replicação do dna · 26/04/2015 3 origens de replicação primase ribonucleoproteína liga‐se...

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ReplicaçãodoDNA

JoséFranciscoDiogodaSilvaJunior– MestrandoCMANS/UECE

ComoaconteceasíntesedoDNA?

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Replicaçãosemi‐conservativa

Origensdereplicação

▪ Locais com um contexto de 

sequência específico

▪ Ligam proteínas específicas

▪ Quando acionadas, essas proteínas permitem o início da 

replicação

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Origensdereplicação

Primase

▪ Ribonucleoproteína

▪ Liga‐se à helicase em procariotos 

formando o chamado primossomo

▪ Sintetiza um primer de RNA contendo 

aproximadamente 11 bases; fornece 3’ 

OH

▪ DNA polimerase lenta e sujeita a erros

▪ Evita a progressão da forquilha uma vez 

que a fita líder anda mais rápido

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DNApolimerase

▪ Enzimas que catalisa a reação de síntese do DNA

▪ Adiciona nucleotídeos tri‐fosfato à extremidades 3’OH livre

▪ Alongamento da cadeia de DNA sempre é feito na direção 5’>3’ 

(endonuclease 5’>3’)

▪ Incapaz de fazer DNA do zero (precisa ter extremidade 3’OH livre)

▪ Possui mecanismo de correção de erros (exonuclease 3’>5’)

TiposdeDNApolimerase

▪ DNA polimerase I

▪ Descoberta em 1956 (Kornberg pai)

▪ Função precisa descoberta apenas em 1969: remove o primer de RNA 

da fita descontínua

▪ DNA polimerase III

▪ Descoberta em 1970 (Kornberg filho)

▪ Principal enzima que realiza a replicação em procariotos

▪ DNA polimerase II

▪ Lenta, envolvida em reparo do DNA

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Replicação

▪ DNA Polimerase III

▪ Sen do 5’ → 3’

▪ Nucleotídeos 3P são adicionados

▪ Liberação de Pirofosfato

DesenovelamentodoDNA

▪ Retirada das histonas

▪ Proteínas de ligação a fita simples (SSBPs)

▪ DNA helicase

▪ Quebra pontes de H

▪ DNA topoisomerases

▪ Tiram a tensão

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Forquilhadereplicação

Forquilhadereplicação

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Replicaçãodasfitas

▪ Fita líder

▪ Primase age uma vez

▪ Fita retardada

▪ Primase age várias vezes

▪ 1967, Fragmentos de Okasaki

Okazaki R, Okazaki T, Sakabe K, Sugimoto K. Mechanism of DNA replication possible discontinuity of

DNA chain growth. Jpn J Med Sci Biol. 1967 Jun;20(3):255‐60

Forquilhadereplicação

▪ Polaridade da síntese define fitas líder e retardada (descontínua)

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DireçõesdereplicaçãonaForquilha

Micrografia,bolhadereplicação

Forquilhas de replicação

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ReplicaçãodoDNA

▪ DNA Pol precisa de um molde inicial

▪ Primase: gera um molde de RNA 

complementar

▪ A DNA Pol III agora é capaz de adicionar bases à extremidade 3’OH

Eliminação dos fragmentos de 

Okasaki

DNA Pol I