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Caracterizacin del cultivo de la papayacomo producto con potencial para

exportacin, con nfasis en el diagnsticomolecular y serolgico de enfermedades.

Gabriel Chiriboga Torres

ZAMORANOCarrera de Ciencia y Produccin Agropecuaria

Noviembre, 2000


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Caracterizacin del cultivo de la papayacomo producto con potencial paraexportacin, con nfasis en el diagnsticomolecular y serolgico de enfermedades.

Tesis presentada como requisito parcialpara optar al ttulo de Ingeniero Agrnomo

en el Grado Acadmico de Licenciatura

Presentado por:


Zamorano, HondurasNoviembre, 2000


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El autor concede a Zamorano permisopara reproducir y distribuir copias de este

trabajo para fines educativos. Para otras personasfsicas o jurdicas se reservan los derechos de autor.

_________________________Gabriel Chiriboga Torres

Zamorano, HondurasNoviembre, 2000


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Caracterizacin del cultivo de la papaya como producto conpotencial para exportacin, con nfasis en el diagnstico molecular y

serolgico de enfermedades.

Presentado por


Aprobada:

_______________________ _______________________Mara Mercedes Doyle, Ph. D. Alfredo Rueda, Ph. D.Asesor Principal Coordinador Area Temtica

Proteccin Vegetal

_______________________ _________________________

Elsa Barrientos, M. Sc. Jorge Ivn Restrepo, M.B.A.Asesor Coordinador de la Carrera deCiencia y Produccin Agropecuaria

_______________________ __________________________Mario Bustamante, M. Sc. Antonio Flores, Ph. D.Asesor Decano Acadmico

______________________ __________________________

Rogelio Trabanino, M. Sc. Keith L. Andrews, Ph. D.Coordinador PIA Director General


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DEDICATORIA

Este trabajo lo dedico:

A mis padres, como ejemplo de uno de los tantos frutos que ha dado todo ese esfuerzoinmenso que han realizado por m, durante mi vida.

A mi esposa Cecilia y a mi hija Mariana que han sido dos luceros en mi vida, lesdedico todo el esfuerzo y tiempo que me han dado.

A todos aquellos agricultores, que estn interesados en cultivar o cultivan papaya,espero que este trabajo sea como una gua de ayuda para conocer ms sobre lasenfermedades y las distintas alternativas de prevencin y control que existen.

A todos los responsables de una Honduras mejor, gobierno, ONGs, institucionesacadmicas, profesionales, agricultores, jornaleros, intermediarios, industriales,

banqueros, etc y etc. Para que podamos ver la situacin de la agricultura, en tan solouno de los tantos productos que podran ser la clave para el bienestar del pas, si sontomados en cuenta e incentivados de la manera ms objetiva y sin intereses

particulares.


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AGRADECIMIENTOS

Gracias Seor Jesucristo por haberme enseado T palabra, que T eres elcamino la verdad y la vida, y gracias por concederme el poder conocer a todoslos hermanos que son mi verdadera familia.

A mis hermanos en Cristo, Felipe, Alvaro, Christian, David, Elas, Ren, Mauricio,Jos, Enrique y a toda la novia les agradezco por sus oraciones, paciencia y su amorgape.

A mis padres Rafael y Miriam les doy las gracias por el esfuerzo que hicieron paraque todo esto haya sido posible.

A mi esposa Cecilia y Mariana mi hija por apoyarme en todo este esfuerzo y poresperarme siempre con sus brazos abiertos.


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AGRADECIMIENTO A PATROCINADORES

Agradezco a mis Padres que fueron los patrocinadores de mis estudios en el programade Agrnomo (PA) y parte del programa de Ingeniera (PIA), gracias por haber puestosu confianza en mi y todo su esfuerzo en ayudarme para ver culminar otra etapa de mivida con logros y superaciones. Estoy agradecido por siempre.

Agradezco al proyecto IPM-CRSP por darme esta oportunidad de poder ayudar apequeos productores y de poder terminar mis estudios, creo que ha sido valiosa lainformacin obtenida y la experiencia de poder trabajar con agricultores necesitadosde tecnologa, crditos, asesora, etc. pero dispuestos a esforzarse y trabajar por sufuturo.


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RESUMEN

Chiriboga, Gabriel. 2000. Caracterizacin del cultivo de la papaya como productocon potencial para exportacin, con nfasis en el diagnstico molecular y serolgico

de enfermedades. Proyecto Especial del Programa de Ingeniero Agrnomo. ElZamorano, Honduras 75 p.

En los pases en vas de desarrollo existe una necesidad creciente de investigacin encultivos no tradicionales con potencial para exportacin ya que son una alternativa

para mejorar la situacin comercial y econmica. Los objetivos del trabajo fuerondeterminar los factores que limiten el xito del cultivo de la papaya como producto notradicional con potencial de exportacin, realizar un inventario de las enfermedadescausadas por virus y rickettsias y elaborar un gua prctica sobre las principales plagasinsectiles y enfermedades. La caracterizacin y recoleccin de muestras paradiagnstico se inici en abril de 1999 y termin en abril del 2000, se trabaj en los

departamentos de Francisco Morazn, Comayagua y La Paz, por ser zonas de altaproduccin de papaya en Honduras. Se realiz un diagnstico inicial utilizando lametodologa de un diagnstico rural rpido participativo. Para el diagnstico de lasmuestras de plantas recolectadas se utiliz el PCR como tcnica molecular y ELISAcomo tcnica serolgica. Las enfermedades que se diagnosticaron fueron PapayaBunchy Top (PBT), Papaya Ringspot Virus (PRSV), Papaya Mosaic Virus (PMV),Fitoplasmas, Geminivirus y una enfermedad de etiologa desconocida encontrada enel Zamorano. Los resultados del diagnstico molecular de geminivirus y fitoplasmadieron negativos, as como el diagnstico del PRSV y el PMV con la tcnicaserolgica ELISA, aunque las muestras recolectadas mostraban sntomascaractersticos y bien definidos de las enfermedades. En el caso de PBT se obtuvieronmuestras de plantas sintomticas que dieron resultados positivos utilizando PCR parasu diagnstico. Con el uso del microscopio electrnico se observ una partcula detipo closterovirus en el diagnstico de la enfermedad de etiologa desconocida en ElZamorano. Se puede concluir que en Honduras la siembra de papaya no est dirigidahacia la exportacin, mas bien es un cultivo que est en manos de pequeos

productores, pero que a su vez tienen problemas en sus cultivos por las enfermedadescomo PBT y causadas por virus. Se recomienda que se haga un incentivo a la

produccin de esta fruta para la exportacin o para el mercado local, pero se debeutilizar nuevas variedades de mayor demanda y resistentes a virus.

Palabras claves:Closterovirus, diagnstico rural rpido,ELISA, PCR,rickettsias.

____________________

Abelino Pitty, PhD.


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Nota de prensa

IDENTIFICAN ENFERMEDAD QUE PUEDE SER CRITICA EN LASPLANTACIONES DE PAPAYA EN HONDURAS

La papaya es un cultivo que tiene un gran potencial para la exportacin, querepresenta una oportunidad para la economa hondurea. Las zonas y climas ptimospara su produccin en el pas.

En Honduras han existido esfuerzos por cultivar papaya para exportar, perocon resultados negativos debido al ataque severo de enfermedades virales.

Zamorano y el proyecto IPM-CRSP del gobierno norteamericano, han unidoesfuerzos tcnicos y econmicos con el objetivo de realizar un estudio/diagnsticosobre las posibles enfermedades que estn presentes en Honduras y que pudieran tenerefectos negativos en los cultivos de papaya.

El estudio comenz en abril de 1999 y concluy en abril del 2000, cubri losdepartamentos de Comayagua, La Paz y Corts, departamentos donde estn ubicadaslas mayores plantaciones de papaya en Honduras. Como primera fase se recolectaronmuestras de plantas que mostraban sntomas caractersticos de las enfermedades y sediagnosticaron por medio de tcnicas moleculares (PCR) y serolgicas (ELISA) en ellaboratorio de diagnstico molecular de la Carrera de Ciencia y Produccin deZamorano.

Entre las enfermedades que se diagnosticaron y que su resultado fue positivo,est: Papaya Bunchy Top (PBT), que es una enfermedad que ha sido reportada enPuerto Rico, Costa Rica y Cuba, pero no haba sido reportada en Honduras. La seidentific en la comunidad de Flores, Comayagua. Esta enfermedad es causada por untipo de bacteria "fastidiosa", y es transmitida por un chicharrita de nombre cientfico

Empoasca papayae. Una vez que ataca el mal no tiene cura, por eso se debe realizarun manejo preventivo. Los sntomas ms caractersticos de la enfermedad son:

1. Copa con forma de sombrilla resultado de la reduccin en el largo normal de lospecolos y entrenudos.

2. Hojas de tamao reducido, en forma convexa, de color amarillento y textura msdura, las frutas se quedan pequeas y no maduran bien, tejido infectado sin ltex

(hojas, tallos, frutas), como la infeccin ocurre solamente en el pice de la planta,muchas veces se desarrollan brotes sanos en la parte inferior del tronco.

Una forma prctica de detectar esta enfermedad se hace una prueba mediante un corteen la punta de la planta y se verifica si fluye ltex. Si los sntomas coinciden y no

brota el ltex lo ms recomendable es cortar la planta y quemarla o enterrarla, paraque la enfermedad no se disemine al resto de la plantacin.

__________________Lic. Sobeyda Alvarez


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CONTENIDO

Portadilla... i.Autora.. ii.Pgina de firmas... iii.

Dedicatoria... iv.Agradecimientos... v.Agradecimientos patrocinadores.. vi.Resumen... vii.

Nota de prensa.. viii.Contenido. ix.Indice de cuadros.. xiii.Indice de figuras.. xiv.Indice de anexos... xv.

1. INTRODUCCION.. 1

1.1 INTRODUCCION AL ESTUDIO... 11.2 OBJETIVOS. 31.2.1 Objetivo general... 31.2.2 Objetivos Especficos... 3

2. REVISION DE LITERATURA 42.1 CONTEXTO DEL COMERCIO GLOBAL ENFOCADO A LA

PAPAYA COMO PRODUCTO NO TRADICIONAL... 42.1.1 Tendencias de los mercados. 52.2 DESCRIPCIN DEL CULTIVO DE LA PAPAYA.. 62.2.1 Generalidades... 62.2.2 Descripcin.. 72.2.3 Origen y Distribucin.. 82.2.4 Propagacin. 82.2.5 Factores importantes para la produccin. 82.2.5.1 Clima 82.2.5.2 Suelos... 82.2.5.3 Riego 92.3 PRINCIPALES PLAGAS Y ENFERMEDADES DE LA

PAPAYA.. 92.4 PLAGAS MAS COMUNES EN HONDURAS.. 10

2.4.1 Mosca de la fruta (Toxotrypana curvicauda).. 152.4.1.1 Daos 152.4.1.2 Biologa y Ecologa.. 152.4.1.3 Manejo y Control.. 152.4.2 Anthracnosis (Colletotrichum gloeosporioides).. 162.4.2.1 Sntomas y Daos. 162.4.2.2 Agente Causal.. 162.4.2.3 Epidemiologa.. 172.4.2.4 Manejo y Control. 172.4.3 Alternaria (Alternaria alternata) 182.4.3.1 Sntomas y Daos. 18

2.4.3.2 Agente Causal.. 182.4.3.3 Epidemiologa... 18


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2.4.3.4 Manejo y Control.. 182.4.4 Pudricin de las races y tronco (Phytophtora parasitica).. 192.4.4.1 Sntomas y Daos. 192.4.4.2 Agente Causal.. 192.4.4.3 Epidemiologa.. 19

2.4.4.4 Manejo y Control.. 192.4.5 Papaya Mosaic Virus (PMV)... 192.4.5.1 Distribucin geogrfica 192.4.5.2 Taxonoma 192.4.5.3 Morfologa y citopatologa... 202.4.5.4 Epidemiologa.. 202.4.5.5 Sintomatologa. 202.4.5.6 Diagnstico.. 202.4.5.7 Manejo de la enfermedad. 202.4.6 Papaya Ringspot Virus (PRSV).. 202.4.6.1 Distribucin geogrfica 21

2.4.6.2 Taxonoma 212.4.6.3 Morfologa y citopatologa.. 212.4.6.4 Epidemiologa. 222.4.6.5 Sintomatologa. 222.4.6.6 Diagnstico.. 222.4.6.7 Manejo de la enfermedad. 222.4.7 Papaya Droopy Necrosis Virus (PDNV). 222.4.7.1 Distribucin geogrfica 222.4.7.2 Taxonoma 232.4.7.3 Morfologa y citopatologa... 232.4.7.4 Epidemiologa... 232.4.7.5 Sintomatologa.. 232.4.7.6 Diagnstico... 232.4.7.7 Manejo de la enfermedad. 232.4.8 Enfermedad de etiologa desconocida en Honduras. 232.4.8.1 Generalidades... 242.4.9 Papaya Bunchy Top (PBT). 242.4.9.1 Distribucin geogrfica 242.4.9.2 Taxonoma 242.4.9.3 Morfologa 242.4.9.4 Biologa 24

2.4.9.5 Sintomatologa. 252.4.9.6 Diagnstico.. 252.4.9.7 Vector.. 252.4.9.8 Manejo de la enfermedad. 252.5 ASPECTOS DE DIAGNSTICO.. 26

3 MATERIALES Y METODOS. 273.1 CONTEXTO GENERAL DE LA PAPAYA.. 273.2 EVALUACIN DE CAMPO. 273.2.1 Reconocimiento de la zona y las plantaciones. 273.2.2 Identificacin de sntomas caractersticos en campos de produccin y

recoleccin de muestras 283.3 DIAGNSTICO RURAL RAPIDO 28


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3.3.2 Elaboracin de la encuesta... 283.3.3 Contacto con los agricultores y realizacin del diagnstico rural

rpido 283.4 ANALISIS DE LAS MUESTRAS EN LABORATORIO.. 293.4.1 Conservacin de muestras 29

3.4.2 Diagnstico de Papaya Ringspot Virus (PRSV) y Papaya Mosaic Virus(PMV) utilizando el mtodo ELISA ("Enzyme-linked immunosorbentassay")... 29

3.4.3 Diagnstico molecular utilizando PCR de Papaya Bunchy Top (PBT).. 303.4.4 Diagnstico de la enfermedad de etiologa desconocida. 31

4. RESULTADOS Y DISCUSIN 324.1 CONTEXTO DE LA PAPAYA.. 334.2 DIAGNSTICO RURAL RAPIDO 344.3 DIAGNSTICO MOLECULAR Y SEROLGICO.. 354.3.1 Papaya ringspot virus y papaya mosaic virus.. 35

4.3.2 Papaya Bunchy Top. 364.3.3 Enfermedad de etiologa desconocida. 37

5. CONCLUSIONES.. 38

6. RECOMENDACIONES 396.1 INVESTIGACION.. 396.2 PRODUCTORES 39

7. BIBLIOGRAFA... 408. ANEXOS..... 45

INDICE DE CUADROS


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Cuadro

1. Honduras.Valor de las exportaciones de hortalizas frescas y procesadas.

2. Plagas principales del cultivo de la papaya

3. Diferentes alternativas de aplicacin para el control qumico de la mosca de lafruta

4. Formato para la informacin de muestras recolectadas y explicacin del cdigo...

5. Primers especficos para el PBT

6. Secuencia de nucleotidos para el par de primers universales para el diagnsticode fitoplasmas.

INDICE DE FIGURAS


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Figuras

1. Esquema ilustrativo del marco lgico..

2. Visin general y efectos del crecimiento de las EXANT (Exportacin Agrcola

no Tradicional).

3. Tendencias de las Exportaciones Agrcolas no tradicionales (EXANT) enAmrica Latina y el caribe..

4. Tendencia de las importaciones de Papaya como fruta fresca, en Estados Unidosy la Unin Europea..

5. Mosca de la fruta.

6. Anthracnosis en Fruto...

7. Alternaria en Fruto....

8. Pudricin de la raz y tallo (Phytophtora sp.)..

9. Papaya Mosaic Virus (PMV)..

10. Papaya Ringspot Virus (PRSV) en hoja.

11. Papaya Ringspot Virus (PRSV) en fruto...

12. Papaya Droopy Necrosis Virus (PDNV)...

13. Enfermedad de etiologa desconocida... 100

14. Papaya Bunchy Top..

15. Mapas demarcados donde fueron tomadas las muestras

16. Resultados negativos de ELISA para PRSV

17. Resultados negativos de ELISA para PMV.

18. Resultados de PCR para Papaya Bunchy Top en Papaya (primers:PBTF-PBTR)..

19. Resultados de PCR para PBT en Papaya utilizando dos mtodos diferentes deextraccin

INDICE DE ANEXOS


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Anexo

1. Descripcin de sntomas encontrados por Bryan Brunner

2. Encuesta para productores

3. Protocolo de la prueba de ELISA indirecta proporcionado por AGDIA ..

4. Protocolo de Extraccin de ADN total (Planta y Patgeno), modificacinde Doyle and Doyle (1990), FOCUS 12 (1): 13 -15. Extraccin Miniprepde ADN.

5. Extraccin de sabia para diagnstico de PBT...


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1 INTRODUCCION

1.1 INTRODUCCIN AL ESTUDIO

Este estudio es parte de los trabajos de investigacin del componente del programa de

IPM-CRSP ("Integrated Pest Management-Collaborative Research Support Program")para la regin de Centro Amrica y el Caribe. El programa de IPM-CRSP es unesfuerzo Global para fomentar la investigacin en temas relacionados con el ManejoIntegrado de Plagas. En Centro Amrica se ha enfocado recientemente en lainvestigacin de plagas insectiles y enfermedades de cultivos no tradicionales con

potencial para la exportacin.

El enfoque de este estudio refleja por un lado una larga trayectoria en Zamorano en lainvestigacin sobre MIP (Manejo Integrado de Plagas) en la regin, y el enfoqueactual de IPM-CRSP en Centro Amrica. Desde 1997, el programa del IPM-CRSP haapoyado estudios en cultivos de exportacin no tradicionales en Zamorano, connfasis en frutas tropicales como la pia y la papaya.

Se hicieron muestreos fitosanitarios en plantaciones y un diagnstico rural rpidoparticipativo a pequeos agricultores de los departamentos con mayor significancia enla siembra de papaya. El objetivo fue poder visualizar la situacin del cultivo de la

papaya y cuales son y podran ser las limitantes fitosanitarias si se destinara estecultivo para la exportacin.

Para el diagnstico fitosanitario se utiliz la tcnica molecular de la Reaccin enCadena de la Polimerasa (PCR) y serolgica la prueba de ELISA ("Enzyme-linked

immunosorbent assay" por sus siglas en ingls).

Para ubicar el cultivo de la papaya y sus problemas, es necesario conocer el marcolgico y sus componentes para esto la parte introductoria ubica al estudio en uncontexto ms general, haciendo especfico la lgica del estudio y sus componentesms importantes (Figura 1).


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Figura 1. Esquema ilustrativo del marco lgico de la problemtica: La realidad globalencierra cambios de estructura, necesidades, capacidades y oportunidades. Los pases endesarrollo tienen que velar por sus oportunidades de ingreso de divisas. Las ltimastendencias de generacin de divisas han sido por exportaciones de productos notradicionales, tanto industriales y de servicios como agrcolas. Dentro de las exportaciones notradicionales del sector agrcola estn las frutas como una alternativa en nuestros pasestropicales. Existen riesgos de produccin, entre los ms crticos estn las enfermedadesespecficamente las de tipo viral y de otra etiologa muchas veces desconocidas.

Contexto de Comercio Global

Estructuras

Necesidades

Capacidades

Oportunidades

Generacin de Ingresos

Tradicional

No tradicional

Exportaciones Agrcolas

Hortalizas

Acuicultura

Frutas

Exportaciones No Agrcolas

Maquilas

Productos/Servicios

Oportunidades de produccin de

frutas no tradicionales enHonduras

Litchi

Rambutn

Papaya

Macadamia

Uvas

Riesgos de produccin

Mercadeo

Precio

Mercados

Ubicacin

Produccin

Agua

Suelo

Plagas

Enfermedades

Poscosecha

Tratamiento

Infraestructura

Hongos

Bacterias

Virus

Otros Organismos


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1.2 OBJETIVOS

1.2.1 Objetivo general

Estudiar el cultivo de la Papaya como producto no tradicional con potencial de

exportacin.

1.2.2 Objetivos Especficos

Determinar los factores que pudieran limitar el xito de la papaya como cultivo deexportacin.

Mediante un Diagnstico Rural Rpido Participativo conocer las posibilidades deproducir papaya como cultivo de exportacin no tradicional.

Realizar el primer inventario en el cultivo de la papaya, de las posibles infeccionescausadas por virus y rickettsias en Honduras.

Elaborar una gua prctica de plagas insectiles y enfermedades ms comunes delcultivo de Papaya en Honduras


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2 REVISION DE LITERATURA

2.1 CONTEXTO DEL COMERCIO GLOBAL ENFOCADO A LA PAPAYACOMO PRODUCTO NO TRADICIONAL

Debido a la tendencia de la economa mundial, que est directamente influida por laglobalizacin y apertura de mercados, cada ao aumenta la competencia entre losdiferentes mercados mundiales. Esto pone en ventaja a los pases que tieneneconomas de escala, estabilidad econmica y mano de obra calificada, entre otros.Tambin se traduce en desventaja para otros pases los cuales tienen todo lo contrario;este es el caso de la mayor parte de Latinoamrica (Granadino, M. 2000)1.

En el contexto mundial continuamente estn ocurriendo cambios que van enfocados auna globalizacin. Entre los puntos que hay que tomar en cuenta de los cambios queestn ocurriendo son: a)disminucin en la proteccin de mercados internos, b)disminucin en subsidios y amparo estatal, y c) aumento de la facilidad demovimiento de grandes capitales hacia mercados ms competitivos (Doyle, 2000)2.

La tendencia est dirigida hacia la bsqueda de nuevos mercados y la necesidad deresponder a las distintas demandas que tienen los mercados modernos como ser:mejor calidad del producto, menor uso de pesticidas y preocupacin por los aspectossociales en la cadena de produccin, entre otros.

Adems, hay un cambio en la estructura de la produccin internacional que est cadavez ms estratificada hacia el desarrollo de servicios y productos ms sofisticados en

pases desarrollados, y en pases en desarrollo hacia la produccin de productos

primarios y maquilados (FAO, 1997).

En este contexto la agricultura puede presentar una oportunidad rentable para variospases en vas de desarrollo que por factores como el clima, suelo, ubicacingeogrfica y caractersticas de la mano de obra debajo costo, dan una ventajacompetitiva en el campo agrcola (Carassas, 2000)3. Tambin existe una fuertetendencia en la economa de los pases en vas de desarrollo en cambiar de una

produccin agrcola tradicional (granos bsicos, etc.), haca productos con msposibilidad de entrada a mercados regionales o internacionales ms rentables. Estatendencia se debe a que a principio de los aos ochenta la regin experiment unagrave crisis econmica, por la dependencia de un nmero reducido de exportaciones

tradicionales haciendo vulnerable e inestable la economa de Amrica Latina y elCaribe (Thrupp, 1994).

Entre los factores para que se diera este cambio estn: la cada de los precios de losproductos tradicionales en los mercados mundiales, recesin y el proteccionismo estotrajo menos ganancias econmicas. Para responder a esta crisis, se formul variasalternativas entre ellas estn la diversificacin de los cultivos tradicionales y elingreso al mercado de productos no tradicionales de alto valor econmico. El enfoque

1 Granadino, M. 2000. Caractersticas de la globalizacin y apertura de mercados, ZamoranoHonduras. Comunicacin Personal2

Doyle, P. 2000. Contexto mundial de la agricultura. Zamorano, Honduras. Comunicacin Personal.3 Carassas, P. 2000 Ventajas competitivas de los pases del trpico, Zamorano Honduras.Comunicacin Personal


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del fomento de las exportaciones agrcolas no tradicionales es netamente generardivisas, fuentes de empleo y revitalizar el crecimiento econmico (Figura 2) (Thrupp,1994).

Figura 2.Visin general y efectos del crecimiento de las EXANT (Exportacin Agrcola noTradicional)

Fuente: Thrupp, 1994. Cultivos nuevos, dilemas viejos: oportunidades y retos en laagroexportacin no tradicional en latinoamrica.URL: http://www.rimisp.cl/publicaciones/electronicas/encuentro/pub2/Adaptado por: Gabriel Chiriboga

Dentro de los productos para exportacin con mayor futuro y ventaja competitivaestn las frutas no tradicionales de alta calidad, que en algunos pases como Hondurasllegan a ser los principales rubros de exportacin e ingreso de divisas (Cuadro 1).

Polticas e institucionesInternacionalesAjuste estructuralPromocin de mercado y de exportacinLiberalizacin del intercambioApoyo del sector privado(USAID, Banco Mundial, BID, etc.)

Condiciones globales del mercadoCambios en las actitudesAumento en la demanda por ladiversidadTendencias demogrficas(urbanizacin)Acuerdos comerciales (por ej. CBI,GATT)

Polticas nacionales y cambios institucionales parapromover las EXANTFacilitar el proceso de exportacinIncentivos tributarios de preciosTasas de comercio y de intercambioPolticas de crdito y de mercadeoApoyo institucional

CRECIMIENTO DE PRODUCTOS NOTRADICIONALES DIVERSSIFICADOS PARA LA

EXPORTACION

Efectos econmicosIncrementos de lasexportacin/gananciasIncrementonegocio/inversinEfecto multiplicador-valor agregadoRiesgos: Saturacin

Efectos sociales/dedistribucinGeneracin deempleosConcentracin de

beneficiosEfectos para losagricultores

Efectos ambientalesEfectos a causa del usode plaguicidas:Costos directosResistenciaCambios en el uso de latierraDegradacin del agua


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Cuadro 1. Honduras. Valor de las exportaciones de hortalizas frescas y procesadas (Miles deUS$)Categora 1994 1996 1998Hortalizas Frescas 4,005.8 2,191.4 5,653.9Productos del

Tomate

695.9 1995.9 873.0

Meln y Sanda 20,615.1 16,609.4 23,693.1Fuente: Rodrguez Estrada (1999?)

El nivel de xito, en la incursin de nuevos mercados con productos mencionados enel cuadro 1, depende de un juego de factores tradicionales (clima, suelo y ubicacingeogrfica), pero cada vez ms incluye factores de carcter ambiental o social como:

Ingreso en mercados de exportacin Tecnologa amigable al ambiente Sistemas de produccin sostenibles Programas de manejo de personal Impactos sociales (sueldos, seguridad industrial, educacin, entre otros)

Por eso es importante considerar aspectos de manejo apropiado del cultivo yparticularmente las enfermedades.

2.1.1 Tendencias de los mercados

En las ultimas dcadas, en el mbito latinoamericano, ha existido la tendencia aincrementar el ingreso de divisas por medio de la promocin y el aumento de las

exportaciones no tradicionales, (Figura 3). Esto se ha debido en parte al fuerte apoyode las agencias crediticias internacionales como el Banco Mundial (BM), FondoMonetario Internacional (FMI) y la Agencia de los Estados Unidos para el Desarrollo(USAID) (Thrupp, 1994).

Figura 3.Tendencias de las Exportaciones Agrcolas no tradicionales (EXANT) en AmricaLatina y el caribe.Fuente: Thrupp, 1994. Cultivos nuevos, dilemas viejos: oportunidades y retos en laagroexportacin no tradicional en latinoamrica. URL:

http://www.rimisp.cl/publicaciones/electronicas/encuentro/pub2/

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Regin Caribe* Sur Amrica ** Amrica Central***


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La papaya es uno de los cultivos no tradicionales que tiene gran potencial deproduccin en los trpicos. En la ltima dcada ha existido un incremento en laimportacin de la fruta, aproximadamente un 40 %, en Europa y Estados Unidos(Figura 4).

Figura 4. Tendencia de las importaciones de Papaya como fruta fresca, en Estados Unidos yla Unin EuropeaFuente: FAOSTAT 2000 http://www.fao.orgAdaptado por: Gabriel Chiriboga.

2.2 DESCRIPCIN DEL CULTIVO DE LA PAPAYA

2.2.1 Generalidades

El origen de la papaya no ha sido determinado, pero es muy probable que seaoriginaria del sur de Mxico y Costa Rica. Luego fue esparcida al oeste de la India y aFilipinas en el siglo XVI, y luego al este Africano en el siglo XIX. Es una planta noleosa esencialmente tropical, se siembra entre las latitudes 32oN y 32oS, las heladasson fulminantes y la altura mxima apta para su siembra es de 2000 m.s.n.m. (Hill yWaller, 1988).

El nombre papaya es bien conocido mundialmente, aunque se ha corrompido en el surde Asia y en el este de la India, llamndose kapaya, kepaya, lapaya o tapaya. Enfrancs es papaye la fruta y papayer la planta; los sudamericanos la llaman meln

zapoteo papayaa la fruta ypapayoopapayeroa la planta, en Cuba se la llama frutabomba, en Venezuela lechosa, y en Brasil se la llamamamao (Morton, 1987).

La papaya adems de ser una fruta fresca exquisita para comer en su estado maduro,tambin se la puede consumir tierna precocinndola y sirvindola en la ensalada.(S.E.P, 1997). Entre los subproductos que se puede extraer del ltex est una enzimallamada papaina; es capaz de ablandar carne, tambin es medicinal y tomarladiariamente influye positivamente en la digestin. Adems, se usa en la industriacervecera para su clarificacin (Arriola, et al. 1976).Segn investigaciones en laUniversidad de Nigeria, el extracto de la semilla y de las frutas tiernas tienen un poder

bactericida (Morton, 1987).

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El fruto es una baya, de un alto grado alimenticio que contiene vitaminas A, B1, B2yC, y si se aprieta su corteza exuda un ltex blanquecino, el cual est presente en todoslos rganos de la planta, cuyo principio activo es la papaina, que constituye unfermento activo de propiedades anlogas a la pepsina y muy usado en medicina. La

presencia de este fermento en el fruto del papayo hace que ste, adems de ser un

excelente alimento, sea un coadyuvante de la digestin (Ibar, 1979).

2.2.2 Descripcin

La papaya pertenece a la Divisin Anthophyta, a la Clase Dicotiledonea, SubclaseCloripetala y al Orden Parientales. El gnero Carica comprende cinco especies, entrelas ms conocidas se encuentran Carica pubescens (C. candamarcensis), Caricamonoica y el hbrido ecuatoriano Carica xheilbornii (Babaco), producto del cruceentre C. pubescens yC. stipulata; sin embargo, la especie ms importante de todas esCarica papaya (Papaya)(Guzmn Daz, 1998).

Segn Morton (1987), comnmente y errneamente al papayo se le ha consideradocomo un rbol, aun cuando la planta propiamente dicho es una hierba alta, ya que esherbcea, pudiendo crecer en el primer ao de 1.8 a 3m y puede llegar a medir de 6 a9 m, el tallo mide aproximadamente 30 a 40 cm de dimetro.

La papaya es una planta considerada perenne, pero de corta vida. Las hojas parecidasa la palma emergen del tallo, sostenidas por largos pecolos. Las flores se desarrollanen las axilas de las hojas, teniendo un olor agradable. Los ptalos miden de 2.5 a 5.1cm. (Chia, et al., 1989)

Existen tres tipos de planta: las hermafroditas, hembras y machos. La planta hembrasiempre producir flores femeninas y si no hubieran plantas masculinas ohermafroditas, esta no cuajara fruto (Pereira de Araujo 1987). Al contrario, en las

plantas masculinas que usualmente no producen frutos, en raras ocasiones tienenflores con expresiones femeninas pudiendo producir algunos frutos. (Chia, et al.,1989)

Las plantas hermafroditas pueden tener flores masculinas, hermafroditas o ambas, yesto depende de las condiciones climticas y el tiempo del ao en algunas regiones.Una temporada de clima seco y clido puede provocar una supresin en los ovarios

producindose as flores hembras estriles (Chia, et al., 1989).

Hay tres tipos de flores hermafroditas: unas parecidas en su aspecto a las floresfemeninas que son las llamadas pentandrias; otras parecidas a las masculinas, laselognatas, y finalmente unas de caracteres intermedios entre stas, las intermedias oirregulares. Los frutos resultantes van a variar en forma y tamao entre los tres tiposde flores (Ibar, 1979).

Las plantas hermafroditas producen frutos que contienen semillas autopolinizadas, lascuales dan una progenie relativamente uniforme. Como ejemplo estn las plantashermafroditas de la variedad Solo que producen una progenie que resulta en unatercera parte en plantas femeninas y dos tercios en plantas hermafroditas, pero no se

produce ninguna planta masculina (Chia, et al., 1989; Pereira de Araujo, 1987).


24/66

xxiv

La calidad de fruto en cuanto a sabor y textura son iguales en los tipos de plantas,aunque normalmente las plantas femeninas son menos productoras, y la fruta en

pases que exportan es destinada al mercado local, por esto en explotaciones paraexportacin, al momento de poder distinguir se eliminan las plantas femeninas (Chia,et al., 1989).

2.2.3 Origen y Distribucin

Aunque el origen no ha sido determinado con exactitud, existen reportes deltransporte de la semilla en el ao 1550 de Panam y Repblica Dominicana a NorteAmrica, Sur Amrica y la India. En 1616 llegaron las primeras semillas a lasBahamas y Filipinas (Morton, 1987).

Siendo nativa de Centro y Norte Amrica ahora se cultiva a escala mundial,especialmente en los trpicos (Galinsky y Laws 1998). Se conoce que hay

plantaciones exitosas en Hawaii, frica, Filipinas, Malasia, Australia y en menor

escala en Latinoamrica (Morton, 1987).

2.2.4 Propagacin

La forma ms fcil y econmica de propagar el papayo es por medio de semillas, apesar de las dificultades que se presentan al obtenerse plantas de diferente sexo, y quea veces las plantas resultantes no reproducen exactamente las caractersticas de la

planta originaria. Si se quiere tener la seguridad de obtener plantas exactamenteiguales a las originaria, tanto en sus caractersticas como en su sexo, no hay otrasolucin que procedera la multiplicacin de la planta por medio de propagacin "invitro"(Vergara, 1999)4o por medio de esquejes (Ibar, 1979).

El uso de cultivo de tejidos es una alternativa para propagar plantas de papaya quehan sido modificadas genticamente (Vergara, 1999).5

La semilla seca puede almacenarse por un ao o ms en recipientes hermticos y bajorefrigeracin. Las semillas frescas tardan entre 10 a 14 das para germinar. Se puedemejorar la germinacin removiendo la cubierta gelatinosa. Las semillas se siembranen bolsas o directamente en el terreno (Chia, et al., 1989).

2.2.5 Factores importantes para la produccin

Se prefiere un clima clido que est entre 22C y 32oC, siendo latemperatura ideal los 25oC. Los cambios bruscos de temperatura resultan en frutos demala calidad. Si la temperatura bajara a 0oC, se produce la cada de las hojas, yaunque la planta fructifique, los frutos quedan expuestos al sol, deteriorndose sucalidad (Pereira de Arajo, 1987).

Necesita un tipo de suelo franco con un pH de 6 a 7.5 (neutro) ypreferiblemente con un contenido de materia orgnica entre 2 y 3 %. Adems, debe

4 Vergara, L. 1999. Pasos para el cultivo de la papaya transgnica in vitro. Universidad del Valle,

Guatemala. Comunicacin Personal5 Vergara, L. 1999. Pasos para el cultivo de la papaya transgnica in vitro. Universidad del Valle,Guatemala. Comunicacin Personal

2.2.5.1 Clima

2.2.5.2 Suelos


25/66

xxv

tener una buena profundidad ya que la planta tiene races pivotantes que alcanzan los2 metros y las races absorbentes estn a unos 80 cm. (Pereira de Arajo, 1987).

Al tener sus tallos y races blandos y esponjosos, no debe cultivarse en terrenosdemasiado hmedos y compactos con mal drenaje, ya que fcilmente se pudrirn las

races (Ibar, 1979). Segn Pereira de Arajo (1987), una acumulacin de agua quehaga contacto con el tronco en un tiempo de 48 horas, causara la muerte a la planta.

El agua debe contener menos de 400 ppm de sales, se utilizaaproximadamente 2000 m3 anuales, que se pueden distribuir cada 15 das. Hay quetener en cuenta que la papaya es muy susceptible a suelos excesivamente hmedos, yque resiste bien a la sequa (Ibar, 1979).

2.3 PRINCIPALES PLAGAS Y ENFERMEDADES DE LA PAPAYA

Existe un sinnmero de enfermedades relacionadas directa en indirectamente con este

cultivo. El siguiente cuadro resume las enfermedades ms crticas y de mayorincidencia en el cultivo de la papaya (Cuadro 2).

Cuadro 2. Plagas principales del cultivo de la papaya.Fuente: Plagas del cultivo de Papaya que ocurren en Honduras OIRSA-HONDURAS, Mayode 1999 Adaptado por: Gabriel Chiriboga.

Nombre Comn Nombre Cientfico y/o Agente CausalENFERMEDADES FUNGOSAS

Mancha Foliar Colletotrichum papayaeMildiu polvoriento; Oidio de la

papaya.Oidium caricaeNoack

Pudricin de la raz y del tallo. Phytophtora spp.Anthracnosis de la fruta Colletotrichum gloesporioidesMal del talluelo (Damping-off) Pythium sp.; Rhizoctonia sp.Pudricin del fruto e inflorescencia Alternaria alternata

BACTERIASPunteado de la hoja Pseudomonas caricapapayaeMancha Angular Pseudomonas syringaepv. Carica-papayae

Rolfs.Pudricin del fruto Erwinia carotovora

VIRUS

Papaya Ringspot Virus PRSVPapaya Mosaic Virus PMVPapaya Solo Lethal Yellowing Virus PMYLVPapaya Dropy Necrosis Virus PDNV

OTROS ORGANISMOSPapaya Bunchy Top PBTPawpaw Yellow CrinklePhytoplasma

PaYCPh

NEMTODOSNemtodo Aguja Longidorus sp.Nemtodo Nodulador MeloidogyneNemtodo de Lesiones Pratylenchus sp.

2.2.5.3 Riego


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xxvi

INSECTOSMosca de la Fruta Toxotrypana cuvicauda Gerstaker;

Anastrepha serpentina;

Ceratitis capitata

Picudo del Cocotero Rhynchosphorus palmarum

Gusano Cachudo Manduca sextaMosca Blanca Bemisia tabaciSalta hojas del papayo Empoasca papayae Oman;Empoasca

stevensi

Tortuguilla Diabrotica balteatafidos Aphis spp.; Myzus persicae

ACAROSDeformador de la hoja Calacarus brionesaeAcaro plano, rojo y blanco Brevipalpus phoenicisAraita Roja Tetranychus sp.

2.4 PLAGAS MS COMUNES EN HONDURAS

Figura 5. Mosca de la frutaFuente: Nation, 1998 UFL

Figura 7. Alternaria en FrutoFuente: Davis, M 1994Figura 6. Antracnosis en FrutoFuente: Ploetz, 1994


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Figura 8. Pudricin de la raz y tallo (Phytophota sp.)URL:http://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/crops/papaya.htm

Figura 9. Papaya Mosaic Virus (PMV)URL: : http://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/crops/papaya.htm
http://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/crops/papaya.htmhttp://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/crops/papaya.htmhttp://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/crops/papaya.htmhttp://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/crops/papaya.htmhttp://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/crops/papaya.htmhttp://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/crops/papaya.htm


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Figura 10. Papaya Ringspot Virus (PRSV) en hoja.URL: : http://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/crops/papaya.htm

Figura 11. Papaya Ringspot Virus (PRSV) en fruto.Fuente: Davis, M 1994
http://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/crops/papaya.htmhttp://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/crops/papaya.htmhttp://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/crops/papaya.htm


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Figura 12. Papaya Droopy Necrosis Virus (PDNV)URL: http://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/crops/papaya.htm

Figura 13. Enfermedad de etiologa desconocida en ZamoranoFoto: Gabriel Chiriboga
http://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/crops/papaya.htmhttp://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/crops/papaya.htmhttp://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/crops/papaya.htm


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xxx

Figura 14. Papaya Bunchy TopFoto: Cortesa de Bryan Brunner


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2.4.1 Mosca de la fruta (Toxotrypana curvicauda)

Los principales factores que limitan la produccion intensiva de la papaya en laFlorida, son las enfermedades virales y la mosca de la fruta (Toxotripana curvicauda

L.) ( Wan y Conover 1983; y Wolfengarger y Walker, 1974).

Esta mosca, conocida como la avispa de la papaya (Figura 5), pertenece al ordenDptera y familia Tephritidae (Berry, 1959). Se distribuye a lo largo de CentroAmrica y Sur Amrica donde se cultive la papaya (Aluja Schuneman, 1993).

El principal problema es la apariencia, ya que las frutas atacadassufren de enfermedades fungosas secundarias, adems de una mala maduracin y unacada precoz de los frutos. Otro problema son las larvas que crecen internamentehaciendo inservible el fruto para el consumo (Aluja Schuneman, 1993).

Una limitante para la exportacin de productos frescos a los Estados Unidos, es laprohibicin de ingresode fruta fresca proveniente de pases donde existe la mosca dela fruta (Duarte, 1999)6.

El adulto es una mosca grande (aprox. 25 mm) colorcastao rojizo. A veces tiene bandas grises y amarillas sobre el trax. Las alas songrandes de forma angular y con el pice redondeado (Aluja Schuneman, 1993). Elovipositor es tan largo como el cuerpo del insecto que es introducido en el frutodonde se depositan los huevos en masas de 10 o ms (Berry, 1959). Los huevoseclosionan a los 14 das y las larvas, apodas y de color amarillento, empiezan a crecery a comer generalmente las semillas y el forro interno de la cavidad de la fruta (ICA,1987).

Los frutos infestados parecen madurar antes de tiempo y las larvas continancomiendo en la cavidad central, hasta que la pulpa se ablanda. Alcanzan su completodesarrollo al cabo de 15 a 20 das; luego abandonan el fruto y penetran en el suelo

para empupar (Selman, 1998). Pasan otro periodo de 15 a 20 das en estado de ninfashasta salir el adulto, el ciclo entero de vida es de 45 a 60 das (Aluja Schuneman,1993).

Las hembras no vuelan muy lejos y su dispersin natural es muy poca. El vehculo

principal de dispersin es el transporte de frutos infestados (Berry, 1959).La ovoposicin es una operacin peligrosa para esta

mosca. Si el ovipositor queda insertado por mucho tiempo en el fruto, el jugo lechosoque exuda la papaya herida coagula prontamente y la atrapa (Berry, 1959). Por esto elmejor manejo es la seleccin de variedades carnosas de papaya para produccin, demodo que las hembras no puedan insertar su ovipositor en la cavidad central del fruto.Adems, se debe recoger los frutos infestados que caen al suelo y destruirlos, estoayudara a reducir la poblacin de moscas (ICA, 1987).

6Duarte, O. 1999. El cultivo de la papaya en el Zamorano. EL Zamorano, Honduras. ComunicacinPersonal.

2.4.1.1 Dao

2.4.1.2 Biologa y Ecologa

2.4.1.3 Manejo y Control


32/66

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En el campo del control biolgico han habido programas de introduccin deparasitoides de las familias Eulophidae, Braconidae y Pteromailidae, de los siguientesgeneros:Dirhinus, Tetrastichus, Aceratoneuromyia, Bracanastrepha, Doryctobracontoxotrypanae Marsh (Hymenoptera: Braconidae) (Selman, 1998).

Los insecticidas sintticos tambin son utilizados para el control de la mosca de lafruta, siendo el Malathin el ms utilizado. Se pueden realizar las siguientesaplicaciones: (Cuadro 3).

Cuadro 3. Diferentes alternativas de aplicacin para el control qumico de la mosca de lafruta.

Tipo de Aplicacin ProductoMezcla(Litros)

Terrestre Malathin 57% CEProtena HidrolizadaAgua

Emulsificante

0.519

Segn el productoTerrestre Malathin 50% CE

Vinagre Natural de PiaMelazaProtena hidrolizadaAguaEmulsificante

0.5110.259Segn el producto

Area Malathin 95% ULVProtena Hidrolizada

14

Fuente: Aluja Schuneman, 1993

2.4.2 Anthracnosis (Colletotri chum gloeosporioides)

La anthracnosis es una de las enfermedades poscosecha ms importante en la regintropical y subtropical en el cultivo de la papaya y otros frutales (Figura 6) (Agrios,1997; Dickman, 1994; Arriola, et al., 1976).

Esta enfermedad se presenta principalmente en el fruto.Inicia con manchas pequeas y redondas, tornndose acuosas y de color oscurocuando est en estado avanzado. El dao aumenta directamente proporcional al gradode madurez. Adems de provocar dao superficial, la lesin tambin penetra en el

fruto. El hongo tambin ataca los pecolos de las hojas inferiores (Fundacin deDesarrollo Agropecuario, 1992).

Las lesiones comienzan con un tamao de 5 cm de dimetro, la masa conidial, que esde color rosado anaranjado, cubre el centro de la lesin y alrededor se forman arosconcntricos (Dickman, 1994).

El agente causal de esta enfermedad es Colletotrichumgloeosporioides en su estado conidial (CastaoZapata y Del Ro, 1994; Agrios,1997). Este patgeno tiene un amplio rango de hospederos, entre ellos el mango, elaguacate y otros frutales tropicales (Ploetz, 1994).

2.4.2.1 Sntomas y Daos

2.4.2.2 Agente Causal


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xxxiii

La anthracnosis inicialmente se establece en el campo,infectando a frutas inmaduras. Despus de la penetracin en la fruta, el crecimientodel hongo es suprimido hasta que la fruta madura (Dickman y Alvarez 1983).

Se desconoce el factor que hace que el hongo entre en dormancia en la fruta verde,

aunque hay evidencias de la presencia de compuestos fungistticos tales como taninosy fenlicos, que son encontrados en altas cantidades en frutas inmaduras (Dickman yAlvarez, 1983).

Segn Couey, et al.(1984), tanto el mtodo de aspersinde agua caliente como la inmersin son efectivos para controlar esta enfermedad enun tiempo de 15 das. Esto se debe complementar con el uso de un fungicida

protectante como el Tiabendazole (Fundacin de Desarrollo Agropecuario, 1992).

2.4.3 Alternaria (Al ternaria alternata)

Es la enfermedad con mayor incidencia en lotes de papaya en zonas secas. El hongocausal se report por primera vez en la India. Hoy en da est distribuido por todo elmundo (Figura 7) (Nishijima, 1994).

Los sntomas caractersticos son pequeas lesionescirculares a ovaladas de color negro, como resultado de la esporulacin del patgeno.Las lesiones se limitan a la superficie de la fruta y no causan dao significativo en la

pulpa. Las lesiones dispersas en distintos sitios de la fruta pueden unirse y extendersehasta cubrir la superficie total de la fruta (Nishijima, 1994).

El agente causal es Alternaria alternata (Fr.:Fr) Keissl., dela clase Deuteromycetes, orden Moniliales, familia Dematiaceae (Castao-Zapata yDel Ro, 1994; Nishijima, 1994).

Comnmente coloniza material de plantas muertas oprximas a morir. Sus conidioforos son de color caf y de tamao mayor a 50 x 3-6m. Las conidias, que pueden ser diseminadas por el viento, agua e insectos, son decolor caf y se forman en largas cadenas (Agrios, 1997).

Generalmente ataca tejidos de plantas viejas, especficamente los pecolossenescentes, produciendo una cantidad considerable de conidias sobre la superficie de

la fruta. Necesita periodos de 3 a 4 das adems de la presencia de alta humedadrelativa y temperaturas moderadas para iniciar la infeccin.(CastaoZapata y DelRo, 1994; Nishijima,1994).

La enfermedad raramente se desarrolla en frutas cosechadas inmaduras, aunque lasfrutas que son almacenadas en cuartos fros a 10 C, por ms de 14 das, podranexperimentar una alta incidencia de daos (>80%) (Nishijima, 1994).

Se recomienda una rotacin de cultivos y prcticas deposcosecha adecuadas. La aplicacin de fungicidas no es econmicamenterecomendada en algunos casos (CastaoZapata y Del Ro, 1994). Para un control

qumico se puede utilizar chlorotalonil o mancozeb asperjado, dependiendo de lainfeccin, hasta dos veces por semana. Se debe tener en cuenta que el uso de control

2.4.2.3 Epidemiologa

2.4.2.4 Mane o Control






34/66

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qumico como nica alternativa no es muy recomendable (Nishijima 1994), por lo quese debe hacer un tratamiento poscosecha que consiste en sumergir el fruto en aguacaliente a 49C durante 20 min, seguido de un desaguado a temperatura ambiente(Arriola, et al., 1976).

2.4.4 Pudricin de las races y tronco (Phytophtora parasit ica)

Han habido grandes prdidas causadas porPhytophtora sp., principalmente en pocalluviosa o en suelos anegados por mal drenaje (Figura 8) (Ko, 1994).

Este hongo no solo ataca a plantas durante el cultivo, sino desde el semillero, causando la pudricin del tronco de la planta (Pereira deAraujo, 1987).

Las plantas afectadas presentan en un inicio una pudricin seca de color marrnoscuro en el pice de las races jvenes. Al avanzar el dao hay muerte de races

secundarias y empieza una pudricin ascendente en el pivote central hasta el cuello.Cuando la enfermedad est ms avanzada, se destruye la mdula y todo el tejido

parenquimtico externo, quedando expuesto solamente el tejido fibroso, Al cubrir laenfermedad la base del tronco, la planta se dobla y se cae (Barahona y Sancho,s.f.).

El agente causal de esta enfermedad es Phytophotoraparasitica Dastur, es un hongo de la clase Oomycetes, orden Peronosporales. Estepatgeno sobrevive en el suelo, lesiones del tallo y otros hospederos (Barahona ySancho,s.f.)

Esta enfermedad se presenta mundialmente, en regionesque mantienen, temperaturas entre 15 y 32 oC, suelos mal drenados y humedadrelativa alta (> 80%) (Agrios, 1997).

Segn Pereira de Araujo (1987), se puede prevenir enun 80% tomndose las siguientes medidas: suspender el riego en el rea, encalar ellote antes de la siembra, drenar el exceso del agua encharcada y arrancar los rbolesenfermos. Ibar (1979) comenta que ningn tratamiento posibilita la eliminacincompleta del hongo del suelo. Sin embargo, la infeccin puede reducirse y hacersems lenta la dispersin evitando la humedad del suelo en lo posible por medio dedrenajes y buenos mtodos de riego.

2.4.5 Papaya Mosaic Virus (PMV)

La incidencia de cepas fuertes de PMV y su difcil control han limitado la produccincomercial de papaya en pases como la India, Puerto Rico, Brasil, Venezuela, yEstados Unidos (Florida y Hawaii) (Purcifull y Hiebert, 1971).

Esta enfermedad se report en Estados Unidos en1962 y en Venezuela en 1970 (Purcifull y Hiebert, 1971). Ahora se conoce que esten la mayora de las regiones productoras de papaya (Brunt, et al. 1996; ).

Este virus pertenece al gnero Potexvirus,y es conocido comoPapaya Mosaic Virus y su siglas son PapMV (Papaya Mosaic Viruses). Los



2.4.4.3 E idemiolo a


2.4.5.1 Distribucin geogrfica

2.4.5.2 Taxonoma


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xxxv

sinnimos ms utilizados son: babaco yellow mosaic virus (BYMV), boussingaultiamosaic virus (BMV) y papaw mild mosaic virus (PMMV) (Purcifull y Hiebert, 1971).

La partcula viral es larga, filamentosa ycontiene ARN. No posee una envoltura cpsida y es flexible. Su dimensin es de

aproximadamente 530 nm de largo y el tamao del genoma total, que es unipartito, esde 6.656 kb (Breman, 1997; Brunt, et al., 1996; Purcifull y Hiebert, 1971).

Los viriones se encuentran en toda la planta hospedera y se presentan inclusiones enforma de bandas en clulas infectadas (Purcifull y Hiebert, 1971).

Segn Purcifull y Hiebert, (1971) esta enfermedad ha sidoencontrada solo en papaya, pero en estudios recientes, Breman (1997) encontr, que

Portulaca sp., maleza importante a nivel mundial, es hospedera de esta enfermedad.

No se conocen insectos vectores, transmisin por semilla ni por polen, pero es fcil

transmitir el virus mecnicamente (Purcifull y Hiebert, 1971; Brunt, et al., 1996;Breman, 1997)

Los sntomas caractersticos son: mal desarrollo de laplanta, mrgenes foliares irregulares y moteado moderado en la hoja fcilmentevisible en las hojas jvenes (Figura 9). No ocurre ningn sntoma en los pecolos,tallos o frutos. Este virus no tiene un efecto muy marcado en el tamao del fruto(Breman, 1997; Conover, 1964 ).

Para hacer un buen diagnstico se debe conocer el historial delcultivo, observar los sntomas caractersticos en el campo, recolectar las muestras,

procesarlas y almacenarlas a 4oC hasta utilizarlas (Palmieri, 1999)7.

Se puede utilizar microscopa electrnica para observar las partculas virales oalternativamente, un microscopio de luz para observar cuerpos de inclusin. Tambinse utilizan anlisis serolgicos como "kits" de ELISA ("Enzyme-linkedimmunosorbent assay") comerciales (Breman, 1997)

Se deben tener en cuenta prcticas culturales,limpieza de instrumentos de cosecha (en el caso que se utilicen) y eliminacin demalezas (Brunt, et al., 1996).

2.4.6 Papaya Ringspot Virus (PRSV)

En Florida, Estados Unidos, los principales factores que limitan la produccinintensiva son las enfermedades virales y la mosca de la fruta (Toxotripana curvicaudaL.) (Wan y Conover 1983 y Wolfengarger y Walker, 1974).

La sanidad del cultivo es el principal problema, siendo la mayor limitante o el fracasopara muchos productores de papaya alrededor del mundo. Como ejemplo se puedecitar lo dicho por la Universidad de Puerto Rico (1987): "La produccin de papaya en

7Palmieri, M. 1999. Capacitacin en uso de tcnicas de diagnstico para enfermedades de la papaya.U. del Valle, Guatemala. Comunicacin Personal.

2.4.5.3 Morfologa y citopatologa


2.4.5.5 Sintomatologa

2.4.5.6 Dia nstico

2.4.5.7 Manejo de la enfermedad


36/66

xxxvi

Puerto Rico es insuficiente para cubrir la demanda local; datos del departamento deestadstica refieren a importaciones realizadas de Repblica Dominicana para cubrir ladel mercado. Siendo el problema principal en la produccin el control inadecuado delas enfermedades".

Honduras tampoco ha sido una excepcin, ya que segn Zuniga (2000)8

, en el Vallede Comayagua hubo un programa de incentivo para iniciar la exportacin de papaya,y el resultado fue una infestacin casi total de los lotes por virus, perdindose toda la

produccin que bast para que no se volviera a sembrar en el valle de Comayagua,papaya destinada a la exportacin.

Esta enfermedad es una de las ms destructivas en casi todos las regiones que sesiembra papaya, con excepcin de Africa. Es particularmente severa en reas deTailandia, Taiwan, Filipinas y la parte sur de China. (Gonsalves, 1994)

Segn Galinsky y Laws (1998), en Asia, la produccin se vio reducida en 5,400 TM

desde 1989. Esto se debi en gran parte a la enfermedad causada por el PapayaRingspot Virus.

Se sabe que ocurre en la mayora de las reasdonde se siembra papaya y cucrbitas. La cepa "p" incluye a Estados Unidos, SurAmrica, pases caribeos, India, China, Medio Oriente Taiwan, Africa y Okinawa.La cepa "w", se encuentra en los mismos pases, y en Francia, Alemania y Australia(CMI/AAB, 1984; Brunt, et al., 1996).

Este virus pertenece de la familia Potiviridae, del gneroPotyvirus, su nombre es Papaya Ringspot Virus, en espaol Virus Anular de laPapayay las siglas ms utilizadas son PRSV (siglas en ingles) (CMI/AAB, 1984).

Se han encontrado dos tipos de Papaya Ringspot Virus (PRSV): PRSV-p (Cepa p) yPRSV-w (Cepa w). El PRV-p puede infectar a Caricaceas y Cucrbitaceas; mientrasque el PRV-w solo infecta cucrbitaceas (Gonsalves, 1994). A la cepa aislada PRV-wtambin se lo conoce como watermelon mosaic virus 1 (CMI/AAB, 1984).

Existen sinnimos del mismo nombre como son: papaya distortion mosaic virus,papaya leaf distortion virus, papaw distortion ringspot virus, papaw mosaic virus,

watermelon mosaic virus 1 (Brunt, et al., 1996), papaya distortion ringspot virus ypapaya mosaic virus. El ltimo nombre aparece en la literatura vieja y no debe serconfundido con la enfermedad causada por el Papaya Mosaic Virus (PMV), que es un

potexvirus(Gonsalves, 1994).

Es una partcula larga filamentosa y flexiblecuya longitud promedio es de 800nm con un dimetro de 12nm (Castao-Zapata yDel Ro, 1994.). Los viriones se encuentran en todas partes en planta; en el citoplasmay en vacuolas de la clula (Brunt, et al., 1996). El virus induce inclusiones celulares

8

Zuniga, A. 2000. Problemtica de la papaya en la zona de Comayagua, Departamento de Sanidadvegetal del ministerio de Recursos Naturales, Tegucigalpa Honduras


2.4.6.2 Taxonoma



37/66

xxxvii

cilndricas e inclusiones amorfas en el citoplasma de la clula hospedera. Lasinclusiones no contienen viriones (CMI/AAB, 1984; Brunt, et al., 1996).

El genoma consiste de ARN, unipartito. El tamao total es de 12 kb y su replicacinno depende de otro virus (Brunt, et al., 1996).

Segn Brunt, et al. (1996), el rango de hospederos se limitaa tres familias: Caricaceae, Cucurbitaceae y Chenopodiaceae. Esto coincide coninvestigaciones realizadas por Yeh, et al. (1984), que diagnosticaron muestrasobtenidas de Taiwan, Hawaii, Florida y Ecuador, aislando 9 cepas diferentes de PRSV

provenientes de estas tres familias.

Se puede transmitir por medios mecnicos, por insectos vectores de manera nopersistente (CMI/AAB, 1984), por injerto (Castao-Zapata y Del Ro, 1994.) yestudios recientes hechos en Venezuela, han demostrado que ciertas especies de

pjaros son transmisores de la enfermedad (Trujillo Pinto, et al. 1989). No se ha

reportado transmisin por semilla (Gonsalves, 1994).

Este virus es rpidamente diseminado por una gran cantidad de especies de fidos, enforma no persistente (Gonsalves, 1994). Entre los ms importantes estn: Aphis

spiraecola, A. gossypii, A. craccivora, A. ruimicis yMyzus persicae.Se conoce que elperiodo de adquisicin del virus por el fidoMyzus persicae es de 10 seg. siendo elperiodo de incubacin igual (Castao-Zapata y Del Rio, 1994)

Eusebio, et al. (1994), encontraron por medio de uso de mtodos inmunolgicos(ELISA), que el virus se puede encontrar distribuido tanto en hojas, pecolos, tronco yen las races.

Gonsalves (1994) encontr que la cantidad de infeccin primaria aumenta en formainversa con la distancia entre plantas, a menor distancia de plantas o de lotesinfectados mayor y ms rpido va a ser la infeccin al resto del lote.

Los sntomas van a variar en intensidad dependiendo deltipo de cepa que cause la infeccin, temperatura del ambiente, vigor y desarrollofisiolgico de las plantas (Gonsalves, 1994; CMI/AAB, 1984). El PRSV tipo P, en

plantas infectadas exhibe inicialmente clorosis en las hojas ms jvenes enaproximadamente 2 a 3 semanas (CMI/AAB, 1984), aclaramiento de venas, rugosidad

y moteado en la lamina foliar (Figura 10) (Castao-Zapata y Del Rio, 1994).En estado avanzado de la enfermedad hay deformacin y reduccin en la laminafoliar, la cual se puede tornar extremadamente filiforme. Adems, sobre los peciolos yel tallo se desarrollan unas rayas de color verde oscuro de aspecto aceitoso.Eventualmente las rayas pueden abarcar todo el tronco (Castao-Zapata y Del Rio,1994).

Sobre los frutos se pueden formar anillos de color verde o caf oscuro (Figura 11)(Castao-Zapata y Del Ro, 1994). El nmero de anillos en la fruta va a variardependiendo de la madurez de la misma y se distingue menos cuando la fruta es ms

madura. Las frutas producidas por arboles ya infectados presentan abultamientosdesuniformes en toda la fruta (Gonsalves, 1994).


2.4.6.5 Sintomatolo a


38/66

xxxviii

El rendimiento del cultivo y los grados brix de la fruta en plantas infectadas sonmarcadamente menores que en plantas sanas. Los frutos y hojas presentan sntomasms severos en poca de invierno o en temperaturas bajas. Las plantas infectadas enlas primeras etapas no suelen morir pero no producen frutos. En Taiwn hay cepas

que matan a plantas pequeas infectadas (Gonsalves, 1994).

Para hacer un buen diagnstico se debe conocer el historial delcultivo, observar los sntomas caractersticos en el campo, recolectar las muestras,

procesarlas y almacenarlas a 4oC hasta utilizarlas (Palmieri, 1999)9.

La partcula viral es un buen inmungeno, y se puede utilizar el Liquidimmunoprecipitin test con extracto de planta clarificado o con particulas virales

purificadas. Tambin es comn el uso de mtodos inmunolgicos como el Ensayo deinmunoabsorbencia ligado a una enzima (Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA) para su diagnstico (CMI/AAB, 1984).

Los esfuerzos para el control del PRSV hanincluido: el control qumico del vector, el uso de aceite blanco para limpiar el estiletede insectos chupadores y disminuir su capacidad de transmisin(Trujillo Pinto, et al.1989), la erradicacin de plantas infectadas, aislamiento de plantaciones a zonas queestn libres de la enfermedad (Castao-Zapata y Del Ro, 1994), el uso de variedadestolerantes, prcticas culturales como deshierba de malezas y plantas hospederas,

proteccin cruzada (Gonsalves, 1994; Vegas et al. 1999) y transformacin gentica(Fitch et al. 1992).

Segn Gonsalves (1994), individualmente ningn mtodo es eficaz y es necesaria lacombinacin varios para tener mejores resultados.

2.4.7 Papaya Droopy Necrosis Virus (PDNV)

En Venezuela el factor limitante en la produccin de papaya es el PRSV. Sinembargo, en la regin costera del Estado de Zulia en Venezuela la incidencia de laenfermedad es baja. Se ha sugerido que esto puede deberse a los vientos constantesque interfieren con la transmisin del virus por los fidos. Este fenmeno la convirtien una zona de gran potencial para la produccin de papaya, pero al poco tiempo unaenfermedad, cuyo agente causal es un rhabdovirus, llamada "Papaya Droopy Necrosis

Virus", (PDNV por sus siglas en Ingls), acab con la produccin de papayascomerciales en toda la zona (Lastra y Quintero, 1981).

Esta enfermedad fue detectada por primera vez enVenezuela en el estado de Zulia en el ao de 1979 y se distribuy rpidamenteeliminando la produccin de papaya en las regiones cercanas a Zulia (Lastra yQuintero, 1981)

9Palmieri, M. 1999. Capacitacin en uso de tcnicas de diagnstico para enfermedades de la papaya.U. del Valle, Guatemala. Comunicacin Personal

2.4.6.6 Dia nstico




39/66

xxxix

Ms tarde fue diagnosticada por Wan y Conover (1981) en el condado de Dade,Florida, en el ao de 1981, pero segn Zettler y Wan (1994) los sntomas ya se habanobservado en 1947.

El agente causal es un Rhabdovirus y su nombre es Papaya

Apical Necrosis Virus, sus siglas son PANV (Zettler y Wan, 1994).

La partcula viral mide 87-98 x 180-254 nm,tiene una forma parecida a una bala, se las puede encontrar en forma agregada en elncleo de las clulas parenquimales de los tejidos vasculares en el floema.Ocasionalmente se puede hallar en el citoplasma de la clula (Zettler y Wan, 1994;Lastra y Quintero, 1981).

No se sabe si es transmisible mecnicamente (Zettler yWan, 1994), pero Lastra y Quintero (1981) encontraron por medio de bioensayos, que

Empoasca papayae es vector del rhabdovirus.

Segn Zettler y Wan (1994), esta enfermedad es especfica para papaya, no se hareportado que tenga otros hospederos.

Los sntomas iniciales son: amarillamiento general de lashojas, seguido por un declinamiento de las hojas ms jvenes, la parte apical sevuelve necrtica, y posteriormente las hojas se mueren (Figura 12) (Lastra y Quintero,1981). Tambin se observa la cada de las hojas bajeras, y en la parte apical las hojastoman una forma convexa, adems hay aborto de flores, consecuentemente no hay

produccin de frutos (Zettler y Wan, 1994).

Los sntomas de la enfermedad son mucho ms severos durante la poca de fro queen la poca de calor. El ltex fluye libremente en comparacin con plantas infectadascon Papaya Bunchy Top (Zettler y Wan, 1994).

Para el diagnstico se puede utilizar la tcnica de cuerpos deinclusin y tambin microscopa electrnica (Wan y Conover, 1981; Lastra yQuintero, 1981).

La nica forma de manejar esta enfermedadhasta el momento es eliminar plantas enfermas del campo (Zettler y Wan, 1994).

2.4.8 Enfermedad de etiologa desconocida en Honduras

Esta enfermedad ha llegado a ser el factor limitante en la produccin de papayas enZamorano (Duarte, 1999),10siempre se ha pensado que es Papaya Bunchy Top, peronunca se ha realizado ningn tipo de diagnstico de la enfermedad. Este estudioconstituye el primer reporte de la enfermedad.

10Duarte, O. 1999. El cultivo de la papaya en el Zamorano. EL Zamorano, Honduras. ComunicacinPersonal.

2.4.7.2 Taxonoma




2.4.7.6 Diagnstico



40/66

xl

No se conoce su distribucin geogrfica pero se haobservado en el valle de Zamorano y Comayagua, se desconoce su agente causal,existencia de vectores y otros hospederos.

Se sabe que es agresiva y es de fcil propagacin ya que en 2 o 3 meses todo el lote seinfecta.

Los sntomas visibles son (Figura 13):

Estancamiento del crecimiento Acortamiento de los entrenudos, pecolos y hojas nuevas El tallo se debilita adquiriendo la apariencia de una "punta de lpiz" Defoliacin desde la parte basal hacia la apical (puede llegar a ser total) Mala maduracin de las frutas

Debilitamiento y ataque de otras enfermedades Termina con la muerte de la planta

2.4.9 Papaya Bunchy Top (PBT)

Esta enfermedad es uno de los factores que limitan la produccin de papaya,principalmente en el Trpico Americano (Davis, 1993), ya que constituye unaenfermedad de gran importancia econmica. (Davis, et al. 1997).

La enfermedad del Papaya Bunchy Top o cogolloarrepollado en espaol, fue reportada por primera vez en Puerto Rico en 1931 y ahora

est distribuida en la regin del Caribe, Centro Amrica y parte de Sur Amrica.(Davis, et al. 1994)

Story y Halliwell (1969), asociaban esta enfermedad con unfitoplasma. Estudios recientes en la Universidad de Florida demostraron que el agentecausal es una bacteria "fastidiosa" del gneroRickettsia. Segn Davis, et al. (1997), lo

publicado acerca de cuerpos fitoplasmticos observados mediante microscopaelectrnica por Story y Halliwell (1969), pudo ser una mala interpretacin demitocndrias degeneradas.

Davis, et al. (1997), encontraron que el anlisis poligentico basado en el uso de la

secuencia del gen 16S rRNA demuestra que el organismo aislado de plantas consntomas de Papaya Bunchy Top tiene una similitud casi del 99% al genero derickettsias, dando como respuesta que puede ser una reciente evolucin del generorickettsia.

LaRickettsia, un tipo de bacteria "fastidiosa" gram-negativa, ,tiene una forma de bacilo, mide aproximadamente 0.25 a 0.35 m de ancho y 0.8 a1.6 m de largo. Tiene una pared celular muy delgada entre un rango de 25 a 50nm.Se presume que tiene ADN y ribosomas. Est asociada con la enfermedad del PapayaBunchy Top. (Davis, et al. 1995)

La Rickettsia es muy difcil de cultivar en medio sintticos, losmtodos que se podran usar para su cultivo son muy similares a los que se usan para

2.4.8.1 Generalidades


2.4.9.2 Taxonoma

2.4.9.3 Morfolo a

2.4.9.4 Biologa


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xli

los virus ya que son intracelulares obligados y generalmente estn asociados conalgn insecto como vector. (Adrian, et al. 1998)

En la papaya, el patgeno se localiza en los tejidos vasculares especficamente en loslaticferos (rganos celulares destinados a la produccin de ltex), deformndolos,

colapsndolos y finalmente destruyndoles (Davis, et al. 1997).

Los sntomas encontrados por Brunner (2000) (Anexo 1),en plantas infectadas con Papaya Bunchy Top, principalmente son (Figura 14):

Al hacer una herida en tejido infectado no fluye ltex (hoja, tallos, frutas) Desarrollo de brotes sanos laterales en el tallo. La copa toma una forma de sombrilla por el acortamiento de tamao de los

entrenudos y pecolos. Las hojas nuevas se reducen en tamao. Las hojas nuevas y viejas adquieren una textura firme (no son flexibles como una

hoja sana) toman una forma convexa y presentan una clorosis desuniforme entoda la hoja.

Las frutas se quedan pequeas y no maduran bien.

Para el diagnstico se utilizan tcnicas moleculares como lareaccin en cadena de la polimerasa (Polymerase Chain Reaction, PCR), con los

primers PBTF1 y PBTR1. Se deben recolectar pecolos de las hojas jvenes yguardarlos en una solucin de 5 % de Borato de Sodio (Na2B4O7

.10H2O) a 4C, hasta

cuando sean utilizados. (Davis, et al. 1997).

Se han detectado dos especies de saltahojas como vectores,Empoasca papayae Oman, y Empoasca stevensi Young. Este reporte constituye laprimera evidencia de que estos saltahojas, transmitan una bacteria inhibitoria del ltex(Davis, et al. 1997).

El mejor control es la prevencin, mediante laeliminacin de las plantas enfermas (Guzmn Daz, 1998). Otra alternativa segn laUniversidad de Puerto Rico (1987), es pinchar el tallo desde arriba hacia abajo con uninstrumento punzante hasta llegar a un punto donde brote ltex. La emisin de ltexindica que la rickettssiano ha invadido los tejidos y que por consiguiente los rebrotesestarn libres de la enfermedad, se debe podar la parte afectada dejando que la planta

tenga nuevos rebrotes.

Guzmn Daz (1998), encontr que algunos agricultores de la zona atlntica en CostaRica, utilizan abamectina (Vertimec) para controlar al vector. Esto ha bajado enalgo la incidencia pero no significativamente, adems que la abamectina no estaregistrada para usar en papaya. En Cuba, Jimenez y Delgado (s.f.),encontraron que eluso de qumicos para controlar los vectores del Papaya Bunchy Top, no es efectivo

para evitar la transmisin en las condiciones de su experimento.

Esta enfermedad se puede confundir con una deficiencia de Boro, pudiendo ocurrirpor dos razones: la primera ocurre antes de floracin, ya que las plantas tienen un

rpido crecimiento y los requerimientos de calcio y boro son altos, si hay carencia deestos se provoca una deficiencia. Los sntomas principales son la formacin de tejido


2.4.9.6 Diagnstico

2.4.9.7 Vector



42/66

xlii

corchoso en el pice de la planta y la disminucin de la exudacin de ltex estoocasiona el arrepollamiento de las hojas jvenes. La segunda forma se da cuando la

planta es adulta y se encuentra en produccin, la misma falta de boro y calcioprovocan una senescencia prematura en hojas intermedias, las cuales se tornanamarillas y cuelgan dejando heridas en la insercin del pecolo (Guzmn Daz 1998).

Para controlar esta deficiencia se puede utilizar hasta 0.5 kg/ha/ao de boroasperjados quincenal o mensualmente antes de iniciarse la floracin; esto puede evitarque se manifieste la enfermedad (Guzmn Daz 1998)

2.5 ASPECTOS DE DIAGNSTICO

El diagnstico de enfermedades en plantas, causadas por virus y otros patgenoscomo los fitoplasmas y rickettsisas, histricamente ha sido dificultoso, ya que estosorganismos no se pueden cultivar en el laboratorio ni se pueden ver directamente conun microscopio de luz (Hansen y Wick, 1993).

La necesidad de utilizar mtodos prcticos para el diagnstico de virus y otrosorganismos, impuls el desarrollo de alternativas de tcnicas sensibles a virussimilares a las usadas en bacterias y hongos. Algunas de estas tcnicas como ELISA("Enzyme-linked immunosorbent assay"), PCR y electroforesis ahora se utilizanrutinariamente en la deteccin de los virus y otros organismos, considerndolasconvencionales (Hansen y Wick, 1993).


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3 MATERIALES Y METODOS

3.1 CONTEXTO GENERAL

Para la investigacin y desarrollo de este tema, se cont con la ayuda de personas conexperiencia en temas econmicos, agrcolas y de mercado, mediante entrevistas

personales. Tambin se utilizaron herramientas como la Internet, biblioteca y otrasfuentes para recopilar y procesar la informacin.

3.2 EVALUACIN DE CAMPO

El presente estudio se realiz en un periodo de un ao, de abril de 1999 a abril del2000. Se realizaron visitas a distintos productores para obtener informacin yrecolectar muestras de plantas enfermas. Adems se realiz una encuesta con elobjetivo de hacer un diagnstico rural rpido participativo.

Se trabaj en las zonas del centro y norte del pas, en los departamentos de: Corts,Francisco Morazn, Comayagua y La Paz, en las localidades de Cofrada, Zamorano,Flores, Villas San Antonio, Sifn, Los Castaos, Playitas y Camino Viejorespectivamente. Estas zonas se escogieron por ser las ms representativas enHonduras en la siembra de papaya (Figura 15).

Figura 15.Mapas demarcados donde fueron tomadas las muestras (circulo amarillo). Fuente:URL: http://www.hondudata.com

3.2.1 Reconocimiento de la zona y las plantaciones

El reconocimiento dur tres meses y consisti en buscar en cada localidad productoreso lotes de papaya. Se trabaj con el apoyo de intermediarios, vendedores, productores

y tcnicos que conocan las distintas zonas.


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3.2.2 Identificacin de sntomas caractersticos en campos de produccin yrecoleccin de muestras

Una vez detectados los lotes de papaya se procedi a inspeccionarlos. Luego selocalizaron plantas con sntomas caractersticos del Papaya Ringspot Virus, Papaya

Mosaic Virus y del Papaya Bunchy Top (descritos anteriormente en la revisin deliteratura); se recolectaron muestras de tejidos sanos y jvenes de las plantassintomticas.

Para la recoleccin se utilizaron bolsas de dos tamaos, pequeas (10cm x 12cm) ygrandes (15cm x 25cm), para pecolos y hojas, respectivamente. Tambin se utilizaronmarcadores y cinta adhesiva para identificarlas y se guardaron en hieleras con hieloartificial para conservar las muestras hasta llegar al laboratorio.

3.3 DIAGNSTICO RURAL RAPIDO PARTICIPATIVO

3.3.1 Elaboracin de la encuesta

Para iniciar y obtener informacin preliminar se utiliz la metodologa de unaencuesta exploratoria. Se inici con 5 productores en las localidades de Flores y Villasde San Antonio en el departamento de Comayagua, se eligieron estas localidades porsu cercana y por ser un sitio representativo, ya que segn el censo nacional,Comayagua es el departamento donde se cultiva mayor cantidad de huertos de

papaya.

Una vez concluida la encuesta exploratoria, donde se hicieron preguntas abiertas ygenerales, se procedi a elaborar los formularios de la encuesta.

La poblacin de la encuesta fueron todos los productores de papaya que estnlocalizados en los departamentos de Comayagua y La Paz. No se trabajo con unamuestra, si no ms bien se cubri todo la poblacin de productores.

La encuesta se dividi en 6 partes, factores socioeconmicos, percepcin al cultivo depapaya, econmico, tcnico, fitosanitario y poscosecha. Adems, se hicieron dosvalidaciones, una con los productores y la otra con la ayuda de dos tcnicos con granexperiencia (Anexo 2).

3.3.2 Contacto con los agricultores y realizacin del Diagnstico Rural RpidoParticipativo.

Mientras se haca la inspeccin en los lotes se llenaba la encuesta mediante unaentrevista con los productores. La encuesta consisti en 45 preguntas cerradas, aunquese inclin hacia una encuesta abierta, es decir, se tom en cuenta adems de lasrespuestas, el dilogo con los productores. Esto ayud a realizar un diagnstico ruralrpido participativo con excelentes resultados.

Fueron en total quince productores encuestados, ubicados en los departamentos de LaPaz y Comayagua. No se encuest a los productores de los otros departamentos por

cuestin de logstica, ya que estaban muy distantes unos de otros.


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3.4 ANALISIS DE LAS MUESTRAS EN LABORATORIO

El anlisis se realiz en el laboratorio de diagnstico molecular del Zamorano. Seutilizaron tcnicas de anlisis de ADN, mediante PCR y pruebas serolgicas con"kits" comerciales de ELISA ("Enzyme-linked immunosorbent assay").

Para la identificacin de las muestras se tomaron los siguientes datos: (Cuadro 4)

Cuadro 4. Formato para la informacin de muestras recolectadas y explicacin del cdigo

FechaCdigo deMuestra

Productor LocalidadEdad delCultivo(Meses)

Sintomatologa

24/02/00 PBTFlCo LuisFloresComayagua

9Hojas nuevas deformes(convexas), clorticas

24/02/00 PBTLCCo DonaldoLos CastaosComayagua

10 Clorosis en Hojas Nuevas

21/02/00 PBTLCCoSegundoLote

Los CastaosComayagua

12Defoliacin completa.Frutos normales. Hojaspequeas y deformes

14/02/00 PBTZ Zamorano Zamorano 6Achaparramiento,clorosis en las hojas,acortamiento de pecolos

3.4.1 Conservacin de muestras

Para los dos mtodos utilizados de PCR y ELISA se utiliz el mismo procedimientode preparacin y conservacin de las muestras. Cada muestra foliar se cort en tiras

guardndose en papel toalla delicado (Kimwipes), se envolvieron y se sellaron concinta adhesiva. Cada muestra se identific con marcadores de tinta indeleble y secoloc en bolsas plsticas tipo Zip Lock que contenan slica gel y se guardaron a4oC en la refrigeradora, para mantener una baja temperatura y humedad, evitando asla proliferacin de hongos y bacterias para disminuir la perdida de muestras por

pudriciones y deterioro.

Con los pecolos se sigui el mismo procedimiento, con la excepcin que no secortaron, mas bien se dejaron intactos.

3.4.2 Diagnstico de Papaya Ringspot Virus (PRSV) y Papaya Mosaic Virus(PMV) utilizando el mtodo ELISA ("Enzyme-linked immunosorbent assay").

Las 55 muestras con sntomas caractersticos fueron recolectadas en losdepartamentos de Corts, La Paz, Comayagua y Francisco Morazn.

Para el diagnstico de las muestras de estas dos enfermedades se utilizaron "kits" deELISA indirecto de la casa comercial Agdia (Anexo 3), y se sigui el protocolostandard. Para la visualizacin de los microplatos se utiliz un lector electrnico, de lamarca Bio-Tek instruments EL 311, con un filtro de 405 nm.


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Como complemento, se enviaron 7 muestras, previamente diagnosticadas en ellaboratorio de la Carrera de Ciencia y Produccin Agropecuaria del Zamorano, al

profesor Denis Gonsalves de la Universidad de Cornell.

3.4.3 Diagnstico molecular de Papaya Bunchy Top (PBT) utilizando PCR

Las 45 muestras que se recolectaron de plantas identificadas con sntomascaractersticos de la enfermedad, fueron de los departamentos de: Comayagua, La Pazy Francisco Morazn.

Por tratarse de una enfermedad recientemente estudiada, los mtodos de extraccin noestn completamente optimizados. Por esta razn se hicieron algunas modificacionesy comparaciones para optimizar el mejor mtodo para la extraccin del ADN.

Se compar la eficacia de dos protocolos: el protocolo Doyle & Doyle (Anexo 4) y elprotocolo utilizado por el Dr. Mike Davis (Anexo 5). Adems, se hicieron

modificaciones en el protocolo Doyle & Doyle ya que se maceraron tambin lospecolos.

Para la comparacin se utilizaron tejidos que se conocan sus resultados de antemano,2 positivos y 2 negativos, y el producto del PCR se corri en una gel de Agarosa al1.5%, 70 voltios por 2 horas en un tanque pequeo de tipo horizontal deelectroforesis.

El ADN positivo (necesario para la comparacin) se extrajo de pecolos de plantasinfectadas con la enfermedad, facilitados por Brian Brunner, de la Universidad dePuerto Rico.

Para el diagnstico de esta enfermedad se utiliz la tcnica de PCR. Se usaron primersespecficos, recomendados por el Dr. Mike Davis de la U. de Florida, para el PBT(Genbank Accesssion U76909) (Davis, et al. 1997) (Cuadro 5).

Cuadro 5. Primers especficos para el PBT, sintetizados en los laboratorios Life Sciences Inc,en los Estados Unidos.Forward Primer 3-PBTF Secuencia (5 a 3) AAAGGTTCTGATTGGTTAGGTGReverse Primer 4-PBTR Secuencia (3a 5) ATCTTTATGCTCTCCAACTCCTC

Se utilizaron "PCR Beads Ready to Go" de la casa comercial AmershamPharmacia Biotech, Inc. Piscataway, NJ, USA. Cada perla contiene aproximadamente1.5 unidades de Taq Polimerasa, 1.5 mM de MgCl2,10 nM de Tris-HCl (pH 9.0), 50nM de KCl, 200 M de cada dideoxinucletido trifosfato (dNTPs o basesnitrogenadas) y estabilizadores incluyendo albmina de suero bovino (ASB). Cada

perla se disolvi en 24 l de agua doblemente esterilizada y desionizada, aadindoles0.5 l de cada primer, obteniendo un volumen final de 25l. Para aprovechar dosreacciones por cada tubo (y as bajar costos de materiales), esta mezcla se dividi endos partes iguales de 12.5l y se aadi 1l del ADN extrado a las muestras. Paraamplificar el ADN, se utiliz un termociclador Perkin Elmer 480 (Norwalk, CT,USA). La amplificacin del ADN se realiz bajo las siguientes condiciones:


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En total son 40 ciclos de:

1. 94C por 2 min. fase de desnaturalizacin2. 58C por 1.5 min. fase de ligamento

3. 72

C por 1 min. fase de extensin4. Extensin final de 72C por 10 min.

Para visualizar el ADN resultante se us la tcnica de electroforesis utilizando untanque horizontal, una gel de Agarosa al 1.5 % y una concentracin de Bromuro deEtidio al 0.5 g/ml, con una corriente elctrica a 70 voltios por 2 horas,

proporcionada por una fuente de poder Bio-Rad 1000/500 (Richmond, CA, USA) yse visualiz en un transiluminador ultravioleta UVP (Upland, CA, USA).

En cada pozuelo en la gel, se coloc 9 l de marcador molecular, control positivo yun control negativo (mezcla de PCR sin ADN), con 2 l de buffer de carga.

3.4.4 Diagnstico de la enfermedad de etiologa desconocida.

Debido a que esta es una enfermedad de etiologa desconocida, no se sabe cual es elmtodo ms apropiado de diagnstico. Sin embargo, como los sntomas sugieren unainfeccin causada por un virus, un fitoplasma o una bacteria fastidiosa (PapayaBunchy Top), se descartaron mtodos de cultivos convencionales para bacterias yhongos. Se probaron varias tcnicas moleculares, serolgicas y microscopaelectrnica para determinar la etiologa del agente causal.

Se recolectaron 7 muestras las que fueron enviadas al laboratorio del Dr. Phil Jones enel "Rothamsted Experimental Station" en Inglaterra. Se diagnosticaron por medio demicroscopa electrnica y se tomaron microfotos en blanco y negro.

Para descartar otros posibles patgenos causantes de la enfermedad, se diagnosticaronpor medio de PCR (descrito en la seccin 3.4.3), utilizando primers para detectar:Papaya Bunchy Top (Cuadro 5.), geminivirus (AV514 y AC1048) y fitoplasmas.

Se utiliz un par de primers universales para detectar fitoplasmas, estos son el P1 y P7que estn basados en una secuencia de ARN ribosomal (rRNA) (Cuadro 6).

Cuadro 6. Secuencia de nucleotidos para el par de primers universales para el diagnstico defitoplasmas (Harrison, 2000).P1 Secuencia (5 a 3) AAG AGT TTG ATC CTG GCT AGG ATTP7 Secuencia (3a 5) CGT CCT TCA TCG GCT CTT


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4 RESULTADOS Y DISCUSIN

4.1 CONTEXTO DE LA PAPAYA

En Honduras la siembra de papaya ha sido dirigida para el consumo local. Se siembraen parcelas de una a dos manzanas, carente de una tecnologa apropiada y sin ningnapoyo gubernamental (Turcios, 2000).11Sin embargo, segn Calidoneo (1999)12 enlos ltimos aos ha existido un pequeo incremento en la siembra del cultivo de la

papaya en forma orgnica en la zona de San Pedro Sula, destinando la fruta paraprocesamiento y obtencin de pur, apto para la exportacin. Sumando a esto segnMiranda (2000),13 DICTA est iniciando programas de fomento para ladiversificacin agrcola y entre los cultivos ms importantes est la papaya.

La mayor produccin en el mbito nacional se encuentra en Comayagua (SECPLAN,1993). La comercializacin de la fruta es el mayor obstculo que tienen los

productores y en segundo lugar estn los problemas de enfermedades y plagas quehan ido aumentando en complejidad y dificultad de manejo. Entre los msimportantes estn las enfermedades virales y la mosca de la fruta (Toxotrypanacurvicauda Gerstaecker)Zuniga (2000)14.

No se tiene informacin reciente de programas o proyectos de exportacin de la frutafresca, mas bien se tiene informacin acerca de la importacin de la fruta desdeGuatemala para venta en supermercados. Esto demuestra la baja productividad y la

problemtica del mercado de la papaya al interior de Honduras.

4.2 DIAGNSTICO RURAL RAPIDO

Se pudo observar que del cultivo de la papaya dependen familias que estncompuestas de 5 a 8 miembros. La mayora de los agricultores (>90%) tienen unaeducacin de 3era 6togrado y se dedican tambin a la siembra de granos bsicos.

La experiencia de cultivar papaya entre los productores va desde 1 ao hasta 10 aos.La semilla que utilizan es criolla, y no utilizan ningn tipo de ayuda econmica(crditos para produccin), ya sea del gobierno o privada.

La venta de la fruta la hacen por medio de intermediarios, convirtindose en uno delos problemas ms importantes, los canales de comercializacin.

En aspectos fitosanitarios los problemas son las enfermedades de tipo viral, seguidopor podredumbre de las races (Phytopthora sp.) y el ataque severo en poca seca(verano) de caros y mosca de la fruta.

11 Turcios, M. 2000 Situacin actual de los productores de papaya en Honduras, SECOP, La PazHonduras. Comunicacin Personal.12Calidoneo, A. 1999 La siembra de papaya orgnica, San Pedro Sula. Comunicacin Personal13

Miranda, D. 2000. Proyectos del DICTA. Tegucigalpa, Honduras. Comunicacin Personal14Zuniga, A. 2000 Problemtica de la papaya en la zona de Comayagua, Departamento de Sanidadvegetal del ministerio de Recursos Naturales, Tegucigalpa Honduras. Comunicacin Personal


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El 86% de los productores no conocen otros beneficios de la papaya, ya seanmedicinales, industrializacin y alimenticios.

4.3 DIAGNSTICO MOLECULAR Y SEROLOGICO

4.3.1 Papaya Ringspot Virus y Papaya Mosaic Virus

Todas las muestras de papaya con sntomas caractersticos de PRSV y PMV,analizadas con un "Kit" de ELISA para estos virus, dieron resultados negativos, a

pes

cultivodelapapayayenfermedades-150712233627-lva1-app6892.pdf

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