BIOQUÍMICA I1º ANO MESTRADO INTEGRADO EM MEDICINA2009-2010

Seminário Orientado 2

Métodos de identificação de biomoléculas e análise de proteínas:• principais biomoléculas• métodos de análise de proteínas• estudo de proteínas para o diagnóstico em Medicina

07-10-2009

BIOMOLÉCULAS Lípidos Insoluvéis em água e solúveis em solventes

apolares;

Ésteres de ácidos gordos ou amidas de ácidos gordos;

Funções biológicas: estruturas membranares, reserva energética, mensageiros (hormonas);

Classificação: Apolares Polares Lípidos complexos

Lípido - triglicerídio

• Proteínas Polímeros de aminoácidos ligados por

ligações peptídicas; Funções: estruturais, defesa, hormonal,

energética e enzimática; Propriedades das proteínas; As proteínas são construídas a partir de 20

aminoácidos; Organização estrutural: primária, secundária,

terciária e quaternária;

Ácidos nucleicos DNA e RNA: sequências de nucleótidos;

Componentes dos nucleótidos: pentose, grupo fosfato e base nitrogenada;

Funções dos nucleótidos: armazenamento e transmissão da informação genética, transporte de energia, constituição de co-enzimas e mensageiros químicos;

Tipos de RNA.

Estrutura do DNA e do RNA;

•Hidratos de Carbono

constituidos por grupo hidroxilo (OH)funções: metabolismo energetico, reservas, estrutura, reconhecimento celular;Classificação: monossacarídeos (açucar simples); oligossacarídeos; polissacarídeos(celulose, glicogenio);

MÉTODOS DE IDENTIFICAÇÃO DE PROTEÍNASBaseiam-se na sua carga, solubilidade, tamanho e afinidade de ligação.

CROMATOGRAFIAConsiste na passagem de macromoléculas

através de uma coluna fixa (fase estacionária) que é desenhada para reter ou diminuir a velocidade de passagem da fase móvel em função de uma dada propriedade química.

Cromatografia por filtração em gel – separação por um critério de tamanho.

Cromatografia por troca iónica – separação por um critério de carga global proteica.

Cromatografia por afinidade – separação por um critério de bioreconhecimento.

ELECTROFORESE

É uma técnica de separação de moléculas que consiste na migração de moléculas com carga, numa solução, em função da aplicação de um campo eléctrico.

Electroforese em gel: separação por um critério de massa molecular

Electroforese por Focalização Isoeléctrica – separação por um critério de radicais ácido/base.

Electroforese Bidimensional – separação por um critério de radicais ácidos/básicos e de massa molecular; permite cruzamento de dados.

OUTROS MÉTODOS

• Ultracentrifugação

• Western blotting

• Diálise

• Salting out

APLICAÇÕES NA MEDICINA

3. PROTEÍNAS NO DIAGNÓSTICO MÉDICO

3.1 Avaliação quantitativa

• Hiperproteinémia: Hiperproteinémia:

PCR (Proteína C-reactiva) ↔ Infecção, Inflamação.• Hipoproteinémia: Hipoproteinémia:

Hipoalbuminémia ↔ Insuficiência renal de último grau, Síndrome nefrótico, Insuficiência hepática grave.

FMUC | Bioquímica I – SO2 | 7 de Outubro de 2009

3.2 Avaliação qualitativa

• Ex.1: HEx.1: Hemoglobina S ↔ Anemia falciforme

• Ex.2: Ex.2: Amilóide ↔ Amiloidose

BIBLIOGRAFIA e NETGRAFIA

ALBERTS, Bruce; JOHNSON, Alexander; LEWIS, Julian; RAFF, Martin; ROBERTS; Keith; WALTER, Peter, Molecular biology of the cell, 4ª edição Garland Science, New York 2002

STRYER, Lubert; BERG, Jeremy M.; TYMOCZKO, John L., Biochemistry, 5ª edição International Edition, New York 2002

“Técnicas de análise de proteínas”,Faculdade de Medicina do Porto

http://preview.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16534226?

itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_RVD

ocSum&ordinalpos=12

http://en.wikipedia.org/wiki/C-reactive_protein

http://anatpat.unicamp.br/taamiloidose.html

http://pt.wikipedia.org/wiki/Amiloidose

MURRAY, Robert; GRANNER, Daryl; MAYES, Peter; RODWELL, Victor,

Harper’s Ilustrated Biochemistry, twenty-sixth edition, 2003, pps. 580-584

Trabalho realizado por:Amélia Fernandes

Ana Carolina MartinsAna Carolina Figueiredo

Ana Carolina PadilhaAna Carlota CaetanoAna Catarina Cunha

Ana Catarina QuintasAna Catarina Lai