CromossomosCromossomos

Estrutura e identificação

do Cariótipo

Prof. Priscilla RussoBiologia - Farmácia

CromossomoCromossomo

• Filamentos espiralados de cromatina, composto por DNA e proteínas

• Durante o ciclo celular, os cromossomos passam por estágios ordenados de condensação e descondensação.

DNA - histonasDNA - histonas

EstruturaEstrutura

• Centrômero: constrição primária que divide o cromossomo em dois braços. É o ponto de ligação de cromátides irmãs

• Telômero: extremidade dos braços cromossômicos.

• Satélite: porção terminal do cromossomo separado por uma constrição secundária.

CentrômeroCentrômero

• Metacêntrico –centrômero central–braços aproximadamente iguais

• Submetacêntrico –centrômero não central –braços de comprimento diferentes

• Acrocêntrico –centrômero próximo a extremidade

CentrômeroCentrômero

Obs. Os cromossomos acrocêntricos humanos (13, 14, 15, 21, 22) possuem satélites

Sexuais e AutossomosSexuais e Autossomos

Técnicas de análiseTécnicas de análise

• Citogenética: estudo dos cromossomos e sua estrutura

• Os cromossomos de uma célula humana em divisão são mais facilmente analisados na metáfase.

• Nesta fase, os cromossomos estão dispersos e apresentam duas cromátides, unidas pelo centrômero.

• Obtém-se uma amostra de sangue• Centrifuga para os leucócitos

sedimentarem • Estes são colocados em meio de

cultura e estimulados a dividir-se, com adição da fito-hemaglutinina, agente mitogênico (estimula mitose)

TécnicaTécnica

TécnicaTécnica

• Incuba para multiplicação celular• Acrescenta solução de colchicina,

para impedir a conclusão da divisão celular (inibindo a formação do fuso e retardando a separação dos centrômeros)

• Então, as células paradas na metáfase acumulam-se na cultura

TécnicaTécnica

• Em seguida, adiciona solução hipotônica para tumefar as células, lisando e liberando os cromossomos, mas mantendo-os intactos

TécnicaTécnica

• Os cromossomos são fixados, espalhados em lâminas e corados por várias técnicas.

BandeamentoBandeamento

• Vários métodos de bandeamento são utilizados nos laboratórios de citogenética para identificação e análise dos cromossomos – Coloração convencional– Bandeamento G– Bandeamento R– Bandeamento C

Coloração convencionalColoração convencional

Bandeamento GBandeamento G

• Os cromossomos são tratados com tripsina (desnaturação de proteínas) e corados com Giemsa.

• Cada par de cromossomos cora-se num padrão típico de bandas claras e escuras.

Bandeamento GBandeamento G

Bandeamento GBandeamento G

Bandeamento RBandeamento R

• Os cromossomos recebem pré-tratamento com calor antes da coloração Giemsa.

• Nesse caso, as bandas claras e escuras resultantes (bandas R) são o inverso das produzidas por bandeamento G.

Bandeamento CBandeamento C

• Coloração da região centrômérica

CariótipoCariótipo

Masculino (15 cromossomos no grupo Masculino (15 cromossomos no grupo C e 5 cromossomos no grupo G)C e 5 cromossomos no grupo G)

Feminino (16 cromossomos no grupo Feminino (16 cromossomos no grupo C e 4 cromossomos no grupo G)C e 4 cromossomos no grupo G)

FISHFISH

• Detecta segmentos específicos de DNA, e um software de computador é capaz discriminar 27 diferentes tons.

• "Chromosome Painting“

• Permite detectar melhor os rearranjos cromossômicos complexos e simples e, ainda pode-se caracterizar muitas anormalidades cromossômicas que não eram detectadas pelas técnicas de bandeamento tradicionais.

FISHFISH

FISHFISH

Ex.: Sd. EdwardsEx.: Sd. Edwards

AtividadesAtividades

1. Montagem do cariótipo

(anexo)

2. Analise o cariótipo e responda:

• Qual é o tipo de bandeamento?

• Qual o sexo do paciente?

• Qual a síndrome destacada?

• Como representamos este cariótipo?

3. Este cariótipo é normal?

( ) Sim

( ) Não

4. Classifique os cromossomos

Metacêntrico:

Submetacêntrico:

Acrocêntrico: