apresentação de imuno iii
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Técnicas imunologicas
Janio Lopeswww.bioconcursos.com
Precipitação• Ocorre pela interação de antígenos (Ag) solúveis
“multivalentes” e seus anti-soros (Ac).• Simples: ( Ac ou Ag fixo e o outro se difunde no gel)• Dupla: (Ac e Ag se difundem no gel)
• Dupla (Ouchterlony)• Forma “linhas”
• Simples (Mancini)• Forma “alos”
Floculação - VDRL
• Teste não treponêmico• Reagentes– Cardiolipina (lipídeo de
mamifero)– Lecitina – Cristal de colesterol– Anticorpos anti-lipídio
ou reagininas
Elisa
• É um método quantitativo em que a reação Ac-Ag é monitorada por medida da atividade enzimática.
• Alta sensibilidade• Enzimas utilizadas: Peroxidade e Fosfatase alcalina• Leitura por Absorbância.
Imunofluorescencia• Anticorpos ligados covalentemente a fluorocromos.• Fluorocromos mais utilizados:– Fluoresceína, Isotiocianato, Lisamina-Rodamina B.
• Indireta: Usada para pesquisa de Ac ou Ag.
• + sensível– Ag+ Anti Ag + Anti-Ac
Marcado
• Direta: Usado para pesquisar Ag em tecidos– Ag + Ac-marcado
Bizu
• Reação de Montenegro: Aplicação intradérmica de antígenos (leishmaniose tegumentar).
• Reação de Paul Bunnel Davidison: pesquisa de anticorpos heterófilos contra hemácias de carneiro ou cavalos ( fase aguda da mononucleose infecciosa / V. Epstein-Barr)
• Reação de PPD: Derivado protéico purificado de tuberculina aplicado na intraderme. (tuberculose)
• Reação de Widal: ensaio imunologico de aglutinação para diagnostico de salmoneloses
Nefelometria
• Quantifica as reações de precipitação entre Ag-Ac medindo o espalhamento de luz (ângulo) provocado pela formação de imunocomplexos.
• Diminuição da trasmitâcia
Testes rápidos
• Imunocromatográficos• Qualitativo• Rápido• Simples• Amostra:
– Soro– Sangue total– Urina
• Enzima, corante coloidal ou ouro coloidal.
• Captura de Ac ou Ag