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FACULDADE DE EXCELÊNCIA EDUCACIONAL DO RIO GRANDE DO NORTE - FATERNUNIVERSIDADE GAMA FILHO - UGF
DISCIPLINA DE CITOLOGIA,EMBRIOLOGIA E HISTOLOGIA
MICROSCOPIA CELULAR: TEORIA E PRÁTICA 1
MICROSCOPIA CELULAR:TEORIA E PRÁTICA
PROFESSORAS: ADRIANA MOTTA MONARA BITTENCOURT DE AMORIM
Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica 2
BIBLIOGRAFIA CONSULTADA:
1.JUNQUEIRA e CARNEIRO, L.C. Histologia Básica. 9ed.Rio de Janeiro:Guanabara Koogan, 2004.2.Manual de Instruções da BIOVAL, 2007.
MICROSCÓPIO
“APARELHO COM LENTES ÓPTICAS QUE MAXIMIZA UM SER OU ESTRUTURAS MINÚSCULAS A UM TAMANHO DE BOA OBSERVAÇÃO”
BACTÉRIAS
CÉLULAS SANGUÍNEAS
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CÉLULALEUCÓCITOS
Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
PRINCIPAIS COMPONENTES DE UM MICROSCÓPIO
O MICROSCÓPIO ÓPTICOMICROSCÓPIO ÓPTICO, É TAMBÉM CONHECIDO COMO MICROSCÓPIO DE LUZ
COMPÕE-SE DE UMA PARTE MECÂNICAPARTE MECÂNICA
QUE SERVE DE SUPORTE PARA A PARTE ÓPTICA
PARTE ÓPTICAPARTE ÓPTICA
É CONSTITUÍDA POR TRÊS SISTEMAS DE LENTES:
O CONDENSADOR, AS OBJETIVAS E AS OCULARES.
4Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
PRINCIPAIS COMPONENTES DA PARTE ÓPTICA
CONDENSADORCONDENSADORCONDENSADORCONDENSADOR
SUA FINALIDADE É PROJETAR UM CONE DE LUZ SOBRE AS CÉLULAS
QUE ESTÃO SENDO EXAMINADAS AO MICROSCÓPIO.
APÓS ATRAVESSAR AS CÉLULAS, ESSE FEIXE LUMINOSO, EM FORMA DE
CONE, PENETRA NAS OBJETIVAS.
OBJETIVASOBJETIVASOBJETIVASOBJETIVAS
PROJETAM UMA IMAGEM AUMENTADA , NO PLANO FOCAL DAS
OCULARES, QUE NOVAMENTE A AMPLIA.
OCULARESOCULARESOCULARESOCULARES
AS IMAGENS FORNECIDAS PELA OCULARES PODEM SER PERCEBIDAS PELA RETINA.
5Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
CONDENSADOR
OCULARES
OBJETIVAS
LÂMPADA
BASE
Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
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PLATINA
BRAÇO
PINÇA
PARAFUSO MACROMÉTRICO
PARAFUSO MICROMÉTRICO
REVÓLVER
PARAFUSO MACROMÉTRICO
PARAFUSO MICROMÉTRICO
CONDENSADOR
OBJETIVAS
OCULARES
BRAÇO OU SUPORTE
PLATINA
BASE
LÂMPADA
7Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
PODER DE RESOLUÇÃO X LIMITE DE RESOLUÇÃO
O PODER DE RESOLUÇÃO DE UM SISTEMA ÓPTICO É A SUA CAPACIDADE DE
SEPARAR DETALHES.
• É EXPRESSO PELO LIMITE DE RESOLUÇÃO.
É A MENOR DISTÂNCIA QUE DEVE EXISTIR ENTRE DOIS PONTOS PARA QUE
ELES APAREÇAM INDIVIDUALIZADOS.
PODER DE RESOLUÇÃOPODER DE RESOLUÇÃO
LIMITE DE RESOLUÇÃOLIMITE DE RESOLUÇÃO
8Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
9Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
EXEMPLO DE LIMITE DE RESOLUÇÃO::
O QUE DETERMINA, A RIQUEZA DE DETALHES DA IMAGEM FORNECIDA POR UM SISTEMA ÓPTICO É O SEU LIMITE DE RESOLUÇÃO, E NÃO O SEU PODER DE AUMENTAR O TAMANHO DO OBJETO.
É A MENOR DISTÂNCIA QUE DEVE EXISTIR ENTRE DOIS PONTOS PARA QUE ELES APAREÇAM INDIVIDUALIZADOS.
HEMÁCIAS
10Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
MICROSCOPIA ÓPTICA EM LÂMINA DE TECIDO
SANGUÍNEO
HEMÁCIAS MICROSCOPIA ELETRÔNICA (ME) DE BACTÉRIAS COMENSAIS
EOSINÓFILOS
LEUCÓCITO
LINFÓCITO
DIFERENÇAS DE IMAGENS ENTRE UM MICROSCÓPIO ÓPTICO (MO) E UM MICROSCÓPIO ELETRÔNICO (ME)
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PLAQUETAS
Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
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DETERMINE QUAL O TIPO DE MICROSCÓPIO QUE SE UTILIZOU NA OBSERVAÇÃO DESSAS IMAGENS
Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
PRINCIPAIS UNIDADES DE MEDIDAS USADAS NA MICROSCOPIA
ESTA UNIDADE ESTÁ SENDO SUBSTITUÍDA PELO NANÔMETRO
MICRÔMETRO (µm) MICRÔMETRO (µm)
NANÔMERO (nm)NANÔMERO (nm)
1mm = 1.000 μm
1μm = 1.000 nm
1nm = 10 ÅÂNGSTROM (Å)ÂNGSTROM (Å)
13Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
ESPECIFICAÇÕES DAS OBJETIVAS E SUAS AMPLIAÇÕES
OBJETIVAS(COM OCULAR DE 10X)
AMPLIAÇÃO TOTAL(VER SEMPRE AS OCULARES)
04 x 40 X
10 x 100 X
40 x 400 X
100 x (Sempre usar com óleo de Imersão)
1000 X
14Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
OPERAÇÃO (PRÁTICA LABORATORIAL)
NORMAS E CONDUTAS NA PRÁTICA LABORATORIAL
1. OBEDECER TODAS AS NORMAS DE BIOSEGURANÇA (EPI/EPC).
2. LAVAR AS MÃOS NA ENTRADA E NA SAÍDA APÓS A PRATICA.
3. É OBRIGATÓRIO QUE VOCÊ CONHEÇA AS PARTES ÓPTICAS E
MECÂNICAS DOS MICROSCÓPICOS ANTES DE USÁ-LO.
4. NÃO MANUSEAR O APARELHO COM AS MÃOS SUJAS OU MOLHADAS
5. NUNCA DESLOQUE O APARELHO COM A LÂMPADA ACESA.
6. NA REMOÇÃO DO EQUIPAMENTO, SEGURE-O FIRMEMENTE COM UMA
DAS MÃOS NO BRAÇO E A OUTRA NA BASE.
7. É PROIBIDO O USO DE CÂMARAS FOTOGRÁFICAS DURANTE A
EXPOSIÇÃO DA AULA PRÁTICA.
15Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
COMO USAR O MICROSCÓPIO
USANDO A OBJETIVA 100x
1. INICIE SEMPRE PELA OBJETIVA DE MENOR AUMENTO.
2. NA OBSERVAÇÃO DE UMA PREPARAÇÃO, OLHE PELA OCULAR
E MOVA O MACROMÉTRICO MUITO LENTAMENTE, ASSIM QUE A
IMAGEM APARECER, MESMO CONFUSA, PARE E COMPLETE A
FOCALIZAÇÃO COM O MICROMÉTRICO.
O USO DA OBJETIVA DE IMERSÃO É MAIS DELICADA POIS, A
DISTÂNCIA FOCAL ENTRE A FACE DA OBJETIVA E A PARTE SUPERIOR
DA LAMÍNULA, DIMINUI QUANDO A AMPLIAÇÃO É AUMENTADA.
16Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
COLORAÇÃO
QUASE TODAS AS ORGANELAS SÃO TRANSPARENTES E INCOLORES, O QUE DIFICULTA SEU ESTUDO MICROSCÓPICO, LOGO A COLORAÇÃO FACILITA A
VISUALIZAÇÃO DAS ESTRUTURAS DOS TECIDOS.
PARA VENCER ESSA DIFICULDADE, FORAM CRIADOS NUMEROSOS PROCESSOS DE COLORAÇÃO QUE TORNAM VISÍVEIS OS DIVERSOS COMPONENTES
CELULARES.
17Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
SÃO OS COMPONENTES DOS TECIDOS QUE SE CORAM FACILMENTE COM CORANTES ÁCIDOS (Ex:EOSINA)
EX: ESTRUTURAS BÁSICAS (ORGANELAS CITOPLASMÁTICAS)
A MAIORIA DOS CORANTES COMPORTA-SE COMO ÁCIDOS OU BASES
SÃO OS COMPONENTES DOS TECIDOS QUE SE CORAM FACILMENTE COM CORANTES BÁSICOS (Hematoxilina)
EX: ESTRUTURAS ÁCIDAS (NÚCLEOS)
ESTRUTURAS BASOFÍLICAS: ESTRUTURAS BASOFÍLICAS: ESTRUTURAS ACIDÓFILAS: ESTRUTURAS ACIDÓFILAS:
18Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
TÉCNICAS DE COLORAÇÃO MAIS USUAIS, TÉCNICA DE IMPREGNAÇÃO PELA PRATA E ALGUNS DOS RESULTADOS OBTIDOS COM ELAS:
TÉCNICAS CONSTITUINTES NÚCLEOS CITOPLASMA FIBRAS
COLÁGENASFIBRAS
RETICULARES
HE
HEMALÚMEN (Hematoxilina),
EOSINAHEMATOXILINA
FÉRRICA
AZUL
PRETO
ROSA ROSA
TRICRÔMICO DE MASSON
FUCCINA ÁCIDAE PONCEAU DE
XILIDINA,
VERDE-LUZ VERMELHO
VERDE
IMPREGNAÇÃOARGÊNTICA
PARA FIBRAS RETICULARES
SOLUÇÕES DE SAIS DE PRATA PRETO
19Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
OS MICROSCÓPIOS MODERNOS UTILIZAM LASERS COMPLEXOS, DETECTORES EXTREMAMENTE SENSÍVEIS, OBJETIVAS PODEROSAS.
PERMITEM FILMAR DIVISÃO CELULAR, O TRÁFICO DE MOLÉCULAS DENTRO DAS CÉLULAS, PERMITEM OBSERVAR CERTAS PROTEÍNAS NO CÉREBRO DE ANIMAIS VIVOS ETC.
20Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica
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EXERCÍCIOS DE FIXAÇÃO
1.Defina microscópio, suas principais estruturas ópticas e mecânicas, observando os cuidados a serem utilizados no manuseio deste aparelho.2.Diferencie Poder de Resolução de Limite de Resolução.3.Quais as características para cada parte do Microscópio óptica ?4.Quais os cuidados a serem observados antes de manusear o aparelho?5.De acordo com as oculares de 22x, calcule a ampliação total de uma imagem observada por objetivas de : 05x,10x,20x,40x e 100x.Jamais esqueçam de acrescentar os cálculos destas respostas na prova 6.Defina Ampliação Total.7.Cite 6 elementos estruturais de um Microscópio Óptico.8.Quais os dois principais corantes da Técnica de coloração por HE?9.Quais os cuidados individuais que se deve ter ao uso dos laboratórios?10.Defina Equipamento de Proteção Individual (EPI).11.Qual a importância dos Equipamento de Proteção Coletiva (EPC)?12.Cite 5 condutas inapropriadas dentro de um laboratório.13.Quais as vacinas que devem ser tomadas antes de se adentrar dentro de um laboratório com riscos biológicos?14. O que são riscos e quais os principais relacionados com a área da saúde?15. Qual a única objetiva que só deve ser usada com óleo de imersão?
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