Capa ndice

4233

Anais do Congresso de Pesquisa, Ensino e Extenso- CONPEEX (2010) 4233 - 4247

RELATRIO FINAL PIVIC 2009/2010

A HISTRIA URBANA DE JATA DE 1836 A 1936 Orientador: Prof. Dr. Marcos Antonio de Menezes-pitymenezes@terra.com.br

Aluno: Adriano Freitas Silva afs.histor@yahoo.com.br

Universidade Federal de Gois - CEP: 75.804-020 - Brasil

Palavras-chave: Espao urbano, regio, Jata/GO.

INTRODUO

Todos ns, que vivemos em cidades, temos nelas pontos de ancoragem da memria: lugares em que nos reconhecemos, em que vivemos experincias do cotidiano ou situaes excepcionais, territrios muitas vezes percorridos e familiares ou, pelo contrrio, espaos existentes em um outro tempo e que s tm sentido em nosso esprito porque narrados pelos mais antigos, que os percorreram no passado. (PESAVENTO, 2008, p. 10)

O processo de urbanizao brasileira teve incio no fim do sculo XVII e

incio do XVIII, quando a minerao do ouro e da prata se expandiu e quando

as ordenanas portuguesas sobre a proibio de fundar cidades no interior do

territrio se afrouxaram. Em Gois, os primeiros arraiais surgiram com a

explorao mineral, principalmente do ouro, no sculo XVIII, quando o estado

ainda fazia parte da Capitania de So Paulo.

Quando a minerao dava seus ltimos suspiros, no restava outra

opo aos mineiros seno a ocupao de reas prximas aos centros

mineradores. Eles se apossaram das terras, requereram as sesmarias e

procuraram legaliz-las, com o intuito de desenvolver uma agricultura bsica

que alimentasse a si e aos seus (CHAUL, 2002). Assim, de acordo com

Barbosa, Teixeira Neto e Gomes (2004), a agropecuria, que j era uma

atividade econmica paralela e associada minerao, ganhou maior

importncia e expresso, impulsionando a formao de cidades.

Alfredo dEscragnolle Taunay, viajante que percorreu as terras goianas

durante o sculo XIX, acrescenta:

Os filhos daqueles inquietos exploradores compreenderam que era impossvel continuar a ingrata minerao que exaure o solo e s enriquece o forasteiro, e ento puseram-se no mais a cavar terra, mas cultiv-la, e de pronto colheitas feracssimas,

Capa ndice

4234

uma aps outras, cada qual mais copiosa, recompensaram o abenoado trabalho. (TAUNAY, 2004, p. 35)

Com base nessas informaes, este trabalho busca reconstituir uma

dada memria acerca da cidade de Jata a partir da histria urbana do

municpio, ou seja, da construo do seu primeiro ncleo urbano e sua

trajetria at 1936. O que se quer saber quais foram as transformaes

ocorridas nesse perodo e o que as teria gerado.

A chegada s margens do Rio Claro: o incio do processo de povoamento da

cidade de Jata

Com a decadncia do ouro, muitas famlias que exerciam a atividade

mineradora foram ao declnio econmico. Os mineiros que permaneceram em

Gois iniciaram novas atividades: a pecuria extensiva e a agricultura de

subsistncia, que impulsionaram a expanso e ocupao do territrio goiano,

uma vez que geraram aumento populacional, atraindo correntes migratrias

vindas de outros estados.

Os imigrantes vindos da zona leste do Brasil, atravs do Rio So

Francisco, tomaram conta de Minas Gerais e chegaram at Gois e Mato

Grosso. A imigrao para o sudoeste goiano data dos anos 30 do sculo XIX,

aps o esgotamento das terras no Tringulo Mineiro. A penetrao na regio

foi rpida, devido principalmente aos incentivos do Governo Imperial. Em 30

anos a regio foi ocupada.

Outro fator que ajudou na imigrao para o sudoeste goiano foi a

abundncia de terras boas para pastagens e a facilidade de acesso

propriedade. Seguindo o caminho das guas e desbravando o territrio

goiano, tais ocupaes se constituam em verdadeiras propriedades

latifundirias que deram origem a cidades como Rio Verde, Jata, Caiapnia,

Quirinpolis, Mineiros, dentre outras (TEIXEIRA NETO, 2002, p. 30).

No perodo de ocupao do sudoeste goiano, mais especificamente de

Jata, algumas reas em torno do Rio Paranaba estavam sendo usadas para a

criao de gado. No caso de Jata, os pioneiros Francisco Joaquim Vilela e o

seu filho Jos Manuel Vilela (figura 1) saram da sua cidade (Esprito Santo

Capa ndice

4235

dos Coqueiros, atual cidade de Coqueiral no Estado de Minas Gerais) e em

1836 entraram pelo leste, atravs de Rio Verde, nos sertes do sudoeste

goiano, em busca de terras produtivas e tambm para a criao de gado. Eles

se instalaram s margens dos rios Claro e Ariranha. A posse das terras,

segundo Basileu Toledo Frana (2004), dava-se pelas leis imperiais ou ento

pela fora.

Figura 1: Jos Manoel Vilela (sentado) ao lado do filho de mesmo nome.

Fonte: www.jatai.not.br

Em 1837, o jovem Jos de Carvalho Bastos, proveniente de Franca, So

Paulo, acompanhado de sua esposa Ana Cndida Gouveia de Moraes, chegou

regio, atravs de Santana do Paranaba, em busca de boas terras goianas e

se instalou s margens do Ribeiro Bom Jardim.

Basileu Toledo Frana, um dos primeiros memorialistas jataienses,

relata a chegada dos pioneiros cidade e destaca algumas caractersticas

deles:

Tudo comeou com os nossos desbravadores no sculo passado, e com as famlias que vieram depois para povoar o serto do Rio Claro. Chegaram com o objetivo de ficar e trouxeram, no mais das vezes, os rudimentos essenciais que aprenderam em seus lugares de origem. Sabiam ler, escrever e contar a fim de atender s necessidades dirias de passar recibos, assinar escrituras, remeter mensagens a parentes que ficaram distantes, ou ainda acompanhar com nmeros e pequenos clculos as transaes simples (...). Portanto, tivemos o privilgio de contar entre os nossos pioneiros com pessoas no s destemidas e laboriosas, mas tambm com algum conhecimento, embora muito primrio, das tcnicas

Capa ndice

4236

sociais da escrita, da leitura e dos nmeros. (...) Deixaram atrs deles, nas Minas Gerais e em So Paulo, especialmente, famlias organizadas com esses mesmos padres culturais mnimos (...), porm fundamentais mesmo nas longnquas terras do Sudoeste de Gois, que vieram domesticar para a civilizao e daqui nunca mais sairiam. (FRANA, 1998, p. 21)

Do encontro dos dois pioneiros ficou acertado amigavelmente que as

terras banhadas por guas da margem esquerda do Ariranha pertenceriam aos

Vilela e as percorridas por afluentes do Bom Jardim seriam dos Carvalho. A

citao a seguir, retirada do livro Os Pioneiros, de Basileu Toledo Frana,

relata esse acerto feito pelos pioneiros na distribuio de terras:

A palestra de Jos Manuel e Carvalho Bastos, sobre guas vertentes do Ariranha e Bom Jardim, no mereceu a ateno de Ana Cndida, quando foi atender ao marido naquele dia. Se quisesse, no repetiria mais do que farrapos do dilogo, palavras soltas, sem sentido completo. Ali, porm estava sendo resolvido assunto de vital importncia para o futuro das duas famlias: os chefes acertaram de modo definitivo, simples e prtico, que todas as terras banhadas por guas afluentes do Ariranha pertenciam aos Vilelas e as percorridas por tributrios do Bom Jardim seriam dos Carvalhos. Na topografia levemente ondulada do sudoeste, isto representava um espigo mestre de doze lguas. Verdadeiro estado. (FRANA, 1998, p. 74)

Ao correr 1838, Jos Manuel Vilela e Jos de Carvalho Bastos foram a

Minas Gerais em busca de gado para procriao. No incio, interessava-lhes a

quantidade, sendo que teriam mais couros para os laos e arreios, sapates e

chinelos, catres e cintos, tacas e ajoujos, tiradeiras e toldas. O gado ia se

tornando o elemento consolidador da penetrao no sudoeste da provncia de

Gois, a principal fonte de riqueza do homem: absorvente e apaixonante

atividade. Iniciava-se a civilizao do couro no extremo sudoeste de Gois.

Desde o incio, os pioneiros se empenharam no desenvolvimento da

regio, fazendo a doao de terras para que fosse erguida a primeira igreja da

cidade, em torno da qual foram construdas casas que passaram a formar o

centro das comemoraes religiosas do povoado que se instalou. Exemplo

disso foi a doao, feita em 13 de maio de 1848 por Francisco Joaquim Vilela e

sua esposa Genoveva Maximina Vilela, de uma parte de suas terras para a

implantao do ncleo inicial do povoado e para a construo, margem do

Capa ndice

4237

crrego Jata, da capela em louvor ao Divino Esprito Santo (padroeiro da

cidade).

A citao abaixo um trecho da escritura assinada por Francisco Vilela,

descrevendo a localizao das terras:

O crrego denominado Jatahy encostado a minha fazenda do Bom Sucesso, sendo os limites desta doao: principiando na barra do dito crrego, pela parte de baixo, guas vertentes do dito crrego, at o alto, dividindo do alto por diante com Jos da Rosa e seguindo pelo espigo mestre at o fim e seguindo pelo espigo guas vertentes do Jatahy, divisando com a mesma fazenda do Bom Sucesso e seguindo por este abaixo at a sua origem, cujo acima declarado doamos. (FRANA, 1998, p. 98)

Depois de doadas as terras para a formao da Capela do Divino

Esprito Santo de Jatahy, Jos Manuel Vilela passou, por volta de 1856, a

projetar a criao de um povoado e a edificao do templo religioso. Importa

lembrar que desde 1836, quando Francisco Joaquim Vilela e seu filho Jos

Manuel Vilela iniciaram o processo de povoamento em Jata, esse territrio era

ligado Cidade de Gois (capital do estado), porm isso mudou em 06 de

novembro de 1856, quando Rio Verde se desmembrou da capital e, com ele,

os vilarejos de Torres do Rio Bonito e Jata, pertencentes ao municpio de Rio

Verde.

Em 17 de agosto de 1864 Jata foi elevado categoria de Distrito,

conforme a Resoluo n 362 do Governo da Provncia de Gois. Pelo artigo 2

desse documento, os habitantes da cidade ficaram obrigados a paramentar s

suas custas e com a necessria decncia a respectiva Matriz. O artigo 4

determinava: Logo que for canonicamente provida, o presidente expedir

ordens para eleio dos Juzes de Paz.

Essa resoluo trouxe muita euforia para a populao da ento

freguesia de Jata, pois a vinda de um vigrio para a localidade significaria no

ir mais a outras cidades em busca de padres para a realizao de casamentos

e batizados, mas tambm imps a necessidade de se construir logo a igreja e

tambm um cemitrio.

Esse sonho se concretizou em 09 de junho de 1867, quando houve o

lanamento da pedra fundamental da primeira Igreja Matriz de Jata (figura 2),

Capa ndice

4238

com missa celebrada pelo padre Antnio Marques Santarm e acompanhada

por grande nmero de fiis. A pedra fundamental do cemitrio localizado

direita da sada para Rio Verde, em uma elevao aps o crrego Jata foi

lanada sete dias depois, em 16 de junho de 1867, com beno do mesmo

padre.

Figura 2: Primeiro templo religioso de Jata

Fonte: www.jatai.not.br

As festas religiosas eram ocasies que motivavam intenso movimento

no povoado. Aconteciam procisses em homenagem ao Divino Esprito Santo,

cavalhadas e corridas de raia. A pedido do vigrio da poca, Pe. Brito, os

fazendeiros levavam seus escravos para que eles pedissem esmolas.

Em 02 de agosto de 1875, o presidente da Provncia de Gois, Antro

Cicero de Assis, aprovou a Resoluo n 547, delimitando as divisas do

municpio de Jata, que ficaram assim estabelecidas:

Das cabeceiras do rio Doce, pela estrada geral que da cidade de Goiaz vai para Coxim; por ella at o rio Verdinho, e por este at sua foz no rio Paranahyba, e por este acima at a barra do rio Claro, e por esta at a barra do rio Doce, e por este at suas cabeceiras, onde comeou a divisa.

Sete anos mais tarde, em 29 de julho 1882, a Assemblia Legislativa

aprovou e o presidente da Provncia sancionou a resoluo n 668, que

elevava categoria de vila a freguesia de Jata, determinando que, logo que os

Capa ndice

4239

habitantes apresentassem os edifcios para a instalao da Casa de Cmara e

Cadeia, seria providenciada a instalao da nova vila.

Em abril de 1883, um grupo de escravos iniciou o transporte de toras de

aroeira das margens do Rio Claro para o largo da futura cadeia pblica. Vrios

homens puseram-se a trabalhar, sob a direo do carpinteiro Miranda, que foi o

responsvel pelos primeiros casares slidos e durveis de Jata. Ele ergueu,

segundo a tradio oral, a casa de Jos Manuel na cidade, o sobrado de

Serafim de Barros, a sede da fazenda So Pedro, o pao municipal, a cadeia

pblica, alm das pontes do Rio Claro e do Paraso.

No ano seguinte, quando acabaram a construo do pao municipal e

dos cubculos da cadeia, o Governo da Provncia determinou a realizao de

eleies, a fim de constituir a primeira Cmara de Vereadores.

Esse fato empolgou o povoado e serviu para dar a todos a conscincia

exata da evoluo administrativa, no momento em que os habitantes iam

escolher representantes polticos para compor a primeira Cmara. Como era

natural naquela poca, no houve disputa; os vereadores foram indicados

pelos moradores de maior poder econmico, de mais prestgio social e de

reconhecida capacidade de comando.

Em 02 de maro de 1885 foram empossados como vereadores o tenente

Jos Inocncio da Costa Lima, Joo Jos Carneiro, Jos Manuel Vilela Jnior e

Joo Manuel de Carvalho. No dia da posse, eles prestaram o seguinte

juramento: Juro aos Santos Evangelhos desempenhar as obrigaes de

vereador da Cmara Municipal da Vila de Jata, de promover quanto em mim

couber, os meios de sustentar a felicidade e integridade do municpio.

(FRANA, 1998, p. 209-210).

No dia 31 de maio de 1895, a sede do municpio foi elevada categoria

de cidade pela Lei Estadual n. 56.

Referencial Terico

A disciplina Histria tem, nos ltimos setenta anos, experimentado uma

intensa renovao. Desde a dcada de trinta do sculo passado, com o

advento dos Annales, que se contrapunha histria positivista, novas

temticas vm sendo propostas aos historiadores. O alargamento do campo

Capa ndice

4240

ganhou impulso notadamente com a Nouvelle Histoire, que questionara o lugar

de onde o historiador escreve, propondo um deslocamento sentido tambm na

perspectiva marxista: de Gramsci a Hobsbawn e Thompson, um estado de

profunda efervescncia intelectual ganhou corpo na arena do conhecimento

histrico.

Nos ltimos anos, porm, os estudos histricos passaram por uma

importante mudana de nfase, a partir do interesse cada vez maior pela

Histria Cultural. Segundo Moutinho (2004), as crticas disciplina (Histria) e

ao prprio conceito de mentalidades contriburam de fato para essa redefinio,

fazendo com que a Histria Cultural se apresentasse como um grande refgio

epistemolgico.

Somos, pois, historiadores formados no bojo dessa renovao

historiogrfica do sculo XX, que viu o esgotamento das explicaes oferecidas

por modelos tericos globalizantes, com tendncias totalidade, nos quais o

historiador era refm da busca da verdade. tal fato que nos fez, no mbito

desta pesquisa, optar pelos mtodos da chamada Nova Histria Cultural.

Entretanto, no nos limitamos a eles. Adotamos tambm alguns procedimentos

da Micro-histria, uma vez que esta um desdobramento terico intimamente

ligado ao surgimento da Nova Histria Cultural.

O arcabouo intelectual que deu origem Nova Histria Cultural est

fortemente vinculado ao surgimento, no final da dcada de 1920, na Frana, de

uma nova forma de se pensar as questes historiogrficas, identificada como

Histria das Mentalidades. Essa vertente de interpretao dos fatos histricos

buscava fugir da histria historicizante: uma histria que se furtava ao dilogo

com as demais cincias humanas: a antropologia, a psicologia, a lingustica, a

geografia, a economia e, sobretudo, a sociologia.

No lugar desse tipo de manejo dos fatos histricos, era preciso adotar,

segundo Vainfas (2002, p. 17),

uma histria problematizadora do social, preocupada com as massas annimas, seus modos de viver, sentir e pensar. Uma histria com estruturas em movimento, com grande nfase no mundo das condies de vida material, embora sem qualquer reconhecimento da determinncia do econmico na totalidade social, diferena da concepo marxista da histria. Uma histria no preocupada com a apologia de prncipes ou generais em feitos singulares, seno com a sociedade global,

Capa ndice

4241

e com a reconstruo dos fatos em srie passveis de compreenso e explicao.

O referencial terico a possibilitar essa abordagem o da Nova

Histria Cultural, que traz uma nova forma de a histria tratar a cultura,

segundo Pesavento (2004, p. 15), no mais como uma mera histria do

pensamento, onde se estudava os grandes nomes de uma dada corrente ou

escola. Mas, enxergar a cultura como um conjunto de significados partilhados e

construdos pelos homens para explicar o mundo.

Cabe salientar que esse novo paradigma no nega a importncia das

outras cincias humanas. Sobre essa questo, Vainfas (2002, p. 56) assegura

que os historiadores da cultura no chegam propriamente a negar a relevncia

dos estudos sobre o mental. No recusam, pelo contrrio, a aproximao com

a antropologia e demais cincias humanas, admitem a longa durao e no

rejeitam os temas das mentalidades e do cotidiano.

Portanto, podemos afirmar, concordando com Lacerda Filho (2005),

que a Nova Histria Cultural revela uma especial afeio pelo informal, por

anlises historiogrficas que apresentem caminhos alternativos para a

investigao histrica, indo onde as abordagens tradicionais no foram. E foi

nesse mar de possibilidades novas que vrios historiadores passaram a

navegar.

No podemos nos desviar da classificao de Histria Local ou

Regional que uma pesquisa como a que fazemos pode receber. Os trabalhos

identificados como de Histria Regional so constantemente questionados pelo

fato de que toda pesquisa aborda determinado espao; da todas as pesquisas

serem regionais, no necessitando enfatizar a metodologia.

Com base no entendimento de que a Histria Regional estuda o

contexto histrico de determinado espao, tomando-o como delimitao para o

objeto de estudo, Barros (2004, p. 152) disserta que,

quando um historiador se prope a trabalhar dentro desse mbito, ele se mostra interessado em estudar diretamente uma regio especfica. Importa destacar que o espao regional no estar necessariamente associado a um recorte administrativo ou geogrfico, podendo se referir a um recorte antropolgico, a um recorte cultural ou a qualquer outro recorte proposto pelo historiador de acordo com o problema histrico que ir examinar.

Capa ndice

4242

A respeito disso, Gonalves, Reznik e Figueiredo (2000, p. 546)

consideram um engano julgar que a eleio de um local, sob a perspectiva de

uma histria local, implica uma simplificao do nmero de variantes e

aspectos da trama social e ressaltam:

O local alado em categoria central de anlise pode vir a constituir uma nova densidade no quadro das interdependncias entre agentes e fatores constitutivos de determinadas experincias histricas ento eleitas pela lupa do historiador. Nessa nova pintura, cada aparente detalhe, insignificante para um olhar apressado ou na busca exclusiva dos grandes contornos, adquire valor e significado na rede de relaes plurais de seus mltiplos elementos constitutivos.

importante explicarmos tambm que Histria Regional e Micro-

histria no so a mesma coisa. A Micro-histria faz uma reduo de escala

de observao para perceber aspectos que poderiam no ser percebidos na

anlise macro, enquanto a Histria Regional faz o estudo da realidade

recortada por ela mesma.

Enfim, consideramos a abordagem sob o recorte da Histria Local um

campo privilegiado de investigao para os diversos nveis em que se tranam

e constituem as relaes de poder entre indivduos, grupos e instituies.

Trata-se de um territrio instigante que convida e provoca o pesquisador para a

anlise dos imbricados processos de sedimentao das identidades sociais,

em particular dos sentimentos de pertencimento e dos vnculos afetivos que

agregam homens, mulheres e crianas na partilha de valores comuns, no gosto

de se sentir ligado a um grupo.

Metodologia

Para viabilizar a pesquisa, reconstituir e registrar a histria e a memria

do espao urbano de Jata, pretendemos utilizar fontes de diversas naturezas:

fotos, plantas arquitetnicas, licenas e alvars de construo emitidos pela

prefeitura, plano diretor urbano, plano de higiene pblica e outros documentos

pblicos e privados, escritos e iconogrficos, alm de fontes orais. Esse ser o

primeiro momento da pesquisa.

Capa ndice

4243

O trabalho com fontes orais se pautar na perspectiva de Thompson

(2002, p. 176) de que todas as fontes so falveis e sujeitas a vis, e cada uma

delas possui fora varivel em situaes diferentes. Em alguns contextos, a

evidncia oral o que h de melhor; em outras, ela suplementar, ou

complementar, a de outras fontes.

Ser considerado o conceito de representao de Roger Chartier: a

representao como dando a ver uma coisa ausente, o que supe uma

distino radical entre aquilo que representado; a representao como

exibio de uma presena, como apresentao de algo ou de algum.

Seguindo a perspectiva do autor, propomos, nesta pesquisa, dar a ver aquilo

que est ausente. O conceito de simblico apresentado por Chartier uma

representao moral atravs de coisas naturais ou imagens nos ajudar no

trabalho com as fontes.

Resultados:

O que se quer preservar a memria do espao urbano de Jata e a

representao que se faz sobre o passado da cidade. compreendendo que

cada marca deixada pelo homem no espao urbano constri memria que este

trabalho pretende contribuir para que o passado de Jata no se perca no

tempo, no vire p, como o que est ocorrendo com muitas das suas

construes centenrias.

Buscaremos tambm catalogar, registrar e documentar toda a pesquisa,

a partir da qual sero produzidos ensaios e artigos cientficos e um catlogo

fotogrfico sobre o patrimnio arquitetnico de Jata a organizao deste

est entre as primeiras providncias a se tomar, pois as edificaes do sculo

XIX so raras e esto em pssimo estado de conservao. A documentao

relativa a essas construes, bastante antiga, compe outro rico material que

ser reproduzido e organizado para exposio.

Resultados Obtidos:

Acesso a livros que contm leis e resolues (Instituto Frei Simo da

Cidade de Gois); neles foram encontradas as resolues n 547, que

Capa ndice

4244

delimita as divisas do municpio de Jata, e n 668, que eleva categoria

de vila a freguesia de Jata.

Acesso s leis estaduais (Arquivo Estadual) leis de elevao

categoria de vila e cidade, documentos referentes segurana pblica e

atas eleitorais.

Participao de encontros na rea de Histria, apresentando os

resultados das pesquisas.

Referncias:

FONTES PRIMRIAS IMPRESSAS:

1 Documentos do Cartrio Civil da Comarca de Jata.

2 Documentos de batismo da Igreja Catlica de Jata.

3 Arquivo Pblico do Estado de Gois.

4 Arquivo do Museu das Bandeiras.

5 Arquivo da Diocese da cidade de Gois.

6 Arquivo Frei Simo na cidade de Gois.

7 Arquivos do Instituto de Pesquisas e Estudos Histricos do Brasil Central

IPHBC.

8 Escritos dos memorialistas sobre Jata:

AMURRIO, Hugo Ayaviri. Assim Jata. Jata: UFG, 1994.

CURADO, Antnio Miguel Fleury. Jata e sua histria. Jata: UFG, 1984.

FRANA, Almrio Barros; LIMA, Binmio da Costa. Primeiros fazendeiros

do sudoeste goiano e do leste mato-grossense: genealogia e histria. Jata:

Sudogrfica, 2004.

FRANA, Basileu Toledo. Cavalo de rodas. Jata, 1979.

FRANA, Basileu Toledo. Pioneiros. Goinia: EdUFG, 1995.

FRANA, Basileu Toledo. Velhas escolas. Goinia: EdUFG, 1998.

LIMA, Filadelfo Borges de. Jata do meu tempo. s/l, 1998.

LIMA. Filadelfo Borges de. Crnicas da colmia. Jata: Sudogrfica, 2005.

LIMA. Filadelfo Borges de. Jata, minha paixo. Jata: Sudogrfica, 2001.

LIMA. Filadelfo Borges de. Prefeitos de Jata: de Carlos Raimundo a

Humberto Machado. Jata, 2002.

Capa ndice

4245

MELLO, Dorival Carvalho. Jatahy: pginas esquecidas. Jata: Sudogrfica,

2001.

MELLO, Dorival de Carvalho. Nos pores do passado: a descoberta de

Jata. Jata, 2002.

MELLO, Evaldo Cabral de. Um imenso Portugal: histria e historiografia. So

Paulo: Editora 34, 2002.

9 Escritos dos viajantes do sculo XIX:

CUNHA MATTOS, Raimundo Jos. Itinerrio do Rio de Janeiro ao Par e

Maranho pelas Provncias de Minas Gerais e Gois. Rio de Janeiro:

Typographia de J. Villeneuve, 1836.

LEAL, Oscar. Viagem s terras goyanas (Brazil Central). Goinia: Ed. Da

Universidade Federal de Gois, 1980.

POHL, Johann Emanuel. Viagem ao Interior do Brasil (1819). Belo Horizonte:

Ed. USP/Itatiaia, 1976.

SAINT-HILAIRE, Auguste de. Viagem Provncia de Gois. Belo Horizonte,

Ed. Itatiaia; So Paulo, Ed. Universidade de So Paulo, 1975.

TAUNAY, Afonso de E. Goyaz. Rio de Janeiro: Francisco Alves, 2004.

10 Fontes iconogrficas:

www.jatai.not.br

BIBLIOGRAFIA:

A OBRA DO SCULO: documentrio histrico de Jata. Jata

ALENCASTRE, Jos Martins Pereira de. 1863. Anais da Provncia de Gois.

Braslia: Ed. Grfica Ipiranga Ltda., 1979.

BARBOSA, Altair Sales; TEIXEIRA NETO, Antnio; GOMES, Horieste.

Geografia: Gois e Tocantins. 2 ed. Goinia: Editora da UFG, 2004.

BARROS, Jos DAssuno. O campo da Histria: especialidades e abordagens. Petrpolis, RJ: Vozes, 2004.

BERTRAN, Paulo (Org.). Notcia Geral da Capitania de Gois1783.

Goinia/Braslia: Solo Editores, 1997.

Capa ndice

4246

BRANDO, Antnio Jos da Costa. Almanach da Provincia de Goyas para o

ano de 1886. Goinia: UFG, 1978.

BURKE, Peter. O que histria cultural? Rio de Janeiro: Jorge Zahar, 2005.

CHAIM, Marivone Mattos. A sociedade colonial goiana. Goinia: Oriente, 1978.

CHARTIER, Roger. A Histria Cultural: entre prticas e representaes.

Lisboa/Rio de Janeiro: B. Brasil/Difel, 1990.

CHAUL, Nasr Fayad (Org.) Caminhos de Gois: da construo da decadncia

aos limites da modernidade. Goinia: Ed. da UFG/Ed. da UCG, 1997.

CHAUL, Nasr Fayad; RIBEIRO, Paulo R. (Orgs.). Gois: identidade, paisagem

e tradio. Goinia: Ed. UCG, 2001.

CHAVEIRO, Egmar Felcio. A prxis simblica do Gois profundo. Goinia:

Mimegrafo, 2007.

CURADO, Antnio Miguel Fleury. Jata e sua histria. Jata: UFG, 1984.

GOMES, Horieste. Geografia scio-econmica de Gois. Goinia: Livraria

Brasil Central Editora, 1969.

GOMES, Modesto. Estudos de Histria de Gois. Goinia: Grfica do Livro

Goiano Ltda, 1974.

Lacerda Filho, Mozart. Nova histria cultural e micro-histria: uma breve reflexo de suas origens. Revista Museu, 2005. Disponvel em http://www.revistamuseu.com.br/artigos/art_.asp?id=5619

LE GOFF, Jacques. A histria nova. Traduo: Eduardo Brando. 5. ed. So

Paulo: Martins Fontes, 2005.

MENEZES, Marcos Antonio de. Olhares sobre a cidade: narrativas poticas

das metrpoles contemporneas. So Paulo: Cone Sul, 2000.

MOUTINHO, Augusto. O ndio brasileiro: ainda um vazio na histria. Historianet, 16 maio 2004. Disponvel em: . Acesso em: 04 maio 2009.

PALACIN, Luiz. Gois 1722-1822: estrutura e conjuntura numa capitania de

Minas. Goinia: Oriente, 1976.

PALACIN, Luiz. O sculo do ouro em Gois. Goinia: Oriente, 1979.

PALACIN, Luiz. Quatro tempos de ideologia. Goinia: Cerne, 1986.

Capa ndice

4247

PALACIN, Luiz; GARCIA, Ledonias Franco; AMADO, Janana. Histria de

Gois em Documentos - I Colnia. Coleo Documentos Goianos - n. 29 -

Goinia: UFG, 1995.

PALACIN, Luiz; MORAES, Maria Augusta Sant'Anna. Histria de Gois

1822/1972. Goinia: Cegraf, 1975.

PALACN, Luiz; MORAES, Maria Augusta Sant'Anna. Histria de Gois. 6. ed.,

Goinia: Ed. UCG, 1994.

PESAVENTO, Sandra Jatahy. Histria e histria cultural. Belo Horizonte, MG: Autntica, 2004.

PESAVENTO, Sandra Jatahy. Histria, memria e centralidade urbana.

Revista Mosaico, Goinia, v. 1, n. 1, p. 3-12, jan./jun. 2008.

REZNIK, Lus. Qual o lugar da histria local?. Artigo publicado em www.historialocal.com.br, acessado em 25.08.2004.

SILVA, Mrcio Rodrigues. Encontros e desencontros: estudos do espao

urbano de Jata-GO. 2005. 114 f. Dissertao (Mestrado em Geografia)

Programa de Pesquisa e Ps-Graduao de Geografia do Instituto de Estudos

Scio-Ambientais da Universidade Federal de Gois.

THOMPSON, Paul. A voz do passado: histria oral. Rio de Janeiro: Paz e

Terra, 2002.

VAINFAS, Ronaldo. Os protagonistas annimos da histria. So Paulo, SP: Campus, 2002.

Capa ndice

4248

Anais do Congresso de Pesquisa, Ensino e Extenso- CONPEEX (2010) 4248 - 4261

A Identidade do Pronto-Sorriso, seus Efeitos e Causa no Processo

de Humanizao entre os Acadmicos, os Pacientes e os

Colaboradores do Hospital das Clnicas de Goinia

Aguinaldo Gabarron Murcia Filho, Ftima Maria Lindoso da Silva Lima

Universidade Federal de Gois, 74001-970, Brasil

gabarron_mf@hotmail.com e fatimalindoso@hotmail.com

PALAVRAS-CHAVE: Pronto-Sorriso; Relao Mdico-Paciente; Medicina.

1 INTRODUO

O Pronto-Sorriso foi criado em 1998 por acadmicos da Faculdade de

Medicina como um projeto de extenso da Universidade Federal de Gois, sem fins

lucrativos, e coordenado pela gastropediatra Dra. Ftima Maria Lindoso da Silva

Lima. O grupo est em atividade desde maro de 1999, no Hospital das Clnicas de

Goinia e eventualmente em eventos em creches, hospitais e postos de sade. O

projeto desenvolvido por uma equipe multidisciplinar, envolvendo profissionais de

diversas reas, como medicina, pedagogia, artes cnicas e arte circense.

Em 2007 o Pronto-Sorriso foi inserido no modelo de Ncleo Livre, fazendo

com que a durao passasse de um ano e seis meses para dois anos, divididos em

dois ncleos de atividades, com durao de um ano em cada fase.

2 JUSTIFICATIVA

Capa ndice

4249

O Pronto-Sorriso, apesar de similar a outros projetos de palhaos de

hospital, possui algumas singularidades. um projeto vinculado a uma instituio de

ensino (UFG), a qual permite a qualquer aluno participar do mesmo, cumprindo

assim, uma importante funo social de integrao de indivduos de diferentes reas

do conhecimento. No entanto, como caracterstica principal, a maior parte desses

alunos so graduandos em Medicina dos primeiros perodos do curso. Tal fator de

especial relevncia para estes acadmicos, haja vista que o pronto-sorriso

proporciona um primeiro contato desses indivduos tanto com o ambiente hospitalar

quanto com os pacientes, sob uma viso diferente da relao aluno-paciente

tradicional.

3 OBJETIVOS

Temos por objetivos:

1. Traar o perfil de diferentes projetos com objetivos e procedimentos

semelhantes ao Pronto-Sorriso;

2. Identificar, descrever e analisar semelhanas e diferenas entre tais

projetos e o Pronto-Sorriso;

3. Analisar as influncias exercidas pelo ambiente hospitalar e seus

freqentadores nos doutores-palhaos e na estrutura do curso.

4 METODOLOGIA

Este estudo foi desenvolvido no Hospital das Clnicas da Universidade

Federal de Gois durante o perodo de agosto de 2009 a julho de 2010. Trata-se de

um estudo observacional, qualitativo, quantitativo e longitudinal, tornando-se

transversal na pesquisa com os acompanhantes dos pacientes da pediatria.

Capa ndice

4250

Os sujeitos da pesquisa foram acadmicos, mdicos e assistentes do

Hospital das Clnicas que participaram ou que estavam participando do Pronto-

Sorriso e demais funcionrios do hospital que estavam em contato com este projeto.

Alm dos acompanhantes da pediatria.

Foram includos os acadmicos que estavam iniciando suas atividades no

Grupo Pronto-Sorriso. Neste grupo a coleta dos dados ocorreu em 2 etapas: 1-

durante o incio do curso de formao do palhao, no momento anterior as entradas

no hospital e o 2 ao final do curso aps s atividades na unidade hospitalar. Em

ambos os momentos foram aplicados o mesmo questionrio a esses alunos.

Tambm foram includos pacientes e colaboradores do Hospital das Clnicas do ano

de 2009. Houve excluso dos acompanhantes de pacientes que estavam em mal

estado geral, bem como daqueles que ainda no receberam visita dos doutores-

palhaos. Foram enviados questionrios, via e-mail, aos projetos similares ao

Pronto-Sorriso em todas as regies do pas.

Os questionrios utilizados foram os de Morgana Masetti, a Escala

Multidimensional de Satisfao de Vida para Crianas, de Claudia Holfheinz

Giacomoni e o Questionrio de Avaliao de Motivao, de Rafael de Deus Pires.

Tais questionrios foram escolhidos aps levantamento bibliogrfico, seguido de

fichamento e anlise.

A aplicao dos questionrios validados se efetivou aps a coleta das

assinaturas do termo de livre consentimento para a participao do sujeito na

pesquisa. Foram aplicados os testes aos alunos do Pronto Sorriso, aos

colaboradores do Hospital das Clnicas e aos acompanhantes dos pacientes em

duas fases: primeiro, no incio do curso Prtico-terico; segundo, no fim das suas

entradas e performances no Hospital das Clinicas de Goinia (ao final do semestre).

Aps a coleta dos dados, estes foram analisados e seus resultados confrontados

com os da anlise bibliogrfica. Por fim, a elaborao deste relatrio final.

Capa ndice

4251

Os dados obtidos com as respostas objetivas foram analisados com

ferramentas estatsticas Microsoft Excel e EpiInfo - e transformados em grficos

para melhor compreenso. J os colhidos atravs de respostas subjetivas foram

avaliados atravs da anlise de contedo de Bardin (1977) e Minayo (1999, p. 22) e

tambm tratados com a utilizao de ferramentas estatsticas (Microsoft Excel e

EpiInfo).

5 RESULTADOS E DISCUSSO

Tendo sido, a princpio, inspirado no trabalho realizado pelos Doutores da

Alegria, de So Paulo, e nas idias do Dr. Patch Adams, como a humanizao do

ambiente hospitalar, ao longo dos anos de atuao o Pronto Sorriso desenvolveu

uma personalidade prpria. Ao aprofundarmos nossa anlise, podemos perceber

diferenas cruciais. Em sua misso os Doutores da Alegria propem:

Nossa misso ser uma organizao proeminentemente dedicada a levar

alegria a crianas hospitalizadas, seus pais e profissionais de sade, atravs

da arte do palhao, nutrindo esta forma de expresso como meio de

enriquecimento da experincia humana. (http://www.doutoresdaalegria.org.br.

2009)

No Pronto Sorriso a misso humanizar os mdicos e outros profissio-

nais por meio de uma viso inter-relacional palhao-paciente. De acordo com nossa

pesquisa, 57,5% dos alunos procuram o projeto buscando crescimento pessoal e

apenas 8,5%por altrusmo (Grfico 1).

Grfico 1: Motivo da participao dos alunos no Pronto-Sorriso

Capa ndice

4252

Sem desprezar a capacidade dos doutores-palhaos de melhorarem o

ambiente e at influenciarem na boa recuperao dos internos em hospitais, o

Pronto-Sorriso acredita que as possibilidades deste tipo de projeto vo muito alm.

Baseados na afirmao de que todo relacionamento modifica ambas as partes, o

Pronto-Sorriso cuida desta relao como um todo, preparando no s o atuante para

incorporar o personagem palhao, como tambm para avaliar e incorporar as

vivncias proporcionadas pelo projeto em sua futura vida profissional.

A maior parte dos projetos pesquisados, de um total de 36, representando

as 5 regies do pas, trabalha com voluntrios de profisses variadas (58,3%), ou

com atores que se especializam na arte do palhao (11,1%), como podemos ver no

Grfico 2.

Grfico 2: Distribuio dos participantes de acordo com sua fase profissional nos

projetos de interveno hospitalar.

Capa ndice

4253

Os doutores-palhaos do Pronto-Sorriso so, em sua maioria,

estudantes de medicina (49,1% -n1=106) e de outras faculdades da sade

Psicologia, Odontologia, Enfermagem e da rea biolgica Biologia, Agronomia -

(25,5% -n=106) como verificado no grfico 3. Neste sentido, encontramos dois

projetos (5,5% n=36) que trabalham com acadmicos, sendo que um abrangendo

cursos diversos e outro abrangendo acadmicos de medicina e psicologia.

Grfico 3: distribuio dos acadmicos de acordo com os cursos

Capa ndice

4254

Outra preocupao do Pronto-Sorriso o incentivo produo cientfica

por parte dos alunos. De acordo com os dados levantados, 58,3% dos grupos

pesquisados declararam no realizar nenhum tipo de produo cientifica. (grfico 4)

Grfico 4: Distribuio dos grupos em relao a produo cientfica

Outro dado relevante a durao dos projetos. De todos os projetos

analisados, 14 (38,9%) tem apenas dois anos de durao e outros 38,9% no

ultrapassam os dez anos de intervenes (Grfico 5). O Pronto-Sorriso por sua vez,

tem doze anos de existncia, e, portanto, um tempo de existncia maior do que

77,8% dos grupos analisados. Nesses doze anos o Pronto-Sorriso sofreu diversas

modificaes. Desde sua transformao em Ncleo livre, o corpo de docentes rev

semestralmente suas atividades, realizando mudanas baseadas em avaliaes e

em relatos de experincia dos alunos. O longo tempo de existncia do projeto tem

sido essencial para o aprimoramento do mesmo, tornando-o mais eficiente em sua

contribuio acadmica.

Capa ndice

4255

Grfico 5 distribuio temporal dos grupos de interveno/clown nos hospitais

Em relao ao numero de participante destes projetos constatamos que

nos projetos pesquisados mais da metade (58,3%) atingiram abaixo de 50

participantes ao longo de sua existncia. Os de maior alcance atingiram no mximo

300 participantes. (Grfico 6). O Pronto-Sorriso prepara uma mdia de 100 alunos

por ano, com uma carga-horria de 12 horas-ms. Estes dados do a medida do

alcance do projeto na UFG, tendo atingido em seus 12 anos de atuao a mais de

mil alunos.

Grfico 6: Distribuio em relao a quantidade(n) de participantes e tempo de

durao do projeto

Capa ndice

4256

Baseados na afirmao de que todo relacionamento modifica ambas as

partes, o Pronto-Sorriso cuida desta relao como um todo, preparando no s o

atuante para incorporar o personagem palhao, como tambm para avaliar e

incorporar as vivncias proporcionadas pelo projeto em sua futura vida profissional.

Alm da evidncia sinalizada pelo fato dos alunos buscarem o projeto mais por

crescimento pessoal que por altrusmo, outro sinal est na expectativa ao se

inscreverem, como a de realizao pessoal (39,6%) que est bem prxima de

levar bem estar ao prximo (41,5%). Ambas seguidas pela de auto-superao

(perda da timidez) e pela de melhoramento nas relaes inter-pessoais (com 26,4%

respectivamente) como observamos no Grfico 7. Estes nmeros mostram que, sem

esquecer-se do objetivo altrusta de melhorar o ambiente hospitalar, os alunos esto

cientes da importncia que esta vivncia pode ter na sua formao como

cuidadores.

Capa ndice

4257

Grfico 7: distribuio dos motivos de procura ao projeto Pronto-Sorriso

Analisando outras diferenas entre o Pronto-Sorriso e os demais projetos

afins encontramos a dinmica de oferecimento do treinamento no curso de

palhao.

Para fins de anlise, classificamos os tipos de treinamento em:

- Estgio Quando o treinamento se resume ao acompanhamento, j no

local da apresentao, por atuantes mais experientes;

- Oficina Quando o treinamento de menos de uma semana;

- Curso Quando o treinamento de mais de uma semana;

- Palestra Quando o treinamento no envolve exerccios prticos.

A grande maioria dos projetos (36%) trabalha com oficinas. 25% fazem

estgios e somente 22% fazem curso (Grfico 8).

Hoje, no Brasil, pululam os projetos de palhaos de hospital. Alguns,

espelhando-se nos Doutores da Alegria, esmeram-se em desenvolver

uma tcnica de relacionamento e abordagem adequada a pblico to

diferenciado, mas, infelizmente, a imensa maioria de projetos bem

Capa ndice

4258

intencionados feitos por voluntrios que tentam brincar de palhao

com as crianas hospitalizadas. (CASTRO, 2005. P. 226)

Grfico 8 Tipo do treinamento para a formao dos doutores-palhaos

A maior parte dos treinamentos relatados se refere a tcnicas de atuao.

Somente 19,4% relatam receber treinamentos ou informaes relativas s

especificidades do trabalho em hospital, como o cuidado com infeces e medidas

como lavar as mos sempre que for interagir com outro paciente. Apenas um projeto

relata fazer trabalhos de integrao com o grupo de atuao.

O foco do treinamento dos grupos pesquisados sempre o produto, a

atuao do palhao em si.

Os grupos que realizam treinamentos voltados somente para as artes

cnicas trabalham pela qualidade final de um produto artstico. O Pronto-Sorriso

trabalha pelo processo, valorizando mais o desenvolvimento pessoal que o produto

artstico, ainda que sem descuidar da qualidade final. Isto porque a funo da

Medicina vai alm do tratamento de patologias, com uso de drogas ou com

intervenes cirrgicas. O ponto fundamental deste ncleo livre est voltado as

Capa ndice

4259

relaes interpessoais e o autoconhecimento dos acadmicos, ampliando os

horizontes do conhecimento dentro de uma concepo biopsicosocial-cultural e

espiritual, para que ele se torne um profissional diferenciado, crtico, sensvel,

comunicativo e com uma nova concepo do cuidar.

6 CONCLUSO

1- O Pronto-Sorriso um dos poucos, seno o nico projeto dentre os

pesquisados cujo foco est na relao, e no no produto final, cuja misso

humanizar os acadmicos, os mdicos e outros profissionais por meio de uma viso

inter-relacional palhao -acadmico e palhao-paciente.

2- A maior parte dos projetos pesquisados, trabalha com voluntrios de

profisses variadas (58,3%), ou com atores que se especializam na arte do palhao

(11,1%). Os doutores-palhaos do Pronto-Sorriso so, em sua maioria, estudantes

de medicina (49,1% /106) e de outras faculdades da sade : Psicologia,

Odontologia, Enfermagem e da rea biolgica: Biologia, Agronomia (25,5% /106).

3- O treinamento dos acadmicos no Pronto Sorriso oferece uma viso

holstica ampliando os horizontes, favorecendo o autoconhecimento, aprimorando as

relaes interpessoais, que promove melhoria na relao acadmico- acadmico,

acadmico-paciente, acadmico- cuidador e acadmico- professor, dentro do

processo ativo de ensino- aprendizagem, promovendo uma nova modalidade do

cuidar.

4- O Pronto-Sorriso prepara no s o acadmico para incorporar o

personagem palhao, como tambm para avaliar e incorporar as vivncias

Capa ndice

4260

proporcionadas pelo projeto em sua futura vida profissional.

5- Os alunos buscam o projeto mais por crescimento pessoal que por

altrusmo, e a expectativa ao se inscreverem de realizao pessoal (39,6%), bem

prxima de levar bem estar ao prximo (41,5%), seguida pela de auto-superao

(26,4%) e por melhoramento nas relaes inter-pessoais (26,4%).

6- Esta pesquisa proporcionou ao grupo uma avaliao dos 12 anos de

existncia do Pronto-Sorriso nos trazendo momentos de reflexo, e necessidade de

reorganizao, baseados em avaliaes e em relatos de experincia dos alunos

durante o perodo deste estudo. Tal prtica essencial ao aprimoramento do projeto

como um todo.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

*BROTTO, Fbio Otuzi. Jogos Cooperativos: o jogo e o esporte como um exerccio de

convivncia. Santos, SP: Projeto Cooperao, 2001.

*CAPRA, Fritjof. O Ponto de Mutao; trad. lvaro Cabral. So Paulo: Cultrix,

2006.

*CAPRA, Fritjof. A Teia da Vida: uma nova compreenso cientfica dos seres vivos

trad.Newton Roberval Eichenberg. So Paulo: Cultrix, 1996.

CASTRO, Alice Viveiros de.O Elogia da Bobagem: Palhaos no Brasil e no Mundo. Rio de

Janeiro,RJ: Famlia Bastos,2005

DOUTORES, Alegria Institucional; disponvel em http://www.doutoresdaalegria.org.br

acesso em 14 jul.2010.

*ERIKSON, E. H. Infncia e Sociedade (2 ed.) Rio: Zahar, 1971.

Capa ndice

4261

*GONDRA, Jose G. Medicina, higiene e educao escolar. In: LOPES, Eliane. FARIA

Luciano. VEIGA, Cynthia. 500 anos de educao no Brasil. 3Edio. Belo Horizonte:

Autntica, 2007.

*GONALVES, Maria Augusta Salin. Sentir, Pensar, Agir. Corporeidade e educao.

Campinas, SP: (coleo corpo e motricidade) Papirus, 1994.

LIMA, Ftima Maria Lindoso da Silva. Pronto-Sorriso: a alegria de planto nos hospitais;

plano de curso. Goinia: UFG, 2008.

*LIPOVETSKY,Gilles. A Era do Vazio: Ensaio sobre o individualismo contemporneo. Trad.

Therezinha Monteiro Deutsch. Barueri, SP: Manole, 2005

*MARTINS, Jos de Souza. As Hesitaes do Moderno e as Contradies da

modernidade no Brasil. In A sociabilidade do homem simples: cotidiano e histria na

sociedade anmala.2 edio. So Paulo: Contexto, 2008.

MASETTO, Marcos Tarciso. Aulas Vivas. So Paulo: MG Editores Associados, 1992.

*REDE, Palhaos em. O Programa; disponvel: http://www.2u-u.com/doutores/ , Acessado

em 20 de maro de 2010.

*ROBBINS, Lois B..O desertar na era da Criatividade; trad. Barbara Theoto Lambert. So

Paulo: Gente, 1995.

*SOLER, Reinaldo. Jogos Cooperativos Para a Educao Infantil. (2 ed.) Rio de Janeiro.

Sprint, 2006.

SANTOS, Amicy. Persona: o teatro na educao, o teatro na vida. Rio de Janeiro:

Eldorado Tijuca, 1975.

*WEIL, P.; LELOUP, J.Y.;CREMA, R. Normose: A Patologia da Normalidade. Campinas-SP:

Verus, 2003.

Capa ndice

4262

Anais do Congresso de Pesquisa, Ensino e Extenso- CONPEEX (2010) 4262 - 4271

Campylobacter spp. em Carne de Aves de Lotes de Frangos Abatidos

em Agroindstrias de Gois: Identificao e Avaliao da

Suscetibilidade a Antimicrobianos

Alessandra Arnez Pacheco, Cntia Silva Minafra e Rezende

Escola de Veterinria - Universidade Federal de Gois, CEP: 74.001-970 Brasil

alessandrarnez@hotmail.com, cintia@cpa.vet.ufg.br

PALAVRAS-CHAVE: Campylobacter spp., carcaas, moelas

1 INTRODUO

A produo de carnes no Brasil um importante segmento do

agronegcio. Tendo em vista a avicultura de corte, apesar de o Brasil ser

considerado o terceiro Pas em produo mundial, ficando atrs dos Estados Unidos

da Amrica e China, o volume de carne exportado, no primeiro semestre de 2008,

referiu-se ao embarque de 1,8 milhes de toneladas, crescimento de 19% em

comparao ao mesmo perodo do ano anterior (ABEF, 2008).

No Brasil, em 2007, o consumo per capita de 37,83 Kg caracterizou a

relevncia do segmento avcola e correspondeu a 2,30% de aumento sob o ano de

2006 (UBA, 2008). Estes dados revelam a representatividade da cadeia produtiva da

carne: fruto de organizao, do uso de tecnologia, da insero direta de pesquisas

cientficas associadas ao gerenciamento ostensivo dos padres genticos, prticas

de manejo, nutrio, ambincia, sanidade, processamento, beneficiamento e

industrializao.

Aves de corte esto entre os principais carreadores de patgenos em

abatedouros e apresentam alta correlao com a contaminao cruzada por

Salmonella sp. e Campylobacter spp.. Estes agentes so patognicos e constituem

severidade para a sade pblica e segurana alimentar. A legislao nacional

determina o controle de Salmonella em carcaas de frango (BRASIL, 2003), porm

para Campylobacter spp., um patgeno de propores e risco similares, no h

legislao especfica para sua avaliao em alimentos e tampouco para seu controle

em lotes de frangos de corte. Para KUANA (2006) h o aceno de uma anlise desta

questo pelas autoridades nacionais num futuro prximo.

Capa ndice

4263

A campilobacteriose tem sido apontada com um dos relatos zoonticos

mais freqentes, associados a doenas de veiculao alimentar na Unio Europia

nos cinco ltimos anos, sendo que Campylobacter jejuni o patgeno de maior

ocorrncia. Alguns dados obtidos pela Autoridade Europia Satefy Authority

revelaram que as aves so a principal fonte do agente (HUGAS et al, 2009;

WESTRELL et al., 2009).

No Brasil, CARVALHO et al. (2002) analisaram 291 amostras de

diferentes pontos em abatedouros e isolaram Campylobacter em 42% das amostras

de fezes e em 38% das amostras de penas. Este patgeno compe a lista dos

microrganimos relacionados veiculao de doenas por alimentos, sendo que isto

ocorre sem distino de localidade.

De modo geral, relatos descrevem que em alguns casos podem ocorrer

graves seqelas da infeco, como a Sndrome de Guillain-Barr (desmielinizao

de neurnios), a sndrome de Fisher, uma variante da Sndrome de Guillain-Barr; e

a Sndrome de Reiter ou artrite reativa (DORREL; WREN, 2007).

Este patgeno emergente e preocupante para a avicultura mundial e

para rgos com aes diretas sade pblica (HARIHARAN et al., 2004).

Em 2007, FREITAS & NORONHA, descreveram o isolamento de

Campylobacter spp. em 93,7% das amostras de fgado, moela, corao, pele,

pescoo e carcaas coletadas em aougues clandestinos, feiras-livres e

supermercados da cidade de Belm, constituindo a primeira notificao de

ocorrncia deste microrganismo em alimentos expostos ao consumo da Regio

Amaznica.

Outro fator importante e preocupante a considerar o aparecimento de

cepas de Campylobacter spp. resistentes a diversos princpios antimicrobianos, o

que ressalta a urgncia de vigilncia e monitoramento com ao precpua de

assegurar a qualidade dos alimentos associada aos preceitos da sade pblica.

Estudos recentes (KUANA et al., 2008) evidenciam as conseqncias adversas da

ocorrncia de cepas resistentes, que se dividem em duas categorias: infeces que

no ocorreriam se no houvesse a cepa resistente e aumento na freqncia de

tratamentos mal sucedidos, bem como o aumento na severidade das infeces

(WHO, 2002).

Por esses motivos, o estudo da presena de Campylobacter spp. em

carne de aves, carcaas e moelas, e a verificao do perfil de suscetibilidade a

Capa ndice

4264

antimicrobianos torna-se tema relevante para assegurar a consequente qualidade

microbiolgica da carne de frango e como forma de resguardar e proteger a sade

da populao.

2 OBJETIVOS

2.1 Objetivo geral

2.1.1 Verificar a ocorrncia de Campylobacter spp. em frangos destinados

ao abate.

2.2 Objetivos especficos

2.2.1 Verificar a ocorrncia de Campylobacter spp. em carcaas e moelas.

2.2.2 Avaliar a suscetibilidade das cepas isoladas frente a antimicrobianos.

2.2.3 Avaliar o isolamento bacteriano convencional para o agente em

questo em contraste tcnica de reao em cadeia pela polimerase em

tempo real.

3 METODOLOGIA

Foram analisadas 54 amostras de ambiente de trs frigorficos distintos

(A, B e C) do estado de Gois, compostas por 27 carcaas inteiras e 27 moelas. As

amostras foram colhidas dentro dos abatedouros e foram friccionadas com suabes

estreis. Estes suabes foram armazenados em temperatura de 5oC e em sacos

plsticos apropriados, identificados e transportados imediatamente ao Laboratrio de

Biologia Molecular do Centro de Pesquisa em Alimentos da Universidade Federal de

Gois, para que as anlises fossem efetuadas. No laboratrio, as amostras foram

submetidas a dois tipos de anlise, o isolamento convencional bacteriano e PCR em

tempo real.

3.1 Isolamento convencional bacteriano

Adotou-se a metodologia segundo a ISO 10272-1 (2006), que determina a

execuo das fases de enriquecimento, plaqueamento diferencial, seleo de

colnias caractersticas, confirmao e testes bioqumicos. Inicialmente os suabes

foram introduzidos em tubos contendo 9 mL de caldo Bolton, encaminhado

Capa ndice

4265

incubao em atmosfera microaerfila a 371 C/ 4-6 horas e depois incubado a

41,51 C/ 444 horas. Aps este perodo de incubao, estriou-se de cada cultura

de caldo Bolton uma alquota em placa de Petri contendo gar Charcoal

Cefoperazona Desoxicolato Modificado (m-CCDA) e em placa de Petri contendo

gar Campylobacter. As placas estriadas foram incubadas 41,51 C/ 444 horas.

Terminado o perodo de incubao, selecionaram-se as colnias tpicas

de Campylobacter spp (colnias acinzentadas, geralmente com brilho metlico,

planas e midas, com tendncia ao espalhamento, no gar m-CCDA). Do gar

Columbia (CDA), selecionaram-se colnias em colorao bege, espalhadas e

levemente metalizadas. Todas as colnias foram repicadas em gar Columbia e as

placas incubadas a 41,51 C/ 444 horas.

A partir das placas em gar Columbia, selecionou uma colnia tpica de

Campylobacter spp e procedeu-se suspenso em 1 mL de caldo Brucella para

observao da motilidade e morfologia.

Tambm a partir das placas incubadas em gar Columbia estriou-se uma

colnia em outra placa de gar Columbia e incubou-se a 25C/ 444 horas, em

microaerofilia. Ainda, estriou-se novamente uma colnia em gar Columbia e

incubou-se a 41,5C /444 horas em aerobiose.

Aps estes procedimentos, colocou-se um disco ou fita de papel de filtro

no interior de uma placa de Petri, sendo que o centro do papel ficou embebido com o

reagente de Kovacs para o teste de oxidase (soluo aquosa 1 % de cloridrato de

N,N,N,N-tetrametil-p-fenilenodiamina). Com uma ala esterilizada, removeu-se

pequena quantidade da cultura em CBA e espalhou-se sobre o reagente no papel,

observando a ocorrncia do desenvolvimento de cor azul intensa, em

aproximadamente dez segundos (teste positivo). O no-desenvolvimento da cor azul

no intervalo de um minuto indicou teste negativo. Bactrias do gnero

Campylobacter so oxidase positivas.

3.2 Reao em cadeia pela polimerase em tempo real

Na anlise de PCR em tempo real, seguiu as determinaes de STERN et

al. (2001) e WANG et al. (1997), respectivamente. Alm dos iniciadores utilizados na

tecnologia PCR convencional, utilizou-se um terceiro oligonucleotdeo (sonda

TaqMan). Essa sonda tem sua extremidade 5 ligada a um fluorforo e sua

Capa ndice

4266

extremidade 3 a uma molcula quencher, essa molcula capaz de um fenmeno

denominado FRET Fluorescence Ressonance Energy transfer, que absorve a

fluorescncia emitida por esse fluorforo transfere o sinal ao aparelho que o

converte em curvas especificas.

medida que a reao ocorria e os ciclos aumentavam a fluorescncia

tambm aumentou. Quando essa fluorescncia emitida pelo fluorforo atingiu limiar

acima da fluorescncia basal da reao, o software do sistema utilizado

correlacionou o ciclo em que isso ocorreu (Ct), apresentando o resultado de

positividade das amostras.

Para a anlise de PCR em tempo real do presente estudo, as culturas em

caldo Bolton foram comprimidas no carto FTA com auxlio de suabes esterilizados,

os cartes foram dispostos em fluxos laminares para a secagem. Aps a secagem

seguiu-se para a eluio do DNA das amostras. A eluio do DNA foi realizada

segundo o protocolo do fabricante. Ao DNA extrado foi adicionado o mix PCR

contendo os primers e sondas desenhados e sintetizados de acordo com a regio

conservada do genoma para o gnero Campylobacter. Aps a adio dos reagentes

a leitura da fluorescncia foi feita pelo equipamento Step One Plus, que durou em

torno de 1hora e 40 minutos.

A reao de PCR em tempo real ocorreu em um intervalo de 99,5% de

confiana e foram adotados tanto os controles positivos quanto os controles

negativos que em testes anteriores apresentaram resultados satisfatrios.

3.3 Suscetibilidade a antimicrobianos

Quanto suscetibilidade aos antimicrobianos, a verificao referiu-se

somente s cepas isoladas pelo ICB. Deste modo, a cepas isoladas foram testadas

quanto aos seguintes princpios: cido nalidxico (30g), cefalotina (30g), cefoxitina

(30g), cefotaxima (30g), eritromicina, enrofloxacina (10g), sulfazotrim (25g) e

cloranfenicol (30g).

Para tanto foi utilizada a tcnica de difuso em gar com adoo de

discos impregnados por antimicrobianos. A metodologia referiu-se preconizada por

Kirby-Bauer (Bauer et al., 1966), com as modificaes de ambiente de incubao,

quanto atmosfera de microaerofilia, por 41,51 C/ 444 horas.

Capa ndice

4267

4 RESULTADOS

O presente estudo ao avaliar a freqncia do ptogeno em lotes de

frangos de corte, identificou que 66,70% das carcaas destinadas ao mercado

interno e externo esto contaminadas com Campylobacter spp. Do total de 27

carcaas analisadas, verificou-se que em 18 suabes isolou-se o agente, o que pode

ser visto na Tabela 1. Ainda nesta Tabela, observa-se que para a PCR em tempo

real, no houve diferena no percentual detectado para suabes de carcaas.

No entanto, analisando os percentuais isolados e detectados em suabes

de moelas, por isolamento convencional bacteriano e PCR em tempo real,

respectivamente, pode-se inferir que pela estatstica descritiva, 18,52% de amostras

positivas ao PCR em tempo real foi mais representativo quando contrastados aos

11,27% por isolamento.

Tabela 1 Ocorrncia de Campylobacter spp. em suabes de carcaas e de moelas de agroindstrias do estado de Gois, perodo de setembro de 2009 a julho de 2010

Categoria de Amostras

positivas/ analisadas

Frequncia relativa

ICB* (%)

Frequncia relativa

PCR tr** (%) ICB* PCR tr** Suabes de carcaas 18/27

18/27 66,70 66,70

Suabes de moelas 3/27 5/27 11,27 18,52

TOTAL 21/54 23/54 38,90 42,59 * ICB isolamento convencional bacteriano

** PCR tr reao em cadeia pela polimerase em tempo real

Considerando as duas categorias de amostras como alimentos

destinados a populao humana, 38,90% apresentaram-se contaminados com o

microrganismo vivel, ou seja, ele foi capaz de utilizar os meios de cultura

empregados e multiplicar-se em condies microaerfilas. Por outro lado, a

deteco do agente em PCR tr maior ou de 42,59% reporta a presena do agente

em condies de multiplicao ou em estgio letal.

Estes resultados reportam a maior contaminao do agente em carcaas

inteiras e menor contaminao vsceras comestveis.

Capa ndice

4268

Quanto suscetibilidade aos antimicrobianos, importante mencionar

que a verificao referiu-se somente s cepas isoladas pelo ICB. Deste modo, das

21 cepas testadas, o perfil de suscetibilidade pode ser visualizado na Tabela 2.

Tabela 2 Nmero de cepas e perfil de sensibilidade de Campylobacter spp. isoladas de suabes de carcaas e suabes de moelas, provenientes de agroindstrias A, B e C, do estado de Gois, no perodo de setembro de 2009 a julho de 2010.

Antimicrobiano Nmero de cepas de Campylobacter spp. e perfil de suscetibilidade

Resistente Intermediria Sensvel

cido nalidxico - - 21

Cefalotina - - 21

Cefoxitina - - 21

Cefotaxima - - 21

Eritromicina 10 11 -

Enrofloxacina 5 5 11

Sulfazotrim - 7 14

Cloranfenicol - 8 13

5 DISCUSSO

Considerando que este estudo est entre os primeiros do estado de

Gois para anlise de carne de aves, quanto presena de Campylobacter spp.

cabe ressaltar que os resultados demonstrados na Tabela 1 so extremamente

alarmantes quando considera-se lotes de frangos encaminhados ao abate.

Principalmente pelo risco microbiolgico que este microrganismo oferece.

A ocorrncia do patgeno em carcaas (66,70%) e em moelas (11,27%),

vsceras comestveis muito apreciadas pelo mercado nacional e internacional,

determina expressiva contaminao dos alimentos de alto consumo.

Por outro lado, considerando os percentuais identificados pela tcnica de

PCR em tempo real, observou-se certa similaridade, o que justifica sua adoo

considerando o tempo de finalizao da anlise (24 horas) em comparao com o

isolamento bacteriano convencional (oito dias).

Capa ndice

4269

Ainda, h que salientar a perpetuao do patgeno no ambiente de

abate, possibilitando a contaminao dos lotes isolados e daqueles que ainda

entraro para a linha de abate, favorecendo a contaminao do produto acabado,

das diversas linhas de operaes, contaminao de mos de manipuladores e riscos

para a sade pblica.

KUANA et al. (2008) revelaram que 81,8% de lotes de frangos de corte na

granja apresentaram-se positivos para Campylobacter spp.. No entanto, 97,4% das

carcaas deste lote, mostraram-se positivas aps a fase de depenagem, o que foi

superior para as categorias de amostras do presente estudo. Em comparao aos

resultados obtidos em Gois, pode-se afirmar que a situao identificada demonstra

similaridade de contaminao, fato agravante para o controle de qualidade da

matria prima e para a avaliao dos perigos e pontos crticos de controle.

Estes resultados reportam a maior contaminao do agente em carcaas

inteiras. Porm, mesmo apresentando menor contaminao, as moelas so

alimentos ou vsceras comestveis, facilmente associadas ao no cozimento efetivo

o que aumenta o risco de exposio da populao consumidora.

Quanto ao perfil de resistncia, pode-se afirmar que 100% das cepas

foram sensveis a quatro princpios antimicrobianos, o denota tranqilidade quanto

s questes pertinentes aos tratamentos clnicos previstos para a populao

humana. Porm, para a eritromicina observou-se que 47,62% (10/21) das cepas

isoladas foram resistentes. Para a enrofloxacina, uma fluoroquinolona, observou-se

23,81% de resistncia (5/21) o que compromete a eleio desta droga para as

principais ocorrncias mdicas devido ao seu espectro de ao abrangente para

microrganismos Gram positivos e Gram negativos, concordando parcialmente com

as informaes de WHO (2000).

Para cloranfenicol, observou-se 38,10% de resistncia intermediria o que

revolve a discusso sobre microrganismos emergentes quanto alterao de seu

perfil de suscetibilidade.

Todos estes resultados denotam a necessidade de aes que envolvam os

diversos segmentos da explorao avcola, ou seja, ambientes de criao, de abate

e processamento e alimentos prontos. A fiscalizao efetiva de toda a cadeia

produtiva ser determinante para a proteo aos plantis e alimentos.

A avicultura de corte orgulha-se de ser um segmento do agronegcio

dinmico, competitivo, empreendedor e dotado de programas de controle de

Capa ndice

4270

qualidade em suas diversas instncias, que vo desde a alimentao das aves at

seu efetivo processamento. Ainda assim, os dados obtidos neste estudo salientam

precariedade quanto presena de Campylobacter spp. no alimento de origem

avcola.

6 CONCLUSO

Considerando os resultados do presente estudo, pode-se concluir que

carcaas de frangos e moelas so importantes veculos de transmisso do agente

para humanos, alm de favorecerem a contaminao das operaes de abate e ao

processamento da carne avcola.

7 BIBLIOGRAFIA ABEF Associao Brasileira dos Produtores e Exportadores de Frangos de Corte. Estatsticas 2008. Disponvel em: www.abef.com.br. Acesso em 30/07/2008. BAUER, A.W.; KIRBY, W.M.M.; SCHERRIS, J.C.; TURCK, M. Antibiotic susceptibility testing by a standadized single disk method. American Journal of Clinical Pathology, Washington, v.45, p.493-496, 1966. BRASIL. Instruo Normativa N 70, de 10 outubro de 2003 do Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Dirio Oficial [da] Repblica Federativa do Brasil, Poder Executivo, Braslia, DF, 10 out. 2003. Seo 1, p. 9. CARVALHO, A. C. F. B.; LIMA, V. H. C.; PEREIRA, G. T. Determinao dos principais pontos de risco de contaminao de frangos por Campylobacter, durante o abate industrial. Higiene Alimentar, v. 16, n. 99, p. 89-94, 2002. DORREL, N.; WREN, B. W. The second century of Campylobacter research: recent advances, new opportunities and old problems. Current Opinion in Infectious Diseases, v. 20, n.5, p. 514-518, 2007. FRANCHIN, P.R.; AIDOO, K. E.; BATISTA, C.R.V. Sources of poultry meat contamination with thermophilic Campylobacter before slaughter. Brazilian Journal of Microbiology, v. 36, p. 157-162, 2005. FREITAS, J.A; NORONHA, G.N. Ocorrncia de Campylobacter spp. em carne e midos de frango expostos ao consumo em Belm, Par. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinria e Zootecnia, v.59, n.3, p.813-815, 2007.

Capa ndice

4271

HARIHARAN, H.; MURPHY, G. A.; KEMPF, I. Campylobacter jejuni: Public health hazards and potencial control methods in poultry: a review. Veterinary Medicine, v.49, n. 11, p. 441-446, 2004. HUGAS, M., TSIGARIDA, E., ROBINSON, T., CALISTRI, P. The EFSA Scientific Panel on Biological Hazards first mandate: May 2003May 2006. Insight in to foodborne zoonoses. Trends in Food Science and Technology 20, p.188193, 2009. ISO 10272-1:2006(E). INTERNATIONAL STANDARD. Microbiology of food and animal feeding stuffs Horizontal method for detection and enumeration of Campylobacter spp. Part 1: Detection method. 16pginas. KUANA, S.L. Campylobacter na avicultura. Anais...V Simpsio de Sanidade Avcola da UFSM. UFSM, Santa Maria, p.82-89, 2006. KUANA, S. L; SANTOS, R. L.; RODRIGUES, L. B.; BORSOI, A.; MORAES, H. L. S.; SALLE, C. T. P.; NASCIMENTO, V. P. Antimicrobial resistance in Campylobacter spp isolated from boiler flocks. Brazilian Journal of Microbiology, v. 39, p. 738-740, 2008. STERN, N. J.; LINE, J.E.; CHEN, H.C. Campylobacter. In: Compendium of methods for the microbiological examination of foods. Washington, DC. 2001. 4a ed. APHA: American Public Health Association, p. 301-310, 2001.

UBA. Relatrio do Comit Tcnico Cientfico da Ala. Unio Brasileira de Avicultura. Disponvel em:

Capa ndice

4272

Anais do Congresso de Pesquisa, Ensino e Extenso- CONPEEX (2010) 4272 - 4286

Isolamento e Cultivo de Leishmania sp em Amostras de Pacientes com Leishmaniose Tegumentar Americana Atendidos no

Ambulatrio de Endemias do Hospital de Doenas Tropicais, Goinia, GO

Alexandre Jesus Silva, Anna Karoline Aguiar Fleuri, Grazzielle Guimares de Matos,

Ledice Incia Arajo Pereira, Fernanda Duarte Bugalho, Sebastio Alves Pinto, Milton Adriano Pelli de Oliveira; Ftima Ribeiro-Dias, Miriam Leandro Dorta

Instituto de Patologia Tropical e Sade Pblica da Universidade Federal de Gois, CEP: 74060-070, Goinia, GO, Brasil

e-mail: aj-silva@biologia.grad.ufg.br; mldorta@uol.com.br

PALAVRAS-CHAVE: LTA, Bipsia, Isolamento, Leishmania

1 INTRODUO

A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) uma zoonose causada

por protozorios do gnero Leishmania, que acomete a pele e/ou mucosas de

diferentes espcies de animais silvestres, sobretudo roedores, animais domsticos e

eventualmente o homem. Vrias espcies de Leishmania so reconhecidas como

agentes etiolgicos da LTA, elas so morfologicamente similares, porm produzem

um amplo espectro de manifestaes clnicas da doena. No Brasil, as principais

espcies responsveis pela LTA pertencem a dois subgneros: (1) Viannia,

representado pelas espcies L. (V.) braziliensis e L. (V.) guyanensis, associadas

com leses cutneas localizadas ou disseminadas e leses mucocutneas e (2)

Leishmania, representado pela espcie L. (L.) amazonensis, associada com o

desenvolvimento de leses cutneas localizadas ou com a forma clnica difusa

(GONTIJO & CARVALHO, 2003).

L. (V.) braziliensis a espcie que possui maior distribuio geogrfica no

Brasil, incluindo a regio Centro-Oeste (DORTA et al., 2003; LIMA JUNIOR et al.,

2009). Freqentemente est associada ao desenvolvimento das leses mais graves

da doena, com leses cutneas mltiplas ou extensas, e cerca de 2% dos casos

esto relacionadas invaso de mucosa. A forma mucocutnea apresenta leses

destrutivas do tecido e da mucosa naso-farngea, podem ser desfigurantes e

tambm incapacitantes, gerando grande repercusso no campo psicossocial do

Capa ndice

4273

indivduo. L. (L.) amazonensis est presente numa extensa rea geogrfica, que

compreende as regies Norte, Nordeste, Centro-Oeste e Sudeste. A doena

causada por L. (L.) amazonensis relativamente rara, sendo amplamente variado o

espectro clnico da doena, podendo ocorrer leso ulcerada, geralmente nica, a

forma visceral da Leishmaniose ou a forma cutnea difusa (REIS et al., 2008;

SILVEIRA et al., 2009).

O diagnstico de LTA abrange aspectos epidemiolgicos, clnicos e

laboratoriais e freqentemente a associao de alguns desses elementos

necessria para se chegar a uma concluso final. A demonstrao do parasito

feita por meio de exames direto e indireto. A probabilidade de encontro do parasito

inversamente proporcional ao tempo de evoluo da leso cutnea, sendo rara aps

um ano. Nos casos de infeco por L. (V.) braziliensis a probabilidade est em torno

de 100% nos dois primeiros meses de evoluo, 75% aos seis meses e 20% acima

dos doze meses (FURTADO, 1980). O exame indireto consiste no isolamento do

parasito por meio do cultivo in vitro ou inoculao em animais de laboratrio do

material coletado da leso (OLIVEIRA et al., 2010). Os exames diretos consistem

em mtodos de identificao dos parasitos por histopatologia e por esfregao da

leso ulcerada (OLIVEIRA et al., 2010). Nos ltimos anos, tcnicas moleculares vm

sendo utilizadas para a deteco e identificao de Leishmania e se tornaram

importantes ferramentas no diagnstico da Leishmaniose, como por exemplo, a

amplificao de sequncias especficas de DNA extra-nuclear presentes no

cinetoplasto (kDNA) do parasito (GOMES et al., 2008; LUZ et al., 2009).

Mtodos imunolgicos so tambm utilizados no diagnstico da doena.

Dentre os exames imunolgicos, os testes sorolgicos e a Intradermorreao de

Montenegro (IRM) so os mais utilizados (PDUA VIDIGAL et al., 2008). A IRM

fundamenta-se na visualizao da resposta de hipersensibilidade celular tardia.

Geralmente persiste positiva aps o tratamento, ou cicatrizao da leso cutnea

tratada ou curada espontaneamente, podendo se tornar negativa nos indivduos

fraco-reatores e nos precocemente tratados (BRASIL, 2007).

Os testes sorolgicos tm sido empregados, com considervel

importncia, no diagnstico e em inquritos epidemiolgicos. A anlise de anticorpos

anti-Leishmania permite avaliar o curso evolutivo da infeco, bem como fornecer

dados sobre as caractersticas de sua resposta imune. Vrios perfis e nveis de

imunoglobulinas especficas a Leishmania tm sido detectados em pacientes com

Capa ndice

4274

LTA, parecendo refletir no s a carga parasitria, mas tambm a espcie envolvida,

o tempo de infeco e fatores intrnsecos do prprio hospedeiro (GUTIERREZ et al,

1991). Dentre os mtodos sorolgicos, a reao de Imunofluorescncia Indireta (IFI)

a mais utilizada. Trata-se de uma tcnica sensvel, porm com possibilidade de

reaes cruzadas especialmente com a Doena de Chagas e Leishmaniose

Visceral. Habitualmente negativa na forma cutnea difusa, sua sensibilidade foi

estimada em 71% nas formas cutneas e 100% na forma mucosa (GONTIJO &

CARVALHO, 2003).

Um dos problemas para se avaliar a imunidade contra a L. (V.)

braziliensis a dificuldade do isolamento desta espcie a partir de leses dos

pacientes. Isto faz com que no haja muitos estudos sobre o comportamento de

diferentes isolados da espcie de Leishmania mais importante para a doena no

Brasil. A infeco de animais experimentais com L. (V.) braziliensis foi pouco

investigada at o momento. Tais fatos se devem tambm pelo limitado nmero de

animais susceptveis e pela dificuldade em manter o parasito em cultura axnica, o

que dificulta a obteno de uma grande quantidade de leishmanias para a realizao

dos estudos. Portanto, devem ser destinados esforos para que se consiga isolar os

parasitos desta espcie para uma melhor caracterizao imunobiolgica e

planejamento de melhores medidas profilticas e teraputicas contra estes

parasitos.

Conforme descrito acima, diante das formas apresentveis da doena, da

variedade de espcies do gnero Leishmania envolvidas e dos diferentes

prognsticos que a doena pode tomar depender da espcie envolvida com o

hospedeiro, justifica-se a importncia das propostas deste trabalho pois, o

isolamento in vivo e in vitro permitir a obteno de espcies de Leishmania

prevalentes na regio centro-oeste que, por sua vez ,permitir conhecer melhor as

espcies envolvidas com a doena nesta regio.

2 OBJETIVOS

- Isolar parasitos, a partir de bipsia de leso cutnea de pacientes com

suspeita de LTA, em meio de cultura (ex vivo) ou em animais de experimentao (in

vivo) - camundongos C57Bl/6 deficientes em interferon gama (C57Bl/6 IFNKO),

comparando a eficincia das duas tcnicas;

Capa ndice

4275

- Analisar o comportamento biolgico dos isolados, quanto ao crescimento

in vitro em culturas axnicas e in vivo em camundongos BALB/c e C57Bl/6;

- Estocar os novos isolados no Banco Imunobiolgico das Leishmanioses

da Regio Centro-Oeste (Leishbank).

3 METODOLOGIA

3.1 Pacientes

Os pacientes que apresentavam suspeita de LTA atendidos no

ambulatrio de endemias do Hospital de Doenas Tropicais Anuar Auad (HDT) de

Goinia, Gois, entre janeiro de 2009 a junho de 2010. A LTA foi diagnosticada por

meio dos aspectos clnicos, dados epidemiolgicos e exames laboratoriais, sendo

estes o isolamento do parasito in vitro, a intradermorreao de Montenegro (IRM),

histopatolgico e imunofluorescncia indireta. O projeto associado ao projeto

Banco imunobiolgico (Leishbank) das leishmanioses da regio Centro-Oeste e

projetos associados, o qual foi aprovado pelo Comit de tica em Pesquisa Animal

e Humana do Hospital das Clnicas (HC/UFG) e todos os pacientes assinaram o

Termo de Consentimento Livre e Esclarecido, para participarem da pesquisa

(Protocolo 126/04).

3.2 Camundongos

Camundongos isognicos, machos com idade entre 6 a 8 semanas, das

linhagens BALB/c, C57Bl/6 e C57BL/6 deficientes em interferon-gama (C57BL/6

IFN-KO) criados e mantidos no Biotrio do Instituto de Patologia Tropical e Sade

Pblica da Universidade Federal de Gois (IPTSP/UFG), foram usados neste

estudo.

3.3 Isolamento dos parasitos

Fragmentos de bipsias, obtidos da leso dos pacientes com suspeita de

LTA, eram macerados em 500 L de soluo salina tamponada com fosfato pH 7,3

(PBS, phosphate buffer saline), sendo que da suspenso 50 L eram inoculados no

Capa ndice

4276

coxim plantar de dois camundongos C57Bl/6 IFNKO (inculo nas duas patas

traseiras) e o restante da suspenso era incubada em uma garrafa de cultura de

clulas (Costar, Cambridge, MA, EUA), contendo 5 mL de meio Grace completo

(Graces Insect Medium, Sigma Chemical Co., St Louis, MD, EUA), suplementado

com 20% Soro Fetal Bovino (SFB, Cripion, Andradina, SP, Brasil) inativado, 2 mM

de L-glutamina (Sigma), 200 U/mL de penicilina (Sigma) e 200 g/mL de

estreptomicina (Sigma). A garrafa era incubada 26C, at o crescimento dos

parasitos (descarte aps 4 semanas se no houvesse crescimento). Aps 4 a 8

semanas do inculo, os animais eram sacrificados e as patas e os linfonodos

drenantes da leso (poplteo) eram retirados e macerados em PBS. Como na

primeira etapa com a bipsia, parte da suspenso celular resultante era cultivada em

garrafas de cultura de clulas 26C e parte era re-inoculada em novos

camundongos C57Bl/6 IFNKO, para manuteno do parasito in vivo.

3.4 Manuteno dos Parasitos in vitro e Criopreservao

Os parasitos eram mantidos in vitro em garrafas de cultura, em meio

Grace completo, suplementado com 20% de SFB inativado, 2 mM de L-glutamina

(Sigma), 200 U/mL de penicilina (Sigma) e 200 g/mL de estreptomicina (Sigma), em

estufa BOD 26C, sendo repicados pela primeira vez quando havia alta densidade

de parasitos. Aps a adaptao s culturas in vitro, os parasitos passaram a ser

repicados iniciando a cultura com 5 x 105 parasitos/mL ou com 1 x 106 parasitos/mL

(em caso de isolados que apresentavam menor taxa crescimento in vitro). A

quantificao dos parasitos era realizada, aps diluio de uma alquota da cultura

em formalina 2%, em hematocitmetro. Os parasitos foram criopreservados em

nitrognio lquido, em fase logartmica do crescimento, para isto 1 x 107 parasitos/mL

eram adicionados a uma mistura contento 10% de dimetilsulfxido (DMSO, Sigma) e

80% de SFB sendo, em seguida, transferidos para -80C por dois dias e depois

eram estocados em nitrognio lquido e armazenados neste local at o uso

(Leishbank, Banco Imunobiolgico das Leishmanioses da Regio Centro-Oeste,

IPTSP/UFG).

3.5 Caracterizao biolgica dos isolados de Leishmania

Capa ndice

4277

3.5.1 Curva de crescimento dos parasitos in vitro

Os parasitos foram cultivados em meio Grace completo 26C em

garrafas de cultura, iniciando a cultura com 1 x 106 parasitos/mL. As curvas de

crescimento in vitro foram feitas em triplicata, sendo o crescimento avaliado por

contagem diria do nmero de parasitos em hematocitmetro, durante 12 dias de

cultivo. A quantidade de parasitos foi expressa em nmero de parasitos/mL. Para

cada parasito foram determinadas a fase logartmica e a estacionria do

crescimento, as quais so caracterizadas, respectivamente, pelas formas procclicas

e metacclicas (infectantes) dos parasitos. Foram preparadas lminas contendo os

parasitos, usando citocentrfuga Fanem (1x 106 parasitos/100 uL de meio Grace

Completo, 400 rpm, 50 segundos), as quais foram coradas usando kit Instant Prov

(Pinhais, PR, Brasil), sendo visualizadas e fotografadas sob microscopia de luz.

3.5.2 Curva de crescimento dos parasitos in vivo

Os parasitos, no sexto dia de cultivo, foram inoculados na pata traseira

direita de camundongos das linhagens C57Bl/6 e BALB/c (5 x 105 parasitos por pata

/50 L). Para cada isolado foram usados 10 animais, sendo cinco de cada linhagem.

Aps o inculo, foi acompanhado semanalmente o tamanho das patas desses

animais com o auxlio de um paqumetro. Os dados representam o tamanho da

leso, sendo a mdia das diferenas entre as patas infectadas (pata direita) e as

patas controles no inoculada (pata esquerda). Quando as patas apresentavam

leso de 5 mm, leso ulcerada ou os animais atingiam 12 semanas de crescimento,

os animais eram sacrificados.

4 RESULTADOS E DISCUSSO

4.1 Obteno dos isolados de Leishmania sp

Entre janeiro de 2009 a junho de 2010 foram processadas 40 amostras

de fragmentos de bipsias obtidas de leso cutnea ou de leso mucosa de

pacientes com suspeita de LTA atendidos no ambulatrio de endemias do Hospital

de Doenas Tropicais Anuar Auad, Goinia, GO. Destes, foram confirmados o

Capa ndice

4278

diagnostico de LTA em 35 pacientes, dois pacientes no retornaram com os

resultados dos exames (NC) e trs apresentavam outras patologias, erisipela,

eczema meato nasal e hansenase.

Os provveis locais de contgio desses pacientes foram os Estados do

Acre (1), Amazonas (1), Gois (18), Maranho (2), Mato Grosso (8), Par (3),

Rondnia (2), Tocantins (1) e Roraima (1). A idade dos pacientes variou entre 13 e

75 anos de idade.

Do total de casos confirmados, 29 pacientes realizaram o histopatolgico.

Neste exame foi possvel a visualizao de formas amastigotas em 17 casos. A IRM

foi realizada em 26 casos confirmados e foi positiva em 18 casos, enquanto que na

IFI de 23 casos confirmados apenas nove casos foram positivos nessa metodologia

(Tabela 1).

Tabela 1. Freqncia absoluta de LTA detectada por diferentes mtodos de diagnstico.

Culturaa Camundongob Histopatolgicoc IRMd IFIe

Positivos

5

3

17

18

9

Negativos

30

32

12

8

14

Totalg

35

35

29

26

23

Em 35 pacientes foram confirmados o diagnstico de LTA por pelo menos um dos exames laboratoriais; a Observao de crescimento de parasito em meio Grace a partir do processamento de bipsias; b Observao do desenvolvimento de leso na pata inoculada por macerado de bipsia; c Observao de amastigotas; d Intradermorreao de Montenegro (IRM) mensurada aps 48 horas da injeo na intraderme de antgeno de L. (L.) amazonensis com dimetro da indurao maior que 5 mm; e Imunofluorescncia indireta (IFI) com ttulo acima de 40; f Total de pacientes confirmados o diagnstico para LTA que foram submetidos ao mtodo de diagnstico especificado.

Dos pacientes com o diagnstico confirmado para LTA, em seis deles

foram isolados parasitos (DLP9, JM9, ORN9, PPP9, RFJ9, SPC10), dentre estes

cinco foram isolados ex vivo (DLP9, JM9, ORN9, PPP9, SPC10), um foi isolado

apenas in vivo (RFJ9) e dois foram isolados tanto ex vivo quanto in vivo (DLP9,

ORN9). O paciente SPC10 apresentou a cultura in vitro positiva, entretanto houve

contaminao por leveduras e no foi possvel estocar este isolado no Leishbank.

Os dados dos pacientes, bem como dos parasitos, foram catalogados no

Leishbank. Como pode ser observado na Tabela 2 os isolados foram codificados

como MHOM/BR/2009/DLP, MHOM/BR/2009/JM, MHOM/BR/2009/ORN,

MHOM/BR/2009/PPP, MHOM/BR/2009/RFJ. Os isolados JM9 e PPP9 so de

pacientes que relatam o estado de Gois como provvel local de infeco. Para os

Capa ndice

4279

isolados DLP9, ORN9 e RFJ9, o local provvel de infeco so os Estados do

Maranho, Roraima e Amazonas, respectivamente. A forma clnica de LTA foi

leishmaniose cutnea (LC) para todos os isolados. Todos os isolados obtidos so de

pacientes do sexo masculino, a idade variou entre 19 e 63 anos com mediana de

45,5 anos (Tabela 2).

A maioria dos pacientes que apresentaram a cultura in vitro ou in vivo

positiva (5) mora em zona rural e mantm contato com locais de circulao do

agente etiolgico desta doena em ambientes silvestres como reas ribeirinhas,

reas de mata fechada e de desmatamento, fazendas e um paciente (RFJ9) mora

em zona urbana, porm adquiriu a doena aps manter contato com rea endmica

na regio Amaznica.

Tabela 2. Dados dos isolados de Leishmania sp.

Isolado LTA Local de contgio Sexo Idade

(anos)

MHOM/BR/2009/RFJ LC Regio Amaznica Masculino 35

MHOM/BR/2009/DLP LC Ribamar (MA) Masculino 63

MHOM/BR/2009/ORN LC Cacoal (RO) Masculino 19

MHOM/BR/2009/JM LC Aruan (GO) Masculino 45

MHOM/BR/2009/PPP LC Acrena (GO) Masculino 46

MHOM/BR/2010/SPC LC Orizona (GO) Masculino 63

O isolamento ex vivo foi positivo em 14% das amostras dos pacientes

com casos confirmados, enquanto que o isolamento in vivo foi positivo em apenas

9% destas amostras. BOTELHO et al. (2007) obtiveram resultados que esto de

acordo com nossos dados. Em um total de 41 bipsias processadas foram obtidos

nove novos isolados in vitro e apenas um isolado in vivo, apresentando uma

eficincia de 22,5% e 2,5%, respectivamente.

Neste estudo alguns fatores interferiam na obteno isolados de

Leishmania sp. Freqentemente ocorria contaminao da cultura por fungos e/ou

bactrias impossibilitando o isolamento in vitro. No isolamento in vivo, ou os animais

morriam ou ento a leso na pata dos camundongos no se desenvolvia e isso

tambm dificultou o isolamento de Leishmania sp. JOELMA et al. (2008)

apresentaram resultados diferentes dos nossos, a tcnica de isolamento in vivo foi

mais eficiente na obteno de isolados do que