2
Complemento x Anticorpo
Anticorpo no soro:
- adquirido e específico
- termoestável
Complemento no soro:
-pré-existente e inespecífico
-termolábil
Proteínas do Complemento:história
Descobertas em 1894 por Bordet
Representam atividade lítica para o soro fresco
A atividade lítica é destruída quando o soro é aquecido a 56°C por 30 min
São ativadas em cascata
4
Ensaio Teste
EnsaioReação de
Aglutinação Lise
Soro Fresco anti-X + +
Soro Velho* anti-X + -
Soro Fresco não imune - -
Soro Velho* anti-X + Soro Fresco não imune + +
* = ou soro aquecido a 56º C por 30 minutos
5
SISTEMA COMPLEMENTOSISTEMA COMPLEMENTO Composto de aproximadamente 30 Composto de aproximadamente 30
proteínasproteínas Início de síntese no primeiro trimestre da Início de síntese no primeiro trimestre da
vida fetalvida fetal Produzidas no fígado e por macrófagosProduzidas no fígado e por macrófagos Há 3 maneiras para ocorrer ativação:Há 3 maneiras para ocorrer ativação:
– Via Clássica - depende de AcVia Clássica - depende de Ac– Via AlternativaVia Alternativa– Via das LectinasVia das Lectinas
6
Componentes da “Cascata” do Complemento
7
SISTEMA COMPLEMENTOSISTEMA COMPLEMENTO
8
Componentes da primeira fase da Via Clássica
C4
C2
C3
Complexo
C1
Ca++
C1r C1s
C1q
10
Complexo C 1Complexo C 13 tipos de
subunidades:
C1q, C1r e C1s
Em cada complexo C1qrs,
há duas moléculas C1r e
C1s e uma de C1q (6 subunidades
idênticas).
11
C1 = C1q+C1r2+C1s2+8Ca+
+
12
13
14
Ca++
C1r C1s
C1q
C4
C4a
b
Via Clássica Geração de C3 convertase
15
Via ClássicaGeração de C3 convertase
C4b
_____
C4b2b é C3 convertase
Via Clássica Geração de C5-convertase
C4b
Mg++
C4a
Ca++
C1r C1s
C1q
C2a
C2b
C3
C3a
b
Opsonização e fagocitose
Remoção de imune-complexos
19
REMOÇÃO DE IMUNOCOMPLEXOS
ERITRÓCITOS
20
Via Clássica Geração de C5-convertase
C4b
Mg++
C4a
Ca++
C1r C1s
C1q
C2a
C2b
C3
C3a
b
C4b2b3b é C5 convertase; ele dirige o complemento para formar o “Membrane
Attack Complex”-MAC
Geração de C5 convertase leva ao início da
Via Lítica ou MAC (“Membrane Attack
Complex”)
Via Lítica
Componentes do MAC
C6
C9
C8
C7C5
23
Via Lítica-MAC Ativação de C5
C3b C2 bC4b
C5 b
C5a
Via Lítica-MAC
Formação do complexo lítico
C5 b
C6
C7
Via Lítica-MACinserção do complexo lítico na membrana
celular
C5 b
C6
C7C8
C9
C9
C9
C9C9
C9 C
9C9
C9
27
VIA LÍTICAVIA LÍTICA
28
Atividade de Anafilatoxina
Fragmentos C5a e C3a
C5aR e C3aR
Mastócitos e Basófilos
Liberação de Aminas Vasoativas
(histamina)
Diapedese de Neutrófilos
Quimiotaxia
30
31
32
Via da lectina MBL (“Manose Binding Proteins”) ligam-se aos
resíduos de carboidratos na superfície da bactéria ou outra substância e passam por uma mudança conformacional.
• MASP1 e MASP2: (“Manose Binding Associated Proteins”) tornam-se ativadas e clivam C4 e C2 (mimetizam C1 r e C1s) para formar C4b2b.
• :
A via das lectinas é considerada similar à via clássica
Componentes da primeira fase da via de lectinas ligantes de manose
C4
MBL
C2
MASP1MASP2
Via de lectinas ligantes de manose
C4
MBL
C4b
C4a
C4b
C2
C2a
C2b
C2b
C4b2b é C3 convertase; ele irá levar à geração do
C5 convertase
Ele dirige o complemento para formar o “Membrane Attack Complex”-MAC
MASP1MASP2
35
36
37
Considerações GeraisNão necessita da formação do complexo antígeno-anticorpo
Não necessita dos componentes iniciais C1, C4 e C2
C3 é fator essencial nesta via
É importante na Imunidade Inata
38
Ativadores da Via Alternativa do Complemento
Microrganismos pobres em ácido siálico
Paredes celulares ricas em polissacarídeos complexos
39
40
Componentes da Via Alternativa do ComplementoFator B = B
Fator D = D
Properdina = P
C3, C5, C6, C7, C8, C9
Componentes da primeira fase da Via
alternativa
C3 BD P
Clivagem espontânea de C3
C3
H2O
iB
D
Geração de C3 convertase
complexo C3iBb tem uma meia vida muito curta!!!
b C3
C3a
b
B
D
bC3b
Ativação de C3:Loop de amplificação de
formação de C3b
C3C3a b
C3a
B
D
BbC3b
C3 b
Ativação de C3:Loop de amplificação de
formação de C3b
C3b
C3a
b
C3a
C3a BbC3b
C3bC3 BbB
D
bb
C3a
Ativação de C3:Loop de amplificação de
formação de C3b
C3b
C3a
C3a BbC3b
BbBbC3b
C3a
Ativação de C3:Loop de amplificação de
formação de C3b
C3bC3b
C3a
C3a BbC3b
BbBb
C3a
Ativação de C3:Loop de amplificação de formação de C3b
C3bC3b
48
Etapas finais - MAC
49
SISTEMA COMPLEMENTO INTEGRADO
50
•REGULAÇÃO DA ATIVAÇÃO
•FUNÇÕES BIOLÓGICAS
•DEFICIÊNCIAS
COMPLEMENTO
51
SISTEMA COMPLEMENTOSISTEMA COMPLEMENTO
52
53
Propriedades Biológicas
Lise de Membranas
Quimiotaxia
Opsonização
Estimulação de reações inflamatórias
Remoção de imunocomplexos
54
SISTEMA COMPLEMENTOSISTEMA COMPLEMENTOCONSEQÜÊNCIASCONSEQÜÊNCIAS
55
SISTEMA COMPLEMENTOSISTEMA COMPLEMENTOCONSEQÜÊNCIASCONSEQÜÊNCIAS
56
SISTEMA COMPLEMENTOSISTEMA COMPLEMENTOCONSEQÜÊNCIASCONSEQÜÊNCIAS
57
58
SISTEMA COMPLEMENTOSISTEMA COMPLEMENTOCONTROLE DA ATIVAÇÃOCONTROLE DA ATIVAÇÃO
As células dos mamíferos, em condições normais, As células dos mamíferos, em condições normais, expressam proteínas reguladoras que inibem a ativação expressam proteínas reguladoras que inibem a ativação do complemento, impedindo, assim, uma lesão das do complemento, impedindo, assim, uma lesão das células do hospedeiro mediada pelo complementocélulas do hospedeiro mediada pelo complemento
Reguladores da ativação do complemento:Reguladores da ativação do complemento: Complexo Complexo INH, Fator H, Fator I, Fator de aceleração do decaimento INH, Fator H, Fator I, Fator de aceleração do decaimento (DAF), CD 59, Fator P, etc... (DAF), CD 59, Fator P, etc...
C INH
Quebra de C1qrs
C1r C1s
C1q
C1r C1s
Dissociação das subunidades de C3 convertase via DAF (decay acceleration
factor)
Ações do DAF
1) desloca o C3b-
ligado ao fator Bb
(impede a formação de C3
convertase da Via Alternativa)
B bb C3b
Membrana Celular
DA
F
CR1
B b
Impede a ligação do fator B para formar C3 convertase
C3b2) Evita a ligação
do fator B em C3bB
Membrana celular
DA
F
CR1
Membrana Celular
C3b C3b
Bb
H
I
iC3b
Clivagem proteolítica de C3b pelo Fator I e dissociação pelo Fator H
B b
I
iC3b DA
F
CR1DA
F
CR1
Fator H: dissociador de C3 convertases
Fator I: 1) Clivagem de
C3b
Degradação de C3b proveniente de hidrólise pelo Fator I
C3b
C3b
iC3biC3b
II
C3dgC3dg
C3c C3c
Fator I: 1) Clivagem de iC3b
Estabilização de C3b e ativação de C5
C3b
C3b encontra um protetor na membrana
C3
C3a
bB
D
b
P
Este C5 convertase é estável e atua na Via
alternativa do complemento
65
CD59: Impede a formação de MAC pois inibe a ligação de C9
Vias de ativação do complemento
VIA CLÁSSICA VIA ALTERNATIVA
ativaçãode C5
VIA LÍTICA DE ATAQUE A MEMBRANA
Dependente de anticorpo
VIA LECTINAS
independente de anticorpo
Ativação de C3 egeração de C5 convertase
Resumo das funções das proteínas do Complemento
Benéficas:Opsonização para potenciar a fagocitoseQuimiotaxia e ativação de fagócitosLise de bactéria e células infectadas ou transformadasRegulação da resposta de anticorposLimpeza de imune-complexosFagocitose de células apoptóticas
Maléficas:Inflamação, anafilaxia
68
DEFICIÊNCIAS DO DEFICIÊNCIAS DO COMPLEMENTOCOMPLEMENTO
6969
Deficiências do Complemento na Via Clássica
Componente Doença Mecanismo
C1, C2, C4 Predisposição ao Lúpus
Eritematoso Sistêmico
(SLE)
Resulta em aumento de imune complexos
insolúveis nos tecidos e inflamação
7070
Deficiências do Complemento na Via das Lectinas
Componente Doença Mecanismo
MBL Susceptibilidade a infecções bacterianas em crianças ou imunosuprimidos
Incapacidade de ativar o complemento pela via das lectinas
7171
Deficiências do Complemento na Via Alternativa
Componente Doença Mecanismo
Fatores B ou D Susceptibilidade a infecções por bactérias piogênicas (formadoras de pús)
Deficiência na opsonização de bactérias
C3 Susceptibilidade a infecções bacterianas
Deficiência na opsonização e incapacidade de ativar Complemento até a formação de MAC
C5, C6, C7 C8, ou C9 Susceptibilidade a infecções por bactérias Gram-negativas
Incapacidade de destruir a membrana de bactérias Gram-negativas por MAC
7272
Deficiências do Complemento na Via Alternativa (cont.)
Componente Doença Mecanismo
Properdina (ligada ao X)
Susceptibilidade a meningite meningocócica
Incapacidade de opsonização
Fatores H ou I Deficiência de C3 e Susceptibilidade a infecções bacterianas
Ativação incontrolada da via alternativa resultando em depleção de C3
73
Via das Lectinas: MBL infecções infantis