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Análise da expressão de neurotrofinas em camundongos sob diferentes estímulos musicais Dayanne M. de Castro RA: 093633 Fernanda Luz P. Costa RA: 091157 Guilherme Morais RA: 093811 Marcio Y. Hirata RA: 092205 Marco Pagliusi Jr. RA: 095855 Marina G. Pessôa RA: 094187 Renato A. Oliveira RA: 092844

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Page 1: Dayanne M. de CastroRA: 093633 Fernanda Luz P. CostaRA: 091157 Guilherme MoraisRA: 093811 Marcio Y. HirataRA: 092205 Marco Pagliusi Jr.RA: 095855 Marina

Análise da expressão de neurotrofinas em camundongos sob diferentes

estímulos musicaisDayanne M. de Castro RA: 093633Fernanda Luz P. Costa RA: 091157Guilherme Morais RA: 093811Marcio Y. Hirata RA: 092205Marco Pagliusi Jr. RA: 095855Marina G. Pessôa RA: 094187Renato A. Oliveira RA: 092844

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O que é Música?

“A música é a arte de pensar por meio dos sons”

“A música expressa o que não pode ser dito em palavras e não pode ficar em

silêncio”música = arte = subjetiva

(várias definições)

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Estilos Musicais

“Estilos musicais são distintos porque conseguimos distingui-los com somente o

ouvir”

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O “ouvir” em definições

ROCK CLÁSSICAX Predominância de

agudos Agudo à grave ALTURA

Menor MaiorEXTENSÃO

RITMOMenos Compassos Mais Compassos

INSTRUMENTOS Predominância de corda e eletrônicos

Sopro (madeira e metal), percussão,

corda

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Música X Organismo

Música

Respostas fisiológicas e psicológicas (em animais)

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E a Genética IV?

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Neurotrofinas

RegulaçãoDesenvolvimento e orientação de dendritos e axônios, estruturas e conexões sinápticas;

Liberação de neurotransmissores;

Potenciais de longa duração;

Plasticidade sináptica.

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Camundongo NGF +/–

• Diminuição da inervação colinérgica do hipocampo• Deficiência na aquisição e retenção de memória• Perda de neurônios do sistema nervoso periférico

Neurotrofinas – NGF (nerve growth factor)

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Neurotrofinas – NGF (nerve growth factor)

Cellular Organisms (3166)

Viruses (10)

Fonte: Uniprot

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Neurotrofinas – NGF (nerve growth factor)

Eukaryota (3149)

Bacteria (17)

Fonte: Uniprot

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Neurotrofinas – NGF (nerve growth factor)

Fungi/Metazoa group (3147)

Arabidopsis lyrata (1)Naegleria gruberi (1)

Fonte: Uniprot

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Neurotrofinas – NGF (nerve growth factor)

Bilateria (3144)

Dikarya (3)

Ou seja...

O NGF é amplamente presente nos seres vivos.

Fonte: Uniprot

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Camundongo BDNF +/–

• Hiperfagia, obesidade

• Agressividade, hiperatividade

• Elevados níveis de dopamina estriatal

• Perda de mecanosensibilidade

• Perda de neurônios do sistema nervoso periférico

Neurotrofinas – BDNF (brain-derived neurotrophic factor)

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Neurotrofinas – BDNF (brain-derived neurotrophic factor)

Protostomia (2)

Gnathostomata (jawed vertebrates)

(1462)

Fonte: Uniprot

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Neurotrofinas – BDNF (brain-derived neurotrophic factor)

Euteleostomi (1462)

Batoidea (2)

Fonte: Uniprot

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Neurotrofinas – BDNF (brain-derived neurotrophic factor)

Sarcopterygii (1462)

Elopocephalla (2)

Fonte: Uniprot

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Neurotrofinas – BDNF (brain-derived neurotrophic factor)

Tetrapoda (1439)

Protopterus (2)

Ou seja...

O BDNF tem distribuição mais restrita, sendo a grande maioria dos organismos

que o expressam do grupo dos tetrápodes.

Fonte: Uniprot

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Regiões Cerebrais

Amígdala

• Percepção semiconsciente; parece padronizar as respostas comportamentais apropriadas para cada ocasião.

• Pode, ao ser estimulada, causar algumas experiência comportamentais como: prazer, raiva, sexualidade, medo

• Mantém amplas conexões com o restante do sistema límbico

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Regiões Cerebrais

Hipocampo

• Qualquer estímulo sensorial causa a estimulação de pelo menos alguma área do hipocampo.

• É importante no processo de transição da memória a curto prazo para memória a longo prazo

• Mantém conexões com o restante do sistema límbico

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Regiões Cerebrais

Núcleo Estriado (Núcleo Caudado e Putâmen)

• Aprendizagem e realização dos movimentos voluntários e daqueles que exigem habilidade motora

• Os núcleos da base preparam o corpo para o movimento ajustando a postura dos músculos axiais e das cinturas.

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Regiões Cerebrais

Córtex auditivo

• Córtex Auditivo Primário: responsável pela percepção dos sons

• Córtex Auditivo Associativo: responsável pelo reconhecimento do som, uma lesão isolada nessa área causa incapacidade de reconhecer melodias

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PERGUNTA BIOLÓGICA

Estímulos musicais distintos levam a

diferentes ou iguais expressões de BDNF e NGF em determinadas

regiões cerebrais ?

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Materiais e Métodos

10 Camundongos ouvindo rock

10 Camundongos sem música(controle)

10 Camundongos ouvindo música

clássica

Teste de comportamento

(BDNF)

Labirinto em cruz elevado

Teste em campo aberto

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Materiais e Métodos

10 Camundongos ouvindo rock

10 Camundongos sem música(controle)

10 Camundongos ouvindo música

clássica

Teste de comportamento

Labirinto em cruz elevado

Teste em campo aberto

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Materiais e Métodos

10 Camundongos ouvindo rock

10 Camundongos sem música(controle)

10 Camundongos ouvindo música

clássica

Teste de comportamento

(BDNF)

Labirinto em cruz elevado

Teste em campo aberto

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Materiais e Métodos

10 Camundongos ouvindo rock

10 Camundongos sem música(controle)

10 Camundongos ouvindo música

clássica

Teste de comportamento

Labirinto em cruz elevado

Teste em campo aberto

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Materiais e Métodos

Dissecção das áreas cerebrais

Hipocampo

Córtex auditivo

Núcleo estriado

Amígdala

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Materiais e Métodos

Análise da expressão gênica

Extração de RNA total

cDNA

PCR em tempo real

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Materiais e Métodos

Análise da concentração das

proteínas (BDNF, NGF)

ELISA

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Resultados Esperados

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Resultados Esperados

Camundongos do grupo com música

clássica

Maior expressão relativa de BDNF e

NGF

Maior concentração relativa de proteínas

Menos ansioso, se comparado aos outros grupos

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Resultados Esperados

Camundongos do grupo com rock

Diminuição da expressão de BDNF e

NGF

Mais ansioso que o grupo controle

Menor quantidade relativa de proteínas.

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Resultados Esperados

Camundongos do grupo controle

Níveis “normais” de BDNF e NGF

Comparado com os outros grupos, menor expressão

do genes das neurotrofinas e menor quantidade de

proteínas

Mais ansioso, se comparado com

os outros

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Cronograma

Março Abril Maio JunhoSeleção musical X

Exposição camundongos à música X X

Otimização dos PCRs X X

Aprender a dissecar SNC X X

Testes de comportamento X

Dissecção X X

PCR tempo real X X

ELISA X

Análise de resultados e Relatório X

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Obrigado!!