NOTAS E INFORMAÇÕES/NOTES AND INFORMATION

DADOS PRELIMINARES SOBRE PARTÍCULAS SEMELHANTES AVIRUS EM CÉLULAS DE TRIATOMÍNEOS *

H. Dolder **Maria Luiza S. Mello **

RSPUB9/399

DOLDER, H. & MELLO, M. L. S. Dados preliminares sobre partículas semelhantesa virus em células de triatomíneos. Rev. Saúde públ., S. Paulo, 12:104-9, 1978.

R E S U M O : Nos tubos de Malpighi de Triatoma infestans Klug e de Pans-trongylus megistus Burmeister foram encontradas estruturas víricas distribuídasno citoplasma, no interior de citolissomos ou outros tipos de glóbulos, formandoàs vezes arranjos para cristalinos envolvidos por membrana, e entre plasmale-mas de células contíguas. Outros tecidos dos mesmos insetos apresentamarranjos paracristalinos desses virus. A análise citoquímica ao nível da micros-copia eletrônica indica serem estes virus compostos de RNP. Não são encon-tradas alterações morfológicas drásticas nos tecidos infectados. Admite-se quetais virus tenham sido ingeridos durante uma alimentação de sangue infectadode ave.

U N I T E R M O S : Triatomíneos. RNA, Virus. Histocitoquímica.

* Trabalho subvencionado pela FAPESP (Proc. Biol. 75/907).**Do Departamento de Biologia Celular do Insti tuto de Biologia da UNICAMP — 13100 Cam-pinas, SP — Brasil.

I N T R O D U Ç Ã O

Nas células epiteliais dos tubos de Mal-pighi do Triatoma infestans Klug, à seme-lhança do que já foi reportado em Rhodniusprolixus Stahl (Wigglesworth e Salpeter6 ,1962) e mesmo em outros grupos de insetos(Sohal 5, 1974), são encontrados glóbuloscitoplasmáticos contendo estruturas lame-lares e/ou granulações semelhantes a ribos-somos (Mello e Dolder2, 1977). A maioriadesses glóbulos, dadas suas propriedadesmorfológicas, parecem se tratar de citolis-somos (Mello e Dolder2, 1977). Em al-

guns dos exemplares de Triatoma infestansestudados foram observados glóbuloscontendo elevado nmero de grânulos comarranjos especialmente orientados, o quelevantou a suspeita de que essas partícu-las pudessem representar estruturas víricas.Tal motivou a presente investigação, aqual trata de um levantamento mais deta-lhado de características ul tra-estruturais ec i toquímicas dessas part ículas e de suadistr ibuição nas células de triatomíneos.

MATERIAL E MÉTODOS

Foram util izados tubos de Malpighi, bemcomo musculatura a eles adjacente, den i n f a s e adultos de Triatoma infestansKlug e Panstrongylus megistus Burmeister(Hemiptera, Reduviidae), sem indícios apa-rentes de anormalidades anatômicas e decomportamento, e criados em laboratório.O material foi fixado durante 3 hem glutaraldeído a 3% em tampão fosfatoa pH 7,2 seguido por 1 h de tratamentoem ósmio a 1% em tampão fosfato. Ainclusão foi efetuada em Epon e os proce-dimentos de coloração e contraste foramrotineiros.

Parte do material foi submetido ao pro-cedimento de coloração preferencial deBernhard1 (1969), que evidencia compo-nentes ribonucleoprotéicos, permanecendoos cortes 45 a 60 min. em EDTA.

Alguns dos órgãos foram tratados comRNAse "en bloc", anteriormente à f ixação.

O exame dos cortes foi realizado numME Hitachi HU — 12 de alta resolução.

RESULTADOS

Tanto em populações de Triatoma infes-tans como de Panstrongylus megistus sãoencontrados indivíduos (ninfas e adultos)com tubos de Malpighi portadores de gló-bulos citoplasmáticos contendo em seuinterior partículas à primeira vista seme-lhantes a ribossomos (Figs. 1-5, 8-9). Oexame mais minucioso das partículas, noscasos especiais em que os glóbulos contêmgrande número delas, geralmente com dis-tribuição orientada, porém, revela seremelas maiores do que os ribossomos (Figs.6 e 8). Após métodos rot ineiros de prepa-ro de material para microscopia eletrônica,tais partículas se apresentam mesmo maiseletrodensas do que os ribossomos. Algunsdos glóbulos aparentam tratar-se de cito-lissomos, contendo em seu inter ior , inclusi-

ve, outras estruturas, tais como ar ran joslamelares empi lhados (Figs. 1 e 3) e restosmembranosos de mitocôndrias (Fig. 4). Emgeral essas formações globulares acham-sedel imitadas por membrana (Figs. 1-4).

Partículas semelhantes às encontradas nointerior de glóbulos foram observadas tam-bém entre membranas plasmáticas de cé-lulas vizinhas (Figs. 6 e 7) e fo rmandoarranjos paracristalinos em células deoutros tecidos (ex.: muscula tura) dosmesmos insetos que forneceram os resul-tados acima descritos (Figs. 10 e 1 1 ) .

Com a ut i l ização do método de Bernhard 1

(1969), foram obtidas imagens que salien-tam uma zona superf ic ia l nas part ículas,com caráter eletrodenso, envolvendo umaregião central eletrolúcida, de aparência oca(Figs. 6-8). Foram também observadasprojeções laterais eletrodensas partindo dasuperfície dessas estruturas (Fig. 7). Otratamento com RNAse digere a ma io r i adas partículas.

DISCUSSÃO E CONCLUSÕES

A observação de que as part ículas objetode estudo deste t rabalho podem aparecercontidas não apenas em citolissomos, masentre plasmalemas de células contíguas, etambém sob a fo rma de a r ran jos paracris-tal inos revestidos por membranas, em cé-lulas de diversos tecidos de um mesmoinseto, indica que elas sejam estruturasvíricas e não agregados orientados de ri-bossomos (corpos cromatóides). Em favordessa afirmação existe também o fato deque as formações que as contêm não seacham presentes em todas as amostras po-pulacionais de Triatoma infestans e Pans-trongylus megistus estudadas. Baseando-senos resultados obtidos após digestão enzi-mática com RNAse ou tratamento do ma-terial pelo método de Bernha rd 1 (1969),ficou demonstrado que os virus em questãocontêm RNA, o qual se apresenta distri-buído na parte superficial das partículas,pelo menos após o processamento metodo-lógico u t i l i zado .

A presença de v i r u s em cé lu la s de ou t rosinsetos vetores de doenças, apa ren temen tenão a f e t a n d o os hábi tos de a l i m e n t a ç ã odestes ú l t imos nem a d u r a ç ã o de suas v idas ,j á fo i cons t a t ada po r a l g u n s a u t o r e s

( P e l e g 4 , 1969; Murphy 3 , 1975; Wise 7 .1975). Foram mesmo sugeridos mecanis-mos especiais modu ladores da in feccão noinseto ( M u r p h y 3, 1975). No presente casoadmite-se que os v i rus t enham sido inge-

r idos q u a n d o da a l i m e n t a ç ã o dos t r i a t o m í -neos, c r iados em l abora tó r io , com sanguei n f e c t a d o de ave. Os v i r u s parecem nãoa f e t a r de modo drást ico o tecido i n f e c t a d o .Mui tas vezes apenas a lgumas cé lu la s nummesmo tubo de M a l p i g h i apresentam-se in-fec tadas , o que também já foi constatadoem glândulas salivares de Aedes triseriatuse Culex p ip i ens i n f ec t ados com v i r u s deence fa l i t e (Murphy 3 , 1975). Inves t igaçõesad ic iona i s fazem-se necessárias no sen t idode c lass i f i cação dos v i r u s encon t rados nos

t r i a t o m í n e o s , bem como no sen t ido de sea n a l i s a r o c o m p o r t a m e n t o dos insetos aolongo de per íodos mais p r o l o n g a d o s dei n f e c c ã o .

AGRADECIMENTOS

Ao Dr. E. O. Rocha-e-Silva pela doaçãodos hemíp te ros e ao Dr. S. C a t i c h a - E l l i s ,por p e r m i t i r o uso do ME H i t a c h i H U - 1 2do D e p a r t a m e n t o de C r i s t a l o g r a f i a do Ins -t i t u t o de Física da U N I C A M P .

RSPUB9/399

DOLDER, H. & MELLO, M. L. S. /Prel iminary data on particles similar to virusesin the cells of triatomines] Rev. Saúae públ., S. Paulo, 12 :104-9 , 1978.

A B S T R A C T : Viral particles distributed within cytolysomes or other cyto-plasmic globule types, giving rise to membrane enclosed paracrystalline arrays,and between membranes of contiguous cells, were found in the Malpighian tubesof T r ia toma i n f e s t a n s Klug and Pans t rongy lus megistus Burmeister. Other tissuesof the same insects also display paracrystalline arrays of these viruses. ARNP composition is assumed for the viruses based on their response to cyto-chemical methods at the EM level. Drastic morphological changes were notfound in the injected tissues. This infection assumed to be promoted by inges-tion of a bird infected blood meal.

U N I T E R M S : Triatominae. RNA viruses. His tocytochemis try .

R E F E R Ê N C I A S BIBLIOGRÁFICAS

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R e c e b i d o para publicação em 07/07/1977Aprovado para publicação em 14 /07 /1977 .