo x ambiente da composição físico-

química de raízes de feijão-macuco (Pachyrhizus spp.) na Região Amazônica. Dissertação de

Mestrado, Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia Manaus, Amazonas. 42p.

Upegui, Y.;Quiñones,J.G.W.; Torres F.; Escobar G.; Robledo S.;Echeverri, F. 2014.

Preparation of rotenone derivatives and in vitro analysis of their antimalarial, antileishmanial

and selective cytotoxic activities. Molecules, 19: 18911-18922.

doi:10.3390/molecules191118911

Taiz, L. & Zeiger, E. 2004. Fisiologia Vegetal. 3ª. Ed. Porto Alegre. Ed. Artmed.

Yang, R.Z; Tang.C.S. 1988. Plants used for Pest Control in China: A literature Review.

Economic . Botanic. 42:376-406.

Yin-Fang, D.; Cheng-jun, L. 1987. Fruit as medicine. (Yam Bean. P. 74.) The Rams Skull Press,

Kuranda, Australia.

Zanklan, A.S.; Ahouangonou, S.; Becker, H.C.; Pawelzik, E.; Grueneberg, W.J. 2007.

Evaluation of the storage root-forming legume yam bean (Pachyrhizus spp.) under west African

conditions. Crop Science, 47:1934-1946.

http://dx.doi.org/10.3390/molecules191118911



29

ANEXO Arquivo analisado:

D:\DADOS\INPA\_Dissertacoes_Inpa\Rodrigo Lima\sisvar diametro.dbf

--------------------------------------------------------------------------------

Variável analisada: DIAMETRO_M

Opção de transformação: Variável sem transformação ( Y )

--------------------------------------------------------------------------------

TABELA DE ANÁLISE DE VARIÂNCIA

--------------------------------------------------------------------------------

FV GL SQ QM Fc Pr>Fc

--------------------------------------------------------------------------------

TRATAMENTO 65 598639.099682 9209.832303 362.811 0.0000

TEMPO_H 2 3154.751736 1577.375868 62.139 0.0000

TRATAMENTO*TEMPO_H 130 21235.574922 163.350576 6.435 0.0000

erro 954 24216.986855 25.384682

--------------------------------------------------------------------------------

Total corrigido 1151 647246.413194

--------------------------------------------------------------------------------

CV (%) = 11.17

Média geral: 45.1163194 Número de observações: 1152

--------------------------------------------------------------------------------

--------------------------------------------------------------------------------

Teste Scott-Knott (1974) para a FV TRATAMENTO

--------------------------------------------------------------------------------

NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------

Média harmonica do número de repetições (r): 12.3783271962125

Erro padrão: 1.43203913486339

--------------------------------------------------------------------------------

Tratamentos Médias Resultados do teste

--------------------------------------------------------------------------------

CABRIOTOP 0.225131 a1

P46 39.916667 a2

P15 40.583333 a2

P14 40.666667 a2

P1 41.333333 a2

P5 43.250000 a3

P64 44.166667 a3

P37 44.416667 a3

P25 44.416667 a3

P20 44.500000 a3

P41 44.500000 a3

P10 44.583333 a3

P26 44.916667 a3

P52 45.000000 a3

30

P57 45.250000 a3

P44 45.285714 a3

P12 45.500000 a3

P39 45.583333 a3

P60 45.583333 a3

P35 45.833333 a3

P17 46.000000 a3

P54 46.083333 a3

P18 46.333333 a3

P23 46.333333 a3

P55 46.500000 a3

P16 46.583333 a3

P21 47.333333 a4

P43 47.416667 a4

P59 47.416667 a4

P38 47.666667 a4

P4 47.666667 a4

P63 47.916667 a4

P7 48.000000 a4

P3 48.083333 a4

P45 48.250000 a4

P27 48.500000 a4

P42 48.666667 a4

P56 48.750000 a4

P62 48.833333 a4

P32 49.000000 a4

P58 49.083333 a4

P48 49.333333 a4

P29 49.333333 a4

P22 49.416667 a4

P30 49.833333 a4

P6 49.916667 a4

P50 50.000000 a4

P9 50.000000 a4

P49 50.250000 a4

P24 50.333333 a4

P47 51.250000 a5

P19 51.833333 a5

P34 52.500000 a5

P2 52.916667 a5

P33 53.166667 a5

P40 53.583333 a5

P8 53.666667 a5

P51 53.833333 a5

P11 54.083333 a5

P36 54.250000 a5

P53 54.583333 a5

P28 54.833333 a5

P31 55.083333 a5

P13 55.583333 a5

P61 60.666667 a6

BDA 76.905759 a7

--------------------------------------------------------------------------------

--------------------------------------------------------------------------------

Teste Scott-Knott (1974) para a FV TEMPO_H

--------------------------------------------------------------------------------

NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------

Média harmonica do número de repetições (r): 384

Erro padrão: 0.257110760818011

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 42.906250 a1

0 45.554688 a2

72 46.888021 a3

--------------------------------------------------------------------------------

31

--------------------------------------------------------------------------------

Análise do desdobramento de TRATAMENTO dentro de cada nível de:

TEMPO_H

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

TRATAMENTO /1 65 208406.442832 3206.252967 126.307 0.0000

TRATAMENTO /2 65 188717.515625 2903.346394 114.374 0.0000

TRATAMENTO /3 65 222750.716146 3426.934095 135.000 0.0000

Erro 954 24216.986855 25.384682

--------------------------------------------------------------------------------

Codificação usada para o desdobramento

cod. TEMPO_H

1 = 0

2 = 48

3 = 72

Teste de Scott-Knott (1974) para o

desdobramento de TRATAMENTO dentro da codificação:

1

Obs. Identifique a codificação conforme valores apresentados anteriormente

NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.47669558861373

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------


P46 34.250000 a2

P20 35.500000 a2

P39 37.750000 a2

P1 38.500000 a2

P64 39.250000 a2

P15 39.750000 a2

P38 40.500000 a2

P54 41.750000 a2

P4 42.250000 a2

P52 43.000000 a2

P22 43.000000 a2

P10 43.250000 a2

P42 43.500000 a2

P44 43.500000 a2

P14 44.250000 a3

P47 44.250000 a3

P25 44.500000 a3

P51 44.750000 a3

P17 44.750000 a3

P26 45.250000 a3

P34 45.250000 a3

P12 45.500000 a3

P41 45.750000 a3

P29 46.250000 a3

P59 46.250000 a3

P35 46.500000 a3

P32 46.500000 a3

P57 46.750000 a3

P55 47.000000 a3

P27 47.500000 a3

P60 47.750000 a3

P6 47.750000 a3

P63 48.000000 a3

P40 48.250000 a3

32

P45 48.500000 a3

P37 48.750000 a3

P48 49.000000 a3

P16 49.000000 a3

P43 50.000000 a3

P18 50.250000 a3

P49 50.500000 a3

P3 50.750000 a3

P53 51.500000 a4

P56 51.750000 a4

P9 51.750000 a4

P58 51.750000 a4

P30 51.750000 a4

P21 52.000000 a4

P5 52.250000 a4

P62 54.000000 a4

P50 55.000000 a4

P7 56.000000 a4

P24 56.000000 a4

P2 56.500000 a4

P33 57.250000 a4

P23 57.250000 a4

P8 57.750000 a4

P13 59.250000 a4

P31 62.000000 a5

P36 62.000000 a5

P11 62.750000 a5

P28 63.000000 a5

P61 66.500000 a5

P19 67.000000 a5

BDA 76.841270 a6

--------------------------------------------------------------------------------



2


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.48311933325359

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------


P23 23.500000 a2

P5 23.750000 a2

P14 24.500000 a2

P46 35.250000 a3

P7 35.750000 a3

P15 37.500000 a3

P1 39.250000 a3

P37 39.500000 a3

P18 40.750000 a3

P19 40.750000 a3

P54 41.750000 a3

P59 41.750000 a3

P62 42.000000 a3

P12 42.000000 a3

P56 42.250000 a3

P52 42.750000 a3

P41 43.250000 a3

P10 43.250000 a3

P43 43.250000 a3

P16 43.250000 a3

P63 43.500000 a3

P64 43.750000 a3

P55 43.750000 a3

P3 44.000000 a3

P58 44.500000 a3

33

P17 44.750000 a3

P36 44.750000 a3

P30 45.000000 a3

P24 45.250000 a3

P42 45.250000 a3

P57 45.500000 a3

P26 45.500000 a3

P29 46.000000 a3

P44 46.250000 a3

P45 46.500000 a3

P50 47.000000 a3

P60 47.000000 a3

P48 47.250000 a3

P2 47.250000 a3

P25 48.500000 a4

P32 49.000000 a4

P9 49.250000 a4

P21 49.500000 a4

P22 49.750000 a4

P11 49.750000 a4

P8 50.250000 a4

P39 50.250000 a4

P4 50.500000 a4

P49 51.250000 a4

P6 51.500000 a4

P47 51.500000 a4

P27 53.000000 a4

P38 53.000000 a4

P51 53.000000 a4

P13 53.250000 a4

P35 53.500000 a4

P40 53.750000 a4

P20 53.750000 a4

P33 55.000000 a4

P53 55.500000 a4

P61 55.750000 a4

P28 56.000000 a4

P34 56.250000 a4

P31 57.750000 a4

BDA 73.171875 a5

--------------------------------------------------------------------------------



3


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.48311933325359

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------


P35 37.500000 a2

P25 40.250000 a2

P21 40.500000 a2

P60 42.000000 a2

P57 43.500000 a2

P26 44.000000 a2

P20 44.250000 a2

P15 44.500000 a2

P41 44.500000 a2

P37 45.000000 a2

P27 45.000000 a2

P31 45.500000 a2

P28 45.500000 a2

P1 46.250000 a3

P44 47.000000 a3

P10 47.250000 a3

34

P33 47.250000 a3

P16 47.500000 a3

P19 47.750000 a3

P50 48.000000 a3

P18 48.000000 a3

P17 48.500000 a3

P39 48.750000 a3

P55 48.750000 a3

P12 49.000000 a3

P9 49.000000 a3

P43 49.000000 a3

P49 49.000000 a3

P52 49.250000 a3

P38 49.500000 a3

P64 49.500000 a3

P3 49.500000 a3

P24 49.750000 a3

P45 49.750000 a3

P11 49.750000 a3

P46 50.250000 a3

P4 50.250000 a3

P62 50.500000 a3

P6 50.500000 a3

P58 51.000000 a3

P32 51.500000 a3

P48 51.750000 a3

P7 52.250000 a4

P56 52.250000 a4

P63 52.250000 a4

P30 52.750000 a4

P8 53.000000 a4

P14 53.250000 a4

P5 53.750000 a4

P59 54.250000 a4

P13 54.250000 a4

P54 54.750000 a4

P2 55.000000 a4

P22 55.500000 a4

P29 55.750000 a4

P36 56.000000 a4

P34 56.000000 a4

P53 56.750000 a4

P42 57.250000 a4

P47 58.000000 a4

P23 58.250000 a4

P40 58.750000 a4

P61 59.750000 a4

P51 63.750000 a4

BDA 80.703125 a5

--------------------------------------------------------------------------------

--------------------------------------------------------------------------------

Análise do desdobramento de TEMPO_H dentro de cada nível de:

TRATAMENTO

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

TEMPO_H /1 2 1815.422217 907.711108 35.758 0.0000

TEMPO_H /2 2 10.963965 5.481982 0.216 0.8061

TEMPO_H /3 2 146.166667 73.083333 2.879 0.0555

TEMPO_H /4 2 42.666667 21.333333 0.840 0.4283

TEMPO_H /5 2 450.666667 225.333333 8.877 0.0001

TEMPO_H /6 2 98.000000 49.000000 1.930 0.1432

TEMPO_H /7 2 82.666667 41.333333 1.628 0.1939

TEMPO_H /8 2 1730.166667 865.083333 34.079 0.0000

TEMPO_H /9 2 102.166667 51.083333 2.012 0.1319

TEMPO_H /10 2 71.166667 35.583333 1.402 0.2434

TEMPO_H /11 2 37.500000 18.750000 0.739 0.4746

TEMPO_H /12 2 197.166667 98.583333 3.884 0.0204

35

TEMPO_H /13 2 1478.166667 739.083333 29.115 0.0000

TEMPO_H /14 2 197.166667 98.583333 3.884 0.0204

TEMPO_H /15 2 666.500000 333.250000 13.128 0.0000

TEMPO_H /16 2 292.666667 146.333333 5.765 0.0032

TEMPO_H /17 2 313.166667 156.583333 6.168 0.0021

TEMPO_H /18 2 3130.166667 1565.083333 61.655 0.0000

TEMPO_H /19 2 233.166667 116.583333 4.593 0.0101

TEMPO_H /20 2 136.166667 68.083333 2.682 0.0675

TEMPO_H /21 2 5.166667 2.583333 0.102 0.9049

TEMPO_H /22 2 134.000000 67.000000 2.639 0.0705

TEMPO_H /23 2 620.666667 310.333333 12.225 0.0000

TEMPO_H /24 2 247.166667 123.583333 4.868 0.0077

TEMPO_H /25 2 103.166667 51.583333 2.032 0.1293

TEMPO_H /26 2 142.166667 71.083333 2.800 0.0600

TEMPO_H /27 2 587.166667 293.583333 11.565 0.0000

TEMPO_H /28 2 50.000000 25.000000 0.985 0.3702

TEMPO_H /29 2 220.166667 110.083333 4.337 0.0130

TEMPO_H /30 2 315.500000 157.750000 6.214 0.0020

TEMPO_H /31 2 514.666667 257.333333 10.137 0.0000

TEMPO_H /32 2 613.500000 306.750000 12.084 0.0000

TEMPO_H /33 2 173.166667 86.583333 3.411 0.0326

TEMPO_H /34 2 332.666667 166.333333 6.553 0.0014

TEMPO_H /35 2 372.666667 186.333333 7.340 0.0007

TEMPO_H /36 2 176.166667 88.083333 3.470 0.0308

TEMPO_H /37 2 220.666667 110.333333 4.346 0.0129

TEMPO_H /38 2 12.500000 6.250000 0.246 0.7817

TEMPO_H /39 2 448.166667 224.083333 8.828 0.0002

TEMPO_H /40 2 106.166667 53.083333 2.091 0.1219

TEMPO_H /41 2 34.607143 17.303571 0.682 0.5028

TEMPO_H /42 2 21.500000 10.750000 0.423 0.6530

TEMPO_H /43 2 642.666667 321.333333 12.659 0.0000

TEMPO_H /44 2 378.500000 189.250000 7.455 0.0006

TEMPO_H /45 2 41.166667 20.583333 0.811 0.4412

TEMPO_H /46 2 10.500000 5.250000 0.207 0.8136

TEMPO_H /47 2 2286.000000 1143.000000 45.027 0.0000

TEMPO_H /48 2 152.000000 76.000000 2.994 0.0495

TEMPO_H /49 2 726.166667 363.083333 14.303 0.0000

TEMPO_H /50 2 108.500000 54.250000 2.137 0.1164

TEMPO_H /51 2 60.166667 30.083333 1.185 0.3026

TEMPO_H /52 2 450.666667 225.333333 8.877 0.0001

TEMPO_H /53 2 51.500000 25.750000 1.014 0.3594

TEMPO_H /54 2 254.000000 127.000000 5.003 0.0067

TEMPO_H /55 2 21.500000 10.750000 0.423 0.6530

TEMPO_H /56 2 127.166667 63.583333 2.505 0.0806

TEMPO_H /57 2 320.666667 160.333333 6.316 0.0018

TEMPO_H /58 2 30.166667 15.083333 0.594 0.5493

TEMPO_H /59 2 78.166667 39.083333 1.540 0.2119

TEMPO_H /60 2 236.166667 118.083333 4.652 0.0095

TEMPO_H /61 2 304.666667 152.333333 6.001 0.0025

TEMPO_H /62 2 153.166667 76.583333 3.017 0.0483

TEMPO_H /63 2 211.166667 105.583333 4.159 0.0155

TEMPO_H /64 2 928.500000 464.250000 18.289 0.0000

TEMPO_H /65 2 115.166667 57.583333 2.268 0.1021

TEMPO_H /66 2 18.500000 9.250000 0.364 0.6933

Erro 954 24216.986855 25.384682

--------------------------------------------------------------------------------

Codificação usada para o desdobramento

cod. TRATAMENTO

1 = BDA

2 = CABRIOTOP

3 = P1

4 = P10

5 = P11

6 = P12

7 = P13

8 = P14

9 = P15

10 = P16

11 = P17

12 = P18

13 = P19

14 = P2

15 = P20

16 = P21

17 = P22

36

18 = P23

19 = P24

20 = P25

21 = P26

22 = P27

23 = P28

24 = P29

25 = P3

26 = P30

27 = P31

28 = P32

29 = P33

30 = P34

31 = P35

32 = P36

33 = P37

34 = P38

35 = P39

36 = P4

37 = P40

38 = P41

39 = P42

40 = P43

41 = P44

42 = P45

43 = P46

44 = P47

45 = P48

46 = P49

47 = P5

48 = P50

49 = P51

50 = P52

51 = P53

52 = P54

53 = P55

54 = P56

55 = P57

56 = P58

57 = P59

58 = P6

59 = P60

60 = P61

61 = P62

62 = P63

63 = P64

64 = P7

65 = P8

66 = P9


desdobramento de TEMPO_H dentro da codificação:

1


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 0.631454084907211

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 73.171875 a1

0 76.841270 a2

72 80.703125 a3

--------------------------------------------------------------------------------



2

37


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 0.631454084907211

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

72 0.046875 a1

0 0.063492 a1

48 0.562500 a1

--------------------------------------------------------------------------------



3


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

0 38.500000 a1

48 39.250000 a1

72 46.250000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



4


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 43.250000 a1

0 43.250000 a1

72 47.250000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



5


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------

38


--------------------------------------------------------------------------------

72 49.750000 a1

48 49.750000 a1

0 62.750000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



6


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 42.000000 a1

0 45.500000 a1

72 49.000000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



7


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 53.250000 a1

72 54.250000 a1

0 59.250000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



8


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 24.500000 a1

0 44.250000 a2

72 53.250000 a3

--------------------------------------------------------------------------------


39


9


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 37.500000 a1

0 39.750000 a1

72 44.500000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



10


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 43.250000 a1

72 47.500000 a1

0 49.000000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



11


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 44.750000 a1

0 44.750000 a1

72 48.500000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



12


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

40

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 40.750000 a1

72 48.000000 a2

0 50.250000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



13


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 40.750000 a1

72 47.750000 a1

0 67.000000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



14


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 47.250000 a1

72 55.000000 a2

0 56.500000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



15


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

0 35.500000 a1

72 44.250000 a2

48 53.750000 a3

--------------------------------------------------------------------------------

41



16


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

72 40.500000 a1

48 49.500000 a2

0 52.000000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



17


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

0 43.000000 a1

48 49.750000 a2

72 55.500000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



18


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 23.500000 a1

0 57.250000 a2

72 58.250000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



19


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------

42


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 45.250000 a1

72 49.750000 a1

0 56.000000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



20


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

72 40.250000 a1

0 44.500000 a1

48 48.500000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



21


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

72 44.000000 a1

0 45.250000 a1

48 45.500000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



22


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

72 45.000000 a1

0 47.500000 a1

48 53.000000 a1

43

--------------------------------------------------------------------------------



23


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

72 45.500000 a1

48 56.000000 a2

0 63.000000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



24


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 46.000000 a1

0 46.250000 a1

72 55.750000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



25


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 44.000000 a1

72 49.500000 a1

0 50.750000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



26


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------

44


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 45.000000 a1

0 51.750000 a2

72 52.750000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



27


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

72 45.500000 a1

48 57.750000 a2

0 62.000000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



28


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

0 46.500000 a1

48 49.000000 a1

72 51.500000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



29


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

72 47.250000 a1

45

48 55.000000 a2

0 57.250000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



30


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

0 45.250000 a1

72 56.000000 a2

48 56.250000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



31


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

72 37.500000 a1

0 46.500000 a2

48 53.500000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



32


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 44.750000 a1

72 56.000000 a2

0 62.000000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



33


46

NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 39.500000 a1

72 45.000000 a2

0 48.750000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



34


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

0 40.500000 a1

72 49.500000 a2

48 53.000000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



35


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

0 37.750000 a1

72 48.750000 a2

48 50.250000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



36


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


47

--------------------------------------------------------------------------------

0 42.250000 a1

72 50.250000 a2

48 50.500000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



37


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

0 48.250000 a1

48 53.750000 a2

72 58.750000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



38


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 43.250000 a1

72 44.500000 a1

0 45.750000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



39


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

0 43.500000 a1

48 45.250000 a1

72 57.250000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



40

48


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 43.250000 a1

72 49.000000 a1

0 50.000000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



41


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.37508747151725

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

0 43.500000 a1

48 46.250000 a1

72 47.000000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



42


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 46.500000 a1

0 48.500000 a1

72 49.750000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



43


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------

49


--------------------------------------------------------------------------------

0 34.250000 a1

48 35.250000 a1

72 50.250000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



44


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

0 44.250000 a1

48 51.500000 a2

72 58.000000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



45


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 47.250000 a1

0 49.000000 a1

72 51.750000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



46


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

72 49.000000 a1

0 50.500000 a1

48 51.250000 a1

--------------------------------------------------------------------------------


50


47


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 23.750000 a1

0 52.250000 a2

72 53.750000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



48


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 47.000000 a1

72 48.000000 a1

0 55.000000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



49


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

0 44.750000 a1

48 53.000000 a2

72 63.750000 a3

--------------------------------------------------------------------------------



50


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

51

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 42.750000 a1

0 43.000000 a1

72 49.250000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



51


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

0 51.500000 a1

48 55.500000 a1

72 56.750000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



52


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 41.750000 a1

0 41.750000 a1

72 54.750000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



53


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 43.750000 a1

0 47.000000 a1

72 48.750000 a1

--------------------------------------------------------------------------------

52



54


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 42.250000 a1

0 51.750000 a2

72 52.250000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



55


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

72 43.500000 a1

48 45.500000 a1

0 46.750000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



56


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 44.500000 a1

72 51.000000 a1

0 51.750000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



57


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------

53


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 41.750000 a1

0 46.250000 a1

72 54.250000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



58


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

0 47.750000 a1

72 50.500000 a1

48 51.500000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



59


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

72 42.000000 a1

48 47.000000 a1

0 47.750000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



60


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 55.750000 a1

72 59.750000 a1

0 66.500000 a2

54

--------------------------------------------------------------------------------



61


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 42.000000 a1

72 50.500000 a2

0 54.000000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



62


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 43.500000 a1

0 48.000000 a1

72 52.250000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



63


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

0 39.250000 a1

48 43.750000 a1

72 49.500000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



64


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------

55


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 35.750000 a1

72 52.250000 a2

0 56.000000 a2

--------------------------------------------------------------------------------



65


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

48 50.250000 a1

72 53.000000 a1

0 57.750000 a1

--------------------------------------------------------------------------------



66


NMS: 0.05

--------------------------------------------------------------------------------


Erro padrão: 2.51916068553159

--------------------------------------------------------------------------------


--------------------------------------------------------------------------------

72 49.000000 a1

48 49.250000 a1

0 51.750000 a1

--------------------------------------------------------------------------------

instituto nacional de pesquisas da amazÔnia - inpa ... · pimentão, a pimenta de cheiro e o...

Documents