2011 - teratoma ovariano canino - relato de caso

Anais do

XIX Congresso Brasileiro de Reprodução Animal

Recife, PE, Brasil 25 a 27 de maio 2001

ISSN 1984-8471

Colégio Brasileiro de Reprodução Animal (CBRA) Belo Horizonte, MG, Brasil

2011

Sumário Indice de autores

Organização

• Rodrigo Costa Mattos –Presidente do CBRA, Médico Veterinário, MSc, PhD, Prof. Associado da UFRGS. Coordenação geral

• José Ricardo Figueiredo – Vice- Presidente do CBRA, Médico Veterinário. Prof. da UECE. • Maria Inês Mascarenhas Jobim – 1ºSecretário do CBRA, Médica Veterinária, MSc. PhD, Prof. Associado

da UFRGS. • Maria Lúcia Gambarini – 2º secratário do CBRA, Médica Veterinária, MSc. PhD, Prof. Associado da

UFG. • Antônio de Pinho Marques Júnior - 1o Tesoureiro do CBRA, Médico Veterinário, MSc. PhD, Prof.

Associado da UFMG. • Carlos Augusto Pelegrino - 2o Tesoureiro do CBRA, Médico Veterinário, MSc.

• Maria Madalena Pessoa Guerra, UFRPE, Secretária geral do XIX Congresso Brasileiro de Reprodução Animal.

Comitê local

• Aurea Wischral, UFRPE. • Cláudio Coutinho Bartolomeu, UFRPE. • Érika Christina Santos Oliveira, UFRPE. • Gustavo Ferrer Carneiro, UFRPE.

Comitê Assessor:

Alexandre Rodrigues Silva (UFERSA) Antonio de Pinho Marques Júnior (UFMG) Carlos Enrique Peña-Alfaro (UFCG) Concepta McManus Pimentel (UFRGS) Erika Christina Santos Oliveira (UFRPE) Eunice Oba (UNESP)

Gustavo Ferrer Carneiro (UFRPE) Lúcia Daniel Machado da Silva (UECE) Luis Alberto Oliveira Ribeiro (UFRGS) Marc Henry (UFMG) Rômulo José Vieira (FACID) Sílvio Peixoto (UFRPE)

Comitê Editorial dos Anais:

Alexandre Rodrigues Silva (UFERSA) Airton Alencar de Araújo (UECE) Alcides de Amorim Ramos (UNESP/FMVZ) Antonio de Pinho Marques Júnior (UFMG) Áurea Wischal (UFRPE) Carlos Enrique Peña-Alfaro (UFCG) Cláudio Coutinho Bartolomeu (UFRPE) Concepta McManus Pimentel (UFRGS) Danielle Maria Machado Ribeiro Azevedo (EMBRAPA/CPAMN) Erika Christina Santos Oliveira (UFRPE) Eunice Oba (UNESP/FMVZ) Fernanda da Cruz Landin-Alvarenga (UNESP/FMVZ)

Francisco Selmo F. Alves (EMBRAPA/CNPC) Gustavo Ferrer Carneiro (UFRPE) Hymerson Costa Azevedo (EMBRAPA/CPATC) Jairo Pereira Neves (UnB) João Carlos Pinheiro Ferreira (UNESP/FMVZ) José Carlos de Andrade Moura (UFBA) Lúcia Daniel Machado da Silva (UECE) Luis Alberto Oliveira Ribeiro (UFRGS) Marc Henry (UFMG) Pierrre Castro Soares (UFRPE) Rômulo José Vieira (FACID) Rubens Paes de Arruda (USP/FMVZ) Sheyla Farhayildes S. Domingues (UFPA) Sílvio Peixoto (UFRPE)

Colégio Brasileiro de Reprodução Animal Alameda das Princesas, 1275 - Belo Horizonte, MG - CEP 31275-180, Brasil

Tel:+55(31)3491-7122 - Fax:+55(31)3491-7025 - Site: www.cbra.org.br – E-mail:[email protected]

Congresso Brasileiro de Reprodução Animal (19. : 2011 : Recife, PE) Anais / XIX Congresso Brasileiro de Reprodução Animal. – Belo Horizonte, MG : CBRA : 2011.

ISSN: 1984-8471 (CD-ROM)

1. Reprodução animal – Congresso. I. Colégio Brasileiro de Reprodução Animal.

CDD – 636.089 261

Os textos foram reproduzidos conforme os originais enviados, sendo de total responsabilidade dos autores o conteúdo apresentado.


Sumário

Organização Editorial Programa Palestras - publicadas na Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.35, n.2,

2011. Disponível em www.cbra.org.br.<

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Resumos científicos e Comunicações técnicas Animais aquáticos 9-15 Animais de laboratório 16-24 Animais silvestres 25-53 Aves 54-55 Bovinos (fêmeas) 56-135 Bovinos (machos) 136-173 Bubalinos 174-180 Caninos (fêmeas) 181-200 Caninos (machos) 201-209 Caprinos 210-244 Equinos 245-260 Felinos 261-268 Ovinos 269-327 Suínos 328-338 Outras 339-348 Índice de autores 349-358

Os textos foram reproduzidos conforme os originais enviados, sendo de total responsabilidade dos autores o conteúdo apresentado.


XIX Congresso Brasileiro de Reprodução Animal Recife, Pernambuco, 25 a 27 de maio de 2011

EDITORIAL Caros Congressistas, Sejam bem vindos ao XIX CBRA!

Nesta edição do Congresso Brasileiro de Reprodução Animal a Diretoria Executiva incorpora

experiências adquiridas nos eventos anteriores, com vistas ao aprimoramento do mesmo, focando em avanços

atuais na área de reprodução animal.

Mais uma vez, atendendo ao convite feito pelo CBRA, os coordenadores de sessão sugeriram os nomes

dos palestrantes com os respectivos temas para as palestras, distinguidos entre especialistas das mais diversas

regiões do país e eventuais convidados estrangeiros.

Com esforço conjunto foi finalizada a programação que ora é apresentada aos congressistas. Salienta-se

o crescimento expressivo dos resumos apresentados, bem como, a qualidade das pesquisas, demonstrando o

desenvolvimento da área no Brasil.

O CBRA, nesta oportunidade, agradece a todos que contribuíram na construção do programa, na análise

dos resumos e na preparação dos simpósios. Ainda, é também grato àqueles que ao longo dos anos

encaminharam sugestões e críticas construtivas ao CBRA. Também agradece aos patrocinadores e instituições

parceiras na organização e viabilização do XIX CBRA. Por último, o CBRA reconhece e agradece a

contribuição inestimável recebida de suas secretárias, sem a qual o bom andamento do evento em suas diferentes

etapas não teria sido possível.

Diretoria Executiva do CBRA Belo Horizonte, maio de 2011

Apoio: Realização:

Colégio Brasileiro de Reprodução Animal

Web site: www.cbra.org.br E-mail:[email protected]

UFRPE


Programa Técnico-científico

25 de maio de 2011, quarta-feira

14:00-16:30 Plenária 1: Biotecnologia e reprodução - Coordenadora: Concepta McManus Pimentel (UFRGS, Porto Alegre, RS)

14:00-14:35 Criopreservação de recursos genéticos animais brasileiros - Artur da Silva Mariante (CENARGEN, Brasília, DF)

14:35-15:10 Desenvolvimento atual de esterilizador não cirúrgico para animais domésticos e selvagens - Irwin K Liu (University of California – Davis, USA)

15:10-15:45 Consequências das decisões em programas de acasalamento na produção animal - Concepta McManus Pimentel (UFRGS, Porto Alegre, RS)

15:45-16:30 Discussão geral 16:30-17:30 Coffee Break e Sessão de Posters 17:30-20:30 Simpósio 1: Reprodução em bubalinos - Coordenadora: Eunice Oba(UNESP, Botucatu, SP) 17:30-18:05 Produção in vitro de embrião bubalino - Eunice Oba(UNESP, Botucatu, SP) 18:05-18:40 Desenvolvimento sexual, manejo e distúrbios reprodutivos do macho bubalino - Otávio

Mitio Ohashi (UFPA, Belém, PA) 18:40-19:15 Caracterização anatomofuncional do sistema genital de fêmeas bubalinas(Bubalus

bubalis) e suas implicações na múltipla ovulação e transferência de embriões - Nelcio Antônio Tonizza de Carvalho (APTA-Polo Vale do Ribeira, Pariquera-Au, SP)

19:15-19:30 Apresentação oral de Resumo: Anormalidades espermaticas de bufalos criados na Amazonia [Abnormal sperm of buffalo raised in the Amazon] - E.M. Barbosa, H.F.L. Ribeiro

19:30-19:45 , S.T. Rolim Filho, R.N. Ferreira, K.B. Nunes, H.D.M. Ayala, M.R. Freitas

Apresentação oral de Resumo: Eficiência do processo de PIV-TE a fresco de embriões bubalinos [IVP and Embryo transfer process efficiency of fresh buffalos embryos] - W.P. Saliba

19:45-20:30

, H.X.S. Bayão, M.T.T. Alvim, P.S. Baruselli, L.U. Gimenes, R.C. Leite, E. Bastianetto, B. Gasparrini Mesa redonda

17:30-20:30 Simpósio 2: Reprodução em caprinos - Coordenador: Alexandre Floriani Ramos (CENARGEN, Brasília, DF)

17:30-18:05 Banco brasileiro de germoplasma animal: desafios e perspectivas para a conservação de caprinos no Brasil - Alexandre Floriani Ramos (CENARGEN, Brasília, DF)

18:05-18:40 Crioconservação e difusão de material genético de caprinos da Patagônia Argentina - Alejandro Gibbons (INTA, Argentina)

18:40-19:15 Uso de procedimentos não cirúrgicos para produção, recuperação e inovulação de embriões de pequenos ruminantes - Jeferson Ferreira da Fonseca (Embrapa Gado de Leite, Juiz de Fora, MG)

19:15-19:30 Apresentação oral de Resumo: Mudanças na biota vaginal de cabras submetidas a protocolo de indução de estro sincronizado [Changes on the vaginal biota of goats following protocol of estrus induction and synchronization] - J.S.K. Oliveira, J.F. Fonseca, L.V. Esteves, G. Martins, B. Penna, W. Lilenbaum, L.M. Figueira

19:30-19:45 , F.Z. Brandão

Apresentação oral de Resumo: Inibição da enzima conversora de angiotensina melhora a produção de embriões em cabras Boer superovuladas com hormônio folículo-estimulante suíno [Angiotensin-converting enzyme inhibition improves the embryo production in Boer goats superovulated by porcine follicle-stimulating hormone] - L.C.S. Feitosa, V.P. Fernandes Neto, Y.L. Boakari

19:45-20:30 , A.M. Reis, G.E.N. Viana, A.P.R. Costa

Mesa redonda 17:30-20:30 Simpósio 3: Reprodução em animais silvestres - Coordenador: Alexandre Rodrigues

Silva (UFERSA, Mossoró, RN) 17:30-18:05 Estratégias de conservação de germoplasma de porcos do mato - Alexandre Rodrigues

Silva (UFERSA, Mossoró, RN) 18:05-18:40 Desenvolvimento de biotécnicas de reprodução em primatas neotropicais ameaçados

de extinção: perspectivas e desafios - Sheyla Farhayldes Souza Domingues (UFPA, Castanhal, PA)


18:40-19:15 Reprodução de carnívoros silvestres - Tarcízio Antônio Rego de Paula (UFV, Viçosa, MG) 19:15-19:30 Apresentação oral de Resumo: Morfometria dos elementos do intertúbulo do testículo do

morcego-da-fruta Artibeus lituratus (OLFERS, 1818) tratados com os fungicidas Tebuconazol e Mancozeb [Morphometric Analysis of the Components of Intertubule of Testis of Artibeus lituratus (OLFERS, 1818) treated with fungicides Tebuconazol and Mancozeb] - D.C. Miranda

19:30-19:45

, T.F. Machado, D.V. Andrade, R.A.C. Carvalho, M.S. Barros, M.M. Neves, S.L.P. Matta, M.B.D. Freitas Apresentação oral de Resumo: Eficiência da coleta de sêmen por eletroejaculação em tatus-peba (Euphractus sexcinctus) anestesiados ou sob contenção mecânica [Efficiency of the semen collection by electroejaculation in six-banded armadillo (Euphractus sexcinctus) under anesthesia or mechanical restraint] - A.R.F. Ricarte

19:45-20:30

, R.N.L. Amorim, A.L.C. Paiva, V.V. Paula, C.I.A. Freitas, A.R. Silva Mesa redonda

26 de maio de 2011, quinta-feira

09:00-12:00 Assembléia do CBRA (Sala Carlos Pena 1)

14:00-16:30 Plenária 2: Seleção de reprodutores: perspectivas e desafios - Coordenador: Marc Henry (UFMG, Belo Horizonte, MG)

14:00-14:35 Seleção reprodutiva de machos, atualização e perspectivas futuras - Peter Chenoweth (Charles Sturt University’s Veterinary Science, Austrália)

14:35-15:10 Seleção de reprodutores: proteínas como marcadores - Arlindo de Alencar Araripe Moura (UFC, Fortaleza)

15:10-15:45 Métodos de avaliação da morfologia e função espermática: momento atual e desafios futuros - Rubens Paes Arruda (USP, Pirassununga, SP)

15:45-16:30 Discussão geral 16:30-17:30 Coffee Break e Sessão de Posters 17:30-20:30 Simpósio 4: Andrologia bovina - Coordenador: Carlos Enrique Peña-Alfaro (UFCG, Patos, PB) 17:30-18:05 Importância da avaliação andrologica na seleção de touros a campo - Carlos Enrique

Peña-Alfaro (UFCG, Patos, PB) 18:05-18:40 Efeitos do macho no embrião - Peter Chenoweth (Charles Sturt University’s Veterinary

Science, Austrália) 18:40-19:15 Aspectos da morfologia espermática na avaliação de touros - Gustavo Eduardo Freneau

(UFG, Goiânia, GO) 19:15-19:30 Apresentação oral de Resumo: IGF-I, leptina e insulina no plasma seminal associadas aos

parâmetros andrológicos durante a puberdade de tourinhos Gir-Leiteiro precoces, criados em regime intensivo [Seminal plasma IGF-I, leptin and insulin and its association with andrologic parameters at puberty of young Gyr-dairy bulls] - R.A.C. Leao, F.A. Souza, J.A.M. Martins, L.L. Emerick

19:30-19:45

, V.R. Vale Filho, V.J. Andrade, P.E.M. Gonçalves, T.G. Leite, G.S. Moura, P.F.B. Pinto, F.A.C. Patrício, F.A. Barbosa, G.P. Moraes Apresentação oral de Resumo: Isolamento e caracterização morfológica de um componente da matrix nuclear (ânulo nuclear) de espermatozoides bovinos [Isolation and morphological characterization of a component of the nuclear matrix (nuclear annulus) from bovine sperm] - M.S. Lemos

19:45-20:30

, P.F.S. Moreira, I.N. Duarte, R. Morandi-Filho, A.S. Moraes, F. Oliveira, M.E. Beletti Mesa redonda

17:30-20:30 Simpósio 5: Reprodução em ovinos - Coordenador: Luis Alberto Oliveira Ribeiro (UFRGS, Porto Alegre, RS)

17:30-18:05 Manejo da ovelha durante o encarneiramento e a parição: novas técnicas para reduzir perdas reprodutivas - Luis Alberto Oliveira Ribeiro (UFRGS, Porto Alegre, RS)

18:05-18:40 Características reprodutivas de carneiros no nordeste do Brasil: parâmetros seminais Marciane da Silva Maia (EMPARN, Natal, RN)

18:40-19:15 Biotecnologias reprodutivas para o melhoramento genético ovino - Alejandro Gibbons (INTA, Argentina)

19:15-19:30 Apresentação oral de Resumo: Identificação das proteínas nos testículos de ovinos Somalis e Santa Inês [Proteins identification in Somalis and Santa Inês testes] - A.M.X. Eloy, N.M.M. Silva, R.V. Valle, F.W.V. Santos, J.R. Furtado


19:30-19:45 Apresentação oral de Resumo: Avaliação da irradiação de calor emitido pela superfície do escroto ovino por termografia [Evaluation of heat radiation emitted from the surface of the scrotum sheep by thermography] - C.A. Cruz Júnior

19:45-20:30

, C.M. Lucci, H. Louvandini, C. McManus Mesa redonda

17:30-20:30 Simpósio 6: Reprodução em animais aquáticos - Coordenador: Sílvio Peixoto (UFRPE, Recife, PE)

17:30-18:05 Biotecnologias na reprodução de camarões marinhos - Sílvio Peixoto (UFRPE, Recife, PE) 18:05-18:40 Importância da avaliação dos parâmetros reprodutivos em peixes nativos - Luis D. Solis

Murgas (UFLA, Lavras, MG) 18:40-19:15 Produção programada e rastreabilidade de larvas e sementes de moluscos em Santa

Catarina - Jaime Fernando Ferreira (UFSC, Florianópolis, SC) 19:15-19:30 Apresentação oral de Resumo: Efeito da técnica de endoscopia sobre os parâmetros

reprodutivos de curimba (Prochilodus lineatus) [Effect of endoscopy technique on the reproductive parameters of curimba (Prochilodus lineatus)] - D.A.J. Paula

19:30-19:45

, E.S. Andrade, M.R. Ferreira, L.D.S. Murgas, F.S.M. Lima, V.O. Felizardo, G.C. Veras Apresentação oral de Resumo: Desenvolvimento embrionário de tambaqui (Colossoma macropomum) [Embryonic development of the tambaqui (Colossoma macropomum)] - L.V Leite

19:45-20:30 , F.C.E. Oliveira, J.T. Lopes, J.P.S. Pinheiro, L.T. Nunes, C.S.B. Salmito-Vanderley

Mesa redonda 17:30-20:30 Simpósio 7: Reprodução em cães (módulo fêmea) - Coordenadora: Lúcia Daniel Machado

da Silva (UECE) 17:30-18:05 O uso de Doppler na reprodução canina e felina - Lúcia Daniel Machado da Silva (UECE,

Fortaleza, CE) 18:05-18:40 Infertilidade em candelas e gatas: avanços recentes - Alain Fontbonne (Ecole Nationale

Vétérinaire d’Alfort, França) 18:40-19:15 O uso de implantes de agonistas de GNRH em candelas e gatas - Alain Fontbonne (Ecole

Nationale Vétérinaire d’Alfort, França) 19:15-19:30 Apresentação oral de Resumo: Identificação e quantificação do VEGF em ovários de

cadelas em anestro e estro [Identification and quantification of VEGF on ovaries of bitches during anestrus and estrus ] - M.V.D. Almeida, H.H. Ortega, N. Salvetti, M.V. Caliari 3,

19:30-19:45

G.R. Valle Apresentação oral de Resumo: Avaliação da viabilidade de blastocistos caninos pós-descongelação [After thawing evaluation of canine blastocysts viability] - C.R.F. Guaitolini, M.O. Taffarel, N.S. Teixeira, M.J. Sudano, M.D. Lopes, F.C. Landim-Alvarenga,

19:45-20:30 M.R. Luz

Mesa redonda

27 de maio de 2011, sexta-feira

09:00-12:00 Assembléia do CBRA (Sala Carlos Pena 1)

14:00-16:30 Plenária 3: Do folículo à transição embrio-fetal e placentação Coordenador: Antônio de Pinho Marques Júnior (UFMG, Belo Horizonte, MG)

14:00-14:35 Placentação e interação materno-fetal - Carlos Eduardo Ambrósio (USP, Pirassununga, SP)

14:35-15:10 Fertilização e estresse no gado de leite - Peter Hansen (University of Florida, USA)

15:10-15:45 Modelos equinos e bovinos para estudo da dinâmica folicular na mulher - (Eduardo Gastal, Southern Illinois University Carbondale, USA)

15:45-16:30 Discussão geral 16:30-17:30 Coffee Break e Sessão de Posters 17:30-20:30 Simpósio 8: Reprodução em equinos - Coordenador: Gustavo Ferrer Carneiro (UFRPE) 17:30-18:05 Folículo pré-ovulatório equino: mudanças circulatórias e predição de ovulação

(Eduardo Gastal, Southern Illinois University Carbondale, USA) 18:05-18:40 Transporte espermático na égua

Sandra Fiala (UFPEL, Pelotas, RS) 18:40-19:15 Conceitos atuais no diagnóstico, nas causas subjacentes e no tratamento da infecção

uterina persistente na égua Irwin K Liu (University of California-Davis, USA)


19:15-19:30 Apresentação oral de Resumo: Grânulo corticais pós-fertilização na espécie equina: um novo conceito [Cortical granules post fertilization in equine specie: a new concept] - G.F. Carneiro

19:30-19:45 , I.K.M. Liu, P.L. Lorenzo

Apresentação oral de Resumo: Comparação da fragmentação do DNA espermático de sêmen congelado de equinos da raça Mangalarga Marchador com relação a outras raças [Comparison between sperm DNA fragmentation in frozen semen from Mangalarga Marchador and others breeds stallions] - M.C. Farrás

19:45-20:30

, H.N. Ferreira, E.G. Fioratti, C.P. Freitas-Dell'Aqua, C. Ramires Neto, M.F.S. Reghini, F.O. Papa, M.A. Alvarenga Mesa redonda

17:30-20:30 Simpósio 9: Reprodução em cães (módulo macho) Coordenadora: Érika Christina S. Oliveira (UFRPE)

17:30-18:05 Castração química de caninos e felinos por meio de injeção intratesticular de gluconato de zinco: quebrando paradigmas - Erika Christina Santos Oliveira (UFRPE, Recife, PE)

18:05-18:40 Infertilidade no cão: avanços recentes - Alain Fontbonne (Ecole Nationale Vétérinaire d’Alfort, França)

18:40-19:15 Inseminação artificial e problemas relacionados à teratospermia em gatos e felines selvagens - Alain Fontbonne (Ecole Nationale Vétérinaire d’Alfort, França)

19:15-19:30 Apresentação oral de Resumo: Efeito da radiação vermelha de baixa intensidade sobre a cinética do espermatozóide canino criopreservado [Effect of low intensity red radiation on the kinetic of cryopreserved dog sperm] - M.F. Brito

19:30-19:45

, T.T.C. Carvalho, M.I.V. Melo, G.R. Valle, L.F.L. Ferreira, J.V.M. Mambrini, M. Henry, B.C. Cruz Apresentação oral de Resumo: Eficiência da associação entre a PGF2α e o feromônio sexual usados previamente à eletroejaculação em cães [Efficiency of the association between PGF2α the sex pheromone used before the electroejaculation in dogs] - I.P. Santos

19:45-20:30 , C.L.G. Ramos, L.G. Ramos, R.F. Oliveira, I.C.N. Cunha

Mesa redonda 17:30-20:30 Simpósio 10: Manejo reprodutivo de vacas

Coordenador:Rômulo José Vieira (FACID, Recife, PE) 17:30-18:05 Transtornos endócrinos e metabólicos na reprodução - Rômulo José Vieira (FACID,

Recife, PE) 18:05-18:40 Ambiente estresse e fertilidade no gado de leite - Peter Hansen (University of Florida, USA)

18:40-19:15 Abordagem diagnóstica e de tratamento da infecção uterina na vaca - Antônio de Pinho Marques Júnior (UFMG, Belo Horizonte, MG)

19:15-19:30 Apresentação oral de Resumo: Software para análise de resultados de inseminação artificial em tempo fixo [Software for analyzing results of timed artificial insemination] - J.L. Costa Junior

19:30-19:45

, J.E.C. Monteiro, D.C. Burgos, S. Oliveira Junior, G.F. Carneiro, C.N. Sant’Anna, A.K.S. Cavalcante Apresentação oral de Resumo: Níveis de RNAm dos fatores de crescimento semelhante a insulina I e II, receptores de IGF e proteínas ligadoras de IGF em folículos ovarianos bovinos [Levels of mRNA for insulin-like growth factors I and II, IGF receptors and IGF binding proteins (IGFBPs) in bovine ovarian follicles] - R.O.D.S. Rossi

19:45-20:30

, A.W.B. Silva, G.L. Vasconcelos, R.P. Ribeiro, E.L. Rebouças, C.C.F. Leitão, J.R.V. Silva Mesa redonda

20:30-20:45 Encerramento do XIX CBRA


Congresso Brasileiro de Reprodução Animal, 19, 2011, Recife, PE, Anais... Belo Horizonte: CBRA, 2011. (CD-ROM). ISSN: 1984-8471.

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Influência da concentração de oxigênio no desenvolvimento embrionário de curimba (Prochilodus lineatus)

Influence of oxygen concentration on embryonic development of curimba (Prochilodus lineatus)

M.R. Ferreira1

E.S. Andrade, DA.J. Paula, V.O. Felizardo , J. Solis, L.D.S. Murgas, A.F.S. de Carvalho, V.F.R. Mansur, G.C. Veras,

Departamento de Medicina Veterinária, Setor de Fisiologia e Farmacologia, Universidade Federal de Lavras, Lavras, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução O desenvolvimento embrionário dos peixes pode ser afetado por diferentes fatores, que alteram consideravelmente as taxas de eclosão. Entre os fatores abióticos estão a temperatura, salinidade e oxigênio. O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência do teor de oxigênio no desenvolvimento embrionário de curimba (Prochilodus lineatus). Material e Métodos Os embriões foram provenientes da estação de piscicultura da Cemig - Itutinga. O reprodutores foram induzidos com extrato bruto de hipófise de catfish, na dose de 0,2 mg/kg. Os gametas foram misturados a seco, misturados em água, e acondicionados em incubadoras verticais. Neste momento foram coletados e encaminhados ao Laboratório de Fisiologia e Farmacologia da UFLA, em sacos plásticos com oxigênio. Posteriormente 10 g de embriões foram transferidos para 6 incubadoras experimentais, com 300 ml de água. Estas incubadoras apresentavam um sistema constante de oxigenação. O oxigênio dissolvido foi verificado a cada hora, durante toda a coleta. Três incubadoras foram manipuladas para manter uma concentração de oxigênio média de 7,81 mg/dl (T1), enquanto as outras foram mantidas com uma concentração de 8,43 mg/dl (T2) de oxigênio dissolvido. Para observação do desenvolvimento embrionário, amostras foram coletadas em intervalos de 1 hora, sendo a primeira coleta 6 horas após a fertilização e a última 13 horas após fertilização. Os embriões foram fixados em formaldeído 1,5% durante 20 minutos e posteriormente colocadas em álcool 70%, para análise e coleta de imagens. Resultados e discussão Após 6 horas de fertilização os embriões apresentaram crescimento celular do pólo animal, com formato de domo, sobre o saco vitelino, porém os embriões submetidos a altos teores de oxigênio já apresentavam constrição da capa vitelina sincicial. Após 7 horas de desenvolvimento os embriões do T1 apresentaram 70% de epibolia, enquanto os embriões do T2 apresentaram 80% de epibolia. Após 9 horas de fertilização, tanto os embriões do grupo T1 quanto do T2 apresentaram-se em forma de gástrula, com diferenciação dorso-ventral. Porém 10 horas pós-fertilização os embriões do grupo T2 apresentavam-se como neurula, com aparecimento de vesícula óptica, enquanto os embriões do T1apresentavam somente iniciando a formação da neurula. Após 12 horas de fertilização no grupo T1 era visto aumento do número de somitos e aparecimento de vesícula óptica, enquanto no grupo T2 foram encontrados a vesícula de Kupffer, 100% de formação de vesícula óptica e cauda já formada. Após 13 horas pós-fertilização, os embriões do grupo T1 a cauda solta, enquanto os embriões do T2 apresentavam o desaparecimento da vesícula de Kupffer, cauda solta e uma pequena saliência da região cranial, indicando o início da formação do telencéfalo. Assim mesmo uma pequena diferença da concentração de oxigênio dissolvido na água, pode alterar as taxas de desenvolvimento embrionário, diminuindo as taxas de crescimento e atrasando a formação da larva. Palavras-chave: fatores abióticos, ontogênese embrionária, peixes teleósteos. Agradecimentos: FAPEMIG, CnPQ, CAPES.



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Determinação do sexo em bagre americano (Ictalurus punctatus) utilizando endoscopia Determination of sex in catfish (Ictalurus punctatus) using endoscopy

V.O. Felizardo

D.A.J. Paula¹, M.R. Ferreira¹ ¹, F.S.M. Lima¹, L.D.S. Murgas¹, A.C. Costa², B.O. Mattos²,

¹Departamento de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Lavras, Lavras, MG; ²Departamento de Zootecnia

Universidade Federal de Lavras, Lavras, MG. E-mail: [email protected]

Introdução A identificação precoce do sexo em peixes é um procedimento importante para o desenvolvimento de estratégias que facilitem o manejo no plantel de reprodutores. Aliado a essa sexagem precoce, a visualização das gônadas para determinar a maturação gonadal é de suma importância para o início dos protocolos de indução hormonal (Hurvitz et al., 2007). Segundo Furuya e Ribeiro (1998), o bagre americano apresenta uma série de caracteres desejáveis para o cultivo, como: normalmente não se reproduzem nos viveiros, apresentam facilidades de desova pelo processo artificial, aceitam facilmente alimentação artificial, adaptam-se a variações bruscas de temperatura e aos vários sistemas de cultivo empregados na sua criação. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi validar o uso do endoscópio rígido via poro urogenital para determinação do sexo do bagre americano (Ictalurus punctatus). Material e Métodos O equipamento utilizado foi um endoscópio Multi-Purpose Rigid™ 30o com 2,7 mm de diâmetro e 18 cm de comprimento. Foram examinados 60 peixes com peso variando entre 86 e 1032 gramas nos quais foi introduzido o endoscópio via poro genital e logo em seguida eutanaziados para confirmação do sexo. Amostras de tecido gonadal foram coletadas para avaliação histológica do estádio de maturação e confirmação do sexo. Resultados e Discussão Os resultados mostraram que dos 60 peixes examinados, 57 tiveram confirmação positiva do sexo via endoscopia, o que corresponde a 95% da amostra. Os resultados demonstram que é viável a utilização da endoscopia para determinação do sexo em bagre americano via poro genital. Referências bibliográficas Furuya WM, Ribeiro RP. Criação de espécies nativas e criação de espécies exóticas. Maringá: FADEC-UEM, 1998. 92p. Hurvitz A, Jackson K, Degani G, Levavi-Sivan B. Use of endoscopy for gender and ovarian stage determinations in Russian sturgeon (Acipenser gueldenstaedtii) grown in aquaculture. Aquaculture, v.270, p.158-166, 2007. Palavras-chave: gônadas, peixe, sexagem. Keywords: fish, gonads, sexing. Financiado pela Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG).



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Efeito da técnica de endoscopia sobre os parâmetros reprodutivos de curimba (Prochilodus lineatus)

Effect of endoscopy technique on the reproductive parameters of curimba (Prochilodus lineatus)

D.A.J. PaulaV.O. Felizardo2, G.C. Veras2

1, E.S. Andrade2,4, M.R. Ferreira2, L.D.S. Murgas2, F.S.M. Lima3,

1Departamento de Zootecnia, Universidade Federal de Lavras, Lavras, MG; 2Departamento de Medicina Veterinária,

Universidade Federal de Lavras, Lavras, MG; 3IBAMA; 4E-mail: [email protected]

Introdução A ausência de dimorfismo sexual em várias espécies de peixes faz com que a sexagem e a definição da maturação gonadal se tornem tarefas complicadas (Swenson et al., 2007). Assim o trabalho objetivou viabilizar a utilização do endoscópio rígido, via papila urogenital, para sexagem de reprodutores de curimba, portanto, determinar se a técnica inibe a reprodução artificial, influenciando os parâmetros reprodutivos.

Material e Métodos O equipamento utilizado foi um endoscópio Multi-Purpose RigideTM 30o com 2,7mm de diâmetro e 18 cm de comprimento. Foram utilizados oito fêmeas e oito machos de curimba (Prochilodus lineatus) nos quais foi introduzido o endoscópio via poro urogenital para identificação das gônadas, em seguida foi realizada a indução hormonal através da utilização do extrato bruto de hipófise de carpa (EBHC), onde nas fêmeas foram utilizadas duas doses do hormônio, a prévia e a definitiva (0,4 e 4,0mg/kg de peixe respectivamente), e nos machos uma única dose de 4,0mg/kg de peixe. Nos machos os parâmetros avaliados foram: motilidade e volume espermáticos, duração da motilidade espermática, concentração de espermatozóides e a morfologia espermática. Nas fêmeas, amostras de ovócitos foram coletadas para análise da posição da vesícula germinativa (núcleo), do diâmetro dos ovócitos e do peso da desova. Resultados e Discussão Um número elevado de animais respondeu eficientemente a indução hormonal após a realização da técnica, sendo que 100% dos machos espermiaram e 75% das fêmeas desovaram. A concentração espermática média dos reprodutores neste trabalho foi de 75,81x109 ± 35,59 espermatozóides/mL, os resultados para a taxa de motilidade de todos os animais foram de 100% e a média do volume observado foi de 1,16 ± 0,38 mL. Os valores médios da duração da motilidade encontrados foram de 139 ± 117 segundos, a morfologia espermática apresentou médias de 19,25 ± 6,11% para patologias maiores, 7,62 ± 1,4% para patologias menores e 26,87 ± 5,79% para patologias totais. Nas fêmeas, o peso da desova e o diâmetro dos ovócitos foram em média 47,0g ± 67,05 e 1680 ± 124 μm respectivamente e a posição da vesícula germinativa, variou com o reprodutor, mas foi possível observar uma maior quantidade de ovócitos com vesícula germinativa na posição periférica (60% das amostras). Os resultados mostram que a técnica de endoscopia pode ser utilizada na sexagem de curimba, por não afetar os parâmetros reprodutivos, e estes, foram próximos aos encontrados na literatura para a espécie.

Referências bibliográficas Swenson EA et al. Validation of endoscopy for determination of maturity in small salmonids and sex of mature individuals. Trans Am Fish Soc, v.4, n.136, p.994-998, 2007.

Palavras-chave: indução hormonal, peixes teleósteos, reprodução. Keywords: hormonal induction, reproduction, teleost fishes. Financiado pela Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais – FAPEMIG.



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Caracterização morfométrica da cabeça de espermatozóides de pirapitinga (Piaractus brachypomus)

Morphometric characterization of the sperm head of pirapitinga

M.A.P. Melo1, S.R. Medeiros, L.T. Leite, J.S. Leite, C.S.B. Salmito-Vanderley, J.F. Nunes

Universidade Estadual do Ceará, Núcleo Integrado de Biotecnologia, Fortaleza, CE. 1E-mail: [email protected]

Introdução A caracterização seminal tem grande importância na biotecnologia da reprodução animal. A avaliação das dimensões e conformação geral dos espermatozóides se faz necessária, uma vez que já foi demonstrado a morfologia seminal é um indicador importante da fertilidade em mamíferos. Ultimamente, a morfologia espermática tem sido avaliada de forma objetiva por análise computadorizada. O objetivo do presente estudo foi observar parâmetros de tamanho da cabeça de espermatozóides de Pirapitinga (Pyaractus brachypomus). Material e Métodos Esse trabalho foi submetido e aprovado pelo CEUA da Universidade Estadual do Ceará (Comitê de Ética para o uso de animais) com protocolo número 09230730 2. Para o experimento foram utilizados 30 machos de Pirapitinga do plantel do Centro de Pesquisas em Aquicultura do Departamento Nacional de Obras Contras as Secas (DNOCS), em Pentecoste, a 90km de Fortaleza-CE. Esses animais foram submetidos à hipofisação 14h antes da coleta do sêmen. Para realização das coletas de sêmen os animais eram anestesiados com eugenol. Após as coletas, as amostras que não estavam contaminadas e apresentavam mais de 80% de motilidade subjetiva pós-ativação com água do tanque foram utilizadas para o experimento. As amostras de sêmen de cada um dos 30 indivíduos foram fixadas em uma solução formol-salina 1% e transportadas ao laboratório do Núcleo Integrado de Biotecnologia (NIB) em temperatura ambiente para análises de morfometria espermática de forma objetiva com o módulo ASMA do SCA. Utilizando 2µl dessas amostras foram confeccionados esfregaços que foram corados com Panótico de Hemograma mergulhando verticalmente, cada uma das lâminas, 2 vezes em cada uma das três substâncias do kit. Após a secagem, as lâminas eram seladas com lamínula. Utilizando o módulo de morfometria do SCA, ASMA, foi possível observar os valores micrométricos da largura, comprimento, área e perímetro da cabeça de 200 espermatozóides por indivíduo. Resultados e Discussão O módulo de morfometria do SCA apresentou grande dificuldade para digitalização dos espermatozóides de pirapitinga. A cabeça dos espermatozóides apresentaram formato oval, sem presença de acrossoma, com valores da cabeça de largura de 2,39 ± 0,04 µm, comprimento de 3,48±0,14 µm, área de 7,313 ± 0,386 µm2 e perímetro de 9,724 ± 0,332 mm. Não foi observado grande variação entre os animais. Tuset et al., (2008), utilizando sêmen de truta arco-íris corados com Hemacolor observaram uma largura de 2.67 ± 0.17 µm, comprimento de 3.22 ± 0,13µm, área de 7.25 ± 0.59 mm2 e perímetro de 9.99 ± 0.39 mm, sendo esses resultados bem similares ao do nosso estudo. Já Asturiano et al, (2008), utilizando contraste de fase negativo e observando os espermatozóides de peixe de água salgada (enguia européia), observaram apenas área e perímetro obtendo 5.42 ± 0.01µm2 (área) e 14.97 ± 0.06 µm (perímetro) da cabeça dos espermatozóides. Em conclusão, a técnica aplicada nesse estudo pode ser utilizada para caracterização da qualidade seminal para escolha de reprodutores e em processo de manipulação de gametas na piscicultura. Referências bibliográficas Tuset VM. Comparison of three staining techniques for the morphometric study of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) spermatozoa. Theriogenology, p.1033-1038. 2008.

Sumário Indice de autores Sumário Indice de autores


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Desenvolvimento embrionário de tambaqui (Colossoma macropomum) Embryonic development of the tambaqui (Colossoma macropomum)

L.V. Leite

, F.C.E. Oliveira, J.T. Lopes, J.P.S. Pinheiro, L.T. Nunes, C.S.B. Salmito-Vanderley

Universidade Estadual do Ceará, Fortaleza, CE. E-mail: [email protected]

Introdução A descrição do desenvolvimento embrionário de uma espécie é muito importante para: o reconhecimento de seus embriões em ambientes naturais; a caracterização do padrão normal de desenvolvimento embrionário; além dos conhecimentos sobre biologia do desenvolvimento da espécie e taxonomia (Nakatani et al., 2001). O tambaqui (Colossoma macropomum), espécie de peixe da família Characidae, é o segundo maior peixe da bacia amazônica, sendo considerado de alto valor comercial e ecológico, o que gera grande interesse na pesquisa tanto para a sua produção em cativeiro quanto para a sua conservação. Diante disso, este trabalho teve como objetivo descrever o desenvolvimento embrionário do tambaqui desde a fertilização até a eclosão. Material e Métodos Foram selecionados reprodutores de tambaqui (C. macropomun) pertencentes ao Departamento Nacional de Obras Contra as Secas (DNOCS) de Pentecoste-CE, em plenas condições reprodutivas. Os animais foram induzidos homonalmente com Estrato Pituitário de Carpa (EPC) para induzir a desova e espermiação. Após a coleta dos gametas, o sêmen foi misturado ás ovas incialmente sem nenhum contato com água, e posteriormente foram hidratados com água tanque e colocados em incubadoras cônicas. O desenvolvimento embrionário foi acompanhado através de amostras de ovos retirados das incubadoras e observados em estereomicroscópio até o momento da eclosão. Os embriões foram classificados quanto aos estágios: 2 blastômeros; 4 a 16 blastômeros; 16 a 32 blastômeros; blástula; gástrula; fechamento do blastóporo; liberação da calda; e eclosão (Boçato et al., 2004). Resultados e Discussão A temperatura da água das incubadoras permaneceu em torno de 27,5°C. Nas primeiras observações foi possível visualizar as primeiras segmentações após a incubação: embriões de 2 blastômeros (20 minutos); 4 a 16 blastômeros (30 minutos); 16 a 36 blastômeros (40 minutos), caracterizando a fase em que as segmentações são verticais e o embrião possui uma única camada de células; blástula (1 hora); gástrula (4 horas); e fechamento do blastóporo (6 horas). A partir desta fase já era possível diferenciar o lado cefálico e caudal. O esboço da vesícula óptica e as segmentações dos somitos foram visualizados 8 horas após a incubação. Embriões com caudas destacadas da vesícula vitelínica (10 horas) já apresentavam movimentação cada vez mais intensa, além disso, a capsula do ovo apresentava-se cada vez mais flácida, e a eclosão ocorreu em torno de 13 horas após a incubação. O desenvolvimento embrionário apresentou segmentação meroblástica discoidal característica de ovócitos telolécitos (Salmito-Vanderley & Santana, 2010), e o período da incubação até a eclosão das larvas de tambaqui já era o esperado nestas condições de temperatura. Referências bibliográficas Boçato FL, Bazzoli n, Sato Y. Embriogenesis and larval ontogeny of the “piau-gordua”, after induced spawring. Rev Bras Zool, v.21, p.117-122, 2004 Salmito-Vanderley CSB, Santana ICH. Histologia e embriologia animal comparada. Fortaleza: Editora RDS, 2010. 159p. Palavras-chave: embrião, peixe, segmentações. Keywords: embryo, fish, segmentation.



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Qualidade do espermatóforo do camarão Litopenaeus vannamei em um sistema de maturação comercial

Spermatophore quality of shrimp Litopenaeus vannamei in a commercial maturation system

E.F. Silva, A.M. Batista, N. Calazans, M. Soares, T. Chaves, B. Valle, R. Coutinho, R. Soares, M. Guerra, S. Peixoto

1

Universidade Federal Rural de Pernambuco, Laboratório de Tecnologia em Aquicultura, Recife, PE. 1E-mail: [email protected]

Introdução A maioria dos estudos com reprodução em cativeiro de peneídeos é direcionado para a maturação de fêmeas. Entretanto, problemas com a reprodução também são atribuídos aos machos, que são susceptíveis a problemas de fertilidade comprometendo a produção de pós-larvas (Alfaro, 1993). Nesse contexto, objetivou-se com o presente estudo avaliar a qualidade do espermatóforo do camarão Litopenaeus vannamei em um sistema de maturação comercial. Material e Métodos A qualidade do espermatóforo foi determinada através do peso do esparmatóforo, contagem e viabilidade dos espermatozóides de 15 camarões entrando no sistema de maturação (dia 0) e 15 com 93 dias de maturação. Os animais da Maricultura Netuno S/A foram mantidos em tanques de 15 toneladas e estocados na proporção de um macho para cada fêmea. A alimentação consistiu de alimento fresco (peixe, lula, e biomassa de Artemia) e ração comercial, ofertados sete vezes ao dia alternadamente. Cada macho foi pesado individualmente e um espermatóforo foi extrusado manualmente e pesado. O espermatóforo foi homogeneizado em 1 mL de água marinha artificial livre de cálcio e a contagem dos espermatozóides determinada. A viabilidade dos espermatozóides foi determinada através da coloração com Iodeto de Propídio (IP) e Diacetato de Carboxifluoresceína (DCF) descrito por Coleto et al. (2002), modificado. Os espermatozóides foram classificados com membrana intacta, quando corados em verde, e membrana danificada, quando corados em vermelho. Resultados e Discussão O peso dos animais com 93 dias de maturação (37,4±3,0 g) foi significativamente superior aos animais entrando no sistema (31,1±3,8 g). O peso do espermatóforo não diferiu entre os lotes analisados, com valores de 0,23 ±0,06 g (dia 0) a 0,27±0,05 g (dia 93). Essa mesma tendência foi observada para contagem espermática, com valores de 326,8±172,5x104 cél/mL (dia 0) e 269,3±160,8x104 cél/mL (dia 93). Entretanto, para viabilidade do espermatozóide, os animais com 93 dias apresentaram uma maior concentração de células intactas (80,8±15,2%) comparados aos animais recém introduzidos no sistema de maturação (61,0±7,9%). Referências bibliográficas Alfaro JM. Reproductive quality evaluation of male Penaeus stylirostris from a grow-out pond. J World Aquacult Soc, v.24, p.6-11, 1993. Coleto ZF, Guerra MMP, Batista AM. Avaliação do sêmen congelado de caprinos com drogas fluorescentes. Rev Bras Med Vet, v.24, p.101-104, 2002. Palavras-chave: camarões peneídeos, maturação, pós-larvas. Keywords: maturation, penaeid shrimp, postlarvae.



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Fotoperíodos no desenvolvimento gonadal de alevinos de tilápia do Nilo (Photoperiods in gonadal development of Nilo tilápia fingerlings)

V.R. Mansur1, G.C. Veras1,3

, L.D.S. Murgas1, M.A.N. Pereira1, T.N. Ribeiro1, M.R. Ferreira1, E.S. Andrade2, D.A.J. Paula2

1Departamento de Medicina Veterinária da Universidade Federal de Lavras, Lavras, MG; 2Departamento de Zootecnia da Universidade Federal de Lavras, MG.

3E-mail: [email protected] Introdução Por um longo período têm-se estudado a influência dos fatores ambientais sobre e a reprodução e o crescimento dos peixes. Dentre estes fatores, o fotoperíodo atua como um sincronizador do ritmo endógeno, influenciando sobre a atividade locomotora, o crescimento e desenvolvimento gonadal de peixes teleósteos (Rad et al., 2006).

Material e Métodos Utilizou-se delineamento inteiramente casualizado com cinco fotoperíodos (0L:24E; 6L:18E; 12L:12E; 18L:6E; 24L:0E) e quatro repetições, sendo o aquário a unidade experimental. Foram utilizados 160 alevinos de tilápia revertidos, com peso e comprimento iniciais de 3,21 ± 0,05 g; 4,35 ± 0,07 cm, respectivamente, distribuídos em 20 aquários, contendo 20 litros de água, em sistema de recirculação; temperatura controlada em 27 oC e densidade de oito peixes por aquário. Os peixes foram alimentados duas vezes ao dia, com ração extrusada contendo 40% de proteína bruta. Ao final de 75 dias de experimento, foi avaliada a atividade locomotora, através de fotocélulas, e o desenvolvimento goanadal dos animais por meio do índice gonadosomático (IGS). Os dados obtidos de cada aquário, dos respectivos fotoperíodos, foram submetidas à análise de variância a 5% de significância e, posteriormente, realizou-se o teste de Tukey. Resultados e Discussão Os animais submetidos ao fotoperíodo de 0L:24E apresentaram os maiores índices gonadossomáticos e os menores registros de atividade locomotora (P < 0,05). Por outro lado, alevinos submetidos aos fotoperíodos mais longos apresentaram maiores registros de atividade locomotora e menor desenvolvimento gonadal. Provavelmente, a energia que seria utilizada para o crescimento das gônadas foi direcionada para o crescimento somático destes peixes submetidos aos fotoperíodos longos. Por outro lado, os peixes submetidos aos tratamentos 0L:24E e 6L:18E, como apresentaram menor atividade, redirecionaram a energia para o desenvolvimento das gônadas.

Referências bibliográficas Rad F, Bozaoğlu S, Gözükara S E, Karahan A, Kurt G. Effects of different long-day photoperiods on somatic growth and gonadal development in Nile tilapia (Oreochromis niloticus L.). Aquaculture, v.255, p.292-300, 2006. Palavras-chave: atividade locomotora, índice gonadossomático, Oreochromis niloticus, peixe. Keywords: fish, gonadossomatic index, locomotor activity, Oreochromis niloticus. Financiado pela Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG).



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Efeito de um agente inibidor da enzima conversora de angiotensina na taxa de ovulação em ratas pré-púberes estimuladas por eCG e hCG

Effect of angiotensin converting enzyme inhibitor on ovulation rate in prepubertal rats stimulated by eCG and hCG

T.S. Câmara

G.E. Nunes Viana3, A.P. Raposo Costa3

1,4, C.K.N. Freitas1, C.B. Mendes1, L.C.S. Feitosa2, V.P. Fernandes Neto2,

1Acadêmicos de Medicina Veterinária da Universidade Federal do Piauí (UFPI), Teresina, PI; 2Pós-graduando em Ciência

Animal (UFPI), Teresina, PI; 3Departamento de Morfofisiologia da UFPI, Teresina, PI. 4E-mail: [email protected]

Introdução A existência de Sistemas renina-angiotensina (SRA) localizados em vários órgãos, inclusive nos ovários, tem sido demonstrada nos últimos anos, onde foram descritos os diversos componentes do SRA (COSTA et al., 2003). Objetivou-se com esse trabalho, avaliar o efeito de um inibidor da ECA (Enalapril) na taxa de ovulação e na produção de oócitos induzida por gonadotrofina coriônica eqüina (eCG) e gonadotrofina coriônica humana (hCG) em ratas pré-púberes. Material e Métodos Foram utilizadas ratas Wistar pré-púberes. Os animais foram mantidos em regime de 12 horas de luz e 12 horas de escuridão com livre acesso à água e ração. As ratas foram divididas aleatoriamente em quatro grupos, com 8 animais cada, submetidas a diferentes tratamentos durante três dias. G1: D1 (10UI de eCG + solução salina), D2 (solução salina) e D3 (20UI de hCG + solução salina). G2: D1 (20UI de eCG + solução salina), D2 (solução salina) e D3 (20UI de hCG + solução salina). G3: D1 (10 UI de eCG + maleato de enalapril (5mg/ml)), D2 (enalapril) e D3 (20UI de hCG + enalapril). G4: D1 (20UI de eCG + enalapril), D2 (enalapril) e D3 (20UI de hCG + enalapril). No 4º dia os animais foram eutanasiados e em seguida foram retiradas as tubas uterinas e ovários. Os ovários foram pesados e avaliados para contagem de corpos lúteos. As tubas uterinas foram fixadas em lâminas para contagem dos oócitos. Oito ovários foram selecionados aleatoriamente, processados para análise histológica e contagem de folículos antrais. Os resultados foram submetidos à análise de variância e as médias dos grupos comparadas pelo teste de Student Newman Keuls (SNK).

Resultados e Discussão O número de oócitos (média ± EPM) foram: 10,00 ± 1,952; 14,88 ± 2,997; 9,286 ± 1,728 e 22,63 ± 3,306, para os grupos I, II, III e IV respectivamente. Houve diferença estatística significava (P < 0,05) para número de oócitos nos animais tratados com enalapril + ECG (G4-22,63 ± 3,30). Enquanto o efeito do tratamento com enalapril associado a eCG, sobre o número de corpos lúteos, não apresentou diferença estatística significante(P > 0,05) entre os grupos estudados, ou seja, no grupo G3 e G4 a ação do enalapril, respectivamente, não teve efeito sobre número de corpos lúteos, nem apresentou diferença representativa na ovulação. De acordo com os resultados observados, o uso de inibidores da ECA, incrementou a taxa de ovulação em ratas estimuladas com 20UI de eCG.

Referências bibliográficas Costa AP, Fagundes-Moura CR, Pereira VM, Silva LF, Vieira MA, Santos RA, Dos Reis AM. Angiotensin-(1-7): a novel peptide in the ovary. Endocrinology, v.144, n.5, p.1942-1948, 2003. Palavras-chave: inibidor da ECA, oócito, ovulação, sistema renina-angiotensina. Keywords: ACE inhibitor, oocyte ovulation, renin-angiotensin system.



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Resposta hormonal de ratas à aplicação oral do extrato hidroalcoólico da vargem de faveira (Parkia platycephala Benth)

Hormonal response of rats to oral administration of hydroalcoholic extract of meadow of field bean (Parkia platycephala Benth)

Y.N.T. CarvalhoM.S. Carneiro, I. M.M. Nunes, I.M.R. Nascimento, A. Sousa Júnior, J.A.T. Souza, L.H.C.M.

Mota, I.O.T. Souza, G.E.N. Viana

1, H.S. Correia, M.A. Castelo Branco, J.M. Frazão Sobrinho, A.P.R. Costa,

Universidade Federal do Piauí, Teresina, PI. 1E-mail: [email protected]

Introdução: Estudos recentes têm demonstrado os efeitos benéficos dos fitoestrógenos na prevenção de várias doenças e principalmente, os efeitos benéficos em pacientes na pós–menopausa, no sentido de reduzir os sintomas e prevenir as doenças decorrentes da síndrome de climatério (Barnes, 1998). Foi observada perda de embriões no período de pré–implantação e atividade estrogênica em extrato de Maytenus ilicifolia Mart administrada em camundongas (Rao et al.,1988). Dentre as famílias estudadas sob o ponto de vista terapêutico incluem-se também a família Fabaceae, constituída por uma variedade de plantas do gênero Parkia. Assim sendo objetivou-se estudar a Resposta hormonal de ratas à aplicação oral do extrato hidroalcoólico da vargem de faveira (Parkia platycephala Benth). Material e métodos As vagens de faveira foram desidratadas em estufa com circulação de ar a 45±1°C e em seguida trituradas em moinho elétrico. O material foi submetido ao processo de maceração com etanol a 70% e posteriormente concentrado em rotavapor a 50°C. Foram utilizadas 32 ratas Wistar adultas, que após serem castradas (ovarictomiazadas) foram mantidas em repouso por 30 dias, tempo necessário a involução uterina. Os animais foram divididos em quatro grupos de oito animais cada e submetidos a tratamentos por quatro dias conforme distribuição a seguir: TI (óleo de milho + solução salina), TII (estradiol 17 β + solução salina), TIII (estradiol 17 β + extrato da vagem), TIV (extrato da vagem + óleo de milho). No 5º dia, as ratas foram sacrificadas, e os úteros retirados e pesados. Os resultados de peso uterino foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey. O nível de significância adotado foi 95% de probabilidade (p < 0,05).

Resultados e Discussão Os pesos (g/%) dos úteros nos tratamentos I, II, III, IV apresentaram médias 77,73 + 9, 13; 492,0 + 60,83; 500,8 + 77,41; 103,4 + 16,97 respectivamente. Ao ser feita a comparação das médias entre os tratamentos I e IV, não se observou diferença significativa entre as mesmas, indicando falta de atividade estrogênica no extrato. O mesmo resultado foi obtido ao ser feita a comparação das medias dos tratamentos II e III, indicando que o extrato não inibiu nem potencializou o efeito do estrógeno, revelando falta de atividade antiestrogênica e confirmando a ausência de atividade estrogênica. Desta forma, o extrato da planta não apresenta ação própria, nem interfere na ação do hormônio no útero das ratas. Avaliando–se a qualidade do experimento, verificou–se que o peso uterino das ratas tratadas com estrógeno foi significativamente superior ao das tratadas com salina (P < 0,05), indicando que o hormônio utilizado possui atividade satisfatória, de acordo com a metodologia utilizada no experimento. Referências bibliográficas Barnes S. Evolution of the benefits of soy isoflavonas. J Soc Exp Biol Med, v.217, p.386-392, 1998. Rao MV. Effect of alcoholic extract of Solanum xanthocarpum seeds in adult male rats. Ind J Exp Biol, v.98, 26p, 1988. Palavras-chave: estrógeno, fitoestrógeno, parkia platycephala benth. Keywords: estrogen, phytoestrogens, parkia platycephala benth.


http://pt.wikipedia.org/wiki/Fabaceae�


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Eficiência reprodutiva de coelhas (Oryctolagus cuniculus) suplementadas com geleia real in natura

Reproductive performance of rabbits (Oryctolagus cuniculus) supplemented with in natura royal jelly

D.O. SouzaR.L.A. Vieira, M.O. Ribeiro

, A.L.A. Santana, L.P. Barbosa¹, P.A. Dutra, B.M. Cardoso Neto, C.S. Aguiar,

Universidade Federal do Recôncavo da Bahia, Cruz das Almas, BA.

¹E-mail: [email protected] Introdução O uso da geleia real tem aumentado significativamente o interesse de pesquisadores, dada a constatação das propriedades medicinais e nutritivas presentes nesse produto (Lengler, 2005). A geleia real vem sendo estudada a fim de elucidar seus efeitos na fisiologia reprodutiva de machos e de fêmeas. Assim, objetivou-se avaliar a eficiência reprodutiva de coelhas (Oryctolagus cuniculus) suplementadas com geleia real in natura por via oral. Material e Métodos Trinta e seis fêmeas pós-desmama foram distribuídas em quatro grupos (G) (n = 9), sendo: G1 fornecimento de água destilada; G2, G3 e G4, fornecimento de 10, 20 e 40 mg de geleia real in natura, administrada diariamente por via oral. Avaliou-se a taxa de gestação a primeira e segunda cobertura, prolificidade, mortalidade, peso da ninhada e peso médio individual dos láparos ao primeiro e segundo parto. Para parâmetros quantitativos utilizou-se análise de variância pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade e para os parâmetros qualitativos, usou-se a metodologia de modelos lineares generalizados, com distribuição binomial. Resultados e Discussão Foi encontrada diferença (P<0,05) para mortalidade ao primeiro e segundo parto. O G3 apresentou média de 1,7% ao primeiro parto enquanto os demais grupos apresentaram 27,1% (G1), 10,4% (G2) e 35,5% (G4). Espíndola et al. (2007) registrou média de 8% de láparos mortos ao parto. Os G2 e G3 apresentaram menores taxas de mortalidade ao segundo parto (6,5% e 7,8%, respectivamente) e o G1 e G4 apresentaram 20 e 40%, respectivamente. Os demais parâmetros não apresentaram diferenças significativas (P>0,05). A média da taxa de gestação entre os grupos foi de 75,4 e 94,1% ao primeiro e segundo parto, respectivamente. A média para prolificidade foi de 6 láparos nascidos ao primeiro parto e de 7 láparos nascidos ao segundo parto. As ninhadas do primeiro parto apresentaram uma média de peso de 350g e do segundo parto uma média de 384g e, avaliando as médias de peso médio individual dos láparos, obteve-se 60g para o primeiro e segundo parto. A suplementação via oral diária nas doses de 10 e 20 mg reduziu a mortalidade de láparos, tanto ao primeiro quanto ao segundo parto. Referências bibliográficas Espíndola GB, Cabral GH, Guerreiro MEF et al. Parâmetros reprodutivos e desenvolvimento ponderal dos láparos das raças Nova Zelândia e Califórnia no Brasil. Rev Caatinga, v.20, n.1, p.1-4, 2007. Lengler S. Produtos das abelhas na saúde humana. Rev Apic Dep Zootec, p.1-9, 2005.

Palavras-chave: abelha, coelho, mortalidade. Keywords: bee, mortality, rabbit.



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Infecção experimental de T. foetus em fêmea murina BALB/c Experimental infection of T.foetus in female murine BALB c

V.L.T. Jesus

1,4, R.C.G., Pereira2, C. Costa3, J.E. Trés1

1Departamento de Reprodução Animal, UFRRJ, Seropédica, RJ; 2 Curso de Pós-Graduação em Ciência Animal, UENF, Campos dos Goytacazes, RJ.

3Curso de Mestrado Saúde Publica, Fiocruz, Rio de Janeiro, RJ. 4E-mail: [email protected]

Introdução A linhagem de murino Balb/c é considerada a mais sensível ao T. foetus, estabelecendo uma infecção persistente e mimetiza lesões similares as descritas na vaca (Monteavaro et al. 2008; Barbieto, 2008), por isto considerado o modelo experimental para estudo da Tricomonose genital bovina. O objetivo deste estudo foi detectar as principais reações inflamatórias vaginais em fêmeas Balb/c infectadas e detectar a presença de T. foetus no trato genital feminino. Material e Métodos Foram formados dois grupos: A: com 25 fêmeas infectadas, as quais receberam dois inóculos de 2 x 105 de T. foetus, por via intra-vaginal, com intervalo de 24 horas entre elas e o grupo B: controle com sete fêmeas. Estas fêmeas tinham a idade variando de 24 a 30 semanas mantidas em gaiolas, com fornecimento de água e ração comercial ad libitum. A cada 24 horas foram realizadas lavagens vaginais com solução PBS durante 10 dias consecutivos, examinado à microscopia óptica direta, a procura do protozoário. Foi realizado o esfregaço, corado pelo Panótico, para detectar o processo inflamatório vaginal. Resultados e Discussão Do grupo A: 5/25 fêmeas (25,0%) permaneceram infectadas durante o experimento. A taxa de infecção foi inferior a 38,0% descrita por Monteavaro et al. (2008), provavelmente devido a faixa etária superior a 10 semanas, interferiu na infecção. Quanto à reação inflamatória vaginal, houve uma persistência da infecção, no grupo A com 49,01% de polimorfonucleares, não diferiu do grupo B (p > 0,05). Portanto as fêmeas Balb/c, demonstraram uma infecção persistente ao T. foetus, mesmo não isolando o protozoário de todos os animais infectados. Referências bibliográficas Barbeito C,Woudwyka M, Cacciato C et al. Tritrichomonas foetus: Experimental infection in pregnant BALB/c mice. Exp Parasitol, v.120, p.156-160, 2008. Monteavaro CE, Soto P, Gimeno EJ et al. Histological and lectin binding changes in the genital tract of mice infected with Tritrichomonas foetus. J Comp Pathol, v.138, p.40-45, 2008. Palavras-chave: citologia, infecção, vagina. Keywords: cytology, infection, vagina.


http://www.sciencedirect.com/science/journal/00144894�


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Efeito da suplementação crônica de sulfato de zinco e vitamina E sobre a morfometria da cauda do epidídimo

Effect of chronic supplementation of zinc sulphate and vitamin E on the epididymal cauda´s morphometry

M.J. Oliveira NetoS.L.P. Matta, M.M. Neves1

, T.P. Menezes, A.T.C. Silva, M.O. Santos, M.K. Balarini,

Lab. Biologia Estrutural, Depto Biologia Geral, Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução O epidídimo é um importante local de maturação espermática, sendo a região da cauda responsável pela estocagem dos espermatozóides maduros (Robaire et al., 2006). Considerando-se que o zinco é um importante cofator para enzimas antioxidantes e a vitamina E também atua como antioxidante, este trabalho objetivou avaliar o efeito desta suplementação sobre a morfometria da cauda do epidídimo. Material e Métodos Utilizaram-se ratos Wistar (n = 56) divididos em 7 grupos (G; n = 8): G1 (Controle) recebeu água de beber sem sulfato de zinco (ZnSO4); G2, G3 e G4 receberam, respectivamente, 5, 10 e 20mg de ZnSO4 diluídos nesta água; G5, G6 e G7 receberam as respectivas quantidades de ZnSO4 mais 5mg de vitamina E, semanalmente por oito semanas. A eutanásia ocorreu no 57º dia e coletou-se o epidídimo esquerdo para se determinar o acúmulo de zinco, por espectrofotometria de emissão de plasma, e o direito para histologia, obtendo-se um fragmento da cauda/animal. Este foi fixado em Karnovsky, processado e incluído em resina. Imagens microscópicas dos cortes histológicos (10 campos/corte; 100X) foram analisadas no software Image Pro Plus 4.5, mensurando-se altura de epitélio e diâmetros luminal e tubular. Os dados foram submetidos à ANOVA e ao teste de Student-Newman-Keuls a 5%, usando o programa Sigma STAT 5. Resultados e Discussão Não houve diferença entre os grupos quanto ao acúmulo de zinco no órgão (P > 0,05), mas houve aumento nos diâmetros tubular e luminal e diminuição da altura epitelial em G2 (Tab. 1; P < 0,05). A diminuição da altura epitelial pode ter ocorrido pelo aumento do diâmetro luminal, que se refletiu no diâmetro tubular. O aumento do fluido luminal e produção espermática, observada em análises testiculares ainda não publicadas, podem ter influenciado essas modificações. Pode-se concluir que a suplementação apenas de 5 mg de ZnSO4 causou alterações na morfometria da cauda epididimária. Tabela 1. Média e desvio-padrão de altura de epitélio (AE; µm), diâmetro luminal (DL; µm) e diâmetro tubular (DT; µm) da cauda do epidídimo de ratos suplementados com sulfato de zinco e vitamina E.

G1 G2 G3 G4 G5 G6 G7 AE 27 ± 2,2b 24 ± 1,4a 26 ± 2,8b 24 ± 1,8b 25 ± 1,5b 27 ± 1,9b 26 ± 1,4b

DL 285 ± 34,6b 366 ± 48,3a 300 ± 56,5b 284 ± 18,8b 298 ± 20,8b 286 ± 25,2b 310 ± 25,0b

DT 339 ± 33,6b 416 ± 44,9a 356 ± 52,1b 325 ± 19,2b 352 ± 20,5b 337 ± 27,1b 363 ± 29,1b

a,bLetras diferentes na mesma linha são diferentes pelo teste Student-Newman-Keuls (P < 0,05).

Referências bibliográficas Robaire, B. et al. The epididymis. In: Physiology of reproduction. New York: Elsevier, 2006. p.1071-1148. Palavras-chave: cauda, epidídimo, morfometria, vitamina E, zinco. Keywords: cauda, epididymis, morphometry, vitamin E, zinc.



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Histomorfometria testicular de ratos após exposição a diferentes doses de cádmio (Rat testis histomorphometry after exposure to different doses of cadmium)

M.C. Cupertino1

, K.L.C. Costa, A.C. Neves, D.C.M. Santos, J.A. Oliveira, S.L.P. Matta

Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG. 1E-mail: [email protected]

Introdução Metais pesados, como o cádmio, são desprovidos de funções biológicas, ou seja, naturalmente, não participam das reações bioquímicas necessárias à manutenção da vida. Contudo, uma vez ingressados no organismo por contaminação exógena geram uma extensa lista de efeitos tóxicos. A carga tóxica e o tempo de contaminação são fundamentais na determinação da qualidade e da intensidade das manifestações a serem apresentadas (Yu, 2004). Os impactos negativos do cádmio alteram o desenvolvimento e a reprodução dos animais. Se não mata em curto prazo, pode inviabilizar a reposição natural das espécies. Dessa maneira, objetivou-se estudar os efeitos crônicos de diferentes doses de cádmio na histomorfometria testicular de ratos Wistar. Material e Métodos Utilizaram-se 30 ratos Wistar machos em idade reprodutiva (70 dias), provenientes do Biotério Central da Universidade Federal de Viçosa. O trabalho foi aprovado pela comissão de ética (CEUAUFV) processo nº 30/2010. Os animais foram distribuídos em gaiolas coletivas em 5 grupos experimentais (n = 6 ). O cádmio foi administrado intraperitonealmente em dose única. O grupo controle recebeu injeção de salina e os demais grupos as dosagens respectivas de 1,1; 1,2; 1,4 e 1,8 mg de cloreto de cádmio por Kg de peso vivo. Após 56 dias os animais foram pesados e eutanasiados, os testículos foram pesados, fixados seguindo a rotina de processamento histológico para inclusão em resina. Secções de 3µm foram coradas com azul de toluidina e fotografadas. As imagens foram analisadas pelo uso do software Image-Pro Plus. Registraram-se a volumetria de túbulo e intertúbulo, comprimento total, proporção de túnica própria e lume dos túbulos seminíferos. Animais com túbulos seminíferos necrosados foram quantificados. O teste Student Newman-Keuls (P < 0,05) foi utilizado para análise de variância. Resultados e Discussão Registrou-se necrose total do epitélio seminífero em animais tratados com as três maiores doses, sendo três animais do grupo tratado com a dose de 1,8, dois na dose 1,4 e um na dose 1,2. Não ocorreu variação significativa na volumetria do túbulo, porém o volume de intertúbulo diminuiu no grupo tratado com a maior dose em relação ao controle e ao grupo tratado com a menor dose. Houve aumento significativo da túnica própria e diminuição da luz tubular nos grupos tratados com as duas maiores doses em relação aos demais. O comprimento total dos túbulos seminíferos não variou significativamente. Conclui-se o cádmio altera a histomorfometria testicular e que a dose é fator relevante na qualidade e a intensidade das lesões neste órgão. Referência bibliográfica Yu M-H. Environmental toxicology: biological and health effects of pollutants. 2.ed. Boca Raton, FL: CRC Press, 2004. 339p. Palavras-chave: cádmio, histomorfometria, reprodução, testículo, toxicologia. Keywords: cadmium, histomorphometry, reproduction, testis, toxicology. Fapemig/CAPES



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Efeitos do uso da Olanzapina sobre os testículos de camundongos Mus musculus Effects of the use of Olanzapine on testes of mice Mus musculus

M.J.A.A.L. Amorim, G.G.A. Silva

A.A. Amorim Júnior 1, C.R.O. Santos, S.R.S. Vanderlei, V.A. Silva Júnior,

Graduanda de Medicina Veterinária, UFRPE, Recife, PE; Bolsista do Programa Institucional de Bolsas de Iniciação

Científica - PIBIC/CNPq) 1E-mail: [email protected]

Introdução A Olanzapina é um antipsicótico atípico utilizado para tratamento agudo e manutenção terapêutica nos quadros de esquizofrenia e outras psicoses, atualmente é comercializada por meio do medicamento ZIPREXA produzido por: Eli Lily & Co. Ltda. Tendo como base que já foram detectados receptores dopaminérgicos em células germinativas e baseando-se nos conhecimentos sobre as funções testiculares, o presente estudo tem como objetivo investigar os efeitos que o tratamento com Olanzapina causa em camundongos Mus musculus, sobre os níveis plasmáticos de testosterona e aspectos produtivos testiculares por meio de análises histomorfológicas deste órgão. Material e Métodos Foram utilizados 16 camundongos Mus musculus machos pré-púberes, sendo divididos em três grupos experimentais: Controle (n = 6), T1 (n = 5; 15 mg/Kg), T2 (n = 5; 20 mg/kg); O grupo controle recebia água deionizada enquanto que os grupos tratados foram submetidos a aplicações diárias do antipsicótico, ambos via intraperitoneal, durante trinta dias. Passado esse período foi feita a inclusão dos órgãos coletados em resina plástica à base de glicol metacrilato (LEICA). Cortes histológicos de 4 µm de espessura foram corados em azul de toluidina/borato de sódio a 1% e analisados morfologicamente e morfometricamente. Resultados e Discussão Os resultados mostraram que a olanzapina não apresentou influencia sobre os parâmetros hematológicos. Observou-se ainda que quanto maior a dose de olanzapina, menor foi o ganho de peso corporal, informação esta de suma importância para pacientes preocupados com a engorda no pós tratamento. Quanto ao diâmetro e altura do epitélio seminifero, não se pode inferir que a olanzapina influencie sobre esses parâmetros, embora houvesse uma leve redução do epitélio seminífero dos animais tratados (T1 e T2) em relação ao grupo controle, mas nada significativo diante do esperado. Ainda assim o fármaco não mostrou influência sobre a proporção volumétrica do parênquima testicular. Referências bibliográficas Ballone GJ. Depressão e Disfunção Sexual: Para o desempenho sexual há necessidade estar emocionalmente bem. (Impotência), In: Psiqweb, 2007. Disponível em http://www.psiqweb.med.br/. Acesso em 20 abr. 2010. Mori H, Christensen AK. Morphometric analysis of Leydig cells in the normal rat testis. Cell Biol, v.84 p.340-354, 1980. Olanzapine. Disponível em www.zyprexa.com. Acesso em 01 maio 2010.. Palavras-chave: antipsicóticos, disfunção sexual, Olanzapina, testículos. Keywords: antipsychotics, sexual dysfunction, testes.



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Avaliação histomorfométrica de testículos de ratos submetidos a choque térmico e tratados com pentoxifilina

Histomorphometric analysis of testes of rats subjected to heat shock and treated with pentoxifylline

V.V.G. Oliveira

, G.C.D. Queiroz, O.G. Gueiros, B.M. Tenorio, V.A. Silva Junior1

Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal, UFRPE, Recife, PE. 1E-mail: [email protected]

Introdução As células germinativas testiculares são vulneráveis ao estresse térmico e sofrem apoptose em resposta a temperaturas supra-escrotais (KUMAGAI et al., 2002). A pentoxifilina é uma metilxantina e antiinflamatório atípico, com ação inibitória sobre TNF-α (MAXWELL et al., 2002). Baseado nas propriedades desta substância estudou-se o seu potencial preventivo e a capacidade em acelerar o processo de recuperação na espermatogênese decorrente das ações do calor sobre o parênquima testicular. Material e Métodos Foram utilizados 72 ratos machos Wistar (Rattus norvegicus, var. albinus) com 90 dias de idade submetidos aos diversos tratamentos: controle sem choque térmico (HS) (G1) (n = 18); controle com HS (G2) (n = 18); HS e tratados com 50mg/kg de pentoxifilina (G3) (n = 18) e HS e tratados com 100mg/kg de pentoxifilina (G4) (n = 18). Os animais foram pré-tratados durante os 30 primeiros dias antes do HS. Aos 120 dias os animais foram submetidos a estresse térmico testicular e continuaram o tratamento. Os animais de cada grupo foram perfundidos nos dias 1, 3, 7, 15, 30 e 60 após o HS e seus testículos foram submetidos a análises histomorfométricas.

Resultados e Discussão Não foram observadas diferenças significativas entre os diferentes tratamentos nos tempos experimentais com relação aos parâmetros avaliados, com exceção do volume total das células de Leydig (µL) no grupo G3 (19,6 ± 4,7) em relação ao G1(71,7 ± 16,8) no 7º dia do período experimental, e aos 30 dias entre os animais G4 (16,9 ± 0,9) e os G1 (86,1 ± 35,0), bem como ocorreu diminuição significativa do volume total do espaço linfático (µL) entre o grupo G3 (58,3 ± 13,7) e o G1 (182,7 ± 58,4). Embora não tenha ocorrido variação significativa, foi observado, nos grupos submetidos ao HS aos 60 dias, uma tendência a redução no índice de Célula de Sertoli (ICS) por secção transversal (ST) de túbulos seminíferos (TS) e que o grupo G4 aos 30 dias, apresentou o mesmo valor de ICS por ST de TS, quando comparado ao G1. A utilização da pentoxifilina na dosagem de 100mg/Kg parece ter exercido efeito inibidor sobre os fatores iniciais que agravam a degeneração testicular reduzindo a gravidade das lesões induzidas pelo estresse térmico. Referências bibliográficas Kumagai A, Kodama H, Kumagai J, Fukuda J, Kawamura K, Tanikawa H, Sato N, Tanaka T. Xanthine oxidase inhibitors suppress testicular germ cell apoptosis induced by experimental cryptorchidism. Mol Hum Reprod, v.8, p.118-123, 2002. Maxwell DT, Jacobson JD, King A, Chan PJ. Effec of Pentoxifylline on Tumor Suppressor and Proto-Oncogene Apoptosis in Sperm. J Assist Reprod Genet, v.19, n.6, 2002. Palavras-chave: choque térmico, morfometria, pentoxifilina, testículo. Keywords: heat shock, morphometry, pentoxifylline, testis.



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Efeitos do extrato etanólico da raiz de Pfaffia glomerata sobre o ambiente intertubular dos testículos de camundongos adultos

Effects of ethanolic extract of Pfaffia glomerata on testicular intertubular compartment in adult male mice

A.P.L.F. Matta1, M.O. Santos

, S.L.P. Matta, J.P.V. Leite, J.S. Rocha, J.V.P.B. Baêta, S.M. Reis, J.M.S. Lima, K.L.C. Costa


Introdução As raízes de Pfaffia glomerata são utilizadas na medicina popular brasileira como afrodisíaco o que motivou uma investigação mais detalhada dos seus efeitos sobre a porção androgênica testicular. Objetivou-se estudar os efeitos do extrato etanólico da raiz de Pfaffia glomerata sobre os componentes do compartimento intertubular dos testículos de camundongos. Material e Métodos Foram utilizados 28 animais divididos em 4 grupos (n = 7). O grupo 1 recebeu apenas água, o grupo 2 dimetilsulfóxido (DMSO) e os grupos 3 e 4 receberam 300 e 400 mg/kg de peso corporal do extrato diluídos em 0,2 ml de DMSO, respectivamente. O tratamento foi feito por gavagem e teve duração de 42 dias. Preparações do testículo incluídas em metacrilato foram coradas com azul de toluidina/borato de sódio e avaliadas sob microscopia de luz, utilizando-se o programa Image Pro-Plus. Foram avaliados o peso corporal, testicular e do perênquima, proporção volumétrica (%) e volume (ml) dos elementos do intertúbulo, diâmetro nuclear, relação nucleoplasmática (RNP %), índice Leydigossomático (ILS %), número de células de Leydig por testículo e por grama de testículo. Análise de variância (ANOVA), seguida pelo teste de Newman-Keuls, foi usada para comparar médias entre os grupos experimentais. Resultados e Discussão O peso corporal, a proporção de tecido conjuntivo, de linfático, a proporção e volume de macrófagos aumentaram de forma significativa (P < 0,05), sendo o primeiro parâmetro citado nos grupos 3 e 4 em relação ao 1; o segundo no grupo 2 em relação ao 1; o terceiro no grupo 3 em relação ao 1 e ao 4; e o quarto e quinto parâmetros, no grupo 2 em relação aos demais. As alterações na proporção e volume de alguns elementos do intertúbulo causadas pelo DMSO, ou por ele em associação com os extratos, não são julgadas como prejudiciais ao intertúbulo. As células de Leydig sintetizam testosterona que sustenta a espermatogênese, promove a diferenciação do trato genital masculino e mantém a função das glândulas acessórias1. A ausência de alterações nessa célula sugere que o extrato etanólico da raiz de Pfaffia glomerata, não interfere na porção androgênica testicular de camundongos adultos, nas concentrações administradas. Referências bibliográficas 1. Russell LD. Mammalian Leydig cell structure. In: Payne AH, Hardy MP, Russell LD (Ed.). The Leydig cell. Vienna: Cache River Press, 1996. p.43-96, Palavras chave: células de Leydig, fitoterapia, reprodução, testículo, Keywords: Leydig cell, phitoterapi, reproduction, testis,



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Estudo da ciclicidade reprodutiva em fêmeas de cateto (Tayassu tajacu) mantidas em cativeiro no semi-árido Brasileiro

Study of reproductive cycle of captive female collared peccaries (Tayassu tajacu) in the Brazilian semiarid

K.M. Maia1, G.C.X. Peixoto1, T.S. Castelo1, A.R.F. Ricarte1, M.F. Oliveira2, A.R. Silva

1,3 1Laboratório de Conservação e Germoplasma Animal, UFERSA, Mossoró,,RN; 2Departamento de Ciências Animais,

UFERSA, Mossoró, RN. 3E-mail: [email protected]

Introdução Os Tayassu tajacu, também conhecidos como catetos, mamíferos da família Tayassuidae, produzem carne e couro de excelente qualidade. Devido à suas características reprodutivas e sua capacidade de adaptação a diversos tipos de ambientes, esses animais podem ser explorados racionalmente tanto no seu habitat quanto em cativeiro e, para aprimoramento do seu desempenho zootécnico, é de suma importância o conhecimento da sua biologia reprodutiva. Assim, o objetivo da presente pesquisa foi estudar a ciclicidade reprodutiva de fêmeas de cateto mantidas em cativeiro no semi-árido Brasileiro, por meio da dosagem hormonal de estrógeno e progesterona ao longo do ciclo estral. Material e Métodos A cada três dias, no decorrer de quarenta e cinco dias, quatro fêmeas de cateto foram contidas mecanicamente, com auxílio de puçá. Estas foram submetidas à coleta de sangue, através de punção da veia cefálica ou da safena, 3 ml, em tubos sem anti-coagulante, obtendo-se soro. Este foi centrifugado a 2000 g por 15 min e armazenado a -18ᵒC, para dosagem dos níveis séricos de estrógeno e progesterona, determinados pela técnica de enzima-imunoensaio (ELISA) por competição. A determinação dos níveis de hormônio (estrógeno e progesterona) em relação às fases do ciclo estral foi demonstrada por meio de análise de regressão, pelo procedimento “proc reg e proc glm” do Statistical Analysis System, versão 6.10 (SAS). Resultados e Discussão As fêmeas apresentaram, em média, 1,5 ciclos estrais, nos quarenta e cinco dias de coleta, com duração média de 21 ± 5,7 dias. A fase estrogênica teve uma duração de seis dias, observando-se um valor de 55,6 ± 20,5 pg/mL de estrógeno durante o pique deste hormônio, valor inferior aos 127.5 ± 20.2 pg/ml descritos em catetos recém capturados sob clima equatorial, na Amazônia (Mayor et al., 2007). Este trabalho produziu informações inéditas em relação a fase luteínica que teve duração de, aproximadamente, 15 dias, verificando-se valores de progesterona em torno de 29,5 ± 15,8 ng/ml. Os presentes dados acerca da ciclicidade reprodutiva de fêmeas de cateto nas condições de criação em cativeiro e sob clima semi-árido, são importantes para o desenvolvimento de técnicas de manejo e reprodução assistida aplicadas a esta espécie. Referências bibliográficas Mayor P, Galvez H, Guimarães DA, López-Gatius F, López-Béjar M. Serum estradiol-17beta, vaginal cytology and vulval appearance as predictors of estrus cyclicity in the female collared peccary (Tayassu tajacu) from the eastern Amazon region. Anim Reprod Sci, v.97, p.165-174, 2007. Palavras-chave: cateto, ciclo estral, estrógeno, progesterona. Keywords: collared peccary, estrogen, estrous cycle, progesterone.



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Estudo da população de folículos pré-antrais ovarianos e taxa de atresia em fêmeas de diferentes posições hierárquicas de Leontopithecus (Callitrichidae-Primates)

Study of preantral follicles population and follicular atresia in Leontophitecus female of different status hierarchical

A.F. Brasil

1, D.K.V. Leite, A. Pissinatti, A.M.R. Ferreira

Centro Univ. Plínio Leite, Univ. Castelo Branco, Centro de Primatologia do Rio de Janeiro, Univ.Fed. Fluminense, Niterói, RJ. 1E-mail: [email protected]

Introdução Os estudos sobre a população de folículos ovarianos na fase pré-antral em fêmeas de Leontopithecus sp. podem ser uma ferramenta útil para o aperfeiçoamento de biotécnicas da reprodução. Os objetivos desse estudo foram avaliar quanti e qualitativamente a população de folículos pré-antrais em fêmeas de diferentes posições hierárquicas. Material e Métodos Foram utilizados 15 pares de ovários, sendo cinco de fêmeas dominantes reprodutivas (GI), cinco dominantes não reprodutivas (GII) e cinco subordinadas (GIII) provenientes do museu do Centro de Primatologia do Rio de Janeiro. Lâminas foram coradas com PAS-Hematoxilina. Os folículos pré-antrais foram classificados de acordo com Hulshof et al. (1994) e qualitativamente em normal ou degenerado.

Resultados e Discussão A população média de folículos pré-antrais, nos ovário direito e esquerdo, foi de respectivamente, 92.650 ± 47.581 e 88.896 ± 44.497 para G1; 88.796 ± 43.074 e 84.760 ± 43.188 para G2 e 89.314±50.979 e 85.551 ± 49.202 para G3. O número de folículos no ovário direito foi significativamente superior ao do ovário esquerdo nos três grupos de fêmeas. Em relação à percentagem de folículos por categoria folicular, folículos primários foram estatisticamente superiores em relação aos outros folículos (Domingues et al.,2004). A percentagem de folículos normais e degenerados foi de, respectivamente, 91,3 ± 9,1 e 8,7 ± 1,9 para G1; 86,7 ± 7,6 e 13,3 ± 2,1 para G2 e 88,3 ± 6,7 e 11,7 ± 5,8 para G3. Os folículos normais foram estatisticamente superiores aos degenerados nos três grupos de fêmeas. A taxa de atresia de folículos pré-antrais em fêmeas dominantes não reprodutivas e subordinadas foi estatisticamente superior à de fêmeas dominantes.

Referências bibliográficas Domingues SFS, Diniz LV, Furtado SHC, Ohashi OM, Silva LDM. Histological study of capuchin monkey (Cebus apella) ovarian follicles. Acta Amaz, v.34, p.495-501, 2004. Hulshof SCJ, Figueiredo JR, Beckers JF, Van Den Hurk, R. Isolation and characterization of preantral follicles from foetal bovine ovaries. Vet Quart, v16, n.2, p.78-80, 1994. Palavras-chave: atresia, folículo pré-antral, Leontopithecus. Keywords: atresia, preantral follicle, Leontopithecus.



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Níveis séricos de 17ß-estradiol e progesterona em cutias (Dasyprocta sp) gestantes Serum 17ß-estradiol and progesterone in pregnant agouti (Dasyprocta sp)

M.A.M. Carvalho1, M.S. Ferraz1, D.J.A. Menezes2, H.M. Almeida1, R.A. Lopes1,

V.P. Fernandes Neto1, M.N.N. Silva1, D.O. Bezerra1, Y.K.P. Carvalho1

1Universidade Federal do Piauí, Teresina, PI; 2Universidade Federal de Campina Grande, Campina Grande, PB. E-mail: [email protected]

Introdução A gestação nos mamíferos é marcada por vários acontecimentos, como modificações no útero e ovários, bem como alteração dos níveis hormonais (Kolb et al., 1984; Ferraz et al., 2001). A secreção de hormônios relacionados a este período é realizada principalmente pela atividade do corpo lúteo e da placenta, começando em poucas semanas após o início da gestação (Resende et al., 1998). Embora estudos que demonstrem a dinâmica hormonal durante a gestação em cutias sejam escassos segundo literatura consultada, sabe-se que os níveis de progesterona aumentam gradativamente da 1ª até a 5ª semana (Guimarães, 2000). O objetivo deste trabalho foi analisar os níveis séricos de 17ß-estradiol e progesterona durante o período gestacional de cutias (Dasyprocta sp) criadas em cativeiro. Material e Métodos Foram utilizadas oito cutias fêmeas criadas no criadouro de animais silvestres (NEPAS) da Universidade Federal do Piauí (Registro IBAMA nº 02/08 – 618). Após a confirmação da cópula, foram coletados 1,5ml de sangue aos 5, 15, 25, 35, 45, 55, 65, 75, 85, 95, 100 e 103 dias pós-cobertura (dpc). O sangue foi centrifugado e o soro obtido foi analisado para os hormônios 17ß-estradiol e progesterona, dosados pela técnica de radioimunoensaio (RIA) em fase sólida utilizando kits comerciais. Os resultados obtidos foram agrupados de acordo com o trimestre da gestação, sendo o primeiro trimestre compreendido da data da cópula até 25 dpc, o segundo de 35 dpc até 65 dpc e o terceiro trimestre de 75 dpc até o final da gestação (103 dpc).

Resultados e Discussão Os níveis séricos de 17ß-estradiol e progesterona encontrados em cutias durante a gestação mostraram que, o estradiol aumenta significativamente com a proximidade do parto, indo de 73,93 pg/ml no primeiro trimestre para 84,52 pg/ml no segundo e 151,92 no terceiro. Já os níveis de progesterona mantiveram-se relativamente constantes e elevados durante a gestação (2,65 ng/ml, 3,51 ng/m e l2,53 ng/ml no primeiro, segundo e terceiro terços da gestação, respectivamente). O comportamento destes hormônios seguiram o padrão fisiológico característico na gestação, da mesma forma descrito para outras espécies, como vaca, ovelha, porca e cutias (Hafez, 2003, Guimarães, 2000). Referências bibliográficas Ferraz LES, Vicente WRR, Ramos PRR. Progesterone and estradiol 17-b concentration, and ultrasonic images of the embryonic vesicle during the early pregnancy in Thoroughbred mares. 2001. Guimarães DAA. Aspectos reprodutivos e endócrinos da puberdade, ciclo estral, gestação e cio pós-parto de cutias (Rodentia: Dasyproctidea) criadas em cativeiro. 2000. 94f. Tese (Doutorado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal do Pará, 2000. Hafez ESE. Reprodução animal. 6.ed. São Paulo: Manole, 2003. Kolb E. Fisiologia veterinária. 4.ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 1984. Resende J, Linhares E. Endocrinologia do ciclo gestativo. In: Resende J. Obstetrícia. 8.ed. Rio Janeiro: Guanabara Koogan; 1998. p.135- 52. Palavras-chave: 17ß-estradiol, cutia, gestação, progesterona. Keywords: 17ß-estradiol, progesterone, pregnancy, agouti.



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Efeito da idade e do número de partos nas variáveis uterinas e ovarianas em macacos-da-noite

Effect of age and number of parturitions on uterine and ovarian variables in owl monkeys

L.N. Coutinho1, F.O.B. Monteiro, R.S.C. Takeshita, F.L.M. Lins e Lins, A.C.C. Lacreta Jr, P.H.G. Castro, J.A.P.C. Muniz, M.B.S. Brito, W.R.R. Vicente

Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (UNESP-Jaboticabal), Departamento de Medicina Veterinária

Preventiva e Reprodução Animal, Jaboticabal, SP. 1E-mail: [email protected]

Introdução As pesquisas sobre reprodução de primatas neotropicais em cativeiro são importantes, pois podem aumentar o desempenho reprodutivo de espécies utilizadas em pesquisas biomédicas, sem que seja necessário utilizar animais de vida livre (Domingues e Caldas-Bussiere, 2006). Porém, para que as biotécnicas sejam implementadas, é necessário desenvolver pesquisas a respeito da biologia reprodutiva. Dessa forma, o presente trabalho objetivou avaliar o efeito da idade e do número de partos nas variáveis uterinas e ovarianas em macacos-da-noite através do ultrassom. Material e Métodos Foram avaliadas 40 fêmeas pertencentes à colônia de reprodução do Centro Nacional de Primatas (CENP) - CEPAN/IEC – n° 036/2008. Exames de ultrassonografia pélvica foram realizados para comparar os parâmetros uterinos com o peso, idade [infantil (0-150 dias, n = 3); juvenil (151-364 dias, n = 4); sub-adulto (1-2 anos, n = 6); adultos jovens (3-4 anos, n = 9) e adultos (> de 5 anos, n = 18)] e número de partos dos animais (nulíparas n = 9, primíparas n = 10 e multíparas n = 8), entre jovens e adultas. E comparar os parâmetros ovarianos com o peso e a idade. A técnica utilizada para mensuração do útero e dos ovários foi semelhante à descrita por Monteiro et al. (2009).

Resultados e Discussão O volume uterino (VU) foi diretamente proporcional ao número de partos, que foi o fator mais importante para o crescimento do útero de fêmeas adultas (p <0,05). O peso corporal e idade dos animais mostrou uma alta correlação positiva com VU (r = 0,5354, r = 0,6489, p <0,01), respectivamente. O volume dos ovários cresceu proporcional a idade das fêmeas (p <0,05). Observou-se que a puberdade foi o período de maior crescimento do útero e ovários.

Referências bibliográficas Domingues SFS, Caldas-Bussiere MC. Fisiologia e biotécnicas da reprodução desenvolvidas em fêmeas de primatas neotropicais importantes para a pesquisa biomédica. Rev Bras Reprod Anim, v.30, p.57-71, 2006. Monteiro FOB, Coutinho LN., Pompeu ESS., Castro PHG., Maia CE., Pereira WLA., Vicente WRR. Ovarian and uterine ultrasonography in captive owl monkeys in Aotus azarai infulatus. Int J Primatol, v.30, p.327-336, 2009. Palavras-chave: Aotus sp., biometria, ginecologia, ultrassom. Keywords: Aotus sp., biometrics, gynecological, ultrasound.



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Caracterização histológica do ovário do Sauim (Saguinus midas Linnaeus, 1758) Histological characteristics of the ovary of Sauim (Saguinus midas Linnaeus, 1758)

A.F. Carvalho¹, R.C. Garcia¹, A.R. Lima², A.C.B. Souza³, L.C. Pereira³, C.A. Costa²,

C.T. Machado², E. Branco²,4

1Centro Universitário da Fundação de Ensino Octávio Bastos (UNIFEOB), São João da Boa Vista, SP; ²Universidade Federal Rural da Amazônia (UFRA), Belém, PA;³Mina de Bauxita, Paragominas, PA.

4E-mail:[email protected] Introdução O Sauim, família Callithricidae é encontrado na Guiana Inglesa, Suriname, Guiana Francesa e no Brasil. Pesa em média 500g e é monogâmico. Possui coloração geral negra e baixo dorso castanho-avermelhado (Araújo et al., 2000). Este trabalho tem por objetivo, descrever o ovário do Sauim, uma espécie em estado de conservação criticamente em perigo, para que possamos contribuir futuramente no entendimento dos aspectos reprodutivos desta espécie e assim auxiliar em sua conservação. Material e Métodos Foram utilizados quatro ovários de dois animais, os quais foram submetidos a processamento histológico padrão e posteriormente cortados em micrótomo LEICA 2165 com espessura de 5µm. Os cortes foram corados por HE e Tricromio de Massona. Resultados e Discussão Com formato elipsóide, macroscopicamente o ovário do sauim assemelha-se ao do macaco de cheiro (Branco et al. 2010). Nos dois animais observados, um dos ovários estava mais ativo, não havendo relação de lateralidade, portanto maior (em média 0,7mm comp. x 0,5mm larg.) e grande quantidade de folículos em crescimento. O ovário menos ativo era menor (em média 0,5mm comp. x 0,3mm larg.). O ovário estava recoberto por tecido conjuntivo com superfície revestida por epitélio (de origem celomática) variando entre pavimentoso e cilíndrico simples. Logo abaixo encontramos uma camada de tecido conjuntivo denso e túnica albugínea. Identificamos duas regiões distintas: medular, constituída por tecido conjuntivo frouxo, rico em vasos sangüíneos, célula hilares (intersticiais), e cortical, rica em folículos ovarianos, corpo lúteo e células intersticiais. Chamou a atenção que somente a face lateral do ovário apresentou folículos primários e em desenvolvimento, destacando-se neste local uma depressão decorrente de ovulação. Na face medial nenhum folículo foi observado abaixo do epitélio germinativo, sugerindo uma região específica para oocitação. Os folículos são simples e possuem em seu interior somente um oócito além das mesmas estruturas histológicas dos mamíferos domésticos (teca externa, teca interna, granulosa, corona radiata e antro) (Banks, 1998). Cerca de 80% do ovário era povoado por células luteínicas, sendo que somente uma pequena porção, extraindo-se o tecido conjuntivo medular, é reservada para o desenvolvimento folicular. Referências bibliográficas Araújo A. et al. Body weight of wild and captive common marmosets (Callithrix jacchus). International Journal of Primatology, v.21, n.2, p.317-324, 2000 Banks WJ. Tratado de histologia Veterinária. 2ª Ed. São Paulo. Manole, 1998. 630p. Branco E. et al. Morfologia macroscópica e morfometria do aparelho urogenital do macaco de cheiro (Saimiri sciureus Linnaeus, 1758). Biotemas, v.23, n.1, p.195-200, 2010. Palavras-chave: histologia, ovário, sauim. Keywords: histology, ovary, sauim.



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Pólipo uterino em macaca-aranha (Ateles paniscus) – Relato de caso Uterine polyp in a spyder monkey (Ateles paniscus) – Case report

L.M.P. Freire1, B.S. Pereira, H.V.R. Silva, J.N. Pinto, C.C. Barbosa, L.A. Freitas,

A.R. Silva, L.D.M. Silva

Laboratório de Reprodução de Carnívoros, UECE, Fortaleza, CE. 1E-mail: [email protected]

Introdução O macaco aranha de cara vermelha (Ateles paniscus) é uma primata arborícola da família Atelidae que habita a região Amazônica. É ameaçado de extinção de acordo com a lista oficial do IBAMA, apêndice II da CITES. A espécie é considerada vulnerável devido à suscetibilidade à caça e a distúrbios de seu habitat natural. Considerando o grande número de espécimes mantidos em cativeiro e a escassez de informações sobre a conduta clínica com esses animais, são necessários mais estudos sobre as diferentes patologias que possam acometer o macaco-aranha. Neste sentido, o presente trabalho tem como objetivo relatar um caso de patologia uterina em macaca-aranha, no qual o exame ultrassonográfico foi utilizado como ferramenta diagnóstica.

Material e Métodos Um macaco-aranha de cara vermelha (Ateles paniscus), fêmea, com aproximadamente 30 anos de idade e peso estimado em 10 kg, proveniente do zoológico Sargento Prata, Fortaleza-CE, apresentou grande quantidade de descarga vaginal de coloração avermelhada e aparência mucosa. Foi realizado um tratamento com Azitromicina na concentração de 500 mg na dose de 50 mg/kg, via oral, por sete dias consecutivos. O animal respondeu positivamente ao tratamento, porém, com o intuito de estabelecer um diagnóstico e acompanhar a evolução do quadro clínico, a macaca foi encaminhada, dez dias após o ocorrido, para exame ultrassonográfico no Laboratório de Reprodução de Carnívoros. O aparelho de ultrassonografia utilizado foi o modelo SonoAce PICO (Medison®, CA, USA) e um transdutor linear multifrequencial (5-9 MHz).

Resultados e Discussão Ao exame ultrassonográfico em corte longitudinal, o útero apresentava ecotextura homogênea hipoecóica, parede uterina medindo 0,79 cm, contornos regulares e presença de acúmulo de líquido anecóico em lúmen uterino, causando reverberação, além da presença de imagem de formato circular, hiperecóico bem próximo à parede uterina, medindo 0,99 x 0,68 cm. Segundo a literatura, as imagens foram compatíveis com o pólipo uterino. Os referidos pólipos são proliferações glandulares focais que se originam total ou parcialmente da mucosa endometrial. Geralmente, apresentam-se como lesões benignas com baixo potencial de malignidade. Em mulheres, a patologia é assintomática grande parte das vezes, podendo ocorrer sangramento uterino anormal em até 30% dos casos, infertilidade, sinusorragia e leucorréia (Nogueira, 2005). Porém, em macacas-aranha, não foram encontradas descrições desta patologia na literatura corrente, provavelmente, sendo o presente, o primeiro relato na espécie. Salienta-se que após o tratamento não foram observadas novas manifestações clínicas e que o exame ultrassonográfico foi uma ferramenta eficiente para o diagnóstico sugestivo de pólipo uterino em macaco-aranha.

Referências bibliográficas Nogueira AA. Pólipos Endometriais. Rev Bras Ginecol Obstet, v.27, p.289-292, 2005. Palavras-chave: Ateles paniscus, Macaco-Aranha, Pólipo uterino, ultrassonografia. Keywords: Ateles paniscus, Spyder Monkey, ultrassonography, Uterine polyps.



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Estimativa e caracterização da população folicular ovariana de catetos (Tayassu tajacu Linnaeus, 1758)

Estimative and characterization of the ovarian follicular population of collared peccaries (Tayassu tajacu Linnaeus, 1758)

G.L. Lima1,4, E.A.A. Santos1, V.B. Luz2, L.S. Lima2, A.P.R. Rodrigues2, J.R. Figueiredo2,

M.F. Oliveira3, A.R. Silva1

1Laboratório de Conservação de Germoplasma Animal, UFERSA, Mossoró, RN; 2Laboratório de Manipulação de Oócitos e Folículos Pré Antrais, UECE, Fortaleza, CE; 3Departamento de Ciências Animais, UFERSA, Mossoró, RN.

4E-mail: [email protected] Introdução No intuito de se produzir catetos (Tayassu tajacu) em cativeiro, seja para sua conservação ou exploração sustentável, faz-se necessário o conhecimento de sua biologia reprodutiva. As informações acerca das características reprodutivas desta espécie ainda são escassas e direcionadas principalmente aos machos. O objetivo deste trabalho foi estimar e caracterizar a população folicular ovariana na espécie Tayassu tajacu. Material e Métodos Pares de ovários foram coletados de seis fêmeas adultas de T. tajacu e um dos ovários foi destinado a análise. Este foi fixado em Carnoy durante 4 h, desidratado, diafanizado e incluso em parafina histológica. A microtomia foi realizada à espessura de 7µm e as lâminas foram montadas a cada 120ª secção onde todos os folículos foram contados e classificados segundo as diferentes categorias. Os resultados são demonstrados em média e erro padrão. Resultados e Discussão Um total de 33.273,5 ± 3.019,3 folículos pré antrais (FOPA) foi estimado para a população em cada ovário. A maioria dos folículos encontrados pertencia à categoria de primordial (91,6%), seguido de primários (6.3%) e secundários (2.2%). Os folículos primordiais possuíam oócito circundado por uma camada de células da granulosa pavimentosas (diâmetro 31,8 µm), os primários possuíam oócito circundado por uma camada de células da granulosa cúbicas (diâmetro 40,9 µm) e os secundários possuíam duas ou mais camadas de células da granulosa cúbicas ao redor do oócito (diâmetro 196,2 µm). A maioria dos FOPA apresentava-se morfologicamente normal (94,4%) e apenas poucos deles eram atrésicos (5,6%). Foram observados 2,7% de folículos pluriovulares. Na análise histológica, uma grande quantidade de vacúolos foi observada no citoplasma oocitário, sugestivas de inclusões lipídicas. A população folicular foi inferior a dos suínos domésticos na qual apenas a população de folículos primordiais representa mais de 420.000 folículos (Gosden e Telfer, 1987). Estes dados inéditos mostram que a população folicular ovariana de catetos é bastante inferior à do porco doméstico, porém,as características histológicas gerais dos folículos primordial, primário e secundário são similares às descritas para outras espécies. Referências bibliográficas Gosden RG, Telfer E. Numbers of follicles and oocytes in mammalian ovaries and their allometric relationships. J Zool, v.211, p.169-175, 1987. Palavras chave: cateto, folículos pré antrais, ovário, oócito. Keywords: collared peccary, oocyte, ovary, preantral follicles.



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Perfis de progesterona e pH vaginal em cervos, Cervus unicolor Progesterone profile and vaginal pH in cervus (Cervus unicolor)

E.A.F. Martins1,6, A.A. Silva2, M.G.M. Chacur3, O.C. Sanches4, E. Oba5

1,2Mestrandas em Ciência Animal, Universidade do Oeste Paulista (UNOESTE), Presidente Prudente, SP, 3Lab. Reprodução

Animal (UNOESTE), Presidente Prudente, SP; 4 Lab. Patologia Veterinária (UNOESTE), Presidente Prudente, SP; 5Lab. Reprodução Animal, FMVZ-UNESP, Botucatu, SP.

6E-mail: [email protected] Introdução O perfil hormonal da progesterona produzida pelo corpo lúteo está diretamente ligado às aplicações práticas na interpretação da fase do ciclo estral e como indicador da atividade reprodutiva cíclica na primavera, de maneira eficaz, em fêmeas de cervídeos mantidas em cativeiro (Brown et al., 2004). Material e Métodos Foram coletadas no Zoológico de Presidente Prudente/SP no mês de outubro (primavera), amostras de sangue por venopunção jugular de 8 fêmeas de cervos não prenhes entre 24 e 36 meses de idade durante 8 momentos com intervalos de 72 horas para a obtenção dos níveis séricos de progesterona pelo método de radioimunoensaio (RIA) com quite (DPC-Medlab®), nos mesmos momentos o pH vaginal foi mensurado com o uso de fita indicadora (pH Merck®). Resultados e Discussão Para o pH vaginal não houve diferença significativa (p < 0,05) entre os momentos de colheita, cujo valor médio total foi de 6,5 ± 0,5. Para o nível sérico de progesterona houve diferença (p < 0,05) entre o intervalo compreendido entre 6 momentos de colheita, perfazendo 15 dias, com valor médio de 7,1 ± 0,9 ng/mL e o intervalo entre 2 momentos, correspondente a 6 dias, com valor médio de 4,5 ± 0,4 ng/mL. Resultados esses semelhantes aos descritos por Brown et al. (2004). Nas condições experimentais, conclui-se que a mensuração do pH vaginal por meio de fita indicadora demonstrou praticidade, porém o método não foi eficiente para indicar a variação do nível de progesterona. A duração da fase progesterônica foi de 15 dias e a atividade reprodutiva cíclica esteve presente no mês de outubro (primavera). Referência bibliográfica Brown J, Walker S, Steinman K. Endocrine manual for the reproductive assessment of domestic and non-domestic species. Endocrine Research Laboratory. 2.ed. Department of Reproductive Sciences, Conservation and Research Center, National Zoological Park, Smithsonian Institution. Manual: 1-93, 2004. Palavras-chave: cervus unicolor, pH vaginal, progesterona, veado sambar. Keywords: cervus unicolor, progesterone, sambar deer, vaginal pH.



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Morfometria dos elementos do intertúbulo do testículo do morcego-da-fruta Artibeus lituratus (OLFERS, 1818) tratados com os fungicidas Tebuconazol e Mancozeb

Morphometric Analysis of the Components of Intertubule of Testis of Artibeus lituratus (OLFERS, 1818) treated with fungicides Tebuconazol and Mancozeb

D.C. Miranda, T.F. Machado, D.V. Andrade, R.A.C. Carvalho, M.S. Barros,

M.M. Neves, S.L.P. Matta, M.B.D. Freitas

Depto. Biologia Geral, Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG. 1E-mail: [email protected]

Introdução Morcegos frugívoros são cruciais para a dinâmica de florestas tropicais, porém têm sido encontrados em pomares devido à destruição do seu habitat natural. Como a pulverização é uma prática rotineira em sistemas de produção agrícola, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito dos fungicidas comumente utilizados Tebuconazol e Mancozeb sobre a morfometria testicular de morcegos Artibeus lituratus, considerando os componentes do espaço intertubular. Material e Métodos Morcegos machos (n = 25) foram divididos em 4 grupos: controle (G1), tratado com Tebuconazol (1ml/L) por 7 dias (G2; n = 6) e 30 dias (G3; n = 6); tratado (G4) por 7 dias com Mancozeb 2g/L (n = 6). O fungicida foi fornecido no alimento, o qual era imerso em uma calda que o continha. Após o tratamento, os animais foram pesados e eutanasiados por decapitação, sendo os testículos coletados, pesados e fixados. Preparações testiculares incluídas em resina foram coradas com azul de toluidina e avaliadas em microscopia de luz. Realizou-se a contagem de 1000 pontos aleatórios sobre o intertúbulo, obtendo-se, assim, as proporções (%) de elementos do tecido conjuntivo, vasos sanguíneo, espaço linfático, núcleo e citoplasma de células de Leydig, utilizando-se o programa Image Pro-Plus. Calculou-se, posteriormente, o volume do intertúbulo. Os dados foram submetidos a ANOVA e as médias comparadas pelo teste de Student -Newman-Keuls a 5%.

Resultados e Discussão Observou-se redução no citoplasma de Leydig (P < 0,05) do G4 (54,60 ± 2,42%), em relação a G1 (62,20 ± 4,25%) e G2 (63,33 ± 6,02%), mostrando um maior efeito do Mancozeb sobre esta célula, considerando exposição de 7 dias. Houve aumento (P < 0,05) no percentual de espaço linfático no G3 (6,10±1,33%), quando comparado a G1 (2,57 ± 1,82%) e G4 (3,30 ± 1,20%), mostrando que a exposição por tempo prolongado (30 dias) ao Tebuconazol estimula proliferação deste tecido, o qual está relacionado com eventos inflamatórios e tóxicos. Como pesquisas têm demonstrado alterações testiculares em ratos expostos cronicamente a fungicidas (Sark, 2009), sugere-se que novos estudos sejam realizados considerando-se um tempo maior de exposição. Referências bibliográficas Sakr AS. et al. Aust J Basic Appl Sci, v.3, p.1328-1333, 2009. Palavras-chave: Fungicida, morfometria, intertúbulo, testículo, morcego Keywords: Fungicide, morfometry, intertubule, testis, bat



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Morfometria e padrão ultrassonográfico dos testículos de catetos (Tayassu tajacu, Linnaeus, 1758) criados em cativeiro

Testicular morphometry and ultrasonographic pattern of captive collared peccaries (Tayassu tajacu, Linnaeus, 1758)

G.C.X. Peixoto1, M.A. Silva, A.R.F. Ricarte, G.L. Lima, M.F. Oliveira, A.R. Silva

Laboratório de Conservação e Germoplasma Animal, UFERSA, Mossoró, RN

1E-mail: [email protected]

Introdução Em diferentes espécies, demonstrou-se que a morfometria testicular pode apresentar correlação positiva com a atividade reprodutiva. Em adição, a ultrassonografia consiste em uma valiosa ferramenta capaz de detectar desordens subclínicas em diferentes órgãos, incluindo os testículos. Sabendo-se da escassez de informações a respeito da biologia reprodutiva de catetos (Tayassu tajacu), o presente trabalho objetivou determinar o padrão ultrassonográfico dos testículos, bem como suas medidas biométricas por uso do ultrassom. Material e Métodos Dez catetos machos adultos foram contidos quimicamente com Propofol (5 mg/kg). Com o uso de um aparelho de ultrassonografia (Aquila vet, Pie Medical®, Nutricel, Campinas, Brazil) equipado com transdutor microconvexo de 8 MHz, foi determinada a espessura (E), comprimento (C) e largura (L) dos testículos direito e esquerdo, sendo calculado o volume testicular utilizando-se a fórmula de Lambert (V = C x E x L x 0.71). Imagens em escala de cinza foram obtidas no intuito de descrever a ecogenicidade e ecotextura dos órgãos. Os resultados foram expressos na forma de média e desvio padrão. Resultados e discussão O parênquima testicular dos catetos apresentava-se ecogênico, com ecotextura homogênea, e com mediastino testicular apresentando-se como uma linha hiperecóica no centro do parênquima, características semelhantes às encontradas em bovinos (Cardilli et al., 2010). Os resultados de biometria testicular, sumariados na Tab. 1, corroboram os descritos por Kahwage et al. (2010), que utilizaram o paquímetro na mesma espécie. Porém, estes autores verificaram comprimentos testiculares superiores aos descritos no presente trabalho em cerca de 1 cm, provavelmente, devido às túnicas e tecidos adjacentes aos testículos. Sugere-se então que a ultrassonografia é uma técnica fidedigna para mensuração da morfometria dos testículos, capaz de identificar alterações importantes no parênquima destes órgãos em catetos. Tabela1: Médias (±DP) dos parâmetros testiculares de catetos (Tayassu tajacu).

Parâmetros Testiculares Testículo Direito Testículo Esquerdo Comprimento (cm) 4,6 ± 0,3 4,7 ± 0,3 Largura (cm) 2,1 ± 0,2 2,1 ± 0,3 Espessura (m) 2,4 ± 0,3 2,3 ± 0,2 Volume testicular (ml) 16,9 ± 0,02 16,6 ± 0,02

Referências bibliográficas Cardilli DJ, Toniollo GH, Pastore AA, Canola JC, Mercadante MEZ, Oliveira JA. Padrão ultrassonográfico do parênquima, mediastino e túnicas testiculares em bovinos jovens da raça nelore. Ciênc Anim Bras, v.11, n.4, p.899-905, 2010. Kahwage PR, Garcia AR, Guimarães DAA, Ohashi OM, Luz-Ramos RS, Dias HL, Albuquerque NI, Bartha MMP. Biometria testicular, eletroejaculação e característica seminal de caititus. Acta Amazonica, v.40, n.2, p.771-778, 2010. Palavras-chave: catetos, testículo, ultrassonografia. Keywords: collared peccary, testicle, ultrasonography.



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Duração do Ciclo do Epitélio Seminífero de quati (Nasua nasua Linnaeus, 1766) Duration of seminiferous epithelium of coati (Nasua nasua, 1766)

G.S.C. Vasconcelos1, T.A.R. Paula, P.K.A. Campos, A.S Trece, M. Carretta Junior

Universidade Federal de Viçosa

1E-mail: [email protected] Introdução O objetivo desse estudo foi caracterizar o processo espermatogênico em quatis, descrevendo seus estádios associando os métodos de morfologia tubular e sistema acrossômico, além de determinar a duração do ciclo do epitélio seminífero (CES) através da técnica de imunohistoquimica com administração prévia intratesticular de bromodeoxiuridina (BrdU), dados importantes para aplicação em biotécnicas reprodutivas voltadas tanto à programas de conservação como de controle populacional.

Material e Métodos Foram utilizados 6 quatis machos adultos, em que em dois deles foi administrado única injeção intratesticular de BrdU (0,2 mL) e após 6 dias, foi realizada a biópsia em todos os animais. Os animais foram anestesiados para a realização da biópsia testicular e o fragmento foi imediatamente imerso em solução fixadora de Karnovsky por 24 horas e posteriormente transferido para solução de álcool 70%. Para análise histológica os fragmentos foram incluídos em resina glicolmetacrilato e corados com azul de toluidina/borato de sódio 1%. Para a coloração do acrossoma, usou-se a técnica de ácido periódico de Schiff (PAS). Na análise histológica para identificação dos estádios do CES foi utilizado o método da morfologia tubular e do sistema acrossômico associados. A freqüência dos estádios do CES foi avaliada através da contagem aleatória dos mesmos em 100 secções transversais de túbulos seminíferos. Os fragmentos testiculares dos animais previamente injetados com BrdU foram incluídos em parafina, e as lâminas submetidas à detecção por anticorpo monoclonal e reveladas usando coloração do kit de coloração BrdU (Zymed®-Invitrogen). A duração do CES foi calculada através da observação da geração da célula e estádio mais avançados a apresentar a marcação.

Resultados e Discussão Em secções transversais de túbulos seminíferos de quati foi possível a descrição dos 8 estádios do CES a partir da morfologia e arranjo das diferentes gerações de células germinativas. Foram identificados 10 passos distintos no desenvolvimento acrossomal das espermátides, sendo que o passo 1 foi observado nas espermátides arredondadas no estádio V, e os demais passos nos estádios subseqüentes. O BrdU pôde ser detectada em espermatócitos primários em paquíteno no estádio VI, percorrendo cerca de 73,93% do CES. Assim, um CES de quatis dura cerca de 8,13 dias e o processo espermatogênico dura cerca de 36,58 dias.

Referências bibliográficas Balarini, M.K., Paula, T.A.R., Matta, S.L.P., Peixoto, J.V. Guião-Leite, F.L., Rossi Jr, J.L., Czermak Jr, A.C. Walker, N.J. Stages and duration of the cycle of the seminiferous epithelium in oncilla (Leopardus tigrinus, SCHREBER, 1775). 2010. Theriogenology. No prelo. Palavras-chave: BrdU, duração do ciclo do epitélio seminífero, quati. Keywords: BrdU, coati, seminiferous epithelium cycle duration. Apoio: FAPEMIG, IEF-MG



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Morfometria epididimária e sazonalidade reprodutiva em morcegos (Molossus molossus) Epididymal morphometry and reproductive seasonality in bat Molossus molossus

M.M. Neves1, D.B. Morais, M.J.Oliveira Neto, S.L.P. Matta, M.K. Balarini, A.C.T. Morais

1Lab. Biologia Estrutural, Depto Biologia Geral, Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução Apesar de existir controvérsias na literatura sobre a sazonalidade reprodutiva do morcego insetívoro Molossus molossus no território brasileiro (Fabián e Marques, 1989), resultados em Minas Gerais mostram que há diferenças entre as estações do ano sobre parâmetros morfométricos testiculares (Morais, 2008). O objetivo deste trabalho foi avaliar se estas diferenças também se refletem na morfometria da cabeça e cauda do epidídimo. Material e Métodos Morcegos adultos (n=15) foram coletados nas 4 estações climáticas, no município de Viçosa-MG. Após eutanásia, os epidídimos foram processados histologicamente, incluídos em resina e avaliados em microscopia de luz, utilizando-se fotomicroscópio (Olympus BX-40). As imagens (400X) foram analisadas no software Image Pro-Plus. Análises morfométricas realizadas: diâmetro tubular-DT, altura do epitélio-AE, diâmetro luminal-DL e proporções volumétricas dos constituintes epididimários: compartimento tubular (epitélio e lâmina basal)-CT, compartimento intertubular (tecido conjuntivo)-TC e lúmen-L, com ou sem espermatozóide. Para análise dos resultados utilizou-se ANOVA e teste de Duncan a 5% (STATISTICA 99). Resultados e Discussão As médias do DT de cabeça e cauda do epidídimo foram maiores no inverno (86 ± 44 e 135 ± 36µm, respectivamente) em relação as demais estações do ano, sendo reflexo dos maiores valores encontrados para lúmen com espermatozóides na cauda (26,2 ± 12%) e médias para DL, nesta mesma estação. No inverno, DL na cabeça foi maior (41 ± 16µm), quando comparada ao outono (28 ± 12µm), e na cauda (103 ± 44µm), quando comparada ao verão (55 ± 1 5µm). Considerando a AE, a região da cabeça teve maior média no outono e inverno que no verão (p<0,05), estação que apresentou menor AE na cauda, em relação às demais. Quanto a proporção volumétrica, a cabeça apresentou maior valor de CT nas estações de outono (68 ± 7%) e inverno (68 ± 3%) e menor TC (20 ± 9% e 18 ± 5%, respectivamente) em relação à primavera (CT: 59 ± 10%; TC: 30 ± 2%) (p < 0,05). Na cauda houve maior percentual de CT (média geral 38,4%) e menor TC (média geral 29,7%) também no outono e inverno, quando comparado a primavera (CT: 31,9 ± 11; TC 45,4 ± 10%) e verão (40,4% ± 10%). Os maiores valores no DT, DL e percentual de espermatozóides no lúmem da cauda no inverno coincidem com achados da morfometria testicular nesta espécie (Morais, 2008). Do mesmo modo a AE, que reflete a atividade celular, foi maior nos meses do outono e inverno, podendo-se inferir maior produção e consequente armazenamento de espermatozóides no epidídimo de M. molossus nestas estações. Referências bibliográficas Fabián ME, Marques RV. Rev Bras Zool, v.6, n.4, p.603-610, 1989. Morais DB. Morfologia e morfometria testicular em morcego insetívoro(Molossus molossus, Pallas, 1776 Chiroptera: Molossidae). Dissertação - Universidade Federal de Viçosa. 2008. 74f. Palavras-chave: cabeça, cauda, epidídimo, estação do ano. Keywords: caput, cauda, epididymis, season.



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Caracterização morfológica do sêmen de dois lobos-guará (Chrysocyon brachyurus) da microrregião de Viçosa

Morphological characterization of semen from two maned wolves (Chrysocyon brachyurus) from the micro region of Viçosa

F.T. Carneiro1, V.H. Dornelas e Silva, A.S. Trece, M. Carretta Junior,

A.R. Oliveira, T.A.R. Paula


Introdução O lobo-guará é citado como vulnerável na Lista Nacional das Espécies da fauna Brasileira Ameaçadas de Extinção de 2010 e no Apêndice II da CITES. A morfologia espermática é um parâmetro indispensável na avaliação seminal, pois é intrinsecamente implicada a problemas de fertilidade, tanto em canídeos como em outras espécies animais. O estudo morfológico das células espermáticas e sua relação com a infertilidade dos machos alcançaram maior importância com o advento da inseminação artificial em mamíferos. O seguinte trabalho objetiva caracterizar o ejaculado e descrever a morfologia espermática de lobos-guará. Material e Métodos Foram utilizados dois lobos-guará (Chrysocyon brachyurus) adultos, mantidos em cativeiro. Os animais foram condicionados até permitirem a coleta de sêmen pelo método de manipulação digital. O ejaculado dos animais foi avaliado quanto aos aspectos físicos (aparência e volume) e uma alíquota de sêmen foi avaliada quanto à motilidade espermática e ao vigor. Para avaliação da concentração e patologias espermáticas, uma alíquota do sêmen foi diluída em formol salino tamponado e analisada em câmara hematimétrica. A morfologia espermática foi avaliada em microscópio de contraste de fase e classificada quanto à presença de patologias espermáticas maiores e menores. Foram contabilizadas 200 células e todas as patologias destas eram registradas, ainda que mais de uma fosse encontrada num mesmo espermatozoide.

Resultados e Discussão A técnica de coleta de sêmen por manipulação digital mostrou-se eficiente em lobos-guará, pois foram realizadas, respectivamente, 7 e 10 coletas dos Animais 1 e 2. O volume do ejaculado variou de 0,5 a 3 ml a depender da duração da coleta, que variava de acordo com a cooperação do animal durante a sessão de condicionamento. A concentração espermática foi 42 ± 11,31x106 espermatozoides/ml, sendo que a motilidade espermática média foi de 40,42 ± 30,38% e vigor de 2,73 ± 0,89. A porcentagem média de espermatozoides morfologicamente normais foi 28,7 ± 11,5% e a de defeitos maiores e menores foi de 49,9 ± 20,2 e 28,6 ± 11,0, respectivamente. Trabalhos com coleta e caracterização de sêmen de lobos guará são escassos na literatura, principalmente devido a necessidade do condicionamento para coleta de sêmen, o que exige muita dedicação (até um ano, dependendo do animal). O elevado índice de patologias espermáticas possui causas multifatoriais, desde falhas nutricionais, estresse em cativeiro e até redução da variabilidade genética. Os animais estudados, apesar de possuírem elevada porcentagem de patologias, possuem fertilidade por “monta natural” comprovada.

Palavras-chave: Chrysocyon brachyurus, Lobo-guará, morfologia espermática. Keywords: Chrysocyon brachyurus, Maned Wolf, sperm morphology. Apoio: FAPEMIG, IEF.



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Estudo comparativo dos índices indicativos do rendimento espermatogênico em cinco diferentes espécies de felídeos da fauna brasileira

Comparative study of the indexes indicative of spermatogenic efficiency in five different species of felines from Brazilian fauna

A.R. Oliveira1, M. Carretta Júnior, M.M. Castro, F.T. Carneiro, V.H. Dornelas e Silva,

T.A.R. Paula, T. Deco S.


Introdução A maioria das 36 espécies de felinos não domésticos está ameaçada ou em extinção em pelo menos uma parte de sua área de ocorrência natural, sendo desta forma imprescindível o estabelecimento de metodologias aplicáveis à conservação destas espécies. Dados sobre o processo espermatogênico, além do conhecimento biológico básico sobre a morfofisiologia reprodutiva, fornecem importantes subsídios ao desenvolvimento de tecnologia em reprodução assistida. O objetivo deste trabalho é comparar os dados da população do epitélio seminífero e do índice indicativo do rendimento espermatogênico nas cinco espécies apresentadas. Material e Métodos Foram utilizados fragmentos testiculares de 5 gatos-do-mato (Leopardus tigrinus), 9 onças pardas (Puma concolor), 5 onças pintadas (Panthera onca), 5 jaguatiricas (Leopardus pardalis) e 4 gatos mouricos (Puma yagouarundi), sendo estes provenientes de estabelecimentos legalizados pelo IBAMA. Os fragmentos foram fixados e submetidos a processamento histológico em resina a base de glicol metacrilato para quantificação da população celular do epitélio seminífero e suas relações entre tipos celulares nas diferentes espécies estudadas. Resultados e Discussão Pôde-se perceber que durante a prófase meiótica não ocorreram grandes perdas celulares em nenhumas das espécies do presente trabalho, o que condiz com a maioria das espécies domésticas já estudadas (França & Russell, 1998). Já a perda no processo meiótico está em torno de 20 a 25% em jaguatiricas, onças pintadas, onças pardas e gatos mourisco, sendo de apenas 12% em gatos-do-mato-pequeno. O rendimento geral de espermetogênese (células arredondadas/espermatogônias A) nessas espécies variou bastante sendo: 18,9 em gatos mouriscos; 22,7 em onças pardas; 23,4 em onças pintadas; 51,93 em gatos-do-mato-pequeno; 57 em jaguatiricas. Por fim, as células de Sertoli dos gatos mouriscos possuem maior capacidade de suporte das células da linhagem germinativa que as dos outros felinos estudados, sendo capazes de manter 14,24 espermátides arredondadas, enquanto os gatos-do-mato-pequeno, as onças pintadas, as jaguatiricas e as onças pardas apresentaram 13,48, 11, 8,75, e 7,3 células arredondadas/ células de Sertoli, respectivamente. Referências bibliográficas França LR, Russell LD. The testis of domestic animals. In: Male reproduction: a multidisciplinary overview. 1998. p.197-219. Palavras-chave: espermatogênese, felídeos, rendimento espermatogênico. Keywords: felines, spermatogenesis, spermatogenic efficiency. Apoio: FAPEMIG, IEF-MG.



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Caracterização do ciclo do epitélio seminífero em cutias (Dasyprocta prymnolopha) criadas em cativeiro

Characterization of the seminiferous epithelium cycle in agouti (Dasyprocta prymnolopha) raized in captivity

A.R.N. Silva1, T.A. Gurjão1, A.C. Assis Neto2, G.T. Pessoa3, M.S. Ferraz3, M.A.M. Carvalho3, D.J.A. Menezes1

1Universidade Federal de Campina Grande, Campina Grande, PB; 2Universidade de São Paulo, São Paulo; 3Universidade

Federal do Piauí, Teresina, PI. E-mail: [email protected]/[email protected]

Introdução Cada vez mais espécies silvestres vêm sendo introduzidas em cativeiro, na busca de alternativas de fonte de proteína animal, bem como, de preservação na natureza. A cutia vem mostrando fácil adaptabilidade e boa profilacidade em cativeiro, com alguns criadouros comerciais já cadastrados no IBAMA. Com o intuito de contribuir com o conhecimento sobre a biologia reprodutiva de cutias, estudou-se as populações celulares do epitélio tubular, determinando os estágios do ciclo do epitélio seminífero. Material e Métodos Foram utilizados três cutias machos, pós-púberes, oriundos do criadouro de animais silvestres da Universidade Federal do Piauí, Teresina, PI. Os testículos foram colhidos por orquiectomia unilateral, e fragmentos foram processados para inclusão em parafina e obtenção de lâminas histológicas. Foram analisados 175 secções transversais de túbulos seminíferos para cada animal, por meio da microscopia de luz, e os estádios do CES foram caracterizados baseando-se no método de morfologia tubular. Resultados e Discussão Observou-se que a cutia apresenta oito estádios do ciclo do epitélio seminífero, segundo o método de morfologia tubular (Curtis, 1918; Ortavant et al., 1984). Em todos os estádios observam-se células de Sertoli e espermatogônias A em contato com a membrana basal. No estádio 6 ocorre espermatogônias intermediárias e nos estádios 7 e 8 espermatogônias tipo B. Espermatócitos em pré-leptóteno e paquíteno são observados nos estádios 8, 1 e 2, estando em zigóteno e diplóteno no estádio 3, em diplóteno no estádio 4 e em paquíteno nos estádios 5, 6 e 7. O estádio 4 caracteriza-se pela presença de figuras de meiose devido a divisão dos espermatócitos primários, sendo, em algumas secções, encontrados espermatócitos secundários nesse estádio. Espermátides arredondadas são observadas em quase todos os estádios, exceto no 2 (onde estão se alongando), 3 e 4. Espermátides alongadas aparecem a partir do estádio 2, e se apresentam em contínua migração para lúmen dos túbulos , estando preparadas para liberação no estádio 8. Presença de corpos residuais foram observadas nos estádio 7 e 8. Concluímos que o aparecimento e a organização dos tipos celulares caracterizaram cada um dos oito estádios do ciclo do epitélio seminífero na cutia. Referências bibliográficas Curtis GM. The morphology of the mammalian seminiferous tubule. Am J Anat, v.24, p.339-394, 1918 Ortavant R, Courot M, Hochereau-de-Reviers MT. Espermatogénesis en los mamíferos domésticos. In: Cole HH, Cupps PT (Ed.). Reprodución en los animals domésticos. 3.ed. Zaragoza: Acribia, 1984. p.171-190. Palavras-chave: cutia, epitélio seminífero,reprodução, roedor. Keywords: agouti, reproduction, redentia, seminiferous epithelium.



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Avaliação do processo espermatogênico em seis diferentes espécies de roedores Evaluation of spermatogenic process in six different species of rodents

M. Carretta Júnior1, A.R. Oliveira, T.A.R. Paula, L.C. Silva, L. Bergo C.F., V.H. Dornelas e Silva


Introdução Os roedores a muito são usados como animais de estimação, como cobaias em testes laboratoriais e, mais recentemente, como animal de criação para exploração comercial. Apesar disso ainda há poucos estudos referentes à espermatogênese dessas espécies. A avaliação histológica do testículo pode revelar injúrias no tecido testicular ou mesmo possibilitar a quantificação da capacidade reprodutiva da espécie ou indivíduo. Objetivou-se com esse trabalho estabelecer maiores informações sobre o processo espermatogênico desses animais. Material e Métodos Foram utilizados testículos de 6 camundongos (Mus musculus), 6 ratos (Ratus ratus), 3 cobaios (Cavia porcellus), 5 gerbils (Meriones unguiculatus) , 6 capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) e 5 pacas (Cuniculus paca), sendo estes de biotério, criações particulares e, no caso das espécies silvestres, criadouros legalizados pelo IBAMA. Os testículos coletados foram mensurados para obtenção de índices volumétricos e submetidos a processamento histológico em resina a base de glicol metacrilato para a confecção de lâminas histológicas para a analise morfológica destes. Resultados e Discussão Quanto aos índices gonadossomático os valores das espécies estudadas se encontram entre um intervalo de 0.116% para capivaras e 1.86% para gerbis, sendo que este valor tende a se apresentar maior em espécies poliândricas e menor nas poligínicas. A percentagem de parênquima testicular alocado em túbulo seminíferos variou bastante entre as espécies deste trabalho, estando os extremos entre 52% para a capivara e 91% pacas. Já as demais espécies mantiveram essa proporção entre 80e 90 %. Quanto às mensurações tubulares a unidade utilizada para comparação foi o comprimento tubular por grama de testículo, onde os valores encontrados foram de aproximadamente 9m/g em ratos, 13m/g em capivaras, 17 m/g em gerbis, 20 m/g em cobaios e camundongos e 29m/g em pacas. Quanto ao rendimento geral da espermatogênese os valores aproximados de espermatozóides formados por espermatogônia, através da análise da população do epitélio seminífero por secção transversal de túbulos em estágio I variou de 13 espermatozóides em capivaras, 15 em cobaio, 20 em paca, 26 em camundongo e gerbil e 28 em rato, demonstrando uma maior eficiência no processo em ordem inversa ao porte dos animais. Referências bibliográficas Kenagy GJ, Trombulak SC. Size and function of mammalian testes in relation to body size. J Mammal, v.67, p.1-22, 1986. Palavras-chave: espermatogênese, roedores, túbulo seminífero Keywords: rodents, seminiferous tubule, spermatogenesis. Apoio: FAPEMIG, IEF-MG.



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Criptorquidismo em jaguatirica de vida livre – Relato de caso Cryptorchidism in free-living ocelot – case report

G.R. Araújo, T.A.R. Paula1, T. Deco S., R.M. Garay, L. Bergo C.F., L.C. Silva, J.B.S. Ferrer

Dpto Veterinária Universidade Federal de Viçosa, UFV, Viçosa, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução Devido à destruição de seu hábitat e à caça predatória as populações de jaguatiricas reduziram consideravelmente. Populações pequenas e isoladas ficam vulneráveis à perda da variabilidade genética, o que pode resultar na fixação de certos alelos, perda de adaptabilidade individual e o aparecimento de patologias reprodutivas. O objetivo do presente trabalho é relatar um caso de criptorquidismo em uma jaguatirica de vida livre. Relato de Caso Um macho adulto de jaguatirica foi capturado na região sul do Parque Estadual do Rio Doce-MG (autorização IBAMA nº 12.593 e IEF-MG nº 157/07). O animal foi contido quimicamente e após entrar em plano anestésico, foi realizada sua avaliação clínica. Ao exame andrológico observou-se que o testículo esquerdo localizava-se subcutâneo, próximo à região inguinal, com consistência flácida e tamanho consideravelmente reduzido em relação ao testículo contralateral, tratando-se de um animal criptorquidico. O tamanho das espículas foi avaliado subjetivamente pela equipe, e não apresentava alteração em relação a outras jaguatiricas não criptorquidicas já estudadas. O volume testicular foi mensurado por meio da fórmula do volume do elipsóide: 4/3π ABC, onde A= largura/2, B= espessura/2 e C= comprimento/2. O volume dos testículos direito e esquerdo foi, respectivamente, 11,50 e 2,57 cm3. Discussão Testículos criptorquidicos normalmente são hipoplásicos e afuncionais quanto à produção de espermatozóides, muito embora possa manter a atividade de produção de testosterona. A presença de espículas em felinos é andrógeno dependente, e pode ser utilizada como preditora da capacidade androgênica individual. Logo, podemos inferir que o referido animal apresentava atividade androgênica normal, possivelmente sem prejuízos consideráveis à sua capacidade reprodutiva, visto a consistência e volume normais do testículo contralateral. A redução da variabilidade genética é observada em algumas espécies isoladas geograficamente, e é um fator predisponente ao aumento da incidência de critorquidismo. Há evidências de que este processo está ocorrendo com pumas da Flórida em que foram observados os mais baixos níveis de diversidade genética de qualquer subespécie de puma examinados. Um dos principais fatores de endogamia é o isolamento populacional causado pela perda e fragmentação de habitat. Logo o achado relatado no presente trabalho torna-se preocupante, visto que a presença de carnívoros criptorquídicos pode ser um indicativo da ocorrência de baixa variabilidade genética. No entanto, é uma característica pouco estudada e pouco relatada em felinos silvestres de vida livre. Referências Bibliográficas Amann RP, Veeramachaneni DNR. Cryptorchidism in common eutherian mammals. Reproduction, v.133, p.541–561, 2007. Palavras chave: felino, reprodução, testículo ectópico. Keyword: ectopic testicle, reproduction, wild cat. Apoio: FAPEMIG, IEF-MG.



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Sobrevivência de espermatozóides de catetos (Tayassu tajacu Linnaeus, 1758) após a descongelação e re-diluição em água de coco em pó ACP®

Survival of collared peccary (Tayassu tajacu Linnaeus, 1758) sperm after thawing and re-dilution in powdered coconut water (ACP®)

L.B. Campos, M.A. Silva, J.A.B. Bezerra, T.S. Castelo, G.C.X. Peixoto, A.R. Silva

1Laboratório de Conservação e Germoplasma Animal, UFERSA, Mossoró, RN.


Introdução Estudos sobre a criopreservação do sêmen de catetos são bastante recentes (Castelo et al., 2010), e técnicas de inseminação artificial para esta espécie não foram ainda estabelecidas. Para a inseminação, muitas vezes faz-se necessária a expansão do volume inseminante. Neste sentido, o presente trabalho objetivou avaliar a sobrevivência de espermatozóides de catetos após descongelação e re-diluição em ACP®, associados ou não a centrifugação prévia. Material e Métodos O sêmen de 12 catetos adultos foi coletado por eletroejaculação e avaliado. Procedeu-se a diluição em ACP®, acrescido de 10% de gema de ovo e 3% de glicerol, a uma concentração final de 100 x 106 espermatozóides/mL. As amostras foram envasadas em palhetas de 0,25 mL, congeladas e armazenadas em nitrogênio líquido. Após uma semana, foram descongeladas em banho-maria a 37ºC/min e divididas em duas alíquotas: uma submetida à centrifugação(C) e a outra sem centrifugação (SC), ambas re-diluídas em ACP®. Foi realizado o teste de termoresistência, no qual avaliou-se a motilidade espermática progressiva (0-100%) por 120 minutos. Os resultados foram analisados por ANOVA, seguido do teste t de Student (P < 0,05). Resultados e Discussão A Tab. 1 mostra que não foram evidenciadas diferenças significativas entre os dois tratamentos (centrifugado x não centrifugado). Verificou-se que os espermatozóides de catetos apresentam uma baixa longevidade pós-descongelação, observando-se uma redução da motilidade espermática já a partir dos 10 minutos. Conclui-se que não é necessário centrifugar o sêmen de catetos após a descongelação e que a longevidade espermática nesta espécie é baixa após a descongelação e re-diluição em ACP®. Tabela 1. Média e Desvio Padrão* da motilidade espermática progressiva no sêmen de catetos descongelado, submetido (C) ou não à centrifugação (SC), e rediluído em ACP®.

Tempos de Avaliação (min) 0 10 30 60 90 120

C 34,6 ± 8,4 29,2 ± 6,9 11,7 ± 5,0 3,8 ± 1,8 1,3 ± 0,9 0,0 ± 0,0 NC 32,9 ± 7,4 32,9 ± 7,3 15,0 ± 4,0 6,7 ± 3,2 1,7 ± 0,7 1,3 ± 0,7

C = Centrifugado, NC = Não centrifugado. *P > 0,05. Referências bibliográficas Castelo TS, Bezerra FSB, Lima GL, Alves HM, Oliveira IRS, Santos EAA, Peixoto GCX, Silva AR. Effect of centrifugation and sugar supplementation on the sêmen cryopreservation of captive collared peccaries (Tayassu tajacu). Cryobiology, v.61, p.275-279, 2010. Palavras-chave: ACP®, catetos, descongelação, sêmen, termorresistência. Keywords: ACP®, collared peccary, thawing, thermoresistance.



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Comparação de diferentes crioprotetores na congelação de espermatozóides epididimários de cutias (Dasyprocta agouti)

Comparison of different cryoprotectants on the cryopreservation of agouti epididymal sperm (Dasyprocta agouti)

T.C. Dantas1,3, M.A. Silva1, T.S. Castelo1, A.R.F. Ricarte1, M.F. Oliveira2, A.R. Silva1

1Laboratório de Conservação de Germoplasma Animal, UFERSA, Mossoró, RN; 2Departamento de Ciências Animais,


Introdução Como forma de garantir a manutenção das cutias (Dasyprocta agouti), seja no intuito da sua conservação ou na exploração sustentável, é sugestiva a utilização das biotécnicas reprodutivas. Para o aproveitamento do material genético de animais mortos acidentalmente, ou daqueles provenientes de abatedouros, é proposta a criopreservação de espermatozóides oriundos da reserva epididimária (Silva et al., 2010). O objetivo deste trabalho foi criopreservar os espermatozóides epididimários de cutias, comparando a ação de diferentes substâncias crioprotetoras.

Material e Métodos Os complexos epidídimos-vasos deferentes de cinco machos adultos de cutia, oriundos do abate programado anual do CEMAS/UFERSA, foram utilizados. Os espermatozóides foram coletados por lavagem retrógrada do epidídimo (Ferraz et al., 2010) e, em seguida, avaliados conforme sugerido pelo CBRA. Procedeu-se a diluição em ACP® com 20% de gema de ovo, testando-se os crioprotetores glicerol, etilenoglicol, dimetilsulfóxido e dimetilformamida, todos a 6%. As amostras foram congeladas e, após uma semana, foram descongeladas e reavaliadas. Os resultados foram analisados pelo ANOVA seguido do teste t de Student.

Resultados e Discussão As amostras a fresco apresentaram 95 ± 1,6 % de motilidade espermática com vigor 4,8 ± 0,2, verificando-se uma redução significativa após a descongelação em todos os tratamentos. No uso do glicerol, verificou-se motilidade de 36 ± 14% com vigor 3,6 ± 0,2, valores superiores aos demais tratamentos (P < 0,05), tendo sido observados 17 ± 10,8% de motilidade com vigor 3 ± 0,5 para o dimetilsulfóxido, 13 ± 7,2% de motilidade com vigor 2 ± 0,6 para o etilenoglicol, e 3 ± 1,2% de motilidade com vigor 1,1 ± 0,6 no uso de dimetilformamida (P > 0,05). Os resultados obtidos com o glicerol são superiores àqueles previamente demonstrados por Silva et al. (2010) na mesma espécie, utilizando este crioprotetor. Estes resultados são ainda preliminares, mas sugerem a utilização do glicerol como crioprotetor para os espermatozóides epididimários de cutias.

Referências bibliográficas Ferraz MS, Menezes DJA, Pessoa GT, Cabral RM, Illera MJ, Silva AR, Carvalho MAM. Collection and evaluation of epididymal sperm in captive agoutis (Dasyprocta aguti). Theriogenology, v.75, p.459-462, 2010. Silva MA, Peixoto GCX, Santos EAA, Bezerra FSB, Castelo TS, Sousa PC, Silva AR. Cryopreservation of epididymal sperm of agouti (Dasyprocta aguti) using Tris and powder coconut water (ACP®) extenders. Anim Reprod, v.7, p.298, 2010. Palavras-chave: criopreservação, crioprotetores, cutias, epidídimo, espermatozóide. Keywords: agouti, cryoprotectants, epididymis, freezing, sperm.



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Criopreservação do sêmen de Cebus apella em diluidor ACP® 118 a 5 e 7 % de glicerol Semen cryopreservation of Cebus apella in ACP®-118 extender with 5 and 7% of glycerol

D.L. Leão1,3,4,5, K.O. Guimarães4, S.A. Miranda1,2,4, A.B. Brito1,2,4, I.S. Sodré4, D.V.C. Almeida1,3,4, S.F.S. Domingues1,2,3,4

1Laboratório de Biologia e Medicina de Animais Domésticos e Silvestres da Amazônia, UFPA, Castanhal, PA; 2Programa de Pós-graduação em Ciência Animal, UFPA, Belém, PA; 3Faculdade de Medicina

Veterinária, UFPA, Castanhal, PA; 4Centro Nacional de Primatas, Ananindeua, PA. 5E-mail: [email protected]

Introdução A utilização de biotécnicas aplicadas à reprodução de animais silvestres vem sendo proposta como ferramenta na conservação de espécies em ameaça de extinção ou com linhagens de alto valor para pesquisa biomédica (Wolf, 2009). Na congelação de sêmen de primatas não humanos, diversos tipos de diluidores e seus efeitos crioprotetores têm sido testados de acordo com a espécie estudada, com a finalidade de buscar o melhor protocolo para a manutenção da viabilidade espermática. Em Cebus apella, somente um trabalho relatou a criopreservação de sêmen utilizando água de coco in natura e TES-TRIS a 2,5 e 3,5% de glicerol, respectivamente (Oliveira et al., 2011). No entanto, este protocolo exige melhorias que permitam a recuperação da motilidade espermática após o descongelamento. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a criopreservação do sêmen de Cebus apella em diluidor a base água de coco em pó (ACP® 118) a 5 e 7% de glicerol. Material e Métodos Foram utilizados dois machos adultos da espécie Cebus apella. As coletas (n=3) do sêmen foram realizadas por eletroejaculação com probe retal, após a contenção química dos animais com Cloridrato de Ketamina (12mg/kg) e Cloridrato de Xilazina (1mg/kg). O sêmen obtido foi diluído na fração A do ACP®-118 (5,84 g de ACP®-118 e 50 ml de água ultrapura) e mantido em banho-maria a 37 °C. Após dissolução do coágulo foi acrescentado à fração B do diluidor (80mL da fração A, 20 ml de gema de ovo e 5% ou 7% de glicerol). O sêmen foi então envasado em palhetas, resfriado a 4°C e congelado (-196°C) em nitrogênio líquido. As palhetas foram descongeladas a 36°C por 30 segundos. A motilidade, o vigor, o percentual de espermatozóides vivos foram analisados antes e após a criopreservação. O vigor e a motilidade foram avaliados de forma subjetiva, já o percentual de espermatozóides vivos foi avaliado por meio da coloração eosina-nigrosina. Os resultados foram expressos em média ± desvio-padrão. Resultados e Discussão O percentual de espermatozóides vivos, a motilidade e o vigor antes da criopreservação foram 80,8 ± 12; 76,6 ± 12,9 e 4 ± 0,8, respectivamente. A 5% de glicerol, o percentual de espermatozóides vivos, motilidade e vigor após a descongelação foram 61 ± 4,5; 14 ± 8 e 3,3 ± 0,5 e a 7% de glicerol foram 57,3 ± 2; 8,3 ± 5,7 e 3,3 ± 0,5, respectivamente. Desta forma, o diluidor ACP®118 em ambas as concentrações de glicerol foi capaz de manter espermatozóides vivos e com motilidade após a criopreservação do sêmen de Cebus apella sem a adição de ativadores espermáticos, como a cafeína. Referências bibliográficas Oliveira KG, Miranda SA, Leão DL, Brito AB, Santos RR, Domingues SFS. Semen coagulum liquefaction, sperm activation and cryopreservation of capuchin monkey (Cebus apella) semen in coconut water solution (CWS) and TES-TRIS. Anim Reprod Sci, v.123, p.75-80, 2011. Wolf DP. Artificial insemination and the assisted reproductive technologies in nonhuman primates. Theriogenology, v.71, p.123-129, 2009. Palavras-chave: ACP® 118, Cebus apella, criopreservação. glycerol, sêmen. Keywords: ACP® 118, Cebus paella, cryopreservation, glycerol, semen.



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Avaliação da fertilidade de pequenos felinos selvagens através do exame andrológico e citológico

Evaluate the fertility of wild felids through andrological examination and testicular cytology

C.F. Noronha, S.M.C. Suzano, D.A. Balthazar, A.F. Brasil, A.M.R. Ferreira, D.K. Vieira

Universidade Castelo Branco, Centro Universitário Plínio Leite, Universidade Federal Fluminense E-mail: [email protected]

Introdução O estudo do sêmen resguarda o potencial genético e auxilia nas biotécnicas da reprodução e pode ser grande de grande esperança nas espécies de felinos selvagens ameaçados de extinção. O objetivo do trabalho foi avaliar a capacidade reprodutiva de pequenos felinos selvagens, atra vés de exames andrológicos e citologia testicular, com punção por agulha fina sem aspiração. Material e Métodos Foram examinados cinco gatos-do-mato pequenos (Leopardus tigrinus, Schreber, 1775), com idade entre 4 e 11 anos do RIOZOO (RJ). Foram realizados exame andrológico completo e citologia testicular. Durante os exames, estes foram anestesiados e sedados. As amostras de sêmen foram coletadas pelo método de eletroejaculação e examinadas quanto às características macro e microscópicas. Após os exames foi realizada a punção sem aspiração dos testículos. Resultados e Discussão Os animais apresentaram normalidade no exame clínico. Os ejaculados apresentaram coloração branco leitoso e pH 8,0. A média e o respectivo desvio padrão da motilidade observada foi de 79,0 ± 14,31, o vigor variou de 3 a 4 e o total de defeitos foi 31,35 ± 6,14%. (Morato et al., 2004). Na citologia testicular foram encontradas células da linhagem espermática (espermatogônia, espermatócito, espermátides iniciais e finais, espermatozóide e multinucleadas) e Sertoli (Paz et al. 2003, Souza et al. 2004 e Vieira et al., 2007). Não foram encontradas bactérias e células neoplásicas. No teste de Mann-Whitney não foi verificada diferença estatisticamente significativa (p>0,05) nas características avaliadas, não havendo diferenças significativas. Conclui-se que, todos os felinos selvagens são férteis; a punção sem aspiração mostrou-se ser uma técnica simples, rápida e eficiente; a citologia testicular é um importante método auxiliar no diagnóstico de casos de subfertilidade e infertilidade. Referências bibliográficas Morato RG, Barnabe RC. Biotécnicas de reprodução aplicadas à preservação de felídeos selvagens. Clín Veta, v.1, n.12, p.24-26, 1998. Morato et al. Seasonal variation in endocrine-testicular function of captive jaguars. Theriogenology, v.617, n. 8, p.1273-1281, 2004. Paz RCR et al. Citologia aspirativa por CAAF em testículo de onça pintada, utilizada como ferramenta no diagnóstico de infertilidade. Braz Vet Res Anim Sci,v.40, n.2, p.100-107, 2003. Vieira DK et al.. Avaliação clínica, citológica e seminal em gatos domésticos (Felis catus) para seleção de reprodutores. In: Congresso Brasileiro Reprodução Animal, 17, Goiânia, GO. Anais... Belo Horizonte: CBRA, 2007. p.235. Palavras-chave: citologia, eletroejaculaçao, felinos selvagens, testículos Keywords: cytology, electroejaculation, testis, wild felines.



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Avaliação do sêmen da espécie Cebus apella após o resfriamento em diluidor ACP®-118 Semen evaluation of Cebus apella species after cooling in ACP®-118 extender

D.V.C. Almeida1,3,4,5, I.S. Sodré4, S.A. Miranda1,2,4, K.O. Guimarães1,2,4, D.L. Leão1,3,4, A.B. Brito1,2,4, S.F.S. Domingues1,2,3,4

1Laboratório de Biologia e Medicina de Animais Domésticos e Silvestres da Amazônia, UFPA, Castanhal, PA; 2Programa de Pós-graduação em Ciência Animal, UFPA, Belém, PA; 3Faculdade de Medicina

Veterinária, UFPA, Castanhal, PA; 4Centro Nacional de Primatas, Ananindeua, PA. 5E-mail: [email protected]

Introdução A ocorrência de primatas não humanos em risco de extinção e a necessidade do emprego de algumas espécies em pesquisas biomédicas são os principais fatores que têm instigado estudos visando o desenvolvimento de biotécnicas aplicadas à reprodução de primatas neotropicais (Domingues & Bussiere, 2006). Em Cebus apella, a congelação de sêmen vem sendo investigada, e a otimização das etapas, como o resfriamento e a escolha do diluidor a ser utilizado são imprescindíveis para o sucesso desta biotécnica. Recentes estudos demonstraram a eficiência da água de coco em pó (ACP®-118) na dissolução do coágulo seminal e na manutenção da integridade espermática em C. apella (Oliveira et al., 2010). Dessa forma, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a eficácia do ACP®-118 após 30 horas de resfriamento do sêmen de C.apella. Material e Métodos Foram utilizados seis machos adultos da espécie C. apella. As coletas do sêmen foram realizadas por eletro-ejaculação com probe retal, após a contenção química dos animais com Cloridrato de Ketamina (12mg/kg) e Cloridrato de Xilazina (1mg/kg), como descrito por Oliveira et al. (2010). O sêmen coletado foi diluído na fração A do ACP®-118 (5,84 g de ACP®-118 e 50 ml de água ultrapura) e mantido em banho-maria a 37 °C. Após dissolução do coágulo, foi adicionada a fração B do diluidor (80 mL da fração A e 20 ml de gema de ovo). O sêmen foi então envasado e resfriado a 4 °C por 30 horas. Volume, concentração e morfologia espermática foram mensurados após a primeira diluição do sêmen. O percentual de espermatozóides vivos, a motilidade e o vigor foram avaliados antes e após o resfriamento. O percentual de espermatozóides vivos foi analisado por meio da coloração eosina e nigrosina. Enquanto os dois últimos foram avaliados de forma subjetiva. Os resultados foram expressos em média ± desvio-padrão. Resultados e Discussão O volume médio, a concentração e o percentual de espermatozóides normais foram 0,6 ± 0,2 mL; 1.806 ± 367x106 espermatozóides/mL e 81,3 ± 2%, respectivamente. O percentual de espermatozóides vivos, a motilidade e o vigor antes do resfriamento foram 86 ± 7,1%, 91 ± 6,5% e 4,6 ± 0,8, respectivamente. O percentual de espermatozóides vivos, a motilidade e o vigor após 30 horas de resfriamento foram 73 ± 4,4%; 64 ± 8,9 e 2,8 ± 0,4 respectivamente. O diluidor ACP®-118 foi capaz de conservar o sêmen em estado líquido por várias horas, mantendo a viabilidade espermática, o que torna possível sua utilização no resfriamento do sêmen de C. apella. Referências bibliográficas Domingues SFS, Bussiere MCC. Fisiologia e biotécnicas da reprodução desenvolvidas em fêmeas de Primatas Neotropicais importantes para a pesquisa biomédica. Rev Bras Reprod Anim, v.30, n.1/2, p.57-71, 2006. Oliveira KG; Castro PHG; Muniz JAPC, Domingues SFS. Conservação do sêmen e liquefação do coágulo seminal de macaco-prego (Cebus apella) em água de coco em pó ACP-118®), em diferentes temperaturas. Cienc Rural, v.40, p.1-15, 2010 Palavras-chave: ACP®, Cebus apella, resfriamento, sêmen. Keywords: Cebus paella, cooling, ACP, semen.



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Ciclo do epitélio seminífero do morcego insetívoro Molossus molossus, caracterizado pela morfologia tubular e sistema acrossômico

Cycle of the seminiferous epithelium of an insectivorous bat Molossus molossus, characterized by tubular morphology and acrosomal system

D.B. Morais1,4, T.A.R. Paula2, S.L.P. Matta3

1Departamento de Biologia Geral, UFV Viçosa, MG; 2Departamento de Veterinária, UFV, Viçosa, MG.

4E-mail: [email protected] Introdução Existe dificuldade na identificação dos estádios do ciclo do epitélio seminífero (CES), pelo método da morfologia tubular, que apresentem duas gerações de espermátides. Assim, objetivou-se aliar duas metodologias para descrição do CES, descrevendo-o pelo método da morfologia tubular, e individualizando as espermátides pelo sistema acrossômico, utilizando-se como modelo de estudo o morcego Molossus molossus. Material e Métodos Cinco M. molossus adultos foram capturados no verão, no município de Viçosa-MG. Após processamento histológico de rotina, os testículos foram incluídos em historesina e analisados em microscópio de luz. Para as análises pelo método da morfologia tubular (MMT) as preparações foram coradas com azul de toluidina/borato de sódio 1% e para a visualização pelo método do sistema acrossômico (MSA), utilizou-se coloração por PAS + hematoxilina. Resultados e Discussão Pelo MMT o CES em M. molossus foi dividido em 8 estádios (algarismos romanos), seguindo o padrão encontrado nas outras espécies de mamíferos (França e Russell, 1998; Beguelini et al., 2009). Uma caracterização mais apurada dos referidos estádios foi obtida pela associação com o MSA descrevendo a morfologia acrossomal em diferentes passos (algarismos arábicos) ao longo do seu desenvolvimento. Assim, nos 8 estádios descritos pelo MMT, foram observados 10 passos acrossomais. Como as espermátides são originadas no estádio V (MMT), aqui tem início os passos caracterizados pelo MSA. Assim, no estádio I observa-se a presença do passo acrossomal 5, no estádio II o passo 6, no estádio III o passo 7, e no estádio IV o passo 8. A partir do estádio V são observadas duas gerações de espermátides: uma recém formada sem acrossoma, no passo 1, e outra mais antiga no passo 9, com o acrossoma recobrindo toda a superfície nuclear. No estádio VI observam-se espermátides no passo 2, com vesículas acrossômicas iniciando contato com o núcleo e no passo 10, com seus núcleos em processo de alongamento e condensação, considerados em fase final de formação. No estádio VII observam-se os passos 3 e 10 e no estádio VIII os passos 4 e 10. Do passo 3 ao 6, o acrossoma ocupará de 95 até 270º da superfície nuclear da espermátide. A combinação dos dois métodos representa alternativa de maior precisão espécie-específica, permitindo a comparação interespecífica do processo espermatogênico a partir de duas metodologias descritivas usuais para o CES. Referências bibliográficas Beguelini MR, Moreira PRL, Faria KC, Marchesin, SRC. Morphological characterization of the testicular cells and seminiferous epithelium cycle in six species of neotropical bats. J Morphol, v.270, p.943-953, 2009. França LR, Russell LD. The testis of domestic mammals. In: Martinez-García F, Regadera J. (Ed.). Male Reproduction. Madri: Churchill Communications Europe, 1998. p.197-219, Palavras-chave: espermátides, estádios, sistema acrossômico. Keywords: acrosomal system,spermatids, stage.



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Avaliação da integridade funcional da membrana dos espermatozóides de tatus-peba (Euphractus sexcinctus) em diferentes soluções hiposmóticas

Assessment of functional membrane integrity of the six-banded armadillo (Euphractus sexcinctus) using different hypoosmotic solutions

K.D.M. Emerenciano1, E.A.A. Santos, P.C. Sousa, T.S. Castelo, A.R.F. Ricarte, A.R. Silva

Laboratório de Conservação e Germoplasma Animal, UFERSA, Mossoró, RN.

1E-mail: [email protected] Introdução A solução hiposmótica utilizada para avaliar a integridade funcional da membrana plasmática de espermatozóides varia de acordo com as diferentes espécies. Em tatus-peba (Euphractus sexcinctus), existe apenas um estudo que descreve suas características seminais, e mostra a utilização da água destilada (0 mOsm/L) para o teste hiposmótico (Serafim et al., 2010). O presente trabalho objetivou comparar soluções com diferentes osmolaridades para analisar a integridade da membrana plasmática dos espermatozóides de tatus-peba, estabelecendo correlações com outras características espermáticas. Material e Métodos Doze ejaculados foram coletados de 4 tatus machos por eletroejaculação e avaliados quanto ao percentual de células vivas, motilidade, vigor, e morfologia. O sêmen foi dividido em alíquotas, e estas foram incubadas por 40 minutos a 34°C em água destilada e em soluções de frutose apresentando 50, 100 e 150 mOsm/L. Na análise microscópica, determinou-se o percentual de espermatozóides reagidos mostrando edema e enrolamento de cauda, o que denotava a integridade funcional da membrana. A presença de correlações entre a resposta osmótica e as demais características seminais foi estabelecida pelo teste de correlação de Spearman (P < 0,05). Resultados e Discussão No sêmen dos tatus-peba, foram detectadas 84,9 ± 4,2% de células vivas, sendo 65,8 ± 7,1% de espermatozóides móveis com vigor 1,4 ± 0,1, e 89.5 ± 1.5% de células com morfologia normal. A solução a 50 mOsm/L foi superior as demais (P < 0,05), apresentando 59,5 ± 5,9% de integridade funcional de membrana, enquanto as demais apresentaram 55,4 ± 8,4% (água destilada), 49,5 ± 5,9% (solução a 100 mOsm/L) e 53,9 ± 7% (solução a 150 mOsm/L). A solução a 50 mOsm/L apresentou uma correlação significativa (r = 84%) com a porcentagem de células vivas. Em conclusão, sugere-se o uso da solução de frutose a 50 mOsm/L para a realização do teste hiposmótico em tatus-peba. Referências bibliográficas Serafim MKB, Lira RA, Costa LLM, Gadelha ICN, Freitas CIA, Silva AR. Description of semen characteristics from six-banded armadillos (Euphractus sexcinctus) collected by electroejaculation. Anim Reprod Sci, v.118, p.362-365, 2010; Palavras-chave: sêmen, tatus, termorresistência, teste de hiposmotico. Keywords: armadillo, hypo-osmotic swelling test, semen, thermoresistance.



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Eficiência da coleta de sêmen por eletroejaculação em tatus-peba (Euphractus sexcinctus) anestesiados ou sob contenção mecânica

Efficiency of the semen collection by electroejaculation in six-banded armadillo (Euphractus sexcinctus) under anesthesia or mechanical restraint

A.R.F. Ricarte1,3, R.N.L. Amorim1, A.L.C. Paiva2, V.V. Paula2, C.I.A. Freitas2, A.R. Silva1

1Laboratório de Conservação e Germoplasma Animal, UFERSA, Mossoró, RN; 2Departamento de Ciências Animais,


Introdução A coleta de sêmen em tatus-peba (Euphractus sexcinctus) é ainda um procedimento pouco corriqueiro. Na literatura corrente, existe apenas um trabalho descrevendo este procedimento (Serafim et al., 2010), no qual os animais foram submetidos a eletroejaculação sem utilização de anestésicos. Entretanto, os autores citam que os animais mostravam grande desconforto ao procedimento. Assim, o presente trabalho objetiva estabelecer um protocolo anestésico para a coleta de sêmen em tatus-peba por eletroejaculação através da comparação da contenção mecânica com a contenção anestésica. Material e Métodos Quatro tatus-peba machos adultos foram utilizados no experimento. Inicialmente, cada animal foi contido mecanicamente com o uso de luvas apropriadas, e submetidos a três coletas de sêmen por eletroejaculação, a intervalos de 15 dias. Posteriormente, os mesmos animais foram contidos com pré-medicação a base de cetamina (7 mh/kg) e xilazina (1 mg/kg), seguida de manutenção do estado anestésico com propofol (5 mg/kg) em bolus, e novamente submetidos a três coletas de sêmen por eletroejaculação em intervalos de 15 dias. Os parâmetros fisiológicos dos animais foram avaliados durante todos os procedimentos. Totalizaram-se 12 procedimentos para cada tratamento, e a eficiência dos tratamentos foi avaliada pelo teste exato de Fisher (P < 0,05). Resultados e Discussão No uso apenas de contenção mecânica, foram coletados ejaculados em todos os procedimentos, constatando-se uma eficiência de 100%, mas os animais apresentaram vocalização e tentativas de fuga, bem como alteração de parâmetros fisiológicos. De modo similar (P > 0,05), os 12 procedimentos com os animais anestesiados denotaram uma eficiência de 100%, mas os animais permaneceram estáveis durante todos os procedimentos, sem alterações fisiológicas, e apresentando uma excelente recuperação do estado anestésico. Diante do exposto, sugere-se a utilização do protocolo anestésico a base de cetamina-xilazina-propofol para a contenção química de tatus-pebas submetidos a coleta de sêmen por eletroejaculação. Referências bibliográficas Serafim MKB, Lira RA, Costa LLM, Gadelha ICN, Freitas CIA, Silva AR. Description of semen characteristics from six-banded armadillos (Euphractus sexcinctus) collected by electroejaculation. Anim Reprod Sci, v.118:362-365, 2010. Palavras-chave: anestesia, eletroejaculação, sêmen, tatu. Keywords: anesthesia, armadillo, electroejaculation, semen.



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Padronização de um protocolo para a recuperação de espermatozóides epididimários de catetos (Tayassu tajacu) – Resultados preliminares

Standardizing a protocol for the recovery of epididymal sperm from collared peccaries (Tayassu tajacu) – Preliminary results

J.A.B. Bezerra1, A.M. Silva, G.C.X. Peixoto, M.A. Silva, T.S. Castelo, A.R. Silva

Laboratório de Conservação de Germoplasma Animal, UFERSA, Mossoró, RN.

1E-mail: [email protected] Introdução Os catetos (Tayassu tajacu) estão entre as principais espécies mamíferas vulneráveis a extinção no Brasil, sendo considerados criticamente ameaçados na Caatinga e na Mata Atlântica (ICMBIO, 2011). Uma vez que a obtenção de espermatozóides epididimários de animais ameaçados, em particular, daqueles mortos acidentalmente aparece como uma alternativa para a preservação de material genético, o presente trabalho objetivou padronizar um protocolo para a recuperação de espermatozóides epididimários de catetos. Material e Métodos Foram utilizados complexos epidídimos-vasos deferentes de cinco catetos adultos submetidos ao abate programado para controle populacional do Centro de Multiplicação de Animais Silvestres da UFERSA. De cada animal, as caudas epididimárias foram dissecadas, sendo uma delas submetida a lavagem retrógrada com diluente à base de Tris, e a outra fatiada e submetida à flutuação também em Tris. Os espermatozóides obtidos foram avaliados quanto à motilidade, vigor, viabilidade, integridade funcional da membrana e morfologia. Comparações entre os dois métodos foram realizadas pela análise de variância seguida do teste t de Student (P < 0,05). Resultados e Discussão As características dos espermatozóides estão representadas na Tabela 1, denotando-se que ambas as técnicas foram eficientes na recuperação de espermatozóides epididimários (P > 0,05). Estes resultados preliminares indicam que ambos os métodos poderiam ser aplicados na recuperação de espermatozóides epididimários em catetos. Tabela 1. Média ± EP das características dos espermatozóides obtidos do epidídimo de catetos por dois diferentes métodos de coleta*.

Lavagem Retrógrada Flutuação Número de espermatozóides coletados (× 106) 2.184 ± 980,1 2.470 ± 1.333,4 Motilidade (%) 16 ± 4,3 28 ± 11,6 Vigor (0 – 5) 2 ± 0,2 2 ± 0,6 Viabilidade (%) 60 ± 8,5 53,6 ± 8,6 Integridade funcional de membrana (%) 48,2 ± 9,9 59,2 ± 6,6 Morfologia normal (%) 46,4 ± 3,5 51,2 ± 5,7 *Não foram evidenciadas diferenças estatísticas entre os dois métodos (P > 0,05). Referências bibliográficas Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade (ICMBIO). Seis espécies de mamíferos dotados de casco correm risco de extinção no Brasil. Disponível em <www.icmbio.org.br> Acesso em: 25 de fevereiro de 2011. Palavras-chave: cateto, epidídimo, espermatozóide. Keywords: collared pecary, epididymis, sperm.



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População do epitélio seminífero e índice indicativo do rendimento espermatogênico de Leopardus pardalis (Linnaeus, 1758) adultos

Population of the seminiferous epithelium and indicative index of spermatogenic yield Leopardus pardalis (Linnaeus, 1758) adults

M. M. Castro1,3, A.R. Oliveira, M.C. Cupertino, M. Carreta Junior, T.A.R. Paula, J.V. Peixoto,

A.C. Csermak Junior, V.H. Dornelas e Silva, F.T. Carneiro

1Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG; 2Universidade Federal de Lavras, Lavras, MG. 3E-mail: [email protected]

Introdução A jaguatirica é uma das espécies de felinos brasileiros que está incluída no apêndice I da Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora (CITES) e na lista oficial de espécies ameaçadas de extinção do Instituto Brasileiro de Recursos Naturais Renováveis e do Meio Ambiente (IBAMA). Dados sobre o processo espermatogênico de animais silvestres, além do conhecimento biológico básico sobre a morfofisiologia reprodutiva, fornecem importantes subsídios ao desenvolvimento de tecnologia em reprodução assistida, auxiliando assim em um desempenho reprodutivo mais consistente em cativeiro. O presente trabalho objetivou estabelecer o rendimento intrínseco da espermatogênese e quantificar a população celular de secções transversais de túbulos seminíferos em estádio I através da metodologia de morfologia tubular em jaguatiricas machos adultas. Material e Métodos Foram utilizadas três jaguatiricas (Leopardus pardalis) machos adultas, mantidas em cativeiro. Os três animais foram submetidos à procedimentos de biópsia testicular feitas com auxílio de bisturi circular de 0,06mm. Após as coletas, os fragmentos testiculares foram imersos imediatamente em solução fixadora Karnovsky e após 24 horas de fixação, os fragmentos foram mantidos em álcool 70% até o momento do processamento histológico. Foram realizados cortes histológicos de 3µm, que foram corados com solução de azul de toluidina/borato de sódio 1% para a posterior análise morfológica tubular. Resultados e Discussão No epitélio seminífero da jaguatirica para cada secção transversal do túbulo seminífero em estádio I, foram observadas em média 2,15 espermatogônias do tipo A; 16,05 espermatócitos primários em pré-leptóteno/leptóteno; 14,25 espermatócitos primários em paquíteno; 59,04 espermátides arredondadas e 7,01 células de Sertoli. O rendimento geral da espermatogênese nessa espécie foi de aproximadamente 27,5 células, e, cada célula de Sertoli foi capaz de sustentar e manter 13,06 células da linhagem germinativa, dentre elas 8,43 espermátides arredondadas. O valor do rendimento geral está próximo dos demais felinos estudados, como o leão africano (22,1), onça parda (22,7), onça pintada (23,4), gato doméstico (16,3), gato mourisco (18,9). E o valor encontrado em jaguatirica referente à capacidade de suporte das células de Sertoli está dentro da amplitude observada para a maioria dos demais felinos estudados. Palavras-chave: espermatogênese, jaguatirica, produção espermática. Keywords: ocelot, spermatic production, spermatogenesis. Apoio: FAPEMIG, IEF.



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Exame andrológico em onça pintada (Panthera onca) proveniente da região Amazônica – Relato de Caso

Andrological examination of a jaguar (Panthera onca) from the Amazon – Case Report

H.V.R. Silva¹,3, L.M.P. Freire¹, J.N. Pinto¹, B.S. Pereira¹, A.C. Mota Filho¹, L.D.M. Silva¹, A.R. Silva²

¹Laboratório de Reprodução de Carnívoros, UECE, Fortaleza, CE; ² Laboratório de Conservação de Germoplasma Animal,


Introdução Dentre as 37 espécies da Família Felidae, destaca-se a onça pintada (Panthera onca) como o principal felino da fauna brasileira, encontrando-se sob crítico risco de extinção, segundo a Convenção sobre o Comércio Internacional de Espécies em Perigo. Visando a manutenção da diversidade genética, é importante a caracterização reprodutiva de animais mantidos em cativeiro, haja vista a possibilidade de conservação e intercâmbio do germoplasma entre regiões distintas. Neste sentido, o presente trabalho relata o exame andrológico realizado em uma onça pintada proveniente da região Amazônica, e mantida em cativeiro em uma instituição particular no Ceará.

Materiais e Métodos O exame foi realizado em julho de 2010. A referida onça apresentou idade estimada em 10 anos, 1,8 m de comprimento crânio-caudal, 0,8 m de circunferência torácica, peso estimado em 40 Kg, e estava clinicamente sadia. Segundo o histórico, o animal fora trazido da região Amazônica em meados de 2002, e desde então dividia um recinto com uma fêmea da mesma espécie. Apesar da monta efetiva e recorrente no decorrer dos anos, não fora obtida uma prole até então. Por ocasião do exame, o animal foi contido com associação tiletamina-zolazepam (Zoletil 50 - Virbac - Brasil), na dose de 10mg/Kg, IM, com auxílio de zarabatana, seguida de contenção mecânica utilizando-se cordas. Fez-se a inspeção da genitália externa e a coleta do sêmen por meio de eletroejaculação (Castelo et al., 2010). O sêmen coletado foi avaliado segundo recomendações do CBRA.

Resultados e Discussão O animal apresentava genitália externa normal, compatível com um macho adulto da espécie. O sêmen apresentou aspecto aquoso, coloração translúcida, viscosidade rala, volume de 2,7 mL, concentração de 130 milhões de espermatozóides/mL, 70% de motilidade e vigor 4, com 81% de integridade funcional de membrana segundo o teste hiposmótico, e 75% de células com morfologia normal, sendo verificados 9% de defeitos de cabeça, 5% de peça intermediária e 3,5% de cauda, além de 7,5% de defeitos acrossomais. Todos esses valores encontram-se dentro da normalidade para a espécie (Morato et al., 1999). Ressalta-se a importância dos dados aqui apresentados para a formação de um catálogo de espécimes de Panthera onca mantidos em cativeiro nas diferentes regiões do Brasil, no intuito de salvaguardar a diversidade biológica da espécie.

Referências bibliográficas

Castelo TS, Bezerra FSB, Souza ALP, Moreira MAP, Paula VV, Oliveira MF, Silva AR. Influence of the thawing rate on the cryopreservation of semen from collared peccaries (Tayassu tajacu) using Tris-based extenders. Theriogenology, v.74, p.1060-1065, 2010. Morato RG, Guimarães MABV, Ferreira F, Verreschi ITN, Barnabé RC. Reproductive characteristics of captive male jaguars (Panthera onca). Braz J Vet Res Anim Sci, v.36, n.5, 1999. Palavras-chave: animal silvestre, avaliação andrológica, onça pintada, Panthera onca, sêmen. Keywords: andrologic evaluation, jaguar, Panthera onca, semen, wild animal.



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Relação entre a concentração espermática e o perímetro escrotal em catetos (Tayassu tajacu, Linnaeus, 1758)

Relationship between sperm concentration and scrotal perimeter in collared peccaries (Tayassu tajacu, Linnaeus, 1758)

A.M. Silva, G.C.X. Peixoto, M.A. Silva, J.A.B. Bezerra, E.A.A. Santos, A.R. Silva

Laboratório de Conservação e Germoplasma Animal, UFERSA, Mossoró, RN.

1E-mail: andré[email protected] Introdução Os catetos são animais gregários e rústicos que produzem carne e couro de excelente qualidade, para os quais existe grande demanda internacional. A sua caça predatória tem representado, ao longo dos tempos, um importante recurso alimentar. Atualmente, esses animais estão sendo criados em cativeiro com objetivos econômicos, podendo representar, em algumas regiões do Brasil, uma importante forma de desenvolvimento sustentável. Sabendo-se que existem poucas informações sobre os catetos, o objetivo do trabalho foi determinar a existência de relações entre o perímetro escrotal (PE) com a concentração de espermatozóides produzidos pelo animal. Material e Métodos Foram utilizados 10 catetos machos adultos provenientes do CEMAS-UFERSA. Os animais foram contidos mecânica e quimicamente (Propofol, 5 mg/kg). A medição do PE foi feita com uma fita métrica no ponto de maior diâmetro testicular. Para a coleta do sêmen foi utilizado um eletroejaculador com o qual foi procedido um protocolo de eletroejaculação contínuo, variando de 5V a 12V durante 10 min. O ejaculado foi coletado no interior de tubos plásticos de 50mL e imediatamente avaliado segundo recomendação do CBRA. A concentração espermática foi determinada por meio da câmara de Neubauer. A existência de relações entre o perímetro escrotal e a concentração espermática foi verificada por meio do teste de correlação de Spearman (P < 0,05). Resultados e discussão O PE médio dos catetos foi mensurado em 19,5 ± 0,2 cm. Foram obtidas 28 amostras de sêmen, apresentando uma concentração média de 992,1 ± 159,6 x 106 espermatozóides/mL, tendo sido observada uma baixa relação (R=-28,8%) não significativa (P = 0,133) entre essas duas características. Resultados similares foram descritos em cães da raça Pastor Alemão, observando-se correlação de 0,10 (P > 0,05) entre PE e concentração espermática (Cortez et al., 2002). Por outro lado, em bovinos da Raça Gir, sugere-se que o PE pode ser utilizado como uma característica de eliminação prévia dos touros que são candidatos à coleta de sêmen (Martinez et al., 2000). Dessa forma, estes resultados preliminares sugerem que o perímetro escrotal não é um indicador apropriado da concentração espermática em catetos (Tayassu tajacu). Referências bibliográficas Cortez AA, Aquino-Cortez A Silva AR, Cardoso RCS, Silva LDM. Relação entre perímetro escrotal e concentração espermática em cães, clinicamente normais, da raça Pastor Alemão. Arq Bras Med Vet Zootec, v.54, n.5, p.549-550, 2002. Martinez ML, Verneque RS, Teodoro RL, Paula LRO, Cruz M, Campos JP, Rodrigues LH, Oliveira J, Vieira F, Bruschi JH, Durães MC. Correlações entre Características da Qualidade do Sêmen e a Circunferência Escrotal de Reprodutores da Raça Gir. Rev Bras Zootec, v.29, n.3, p.700-706, 2000

Palavras-chave: cateto, perímetro escrotal, concentração espermática. Keywords: collared peccary, scrotal perimeter, sperm concentration.



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Dimensões testiculares e aspectos anatômicos do falo de avestruzes (Struthio camellus) Testicular dimensions and anatomy of phallus of ostriches (Struthio camellus)

L.H.X. Silva, A.M.A. Gabriel1, R.G. Garcia, F. Cavichiolo, L.V. Moura, F.P. Monção,

E.R. Oliveira, A.D. Maidana, R.H.T.B. Goes

Faculdade de Ciências Agrárias, Universidade Federal da Grande Dourados, Dourados, MS. 1E-mail: [email protected]

Introdução O avestruz (Struthio camellus) é uma ave de origem africana que vem surgindo como alternativa mundial de diversificação na economia agropecuária. Como se trata de uma criação nova no mundo e, principalmente, no Brasil, torna necessário o maior número possível de pesquisas e relatos sobre a estrutiocultura. Assim objetivou-se avaliar a biometria e histometria testicular e verificar o aspecto anatômico do falo de avestruz, assim como verificar as possíveis correlações existentes entre as variáveis estudadas. Material e Métodos No presente trabalho foi realizado um estudo biométrico e histométrico dos testículos e uma avaliação anatômica dos falos de cinco avestruzes com idade média de 20,6 meses. Após serem abatidos, mediram os testículos e coletou fragmento dos mesmos para processamento histológico e na oportunidade fez-se uma avaliação macroscópica do falo. O volume do testículo foi obtido pela fórmula para cálculo de volume de uma elipsóide: V= 4π/3 x a x b 2, onde a é igual a metade do comprimento do testículo e b e igual a metade da largura do testículo, conforme descrito por Woodall e Johnstone (1988). Para estudo das medidas de tamanho, comprimento, circunferência dos testículos e tamanho dos falos foi utilizada estatística descritiva, média, desvio padrão e teste t de Student. O grau de correlação entre as características avaliadas foi realizado pelo método de Spermann.

Resultados e Discussão Ao realizar o exame macroscópico dos testículos na carcaça, foi verificado que o testículo esquerdo posicionava-se ligeiramente mais caudal que o direito, conforme também descrito por Carrer et al. (2004) e apresentava uma coloração rosa. A circunferência testicular media foi de 13,27 ± 0,2 cm, o volume, comprimento, largura e espessura testicular médio, 141,81 ± 1,70 cm3, 10,56 ± 1,5 cm, 4,23 ± 0,7 cm e 3,83 ± 0,7 cm, respectivamente. O diâmetro médio do túbulo seminífero (TS), 512,43 ± 77,9 µm e a espessura média do epitélio seminífero (EP), 135,11 ± 25,42 µm e o comprimento médio do falo estirado, 24,94 ± 3,40 cm. Os resultados desse estudo demonstraram haver correlação estatisticamente significativa (P > 0,05) entre a idade e as medidas biométricas testiculares. Entre a espessura do testículo e todas as características avaliadas, exceto o comprimento do falo; entre o comprimento dos testículos e a circunferência do testículo, o volume e largura dos testículos. Houve correlação significativa (P < 0,05) também entre o diâmetro do TS e a espessura do ES e a largura do testículo.

Referências bibliográficas Carrer CC, Elmôr RA, Kornfeld ME, Carvalho MC. A Criação de avestruz: guia completo de A a Z. São Paulo: C.C.Carrer, 2004. 255p. Woodall PF, Johnstone IP. Scrotal wibth as an index of testicular size in dogs and its relationship to body size. J Small Anim Pract, v.29, p.543-547, 1988. Palavras-chave: biometria testicular, estrutiocultura, histometria testicular. Keywords: ostriches, testicular biometrics, testicular histometric.



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Uso da técnica de ultrasonografia para avaliação da biometria testicular em galos The use of ultrasound technique to evaluate testicular biometry in roosters

D.F. Norte1,3, N.I.S. Cordeiro1, M.I.V. Melo1, J.T. Abreu1, B.D. Rocha1, J.V.M. Mambrini2

1PUC Minas, Betim, MG; 2Consultor estatístico. 3E-mail: [email protected]

Introdução Nos animais de produção a escolha dos reprodutores é de fundamental importância para se garantir a difusão genética com ganhos produtivos e reprodutivos das futuras gerações. Nos galos a posição interna dos testículos na cavidade celomática, não permite a estimativa da produção quantitativa espermática, a partir da biometria testicular direta. O objetivo geral desse experimento foi estudar a viabilidade de se proceder a biometria testicular através da ultrasonografia (US) em diferentes fases do desenvolvimento sexual de galos. Materiais e Métodos Foram utilizados 30 galos descartes de granja de reprodutores em diferentes fases do desenvolvimento sexual, para comparar a biometria testicular avaliada por US com a biometria direta. As fases de desenvolvimento sexual e a produção espermática foram atestadas pela avaliação da reserva gonádica do testículo esquerdo (TE) e da concentração espermática de material coletado do ducto deferente esquerdo, sendo todas as avaliações realizadas em animais já sacrificados. Os galos na fase de senilidade (> 48 semanas de idade; n=10) apresentaram peso corporal médio de 4,2 + 0,96 kg; adultos (24 a 48 semanas; n=15) 3,46 + 0,63 kg, e na fase puberal (12 a 24 semanas; n=05) 2,77 + 0,41 kg. Resultados e Discussão Na análise englobando as diferentes fases do desenvolvimento sexual estudadas, as correlações entre a biometria testicular direta e a biometria testicular avaliada por US foram: comprimento do TE r=0,84; comprimento do TD r= 0,83; espessura do TE r=0,74 e espessura do TD r=0,71. Os parâmetros analisados apresentaram alta correlação. Entretanto, é importante salientar que a biometria por US mostrou maior exeqüibilidade em galos adultos e senis. A reserva gonádica na fase de senilidade e adulta foram respectivamente, 471,33 + 376,80 e 360,45 + 407,77 milhões de espermatozóides/ testículo, e a concentração espermática na fase de senilidade e adulta foram respectivamente, de 72370,00 + 77460,05 e 21179,32 + 22477,04 milhões de espermatozóide por ml. Na fase puberal a reserva gonádica foi de 6,88 + 1,57 milhões de espermatozóides por testículo, não havendo liberação de espermatozóides na coleta pelo ducto deferente. Referências bibliográficas Fantini MOO. Efeitos da redução do peso corporal sobre as características reprodutivas de galos adultos de matriz pesada. 2007. 43f. Dissertação (Doutorado) – UFMG. Celeghini ECC et al, Avaliação das características seminais de galos selecionados para a reprodução pelo desenvolvimento da crista. Braz J Vet Res Anim Sci, São Paulo,v.38, n.4, p.177-183, 2001. Palavras-chave: biometria testicular, galo, reserva gonádica, ultrasonografia. Keywords: gonadic reserve, rooster, testicular biometry, ultrasound.



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Expressão do MHC classe I em blastocistos bovinos MHC class I expression in bovine blastocyst

J.M.S. Gallo, L.S. Braga, M.C. Martins1, B.G. Alves, T.H. Silva, B.G. Alves,

J.O. Jacomini, M.E. Beletti

Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, MG. 1E-mail: [email protected]

Introdução O embrião/feto é um semi-enxerto alogênico que precisa ser reconhecido pelo organismo materno como próprio para poder se desenvolver e não ser abortado. Reações imunológicas iniciam-se desde o momento da concepção até o momento do nascimento. O complexo principal de histocompatibilidade (MHC) de classe I é um dos responsáveis pela aceitação ou não desse novo ser pelo organismo materno. Sendo assim, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a expressão gênica do MHC classe I em blastocistos bovinos. Material e Métodos Para produção in vitro de embriões foram utilizados ovócitos aspirados de ovários de fêmeas nelores obtidos em abatedouros. Blastocistos, coletados no dia nove pós-FIV, foram fixados com acetona PA e posteriormente permeabilizados com triton X100, recuperados antigenicamente com citrato de sódio e bloqueados com de leite desnatado. Foram então incubados com anticorpo monoclonal de camundongo anti-MHC de classe I de ovelha e posteriormente com anticorpo de coelho anti-IgG de camundongo conjugado com FITC. Os núcleos foram marcados com iodeto de propídio. O material foi observado em microscópio confocal Zeiss LSM 510 META.

Resultados e Discussão Verificou-se que o trofoblasto de blastocisto bovino expressa MHC de classe I. Este fato poderia teoricamente levar a rejeição. Sabe-se que o trofoblasto entra em contado com o útero após a perda da zona pelúcida. No entanto, em bovinos, a adesão entre o embrião e o útero materno se inicia entre 28 e 32 dias após a ovulação e se completa entre 40 e 45 dias quando o blastocisto sofreu o processo de alongamento. Portanto, a expressão na fase de blastocisto com zona pelúcida ou esférico pouco interferiria no processo de implantação. Na fase de blastocisto alongado o MHC de classe I deveria estar suprimido, tendo em vista que a adesão das células fetais às uterinas é desejável. Já, durante o período de migração do embrião na tuba uterina, a expressão do MHC pode ser considerada desejável, pois evitaria sua ligação em sítios ectópicos levando, por exemplo, a uma gestação tubária. É importante salientar que a baixa expressão do MHC classe I não é o único processo que leva a não rejeição do embrião (Davies et al., 2006). Referências bibliográficas Davies CJ, Eldridgel JA, Fisher PJ, Schlafer DH. Evidence for expression of both classical and non-classical major histocompatibility complex class i genes in bovine trophoblast cells. Am J Reprod Immunol, v.55, p.188-200, 2006. Palavras-chave: blastocisto, bovino, MHC classe I. Keywords: blastocyst, bovine, MHC class I. Apoio financeiro: FAPEMIG.



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Proporção volumétrica dos constituintes do corpo lúteo de vacas Nelore em três estádios da gestação

Volumetric proportion of the corpus luteum of Nelore cow in the tree gestation stages

P.R. Xavier1, R.A.C. Leão, P.V.D.O. Silva, A.P. Marques Junior

Departamento de Clínica e Cirurgia, Escola de Veterinária, UFMG, Belo Horizonte, MG. 1E-mail: [email protected]

Introdução O corpo lúteo, de sua formação até a regressão, passa por intensa remodelação tecidual com proliferação, diferenciação e morte celular de sua população heterogênica de células com características morfofuncionais e bioquímicas distintas, classificadas como células esteroidogênicas e não-esteroidogênicas (Neves e Marques Jr, 2002; Schams e Berisha, 2004). O conhecimento da morfofisiologia do corpo lúteo possibilita avaliar o estádio reprodutivo do animal, tornando-se essencial para a utilização e aperfeiçoamento de biotecnias da reprodução. O objetivo deste trabalho foi avaliar a proporção volumétrica dos constituintes do corpo lúteo da vaca Nelore, em três estádios da gestação.

Material e Métodos O experimento foi desenvolvido, após o projeto ter sido aprovado pelo CETEA-UFMG, sob o número 31/2010. Ovários de 48 vacas Nelore gestantes e saudáveis foram coletados, identificados e divididos em três grupos, de acordo com o desenvolvimento fetal. Os corpos lúteos foram fixados em formol a 10%, incluidos em parafina, cortados à espessura de 5µm e corados pela técnica de hematoxilina e eosina e tricômio de Gomory. Os valores médios da proporção volumétrica dos constituintes do corpo lúteo foram compilados e analisados (Tab.1). Resultados e Discussão Tabela 1. Médias e desvios padrões da proporção volumétrica (%) do citoplasma das células luteínicas (CCL), núcleo das células luteínicas (NCL), células endoteliais e pericito (CE e P) e tecido conjuntivo e fibroblastos (TC e F) do corpo lúteo de vacas Nelore gestantes no primeiro (0-100), segundo (100-180) e terceiro (180-280) trimestre de gestação. Período de gestação CCL NCL CE e P TC e F

0-100 54,9 ± 6,3a 10,0 ± 3,0a 1,7 ± 1,1a 29,3 ± 7,4c 100-180 48,7 ± 6,6b 6,8 ± 2,0b 0,2 ± 0,3b 40,0 ± 7,2b 180-270 42,7 ± 7,5c 5,1 ± 1,5c 0,1 ± 0,1b 47,7 ± 8,0a

Números com letras diferentes na mesma coluna diferem estatisticamente (P < 0,05). Os resultados mostram alteração significativa dos constituintes celulares nos estádios de gestação avaliados. Houve consistência na diminuição das CCL a cada terço, comparando-se com o encontrado para NCL, o que demonstra a coerência do método utilizado, além de revelar redução das células esteroidogênicas observada desde o primeiro estádio de gestação, embora com menor intensidade em relação ao último estádio, ao contrário do descrito por Fields e Fields (1996), de que somente após os 200 dias de gestação, é que se observa um elevado declínio das células esteroidogênicas devido ao processo de luteólise. Embora a apoptose das células luteínicas, observada neste experimento, aparentemente não interfira na atividade mínima do CL para manter a gestação, estudos são necessários para verificar se este tipo de evento ocorre também no animal não gestante. O futuro entendimento desse evento fisiológico poderia contribuir para o desenvolvimento ou ampliação e refinamento de métodos utilizados em biotecnias reprodutivas que demandam o controle do corpo lúteo em zebuínos, na busca de terapêutica de indivíduos ou para incrementar a produtividade do rebanho. Referências bibliográficas Fields MJ, Fields PA. Morphological characteristics of the bovine corpus luteum during the estrus cycle and pregnancy. Theriogenology, v.45, n.7, p.1295-1325, 1996. Neves MM, Marques Júnior AP. Tamanho da amostra para estudo da proporção volumétrica dos constituintes do corpo lúteo bovino. Arch Vet Sci, v.7, n.2, p.81-85, 2002. Schams D, Berisha B. Regulation of corpus luteum function in cattle - an overview. Reprod Domest Anim, v.39, n.1, p.241-251, 2004. Palavras-chave: corpo lúteo, proporção volumétrica, vaca Nelore. Keywords: corpus luteum, Nelore cow, volumetric proportion.



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Influência de suplementação alimentar com diferentes fontes de ácidos graxos poli-insaturados sobre o diâmetro folicular de novilhas zebuínas

Influence of dietary supplementation with different sources of polyunsaturated fatty acids on the follicular diameter of zebu heifers

F.B. Rosa1, F.Q. Costa, B.P. Carvalho, A.M. Arrais, I.R. Santos, A.J.B. Dias

LRMGA, Universidade Estadual do Norte Fluminense, Campo dos Goytacazes, RJ

1E-mail: [email protected] Introdução A utilização de ácidos graxos poliinsaturados na dieta em bovinos, como o linoléico e linolênico podem ter efeitos benéficos sobre a reprodução. O efeito positivo da suplementação com ácidos graxos poliinsaturados (PUFAS) não é devido ao aumento do consumo energético e sim o resultado dos efeitos dos PUFAS sobre a hipófise, útero e ovário (Mattos et al., 2000). Os PUFAS podem alterar parâmetros reprodutivos tais como: numero e tamanho de folículos, taxa de ovulação, produção de progesterona e tempo da luteólise em vacas de alta produção (Thomas et al., 1997; Bilby et al., 2006). Dessa forma o objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da suplementação alimentar com ácidos graxos sobre o tamanho do folículo dominante de novilhas zebuínas.

Material e Métodos Vinte novilhas mestiças, cíclicas, com escore corporal variando entre 3 e 4 (escala de 1 a 5) e idade média de 2,5 anos, mantidas a pasto com suplementação diária de 4,5 Kg de concentrado e sal mineral ad libitum, foram distribuídas aleatoriamente em quatro grupos experimentais de acordo com a fonte de ácido graxo fornecida na dieta: óleo de soja (51% 18:2); óleo de canola (9,3% 18:3); óleo de girassol (45% 18:1) e sem adição de óleo na dieta (controle). A suplementação alimentar foi fornecida inicialmente por 40 dias (adaptação) e depois por mais cinco semanas. Os folículos dominantes (FD) foram mensurados e aspirados semanalmente com auxilio de ultrassom (DP-2200, Mindray, 7,5 Mhz) desde o dia de início da dieta experimental. Os dados foram analisados no ambiente R versão 2.11.1(2010) pelo teste T pareado, com nível de significância de 5%. Resultados e Discussão Os diâmetros dos FD de novilhas do grupo controle, óleo de soja, de canola e de girassol, medidos no início e no final do experimento não diferiram significativamente (p > 0,05) (12,33 ± 1,90 vs 11,95 ± 0,77 mm; 10,71 ± 2,20 vs 12,95 ± 1,18; 12,93 ± 4,09 vs 12,95 ± 1,55; 12,8 2± 4,72 vs 12,15 ± 2,22 mm, respectivamente). Bilby et al. (2006) descreveram aumento do diâmetro de folículos pré-ovulatórios e maior volume luteal de vacas submetidas a quatro diferentes fontes de ácidos graxos ômega-3 e ômega-6. Nossos resultados diferem dos descritos por Bilby et al. (2006), pois em nosso trabalho foram avaliados folículos em início do período de dominância. Os resultados obtidos demonstram que o diâmetro do folículo dominante inicial não foi afetado pelas dietas utilizadas. Referências bibliográficas Bilby TR, Block J, Do Amaral BC, SA Filho O, Silvestre FT, Hansen PJ, Staples CR, Thatcher WW. Effects of dietary unsaturated fatty acids on oocyte quality and follicular development in lactating dairy cows in summer. J Dairy Sci, v.89, p.3891-3903, 2006. Mattos R, Staples CR, Thatcher WW. Effects of dietary fatty acids on reproduction in ruminants. Rev Reprod, v.5, p.38-45, 2000. Thomas MG, Bao B, Williams GL. Dietary fats varying in their fatty acid composition differentially influence folicular growth in cows fed isoenergetic diets. J Anim Sci, v.75, p.2512-2519, 1997. Palavras chave: ácido graxo, bovino, novilhas. Keywords: bovine, fat acid, heifers.



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Restabelecimento da atividade ovariana após exposição prolongada ao implante subcutâneo de deslorelina (GnRHa) em vacas Nelore (Bos taurus indicus)

Restoration of ovarian activity after subcutaneous implant by long-term of deslorelin (GnRHa) in Nelore cows (Bos taurus indicus)

W.C. Marques Filho1, I. Martin, E. Trevisol, R. Sartori, J.C.P. Ferreira

DRARV, FMVZ, UNESP, Botucatu, SP. 1E-mail: [email protected]

Introdução Tratamentos por longos períodos utilizando agonistas de GnRH (deslorelina) têm sido usados para controlar a atividade reprodutiva em várias espécies animais. Em bovinos, o implante de deslorelina provoca down-regulation dos receptores hipofisários de GnRH, com consequente diminuição da secreção de gonadotrofinas. A implantação por 21 dias de 2,1 mg de deslorelina em vacas holandesas impediu o desenvolvimento folicular a diâmetros > 2-3 mm. Nesse estudo a ovulação foi diagnosticada 30 dias após a remoção do implante (Silvestre et al., 2009). No entanto, não existem relatos dos efeitos deste implante em Bos taurus indicus. Deste modo, o presente estudo visou avaliar o restabelecimento da atividade ovariana após o anestro induzido com agonista de GnRH (Deslorelina-Suprelorin®) em vacas Nelore. Material e Métodos Ciclos estrais de 15 vacas adultas da raça Nelore, apresentando escore corporal ≥ 3 (0-5) e atividade reprodutiva regular, foi sincronizado segundo o protocolo: D-11: 2mg de benzoato de estradiol (BE) i.m. (Estrogin®, Farmavet Ltda, Brasil) + 1g de dispositivo intravaginal de progesterona (DIB®, Intervet Schering-Plogh, Brasil); D-3: 12,5mg de dinoprost trometamina i.m (Lutalyse®, Pfizer Saúde Animal, Brasil) + remoção do dispositivo intravaginal de progesterona; D-2: 1mg de BE i.m.; D-1 e D0: exame ultassonográfico transretal do ovário para detecção da ovulação. No D0, 7 vacas foram escolhidas aleatoriamente e receberam o implante de Deslorelina, o qual permaneceu por 70 dias. A partir da remoção do implante até a primeira ovulação após a indução do anestro com a Deslorelina, os animais foram submetidos à avaliação ultrassonográfica dos ovários, a cada dois dias, para determinação da dinâmica folicular. Resultados e Discussão Durante o período que os animais permaneceram com o implante não foi detectada ovulação em nenhum animal. Após a remoção do implante, observou-se a emergência média de 22,25 (±3,49) folículos por onda de crescimento folicular. Em média, a primeira ovulação ocorreu 28 dias após a retirada do implante e 37,5% (03/08 animais) dos animais apresentaram dupla ovulação. Fenômeno semelhante foi observado por Sartori et al. (2004) em vacas holandesas, que relataram a maior ocorrência de co-dominância folicular e ovulações duplas quando a onda folicular cresce na presença de baixas concentrações séricas de progesterona. Provavelmente isto se deve ao aumento transitório das concentrações plasmáticas de FSH e LH, decorrente da redução dos níveis séricos de progesterona no momento do recrutamento e seleção folicular. A semelhança do observado por Silvestre et al. (2009) em vacas holandesas, a atividade folicular ovariana de Nelore se restabeleceu e a ovulação foi observada aproximadamente 28 dias após a remoção do implante. Referências bibliográficas Sartori R Haughian JW, Sharver RD, Rosa GJM, Wiltbank MC. Comparison of ovarian function and cicrulating steroids in estrous cycles of Holstein heifers and lactating cows. J Dairy Sci, v.87, p.905-920, 2004. Silvestre FT, Bartolome JA, Kamimura S, Arteche AC, Pancarci SM, Trigg T, Thatcher WW. Postpartum suppression of ovarian activity with a deslorelin implant enhanced uterine involution in lacting dairy cows. Anim Reprod Sci, v.110, p.79-95, 2009. Palavras-chave: agonista de GnRH, anestro, atividade ovariana, dinâmica folicular, Nelore. Keywords: anestrous, follicular dynamic,GnRH agonist, Nelore, ovarian activity. Agradecimentos: FAPESP (2008/00906-1); FUNDUNESP (01189/08) e Peptech Animal Health/Australia.



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Resgate da função luteal em bovinos após desafio com cloprostenol sódico Rescue of luteal function in bovine after treatment with cloprostenol sodium

E. Trevisol1, W.C. Marques Filho1, F.C. Destro1, J.C. Ferreira1, A.S. Carmargos1,

J.B. Amaral2, C. Meira1, R. Sartori3, J.C.P. Ferreira1

1Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, UNESP, Botucatu, SP; 2Instituto de Zootecnia, Nova Odessa, SP;3ESALQ-USP, Piracicaba, SP.

E-mail: [email protected]. Introdução A ação de sub-dose de PGF2α nem sempre causa a regressão do CL, devido a alguns fatores, tais como fase do ciclo estral dose administrada e forma de administração (1). Em algumas situações em que não ocorre luteólise, observa-se, nas primeiras 12-24 horas após a administração da prostaglandina, a diminuição da concentração plasmática de progesterona (P4) até valores próximo a 1,0 ng/mL, seguida do aumento subsequente desta a valores semelhantes aos observados antes do tratamento (2). Devido a importância desse fenômeno para a compreensão dos fatores que regulam a luteólise, o objetivo do presente estudo foi avaliar as alterações da P4 e perfusão sanguínea após administração de 83,33 µg de cloprostenol sódico no sexto dia do ciclo estral.

Material e Métodos Foram utilizadas 19 vacas adultas da raça Caracu, submetida ao protocolo de sincronização Dia -9 (D-9 - inicio do protocolo): aplicação de 50 µg de Lecirelina (Gestran plus®1; IM) e colocação de dispositivo intravaginal de P4 (DIB®2); D-2,5: aplicação de 500 μg de cloprostenol sódico (Sincrocio®3

, IM); D-2: aplicação de 250 μg de cloprostenol sódico (Sincrocio®, IM) e retirada do dispositivo intravaginal de P4; e D0: administração de 50 µg de Lecirelina (Gestran plus®, IM). No D6 os animais foram aleatoriamente divididos entre os seguintes grupos experimentais: G1 (2 mL de solução fisiológica 0,9%; IM, n = 6), G2 (duas doses de 500 μg de cloprostenol sódico com intervalo de 2 horas, n=6) e G3 (83,33 μg de cloprostenol sódico IM, n=7). Imediatamente antes do tratamento e posteriormente a cada 8h durante 48h os animais foram submetidos a avaliações ultrassonográficas modo B e Power-Doppler, avaliando volume e perfusão sanguínea luteais, e colheita de sangue para dosagem de P4. Os dados foram submetidos a ANOVA e para diferenças entre as médias foi aplicado o teste TUKEY (p<0,05).

Resultados e Discussão Os tratamentos influenciaram as concentrações de P4, perfusão sanguínea e volume luteal. No G1 não foi observado alterações nas variáveis (p > 0,05), porém no G2 a P4 diminuiu a partir do momento 16 (p < 0,001) e manteve-se baixa nos demais momentos. A perfusão sanguínea e volume luteal diminuíram 48 horas após o tratamento no G2 (p=0,049). No G3 a P4 diminuiu até o momento 16 (p = 0,025) e voltou a aumentar, igualando-se aos valores iniciais, porém a perfusão sanguínea e volume luteal não alteraram (p > 0,05). Conclui-se que o tratamento interferiu na capacidade secretória do CL e a P4 diminuiu até 16h após tratamento 3, com posterior recuperação nos momentos seguintes. Referências bibliográficas Miyamoto A. et al. Local regulation of corpus luteum development and regression in the cow: impact of angiogênico and vasoactive factor. Domest Anim Endocrinol, v.37, p.159-169, 2009 Shrestha HK, Beg MA, Siddiqui MAR, Ginther OJ. Dynamic progesterone responses to simulation of a natural pulses of a metabolite of prostaglandin F2α in heifers. Anim Reprod Sci, v.118, p.118-123, 2010. Palavras-chave: bovinos, corpo lúteo, luteólise, prostaglandina F2α. Keywords: cattle, corpus luteum, Luteolysis, prostaglandin F2α.

1 Gestran Plus® –Tecnopec - São Paulo – Brasil 2 DIB® - Syntex - Argentina 3 Sincrocio: Ouro Fino – São Paulo – Brasil



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Expressão do MHC classe I em placenta e útero bovino com quatro meses de gestação MHC class I expression in placenta and bovine uterus with four months of pregnancy

M.E. Beletti1, D.A. Pinto, S.V.S. Silva, J.M.S. Gallo

Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução Sabe-se que o útero constitui ambiente imunológico privilegiado, onde o embrião/feto, mesmo possuindo características imunológicas diferentes, não gera rejeição. Em placentas hemocoriais, quanto maior a diferença imunológica entre mãe e filho, melhor se dá a implantação. Em bovinos, a rejeição com conseqüente reabsorção ou aborto embrionário é alteração freqüente e de grande importância econômica. Em transplantes de órgãos, a principal característica indutora de rejeição é a diferença no MHC classe I entre doador e receptor. Assim sendo, este trabalho teve como objetivo avaliar a expressão de MHC classe I do placentoma durante o quarto mês de gestação em bovinos. Material e Métodos Foram coletados placentomas de vacas prenhes abatidas em frigorífico, com idade gestacional de aproximadamente quatro meses. Os mesmos foram incluídos em meio de inclusão para espécies em congelação, congelados em nitrogênio líquido e cortados em criostato a uma espessura de 10 μm. Os cortes foram fixados com acetona, permeabilizados com triton X-100, recuperados antigenicamente com citrato de sódio e bloqueados com de leite desnatado. Foram então incubados com anticorpo monoclonal de camundongo anti-MHC de classe I de ovelha e posteriormente com anticorpo de coelho anti-IgG de camundongo conjugado com FITC. Os núcleos foram marcados com iodeto de propídio e o material foi observado em microscópio confocal Zeiss LSM 510 META

Resultados e Discussão Verificou-se que o epitélio uterino expressa intensamente MHC classe I, assim como boa parte das células da lâmina própria. Já o trofoblasto da região cotiledonária pouco ou não expressa este complexo. Isso demonstra que além da já conhecida modulação imunológica ocorrida no útero gravídico, o trofoblasto que entra em contato direto com o útero, não é reconhecido como “não próprio” (Davies et al, 2000). Um possível aumento na expressão deste complexo glicoprotéico em trofoblastos justificaria a ocorrência de parte dos abortos neste período gestacional.

Referências bibliográficas Davies CJ, Fisher PJ, Schlafer DH. Temporal and regional regulation of major histocompatibility complex class I expression at the bovine uterine/placental interface. Placenta, v.21, p.194-202, 2000. Palavras-chave: imunofluorescência, MHC classe I, microscopia confocal, trofoblasto. Keywords: confocal microscopy, immunofluorescence, MHC class I, trophoblast. Apoio financeiro: FAPEMIG.



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Impacto do intervalo de partos sobre a taxa de natalidade em rebanhos leiteiros do Vale do Rio Preto, RJ

Impact of calving interval on birth rate dairy herds in the Vale do Rio Preto, RJ

B.B. Otha, P.A.C. Pereira1, A.M. Ferreira, I.L. Goulart, J.R.M. Almeida Neto, D.G.R. Santos, C.H.P.J. Fonseca

Faculdade de Medicina Veterinária (FMVV), Centro de Estudos e Pesquisa Aplicada em

Reprodução Bovina (CEPARB), Valença, RJ. 1E-mail: [email protected]

Introdução O intervalo de partos (IP) constitui-se na medida mais utilizada nos rebanhos leiteiros do Brasil, embora seja mais preciso quando se avalia individualmente cada animal. Pode-se maximizar a produção de leite e de bezerros com IP em torno de 12 a 13 meses. No Brasil, a produção leiteira poderia ser elevada em até 50% com a redução do IP do rebanho nacional para próximo de 12 meses, além de um aumento expressivo do número de bezerros nascidos (Pereira, 2009). Material e Métodos O trabalho foi conduzido em 38 propriedades leiteiras distribuídas na região do Vale do Rio Preto-RJ, considerada a principal bacia leiteira do Estado. Através do Intervalo de Partos (IP) e Taxa de Natalidade (TN) dos rebanhos foi possível estimar o déficit no nascimento de bezerros no período avaliado. Resultados e Discussão Foi encontrado um IP médio de 15,3 meses, o que corresponde a 78,4% de TN, abaixo dos 90 a 95% descritos como sendo o ideal para o melhor retorno econômico da atividade, mas acima dos cerca de 60,0% encontrados por Ferreira et al. (1997) em rebanhos do Estado do Rio de Janeiro. Verificou-se um déficit total de 56 bezerros/nascidos/ano nas propriedades analisadas, representando perdas econômicas aos produtores, que poderiam acelerar a reposição de matrizes em seus rebanhos e efetuar vendas de animais excedentes. Referências bibliográficas Ferreira AM, Teixeira SR, Santos PCB et al. Taxa de natalidade em rebanhos leiteiros do Estado do Rio de Janeiro. Rev Bras Reprod Anim, v.21, p.122-124, 1997. Pereira PAC. Relação entre problemas reprodutivos e eficiência reprodutiva comparada por diferentes métodos em rebanhos bovinos leiteiros. 2009. 34f. Tese (doutorado). Universidade Federal de Minas Gerais, Escola de Veterinária, Belo Horizonte, MG, 2009. Palavras-chave: bovinos, intervalo de partos, reprodução. Keywords: bovine, calving interval, reproduction.



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Avaliação da performance reprodutiva de vacas leiteiras com diferentes graus de sangue durante os meses de outubro a março

Evaluation of reproductive performance of dairy cows with different degrees blood during the months from October to March

C.H.P.J. Fonseca, P.A.C. Pereira, A.M. Ferreira, I.L.Goulart, J.R.M. Almeida Neto,

L.S. Izidoro, B.B. Otha

Faculdade de Medicina Veterinária (FMVV), Centro de Estudos e Pesquisa Aplicada em Reprodução Bovina (CEPARB), Valença, RJ.

E-mail: [email protected] Introdução Os efeitos da nutrição, manejo e genética são variáveis importantes para a obtenção de altos índices produtivos e reprodutivos na pecuária bovina. Contudo, em se tratando na exploração de raças leiteiras em condições de clima tropical, a temperatura e umidade relativa do ar, mostram-se fatores a serem considerados, uma vez que o clima pode influenciar diretamente no potencial produtivo e reprodutivo dos animais. (Hansen, 2004; McManus et. al.,2008). Material e Métodos Durante os meses de outubro de 2009 a março de 2010 foram avaliados dados reprodutivos de 170 vacas leiteiras com graus de sangue variando do ½ HPB x ½ Gir a 15/16 HPB x 1/16 Gir pertencentes a um único rebanho situado no Vale do Paraíba-SP. Resultados e Discussão O período de serviço (PS) observado para os diferentes grupos formados variou de 137 dias para o grupo 1 (½ Hol x ½ Gir) a 142 dias para o grupo 4 (15/16 Hol x 1/16 Gir), com média de 135 dias. Os resultados encontrados no presente estudo são semelhantes ao descrito por Guimarães et al (2002), que estudando os efeitos climáticos das estações do ano sobre parâmetros reprodutivos de vacas leiteiras não verificou diferença significativa na performance reprodutiva de nenhum grupo formado em função do grau de sangue. Referências bibliográficas Guimarães JD, Alves NG, Costa EP. et al. Eficiências reprodutiva e produtiva em vacas das raças Gir, Holandês e Cruzadas Holandês x Zebu. Rev Bras Zootec, v.31, n.2, p.641-647, 2002. Hansen PJ. Physiological and cellular adaptations of zebu cattle to thermal stress. Anim Reprod Sci, v. 82/83, p.349-360, 2004. McManus C, Teixeira RA, Dias LT. et al. Características produtivas e reprodutivas de vacas Holandesas e mestiças Holandês × Gir no Planalto Central. Rev Bras Zootec, v.37, n.5, p.819-823, 2008. Palavras-chave: bovinos, índices, reprodução. Keywords: bovine, indexes, reproduction.



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Níveis de RNAm dos fatores de crescimento semelhante a insulina I e II, receptores de IGF e proteínas ligadoras de IGF em folículos ovarianos bovinos

Levels of mRNA for insulin-like growth factors I and II, IGF receptors and IGF binding proteins (IGFBPs) in bovine ovarian follicles

R.O.D.S. Rossi1, A.W.B. Silva, G.L. Vasconcelos, R.P. Ribeiro, E.L. Rebouças,

C.C.F. Leitão, J.R.V. Silva

Núcleo de Biotecnologia de Sobral, Universidade Federal do Ceará, Sobral CE. 1Email: [email protected]

Introdução Diferentes fatores intra-foliculares estão envolvidos no crescimento e maturação dos folículos pré-antrais. Foi demonstrado que os componentes do sistema de fatores de crescimento semelhante a insulina (IGF) são sintetizados pelos folículos pré-antrais; todavia, os níveis de RNAm dos componentes do sistema IGF em folículos ovarianos bovino antes e após o cultivo ainda não foi relatado. Este trabalho objetivou avaliar a expressão relativa dos IGF’s I e II, receptores de IGF tipos I e II (IGFR-I e IGFR-II), e proteínas ligadoras de IGF (IGFBP 1-6) em folículos ovarianos bovino de ~200μm antes e após o cultivo in vitro. Material e Métodos Ovários (n=20) de bovinos adultos oriundos de abatedouro foram lavados em álcool 70% e solução salina a 0,9% e transportados à 4ºC em até 1 hora. Folículos foram isolados mecanicamente do córtex ovariano. Vinte e quatro folículos de 211,25 ± 40,25μm foram cultivados em α-MEM suplementado com 1,25mg/mL de albumina sérica bovina, 6,25µg/mL de insulina, 6,25µg/mL de transferrina, 6,25ng/mL de selênio (ITS), 200mM de glutamina, 50μg/mL de ácido ascórbico e 100ng/mL de ativina-A, adicionados com 100ng/mL de FSH (dia 0 ao 6) e 500ng/mL de FSH (dia 6 ao 12) imersos em óleo mineral. A cada dois dias, 50 μL do meio de cultivo foi trocado. Após o cultivo, foram mantidos a - 80oC. Realizou-se a extração do RNA total e síntese cDNA. Os níveis de RNAm do sistema IGF, no dia 0 (D0) e no dia 12 (D12) foram comparados pelo teste t pareado (P<0,05). Resultados e Discussão Após 12 dias de cultivo, os folículos alcançaram diâmetro de 378,33 ± 106,43μm. Estes tiveram redução nos níveis de RNAm para IGF-I, IGFR-1, IGFBP-3, IGFBP-5 e IGFBP-6, comparados com D0. Os níveis de RNAm para IGF-II, IGFR-II, IGFBP-1, IGFBP-2 e IGFBP-4 não diferiram entre D0 e D12. O sistema IGF participa do desenvolvimento de folículos primários em antrais, assim como estimula a vascularização folicular e a permeabilidade vascular (van den Hurk e Zhao, 2005). Podemos concluir que o sistema IGF apresenta expressão variável nas classes de folículos analisadas, tornando-se necessário alcançar níveis adequados do sistema IGF no cultivo de folículos ovarianos bovinos. Referências bibliográficas Van den Hurk R, Zhao J. Formation of mammalian oocytes and their growth, differentiation and maturation within ovarian follicles. Theriogenology, v.63, p.1717-1751, 2005. Palavras-chave: bovino, folículos pré-antrais, IGF, RNAm. Keywords: bovine, IGF, mRNA, preantral follicle.



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Expressão do bFGF e seus receptores em carúnculas bovinas aos 35 dias de gestação Expression of bFGF and its receptors in bovine caruncules on day 35 of pregnancy

A.D.B Lira1, A.E. Silva Júnior1, L.O. Barros2, L.A. Fátima3, P.C. Papa3, D.B Campos1

1Universidade Federal da Paraíba, João Pessoa, PB; 2Universidade Federal Rural de Pernambuco, Recife, PE; 3Universidade

de São Paulo, São Paulo, SP. E-mail: [email protected]

Introdução Na maioria das espécies as bases moleculares da comunicação materno-fetal não estão bem definidas e os estudos relacionados à modulação dos eventos uterinos pelo embrião são limitados. Kashiwagi e colaboradores (2007) demonstraram que o embrião de camundongo tem papel ativo no estabelecimento do ambiente uterino durante a implantação, regulando o desenvolvimento e diferenciação do endométrio materno. A observação de que em bovinos as carúnculas do corno uterino gestante tem maior desenvolvimento, e que, no caso de gestações de embriões produzidos in vitro diversas anomalias são detectadas, incluindo insuficiente desenvolvimento e vascularização caruncular, no levaram a hipotetizar que não só os hormônios ovarianos controlam o desenvolvimento caruncular, mas também fatores fetais estão envolvidos. O presente estudo teve como objetivo investigar a expressão do fator de crescimento bFGF e de seus receptores (R1, R2 e R4) em carúnculas do corno gestante e não gestante de bovinos. Material e Métodos Carúnculas bovinas do corno gestante e do corno não gestante foram coletadas aos 35 dias de gestação e o RNA total foi isolado usando o reagente Trizol® e colunas específicas para extração de RNA (Qiagen). As amostras foram tratadas com DNase e a trasncrição reversa foi realizada utilizando o kit Superscript III (Invitrogen) e 1µg da amotra. A expressão do bFGF e seus receptores R1, R2 e R4 foi determinada por PCR em tempo real, utilizando-se como controle endógeno a tubulina. Os dados foram expressos em relação a tubulina e calculados pelo método do ∆∆Ct com correção da eficiência de amplificação. Resultados e Discussão Os níveis de expressão do bFGF e do receptor R2, foram significantemente menores em carúnculas do corno gestante quando comparadas com carúnculas do corno não gestante, não havendo variação nos níveis dos receptores R1 e R4. Ainda que bFGF seja considerado um dos principais fatores angiogênicos plancetários, influenciando ainda os processos desenvolvimento e diferenciação celular em outros tecidos, estudos demonstraram que o fator não altera os níveis de proliferação celular em células da granulosa e inibe a expressão de genes relacionados a remodelação tecidual (Cao et al., 2006). Os dados apresentados sugerem que a diminuição da expressão do bFGF em carúnculas do corno gestante pode estimular a remodelação tecidual, no entanto, estudos são necessários para elucidar o papel do bFGF no desenvolvimento caruncular. Referências bibliográficas Kashiwagi A, DiGirolamo CM, Kanda Y, Niikura Y, Esmon CT, Hansen TR, Shioda T, Pru JK. The postimplantation embryo differentially regulates endometrial gene expression and decidualization. Endocrinology, v.148, n.9, p.4173-4184, 2007. Cao M, Nicola E, Portela VM, Price CA. Regulation of serine protease inhibitor-E2 and plasminogen activator expression and secretion by follicle stimulating hormone and growth factors in non-luteinizing bovine granulosa cells in vitro. Matrix Biol, v.25, n.6, p.342-54, 2006. Palavras-chave: bFGF, carúnculas, bovino, receptores. Keywords: caruncle, bovine. receptors, VEGF-A.



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Expressão do VEGF-A e seus receptores em carúnculas bovinas aos 35 dias de gestação Expression of VEGF-A and its receptors in bovine caruncules on day 35 of pregnancy

A.E. Silva Júnior1, A.D.B Lira1, L.O. Barros2, L.A. Fátima3, P.C. Papa3, D.B Campos1,4

1Universidade Federal da Paraíba, João Pessoa, PB; 2Universidade Federal Rural de Pernambuco, Recife, PE; 3Universidade

de São Paulo, SP. 4E-mail: [email protected]

Introdução Na maioria das espécies as bases moleculares da comunicação materno-fetal não estão bem definidas e os estudos relacionados à modulação dos eventos uterinos pelo embrião são limitados. Kashiwagi e colaboradores (2007) demonstraram que o embrião de camundongo tem papel ativo no estabelecimento do ambiente uterino durante a implantação, regulando o desenvolvimento e diferenciação do endométrio materno. A observação de que em bovinos as carúnculas do corno uterino gestante tem maior desenvolvimento, e que, no caso de gestações de embriões produzidos in vitro diversas anomalias são detectadas, incluindo insuficiente desenvolvimento e vascularização caruncular, no levaram a hipotetizar que não só os hormônios ovarianos controlam o desenvolvimento caruncular, mas também fatores fetais estão envolvidos. Desta forma, o presente estudo teve como objetivo investigar a expressão do fator de crescimento angiogênico VEGF-A e de seus receptores em carúnculas do corno gestante e não gestante de bovinos. Material e Métodos Carúnculas bovinas do corno gestante e do corno não gestante foram coletadas aos 35 dias de gestação e o RNA total foi isolado usando o reagente Trizol® e colunas específicas para extração de RNA (Qiagen). As amostras foram tratadas com DNase e a trasncrição reversa foi realizada utilizando o kit Superscript III (Invitrogen) e 1µg da amotra. A expressão do VEGF-A, Flt-1 e KDR foi determinada por PCR em tempo real. Os dados foram expressos em relação a tubulina e calculados pelo método do ∆∆Ct com correção da eficiência de amplificação.

Resultados e Discussão A análise dos resultados demonstrou que a expressão do VEGF-A e seus receptores FLT-1 e KDR não variou significantemente entre carúnculas do corno gestante e não gestante, sugerindo que provavelmente a expressão destes fatores de crescimento não seja influenciada pelo embrião e esteja sob controle materno. De fato, estudos demonstram existir correlação entre a concentração de progesterona circulante materna e a expressão do VEGF-A e seus receptores no útero (Sagsöz 2001). Neste caso, a progesterona de origem luteal, estimulando o sistema VEGF desde o início da gestação, garantiria um ambiente uterino adequado ao desenvolvimento inicial do embrião e à implantação. Referências bibliográficas Kashiwagi A, DiGirolamo CM, Kanda Y, Niikura Y, Esmon CT, Hansen TR, Shioda T, Pru JK. The postimplantation embryo differentially regulates endometrial gene expression and decidualization. Endocrinology, v.148, n.9, p.4173-4184, 2007. Sagsöz H, Saruhan BG. The expression of vascular endothelial growth factor and its receptors (flt1/fms, flk1/KDR, flt4) and vascular endothelial growth inhibitor in the bovine uterus during the sexual cycle and their correlation with serum sex steroids. Theriogenology. 2011 Palavras-chave: bovino, carúnculas, Flt-1, KDR, VEGF-A. Keywords: bovine, caruncle, Flt-1, KDR, VEGF-A.



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Occurrence of persistent follicle after ultrasound-guided follicle aspiration in cattle: preliminary results

Ocorrência de folículos persistentes após a aspiração folicular orientada por ultra-sonografia em bovinos: Resultados preliminares

M.D. Dórea1, M.P. Palhão2,5, E.K.N. Arashiro3, C.A.C. Fernandes4, M.R. Luz1, J.H.M. Viana2

1UFES, Espírito Santo; 2 Embrapa Gado de Leite, Juiz de Fora, MG; 3UFMG, Belo Horizonte, MG; 4Biotran Alfenas, MG.

5E-mail: [email protected] Introduction The ultrasound-guided follicle aspiration is an important technique in bovine embryo production. It has applications in both IVF – oocytes recovering - and MOET – remove the dominant follicle before the ovarian superestimulation. Therefore, the ovarian activity of the donors after follicle aspiration is underreported. After follicular puncture, the presence of non-regressed follicles in the ovaries has been described (Viana et al., 2001). However, the occurrence of this phenomenon and its physiologic significance has not been reported. The aim of this study was to evaluate the occurrence of the non-regressed structures – here identified as “persistent follicles” - after follicle aspiration at specific stage of development in a follicular wave and to assess the effect of the progesterone in its incidence. Material and Methods Thirteen non- pregnant and non- lactating Holstein cows were used for this purpose. In order to control the progesterone concentrations 500 µg of cloprostenol4 were given and a subcutaneous ear implant5 was inserted on day 0. The development of a new follicular wave was synchronized with 2 mg of estradiol benzoate6 given one day later (Day 1). After follicle emergence the cows were randomized in one of the groups related to progesterone treatment. The ear implant was kept in the cows from progesterone group and it was removed in those from non-progesterone group. Thus, the emerged follicular wave developed in an environment with or without progesterone, respectively. The objectives were to control the pulsatility of LH and evaluate its effects on follicle persistence after aspiration. Beginning at the follicle emergence, the ovarian follicular growth were monitored (transrectal ultrasound with 8.0 MHz linear array7) twice a day. At specific diameters of the F1 (largest follicle), the cows from both progesterone groups were randomized in one of the follicle aspiration treatments (8 or 12 mm). The diameter of the follicles was chosen to compare the probability of the follicle at the beginning of deviation (around 8 mm) or at dominant stage (12 mm) to become persistent after aspiration. The ultrasound-guided follicle aspiration has been described (Viana et al., 2010) and adapted here for individual follicle sampling. Cows were switched in experimental groups until complete the desired number of follicles for each group (n=18). Data were analyzed in SAS program8

. The rate of persistent follicles between groups of progesterone or follicle diameter was compared by Chi-square (using the Fisher’s exact test). Results are presented as percentage and P<0.05 were considered significant. Probabilities between 5% and 10% were considered approach of the significance.

Results e Discussion Seventy-two follicles were aspirated and 53 (73.6%) had become persistent after aspiration. Based on 12 hours scanning, the persistent follicle was detected between 12 and 24 h after aspiration. The persistent structure was sampled around 44 h after the first aspiration and the fluid was stored for further analysis and comparison with the follicular fluid from the follicle. For these preliminary results the progesterone treatment had no effect on persistence rate. Independent of the follicle diameter, the progesterone treatment did not change (P>0.05) the rate of the follicle persistence, 75% (27/36) and 72.2% (26/36), for progesterone and non- progesterone group, respectively. Related to the diameter of the follicle at the moment of aspiration, the difference between 12 mm (83.3%, 30 /36) and 8 mm (63.9%, 23/36) had approached significance (P<0.06). Apparently, the persistent follicle did not affect the follicle turnover and the development of the new follicular wave. However, these data should be carefully interpreted and the steroidogenic profile of the follicular fluid might clarify this information. These results suggest that well established dominant follicles are more likely to become persistent after aspiration than early dominant follicles. Referências bibliográficas Viana JHM et al. Theriogenology, v.55, n.1, p.334, 2001. Viana JHM et al. Theriogenology, v.73, p.966-972, 2010. Palavras-chave: FIV, folículo dominante, folículo persistente, OPU, TE. Keywords: dominant follicle, IVF, MOET, non-regressed follicle, OPU, persistent follicle. 4 Sincrocio®, Ouro Fino, Ribeirão Preto, Brazil. 5 3 mg of norgestomet Crestar®, Intervet International B.V., Boxmeer, Netherlands. 6 Sincrodiol®, Ouro Fino, Ribeirão Preto, Brazil. 7 Esaote Pie Medical® - Maastricht/Netherlands. 8 Version 9.1.3, SAS Institute Inc., Cary, NC, USA.


http://lattes.cnpq.br/6373011290416636�


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Dinâmica folicular ovariana no puerpério de vacas leiteiras de elevada produção Ovarian follicular dynamics in puerperium of dairy cows with high production

J.C.Breda2, L.E. Kozicki1,5, M.S.Segui1, A.M.Grebogi3, I.W.Santos4, R.R.Weiss4

1Docente, Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, PR; 2Mestrando do Programa de Ciência Animal, Pontifícia

Universidade Católica do Paraná; 3Zootecnista, Pontifícia Universidade Católica do Paraná; 4Docente – Universidade Federal do Paraná.

5E-mail: e mail [email protected] Introdução O período pós-parto reveste-se de fundamental importância na reprodução de bovinos, em função da sua influência significativa sobre o desempenho reprodutivo (Peter et al., 2009). O presente trabalho teve como objetivo acompanhar a dinâmica ovariana do 5º ao 40º dia pós-parto em bovinos leiteiros de elevada produção, mediante exames ultrassonográficos. Materiais e Métodos Foram utilizadas 40 vacas leiteiras pluríparas, da raça Holandesa Preta e Branca, as quais foram submetidas a exames ultrassonográficos dos ovários no 5º, 10º , 15º, 20º, 25º, 30º, 35º e 40º dia pós-parto, com transdutor de 5mH. A alimentação dos animais baseou-se em silagem de milho, forrageiras cultivadas no verão e no inverno e suplementação mineral (ad libitum) além de concentrado. A produção diária média de leite no período foi de 37,3. Resultados e Discussão Tabela 1. Diâmetro do folículo dominante(FD), do subordinado(FS) do corpo lúteo(CL) (mm) e o número de folículos no ovário direito(OD) e esquerdo(OE), do 5º ao 40º dia do puerpério de vacas da raça Holandesa Preta e Branca, mensurados via ultrassonografia. Dia puerpério Ø FD

(mm)(x ± s) Ø FS

(mm), (x ± s) Ø CL

(mm) (x±s) Folículos OD

(n)(x±s) Folículos OE

(n)(x±s) 5º 10,1 ± 4,1 6,4 ± 2,9 2,0 ± 1,2 1,8±1,3 10º 12,1 ± 4,4 8,7 ± 5,1 15,4 ± 8,0 (n=3) 2,1 ± 1,0 1,6±1,1 15º 13,4 ± 5,1 10,3 ± 4,4 8,8 ± 2,1(n=4) 2,3 ± 1,4 2,2±1,2 20º 14,4 ± 5,9 9,8 ± 5,1 14,1 ± 7,2 (n=8) 2,0 ± 0,9 2,3±1,0 25º 14,1 ± 4,8 9,8 ± 4,0 14,7 ± 7,2 (n=7) 1,9 ± 0,9 1,8±1,0 30º 14,8 ± 5,0 11,2 ± 5,5 17,3 ± 7,0 (n=4) 2,0 ± 0,9 1,7±1,1 35º 15,8 ± 3,7 11,1 ± 4,0 21,7 ± 1,0 (n=2) 2,1 ± 0,7 2,0±1,3 40º 16,2 ± 3,2 12,10 ± 3,1 1,9 ± 0,6 1.8±0,7 Os resultados mostram a presença de FD e de FS (Tabela 1) já a partir do 5º dia (D5) pós parto (p.p.), indicando o recomeço da atividade ovariana, um dos fatores essenciais para que o processo de involução uterina ocorra (Kozicki e Tahira, 1987). Estes dados são corroborados por Tanaka et al. (2008), ao relatarem a presença de FD > que 8,0 mm no D7 p.p(1ª onda folicular). A 1ª ovulação p.p. observada no presente estudo foi no D20 (Ø CL=14,1 mm) e os FDs (na média do Ø máximo) foram aumentando gradativamente no decorrer do puerpério, passando de 10,1 mm(D5 p.p.) para 16,2 mm no D40. Concluiu-se que o eixo hipotálamo-hipófise-gonadas no decurso do puerpério, gradativamente buscou a normalidade e o equilíbrio endócrino, confirmado igualmente pelos folículos subordinados, ao demonstrarem similar tendência no decurso do tempo pesquisado. Referências bibliográficas Kozicki LE, Tahira JK. Contribuição ao estudo do puerpério em vacas leiteiras, Rev Set Cienc Agr (UFPR), v.9, p.145-151, 1987. Peter AT, Vos PLAM, Ambrose DJ. Postpartum anestrus in dairy cattle. Theriogenology, v.71, p.1333-1342, 2009. Tanaka T, Arai M, Ohtani S, Uemura S, Kuroiwa AT, Kim S, Kamomae H. Influence of parity on follicular dynamics and resumption of ovarian cycle in postpartum dairy cows. Anim Reprod Sci, v.108, p.134-143, 2008. Palavras-chave: dinâmica folicular ovariana, puerpério, vacas leiteiras.



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Balanço energético negativo (BEN) e a dinâmica folicular ovariana (DFO) no puerpério de bovinos leiteiros com elevada produção

Negative energy balance (NEB) and ovarian activity in postpartum dairy cows with high production

M.S.Segui1, J.C. Breda1, L.E.Kozicki,1, A.M.Grebogi1, R.R.Weiss2, I.W.Santos2

1Pontifícia Universidade Católica do Paraná, PUCPR, Curitiba, PR; 2Docente, Universidade Federal do Paraná, Curitiba, PR. Introdução Vacas leiteiras de elevada produção leiteira frequentemente entram em um estado de BEN no puerpério, em função de a energia requerida para a produção e manutenção das funções corporais venham, a exceder a energia ingerida (REIST et al., 2003). Com isso a DFO começa a ser afetada. O presente trabalho objetivou verificar a taxa de crescimento folicular de vacas leiteiras de alta produção durante o período do BEN durante todo o puerpério. Materiais e Métodos Foram utilizadas 47 vacas leiteiras da raça Holandesa Preta e Branca, com escore da condição corporal (ECC) de 2,5 (de 1 a 5), e produção média de 39 kg/leite/dia, as quais foram submetidas a exames ultrassonográficos dos ovários no dia(D) 5,10, 15, 20, 25, 30, 35 e 40 pós-parto(p.p), sendo calculadas as taxas de crescimento folicular ovariano nos intervalos: D5-10, D10-15, D15-20, D20-25, D25-30, D30-35, D 35-40. Resultados e Discussão Tabela 1. Parâmetros médios de crescimento (mm) do folículo dominante (FD), de folículos subordinados(FS), crescimento médio do FD/dia e crescimento médio dos FS/dia, de acordo com intervalos de cinco dias, em vacas leiteiras da raça Holandesa Preta e Branca. Dia Cresc. FD CrescFS Cresc médio. FD/dia Cresc.médio FS/dia

5º - 10º 2,07 3,65 0,41 0,37 10º - 15º 1,26 0,72 0,25 0,14 15º - 20º 0,96 -0,93 0,19 -0,18 20º - 25º -0,31 0,02 -0,06 0,004 25º - 30º -0,79 1,4 -0,15 0,28 30º - 35º 2,52 -0,11 0,50 -0,02 35º - 40º 0,45 -0,22 0,09 -0,04

Dados da tabela evidenciam uma baixa taxa média de crescimento do FD, desde o início do monitoramento ultrassonográfico (D5 p.p.) até a 6ª. semana do puerpério, sinalizando que a elevada produção pode ter influenciado a atividade folicular ovariana. A menor DFO foi igualmente observada ao se verificar os FS, durante todo o decurso do puerperio. Estes dados são bastante diferentes dos obtidos por Figueiredo et al.(2000), ao pesquisarem animais sem BEN, ao verificarem crescimento diário do FD de 0,9 mm em vacas leiteiras com produção média de 15 kg/leite/dia. Concluiu-se que a DFO no puerpério é influenciada pelo nível da produção leiteira sob condições do BEN presente. Referências bibliográficas Reist M, Erdin D.; Euw,D, Tschumperlin KM, Leuenberger H, Hammon HM, Morel C, Philipona C, Zbinden Y, Kunzi N, BlumJ. Postpartum reproductive function: association with energy, metabolic and endocrine status in high yielding dairy cows. Theriogenology, v.59, p.1707-1723, 2003. Figueiredo MMM, Fonseca FA, Torres CAA, Galimberti AM, Almeida CD. Dinâmica folicular ovariana de vacas leiteiras no pós-parto após tratamento com Buserelina (GnRH) e Cloprostenol (PGF2α). Ver Bras Zootec, v.29, n.3, p.725-731, 2000.



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Condrodisplasia em Mini-Vaca -Relato de Caso Chondrodysplasia in Mini-Cow -Case Report

M.D.S.M. Campos1, R.J. Silva1, H.F. Veloso Neto1, M.V. Azevedo1, N.M.Souza1, D.A. Santos Junior1, A.C.C. Fernandes1, J.D.R. Alves1, P.F. Lima1, C.C. Bartolomeu1

1Universidade Federal Rural de Pernambuco, Departamento de Medicina Veterinária

E-mail: [email protected] Introdução O interesse na criação de mini-gado vem aumentando consideravelmente nos últimos anos. Esses animais, de baixa estatura, são utilizados principalmente como mascotes, entretanto vêm ganhando espaço na pecuária leiteira e de corte visto que o rendimento é similar ao de animais de estatura normal, porém com menores custos na alimentação, espaço físico e manejo além de produzir cerca de dez vezes menos metano. Como qualquer bovino, as raças de mini-gado também estão sujeitas a doenças de origem genética. A enfermidade denominada condrodisplasia, também conhecida como bezerro “bulldog”, caracteriza-se por distúrbios generalizados no desenvolvimento ósseo devido a uma desordem cartilaginosa primária. A condrodisplasia é descrita em diversas raças bovinas como a Dexter, Hereford e Aberdeen Angus (Buchanan, 2011). Material e Métodos Deu entrada na Clínica de Grandes Animais do Departamento de Medicina Veterinária da Universidade Federal Rural de Pernambuco, no dia 28 de fevereiro de 2011, uma mini-vaca em trabalho de parto há cerca de 24 horas. O animal apresentava fortes contrações abdominais, taquicardia e taquipnéia, eliminação de conteúdo pela vulva de coloração marrom e odor fétido. À palpação retal, constatou-se distocia fetal, apresentação longitudinal posterior e posição inferior sendo a fêmea encaminhada para cesariana, segundo técnica descrita por Silva (2010). Resultados e Discussão O feto, já morto, apresentava características como corpo pesado, exoftalmia, membros encurtados e apresentando rotação, protrusão da língua, braquicefalia, prognatismo inferior e pescoço curto. Tais características são compatíveis com a condrodisplasia. Essa anomalia genética está relacionada a genes autossômicos simples que quando em homozigose recessiva (tipo Telemark, tipo braquicefálico) ou dominante (tipo Dexter) levam a falhas no processo biológico, como em reações bioquímicas durante o desenvolvimento fetal, acarretando o defeito genético. É possível que devido ao pequeno rebanho desses animais, na região, e aos cruzamentos endógenos tenha levado à homozigose recessiva e desenvolvimento da condrodisplasia. Referências bibliográficas Jones, T. C.; Hunt, R. C.; King, N. W. Patologia Veterinária. 6ª ed. Ed. Manole, Barueri, p. 923-924, 2000. Riet-Correa, F. Condrodisplasia. In: RIET-CORREA et al. Doenças de Ruminantes e Equídeos. 3 ed. Vol. 1 Ed. Palotti , Santa Maria, p. 32-34, 2007. SILVA, A. A. Diprosopus em bezerro – Relato de Caso. Revista Científica Eletrônica de medicina Veterinária, n. 14, 2010. Disponível em http://www.revista.inf.br/veterinaria14/relatos/RCEMV-AnoVIII-Edic14-RCO8.pdf BUCHANAN, D. S. Genetic Defects in Cattle. NDSU 2011. Disponível em http://www.ag.ndsu.edu/williamscountyextension/agriculture/livestock/genetic-defects-in-cattle Palavras-chave: Condrodisplasia, Mini-Vaca Keywords: Chondrodysplasia, Mini-Cow



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As infecções pós-parto e seus efeitos nos índices reprodutivos em vacas holandesas The Postpartum infections and their effects on reproductive index of Holstein cows

R.D. Tortorella, J.P. Neves1

FAV, Universidade de Brasília (UnB), Brasília, DF.

1E-mail: [email protected] Introdução A eficiência reprodutiva está intimamente ligada ao desempenho econômico e a lucratividade de uma propriedade de produção de leite (Lewis, 1997). Alguns parâmetros como: intervalo parto cio (IPC), intervalo parto concepção (IPConc), número de serviços por concepção (N° IA) e intervalo entre partos (IEP) são utilizados para avaliação desta eficiência. O objetivo desta análise retrospectiva dos dados foi, verificar o impacto das metrites e/ou endometrites na eficiência reprodutiva de vacas em lactação da raça holandesa criadas no entorno de Brasília. Material e Métodos Todos os animais foram examinados entre 5-30 dias, e reavaliados mensalmente, por meio de exame ginecológico contando de palpação retal de útero, ovários e vaginoscopia. Foram considerados como metrite vacas com até 21 dias de puerpério com útero com involução retardada, flácido, cheio de líquido, descarga vaginal fétida e aquosa/purulenta. Animais que apresentaram após 21 dias do parto descarga vaginal aquosa/purulenta ou mucopurulenta foram considerados com endometrite. Algumas vacas tiveram inicialmente metrite, e após evoluíram para um quadro de endometrite. Os animais foram avaliados considerando os seguintes grupos: G1-Puerpério fisiológico; G2-Metrite; G3-Endometrite e G4-Metrite/Endometrite. Os animais com infecções foram tratados com Ceftiofur (IM; 1 mg/Kg) por 3 dias. A performance reprodutiva foi avaliada levando em conta os seguintes parâmetros: IPC, IPConc, n° IA e IEP. As análises foram realizadas com o pacote estatístico SAS e com nível de significância P < 0,05. Resultados e Discussão Das 97 lactações 52,57% (51/97) não apresentaram nenhuma alteração patológica puerperal e pós-puerperal, 21,65% (21/97) apresentaram metrite, 14,43% (14/97) endometrite e 13,34% (11/97) metrite seguida de endometrite. Estes índices foram semelhantes aos encontrados na literatura sobre a frequência de aparecimento destas infecções (Le Blanc et al. 2002; Sheldon & Dobson, 2004). O IPC no G1 (62.75 ± 3.20 dias; p>0,05) não diferiu do G2 (71.57 ± 4.51), porém foi menor que no G3 (78.14 ± 4.29) e G4 (80.73 ± 9.05). O G1 teve o menor IP Conc (83.08 ± 5.16), enquanto que no G2 (120.81 ± 13.76) o IP Conc foi menor que em G3 (185.86 ± 25.62), mas não diferiu de G4 (153.36 ± 26.17). O N° de IA por prenhez foi menor no G1 (1.41 ± 0.11) não diferindo os grupos G2, G3 e G4 entre si (2.67 ± 0.40, 3.503.50 ± 0.59 e 2.73 ± 0.49, respectivamente). O G1 teve o menor IEP (363.08 ± 5.16), enquanto que no G2 (394.19 ± 15.60) o IEP foi menor que no G3 (465.86 ± 25.62), mas não diferiu de G4 (433.36 ± 26.17). Na análise estas infecções uterinas inespecíficas tiveram impacto negativo nos indíces reprodutivos, aumentaram os custos, diminuiram a produção de leite e por vezes determinaram o descarte. Referências bibliográficas Le Blanc SJ, Duffield TF, Leslie KE et al. Defining and diagnosing postpartum clinical endometritis and its impact on reproductive performance in dairy cows. J Dairy Sci, v.85, p.2223-2236, 2002. Lewis GS. Uterine Health and Disorders. J Dairy Sci, v.80, p.984-994, 1997. Sheldon IM, Dobson H. Postpartum uterine health in cattle. Anim Reprod Sci, v.82/83, p.295-306, 2004. Palavras-chave: eficiência reprodutiva, endometrite, metrite, vacas de leite. Keywords: dairy cows, endometritis, metritis, reproductive efficiency.



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Efeitos da inseminação artificial sobre a vascularização uterina de bovinos Effects of artificial insemination on uterine vascularization of bovine

B.M.M. Oliveira¹, L.A.Silva², G.C. Oliveira¹, H.E. Thomé¹, R.P. Arruda¹, M. Maturana Filho¹, C.B. Fernandes¹, E.C.C. Celeghini¹,3

¹Departamento de Reprodução Animal, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, USP, São Paulo, SP; ²Curso de

Medicina Veterinária, FZEA, USP, Pirassununga, SP. 3E-mail: [email protected]

Introdução Após a inseminação artificial, as fêmeas apresentam reação inflamatória transitória e fisiológica, que pode resultar em alterações na vascularização uterina. A ultrassonografia Doppler colorida é uma técnica não invasiva, que vem sendo utilizada para estudar a hemodinâmica do trato reprodutivo de bovinos (Bollwein et al., 2000). O objetivo deste trabalho é avaliar os efeitos da deposição do sêmen sobre a vascularização uterina de vacas por meio de ultrassonografia Doppler colorida.

Material e Métodos Foram utilizadas 17 vacas Nelore entre 30 e 50 dias pós-parto, as quais foram submetidas à sincronização do estro e da ovulação e divididas em dois grupos: grupo controle (C, não inseminado, n = 8) e grupo inseminado (IA, n = 9). Os cornos uterinos foram escaneados por ultrassonografia no modo Doppler colorido com probe linear transretal (Mindray, M5Vet), para avaliar a hemodinâmica uterina, em três períodos pré-determinados: 4, 24 e 48 horas após a inseminação artificial (IA). As imagens obtidas foram classificadas em escores de 0 a 4, sendo 0 (zero) referente a vascularização mínima e 4 (quatro) à vascularização máxima. O diagnóstico de gestação foi realizado 30 dias após a IA. Os dados foram submetidos a ANOVA e teste de Fisher utilizando o programa StatView. Resultados e Discussão As médias dos escores de vascularização uterina nos grupos IA e C nos diferentes períodos estão apresentadas na Fig. 1. Houve uma tendência da vascularização uterina ser mais intensa 4 horas após a IA do que 24 (P = 0,053) e 48 horas (P = 0,083) no grupo IA, o que não foi observado no grupo C, sugerindo o aumento de vascularização devido a reação inflamatória pós-IA (Kaufmann et al., 2008). A taxa de prenhez do grupo IA foi de 55,55% (5/9), valor esperado para um programa de IATF (Sales et al., 2011). Pode-se inferir que a vascularização uterina aumenta 4 horas após a IA e esse aumento pode ser diagnosticado por ultrassonografia Doppler colorida, sem afetar a taxa de prenhez.

* +

* +

0,00

0,50

1,00

1,50

2,00

2,50

IA C

Esco

res (

0 - 4

)

4 horas24 horas48 horas

Figura 1. Média ± erro padrão dos escores subjetivos (0-4) da vascularização dos cornos uterinos dos animais submetidos à inseminação artificial (IA) ou não (C) nos diferentes momentos de avaliação (4, 24 e 48 horas após IA). * P = 0,053, + P = 0,083.

Referências bibliográficas Bollwein et al. Theriogenology, v.57, n.8, p.2053-2061, 2000. Kaufmann et al. Theriogenology, v.71, p.385-391, 2008. Sales et al. Anim Reprod Sci, in press (doi:10.1016/j.anireprosci.2011.02.007) Palavras-chave: Doppler, perfusão sanguínea, sêmen, útero, vaca. Keywords: blood perfusion, cow, Doppler, semen, uterus.



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Hemodinâmica uterina de vacas submetidas à colheita de material endometrial para avaliação citológica

Uterine homodynamic of cow submitted to endometrial material recovery to cytological evaluation

E.C.C. Celeghini1,3, H.E. Thomé1, B.M.M. Oliveira1, L.A.Silva², G.C. Oliveira1, M. Maturana Filho1, C.F. Guimarães1, R.P. Arruda1

1Departamento de Reprodução Animal, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, USP

²Curso de Medicina Veterinária, FZEA, USP, Pirassununga, SP. 3E-mail: [email protected]

Introdução As técnicas para a avaliação da resposta inflamatória uterina celular em bovinos apresentam característica invasiva, que pode afetar o ambiente uterino (Kasimanickam et al., 2005). Visto que reações inflamatórias resultam em alterações na vascularização, a ultrassonografia Doppler colorida pode ser utilizada para avaliar estes efeitos (Bollwein et al., 2000). O objetivo deste trabalho foi comparar os efeitos da colheita de material para citologia endometrial por lavagem uterina com solução salina e swab com escova ginecológica sobre a hemodinâmica uterina. Material e Métodos Dezenove vacas Nelore, sem alterações uterinas e ovarianas, foram inseminadas artificialmente após sincronização de estro e ovulação. Quatro horas após a IA foram submetidas a dois métodos de colheita de amostra uterina para citologia: lavagem uterina (LU, 60 mL NaCl 0,9%, n=10) ou swab uterino por escova ginecológica (SE, n = 9). O útero foi escaneado por ultrassom no modo Doppler colorido com probe linear transretal (Mindray, M5Vet): 34 h antes (controle), 4, 24 e 48 h após a colheita. Foram avaliados o índice de resistência vascular (RI, 0 - 1)) das artérias uterinas direita e esquerda e a vascularização dos cornos uterinos de forma subjetiva, classificando as imagens em escores de 0 a 4, respectivamente da mínima à máxima intensidade. Os dados foram submetidos à ANOVA e teste de Fisher pelo programa StatView.

Resultados e Discussão Os resultados estão apresentados na Tab. 1. A LU resultou em menor RI da artéria uterina direita (P<0,05) do que SE somente 4 h após o procedimento, sendo que nas demais avaliações e momentos não foram encontradas diferenças estatísticas (P > 0,05). Desta forma, pode-se concluir que ambas as técnicas influenciam a hemodinâmica uterina de forma semelhante. Tabela 1. Média ± erro padrão do índice de resistência vascular (RI) das artérias uterinas direita (AUD) e esquerda (AUE) e do escore de vascularização dos cornos uterinos direito (CD) e esquerdo (CE) de vacas submetidas à lavagem uterina (LU) e ao swab por escova ginecológica (SE), nos diferentes períodos.

Tempo em relação ao procedimento Tratamento RI (0 – 1) Escore (0 – 4)

AUD AUE CD CE -34 horas SE 0,69 ± 0,02 0,62 ± 0,02 2,39 ± 0,82 2,33 ± 0,25

LU 0,69 ± 0,06 0,72 ± 0,06 2,20 ± 0,21 2,15 ± 0,16 4 horas SE 0,71 ± 0,05ª 0,68 ± 0,04 2,39 ± 0,20 2,17 ± 0,22

LU 0,63 ± 0,03b 0,70 ± 0,02 2,05 ± 0,20 2,20 ± 0,11 24 horas SE 0,72 ± 0,03 0,72 ± 0,04 2,00 ± 0,27 2,06 ± 0,13

LU 0,80 ± 0,05 0,78 ± 0,04 1,8 5± 0,15 1,90 ± 0,16 48 horas SE 0,81 ± 0,04 0,85 ± 0,05 1,72 ± 0,12 1,72 ± 0,12

LU 0,79 ± 0,03 0,78 ± 0,05 1,70 ± 0,08 1,55 ± 0,11 a,bLetras diferentes entre as técnicas no mesmo período indicam diferença estatística (P < 0,05) Referências bibliográficas Bollwein et al. Theriogenology, v.57, n.8, p.2053-2061, 2000. Kasimanickam et al. Can Vet J, v.46, p.255-259, 2005. Palavras-chave: escova ginecológica, lavado uterino, endometrite, Ultrassom Doppler colorido Keywords: cytobrush, uterine lavage, endometritis, color Doppler ultrasound Processo FAPESP: 09/50365-0.



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Eficiência de uma ferramenta auxiliar de detecção de estro (Estrotect®) em vacas leiteiras mestiças

Efficiency of an auxiliary tool for the heat detection (Estrotect ®) in crossbred dairy cows

G.L. Bonato, M.O. Cunha, L.C. Carneiro, R.M. Santos1

FMVZ, UFU, Uberlândia, MG. 1E-mail: [email protected]

Introdução Senger (1994) apontou que a eficiência de detecção visual de estros é menor ou igual a 50% na maioria das fazendas leiteiras. O Estrotect® é uma ferramenta auxiliar de detecção de estro que consiste na facilitação da visualização dos animais que aceitaram a monta por meio de um adesivo que é aderido a garupa do animal e que têm sua cor alterada por movimentos de fricção e atrito durante a aceitação da monta. Objetivou-se avaliar a eficiência do Estrotect® em vacas leiteiras mestiças e compará-la com a observação visual. Material e Métodos Vacas leiteiras mestiças (n = 58), vazias e com presença de corpo lúteo (CL) receberam o Estrotect® e tiveram acompanhamento ultrassonográfico (Mindray® DP3300) por 28 dias a fim de observar se os animais mantinham o CL por todo período de avaliação ou se os mesmos regrediam para formação de um novo CL, ativando o dispositivo e indicando assim a ocorrência de um estro, seguido por ovulação. Os resultados dos exames ultrassonográficos foram comparados com os relatórios diários de detecção visual de estro. Para comparar a eficiência do Estrotect® com a detecção visual foi utilizado o teste de McNemar. Resultados e Discussão A eficiência do Estrotect® foi de 92,5%, similar ao estudo de Jimenez et al (2009) que usando o mesmo método de detecção de estro encontraram eficiência de 94%, em novilhas. Não foi detectada diferença significativa entre a detecção visual e o Estrotect® pelo teste de McNemar (P>0,05), porém a taxa de detecção visual no presente estudo foi de 92,5%, muito acima da descrita anteriormente (Senger, 1994; At-Taras e Spahr, 2001). A ferramenta auxiliar de detecção de estro (Estrotect®) se mostrou tão eficiente quanto à detecção visual, e pode ser utilizada em programas de inseminação artificial de vacas leiteiras. Referências bibliográficas At-Taras EE, Spahr SL. Detection and characterization of estrus in dairy cattle with an electronic heatmount detector and an electronic activity tag. J Dairy Sci, v.84, n.4, p.792-798, 2001. Jimenez F, Urdaneta M, Gonzalez R, Sandoval J, Urdaneta-Fernández M, Parra A. Evaluation of four methods for heat detection in dual purpose heifers. Rev Cient, vol.19, n.4, p.366-370, 2009. Senger PL. The estrus detection problem: new concepts, technologies, and possibilities. J Dairy Sci, v.77, n.9, p.2745-2753, 1994. Palavras-chave: inseminação artificial, detecção de estro, reprodução. Keywords: artificial insemination, heat detection, reproduction. Apoio FAPEMIG.



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Avaliação de diferentes tempos de maturação de ovócitos bovinos utilizados em PIV Evaluation of different maturation times of bovine oocytes used in PIV

L.S. Braga1, M.C. Martins, B.G. Alves, T.H. Silva, B.G. Alves, K.A. Alves,

J.O. Jacomini, M.E. Beletti

Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade Federal de Uberlândia (UFU), Uberlândia, MG. 1E-mail: [email protected]

Introdução Sabe-se que os ovócitos bovinos utilizados na produção de embriões in vitro sofrem várias alterações nucleares durante o processo de retomada da meiose. Alguns trabalhos demonstraram que ovócitos bovinos maturados por 18 horas resultaram em taxas de clivagem e desenvolvimento embrionário semelhantes às observadas em ovócitos maturados por 24 horas (Varago et al 2008). O presente trabalho tem por finalidade avaliar o momento mais apropriado para a fertilização dos ovócitos levando em conta a presença ou não do 1° corpúsculo polar confirmando o término da 1° divisão meiótica.

Material e Métodos Os complexos cumulus-ovócitos (CCO) utilizados nos experimentos foram obtidos de ovários provenientes de frigorífico e transportados à temperatura inicial de 38ºC em solução tampão PBS até o laboratório. Os CCO foram colocados para maturação em meio MIV em estufa à 39°C e atmosfera de 5% de CO2. Foram processadas 4 amostras de CCO: uma controle (antes da maturação), uma com 19 horas , uma com 22 horas e uma com 25 horas de maturação.Os CCO foram colocadas por meia hora em uma solução de tripsina, desnudados e posteriormente fixados em Karnovsky. Aapós a fixação os CCO foram lavados em água destilada e corados com iodeto de propídeo por quinze minutos e depois visualizados em microscopia com focal. Resultados e Discussão Dentre os ovócitos controle observou-se que 80% dos ovócitos encontravam-se em meiose bloqueada em prófase I e em 20% não se observou cromossomos e envoltório nuclear, representando um quadro de degeneração celular. Após 19 horas de maturação 100% dos ovócitos estavam em fases terminais da meiose (anáfase, telófase), porém sem formação de corpúsculo polar, demonstrando que ainda não estão aptos a serem fecundados. Após 22 horas, 50% dos ovócitos já apresentavam corpúsculo polar e o restante ainda estavam em fases terminais da meiose. Com 25 horas de maturação, 5% estavam com meiose bloqueada em prófase I, 55% dos ovócitos possuíam corpúsculo polar e 40% estavam degenerados, demonstrando que o momento ideal para fecundação já havia passado. Conclui-se que dentre os tempos testados 22 horas de maturação apresenta as melhores condições para o processo de fecundação. Referências bibliográficas Varago FC, Mendonça LF, Lagares MA. Produção in vitro de embriões bovinos: estado da arte e perspectivas de uma técnica em constante evolução. Rev Bras Reprod Anim, v.32. n.2, p.100-109, 2008. Palavras-chave: bovino, corpúsculo polar, maturação, ovócito, PIV. Keywords: bovine, maturation, oocyte, PIV, polar body. Agradecimentos: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais – FAPEMIG. Apoio financeiro: FAMEMIG e CNPq.



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Caracterização da dinâmica folicular de vacas Red Sindi (Bos taurus indicus) tratadas com dois protocolos de sincronização da ovulação

Characterization of follicular dynamics of Red Sindhi cows (Bos taurus indicus) treated with two protocols of synchronization of ovulation

R.R.C. Mello1,3, J.E. Ferreira1, A.P.T. B. Silva1, L. M. Mascarenhas1, B.J.F. Silva1,

B.O. Cardoso1, H.B. Palhano2, M.R.B. Mello1

1DRAA, IZ, UFRRJ, Seropédica, RJ, Brasil; 2DBA, IB, UFRRJ, Seropédica, RJ.

3E-mail: [email protected] Introdução A raça zebuína Red Sindi apresenta excelente adaptabilidade às condições adversas de clima e manejo e boa capacidade de produção de leite. Embora muitas pesquisas venham sendo desenvolvidas com animais desta raça, pesquisas envolvendo a área reprodutiva ainda são escassas. Portanto, o objetivo deste trabalho foi caracterizar a dinâmica folicular de vacas Red Sindi, para que se possa melhorar a eficiência dos protocolos de sincronização da ovulação e, conseqüentemente, contribuir para a difusão da genética destes animais. Material e Métodos Foram utilizadas 16 vacas da raça Red Sindi divididas em dois protocolos de sincronização da ovulação. No protocolo 1, os animais (n = 8) receberam no dia 0 um implante intravaginal de 1,9g de progestágeno e uma aplicação de 2mg de benzoato de estradiol. No dia 8 o implante foi removido, sendo aplicados 10mg de Dinoprost (PGF2α) e, no dia 9, aplicado 1mg de benzoato de estradiol, sendo realizada a IATF 24 horas depois; no protocolo 2, os animais (n = 8) passaram pelo mesmo tratamento, sendo que no dia 8 foram aplicadas 400UI de gonadotrofina coriônica eqüina (eCG). A partir do dia 0 todos os animais foram avaliados diariamente por via trans-retal com aparelho de ultrassom com objetivo de monitorar a dinâmica folicular nos ovários. Os resultados foram analisados pelo teste F, com nível de significância de 5%. Resultados e Discussão Os resultados estão apresentados na Tabela 1. Não houve diferença estatística (P>0,05) entre os grupos para as variáveis resposta analisadas na dinâmica folicular. Porto-Filho (2004), ao avaliar dois protocolos de sincronização da ovulação para a IATF em fêmeas bubalinas também não encontrou diferença significativa (P>0,05) entre os grupos. Portanto, a dinâmica folicular de fêmeas bovinas da raça Red Sindi mostrou-se semelhante à dinâmica folicular de fêmeas bubalinas.

Tabela 1. Resultados da dinâmica folicular em fêmeas bovinas Red Sindi. Dinâmica folicular Grupo I (sem eCG) Grupo II (400UI eCG)

ØD8 (mm) 7,5 ± 2,5 6,6 ± 1,5 ØFD (mm) 10,47 ± 3,7 8,85 ± 1,2

Taxa de ovulação (%) 75 (6/8) 100 (8/8) Taxa de crescimento FD (mm/dia) 0,90 ± 0,78 0,83 ± 0,64

Referências bibliográficas Porto-Filho RM. Sincronização da ovulação para a inseminação artificial em tempo fixo (IATF) durante a estação reprodutiva desfavorável em fêmeas bubalinas. São Paulo, 2004. 97f. Tese (Doutorado) – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, SP, 2004. Palavras-chave: crescimento folicular, eCG, reprodução, zebuínos. Keywords: eCG, follicular growth, reproduction, zebu.



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Efeito de duas diferentes doses de pFSH na resposta superovulatória de vacas Sindi criadas no agreste paraibano

Effect of two different doses of FSH on superovulatory response in Sindhi cows raised in paraiba

F.C. Almeida1,3, P.L.J. Monteiro Junior1, A.M. Batista1, S.V. Silva1, P.F.B.A. Lemos2, A.T. Soares2, M.M.P. Guerra1

1Laboratório de Andrologia (ANDROLAB), UFRPE, Recife, PE; 2Empresa Estadual de Pesquisa Agropecuária da Paraíba (EMEPA), João Pessoa, PB.

3E-mail: [email protected] Introdução O rebanho Sindi vem crescendo em popularidade na região Nordeste do Brasil por apresentar características de rusticidade que o possibilitam grande adaptação neste ambiente. Devido à escassez de estudos na área de reprodução, principalmente de transferência de embriões (TE) nesta raça, objetivou-se com este trabalho avaliar duas diferentes concentrações de FSHp (100 e 133 mg) no protocolo de superovulação (SOV) de vacas Sindi criadas no Agreste da Paraíba. Material e Métodos Foram utilizadas seis vacas Sindi, criadas na estação experimental de Alagoinha (EMEPA/PB), em delineamento cross-over, no qual cada fêmea recebeu os dois tratamentos de forma alternada (100 e 133mg de FSHp). O protocolo de SOV foi iniciado em dia aleatório do ciclo estral (D0), onde as doadoras receberam implante intravaginal contendo progesterona, associado a 2,5 mg de BE. No D4 iniciou-se a administração de FSHp, em doses decrescentes, durante quatro dias, em duas aplicações diárias, a intervalo de 12 horas. No D6, juntamente com a 5ª aplicação do FSH, administrou-se 0,225 mg de d-Cloprostenol. No D7 foram retirados os implantes e administrada a última dose de FSH. Os animais foram inseminados 12 e 24 horas após o estro. A colheita dos embriões foi realizada no D15 e, em seguida, procedeu-se a avaliação da resposta ao tratamento de SOV, com o auxílio de ultrassom, sendo quantificados os corpos lúteos formados e, posteriormente, relacionados com o número de estruturas recuperadas. As médias dos grupos foram analisadas pelo teste “t” de Student com nível de significância de 5%. Resultados e Discussão Observou-se 2,5 ± 2,1 e 8,6± 4,7 corpos lúteos no D15, 1,2 ± 1,3 e 7,2 ± 5,7 estruturas totais recuperadas, 0,8 ± 1,3 e 2,2 ± 3,5 estruturas transferíveis, 0,7 ± 1,2 e 1,3 ± 2,1 estruturas congeláveis, 0,0 ± 0,0 e 2,2 ± 2,2 estruturas degeneradas, bem como 0,3 ± 0,8 e 2,8 ± 2,8 estruturas não fertilizadas, respectivamente, nos tratamentos 100 mg e 133g de FSH, com diferenças significativas (P<0,05) entre grupos em todas as análises realizadas. Este resultado evidencia uma relação dose dependente, uma vez que o aumento da dose de FSH determinou maior número de CL formados, fato não constatado por Carvalho et al. (2008), também em vacas Sindi. Conclui-se que, nas condições deste experimento, deve-se utilizar a dosagem de 133 mg de FSHp em protocolo de superovulação de vacas da raça Sindi. Referências bibliográficas Carvalho BP, Mello MRB, Dias AJB. Reposta ovariana de vacas Red Sindi superovuladas com diferentes doses de FSH. Acta Sci Vet, v.36, supl. 2, p.453, 2008. Palavras-chave: bovino, hormônio folículo estimulante, superovulação. Keywords: bovine, follicle stimulanting hormone, superstimulation.



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Efeito do estresse calórico na morfologia e na maturação citoplasmática de oócitos bovinos maturados in vitro

Effect of heat stress on morphology and cytoplasmic maturation of bovine oocytes maturated “in vitro”

M.F. Alves1, D.L. Pavão, F. Souza, R.K. Queiroz, E.G. Palazzi, M. D’Angelo

Instituto Biológico, Centro de Pesquisa e Desenvolvimento de Sanidade Animal, 04014-002, São Paulo, SP. 1E-mail: [email protected]

Introdução As condições climáticas são o principal fator determinante para o sucesso na exploração pecuária. São grandes as perdas econômicas e custos operacionais do setor atribuído a fatores ambientais, dentre eles o aquecimento global, principalmente devido à diminuição no desempenho produtivo, aumento da mortalidade e queda na eficiência reprodutiva (ST-Pierre et al., 2003). Há indicações de que o estresse calórico influencia as respostas fisiológicas, sendo prejudicial à dinâmica ovariana, qualidade e competência oocitária de fêmeas (Rocha et al., 1998). O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito do estresse calórico na morfologia e na maturação citoplasmática de oócitos bovinos maturados “in vitro”. Material e Métodos Complexos oócitos cúmulus (COCs) foram obtidos através da punção folicular de ovários bovinos provenientes de abatedouro. Após a identificação, os COCs foram divididos em dois grupos: um controle (n = 316), mantido à temperatura de 38ºC e um exposto (n=365) à 40ºC, para serem maturados durante 24h em meio de maturação (In Vitro®) em estufa à 5% de CO2 e 95% de umidade. Após o período de maturação, os oócitos foram avaliados quanto à sua morfologia em microscópio óptico e, após a retirada das células do cúmulus avaliou-se a taxa de maturação pela presença do corpúsculo polar (CP). Resultados e Discussão Nos oócitos expostos à 40ºC, não observou-se diminuição na expansão das células do cúmulus e, as mesmas, apresentaram aspecto normal quando comparadas com o grupo controle, que apresentou uma taxa de maturação de 69,62% (220/316) enquanto que para o grupo exposto, verificou-se uma taxa de 49,04% (179/365) de maturação. Para a análise estatística dos dados observados, utilizou-se o teste x2 (P > 0,05) onde constatou-se significância nos resultados obtidos. Esses dados sugerem que o aumento da temperatura influencia negativamente a maturação oocitária bovina e, com isso a relevância de se estudar os danos ocasionados por fatores ambientais na reprodução animal e também a proposta da fecundação in vitro (FIV) como um modelo experimental para avaliação desses parâmetros. Referências bibliográficas Rocha AA, Randel RD, Broussard JR, Lim JM, Blair RM, Roussel JD, Godke RA, Hansel W. High environmental temperature and humidity decrease oocyte quality in Bos taurus but not in Bos indicus cows. Theriogenology, v.49, p. 657-665, 1998. ST-Pierre NR, Cobanov B, Schinitkey G. Economic losses from heat stress by US livestock Insdustries. J Dairy Sci, v.86, p.52-77, 2003. Palavras-chave: aquecimento global, bovinos, maturação, oócitos, reprodução. Keywords: bovine, global warming, oocytes, maturation, reproduction.



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Efeito do eCG sobre o tamanho do folículo pré-ovulatório em vacas Girolando lactantes eCG effect over pre-ovulatory follicular size of Girolando lactating cows

P.F.M.P. Souto1, T.F. Pires, G.A. Veras, A.S. Santos Filho, F.I. Guido, J.C.V. Oliveira,

C.C. Bartolomeu, F.A.B.M. Sales, F.R. Martins Filho, F.P. Pinho

Unidade Acadêmica de Garanhuns, Instituto Agronômico de Pernambuco, Universidade Federal Rural de Pernambuco, Recife, PE; Faculdades Integradas Aparício Carvalho, Porto Velho, RO.


Introdução O eCG quando administrado em vacas estimula o crescimento final do folículo pré-ovulatório, esse crescimento provavelmente leva à melhora dos índices de concepção. Visando obter uma maior taxa de concepção, o presente trabalho teve por objetivo avaliar o efeito do eCG sobre o tamanho do folículo pré-ovulatório de vacas Girolando 5/8.

Material e Métodos Foram utilizadas 16 vacas Girolando 5/8 lactantes (+60 dias pós-parto), ciclando regularmente, com boa condição corporal, mantidas na Estação Experimental do IPA (Instituto Agronômico de Pernambuco) em Arcoverde-PE. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em dois tratamentos. No D0 todas as fêmeas receberam um dispositivo intravaginal de P4 (DIB®, Schering), juntamente com a aplicação de 2 mg de BE (IM). No D8, o dispositivo foi retirado e foi aplicado 500 µg PGF2α (IM). O grupo tratamento (T2) recebeu 500UI de eCG IM (Novormon®, Schering) e o grupo controle (T1) um placebo (solução fisiológica; 2,5 ml). Foram realizados exames ultrassonográficos (Pie Medical Aquila Pro Vet, transdutor linear 6-8 MHz) no D0, no D8, no dia da IA e a cada 6 horas até a ovulação para mensuração dos diâmetros foliculares. Todos os animais foram inseminados ±12 horas após exibição de estro. Os dados foram analisados pelo teste ANOVA do programa estatístico SPSS 19.

Resultados e Discussão O diâmetro do folículo ovulatório no D8 foi de 10,77 ± 0,59 mm para T1 e 13,60 ± 1,25 mm para T2 (P > 0.05). No momento da inseminação, foi de 13,07 ± 0,97 mm para T1 e 13,60 ± 1,25 mm pra T2 (P > 0,05). A diferença entre os diâmetros foliculares do D8 e do momento da inseminação nos tratamentos T1 e T2 foi de 3,50 ± 1,05 mm e 3,57 ± 1,67 mm., respectivamente (P > 0,05). Esses dados corroboram resultados apresentados por Kastelic et al. (1999) e Baruselli et al. (2004), que retratam que animais com boa condição corporal, ciclando regularmente e com pós-parto superior a dois meses, não apresentam efeito positivo do uso do eCG sobre o crescimento final do folículo já que estes animais não apresentam deficiência de LH. Referências bibliográficas Baruselli PS, Reis EL, Marques MO, Nasser LF, Bó G. The use of hormonal treatments to improve reproductive performance of anestrous beef cattle in tropical climates. Anim Reprod Sci, v.82/83, p.479-486, 2004. Kastelic JP, Olson WO, Martinez M, Cook RB, Mapletoff RJ. Synchronization of estrus in beef cattle with norgestomet and estradiol valerate. Can Vet J, v.40, p.173-178, 1999. Palavras-chave: eCG, folículo, girolando. Keywords: eCG, follicle, girolando.



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Efeito do eCG na sincronização de receptoras de embriões bovinos Effect of eCG in the synchronization of bovine embryo recipients

J.E. Ferreira1,4, L.D.P. Sinedino2, R.R.C. Mello1, R.V. Serapião3, P.A.M. Alves3,

L.A.G. Nogueira2, M.R.B. Mello1

1Instituto de Zootecnia, UFRRJ, Seropédica, RJ; 2Centro de Ciências Médicas, UFF, Niterói, RJ; 3PESAGRO,

Seropédica, RJ. 4E-mail: [email protected]

Introdução No início da gestação o embrião necessita de secreções uterinas para sua sobrevivência e crescimento. Nesta fase são importantes as proteínas uterinas específicas secretadas em resposta à progesterona (P4) sangüínea. Menor concentração de P4 circulante neste período pode resultar em maior mortalidade embrionária. A indução de corpo lúteo acessório e/ou o aumento em seu diâmetro, após a aplicação de gonadotrofina coriônica eqüina (eCG), poderiam ser uma forma de elevar a concentração de P4 aumentando a sobrevivência embrionária e, consequentemente, as taxas de concepção. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do eCG na sincronização de receptoras de embriões bovinos. nem me fale, se ao menos dessem valor Material e Métodos Foram utilizadas como receptoras 30 novilhas mestiças distribuídas aleatoriamente em dois tratamentos: Grupo controle: Implante com 1,9 g de progestágeno e aplicação de 2 mg de Benzoato de Estradiol (BE) no D0; remoção do implante e aplicação de 0,15 mg de D-Cloprostenol no D8; aplicação de 1mg de BE no D9 e transferência de embrião (TE) no D17. Grupo tratado (eCG): protocolo de sincronização igual ao anterior, acrescido da aplicação de 400UI de eCG no D5. No 16º dia após o início da sincronização, as receptoras foram avaliadas com auxílio de ultrassom para confirmação da presença de corpo lúteo (CL), sendo consideradas aptas às receptoras apresentando CL com diâmetro ≥13 mm. Os embriões foram transferidos a fresco e, três semanas após a TE, foi realizado o diagnóstico de gestação por ultrassonografia.

Resultados e Discussão A porcentagem de receptoras aptas em relação às sincronizadas foi de 60% (9/15) e 66,7% (10/15) para os grupos controle e tratado, respectivamente. O diâmetro médio do CL no dia da inovulação para os grupos controle e tratado foi de 17,2 e 19,5mm e as taxas de concepção foram de 55,5% (5/9) e 30% (3/10), respectivamente. Não houve diferença estatística para nenhum dos parâmetros avaliados (P > 0,05). Estes resultados diferem dos apresentados por Baruselli et al. (2009) e Bó et al. (2002) onde a adição do eCG ao protocolo de TETF resultou em maior proporção de receptoras selecionadas e melhores taxas de concepção. Esta diferença pode estar relacionada ao diferente número de animais empregados. Portanto, conclui-se que, o emprego do eCG para aumento das taxas de concepção não se mostrou benéfico, em nossas condições, sendo economicamente viável a utilização do protocolo controle. Referências Bibliográficas Baruselli PS, Ferreira RM, Filho MFS, Nasser LFT, Rodrigues CA, Bó, G.A. Bovine embryo transfer recipient synchronization and management in tropical environments. Reprod Fertil Dev, v22, p.67-74, 2009. Bó GA, Baruselli PS, Moreno D, Cutaia L., Caccia M, Tríbulo R, Tríbulo H, Mapletoft RJ. The control of follicular wave development for self-appointed embryo transfer programs in cattle. Theriogenology, v.57, p.53-72, 2002. Palavras-chave: concepção, progesterona, transferência embrionária. Keywords: conception, embryo transfer, progesterone. Projeto financiado pela FAPERJ.



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FSH-p in the TAI protocol of crossbred heifers FSH-p em protocolo de IATF de novilhas mestiças

F.A. Oliveira1, C.A.A. Torres, V.A. Nascimento, M.M.N.F. Oliveira, M. Dias,

J.M. Penitente Filho

Federal University of Viçosa, Viçosa, MG. 1E-mail: [email protected]

Introduction The pregnancy rate in TAI protocols is related to the diameter of ovulatory follicle (Mussard et al., 2007), because of the close relationship between diameter of ovulatory follicle and the volume of corpus luteum and blood levels of progesterone (Vasconcelos et al., 1999). Thus, the aim was to evaluate if the application of FSH-p at the progesterone device removal, at the stage of follicular divergence occurrence, affect the follicular dynamics and pregnancy rate in crossbred heifers. Material and Methods One hundred and thirty eight heifers were used in a random design experiments. In experiment I the dynamics of the protocols were evaluated: Tcontrol (n=11) – day 0, insertion of intravaginal progesterone device (IPD) followed by an injection of 2 mg of estradiol benzoate (EB); day 8, withdrawal of IPD and injection of 0.150 mg of PGF2α; day 9, injection of 1 mg of EB; day 10, the AI was carried out between 48 and 54 hours after the IPD removal; TFSH (n=11) – similar to the Tcontrol, but on day 8, 15 mg of FSH-p were administered. Ultrasonography examinations were done on days 0, 8, and on TAI day to ovulation which was determined by the absence of dominant follicle. Experiment II the pregnancy rate evaluation were similar to the protocols of the experiment I, differing in the number of animals: Tcontrol = 55 heifers and TFSH = 61 heifers. The data were analyzed in a random design at 5 % probability.

Results and Discussion The follicular growth rate was not affected by the protocols or treatments (P>0.05). The diameter of the largest follicle was not affected by the treatment on day 10, being 10.27 and 9.47 mm in the TFSH and Tcontrol females, respectively (P > 0.05). The ovulation rate was not affected by the FSH-p treatment in the ovulation synchronization protocol (P > 0.05). However, the TFSH heifers showed a pregnancy rate (50.82%) higher than Tcontrol (30.91%; P<0.05). The administration of FSH-p in crossbred heifers on ovulation synchronization protocol did not show alterations in the follicular dynamic pattern, but resulted in greater pregnancy rate. References Mussard ML, Burke CR, Behlke EJ et al. Influence of premature induction of a luteinizing hormone surge with gonadotropin-releasing hormone on ovulation, luteal function, and fertility in cattle. Journal of Animal Science, v.85, p.937-943, 2007. Vasconcelos JL, Silcox RW, Rosa GJ et al. Synchronization rate, size of the ovulatory follicle, and pregnancy rate after synchronization of ovulation beginning on different days of the estrous cycle in lactating dairy cows. Theriogenology, v.52, p.1067-1078, 1999. Keywords: biotechnology, cattle, fertility, follicle. Palavras-chave: biotecnologia, bovinos, fertilidade, folículos.



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Progestogen and progesterone supplementation after artificial insemination in postpartum beef cows

Suplementação progesterônica ou progestogênica após a inseminação artificial de vacas de corte no pós-parto

R. Machado1,4, M. Zorzenon2, L.C. Ferreira2, L.S. Leal2, R.M. Guiesi3, M.A. Bergamaschi1, M.J.Sudano3

1Embrapa Pecuária Sudeste, São Carlos, SP; 2Unicastelo; 3UNESP.

4E-mail: [email protected] Introduction This study aimed to determine pregnancy rate (PR) of cows submitted to the fixed time artificial insemination (FTAI) and supplemented with norgestomet or progesterone on day 12 post-AI. Material and methods Crossbred beef suckled cows (n=176; ½ Nelore and ½ either Simental or Aberdeen Angus) from Embrapa Pecuária Sudeste (Body Condition Score= 6.2 and 68 days postpartum, on average) were randomly assigned to group NOR– received 3 mg norgestomet/5 mg estradiol valerate IM and an auricular implant with 3 mg norgestomet (day 0), on Day 9 implant was withdrawn and 0.5 mg of estradiol cipionate (EC) was given IM; and group PRO - received (day 0) one progesterone (1g) intravaginal device (P4D) associated with 2mg benzoate estradiol IM, on day 7 cows received 0.25mg of PGF2α analogue IM and on day 9 device was removed and 0.5 mg of EC was given IM. All cows were artificially inseminated 48 hours after implant or P4D removal. Twelve days after FTAI, cows from NOR were re-implanted with one once-used norgestomet implant (NOR-rei; n = 34) or remained untreated (NOR-con; n=42); and cows from PRO were re-inserted with one once-used P4D (PRO-rei; n=40) or remained untreated (PRO-con; n=40). Devices and implants were withdrawn 9 days after insertion. Cows were examined by rectal ultrasonography 30 days after FTAI and PR data were analyzed by chi-square analysis. Results and Discussion Pregnancy rate did not differ (P>0.05; χ2

GL=3=5.90) among treatments (79.4%, 61.9%, 52.5% and 65.0% respectively for NOR-rei, NOR-con, PRO-rei and PRO-con). The second norgestomet implants increased (P<0.05; χ2

GL=1=5.84) PR as compared with P4D re-insertion. NOR-rei tended (P<0.10; χ2

GL=1=2.73) to increase PR as compared to NOR-con. Post-AI supplementation with norgestomet1 or progesterone2 intends to enhance embryo survival in cows with premature corpus luteum regression or with short luteal phases. The present trial did not show difference amongst treatments. Control cows achieved high PR for FTAI, which may indicate that only few cows could benefit from treatments2. Even though, PR after the supplementation with NOR was promising. Further studies on this matter are encouraged.

References 1. Favero RJ, Faulkner DB, Kesler, DJ. Norgestomet implants synchronize estrus and enhance fertility in beef heifers subsequent to a timed artificial insemination. J Anim Sci, v.71, p.2594-2600, 1993. 2. Van Cleeff J, Drost M, Thatcher WW. Effects of post-insemination progesterone supplementation on fertility and subsequent oestrus response of dairy heifers. Theriogenology, v.36, p.795-807, 1991. Keywords: cattle, estrus synchronization, norgestomet progesterone. Palavras-chave: bovino, norgestomet, Progesterona, sincronização do estro.



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Influência da qualidade dos complexos cumulus oophorus na eficiência da produção in vitro de embriões

Influence of the COCs quality in the efficiency of in vitro production of embryos

K.S. Viana1, L.F. Matos, B.P. Carvalho, R.S. Fontes, L.D. Zini, M.M. Rosado, M. Sabino, A.J.B. Dias

PecGen Embriões - Central de Receptoras do Norte Fluminense

1E-mail: [email protected]/[email protected] Introdução Uma série de tecnologias reprodutivas como maturação in vitro (MIV), fertilização in vitro (FIV), injeção intracitoplasmática (ICSI) e clonagem animal vem sendo desenvolvidas e melhoradas continuamente durante décadas. Como fator chave desses procedimentos encontra-se a qualidade oocitária, que influencia a sobrevivência embrionária inicial, manutenção da gestação e desenvolvimento fetal. Sendo assim, estudos que avaliem a influência da qualidade oocitária na produção de embriões in vitro são de grande importância para aumentar a eficiência na produção embrionária. Material e Métodos Foi utilizado um total de 3400 oócitos distribuídos em 160 repetições. A classificação dos complexos cumulus-oócito (CCOs) seguiu os critérios descritos por de Loss et al. (1989). Os CCOs foram separados conforme sua qualidade (I, II e III) e colocados em gotas com meio de maturação. Os CCOs foram inseminados com sêmen descongelado de dois touros diferentes. Em todas as etapas foi utilizado meio comercial (Nutricell, Campinas, SP). Foram avaliadas taxa de clivagem no dia 3 e taxa de blastocisto no dia 8 do cultivo in vitro.

Resultados e Discussão Os resultados da taxa de clivagem e blastocisto estão sumarizados na tabela 1. A qualidade dos CCOs (I, II, III) não influenciou a taxa de clivagem e de blastocisto, exceto nos CCOs de grau III inseminados com sêmen do touro 2, os quais apresentaram uma taxa de blastocisto maior que as obtidas com CCOs de grau II (P < 0,05 pelo teste Tukey 5%). Os dados mostram que CCOs de grau III possuem competência de produção de embriões semelhante aos classificados como de melhor qualidade (G I) nesse modelo de sistema de cultivo. Corroborando os dados da literatura, foi observado também diferença na eficiência da produção de embriões relacionada ao sêmen utilizado (P< 0,05). Este resultado é de grande importância tanto para o sistema comercial de produção in vitro de embriões quanto para a pesquisa, pois a inclusão dos CCOs de grau III no sistema de produção in vitro aumenta o número de estruturas disponibilizadas para a fertilização, sem que ocorra redução na taxa de produção de blastocistos, obtendo-se assim um maior número de embriões produzidos.

Tabela 1. Valores médios (%) de taxa de clivagem e de blastocistos após inseminação com sêmen convencional de COCs de diferentes graus de qualidade.

G I G II G III Touros N Cliv Bx N liv Bx N Cliv Bx Touro 1 (%) 480 78,46 22,54 640 80,63 24,78 760 76,18 28,82 Touro 2 (%) 420 82,81 36,25 ab* 460 76,39 30,00a 640 83,44 42,97b*

Valores GI, GII e GIII = COCs de qualidade I, II e III segundo de Loss (1989). Cliv = taxa de clivagem. Bx = taxa de blastocisto no dia 8 (D8). Diferentes letras minúsculas na mesma linha indicam diferença entre grupos. (*) = indica diferença entre touros.

Referências bibliográficas De Loos F, Van Vliet C, Van Maurik P, Kruip Th, AM. 1989. Morphology of immature bovine oocytes. Gamete Res, v.24, p.197-204.

Palavras-chave: fertilização in vitro, oócito, qualidade oocitária. Keywords: in vitro fertilization, oocyte, oocyte quality.



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Avaliação da interferência reprodutiva de dois protocolos para sincronização de estro em fêmeas bovinas

Assessment of reproductive interference of two protocols synchronization of estrus in cows

C.F.M. Mansano1, H.M. Simon, L.S. Mukai, A.R. Peres, B.I. Macente, R.R. Gutierrez, D.J.A. Santos

UNESP, Campus Jaboticabal, SP; UNICASTELO, Campus Fernandópolis, SP

1E-mail: [email protected] Introdução Os programas de inseminação artificial em tempo fixo (IATF), tornam desnecessária a detecção de estro, eliminando a causa das baixas taxas de serviços em bovinos. Os protocolos de sincronização de estro nos programas de IATF utilizam-se de dispositivos liberadores de progesterona, mantendo-a em níveis elevados e prolongando a fase luteínica. Os dispositivos são encontrados nas formas de implantes intravaginais ou auriculares subcutâneos, sendo os primeiros considerados indutores de vaginites em bovinos. Este estudo objetivou avaliar os efeitos causados na genitália de fêmeas bovinas da raça nelore, sincronizadas para IATF com dispositivos intravaginais siliconados comparativamente as fêmeas com implantes auriculares subcutâneos, por meio da taxa de prenhez.

Material e Métodos Foram utilizadas vacas da raça Nelore, em idade reprodutiva, divididas em dois grupos, A e B. O grupo A, constituído de quinze fêmeas sincronizadas com implante auricular subcutâneo (CRESTAR®) e o grupo B, com dispositivo intravaginal siliconado (CIDR®). Após as sincronizações realizou-se a IATF. O diagnóstico precoce das gestações foi realizado por ultrassonografia. Resultados e Discussão A avaliação ultrassonográfica confirmou no grupo A, a gestação de nove fêmeas (60%) e no grupo B, oito fêmeas (57,14%). Observou-se que a taxa de concepção para ambos os grupos experimentais apresentou valores muito próximos, demonstrando similaridade para ambos os dispositivos de sincronização. Portanto, nas condições deste presente estudo, a vaginite causada pelo uso de implantes intravaginais não interferiram na taxa de concepção.

Referências bibliográficas Barros CM, Ereno RL. Avanços em tratamentos hormonais para inseminação artificial em tempo fixo (IATF) em bovinos de corte. Acta Sci Vet, v.32,p. 23-34, 2004. Walsh RB, Leblanc SJ, Vernooy E, Leslie KE. Safety of a progesterone-releasing intravaginal device as assessed from vaginal mucosal integrity and indicators of systemic inflammation in postpartum dairy cows. Can J Vet Res, v.72, n.1, p. 43-49, 2008. Palavras-chave: bovinos, inseminação, vaginite. Keywords: bovine, insemination, vaginite.



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Software para análise de resultados de inseminação artificial em tempo fixo Software for analyzing results of Timed Artificial Insemination

J.L. Costa Junior1,7, J.E.C. Monteiro2, D.C. Burgos3,4, S. Oliveira Junior4, G.F. Carneiro3,

C.N. Sant’Anna5, A.K.S. Cavalcante6

1PPGGBC, UESB, Jequié, BA, 2Topwise Software, Jequié, BA, 3PPGSRR-UAG, Clínica de Bovinos de Garanhuns, UFRPE, Garanhuns, PE; 4CRIAR, Salvador, BA, 5DCC-UFBA, Salvador, BA; 6UFRB, Cruz das Almas, BA.

7E-mail: [email protected] Introdução Muitas são as variáveis que interferem no resultado de um programa reprodutivo para bovinos, principalmente quando se utiliza da biotecnologia de Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF). Com o objetivo de auxiliar a tomada de decisão em futuros programas de reprodução assistida, foi desenvolvido o MATRIZ – Monitoramento e Análise de Tratamentos Reprodutivos por Índices Zootécnicos, software de banco de dados com a finalidade de avaliar os resultados da IATF comparando as variáveis de interesse. Material e Métodos O Software foi desenvolvido utilizando-se as ferramentas Delphi® versão 7.0 e o banco de dados Paradox® versão 7.0, ambos da empresa Borland. O Structured Query Language (SQL) foi o sistema de consulta escolhido para análise e edição dos dados. As variáveis cadastradas para análise foram levantadas a partir da demanda de Veterinários, além de diversos trabalhos publicados com análise comparativa de resultado utilizando: escore de condição corporal, idade, raça, dias pós-parto, exame ginecológico prévio, hormônios utilizados, ordem de uso de implante de progestágeno, métodos de manejo, inseminador, touro, partida, presença e qualidade do muco dentre outros. Resultados e Discussão O MATRIZ obtém resultados de índices de gestantes, retorno ao cio e a soma dos dois através da combinação de filtros expostos na sua interface na forma de apêndice. As variáveis avaliadas são as seguintes: datas; lotes; animais; inseminação; manejo; progestágenos; sincronização de onda; luteolíticos; indução da ovulação e promotor de crescimento folicular. Ainda oferece a opção de inclusão, exclusão ou alteração de qualquer filtro a qualquer momento. O software pode se tornar uma ferramenta de auxílio à tomada de decisão, num programa de reprodução assistida através de consultas rápidas sendo de fácil utilização para o profissional no campo. Referências bibliográficas Vasconcelos JLM, Menehettim M, Santos RM. Inseminação artificial em tempo fixo (IATF) em bovinos. Acta Sci Vet, v.34, supl. 1, p.9-16, 2006. Cócaro H, Lopes MA. O uso de softwares para a bovinocultura de corte: uma revisão de literatura. Rev Bras Agroinform, v.6, n.1, p.64-78, 2004. Alves WP. Delphi 7: aplicações avançadas de banco de dados. São Paulo: Érica, 2003. 302p. Palavras-chave: IATF, ovulação, programa, sincronização, software. Keywords: Ovulation, program, software, synchronization, tai.



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Resposta a protocolo de IATF em novilhas da raça Gir com distúrbios reprodutivos Response to FTAI protocol in Gir heifers with reproductive disorders

P.F.B. Araújo-Lemos1,3, A.T. Soares1, R.M.H. Leite1, J.B. Pires Júnior2

1EMEPA-PB, João Pessoa, PB; 2Bolsista CNPq.


Introdução Devido o aumento das falhas na detecção do estro, a utilização da inseminação artificial em tempo-fixo (IATF) tornou-se uma estratégia viável para o aumento da eficiência reprodutiva (Sartori, 2007). Os programas para sincronização do estro e da ovulação têm como princípio básico prevenir o estro durante o tratamento hormonal com a utilização de progesterona exógena, controlar a vida do corpo lúteo (CL), induzir o desenvolvimento folicular e sincronização da ovulação. Para aumentar a produtividade em fazendas que utilizam a inseminação artificila (IA), protocolos de sincronização do estro e da ovulação estão sendo desenvolvidos para realizar a inseminação em tempo fixo, sem a necessidade de detecção do estro. O objetivo deste trabalho foi avaliar a taxa de fertilidade após a IATF em novilhas da raça Gir com distúrbios reprodutivos. Material e Métodos Foram utilizadas 30 novilhas da raça Gir, com idade variando de 34 a 66 meses. Os animais foram avaliados por meio de palpação retal e exame ultrassonográfico, analisando o tamanho ovariano e presença ou não de CL. O protocolo de sincronizados foi mediante o emprego de dispositivo intravaginal a base de progesterona (Primer, Tecnopec, Brasil) durante oito dias, contando o dia zero como o momento da inserção do pessário vaginal, aplicando-se por via intramuscular 2 mL de benzoato de estradiol (Ric-BE, Tecnopec, Brasil). No oitavo dia, retirou-se o dispositivo e aplicou-se 2 mL de cloprostenol (Prolise, Tecnopec, Brasil) e 0,5 mL de FSHp (Folltropin, Tecnopec, Brasil). No nono dia aplicou-se 1 mL de benzoato de estradiol (Ric-BE, Tecnopec, Brasil). Ao décimo dia realizaram-se as inseminações.

Resultados e Discussão A taxa de fertilidade foi de 43,33%, considerada resultado satisfatório frente às condições reprodutivas das fêmeas, que apresentavam anestro e cistos foliculares. Isto sugere que animais de alto valor zootécnico portadores de distúrbios reprodutivos podem ser submetidos a medidas terapêuticas, como protocolos de sincronização do estro, visando oferecer uma oportunidade de aproveitamento desses animais, eliminando o descarte precipitado. O programa de desenvolvimento da IATF, que está direcionando os esforços para ganhos qualitativos (genética) bem como quantitativos (número de animais nascidos), apresenta-se como uma alternativa para superar os entraves ligados, principalmente, a baixa taxa de serviço.

Referências bibliográficas Sartori R. Manejo reprodutivo da fêmea leiteira. Rev Bras Reprod Anim, v.31, n.2, p.153-159, 2007. Palavras-chave: bovinos, infertilidade, manejo reprodutivo, sincronização do estro. Keywords: cattle, infertility, reproductive management, synchronization of oestrus.



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Caracterização de proteínas no líquido folicular de novilhas zebuínas mestiças Protein characterization in follicular fluid of heifers crossbred zebu

F.Q. Costa, B.P. Carvalho, F.B. Rosa, C. Retamal, A.J.B. Dias

LRMGA, Universidade Estadual do Norte Fluminense, Campos dos Goytacazes, RJ.

E-mail: [email protected] Introdução Tem sido descrita uma diferença no perfil eletroforético do fluido folicular de vacas, coletado de folículos dominantes de diferentes diâmetros. Folículos com diâmetros <5 mm e >10 mm apresentam diferenças morfológicas e fisiológicas bastante claras, como, por exemplo, diferença de sensibilidade a baixas concentrações de FSH, habilidade para ligar LH e produção de estradiol-17B (Gradela et al., 1998). O objetivo desse trabalho foi caracterizar as proteínas encontradas no fluido de folículos na fase inicial do período de dominância, de novilhas mestiças zebuínas. Material e Métodos Vinte novilhas mestiças, cíclicas e idade média de 2 anos, foram submetidas à aspiração folicular com auxílio de ultrassom (DP-2200, Mindray, 7,5 Mhz). O fluido foi aliquotado e congelados a -70ºC até a análise. As amostras foram analisadas por eletroforese bidimensional (nativo/desnaturante) em gel de poliacrilamida. Resultados e Discussão Após eletroforese em primeira dimensão (gel nativo) foram identificadas as bandas majoritárias de mobilidade relativa (Rf) de 0,04 a 0,13; 0,15; 0,43 e 0,93. A migração das amostras em gel desnaturante (segunda dimensão) permitiu observar bandas de peso molecular de 82, 78, 65, 58 e 51 KDa associados à banda de Rf 0,93; de 187, 165, 136, 116, 85 64 e 56 KDa associadas à banda de Rf 0,43 e de 170, 138, 112 e 72 KDa associadas à banda de Rf 0,15. Também foi detectada uma banda 27 KDa, agregada à banda de Rf entre 0,04 aa0,13, a qual pode corresponder a proteína descrita por Gradela et al. (1998) como sendo a proteína ligante de IGF-4 (IGFBP-4). Segundo Armstrong et al.(1996) esta proteína ligante é detectada em cultura de células da teca, especialmente se as células são isoladas de folículos pequenos, e suas concentrações aumentam quando as células são expostas ao LH, o que simularia o ocorrido em folículos em fase de dominância. Referências bibliográficas Armstrong DG, Hogg CO, Campbell BK, Webb R. Insulin-like growth factor (IGF)-binding protein production by primary cultures of ovine granulosa and theca cells. The effects of IGF-1, gonadotropin and size follicle. Biol Reprod, v.55, n.5, p.1163-71, 1996. Gradela A, Roncolleta M, Morani ESC, Esper CR, Franceschini PH. Proteínas ligantes do insulin-like growth factor (IGFBPs) e dominância folicular em vacas Bos taurus indicus puras e cruzadas. Braz J Vet Res Anim Sci, v.35, n.5, p.218-220, 1998. Palavras-chave: fluido folicular, novilhas, proteínas. Keywords: follicular fluid, heifers, protein.



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Efeito do ácido linoléico conjugado a albumina (LAA) no meio de cultivo sobre as taxas de produção in vitro de embriões bovinos

Effect of linoleic acid-albumin(LAA) in the culture medium on blastocysts rates of in vitro-produced bovine embryo

D. Detoni1, F.Q. Costa, B.P. Carvalho, I.R. Santos, C.S. Paes de Carvalho, A.J.B. Dias

LRMGA, Universidade Estadual do Norte Fluminense, Campos dos Goytacazes, RJ.

1E-mail: [email protected] Introdução O ácido linoleico conjugado a albumina (LAA) tem sido utilizado no cultivo de embriões in vitro visando aumentar sua criorresistência (Hochi et al., 1999). No entanto, tem sido relatado que o LAA tem também um efeito importante no metabolismo energético e pode estar envolvido em vários processos do desenvolvimento embrionário (Haggarty et al., 2006). Então o objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da suplementação com LAA em diferentes momentos do cultivo in vitro na taxa de clivagem e produção de blastocistos bovinos. Material e Métodos Complexos cumulus oophorus (COCs) aspirados de folículos de 3 a 8 mm de ovários obtidos em matadouro, foram maturados in vitro (MIV) em meio comercial (Nutricell), em uma atmosfera de umidade controlada de 5% de CO2 e 38,8 º C, durante 22 h. A fertilização in vitro (FIV) foi realizada em gotas de 100 µl de meio de FIV (Nutricell) por 18 h. Os possíveis zigotos foram cultivados in vitro (CIV) em gotas de 100 µL em meio de cultivo (Nutricell) suplementadas com LAA (0,1%) nas primeiras 72 h (T1), nas últimas 72 h (T2), ou durante todas as 192 h (T3) de CIV. O cultivo por 192 h em meio sem LAA foi utilizado como controle. A taxa de clivagem foi avaliada às 72 h pós-fecundação e a taxa de blastocistos às 192 h pós-fertilização. Os dados foram analisados no ambiente R versão 2.11.1(2010) pelo teste X2 (Qui quadrado), com nível de significância de 5%. Resultados e Discussão As taxas de clivagem foram semelhantes (P > 0,05) entre os embriões dos grupos controle, T1, T2 e T3 (68,7; 62,7; 65,35; 62,88 %, respectivamente). Da mesma forma não foram observadas diferenças significativas (P > 0,05) na taxa de blastocistos (22,9; 33,01; 33,07; 28,03%, respectivamente). A suplementação do meio de cultivo com LAA nos diferentes momentos analisados não promoveu alteração na taxa de clivagem e de blastocistos produzidos in vitro. Referências bibliográficas Haggarty P, Wood M, Ferguson E, Hoad G. et al. Fatty acid metabolism in human preimplantation embryos Hum Reprod, v.21, n.3 p.766-773, 2006. Hochi S, Kimura K, Hanada A. Effect of linoleic acid-albumin in the culture medium on freezing sensitivity of in vitro-produced bovine morulae. Theriogenology, v.52, n.3, p.497-504, 1999 Palavras-chave: ácidos graxos, bovino, produção de embriões. Keywords: cattle,embryo production, fat acid.


http://www.biomedexperts.com/Abstract.bme/10734383/Effect_of_linoleic_acid-albumin_in_the_culture_medium_on_freezing_sensitivity_of_in_vitro-produced_bovine_morulae�

http://www.biomedexperts.com/Abstract.bme/10734383/Effect_of_linoleic_acid-albumin_in_the_culture_medium_on_freezing_sensitivity_of_in_vitro-produced_bovine_morulae�


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Taxas de prenhez de vacas Nelore associando acetato de melengestrol aos análogos da gonadorelina e prostaglandina

Pregnancy rate of Nelore cows associating melengestrol acetate with gonadorelin and prostaglandin analogues

J.E.J. Murta1,4, V.J. Andrade2, V.R. Vale Filho2, E.A. Murta3

1Professor da Unimontes, Montes Claros, MG; 2Professor da UFMG, Belo Horizonte, MG; 3Aluno da FEAD, Belo Horizonte, MG.

4E-mail: [email protected] Introdução Melhoria na resposta a sincronização do estro, concepção, fecundidade e taxa de prenhez no pós- parto de fêmeas bovinas foram relatados quando se utilizou Acetato de Melengestrol em comparação com uso somente de Prostaglandina. O objetivo do presente estudo foi avaliar a taxa de prenhez de vacas Nelore associando Acetato de Melengestrol aos análogos da Gonadorelina e da Prostaglandina nos protocolos de inseminação artificial a tempo fixo (IATF). Material e Métodos Oitenta e uma vacas da raça Nelore, multíparas, lactantes, idade média de 7,5±1,7 anos, escore corporal médio de 2,6±0,2 (escala de 1 a 5) e 100±20 dias pós-parto foram selecionadas de um rebanho de 300 matrizes. Os animais foram divididos aleatoriamente em dois grupos: G1, n=40, recebendo pré-tratamento com MGA (0,5 mg/dia) durante quatorze, e G2, recebendo o mesmo tratamento por apenas sete dias. A seguir foram aplicados Análogo do GnRH (100µg de Gonadorelina), via intramuscular, no dia 1 (d1); análogo da Prostaglandina (75 µg D-Cloprostenol), via mucosa da vulva, no dia sete (d7); segunda dose de análogo do GnRH (100µg de Gonadorelina), via intramuscular, no dia nove (d9), sendo as inseminações artificiais realizadas no dia nove (d9). Resultados e Discussão As taxas de prenhez (24 e 22% respectivamente no G1 e G2) não foram afetadas (P>0,05) pelos tratamentos e diferiram dos resultados apresentados por Perry et al. (2002) que registraram taxas de prenhez de 61 e 47%, respectivamente, para animais pré-tratados com adição de MGA (0,5 mg/animal/dia) no concentrado e sem adição de MGA. Também Ahola et al. (2009), estudando o uso do GnRH na IATF em vacas de corte, em dois momentos após administração da Prostaglandina (80 ou 97 horas) registraram taxas de prenhez de 70,5% (n=190), 40,5% (n=74) e 49,4 (n=89), respectivamente para inseminações realizadas após observação logo após a observação do estro, às 80 e às 97 horas após administração da Prostaglandina. Os autores concluíram que a IATF em torno das 72 horas após administração da Prostaglandina, possa apresentar resultados mais eficientes. No presente estudo, o momento das inseminações tenha, possivelmente, afetado a fertilidade dos animais, conseqüentemente reduzindo a taxa de prenhez. Referências bibliográficas Ahola JK, Seidel JR GE, Whittier JC. Use of Gonadotropin-releasing hormone at fixed-time artificial insemination at eighty or ninety-seven hours post prostaglandin f2α in beef cows administered the long-term melengestrol acetate Select Synch. Profes Anim Sci, v.25, p.256-261, 2009 Perry GA, Bader JF, Smith MF, Patterson DJ. Evaluation of a fixed-time artificial insemination for beef cows. J Anim Sci, v.80, p.1932-1938, 2002 Palavras-chave: acetato de melengestrol, gonadorelina, nelore, prostaglandina, prenhez. Keywords: gonadorelin, melengestrol acetate, pregnancy rate, prostaglandin, zebu.



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TAI protocol with FSH-P for cyclic and anestrous crossbred cows FSH-p em protocolo de IATF de vacas mestiças cíclicas e em anestro

C.A.A. Torres1, F.A. Oliveira, V.A. Nascimento, M.M.N.F. Oliveira,

M. Dias, J.M. Penitente Filho


Introduction The follicle stimulating hormone (FSH-p), when administered, stimulates follicular growth for three days continuously to the preovulatory stage (Kenny et al., 2006). The aim was to evaluate the use of the FSH-p in TAI protocols in terms of follicular dynamics and pregnancy rate in cyclic and in anestrous crossbred cows.

Material and Methods Two hundred and twenty cows were used in the experiments with a simultaneous 2x2 factorial design, consisting of cyclic (Tcyclic) and anestrous (Tanestrous) cows, and two protocols: 1) Tcontrol – day 0, insertion of intravaginal progesterone device (IPD) plus the injection of 2 mg of estradiol benzoate (EB); day 8, withdrawal of the IPD and injection of 0.150 mg of PGF2α; day 9, injection of 1 mg of EB; day 10, artificial insemination (IA) carried out between 48 and 54 hours after IPD removal; 2) TFSH – similar to the Tcontrol, but on day 8, 15 mg of FSH-p was administered. In experiment I, ultrasonography examinations were done on days 0, 8, and from the TAI to ovulation, determined for the cows of the following treatments: Tcyclic+Tcontrol (n=11 cows), Tanestrous+Tcontrol (n=11 cows), Tcyclic+TFSH (n=12 cows), Tanestrous+TFSH (n=11 cows). In experiment II, the cows pregnancy evaluation rate for treatments was similar to experiment I, differing in the number of animals: Tcyclic+Tcontrol (n=28), Tanestrous+Tcontrol (n=55), Tcyclic+TFSH (n=29), Tanestrous+TFSH (n=63). The data were analyzed by 2x2 factorial at 5 % probability.

Results and Discussion The synchronization protocols and the cyclicality of the cows did not show an effect nor interaction for follicular growth rate (1.08±0.12 mm / day), and did not affect the progesterone device removal interval to TAI and to ovulation (57.26±0.78 and 9.26±0.78 hours, respectively; P> 0.05). No interaction was found among any of the evaluated effects (treatment, cyclicality, day of observation; P> 0.05) for the diameter of the largest follicle (10.15 ±0.44 mm). Also, no interaction was found on the principal effects for ovulation and pregnancy rate and not even an effect on the protocols (P> 0.05). The ovulation and pregnancy rate were greater for the cyclic cows (91.39 % and 54.39 %), than for those in anestrous (63.64 % and 24.58 %; P <0.05). In the cows, the administration of FSH-p did not alter the follicular dynamics patterns, the ovulation and pregnancy rates, while the pregnancy rate of the cyclic cows was satisfactory independent of the FSH-p administration. References Kenny AL, Phillips NJ, D'Occhio MJ. Ovarian follicular response to repeat stimulation with FSH and oocyte recovery and quality in Brahman heifers treated with a GnRH agonist. Reprod Domest Rumin, v.64, p.456, 2006. Keywords: biotechnology, bovine, fertility, follicle, hormones. Palavras-chave: biotecnologia, bovinos, fertilidade, folículos, hormônios.



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Ativação química de ovócitos bovinos imaturos vitrificados em duas concentrações de soluções de equilíbrio

Chemical activation of bovine oocytes immature vitrified in two concentrations of equilibrium solutions

G.M. Santos1,4, J.G.V. Grázia2, E.C.M. Pereira3, F. Paludo2, L.A. Benjamin3, L.S.A. Camargo2, E.P. Costa3

1Facisa, Univiçosa, Viçosa, MG; 2Embrapa Gado de Leite, Coronel Pacheco, MG; 3Universidade Federal de Viçosa,

Viçosa, MG. 4E-mail: [email protected]

Introdução A vitrificação é um método de criopreservação que consiste no resfriamento ultra-rápido, permitindo a formação de bancos genéticos de espécies ou raças em extinção, possibilita avanços no melhoramento genético, além de possuir grande importância na reprodução assistida. Diante disso o objetivo do trabalho foi avaliar a ativação partenogenética química de ovócitos bovinos imaturos vitrificados utilizando duas soluções de equilíbrio (3% e 16%) contendo etilenoglicol (EG), e sendo vitrificados em 40% de EG associado à 1 mol L-1 sacarose. Material e Métodos O presente estudo foi realizado no Laboratório de Reprodução Animal do Departamento de Medicina Veterinária da UFV e no Laboratório de Reprodução Animal da Embrapa Gado de Leite. Os complexos cumulus-oócitos (CCOs) bovinos foram provenientes de animais abatidos em frigorífico, e todos os grupos foram maturados com meio TCM-199, desnudos com hialuronidase 0,1% após a maturação e ativados em solução de ionomicina por 4 minutos, e em seguida lavados com CR2aa e colocados em solução 6-dimetilaminopurina (DMAP) por 4 horas antes de serem cultivados em meio CR2aa recobertos com óleo mineral em estufa com 5% de CO2 e 5% de O2. No entanto os grupos tratados foram expostos a soluções de equilíbrio contendo 3% e 16% EG após a aspiração e posteriormente vitrificados, sendo descongelados e reidratados, já o grupo controle consistiu de ovócitos submetidos à maturação por 24h sem nenhum tratamento prévio. Os resultados foram expressos em porcentagem de estruturas clivadas e de blastocistos produzidos.

Resultados e Discussão Foi realizado 3 repetições com aproximadamente 150 ovócitos em cada tratamento (3%, 16% e controle). A avaliação da taxa de clivagem foi realizada 72 horas após a ativação. A taxa de produção de blastocistos foi avaliada no sétimo (D7) e oitavo (D8) dia de cultivo. Observou-se que os grupos tratados não ocorreu nenhuma clivagem e nem mesmo produção de blastocisto independentemente da concentração de EG e somente o grupo controle obteve clivagem (70,38% ) e blastocistos (25,16%). Com os resultados é possível concluir que o processo de vitrificação não se mostrou satisfatório para a criopreservação de ovócitos bovinos imaturos nas condições citadas, uma vez que a ativação química permite sugerir que os ovócitos vitrificados sofreram algum dano a nível molecular que impediu a sua clivagem, pois não houve a presença de espermatozóides e, portanto o já conhecido enrigecimento da zona pelúcida foi desconsiderado (Sripunya, 2010). Referências bibliográficas Sripunya N. A comparison of cryotop and solid surface vitrification methods for the cryopreservation of in vitro matured bovine oocytes. J Reprod Dev, v.56, p.176-81, 2010. Palavras-chave: ativação partenogenética, bovino, ovócitos, vitrificação. Keywords: bovine, oocyte, parthenogenetic activation, vitrification.



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Níveis de RNAm para o fator de crescimento semelhante à insulina (IGF) I e II, receptores de IGF (IGFR) e proteínas de ligação ao IGF (IGFBPs) em folículos

ovarianos bovinos frescos Levels of mRNA for insulin-like growth factors (IGF) I and II, IGF receptors (IGFR) and IGF binding proteins

(IGFBPs) in bovine fresh ovarian follicles

A.W.B. Silva¹, R.O.D.S. Rossi, G.L. Vasconcelos, M.J. Passos, E.L. Rebouças, C.C.F. Leitão, J.R.V, Silva

Núcleo de Biotecnologia de SobralNUBIS, Universidade Federal do Ceará, Sobral, CE.

¹E-mail: [email protected]

Introdução Evidências têm mostrado que o sistema IGF exerce importante função na oogênese e foliculogênese em animais domésticos. Em caprinos, tanto o RNAm como a proteína para IGF-I foram detectados em folículos pré-antrais, bem como em células da granulosa e da teca de folículos antrais (Silva et al., 2008). Porém, a expressão do RNAm do sistema IGF em folículos secundários e antrais iniciais na espécie bovina ainda não é conhecida. O objetivo deste estudo foi investigar a expressão relativa de IGF-I e II, os seus receptores do tipo I e tipo II, e suas seis proteínas de ligação (IGFBPs 1-6) em folículos bovinos com diâmetro de 0,2; 0,5 e 1 mm. Material e Métodos Ovários bovinos (n=10) foram coletados em abatedouros e três grupos de 10 folículos de 0,2; 0,5 e 1 mm foram isolados mecanicamente. Realizou-se a extração do RNA total e após sintetizou-se o cDNA. Quantificou-se o RNAm por qRT-PCR para IGF-I e II, IGFR tipo I e II, e IGFBPs 1-6. Os níveis de RNAm dos componentes do sistema IGF foram analisados pelo teste de Kruskal-Wallis (P <0,05). Resultados e Discussão Os níveis de RNAm para IGF-I e IGF-II não diferiu entre as classes de folículos. Os folículos de 0,5 mm apresentaram níveis elevados de RNAm para IGFR-I e IGFBP-2 em relação aos folículos de 1 mm, e para IGFR-II comparados aos de 0,2 mm. Os níveis de RNAm para IGFBP-1 foi maior em folículos de 0,2 mm do que nas outras classes foliculares. Transcritos para IGFBP-3 e IGFBP-4 são mais presentes em folículos de 1mm, a expressão de IGFBP-3 é reduzida na classe folicular de 0,2mm, enquanto que IGFBP-4 apresenta maior expressão quando comparada a classe de 0,5 mm. Os níveis de RNAm para IGFBP-5 e IGFBP-6 não diferiram entre as classes foliculares. Em conclusão, a expressão do RNAm para IGF-I e II permanece constante durante o crescimento de folículos com 0,2 até 1mm de diâmetro, mas os níveis de RNAm para os receptores de IGF e das IGFBPs apresentam variação significativa durante o crescimento folicular in vivo.

Referências bibliográficas Silva JRV, Brito IR, Leitão CCF, Silva AWB, Passos MJ, Vasconcelos GL. Protein and messenger RNA quantification of insulin-like growth factor-1 (IGF-1) in goat ovarian follicles. Acta Sci, v.36, p.466, 2008. Palavras-chave: bovino, folículos ovarianos, IGF, PCR em tempo real, RNAm. Keywords: bovine, IGF, mRNA, ovarian follicles, real time PCR.



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Influência da condição corpórea e categoria reprodutiva nas taxas de prenhez pós IATF em vacas nelore

Influence of body condition and reproductive category on pregnancy rates after TAI in Nelore cows

G.A. Toledo1, A.P.C. Ribeiro, G.M. Ribeiro, L.F. Sousa, W.S. Coelho, A.L.M. Carrera

EMVZ, UFT, Araguaína, TO. 1E-mail: [email protected]

Introdução O estado nutricional é fator determinante na obtenção de índices reprodutivos adequados, uma vez que o consumo abaixo das exigências de nutrientes consiste no principal motivo de prolongamento do anestro em fêmeas bovinas. A estimativa do estado nutricional por meio da avaliação da condição corporal (CC) é uma medida subjetiva, porém efetiva. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência da condição corporal e categoria reprodutiva sobre a taxa de gestação de fêmeas bovinas submetidas à protocolo de IATF. Material e Métodos O experimento foi realizado em propriedades do município de Araguaína-TO. Utilizou-se 665 vacas Nelore, manejadas em sistema de criação extensiva suplementada com sal mineral, sendo, 19 novilhas, 90 vacas solteiras e 556 vacas com bezerro ao pé. A CC, utilizou-se de escala de 1-9 e foi realizada antes do início do protocolo de IATF. O diagnóstico de gestação foi realizado por palpação retal, 60 dias após a IA. As variáveis categoria animal, condição corporal e taxa de prenhez foram avaliadas através do teste de qui-quadrado no programa estatístico SPSS.

RESULTADOS E DISCUSSÃO Verificou-se CC média de 5,57±0,5 para novilhas, 4,85±1,03 para vacas com cria ao pé e 5,11±0,4 para vacas solteiras, com taxa prenhez de 63,1%; 53,7% e 53,3%, respectivamente. Observou-se que não houve diferença significativa entre categoria animal para taxa de prenhez (P=0,716), porém verificou-se diferença significativa (P=0,001) entre os grupos de animais com CC 3 e 4 e com 5, 6 e 7 que apresentaram taxa de 40,7% e 59,3%, respectivamente, resultados semelhante aos obtidos por Pfeifer et al. (2007), que relataram que animais com baixo ECC apresentaram baixa taxa de concepção, comprovando a forte influência da CC nos índices reprodutivos. Não houve diferença significativa entre os ECC 5, 6 e 7 (P=0,747) indicando que a CC 5 é suficiente para submissão dos animais aos protocolos de manipulação do ciclo estral. A taxa de concepção total foi de 54%, condizente com estudos realizados por Meneghetti e Vasconcelos (2008), que verificaram taxa de 58,9% de concepção. Assim, postula-se que a CC ideal para animais submetidos a protocolos de IATF é 5, já que CCs superiores a esta apenas despendem recursos não melhorando os resultados de concepção. Referências bibliográficas Menegheti M, Vasconcelos JLM. Mês de parição, condição corporal e resposta ao protocolo de inseminação artificial em tempo fixo em vacas de corte primíparas. Arq Bras Med Vet Zootec, v.60, n.4, p.786-793, 2008. Pfeifer LFM, Varela AS, Fontoura Jr, JAS, Schineiderr A, Corrêa MN, Dionello NJL. Efeito da condição corporal avaliada no diagnóstico de gestação sobre o momento da concepção e taxa de prenhez em vacas de corte. Acta Sci Vet, v.35. p.303-307, 2007. Palavras-chave: bovino, condição corporal, inseminação, reprodução. Keywords: bovine, body condition, insemination, reproduction.



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Efeito da criopreservação de embriões bovinos PIV sobre a taxa de concepção Effect of IVP bovine embryos cryopreservation on conception rate

L.M. Mascarenhas1,3, A.P.T.B. Silva1, R.R.C. Mello1, J.E. Ferreira1, B.J.F. Silva1,

B.O. Cardoso1, S.T. Camargo Filho2, M.R.B. Mello1

1Instituto de Zootecnia, UFRRJ, Seropédica, RJ; 2PESAGRO, Seropédica, RJ.

3E-mail: [email protected] Introdução A produção in vitro de embriões (PIV) é uma importante biotécnica da reprodução associada ao aumento da produtividade. Em bovinos, a PIV tem sido utilizada como instrumento importante para exploração maximizada do potencial reprodutivo dos rebanhos, diminuindo o intervalo de gerações e acelerando o melhoramento genético animal. No entanto, a grande limitação da PIV está relacionada à criopreservação de embriões, pois estes são mais sensíveis à congelação lenta e tem as taxas de concepção significativamente menores quando comparadas com as de embriões transferidos a fresco (Dobrinsky, 2002). Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da criopreservação de embriões produzidos in vitro sobre as taxas de concepção. Material e Métodos Embriões foram produzidos in vitro a partir de oócitos aspirados de doadoras das raças Holandesa, Gir e Nelore. Todas as etapas da produção in vitro foram realizadas pela empresa In Vitro Brasil - Rio, localizada no município de Barra do Piraí - RJ. Os embriões que atingiram o estádio de blastocisto foram transferidos a fresco para receptoras sincronizadas ou criopreservados lentamente a 0,5°C/min. Foram transferidos 5204 embriões congelados e 252 embriões a fresco. O diagnóstico de gestação foi realizado com auxílio de ultrassom. As taxas de concepção foram analisadas pelo teste Qui-Quadrado com nível de significância de 5%. Resultados e Discussão As taxas de concepção foram de 42,87% e 28,66% na raça Holandesa; 44,26% e 4,35% na raça Gir; 39,00% e 10,53% na raça Nelore para as transferências realizadas com embriões FIV a fresco e congelado, respectivamente. Para todas as raças houve diferença estatística (P<0,05) entre as taxas de concepção quando comparados os embriões transferidos a fresco com os congelados. Estes resultados corroboram com os encontrados por Hasler et al (1995) que observaram diferença estatística nas taxas de concepção após a transferência de embriões FIV congelados e transferidos a fresco em vacas de corte. Portanto, conclui-se que a criopreservação de embriões PIV reduz consideravelmente as taxas de concepção, devendo sempre que possível, transferi-los a fresco.

Referências bibliográficas Dobrinsky JR. Advancements in cryopreservation of domestic animal embryos. Theriogenology, v.57, p.285-302, 2002. Hasler JF, Henderson WB, Hurtgen PJ, Jin ZQ, McCauley AD, Mower SA, Neely B, Shuey LS, Stokes JE, Trimmer SA. Production, freezing and transfer of bovine IVF embryos and subsequent calving results. Theriogenology, v.43, p.141-152, 1995. Palavras-chave: congelação, embrião, FIV, prenhez. Keywords: embryo, freezing, IVF, pregnancy.



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Efeito da insulina na expressão do gene GDF9 em oócitos bovinos maturados em meio Alpha-MEM livre de soro

Effect of insulin on expression of the GDF9 gene in bovine oocytes matured in Alpha-MEM serum-free medium

G.B. Mota1,3, I. Oliveira e Silva1, F.T.R. Lima1, M.M. Pereira2, C.S. Nobre1, W.G. Silva1, L.S.A. Camargo2, A.A.M. Rosa e Silva1

1Universidade de Brasília, IB/CSF, Brasília, DF; 2Embrapa Gado de Leite, Juiz de Fora, MG.


Introdução Os efeitos da insulina na maturação in vitro (MIV) de oócitos bovinos ainda não estão bem compreendidos. A suplementação dos meios de MIV com soro pode impedir que o real efeito de hormônios ou fatores de crescimento, seja determinado em oócitos maturados in vitro. GDF9 (Growth differentiation factor 9) é um fator de crescimento secretado pelo oócito com ação parácrina sobre as células foliculares (Gilchrist e Thompson, 2007). O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito de diferentes doses de insulina em meio quimicamente definido na quantidade relativa de transcritos de GDF9 em oócitos bovinos maturados in vitro. Material e Métodos Complexos cumulus-oócito (CCOs) aspirados de folículos (3-8mm) de ovários bovinos coletados em abatedouro, foram selecionados morfologicamente e distribuídos em quatro tratamentos de MIV: T1-Alpha-MEM+0ng/mL de insulina;T2-Alpha-MEM+1ng/mL de insulina;T3-Alpha-MEM+10ng/mL de insulina;T4-Alpha-MEM+100ng/mL de insulina. O meio Alpha-MEM foi suplementado por PVA, aminoácidos, FSH e antioxidantes. A MIV procedeu-se em estufa por 24h, a 38,5 ºC, 5% de CO2 e umidade saturada. Ao término da MIV, três pools de 10 oócitos de cada tratamento tiveram as células do cumulus removidas e então congelados em nitrogênio líquido. A extração de RNA, transcrição reversa e PCR em tempo real foram feitas em triplicata e adaptadas de Pereira et al. (2010). Para quantificação relativa utilizou-se o programa REST®/modelo estatístico Pair Wise Fixed Reallocation Randomisation TEST®. Utilizou-se o gene β-Actina como referência endógena e o tratamento T1 como calibrador. Resultados e Discussão Observou-se maior (p<0,05) abundância relativa de transcritos de GDF9 em oócitos de CCOs maturados no tratamento T1 comparado ao T2, T3 e T4. Gilchrist e Thompson (2007) verificaram que a proteína GDF9, secretada pelo oócito, pode regular funções das células do cumulus, as quais podem melhorar a competência dos oócitos in vitro. Provavelmente, a maior expressão de GDF9 pelo oócito em meio definido sem insulina, seja uma resposta do oócito para estimular a atividade das células do cumulus. Dessa forma, a ausência de insulina na MIV de CCOs bovinos em meio definido, aumenta a expressão do gene GDF9 em oócitos. Referências bibliográficas Pereira MM, Machado MA, Costa FQ. Effect of oxygen tension and serum during IVM on developmental competence of bovine oocytes. Reprod Fertil Dev, v.22, p.1074-1082, 2010. Gilchrist R, Thompson J. Oocyte maturation: emerging concepts and technologies to improve developmental potential in vitro. Theriogenology, v.67, p.6-15, 2007. Palavras-chave: insulina, oócito, maturação. Keywords: insulin, oocyte, maturation.



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Efeito da adição da citocina GM-CSF em meio de cultivo in vitro de embriões bovinos Effect of the addition of cytokine GM-CSF in bovine embryos culture medium

C.S. Nobre1, G.B. Mota, I. Oliveira e Silva, F.T.R. Lima, A.A.M. Rosa e Silva

Universidade de Brasília, Laboratório de Biotecnologia da Reprodução, IB/CFS, Brasília, DF.


Introdução A suplementação dos meios de cultivo in vitro (CIV) com a citocina GM-CSF (Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor) tem sido associada à melhora nas taxas de produção e qualidade de blastocistos (Loureiro et al 2009). O objetivo do presente estudo foi verificar se a adição de GM-CSF em meio CR2aa, após 48 horas de CIV, é capaz de aumentar a produção in vitro de embriões bovinos. Material e Métodos Complexos cumulus-oócito (CCOs) aspirados de folículos (3-8mm) de ovários bovinos coletados em abatedouro local foram selecionados morfologicamente e submetidos a maturação in vitro (MIV) em meio TCM199+10% de soro fetal bovino (SFB)+FSH. Os procedimentos de fecundação in vitro (FIV-D0) e CIV em meio CR2aa+SFB foram adaptados de Mota et al. (2010). As etapas de MIV, FIV e CIV foram realizadas em estufa incubadora a 38,5ºC, 5% de CO2 e umidade saturada. No momento da avaliação da clivagem, após 48 horas do início do cultivo, os possíveis zigotos foram divididos em dois grupos: G1(n=167)-50% do meio de CIV renovado por CR2aa+SFB+40ng/ml de GM-CSF e G2(n=149)-50% do meio de CIV renovado por CR2aa+SFB+0ng/ml de GM-CSF. No D8 foram avaliadas as taxas de blastocisto e blastocisto eclodido. Os resultados foram submetidos ao teste de Qui-quadrado (p<0,05). Resultados e Discussão As taxas de clivagem (G1=67,6% e G2=73,1%) blastocisto (G1=35,9% e G2=34,8%) e blastocisto eclodido (G1=21,6% e G2=21,1%) foram semelhantes (p>0,05) entre os grupos. Loureiro et al (2009) verificaram que a citocina GM-CSF foi capaz de aumentar a produção in vitro de blastocistos, porém em meio semi-definido (livre de soro). Os resultados sugerem que o soro por si só, apresenta concentrações suficientes de suplementos tornando dispensável a adição de GM-CSF na dose utilizada, após 48 horas do início do CIV. Referências bibliográficas Loureiro B, Bonila L, Block J. Colony-Stimulating Factor 2 (CSF-2) improves development and posttransfer survival of bovine embryos produced in vitro. Endocrinology, v.150, p.5046-54, 2009. Mota GB, Batista RITP, Serrapião RV. Developmental competence and expression of the MATER and ZAR1 gene in immature bovine oocytes selected by Brilliant Cresyl Blue. Zygote, v.8, p.209-16, 2010. Palavras chave: bovino, citocina, embrião. Keywords: bovine, cytokine, embryo.



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Influência da vacinação contra febre aftosa no momento da inseminação na taxa de prenhez de vacas nelore no município de Sapucaia, Nordeste Paraense

Influence of vaccination at the insemination on pregnancy rate of cows in the district ofNellore Sapucaia, Northeast of Pará

E.Y.E. Mesquita, H.F.L. Ribeiro, S.T. Rolim Filho, H.G.S. Favacho, A.C. Oliveira Neta,

S.M.K.C. Sousa, P.N. Magalhães

Universidade Federal Rural da Amazônia (UFRA), Setor de Reprodução Animal (SRA), Belém, PA. Email: [email protected]

Introdução A febre aftosa é uma doença vesicular de caráter agudo e altamente contagioso que afeta bovinos, suínos, ovinos e outros animais domésticos e selvagens biungulados (House & House, 1999). Com a vacinação massiva aparecerem problemas de reação pós-vacinal, quer reações locais, quer de aborto, quer de óbitos em quantidade significativa (Veran, 2000). No Estado do Pará, a vacinação contra febre aftosa acontece nos meses de maio e novembro, coincidindo esse ultimo mês com a estação de monta de muitas propriedades no estado. Esse trabalho teve objetivo verificar a interferência na taxa de prenhez da vacinação no momento da inseminação. Material e Métodos Foram utilizadas 2560 fêmeas de diferentes categorias com dias pós-parto entre 38 e 102 e ECC variando de 2,0 a 3,5 (escala de 1 a 5). Desse total, 527 foram vacinadas contra febre aftosa no dia da inseminação e 1170 não foram vacinadas. O protocolo utilizado foi comercial à base de progestágenos, estrógenos e prostaglandina. Os dados foram analisados em planilha eletrônica através do Programa Estatístico SAS (2000) utilizando o método de ( χ ) Qui-quadrado com nível de significância de 5%. Resultados e Discussão As taxa de prenhez dentre primíparas e multíparas vacinadas e não vacinadas foi de 54,57% (1397/2560). 562 fêmeas foram vacinadas no dia da inseminação, destas 227 (40,39%) ficaram prenhas. Por outro lado, 1.998 animais não sofreram com estresses do manejo da vacinação contra febre aftosa no dia da inseminação, e assim observamos que 1.170 (58,56%) ficaram prenhas. Houve diferença altamente significativa (P<0,0001) nas taxas de prenhez dos animais que foram vacinados contra febre aftosa no dia da IATF. A taxa de prenhez nas fêmeas vacinadas e inseminadas foi similar aos resultados de Machado et al (2008), realizando IATF com o protocolo ovsynch e ovsynch associado ao hCG, obtiveram taxas de prenhez de 34,5% e 36,4% respectivamente, e atribuíram as várias situações adicionais de estresse como causa do baixo desempenho reprodutivo das vacas do seu experimento. Para Jones 1983, a perda embrionária ou fetal após reação anafilática vacinal, ocorre em função dos produtos anafilático, como histamina e prostagladina provocarem contratilidade da musculatura uterina. Pimentel (1983) afirma que qualquer alteração na rotina dos animais como mudanças na temperatura, alimentação ou dor, provoca um desequilíbrio no organismo alterando as taxas de concepção. Referências bibliográficas Machado R, Bergamaschi MACM, Barbosa RT, Madureira EH, Alencar MM, Binelli M. Taxas de serviço, concepção e prenhez de vacas nelore tratadas com gonadotrofina coriônica humana e 17β-estradiol após a inseminação artificial em tempo fixo. Braz J Vet Res Anim Sci, v.45, n.3, p.221-230, 2008. House JA, House CA. Vesicular diseases. In: Straw BE, d’Allaire S, Mengeling WL et al. Disease of swine. Ames, IA: Iowa State University Press, 1999. p.327-340. Jones L Me, Booth N H, McDonald L E. Farmacologia e Terapeutica Veterinária 4.ed. Rio de Janeiro, RJ: Guanabara Koogan, 1983. Pimentel CA. Repetição de serviço - “Repeat breeding”. In: Simpósio Nacional de Reprodução Animal, 5, 1983, Belo Horizonte. Anais... 1983. v.5, p.17-36. Palavras-chave: aftosa, IATF, reprodução, vacas. Keywords: cows, FMD, FTAI, reproduction.



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Influência dos meses do ano na produção in vitro de embriões Gir Leiteiro (Bos indicus) no Rio de Janeiro

Influence of months of year in Gir (Bos indicus) in vitro embryo production in Rio de Janeiro

A.P. Dourado, R.A. Torres Filho, L.D.P. Sinedino, B.T. Gerhardt, C.S. Cochito1, L.A.G. Nogueira

Universidade Federal Fluminense, Niterói, RJ.

1E-mail: [email protected] Introdução A produção in vitro de embriões (PIVE) de doadoras Gir Leiteiro vem aumentando consideravelmente devido à expressiva ascensão da raça no mercado brasileiro e em países tropicais. Foi demonstrado que o estresse calórico afeta negativamente a PIVE de fêmeas leiteiras taurinas. Porém, são escassos dados relativos ao estresse térmico na produção de embriões de animais zebu, sobretudo na raça Gir. Portanto, o objetivo deste estudo foi verificar a possível influência dos meses do ano sobre a quantidade de oócitos e embriões produzidos. Material e Métodos Foram coletados dados de 410 sessões de OPU realizadas de abril de 2008 a março de 2009, agrupados de acordo com os meses do ano. A metodologia e equipe envolvidas na OPU-PIVE foram as mesmas durante o período estudado. As doadoras eram da raça Gir Leiteiro (Bos indicus) procedentes de rebanhos de elite, com assistência técnica regular, localizados no estado do Rio de Janeiro. Analisou-se o número de oócitos totais recuperados, oócitos viáveis, embriões produzidos e taxa de embriões produzidos (% embriões/oócitos viáveis). Os dados foram analisados pelo programa SAS. Resultados e Discussão De 6633 oócitos totais, 5546 (83,61% viáveis) foram maturados in vitro, resultando em 1596 embriões (28,78%). O percentual de embriões produzidos foi maior (p<0.05) nos meses que apresentaram menor número de oócitos viáveis, demonstrando relação inversamente proporcional entre oócitos viáveis e embriões produzidos. Apesar de no período de seca (abril a setembro) o número médio de oócitos viáveis ter sido menor, possivelmente em função da qualidade da pastagem, não houve diferença estatística (p>0.05) para oócitos viáveis ao longo do ano. Diferente do encontrado por Torres-Júnior et al. (2008) onde a exposição de doadoras Gir ao estresse térmico a longo prazo causou efeito negativo na competência oocitária. Conclui-se, portanto, que doadoras da raça Gir Leiteiro têm condição de produzir embriões viáveis o ano todo no estado do Rio de Janeiro.

Gráfico 1 - Número de oócitos viáveis/OPU. Gráfico 2. % de embriões em 2008 e 2009 produzidos/mês em 2008 e 2009.

Referências Bibliográficas Torres-Júnior JRS, Pires MFA, Sá WF, Ferreira AM, Viana JHM, Camargo LSA, Ramos AA et al. Effect of maternal heat-stress on follicular growth and oocyte competence in Bos indicus cattle, Theriogenology, v.69, p.155-166, 2008. Palavras-chave: bovinos, competência oocitária, estresse térmico, OPU-PIV. Keywords: bovine, heat stress, oocyte competence, OPU-IVP.

05

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ABR MAI JUN JUL AGO SET OUT NOV DEZ JAN FEV MAR

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ABR MAI JUN JUL AGOSET OUTNOVDEZ JAN FEVMAR



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Produção in vitro de embriões bovinos em meio de maturação suplementado com vitamina E

In vitro production of bovine embryos in maturation medium supplemented with vitamin E

P.H.D. Gomes1, L.K. Hatamoto-Zervoudakis, T.T. Maciel, C.P. Curtivo, P.P. Tsuneda, M.F. Duarte-Júnior, L.M. Thiesen, F.M. Wingert, A.C.S. Souza

Universidade Federal de Mato Grosso e Multiplic Embriões, MT.

1E-mail: [email protected] Introdução Na produção de embriões em laboratório, um fator limitante é a presença de radicais livres. Eles são substâncias sintetizadas pelo próprio metabolismo celular e que apresentam numero ímpar de elétrons, sendo altamente energéticos e instáveis. Provocam um efeito deletério no desenvolvimento embrionário por desestabilizarem as membranas celulares alterando a sua permeabilidade e funcionalidade. A vitamina E, é um antioxidante estrutural da membrana, que protege os ácidos graxos poli-insaturados contra peroxidação. Com este trabalho objetivou-se avaliar se a suplementação do meio de maturação com a vitamina E influenciaria a produção e estágio de desenvolvimento embrionário no dia 7 de cultivo e o nível de estresse oxidativo de embriões bovinos produzidos in vitro. Material e Métodos Foram utilizados 105 ovários de vacas da raça nelore mestiças abatidas em frigorífico. Os folículos com diâmetro entre 2 e 8 mm foram aspirados. Dos oóctos recuperados 360 foram classificados como grau I, II e III e submetidos ao processo de PIV. Primeiramente foram divididos em dois grupos: Grupo controle e o grupo suplementado com 2 Mol de vitamina E no Meio de Maturação. A maturação in vitro foi feita em incubadora a 39°C, 5% de CO2, durante 24 horas. Em seguida foram fertilizados e mantidos em cultivo durante 7 dias em mesma atmosfera (a 39°C, 5% de CO2). Nos dias 3 e 7 após a Fecundação in vitro foi avaliada, a clivagem dos embriões e a quantidade de embriões viáveis e degenerados, respectivamente. Foram coletadas amostras do meio de maturação, meio de fecundação e meio de cultivo para determinação do estresse oxidativo através da quantificação de TBARS. Os dados foram analisados através da ANAVA com nível de significância de 10%. Resultados e Discussão Não foi observado efeito significativo (p>0,10) da suplementação com vitamina E sobre as variáveis avaliadas. Com base nos resultados conclui-se que a suplementação dos meios de maturação nos níveis utilizados não interferiram a produção e o estágio de desenvolvimento embrionário e o estresse oxidativo de embriões bovinos produzidos in vitro. Referências bibliográficas Sudano MJ, Mattos MCC, Fernandes CB, Mazieiro RR, Landim-Alvarenga FC. In vitro production of bovine embryos using Sigma antioxidant supplement®, α-tocopherol and L-ascorbic acid. Anim Reprod, v.7, n.1, p.42-48, 2010. Palavras-chave: antioxidante, embrião, TBARS. Keywords: antioxidant, embryo, TBARS.


http://www.cbra.org.br/pages/publicacoes/animalreproduction/issues/download/v7n1/pag42.pdf�


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Determinação da estabilidade de genes de referência em folículos ovarianos bovinos Determination of stability of genes in reference bovine ovarian follicles

R.P. Ribeiro¹, E.L. Rebouças, M.J. Passos, A.M.L.R. Portela,

J.J.N. Costa, C.C.F. Leitão, J.R.V. Silva

Núcleo de Biotecnologia de Sobral (NUBIS), Universidade Federal do Ceará, Sobral, CE.

¹E-mail: [email protected]

Introdução O isolamento e cultivo in vitro de folículos secundários ~0,2 mm visa à obtenção de oócitos maduros aptos à fertilização in vitro. Assim, é importante conhecer o perfil de expressão gênica, os genes de referência ideais para a normalização dos dados da PCR em tempo real (qRT-PCR) como controles internos. Os genes de referência comumente utilizados são gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (GAPDH), β-tubulina, β-actina, fosfoglicerato quinase (PGK), RNA ribossômico 18S (RNAr 18S), ubiquitina (UBQ) e proteína ribossomal 19 (RPL-19). No entanto, não existem dados sobre a estabilidade de genes de referência em folículos ovarianos bovinos durante o crescimento de folículos secundários até folículos antrais iniciais. O objetivo do estudo foi investigar a estabilidade de sete genes de referência em folículos bovinos frescos de 0,2, 0,5 e 1 mm de diâmetro. Material e Métodos Ovários bovinos (n=10) foram coletados em abatedouros locais e, no laboratório três grupos de 10 folículos de 0,2, 0,5 e 1 mm foram isolados mecanicamente. Em seguida, o RNA total das amostras foi extraído com o reagente Trizol®. Após a obtenção do cDNA, realizou-se a quantificação de RNAm por (qRT-PCR) com SYBRGreen. O programa geNorm foi usado para avaliar a estabilidade do GAPDH, β-tubulina, β-actina, PGK, RNAr 18S, UBQ e RPL-19, este programa calcula valor M, que é a variação média de pares de genes em comparação com todos os outros genes testados. Resultados e Discussão Em folículos ovarianos de 0,2, 0,5 e 1 mm, GAPDH e UBQ foram os genes de referência mais estáveis, sendo os mais adequados para serem utilizados para normalizar os dados entre as categorias foliculares testadas. O gene RNAr 18S foi o menos estável. Estudos anteriores demonstraram que UBQ, β-actina e GAPDH foram os três genes de referência mais estáveis em oócitos bovinos, enquanto que UBQ e PGK foram os genes mais estáveis em células do cumulus antes e após o cultivo (Van Tol et al., 2007). Estes dados demonstram a importância da escolha dos genes de referência mais estáveis em determinada condição experimental. Além disso, Garcia-Vallejo et al. (2004) afirmam que nenhum gene de referência pode ser considerado adequado para todas as condições experimentais. Em conclusão, GAPDH e UBQ são os genes mais estáveis em folículos bovinos de 0,2, 0,5 e 1 mm e podem ser utilizados para normalizar a quantificação da expressão gênica nestas categorias foliculares. Referências bibliográficas García-Vallejo JJ, Van Het HOF B, Robben J, Van Wijk JA, Van Die I, Joziasse DH, Van Dijk W. Approach for defining endogenous reference genes in gene expression experiments. Anal Biochem, v.329, n.2, p.293-299, 2004. Van Tol Ht, Van Eerdenburg FJ, Colenbrander B, Roelen BA. Enhancement of bovine oocyte maturation by leptin is accompanied by an upregulation in mRNA expression of leptin receptor isoforms in cumulus cells. Mol Reprod, v.75, p.578-587, 2007. Palavras-chave: bovino, folículos, genes de referência, ovário. Keywords: bovine, follicles, housekeeping, ovary.


http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Garc%C3%ADa-Vallejo%20JJ%22%5BAuthor%5D�

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Van%20Het%20Hof%20B%22%5BAuthor%5D�

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Robben%20J%22%5BAuthor%5D�

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Van%20Wijk%20JA%22%5BAuthor%5D�

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Van%20Die%20I%22%5BAuthor%5D�

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Joziasse%20DH%22%5BAuthor%5D�

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Van%20Dijk%20W%22%5BAuthor%5D�


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Transferência de embriões sexados e congelados de fêmeas Nelore e sua eficiência reprodutiva em novilhas cruzadas

Sexed and frozen embryo transfer from Nelore cows and this reproductive efficiency on crossbred heifers

A.J. Del Rei1,6, C.C. Bartolomeu2, C.T.G. Alvares3; P.C. Ferraz4 J.A Silveira Jr5

1DTRA, UESB, Vitória da Conquista, BA; 2DMV, UFRPE, Recife, PE; 3DCAA, UESC, Ilhéus, BA; 4ADAB, Salvador, BA; 5IFBaiano, Salvador, BA.

6E-mail: [email protected] Introdução A utilização de embriões sexados permite aumentar a eficiência produtiva e econômica dos programas de (TE). Objetivou avaliar as taxas de aproveitamento e prenhez em novilhas receptoras de embriões mestiças (red angus/nelore) com corpo lúteo (CL), submetidas a dupla dose de PGF2alfa com observação de estro, em um programa comercial de(TE) utilizando embriões sexados e congelados de fêmeas Nelore em uma propriedade particular localizada na região sudoeste do estado da Bahia. Material e Métodos Foram utilizados 62 embriões adquiridos de uma empresa comercial com Reg.no MARA, divididos em dois tratamentos: T1(embriões sexados e congelados) e T2 (embriões não sexado e congelados),45 embriões (T1) e adicionalmente 22 embriões (T2) para transferência direta,todos os embriões de 7dias .Das 130 receptoras novilhas cruzas F1 (Red Angus x Nelore) com idade entre 14 e 24 meses , pelo menos com 350 Kg de PV, submetidas a avaliação clinica 40 dias da (TE) .Foram selecionadas para SC em função da CC (> 2,25 e< 4,0) utilizando escala de 1 a 5 (1=magra e 5=gorda),fêmeas cíclicas e aptas ao exame ginecológico, que receberam dupla aplicação de PGF2alfa (530mcg de Cloprostenol sódico), por via IM com 11 dias de intervalo.Observaçâo do estro teve inicio 24h após a segunda dose por 72h diuturnamente, e aceitas para TE fêmeas com assincronia de+12h a-12h.Os embriões descongelados e transferidos por via não-cirurgica utilizando inovulador\bainha azul (IMV). Aos 50 dias foram realizadas palpação retal para o diagnóstico de gestação,sendo a taxa de aproveitamento e prenhez, foram analisadas pelo (SPSS),para os métodos descritivos(X +- EP) foi utilizado o teste de Mann-Whitney na comparação de idades e CC entre receptoras selecionadas e descartadas para a SC e TE.O teste do Qui-Quadrado foi usado para comparação das taxas de prenhez em função dos embriões , com nível de significância de (P<0,05). Resultados e Discussão Das 130 novilhas receptoras, 71,5%com idade e CC media respectivamente de 17,63+-0,47 meses e de 2,73+-0,02, foram selecionadas.Previamente á TE, foi efetuado um exame ginecológico,na seleção das receptoras,sendo descartadas 5,5%.Entre idade e CC das receptoras para TE e descartadas 17,56+-0,55meses e 2,77+-0,06 vs 16,98+-0,68meses e 2,77+-0,08 (P >0,05).Das 67 TE,utilizando 45 embriões(T1) e 22 (T2) ambos da raça Nelore. Foram descartadas 28,5% das receptoras A taxa de detecção de cio 78,5% foi de boa eficácia.Resultados a campo com embriões sexados e congelados Lacaze et al.(2007) registraram uma taxa de gestação 51,7% e 66% respectivamente.O resultado deste trabalho registrou uma taxa de gestação total de 58,2%(39\67);no tratamento(T1), foi de 55,5%(25\45)para os sexados e de 63,6%(14\22)não sexado(T2) não diferindo entre tratamentos(P>0,05), o que revelou eficiência.Os resultados demonstram viabilidade e segurança na utilização de embriões sexados e congelados.



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Taxa de prenhez em vacas Nelore de acordo com o mês do parto na estação de IATF no estado do Pará

Pregnancy rates in Nelore cows according to month of calving season on FTAI in Pará

S.T. Rolim Filho1, E.Y.E. Mesquita, H.F.L. Ribeiro, H.G.S. Favacho, A.C. Oliveira Neta, S.M.K.C. Sousa, R.S. Albuquerque, P.H.L. Bertolo

Universidade Federal Rural da Amazônia (UFRA), Setor de Reprodução Animal (SRA), Belém, PA.

1Email: [email protected] Introdução O rebanho efetivo paraense atual é de 16.856.561 de cabeças de gado (IBGE, 2009). A inseminação artificial (IA) é uma biotécnica comprovadamente utilizada como difusora de material genético superior, além de proporcionar um melhor controle produtivo aos rebanhos (Gregory e Rocha, 2004). Um bom período de serviço é indispensável para o retorno a ciclicidade a tempo na estação subsequente e aliado a nutrição, aumentam a eficiência reprodutiva das fêmeas inseminadas. O objetivo desse trabalho é correlacionar o mês de parição com a taxa de prenhez de vacas Nelore no estado do Pará. Material e métodos Foram utilizadas 2561 fêmeas da raça nelore, no município de Sapucaia, sudeste paraense. Do total, 930 primíparas com bezerro ao pé entre 39 e 61 dias pós-parto e 1631 multíparas com bezerro ao pé entre 38 e 102 dias pós parto e escore de condição corporal variando de 2 a 3,5 (escala de 1 a 5). No dia zero (D0) realizou-se a introdução do dispositivo intravaginal à base de progesterona, sendo que esse era de 1º, 2º ou 3º uso, distribuídos aleatoriamente entre os animais. Em seguida era realizada aplicação de 2ml de Benzoato de estradiol via IM. No dia sete (D7) aplicou-se 2.5ml de Dinoprost Trometamina por via IM, no dia nove (D9) realizou-se a remoção do dispositivo intravaginal seguido de uma aplicação de 0.25 ml de Cipionato de Estradiol. Ainda no D9 em alguns lotes era realizada a separação dos bezerros das mães, por 48 horas. Em outros lotes, no D9 aplicou-se 2,5 ml de PMSG sem a necessidade da retirada dos bezerros. Os animais são inseminados no período de outubro a janeiro, respeitando a estação de parição dos animais, bem como o puerpério fisiológico para a formação dos lotes (a partir de 35 dias). O diagnostico de gestação foi realizado após 30 dias de IATF através de ultrassonografia. Os dados foram analisados em planilha eletrônica através do Programa Estatístico SAS (2000) utilizando o método de ( χ ) Qui-quadrado com nível de significância de 5%, correlacionando o mês de parição e taxa de prenhez na estação subsequente. Resultados e discussão Das 2561 fêmeas inseminadas, 1398 (54,59%) ficaram prenhas, sendo 507 primíparas e 891 multíparas, não havendo diferença entra as categorias. As analises estatísticas comprovaram a influência do mês do parto na taxa de prenhez, tanto nas primíparas quanto nas multíparas. Fêmeas que pariram no mês de agosto, apresentaram maior taxa de parição em comparação aos outros meses sendo de 59,22% primíparas e 62,78 % de multíparas. Quanto a inseminação, fêmeas inseminadas no mês de outubro e novembro obtiveram maior taxa de prenhez, o que representa que o mês de parição está intimamente relacionado com o retorno a reprodução e prenhez e fertilidade das fêmeas. A região sudeste do Pará apresenta índices pluviométricos mais baixos nos meses de setembro, outubro e novembro, refletindo diretamente na qualidade e quantidade de forragens, além das mais altas temperaturas, provocando desconforto térmico que interfere na fisiologia reprodutiva das fêmeas, principalmente primíparas. Meneghetti e Vasconcelos (2008) comprovaram que vacas primíparas que passam por menor período de restrição alimentar pós-parto, apesar de terem menor numero de dias, apresentam maior ECC e melhor resposta ao protocolo de sincronização, ovulação e consequentemente, maior taxa de concepção da IATF no início da estação de monta. Referências bibliográficas Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística (IBGE), 2010 Gregory RM, Rocha DC. Protocolos de sincronização e indução de estros em vacas de corte no Rio Grande do Sul. 1º Simpósio Internacional de Reprodução Animal Aplicada, Londrina-PR. Anais... 2004. p.147-154. Meneghetti M, Vasconcelos JLM. Mês de parição, condição corporal e resposta ao protocolo de IATF em vacas de corte primíparas. Arq Bras Med Vet Zootec, v.60, n.4, p.786-793, 2008. Palavras-chave: bovinos, IATF, prenhez, reprodução. Keywords: FTAI, bovine, pregnancy, reproduction.



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Taxa de prenhez em vacas Nelore, exploradas no sul do estado do Piauí, submetidas a diferentes TSEO seguidos por IATF

Pregnancy rate on Nellore cows, exploited southern state Piaui, submitted TSEO different followed by IATF

A.C.S. Oliveira, W.M.F. Rêgo, M.S. Sousa, M.L. Silva-Filho, J.F.S. Cardoso, N.R.O. Paula1

UFPI, Campus de Bom Jesus Teresina, PI.

1E-mail: [email protected] Introdução Os Tratamentos de Sincronização do Estro e Ovulação (TSEO) atuam como ferramentas para elevar os índices reprodutivos. Neste sentido, este trabalho teve por objetivo, comparar a taxa de prenhez aos 30 dias utilizando três protocolos de sincronização do estro e da ovulação seguidos de IATF em bovinos de corte explorados extensivamente no sul do Estado Piauí. Material e Métodos Foram utilizadas 25 vacas nelores divididas: Grupo I composto de 15 animais, recebeu tratamento de 2mg de Benzoato de estradiol (RIC - BE®) e um implante auricular de P4 (Creastar®) no dia zero, seguido de sua retirada no dia 08 associada à aplicação de 1 mg de cipionato de estradiol (ECP®) + 12,5 mg de PGF2α (Prolyse®) + 300 UI de eCG (Novormon®) e no dia 10 foi realizada a IATF; o grupo II composto de 10 animais, recebeu como tratamento 2 mg de BE (Gonadiol®) + Implante intravaginal de P4 (CIDR®) no dia zero (0), dia 08 foi feita a retirada do implante associada a aplicação de 1 mg de cipionato de estradiol (ECP®) + 300 UI de eCG + 12,5 mg de PGF2α (Lutalyse®), em seguida no dia 09 foi realizada a primeira inseminação, 24 h após a retirada do implante e 48 horas após a primeira IA realizou-se a segunda IA. Foi utilizado sêmen congelado oriundo de central de IA (ABS Pecplan ®). O diagnóstico de gestação realizado por ultrassonografia aos 30 dias após a última inseminação. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA). Resultados e Discussão Os índices de prenhez entre 30% e 54% na IATF em bovinos, foram reportados por Baruselli et al. (2004) e Dias et al. (2005), os quais podem ser considerados como semelhantes aos obtidos no presente trabalho, que foram: para o G I (46,7%) e G II (30%). Portanto, os dois protocolos de sincronização do estro e da ovulação, seguidos de IATF em bovinos de corte, são eficientes como biotecnologias reprodutivas, e conseqüentemente poderão ser indicados aos produtores de gado de corte do sul do Piauí. Referências bibliográficas Baruselli PS et al. The use of hormonal treatments to improve reproductive performance of anestrous beef cattle in tropical climates. Anim Reprood Sci, v.82/83, p.479-486, 2004. Dias CC et al. Efeito da adição de eCG e/ou remoção de bezerro ao protocolo CRESTAR em parâmetros reprodutivos de vacas Nelore paridas. In: Congresso Brasileiro de Reprodução Animal, 16., 2005, Goiana. Anais… Belo Horizonte: Colégio Brasileiro de Reprodução Animal, 2005. p.100. Palavras-chave: IATF, Nelore, taxa de fertilidade, TSEO. Keywords: fertility rate, IATF, Nelore, TSEO.



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Resposta ovariana, produção e qualidade de embriões Gir e Girolano após suplementação exógena de P4 exógena na primeira onda folicular

P4 supplementation on the first follicular wave: ovarian response, production and quality of Gir and Girolando embryos

K.J.G. Santos, M.A.O. Viu, B.D. Oliveira Filho1, M.L. Gambarini

Universidade Estadual de Goiás; Universidade Federal de Goiás, Goiânia, GO.

1E-mail: [email protected] Introdução O objetivo do estudo foi avaliar a resposta ovariana em novilhas Gir e Girolando na primeira onda de crescimento folicular tratadas com e sem progesterona exógena (P4) em relação às características de número de folículos no dia da Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF), taxa de ovulação, estruturas recuperadas, qualidade embrionária, estruturas transferíveis, congeláveis, não fecundadas e embriões degenerados. Material e Métodos Vinte novilhas Gir e 20 Girolando foram tratadas com dispositivos intravaginais de P4 e aplicação de benzoato de estradiol. No D9 retirou-se os dispositivos e no D10 todas receberam 12,5mg de LH. As novilhas foram divididas em quatro grupos e a superestimulação ovariana com FSH foi feita por quatro dias, sendo T1 e T2 sem e T3 e T4 com novo dispositivo intravaginal sendo inserido no primeiro dia de FSH. No quarto dia os animais receberam 500 mg de PGF2α e os dispositivos foram retirados. No D16 todas receberam 25 mg de LH e foram inseminadas, colhendo-se os embriões após 6,5 dias. As variáveis de resposta ovariana foram avaliadas por ultrassonografia, e a resposta embrionária após a colheita dos mesmos. Resultados e Discussão O número de folículos, taxa de recuperação, estruturas colhidas, qualidade do embrião Graus 1, 2 e 3, estruturas transferíveis e congeláveis diferiram para T3 e T4 (P<0,05). Para T1 e T2 não houve diferenças entre taxa de ovulação, de recuperação, estruturas colhidas, qualidade de embriões Graus 1 e 2, estruturas transferíveis e congeláveis, estruturas não fecundadas e embriões degenerados. Os resultados das fêmeas tratadas com P4 deve-se à maior sensibilidade dos folículos emergentes ao FSH. O recrutamento folicular não depende somente do FSH, pois a progesterona determina pulsatilidade de LH de baixa freqüência e grande amplitude. Verificou-se melhor resposta da raça Gir ao tratamento com LH associado a P4. Menores taxas de ovulação em novilhas Bos Indicus X Bos taurus podem estar associadas à presença de folículos de menor diâmetro no momento da retirada do implante de P4. O maior número de estruturas recuperadas das novilhas Gir isto pode ter ocorrido pela influencia genética taurina nas novilhas Girolando, apresentando qualidade inferior das células embrionárias em desenvolvimento. Palavras-chave: novilhas, produção de embriões, progesterona, resposta ovariana. Keywords: embryo production, heifers, ovarian response, progestagen.



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Estudo da eficiência reprodutiva de vacas mestiças sindi/pitangueira e da raça pitangueira no estado do Pará

Study on reproductive efficiency of cows crossbred Sindi/Pintagueira and race Pintagueira in the state Pará

P.M.A. Melo, L.C. Lechinoski, A.C. Farias, S.T. Rolim Filho, H.F.L. Ribeiro

Setor de Reprodução Animal, SRA, UFRA, Belém, PA E-mail: [email protected]

Introdução Vários fatores interferem na baixa produção de leite no Brasil, sendo a eficiência reprodutiva um dos mais importantes segmentos para o bom desempenho da atividade pecuária leiteira, a qual pode, teoricamente, atingir valores próximos a 95% (Guimarães et al., 2002). Com isso esse trabalho tem como objetivo conhecer e estudar a eficiência reprodutiva real das raças Sindi e Pitangueira no estado do Pará. Material e Métodos O estudo foi conduzido nas instalações do Campus da Universidade Federal Rural da Amazônia– UFRA, no município de Belém, mesorregião do Estado do Pará. Foram utilizadas neste experimento dezessete vacas sendo seis animais mestiços Sindi/Pitangueira e onze da raça Pitangueira. Para análise da eficiência reprodutiva foi verificada a Idade ao Primeiro Parto (IPP), Intervalo Entre Partos (IEP), Período de Serviço (PS) e taxa de abortamento, dados coletados durante 2007 à 2010. Para a analise estatística foi utilizado o programa Statistical Analysis System versão 8.0 (SAS, 1999). Resultados e Discussão A idade média ao primeiro parto (IPP) das vacas mestiças Sindi/Pitangueira apresentou média de 30,2±6,3 meses. Resultado que se assemelha ao encontrado por Lemos et al., (2007) que apresentou IPP 31,3 meses em vacas puras da raça Sindi. O intervalo entre partos (IEP) das vacas mestiças foi de 16,35±3,77 meses, mostrando-se semelhantes aos resultados encontrados por Lemos et al., (2007) o qual encontrou IEP de 13 meses. O período de serviço encontrado nas vacas mestiças foi de 177,25±122,77 dias, foi semelhante ao encontrado por Calhau et al., (2001), onde encontrou PS de 310,53±160,66 dias. O índice de abortamento nas vacas mestiças foi de 16,6%, diferindo de (Guimarães et al., 2002) que obteve 10%. A raça Pitangueira apresentou um intervalo entre parto de 16,81±3,42 meses, não diferiu de Lemos et al., (2007) que observou IEP de 14,83±3,65 meses. O período de serviço apresentado pela raça Pitangueira foi de 230±111,26 dias, diferindo de Andrade et al., (1996). A raça Pitangueira não apresentou abortamento. Referências bibliográficas Andrade VJ, Guatimosin Filho V, Saturnino HM. Efeito do manuseio do aparelho reprodutivo sobre o intervalo do parto ao primeiro cio em fêmeas zebu multíparas. In: Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Zootecnia, 33, Fortaleza, 1996. Anais... Fortaleza: SBZ, p.335-337, 1996 Calhau AS, Ribeiro HFL, Cardoso EC, Figueiredo HF, Arruda AD. Idade ao Primeiro Parto, Intervalo Entre Partos e Período de Serviço da Raça Sindi Criada No Clima Tropical da Amazônia. Seminário de Iniciação Cientifica da FCAP. 11. . Seminário de Iniciação Cientifica Embrapa Amazônia Oriental.5. Belém-Pará. 2001, FCAP. Resumos, p. 241-243. Guimarães et al. Eficiências Reprodutiva e Produtiva em Vacas das Raças Gir, Holandês e Cruzadas Holandês x Zebu. Rev Bras Zootec, v.31, n.2, p.641-647, 2002. Lemos PFB, Leite SVF, Albuquerque RPF, Guedes PLC, Lima AM, Fernandes FG, Quedes Filho A. O Zebu Leiteiro da EMEPA-PB; Características produtivas, reprodutivas e sistema de produção. João Pessoa – Paraíba. Maio, 2007. Palavras-chave: intervalo entre partos, período de serviço, produção leiteira. Keywords: calving interval, milk production, service period.



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Efeito do eCG na dinâmica folicular, lútea e taxa de ovulação em vacas 5/8 Girolando submetidas à inseminação artificial em tempo fixo

eCG effect over follicular development, ovulation rate and corpus luteum size in 5/8 Girolando cows submitted fixed time artificial insemination

G.A. Veras¹, P.F.M.P. Souto¹, A.S. Santos Filho², J.C.V. Oliveira², S.I. Guido²,

F.R. Martins Filho³, F.P. Pinho³, C.C. Bartolomeu4

¹UAG, UFRPE, Garanhuns, PE; ²IPA; ³FIMCA; 4DMV, UFRPE, Recife, PE


Introdução O emprego do eCG em programas de sincronização com implantes auriculares ou dispositivos intravaginais de P4 visa melhorias na taxa de prenhez e aumento nas concentrações plasmáticas de progesterona pós-ovulação. No entanto, na literatura existem controvérsias sobre o uso do eCG em protocolos de inseminação artificial em tempo fixo (IATF). Assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito do eCG sobre o desenvolvimento folicular, taxa de ovulação e diâmetro do corpo lúteo em vacas Girolandas submetidas a IATF. Material e Métodos Foram utilizadas 16 vacas 5/8 Girolando, apresentando ECC acima de 2,5 (1-5) segundo Broster e Broster, (1998) e idade entre dois e doze anos, distribuídas em dois grupos experimentais. O Grupo 1 (G1; n=8) e o Grupo 2 (G2; n=8) receberam no dia 0 (D0) implante intravaginal contendo 1g de P4 (DIB®) e 2 mg de BE (Gonadiol®). No dia 8 (D8) foram retirados os implantes intravaginais e aplicado 500μg de cloprostenol sódico (Sincrocio®), além de 500 UI de eCG (Novormon®) no G2 . As vacas do G1 (controle) não receberam eCG, e sim solução salina. Vinte e quatro horas após remoção do implante (D9), foi aplicado 1mg de ciprionato de estradiol (ECP®) em ambos os grupos, e IATF 56 horas após a remoção dos implantes. Para avaliação das variáveis estudadas empregou-se ultrassom (Áquila Vet da PIE MEDICAL transdutor linear de 6,0 MHz), e os exames foram procedidos por via transretal no D0 e D8, no momento da inseminação artificial (IA) D10, 12 horas após a IA e, em seguida, de 6-6 horas até a ovulação e de 10 dias após a IA. Os dados foram analisados pelo programa estatístico SPSS 9.0 empregando-se a análise de variância (ANOVA).

Resultados e Discussão Tabela 1. Diâmetro do folículo dominante e ovulatório, momento da ovulação (hora), tamanho do CL e taxa de ovulação (média ± erro padrão) de vacas 5/8 Girolando submetidas à sincronização do estro e da ovulação.

Grupos

Diâmetro do FD no D8

(mm)

Diâmetro do FO (mm)

Remoção P4/ Ovulação (horas)

Tamanho CL 10 dias pós IA

(mm)

Taxa de Ovulação % (n)

G1 9,30 ± 0,82a 11,0 ± 1,33a 73,2 ± 1,73a 17,0 ± 1,07a 100 (8/8) G2 11,5 ± 1,33a 13,5 ± 1,30a 74,7 ± 1,60a 18,1 ± 1,27a 100 (8/8)

Letras iguais na mesma coluna; P>0,05.

Apesar de não se observar diferença estatística, os animais que receberam eCG apresentaram um incremento sobre o diâmetro do folículo ovulatório e do corpo lúteo em relação ao grupo controle. É possível que não se tenha observado um maior efeito do eCG sobre estas variáveis devido à condição corporal dos animais(>2,5) que não compromete a liberação do LH tônico. Referências bibliográficas Broster WH, Broster VJ. Body score of dairy cows. J Dairy Res, v.65, p.155-173, 1998. Palavras-chave: dinâmica folicular, eCG, IATF. Keywords: eCG, follicular dynamics, FTAI.



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Taxa de prenhez em vacas nelore tratadas com diferentes protocolos de inseminação artificial em tempo fixo

Pregnancy rates in Nelore cows treated with different protocols for fixed time artificial insemination

R.S. Silva1,4, A.M.S. Conceição1, M.D. Oliveira1, M.O. Paixão1, D.A.F. Viana1, L.M. Freitas Neto1, J.A. Nascimento2, A.M. Fraga Junior3

1Departamento de Medicina Veterinária, Faculdade Pio Décimo, Aracaju, SE; 2Universidade Federal da Paraíba, João Pessoa,

PB; 3Unidade Acadêmica de Garanhuns, Universidade Federal Rural de Pernambuco, Garanhuns, PE. 4E-mail: [email protected]

Introdução Recentes protocolos, desenvolvidos para controlar tanto o status luteal quanto folicular, permitiram uma sincronização do estro e da ovulação suficientemente precisa, possibilitando a inseminação artificial em tempo fixo (IATF) sem necessidade de detecção do estro (Bó e Mapletoft, 2004), eliminando uma das possíveis causas para redução na fertilidade. Tendo em vista as perspectivas de programas de IATF, vários protocolos, hormônios e doses hormonais vêm sendo avaliados por diversos pesquisadores. Objetivou-se com esse trabalho avaliar o efeito de diferentes protocolos hormonais sobre a taxa de prenhez de vacas Nelore inseminadas artificialmente em tempo fixo. Material e Métodos Foram utilizadas 90 fêmeas pluríparas cíclicas da raça Nelore, com idade variando entre 24 e 60 meses. Os animais tanto do lote 1 quanto o lote 2 receberam no Dia zero (D0) um pessário vaginal de progesterona (CIDR®, Pfizer) e 2 mg de BE (Estrogin®, Farmavet). No Dia 8 foi retirado o pessário de progesterona e aplicado 400 UI de eCG (Folligon® - Gonadotrofina Coriônica eqüina, Intervet), 2 mL de Prostaglandina (Sincrocio®, Ouro Fino). No Dia 10 foi feita a IATF em todas as vacas. A diferença entre os protocolos foi que no Dia 9 as vacas do lote 1 receberam 2,5 mL (IM) de GnRH (Conceptal®, Intervet) e as vacas do lote 2 recebram 2 mg de BE, 24 horas antes da IA. Os resultados foram avaliados através da análise estatística descritiva, teste de Student (T) e teste de Qui-quadrado. O nível de significância foi de 5%.

Resultados e Discussão Não foi verificado no presente trabalho diferença na taxa de prenhez nos diferentes tratamentos. Tratamento 1 (GnRH) foi de 53,33% (24/45)a, enquanto que no tratamento 2 (BE) foi de 66,66% (30/45)a (P<0,05). Concluiu-se que é possível obter taxas de prenhez satisfatórias utilizando-se tanto o GnRH quanto o BE na indução da ovulação.

Referências bibliográficas Jaume CM, Moraes JCF. Um sistema para melhorar a taxa reprodutiva de vacas em cria. Bagé – Embrapa Pecuária Sul. 2001, 14p. Bó GA, Mapletoft RJ. Control of ovarian function for Fixed time AI and embryo transfer without estrus detection. 2004. Palavras-chave: IATF, prenhez, sincronização da ovulação. Keywords: IATF, pregnancy, synchronisation of ovulation.



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Sincronização do cio e fertilidade de novilhas leiteiras tratadas com Croniben® ou Preloban®

Oestrus synchronization and fertility of dairy heifers treated with Croniben or Preloban

R.H. Alvarez1,3, A.J.F. Melo1, V.A.P. Poncio1, A.A.C. Peres1, F.L. Mucci2, B. Salgado2

1Agencia Paulista de Tecnologia dos Agronegócios, Piracicaba, SP; 2Dpto Agricultura, Prefeitura de Pindamonhangaba, Pindamonhangaba, SP.

3E-mail: [email protected] Introdução Atualmente, existe no mercado brasileiro uma dezena de produtos destinados à sincronização do cio dos bovinos, tendo como princípio ativo a prostaglandina F2 alpha (natural ou análogo sintético). O preço desses produtos varia de 1 a 3 dólares por dose (Informativo pecuário, 2010), sendo que essa variação deriva de fatores relacionados aos custos de matéria prima, distribuição, propaganda e margem de lucro do fabricante, entre outros. Alguns laboratórios, inclusive, utilizam como estratégia de marketing ressaltar a qualidade do seu produto para justificar o maior preço em comparação aos concorrentes. Para o produtor de gado, contudo, interessa que o produto adquirido atenda com eficiência a finalidade a que é destinado, independentemente do preço de venda. Dessa forma, o presente estudo objetivou avaliar, em novilhas leiteiras, a atividade biológica (capacidade de induzir cio e fertilidade) de dois produtos comerciais formulados a base de d-cloprostenol que, no momento do experimento, apresentavam o maior e o menor preço de mercado. Material e Métodos Foram utilizadas trinta e seis novilhas holandesas de 16.8 ± 3.1 meses de idade e peso de 361,6 ± 12,6 kg, criadas em condições semelhantes de manejo no Polo APTA Vale do Paraíba, em Pindamonhangaba, SP (Long. 22º55'26" S, Lat. 45º27'42 W e Alt 557 m). Em dia aleatório do ciclo estral (D0), os animais receberam um dispositivo vaginal contendo 1 g de progesterona (Primer®, Tecnopec, Brasil) juntamente com uma injeção intramuscular (i.m.) de 2 mcg de benzoato de estradiol (Estrogin®, Farmavet, Brasil). No D8 foi retirado o Primer e os animais receberam uma injeção i.m de 150 mcg de D- cloprostenol (Prolise®, Arsa, Argentina). No dia seguinte (D9) os animais receberam uma segunda injeção i.m. de 1 mcg de Estrogin. Doze dias após a retirada do Primer, as novilhas foram divididas aleatoriamente em 3 grupos de 12 animais. Os grupos 1 e 2 receberam 2 mL (150 µg de D-Cloprostenol) de Croniben (Lab. Biogenesis Bago, Brasil) ou Preloban (Intervet Schering-Plough, Brasil), respectivamente, enquanto que o grupo 3 recebeu 2 mL de solução salina. Nos seguintes 5 dias o cio foi anotado e os animais inseminados 8-12 horas após a manifestação do cio. A inseminação foi realizada por um técnico experiente utilizando sêmen do mesmo touro. O diagnóstico de prenhez foi realizado, por ultra-sonografia, 40 dias após. O teste de χ 2 foi utilizado para estabelecer diferenças entre os grupos.

Resultados e Discussão Não houve efeito (P > 0,05) do produto comercial no desempenho reprodutivo avaliado no presente estudo. Nenhum dos animais controle apresentou cio. A resposta de manifestação do cio foi similar entre os tratamentos Preloban (83,3%) e Croniben (91,7%). O pico da resposta do estro ocorreu, em media, 60 h apos a injeção dos tratamentos e a taxa de concepção foi de 50, 0% (Preloban) e 54,5% (Croniben), respectivamente (P > 0,5). Assim, da mesma forma que estudos prévios constataram não haver diferença na eficiência luteolítica da prostaglandina natural ou sintética, os resultados do presente experimento confirmam a equivalência do efeito biológico do d-Cloprostenol comercializado por diferentes laboratórios. Conclui-se que a atividade biológica dos produtos a base de d-Cloprostenol não esta relacionada com a origem do laboratório ou preço de venda ao produtor. Palavras-chave: bovinos, Cloprostenol, sincronização do cio. Keywords: bovine, Cloprostenol, estrus synchronization.

Apoio financeiro: Fapesp.


mailto:[email protected]�


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Eficiência de dois dispositivos vaginais para liberação de progesterona em bovinos Efficiency of two vaginal devices for progesterone releasing in cattle

A.S. Maximiano¹, C.A.C. Fernandes², M.M. Gioso²

¹Bolsista PROBIC/CNPq, Unifenas, Alfenas, MG, Brasil; ²Unifenas, Alfenas, MG.

E-mail: [email protected], [email protected], [email protected]

Introdução Implantes de progesterona (P4) são usados para simular os efeitos do corpo lúteo funcional e manter concentrações elevadas de P4 atuando sobre dinâmica folicular e bloqueando o Centro Hipotalâmico e o Rinencéfalo. Os objetivos foram avaliar e comparar implantes com 0,6 e 1,2 de progesterona pela avaliação da concentração de P4 durante sete dias, em diferentes categorias pela dosagem de P4. Material e Métodos Foram utilizadas oito fêmeas bovinas acíclicas, quatro vacas lactantes e quatro novilhas, formando dois grupos com duas vacas e duas novilhas. G1: implantes 0,6g e G2: implantes 1,2 g de P4. Foram feitas nove colheitas de sangue para avaliação de P4. A primeira antes da colocação, sete colheitas diárias durante a permanência e uma 12 horas após a retirada.

Resultados e Discussão Ambos os grupos mantiveram concentrações adequadas de P4 (>0,8ng/ml), necessária para bloquear rinencéfalo e hipotálamo, durante os sete dias de utilização, com aumento rápido após a colocação e a queda acentuada após remoção, nas duas categorias utilizadas (Fig. 1).

0

5

10

15

20

0h 12h 36h 60h 84h 108h 132h 156h 168h

Vacas 0,6

Vacas 1,2

Novilhas 0,6

Novilhas 1,2

P4 n

g/m

L

Figura 1. Concentrações de P4 nos diferentes dias, implantes e categorias de fêmeas. Não foram encontradas diferenças de concentrações entre os dois dispositivos nas vacas. Até o 3º dia de colheita as novilhas apresentaram maior [P4] que em vacas (P,0,05). Conclui se que ambos dispositivos, com 0,6 e 1,2g de P4 são eficientes em vacas e novilhas na primeira utilização. Referências bibliográficas Adams GP. Control of ovarian follicular wave dynamics in cattle: implications for synchronization and superstimulation Theriogenology, v.41, p.19-24, 1994. Fortune Je. Ovarian follicular growth and development in mammals. Biol Reprod, v.50, p.225-232, 1994. Palavras-chave: implantes,progesterona. Keywords: implants, progesterone. Apoio: Fapemig



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Influência da sazonalidade sobre a qualidade de oócitos bovinos selecionados pelo método do azul cresil brilhante

Influence of seasonality on the quality of bovine oocytes selected by the brilliant cresyl blue method

R.C. Maia1, B.P. Carvalho, C.S. Paes de Carvalho, I.P. Santos, J.L. Pereira, A.J.B. Dias

Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro, Campos dos Goytacazes, RJ. 1E-mail: [email protected]

Introdução As mudanças climáticas ao longo do ano impõem às doadoras diferentes padrões nutricionais e ambientais que podem influenciar a qualidade dos oócitos (Webb et al., 2004) e consequentemente os resultados da produção in vitro de embriões (PIVE). Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar a influência da sazonalidade na maturação in vitro (MIV) de oócitos selecionados pelo método do Azul Cresil Brilhante (ACB), um marcador não invasivo que permite identificar oócitos de maior potencial de desenvolvimento in vitro. Material e Métodos Ovários obtidos em matadouro foram utilizados para a obtenção dos 490 oócitos utilizados neste trabalho. Os oócitos foram selecionados por critérios morfológicos (Grau I e II), em estereomicroscópio, durante o verão e inverno de 2010. Após a seleção, os oócitos foram incubados em solução de ACB (26 µM em meio 199) por 90 minutos, à 38,5°C e 5% de CO2. Posteriormente os oócitos foram classificados em ACB+ (citoplasma azul – de maior potencial de desenvolvimento para MIVe PIVE) e ACB- (citoplasma não corado - de menor potencial de desenvolvimento para MIV e PIVE).Os dados foram avaliados pelo teste de qui-quadrado com 5% de significância, relacionando o número de oócitos corados ou não, com as duas estações do ano .

Resultados e Discussão Não houve diferença significativa (P > 0,05) entre o percentual de oócitos ACB+ coletados no verão e inverno (56 e 44% respectivamente), assim como os ACB– (45 e 55%, respectivamente). Diferentemente dos resultados de Webb et al. (2004), os do presente trabalho mostraram que a sazonalidade não influenciou o percentual de oócitos selecionados pelo ACB nas duas estações comparadas, possivelmente pelas características raciais e condições corporais dos animais ao abate. O método de seleção pelo ACB se mostrou prático e eficiente para a seleção de oócitos para a MIV e PIVE. Referências bibliográficas Webb R, Garnsworthy PC, Gong JC, Armstrong DG. Central of follicular growth local interactions and nutritional influences . J Anim Sci, v.82, suppl, p.E63-74, 2004. Palavras-chave : Azul Cresil Brilhante, bovino, embrião. Keywords : bovine , Brilliant Cresyl Blue, embryo.



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Avaliação do índice de recuperação e qualidade de oócitos bovinos obtidos por aspiração e fatiamento

Evaluation of recovery rate and quality of bovine oocytes obtained by aspiration and slicing

M.T.C. Gonçalves1, P.M. Costa, L.H. Gomes, S.C.C. Pinto, I.R. Cardoso, M.L. Oliveira, S.R. Silva, A.C. Nicacio

Universidade Estadual do Maranhão (UEMA), São Luís, MA


Introdução A obtenção dos oócitos é uma etapa fundamental para a realização da produção in vitro (PIV). Esses podem ser colhidos de ovários obtidos em abatedouros, que têm sido a fonte de oócitos de menor custo e mais abundante para a produção de embriões em larga escala (Martino et al., 1994; Wani et al., 2002), por ovariectomia, ou colhidos in vivo por aspiração de folículos. Material e Métodos Os ovários foram obtidos de fêmeas bovinas, abatidas em matadouro de São Luís, em fase aleatória do ciclo estral, coletados logo após o abate e evisceração, acondicionados em garrafa térmica contendo solução salina aquecida e encaminhados ao laboratório. Foram divididos em dois grupos experimentais (aspiração e fatiamento), após a recuperação e sedimentação do líquido folicular colocou-se os sedimentos em placas de Petri distintas, para procura e seleção dos oócitos sob estereomicroscópio.

Resultados e Discussão Foram recuperados 3061 oócitos, com índices médios de recuperação de 10,03 ± 3,22 oócitos/ovário aspirado e 7,45 ± 2,38 oócitos/ovário fatiado, ocorrendo diferença significativa (P < 0,05) entre as técnicas. Dos oócitos recuperados na aspiração, 39,64% foram classificados como grau I, 23,32% como grau II, 18,86% grau III, 10,9% desnudos e 7,28% expandidos. Recuperou-se pelo fatiamento 30,85% oócitos grau I, 26,59% grau II, 24,65% grau III, 12,94% desnudos e 4,96% expandidos, verificando-se diferença significativa (P < 0,05) entre os graus dentro de cada técnica. Seneda et al. (2001) em seu experimento recuperaram: 73,11% oócitos bons, 14,15% regulares, 9,90% desnudos e 2,83% atrésicos, por aspiração. Estes dados corroboram com os encontrados neste experimento quanto à maior recuperação de oócitos bons (grau I e grau II), porém diferem em relação à porcentagem encontrada neste experimento. Referências bibliográficas Martino A, Palomo MJ, Mogas T, Paramio MT. Influence of the collection technique of prepubertal goat oocytes on in vitro maturation and fertilization. Theriogenology, v.42, n.5, p.859-873,1994. Seneda MM, Esper CR, Garcia JM, Vantini R. Aspiração folicular transvaginal sem estímulo hormonal em vacas holandesas. Anim Reprod Sci, v.17, p.11-16, 2001. Wani NA. In vitro maturation and in vitro fertilization of sheep oocytes. Small Rumin Res, v.44, n.2, p.89-95, 2002. Palavras-chave: bovinos, oócito, ovário. Keywords: bovine, oocyte, ovary.



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IATF em novilhas Nelore no estado do Ceará FTAI in Nelore heifers in Ceara state

A.N.L. Costa, J.V. Feitosa, A.A. Araújo

Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, CE

E-mail: [email protected], [email protected], [email protected] Introdução A inseminação artificial em tempo fixo (IATF) é uma técnica que permite o uso em massa da inseminação artificial (IA), já que não envolve a observação de cio e engloba a IA de muitos animais em um mesmo dia. É uma opção de manejo que permite emprenhar grande número de vacas em um único dia de IA. O objetivo deste trabalho foi verificar a eficácia do protocolo crestar em novilhas da raça Nelore no interior de estado do Ceará. Material e Métodos O trabalho foi realizado em Março de 2010 na Fazenda Poções, no município de Missão Velha, estado do Ceará, distante 528 km de Fortaleza. Foram utilizadas 100 vacas da raça Nelore com escore de condição corpórea 3,5, média de peso de 400 kg. Mantidas em piquetes de capim Tanzânia (Panicum maximum cv. tanzania), sal mineral e água a vontade. Utilizou-se o protocolo Crestar para a IATF, onde os animais receberam implante subcutâneo com 3 mg de Norgestomet e 5 mg de Valerato de Estradiol IM no dia zero; no nono dia o implante foi removido e aplicado 400 UI de ECG IM e 150 µg de PGF2α; no décimo dia foi aplicado 0,75 mg de Benzoato de estradiol, enquanto que, a IATF foi feita após 56 h da retirada do implante. Os diagnósticos de gestação foram feitos 35 dias após a IATF através de ultrassonografia trans-retal. As análises estatísticas foram realizadas utilizando-se o programa SYSTAT versão 12. Resultados e Discussão Com relação aos sinais de estro, 95% dos animais os apresentaram com presença de muco límpido no momento da IATF. As taxa de concepção a primeira IA foi de 51,5% e na segunda IA passou para 70%, valores semelhantes aos de Martinez et al. (2000) e superiores aos de Sá Filho et al. (2006) que trabalharam com novilhas. Mais estudos necessitam ser executados nesta região do Nordeste brasileiro para se aprimorar os protocolos de sincronização do cio e da ovulação de acordo com a realidade local.

Referências bibliográficas Martinez MF, Adams GP, Kastelic JP, Bergfelt DR, Mapletoft RJ. Induction of follicular wave emergence for estrus synchronization and artificial insemination in heifers.Theriogenology, v.54, n.5, p.757-769, 2000. Sá Filho MF, Reis EL, Ayres H, Peres AAC, Carvalho CAB, Carvalho JB, Araújo CASC, Baruselli PS. Effect of oestradiol valerate or benzoate on induction of a new follicular wave emergence in Bos indicus cows and heifers treated with norgestomet implant. Reprod Fertil Dev, v.18, p.289, 2006. Palavras-chave: Crestar, nordeste, sincronização. Keywords: Crestar, northeast, synchronization.



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Ressincronização em vacas Nelore utilizando sêmen sexado ou convencional Resynchronization in Nellore cows using sexed sorted or non-sorted sperm

K.A.L. Neves1,4, I.K.F. Sousa2, M.F. Sá Filho3, P.S. Baruselli3

1Instituto de Biodiversidade e Florestas (UFOPA), Santarém, PA; 2Médica Veterinária; 3Departamento de Reprodução

Animal, VRA, FMVZ/USP, São Paulo, SP. 4E-mail: [email protected]

Introdução A sincronização do estro após a primeira IA pode ser uma alternativa para controlar a variação dos intervalos de retorno ao estro e incrementar o desempenho reprodutivo (McDougall; Loeffler, 2004). Vacas que não concebem ao primeiro serviço necessitam ser re-inseminadas rapidamente para manter a eficiência reprodutiva (Stevenson et al., 2003). Material e Métodos Foram utilizadas 184 vacas Nelore, previamente inseminadas em tempo fixo, divididas em dois lotes (IATF ou Observação de estro). Vacas em estro eram inseminadas 12 horas após, com sêmen convencional ou sexado. O período de observação foi entre os dias 17 e 25 após a IATF. Considerou-se como dia 0, a IATF anterior. O grupo IATF recebeu, no dia 19, um dispositivo intravaginal de P4 (Sincrogest®, Ourofino), por oito dias. No implante, receberam 0,105 mg de acetato de buserelina (Sincroforte®, Ourofino) i.m. Na retirada, passaram por exames ultrassonográficos (7,5 MHz, CTS-3300V, SIUI, China) para diagnóstico de gestação. As não gestantes receberam, via i.m, 0,25mg de cloprostenol sódico (Sincrocio®, Ourofino). No dia 28, receberam i.m, 1,0 mg de benzoato de estradiol (Sincrodiol®, Ourofino) como indutor de ovulação. As vacas foram separadas para receberem IATF usando sêmen sexado ou convencional às 60 horas após a remoção dos implantes. Sêmen de um único touro Angus foi utilizado. Os dados foram analisados utilizando o programa SAS.

Resultados e Discussão A TS para os animais ressincronizados foi de 100% (88/88), sendo superior (P<0,001) aos animais submetidos à detecção de estro (63,5%; 61/96). A TC e TP foram de 7,3% (3/41) para o sêmen sexado e de 14,9% (7/47) para o sêmen convencional. As TC e TP do grupo observação de estro com sêmen sexado foram de 38,7% (12/31) e 25% (12/48) e para o sêmen convencional de 43,3% (13/30) e 27,08% (13/48), respectivamente. Uma possível explicação para a taxa de prenhez diminuída no grupo IATF, pode ter sido o desenvolvimento de folículos persistentes, ou a inadequada resposta a aplicação do GnRH no dia 19 após a primeira IA.

Referências bibliográficas McDougall S, Loeffler SH. Resynchrony of postpartum dairy cows previously treated for anestrus. Theriogenology, v.61, p.239-253, 2004. Stevenson JS, Cartmill JA, Hensley, BA, El-Zarkouny SZ. Conception rates of dairy cows following early not-pregnant diagnosis by ultrassonography and subsequent treatments with shortened Ovsynch protocol. Theriogenology, v.60, p.475-483, 2003. Palavras-chave: estro, IATF, ressincronização, sêmen convencional, sêmen sexado. Keywords: estrus, non-sexed sperm, resynchronization, sexed sorted, TAI.



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Efeito de sucessivas aspirações foliculares sobre a taxa de recuperação e número de oócitos em novilhas mestiças zebuínas

Effect of successive ovum pick-up on recovery rate and number of oocytes in crossbred heifers zebu

B.P. Carvalho1, F.B. Rosa, F.Q. Costa, R.C. Maia, I.P. Santos, A.J.B. Dias

LRMGA, Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro, Campos dos Goytacazes, RJ. 1E-mail: [email protected]

Introdução Na tentativa de se reduzir o intervalo entre gerações tem sido cada vez mais freqüente o uso da técnica de aspiração folicular (OPU) associada à produção in vitro de embriões em novilhas. No entanto, para que esses animais sejam submetidos a esta técnica sem que haja redução na produção e recuperação oocitária é importante a avaliação do efeito de repetidas sessões de OPU em intervalos curtos. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de repetidas sessões de OPU no número médio de oócitos e na taxa de recuperação oocitária de novilhas zebuínas. Material e Métodos Foram utilizadas 20 novilhas mestiças, cíclicas, com escore corporal variando entre 3 e 4 (escala de 1 a 5) e idade média de 2 anos, mantidas a pasto com suplementação diária de 4,5 kg de concentrado e sal mineral ad libitum. Foram realizadas sessões de aspiração folicular transvaginal (DP-2200, Mindray, 7,5 Mhz) com intervalo de sete dias durante cinco semanas consecutivas (S1, S2, S3, S4 e S5), totalizando 100 sessões. Os animais foram distribuídos em dois grupos com dez animais cada para que não fosse aspirado um número grande de animais a cada dia. Sete dias antes do início do experimento e a cada sessão, os folículos acima de 3 mm eram contados e aspirados, inclusive o folículo dominante quando presente. Foi determinada a média do número de oócitos obtidos por sessão e a respectiva taxa de recuperação, a qual foi calculada pela relação entre o número de folículos observados e o número de oócitos recuperados, expressa em porcentagem. Os dados da taxa de recuperação foram analisados pelo teste de Kruskal-Wallis e o número de oócitos pela ANOVA e teste de Tukey. Todas as análises foram feitas no ambiente R versão 2.11.1(2010), com nível de significância de 5%. Resultados e Discussão As taxas de recuperação em S1, S2, S3, S4 e S5 foram 80, 86, 88, 64 e 82%, respectivamente. A taxa de recuperação de S4 foi semelhante a de S1 (P>0,05) e diferente das demais (P< 0,05). No entanto as taxas de S1, S2, S3 e S5 foram semelhantes (P> 0,05). A média ± desvio padrão do número de oócitos obtidos por animal em S1, S2, S3, S4 e S5 foi 12,9 ±8,7; 13,2±9,0; 13,4±7,9; 9,6±6,4; 10,7±7,5, respectivamente, não havendo diferença significativa entre as cinco semanas (P>0,05). Os resultados demonstram que, apesar de em S4 ter havido uma queda na taxa de recuperação, o número de oócitos recuperados se manteve durante todo o período. Assim, conclui-se que é possível a realização de sessões de OPU em novilhas mestiças com intervalo de 7 dias por 5 semanas consecutivas sem afetar o número de oócitos obtidos por sessão. Palavras-chave: bovino, oócito, OPU, produção in vitro. Keywords: bovine, in vitro production, oocyte, OPU.



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Fracionamento de doses de sêmen em programas de IATF em bovinos Fractionation of semen doses in FTAI programs in catle

A.S. Rodrigues1, P.A. Ferraz, M.V.G. Loiola, M. Chalhoub, B.H.A. Andrade, R.F. Bittencourt,

E.A.B. Araújo, S.N. Oliveira, A.L. Ribeiro Filho

Escola de Medicina Veterinária, UFBA, Salvador, BA. 1E-mail: [email protected]

Introdução Os programas comerciais de Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF) são marcados por baixas taxas de concepção o que eleva substancialmente os custos, principalmente, quando se utiliza sêmen de alto valor comercial. Diante deste quadro, o fracionamento do sêmen representa uma alternativa para se superar este entrave (SILVEIRA et al., 2008). Assim, o presente trabalho objetivou comparar as taxas de concepção de fêmeas bovinas preparadas para programas de IATF e inseminadas com doses de sêmen congelado intactas ou fracionadas. Material e Métodos Para realização deste experimento 78 vacas Nelore em estágio aleatório do ciclo estral (Dia 0), receberam um dispositivo intravaginal de progesterona (SINCROGEST®, Ouro Fino, São Paulo, Brasil) associado a 2mg de Benzoato de Estradiol (ESTROGIN®, Farmavet, São Paulo, Brasil) IM. No Dia 8 esses animais tiveram os dispositivos intravaginais retirados, foram tratados com 300U.I. de eCG (NOVORMON®, Shering Plough, São Paulo, Brasil) IM, 500µg de Cloprostenol sódico (SINCROCIO®, Ouro Fino, São Paulo, Brasil) IM e 1mg de Cipionato de Estradiol (E. C. P.®, Pfizer, São Paulo, Brasil) IM. No Dia 10 realizou-se a IATF e os animais foram aleatoriamente divididos em dois grupos: Metade foi inseminada com doses de sêmen convencionais (CONV, n=39) e a outra metade foi inseminada com doses de sêmen fracionadas (FRAC, n=39). Cada dose de sêmen empregada no grupo FRAC foi fracionada na proporção de 1:1, para tanto as palhetas de 0,5 mL foram descongeladas a 37°C por 30 segundos e rediluídas em 0,5mL do diluidor Botu-bov® acrescido de 7 mM de pentoxifilina, em seguida procedeu-se o envase em duas palhetas de 0,5 mL. Alíquotas de sêmen foram retiradas para determinação da concentração espermática das doses convencionais e fracionadas. O diagnóstico de gestação foi realizado 30 dias após a IATF. As taxas de concepção foram comparadas utilizando-se o teste do Qui-quadrado (χ2) disponível no pacote estatístico SAS.

Resultados e Discussão Na comparação entre as taxas de concepção obtidas nos grupos CONV (42,11%) e FRAC (56,76%) não foi verificado diferença significativa, concordando aos achados de Silveira et al. (2008), os quais também obtiveram satisfatórias taxas de concepção ao empregarem diluidores a base metilxantinas, comprovando a eficiência da utilização desses diluidores para o fracionamento das doses inseminantes empregadas na IATF. A concentração espermática por dose inseminante no grupo CONV foi em média de 28,75x106 SPTZ enquanto que no grupo FRAC a mesma foi em média de 13,75x106 SPTZ, podendo também justificar os índices de concepção obtidos nesta pesquisa, pois como foi relatado por Seidel Jr e Schenk (2008) a maioria dos touros mantêm índices de fertilidade satisfatórios com doses maiores ou iguais a 10x106 SPTZ. Os resultados do presente experimento demonstram que as doses de sêmen bovino podem ser fracionadas com diluidores a base de metilxantinas na proporção de 1:1, sem o comprometimento dos índices de fertilidade em programas de IATF. Referências bibliográficas Seidel Jr GE, Schenk JL. Effects of sperm numbers per inseminate and site of sperm deposition. Anim Reprod Sci, v.105, p.129-138, 2008. Silveira EC, Bortolloti LA, Sgoberto Filho I, Silva KCF, Santos GMG, Seneda MM. Emprego do fracionamento de sêmen em programas comerciais de IATF em bovinos. Acta Sci Vet, v.36, p.619, 2008. Palavras-chave: bovino, fracionamento de doses de sêmen, IATF. Keywords: bovine, fractionated of semen doses, FTAI.




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Dinâmica pré-ovulatória de vacas zebuínas usando diferentes indutores da ovulação Dynamic preovulatory in zebu cows using different inducers of ovulation

B.H.A. Andrade1, M.V.G. Loiola, M. Chalhoub, A.S. Rodrigues, P.A. Ferraz, E.A.B Araújo,

S.N. Oliveira, A.L. Ribeiro Filho

Escola de Medicina Veterinária, UFBA, Salvador,BA. 1E-mail: [email protected]

Introdução A Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF) tem se destacado no cenário nacional da pecuária de corte alcançando índices extraordinários de crescimento. Neste contexto, a utilização de protocolos mais simplificados pode representar uma alternava para aumentar a viabilidade desta biotecnologia pelo menor dispêndio de mão-de-obra (CREPALDI et al., 2008). Assim, objetivou-se avaliar a eficiência em sincronizar a dinâmica pré-ovulatória de fêmeas Bos indicus entre um protocolo composto por três manejos, com uso do cipionato de estradiol (CE) e um protocolo composto por quatro manejos, usando o benzoato de estradiol (BE). Material e Métodos Em estádio aleatório do ciclo estral (Dia 0), 30 fêmeas Nelores lactantes receberam um dispositivo intravaginal de progesterona (SINCROGEST®, Ouro Fino, São Paulo, Brasil) associado a 2mg de Benzoato de Estradiol (SINCRODIOL®, Ouro Fino, São Paulo, Brasil) IM. No Dia 8 esses animais tiveram os dispositivos intravaginais retirados, foram tratados com 300U.I. de eCG (NOVORMON®, Shering Plough, São Paulo, Brasil) IM e 500µg de Cloprostenol sódico (SINCROCIO®, Ouro Fino, São Paulo, Brasil) IM. Neste momento, as fêmeas foram aleatoriamente dividas em dois grupos: metade dos animais (n=15) recebeu 1mg de CE (ECP®, Pfizer, São Paulo, Brasil) IM, enquanto a outra metade (n=15) foi submetida a outro manejo para aplicação de 1mg de BE no Dia 9 do protocolo. No D10 pela manhã todos os animais foram inseminados, foi também procedido a mensuração e acompanhamento do folículo pré-ovulatório por meio da ultrassonografia transretal, 3 vezes/dia, pelas decorridas 34h seguintes. O diâmetro do Corpo Lúteo (CL) foi mensurado por ultrassonografia transretal no Dia 17 do protocolo. Utilizou-se o software SPSS para análise de regressão linear entre o diâmetro (Ø) do folículo pré-ovulatório e do CL e nas demais comparações, o teste SNK. Resultados e Discussão A média observada para o Ø do folículo pré-ovulatório foi de 12,77±1,71mm e o uso do CE ou BE foi indiferente estatisticamente, alcançando um Ø de 12,79±2,18mm e 12,75±1,18mm, respectivamente. A média do Ø do CL foi de 17,11mm, também não diferindo entre os grupos (CE:16,70±4,18 e BE:17,51±3,25mm). O Ø do CL apresentou correlação positiva com o Ø do folículo pré-ovulatório (R= 0,489, representada pela equação y= 3,699+1,05x). Crepaldi et al. (2008) quando utilizaram o CE no momento da retirada do progestágeno e o BE 24h após a retirada, verificaram que a ovulação ocorreu em média 72h após a remoção do progestágeno, concordando aos resultados encontrados no presente estudo, onde as mesmas ocorreram em média às 74,71±3,56h, não diferindo entre os grupos (CE: 74,43±3,50 e BE: 75,00±3,72mm). Ao avaliar a distribuição das ovulações, foi observado que 60,7% se concentraram nas 72 horas após a retirada do progestagéno, enquanto que apenas 14,3% e 25% ovularam nas próximas 77 e 80h. Os resultados revelam a possibilidade de substituição do BE no Dia 9 pelo CE no Dia 8 objetivando minorar a demanda de mão-de-obra nos protocolos de IATF. Referências bibliográficas Crepaldi A. Sales JNS, Girotto RW, Ayres H, Salla-Cardoso PB, Faria Junior SP, Baruselli PS. Momento da ovulação e taxa de concepção de vacas nelore tratadas com cipionato ou benzoato de estradiol para induzir a ovulação em protocolos de IATF. In: Reunião Anual da SBTE, 22, 2008, Guarujá, SP. Anais... v: 36. 2008. p.464. Palavras-chave: benzoato, bovino, cipionato, IATF. Keywords: benzoate, bovine, cypionate, TAI.



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Desempenho reprodutivo de bovinos da raça Nelore submetidos a diferentes protocolos de inseminação artificial em tempo fixo (IATF)

Reproductive performance of Nellore cattle subjected to different protocols for fixed time artificial insemination (FTAI)

G.G. Silva1, A.L.B. Souza2, M.S. Segui1, L.E. Kozicki1,4, J.C. Breda1, I.W.Santos3, R.R.Weiss3

1Pontifícia Universidade Católica do Paraná ( PUCPR), Curitiba, PR; 2 Médico Veterinário, VetMax Assistência e

Consultoria Veterinária, Curitiba, PR; 3Médico Veterinário, docente, UFPR, Curitiba, PR. 4E-mail: [email protected]

Introdução O desmame temporário (shang) facilmente aplicável e de baixo custo, consiste na separação temporária do bezerro por um período de 48 a 72 horas, a partir de 30 dias pós-parto, podendo ser repetida várias vezes na estação de monta (EMBRAPA, 2006). Tratamentos hormonais podem ser utilizados no intuito de reduzir o período de espera em vacas de corte (Viana et al.,2008). O objetivo deste estudo foi comparar as taxas de prenhez entre animais submetidos ao ‘shang’e os que receberam tratamento hormonal. Material e Métodos Foram utilizadas 158 vacas da raça Nelore, submetidas à similares condições de manejo. O início do experimento ocorreu no D50 após o parto. Dividiu-se os animais em dois grupos(G) conforme protocolos abaixo esquematizados.

Grupo 1(n=110) Remoção P4 IATF

P4+2mg BE + 150mcg PG+1mg ECP+48 h shang __________________________________________________________________________________ D0 D9 D11

Grupo 2(n=48) Remoção P4 IATF

P4+2mg BE + 150mcg PG+1mg ECP+ 300UI eCG

__________________________________________________________________________________ D0 D9 D11

Resultados e Discussão Uma variação significativa de protocolos visando a IATF tem sido empregados na última década. A presente pesquisa demonstrou taxas de prenhez de 37,2 e 47,9% (p>0,05%) respectivamente para os grupos 1 e 2. A aplicação de protocolos empregando-se o shang assim como o ECG, no sentido de reduzir o período de espera, foi utilizada por Ereno et al.(2007); Silveira et al.(2008), os quais obtiveram taxas de prenhez similares as do presente estudo. Dados deste estudo mostram que 96,3% do G1 haviam ciclado até o 80º dia contra 93,7% do G2 (p>0,05). Concluiu-se que para um manejo de três idas dos animais ao brete de trabalho, os protocolos foram compatíveis com os relatos da literatura. Referências bibliográficas Ereno RL, Barreiros TRR, Seneda MN, Baruselli PS, Pegorer MF, Barros CN. Taxa de prenhez de vacas Nelore lactantes tratadas com progesterona associada à remoção temporária de bezerros ou aplicação de gonadotrofina coriônica eqüina. Rev Bras Zootec, v.36, n.5, p.1288-1294, 2007. Silveira AP. Uso de protocolos de IATF para aumentar a eficiência reprodutiva de gado de corte. Dissertação (Mestrado) - Universidade do Oeste Paulista, Presidente Prudente, SP, 2010. Viana GNO, Kozicki LE, Weiss RR, Segui,M.S, Meirelles,C, Efing AC, Breda JC, Giacomelli A. Comparação de diferentes protocolos para a sincronização de estro e inseminação artificial em tempo fixo em vacas da raça Nelore em anestro pós parto. Arch Vet Sci, v.13, n.4, p.247-254, 2008. Palavras-chave: Bovinos de corte, desmame interrompido, ECG, IATF, Shang. Keywords: beef cattle, ECG, FTAI, Shang.



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Avaliação do tratamento com anti-inflamatórios sobre a quantidade e qualidade dos COC’s aspirados de ovários de novilhas mestiças

Evaluation of the treatment with anti-inflammatory on the quantity and quality of the COC’s aspirated from the ovaries of crossbred heifers

A. Pinto-Neto1,5, A.C. Martinez2, G.M. Fernandes3, R.F.S. Lucia4, C.O. Abreu2, M.F. Mota3

1UFFS, Realeza, PR, 2UEM, Umuarama, PR; 3UNIPAR, Umuarama, PR; 4Geração Tecnologia Ltda. Maringá, PR.

5E-mail: [email protected] Introdução A produção de embrião in vitro (PIV) associada à aspiração folicular transvaginal guiada por ultra-som (OPU) proporcionou um incremento na reprodução de fêmeas bovinas (Seneda et al., 2006). No entanto, pode ocasionar alterações morfológicas e funcionais nos ovários (Viana et al., 2003). Esse estudo objetiva avaliar os efeitos do tratamento com anti-inflamatórios sobre a quantidade e qualidade de complexos cumulus oophorus (COC’s) aspirados de ovários de novilhas mestiças. Material e Métodos Dezoito novilhas mestiças foram divididas em três tratamentos: Grupo I Controle, II tratado com flunixin meglumine (1,1 mg/Kg – BanamineR) e III tratado com meloxicam (0,5 mg/kg – MaxicamR) e submetidas a dez sessões de OPU, sendo os COC’s coletados quantificados e avaliados de acordo com as descrições de Mallard (2000). Resultados e Discussão O número médio de folículos a serem aspirados foi semelhante em todos os tratamentos (p>0,05 - 23, 92 ± 9,57, 23,81 ± 9,88 e 21,54 ± 9,42 para os grupos I, II e III respectivamente). O Grupo III apresentou menor média de COC’s viáveis (p<0,05 - 10,02 ± 6,05), enquanto o grupo Controle e o tratado com flunixin meglumine apresentaram média de COC’s viáveis semelhantes, sendo de 14,09 ± 8,53 e 12,80 ± 7,51, respectivamente (p>0,05). O número médio de COC’s aspirados no Grupo Controle foi 19,52 ± 11,00 COC’s e o de COC’s viáveis de 14,09 ± 8,53 por sessão de aspiração folicular. O número médio de oócitos Grau 1 (1,68 ± 1,59, 1,49 ± 1,57 e 1,35 ± 1,22 nos grupos I, II e III, respectivamente) e 2 (3,58 ± 3,06, 2,76 ± 2,41 e 3,26 ± 2,41 nos grupos I, II e III, respectivamente) foi semelhante entre os grupos experimentais (p>0,05). No entanto, o número médio de oócitos Grau 3 foi menor nos animais tratados com meloxicam, sendo de 5,39 ± 4,02 (p<0,05). O número de oócitos sem cumulus foi semelhante entre os grupos experimentais (p>0,05 - 3,03 ± 2,67, 2,65 ± 2,26 e 2,21 ± 2,66 nos grupos I, II e III, respectivamente), enquanto o número de oócitos atrésicos apresentou diferença somente entre os grupos tratados com anti-inflamatório, onde os animais tratados com meloxicam, apresentaram menor número médio de oócitos atrésicos (p<0,05 - 2,15 ± 2,23). Referências bibliográficas Malard, P.F. Coleta, maturação, fecundação e cultivo in vitro de ovócitos de bezerras da raça Nelore de 2-3 meses de idade. BH: UFMG, 2000. 47p. Dissertação (Mestrado) – UFMG, 2000. Seneda, M.M. et al. Situação atual da aspiração folicular e da fecundação in vitro. In: 2o Simpósio Internacional Reprodução Animal Aplicada, 2006, Londrina. p.172-180. Viana J.H.M. et al. Caracterização de seqüelas subseqüentes à punção folicular em bovinos. Pesq Vet Bras, v.23, n.3, p.119-124, 2003. Palavras-chave: bovino, OPU, flunixin meglumine, meloxicam Keywords: cattle, OPU, flunixin meglumine, meloxican.



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Utilização de etilenoglicol e dimetilformamida como crioprotetores na vitrificação de oócitos bovinos em diferentes momentos da maturação in vitro

Use of dimethylformamide and ethylene glycol as cryoprotectants in bovine oocytes vitrification at different times of in vitro maturation

A.T.M. Macedo, C.M.M. Oliveira1, J.D.R. Alves, M.B.S. Barros, N.M. Souza,

M.V. Azevedo, P.F. Lima

UFRPE, Recife, PE.

1E-mail: [email protected] Introdução O desenvolvimento de uma técnica de criopreservação viável para reprodução de oócitos caprinos e ovinos, utilizando como agentes crioprotetores Etilenoglicol (EG) e Dimetilformamida (DF) em associação é de muita valia para o avanço da biotécnica referida. Material e Métodos Os ovários foram transportados ao laboratório em garrafa térmica com solução fisiológica com adição de 30µg/mL de sulfato de gentamicina em temperatura variando de 28 a 30º C, em período máximo de uma hora. Os oócitos foram obtidos de folículos medindo de 2 a 6 mm de diâmetro, aspirados com uma seringa de 5mL e agulha 18G, a técnica de fatiamento (“slicing”) também foi empregada com objetivo de melhor aproveitamento dos oócitos. Os oócitos selecionados foram distribuídos em grupos experimentais: Grupo vitrificados imaturos à 0 hora (1G Vit 0h) - Composto por oócitos vitrificados imediatamente após a colheita. Foram aquecidos e após o período de equilíbrio, transferidos para placa de maturação e submetido aos processos de maturação e avaliação. Grupo exposto há 0 hora (1G Exp 0h) - Composto por oócitos que foram somente expostos aos crioprotetores imediatamente após a colheita e a seguir foram transferidos para a placa de aquecimento e após o período de equilíbrio transferido para placas de maturação e submetido aos processos de maturação e avaliação. Grupo vitrificados às 24 horas de MIV (1G Vit 24h) - Composto por oócitos vitrificados após o período de 24 horas de maturação in vitro. Após o aquecimento e período de equilíbrio os oócitos foram submetidos aos processos de avaliação. Grupos Expostos às 24 horas de MIV (1G Exp 24h) - Composto por oócitos que foram somente expostos aos crioprotetores após o período de 24 horas de maturação in vitro. Após a exposição os oócitos foram transferidos para placa de aquecimento e após o período de equilíbrio foram submetidos aos processos de avaliação. Resultados e Discussão Os resultados obtidos através da análise da morfologia nuclear dos oócitos pertencentes ao grupo vitrificado a 0h e vitrificado a 24h. A grande porcentagem de oócitos degenarados visualizados demonstra o fato da criopreservação aumentar taxas de degeneração a cultura. Já os maturados in vitro por 24 horas, tiveram suas organelas distribuídas mais nas porções centrais das células.

Referências bibliográficas Gonçalves PBD, Visintin JA, Oliveira MAL, Montagner MM, Costa LFS. Produção in vitro de Embriões. In: Gonçalves PBD, Figueiredo JR, Freitas VJF. Biotécnicas Aplicadas à Reprodução Animal. São Paulo: Varela Editora e Livraria Ltda. p. 195-226, 2002. Men H, Monson RL, Parrish JJ, Rutledge JJ. Degeneration of cryopreserved bovine oocytes via apoptosis during subsequent culture. Cryobiology, v.47, p.73-81, 2003. Palavras-chave: dimetilformamida, etilenoglicol, maturação, vitrificação, oócitos. Keywords: dimethylformamide, ethylene glycol, maturation, vitrification, oocytes.



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Protocolo de IATF com detecção de estro por 48 horas e GnRH em vacas azebuadas TAI protocol with 48 hours of estrus detection and GnRH in zebu cattle

D.C. Burgos1,2,5 , S. Oliveira Junior2, A.C.S. Sant`Ana2, A.A. Wicke2, A.H. Vidal1,

A.M. Fraga Junior1, J.L. Costa Junior3, A.K.S. Cavalcante4, G.F. Carneiro1

1PPGSRR-UAG/Clínica de Bovinos de Garanhuns,UFRPE, Garanhuns, PE; 2CRIAR–Salvador, BA; 3PPGGBC, UESB, Jequié, BA, 4UFRB, Cruz das Almas, BA


Introdução A Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF) é uma ferramenta que aumenta o desempenho reprodutivo, sendo mais importante que ganho de peso ou características de carcaça para a bovinocultura. Siqueira et al. (2008) compararam protocolo de IATF com observação de estro por dois dias associado ao uso de GnRH e IATF em vacas taurinas, obtendo aumento da eficiência reprodutiva. Objetivou-se avaliar se a observação do estro por dois dias associada à aplicação de GnRH e IATF seria mais eficaz do que protocolo de IATF em vacas zebuínas. Material e Métodos Cem vacas paridas foram sincronizadas com implantes de P4 e 2mg de BE. No D7 foi aplicado 12,5mg de PGF2α. No D9 foram retirados os implantes, realizada desmama por 54 horas e formados os seguintes grupos: G1 – 49 vacas – aplicou-se 0,8mg de ECP; G2 – 51 vacas – observou-se o estro 2 vezes por dia por 48 horas, e as vacas que o apresentaram foram inseminadas pelo modelo AM/PM. No D11 todas as vacas do G1 foram inseminadas e nas vacas do G2 que não apresentaram estro aplicou-se 25µg de GnRH e imediata inseminação. Após 45 dias diagnosticou-se as gestações e os resultados foram submetidos ao teste do qui-quadrado.

Resultados e Discussão As prenhezes nos grupos 1 e 2 foram 40,82% (20/49) e 45,10% (23/51) respectivamente, não existindo diferença entre os mesmos (P<0,05). A taxa de estro no G2 foi de 29,41% (15/51) contrastando com Sirqueira et. Al. (2008) que obteve uma taxa de 48,7% em vacas taurinas. Diferentemente de vacas de leite, o uso do GnRH para IATF como indutor da ovulação, ainda não está adequado para ser utilizado em vacas de corte, pois produzem resultados variados. Neste experimento as prenhezes do GnRH foram de 33.33% (12/36) que se vistos isoladamente foram relativamente baixas. Contudo, ao se realizar um período de 48h de detecção de estros anteriormente ao mesmo, torna-se uma ferramenta importante, capaz de proporcionar uma prenhez aceitável. Referências bibliográficas Siqueira LC, Oliveira JFC, Loguércio RS, Lof HK, Gonçalves PBD. Sistemas de inseminação em dois dias com observação de estro ou em tempo fixo para vacas de corte amamentando. Ciênc Rural, v. 38, n. 2, p. 411-415, 2008. Vasconcelos JLM, Meneghetti M, Santos RM. Inseminação artificial em tempo fixo (IATF) em bovinos. Acta Sci Vet, v.34, Supl.1, p.9-16, 2006. Palavras-chave: estro, GnRH, IATF, ovulação, sincronização. Keywords: estrus, GnRH, ovulation, synchronization, TAI.



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Soroprevalência da leptospirose em fêmeas bovinas da bacia leiteira de Parnaíba, PI Seroprevalence of Leptospirosis in dairy cattle in Parnaiba, PI

F.J.M. Aragão, R.J.Vieira, F.A. L. Souza, E.E.A. Beserra, M.S. Rizzo, J.S. Ferreira Neto,

F.A.L. Costa, A.L.B.B. Mineiro

Laboratório de Fisiopatologia da Reprodução, Universidade Federal do Piauí, Teresina, PI. E-mail: [email protected]

Introdução No Brasil, a soroprevalência da leptospirose em bovinos varia de 74% a 100% (LAGE et al., 2007). Entre as técnicas de diagnóstico baseadas na detecção de anticorpos, a prova de soroaglutinação microscópica (SAM) é o método considerado como prova padrão ouro. Tendo em vista a disseminação da leptospirose no rebanho brasileiro e os transtornos reprodutivos decorrentes desta doença, este trabalho tem como objetivo obter a soroprevalência da leptospirose em fêmeas bovinas na Bacia Leiteira de Parnaíba Piauí. Material e Métodos Foram coletadas 265 amostras de sangue de fêmeas bovinas, com idade igual ou superior a 24 meses, de nove municípios que compõem a bacia leiteira de Parnaíba (PI), no período de setembro de 2010 a março de 2011. O sangue foi centrifugado para a obtenção do soro e acondicionado em microtubos de 1,5 ml e, posteriormente, armazenado a – 20°C até a realização da prova de soroaglutinação. Resultados e discussão Das 265 amostras sorológicas de fêmeas bovinas, 126 (47,5%) foram reagentes à SAM para qualquer um dos 28 sorovares de Leptospira spp, com títulos variando entre 100 a 3200. O município de Piracuruca apresentou o maior número de animais reagentes (65%), seguido dos municípios Caraúbas (62,5%), Parnaíba (52%), Caxingó (45%), Murici dos Portelas (40%), Luís Correia (29%), Ilha Grande (25%). Dentre os animais reagentes 62 apresentaram reação para um único sorovar, sendo o de maior ocorrência o sorovar Hardjo (24/62), onde 06 animais apresentaram títulos de anticorpos para 100, enquanto 14 animais para 200 e 04 para 400. Os animais que reagiram ao sorovar Hardjo corresponderam a 38,70% (24/62), seguidos dos sorovares icterohaemorragiae com 14,52%, butembo com 12,90%, Grippotyphosa com 11,30%, Pomona com 9,68%, Australis com 4,84%, Autumnalis com 3,22% e Canícola com 1,61%. Este resultado foi inferior aos encontrados por Castro et al. (2008) no estado de São Paulo. Porém, a infecção por leptospira está presente em vacas com idade reprodutiva na bacia leiteira de Parnaíba (PI), sendo o sorovar Hardjo o mais prevalente na região. Referências bibliográficas Aguiar DM et al. Seroprevalence of Leptospira spp. in cattle from Monte Negro municipality western Amazon. Pesq Vet Bras, v.26, n.2, p.102-104 2006. Lage AP et al. Serology for Leptospira sp. In cattle of the State of Paraíba, Brazil. Arq Inst Biol São Paulo, v.74, n.3, p.185-190, 2007. Palavras-chave: leptospirose, SAM, vacas. Keywords:cattle, leptospirosis, MAT.



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Investigação da infecção transplacentária em bovinos inoculados com Neospora caninum

Transplacentary infection of cows inoculated with Neospora caninium

G.R. Pereira1,3, F.S.F. Vogel2, J.F.C. Oliveira1, P.B.D. Gonçalves1

1Laboratório de Biotecnologia e Reprodução Animal (BioRep), UFSM, RS; 2Laboratório de Doenças Parasitárias (Ladopar), UFSM, RS.

3Email: [email protected] Introdução A neosporose bovina tem sido considerada com uma das principais causas de aborto em bovinos em todo o mundo (Dubey et al., 1996). As conseqüências da infecção pelo Neospora caninum (N. caninum) em um rebanho bovino incluem importantes perdas reprodutivas que são caracterizadas por morte embrionária, com retorno ao cio em intervalo regular ou irregular, até o aumento das taxas de descarte do rebanho (Hall et al., 2005). No estado do Rio Grande do Sul, a presença do N. caninum demonstra percentuais de aborto próximos a 23% (Corbellini et al., 2002). O objetivo geral do projeto é determinar a patogenia da infecção transplacentária em fêmeas bovinas inoculadas com N. caninum. Material e Métodos Trinta vacas soronegativas ao protozoário N. caninum foram submetidos a um protocolo de IATF. Os animais foram previamente avaliados quanto a capacidade reprodutiva e aleatóriamente divididos em três grupos experimentais: G1: Animais (n=10) foram inoculados via endovenosa com N. caninum e após 60 dias foram submetidos ao protocolo de IATF; G2: Animais (n=10) foram inoculados 60 dias após a IATF; e G3: Animais (n=10) soronegativos foram submetidos a IATF. O diagnóstico de prenhez por ultra-som foi realizado aos 35 dias após a inseminação artificial. Taquizoítos da cepa NC-1 do N. caninum (1x107 taquizoito/ml) foram utilizados para inoculação nos animais. As amostras de soro sangüíneo foram coletadas dos animais a cada quinze dias após o inicio do experimento e a presença de anticorpos anti-N. caninum foi verificada através da técnica de imunofluorescência indireta (RIFI) para detecção de IgG e IgM contra o N. caninum. Aos 170 dias a gestação foi interrompida pela remoção do feto através de cesárea para a realização das análises do tecido fetais. As amostras foram submetidas a extração de DNA para avaliação quantitativa da presença do N. caninum através da abordagem de qRT-PCR com a utilização de uma sonda TaqMan desenhada a partir da sequência do gene Nc5 (GenBank: X84238). Resultados e Discussão A confirmação dos animais inoculados com N. caninum foi realizada através da soroconversão e todos os animais apresentaram títulos de anticorpos ≥100. As taxas de prenhez diagnosticadas ao 35 dias dos animais previamente inoculados (G1: 50% e G2: 70%) foram menores que o grupo controle (G3: 80%). Com esses resultados, sugerem que o N. caninum possa estar relacionado a perda embrionária no início da gestação conforme descrito na literatura (Dubey et al., 2003). A técnica de qRT-PCR foi padronizada para a detecção do DNA do parasita em tecidos coletados de camundongos infectados. As amostras do material coletado dos tecidos fetais estão sendo processados para detecção do DNA do protozoário nos tecidos bovinos. Com esses resultados parciais, podemos concluir que o N. caninum interferiu negativamente na gestação dos animais. Referências bibliográficas Dubey JP et al. A review of Neospora caninum and neosporosis. Vet Parasit, v.67, p.1-59, 1996. Dubey JP et al. Pathogenesis of bovine neosporosis. J Comp Path, v.134, p.267-289, 2006. Hall CA et al. Neospora abortions in dairy cattle: diagnosis, mode of transmission and control. Vet Parasitol, v.128, p.231-241, 2005. Corbellini LG et al. Neosporosis as a cause of abortion in dairy cattle in Rio Grande do Sul, southern Brazil. Vet Parasitol, v.103, p.195-202, 2002. Palavras-chave: biologia molecular, bovinos, Neospora caninum, perdas reprodutivas, qRT-PCR. Keywords: bovine, molecular biology, Neospora caninum, qRT-PCR, reproductive lost.



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Comparação de técnicas para avaliar citologia endometrial em bovinos após a inseminação artificial

Comparison of techniques to evaluate endometrial cytology in bovines post artificial insemination

H.E. Thomé1, B.M.M. Oliveira1, G.C. Oliveira1, M. Maturana Filho1, F.C. Pogliani2, M.R. Azedo2, R.P. Arruda1, E.C.C. Celeghini1,3

1Departamento de Reprodução Animal; 2Departamento de Clínica Médica, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia,

Universidade de São Paulo, São Paulo, SP. 3E-mail: [email protected]

Introdução A resposta inflamatória uterina após a inseminação artificial tem sido pouco estudada em bovinos, o que se deve à dificuldade da aplicação das técnicas para sua avaliação (Kasimanickam et al., 2005; Santos et al., 2009). Este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de comparar os métodos de avaliação da resposta inflamatória uterina por infusão de solução salina (IU) e por swab com escova ginecológica (SE), levando em consideração a execução da técnica, a quantidade e qualidade da amostra. Material e Métodos Utilizou-se 19 vacas da raça Nelore previamente avaliadas quanto às condições uterinas e ovarianas, inseminadas artificialmente após sincronização de estro e ovulação e divididas em 2 grupos de acordo com o método de colheita de amostra uterina para citologia 4 horas após IA: Grupo IU (n=10), vacas submetidas a infusão uterina de 60 mL de solução de cloreto de sódio a 0,9% e Grupo SE (n=9), vacas submetidas ao swab uterino por escova ginecológica, a qual foi lavada em 10 mL de solução fisiológica. O líquido recuperado de ambas as técnicas foi centrifugado e o sedimento colocado em lâmina por meio de citocentrífuga, utilizando 100 e 200 µL da amostra. As lâminas foram fixadas em metanol e coradas por Giemsa modificado. A avaliação citológica consistiu em leitura das lâminas com a contagem de 300 células nucleadas (endometriais e inflamatórias) em aumento de 400x determinando a porcentagem de células polimorfonucleares. Os dados foram submetidos à ANOVA utilizando o programa StatView. Resultados e Discussão Foi possível contar 300 células em 89% das amostras recuperadas por SE e 80% por IU; entretanto, nas amostras que não atingiram esse valor, em ambas as técnicas, contou-se no mínimo 100 células, sendo estas incluídas na porcentagem de células inflamatórias. Observou-se maior porcentagem (P<0,05) de células inflamatórias no material colhido por IU (13,89 ± 5,51%) do que por SE (1,46 ± 0,46%), resultados contraditórios aos de Kasimanickam et al. (2005). Em relação ao material recolhido por IU, todos os lavados resultaram na recuperação de líquido, o que diferencia de Kasimanickam et al. (2005); também constatou-se que o volume médio recuperado foi de 45 ± 9,4 mL, pode-se inferir que esse volume foi alto quando comparado com os resultados de Kasimanickam et al. (2005) e Santos et al. (2009). A IU é uma técnica de fácil execução, com boa recuperação do material introduzido, sua amostra é mais representativa de todo ambiente uterino e permite recuperar maior número de células inflamatórias, sendo preferível como método de colheita de material para avaliação da resposta inflamatória uterina em vacas. Referências bibliográficas Kasimanickam et al. Can Vet J, v.46, p. 255-259, 2005. Santos et al. Theriogenology, v.71, p.739-745, 2009. Palavras-chave: escova ginecológica, lavado uterino, endometrite. Keywords: cytobrush, uterine lavage, endometritis. Processo FAPESP: 09/50365-0



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Sazonalidade da temperatura retal e da taxa de concepção de vacas Jersey em lactação Seasonality of rectal temperature and conception rate in Jersey dairy cows

A.F. Ferreira, L.C. Carneiro, T.L. Campos, F.R. Souza, R.M. Santos1

Faculdade de Medicina Veterinária da Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução Um dos fatores de baixa fertilidade em vacas leiteiras é o estresse térmico, provocado por altas temperaturas, o que pode afetar qualidade dos ovócitos e dos embriões (Roth et al., 2001). Vacas Jersey possuem alta capacidade de adaptar-se a vários tipos de climas, o que favorece a eficiência reprodutiva desta raça. Objetivou-se avaliar o efeito da sazonalidade na temperatura retal (TR) e na taxa de concepção de vacas leiteiras da Jersey mantidas confinadas. Material e Métodos Foram analisadas 333 inseminações de vacas Jersey em lactação, pertencentes ao rebanho da Fazenda Capela Nova, Itaúna, Minas Gerais. O manejo reprodutivo foi feito a cada 30 dias. O rebanho foi submetido rotineiramente ao seguinte protocolo de inseminação artificial em tempo fixo: D0 - GnRH + CIDR – D7 – Lutalyse + remoção do CIDR – D8 – ECP – D11 – IATF. A aferição da TR foi realizada no momento da IA, com termômetro de mercúrio. O efeito da estação do ano sobre a TR no momento da IA foi analisado por análise de variância (SAS) e os efeitos da TR ajustada (acima ou abaixo da média) no momento da IA e da estação do ano da IA sobre a taxa de concepção foram analisados por regressão logística. Resultados e Discussão A TR média das vacas foi de 38,66°C. Foi detectado efeito (P <0,05) da TR ajustada na taxa de concepção, as vacas com TR > 38,66°C apresentaram taxa de concepção menor (32,52 vs. 43,31%) do que aquelas com TR < 38,66°C, o que está de acordo com Wolfenson et al. (2002), que afirmaram que altas temperaturas diminuem a taxa de concepção. Não foi detectado efeito da estação do ano sobre a TR, porém detectou-se tendência (P = 0,09) de efeito da estação do ano sobre a taxa de concepção (Outono/Inverno= 39,91% vs. Primavera/Verão =30,83%), o que também foi encontrado por Barbosa et al. (2011), que detectaram que vacas mestiças tiveram maior taxa de concepção nos meses de Outono/Inverno do que nos meses de Primavera/Verão. Conclui-se que fêmeas da raça Jersey em lactação com TR elevada apresentam menor taxa de concepção. Referências bibliográficas Barbosa CF, Jacomini JO, Diniz EG, et al. Inseminação ... Rev Bras Zootec ,v.40, n.1, p.79-84, 2011. Roth Z, Arav A, Bor A, et al. Improvement of quality … Reproduction, v.122, p.737-744, 2001. Wolfenson D, Roth Z, Meidan R. Impaired reproduction... Anim Reprod Sci, v.60-61, p.535-547, 2002. Palavras-chave: eficiência reprodutiva, estação do ano, inseminação, protocolo. Keywords: insemination, protocol, reproductive efficiency, season. Apoio FAPEMIG.



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Incidência de endometrite citológica em vacas leiteiras mestiças Cytological endometritis incidence in crossbred dairy cows

L.C. Carneiro, A.F. Ferreira, M.F.S. Pádua, N. Bortoletto, J.P.E. Saut, R.M. Santos1

Faculdade de Medicina Veterinária da Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução Endometrite é definida como uma inflamação do útero, que pode ser clínica ou subclínica (citológica) e que afeta o desempenho reprodutivo (Dubuc, 2010). A endometrite citológica representa um aumento na proporção de células polimorfonucleares em amostras de citologia endometrial obtidas pelo método de citobrush (Kasimanickam et al., 2004), ela causa infertilidade no momento em que há infecção uterina, e subfertilidade mesmo após a realização de tratamentos bem sucedidos (Sheldon, 2004). Sendo assim, o objetivo foi avaliar a incidência e fatores de risco para endometrite citológica em vacas leiteiras mestiças. Material e Métodos Utilizou-se 26 vacas primíparas e 100 multíparas de um rebanho com 480 vacas (Holandês/Gir 18,75 Kg de leite/dia) em lactação (DPP 48,18 ± 9,10). O escore de condição corporal (ECC) foi avaliado numa escala de 1 a 5, e foram submetidas a um exame ultrassonográfico para determinar a presença de corpo lúteo (CL) e fluido uterino. As amostras foram coletadas, com escova de cytobrush, somente nas vacas com muco vaginal claro ou translúcido e sem fluido uterino. A endometrite citológica foi definida quando a proporção de neutrófilos foi ≥ 5% no esfregaço do material uterino. Os resultados foram analisados por regressão logística incluindo-se no modelo estação do parto, ECC, presença de CL, número de lactações e DPP. Resultados e Discussão A incidência de endometrite citológica foi 25,40%, Dubuc et al. (2010) encontraram 18,7% de endometrite citológica em vacas Holandesas com 35 ± 3 DPP. Vacas paridas na primavera /verão apresentaram 34,04% de endometrite citológica, contra 20,25%, naquelas paridas no outono/inverno (P = 0,057), Kasimanickam et al. (2004), também não relataram efeito de estação do ano. Vacas com ECC ≤ 2,50 apresentaram maior incidência (31,25 vs. 15,22%, P < 0,05) do que aquelas com ECC ≥ 2,75, o que está de acordo com Dubuc et al. (2010) que relataram que vacas com menor ECC estão mais predispostas à endometrite citológica. Efeitos da presença do CL, paridade e dias em lactação não foram detectados. Vacas leiteiras mestiças apresentam endometrite citológica, sendo assim estudos adicionais são necessários para avaliar seus efeitos na eficiência reprodutiva das mesmas. Referências bibliográficas Dubuc J, Duffield TF, Leslie KE, Walton JS, Leblanc SJ. Risk factors for postpartum uterine diseases in dairy cows. J. Dairy Sci, v.93, p.5764-5771, 2010. Kasimanickam R, Duffied TF, Foster RA, et al. Endometrrial cytology and ultrasonography for the detection of subclinical endometrites in portpartum dairy cows. Therio, v.62, p.9-23, 2004. Sheldon IM, Dobson H. Postpartum uterine health in cattle. Anim Sci, v.82, p.295-306, 2004. Palavras-chave: infecção, lavado uterino, neutrófilo. Keywords: infection, uterine lavage, neutrophil. Apoio FAPEMIG - Projeto APQ 00402 – 09.



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Comparação do custo/benefício por prenhez de matrizes bovinas zebu, na monta natural e na inseminação artificial, no Brasil Central

Comparison of cost/benefit for pregnancy from zebu cows in natural mating and artificial insemination systems, in Central Brazil

T.G. Leite1, P.E.M. Gonçalves¹,4, V.J. Andrade¹, V.R. Vale Filho1, F.A. Souza2, J.A.M. Martins3,

L.L Emerick1, G.S. Moura1, P.F.B. Pinto1, G.P Moraes3, D.F. Norte1, F.A Barbosa1

¹E.V., UFMG, Belo Horizonte, MG/CNPq; - 2U.E. Maranhão, São Luís, MA/CAPES; 3U.F. Ceará, Fortaleza, CE/CAPES 4E-mail: [email protected]

Introdução A produção comercial de carne bovina a pasto é uma atividade econômica multivariável. Num mercado competitivo, produzir bem e a abaixo custo tornou-se indispensável para a sobrevivência do produtor. Nesse contexto, as novas tecnologias reprodutivas e as formas como elas vêm sendo empregadas nas propriedades rurais, mostra como a questão econômica tem peso na cadeia produtiva da carne. O objetivo do presente estudo foi comparar o custo/benefício por prenhez de matrizes bovinas zebu, na monta natural e na inseminação artificial.

Material e Métodos Para a avaliação dos custos por prenhez, utilizaram-se dados de uma única estação de monta de quatro meses (2010) de um rebanho com 1369 fêmeas em monta natural (MN) e 5352 em regime de inseminação artificial (IA), criadas extensivamente. Ao toque ao final da estação de monta registram-se taxas de prenhez, respectivamente, de 80,4%; 76,8%. Adotou-se o programa da EMBRAPA versão 2004.1 para avaliação do custo por prenhez (Martinez, 2004).

Resultados e Discussão O custo da prenhez da MN e da IA foi influenciado pela diferença esperada na progênie para o peso a desmama, pelo valor da dose de sêmen, bem como pelo valor genético e custo financeiro do touro, (Tab. 1 e 2).

Tabela 1. Custo por prenhez na MN, em função do preço do touro e da taxa de prenhez, para uma relação touro:vaca de 1:30, em 1369 matrizes.

Custo do Taxa de prenhez (R$) touro 50% 60% 70% 80% 80,4% 90%

R$ 1.100,00 9,34* R$ 2.000,00 29,26 24,39 20,9 18,29 16,26 R$ 3.000,00 45,09 37,58 32,21 28,18 25,05 R$ 4.000,00 60,92 50,76 43,51 38,07 33,84 R$ 5.000,00s 76,74 63,95 54,82 47,96 42,63

*Custo da prenhez registrado no presente estudo, para um touro no valor de R$ 1100,00 e taxa de prenhez de 80,4%.

Tabela 2. Custo por prenhez da IA, em função do preço da dose de sêmen (touros com DEP positiva) e da taxa de prenhez, em um rebanho com 5352 matrizes.

Custo da Taxa de prenhez (R$) dose sêmen 50% 60% 70% 76.8% 80% 90% R$ 5,00** 14,57 12,14 10,41 9,11 8,09

R$ 10,00** 24,57 20,48 17,55 15,36 13,65 R$ 13,70** 20,81* R$ 15,00** 34,57 28,81 24,69 21,61 19,21 R$ 20,00** 44,57 37,14 31,84 27,86 24,76

*Custo da prenhez registrado no presente estudo. ** Valor do sêmen variável com o valor das DEP

Observou-se custo por prenhez 2,23 vezes maior para a IA em relação à MN. Este custo não reflete a viabilidade econômica do sistema, uma vez que a IA utilizou-se de sêmen de touros com DEP positiva para peso a desmama, com maior valor agregado no peso de abate. Concluiu-se que qualquer decisão em relação ao processo econômico e produtivo, exige uma análise prévia do sistema de produção como um todo e não apenas de um único índice zootécnico.

Referências bibliográficas Martinez ML et al. Cálculo do custo da monta natural e da inseminação artificial. Versão 2004.1. Juiz de Fora, MG: Embrapa, 2004. 28p. (no. 101).

Palavras-chave: inseminação artificial, estação de monta, custo por prenhes, Zebu. Keywords: artificial insemination, breeding season, cost for pregnancy, Zebu.



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Substituição do farelo de soja pelo farelo de algodão de alta energia sobre estresse oxidativo folicular em vacas leiteiras

Replacement of soybean meal for high energy cottonseed meal follicular oxidative stress dairy cows

A.C.S. Souza, L.K. Hatamoto-Zervoudakis, P.N. Cosentino, P.H.D. Gomes, F.M. Wingert, L.M. Thiesen, P.P. Tsuneda, M.F. Duarte Junior

Universidade Federal de Mato Grosso (UFMT), Cuiabá, MT.

E-mail: [email protected] Introdução O desempenho reprodutivo de vacas leiteiras é afetado diretamente pela dieta. Recentemente tem-se utilizado o farelo de algodão como fonte de proteína alternativa com alta energia e de menor custo que o farelo de soja. O trabalho foi desenvolvido a fim de avaliar a influencia da substituição do farelo de soja pelo farelo de algodão de alta energia sobre o nível de estresse oxidativo folicular em vacas leiteiras.

Material e Métodos Foram utilizadas cinco vacas girolandas (5/8), com peso vivo médio de 530 Kg, estágio médio de lactação e produção média de 14 Kg de leite/dia. Elas receberam a silagem de soja na proporção volumoso:concentrado 60:40. O concentrado foi formulado com diferentes níveis de substituição do farelo de soja pelo farelo de algodão (FS - 0%, FA15 - 15%, FA30 - 30%, FA45 - 45%, FA60 - 60%,). As dietas experimentais eram isoprotéicas e foram fornecidas aos animais por 18 dias, sendo então realizada a aspiração folicular para coleta de líquido folicular. A avaliação do estreses oxidativo se deu através da mensuração das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS).O experimento foi delineado em quadrado latino e os tratamentos comparados através do SNK com α de 10%. Resultados e Discussão Não houve efeito (p>0,10) da substituição da proteína da soja pela proteína do farelo de algodão de alta energia sobre o nível de estresse oxidativo folicular. Estes resultados indicam que a substituição do farelo de soja pelo farelo de algodão para vacas Girolanda em terço médio de lactação pode ser realizada sem que haja alteração do nível de estresse oxidativo. Referências bibliográficas Allen MS. Effects of diet on short-term regulation of feed intake by lactating dairy cattle. J Dairy Sci, v.83, p.1598-1624, 2000. Britt JS, Thomas RC, Speer NC, Hall MB. Efficiency of converting nutrient dry matter to milk in Holstein herds. J Dairy Sci, v.86, p.3796-3801, 2003. Palavras-chave: nutrição,estresse oxidativo, fontes de proteína. Keywords: nutricion, oxidative stress, protein sources.



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Avaliação de marcadores moleculares em características reprodutivas de bovinos da raça Nelore

Molecular markers evaluation in reproductive traits in Nellore cattle

J.C.C. Balieiro1,3, J.P. Eler1, L.L. Coutinho2, E.C. Mattos1, R.C.G. Silva1, D.C. Cucco1

1Departamento de Ciências Básicas, FZEA/USP, Pirassununga, SP; 2Departamento de Zootecnia, ESALQ/USP, Piracicaba, SP.

3E-mail: [email protected] Introdução Em relação às características reprodutivas em bovinos de corte, as restrições atribuídas à raça Nelore têm duas origens: (i) os baixos índices reprodutivos observados a campo, quando comparados às raças taurinas, principalmente relacionado à precocidade sexual; e, (ii) o estigma de que as características reprodutivas são de baixa herdabilidade. Estudos recentes mostram que a seleção assistida por marcadores (SAM) possui grande potencial para melhorar características de baixas herdabilidades, como é o caso das características reprodutivas. Entretanto, há poucos relatos avaliando o potencial de utilização de marcadores moleculares para características reprodutivas. Pelo exposto, o objetivo geral deste trabalho foi avaliar alguns polimorfismos em 11 marcadores, possivelmente relacionados às características reprodutivas em bovinos de corte da raça Nelore. Material e Métodos Os dados utilizados neste trabalho foram obtidos junto ao à Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos da Universidade de São Paulo (FZEA/USP), Pirassununga, SP. As características reprodutivas analisadas referem-se aos valores gaméticos diretos (DEPs) para prenhês aos 14 meses de idade (DEPP14, N=2.466 animais) e para habilidade de permanência da fêmea (Stayability- DEPSTY, N=2.290 animais) até seis anos. Para obtenção dos valores gaméticos diretos DEPP14 e DEPSTY, as análises consideram ambas variáveis categóricas (1=sucesso ou 0=fracasso), sob um modelo animal e as predições dos valores genéticos foram obtidas usando um modelo limiar de probabilidade máxima a posteriori, numa escala genética subjacente. Os 11 marcadores avaliados neste trabalho foram previamente escolhidos em virtude dos relatos de alguns autores, com destaque para SHERMAN et al. (2008). Os valores gaméticos aditivos diretos foram variáveis dependentes e os genótipos para os diferentes marcadores foram avaliados como variáveis independentes. Todas as análises foram realizadas com auxílio do programa Statistical Analysis System, versão 9.1.3. Resultados e Discussão As análises simultâneas envolvendo múltiplos marcadores moleculares nos estudos de associação com os valores gaméticos aditivos, permitem a verificação da importância de marcadores dentro da fração poligênica da característica. Nove marcadores apresentaram resultados significativos para DEPP14 e seis marcadores segregaram significativamente para DEPSTY. Estimativas de correlação entre os efeitos dos marcadores e os méritos gaméticos aditivos nos diferentes genótipos encontrados foram 0,3131 e 0,3873, para DEPP14 e DEPSTY, respectivamente. Este fato sugere que os marcadores não fazem parte da porção poligênica aditiva das características DEPP14 e DEPSTY. Neste caso, a inclusão destes marcadores, via seleção assistida, poderá melhorar as predições de DEPP14 e DEPSTY. Referências bibliográficas Sherman EL. et al. Polymorphisms and haplotypes in the bovine neuropeptide Y, growth hormone receptor, ghrelin, insulin-like growth factor 2, and uncoupling proteins 2 and 3 genes and their associations with measures of growth, performance, feed efficiency, and carcass merit in beef cattle. J Anim Sci, v.86, p.1-16, 2008.

Palavras-chave: eficiência reprodutiva, gado de corte, longevidade, marcadores SNP. Keywords: beef cattle, breeding efficiency, longevity, SNP markers.



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Avaliação da viabilidade do espermatozóide bovino pós-descongelamento: Nelore Assessment of bovine sperm viability post-thawing: Nellore

L.A. Teixeira1, R.F .Barros1, C.P. Barbosa1, L.G. Deragon2, A.B. Vasconcelos1

1Universidade de Uberaba, Uberaba, MG; 2,3Central de Reprodução Alta Genetics


Introdução A criopreservação de sêmen é um importante instrumento de preservação de material genético de bons reprodutores de várias espécies. Alguns estudos têm sido realizados no intuito de melhorar a qualidade do sêmen bovino, resfriado e congelado, por meio da compreensão das injúrias presentes na membrana plasmática e acrossomal (Moc´e e Graham, 2008). O objetivo do trabalho foi avaliar as estruturas, membrana plasmática e acrossomal do espermatozóide bovino, da raça Nelore após o congelamento utilizando a microscopia de campo claro e fluorescência. Material e Métodos Foram utilizados dois ejaculados de cada 14 bovinos da raça nelore. A motilidade total, progressiva , vigor e o teste de integridade e funcionalidade de membrana foram avaliadas através de microscopia de campo claro pré e pós-congelamento. Para o teste de integridade da membrana plasmática foi comparado o corante eosina versus o corante diacetato de carboxifluoresceína. Para a integridade do acrossoma o corante PNA-FITC. Estes protocolos foram descritos por Vasconcelos e al. (2010). A analise estatística foi realizada entre as médias dos valores e comparada pelo teste Student-Newman-Keuls (SNK) (P < 0,001). Resultados e Discussão Foi realizada a avaliação das médias entre o sêmen pré e pós-congelamento: motilidade progressiva (64,28 vs 32,14%, P < 0,001); vigor espermático (4,64 vs 3,21, P < 0,001); teste de integridade de membrana com o corante eosina (85,85 vs 66,21%, P < 0,001) e o teste de funcionalidade de membrana (64,92 vs 38,07%, P < 0,001). Os valores para os corantes fluorescentes, diacetato de carboxifluoresceína (63,64%) e PNA-FITC (74,14%) foram obtidos somente com o sêmen descongelado. Dentro dos parâmetros de avaliação da integridade da membrana plasmática para a avaliação pós-descongelamento, os resultados com o corante eosina não apresentaram diferença estatística (P > 0,001) quando comparados com o corante diacetato de carboxifluoresceína (66,21 vs 63,64%). A queda na motilidade espermática, na integridade de membrana plasmática e acrossomal dos animais sugerem o efeito da criogenia sobre as células espermáticas. Todavia os parâmetros de motilidade progressiva (32,14%) e vigor (3,21) estão dentro dos valores estabelecidos pelo CBRA (1998), que são de ≥30% e ≥3, respectivamente. Por outro lado não há parâmetros estabelecidos para os valores de referência para a integridade e funcionalidade da membrana plasmática e da integridade do acrossoma. Este trabalho possibilita discussões e instiga novas pesquisas, a fim de se estabelecer critérios auxiliares para determinação da qualidade do sêmen pós-congelamento. Referências bibliográficas Manual para exame andrológico e avaliação de sêmen animal. Belo Horizonte, MG: CBRA, 1998. Moc´e E, Graham JK. In vitro evaluation of sperm quality. Anim Reprod Sci, v.105, p.104-118, 2008. Vasconcelos AB, Martins-Filho OA, Santoro MM, Oliveira CH, Varago FC, Xavier M, Lagares ML. Addition of Serine protease inhibitors on equine sperm extender during cooling and freezing. Pferdeheilkunde, v.26, p.701-705, 2010. Palavras-chaves: bovino, descongelamento,espermatozóide. Keywords: bovine, spermatozoa, thawing.



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Efeito da raça na produção in vitro de embriões bovinos Effect of breed on bovine embryos in vitro production

A.P.T.B. Silva1,3, R.R.C. Mello1, J.E. Ferreira1, L.M. Mascarenhas1, B.J.F. Silva1, B.O. Cardoso1,

S.T. Camargo Filho2, M.R.B. Mello1

1Instituto de Zootecnia, UFRRJ, Seropédica, RJ; 2PESAGRO, Seropédica, RJ. 3E-mail: [email protected]

Introdução O desenvolvimento e a utilização de biotécnicas da reprodução animal são condições indispensáveis para o aumento da eficiência reprodutiva dos rebanhos. A Produção in vitro de embrião (PIV) vem sendo largamente utilizada para estudos da fisiologia da maturação e fecundação dos oócitos, capacitação espermática e cultivo de embriões, entre outras. Existem particularidades reprodutivas entre animais de diferentes grupos genéticos que devem ser levadas em consideração quando do emprego das biotécnicas reprodutivas como, por exemplo, o número de folículos recrutados (Baruselli et al, 2007). Portanto, o objetivo do presente estudo foi comparar o efeito da raça de doadoras de oócitos sobre a PIV de embriões bovinos. Material e Métodos Foram utilizados dados de oócitos aspirados de doadoras das raças Holandesa (Bos Taurus Taurus) e Gir (Bos Taurus Indicus) obtidos após 2.022 e 887 aspirações, respectivamente. Foram comparadas a média de estruturas aspiradas por doadora e a qualidade dos oócitos entre as raças. As aspirações foliculares foram realizadas em doadoras de diversas propriedades do estado do Rio de Janeiro, mantidas em diferentes condições de manejo. Estes dados foram disponibilizados pela empresa In Vitro Brasil - Rio, localizada no município de Barra do Piraí - RJ. Os parâmetros estudados entre as raças foram analisados pelo teste ANOVA e a comparação de médias pelo teste de Tukey com nível de significância de 5%.

Resultados e Discussão O número médio de estruturas aspiradas por doadora e a porcentagem de oócitos viáveis foram de 16,26 e 60,20%; 15,49 e 61,95%, respectivamente para as raças Holandesa e Gir. A porcentagem de oócitos maturados in vitro que se desenvolveram até o estágio de blastocisto foi de 21,64 e 20,27% respectivamente para as raças Holandesa e Gir. Não houve diferença estatística (p<0,05) para nenhum dos parâmetros avaliados. Estes resultados diferem dos de Abraham et al (2010) que observaram diferença significativa para o desenvolvimento a blastocisto de oócitos proveninetes de doadoras de raças distintas, evidenciando que a raça das doadoras de oócitos influencia o desenvolvimento durante a PIV de embriões. Portanto, conclui-se que, neste estudo, não houve efeito do genótipo sobre a produção in vitro de embriões. Referências bibliográficas Abraham MC, Ruete A, Brandt YCB. Breed influences outcome of in vitro production of embryos in cattle. Reprod, Fertil Dev, v.22, n.1, p. 287, 2010. Baruselli PS, Gimenes LU, Sales JS. Fisiologia reprodutiva de fêmeas taurinas e zebuínas. Rev Bras Reprod Anim, v.31, n.2, p.205-211, 2007. Palavras-chave: aspiração folicular, FIV, oócitos, raça. Keywords: breed, IVF, oocytes, ovum pick up.



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Influência do período de estocagem do meio de maturação in vitro sobre as taxas de clivagem e produção de blastocistos bovinos

Influence of in vitro maturation medium storage period under bovine blastocysts cleavage and production rates

M.C. Martins1, B.G. Alves, T.H. Silva, L.S. Braga, K.A. Alves, B.G. Alves, R.M. Santos, J.O. Jacomini, M.E. Beletti

Laboratório de Reprodução Animal/Faculdade de Medicina Veterinária, UFU, Uberlândia, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução Em sistemas de produção in vitro de embriões (PIV) são vários os fatores que podem influenciar as taxas de clivagem e formação de blastocistos. Dentre eles a produção regular de meios pode padronizar as rotinas e os resultados obtidos, já que estas formulações são complexas, laboriosas e compostas por proteínas e hormônios facilmente degradados (Bavister et al., 1992). Objetivou-se neste estudo avaliar a viabilidade de meios de maturação in vitro (MIV) estocados e refrigerados em diferentes períodos sobre os índices de clivagem e formação de blastocistos. Material e Métodos Complexos cumulus ovócito (CCO) (n=536) aspirados de ovários bovinos, selecionados sob TCM-199 foram distribuídos em 2 grupos, a saber: G10, meio MIV estocado a 4°C e utilizado até 10 dias após sua manipulação; G15, meio MIV estocado a 4°C e utilizado a partir de 15 dias de sua manipulação. Em seguida, foram maturados em estufa de CO2 a 5% e temperatura de 39°C com umidade saturada durante 22 horas e depois fertilizados in vitro (FIV) por 18 horas em meio TALP-FERT. Logo após os supostos zigotos foram desnudados e transferidos para o fluido sintético de tuba uterina (SOF) e cultivados durante 8 dias. As taxas de clivagem e produção de blastocistos foram determinadas 48 (D2) e 216 horas (D9) após a FIV, respectivamente. Resultados e Discussão Taxas de clivagem e produção de blastocistos bovinos produzidos in vitro de acordo com o tempo de estocagem do meio de maturação (MIV).

Tratamentos CCO (n) % Clivados* % BL/BX/BE* % BL/BX/BE** G10 327 66,3 (217/327) a 18,3 (60/327) a 27,6 (60/217) a G15 209 43,0 (90/209) b 6,7 (14/209) b 1,5 (14/90) a

Letras diferentes na mesma coluna indicam diferença estatística; *Calculado sobre o total de CCO maturados (P < 0,05); **Porcentagem de blastocistos (BL), blastocistos expandidos (BX) e blastocistos eclodidos (BE) em D9 calculado sobre o total de estruturas clivadas (P < 0,05). Teste Qui-quadrado. O meio MIV quando utilizado até 10 dias de sua manipulação proporcionou resultados superiores quanto às taxas de clivagem e formação de blastocistos. Referências bibliográficas Bavister BD, Rose-Hellekant TA, Pinyopummintr T. Development of in vitro mature/in vitro fertilized bovine embryos into morulae and blastocysts in defined culture media. Theriogenology, v.37, p.127-146, 1992. Palavras-chave: Meio de maturação, PIV, bovinos, hormônios, validade. Keywords: Maturation medium, IVP, cattle, hormones, validity. Agradecimentos: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais – FAPEMIG..



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Efeito da substituição parcial de fluido sintético de tuba uterina (SOF) sobre a produção in vitro de blastocistos bovinos

Effect of partial replacement of synthetic oviductal fluid (SOF) under in vitro production of bovine blastocistys

B.G. Alves1, T.H. Silva, B.G. Alves, M.C. Martins, L.S. Braga, K.A. Alves, R.M. Santos, M.E. Beletti, J.O. Jacomini

Laboratório de Reprodução Animal, Faculdade de Medicina Veterinária, UFU, Uberlândia, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução O desenvolvimento embrionário in vitro pós-fertilização é uma etapa essencial que depende de um ambiente adequado para o início da clivagem até a fase de blastocisto. Tais condições apropriadas proveem de meios de cultivo específicos que por sua vez podem ser alterados pela presença de substâncias (acetato e a amônia) produzidas pelo metabolismo celular (Nicolas e Henry, 2004). Objetivou-se nesse estudo avaliar o efeito da troca parcial de fluido sintético de tuba uterina (SOF), em diferentes períodos, sobre a produção in vitro de blastocistos bovinos. Material e Métodos Complexos cumulus ovócito (CCO) (n=304) foram aspirados de ovários bovinos, selecionados em TCM-199 e maturados em meio MIV por 22 horas em estufa de CO2 a 5% e temperatura de 39°C com umidade saturada. Logo após, os CCO foram incubados com espermatozoides por 18 horas em meio TALP-FERT. Em seguida, os supostos zigotos foram desnudados e divididos em 4 tratamentos, em relação à reposição de 80% do meio SOF após a fertilização in vitro (FIV), a saber: Controle; G96 (reposição após 96 h); G96/144 (reposições às 96 e 144 h) e G144 (reposição às 144 h). Os dados referentes à produção de blastocistos (BL), blastocistos expandidos (BX) e blastocistos eclodidos (BE) foram avaliados pelo teste Qui-quadrado (P<0,05).

Resultados e Discussão Tabela 1. Efeito da troca de SOF sobre a porcentagem de blastocistos bovinos produzidos in vitro. Tratamentos

CCO (n)

% Clivados*

% BL/BX*

D7 % BE**

D9 % BE***

D9 Controle 78 71,7 (56/78) 21,8 (17/78) 7,1 (4/56) a 23,5 (4/17) a

G96 82 43,9 (36/82) 23,1 (19/82) 11,1 (4/36) ab 21,0 (4/19) a G96/144 60 75,0 (45/60) 23,3 (14/60) 24,4 (11/45) b 78,6 (11/14) b

G144 84 72,6 (61/84) 15,4 (13/84) 0 (0/61) c 0 (0/13) c Letras diferentes na mesma coluna indicam diferença estatística; *Calculado sobre o total de CCO maturados (P > 0,05); **Taxa de eclosão em D9 calculada sobre o total de estruturas clivadas (P < 0,05); ***Taxa de eclosão em D9 calculada sobre o total de blastocistos (P<0,05). D7 e D9=168 e 216 horas após a FIV, respectivamente. Não houve efeito da reposição de SOF sobre a produção de blastocistos, no entanto quando as trocas foram realizadas 96 e 144 horas após a FIV ocorreram maiores taxas de eclosão. Referências bibliográficas Nicolas MO, Henry JL. Ammonium exposure and pyruvate affect the amino acid metabolism of bovine blastocysts in vitro. Reproduction, v.127, p.131-140, 2004. Palavras-chave: bovinos, embriões, meio de cultura, PIV, substituição. Keywords: bovine, culture medium, embryos, IVP, replacement. Agradecimentos: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais – FAPEMIG.



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Detecção de estro em reprodutrizes Nelore com o uso de rufiões com buçal marcador Estrus detection in Nelore cows using teasers with chin-ball

C.A. Mota1, P.R. Xavier, V.S. Marques, A.P. Marques Junior

Departamento de Clínica e Cirurgia, Escola de Veterinária, UFMG, Belo Horizonte, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução O manejo reprodutivo animal é essencial para o sucesso da bovinocultura e objetiva utilizar técnicas economicamente viáveis que aperfeiçoem o desempenho reprodutivo e produtivo do rebanho (Marques, 2004). Buscou-se avaliar a utilização de rufiões, com buçal marcador, como auxiliar na observação de estro, com ênfase na identificação de estros noturnos, ou de ocorrência no intervalo de observações pelo inseminador, na busca de maior número de animais inseminados ao final da estação de monta. Material e Métodos: Utilizou-se 382 reprodutrizes (87 novilhas, 127 vacas solteiras e 168 vacas amamentando), de um rebanho comercial com inseminação artificial e estação de monta. As reprodutrizes identificadas com o dorso marcado pelo buçal marcador, mas sem observação de receptividade sexual (SRS) pelo inseminador, eram logo inseminadas ao serem levadas ao curral. As reprodutrizes marcadas, porém com receptividade sexual (CRS) eram levadas ao curral e inseminadas ao término da receptividade. A Tab.1 mostra o percentual de estros detectados, com e sem receptividade sexual observada, por categoria animal. Resultados e Discussão: Tabela 1. Percentual de animais detectados em estro, segundo a receptividade sexual e por categoria, em um rebanho Nelore comercial, incluindo animais marcados pelo rufião, sem receptividade sexual (SRS) e com receptividade sexual (CRS).

Categoria Animais detectados SRS CRS Novilhas 72 16,67%Aa (12/72) 83,33%Ab (60/72)

Vacas solteiras 114 28,07%Aa (32/114) 71,93%Ab (82/114) Vacas amamentando 85 29,41%Aa (25/85) 70,59%Ab (60/85) Total 271 25,46%a (69/271) 74,54%b (202/271)

Valores seguidos por letras maiúsculas semelhantes na mesma coluna não diferem (P > 0,05). Valores seguidos por letras minúsculas diferentes na mesma linha diferem (P < 0,05). Adaptado de Marques, 2004. Dos 271 animais com estro identificado, 72 (26,57%) eram novilhas, 114 (42,07%) vacas solteiras e 85 (31,36%) vacas amamentando. O percentual de animais SRS e de CRS foi diferente (P < 0,05) entre os grupos. O percentual de animais CRS foi maior (P < 0,05) nas três categorias, quando comparado aos SRS. A avaliação econômica ao final da estação de monta, mostrou que 25,46% de estros SRS identificados representaram ganho significativo, decorrente apenas da eficiente identificação e inseminação dos animais SRS, com baixo investimento e a mesma mão de obra, justificando sua adoção em programas de inseminação artificial em rebanhos de corte comerciais. Referência bibliográfica Marques VS. Detecção de estro em reprodutrizes nelore com o uso de rufiões com buçal marcador. 2004. 86f. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) – Escola de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, 2004. Palavras-chave: detecção estro, rufiões, bucal marcador, vaca Nelore. Keywords: chin-ball, estrus detection, Nelore cow, teasers.



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IATF com sêmen resfriado a 5ºC e sêmen congelado a -196ºC em novilhas da raça Nelore

FTAI using refrigerated semen at 5ºC and frozen semen at -196ºC in Nelore heifers A.S. Fujita¹,4, F.V.N. Greselle¹, L.F. Frares¹, R.R. Weiss¹, L.E. Kozicki³, J.A. Dell’Aqua Júnior³

¹Universidade Federal do Paraná, Curitiba, PR; ²Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, PR; ³Universidade

Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho 4E-mail: [email protected]

Introdução O objetivo do uso de biotécnicas reprodutivas como a Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF) no manejo de fazendas comerciais é o aumento da eficiência na produção de bezerros e maior sincronia entre os partos. A IA com sêmen congelado é a mais utilizada atualmente, e resulta em taxas medianas de prenhez. O sêmen resfriado seria uma alternativa para melhores resultados, pois ocorrem menores danos aos espermatozoides em comparação à criopreservação. Material e Métodos Foram utilizadas 96 novilhas da raça Nelore com escores corporais entre 2,5 e 4,0 e ovários funcionais, divididas aleatoriamente em dois grupos: G1 (47 novilhas) e G2 (49 novilhas). As fêmeas foram sincronizadas para a IATF de acordo com o seguinte protocolo: Dia 0 = aplicação de implante auricular CRESTAR® + aplicação de 2 mg de benzoato de estradiol; Dia 8 = retirada do implante + aplicação de 1,5 mg de prostaglandina + aplicação de eCG 300 UI; D10 = aplicação de 100 μg de acetato de deslorelina; D11 = IA. Todas foram inseminadas com o sêmen de um único touro; no grupo G1 foi utilizado sêmen resfriado a 5ºC, e no grupo G2 sêmen congelado a -196ºC. As palhetas de sêmen obedeciam aos padrões mínimos de qualidade sugeridos pelo Colégio Brasileiro de Reprodução Animal (CBRA, 1998). As taxas de concepção foram analisadas após 28 dias da inseminação. Resultados e Discussão As avaliações das palhetas após reaquecimento a 36ºC foram: sêmen resfriado com motilidade progressiva de 85% e vigor 4; sêmen congelado com motilidade progressiva de 50% e vigor 3. O total de novilhas prenhes foi de 46 animais, ou 47,92%, que é um número similar ao observado por outros autores (Sá Filho et al., 2010). O grupo G1 apresentou 23 prenhezes, ou seja, 48,94%, e o grupo G2 apresentou 23 prenhezes, sendo assim 46,94%, não havendo diferença estatística significativa entre os grupos (P>0,05). Outros estudos ainda são necessários para avaliar a eficiência dos protocolos de IATF em novilhas zebuínas. Referências bibliográficas Manual para Exame Andrológico e Avaliação do Sêmen Animal. 2. ed. Belo Horizonte: Colégio Brasileiro de Reprodução Animal, 1998. 49 p. Sá Filho MF, Marques MO, Baruselli PS. Indução de ciclicidade e IATF em novilhas zebuínas. Biotecnologia da Reprodução em Bovinos (4º Simpósio Internacional de Reprodução Animal Aplicada), Londrina, p.79-100, 2010. Palavras-chave: bovinos, deslorelina, IATF, sêmen. Keywords: cattle, deslorelin, FTAI, semen.



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Taxa de gestação de fêmeas Nelore inseminadas com sêmen sexado macho Pregnant rate of Nelore cattle using sexed semen

J.H.E. Dominguez1,3, D.S. Costa1, V.C. Jojot2, F.J.C. Faria1

1Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, Campo Grande, MS; 2Grupo Goya S.A., Paraguai.

3E-mail: [email protected] Introdução A comercialização de sêmen sexado tem alavancado a indústria de inseminação artificial em todo mundo, devido aos inúmeros benefícios que a escolha do sexo do bezerro traz para a pecuária. Objetivou-se com esta pesquisa avaliar a taxa de gestação de fêmeas Nelore inseminadas com sêmen sexado macho e com sêmen convencional dos mesmos touros. Material e Métodos Utilizaram-se 663 animais da raça Nelore, sendo 433 novilhas de dois anos de idade e 230 vacas adultas sem bezerro ao pé. O escore corporal médio dos animais foi de 3,5 (escala de 1-5). Aplicaram-se 2,0mL intramuscular (IM) de PGF2α para sincronização do cio. Utilizaram -se sêmen convencional e sexado macho de três touros Nelore (A, B e C). O diagnóstico de gestação foi feito por US 35 dias após a IA.

Resultados e Discussão Tabela 1. Percentual de gestação de fêmeas da raça Nelore inseminadas com sêmen convencional e sexado macho. Animais Fazenda 1 Fazenda 2 Fêmeas IA com sêmen sexado do touro A 41,50% (39/94)a - Fêmeas IA com sêmen convencional do touro A 61,73% (50/81)b - Fêmeas IA com sêmen sexado do touro B - 36,21%(41/114)a

Fêmeas IA com sêmen convencional do touro B - 61,40%(71/116)b

Fêmeas IA com sêmen sexado do touro C - 39,06%(51/130)a

Fêmeas IA com sêmen convencional do touro C - 52,30%(67/128)b

Médias acompanhadas pela mesma letra na coluna, não diferiram estatisticamente (P>0,05) pelo teste de Qui-Quadrado. A taxa total de gestação das fêmeas inseminadas com sêmen sexado macho dos touros A, B e C foi de 38,76% (131/338), valor inferior ( P< 0, 0001) à taxa total de gestação observada nas fêmeas inseminadas com sêmen convencional dos mesmos touros que foi de 57,85% (188/325). Esses resultados foram semelhantes ao relatado para raças européias (Dejarnette et al., 2008). A taxa de prenhez das vacas sem bezerro ao pé inseminadas com sêmen sexado macho foi 43,3% (49/113), valor semelhante (P ≥ 0,05) ao encontrado em novilhas que utilizaram sêmen sexado dos mesmos touros, 36,4% (82/225). Conclui-se que a taxa de prenhez do sêmen sexado macho foi menor que a do sêmen convencional, e que não há diferença significativa entre a taxa de prenhez entre novilhas e vacas sem bezerro ao pé.

Referências bibliográficas Dejarnette et al. Effect of sex-sorted sperm dosage on conception rates in holtein heiferes and lacting cows. J Dairy Sci, v.91, p.1779-1785, 2008. Palavras-chave: inseminação artificial, novilha, sêmen sexado, vacas sem bezerro ao pé. Keywords: artificial insemination, cows without calf, heifers, sexed semen.



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Influência da estação no cortisol e testosterona em touros Nelore e Simental Season influence on cortisol and testosterone in Nelore and Simental bulls

K.T. Mizusaki1,6, A.G. de Cesare2, F.H. Santos2, M.G.M. Chacur3, E. Oba4, L.R.A. Gabriel Filho5

1Mestrando em Ciência Animal – Universidade do Oeste Paulista (UNOESTE), Presidente Prudente - SP/Brasil. 2Médicos

Veterinários; 3Lab. Reprodução Animal – UNOESTE; 4 Depto. Reprodução Animal (FMVZ-UNESP); 5CET/UNESP, 6E-mail: [email protected]

Introdução A maioria dos reprodutores bovinos é criada extensivamente, sofrendo influência das estações do ano na produção hormonal. O eixo hipotálamo-hipófise-adrenal controla a resposta neuroendócrina durante o estado de estresse, com influência nos níveis séricos de cortisol e testosterona, fundamental para a adaptação do animal ao meio ambiente (Charmandari et al., 2005). Material e Métodos Foram utilizados touros das raças Nelore (n = 5) e Simental (n = 5), com idades entre 48 e 72 meses, criados extensivamente. O experimento foi realizado no período de setembro de 2008 a agosto de 2009, sendo efetuadas 4 colheitas de sangue em cada uma das 4 estações do ano para a obtenção dos níveis séricos de cortisol e testosterona com uso de quites comercias (DPC-Medlab), em fase sólida, por radioimunoensaio (RIA). Os dados foram submetidos à análise de variância e as diferenças entre as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5%. Resultados e Discussão No outono para os touros Nelore, os níveis de cortisol foram inferiores (P < 0,05) em relação às demais estações (Tabela 1), similar aos relatos de Charmandari et al. (2005) revelando a adaptação da raça ao meio ambiente. Com relação à testosterona, não houve diferença (P < 0,05) entre estações dentro de cada raça. Provavelmente, a adaptação dos touros esteja relacionada aos mesmos viver desde o nascimento no mesmo local. Tabela 1. Médias e desvios-padrão para os níveis séricos de testosterona (ng/dL) e cortisol (µg/dL) nas quatro estações do ano para touros das raças Simental (S) e Nelore (N), criados extensivamente. Estações do Ano Variáveis Raça P V O I

Testosterona S 879,47 ± 164,70 Aa 901,09 ± 173,61 Aa 584,02 ± 164,70 Aa 648,15 ± 164,70 Aa N 430,40 ± 173,61 Aa 234,71 ± 196,86 Ba 420,31 ± 164,70 Aa 329,14 ± 164,70 Aa Cortisol S 0,62 ± 0,26 Ba 0,61 ± 0,28 Ba 0,54 ± 0,26 Ba 1,09 ± 0,26 Ba N 1,68 ± 0,28 Aa 3,10 ± 0,31 Aa 1,35 ± 0,26 Ab 3,06 ± 0,26 Aa

Legenda: Nível de significância de 5% (P < 0,05); Letras maiúsculas diferentes nas colunas (P < 0,05); Letras minúsculas diferentes na linha (P < 0,05); estações do ano: primavera (P); verão (V); outono (O) e inverno (I). Nas estações do ano, com exceção da produção de cortisol no outono na raça Nelore, não houve influência das estações na produção de cortisol e testosterona. Referência bibliográfica Charmandari E, Tsigos C, Chousos G. Endocrinology of the stress response. Annu Rev Physiol, v.67, p.259-284, 2005. Palavras-chave: cortisol, testosterona, touros, sazonalidade. Keywords: bulls, cortisol, sazonality, testosterone.



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Congelabilidade do sêmen de touros Pantaneiros em diferentes épocas do ano Semen freezability from Pantaneiro bulls in different seasons

N.H. Moreira1,2,4, N.V. Nascimento1, E.A. Barbosa1,2,4, R.S. Juliano3, A.F. Ramos1,5

1Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, Brasília, DF; 2Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Universidade de Brasília, Brasília, DF; 3Embrapa Pantanal, Corumbá, MS; 4Bolsista CNPq.

5E-mail: [email protected] Introdução A conservação do grupamento genético Pantaneiro é de suma importância para a manutenção da variação genética em uso futuro. O bovino Pantaneiro possui características de adaptabilidade, prolificidade e rusticidade que poderiam ser utilizadas em critérios de seleção ou para aumentar a resistência a novos patógenos ou vetores (Mazza et al., 1994). Nesse sentido, a conservação ex situ na forma de sêmen congelado torna-se fundamental. Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da época do ano sobre a qualidade do sêmen congelado de touros do grupamento genético Pantaneiro, visando avaliar a melhor época para a execução de trabalhos de enriquecimento do Banco Brasileiro de Germoplasma Animal. Material e Métodos Seis touros do grupamento genético Pantaneiro foram submetidos à coleta e congelamento de sêmen mensalmente durante um ano. O sêmen pós-descongelamento foi avaliado quanto a motilidade progressiva (microscopia de luz), morfologia espermática (contraste de fase) e integridade de acrossoma (Tripam blue + Giemsa). Os resultados foram analisados por ANOVA e Teste de Duncam com auxílio do programa estatístico SAEG. Resultados e Discussão Neste trabalho estão apresentados a Média±Desvio Padrão dos resultados obtidos os meses de março, junho, setembro e dezembro, respectivamente. Não houve efeito da época do ano (P > 0,05) sobre a motilidade progressiva (25,2 ± 7,8; 26,9 ± 5,9; 25,0 ± 4,5; 23,6 ± 5,3), a proporção de defeitos totais (13,7 ± 4,1; 12,8 ± 2,4; 10,3 ± 3,7; 8,7 ± 3,6) e de defeitos maiores (8,9 ± 2,9; 7,2 ± 1,9; 6,8 ± 1,7; 7,5 ± 2,1) no sêmen de reprodutores Pantaneiros após o congelamento, sugerindo que os animais apresentaram uma boa congelabilidade em qualquer época do ano. Entretanto, apesar de não haver diferença (P > 0,05) quanto à integridade acrossômica dos espermatozóides após o congelamento, foi observado um aumento gradual da relação entre a proporção de espermatozóides vivos e mortos com acrossoma íntegro entre os meses de abril a agosto. Sendo este um fator relevante para a obtenção de um material de melhor qualidade, os esforços para enriquecimento do Banco Brasileiro de Germoplasma Animal podem ser concentrados nesta época, visando a melhor qualidade do sêmen a ser estocado no Banco Brasileiro de Germoplasma Animal. Referências bibliográficas Mazza MCM, Mazza CAS, Sereno JRB, Santos SA, Pellegrin, AO. Etnobiologia e conservação do bovino Pantaneiro. Corumbá: EMBRAPA- CPAP; Brasília: EMBRAPA- SPI, 1994. 61p. Palavras-chave: bovino, conservação; criopreservação; recursos genéticos; variação sazonal. Keywords: bovine, conservation; cryopreservation; genetics resources; seasonal variation.



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Termometria escrotal por infravermelho na pré e pós-colheita de sêmen em touros Nelore

Scrotal infrared thermometry pre and post semen collect in Nelore bulls

A.A. Silva1,4, M.G.M. Chacur2, E.A. Martins1, B.F. Agostinho1, M.C. Martins1, E. Oba3

1Pós-Graduandos, Universidade do Oeste Paulista (UNOESTE), Presidente Prudente, SP; 2Laboratório de Reprodução Animal, FCA-UNOESTE, Presidente Prudente, SP; 3FMVZ-UNESP, Botucatu, SP.

4E-mail: [email protected] Introdução A termometria escrotal por infravermelho é um método seguro, não invasivo e eficaz para determinar a temperatura em regiões específicas do escroto; sendo alta a correlação entre a temperatura da superfície da bolsa escrotal e a temperatura interna do testículo (Kastelic et al., 1996). A testosterona é essencial à função reprodutiva dos machos, dentre outras funções, atua estimulando os estádios finais da espermatogênese, cuja eficácia depende do equilíbrio da termorregulação testicular (Hafez, 2004). Material e Métodos Dez touros da raça Nelore, com 24 meses de idade, criados extensivamente na região Oeste do Estado de São Paulo, durante os meses de outubro e novembro (primavera), foram submetidos a 8 colheitas de sêmen com intervalos de 7 dias por meio de eletroejaculador (Autoejac®). Imediatamente antes e após cada colheita de sêmen, foram aferidas a temperatura retal (TR) e as temperaturas no colo do escroto (T1) e terços dorsal (T2), médio (T3) e ventral (T4) do escroto; e da região da cauda do epidídimo (T5) com termômetro de infravermelho (Incoterm®), posicionado a 1cm de distância da pele do escroto. Após os procedimentos, nos mesmos dias, amostras de sangue foram obtidas para a quantificação dos níveis séricos de testosterona por radioimunoensaio (RIA) com o uso de quite (DPC Medlab®). Resultados e Discussão As características do sêmen estavam dentro dos padrões segundo normas do CBRA (Manual..., 1998) e a testosterona apresentou média de 124,57 ± 85,43 ng/dL, revelando equilíbrio na espermatogênese. Houve diferença (P < 0,05) para T4 e T5 na pré e pós-colheita de sêmen, em relação à T1, T2 e T3 (Tab. 1). Resultado esse similar ao relatado por Kastelic et al. (1996). Tabela 1 – Médias para a temperatura retal (TR) e escrotal (T1 a T5), antes e após a colheita de sêmen.

TR T1 T2 T3 T4 T5 Pré- colheita 38,5 ± 0,8 A 33,9 ± 0,4 Aa 32,8 ± 0,3 Aa 32,1 ± 0,3 Aa 31,5 ± 0,2 Ab 30,4 ± 0,3 Ab

Pós- colheita 38,2 ± 0,7 A 33,6 ± 0,5 Aa 32,6 ± 0,4 Aa 31,8 ± 0,2 Aa 31,2 ± 0,3 Ab 29,8 ± 0,2 Ab Letras minúsculas diferentes nas linhas (P < 0,05), letras maiúsculas iguais nas colunas (P > 0,05). Conclui-se que a termometria por infravermelho é de fácil e rápida realização, podendo ser usada antes ou após a colheita de sêmen, agregando informação ao exame andrológico. Referências bibliográficas Hafez ESE Reprodução animal. 7.ed. São Paulo: Manole, 2004. Kastelic JP, Cook RB, Coulter GH, Saacke RG. Insulating the scrotal neck affects semen quality and scrotal/testicular temperatures in the bull. Theriogenology, v.45, p.935-942, 1996. Manual para exame andrológico do sêmen animal. 2.ed. Belo Horizonte: CBRA, 1998. Palavras-chave: temperatura escrotal, termometria por infravermelho, touro Nelore. Keywords: infrared thermometry, Nelore bulls, scrotal temperature.



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Elevação temporária da temperatura testicular e sua influência sobre a compactação da cromatina espermática em touros

Effect of temporary increase of testicular temperature on the chromatin condensation of sperm bull

I.N. Duarte1, U.C.P. Moreira, J.O. Jacomini, M.S. Lemos, D.A. Pinto, M.E. Beletti

Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, MG


Introdução Mesmo com o avanço de novas tecnologias, contribuindo para melhoria dos índices reprodutivos, existem pontos de estrangulamentos que não permitem o aumento da produção animal, como por exemplo, a fertilidade dos machos. Muitas vezes os machos não possuem mecanismos satisfatórios de regulação térmica, em especial nos testículos. Sabe-se que o estresse térmico piora os parâmetros normalmente avaliados no espermograma de rotina, porém pouco se sabe sobre sua influência na cromatina espermática. O objetivo do presente trabalho é verificar como a elevação da temperatura testicular por quatro dias influencia a compactação da cromatina dos espermatozóides ejaculados. Material e Métodos Foram utilizados quatro touros cruzados que sofreram insulação escrotal por quatro dias. Amostras de sêmen foram coletadas semanalmente durante quinze semanas. Todas as amostras de sêmen foram avaliadas quanto à compactação da cromatina dos espermatozóides utilizando-se análise de imagem computacional de esfregaços corados com azul de toluidina, após hidrólise com ácido clorídrico 4N. Foram avaliadas a descompactação e a heterogeneidade da cromatina.

Resultados e Discussão Houve uma tendência de aumento no nível de descompactação da cromatina espermática no 35o dia apos o início da insulação escrotal. Os espermatozoides ejaculados nesse período encontravam-se no final do processo de mitose e início da espermiogênese quando da insulação escrotal. Também houve uma tendência ao aumento da heterogeneidade da compactação da cromatina logo após a insulação escrotal. Ou seja, as cabeças tenderam a apresentar diferentes níveis de compactação de cromatina no interior de cada uma delas, apesar de não ter sido identificado uma diminuição evidente da compactação cromatínica. Entre o 35o e o 42o dia após o início da insulação houve aumento significativo em relação aos valores anteriores ao tratamento. Fica claro que as células que estavam no final do processo de mitose e início da espermiogênese foram mais susceptíveis ao estresse térmico, gerando espermatozoides com cromatina mais heterogênea e menos compactada. Ao final do experimento, a cromatina dos espermatozoides estava semelhante à encontrada anterior ao tratamento. Palavras-chave: cromatina, espermatozoide, insulação escrotal, estresse Keywords: chromatin, scrotal insulation, sperm, stress. Apoio financeiro: CNPq e FAPEMIG.



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Perfil de testosterona em animais da raça Nelore dos 12 aos 24 meses de idade Testosterone profile in Nellore breeds from 12 to 24 months of age

T.I. Assumpção1,4, M.A. Souza2, C. Alberton3, R. Pallaoro3, N.A.M. Silva1, A.C. Carlis1

1Universidade Federal de Uberlândia, MG; 2,3Universidade Federal do Mato Grosso, MT.

4E-mail: [email protected] Introdução A testosterona é o principal hormônio masculino que controla a espermatogênese, libido e as características sexuais secundárias e aumenta progressivamente, desde níveis muito baixos no animal pré-púbere até níveis elevados no adulto, em resposta à secreção de gonadotrofinas (Hafez & Hafez, 2005). A concentração sérica de testosterona ≥ 1ng/ml é marcadora do início da puberdade, provocando à medida que a idade avança, uma melhoria nas características físicas e morfológicas do sêmen até a maturidade sexual (Evans et al., 1996). Objetivou-se com esta pesquisa avaliar o perfil de testosterona em animais da raça Nelore dos 12 aos 24 meses de idade e correlacionar este perfil com o desenvolvimento escrotal e corporal dos animais. Material e Métodos Foram utilizados 12 animais da raça Nelore PO (Bos taurus indicus), a partir de 12 meses de idade. Foram realizadas mensalmente a pesagem e a medida de circunferência escrotal, assim como as coletas de sangue por venopunção realizadas duas horas após a aplicação de GnRH (protocolo de Mackinnon et al.,1991), sendo que as dosagens de testosterona foram feitas pela técnica de quimioluminescência no laboratório TECSA®. Para o estudo estatístico, as variáveis foram correlacionadas pelo método de Pearson e foi realizada uma análise de variância seguida de regressão para a variável testosterona. Resultados e Discussão Os resultados das análises de testosterona mostraram média de 10,36 ± 3,15 ng/ml de soro sanguíneo, sendo de 7,42 ng/ml aos 12 meses e 12,90 ng/ml aos 24 meses. Foi observada uma correlação significativa entre as dosagens de testosterona com a idade, peso e circunferência escrotal, pois à medida que cresce o animal e seus testículos, a tendência é crescer também sua produção hormonal. A análise de regressão das dosagens de testosterona mostrou um comportamento do tipo cúbico (R2 = 49,58%), o que mostra a grande variação na secreção do hormônio verificada nos animais entre as diferentes idades, como visualizado no gráfico abaixo.

Referências bibliográficas Evans ACO et al. Chances in circulating hormone... Theriogenology, v.31, n.2, p.345-357, 1996. Hafez ESE, Hafez B. Reprodução Animal. São Paulo: Editora Manole Ltda, 2005. 513p. Mackinnon MJ et al. Genetic parameters for testosterone…Liv Prod Sci, v.29, p.297-309,1991. Palavras-chave: bovinos, raça Nelore, testosterona. Keywords: cattle, Nellore breed, testosterone. * Projeto financiado pela FAPEMAT – Cuiabá/MT.



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Isolamento e caracterização morfológica de um componente da matrix nuclear (ânulo nuclear) de espermatozoides bovinos

Isolation and morphological characterization of a component of the nuclear matrix (nuclear annulus) from bovine sperm

M.S. Lemos1, P.F.S. Moreira, I.N. Duarte, R. Morandi-Filho, A.S. Moraes,

F. Oliveira, M.E. Beletti

Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, MG. 1E-mail: [email protected]

Introdução Estudos recentes em roedores têm sugerido que a matriz nuclear dos espermatozoides possui papel crucial na regulação, fragmentação e degradação do DNA antes e depois da fertilização. Com o propósito de melhor conhecer a organização da matriz nuclear de espermatozoides de touros, o objetivo do presente trabalho foi isolar e caracterizar morfologicamente o ânulo nuclear, um componente da matriz nuclear de espermatozoides. Material e Métodos Amostras de sêmen foram lavadas com PBS e submetidas à ultracentrifugação em gradiente de concentração de cloreto de césio e sacarose. O pellet obtido foi tratado com Triton X-100 a 10% por 24 horas e então tratada com solução de DTT (ditiotreitol) 40mM por 24horas. Após todas as etapas foram preparadas lamínulas para visualização em microscopia eletrônica de varredura e mensuração do comprimento e largura do ânulo nuclear. Resultados e Discussão Após a ultracentrifugação foi possível o isolamento das cabeças dos espermatozoides. O tratamento com Triton permitiu a permeabilização da membrana das cabeças (Fig. 1A) e o DTT por sua vez desnaturou as protaminas, liberando o DNA, restando somente o ânulo nuclear (Fig. 1B). A microscopia eletrônica de varredura, verificou-se que este em espermatozoides de touro possui formato elíptico com comprimento e largura médios de 1,10±0,18 µm e 0,54±0,07 µm, respectivamente.

Figura 1. A- Eletromicrografia do ânulo nuclear (rosa) ainda preso à cabeça do espermatozoide por filamentos de DNA, B- Eletromicrografia de ânulos nucleares isolados.

Palavras-chave: ânulo nuclear, espermatozoides, matriz nuclear, microscopia eletrônica de varredura Keywords: nuclear annulus, nuclear matrix, scanning electron microscopy, spermatozoon. Apoio financeiro: CNPq e FAMEMIG.



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Proteínas do plasma seminal de tourinhos Gir-Leiteiro precoces na puberdade, correlacionadas com parâmetros espermáticos

Seminal plasma proteins of young Gyr-Dairy bulls at puberty and its correlation with spermatic parameters

C.L.F. Santos1, J.A.M. Martins2,5, F.A. Souza1, V.J. Andrade3, V.R. Vale Filho3, P.E.M. Gonçalves3, L.L. Emerick3, T.G. Leite3, P.F.B. Pinto3, F.A.C. Patrício3, G.S. Moura3,

G.P. Moraes3, F.A.Barbosa3, N.A. Azevedo4

1U.E. Maranhão, São Luís, MA/CAPES; 2U.F. Ceará, Fortaleza, CE/CAPES; 3E.V./UFMG, Belo Horizonte, MG; 4EPAMIG (Financiamento FAPEMIG)

5Email: [email protected] Introdução Proteínas do plasma seminal podem ser utilizadas como marcadoras da qualidade da célula espermática (Killian et al., 1993). Contudo, apesar de descritas em tourinhos sexualmente maturos s (Bellin et al., 1996), informação são ainda escassas no período da pré- até a pós-puberdade. Objetivou-se no presente estudo determinar o panorama protéico seminal de tourinhos Gir-Leiteiro na puberdade, correlacionando-o com os parâmetros espermáticos. Material e Métodos Trinta tourinhos com 14 meses de idade, clinica-andrologicamente normais, de cinco rebanhos comerciais com alta pressão de seleção leiteira, F1 de 15 progenitores usados em inseminação artificial, reunidos em Uberaba, MG, com 30 dias de adaptação para regime alimentar (20% PB), fornecido em piquetes individuais, foram estudados durante nove meses. Aos 15 meses de idade foram submetidos à CAP (Vale Filho et al. 2010) e classificados em quatro grupos (1= superprecoce, 2= precoce, 3= regular e 4= tardio). Destes, em 16, com base no ejaculado (CBRA, 1998), determinou-se a puberdade (Wolf et al., 1965). Segundo Brito et al. (2004) foi estabelecido o período de peripuberdade dos 60 dias antes aos 60 dias após a manifestação da puberdade, sendo as médias analisadas por meio do procedimento PROC MIXED do pacote estatístico SAS (2002), com o efeito de grupo obtido pelo teste F e as comparações entre as idades, dentro de cada grupo, realizadas pelo teste de Duncan por meio do procedimento GLM (SAS, 2002). As concentrações no plasma seminal de proteínas foram determinadas por radioimunoensaio, após passarem por gel filtração em cromatografia de rápido desempenho. Os géis em SDS-PAGE foram preparados em gradiente de 10 a 15% de acrilamida, sendo digitalizados (600dpi) em formato Tiff e analisados pelo programa Quantity One®, versão 4.6.3 (Bio-Rad Laboratories). Resultados e Discussão Observaram-se 22 bandas protéicas com pesos moleculares de 6,9 a 238 kDa. Registrou-se diferença (p<0,05) para as proteínas de 112, 62, 55, 30, 22, 19, 16, 13,9, 12, 11 e 6,9kDa, mas não entre grupos, destacando-se as de peso molecular <22kDa (69,8% do total), com maiores concentrações. Estas, juntamente com a de 112kDa, se correlacionaram positivamente com idade, peso corporal, perímetro escrotal, concentração e motilidade espermáticas e negativamente com defeitos espermáticos maiores. Bandas protéicas de 55 e 47kDa apresentaram correlações negativas com parâmetros espermáticos, credenciando-as como possíveis marcadoras negativas e aquelas de menor peso molecular (22, 16, 13,9 e 11kDa) e a de 112kDa, como marcadoras positivas da qualidade espermática. Referências bibliográficas Bellin, M.E. et al. Monoclonal antibody detection of heparin binding proteins on sperm corresponds to increased fertility of bulls. J. Anim. Sci., v.74, n.1, p. 173-182, 1996. Brito, L.F.C. et al. Sexual development in early- and late-maturing Bos indicus and Bos indicus x Bos taurus crossbred bulls in Brazil. Theriogenology, v.62, p.1198-1217, 2004. Killian, G.J. et al. Fertility-associated proteins in holstein bull seminal plasma. Biol. Reprod., v.49, n.6, p.1202-1207, 1993. SAS. User’s Guide. SAS Inst., Inc., Cary, NC, 2002. Vale Filho, V.R. et al. Avaliação andrológica e seleção de tourinhos Zebu para a reprodução. In: VII SIMCORTE, UFV, 2010. p.363-400, Wolf, F. R. et al. Prepuberal behavior and puberal characteristics of beef bulls on high nutrient allowance. J. Anim. Sci., v24, p761-765, 1965. Palavras-chave: plasma seminal, puberdade, SDS-PAGE, zebu. Keywords: puberty, SDS-PAGE, seminal plasma, zebu.



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Bloqueio do órgão vomeronasal e concentração sérica de testosterona em tourinhos Nelore com um ano de idade, criados extensivamente

Blocking of vomeronasal organ and testosterone serum concentration in one-year-old Nellore bulls raised under pasture conditions

L.L. Emerick1,5, V.J. Andrade1, G.A.B. Mahecha1, J.C. Ivo1, P.F.B. Pinto1, T.G. Leite1, J.A.M.

Martins2, P.E.M. Gonçalves1, F.A. Souza1, J.C. Dias3, J.E.J. Murta4, F.A. Barbosa1, V.R. Vale Filho1

1EV-UFMG, Belo Horizonte, MG/CNPq/FAPEMIG; 2UFC, Fortaleza, CE; 3IFC, Campus Concórdia, Concórdia, SC., 4Unimontes, Montes Claros, MG.

5E-mail: [email protected] Introdução O órgão vomeronasal (OVN) é conhecido como detector de ferormônios, que são substancias exaladas pelo organismo através da urina, fezes ou secretadas pelas glândulas sudoríparas em algumas espécies, estando conectado com o sistema límbico (SNC), influenciando a liberação de esteróides e modulando o comportamento sexual (Dulac e Wagner, 2006). Acredita-se que esse efeito seja dependente da experiência sexual (Hull et al., 1995). O objetivo do presente estudo foi avaliar o bloqueio do OVN sobre a concentração sérica de testosterona em tourinhos Nelore de um ano de idade, criados extensivamente na região norte do estado de Minas Gerais. Material e Métodos O experimento foi conduzido em Engenheiro Navarro-MG, de janeiro/2008 a maio/2009, utilizando 14 tourinhos da raça Nelore com um ano de idade, divididos aleatoriamente em dois grupos: G1= grupo controle (intactos); G2= ductos incisivos cauterizados. As avaliações da testosterona sérica foram realizadas, de 3 em 3 meses (total de cinco), com as coletas de sangue realizadas pela manhã (7 hs) e tarde (17 hs). O sangue foi coletado na veia jugular, utilizando-se tubos vacutainer, com o soro obtido por centrifugação a 300g por 10 minutos. A análise de testosterona foi realizada por kit de radioimunoensaio (DSL 4000®) conforme Dias et al. (2009). As médias das concentrações séricas de testosterona foram comparadas pelo teste “T de Student”, ao nível de 5 % de significância, utilizando-se os recursos computacionais do pacote estatístico SAS (1996). Resultados e Discussão Registrou-se diferença para o G1 e G2 entre as coletas 1 e 2 (p < 0,05). Na coleta 4 houve efeito de tratamento, com o G1 e o G2 apresentando, respectivamente, 11,55 ± 1,05 e 6,9 ± 1,60 ng/mL, (p < 0,05). Não houve efeito de tratamento e idade entre as coletas 2, 3 e 5 para ambos os grupos (p > 0,05). Esses resultados sugerem que não ocorreu maturação adequada das células de Leydig na puberdade no G2, provavelmente, por redução da secreção de LH (Bedair e Thibier, 1979). Conclui-se que a cauterização dos ductos incisivos foi eficiente para bloquear o OVN e que este órgão possui importante função no desenvolvimento sexual de tourinhos Nelore. Referências bibliográficas Bedair GAM, Thibier M. Peripheral plasma androstenedione and testosterone concentrations in bulls before and during puberty. J Reprod Fertil, v.56, p.7-10, 1979. Dias JC, et al. Teste da Libido em touros Guzerá e suas associações com características reprodutivas e níveis séricos de testosterona. Arch. Vet. Sci., v. 14, n. 4, p. 204-213, 2009. Dulac C, Wagner S. Genetic analysis of brain circuits underlying pheromone signaling. Annu Rev Genet, v.40, p.449-467, 2006. Hull EM et al. Extracellular dopamine in the medial preoptic area: Implications for sexual motivation and hormonal control of copulation. J Neurosci, v.15, p.7465-7471, 1995. SAS. User’s Guide. Cary, NC: SAS Inst., 1996. Palavras-chave: bos taurus indicus, ductos incisivos, puberdade. Keywords: bos taurus indicus, incisive duct, puberty.



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Classificação andrológica por pontos (CAP) associada aos parâmetros hormonais e protéicos seminais, durante a puberdade de tourinhos Gir-Leiteiro precoces criados em

regime intensivo Association of breeding soundness evaluation with hormonal seminal and proteic parameters during puberty of

young Gyr-dairy bulls

V.R. Vale Filho3,5, F.A. Souza1, J.A.M. Martins2, V.J. Andrade3, P.E.M. Gonçalves3, L.L. Emerick3, T.G. Leite3, P.F.B. Pinto3, F.A.C. Patrício3, G.S Moura3, G.P Moraes3, F.A Barbosa3

1U.E. Maranhão, São Luís, MA/CAPES; 2U.F. Ceará, Fortaleza, CE/CAPES; 3EV/UFMG, Belo Horizonte, MG; 4EPAMIG, Belo Horizonte, MG.

5Email: [email protected] Introdução Touros após avaliação andrológica podem ser submetidos à CAP, sendo pontuados pelo potencial reprodutivo. Entretanto, não se tem estudos correlacionando estes índices, com proteínas e hormônios seminais. Neste estudo determinou-se a CAP de tourinhos Gir-Leiteiro, durante a puberdade, associando-a com os valores hormonais e protéicos seminais. Material e Métodos Trinta tourinhos com 14 meses de idade, clinica-andrologicamente normais, de cinco rebanhos comerciais, com alta pressão de seleção leiteira, F1 de 15 progenitores usados em inseminação artificial, foram reunidos em Uberaba, MG, com 30 dias de adaptação para regime alimentar (20% PB), fornecido em piquetes individuais, e estudados durante nove meses. Aos 15 meses de idade foram submetidos à CAP (Vale Filho et al. 2010) e classificados em quatro grupos (1= superprecoce, 2= precoce, 3= regular e 4= tardio). Destes, em 16, com base no ejaculado (CBRA, 1998), determinou-se a puberdade (Wolf et al., 1965). Segundo Brito et al. (2004) foi estabelecido o período de peripuberdade dos 60 dias antes, aos 60 dias após a manifestação da puberdade. As concentrações no plasma seminal de IGF-I, leptina e insulina foram determinadas por radioimunoensaio, após passarem por gel filtração em cromatografia de rápido desempenho. As proteínas seminais foram determinadas por géis 1D (SDS-PAGE) em gradiente de 10 a 15% de poliacrilamida, sendo posteriormente analisados pelo programa Quantity One® versão 4.6.3 (Bio-Rad Laboratories), enquanto as proteínas com afinidade à heparina foram separadas por gel filtração por meio de cromatografia líquida de rápido desempenho em coluna de afinidade. As variáveis foram ajustadas de acordo com a idade à puberdade (Brito et al., 2004), sendo as médias analisadas por meio do procedimento PROC MIXED do pacote estatístico SAS (2002), com o efeito de grupo obtido pelo teste F e as comparações entre as idades, dentro de cada grupo, realizadas pelo teste de Friedman por meio do procedimento GLM (SAS, 2002). Resultados e Discussão Animais precoces apresentaram CAP de 23,67±7,31, 28,83±8,86, 34,5±16,19, 48,16±12,38 e 66,50±14,12 e os regulares de 26,00±9,97, 32,00±12,00, 39,83±12,95, 57,33±10,80 e 76,83±14,63 (p>0,05), respectivamente, para os momentos -60, -30, 0, 30 e 60 da peripuberdade. A CAP apresentou correlação positiva (de alta magnitude) para idade, perímetro escrotal, peso corporal, concentração espermática, número de espermatozóides totais e número de células normais, apresentando também correlação com as bandas protéicas seminais de 112, 55, 47, 27, 25, 22, 18, 12 e 6,9kDa, além das concentrações de IGF-I e dos picos protéicos com afinidade à heparina. Estes resultados sugerem a importância da CAP na classificação de animais com maior capacidade para a reprodução, sendo indicada para seleção andrológica de tourinhos, futuros reprodutores. Referência Bibliográfica Brito LFC et al. Sexual developement in early and late Bos indicus and Bos indicus x Bos taurus crossbred bulls in Brazil. Theriogenology, v.62, p.1198-1217, 2004. Manual para exame andrológico. Belo Horizonte: CBRA, 1998. 49p. SAS. User’s Guide. Cary, NC: SAS Inst., 2002. Vale Filho VR et al. Avaliação andrológica e seleção de tourinhos Zebu para a reprodução. In: VII SIMCORTE, UFV, p.363-400, 2010. Wolf FR et al. Prepuberal behavior and puberal characteristics of beef bulls on high nutrient allowance. J Anim Sci, v24, p761-765, 1965. Palavras-chave: IGF-I, insulina, leptina, proteína seminal, zebu. Keywords: IGF-I, insulin, leptin, seminal protein, zebu. Financiamento FAPEMIG.



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Classificação Andrológica por Pontos (CAP) de tourinhos da raça Senepol, aos 15 meses de idade, criados extensivamente, no Brasil Central

Breeding Soundness Evaluation (BSE) of 15 month old Senepol bulls raised under pasture conditions, in Central Brazil

G.P Moraes1,4, V.R. Vale Filho1, V.J. Andrade 1, F.A. Barbosa1, F.A. Souza1, G.S. Moura1, L.L Emerick1,

T.G. Leite1, F.A.C. Patrício1, J.A.M. Martins2, T.I Assumpção3, C.L.F. Santos1, D.F. Norte1

1EV/UFMG, Belo Horizonte, MG/CAPES; 2UFCE, Fortaleza, CE/CAPES; 3FAMEV/UFU, Uberlândia, MG. 4E-mail: [email protected]

Introdução Na identificação de tourinhos Bos taurus taurus precoces, a primeira avaliação andrológica e a determinação da CAP devem ser realizadas aos 12 meses de idade (Vale Filho et al. 2010), para determinação da maturidade sexual, selecionando-se os andrologicamente mais aptos para uso como futuros reprodutores. O objetivo desse estudo foi avaliar, aos 15 meses de idade, as características zootécnicas e andrológicas de touros da raça Senepol criados a pasto. Material e Métodos Onze tourinhos da raça Senepol, com idade média de 15 meses, criados a pasto, em Uberlândia, MG, foram avaliados quanto os aspectos clínico-andrológicos. O peso corporal (PC) e a circunferência escrotal (CE) foram mensurados com auxilio de balança eletrônica e fita métrica, respectivamente. Os aspectos físicos e morfológicos do sêmen, assim como a maturidade sexual completa, definida por <15% de defeitos maiores e < 30% de defeitos totais, foram avaliados segundo normas do CBRA (1998). A CAP e o teste da libido foram realizados segundo Vale Filho et al., (2010). Resultados e Discussão Dos 11 tourinhos avaliados (Tab. 1), oito apresentaram sêmen com percentuais elevados de defeitos espermáticos maiores (DM), caracterizando-os como sexualmente imaturos. Entretanto três tourinhos apresentaram-se com desenvolvimento testicular satisfatório (CE>30 cm) e sêmen com aspectos físicos e morfológicos normais, indicando maturidade sexual completa. Os altos percentuais de DM e defeitos totais (DT) apresentados pelo grupo de tourinhos imaturos indicam que a gametogênese se encontra muito alterada (Vale Filho et al. 2011). Entretanto, os valores normais apresentados para a CE, a motilidade e o vigor dos espermatozóides ejaculados mostram que os tourinhos estão próximos aos valores apresentados pelo grupo de imaturos, presumindo-se que estes estão próximos de alcançar a maturidade sexual. Esses resultados foram similares aos observados por Godfrey e Dodson, (2005), trabalhando no Caribe, com animais da mesma raça, sob mesmo manejo nutricional. Quando submetidos ao teste da libido, ambos os grupos apresentaram alto desempenho (Vale Filho et al., 2010). Tabela 1. Avaliação andrológica e libido de tourinhos da raça Senepol, aos 15 meses de idade, criados extensivamente, no Brasil Central. MS n Idade

(meses) Peso (Kg)

CE (cm)

Mot. (%)

Vigor (1 -5)

DM (%)

DT (%)

CAP (1-100)

LA (%)

M 3 15,1 ± 0,2 276,3 ±2 1,5 31,0 ± 3,4 76,6 ± 5,7 4,3 ± 0,5 13,6 ± 0,5 19,3 ± 4,1 61,6 ± 7,0 33,3 IM 8 14,9 ± 1,0 280,3 ± 44,3 30,3 ± 3,1 60,0 ± 13,0 3,0 ± 0,5 55,6 ± 18,0 64,0 ± 21,3 32,7 ± 14,9 50,0

Legenda: MS= Maturidade sexual, M= maturo, IM= Imaturo, CE= circunferência escrotal; Mot= Motilidade; DM= Defeitos maiores; DT= Defeitos totais; CAP = Classificação Andrológica por Pontos. LA = Libido alta.

Referências bibliográficas Godfrey, R.W; Dodson, R.E. Breeding soundness evaluations of Senepol bulls in the US Virgin Islands. Theriogenology, v.63, p. 831-840, 2005. Manual para exame andrológico e avaliação de sêmen animal. 2.ed. Belo Horizonte: CBRA, 49p, 1998. Vale Filho et al. Avaliação andrológica e seleção de tourinhos zebu para reprodução. Anais....VII SIMCORTE, UFV., Viçosa, MG, 2010. v.7, p.363. Vale Filho et al. Patologia espermática. In: Nascimeto EF, Santos RL. Patologia da reprodução dos animais domésticos. 3.ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2011. p.129-149. Palavras-chave: Bos taurus taurus, circunferência escrotal, sêmen, Senepol. Keywords:, Bos taurus taurus, scrotal circumference, semen, Senepol.



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IGF-I, leptina e insulina no plasma seminal associadas aos parâmetros andrológicos durante a puberdade de tourinhos Gir-Leiteiro precoces, criados em regime intensivo

Seminal plasma IGF-I, leptin and insulin and its association with andrologic parameters at puberty of young Gyr-dairy bulls

R.A.C. Leão, F.A. Souza1, J.A.M. Martins2, L.L. Emerick3, V.R. Vale Filho3, V.J. Andrade3,

P.E.M. Gonçalves3, T.G. Leite3, G.S. Moura3, P.F.B. Pinto3, F.A.C. Patrício3, F.A. Barbosa3, G.P. Moraes3

1U.E. Maranhão/CAPES, São Luís, MA; 2U.F. Ceará/CAPES, Fortaleza, CE; 3E.V./UFMG, Belo Horizonte, MG; 4EPAMIG, Belo Horizonte, MG.

Email: [email protected] Introdução Pesquisas recentes apontam alguns hormônios como determinantes na qualidade seminal. Entre estes, o fator de crescimento semelhante à insulina do tipo 1 (IGF-I), a leptina e a insulina são importantes, atuando no metabolismo e estrutura do espermatozóide (Andò e Aquila 2005). Neste estudo determinaram-se os valores de leptina, insulina e IGF-I no plasma seminal e suas correlações com os padrões espermáticos na puberdade. Material e Métodos Trinta tourinhos com 14 meses de idade, clinica-andrologicamente normais, de cinco rebanhos comerciais, com alta pressão de seleção leiteira, F1 de 15 progenitores usados em inseminação artificial, foram reunidos em Uberaba, MG, com 30 dias de adaptação para regime alimentar (20% PB), fornecido em piquetes individuais, e estudados durante nove meses. Aos 15 meses de idade foram submetidos à CAP (Vale Filho et al. 2010) e classificados em quatro grupos (1= superprecoce, 2= precoce, 3= regular e 4= tardio). Destes, em 16, com base no ejaculado (CBRA, 1998), determinou-se a puberdade (Wolf et al., 1965). Segundo Brito et al. (2004) foi estabelecido o período de peripuberdade dos 60 dias antes, aos 60 dias após a manifestação da puberdade. As concentrações hormonais foram determinadas por radioimunoensaio, após passarem por gel filtração em cromatografia de rápido desempenho. As médias foram analisadas pelo procedimento PROC MIXED do pacote estatístico SAS (2002), com o efeito de grupo obtido pelo teste F e as comparações entre as idades, dentro de cada grupo, realizadas pelo teste de Duncan por meio do procedimento GLM (SAS, 2002). Resultados e Discussão Concentrações de IGF-I diferiram entre períodos (p<0,05), mas não entre grupos. As médias para os períodos -60, -30, 0, 30 e 60 da puberdade foram, respectivamente, de 38,11±93,77, 104,42±107,47, 321,28±318,29, 208,33±193,83 e 264,91±278,97 ng/mL, apresentando correlações positivas com idade, peso, perímetro escrotal, motilidade e concentração espermática. As concentrações de insulina não diferiram entre grupos ou idades, não apresentando correlação com parâmetros espermáticos, mas diferiu (p <0,05) entre grupos com altos percentuais de defeitos maiores (31,08 ± 18,58 mU/mL) em relação àqueles com baixa concentração desses defeitos (40,01 ± 25,37 mU/mL). A leptina não diferiu entre os grupos ou estádios de desenvolvimento sexual, com concentrações de 23,10 ± 10,43, 24,35 ± 9,42, 22,41 ± 9,90, 23,76 ± 9,69 e 24,99 ± 11,42 ng/ml para os períodos de puberdade (-60 - 30, 0, 30 e 60), respectivamente, sugerindo que a insulina e o IGF-I no plasma seminal de touros na peripuberdade, podem servir como marcadores da qualidade espermatica. Referências bibliográficas Andò S, Aquila S. Arguments raised by the recent discovery that insulin and leptin are expressed in and secreted by human ejaculated spermatozoa. Mol Cell Endocrinol, v.245, n.1-2, p.1–6, 2005. Brito LFC et al. Sexual development in early- and late-maturing Bos indicus and Bos indicus x Bos taurus crossbred bulls in Brazil. Theriogenology, v.62, p.1198-1217, 2004. SAS. User’s Guide. Cary, NC: SAS Inst, 2002. Vale Filho VR et al. Avaliação andrológica e seleção de tourinhos Zebu para a reprodução. In: VII SIMCORTE, UFV, p.363-400, 2010. Wolf FR et al. Prepuberal behavior and puberal characteristics of beef bulls on high nutrient allowance. J Anim Sci, v24, p761-765, 1965. Palavras-chave: plasma seminal, puberdade, SDS-PAGE, zebu. Keywords: puberty, SDS-PAGE, seminal plasma, zebu. Financiamento FAPEMIG.



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Proteínas ligadoras de heparina do plasma seminal de touros Guzerá criados no semi-árido brasileiro

Heparin-binding proteins in the seminal plasma of Guzerat bulls from Brazilian semi-arid

J.A.M. Martins¹, J.P.A. Rêgo, V.G. Cadavid, O.O. Brasil, M.F. vanTilburg, C.E.A. Souza, A.A.A. Moura

Depto. de Zootecnia, Universidade Federal do Ceará (UFC), Fortaleza, CE.

¹E-mail: [email protected] Introdução Dois estudos foram conduzidos com o objetivo de caracterizar e purificar as proteínas do plasma seminal com afinidade à heparina (HBPs) de touros da raça Guzerá criados no semi-árido brasileiro. Material e Métodos O plasma seminal de 22 touros Guzerá de 22 a 26 meses de idade foi obtido por eletroejaculação e centrifugação do sêmen. No estudo 1, o pool do plasma seminal foi submetido à cromatografia líquida de afinidade à heparina (CLAH - Martins et al., 2010) e as frações correspondentes às HBPs e às proteínas sem afinidade, precipitadas com acetona e ressuspensas em tampão Tris-HCl 40mM. Submeteu-se 600 µg de proteínas do plasma seminal e das frações cromatográficas à eletroforese bidimensional (2D PAGE) para a caracterização do padrão das proteínas ligadoras de heparina. No estudo 2, o “pool” de plasma seminal foi submetido à CLAH com um esquema de eluição “step wise” nas concentrações de 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5 e 1M de NaCl para o fracionamento do pico com afinidade à heparina (estudo 1). As frações correspondentes foram precipitadas com acetona e 20µg de proteína, submetidas à eletroforese unidimensional. Resultados e Discussão Foram detectados, nos mapas bidimensionais (estudo 1), 342 spots com afinidade à heparina. Aqueles de maior intensidade nos géis (4210 – 13,7kDa, pI 5.1; 5239 – 13.1kDa, pI 5.5; 5234 – 13.6kDa, pI 5.8) se ligam efetivamente na heparina, estando presentes apenas no gel das HBPs. Tais proteínas possuem parâmetros semelhantes às BSPs 1 e 3 de touros Bos taurus (Manjunath e Sairam, 1987), da mesma forma que train de spots com médias de peso molecular (PM) e ponto isoelétrico (pI) de 25,7kDa e 4,0, respectivamente, semelhantes às BSPs 5 (Calvete et al., 1996). Outro grupo presente apenas nos géis das HBPs foi o train representado pelos spots de PM 19,5kDa e pI 7.7, semelhante às TIMP-2 envolvidas nos processos de proteção espermática. No estudo 2, a eluição das HBPs no modo “step wise” foi eficaz separar as mesmas, de modo a obter uma maior precisão na purificação das proteínas mais expressas no plasma seminal de Bos indicus. A concentração de 0,3M de NaCl foi eficiente na separação das proteínas com pesos moleculares semelhantes às BSPs 1, 3 e 5, associadas aos processos de capacitação espermática e reação acrossômica em várias espécies. Devido à importância biológica das HBPs do plasma seminal, a estratégia de separação aqui apresentada pode servir como uma etapa importante para purificação das várias proteínas associadas à fertilidade especialmente das BSPs de touros Bos indicus. Referências bibliográficas Calvete JJ, Mann K, Sanz L et al. The primary structure of BSP-30k, a major lipid-, gelatin-, and heparin-binding glycoprotein of bovine seminal plasma. FEBS Lett, v.399, p.147-152, 1996. Manjunath P, Sairam MR. Purification and biochemical characterization of three major acidic proteins (BSP-A1, A2 and A3) from bovine seminal plasma. Biochem J, v.241, p.685-692, 1987. Martins JAM, Souza CEA, Silva FDA et al. Electrophoretical characterization of Morada Nova rams seminal plasma heparin-binding proteins. In: International Symposium on Animal Biology of Reproduction, 3, Águas de São Pedro, SP, 2010. Belo Horizonte, CBRA, 2010. Palavras-chave: fertilidade, proteômica, sêmen, zebu. Keywords: fertility, proteomics, semen, zebu.



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Perfil das proteínas do plasma seminal de touros Curraleiro/Pé-Duro (Bos taurus ibericus) - Resultados preliminares

Seminal plasma protein profile from Curraleiro bulls (Bos taurus ibericus). - Preliminary results

E.S.B. Menezes¹,4, R.O. Oliveira¹, E.A. Barbosa², N.V. Nascimento², A.F. Ramos², A.A.A. Moura¹,3

¹Departamento de Zootecnia, UFC, Fortaleza, CE; ²Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, Brasília, DF.

E-mail: [email protected], [email protected]

Introdução As raças nativas possuem características adaptativas desejáveis Nesse sentindo, algumas raças bovinas têm se tornado uma importante fonte de estudo na identificação da expressão de proteínas relacionadas à manutenção da eficiência reprodutiva em climas tropicais. Assim, o objetivo desse estudo foi caracterizar o perfil eletroforético do plasma seminal de touros Curraleiro por meio da eletroforese 2-D. Material e Métodos Amostras de plasma seminal foram obtidas por meio de centrifugações dos ejaculados de 11 touros Curraleiro. Posteriormente, alíquotas de plasma seminal contendo 350 μg de proteína total foram eletrofocalizadas (13 cm IPG strips; pH 3 a 10), e em seguida submetidas à SDS-2-D-PAGE (12,5%). Os géis foram corados com Coomassie coloidal G-250, digitalizados e analisados por meio do aplicativo PDQuest . Resultados e Discussão As análises dos mapas bidimensionais detectaram 119,44 ± 18,42 spots, com variação de 163 a 97 spots por gel. Com base nos valores de pI, massa molecular e intensidade dos spots protéicos, constatamos proteínas já identificadas em touros Bos taurus taurus (1,2) e Bos taurus indicus (3). As principais proteínas expressas apresentaram semelhança com a BSP 1 spots 2104 (10,43kDa, pI 4,99), 14204 (10,87kDa, pI 6,45), 2206 (11,55kDa, pI 4,99) e 3205 (12,45kDa, pI 5,64), BSP5 2511 (30,84 kDa, pI 4,99), 3504 (33,66 kDa, pI 5,24). As BSPs secretadas pelas glândulas vesiculares e ampolas alteram as propriedades da membrana espermática, por meio do efluxo de colesterol e fosfolipídeos e atuam na motilidade espermática. Outras proteínas expressas foram a espermadesina 3412 (24,55 kDa, pI 5,67), 3414 (26,29 kDa, pI 5,18) e a clusterina 1604 (46,58 kDa, pI 3,94). Essa última modula vários processos fisiológicos como adesão e agregação celular e maturação espermática. Estudos com proteínas do plasma seminal de touros adaptados à regiões tropicais poderá contribuir para uma melhor compreensão da fisiologia reprodutiva, bem como os fatores envolvidos na maturação de espermatozóides e função espermática, fornecendo base para compreensão do potencial de fertilidade desses animais. Referências bibliográficas (1) Moura et al. Identification of proteins in the accessory sex gland fluid associated with fertility indexes of dairy bulls: a proteomic approach J Androl, v.27, p.201-211, 2006. (2) Moura et al. Proteomics of cauda epididymal fluid from mature Holstein bulls. J Prot, v.73, p.2006-2020, 2010. (3) Moura et al. Proteomics of Seminal Plasma from Bos indicus Bulls Raised in Queensland-Australia, 43rd Annals Meeting of the Society for the Study of Reproduction, Madison, WI, EUA, 2010 Palavras-chave:, bovino, conservação, eletroforese bidimensional, recursos genéticos. Keywords: conservation, bovine, genetic resources, two-dimensional electrophoresis.



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Quantificação de proteínas do plasma seminal e suas associações com características seminais e nível sérico de testosterona em touros Guzerá

Seminal plasma proteins and their associations with seminal traits and serum testosterone level in Guzerat bulls

J.C. Dias1,4, V.J. Andrade2, T.S. Castro3, J.S. Oliveira3, M.M. Santoro3, J.A.M. Martins2, L.L. Emerick2, V.R. Vale Filho2

1Instituto Federal Catarinense, Campus Concórdia, Concórdia, SC; 2Escola de Veterinária, UFMG, Belo Horizonte, MG; 3Instituto de Ciências Biológicas, UFMG, Belo Horizonte, MG.

4E-mail: [email protected] Introdução Estudos mostram a existência de proteínas do plasma seminal fundamentais aos processos de fecundação (Bellin et al., 1998; Sprott et al., 2000). Desta forma, a determinação do perfil protéico do sêmen tem aberto novas fronteiras como avaliação complementar da condição reprodutiva do touro. O objetivo do presente estudo foi quantificar as proteínas do plasma seminal e buscar suas associações com características seminais e nível sérico de testosterona em touros Guzerá. Material e Métodos Foram avaliadas as concentrações de proteínas do plasma seminal de 19 touros Guzerá de 24 a 34 meses de idade. O sêmen foi coletado por eletroejaculação e uma alíquota diluída em solução tampão (Tris base 40mM, CaCl2 2mM, Azida Sódica 0,01%, Pepstatina A 1µM, PMSF 1mM) com inibidores de protease. O sêmen foi submetido a centrifugação para separação do plasma (1200g/15 min.), e a dosagem de proteínas foi realizada de acordo com Lowry et al. (1951). As avaliações físicas e morfológicas do sêmen foram efetuadas conforme recomendações do CBRA (1998). A concentração sérica de testosterona foi determinada através de radioimunoensaio. As associações entre a concentração de proteínas do plasma seminal (CPPS) e os parâmetros seminais e nível sérico de testosterona foram avaliadas por correlações de Spearman (SAS, 1999).

Resultados e Discussão A CPPS apresentou média de 17,18 mg/mL, e se mostrou correlacionada (p<0,01) com o volume ejaculado (0,58) e a concentração espermática (0,65), sugerindo que parte dessas proteínas tem como origem as glândulas sexuais acessórias e os testículos. A associação com a concentração espermática sugere que as proteínas de origem testicular sejam sintetizadas por células que participam do processo espermatogênico. Pode-se ainda especular, que exista uma ação ou efeito comum e sinérgico entre a produção espermática e a síntese de proteínas do plasma seminal. Registrou-se associação favorável (p<0,01) entre a CPPS e a concentração sérica de testosterona (0,70) mostrando que a síntese de algumas proteínas do plasma seminal responde à concentração de testosterona circulante. A CPPS não esteve associada (p>0,05) a nenhuma outra característica física ou morfológica do sêmen. Referências bibliográficas Bellin ME et al. Fertility-associated antigen on bull sperm indicates fertility potential. J Anim Sci, v.76, p.2032-2039, 1998. Lowry OH et al. Proteins measurement with the folin phenol reagent. J Biol Chem, v.193, p.265-275, 1951. Manual para exame andrológico e avaliação de sêmen animal. 2ed. Belo Horizonte: CBRA, 1998. 49p. SAS. User’s guide. Versão 8. Cary, NC: SAS Institute, EUA. 1999. Sprott LR et al. Artificial insemination outcomes in beef females using bovine sperm with a detectable fertility - associated antigen. J Anim Sci, v.78, p.795-798, 2000. Palavras-chave: Bos taurus indicus, fertilidade, proteínas do sêmen, sêmen. Keywords: Bos taurus indicus, fertility, semen, semen of proteins.



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Avaliação do comportamento sexual de touros Nelore: proposta simplificada de pontuação

Assessment of sexual behavior of Nellore bulls: proposed simplified scoring

C.A.M. Bomfim1,4, S.D. Bicudo2, D. Cardoso3, S.R.M. Bomfim1

1Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba (FMVA), UNESP, Araçatuba, SP; 2Faculdade de Medicina Veterinária e

Zootecnia, UNESP, Botucatu, SP; 3APTA, Pólo Extremo Oeste, Araçatuba, SP. 4E-mail : [email protected]

Introdução A maioria das metodologias para se avaliar o comportamento sexual tem sido desenvolvida para animais Bos taurus taurus os quais diferem das Bos taurus indicus (Bascunân et al., 2008) quanto à demonstração do comportamento sexual. Estes últimos são mais discretos e parece ter menor libido. O procedimento ideal para verificação da libido deve ser simples, rápido e que os resultados possam ser verificados por repetição, servindo para predizer o desempenho reprodutivo do touro em acasalamento com fêmeas férteis. Material e Métodos O comportamento sexual (CS) de 41 touros Nelore (idades entre 22 a 29 meses) foram avaliados durante 10 minutos em cinco oportunidades. Utilizou-se dois tipos de provas: (a) Provas de touros individualizados – 1 touro : 3 vacas e (b) Provas de touros múltiplos – 4 touros : 3 vacas. Classificou-se o CS observado (n = 187) em escala de dez notas conforme Chenoweth et al. (1979) e cinco notas de acordo com a proposta simplificada (0 = não mostrou interesse sexual; 1 = interesse ou perseguição uma a cinco vezes; 2 = interesse e/ou perseguição seis ou mais vezes; 3 = monta ou tentativa de monta sem serviço; e 4 = monta com serviço).

Resultados e Discussão Justifica-se a apresentação da proposta simplificada em decorrência da não observação de pontuação de algumas notas (Ex.: 7 e 9) e baixa ocorrência de outras (Ex.: 1, 5 e 10) frente a proposta de classificação apresentada por Chenoweth et al. (1979). A proposta simplificada para avaliação do CS, por apresentar cinco notas, é mais fácil de aplicação e de maior repetibilidade, podendo ser mais objetiva em distinguir o CS de touros Nelore que são mais discretos e respondem negativamente as variações ambientais quanto à intensidade na demonstração dos sinais da libido. Referências bibliográficas Chenoweth PJ, Brinks JS, Nett TM. A comparasion of three methods of assessing sex-drive in yearling beef bulls and relationship with testosterone and LH levels. Theriogenology, v.12, p.223-33, 1979. Bascuñan DS, Jorge AM, Rocha GP, Weschler FS, Andriguetto C. Comportamento sexual de touros zebuínos e angus em central de coleta e processamento de sêmen. Rev Bras Zootec, v.37, p.257-260, 2008. Palavras-chave: andrologia, Bos taurus indicus, bovino, libido, reprodução. Keywords: andrology, Bos taurus indicus, bovine, libido, reproduction.



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Parâmetros testiculares e seminais de bovinos das raças Pé-duro, Nelore e Mestiço. Testis size and semen parameters of bovine races “Pé-duro”, Nelore and Mestiço

J.A.T. Souza1,3, D.N.M. Costa1, S.B. Ferreira1, A. Sousa Júnior1, I.M.R. Nascimento1,

L.H.C.M. Mota1, M.A. Castelo Branco1, I.O.T Souza1, G.M.C. Carvalho2

1Laboratorio de Biotecnologia da Reprodução Animal, UFPI, Teresina, PI; 2Embrapa Meio-Norte, Teresina, PI. 3E-mail: [email protected]

Introdução Raças bovinas oriundas de Portugal e Espanha deram origem aos rebanhos crioulos que formaram, dentre outras, a raça Curraleiro ou Pé-Duro. Com a introdução das raças zebuínas, raças tipicamente brasileiras, incluindo o Pé-Duro, entraram em processo de extinção. O gado Pé-Duro detém um importante patrimônio genético de adaptação e de resistência às condições ambientais adversas, próprias do semi-árido nordestino (Azevedo et al, 2008). Dócil e dotado de excepcional rusticidade, sua seleção e utilização em cruzamentos, poderá ser de grande utilidade para o pequeno produtor rural, fornecendo carne, leite e animais de trabalho, sem a necessidade de grandes na infra-estrutura da propriedade (Boaventura et al, 2005). Na seleção de touros destinados à reprodução, parâmetros testiculares e seminais são comumente utilizados para predizer a real capacidade reprodutiva do macho. O presente trabalho teve como objetivo avaliar e comparar parâmetros testiculares e seminais de bovinos das raças Pé-Duro, Nelore e Mestiço. Material e Métodos A pesquisa foi desenvolvida na Fazenda Experimental da EMBRAPA Meio-Norte, localizada no município de Campo Maior, estado do Piauí. Foram avaliados 48 touros, sendo sete da raça Nelore, 21 da raça Pé duro e 19 Mestiços, todos com idade variando entre 29 a 38 meses e peso entre 196 a 354 Kg. Entre os parâmetros biométricos testiculares foram mensurados, com utilização de fita métrica e paquímetro, a circunferência escrotal, o comprimento e a largura dos testículos e, entre os parâmetros seminais, após colheita por eletro-ejaculação, a motilidade, o vigor e os defeitos maiores e defeitos totais espermáticos. Os dados obtidos dessas variáveis foram avaliados pelo teste de TUKEY a 5% de probabilidade.

Resultados e Discussão Tabela 1. Médias e desvios padrão da circunferência escrotal (CE), comprimento (CT) e largura testicular (LT), motilidade (MT), Vigor (VG), defeitos maiores (DM) e totais (DT).

Raça CE (cm)

CT (cm)

LT (cm)

MT (%)

VG (%)

DM (%)

DT (%)

Pé-duro 24,5±3,9 a 8,0±0,7 b 4,6±0,5 a 73,7±6,8 a 3,4±0,6 a 5,00±3,6 a 18,16±4,0 a

Nelore 28,0±5,0 a 8,4±0,8 a 5,3±0,5 b 74,3±5,3 a 3,4±0,5 a 6,50±2,4 a 19,80±4,4 a

Mestiço 24,9±2,6 a 8,8±0,8 a 4,7±0,4 a 76,7±6,7 a 3,7±0,7 a 7,90±3,1 a 19,47±4,2 a

Medias seguida das mesmas letras nas linhas não diferem entre si pelo teste de TUKEY (P≥5%). Como verificado na tabela 1, no Pé-duro o CT foi inferior às demais raças enquanto que a LT diferiu apenas da raça Nelore. Com relação aos parâmetros seminais não houve diferenças entre as raças. Entretanto, Britto (1988) constatou altos índices de patologias de cabeças (> 20%) no gado Pé-duro, comparado às raças Nelore e Mestiço que participaram do estudo. Referências envolvendo parâmetros testiculares e seminais no gado Pé-duro são escassas. Concluiu-se que apenas as medidas de comprimento e largura diferiram entre o Pé-Duro e as demais raças. Referências bibliográficas Azevedo DMMR et al. Adaptabilidade de bovinos da raça pé-duro às condições climáticas do semi-árido do estado do Piauí. Archivos de zootecnia v. 57, n. 220, p. 514, 2008. Boaventura MV, Fioravanti, MCS, Juliano, RS. Gado curraleiro: relação de criadores e aspectos gerais da raça. Goiânia: ABCCurraleiro/SEBRAE/UFG, 2005, p.74. Britto CMC, Mello MLS. Anomalias da cabeça em espermatozóides de gado “Pé-duro”. Rev Bras Genét, v.11, n.1, p.63-71, 1988. Palavras-chave: biometria testicular, bovino, pé-duro, sêmen. Keywords: bovino, pé-duro, sêmen, testicular biometrics.



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Efeitos do pastejo de Brachiaria brizantha e Brachiaria decumbens sobre as características reprodutivas de touros Nelore

Pasture effects of Brachiaria brizantha and Brachiaria decumbens on the reproductive characteristics of Nelore bulls

J. Almeida1,2,3, A. Galvão¹,2, O.A. Resende¹, C. Galvão¹, M.R.B. Mello2 , A. Sanavria2

¹Centro Universitário de Barra Mansa (UBM) Barra Mansa, RJ; 2Universidade Federal Rural Rio de Janeiro, Seropédica, RJ.

3E-mail: [email protected] Introdução A exploração extensiva de animais corte, em sistema de monta natural, usando de pastagens de Brachiaria brizantha e B. decumbens tem sido incrementada na região Sul do estado do Rio de Janeiro, local de topografia bastante acidentada, devido a sua boa adaptação e face a valorização da raça Nelore nos últimos anos. O objetivo foi relatar a avaliação andrológica comparativa de dois reprodutores que sobre o pastejo dessas gramíneas, apresentaram clinicamente reações de fotosensibilização. Material e Métodos Durante o período de janeiro a julho de 2009 foram avaliados andrologicamente 36 touros da raça Nelore com mais de 30 meses, em regime extensivo de monta natural durante a estação de monta na região de Porto Real/RJ. Foram realizados exames andrológicos completos, a cada 30 dias, seguindo as normas do CBRA (Manual..., 1998).

Resultados e Discussão As características andrológicas dos dois reprodutores com fotossensibilização (Tab. 1) foram afetadas a partir das coletas realizadas aos 30 dias de permanência em pastagem de Brachiaria spp., sendo observado diarréia, perda de peso, dermatite superficial nas regiões internas das membros posteriores e escroto, o qual encontrava-se fibroso, e azoospermia aos 90 dias. Tabela 1. Valores das características andrológicas de dois animais (A e B) com fotosensibilização, em lote de 36 reprodutores Nelore, sobre o pastejo de Brachiaria brizantha e B. decumbens. Coletas (Dias)

PE (cm) Motilidade(%) Vigor (0-5) Def. Totais (%) Def.Maiores(%) A B Lote A B Lote A B Lote A B Lote A B Lote

0 32 29 32,9 90 80 85,4 4 2 3,0 12,5 29 27,2 1 5 4,4 30 31 24 31,7 40 10 71,4 2 1 3,1 22 36 23,6 7 17 12,7 90 30 27 31,9 - - 78,2 - - 3,2 - - 22,8 - - 7,5 150 27,5 28 32,1 10 80 81,8 1 2 3,9 51 61 16,9 16 21 5,9

A recuperação da espermatogênese teve início aos 120 dias após a mudança de pastagem. Esses achados servem de alerta sobre os possíveis efeitos deletérios em reprodutores Nelore, manejados em pastagens de Brachiaria brizantha e B. decumbens. Pesquisas com técnicas mais adequadas são necessárias para elucidar e quantificar os efeitos deletérios do pastejo de Brachiaria spp., sobre a espermatogênese dos reprodutores. Referências bibliográficas Manual para exame andrológico e avaliação de sêmen animal. 2.ed. Belo Horizonte, MG: CBRA, 1998. Palavras-chave: alimentação, avaliação andrológica, fotossensibilização. Keywords: breeding soundness, feeding, photosensitization.



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Análise morfológica e ultraestrutural de defeitos no núcleo espermático em bovinos Morphologycal and fine structure analysis of nuclear defects in bovine sperm nucleus

C.E. Fernandes1,4, M.J. Soares2, A.L. Zart3

1DPA/CCBS-UFMS, Campo Grande, MS; 2IBMP-FIOCRUZ, Rio de janeiro, RJ; 3Pós-graduação, FAMEZ-UFMS, Campo

Grande, MS. 4E-mail: [email protected]

Introdução As alterações nucleares espermáticas originam-se a partir da diferenciação pós-meiótica durante o remodelamento nuclear, possivelmente no início da espermiogênese. Esses defeitos têm sido associados à teratogênese e compõem diferentes tipos de lesões (Holstein et al., 1988). O objetivo desse estudo foi descrever a ultra-estrutural de defeitos nucleares no sêmen bovino. Material e Métodos Foram estudadas amostras de seis touros mestiços (Bos indicus x Bos taurus) descartados por apresentarem altos percentuais de defeitos de núcleo e cromatina espermática observados pela reação de Feulgen. Após uma segunda colheita, amostras de sêmen foram fixadas em glutaraldeído 2,5% e processadas para microscopia de transmissão. Secções ultrafinas longitudinais foram coradas com acetato de uranil e citrato de chumbo. As leituras foram feitas em um microscópio Zeiss EM10C. Resultados e Discussão Pela reação de Feulgen, os defeitos nucleares foram observados contendo formato vacuolar do tipo pouch formation e crateras (crater defects) dispostas aleatoriamente na área nuclear. Graus diferenciados de condensação anormal da cromatina também foram observados. A microscopia de transmissão revelou aspectos morfológicos semelhantes a outras espécies. Todos os núcleos avaliados apresentaram edema e ruptura da membrana plasmática, sendo que os vacúolos distribuíram-se entre a região acrossomal e segmento equatorial. Os vacúolos mostraram material amorfo, totalmente preenchido ou não com feixes membranosos proveniente da membrana acrossomal e teca perinuclear. Em alguns casos havia ruptura da teca perinuclear fusionada à matriz nuclear, com granulação cromatínica. Um dos touros apresentou núcleos envoltos com feixes de fibras mitocondriais juntamente com as membranas acrossomais e perinucleares, constituindo um defeito atípico aos demais. Os defeitos reportados demonstram alterações no remodelamento nuclear associados à retenção do conteúdo acrossomal e, menos frequentemente, da peça intermediária. Em todos os casos havia indícios de severa degeneração testicular ao exame clínico e de sêmen, no entanto, especula-se a possibilidade que tais defeitos sejam de origem genética. Referências bibliográficas Holstein AF, Roosen-Runge EC, Schirren CS. Illustrated pathology of human spermatogenesis. Berlim: Grosse Verlag, 1988. Palavras-chave: bovino, espermatozóide, núcleo, ultra-estrutura Keywords: bovine, fine structure, nucleus, spermatozoa.



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Elevação temporária da temperatura testicular e sua influência sobre a morfometria da cabeça de espermatozoides de touros

Effect of temporary increase of testicular temperature on the sperm head morphometry in bull

R. Morandi-Filho, U.C.P. Moreira1, I.N. Duarte, J.O. Jacomini, M.S. Lemos, D.A. Pinto, M.E. Beletti

Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução Muitos animais introduzidos no Brasil são de clima temperado, ou seja, estão acostumados a temperaturas mais amenas do que as aqui encontradas. Sendo assim, estão sendo mantidos a um constante estresse térmico. O bovino tem uma temperatura escrotal normalmente 4°C abaixo de sua temperatura corporal. Sendo este um fator importante para manter as células germinativas em perfeito estado, mantendo uma produção espermática normal. A alta temperatura do Brasil, em relação aos países de clima temperado, pode afetar os espermatozóides produzidos, alterando-os morfologicamente e geneticamente, fazendo com os embriões produzidos com esse sêmen sejam afetados, trazendo transtornos para a reprodução bovina em geral. O objetivo do presente trabalho é verificar como a elevação da temperatura testicular por quatro dias influencia a morfometria da cabeça dos espermatozóides ejaculados. Material e Métodos Foram utilizados quatro touros cruzados que sofreram insulação escrotal por quatro dias. Amostras de sêmen foram coletadas semanalmente durante quinze semanas. Todas as amostras de sêmen foram avaliadas utilizando-se análise de imagem computacional de esfregaços corados com azul de toluidina. Utilizando-se algoritmos desenvolvidos em ambiente de programação Scilab foram avaliados área, perímetro, largura, comprimento, razão largura/comprimento e simetria lateral de cem cabeças de espermatozoides por ejaculado. Resultados e Discussão O estresse térmico por quatro dias causou uma azoospermia nos touros no período compreendido entre os dias 21 e 28 após o início do estresse, provavelmente por liberação precoce das células espermáticas em estágio mais avançado de diferenciação (espermatides). Observou-se uma oscilação dos valores das variáveis relacionadas ao tamanho, com tendência a diminuição após a insulação. Já em relação às variáveis relacionadas com a forma da cabeça, a razão largura/comprimeto teve uma tendência a aumentar a partir do dia 14 atingindo seu pico máximo no dia 42 e retornando a valores anteriores à insulação no dia 49. A simetria lateral sofreu alteração significativa no 49o dia após a insulação. Com exceção da simetria lateral, que demonstrou uma tendência de normalização de seus valores, os outros parâmetros demonstraram uma tendência de estabilização abaixo dos valores tidos como normais. Das alterações morfométricas encontradas, somente as da simetria comprovadamente interfere na fertilidade. Palavras-chave: cromatina, espermatozoide, estresse, insulação escrotal. Keywords: chromatin, scrotal insulation, sperm, stress. Apoio financeiro: CNPq e FAMEMIG.



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Efeitos da administração de dexametasona sobre a qualidade do sêmen bovino Effects of dexamethasone on the quality of bull semen

L.C. Bicudo1,3, R.R. Weiss1, I.V. Santos2, T.E. Treml1, R.A. Abreu1, C.C. Ferraro1

Universidade Federal do Paraná (UFPR), 1Curitiba, PR, 2Palotina, PR.

3E-mail: [email protected] Introdução A dexametasona é um glicocorticóide sintético de ação prolongada, amplamente utilizada em Medicina Veterinária no controle de reações inflamatórias, alérgicas e imunomediadas, devido a seus efeitos antiinflamatório e imunossupressor. Entretanto, seu uso pode acarretar no aparecimento de inúmeros efeitos indesejáveis. Embora seja bem conhecida a maioria das ações, das indicações, dos efeitos colaterais e tóxicos dos glicocorticóides, há poucas informações a respeito de seus efeitos sobre a reprodução, principalmente a dos machos (HORN et. al.,1999). Objetivou-se avaliar os efeitos da administração da dexametasona por 5 dias, sobre o volume do ejaculado, motilidade, vigor, concentração e anormalidades espermáticas em touros. Material e Métodos Foram utilizados 6 touros que se encontravam em regime de coleta de sêmen em uma Central de Inseminação do sul do Brasil, sendo 4 Jersey, 1 Nelore e 1 Red Angus, com idade em torno de 5 anos, que foram divididos em Grupos Experimental (GE; n=3) e Controle (GC; n=3). Foi coletado por meio da vagina artificial modelo Hannover (V.A.), um ejaculado de cada touro uma vez por semana durante 9 semanas a fim de se estabelecer o perfil seminal das características a serem estudadas (Pré-tratamento). Após este período, os animais do GE receberam aplicações diárias I.M. de 20mg de dexametasona durante 5 dias e os do GC aplicações equivalentes de solução salina (0,9%). Após o período de tratamento, de cada touro de ambos os grupos foi coletado por meio de V.A., um ejaculado uma vez por semana, durante 9 semanas e realizadas avaliações seminais dos parâmetros mencionados (Pós-tratamento). Na comparação entre os GE e GC para os momentos pré e pós-tratamento foi utilizada estatística paramétrica pelo teste ANOVA, para as variáveis concentração e anormalidades espermáticas e avaliação não-paramétrica pelo teste Kruskall-Wallis, para o volume ejaculado, motilidade e vigor espermáticos. Para as análises estatísticas considerou-se um nível de significância de 5%. Resultados e Discussão Não se obteve diferença entre os GE e GC (P>0,05) e nem entre os dois momentos estudados (pré e pós-tratamento, P>0,05) para nenhum dos parâmetros considerados. Deste modo, conclui-se que, em touros, a administração de doses diárias de 20mg de dexametasona por 5 dias não induz à alterações das características seminais: volume do ejaculado, motilidade, vigor, concentração e anormalidades espermáticas. Referências bibliográficas Horn MM, Moraes JCF, Galina CS. Qualidade do sêmen de touros das raças Aberdeen Angus e Brangus-Ibagé em frente à degeneração testicular experimental induzida por dexametasona. Ciência Rural, v.29, n.3, 1999. Palavras-chave: dexametasona, parâmetros espermáticos, sêmen bovino. Keywords: bull semen, dexamethasone, sperm parameter.



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Alta prevalência da hipoplasia testicular em dois rebanhos Gir-leiteiro com diferentes níveis genéticos para produção de leite e manejos nutricionais distintos

High prevalence of testicular hypoplasia in two Gyr-dairy herds with different genetic dairy production levels and nutritional management

G.S. Moura1,4, V.R. Vale Filho1, V.J. Andrade1, M.R.S. Carvalho2, F.A.C. Patrício1, I. Rosse2, F.A. Souza1,

G.P. Moraes1, L.L. Emerick1, T.G. Leite1, J.A.M. Martins3, N.A. Azevedo, M.A Silva

1EV, UFMG, Belo Horizonte, MG; 2ICB, UFMG, Belo Horizonte, MG; 3DCR/FUNCAP/CNPq 4E-mail: [email protected]

Introdução A maior pressão na seleção genética da raça Gir leiteira (Gir-L) tem sido na produção de leite, mantendo-se a caracterização racial, porém a eficiência reprodutiva é também um fator imprescindível, para se atingir boa lucratividade na atividade. O objetivo deste estudo foi determinar a prevalência de hipoplasia testicular (HT) na raça Gir-L, em dois rebanhos no estado de Minas Gerais. Material e Métodos Avaliação clinica - andrológica foi efetuada em todos os tourinhos entre 24 e 40 meses de idade em dois rebanhos da raça Gir-L, no estado de Minas Gerais, no período de março a dezembro de 2009. No rebanho 1, com produção média anual de 2500 kg de leite os animais receberam manejo extensivo, enquanto no rebanho 2, com produção média anual de 6000 kg de leite, os animais foram suplementados com ração balanceada (2Kg/animal/dia, com 20%PB). Foram avaliados peso corporal (PC), circunferência escrotal (CE), e sêmen segundo CBRA (1998), definindo-se andrologicamente os tourinhos normais e hipoplásicos (Vale Filho et al. 2011). A frequência de hipoplasia testicular foi avaliada pelo teste do Qui-quadrado; os demais parâmetros pela ANOVA e as médias testadas pelo teste de Tukey ao nível 5% de probabilidade, utilizando-se o pacote estatístico SAS (1996). Resultados e Discussão A freqüência de HT nos tourinhos não diferiu (p> 0.05) nos dois rebanhos. Em estudo anterior Vale Filho et al. (1980), no Brasil, mostraram prevalência maior da HT em touros “high pedigree” comparado com “standard pedigree”. No presente trabalho considerou-se com HT, tourinhos com alterações graves de gametogênese (Manual..., 2008; Vale Filho et al., 2011) e assimetria maior que 1 cm no comprimento e/ou na largura testicular. Concluiu-se que o manejo alimentar não interferiu na prevalência da HT (p>0,05) nos dois rebanhos, embora tenha sido verificada diferença marcante da Classificação Andrológica por Pontos (CAP) nos tourinhos clinicamente normais, respectivamente, de 59,3 no rebanho 1 e 75,8 pontos no rebanho 2, evidenciando-se maior pressão de seleção para fertilidade nos machos selecionados para futuros reprodutores, no rebanho 2. Tabela 1. Prevalência da hipoplasia testicular em dois rebanhos Gir leiteiro com características genéticas e manejo alimentar diferenciados.

Rebanho

Nível nutricional

Testículo

N (%)

Idade (meses)

Peso (Kg)

CE (cm)

DM (%)

DT (%)

CAP (pontos)

1 (2500 Kgleite/ano)

Pasto

Hipoplásicos (Assimetria)

10 (18,2%)a

28,5

385,0

30,7

31,6c

38,6

-

Normais 45 81,8%)b 36,1 375,9 31,1 12,4d 20,5 59,4

2 (6000 Kg/leite/an

o)

Suplementados

Hipoplásicos (Assimetria)

3(13,1%)a

31,0

440,0

32,5

42,0c

51,5

-

Normais 20 86,9%)b 33,9 467,0 33,7 11,3d 18,6 75,9 P<0,05; CE=circunferência escrotal; DM= defeitos espermáticos maiores; DT: defeitos espermáticos totais. Referências bibliográficas Vale Filho et al. Fertilidad del toro em Brasil. Um estúdio de 1088 toros y 17 945 eyculaciones. In: 9th ICAR, 1980, Madrid,Espanha. Madrid: ICAR, 1980. v.4, p545-548, Vale Filho et al. Patologia espermática. In: Nascimeto EF, Santos RL. Patologia da reprodução dos animais domésticos. 3.ed. Rio de Janeiro, Guanabara Koogan, 2011. p129-149. SAS. User’s Guide. Cary, NC: SAS Inst., 1996. Palavras-chave: fertilidade, hipoplasia testicular zebu. Keywords: fertility, testicular hypoplasia, zebu.



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Achados ultrassonográficos em testículos de touros Nelore durante o desenvolvimento sexual

Ultrasonography’s testicular images in Nelore young bulls during the sexual development

E.V. Costa e Silva1, B.X. Ferreira, C.C. Souza, V.M. Oliveira, A.A.A.D. Fortunato, C.E.S.N. Zúccari

Lab. de Reprodução Animal, GERA-MS, CNPq/UFMS, Campo Grande, MS.

1E-mail: [email protected] Introdução A imagem ultrassonográfica pode ser utilizada para diagnóstico de patologias testiculares, além de ser importante recurso para caracterizar alterações morfo-funcionais normais observadas durante o período de desenvolvimento sexual de tourinhos. O objetivo deste trabalho foi analisar as alterações de imagens ultrassonográficas e caracterizar o aparecimento dos múltiplos pontos hiperecóicos no parênquima testicular de tourinhos Nelore pré-púberes. Material e Métodos Machos Nelore (n=1263) foram submetidos a exames andrológicos sequenciais intercalados de três meses, iniciados após a desmama até os 18 meses: EX1, EX2 E EX3. Os animais contemporâneos estavam a pasto (B. brizantha cv marandu) e suplementação mineral ad libitum. Foi realizada avaliação clínica da genitália externa por meio de inspeção e palpação, tentativas de coleta de sêmen por eletroejaculação a partir de 19 cm de perímetro escrotal e avaliação ultrassonográfica. Imagens ultrassonográficas testiculares no plano látero-medial longitudinal foram obtidas através de um ultrassom Chisson D500vet, sonda linear de 5,0 MHz. As imagens foram analisadas no programa Image J (RASBAND, 1997-2007) identificando-se aqueles que apresentaram no EX1 múltiplos pontos hiperecóicos (MPH) relatados por Cardilli et al. (2009) como microlitíases. Após a coleta de sêmen, realizada por eletroejaculação, foram preparadas amostras de do ejaculado para avaliação da concentração e morfologia espermáticas para determinação a entrada na puberdade adotando-se os critérios de Wolf et al. (1965).

Resultados e Discussão Registrou-se 7,44% (n=94) dos animais com MPH no parênquima testicular no EX1, aos 7 e 9 meses de idade. No EX2, 4,58 (n=81) apresentavam esta alteração, sendo que em 23 deles havia sido observada esta alteração na coleta anterior. No EX3 foi observado 3,48% (n=44) dos animais com MPH no parênquima testicular. No EX3, 44 (3,48%) animais apresentavam MPH, sendo que 21 deles (1,66%) apresentavam a mesma alteração no EX2. Apenas 0,72% (n=9) dos animais apresentaram MPH nos três exames, dos quais oito ainda não havia alcançada a puberdade e um apresentava hipoplasia bilateral. Os MPH não permaneceram nos EX subsequentes na maioria dos animais que apresentaram esse achado ultrassonográfico, ocorrendo o desaparecimento em média aos 12 meses de idade, evidenciando as mudanças estruturais que ocorrem durante o desenvolvimento puberal. A variação do quadro ultrassonográfico sugere que esses achados não devem ser utilizados como recurso clínico de prognóstico único para definição de quadros de infertilidade em tourinhos Nelore nesta idade. Referências bibliográficas Cardilli DJ et al. Alterações do padrão ultrassonográfico do parênquima testicular em bovinos jovens da raça nelore. Acta Sci Vet, v.37, n.4, p.367-370, 2009. Wolf FR. et al. Pubertal behaviour and pubertal characteristics of beef bulls on a high nutrition allowance. J Anim Sci, v.224, p.761-765, 1965. Rasband WS. ImageJ. Bethesda, MD: U.S. National Institutes of Health. Disponível em: http://rsb.info.nih.gov/ij/, 1997-2007. Palavras-chave: exame andrológico, patologia, puberdade, zebu. Keywords: andrologic evaluation, pathology, puberty, zebu bulls.



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Ecotextura testicular em touros da raça Composto Montana Tropical avaliados na pré-estação de monta

Testicular echotexture in Montana Tropical Compound bulls evaluated before breeding season

R.O. Pinho1,8, D.S. Costa2, J.B. Siqueira3, R.B.R. Menezes4, J.V.P. Magão4, L.F. Martins5, J.V.P. Nascimento1, T. Miranda Neto6, S.E.F. Guimarães1, J.D. Guimarães7

Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG, Brasil; 2Universidade Federal do Mato Grosso do Sul, Campo Grande, MS;

3Universidade Federal do Espírito Santo, Vitória, ES; 4Médico Veterinário autônomo; 5Faculdade Anhanguera Educacional; 6Agro-Pecuária CFM Ltda, Magda, SP; 7Coordenador, Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG

8E-mail: [email protected] Introdução O presente estudo teve como objetivo avaliar a utilização da ultrassonografia como teste complementar no diagnóstico de enfermidades testiculares e verificar a relação da ecotextura testicular com a qualidade seminal em touros adultos da raça Composto Montana Tropical.

Material e Métodos Foram utilizados 111 touros adultos da raça Composto Montana Tropical, com idade variando entre 2,9 e 11,8 anos, criados extensivamente. Os animais foram avaliados por exame andrológico e classificados como aptos e inaptos à reprodução pelos aspectos físicos e morfológicos do sêmen. Todos os animais foram avaliados pelo exame ultrassonográfico dos testículos para se avaliar a média da intensidade de pixels de cada imagem das regiões testiculares. Adicionalmente foi atribuído um escore de pontos de fibrose testicular, de 0 a 6, a fim de quantificar os padrões, dimensões e freqüência das lesões fibróticas.

Resultados e Discussão Os animais subdividiram-se em 85,6% (95/111) de animais aptos à reprodução e 14,4% (16/111) de animais inaptos à reprodução. Houve baixa correlação da intensidade de pixels do testículo direito e da média entre os dois testículos com o escore de pontos de fibrose do testículo esquerdo (r = 0,19). Os escores de ponto de fibrose testicular demonstraram baixa correlação com o perímetro escrotal (r = 0,28 e 0,26 para testículo esquerdo e direito, respectivamente), volume testicular (r = 0,29), além de média correlação com a idade dos animais (r = 0,35 e 0,34 para testículo esquerdo e direito, respectivamente). A quantificação da intensidade de pixels por meio da avaliação ultrassonográfica dos testículos isoladamente não foi eficaz em determinar a aptidão reprodutiva em touros adultos da raça Composto Montana Tropical. Além disso, os diversos graus de fibrose testicular não afetaram a qualidade seminal. Referências Bibliográficas Barth AD, Alisio L, Avilés M, et al. Fibrotic lesions in the testis of bulls and relationship to semen quality. Anim Reprod Sci, v.106, p.274-288, 2008. Palavras-chave: fibrose testicular, qualidade seminal, touros, ultrassonografia Keywords: bulls, semen quality, testicular fibrosis, ultrasonography Agradecimentos: Agropecuária CFM Ltda. pelos animais utilizados e à FAPEMIG, pelo apoio financeiro.



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Avaliação do espermatozóide de bovinos por citometria de fluxo: Nelore Assessment of bovine sperm by flow cytometry: Nellore

R.F. Barros1, L.A.Teixeira1, L.G. Deragon2, A.B. Vasconcelos1

1Instituto de Estudos Avançados em Veterinária “José Caetano Borges”, Universidade de Uberaba, Uberaba, MG; 2Central de Reprodução Alta Genetics, Uberaba, MG.

E-mail: [email protected] Introdução A inseminação artificial se tornou o meio mais eficaz, rápido e seguro de gerar animais de alto valor zootécnico e novas técnicas de avaliação têm sido utilizadas para predizer a qualidade do sêmen. Dentre as técnicas mais abordadas, o uso de sondas fluorescentes juntamente com citometria de fluxo tem se mostrado de grande valia (Lymberopoulos e Khalifa, 2010). O presente trabalho objetivou avaliar, por meio de citometria de fluxo, a integridade da membrana plasmática e acrossomal utilizando Iodeto de Propídio e PNA-FITC, respectivamente, e o nível de integridade do DNA com o Alaranjado de Acridina. Material e Métodos Dois ejaculados de 14 bovinos da raça nelore foram coletados por vagina artificial e avaliados em dois momentos, pré e pos congelamento, quanto à motilidade progressiva, vigor e integridade da membrana plasmática (eosina 3%). Das amostras congeladas, foram avaliados todos os parâmetros descritos anteriormente, além da técnica de citometria de fluxo utilizando o Citômetro de fluxo FACS Can, Becton Dickinson®. Para a avaliação da integridade física da membrana plasmática foi utilizado o corante Iodeto de propídeo (IP) e para a avaliação da integridade do acrossoma foi utilizado o corante PNA-FITC. A integridade do DNA foi avaliada por indução ácida e corado pelo alaranjado de acridina. Foram lidos 10.000 eventos para cada uma das 28 amostras de sêmen, sendo que cada leitura durou, em média, 15 segundos. Os dados coletados por citometria de fluxo foram analisados utilizando o programa FLOW JO (Becton Dickinson®). As médias foram comparadas seguindo análise não paramétrica de Kruskal-Wallis. Resultados e Discussão Os resultados das amostras de sêmen pré e pós-congelamento foram descritos pelas médias dos valores: motilidade progressiva (64,24 vs 32,14%; P < 0,001); Vigor (4,64 vc 3,21; P < 0,001); integridade da membrana plasmática, pelo corante eosina (85,85 vs 46,21%, P < 0,001). Na avaliação por citometria de fluxo as amostras de sêmen pós-congelamento apresentaram nível de lesão na membrana plasmática de 45,68%; o nível de lesão na membrana acrossomal de 0,74%; a integridade do DNA 95,93%. Os resultados sugerem que mesmo que ocorra uma lesão na membrana plasmática, esta não necessariamente acometerá a membrana acrossomal. Em relação à desfragmentação do DNA, sugere-se que o processo de criogenia não tem ação sobre a queda da qualidade do DNA, sendo este fator somente espermatogênico (Waterhouse et al., 2010; Lymberopoulos e Khalifa, 2010). Com base nos resultados obtidos, foi possível estabelecer novos protocolos de avaliação do espermatozóide bovino congelado, possibilitando maior acurácia na avaliação da qualidade destas células. Referências bibliográficas Lymberopoulos AG, Khalifa TA. Sperm chromatin stability during in vitro manipulation of beef bull semen. Reprod Domest Anim, v.45, p.307-314, 2010. Waterhouse KE, Gjeldnes A, Tverdal A, De AngelisPM, Farstad W, Håård M, Kommisrud E. Alterations of sperm DNA integrity during cryopreservation procedure and in vitro incubation of bull semen. Anim Reprod Sci, v.117, p.34-42, 2010. Palavra-chave: citometria de fluxo, cromatina, sêmen bovino. Keywords: bull semen, chromatin, flow cytometric.



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Avaliação da morfometria e integridade cromatínica de espermatozóides bovinos após centrifugação em gradiente de Percoll™

Chromatin and morphometry assessment of bovine sperm head after Percoll™ density gradient centrifugation

V. Guimarães Junior1, L.Z. Oliveira2, R.M. Santos1, J.O. Jacomini1, A.F.C. Andrade3, R.P. Arruda3, V.F.M. Hossepian de Lima2, M.E. Beletti1,4

1FAMEV/UFU, Uberlândia, MG; 2FCAV/UNESP, Jaboticabal; 3FMVZ/USP, Pirassununga,SP.

4E-mail: [email protected] Introdução Diversos trabalhos já demonstraram que a porcentagem de espermatozóides com membrana plasmática íntegra aumenta após a centrifugação em gradiente Percoll™ (Machado et al., 2009). Entretanto, os resultados são contraditórios no que diz respeito à integridade da cromatina. O objetivo deste estudo foi analisar a morfometria espermática e a integridade cromatínica de espermatozóides bovinos criopreservados após a centrifugação em gradiente de Percoll™. Material e Métodos Foram utilizados doses de sêmen de seis touros de diferentes raças (Angus, Holandês, Jersey, Gir, Guzerá e Nelore), sendo analisadas três partidas diferentes de cada touro (n = 18). O gradiente de densidade de Percoll™ foi preparado depositando-se 3 mL de cada solução (Percoll™ 80%, 85% e 90%) em camadas. Depois de descongeladas, as amostras de sêmen foram depositadas sobre o gradiente e centrifugadas (500 x g, a 22 °C) por 20 min. Dois esfregaços de cada amostra foram confeccionados antes e após a centrifugação em Percoll™. Os esfregaços foram corados com Azul de Toluidina e as imagens digitais foram processadas em software desenvolvido em ambiente Scilab (Beletti et al., 2005). As análises foram submetidas ao teste T pareado, utilizando o programa SAS, ao nível de significância de 5%. Resultados e Discussão A centrifugação em gradiente de Percoll™ elimina parte dos espermatozóides com morfologia e motilidade anormal (Machado et al., 2009). Assim, era esperada uma maior proporção de espermatozóides com integridade cromatínica após a centrifugação. Entretanto, no presente trabalho, observou-se aumento (P<0,05) da descompactação da cromatina de 2,58 ± 1,38% no sêmen descongelado para 4,57 ± 2,21% no sêmen centrifugado em Percoll™. Adicionalmente, observou-se que o comprimento médio da cabeça espermática (6,05 ± 0,33 pixels) foi maior e que a simetria lateral (0,963 ± 0,002) foi menor nos espermatozóides centrifugados em comparação ao sêmen descongelado (5,94 ± 0,24 pixels e 0,967 ± 0,002, respectivamente, P<0,05). Visto que as camadas do gradiente utilizado no presente trabalho apresentam elevados volume e densidade, é possível que lesões mecânicas tenham ocorrido nas células durante a centrifugação, o que pode ter interferido na compactação da cromatina. Concluiu-se que a centrifugação no gradiente de Percoll™ do presente trabalho aumentou a descompactação da cromatina, o que por sua vez provocou alterações morfométricas na cabeça de espermatozóides descongelados. Entretanto, maiores estudos são necessários para verificar as reais implicações destas alterações na fertilidade in vitro do sêmen bovino centrifugado em Percoll™. Referências bibliográficas Beletti ME et al. Braz J Morphol Sci, v.22, p.85-90, 2005. Machado GM et al. Theriogenology, v.71, p.1289-1297, 2009. Palavras-chave: compactação da cromatina, Percoll, sêmen congelado. Keywords: chromatin condensation, frozen semen, Percoll. Apoio: FAPEMIG.



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Utilização do teste hiposmótico como indicador do potencial de fertilidade do sêmen congelado de touros

Use of hipoosmotic test as an indicator of potential fertility of frozen semen of bulls

T.F. Silva1,3, A.N. Reis2, A.O.A. Silva2, J.S. Sousa2, R. Cunha-Santos1

1Curso de Medicina Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária, UFPA, Belém, PA; 2Central de Biotecnologia de Reprodução Animal, CEBRAN/UFPA, Belém, PA.


Introdução Tem sido demonstrado que a congelação do sêmen provoca efeitos deletérios na estrutura e integridade das membranas dos espermatozóides, que podem estar associadas à redução na fertilidade do sêmen, principalmente quando utilizado para a Fertilização in vitro, pois tem sido demonstrado que mesmo quando o touro é aprovado no exame andrológico e tem o sêmen viável pós-congelação, com altas taxas de fertilidade a campo, estas doses pode não apresentar a mesma fertilidade in vitro (Câmara et al., 2004). O objetivo do experimento foi avaliar a eficiência do teste hiposmótico (HOST) para a identificação da fertilidade do sêmen congelado. Material e Métodos O experimento foi desenvolvido no Laboratório de Fertilização in vitro – INVITRO, da Central de Biotecnologia de Reprodução Animal (CEBRAN/UFPA), localizada em Castanhal-Pa. Para o HOST, utilizou-se a técnica descrita por Bacinoglu et al. (2008) modificada. Foram utilizadas 30 partidas de sêmen congelado de dois reprodutores bovinos adultos com fertilidade comprovada pelo INVITRO, sendo um animal considerado de alta fertilidade (AF) (>40%) e outro de baixa (BF) (<20%) com relação à taxa de blastocistos ao final do cultivo in vitro de 7 dias. O experimento foi dividido em 1 grupo controle e 4 grupos experimentais diferentes quanto à temperatura ou período de incubação (41ºC/15’, 41ºC/30’, 46ºC/15’ e 46ºC/30’). Após estes períodos e tempos, foram avaliadas as caudas enroladas características do HOST. Resultados e Discussão Observou-se um maior aparecimento das caudas enroladas no grupo de AF do que no de BF, quando se utilizou a temperatura de 46ºC, visto que os valores obtidos de caudas dobradas apresentaram uma diferença significativa durante 15 (25,1 x 21,9) ou 30 minutos (25,8 x 22,3) respectivamente (P<0,01), demonstrando que quando se eleva a temperatura de incubação, os animais do grupo de AF tendem a ter uma maior resistência de suas membranas. Isto também foi observado por Bacinoglu et al. (2008) e Fonseca et al. (2005), que demonstraram um maior número de caudas enroladas no grupo de alta fertilidade para diferentes períodos e temperaturas de incubação. No entanto, em vista da necessidade de se obter o resultado da fertilidade no menor tempo possível, pode-se considerar o período de 15 minutos à 46ºC como o melhor tempo para se avaliar a fertilidade de partidas de sêmen congelado de touros. Referências bibliográficas Bacinoglu S, Tas M, Cirit Ü, Özdas ÖB. The potential fertility estimation capacity of the hypoosmotic swelling test, the thermal stress test and a modified cervical mucus penetration test in the bovine. Anim Reprod Sci, n 104. p.38-46. 2008. Câmara DR, Simplício KMMG, Guerra MMP, Brandão EWP, Padilha RT. Influência da variação individual na congelabilidade do sêmen e fertilidade in vivo de ovinos deslanados. Ciênc Vet Tróp, v.7, p.82-89, 2004. Fonseca JF, Torres CAA, Maffili VV, Borges AM. Hypoosmotic swelling test in goat spermatozoa. Anim Reprod, v.2, n.2, p.139-144, 2005. Palavras-chave: bovino, fertilidade, HOST, sêmen. Keywords: bovine, fertility, HOST, semen.



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Efeito da sequência de inseminação após descongelamento simultâneo de palhetas de sêmen na taxa de concepção à IATF de vacas Nelore

Effect of sequence of insemination after simultaneous thawing of multiple semen straws on conception rate at TAI in Nelore cows

L.Z. Oliveira1, R.M. Santos2, A.F.C. Andrade3, E.C.C. Celeghini3, T. Martins4, R.F.G. Peres5,

H.B. Graff5, E.R. Carvalho5, V.F.M. Hossepian de Lima1, R.P. Arruda3

1FCAV/UNESP, Jaboticabal, SP; 2FAMEV/UFU, Uberlândia, MG; 3FMVZ/USP, Pirassununga, SP; 4FMVZ/UNESP,

Botucatu, SP; 5AFB, Nova Xavantina, MT E-mail: [email protected]

Introdução Devido ao intenso uso da inseminação artificial em tempo fixo (IATF) e ao elevado tamanho dos rebanhos em reprodução no Brasil, diversas vacas precisam ser inseminadas ao mesmo tempo. Esses fatores têm resultado na prática rotineira do descongelamento simultâneo de diversas palhetas para facilitar o manejo do sêmen. O objetivo deste trabalho foi determinar o efeito da sequência de inseminação após o descongelamento simultâneo de diversas palhetas de sêmen na taxa de concepção (TC) à IATF de vacas Nelore. Material e Métodos Foram utilizadas vacas da raça Nelore, com no mínimo 30 dias pós-parto. Todas as vacas (n=947) receberam 2 mg de Benzoato de Estradiol (Sincrodiol®) e inserção de dispositivo intravaginal liberador de progesterona (Sincrogest®) no d0. No d8 o dispositivo foi removido e administrou-se 500 μg de cloprostenol sódico (análogo da PGF2α; Sincrocio®), 300 UI de eCG (Novormon®) e 0,5 mg de Cipionato de Estradiol (ECP®). No d10 (48h após remoção do dispositivo), as fêmeas foram submetidas à IATF. Dez palhetas de sêmen (0,5 mL) foram descongeladas simultaneamente em descongelador eletrônico (Fertilize®) a 36°C, durante no mínimo 30 segundos. Foram utilizadas doses de sêmen de três touros da raça Angus. As partidas de sêmen e a sequência de palhetas foram distribuídas igualmente entre os dois inseminadores. As anotações incluíram sequência de inseminação (primeira, segunda, terceira, até a décima palheta) e momento da inseminação propriamente dita. O diagnóstico de gestação foi realizado por ultrassonografia 40 dias após a IATF. As vacas foram divididas em três grupos diferentes: vacas inseminadas com as 1a, 2a e 3a palhetas (G1, n=286); vacas inseminadas com as 4a, 5a e 6a palhetas (G2, n=284); vacas inseminadas com as 7a, 8a , 9a e 10a palhetas (G3, n=377). A TC foi analisada pelo PROC LOGISTIC do programa SAS, incluindo no modelo os efeitos de touro, inseminador e grupo.

Resultados e Discussão A TC foi afetada (P=0,042) pela sequência de inseminação (G1: 52,80%; G2: 53,17%; G3: 45,36%). O período médio (± DP) que as palhetas permaneceram no descongelador, após os 30 segundos de descongelação, foram 01:10 ± 00:49 (G1), 03:03 ± 01:10 (G2) e 05:27 ± 01:39 min (G3). Quando se realiza um descongelamento simultâneo de grupos de palhetas, é importante considerar que sob essas condições, o banho-maria pode funcionar como um ambiente de incubação para o sêmen (Brown et al., 1991). Assim sendo, o ambiente do descongelador pode ter influenciado na integridade das membranas espermáticas e/ou em outras características seminais, interferindo desta forma, na fertilidade in vivo do espermatozóide bovino criopreservado. Referências bibliográficas Brown DW et al. J Anim Sci, v.69, p.2303-2309, 1991. Palavras-chave: descongelamento simultâneo, nelore, taxa de prenhes, Keywords: nelore, pregnancy rate, simultaneous thawing.




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Avaliação in vitro da congelabilidade do sêmen de touros jovens da raça Gir Evaluation in vitro of the freezability of semen from young bulls Gir breed

C.P. Barbosa1,4, L.A. Batista2, R.F. Barros1, M.B.D. Ferreira3, L.A. Teixeira1,

A.B. Vasconcelos1

1Instituto de Estudos Avançados em Veterinária “José Caetano Borges” Universidade de Uberaba, Uberaba, MG; 2Biomedicina/Universidade de Uberaba, Uberaba, MG; 3EPAMIG, Belo Horizonte, MG

4E-mail: [email protected] Introdução O congelamento do sêmen bovino é essencial para atender as novas biotecnologias da reprodução. A importância da criogenia está na diminuição do custo de produção, maior aproveitamento do reprodutor, melhoramento genético e controle de doenças. A criopreservação consiste na redução do metabolismo celular mantendo preservada a qualidade genética (Martins et al., 2007). O objetivo deste trabalho foi avaliar a congelabilidade do sêmen de touros jovens da raça Gir para uma posterior seleção genética. Material e Métodos Foram avaliados três ejaculados, coletados de novembro a abril (2009-2010) em coletas de dois em dois meses por meio de eletroejaculador, de cada 36 touros jovens da raça Gir, com idade entre 20 e 24 meses, participantes da prova de melhoramento genético promovida pela ABCZ (Associação Brasileira dos Criadores de Zebu). Todos os animais foram submetidos às mesmas condições de coleta e manejo. As amostras de sêmen foram analisadas antes do congelamento quanto à motilidade progressiva (MP) e vigor (V). O diluente de escolha foi o tryladil®. Três semanas após o congelamento, as amostras foram descongeladas e analisadas pelas técnicas de microscopia de campo claro, observando-se a motilidade progressiva (MP), o vigor (V), a integridade da membrana plasmática pelo corante azul de tripan (AT) e eosina (E) e a funcionalidade de membrana pelo teste HOST. A análise estatística foi realizada entre as médias dos valores e comparada pelo teste Student-Newman-Keuls (SNK) (p<0,001). Resultados e Discussão Na avaliação da capacidade de congelabilidade do sêmen, apenas 22 animais apresentaram índices satisfatórios (CBRA,1998) após o descongelamento, sendo o valor médio dos ejaculados, para motilidade progressiva ≥30% e vigor ≥3. Os outros 14 animais não se qualificaram nestes parâmetros impostos de motilidade e vigor, em relação ao valor médio dos três ejaculados avaliados, mas não foram descartados do programa, para serem avaliados quando mais velhos. Os resultados de congelabilidade, dos 22 animais classificados, foram determinados pela média entre os valores que respondem aos parâmetros pré e pós-congelamento. Os valores foram no pré-congelamento: MP (80%) e V(4) e no pós- congelamento: MP (65%), V (3), AT (63%), E (60%) e HOST (40%). A média dos resultados microscópios estão dentro dos parâmetros estabelecidos pelo CBRA (Manual..., 1998). Quanto à comparação entre azul de tripan e eosina, para análise da integridade da membrana plasmática, não houve diferença significativa (p>0,001). Sugere-se que o sêmen dos animais aprovados apresenta características básicas para o programa de criogenia, mesmo sendo jovens. Os valores de integridade e funcionalidade da membrana plasmática, encontrados no pós-congelamento poderão servir para padronizações futuras de exames para a seleção de touros jovens da raça Gir. Referências bibliográficas Manual para exame andrológico e avaliação de sêmen animal. Belo Horizonte: CBRA, 1998. 49p. Martins CF, Báo SN, Dode MN, Correa GA, Rumpf R. Effects of freeze-drying on cytology, ultrastructure, DNA fragmentation, and fertilizing ability of bovine sperm. Theriogenology, v.67, n.8, p.1307-1315, May 2007. Palavras-chave: congelamento, Gir, sêmen. Keywords: Gir, semen, thawing.



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Efeito do bloqueio do órgão vomeronasal sobre o comportamento sexual de bovinos inteiros confinados a partir do desmame

Effect of blocking the vomeronasal organ of feedlot bulls at weaning on sexual behavior

F.A. Barbosa1, P.F.B. Pinto, V.J. Andrade, L.L. Emerick, F.A. Souza, J.A.M. Martins, P.E.M. Gonçalves, F.A.C. Patricio, G.S. Moura, V.R. Vale Filho

1Escola de Veterinária da UFMG, Belo Horizonte, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução O órgão vomeronasal (OVN) é uma estrutura quimiorreceptiva situada na base do septo nasal, capaz de detectar ferormônios, induzindo respostas comportamentais estereotipadas. Liga-se às estruturas límbicas do cérebro, importantes para o desenvolvimento e a expressão do comportamento sexual (Meredith, 1998; Keverne, 2004) A depleção do OVN pode afetar o interesse sexual dos machos sem experiência prévia, não tendo efeito no comportamento sexual dos animais com experiência sexual. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito do bloqueio do órgão vomeronasal sobre a libido de bovinos machos inteiros jovens, confinamento a partir do desmame. Material e Métodos Foram utilizados 23 bezerros F1 Angus x Nelore, inteiros, confinados, com peso médio de 189,02 ± 21,47 Kg e idade média de 202,2±23,76 dias, divididos em dois tratamentos: T1 = 11 cauterização dos ductos incisivos (n= 11) e T2 = controle (n=12). O teste da libido utilizado foi o proposto por Vale Filho et al. (1994), realizado aos 72 e aos 98 dias após a aplicação dos tratamentos. Para cada atitude dos touros foi atribuído um escore, classificando-os em: baixa, média e alta libido. Foi utilizado para comparação entre os tratamentos o teste de Kruskal-Wallis por meio do procedimento NPAR1WAY com a opção WILLCOXON do SAS (SAS, 2002), ao nível de 5% de probabilidade. Resultado e Discussão Durante o primeiro teste realizado aos 283,20±23,76 dias de idade, o grupo cauterizado apresentou menor libido que o grupo controle (p<0,05), mas esta diferença não se manteve durante o segundo teste, quando os mesmos apresentavam idade média de 306±23,76 dias (Tabela 1). Os resultados sugerem que o bloqueio do OVN pela cauterização tenha resultado no atraso da manifestação da puberdade, ou ainda que, no intervalo do primeiro para o segundo teste os animais tenham passado por um processo de aprendizado, apresentando um comportamento sexual semelhante aos animais do grupo controle. Concluiu-se que a cauterização dos ductos incisivos foi eficaz em bloquear o OVN e alterar a libido de bovinos inteiros sem experiência sexual prévia, mas não em animais com experiência sexual prévia. Tabela 1 – Escores e classificação da libido durante os testes realizados para os diferentes tratamentos.

Tratamento 1oTeste (72 dias) 2oTeste (98 dias) Escore Classificação Escore Classificação

Cauterizado 2,55±0,62ª Baixo 3,82±0,54ª Médio Controle 4,83±0,44b Médio 4,25±0,48ª Médio

P < 0,05. Referências Bibliográficas Meredith M. Vomeronasal function. Chem. Senses, v.23, p.463-466, 1998. Keverne EB. Importance of olfactory and vomeronasal systems for male sexual function. Physiology and Behavior, v.83, p.177-187, 2004. Vale Filho VR, Bergmann JAG, Andrade VJ. et al. (1994). Classificação andrológica por pontos (CAP), versus libido, na eficiência na fecundação de touros Nelore de 2 e 3 anos de idade, usados em estação de monta bem definida. In: Encontro de Pesquisa da Escola de Veterinária da UFMG, 14, v.1, 1994, Belo Horizonte. Anais... Belo Horizonte: UFMG, 1994. p.88, SAS. User’s Guide. Cary, NC: SAS Inst. Inc., 2002. Palavras-chave: castração, cauterização, libido, órgão vomeronasal. Keywords: castration, cauterization, libido, vomeronasal organ.



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Avaliação andrológica de touros bovinos, criados à campo, no Estado do Maranhão Andrologic evaluation of bulls under extensive production conditions on Maranhão State

S.C.C. Pinto1,3, P.M. Costa1, L.S. Sarmento1, M.T.C. Gonçalves1, R.T. Chaves1, A.C. Nicacio2

1Universidade Estadual do Maranhão, São Luís, MA; 2Universidade Federal do Pampa, Curso de Biotecnologia, São Gabriel, RS.

3E-mail: [email protected] Introdução Novas biotecnologias reprodutivas estão sendo inseridas no Maranhão, a fim de elevar o potencial genético dos animais. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar andrologicamente reprodutores criados extensivamente, em propriedades rurais do Estado do Maranhão, a fim de selecionar reprodutores com as melhores características seminais para protocolos de criopreservação de sêmen. Material e Métodos O trabalho está sendo desenvolvido em propriedades rurais no Estado do Maranhão. Foram analisados 45 touros, sendo 39 da raça Nelore e 5 da raça Santa Gertrudes. Os animais foram submetidos à avaliação andrológica completa, sendo a eletroejaculação o método de colheita de sêmen. Ainda na propriedade foi feita análise imediata do sêmen, sendo analisados parâmetros de motilidade, vigor e turbilhonamento. A análise tardia do sêmen foi realizada no Laboratório de Reprodução da Universidade Estadual do Maranhão, sendo avaliadas concentração e patologias espermáticas. Resultados e discussão Dentre os 45 touros examinados, somente 29 responderam satisfatoriamente a eletroejaculação. Quanto ao exame do aparelho genital, a média do perímetro escrotal (PE) foi de 33cm, com desvio padrão médio (DPM) de 3,45. Dos animais avaliados, 33 apresentaram alterações menores no escroto: presença de carrapatos (n=22), presença de moscas (n=7), lesões superficiais (n=1). Apenas um animal apresentou sensibilidade dolorosa no momento do exame. A biometria testicular dos animais apresentou médias de comprimento e largura do testículo direito de 16,75cm (DPM±3,59) e 8,51cm (DPM ±1,89) e do testículo esquerdo foi de 16,71cm (DPM±3,23) e 8,66cm (DPM±1,96), respectivamente. Considerando a escala de 1 (consistente) a 5 (flácido), a consistência média testicular, foi de 2,87 (DPM±0,33) para ambos os testículos. Quanto ao turbilhonamento obteve-se média de 2,23 (DPM±0,93); motilidade média foi 66,07% (DPM±17,15); vigor médio foi 2,7 (DPM±0,8); a média da concentração espermática foi 639,5X106 sptz/mL e, as médias de defeitos maiores e menores foram 3,46 (DPM±3,05) e 13,51 (DPM±8,8), respectivamente. Baseado nos parâmetros de qualidade preconizados pelo Colégio Brasileiro de Reprodução Animal (CBRA, 1998) e do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA), concluímos que dentre os 45 animais examinados, apenas 10 estão aptos à criopreservação de sêmen. Palavras-chave: bovino, exame andrológico, sêmen. Keywords: andrologic exam, bovine, semen.



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Suplementação oral com vitamina E e qualidade seminal pós congelamento Supplementation with vitamin E and seminal quality after freezing

L.M. Thiesen1, L.K. Hatamoto-Zervoudakis, F.M. Wingert, P.H.D. Gomes, M.F. Duarte Júnior,

P.P. Tsuneda, J.T. Zervoudakis, B.H. Tsuneda, F.A.P.B. Arguello, W.A.S. Marinho

Universidade Federal de Mato Grosso (UFMT), Cuiabá, MT. 1E-mail: [email protected]

Introdução Trabalhos têm demonstrado que a Vitamina E melhora a qualidade seminal devido a sua ação antioxidante, sendo um eficiente inibidor da peroxidação lipídica. A peroxidação lipídica diminui a viabilidade e a integridade da membrana espermática. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da suplementação oral com vitamina E sobre a integridade da membrana espermática e a qualidade do sêmen pós-congelamento. Material e Métodos Foram utilizados 16 touros da raça Brangus com idade e pesos médios de 24meses e 462,2 K, divididos aleatoriamente em dois grupos, um controle (GC) e o outro suplementado (GS) com vitamina E (400UI/animal/dia) durante 60 dias. Durante o período experimental foram realizadas quatro coletas de sêmen por eletroestimulação. A integridade da membrana espermática foi avaliada através do teste hipo-osmótico (HIPO), coloração eosina/nigrosina (EOS) e coloração tripla (TRIP). Os dados foram analisados através da ANAVA com nível de significância de 10%. Resultados e Discussão Não houve efeito (p>0,10) da suplementação oral com vitamina E sobre as variáveis utilizadas para avaliar a integridade da membrana espermática HIPO e TRIP. Entretanto, na variável EOS observou-se efeito da suplementação (p=0,0225) onde GC apresentou 76,83±2,07 % de espermatozóides viáveis e GS com 81,91±2,56 % de espermatozóides viáveis após o descongelamento. Desta forma é possível concluir que a suplementação oral dos touros com vitamina E evitou uma piora na viabilidade espermática no pós congelamento/descongelamento.

Referências bibliográficas Marinho WAS. Suplementação oral com Vitamina E para touros Brangus: Integridade da membrana espermática, qualidade seminal a fresco e pós-congelamento. 2009 68f. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) - Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Universidade Federal de Mato Grosso, Cuiabá, 2008. Tizol G, Duque D, Cardenas A. Tecnica de eosina-nigrosina para la determinacion de reacciones acrosomaticas en espermatozoides vivos. Rev Cub Cienc Vet, v.22, n.2, 1991. Palavras-chave: fertilidade, integridade de membrana, tocoferol. Keywords: fertility, membrane integrity, tocopherol.



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Viabilidade e fertilidade do sêmen bovino congelado com vitamina C, vitamina E ou vitamina C + E

Viability and fertility of frozen bovine semen with vitamin C, vitamin E or vitamin C + E

F.M. Wingert1, L.K. Hatamoto-Zervoudakis, L.M. Thiesen, P.H.D. Gomes, P.P. Tsuneda, M.F. Duarte Júnior, A.C.S. Souza, J.T. Zervoudakis, B.H. Tsuneda,

F.A.P.B. Arguello, W.A.S. Marinho

Universidade Federal de Mato Grosso (UFMT), Cuiabá, MT. 1E-mail: [email protected]

Introdução Embora muito útil, o processo de criopreservação de sêmen causa perda e diminuição na qualidade espermática devido ao aumento no estresse oxidativo. Algumas vitaminas vêm sendo testadas como alternativas que contribuam para diminuição desses danos. A vitamina C é um antioxidante presente no plasma seminal que melhora a qualidade do espermatozóide protegendo-o do efeito oxidativo, e sabe-se que a vitamina E possui propriedades antioxidantes que podem reduzir a incidência de distúrbios reprodutivos. O objetivo do presente trabalho foi avaliar se a utilização de vitamina C e vitamina E bem como a associação de ambas na suplementação do meio de congelamento alteraria a viabilidade e a fertilidade do sêmen bovino congelado. Material e Métodos As amostras de sêmen foram obtidas a partir de três ejaculados de 3 touros jovens da raça Brangus obtidas através da técnica de eletro-estimulação. De cada ejaculado foram retiradas 4 alíquotas de 1mL e diluídas na proporção de 1:1, uma com diluente a base de TRIS-gema-citrato de sódio (GC), uma com diluente suplementado com 0,45mg/mL de vitamina C (VITC), uma com diluente suplementado com 2,0mM de vitamina E (VITE), e a outra com diluente suplementado com 2,0mM de vitamina E associado a 0,45mg/mL de vitamina C (VITC+E). Imediatamente após o descongelamento o sêmen foi avaliado quanto á motilidade espermática (MOT) vigor (VIG) e viabilidade espermática (EOS). Os dados foram analisados através da análise de variância e do teste SNK, com um nível de significância de 10%. Resultados e Discussão Em relação á motilidade e vigor não houve diferença entre os tratamentos (p>0,10). Para eosina observou-se influência do tratamento (p=0,0049) onde os valores encontrados para a viabilidade espermática pós-descongelamento foram: 15,00±9,38; 62,75±10,18; 69,25±10,19; 60,67±13,40, para GC, VITC, VITE, VITC+E, respectivamente.Entretanto não foram encontradas diferenças entre os tipos de suplementação. Com base nos resultados conclui-se que a suplementação dos meios de congelamento protegeu a célula espermática do dano da criopreservação, contudo mais estudos tornam-se necessários. Referências bibliográficas A Membrillo Ortega, A. Cordova Izquierdo, J.J. Hicks Gomez, et al. Peroxidación lipídica y antioxidantes en la preservación de semen: Una revisión. INCI, v.28, n.12, p.699-704, 2003. Palavras-chave: antioxidante, estresse oxidativo, fertilidade. Keywords: antioxidant, fertility, oxidative stress.



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Suplementação oral com selênio: integridade da membrana espermática e qualidade do sêmen fresco de touros jovens da raça Brangus

Oral supplementation with selenium: spermatic membrane integrity and fresh semen quality of young Brangus bulls

B.H. Tsuneda, L.C. Freitas, L.K. Hatamoto-Zervoudakis, E.A. Barbosa, F.A.P.B. Arguello,

W.A.S. Marinho, J.T. Zervoudakis, J.L.O. Santana, M.F. Duarte Júnior

Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Universidade Federal de Mato Grosso, Cuiabá, MT. E-mail: [email protected]

Introdução Fisiologicamente, ocorre a produção de espécies reativas ao oxigênio (EROs), porém, quando há um desbalanço entre a produção e inativação dos EROs, tem-se o estresse oxidativo. O selênio atua como co-fator da GPx, protegendo o tecido celular contra o estresse oxidativo. O objetivo do trabalho foi avaliar se a integridade da membrana espermática e a qualidade do sêmen fresco de touros da raça Brangus são alterados com a suplementação oral de selênio. Material e Métodos Foram utilizados 17 touros da raça Brangus com idade média de 24 meses e peso vivo médio de 454 kg. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em 2 grupos: grupo controle (GC) e grupo suplementado com selênio (GS, 0,1 mg de selênio/kg de MS ingerida) adicionados ao concentrado. Cada grupo foi mantido separado em piquete formado por pastagem de Panicum maximum cv. Mombaça recebendo 4,5 kg/animal de concentrado diariamente. A suplementação com selênio foi realizada por 60 dias. Durante o período experimental, foram realizadas 4 coletas de sêmen sendo: antes da suplementação; com 30 e 60 dias de suplementação; e 15 dias após o término da suplementação. As amostras foram submetidas a exames imediatos: morfologia, volume, turbilhonamento, motilidade(MOT) e vigor(VIG) espermático; e exames laboratoriais: concentração, patologias e integridade de membrana espermática(HIPO). Os dados foram analisados através da ANAVA com nível de significância de 10% com auxilio do programa estatístico SAS. Resultados e Discussão Para o sêmen fresco foi encontrado efeito da suplementação para as variáveis MOT (p= 0,0183), VIG (p= 0,0125) e HIPO (p= 0,0287); sendo GC superior ao GS para MOT e VIG e GS superior ao GC para HIPO, para as demais variáveis não foi observado efeito da suplementação com selênio (p> 0,10). Com base nos resultados encontrados conclui-se que, nas condições experimentais presentes, a suplementação com selênio, na concentração de 0,1 mg/kg de MS para reprodutores bovinos jovens da raça Brangus diminui a motilidade e o vigor espermático, entretanto, melhora a integridade da membrana espermática no sêmen fresco, não alterando a qualidade seminal. Referências bibliográficas -SHARMA RK, AGARWAL A. Role of reactive oxygen species in male infertility. Urology, v.48, p.835-850, 1996. Palavras-chave: espécies reativas ao oxigênio, espermatozóide, estresse oxidativo. Keywords: reactive oxygen species, spermatozoa, oxidative stress.



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Relação entre a avaliação subjetiva da motilidade durante o teste de termorresistência e avaliação computadorizada imediatamente após a descongelação de espermatozóides

epididimários bovinos criopreservados Relationship between subjective assessment of motility during the heat resistance test and a single computer

assisted motility evaluation of cryopreserved bovine epididymal sperm

T.T.C. Carvalho1, M.F. Brito1, A.O. Gontijo1, M.I.V. Melo1, J.V.M. Mambrini2, M. Henry3, B.C. Cruz3

1PUC Minas, Betim, MG; 2Consultor Estatístico; 3EV-UFMG, Belo Horizonte, MG.

Contato: [email protected] Introdução O objetivo dessa pesquisa foi avaliar o grau de correlação entre os resultados do Teste de Termo Resistência Lento (TTR) usado para a avaliação da motilidade espermática usando microscopia convencional, com os resultados obtidos pelo Sistema de Análise Computadorizada de Parâmetros Espermáticos (CASA) para espermatozóides epididimários bovinos criopreservados.

Material e Métodos Foram trabalhados 16 pares de epidídimos. Os epidídimos dissecados foram mantidos a 5°C por 24 horas. O volume recuperado foi diluído com o meio diluidor Tris-gema alcançando 7% de glicerol na diluição final. As amostras foram resfriadas em estufa (-0,10°C/ minuto) e mantidas à 5º C por período entre 24 e 48 horas, sendo então congeladas. As amostras foram submetidas ao CASA somente logo após descongelação e ao TTR até 120 minutos, usando para a avaliação um microscópio óptico convencional. Os resultados das características físicas do espermatozóide não seguiram distribuição normal (teste de Shapiro-Wilk) e para obtenção do grau de associação das variáveis obtidas no TTR e no CASA procedeu-se a correlação de Spearman. Resultados e Discussões As amostras que apresentaram valores mais altos de motilidade total no início da análise do TTR , em sua maioria, foram as que apresentaram maiores valores após 120’ (MT120’) de descongelação (r2= 0,73). As correlações entre a MT no TTR (análise subjetiva) e MT após descongelação (MTCASA) foram de médias a altas e positivas, ressaltando-se a alta correlação entre MT aos cinco minutos no TTR e no CASA (r2=0,74), e entre MT120’ (TTR) e MTCASA após descongelação (r2=0,59). A correlação entre VCL (velocidade curvilinear de deslocamento espermático) ao descongelar e MT120’ foi baixa (r2= 0,09), indicando que importante característica da cinética espermática correlacionada com a fertilidade (Verstegen et al., 2002) não está refletida na avaliação da longevidade espermática. As correlações entre a motilidade progressiva após descongelação (MPCASA) e MP aos cinco minutos no TTR (r2= 0,47) e MPCASA, sugere maior imprecisão na avaliação subjetiva desta característica de movimento espermático, quando se tem como base padrões pré-estabelecidos para análise computadorizada. Conclusões O TTR avaliado por microscopia óptica convencional e a avaliação computadorizada da motilidade espermática após descongelação se mostraram correlacionados. Entretanto, estes testes não são excludentes, uma vez que a VCL apresentou baixa correlação com o TTR. Referências bibliográficas Verstegen J, Iguer-Ouada M, Oclin K. Computer assisted semen analyzers in andrology research and veterinary pratice. Theriogenology, v.57, p.149-l 79, 2002. Palavras-chave: bovino, CASA, criopreservação, espermatozóide epididimário, TTR. Keywords: bovine, CASA, cryopreservation, epididymal sperm, TTR.



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Descrição do crescimento do perímetro escrotal em touros Guzerá pelo uso de modelos não lineares

Description of the scrotal circumference growth in Guzerat bulls using nonlinear models

A.M. Loaiza-Echeverri1, D.A. Miranda, P.G. Lage, A. Solini, A.C.D. Oliveira, J.A.G. Bergmann, M. Henry

Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução O perímetro escrotal tem sido amplamente usado como um critério de seleção de touros jovens por estar positivamente associado com características seminais e por ser um indicativo de precocidade sexual (Brito et al. 2004). Os modelos matemáticos não lineares permitem descrever o crescimento ao longo do tempo e a interpretação biológica de seus parâmetros (Santoro et al. 2005); assim, o objetivo do presente trabalho foi identificar o modelo mais adequado para descrever o crescimento testicular da raça Guzerá. Material e Métodos Foram utilizadas 7.695 medidas de perímetro escrotal de touros Guzerá provenientes de três fazendas localizadas nos municípios de Brasilândia, Unaí e Carlos Chagas, no estado de Minas Gerais. Foram utilizados os modelos não-lineares Von Bertalanffy A (1-B exp –kt)3, Brody A (1 – B exp –kt), Gompertz A exp(- B exp –kt) e Logístico A (1 + B exp –kt), em que A é o perímetro escrotal à maturidade, B é o valor inicial do perímetro escrotal, e k é o índice de maturidade ou taxa de crescimento. O ajuste dos modelos foi avaliado pelo coeficiente de determinação (R2) e o quadrado médio do erro (QME). Resultados e Discussão Os modelos apresentaram o R2 entre 0,60 e 0,80; o modelo Logístico apresentou o maior R2. O QME foi similar entre os modelos, mas foi o modelo Logístico o que obteve o menor valor. O modelo Brody, seguido do modelo Von Bertalanffy sobre estimaram o valor do parâmetro A (81 e 53,6 cm), fato também relatado por Quirino et al. (1999). O modelo Gompertz calculou o parâmetro A entre 39 e 48 cm e o Logístico entre 37 e 41 cm. As maiores taxas de crescimento foram calculadas pelo modelo Logístico e as menores pelo Brody. O modelo Logístico calculou o parâmetro B entre 2,5 e 3,3 cm enquanto os demais modelos entre 0,3 e 1,7. Entre os modelos Gompertz e Logístico, foi este ultimo o que melhor descreveu o crescimento do perímetro escrotal nos touros Guzerá, como relatado por Quirino et al. (1999) e Nieto et al. (2006) para as raças Nelore e Canchim, respectivamente. Referências bibliográficas Brito LFC, Silva DF, Unanian MM. Sexual development in early- and late-maturing Bos indicus and Bos indicus x Bos taurus crossbred bulls in Brazil. Theriogenology, v.62, p.1198–1217, 2004. Santoro KR, Barbosa SBP, Brasil LHA .Estimativas de parâmetros de curvas de crescimento de bovinos zebu, criados no estado de Pernambuco. Rev Bras Zootec. v.34, n.6, p.2262-2279, 2005 (supl.). Quirino CR, Bergmann JAG, Vale Filho VR, Andrade VJ, Pereira JCC. Evaluation of four mathematical functions to describe scrotal circumference maturation in Nellore bulls. Theriogenolgy, v.52, p.25-34, 1999. Nieto LM, Silva LOC, Gondo A. Análise da curva de crescimento do perímetro escrotal de touros Canchim em diferentes sistemas de criação. Arq CiêncVet Zool Unipar. v.9, n.2, p.99-103, 2006. Palavras-chave: crescimento testicular, Guzerá, modelos não lineares. Keywords: Guzerat bulls, nonlinear models, testicular growth.



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Estudo da campilobacteriose genital bovina e tricomonose bovina no Distrito Federal e entorno

Study of bovine genital campilobacteriosis and bovine trichomoniasis at the Distrito Federal and surroundings

D.R. Leal1, G.O. Fernandes, F.F. Gouveia, K.L. Miranda, J.P. Neves

Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Brasília, DF. 1E-mail: [email protected]

Introdução A Campilobacteriose Genital Bovina e a Tricomonose Bovina são enfermidades de caráter eminentemente venéreo. A primeira causada pela bactéria Campylobacter fetus subsp. venerealis e a segunda causada por um protozoário, o Tritrichomonas foetus. O habitat natural desses agentes é o trato reprodutivo de bovinos e as principais manifestações clínicas são: a repetição de cio em intervalos irregulares e o aborto, com maior frequência até os cinco meses de gestação. A campilobacteriose e a tricomonose são responsáveis por perdas econômicas principalmente devido à queda na produção de bezerros e o aumento no intervalo de partos. O objetivo deste trabalho foi estudar a prevalência dessas duas doenças em bovinos do Distrito Federal e entorno. Material e Métodos Foram coletadas 398 peças de aparelhos reprodutivos em frigoríficos da região do Distrito Federal e entorno, 258 de fêmeas (útero e vagina) e 140 de machos (pênis e prepúcio). Os úteros e vaginas ou prepúcios foram abertos com material estéril e após escarificação com lâmina de bisturi foram passados dois swabs estéreis por órgão amostrado. Um swab foi lavado em PBS (pH 7,4) e acondicionado em gelo para diagnóstico de campilobacteriose pelo exame de imunofluorescência direta, o outro foi lavado em meio de Diamonds para cultivo e identificação do agente da tricomonose bovina. Resultados e Discussão Dos 398 animais testados, 44 foram positivos ao teste de imunofluorescência direta (27 fêmeas e 17 machos), o que corresponde a uma prevalência de 11,1% de animais positivos para campilobacteriose, com intervalo de confiança (95%) de 7,97% a 14,14%. Pellegrin et al. (2002) em um estudo com amostragem aleatória relataram índices de 52,3%. Não foi possível isolar o agente Tritrichomonas foetus de nenhuma das amostras coletadas, embora possíveis falhas possam ter influenciado esse resultado, Rocha et al. (2009) encontraram resultados semelhantes. Os resultados desse estudo confirmam a presença da infecção por Campylobacter fetus subsp. venerealis em rebanhos bovinos da região do Distrito Federal e entorno. Assim, recomenda-se a inclusão da pesquisa dessa infecção em rebanhos com baixos índices reprodutivos e uma maior investigação para tricomonose.

Referências bibliográficas Pellegrin, A.O. et al. Bovine Genital Vampilobacteriosis in Pantanal, State of Mato Grosso do Sul, Brazil. Rev Élev Méd Vét Pays Trop, v.55, p.169-173, 2002; Rocha, F.S. et al. Investigação de Campylobacter fetus e Tritrichomonas foetus na mucosa prepucial de touros da região do Médio Paraíba, RJ. Cienc Rural, v.39, n.5, p.1586-1589, 2009. Palavras-chave: Campilobacteriose, tricomonose, reprodução, bovinos. Keywords: Campylobacteriosis, trichomoniasis, breeding, cattle.



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Características físicas do sêmen de touros (Bos taurus indicus) recebendo dietas com níveis de glicerol

Physical characteristics of sperm of bulls (Bos taurus indicus) fed diets with levels of glycerol

E.S.O. Strada, J.A. Marques, R.S. Souza, L.P. Barbosa1, P.A. Dutra, B.M. Cardoso Neto, C.E.A. Biscarde, F.G. Ferreira

Universidade Federal do Recôncavo da Bahia, Cruz das Almas, BA.

1E-mail: [email protected] Introdução O glicerol ocorre naturalmente em formas combinadas com os glicerídeos, em todas as gorduras animais e óleos vegetais. Também é considerado um subproduto da produção de biodiesel que vem crescendo significativamente nos últimos anos no Brasil (Knothe et al., 2006). Segundo Schröder e Südekum (1999) o glicerol pode ser utilizado na dieta de ruminantes, principalmente como substância glicogênica, melhorando o suplemento de energia e auxiliando na prevenção de problemas de cetose. Desta forma, objetivou-se avaliar o efeito de diferentes níveis de glicerol nas características físicas do sêmen de touros. Material e Métodos Foram utilizados cinco níveis de inclusão de glicerol (0, 3, 6, 9 e 12%) na dieta de 35 bovinos anelorados durante 70 dias. Além da suplementação com concentrado, os animais tiveram acesso à pastagem de Brachiaria decumbens e água ad libidum. Para avaliação das características físicas do sêmen foram realizadas coletas utilizando eletroejaculador. Os ejaculados foram submetidos a exames dos aspectos físicos, segundo CBRA (1998). Os dados foram avaliados por análise de regressão a 5% de probabilidade. Resultados e Discussão Não houve diferença entre os grupos (P > 0,05) para consistência seminal e coloração seminal. O volume seminal, turbilhonamento espermático e concentração espermática não apresentaram diferença significativa (P > 0,05), sendo encontrada média entre os grupos de 7,08mL, 0,56 e 104,86 x 106

espermatozóides/mL, respectivamente. A motilidade espermática progressiva e o vigor espermático apresentaram comportamento quadrático, onde os níveis ótimos de inclusão de glicerol na dieta foi de 5,50% e 5,24%, para obtenção dos melhores resultados de motilidade espermática progressiva (81,55%) e vigor espermático (3,93). Desta forma, pode-se incluir até 6% de glicerol na dieta de reprodutores bovinos, sem reduzir a qualidade física do sêmen. Referências bibliográficas Knothe G. Manual do biodiesel. São Paulo: Edgard Blucher, 2006. 340p. Manual para exame andrológico e avaliação de sêmen animal. 2.ed Belo Horizonte: CBRA, 1998. 49p. Schröder A, Südekum K.-H. Glycerol as a by-product of biodiesel production in diets for ruminants. In: International Rapeseed Congress, 10., 1999. Australia. Disponível em: http://www.regional.org.au/au/gcirc/1/241.htm. 26 fevereiro 2011. Palavras-chave: ejaculado, sêmen, suplementação. Keywords: ejaculate, semen, supplementation.




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Bloqueio do órgão vomeronasal e seu efeito na libido de tourinhos Nelore com um ano de idade criados extensivamente

Blocking of vomeronasal organ and libido in one year old Nellore bulls raised under pasture condition

V.J. Andrade1,5, L.L. Emerick1, G.A.B. Mahecha1, V.R. Vale Filho1, P.F.B. Pinto1, T.G. Leite1, J.A.M. Martins2, P.E.M. Gonçalves1, J.C. Dias3, J.E.J. Murta4,

F.A. Barbosa1, N.A. Azevedo, F.A. Souza1

1EV-UFMG, Belo Horizonte, MG; CNPq; 2UFCE, Fortaleza, CE; 3IFC, Campus Concórdia, SC; 4Unimontes, Janaúba, MG.

5E-mail: [email protected] Introdução O órgão vomeronasal (OVN) é conhecido como detector de ferormônios, que são substancias exaladas pelo organismo através da urina, fezes ou secretadas pelas glândulas sudoríparas em algumas espécies, estando conectado com o sistema límbico (SNC), influenciando a liberação de esteróides e modulando o comportamento sexual (Dulac e Wagner, 2006). Acredita-se que o reflexo de flehmen seja um mecanismo facilitador de condução de ferormônios para o OVN pelos ductos incisivos (Doving e Trotier, 1998). O objetivo do presente estudo foi avaliar o bloqueio do OVN sobre a libido de tourinhos Nelore de um ano de idade, criados extensivamente na região norte do estado de Minas Gerais. Material e Métodos O experimento foi conduzido em Engenheiro Navarro-MG, de janeiro/2008 a maio/2009, utilizando 45 tourinhos da raça Nelore com um ano de idade, divididos aleatoriamente em três grupos: G1= grupo controle (intactos); G2= ductos incisivos cauterizados e o G3= orquiectomizados. As avaliações da libido foram realizadas, de 3 em 3 meses, com dois tourinhos, desafiados simultaneamente com cinco fêmeas em cio forte, ao mesmo tempo, em curral de observação. Os comportamentos sexuais (libido baixa = sem interesse sexual; libido média: cheirar e/ou lamber, com ou sem Flehmen, e/ou perseguição ativa, com ou sem impulso e/ou tentativa de monta; libido alta = monta completa ou abortada) foram observados por cinco minutos por três observadores, estrategicamente posicionados (Dias et al., 2009). As comparações das médias dos escores da libido foram realizadas pelo teste de Kruskal Wallis, ao nível de significância de 5 %, utilizando-se os recursos computacionais do pacote estatístico SAS (1996). Resultados e Discussão Os grupos cauterizado (G2) e orquiectomizado (G3) foram iguais (p>0,05), quanto à manifestação da libido, ao longo de toda a fase experimental. Registrou-se incremento da libido no grupo de animais “inteiros” (G1) da primeira à quarta avaliação (p<0,05), mantendo-se estabilizada a partir de então. Esses resultados sugerem que a cauterização dos ductos incisivos inibiu a percepção dos ferormônios pelo OVN, modulando a concentração de esteróides e, consequentemente, alterando a manifestação da libido (Dulac e Wagner, 2006). Conclui-se que o bloqueio do OVN antes da manifestação da puberdade, pela obstrução dos ductos incisivos foi eficiente, inibindo a libido e a aquisição da experiência sexual. Referências bibliográficas Dias JC. et al. Teste da Libido em touros Guzerá e suas associações com características reprodutivas e níveis séricos de testosterona. Arch. Vet. Sci., v. 14, n. 4, p. 204-213, 2009. Doving KB, Trotier D. Structure and function of the vomeronasal organ. J. Experim. Biol., p.2913-2925, 1998. Dulac C, Wagner, S. Genetic analysis of brain circuits underlying pheromone signaling. Annu. Rev. Genet., v.40, p.449-467, 2006. SAS. User’s Guide. Cary, NC: SAS Inst., Inc., 1996. Palavras-chave: Bos taurus indicus, castração, ductos incisivos, reflexo de flehmen. Keywords: Bos taurus indicus, castration, flehmen reflex, incisive duct.



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Uso do acetato de deslorelina como indutor da ovulação na inseminação artificial em tempo fixo em búfalas durante a estação reprodutiva desfavorável

Use of deslorelin acetate as inductor of ovulation in fixed-time artificial insemination in buffaloes during the breeding season unfavorable

L.F. Frares¹,4, R.P. Antonângelo¹, A.S. Fujita¹, R.R. Weiss¹, L.E. Kozicki², J.A. Dell’Aqua Jr.³

¹Universidade Federal do Paraná, Curitiba, PR; ²Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, PR; ³Universidade

Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, SP. 4E-mail: [email protected]

Introdução Segundo a fisiologia reprodutiva, a espécie bubalina é considerada como poliéstrica estacional ou reprodutora de período curto (ZICARELLI, 1990). Consequentemente a isso, os partos ocorrem principalmente entre os meses de março a junho, resultando na concentração da produção de leite até o mês de setembro, com ausência de matéria prima no verão (BARUSELLI et al., 2003). É indispensável adequar técnicas de reprodução e multiplicação de material genético superior para elevar a produção de leite dos animais durante todo o ano. Material e Métodos O experimento foi realizado com 68 búfalas que foram divididas em dois grupos: G1 ou buserelina (n=20) e G2 ou deslorelina (n=48). No dia 0, os animais receberam 2 mg de benzoato de estradiol (IM) e um dispositivo intravaginal de progesterona que permaneceu por duas semanas. No dia 14, os animais receberam 150 µg de D-cloprostenol e 400 UI de eCG. No dia 16, os animais do Grupo 1 receberam 10 µg de buserelina e os animais do Grupo 2 receberam 100 µg de acetato de deslorelina. No Dia 17, os animais de ambos os grupos foram inseminados. Exames ultrassonográficos foram realizados em todos os dias de aplicação do protocolo e o diagnóstico de gestação foi feito 55 dias após a IATF. Resultados e Discussão O diâmetro médio do folículo dominante no Dia 16 do protocolo foi de 7,9 ± 3,3 mm no Grupo 1 (buserelina) e 8,9 ± 3,4 mm no Grupo 2 (deslorelina). As taxas de ovulação foram de 15% para o grupo que recebeu buserelina e de 35,4% para o grupo que recebeu deslorelina. Com relação às taxas de concepção: 20% e 39,6% para G1 e G2, respectivamente. Nenhuma das variáveis analisadas diferiu estatisticamente (p > 0,05). Referências bibliográficas Baruselli PS, Madureira EH, Banarbe VH, Barnabe RC, Berber RCA. Evaluation of synchronization of ovulation for fixed-timed insemination in buffalo (Bubalus bubalis). Braz J Vet Res Anim Sci, 40. n.6, 2003. Zicarelli LFC, Francillo M, Pacelli C, Villa EE. Influence of insemination technique and ovulation time on fertility percentage in synchronized buffaloes. In: World Buffalo Congress, 5, 1990. p.732-737. Palavras-chave: agonista, búfalas, deslorelina, IATF, indutor. Keywords: agonist, buffaloes, deslorelin, inductor, TAI.



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Indução da puberdade de novilhas búfalos com o emprego de dispositivos intravaginais de progesterona

Puberty induction of buffalo heifers with the use of progesterone intravaginal devices

C.C. Bartolomeu1,4, A.J. Del Rei2, J.A. Carvalho3, C.T.G. Alvares3

1Universidade Federal Rural de Pernambuco, DMV, Recife, PE; 2Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia, DTRA, Vitória da Conquista, BA; 3Universidade Estadual de Santa Cruz, DCAA, Ilhéus, BA.


Introdução O búfalo exerce um papel proeminente na produção pecuária mundial, particularmente na Ásia. Fora do continente asiático, o Brasil vem tornando-se o maior destaque na criação de búfalos, com tendência a ganhar projeção como produtor de carne e de leite em âmbito mundial O mercado de leite de búfala é uma realidade e o de carne apresenta boas perspectivas, tendo em vista o tamanho do rebanho brasileiro. Apesar da importância sócio-econômica que o búfalo representa para vários países em desenvolvimento, a literatura referente a idade à puberdade é bastante contraditória. Existem na literatura internacional, várias citações que relatam ser a fêmea bubalina, no que se refere ao estabelecimento da puberdade, bem mais tardia quando comparada as diferentes raças de Bos taurus (Vale et al., 2005). Desta forma o presente experimento teve por objetivo avaliar o uso de implantes intravaginais em novilhas búfalas para indução da puberdade. Material e Métodos Este estudo foi realizado no município de Mamanguape-PB, Brasil Latitude -06° 50' 19'' e Longitude 35° 07' 34'' durante os meses de julho a agosto de 2010. Foram utilizadas 40 novilhas búfalas com idade variando de 16 a 18 meses e peso médio de 358 ± 27 Kg. As novilhas foram distribuídas aleatoriamente no Grupo Controle (G1; n = 20) e Grupo tratamento (G2; n = 20). O G1 não foi submetido a nenhum tratamento, enquanto que o G2 recebeu um dispositivo intravaginal de P4 (DIB®, Schering) por um período de 10 dias tendo sido aplicado no D0 100mg de GnRH (Profertil®, Tortuga). No D10 os dispositivos foram removidos e as novilhas do G1 e G2 foram colocadas junto com touro durante uma estação de monta de 45 dias. Sessenta dias após o final da estação de monta foram realizados exames ultrassonográficos (Pie Medical Áquila Pro Vet) para diagnóstico de gestação. Os dados foram analisados pelo teste ANOVA utilizando-se o programa estatístico SPSS 10.0.

Resultados e Discussão Ao exame ultrassonográfico verificou-se que 60% das búfalas do G1 e 90% das búfalas do G2 apresentaram diagnóstico positivo para gestação (P = 0,02). Segundo Silva Filho (2006) os tratamentos apenas com progestágenos induzem a puberdade em novilhas. Entretanto o mecanismo pelo qual a progesterona induz a puberdade ainda não está totalmente elucidado. Com base nos resultados relatados neste estudo, pode-se concluir que é viável tecnicamente a utilização de tecnologias que venham antecipar a puberdade em fêmeas bubalinas.

Referências bibliográficas Silva Filho AHS. da et al. Indução da puberdade em novilhas com uso da hormonioterapia. Ciênc Anim, v.17, p.83-89, 2007. Vale WG, Ribeiro HFL. Características reprodutivas dos bubalinos: puberdade, ciclo estral, involução uterina e atividade ovariana no pós-parto. Rev Bras Reprod Anim, v.29, p.63-73, 2005. Palavras-chave: búfala, novilhas, P4, puberdade. Keywords: buffalo, heifers, P4, puberty.



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Utilização de PGF2α no período peri-ovulatório para aumentar a taxa de recuperação de embriões em búfalas superovuladas (resultados preliminares)

PGF2a use on peri-ovulatory period for increasing the embryo recovery rate in superovulated buffaloes (preliminary results)

J.G. Soares1,6, N.A.T. Carvalho2, B. Martins Júnior2, D.C. Souza3, J.R.G. Maio4, P.S. Baruselli5

1Universidade Estadual do Maranhão, São Luís, MA; 2Unidade de Pesquisa e Desenvolvimento, Pólo Regional do Vale do

Ribeira/APTA, Registro, SP; 3CATI, Registro, SP; 4Ouro Fino Saúde Animal, Ribeirão Preto, SP; 5Departamento de Reprodução Animal, FMVZ, USP, São Paulo, SP.

6E-mail: [email protected] Introdução A baixa taxa de recuperação de estruturas embrionárias verificada em búfalas submetidas a protocolos de múltipla ovulação pode estar relacionada a alguma falha no processo de captação e/ou transporte dos oócitos pelo oviduto (1). Foi verificado em coelhas que a administração de doses subsequentes de PGF2α no período peri-ovulatório, estimula a contração da musculatura lisa do oviduto, permitindo que as fímbrias deste órgão se ativem para captar os oócitos (2). Nesse sentido, o presente estudo teve como objetivo avaliar a utilização de PGF2α no período peri-ovulatório para aumentar a taxa de recuperação de embriões em búfalas superovuladas. Material e Métodos Foram utilizadas 8 doadoras bubalinas divididas aleatoriamente em 2 grupos (GC e GPGF). As doadoras receberam 2mg de Benzoato de Estradiol via intramuscular (i.m.; Sincrodiol®, Ouro Fino) juntamente à inserção do dispositivo intravaginal de progesterona (P4; Sincrogest®, Ouro Fino) em estágio aleatório do ciclo estral (Dia 0 = D0; manhã). Do D4 ao D7, foram aplicadas 8 doses decrescentes de FSH (12/12h; 200mg i.m.; Foltropin-V®, Bioniche), para a superestimulação do crescimento folicular. No D6 (tarde) e no D7 (manhã), todas as búfalas receberam 0,53mg de prostaglandina (PGF2α; Cloprostenol sódico, Sincrocio®, Ouro Fino). No D7 (tarde), o Sincrogest® foi removido e no D8 (tarde) foram administrados 20µg de GnRH (Sincroforte®, Ouro Fino), para a indução e sincronização das múltiplas ovulações. Os animais do GPGF receberam do D8 (tarde) ao D10 (manhã), mais quatro aplicações de PGF2α (12/12h; 0,53mg de Sincrocio®). As inseminações artificiais foram realizadas 12 e 24 h após a aplicação do GnRH. No D15 (tarde) as estruturas embrionárias foram colhidas, quantificadas e classificadas. Vinte e um dias após a lavagem uterina foi reiniciado o tratamento, de modo que todas as búfalas receberam todos os tratamentos (delineamento cross over). Os dados foram analisados pelo ANOVA utilizando o Modelo Linear Geral do SAS®/STAT. Resultados e Discussão Os resultados preliminares demonstraram não haver aumento na produção de embriões em búfalas submetidas à administração de PGF2α no período peri-ovulatório. Não foi verificada diferença entre o GC e o GPGF no total de estruturas embrionárias recuperadas (4,1±5,3 vs. 4,4±3,1), embriões transferíveis (3,4±4,8 vs. 2,1±2,1), congeláveis (3,1±4,2 vs. 2,1±2,1) e degenerados (0,7±0,9 vs. 1,0±1,1). No entanto, o GPGF apresentou mais oócitos (1,2±1,3) que o GC (0,0±0,0), o que pode estar associado ao aumento na motilidade do oviduto, em função das aplicações de PGF2α. Os resultados obtidos indicam que a administração de PGF2α no período peri-ovulatório, não foi eficiente em aumentar a taxa de recuperação de embriões em búfalas submetidas à múltipla ovulação. Referências bibliográficas (1)Baruselli PS, Madureira EH, Visintin JA, Porto Filho RM, Carvalho NAT, Campanile G, Zicarelli L. Failure oocyte entry into oviduct in superovulated buffalo. Theriogenology, v.53, p.491, 2000. (2)Osada H, Fujii TK, Tsunoda I, Takagi K, Satoh K, Kanayama K, Endo T. Fimbrial capture of the ovum and tubal transport of the ovum in the rabbit, with emphasis on the effects of β2-adrenoreceptor stimulant and prostaglandin F2 on the intralumial pressures of the tubal ampullae. J Assist Reprod Genet, v.16, n.7, p.373-79, 1999. Palavras-chave: bubalinos; embriões, múltipla ovulação, PGF2α. Keywords: buffaloes, embryo,multiple ovulation, PGF2α.



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Influencias hidrograficas das varzeas no estado do Amapá na eficiencia reprodutiva de bubalinos

Hydrographic influences of floodplains in the state of Amapa in the reproductive efficiency of buffaloes

H.F.L Ribeiro1, S.T. Rolim Filho, E.M. Barbosa, M.R. Freitas, E.Y.E. Mesquita, K.B. Nunes, A.C. Oliveira Neta

Setor de Reprodução Animal, UFRA, Belém, PA.


Introdução A população de búfalos no Amapá é de 178.811 animais contra 109.422 bovinos. Os búbalinos produzem economicamente em regiões onde outras espécies domésticas não sobrevivem. A especie é uma alternativa para a pecuária do norte do Brasil, bem superior aos das outras espécies domésticas, quando criadas em condições extensivas de várzeas predominantes na Região Amazônica (RIBEIRO, 2002). O obetivo foi verificar a influencia hidrograficas das varzeas na idade ao primeiro parto, periodo de serviço e intervalo entre partos de búfalas. Material e Métodos O levantamento foi no Município de Itaubal, estado do Amapá, em uma região de várzea flúvio-marítimas totalmente inundadas nos meses de fevereiro a maio e um período intermediário de vazante junho a setembro, onde o solo mostra-se encharcado, sem drenagem e um período seco (vazante) de outubro a janeiro. Nos rebanhos predominavam as raças Mediterrâneo e Murrah destinado para cria, recria e engorda. em regime de pastejo extensivo, em pastagem nativa não sendo fornecida nenhuma suplementação mineral. As médias de IEP e PS foram analisadas de 261observações, já a média de IPP foram analizadas de 186 observações, submetidas a ANOVA, tendo como causa de variação os meses dos ano e as diferenças entre as médias submetidas ao teste de tukey com nível de significancia de 5%.

Resultados e Discussão A IPP foi de 41,93±8,06 meses, as maiores médias foram das que pariram no periodo das enchentes (48,7±2,5meses). O PS foi de 8,4±5,1 meses e as maiores médias foram para as búfalas que pariram no periodo de vazante (10,6±3,2meses), as quais diferiram estatisticamente dos outros periodos (P<0,05). O IEP médio foi de 18,3 meses, sendo as maiores médias no periodo de vazante (20,6 meses) estatisticamente diferente das outras médias. A IPP ficou dentro de uma variação compatível com a literatura, já o PS e IEP ficaram acima das médias na região amazônica. Florezano (2009) cita que na Amazonia, o período de parto, quatro a um mês antes das enchentes apresentam um PS e IEP mais longo em relação aos animais que parem de oito a cinco meses antes. No estudo verificou-se influência hidrografica significativa (enchente -vazante) para parâmetros estudados. Referências bibliográficas Ribeiro HFL. Characteristics of the reproductive handling in búfalas in the Amazonian. Brazilian In: Congresso of Specialties in Medicina Veterinária, 1., 2002, Curitiba, PR. Anais... Curitiba: SPrMV, 2002. v.1, p.101-104. Florenzano PF. Parâmetros da eficiência reprodutiva em bubalinos criado em área de várzea, Itaubal, Amapá. Monografia. TCC. 2009. Palavras-chave: bufalos, eficiencia reprodutiva, hidrografia. Keywords: buffalos, hydrography, reproductive efficiency.



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Eficiência do processo de PIV-TE a fresco de embriões bubalinos IVP and Embryo transfer process efficiency of fresh buffalos embryos

W.P. Saliba1, H.X.S. Bayão1, M.T.T. Alvim1, P.S. Baruselli2, L.U. Gimenes2, R.C. Leite3, E. Bastianetto3, B. Gasparrini4

1Cenatte Embriões LTDA, Pedro Leopoldo - MG, Brazil 2Departamento de Reprodução Animal, FMVZ-USP, São Paulo - SP, Brazil

3Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, UFMG, Belo Horizonte - MG, Brazil 4Dipartimento di Scienze Zootechniche e Ispezione degli Alimenti, Università degli Studi di Napoli Federico II (UNINA),

Napoli, Italy e-mail: [email protected]

A técnica de produção de embriões in vitro (PIV) tem se mostrado promissora na espécie bubalina, contrariamente à recuperação de embriões in vivo que ainda é insatisfatória. Entretanto, até o momento, o sucesso no processo de transferência de embriões (TE) a fresco não tem alcançado taxas superiores a 15% de prenhez a termo (Sá Filho et al., 2005). O objetivo do presente estudo é relatar índices inéditos obtidos tanto na PIV, quanto nas TEs a fresco realizadas em bubalinos em projeto que está sendo conduzido em parceria entre o Laboratório CENATTE Embriões Ltda, a UFMG, o Departamento de Reprodução Animal da USP e a Universidade de Napoli (UNINA). Para esta finalidade, doadoras bubalinas (entre 6 e 36) foram submetidas a 10 sessões de aspiração folicular guiada por ultrassonografia (OPU), totalizando 199 punções foliculares realizadas entre os meses de julho a dezembro de 2010. No total foram recuperados 984 oócitos totais (4,9 ± 0,5/ doadora/ sessão) e 584 oócitos viáveis (2,9 ± 0,3/ doadora/ sessão). Os oócitos viáveis (graus 1, 2 e 3) foram submetidos à maturação in vitro (MIV), fecundação in vitro (FIV; D0) e cultivo in vitro (CIV). No 2º dia (D2) após a FIV foi realizada a avaliação da taxa de clivagem, e mesma foi confirmada no 5º dia (D5), cuja média foi de 56,8% (332 embriões clivados/ 584 oócitos viáveis). A taxa de produção embrionária foi avaliada aos 5 (D5) e 6 (D6) dias após a FIV, e os embriões classificados em graus 1 (225 embriões), 2 (3 embriões) e 3 (28 embriões). Do total de embriões produzidos (43,8%), 87,9% foram de grau 1. Foram transferidos 119 embriões para receptoras previamente sincronizadas com o seguinte protocolo hormonal: em dia aleatório do ciclo estral todas as fêmeas receberam um dispositivo intravaginal de progesterona previamente utilizado por 8 dias (multíparas) ou 16 dias (nulíparas) concomitantemente ao tratamento com 2 mg de benzoato de estradiol associado a uma dose de PGF2α. Nove dias após, os dispositivos foram removidos e todos os animais receberam 400 UI de eCG e uma dose de PGF2α. Após 48 horas, as fêmeas foram tratadas com uma dose de GnRH. A taxa de aproveitamento das receptoras foi de 68,3%. Das 119 TEs, 50 foram de embriões em D5 para receptoras sincronizadas aos 6 dias após a ovulação, e 69 foram de embriões em D6 para receptoras aos 7 dias após a ovulação. O diagnóstico de gestação precoce foi realizado aos 30 dias de gestação, verificando-se 51 gestações positivas (42,9%), independentemente se a TE foi realizada com embriões em D5 ou em D6. Entre 30 e 60 dias de gestação um animal foi descartado do estudo. Aos 60 dias de gestação foram quantificadas duas perdas embrionárias (3,9%) e realizada a sexagem dos fetos, sendo 26 fêmeas (54,2%) e 22 machos (45,8%). Os resultados descritos no presente estudo demonstram a viabilidade da associação das técnicas de PIV e TE de embriões à fresco na espécie bubalina. Agradecimentos: FAPEMIG (APQ – 0591-5.04/08), FINEP, FIEMG. Referências bibliográficas Sá Filho MF, Carvalho NAT, Gimenes LU, Torres-Júnior JRS, Ferreira CR, Perecin F, Perini AP, Tetzner TAD, Vantini R, Soria GF, Garcia JM, Tonhati H, Gasparrini B, Baruselli PS. Prenhezes de embriões bubalinos frescos e vitrificados produzidos in vitro. Acta scientiae veterinariae, v.33, p.431, 2005.



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Características ultraestruturais de oócitos bubalinos maturados em meio definido e não definido

Ultrastructural characteristics of buffalo oocytes matured in defined and nondefined medium

H. Blume1, G.B. Mota2,4, A.L. Valadares1, I. Oliveira e Silva2, M.V. Snel-Oliveira1, S.N. Báo3 A.A.M. Rosa e Silva2

1Faculdade de Medicina Veterinária da UPIS, Brasília, DF; 2Universidade de Brasília, IB/CSF, Brasília, DF; 3Universidade

de Brasília,IB/LME, Brasília, DF. 4E-mail: [email protected]

Introdução Processos celulares que ocorrem durante a maturação in vitro (MIV) de oócitos bubalinos podem ser melhor compreendidos a partir de análises de microscopia eletrônica de transmissão. O objetivo do presente estudo foi visualizar características ultraestruturais de oócitos bubalinos imaturos, maturados em meio TCM199+SFB (indefinido) e em meio Alpha-MEM livre de SFB (definido). Material e Métodos Seis búfalas da raça Murrah com idade entre 24 e 36 meses foram puncionadas em duas sessões de OPU. Foram obtidos 33 complexos cumulus-oócito (CCOs) dos quais 17 foram classificados morfologicamente como de qualidade A e B. Após seleção e classificação os CCOs foram transportados em meio TALP HEPES por aproximadamente 2h a 38,5 ºC e posteriormente distribuídos aleatoriamente em três grupos: G1(n=4) imaturos; G2(n=7) MIV em TCM199+10% de SFB+FSH; G3(n=6) MIV em Alpha-MEM+PVA, transferrina e selênio. Ao término de 24h de MIV os CCOs foram fixados e emblocados de acordo com Oliveira e Silva et al (2011). As observações ultraestruturais dos CCOs foram feitas através do microscópio eletrônico de transmissão JEOL-JEM 1011. As características analisadas foram: localização de mitocôndrias e grânulos corticais (GC), morfologia de microvilosidades (MV) de membrana e desenvolvimento do espaço perivitelínico (PVS) (Oliveira e Silva et al.,2011). Resultados e Discussão Os CCOs dos grupos G2 e G3 apresentaram características típicas de maturação citoplasmática tais como: mitocôndrias (Mt) dispersas pelo citoplasma, GC alinhados à membrana plasmática e MV eretas ou levemente eretas. Tanto G2 quanto G3 apresentaram PVS pequeno. Observou-se no grupo G1 características de, oócitos imaturos: presença de mitocôndrias na região cortical, GC em grumos e PVS pequeno, porém alguns CCOs apresentaram características de maturação em andamento: mitocôndrias dispersas, GC alinhando-se à membrana plasmática e MV levemente eretas. Em todos os grupos observou-se grande quantidade de gotas de lipídeo (GL) espalhadas pelo citoplasma (Fig. 1).

Figura 1. Ultraestrutura de CCOs bubalinos dos grupos: G1(A), G2(B) e G3(C).

Referências bibliográficas Oliveira e Silva I, Vasconcelos RB, Caetano JVO. Induction of reversible meiosis arrest of bovine oocytes using a two-step procedure under defined and nondefined conditions. Theriogenology, v.75, p.1115-1124, 2011. Palavras chave: búfalos, maturação, oócito. Keywords: buffaloes, maturation, oocyte.

ZP ZP

PVS

CC ZP

GL GL

GL

GL

GL

CC

Mt→ ← Mt

Mt→

Mt→ (A) (B) (C)



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Anormalidades espermaticas de bufalos criados na Amazonia Abnormal sperm of buffalo raised in the Amazon

E.M. Barbosa, H.F.L. Ribeiro1, S.T. Rolim Filho, R.N. Ferreira, K.B. Nunes,

H.D.M. Ayala, M.R. Freitas

Setor de Reprodução Animal, UFRA, Belém, PA. 1E-mail: [email protected]

Introdução Sêmen na maioria dos reprodutores, apresenta alguns espermatozóides mal formados, isso geralmente não está associado com índices diminuídos de fertilidade até que a proporção de anormalidades exceda cerca de 20%. Mesmo assim, certos tipos de anormalidades podem estar associados com a infertilidade. Amostras com grande número de espermatozóides anormais podem ser detectadas durante a estimativa da porcentagem de células móveis. Animais com excesso de defeitos espermáticos apresentam piores níveis de fertilidade ou até infertilidade (HAFEZ, 2004). O objetivo deste foi determinar a prevalência de patologias espermáticas em reprodutores bubalinos na Amazônia. Material e Metodos Foram estudados 305 touros da raça Murrah, Mediterrânea e mestiços com idade de 2 a 15 anos Destes 123 ejacularam por massagem das ampolas. Para a análise da morfologia espermática foi usado o método de Cerovsky. Foram analisadas 200 células, por lâmina em objetiva de imersão, onde foram avaliados espermatozóides com patologias maiores e menores individualmente. Os dados quantitativos referentes a morfológicas foram submetidos à ANOVA, tendo como causa de variação o sistema de criação extensivo e semi intensivo e as diferenças entre as médias das patologias submetidas ao teste de tukey com nível de significancia de 5%. Resultados A media e desvio padrão dos defeitos maiores no estado do Pará, foi de 69,71% e 39% no sistema extensivo em animais com menos de 4 e mais de 4 anos respectivamente e 41,2 % e 16% em sistema semi intensivo em animais com menos e mais que 4 anos respectivamente. Essas médias foram maiores que as médias dos animais criados no estado do Amapá em sistema extensivo sendo de 34,84% e 30,37% para animais com menos de 4 e mais de 4 anos respectivamente, diferindo significativamente (p<0,05). Nas variáveis, local e sistema de criação, assim como, entre grupos por idade não houve diferença (p>0.05) significativa, na media e desvio padrão nos defeitos menores (Tabela 1). Tabela 1 Patologias maiores e menores (media e desvio padrão) do sêmen de bubalinos de acordo com a idade e sistema de manejo nos estados do Pará e Amapá.

Media e desvio padrão das percentagens de patologias dos espermatozóides Patologias espermáticas Amapá Pará

Extensivo Extensivo Semi Intensivo ≤ 4 anos > 4 anos ≤ 4 anos > 4 anos ≤ 4 anos > 4 anos

Defeitos Maiores 34,84 ± 21,64b 30,37 ±9,45b 69,71 ± 33,86a 39,0a 41,2 ± 16,80b 16,0b

Defeitos Menores 45,96 ± 16,11a 46,25 ± 5,11a 52,5 ± 10,22a 55,0a 48,37 ± 11,36a 35,0ª As medias e desvio padrão dos defeitos maiores e menores, foram altas com relação às recomendadas pelo CBRA (1998). Esses resultados apontam média de 48,76±18,33% de patologias espermáticas totais encontradas em touros menores do que 4.0 anos de idade. Assim os resultados indicam que os touros com 4.0 anos de idade, apresentam uma imaturidade sexual, ou seja, uma incapacidade reprodutiva prolongada. Este aumento na percentagem de patologias espermáticas pode estar ligado ao tipo de criação e manejo extensivo a que são submetidos os rebanhos, bem como a alta consangüinidade no sistema intensivo, já reportada por Vale et al (2008), ou ainda devido a baixa frequencia da utilização dos touros. Referências bibliográficas Hafez ESE. Reprodução animal. 7.ed. Rio de Janeiro: Manole, 2004. p.33-53. Vale WG, Ribeiro HFL, Sousa JS, Silva AOA, Barbosa EM, Rolim Filho ST. Seleção e avaliação andrológica do reprodutor bubalino. Rev Bras Reprod Anim, v.32, n.2, p.141-155, 2008. Disponível em www.cbra.org.br. 2008. Palavras-chave: anomalias espermatica, búfalos. Keywords: Abnormal, sperm, buffalos.



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Identificação e quantificação do VEGF em ovários de cadelas em anestro e estro Identification and quantification of VEGF on ovaries of bitches during anestrus and estrus

M.V.D. Almeida1, H.H. Ortega2, N. Salvetti2, M.V. Caliari 3, G.R. Valle1,4

1PUC Minas, Betim, MG; 2Universidad del Litoral, Argentina; 3ICB/UFMG, Belo Horizonte, MG

4E-mail: [email protected] Introdução Recentemente, muitas são as evidências de que Fatores de Crescimento participam da fisiologia ovariana, dentre eles o Fator de Crescimento Endotelial Vascular (VEGF), fator pró-angiogênico que participa do desenvolvimento folicular e formação do corpo lúteo (Bruno et al., 2009). Pouco se sabe sobre a participação do VEGF na fisiologia ovariana de cadelas. Material e Métodos Este estudo foi aprovado pelo CETEA/UFMG (nº176/2007). Foi avaliada e quantificada a expressão do VEGF em ovários de cadelas, que foram divididas em dois grupos: Anestro (cadelas sem sinais de cio e progesterona plasmática menor que 1,0 ηg/mL); e Cio (cadelas em cio natural). Foram realizadas marcações imuno-histoquímicas para VEGF (anticorpos primários policlonais anti-VEGF - PU 360-UP, Biogenex, San Ramon, CA, USA; diluição 1:30) nos cortes histológicos dos ovários (Ortega et al., 2007) seguidas de avaliação do índice de marcação (área marcada dividida pela área total analisada), utilizando o software KS300 do analisador de imagens Carl Zeiss, no estroma ovariano e na teca e granulosa de folículos secundários/terciários e pré-ovulatórios. Foram comparadas teca x granulosa no mesmo tipo folicular num mesmo grupo; teca x teca e granulosa x granulosa entre diferentes tipos foliculares num mesmo grupo; teca x teca e granulosa x granulosa de mesmo tipo folicular entre diferentes grupos; e estroma x estroma entre diferentes grupos. Os resultados foram comparados pelo teste t de Student, com nível de significância de 5%. Resultados e Discussão Não houve diferença na imunomarcação: 1) entre tecas e entre granulosas de folículo secundário/terciário e entre estromas ovarianos ao comparar Anestro com Cio; 2) entre teca e granulosa de um mesmo folículo, para os diferentes tipos foliculares, tanto no Anestro quanto no Cio; e 3) entre tecas de diferentes tipos foliculares no Cio (P > 0,05). No entanto, houve diferença entre granulosas do folículo secundário/terciário e folículo pré-ovulatório no Cio (P<0,05). Como os folículos pré-ovulatórios de cadelas apresentam certo grau de luteinização (Johnston et al., 2001), o VEGF parece ter participação neste processo, semelhante ao observado na formação de corpos lúteos em outras espécies. Referências bibliográficas Bruno JB et al. Angiogenic factors and ovarian follicle development. Anim Reprod, v.6, p.371-379, 2009. Johnston SD, Kustritz MVR, Olson PNS. Canine and feline theriogenology, Philadelphia:Saunders, 2001. Ortega HH et al. Intraovarian localization of growth factors in induced cystic ovaries in rats. Anat Histol Embryol, v.36, p.94-102, 2007. Palavras-chave: cadela, fisiologia ovariana VEGF. Keywords: bitch, ovarian physiology, VEGF.



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Histerocele inguinal gravídica com feto viável – Relato de caso Inguinal Hysterocele with a viable fetus - case report

I.R. Carvalho, J.T. Carreira, J.T. Trevizan, N.C. Souza, P.B.C. Gomes, M.B. Koivisto1

1Departamento de Clínica, Cirurgia e Reprodução Animal, UNESP, Araçatuba, SP.

1E-mail: [email protected] Introdução As hérnias inguinais são protusões de tecidos ou órgãos através do canal inguinal e podem conter além do omento, o útero, caracterizando a histerocele (Fossum et al., 2005). A herniorrafia seguida da ovariosalpingohisterectomia é o tratamento de escolha para histerocele gravídica (Noakes, 2001). Descrição do caso clínico Foi atendida no Hospital Veterinário “Luiz Quintiliano de Oliveira”- UNESP, campus de Araçatuba, uma cadela de 10 anos, peso 7,8kg, sem raça definida. A queixa principal foi um aumento de volume abdominal progressivo localizado em região inguinal. O animal, pluríparo, apresentou o ultimo estro há aproximadamente 60 dias. No exame físico especifico, constatou-se presença de corrimento vulvar mucóide de coloração marrom e presença de secreção láctea em todas as mamas. Á palpação observou-se aumento de volume na região inguinal esquerda com consistência firme e presença de movimentação, sugestivo de gestação. Para confirmação do diagnóstico presuntivo foi realizado exame ultrassonográfico, identificando-se um feto em sofrimento fetal com170 batimentos por minutos. O diagnóstico foi determinado como Histerocele Inguinal Gravídica (HIG). O animal foi submetido a uma cesariana emergencial. O útero gravídico encontrava-se encarcerado no anel herniário, sugerindo que a gestação se desenvolveu, pelo menos parcialmente dentro do espaço herniário; após a cesariana, o útero foi anatomicamente reposicionado realizada herniorrafia e ovariosalpingohisteréctomia por meio da técnica das três pinças, com acesso pela linha Alba. O feto apresentava-se responsivo a estímulos vitais e a termo. A fêmea apresentou excelente recuperação pós-cirúrgica e o neonato desenvolvimento normal até o final do acompanhamento pós-operatório (10 dias).

Discussão Altos índices de estrógeno durante o período de proestro favorecem o afrouxamento do tecido conjuntivo e alargamento do canal inguinal (Noakes, 2001; Read e Bellenger, 2003), somado ao aumento da pressão intra-abdominal durante a gestação, são fatores de risco para o desenvolvimento da histerocele inguinal gravídica (Read e Nellenger, 2003). Relatos anteriores descrevem a inviabilidade da gestação ou de fetos localizados nas porções do útero encarceradas (Serin et al., 2009). Neste caso o feto desenvolveu-se sem alterações na histerocele, podendo ter sido favorecido por ser um feto único e não haver estrangulamento da circulação uterina pelo anel herniário.

Referências bibliográficas Fossum TW, Hedlund CS, Hulse DA, Johnson AL, Seim IIIHB, Willard MD, Carrol GL. Cirurgia da cavidade abdominal. Cirurgia de pequenos animais. 2.ed. São Paulo: Roca, 2005. p.264. Noakes D.E. Maternal dystocia: causes and treatment. In: Noakes D.E., Parkinson T.J., England G.C.W. (eds.): Arthur’s veterinary reproduction and obstetrics. Philadelphia: WB Saunders, 2001. p.240-241. Read RA, Bellenger CR. Hernias. In: Slatter D. (ed.): Textbook of Small Animal Surgery. Philadelphia: WB Saunders, 2003. p.446-470. Serin G, Yaygingul R, Tarimcilar T, Sarierler M. An incarcerated inguinal hysterocele in a pregnant bitch: a case report. Vet Med, v.54, n.8, p.382-386, 2009. Palavras-chave: cadela, gestação, hérnia inguinal, histerocele. Keywords: bitch, hysterocele, inguinal hérnia, pregnancy.



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Biometria fetal em cadelas da raça Shih-Tzu Fetal biometry in Shih-Tzu female dogs

N.I. Camargo1, A. Wischral2,4, A.T. Berlim3, F.J.R. Magalhães1, H.C. Manso Filho2

1Pós-graduando em Ciência Veterinária, UFRPE, Recife, PE; 2Professor UFRPE, Recife, PE; 3Médica Veterinária

Autônoma, Recife, PE. 4E-mail:[email protected]

Introdução A ultrassonografia é útil para determinar a exata data do parto (England e Russo, 2006), no entanto, nas cadelas, é necessário estabelecer padrões de medidas e cálculos para animais de mesma característica racial. Como as raças braquicefálicas tendem a ter maior predisposição à distocia, objetivou-se correlacionar a idade gestacional com as medidas fetais, obtidas por ultrassonografia, em cadelas da raça Shih-Tzu, a fim de gerar fórmulas que permitam a previsão da data do parto nesta raça. Material e Métodos

Utilizaram-se quatro cadelas gestantes da raça Shih-Tzu. Os exames foram realizados com aparelho de ultrassom (LOGIQ E - 5,0 e 11,0 MHz). Detectada a prenhez aos 20 dias, as cadelas foram examinadas a cada sete dias até a semana do parto, para mensuração de vesícula embrionária (VE), espessura da placenta (EP), diâmetros biparietal (DBP) e do abdome (DA) de dois conceptos por fêmea. Foram estudadas as correlações simples entre idade e as diversas medidas, e significância dos coeficientes de regressão linear e coeficientes de determinação (R2) será testada pelo teste F, utilizando o nível de significância de P<0,05. Resultados e Discussão As medidas obtidas foram relacionadas ao número de dias que faltavam para o parto, considerando o parto como dia zero. O DBP, DA e VE foram os que apresentaram maior correlação com a idade gestacional (TAB. 1), demonstrando maior confiabilidade das medidas, apesar de todas terem sido significativas (P<0,05). A espessura da placenta foi a medida com menor R2, pois apesar de ser uma estrutura que está diretamente ligada ao desenvolvimento fetal, sua espessura não apresenta crescimento linear, ao longo da gestação. Conclui-se que as melhores medidas para determinar a idade gestação na raça Shih-Tzu são DBP, DA e VE. Tabela 1 – Medidas fetais e equações de regressão linear da estimativa do parto (Ŷ) e coeficiente de determinação (R2) de acordo com as estruturas mensuradas.

Variável n dias pré-parto Ŷ R2 DBP 32 02-30 Ŷ = -14,262x + 35,17 0,8819 DA 30 02-25 Ŷ = -8,8103x + 29,977 0,8623 VE 46 02-39 Ŷ = -8,8666x + 48,461 0,8805 EP 44 02-39 Ŷ = -57,707x + 51,248 0,6551

Referências bibliográficas England GC, Russo M. Ultrasonographic characteristics of early pregnancy failure in bitches. Theriogenology,v. 66, p. 1694-1698, 2006. Palavras-chave: Ultrassom, canino, gestação, braquicefálico. Keywords: Ultrasound, canine, gestation, brachycephalic.


http://www.google.com.br/url?sa=t&source=web&cd=3&ved=0CDMQFjAC&url=http%3A%2F%2Fwww.marvistavet.com%2Fhtml%2Fbody_brachycephalic.html&ei=SoSMTdSpDPSx0QGumIC5Cw&usg=AFQjCNEk4_vpxn6WoxM8Hjbxl4Di-fThyg�


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Diagnóstico do ciclo estral de cadelas por avaliação da citologia vaginal

E.B. Araújo1, P.C.S., Lima, C.D.O. Guimarães, L.C. Américo, A.S. Carvalho, T.C.A. Silveira, K.C. Sousa

1Universidade Federal Rural da Amazônia (UFRA), Belém, PA. E-mail: [email protected]

Introdução O ciclo estral (CE) da cadela é o mais longo de todas as espécies domésticas, com duração de quatro a 10 meses. Nos carnívoros, o aparelho genital feminino apresenta, durante o período de atividade sexual, modificações estruturais, que se alteram em cada fase do ciclo (Derivaux,1980), e podem ser detectadas pelo exame de citologia vaginal (ECV), uma técnica diagnóstica simples e rápida realizada com material colhido da vagina por meio de “swab”, e usada na prática de reprodução de cadelas (Barnabé et al., 1986) por avaliar, qualitativamente, alterações infecciosas e endócrinas (Mello, 2001), sendo, portanto, método de monitoramento do CE de cadelas (Tostes, 2001). Desta forma, o presente trabalho objetivou diferenciar as características celulares para meio de diagnóstico das fases do CE. Material e métodos Foi feito o acompanhamento do CE de cadela adulta, Cocker Spaniel, 6 anos, realizando-se ECV em cada fase do ciclo. Para o exame foi realizado um esfregaço vaginal, separando-se os lábios da vulva gentilmente para a introdução de um “swab” de algodão estéril, o qual foi conduzido através da comissura dorsal da vulva, evitando-se o contato com a fossa clitoriana, seguindo na direção craniodorsal, no sentido da coluna vertebral, até ultrapassar o arco isquiático, atingindo o canal vaginal pélvico, onde foi rotacionado. Após sua retirada do canal, o conteúdo no “swab” foi depositado sobre uma lâmina, que foi fixada com álcool a 96° GL por um minuto, e coradas com eosina e hematoxilina, por 20 segundos cada, sendo lavada em água corrente entre as mesmas. A avaliação dos esfregaços foi realizada em microscópio óptico com aumento de 400X. Resultados e Discussão O proestro foi observado em três fases, semelhante ao publicado por Mussolino et al. (2000): na fase inicial foram observadas hemácias, células parabasais, intermediárias, neutrófilos e bactérias; na fase intermediária houve ausência de neutrófilos, sendo encontradas células superficiais iniciais; e a fase final foi composta por mais de 80% de células superficiais, descarga hemorrágica e bactérias livres ou dentro de células epiteliais. No estro foram observadas bactérias, células superficiais parcialmente queratinizadas e células superficiais totalmente queratinizadas, corroborando com o descrito por Chritiansen (1988). O diestro conteve menos de 20% de células superficiais, com predomínio de células parabasais e intermediárias, e algumas hemácias. O anestro apresentou células basais, parabasais, intermediárias, neutrófilos, restos celulares e bactérias. A presença de hemácias nesta fase não foi constatada, o número de células é pequeno devido a citólise (Mussolino et al. 2000). As células parabasais são redondas ou ligeiramente ovais, com 15 a 25 µm, apresentam um núcleo central vesicular e pouca quantidade de citoplasma, corroborando com o descrito por Christiansen (1988). Já as células intermediárias variam em tamanho podendo ser classificadas em células intermediárias pequenas ou grandes; com bordos irregulares e núcleos menores que os das parabasais, o que também foi registrado por Musolino et al. (2000). As células superficiais parcialmente queratinizadas apresentaram-se achatadas e com bordas anguladas, pobremente coradas e com núcleos picnóticos; contrastando com as células superficiais queratinizadas, caracterizadas como grandes, mortas, devido ao espessamento da parede que as afastou do suprimento sangüíneo; e irregulares, representando o fim do processo que se inicia com as células parabasais, acordando com os resultados do mesmo autor. Referências bibliográficas Barbabé VH, Oliveira CM, Barnabe RC et al. Citologia vaginal: método auxiliar no diagnóstico de problemas da esfera genital e das fases do ciclo estral da cadela. Hora Vet, v.5, n.29, p.25-26, 1986. Christiansen IJ. Reprodução do cão e no gato. São Paulo: Manole, 1988. p.26-28. Derivaux J. Reprodução dos animais domésticos. Zaragoza: Acribia. 1980. p.3. Mello MLV. Colpocitologia em cadelas e gatas. 2000. Disponível em: www.homeopatiaonline.com.br. 2000. Musolino C, Ghirelli CO, Moreno LM. Alterações do ciclo estral em cadelas. www.redevet.com.br, 2000. Tostes RA. Diagnóstico citológico em medicicna veterinária, www.lacocountry.com.br, 1997. Palavras-chave: cadela, citologia vaginal, ciclo estral. Keywords: estrous cycle, female dog, vaginal cytology.



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Análise imunoistoquímica de receptores de estrógeno nas cadelas em diferentes estágios do ciclo estral e com piometra

Immunoistochimical analysis of estrogen receptors in the bitch in different stages of estrus cycle and with pyometra

P.C. Oliveira, M.D. Lopes, V.M.B.D. Moura, J.C.C. Balieiro

Departamento de Reprodução Animal, UNIFEOB, São João da Boa Vista, SP.

E-mail: [email protected] Introdução A patogenia da piometra não é completamente conhecida, apesar de décadas de estudo direcionados a etiologia da doença (Johnston et al., 2001). Por ser a patologia mais importante na esfera reprodutiva de fêmeas caninas o objetivo deste trabalho foi avaliar por meio de técnicas imunoistoquímica os receptores de estrógeno em animais normais nos diferentes fases do ciclo estral e com piometra. Material e Métodos Foram utilizadas 51 fêmeas caninas submetidas à ovariohisterectomia. Os animais foram divididos em dois grupos: (i) animais normais (grupo controle, N = 30), constituídos de fêmeas, adultas, em diferentes fases do ciclo estral e (ii) animais com piometra (grupo experimental, N = 21). As fases do ciclo estral foram determinadas pelo histórico clínico, citologia vaginal e dosagem de progesterona sérica. Os exames de imunoistoquímica foram realizados utilizando o anticorpo de estrógeno Anti-E2 clone PPG5/10. Para a visualização da reação, foi utilizada solução de diaminobenzidina (Liquid DAB+Substrate - Dako 3468) e posteriormente utilizou-se TRIS, para interrupção da reação. Prosseguiu-se com a contra-coloração em Hematoxilina de Maye. A finalização da técnica compreendeu a cobertura dos cortes com resina sintética (Permount – Fisher Scientific) e com lamínulas de vidro. Foram analisados dois campos de cada camada (superficial, glandular, estroma e miométrio), sendo que em cada campo todas as células foram contadas, diferenciando as marcadas das não marcadas. Resultados e Discussão A análise de variância considerando os efeitos de grupos comparativos, fase do ciclo estral dentro de cada grupo comparativo, bem como, tecidos dentro de cada fase e dentro de cada grupo comparativo, apresentou resultado altamente significativo (P < 0,01) para a fonte de variação tecidos dentro de cada fase e dentro de cada grupo comparativo. Avaliando-se os grupos comparativos dentro de uma mesma fase e tecido, verificou-se que, tanto no anestro quanto no diestro, os animais acometidos pela patologia apresentaram porcentagens de células imunopositivas significativamente superiores (P < 0,01) quando comparados com animais normais, para todos os tecidos avaliados. Os escores de marcação obtidos por microscopia óptica apresentaram resultados significativos pelo Teste de Qui-quadrado (P < 0,01), em relação aos grupos comparativos. Foram observados 20,41% demonstraram escores de marcação 1 e 36,73% apresentaram escores de marcação 2 entre os animais controle. Não foram observados animais do grupo controle com escore 3 (0,0%). Contudo, animais acometidos pela piometra, foram verificados escores 1 (4,08%), 2 (20,41%) e 3 (18,37%). Referências bibliográficas Johnston SD, Kustritz MVR, Olson PNS. Canine and feline theriogenology. Philadelphia: WB Saunders, 2001. 592p. Palavras-chave: ciclo estral, imunoistoquímica, piometra, receptor de estrógeno. Keywords: estrogen receptor, estrus cycle, immunohistochimical, pyometra.



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Teratoma ovariano canino - Relato de caso Canine ovarian teratoma - Case report

R.R. Gutierrez1, B.I. Macente, F.A. Voorwald, W.R.R. Vicente

UNESP, Campus Jaboticabal, Jaboticabal, SP.

1E-mail: [email protected] Introdução O teratoma é uma neoplasia de células germinativas. Os teratomas ovarianos são formados por cistos incrustados por pêlos e epitélio queratinizado, podendo entornar material sebáceo, dentes, músculo estriado, cartilagem, entre outros. Acometem com maior freqüência animais jovens. A maioria dos animais é assintomática, mas sinais clínicos associados a disfunções hormonais podem ocorrer. Avaliações radiográficas e ultrassonográficas podem auxiliar o diagnóstico. A casuística é considerada maior no ovário esquerdo. O tratamento de eleição é a ovariosalpingohisterectomia uni ou bilateral. O diagnóstico definitivo e prognóstico serão obtidos após classificação histopatológica e estadiamento tumoral. Material e Métodos Foi atendida no Hospital Veterinário, Unesp - Jaboticabal, no Setor de Obstetrícia e Reprodução Animal, uma fêmea canina, de um ano e seis meses de idade, raça Labrador, nulípara, cios regulares e sem histórico de uso de anticoncepcional, para realização de ováriosalpingohisterectomia eletiva. À avaliação pré-operatória, não foram observadas alterações, sendo realizado o procedimento cirúrgico.

Resultados e Discussão Durante o procedimento cirúrgico, observou-se presença de uma massa de três centímetros de diâmetro, em ovário direito, aparentando aspectos de vários tipos teciduais, como cartilagem, ossos e pêlos. Coletado amostra para realização de análise histopatológica, sendo diagnosticadas formações císticas contendo queratina em seu interior, presença de anexos cutâneos, abundante tecido adiposo e presença de fibras nervosas com distribuição difusa, caracterizando um Teratoma ovariano. Assim como descrito na literatura, o animal era assintomático, sendo um achado cirúrgico a alteração ovariana apresentada.

Referências bibliográficas Tappin S, Norman D. What is your diagnosis? Ovarian teratoma. J Small Anim Pract, v.48, p.53-55, 2007. Daleck CR, Cesar JRF, De Nardi AB, Faro AM. Neoplasias do sistema reprodutivo feminino. In: Oncologia em cães e gatos. São Paulo: Roca, 2008. p.353-359. Palavras-chave: fêmea, ovariosalpingohisterectomia, tumor. Keywords: female, ovarysalpingehisterectomy, tumor.



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Defeitos congênitos associados à aplasia segmentar uterina em cadela: Relato de caso

Congenital defects associated with uterine segmental aplasia in bitch: Case report

A. Gradela1,3, A.G.C. Macedo2, L.O. Santos2, N.M. Ferreira2, I.R. Silva2, J.D.R. Santos2, S.S. Souza2, M.H.T. Matos1

1Docente, 2Aluno graduação, CMVET, Universidade Federal do Vale do São Francisco (UNIVASF), Petrolina, PE.

3E-mail: [email protected] Introdução Aplasia segmentar uterina (ASU) é uma anormalidade congênita rara em cadelas que decorre da perda de um segmento do útero e de sua conexão com o restante do trato genital (Chang et al., 2008). Além dos aspectos reprodutivos é importante por sua associação com agenesia renal (Chang et al., 2008), inexistindo relatos em animais de sua associação com hipoplasia renal (Petersen, et al., 2009) e Hérnia de Morgagni (Freitas et al., 2007) associada com forma incompleta da pentalogia de Cantrell (Van Hoorn et al., 2008). Material e Métodos Foi encaminhado ao Laboratório de Anatomia dos Animais Domésticos e Silvestres da Univasf um cão (Canis familiares), fêmea, mestiça, com seis meses de idade procedente do CCZ de Petrolina-PE. Ao estudo anatomotopográfico confirmou-se um caso de ASU associada com hipoplasia renal, agenesia ureteral, hérnia de Morgagni e dextrocardia. Foram coletados fragmentos do rim, artéria e a veia renal direitos para análise histológica de rotina. Resultados e Discussão O corno uterino direito (8,5 X 0,3 cm, comprimento X largura, respectivamente) era implantado no músculo transverso do abdome e menor que o esquerdo (9,6 X 0,3 cm). O rim direito (1,2 X 0,7 cm) tinha redução acentuada de glomérulos, túbulos e cálices renais e era menor que o esquerdo (5,5 X 3,5 cm). O lobo hepático quadrado, crânio-vertido, estava presente na cavidade torácica, assim como, defeitos da parede abdominal supra-umbilical e cardíaca (dextrocardia) Vale ressaltar que a ocorrência conjunta de APS, hipoplasia renal e HM associada à forma incompleta da Pentalogia de Cantrell é um achado inédito e que seu diagnóstico, em associação ou isoladamente, deveria sempre ser relatado para que, no futuro, venhamos a ter uma casuísta destas anomalias na clínica reprodutiva e/ou médica dos animais de companhia. Referências bibliográficas Chang J, Jung J-H, Yoon J et al. Segmental aplasia of the uterine horn with ipsilateral renal agenesis in a cat. J Vet Med Sci, v.70, p.6, p.641-643, 2008. Freitas LF, Amâncio FM, Souza LRMF et al. Hérnia de Morgagni: relato de caso. Rev Imagem, v.9, n.2, p.67-70, 2007. Petersen RO, Sesterhenn IA, Davis CJ. Urologic pathology. 3..ed. Lippincott Williams & Wilkins, 2009. 636 p Van Hoorn JHL, Moonen RMJ, Huysentruyt CJR et al. Pentalogy of Cantrell: two patients and a review to determine prognostic factors for optimal approach. Eur J Pediat, v.167, n.1, p.29-35, 2008. Palavras-chave: aplasia segmentar uterina, cadela, hipoplasia renal, hérnia de Morgagni. Keywords: bitch, Morgagni hernia, renal hypoplasia, uterine segmental aplasia.



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Aplasia segmentar de corno uterino com gestação a termo no corno uterino contralateral em cadela Buldogue Francês - relato de caso

Segmental aplasia of uterine horn with full-term gestation in the contralateral uterine horn in French Bulldog bitch - case report

L.L. Lanna1,3, R.M. Mascarenhas2, F.J. Calixto Júnior1, A.P. Marques Júnior2

1Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Norte de Minas Gerais (IFNMG) - Campus Salinas, Salinas, MG;

2Escola de Veterinária da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), Belo Horizonte, MG. 3E-mail: [email protected]

Introdução A aplasia segmentar do genital feminino é um distúrbio de desenvolvimento dos ductos paramesonéfricos, raro em cadelas (Nascimento e Santos, 2003). Especula-se que tenha origem hereditária, embora a causa permaneça desconhecida. McIntyre et al. (2010) relataram ocorrência de apenas 0,05% de anomalias de desenvolvimento uterino em 32.660 cadelas submetidas a ovariohisterectomia eletiva. A aplasia segmentar uterina na cadela pode ser acompanhada de hidro, muco ou piometra. No caso de envolvimento unilateral de corno uterino, geralmente a fertilidade é preservada (McIntyre et al., 2010). Material e Métodos Uma cadela da raça Buldogue Francês, um ano e meio de idade, pelagem dourada, foi admitida com sinais de distocia, 63 dias após inseminação com sêmen fresco. Após manobras obstétricas sem sucesso, foi encaminhada para cesariana. Não foi feito exame ultrassonográfico abdominal prévio à cirurgia, por não disponibilidade de equipamento.

Resultados e Discussão Na cesariana, foi retirado um feto viável do corno uterino direito e o esquerdo encontrava-se distendido por líquido e com parede fina. Optou-se por ressecção cirúrgica do corno uterino afetado e posterior análise macroscópica, verificando-se perda da continuidade do lúmen próximo à região do corpo uterino, sugestiva de aplasia segmentar, e acúmulo de muco viscoso inodoro na região cranial. O ovário esquerdo apresentava folículos de diâmetros variados e corpos lúteos, como sugerido por McIntyre et al. (2010). Na literatura consultada, não foi encontrado relato semelhante de aplasia segmentar em útero gestacional com feto viável. Na cadela, devido a sua fisiologia reprodutiva, a ocorrência de mucometra unilateral provavelmente não interfere na dinâmica ovariana, na manutenção dos corpos lúteos ou nos mecanismos de desencadeamento do parto. Devido à incerteza a respeito da hereditariedade desta anomalia, o proprietário foi orientado a realizar avaliação do aparelho reprodutivo de futuros filhotes. Referências bibliográficas McIntyre RL, Levy JK, Roberts JF, Reep RL. Developmental uterine anomalies in cats and dogs undergoing elective ovariohysterectomy. J Am Vet Med Assoc, v.237, p.542-546, 2010. Nascimento EF, Santos RL. Patologia da reprodução dos animais domésticos. 3.ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2011. Palavras-chave: aplasia segmentar, cadela, corno uterino, gestação. Keywords: bitch, gestation, segmental aplasia, uterine horn.



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Deformação vaginal por lipoma perineal - Relato de caso Vaginal deformation by perineal lipoma - Case Report

B.I. Macente1, R.R. Gutierrez, C.F.M. Mansano, W.R.R. Vicente

UNESP, Campus Jaboticabal, Jaboticabal, SP.


Introdução As neoplasias estão entre as patologias genitais das cadelas. Os lipomas são originários de tecido adiposo, aparecendo como massas subcutâneas, macias e bem delimitadas. Lipomas infiltrativos aparecem histologicamente como adipócitos benignos invadindo músculos, fascia e ocasionalmente ossos. A classificação dos lipomas gigantes ocorre, se medirem no mínimo dez centímetros em uma das dimensões ou pesar ao menos 1000 gramas. Podem ocasionar sinais clínicos dependendo da localização e tamanho. A citologia pode ser efetiva, mas o diagnóstico definitivo é feito com a histologia. A ressecção cirúrgica completa é o tratamento de eleição.

Material e Métodos Uma canina, SRD, meia idade, foi atendida no Hospital Veterinário da UNESP - Campus Jaboticabal, apresentando aumento de volume em região perineal com deformação vaginal, evolução de seis meses. Realizados exames complementares para auxílio diagnóstico. Como opção de tratamento foi realizado exérese da massa por meio de episiotomia.

Resultados e Discussão Ao exame físico observou-se uma grande massa flutuante na região perineal comprometendo a região vaginal. Nas avaliações radiográficas e ultrassonográfica, confirmou tratar-se de uma massa uniforme e densa em períneo comprimindo e deslocando o canal vaginal. A citologia foi inconclusiva. Após a exérese da massa, foi coletado material para avaliação histopatológica, obtendo-se resultado confirmatório de lipoma. Apesar de tratar-se uma neoplasia benigna, o diagnóstico definitivo e a retirada da massa foram imprescindíveis para qualidade de vida e determinação do prognóstico do animal.

Referências bibliográficas Bichard SJ, Sherding RG. Manual de saunders clinica de pequenos animais. 3ed. Porto Alegre: Roca, 2008. p.1022. Sanchez MR, Golomb FM, Moy JA, Potozkin JR. Giant lipoma: case report and review of the literature. J Am Acad Dermatol, v.28, n.8, p. 266, 1993. Palavras-chave: episiotomia, fêmeas, neoplasia. Keywords: episiotomy, female, neoplasy.



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Efeito do tissue culture médium (TCM) 199 suplementado com fator de crescimento epidermal (EGF) ou fator de crescimento semelhante à insulina (IGF-1) sobre a

maturação in vitro de oócitos caninos. Comparação entre dois métodos de coloração nuclear

The effect of the tissue culture medium (TCM) 199 supplemented with epidermal growth factor (EGF) or insulin-like growth factor-1 (IGF-1) on in vitro maturation of canine oocyte. Evaluation of two methods of nuclear staining

D.J. Cardilli1,3, G.H. Toniollo1, J.F. Pérez-Gutiérrez2, K.S. Oliveira1,

F.A. Voorwald1, C.F. Joao1, J.A. Oliveira1

1FCAV, UNESP, Jaboticabal,SP; 2Universidad Complutense de Madrid (UCM) Madrid, Espanha. 3E-mail: [email protected]

Introdução A partir da década de 90, com o início do interesse da comunidade científica pela preservação de espécies ameaçadas de extinção, ocorreu um grande desenvolvimento das biotecnologias da reprodução em carnívoros. Em canídeos, a maturação in vitro (MIV) apresenta índices limitados, com valores que variam de 0 a 58%. Algumas peculiaridades da biologia reprodutiva das cadelas, como a luteinização pré-ovulatória e a ovulação do oócito em estágio imaturo (vesícula germinativa), têm sido responsabilizadas por estes baixos índices de maturação. Objetivou-se com o presente estudo avaliar o efeito dos fatores de crescimento IGF-I e EGF sobre a maturação nuclear de oócitos caninos, e também comparar dois métodos de coloração nuclear. Materiais e Métodos Foram selecionados 787 complexos cumulus-oocitos (COCs), provenientes de ovários de 34 cadelas, em diferentes fases do ciclo estral, submetidas a ovário-histerectomias eletivas. Os COCs foram dividos em três grupos, A (TCM 199, n=199), B (TCM 199 + 100ng/ml de EGF, n=208) e C (TCM 199 + 100 ng/ml IGF-1, n=204). Após 96 horas de incubação a 38 °C em atmosfera de 5% de CO2, 50% dos oócitos, desprovidos das células do cumulus, de cada grupo foram corados com Bisbenzimida H33342 (Hoechst) e 50% com 4',6-Diamidino-2-phenylindole (Dapi). Os dados foram analisados por meio do teste Qui-quadrado utilizando-se o programa SAS. Resultados e Discussão A taxa de retomada da meiose, ou seja, os oócitos que saíram do estágio de vesícula germinativa (VG) foi de 28% no grupo A, de 27% no grupo B e de 20% no grupo C, logo, não houve diferença significativa entre o grupo controle (A) e o grupos experimentais (B e C). Não foram encontrados oócitos em metáfase II. A coloração Hoechst é muito utilizada na avaliação do estágio de maturação nuclear de oócitos de cadelas. Com relação à coloração Dapi, alguns trabalhos foram encontrados com o uso deste método para a avaliação do estágio de maturação nuclear de oócitos de ovelhas, búfalas e ratas. Os estágios de VG, quebra de vesícula germinativa (QVG) e metáfase I (MI) foram identificados em ambas as colorações. O presente estudo mostrou que maior quantidade de oócitos em QVG (p<0,05) foi observada nos grupos B e C na coloração Hoechst quando comparada com a Dapi. No grupo B, foi encontrado na coloração Hoechst menor taxa de oócitos degenerados e em VG e maior índice de oócitos em MI (p<0,05). Concluiu-se que a adição de EGF ou de IGF-1 ao meio TCM 199 não foi benéfica à MIV de oócitos de cadelas, e que a coloração Hoechst é mais eficaz para a avaliação dos estágios de maturação nuclear de oócitos de cadelas, devido à maior facilidade de visibilização e diferenciação dos estágios de maturação nuclear nesta coloração. Referências bibliográficas Luvoni GC et. al. Factors involved in vivo and in vitro maturation of canine oocytes. Theriogenology. v.63, p.41-59, 2005 Palavras chaves: cadelas, fatores de crescimento, maturação in vitro. Keywords: bitches, growth factors, in vitro maturation. Apoio Financeiro: FAPESP.



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Criopreservação de folículos pré-antrais caninos com glicerol e etilenoglicol Cryopreservation of canine preantral follicles with glycerol and ethylene glycol

K.A. Alves1, B.G. Alves, T.H. Silva, L.S. Braga, M.C. Martins, B.G. Alves, R.M. Santos,

M.E. Beletti, J.O. Jacomini

Laboratório de Reprodução Animal, Faculdade de Medicina Veterinária, UFU, Uberlândia, MG 1E-mail: [email protected]

Introdução A manipulação de ovócitos inclusos em folículos pré-antrais (FOPA) pode aumentar a eficiência reprodutiva de animais de alto valor zootécnico e contribuir na preservação de espécies em vias de extinção. A criopreservação é uma excelente alternativa para estocagem de um grande número de ovócitos imaturos e a adição de crioprotetores durante o processo pode reduzir os danos intracelulares. Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito dos crioprotetores glicerol e etilenoglicol em duas concentrações (1,5M e 3,0M) sobre a viabilidade de FOPA caninos após exposição e criopreservação. Material e Métodos Ovários (n=8) de cadelas foram submetidos ao procedimento mecânico de isolamento, utilizando o Tissue Chopper ajustado para intervalos de corte de 500 µm. Após ressuspenção e filtração o pool folicular forneceu 9 amostras de 1000 µL cada, de onde foram compostos: um grupo controle, quatro grupos de teste de toxicidade e quatro grupos de criopreservação com análise de viabilidade após os processos. Os grupos toxicidade e criopreservação receberam alíquotas de glicerol e etilenoglicol em duas concentrações (1,5 e 3M). A viabilidade de cada grupo foi avaliada por microscopia de fluorescência com o corante iodeto de propídeo. Cada par ovariano constituiu uma repetição e o efeito dos crioprotetores e suas diluições sobre a viabilidade folicular foi analisado pelo teste Qui-quadrado com nível de significância de 5%. Resultados e Discussão A taxa de viabilidade do grupo controle após o isolamento foi de 63,2%, resultado próximo ao reportado por Lopes et al. (2009) que obtiveram 67% com FOPA caninos, utilizando o mesmo método de isolamento. O grupo teste de toxicidade com etilenoglicol a 1,5M foi o único a não apresentar redução significativa da viabilidade dos FOPA (51,5%) em relação ao grupo controle. A criopreservação com etilenoglicol a 3,0M apresentou a melhor taxa de viabilidade folicular (28,0%) após o processo de descongelação. Rodrigues et al. (2004) observaram um aumento da viabilidade de FOPA de caprinos criopreservados quando modificado as concentrações de etilenoglicol de 1,5 para 3,0M. Dentre os crioprotetores, o etilenoglicol a 1,5 (toxicidade) e 3,0M (criopreservação) apresentou os melhores resultados de viabilidade folicular após os testes. Referências bibliográficas Lopes CAP, Santos RR, Celestino JJH, et al. Short-term preservation of canine preantral follicles: Effects of temperature, medium and time. Anim Reprod Sci, v.115, p.201-214, 2009. Rodrigues APR, Amorim CA, Costa SHF, et al. Cryopreservation of caprine ovarian tissue using glycerol and ethylene glycol. Theriogenology, v.61, p.1009-1024, 2004. Palavras-chave: crioprotetores, iodeto de propídeo, ovários, viabilidade. Keywords: cryoprotectants, propidium iodide, ovaries, viability. Agradecimentos: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais – FAPEMIG.



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Avaliação da viabilidade de blastocistos caninos pós-descongelação After thawing evaluation of canine blastocysts viability

C.R.F. Guaitolini1,2,4, M.O. Taffarel1,2, N.S. Teixeira1, M.J. Sudano2, M.D. Lopes2,

F.C. Landim-Alvarenga2, M.R. Luz1,3

1Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, UFES, Campus de Alegre, ES; 2Depto. de Reprodução Animal e

Radiologia Veterinária, FMVZ, UNESP, Botucatu, SP. E-mail: [email protected]; [email protected]

Introdução O conhecimento de fisiologia reprodutiva básica de animais de companhia é restrito quando comparado aos animais de produção, e a criopreservação embrionária ainda é um desafio para os cientistas. Além da demanda de reprodução assistida por criadores, o cão pode ser um modelo experimental mais relevante do que camundongos para o Ser Humano, devido ao seu tamanho, tempo e modo de vida, e fisiologia semelhante na reatividade a drogas e irradiação (Chastant-Maillard et al., 2010). Objetivou-se avaliar a viabilidade in vitro pós-descongelação de blastocistos caninos criopreservados em glicerol 10% ou etilenoglicol 1,5M. Material e Métodos Dezoito blastocistos caninos produzidos in vivo foram colhidos por OSH doze dias após a primeira cópula ou IA (Luz et al., 2010), e congelados em glicerol 10% (G1, n=9) ou etilenoglicol 1,5M (G2, n=9). A congelação lenta foi realizada em máquina de congelação programável (TK 3000®). Após o seeding a -6,0°C, a taxa de resfriamento foi de -0,6°C/min até -35°C, e as palhetas mergulhadas em N2L. Imediatamente após a descongelação os embriões foram avaliados com as sondas iodeto de propídeo (125 µg/mL) e Hoechst 33342 (1mg/mL). Foram considerados viáveis embriões com 50% ou mais de blastômeros com fluorescência azul. Os dados foram analisados por regressão logística (SAS), com nível de significância de 5%.

Resultados e Discussão Não houve diferença (P = 0,6297) na viabilidade embrionária entre os crioprotetores utilizados, com 6/9 (66,7%) blastocistos viáveis no grupo GLI e 5/9 (55,6%) no grupo EG. Abe et al. (2010) obtiveram 50% de viabilidade para mórulas e 40% para blastocistos caninos vitrificados, com no mínimo 75% de blastômeros negativos ao IP. Conclui-se que blastocistos caninos criopreservados em glicerol 10% e etilenoglicol 1,5M apresentam viabilidade similar in vitro pós-descongelação.

Referências bibliográficas Abe Y, Suwa Y, Tomoyoshi A, Ueta YY, Kobayashi N, Ohshima N, Shirasuna S, Abdel-Ghani MA, Oi M, Kobayashi Y, Miyoshi M, Miyahara K, Suzuki H. Cryopreservation of canine embryos. Biol Reprod, 2010. DOI 10.1095/Biolreprod.110.087312. Chastant-Maillard S, Chebrout M, Thoumire S, Saint-Dizier M, Chodkiewicz M, Reynaud K. Embryo biotechnolgy in dog: a review. Reprod Fertil Dev, v.22, p.1049-1056, 2010. Luz MR, Holanda CC, Pereira JJ, Freitas PMC, Salgado AEP, Giannotti, JG, Oliveira SB, Teixeira NS, Guaitolini CRF. High embryonic recovery rates with in vivo and ex vivo techniques in the bitch. Reprod Domest Anim, 2010. DOI 10.1111/j.1439-0531.2010.01693.x Palavras-chave: cães, criopreservação, viabilidade embrionária. Keywords: cryopreservation, dogs, embryonic viability. Apoio financeiro: Fund. de Apoio à Ciência e Tecnologia do Espírito Santo e CAPES-REUNI.



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Efeito do intervalo de secção sobre o isolamento mecânico de folículos pré-antrais de cadelas

Effect of section interval under bichtes preantral follicles mechanical isolation

J.O. Jacomini1, K.A. Alves, B.G. Alves, T.H. Silva, B.G. Alves, L.S. Braga, M.C. Martins, R.M. Santos, M.E. Belleti

Laboratório de Reprodução Animal, Faculdade de Medicina Veterinária (UFU), Uberlândia, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução A partir da biotécnica de manipulação de ovócitos inclusos em folículos pré-antrais (MOIFOPA) é possível o isolamento, a maturação e o cultivo folicular. Devido à proximidade filogenética dos cães com algumas espécies ameaçadas de extinção objetivou-se neste estudo avaliar o efeito de dois intervalos de corte (250 e 500 µm), utilizados no procedimento mecânico de isolamento, sobre a quantidade e qualidade folicular obtida. Material e Métodos Ovários (n = 10) de cadelas foram processados no aparelho Tissue Chopper calibrado para espessuras de corte de 250 e 500 µm. Em seguida, os fragmentos ovarianos foram dissociados e filtrados em malhas de náilon. Após, colocou-se uma alíquota do pool processado sob microscópio invertido para a quantificação folicular. As avaliações quanto à presença de células da granulosa e viabilidade folicular foram realizadas em microscópio invertido de fluorescência utilizando os corantes Hoechst 33342 e iodeto de propídeo (10µg/mL), respectivamente. A viabilidade e a classificação folicular foram analisadas pelo teste Qui-quadrado e a quantificação folicular e o número de células da granulosa pelos testes t e de Mann-Whitney, respectivamente. Os resultados foram considerados significativos quando P < 0,05. Resultados e Discussão Foi obtido valor médio (±erro padrão) de 25200 ± 6676 folículos pré-antrais por ovário no intervalo de 250 µm contra 11000 ± 2727 no de 500 µm (P=0,08). Em primatas (Cebus apella) Domingues et al. (2003) reportaram a influência da espessura de corte (250, 500, 750 e 1000 µm) no total de folículos isolados por ovário, onde o melhor resultado foi observado na secção de 500 µm (300830). Neste estudo o intervalo de corte de 500 µm preservou maior número de células da granulosa por folículo (6,96 versus 2,83) e proporcionou melhor taxa de viabilidade (74,5 versus 48,7%; P < 0,05) quando comparado ao de 250 µm. As células da granulosa são essenciais para o crescimento do ovócito, diferenciação, maturação e atividade transcripcional (Van Den Hurk e Zhao, 2005). Portanto, o isolamento mostrou-se eficiente em ambos os intervalos de corte, porém a viabilidade e a qualidade folicular foram melhores quando utilizado o intervalo de 500 µm. Referências bibliográficas Domingues SFS, Ferreira HS, Muniz JAPC et al. Mechanical isolation of capuchin monkey (Cebus apella) preantral ovarian follicles. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v.55, n.3, p.301-308, 2003. Van Den Hurk R, Zhao J. Formation of mammalian oocytes and their growth, differentiation and maturation within ovarian follicles. Theriogenology, v.63, p.1717-1751, 2005.

Palavras-chave: células da granulosa, ovários, viabilidade. Keywords: granulosa cells, ovaries, viability. Agradecimentos Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais – FAPEMIG.



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Utilização do score Apgar na avaliação clínica de neonatos caninos Apgar scoring in the clinical assessment of canine neonate

L.T. Brito1, M.J.C.D. Teixeira, C.C.V. Souza, A.K.F. Fagundes, E.C.S. Oliveira

UFRPE, Recife, PE.

1E-mail: [email protected] Introdução O score Apgar avalia a vitalidade neonatal, auxiliando na diferenciação entre neonatos hígidos e severamente comprometidos permitindo dessa forma, a prevenção ou a correção de anormalidades neonatais. Apesar de sua utilização na neonatologia humana desde meados de 1950, este parâmetro ainda é pouco utilizado na rotina veterinária. No entanto, devido à valorização econômica de cães de raça pura e ao envolvimento emocional dos proprietários com seus animais de estimação, cresce o interesse em aumentar as taxas de sobrevivência neonatal (Veronesi et al., 2009; Brito, 2011). Assim, este trabalho tem como objetivo enfatizar a importância do score apgar na avaliação clínica de neonatos caninos. Materiais e Métodos Uma cadela, Schnauzer, de 7 anos de idade, 11 kg, foi atendida no Hospital Veterinário Harmonia com problemas durante o parto. A proprietária relatou que a expulsão do primeiro concepto havia ocorrido há aproximadamente 1 hora. Após o exame ginecológico e radiográfico, constatou-se que se tratava de um quadro de distocia, e foi indicada como terapêutica a cesariana. Foram retirados mais 5 conceptos, sendo 1 natimorto. E, logo após o nascimento foi realizado o manejo neonatal e a avaliação clínica por meio do score apgar. Os parâmetros avaliados incluíram: freqüência respiratória (FR: 15-40 mrm), freqüência cardíaca (FC: 180-250bpm), temperatura corpórea (TºC: 34,5ºC-36 ºC), peso corporal (PC: 100g-400g), tônus muscular, reflexo de sucção e vocalização. Os valores entre parênteses, são utilizados como referência de normalidade segundo Silva et al (2008) e Prats (2005). Resultados e Discussões Segundo Silva et al (2008) o score Apgar é classificado em três níveis ( 0, 1 e 2 ), sendo o nível 2 considerado o ideal para a vitalidade do neonato. No presente trabalho, em média a FR, FC, TºC e PC foram respectivamente: 25 mrm, 155 bpm, 34ºC, 190 g, desconsiderando o natimorto. Os neonatos só apresentaram tônus muscular, reflexo de sucção e vocalização 10 minutos após o nascimento. Levando-se e consideração os parâmetros avaliados os neonatos teriam um score Apgar do tipo 2, apesar da leve bradicardia e hipotermia apresentada pelos mesmos. O score apgar do tipo 1 indica a necessidade de uma terapêutica medicamentosa, pois provavelmente o neonato apresentaria bradicardia, bradipnéia, hipotermia e cianose das mucosas. Já o score apgar do tipo 0, indica morte neonatal. Assim, pode-se concluir que o score apgar é um parâmetro fidedigno para a avaliação clínica neonatal, pois permite avaliar com eficácia a viabilidade dos recém-nascidos. Referências bibliográficas Brito LT. Neonatologia canina: Estudo da arte e perspectivas. 2011. 40f. Monografia (Bacharelado em Medicina Veterinária) – Universidade Federal Rural de Pernambuco, Recife. Silva LCG et al. Avaliação clínica neonatal por escore Apgar e temperatura corpórea em diferentes condições obstétricas na espécie canina. Rev Port Ciênc Vet, v.103, p.165-170, 2008. Prats A. Período neonatal. In: Prats A. Neonatologia e pediatria: canina e felina. São Caetano do Sul, Interbook, 2005. p.30-41. Veronesi MC et al. An Apgar scoring system for routine assessment of newborn puppy viability and short-term survival prognosis. Theriogenology, v.72, p.401-407, 2009. Palavras-chaves: Apgar, clínica, neonatologia, Keywords: Apgar, clinical, neonatology.



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Avaliação clínica de fetos caninos através da ultrassonografia Clinical evaluation of canine fetuses by ultrasound

D.S. Carvalho, L.T. Brito1, F.S. Costa, E.C.S. Silva, C.C.S. Melo, E.C.S. Oliveira

UFRPE, Recife, PE.

1E-mail: [email protected] Introdução O exame ultrassonográfico tornou-se uma ferramenta essencial no acompanhamento gestacional de cadelas. Através deste é possível a obtenção de um diagnóstico gestacional precoce, bem como o monitoramento da gestação, avaliação fidedigna da viabilidade fetal e detecção de possíveis anormalidades (Kustritz, 2005). Dessa forma, foi objetivado neste trabalho relatar e enfatizar a importância da avaliação clínica de fetos caninos utilizando a ultrassonografia como ferramenta. Materiais e Métodos Para a execução do exame ultrassonográfico, a cadela gestante foi previamente tricotomizada na região abdominal e colocada na posição dorso-ventral para o inicio do procedimento. Foram avaliados a freqüência cardíaca (Fc), diâmetro do crânio (Dc), motilidade intestinal, diâmetro e anatomia renal, posição, ecogenicidade e textura dos órgãos, bem como o tamanho dos fetos e o grau de estresse aos quais estavam submetidos. A cadela foi acompanhada a partir do 45º dia de gestação. Resultados e Discussões No exame, foram visualizadas estruturas sugestivas de coluna vertebral e crânio, as quais confirmaram o diagnóstico de gestação. Numa primeira avaliação o Dc foi de 2.13 cm, e a Fc foi de 125 batimentos por minutos (bpm), indicando um feto prematuro. Já na segunda avaliação, o Dc foi de 2.54 cm e a Fc foi de 231.15 bpm sugerindo a proximidade do parto. Durante as avaliações, foi observado que um dos fetos apresentava um de seus rins medindo 1.53 cm e uma dilatação anormal da pelve renal, o que sugeriu uma hidronefrose fetal, sendo uma patologia raramente relatada na literatura. Dessa forma, a ultrassonografia foi essencial para o acompanhamento gestacional e diagnóstico da hidronefrose fetal, permitindo um acompanhamento clínico pós-natal eficaz do feto acometido. Referências bibliográficas Kustritz MV.R. Pregnancy diagnosis and abnormalities of pregnancy in the dog. Theriogenology, v.64, p.755-765, 2005. Palavras-chaves: cínica, fetos, ultrassonografia. Keywords: clinical, fetuses, ultrasound.



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Avaliação prognóstica em cadelas com piometra- resultados preliminares Prognostic marker in bitches with pyometra- preliminaries results

M.C. Sant’Anna, E.D. Vettorato, M.R.S. Balarin, P.M. Pereira, M.I.M. Martins1

Universidade Estadual de Londrina, UEL, Londrina, PR.


Introdução O complexo hiperplasia endometrial cística - piometra é uma doença aguda ou crônica que ocorre normalmente no diestro de fêmeas adultas e intactas e que tem importância multissistêmica. No hemograma, a anormalidade mais consistente é a leucocitose por neutrofilia, enquanto a azotemia é a anormalidade bioquímica mais comum (Johnston et al, 2001). A dosagem de lactato sérico pode ser utilizada como valor prognóstico em afecções de caráter emergencial, como por exemplo, cães com torção gástrica (Rabelo et al., 2009). Embora, Hagman, et al (2009) comparando os níveis de lactato sanguíneo em cadelas com piometra e sadias, não encontraram diferença entre os grupos. O objetivo do estudo foi associar variáveis clínicas, laboratoriais como indicadores prognósticos de cadelas com piometra tratadas pela ovariohisterectomia (OSH). Material e Métodos Foram avaliadas prospectivamente 54 cadelas adultas submetidas a OSH devido a piometra. Imediatamente após o diagnóstico clínico, foi coletado sangue venoso para exames hematológicos e bioquímicos, e para dosagem do lactato com o aparelho Accutrend® Lactato e das tiras BM-Lactato (Roche®), o lactato sanguíneo foi repetido após 24h. Os pacientes foram classificados como positivo ou negativo para SIRS (síndrome da resposta inflamatória sistêmica) baseada na classificação descrita por Hauptman et al (1997). A análise estatística foi realizada pelo teste exato de Fisher, onde as variáveis dependentes foram óbito e tempo de internamento maior que 48 horas, com nível de significância de 5%, usando o pacote estatístico EPINFO 6 (2001). Resultados e Discussão Dentre as variáveis estudas apenas os pacientes classificados como SIRS + (p = 0,037) e a elevação da creatinina acima dos valores de referência (p = 0,014) foram associados com a necessidade de internamento maior que 48 horas. A presença de peritonite (p = 0,028) foi associada com o óbito. As variáveis como anemia, hipoglicemia, presença de bastonetes e metamielócitos na circulação, status de cervix e hiperlactatemia > 2,5mmol/l pré-cirúrgico e 24 horas após não tiveram associação significativa. Apesar de ter sido observada uma queda importante do lactato sangüíneo 24 horas após o tratamento, assim como Hagman et al (2009), a hiperlactatemia e períodos prolongados de internamento não estiveram associados. Frente a esses preliminares resultados, os principais fatores prognósticos são a presença da SIRS, o aumento da creatinina sérica e a ocorrência de peritonite. Referências Bibliográficas Johnston SD, Kustritz MVR, Olson PNS. Canine and Feline Theriogenology, 1ª ed., Philadelphia: Ed. Saunders company, p. 206-224, 2001. Rabelo RC, Arnold CF, Alsua SC. RICO Score - Classificação rápida de sobrevida em cuidados intensivos. Variáveis inter-relacionadas em cães. Revista Clínica Veterinária, n.78, 2009. Hauptman JV, Walshaw R, Olivier NB. Evaluation of the sensitivity and specificity of diagnostic criteria for sepsis in dogs. Veterinary Surgery, v.26, p.393-397, 1997. Ragman R et al. Blood lactate levels in 31 female dogs with pyometra. Acta Veterinaria Scandinavica, v.51, n.2. 2009. Palavras-chave: cães, lactato, infecção uterina, SIRS. Keywords: dogs, lactate, SIRS, uterine infection. Financiamento Capes.



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Padronização da técnica de imunoistoquímica para a detecção de colágeno I e III em endométrio e cérvis de cadelas

Standardization of immunohistochemical technique for type I and III collagen receptor detection in bitch cervix and endometrium

R. Volpato1, I. Martins, A.S. Rocha, R.L. Amorin, M.D. Lopes

Faculdade de Medicina Veterinaria e Zootecnia, UNESP, Botucatu, SP.

1E-mail: [email protected] Introdução O presente estudo teve como objetivo validar a técnica de imunoistoquímica para detecção de receptores de colágenos I e III no cérvix e endométrio de cadelas. A patência da cérvix é regulada pela musculatura lisa, tecido fibroso e elastina. A remodelação da matriz extracelular tem um papel importante na dilatação cervical pela degradação do colágeno. Chatdarong et al. (2010) concluíram que no útero de cadelas cíclicas tem uma maior proporção de colágeno comparado com a musculatura lisa, levando a uma diminuição da resistência a tração, causando o relaxamento da cérvix. Material e Métodos Os fragmentos uterinos e cervicais foram fixados em formol tamponado 10% durante 24 horas e mantidos em álcool 70% até o momento de inclusão em parafina. Cortes de 3μm foram obtidos e colocados em lâminas previamente tratadas com Poly-L-lysina (Poly-L-lisine® – Sigma Chemical Co.- USA). Para a desparafinização, as lâminas foram colocadas em cuba com xilol por 30 minutos e, a seguir, mantidas em uma nova solução de xilol por 20 minutos. As lâminas foram transferidas para a hidratação em banhos de álcool, na seguinte sequência: álcool absoluto I, álcool absoluto II, álcool absoluto III, álcool 95%, álcool 85%, por três minutos cada etapa. Para a detecção de receptores de colágeno I e III realizou-se recuperação antigênica em pepsina 1% pH 1,8 ( Pepsina 1:1000 NF- Nuclear SP-Brasil) com incubação em estufa a 60°C por 10 minutos e, em seguida, a 37° por 20 minutos. As etapas seguintes foram o bloqueio da peroxidase endógena e bloqueio com leite molico 3%. Realizou-se a incubação com o anticorpo primário na diluição de 1:2000, para os receptores de colágeno I e III ( Anti-Humam Cytokeratin, clones AE1 e AE3 Daki,USA), em câmara úmida durante 18h à temperatura de 4ºC. Após a incubação, foi feita revelação com o cromógeno DAB (3,3´-diaminobenzidina - Liquid DAB Cromogen® – DakoCytomation – USA) durante 5 minutos ao abrigo da luz e, novamente, lavagem com solução tampão TRIS - pH 7,4. As lâminas foram contra-coradas com Hematoxilina de Mayer. Procedeu-se, então, a desidratação através de banhos de álcool. Resultados e Discussão Como controle negativo, um corte de cérvix e endométrio canino foi incubado com imunoglobulina da mesma espécie empregada na confecção do anticorpo primário (N-Universal Negative Control Mouse, Dako, USA). As regiões portadoras de receptores de colágenos I e III, após o tratamento, passaram a apresentar coloração marrom, demonstrando a eficiência da técnica em cadelas. Referências bibliográficas Chatdarong K, Linharattanaruksa P, Sirivaidyapong S, Srisuwatamasakul S. The proportions of smooth muscle an collagen in the cervical tissue of bitches during various stages of the estrous cycle and bitches developing. In: Chulalongkorn University Veterinary Science the Animal Company, 9, 2010, Proceedings… v.1, p.129. Palavras-chave: cadelas, colágeno, imunoistoquímica. Keywords: bitches. collagen, immunohistochemical.



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Padronização da técnica de imunoistoquimica para a detecção de receptores de progesterona em endométrio e cérvix de cadelas

Standardization of immunohistochemical technique for progesterone receptor detection in bitch cervix and endometrium

A.S. Rocha, R. Volpato, I. Martins, R.L. Amorin, M.D. Lopes

Faculdade de Medicina Veterinaria e Zootecnia, UNESP, Botucatu, SP.

[email protected] Introdução O presente estudo teve como objetivo validar a técnica de imunoistoquímica para detecção de receptores de progesterona no cérvix e endométrio de cadelas. Pesquisas estão sendo focadas nas concentrações desses recptores buscado compreender suas implicações no desenvolvimento de afecções uterinas. Hormônios como a progesterona e os estrógenos são responsáveis pelo aumento e desenvolvimento do endométrio e ramificação de suas glândulas (De Bosschere et al, 2003). Material e Métodos Os fragmentos uterinos e cervicais foram fixados em formol tamponado 10% durante 24 horas e, posteriormente, mantidos em álcool 70% até o momento de inclusão em parafina. Cortes de 3μm foram obtidos e colocados em lâminas previamente tratadas com Poly-L-lysina (Poly-L-lisine® – Sigma Chemical Co.- USA). Para a desparafinização, as lâminas foram colocadas em cuba com xilol por 30 minutos e, a seguir, mantidas em uma nova solução de xilol por 20 minutos. As lâminas foram transferidas para a hidratação em banhos de álcool, na seguinte sequência: álcool absoluto I por três minutos, álcool absoluto II por três minutos, álcool absoluto III por três minutos, álcool 95% por três minutos, álcool 85% por três minutos. Para a detecção de receptores de progesterona realizou-se a recuperação antigênica em solução de citrato de sódio 10 mM, com incubação em panela de pressão tipo pascal (Dako-USA) durante 30 minutos. A etapa seguinte foi o bloqueio da peroxidase endógena e o bloqueio com leite molico 3%. Realizou-se a incubação com o anticorpo primário, na diluição de 1:50, para os receptores de progesterona (anticorpo monoclonal cat. No 1546, Immunotech, France), em câmara úmida durante 18h à temperatura de 4ºC. Então, o material foi submetido a banhos de TRIS e incubado com o anticorpo secundário Advance (Advance, Dako, USA) segundo instruções do fabricante. Realizou-se lavagem com solução tampão TRIS - pH 7,4, e revelação com o cromógeno DAB (3,3´-diaminobenzidina - Liquid DAB Cromogen® – DakoCytomation – USA) durante 5 minutos ao abrigo da luz e, novamente, lavagem com solução tampão TRIS - pH 7,4.As lâminas foram contra-coradas com Hematoxilina de Mayer. Procedeu-se, então, a desidratação através de banhos de álcool. Resultados e Discussão Como controle negativo, um corte de cérvix e endométrio canino foi incubado com imunoglobulina da mesma espécie empregada na confecção do anticorpo primário (N-Universal Negative Control Mouse, Dako, USA). As células portadoras de receptores hormonais de progesterona, após o tratamento, passaram a apresentar seus núcleos corados em marrom, demonstrando a eficiência da técnica em cadelas. Referências bibliográficas De Bosschere H, Ducatelle R, Tshamala M. Uterine oestrogen and progesterone receptor expression in experimental pyometra in the bitch. J Comp Pathol, v.128, p.99-106, 2003. Palavras-chave: cadelas, imunoistoquimica, progesterona. Keywords: bitches, immunohistochemical, progesterone.



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Avaliação citológica e dosagem de progesterona sérica na identificação do estro hormonal e citológico da cadela

A.A.P. Derussi1, C.L. Arckerman, R. Volpato, A.A. Ribeiro, C.R. Guaitolini, G.S. Cardoso,

M.O. Taffarel, M.J. Sudano, M.D. Lopes

Departamento de Radiologia animal e Reprodução Veterinária, FMVZ, UNESP, Botucatu, SP. 1Email: [email protected]

Introdução A diferenciação entre estro citológico e estro hormonal, a correlação entre as modificações físicas, comportamentais, alterações hormonais, ultrassonográficas e tempo de ovulação não é precisa nas cadelas (GIER, 2006). A realização de exames citológicos seriados, desde o início do proestro, pode facilitar a determinação da onda pré-ovulatória de LH; uma contagem de 80% de células superficiais corresponde à concentração máxima de estrógeno (dia -2 da onda pré-ovulatória de LH) (FELDMAN & NELSON, 2004). Da mesma forma, o surgimento da onda pré ovulatória de LH corresponde a uma concentração de progesterona (P4) ao redor de 0,9 ng/ml (ENGLAND E CONCANNON, 2002). Deste modo, nosso objetivo foi testar a eficácia da citologia vaginal em predizer a identificação do início do estro hormonal. Material e Métodos Realizou-se citologia vaginal em 08 fêmeas caninas em dias alternados, desde o início da identificação do proestro até a detecção de 80% ou mais de células superficiais (M1). Também foi realizada dosagem sérica de P4 em M1 e determinada a correlação destas variáveis em relação ao surgimento da onda pré-ovulatória de LH. Os dados foram analisados através da correlação de Pearson, utilizando o programa PROC CORR do SAS. Resultados e Discussão O resultado demonstrou que não houve correlação (r= 0,39 e P = 0,3330) entre as variáveis analisadas. A citologia vaginal apesar de ser uma metodologia de fácil realização e baixo custo, não se mostrou eficaz para a identificação do estro hormonal. A citologia vaginal mostrou uma variação de ± 3 dias em relação ao início do estro hormonal, quando se utilizou a P4 sérica como forma de determinação da onda pré-ovulatória de LH. A dosagem de LH nas cadelas ainda é o método mais adequado para a identificação do estro hormonal, no entanto, não é realizada rotineiramente. A citologia vaginal não se mostrou um teste eficiente para diferenciar o proestro e estro citológico, não devendo, portanto, ser o único método utilizado em protocolos de cobertura controlada ou inseminação artificial. Referências bibliográficas Gier J. Differential regulation of the secretion of luteinizing hormone and follicle stimulating hormone around the time of ovulation in the bitch. Theriogenology, v. 66, n.6-7, p.141-1422, 2006. Feldman EC, Nelson RW. Ovarian cicle andvaginal citology. In: Feldman EC, Nelson RW. Canine and feline endocrinology and reproduction. 2.ed. Philadelphia, W.B Saunders, 2004. 78p. England G, Concannon PW. Determination of the optimal breeding time in the bitch; Basic consideration. In: Concannon PW, England GCM, Verstegen J. Recent advances in small animal reproduction. Ithaca: Disponível em: </http://www.ivis.org/>. . Palavras-chave: citologia vaginal, ovulação, progesterona. Keywords: ovulation, progesterone, vaginal smear.



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Hipoluteoidismo em cadela: Relato de Caso Hypoluteoidism in a bitch: case report

C.C.S. Melo1,2, G.S.J. Aragão2, A.K.F. Fagundes1, E.C.S. Oliveira1

1Departamento de Medicina Veterinária, UFRPE, Recife, PE, Brasil; 2Médico Veterinário Autônomo.

2E-mail: [email protected] Introdução Uma característica importante da gestação da cadela é a manutenção das concentrações plasmáticas de progesterona (P4) ser exclusivamente de origem luteal (Luz et al., 2005). Entretanto, o fracasso em manter uma concentração ideal de progesterona (P4) durante a prenhez pode levar à reabsorção fetal, assim como ao aborto. Este tipo de situação pode estar relacionado ao Hipoluteoidismo, que é caracterizado por uma secreção insuficiente de P4 pelo corpo lúteo durante a gestação (Görlinger et al., 2005). Este trabalho teve como objetivo relatar um caso de insuficiência luteal em cadela. Descrição do caso Uma cadela Rotweiller, 4,5 anos, foi levada a uma Clínica Veterinária na cidade de Campina Grande, Paraíba, com histórico de gestações anteriores que foram interrompidas, em média, aos 56 dias (54, 56 e 58 dias). Não foi observada anormalidades ao exame físico e ginecológico. Foi realizado exame para brucelose, uma das causas infecciosas de aborto em cadelas, e este deu negativo. Suspeitou-se de hipoluteoidismo e o ciclo estral seguinte foi acompanhado e foram dosadas as concentrações de P4 plasmática no dia 01 (estro), 30, 42, 56 e 63 do ciclo (Tab 1). Resultados e Discussão A gestação foi confirmada aos 30 dias por meio de avaliação ultrassonográfica, mas a concentração de P4 encontrava-se abaixo dos valores preconizados para a manutenção de uma gestação na cadela, confirmando o diagnóstico. Iniciou-se suplementação oral com P4 (acetato de medroxiprogesterona-MPA, 0,1mg/kg, SID, até o dia 58) na tentativa de se prevenir o aborto devido à insuficiência de P4 . Após a interrupção do tratamento, a cadela entrou em trabalho de parto e foi indicada a cesariana, entretanto, optou-se pela indução do parto e a fêmea pariu oito filhotes (cinco mortos e três vivos). Em conclusão, baseando-se no histórico de abortos anteriores em média aos 56 dias e nos achados laboratoriais, suspeitou-se de insuficiência luteal nesta cadela. O decréscimo prematuro da concentração de P4 quando a avaliação ultrassonográfica confirmou a viabilidade dos fetos, e a manutenção da gestação durante a administração de MPA, suportaram e confirmaram o diagnóstico de hipoluteoidismo. Tabela 1. Concentrações plasmáticas de progesterona em cadela Rotweiller.

Dias Concentração Plasmática de P4 (ng/ mL) 01 (estro) 1,90

30 8,7 42 14,46 56 6,01 63 4,1

Referências bibliográficas Görlinger S, Galac S, Kooistra HS, Okkens AC. Hypoluteoidism in a bitch. Theriogenology, v.64, p.213-219, 2005. Luz MR, Freitas PMC, Pereira EZ. Gestação e parto em cadelas: fisiologia, diagnóstico de gestação e tratamento das distocias. Rev Bras Reprod Anim, v.29, p.142-150, 2005. Palavras-chave: corpo lúteo, gestação, hipoluteoidismo, progesterona. Keywords: corpora lútea, hipoluteoidism, pregnancy, progesterone.



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Sertolinoma em cão - relato de caso Sertoli cell tumor in dogs - case report

A.M.S. Conceição1,3, M.D. Oliveira1, M.O. Paixão1, R.S. Silva1, D.A.F. Viana1, G.S. Correia1,

M.C. Scherr1, L.M. Freitas Neto1, A.M. Fraga Junior2

1Departamento de Medicina Veterinária, Faculdade Pio Décimo, Aracaju, SE; 2Unidade Acadêmica de Garanhuns, Universidade Federal Rural de Pernambuco, Garanhuns, PE.

3E-mail: [email protected] Introdução Objetivou-se descrever o caso de um sertolinoma em um cão com 9 anos de idade, da raça Poodle, na cidade de Aracaju-SE. O animal foi avaliado clinicamente e submetido ao exame ultrassonografico; sendo diagnosticado apenas um testículo na bolsa escrotal, contralateral da cavidade abdominal. O animal possuía como principais sinais clínicos aumento das mamas, rarefação pilosa, intensa leucopenia e trombocitopenia. Relato de caso No dia 06 de julho de 2010, foi atendido um cão, macho, da raça Poodle, 9 anos de idade, cujo proprietário relatou que o animal nasceu com apenas um testículo na bolsa escrotal, que as mamas do cão estavam aumentadas e produzindo leite. Realizou-se hemograma evidenciando leucopenia e trombocitopenia. Ao exame ultrassonografico diagnosticou-se a presença do testículo contralateral na cavidade abdominal, que se apresentava como uma massa hiperecóica com 6,36 cm de diâmetro. Desse modo foi indicado cirurgia para retirada da massa. No dia 02 de agosto o animal apresentou piora, com queda acentuada no número de leucócitos e plaquetas. No dia 12 de agosto foi feita transfusão sanguínea, orquiectomia e a retiradas de um nódulo na mama inguinal. Em 28 de agosto de 2010 o animal foi a óbito. Resultados e Discussão O animal deste relato apresentava sinais de hiperestrogenismo como: ginecomastia, rarefação pilosa, galactorréia e supressão da medula óssea, devido aos índices de leucócitos e plaquetas diminuídos Jones et al. (2000). O criptorquidismo junto com outros fatores como idade e raça são fatores de risco para o desenvolvimento de neoplasias testiculares acarretando em sérias perdas econômicas Gori et al. (2005) Fan e Lorimier (2007). Vale ressaltar a importância do exame clínico, diagnóstico por imagem e tratamento cirúrgico precoce de cães criptorquidas, para prevenção desta neoplasia testicular. Referências bibliográficas Fan TM, Lorimier LP. Tumors of the male Reprodutive System. In: WITHROW SJ, VAIL, B. M. Withrow & MacEwen’s. Small Animal Clinical Oncology. Saunders Elsevier. Missouri, 2007. Gori S, Porrozzi S, Roila F, Gatta G, De Giorgi U, Marangolo M. Germ cell tumours of the testis. Crit Rev Oncol Hematol, v.53, n.2, p.141-64, 2005. Jones TC, Hunt RD, King NW. Patologia veterinária: sistema genital. 6.ed. São Paulo: Manole, 2000. v.1, p.1231-1234. Palavras-chave: leucopenia, sertolioma, testículo, trombocitopenia. Keywords: leucopenia, sertoli cell tumor, testicle, thrombocytopenia.



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Dieta suplementada de antioxidantes (HT 42d) melhora qualidade do sêmen canino Dietary supplementation with antioxidants (HT 42d) improves canine semen quality

D.C. Uchoa1,3, T.F.P. Silva2, A.C. Mota Filho1, L.D.M. Silva1

1Laboratório de Reprodução de Carnívoros, 2Laboratório de Manipulação de Folículos Ovarianos Pré-Antrais, Faculdade de

Veterinária, Universidade Estadual do Ceará, Fortaleza, CE 3E-mail: [email protected]

Introdução A fim de aumentar o desempenho de cães de elite destinados à reprodução, faz-se uso de suplementação da dieta com vitaminas, que se constituem antioxidantes importantes para a manutenção da integridade da membrana plasmática, melhorando o volume e a qualidade seminal em várias espécies (ex: coelhos Yousef et al., 2003; carneiros, Yue et al., 2010). A primeira ração desenvolvida especificamente para reprodução foi a HT 42d (Royal Canin), que comprovadamente melhora a performance de fêmeas caninas. Esta ração é enriquecida com vitamina A, D3, E, C, cobre, manganês, zinco, ácido fólico e selênio. Entre outros componentes, também contém L-carnitina e β-caroteno. Entretanto, com o uso desta ração não foram encontrados dados referentes à melhora de qualidade seminal de machos caninos Assim, objetivo foi avaliar os parâmetros seminais caninos antes e após o uso da ração HT 42d. Material e Métodos Sêmen de 5 cães das raças Beagle, Boxer, Buldogue Francês e Terrier Brasileiro foram coletados por manipulação digital e a 3ª fração avaliada quanto ao volume (mL), concentração espermática (106 sperm/ml), motilidade (%), vigor (0 a 5), funcionalidade de membrana (%), espermatozoide normal (%), acrosoma normal (%) e espermatozoides vivos (%) antes e após o uso por 60 dias da ração HT 42d (Royal Canin, Descalvado-SP-Brazil) fornecida de acordo com o peso do animal. Os resultados foram expressos em media e erro padrão e comparados por ANOVA e PSLD Fischer.

Resultados e Discussão Com exceção do vigor (4,8 ± 0,1 e 5,0 ± 0,0), os valores de volume (0,6ml ± 0,1 e 1,0ml ± 0,1), concentração espermática (638,0 x 106 espermatozoides/ml ± 38,5 e 1.046,0 x 106 espermatozoides/ml ± 110,5), motilidade (91,0% ± 7,4 e 97,0% ±1,5), funcionalidade de membrana (81,6% ± 0,8 e 87,2% ± 1,3), espermatozóides normais (80,2% ± 0,9 e 85,6 % ± 1,1), com acrossoma normal (86,9 % ± 0,7 e 92.9% ± 0,9) e vivos (91.1 % ± 0,4 e 97,4 % ± 0,3) foram significativamente superiores após o uso da ração. Conclui-se que o uso da ração HT 42d por 60 dias em machos caninos, melhora a qualidade espermática do sêmen a fresco.

Referências bibliográficas Yousef MI, Abdallah GA, Kamel KI. Effect of ascorbic acid and Vitamin E supplementation on semen quality and biochemical parameters of male rabbits. Anim Reprod Sci, v.76, p.99-111, 2003. Yue D, Yan L, Luo H, Xu X, Jin X. Effect of Vitamin E supplementation on semen quality and the testicular cell membranal and mitochondrial antioxidant abilities in Aohan fine-wool sheep. Anim Reprod Sci, v.118, p.217-222, 2010. Palavras-chave: antioxidantes, cão, ração suplementada, sêmen. Keywords: antioxidants, dietary supplementation, dog, semen.



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Recuperação de espermatozóides epididimários em cães utilizando diferentes diluidores Recovery of epididymal spermatozoa in dogs using different extenders

A.C. Mota Filho1, H.V.R. Silva, L.M.P. Freire, L.D.M. Silva

Laboratório de Reprodução de Carnívoros, Universidade Estadual do Ceará, Fortaleza, CE.

1E-mail: [email protected] Introdução A recuperação de espermatozóides colhidos diretamente do epidídimo, após a morte do animal, é um procedimento importante para se obter reserva de material genético de animais domésticos e de espécies em extinção. Experimentos têm sido realizados em várias espécies animais com o intuito de determinar o período ideal entre o óbito e a colheita dos espermatozoides (Yu e Leibo, 2002). Esse trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade dos espermatozóides epididimários imediatamente após a orquiectomia, usando os diluidores TRIS e ACP-106C. Material e Métodos Foram utilizados 4 cães, oriundos do Centro de Controle de Zoonozes da cidade de Fortaleza, Ceará. Todos foram submetidas a um jejum hídrico e alimentar de 12 horas e foram eutanasiados. Após confirmação da morte foram submetidos à orquiectomia bilateral para retirada dos testículos e epidídimos. Estes foram envolvidos em gaze umedecida com solução fisiológica estéril 0,9% e colocados em Becker, todos estéreis, e transportados imediatamente até o laboratório. A técnica de colheita dos espermatozóides da cauda do epidídimo baseou-se nos relatos de GARDE et al.(1994) com modificações e realizada da seguinte maneira: o complexo testículo-epidídimo foi separado em duas partes: testículo e cauda do epidídimo, sendo feita uma lavagem externa da cauda do epidídimo com soro fisiológico pré-aquecido (37°C), para remoção do sangue. O tecido conjuntivo que recobre a cauda do epidídimo foi removido por dissecação cuidadosa evitando-se o rompimento dos vasos sanguíneos e do ducto epididimário, em seguida, foi realizada a lavagem do mesmo. Para a lavagem utilizou-se de 1mL do diluidor Tris destinado ao testículo direito e 1mL do diluidor ACP-106C para o testículo esquerdo. Posteriormente, foram realizadas as avaliações seminais de motilidade (%), vigor (0-5), espermatozoide normal (%) e funcionalidade de membrana (%). Resultados e Discussão Os dados foram expressos na forma de média e desvio padrão. Os resultados obtidos com os diluidores Tris e ACP-106C, respectivamente, foram: motilidade (57,5 ± 3,5% x 62,5 ± 6,5%), vigor (3,1± 0,4 x 3,3 ± 0,5), espermatozoides normais (69,8 ± 2,1% x 71 ± 9,5%) e funcionalidade de membrana (50,8 ± 3,5% x 52,0 ± 6,4%). Vale ressaltar que os resultados encontrados fazem parte de um estudo preliminar que abrangerá um maior número de animais. No entanto, os resultados preliminares apontam para o sucesso na recuperação epididimária de espermatozoides caninos, tanto com o diluidor Tris, como com o ACP-106C. Referências bibliográficas Garde J, Aguado M, Perez S, Garrido P, Perez-Guzman M, Montoro V. Physiological characteristics of epididymal spermatozoa from postmortem rams. Theriogenology, v.41, p.2003, 1994. Yu I, Leibo SP. Recovery of motile, membrane-intact spermatozoa from canine epididymides stored for 8 days at 4ºC. Theriogenology, v.57, p.1179-1190, 2002. Palavras-chave: cão, epidídimo, espermatozóide. Keywords: dog, epididymis, sperm.



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Efeito da renovação do meio diluidor sobre a longevidade do sêmen canino resfriado Effect of extender exchange on longevity of chilled dog semen

A.P. Marques Jr, R.M. Mascarenhas1, L.L. Lanna, P.V.D.O. Silva

Departamento de Clínica e Cirurgia, Escola de Veterinária, UFMG, Belo Horizonte, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução Buscando alternativas para aumentar a longevidade do sêmen canino resfriado, Verstegen et al. (2005) observaram que a renovação do meio diluidor parece restabelecer a motilidade de uma parcela de espermatozóides imóveis. O presente trabalho busca esclarecer o efeito da renovação do meio no incremento na motilidade e integridade de espermatozóides caninos resfriados. Material e Métodos Sêmen de 6 cães foi coletado, diluído em meio Tris-Cítrico (com 20% de gema de ovo), e armazenado em geladeira a 5°C por 12 dias. Cada ejaculado foi dividido em duas amostras correspondentes aos tratamentos T1 e T2. No T1 o meio diluidor foi renovado após 12 dias, enquanto no T2 o meio foi renovado a cada 6 dias. Durante este período, a cada dois dias foram avaliados: 1) motilidade espermática, através de análise computadorizada em (Ivos-Ultimate da Hamilton Torne Biosciences®) 2) integridade da membrana plasmática e do acrossoma, pela técnica de coloração fluorescente com diacetato de carboxifluoresceína e iodeto de propídio e 3) integridade da membrana plasmática da cauda dos espermatozóides, pelo teste hiposmótico. Resultados e Discussão A renovação do meio diluidor, em ambos os tratamentos, foi seguida de imediata melhora em todos os parâmetros seminais avaliados. Entretanto, este efeito parece ser transitório no que diz respeito à integridade das membranas. O efeito benéfico da renovação do meio diluidor foi mais acentuado na primeira renovação, no Dia 6, quando comparado à segunda renovação, no Dia 12. Tabela 1 - Valores médios de motilidade (M), integridade de membrana plasmática e acrossoma (I), e integridade da membrana plasmática da cauda (HO), no sêmen canino resfriado, do dia 0 ao dia 12, expressos em porcentagem (%). Dia 0 Dia 2 Dia 4 Dia 6 Dia 8 Dia 10 Dia 12 M I HO M I HO M I HO M I HO M I HO M I HO M I HO T1 90 83 61 65 64 55 61 51 53 23A 37A 49A 41A 25 55 29A 12A 51A 9A 18 52 T1PC - - - - - - - - - - - - - - - - - - 34B - 58 T2 90 83 61 65 64 55 61 51 53 23A 37A 49A - - - - - - - - - T2PC1 - - - - - - - - - 78B 59B 59B 75B 23 52 49B 37B 62B 26 17 54 T2PC2 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 43 - 54 T1 – Tratamento 1; T1PC – Tratamento 1 imediatamente após a centrifugação; T2 – Tratamento 2; T2PC1 – Tratamento 2 imediatamente após a primeira centrifugação; T2PC2 – Tratamento 2 imediatamente após a segunda centrifugação. Números com letras diferentes na mesma coluna diferem estatisticamente (P<0,05). Referências bibliográficas Verstegen JP, Onclin K, Iguer-Ouada M. Long-term motility and fertility conservation of chilled canine semen using egg yolk added tris-glucose extender: an in vivo studies. Theriogenology, v.64, p.720-733, 2005. Palavras-chave: cão, resfriamento, sêmen. Keywords: chilling, dog, semen.



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Efeito da radiação vermelha de baixa intensidade sobre a cinética do espermatozóide canino criopreservado

Effect of low intensity red radiation on the kinetic of cryopreserved dog sperm

M.F. Brito1, T.T.C. Carvalho1, M.I.V. Melo1,4, G.R. Valle1, L.F.L. Ferreira1, J.V.M. Mambrini2, M. Henry3, B.C. Cruz3

1PUC Minas, Betim, MG; 2Consultor Estatístico; 3EV-UFMG, Belo Horizonte, MG.

4E-mail: [email protected] Introdução O objetivo geral deste trabalho foi analisar o efeito da radiação de baixa intensidade sobre alguns parâmetros cinéticos do espermatozóide canino criopreservado. Material e Métodos Ejaculados de 11 cães adultos foram centrifugados a 800G/ 15 minutos, e rediluídos em meio Tris-Gema de ovo com 6% de glicerol, e posteriormente foram fracionados em quatro tratamentos: T1: incidências de radiação vermelha (660 NM) (Fisioled - Mmoptics - 100mW) por 60 segundos, antes do resfriamento e após a descongelação; T2: incidência somente antes do resfriamento; T3: incidência somente após a descongelação; e T4: sem incidência. Após a descongelação as amostras foram submetidas ao Teste de Termorresistência (TTR) utilizando análise computadorizada (Sperm analyzer ®). O efeito dos tratamentos sobre a Motilidade Total (MT), Motilidade Progressiva (MP) e Motilidade Não Progressiva (NP) foi verificado pelo teste não-paramétrico de Kruskal-Wallis, e as médias comparadas pelo teste de Mann-Whitney, em cada tempo de TTR: 0, 30, 60 e 90 minutos. Resultados e Discussões No TTR0 não houve diferença entre as variáveis MT (38,1 + 25,1 a 58,6 + 33,2%), NP (de 29,8 + 16,6% a 45,8 + 21,8%), e MP (de 8,3 +10,5% a 14,5 + 11,9%). No TTR60 e TTR90 também não houve diferença entre os baixos valores de MT, NP e MP. Somente no TTR30 os efeitos da incidência da radiação vermelha foram evidentes e significativos, T1 resultou em baixa MT (11,3 + 10,8%) e T2 determinou o melhor resultado de motilidade total 40,3 + 26,1%, sendo este semelhante ao T3 e T4. Foi sugerido que a incidência da radiação de baixa intensidade possivelmente promove melhora imediata das características físicas do espermatozóide, por ação na cadeia respiratória das mitocôndrias aumentando a produção de energia (Corral-Baqués et al., 2005), mas deve interferir negativamente com a longevidade espermática. Conclusões A dupla incidência de radiação vermelha de baixa intensidade antes do resfriamento e após a descongelação teve efeito deletério sobre a motilidade do espermatozóide canino, expressa principalmente aos 30 minutos após descongelação. Referências bibliográficas Corral-Baqués MI, Rigau T, Rivera M, Rodriguéz JE, Rigau J. Effect of 655-nm diode laser on dog sperm motility. Lasers Med Sci, v.20, p.28-34, 2005.

Palavras chave: cão, CASA, radiação vermelha, sêmen, TTR. Keywords: CASA, dog, red radiation, sperm, TTR.



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Utilização de diluidor para promover aumento de volume do sêmen em um cão com ausência de líquido prostático (relato de caso)

Semen extender use to promote semen volume increasein a dog with no prostatic fluid (case report)

S.E. Crusco1, C.K. Minazaki

Universidade Paulista (UNIP), SP. E-mail: [email protected]

Introdução O ejaculado dos cães é composto de três frações distintas. A primeira fração, proveniente de líquido prostático, a segunda fração, denominada de fração rica, proveniente dos epidídimos e testículos e a terceira fração, proveniente da próstata. A segunda fração é também denominada de fração rica e é composta em sua maioria por espermatozóides e a terceira fração é a que dará volume ao sêmen, sendo praticamente o volume de todo plasma seminal. Sabe-se que para a fertilização e inseminação o volume tem determinada importância assim como a concentração de espermatozóides. Material e Métodos Foi levado para avaliação andrológica um animal da espécie canina, macho, da raça West Highland Terrier, com idade de 4 anos e histórico de infertilidade, ou seja, taxa de prenhez zero (n=4). Ao exame clínico nenhuma alteração foi detectada. O sêmen foi colhido com estimulação digital sem a presença de uma fêmea no cio e foi realizado espermograma completo conforme metodologia pré-estabelecida. Ao observar alteração de volume seminal o mesmo foi encaminhado para exame ultrasonográfico dos órgãos do sistema reprodutivo. O diluidor utilizado foi à base de Tris frutose ácido cítrico e 20% de gema. As inseminações realizadas após o diagnóstico e recomendação de tratamento auxiliar foram realizadas conforme procedimento conhecido.

Resultados e Discussão Ao realizar o espermiograma do animal observou-se que o mesmo não tinha em seu ejaculado a presença da terceira fração, ou seja, líquido prostático. A aparência do sêmen era cremosa e o baixo volume colhido (0,5 ml) era extremamente rico em espermatozóides (concentração de 725 x 10 6 de espermatozóides por ml), com motilidade de 80% e vigor 4. A quantidade de alterações nos espermatozóides era de 5%, sendo 2% de defeitos menores e 3% de defeitos totais. A condição espermática encontrada era passível de fertilizar fêmeas, porém a ausência de líquido prostático tornava este fato inviável. O animal foi encaminhado para avaliação ultrasonográfica e verificou-se a quase ausência de tecido prostático. Em vista da somatória dos dois diagnósticos que foram, quantidade de espermatozóides vivos e viáveis suficientes para fertlizar uma fêmea e ausência de líquido prostático foi recomendado a diluição do sêmen com diluidor tris frutose ácido cítrico com 20% de gema na proporção 1:4 do volume inicial colhido. Após a introdução deste procedimento o animal foi utilizado em regime de inseminação artificial e teve a fertilidade restabelecida, alcançando níveis aceitáveis para a espécie. De 5 fêmeas cobertas após o diagnóstico e diluição do sêmen, todas ficaram prenhes com o nascimento de filhotes vivos e normais. Referências bibliográficas Peña FJ, Nuñez-Martinez I, Morán JM. Semen technologies in dog breeding: an update. Reprod Domest Anim, v.41, suppl.2, p.21-29, 2006. Memon MA. Common causes of male dog infertility. Theriogenology, v.6, p.322-328, 2007. Palavras-chave: cão, diluidor, próstata, sêmen. Keywords: dog, extender, prostate, semen.



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Differentiation of sperm and non-sperm sarticles during flow cytometer analysis of canine spermatozoa

Diferenciação entre espermatozoides e partículas não espermáticas durante analise por meio de citometria de fluxo

I.C.N. Cunha1,2,3, H. Henning2, C. Urhausen2, D. Waberski2, A.R. Günzel-Apel2

1North of Rio de Janeiro State University, Brazil, Campos dos Goytacazes, RJ; 2Unit for Reproductive Medicine of Clinics, University of Veterinary Medicine Hannover, Hannover, Germany.

3E-mail: [email protected] Introduction The quality of liquid preserved or frozen/thawed canine semen samples is often evaluated by flow cytometry. Besides spermatozoa, samples may contain egg yolk particles, bacteria, or other contaminants. To avoid systematic misestimation in flow cytometric analyses it is necessary to differentiate non-sperm particles from sperm cells. The aim was to compare two recently proposed methods for dealing with non-sperm particles in the flow cytometric assessment of sperm membrane integrity in samples with and without egg yolk (Petrunkina et al. 2010). Materials and methods Two sperm rich fractions of each of three dogs were diluted to 50x106/ml spermatozoa and stored at 5 °C either in TRIS extender (without egg yolk) for 24 h or in TRIS-egg yolk extender for 96 h. After storage sperm were stained with FITC-PNA, FITC-PSA, propidium iodide (PI), and Hoechst 33342 for 10 min at 38 °C. Samples were analyzed on a flow cytometer equipped with a laser (488 nm) and an UV-lamp. In a first approach (method 1), the amount of sperm with intact plasma- and acrosomal membrane (PI neg./FITC-PNA neg./FITC-PSA neg.) was determined from the fraction of Hoechst-positive (i.e DNA-containing) particles with forward and side scatter characteristics accounting for sperm cells. In a second approach (method 2), the rate of sperm with intact plasma- and acrosomal membrane was determined from particles that had just light scatter characteristics of spermatozoa. This value was corrected for the amount of non-DNA-containing particles (PI neg.) derived from an additional measurement of a permeabilized aliquot (Petrunkina et al. 2010). Results and Discussion For samples diluted without egg yolk in TRIS extender the mean percentage of membrane intact sperm was 64.7 ± 8.2 % for method 1 and 63.3±7.9 % for method 2. In contrast, when egg yolk particles were present in the samples the situation changed. Egg yolk vesicles had light scatter characteristics similar to those of spermatozoa and showed highly variable intensity in staining with FITC-PNA and -PSA as determined by fluorescence microscopy. This prevented to distinguish discrete populations of FITC-neg. and FITC-pos. events in the flow cytometric histogram. Altogether, it was not feasible to use method 2. However, evaluation of samples containing egg yolk using method 1 worked without any limitation. On average, 78.7±1.3% of all measured events was neither Hoechst-pos. nor had scatter characteristics comparable to spermatozoa and therefore was identified as non-sperm particles. In conclusion, the presence of egg yolk in extended canine semen requires the simultaneous use of scatter characteristics and a DNA-binding fluorescent probe for reliable identification of non-sperm particles in the flow cytometric assessment of membrane intact spermatozoa. References Petrunkina AM, Waberski D, Bollwein H, Sieme H. Identifying non-sperm particles during flow cytometric physiological assessment: a simple approach. Theriogenology, v.73, n.7, p.995-1000, 2010. Palavras-chave: partículas não espermáticas, citômetro de fluxo, sêmen, cão. Keywords: non-sperm particles, flow cytometer, sperm, dog.



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Efeito de diferentes protocolos de resfriamento, curvas de congelamento e concentrações de glicerol na qualidade do sêmen canino descongelado

Effect of different cooling protocol, freezing rates and glycerol concentration on frozen-thawed dog semen quality

R.M. Mascarenhas1, T.A.R. Paula, D.Q. França

Escola de Veterinária, UFV, Viçosa, MG

1E-mail: [email protected] Introdução Diversas variáveis associadas ao protocolo de congelamento influenciam a qualidade do sêmen canino descongelado. Embora o comportamento individual de cada variável seja, na maior parte dos casos, bem estabelecida, sabe-se que elas não agem de forma isolada e é a complexa interação entre elas que determina a sobrevivência de célula espermática (Holt, 2000). O presente trabalho teve como objetivo a avaliação in vitro do efeito do tempo de equilíbrio, da taxa de congelamento e de diferentes concentrações de glicerol, sobre o sêmen canino após o seu congelamento e descongelamento em meio diluidor a base de Tris-Citrato. Material e Métodos Trinta e seis ejaculados, de 12 cães, forma coletados, e cada ejaculado foi divididos em quatro amostras, que foram centrifugadas e ressuspendidas em meios a base de Tris-Citrato (20% de gema de ovo) contendo 1, 2, 4, e 6% de glicerol. O sêmen diluído em cada meio foi submetido diferentes protocolos de resfriamento, no primeiro protocolo o sêmen foi resfriado em caixa de isopor com gelo por 1 hora até 40C e em seguida congelado, já no segundo protocolo após o resfriamento o sêmen foi mantido na caixa por 1 hora adiciona, em equilíbrio a 4oC. Após o resfriamento, as amostras de cada protocolo foram submetidas ao congelamento em caixa de isopor contendo nitrogênio líquido, em duas taxas: uma lenta (38°C/min entre 4 e 34°C e 5°C/min entre 34 e 70°C) através do posicionamento das palhetas a 10 cm da lâmina de nitrogênio, e uma rápida ( 71°C/mim entre 4 e 65°C e 7°C entre 65 e 107°C), com as palhetas distantes 5 cm do nitrogênio. Ao descongelamento o sêmen foi avaliado quanto a motilidade espermática, integridade e viabilidade da membrana plasmática da cauda do espermatozóide (Testes Hiposmótico) e viabilidade espermática (coloração supravital com Eosina-Nigrosina).

Resultados e Discussão Foram avaliados 16 Tratamentos (4 meios x 2 resfriamentos x 2 taxas de congelamento) e todos os tratamentos em que estava presente o tempo de equilíbrio apresentaram melhores resultados quando comparados aqueles que não envolviam tempo de equilíbrio. De uma maneira geral, os meios contendo maiores concentrações de glicerol apresentaram, independente da taxa de congelamento, melhores resultados ao descongelamento (Tab. 1). Tabela 1 - Valores médios de motilidade espermática, espermatozóides reativos ao teste hiposmótico (HO) e espermatozóides corados pela Eosina-Nigrosina (EM), expressos em porcentagem (%), nos tratamentos em que estava presente o tempo de equilíbrio.

Motilidade HO EN M1 M2 M3 M4 M1 M2 M3 M4 M1 M2 M3 M4

TCR 11,6Aa 18,6Aa 31,6Ba 21,5ABa 10,7Aa 13,3ABa 19,8ABa 20,6Ba 80,3Aa 75,1ABa 68,3Ca 70,3BCa

TCL 17,4Aa 25,2ABa 28,8Ba 34,2Bb 14,5Aa 21,6Ab 23,6Aa 19,5Aa 67,9Ab 61,7ABb 60,1Bb 59,7Bb

M1, M2, M3 e M4: meios contendo 1, 2, 4 e 6% de glicerol respectivamente. TCR e TCL: taxa de resfriamento rápida e lenta. Números com letras diferentes, maiúsculas na mesma linha ou minúsculas na mesma coluna, diferem estatisticamente (P<0,05).

Referências bibliográficas Holt WV. Basic aspects of frozen storage of semen. Anim Reprod Sci, v.62, p.3-22, 2000. Palavras-chave: cão, congelamento, sêmen. Keywords: dog, freezing, semen.



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Eficiência da associação entre a PGF2α e o feromônio sexual usados previamente à eletroejaculação em cães

Efficiency of the association between PGF2α the sex pheromone used before the electroejaculation in dogs

I.P. Santos 1,2, C.L.G. Ramos 1, 2, L.G. Ramos 3, R.F. Oliveira 1,4, I.C.N. Cunha 1,5.

1Laboratório de Reprodução e Melhoramento Genético Animal/UENF, Campos dos Goytacazes, RJ; 2Doutorando do curso de Ciência Animal/UENF com bolsa FAPERJ; 3Mestrando do curso Ciências Veterinárias /UFES; 4Graduando em Medicina

Veterinária com bolsa IC FAPERJ/UENF. 5E-mail: [email protected]

Introdução A Prostaglandina F2α (PGF2α) melhorou a ejaculação em cães que também receberam estímulos sensoriais de uma cadela em cio¹. Alternativamente às cadelas em cio, foi utilizado um feromônio sexual sintético². Em suínos, a PGF2α contida no diluidor melhorou a motilidade e a viabilidade espermática durante o resfriamento do sêmen³. O objetivo deste trabalho foi avaliar se estímulos farmacológicos e sensoriais sexuais que agissem sobre a ejaculação, poderiam aumentar a eficiência desta técnica. Material e Métodos Foram utilizados 20 cães, sem raça definida, com peso entre 5,3-22,2kg, divididos em 2 grupos iguais que receberam dois tratamentos de estímulo pré-eletroejaculatório: 1) submetidos a presença de fêmea castrada por 10 minutos; 2) submetidos a presença de fêmea castrada com genitália externa impregnada por feromônio sintético metil 4-hidroxibenzoato por 10 minutos e após, receberam uma aplicação IM de Dinoprost Trometamina, 0,1mg/kg. Após o estimulo todos os cães foram contidos quimicamente com Quetamina, 8mg/kg, IM; e Xilazina, 1mg/kg, IM, e submetidos ao protocolo de eletroejaculação descrito por Newell-Fugate, 20094. Foi realizada avaliação das variáveis seminais: volume, motilidade, vigor, concentração e morfologia5. A análise estatística foi realizada no ambiente R versão 2.11.1 (2010), utilizando o Wilcoxon rank sum test. Os resultados são apresentados com média ± erro padrão.

Resultados e Discussão A motilidade diferiu significativamente (p < 0,05) entre os grupos 1 e 2 (10,1 ± 4,5 e 43,0 ± 8,3, respectivamente) já tendo sido o mesmo efeito relatado para espermatozóides de suínos³ . Não houve diferença entre as outras variáveis analisadas (p > 0,05). Um dos efeitos esperados pela ação da Dinoprost Trometamina, que seria o aumento do número de espermatozóides¹, não foi observado neste trabalho. De acordo com os resultados apresentados, concluímos que análogos à PGF2α associados ao estímulo sensorial sexual podem melhorar a qualidade do sêmen em cães submetidos à eletroejaculação.

Referências bibliográficas 1- Kustritz MVR, Hess M. Effect of administration of prostaglandin F2alpha or presence of an estrous teaser bitch on characteristics of the canine ejaculate. Theriogenology, v. 67, p.255–258, 2007. 2- Goodwin M. Sex pheromone in the dog. Science, v.203, p.559-561, 1979. 3- Yeste M, Briz M, Pinart E, Sancho S, Garcia-Gil N, Badia E, Bassols J, Pruneda A, Bussalleu E, Casas I, Bonet S. Boar spermatozoa and prostaglandin F2α Quality of boar sperm after the addition of prostaglandin F2α to the short-term extender over cooling time. Anim Reprod Sci 108 (2008) 180–195. 4- Newell-Fugate AE. 2009. The effects of two formulations of deslorelin on the reproduction of male African wild dogs (Lycaon pictus). Pretoria. South Africa. Master's Dissertation. Available from: http://upetd.up.ac.za/thesis/available/etd-02192009-154836/. Accessed in: November 25th. 2010. 5- Manual de Exame Andrológico do CBRA. 1998. Palavras-chave: coleta, ejaculação, sêmen. Keywords: collection, electroejaculation, sêmen.



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Effect of physiological and environmental conditions on the pregnancy rate in goats Efeito das condições fisiológicas e ambientais na taxa de gestação em cabras

M. Alcoléa1, M. Christilis, J.C.O. Dias, G.D. Oliveira, C.O. Silveira,

P.P. Maitan, J.D. Guimarães

Universidade Federal de Viçosa (UFV), Viçosa, MG 1E-mail: [email protected]

Introduction The reproductive capacity of animals is directly related to the location where the animal is housed (Costa e Silva et al., 2010). The animal's ability to withstand the rigors of heat stress has been assessed physiologically by means of rectal temperature and respiratory rate (MULLER et al., 1994). The objective was to evaluate the possible relationship of influence of environmental temperature, body weight, body condition score (BCS), rectal temperature, preganancy rate in goats with induced ovulation outside the breeding season. Material and Methods In September 2010, anoestrus reproductive phase, 38 adult goats, healthy, lactating were underwent induction of estrus, weighing and grading of BSC on a scale of one to five (1 - very thin and 5 - very fat) being used only animals with BCS between 2 and 4. This period was measured at room temperature and relative humidity. For induction of estrus was used intravaginal implant impregnated with Medroxyprogesterone acetate (MPA), 75 µg of D - Cloprostenol and 200 IU of eCG. After removal of the intravaginal implant (RD) were made two estrus observations daily (07:00 am and 05:00 pm) for 96 hours. Artificial insemination (AI) with diluted fresh semen was performed 12 hours after estrus detection. The rectal temperature measurement was done in the days to place the device (PD) and RD, at detect estrus (DE) and at the AI. Preganancy's diagnosis was done 30 days after AI by ultrasonography transrectal. It was made simple Pearson correlation between variables, with 5% probability. Results and Discussion The environment temperature conditions (24.2 ± 4.2) and relative humidity (73.8 ± 14.9) did not affect the pregnancy rate (PR) (63.2%, n = 38; P > 0.05). The temperatures on the time of the PD, RD, DE, AI (39.1 ± 0.5, 39.3 ± 0.3, 38.9 ± 0.4, 39.1 ± 0.3, respectively) showed no correlation (P > 0.05) with PR. The animal's weight (54.3 ± 8.7) had a positive correlation of 75% with BSC (3.3 ± 0.6, P <0.05), and 45% for PR (P < 0,05). No correlation between BSC and PR (P > 0.05). It may conclude that heavier animals are more suitable for estrus induction programs and that the BSC has an indirect positive influence on the pregnancy rate for goats with induced ovulation. In conditions of this study the rectal temperature did not influence the pregnancy rate. References Costa e Silva EV, Kataiama KA, Macedo et al. Efeito do manejo e de variáveis bioclimáticas sobre a taxa de gestação em vacas receptoras de embriões. Ci. Anim. Bras., Goiânia, v. 11, n. 2, p. 280-291, abr./jun. 2010. Muller CJC, Botha JA, Smith W A. Effect of shade on various parameters of Friesian cows in a Mediterranean climate in South Africa: 3. behavior. South African Journal of Animal Science, Pretoria, v.24, p. 61-66, 1994. Palavras-chave: cabras, escore, estro, peso, temperatura. Keywords: estrus, goats, score, temperature, weight. Thanks the FAPEMIG for financial support.



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Inibição da enzima conversora de angiotensina melhora a produção de embriões em cabras Boer superovuladas com hormônio folículo-estimulante suíno

Angiotensin-converting enzyme inhibition improves the embryo production in Boer goats superovulated by porcine follicle-stimulating hormone

L.C.S. Feitosa1, V.P. Fernandes Neto1, Y.L. Boakari1, A.M. Reis2, G.E.N. Viana1, A.P.R. Costa1

1,3Laboratório de Ciências Fisiológicas, Universidade Federal do Piauí, Teresina, PI; 2 Instituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal de Belo Horizonte, MG.

E-mail: [email protected] Introdução Além de um sistema renina-angiotensina (SRA) clássico, tem sido demonstrada a existência de SRA’s locais em vários tecidos, incluindo os ovários (Costa et al., 2003). Há na literatura relatos de funções controversas entre os dois principais peptídeos do SRA: angiotensina II (Ang II) e angiotensina-(1-7) [Ang-(1-7)].Entretanto, apesar de ser atribuído um importante papel a Ang II nos processos de ovulação e maturação oocitária, é possível que este peptídeo tenha importante função na atresia folicular e produção de estrógeno. Este trabalho objetivou avaliar o efeito da inibição da enzima conversora de angiotensina sobre a produção de embriões em cabras Boer. Material e Métodos Quinze cabras Boer foram divididas em dois grupos: Enapril (n=8) e controle (n=7). As cabras receberam dispositivos com 0,33g de progesterona por 13 dias. Para superovulação receberam 300 UI de hormônio folículo estimulante suíno (seis doses, BID) e 100μg de D-cloprostenol. O grupo Enalapril recebeu adicionalmente solução de maleato de enalapril (2mg/mL) por 13 dias. As cabras foram inseminadas com sêmen de caprinos de fertilidade conhecida. Os embriões foram recuperados por via transcervical, classificados e transferidos para receptoras previamente sincronizadas e preparadas. A gestação foi confirmada por exame ultrassonográfico 25 dias após as inseminações. Resultados e Discussão Houve diferença estástistica significativa (P < 0,05) para número de embriões viáveis (8,12 ± 1,71 e 3,00 ± 0,92), produtos gerados (3,83 ± 0,74 e 1,00 ± 0,54) e percentual de utilização de embriões (70,5 ± 11,5 e 27,9 ± 14,9). Quanto à qualidade dos embriões, houve diferença significativa (P < 0,05) para embriões grau I (4,62 ± 1,25 e 0,71 ± 0,71). É provável que a inibição da ECA tenha reduzido a produção de Ang II, e, paralelamente aumentado a produção de Ang-(1-7). Assim, pode ter havido uma redução na taxa de atresia folicular e um aumento na produção de estrogênio pela redução da produção de Ang II e aumento de Ang-(1-7) respectivamente (Pepperell et al., 2006), levando a um maior número de folículos no grupo Enalpril. Concluímos que o uso de inibidores da ECA pode ser uma alternativa para melhorar a transferência de embriões por superovulação em caprinos. Referências bibliográficas Costa APR, Fagundes-Moura CR, Pereira VM, Silva LF, Vieira MA, Santos RA, Reis AM. Angiotensin-(1-7): a novel peptide in the ovary. Endocrinology, v.144, n.5, p.1942-1948, 2003. Pepperell JR, Nemeth G, Yamada Y, Naftolin F, Merino M. Localized accumulation of angiotensin II and production of angiotensin-(1-7) in rat luteal cells and effects on steroidogenesis. Am J Physiol Endocrinol Metab, v.291, p.E221-E233, 2006. Palavras-chave: cabra, embrião, ovário, sistema renina-angiotensina. Keywords: embryo, goat, ovary, renin-angiotensin system.



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Plasma progesterone concentrations in Toggenburg goats submitted to estrous synchronization reusing autoclaved intravaginal progesterone devices

Concentrações de progesterona plasmática em cabras da raça Toggenburg submetidas à sincronização de estro reutilizando dispositivos intravaginais de progesterona autoclavados

F.Z. Brandão1,5, J.M.G. Souza2*, C.A.A. Torres2, A.L.R.S. Maia1, R. Denadai3,

E. Oba3, J.F. Fonseca4

1Universidade Federal Fluminense, Niterói, RJ; 2Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG; 3UNESP, Botucatu, SP, 4Embrapa Caprinos e Ovinos, Sobral, CE.


Introduction Intravaginal devices containing progesterone (P4) are used worldwide for estrous induction in goats. As protocols for estrous induction shortened the time of exposure to P4, devices were able to be reused until three times to induce estrus (Zambrini et al., 2005). However, even with a good cleaning, there is no total warranty that all microorganisms are eliminated. Thus, sanitary risks are associated with device reuse. The aim of this study was to evaluate plasma P4 concentration in Toggenburg goats receiving autoclaved progesterone devices for estrous synchronization. Materials and Methods This study was conducted in the breeding season (March) at the City of Piau-MG, Brazil (latitude 21˚35’ S and longitude 43˚15’ W). Nulliparous (n = 12) and pluriparous (n = 15) goats were equally assigned according to weight and body condition score into 3 treatments: females received new intravaginal devices (n = 9) containing 0.33 g of P4 (CIDR-G®), autoclaved devices (121°C, 1 atm, 15 min) used previously during 6 days (n = 9) or 12 days (n = 9). Additionally, 5 mg dinoprost (Lutalyse®) on the day of device insertion and 200 IU eCG (Novormon 5000®) 24 h before its removal were done in both latero-vulvar. In all does, devices were removed after 6 d. Blood collection was performed to determine the plasma P4 concentration using a commercial kit (Coat-a-Count®) of solid phase radioimmunoassay on different moments: 7 days before device insertion (Day -7), at the insertion (Day 0), 6 and 12 h after and daily from the first to the ninth day. Statistical analysis was tested for statistical significance at the 95% confidence interval. Results and Discussion From the 27 goats, 23 (85.2%) had P4 ≥ 1 ng/mL on Day -7 and/or Day 0, indicating that most of all goats were cyclic. The other 4 goats had a P4 increase after device insertion. No differences were detected among all treatments during the 6 days devices were inserted (P>0.05). All goats had at the moment of device removal P4 ≥ 1 ng/mL. On the following day, P4 concentrations decreased to subluteal levels in 17 goats whereas 10 goats remained with elevated P4. All 17 goats showed estrus after device removal and the other 10 did not. There was no category effect (P>0.05) between nulliparous or lactating goats regarding the P4 concentrations. Progesterone analysis allows us to infer that the autoclaving process does not influence progesterone availability and so this technique can be a simple and valuable tool to reduce sanitary risks of disease transmission without alterating fertility in goats. References Zambrini FN, Fonseca JF, Bruschi JH, Viana JHM, Palhão MP, Santos AFA. Induction estrus in goats using reused intravaginal devices. Acta Sci Vet, 33, suppl. 1, 2005. Keywords: autoclaved CIDR, caprine, reproductive efficiency, steroid hormone. Palavras-chave: caprino, CIDR autoclavado, eficiência reprodutiva, hormônio esteróide. Financial Support: CNPq, Embrapa Dairy Cattle, Embrapa Goats and Sheep, Pfizer Animal Health.



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Comparison between Flunixin Meglumine and Medroxyprogesterone Acetate efficiency on the early regression inhibition of the corpus luteum in superovulated Boer goats

Comparação entre a eficiência do Flunixim Meglumine e do Acetato de Medroxiprogesterona sobre a inibição da regressão precoce do corpo lúteo em cabras Boer superovuladas

C.F. Guimaraes1, R.J.T.A. Pereira1, M. Meireles2, C.B. Fernandes3

1Centro de Ensino Superior dos Campos Gerais (CESCAGE), Ponta Grossa, PR;

2Universidade Federal de Pelotas (UFPEL, )Pelotas, RS; 3Universidade de São Paulo (USP), SP. 4E-mail: [email protected]

Introdution Early regression of the corpus luteum (CL) results in important loss pregnancy in goats.The corpus luteum is essential for progesterone production and maintenance of pregnancy. The CL is a transitional reproductive gland and its regression is associated to early production of PGF2alfa (Salles and Araujo, 2010). The hypothesis of this study was that the flunixin meglumine could act on enzymes that promote the release of arachidonic acid, thereby inhibiting the production of PGF2alfa. While the progestin medroxyprogesterone acetate (MPA) would act as a source of exogenous progesterone. Thus, the purpose of this study was to compare the efficiency of both substances on the recovery rates of viable embryos in Boer superovulated goats with FSHp.

Material and Methods A total of 36 embryo donors Boer goats were used, between 3 and 4 years old, superovulated with 300 IU FSHp, distributed in 8 applications, in decreasing doses, at intervals of 12 hours. Females were randomly divided into two groups: Group A: 18 females received 1.1 mg / kg flunixin meglumine IM, started two days after the last covering, a total of 4 applications, and Group B: 18 females received intravaginal sponge (MAP) on the second day after the last covering, removing them 16 hours before embryo collection. The ovulation rate was assessed by counting the number of LCs in each ovary at the embryo collection, which was performed by laparotomy on the 7th day after insemination.

Results and Discussion In both groups, a rate of 80% recovery of viable embryos was observed (grade II, according to IETS manual), a fact which shows an equal efficiency in both substances used. The information corroborate with Traldi et al. (1996), who used the flunixin meglumine in ET program with Alpine superovulated goats, finding positive results, above 40% , when compared to the control group on the inhibition of early CL regression. References Salles MGF, Araújo AA. Corpo lúteo cíclico e gestacional: revisão. Rev Bras Reprod Anim, v.34, p.185-194, 2010. Traldi JL, Visintin VA, Mizuta K, Dela Libera AMP, Silva EC, Rodrigues PHM. Eficácia de tratamento antiprostaglandínico na prevenção da regressão prematura de corpo lúteo em caprinos. Arq Fac Vet UFRGS, v.24, supl., p.220, 1996. Palavras-chaves: embrião, morte embrionária precoce, superovulação. Keywords: early embryonic death, embryo, superovulation.



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Características estrais de cabras submetidas à sincronização de oocitação utilizando hormônio folículo estimulante ou gonadotrofina coriônica equina

Characteristics of estrus synchronization in goats undergoing oocytation using follicle stimulating hormone or equine chorionic gonadotrophin

L.P. Barbosa1,3, M.C. Nascimento2,3, B.M. Cardoso Neto1, P.A. Dutra1, R.L. Oliveira2,

T.C. B.S.C. Bittencourt2, C.K. Kiya2, R.S. Souza1

1Universidade Federal do Recôncavo da Bahia, Cruz das Almas, BA; 2Universidade Federal da Bahia, Salvador, BA. 3E-mail: [email protected], [email protected]

Introdução A associação de gonadotrofina coriônica equina (eCG) com progestágenos, em protocolos de sincronização de oocitação, demonstra resultados eficazes, porém, devido à eCG apresentar uma molécula com alto peso molecular, o seu uso contínuo induz a formação de anticorpos (Oliveira et al., 2007). Neste contexto o FSH pode ser utilizado como uma alternativa ao uso de eCG na sincronização de oocitação. Material e Métodos Foram selecionadas 227 cabras sem raça definida, distribuídas em dois grupos (G), sendo G1 (n = 114) composto por cabras que receberam eCG e G2 (n = 113) composto por cabras que receberam FSH. Os animais receberam pessários intravaginais contendo 60mg de acetato de medroxiprogesterona. No décimo dia, retiraram-se os pessários e aplicou-se 0,5ml de d-cloprostenol e 200UI de eCG (G1) ou 20mg de FSH (G2), por via intramuscular. Após o início do estro, foi observado de 3 em 3h, por meio de vaginoscopia, as mudanças das características físicas do muco vaginal. Avaliou-se o percentual de cabras em estro, o intervalo entre a retirada do pessário intravaginal e o início do estro (IREE) e o intervalo entre o início do estro e as mudanças de características físicas do muco vaginal (IEOM). Foi utilizado o teste de Mann Whitnney (IREE, IIEOM, IROM) e o teste de Qui-quadrado (Estro), a 5% de probabilidade. Resultados e Discussão A eCG foi mais eficiente em estimular o estro nas cabras (88,6%) do que o FSH (69%) (P < 0,05). O intervalo entre a retirada das esponjas e a exibição do estro (IREE) apresentou uma duração de 26 ± 8,5 h, utilizando eCG, e de 28 ± 13,8h, utilizando FSH, com diferença significativa (P < 0,05). O intervalo entre o início do estro e a detecção da opacidade do muco vaginal (IIEOM) apresentou menor duração nas cabras com aplicação de FSH (12 h), em relação às cabras que receberam eCG (16h) (P < 0,05). Os resultados monstraram que o melhor momento para a fecundação das cabras SRD, é em média 16 h quando se utiliza eCG, corroborando com achados de Maffili et al. (2005) e 12 h quando aplica-se FSH. Apesar do menor percentual de estro o FSH deve ser pesquisado, com o intuito da sincronização de oocitação.

Referências bibliográficas Maffili, VV, Torres CAA, Fonseca JF. et al. Sincronização de estro em cabras da raça Saanen com esponjas intravaginais e CIDR-G. Arq Bras Med Vet Zootec, v.57, n.5, p.591-598, 2005a. Oliveira AF, Nascimento AV, Torres AAC. et al. Dinâmica folicular na sincronizacão de ovulação associado à administração de FSH-p em vacas da raca Nelore. Acta Sci Vet, v.35, Supl. 3, 2007. Palavras-chave: comportamento, estro, oocitação. Keywords: behavior, estrus, oocytation.



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Avaliação do uso da prostaglandina na sincronização do estro associado ou não ao uso do hCG em cabras

Evaluation of the use prostaglandin in synchronization the estrus associated or not the hCG in goats

L.V. Esteves1,4, F.Z. Brandão 1, R.C. Cruz2, P.H.N.Pinto2, J.F. Fonseca3

1Faculdade de Veterinária, Universidade Federal Fluminense, Niterói, RJ; 2Médico Veterinário Autônomo; 3Embrapa Caprinos e Ovinos, Sobral, CE.

4E-mail: [email protected] Introdução Atualmente avalia-se a viabilidade de diferentes protocolos de sincronização do estro com PGF2α, visando à redução de custos, ampliando sua utilização na reprodução animal (Frazão et al., 2006). O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da sincronização do estro sobre os parâmetros ovarianos e comportamentais de cabras da raça Toggenburg. Material e Métodos Para a sincronização do estro as fêmeas receberam duas doses de 0,03 mg de d-cloprostenol (Veteglan®, Laboratórios Calier, Barcelona, Espanha) intervaladas de 10 dias e foram eqüitativamente divididas em dois grupos, onde no T1 receberam 250UI hCG (Vetecor 5000®, Laboratórios Calier, Barcelona, Espanha) e T2 1 ml solução salina no momento da identificação do estro. A partir da aplicação da segunda dose de PGF2α, o comportamento sexual e os exames ultrassonográficos foram realizados a cada 12 horas. Todos os animais foram inseminados 16 horas após o início do estro. Resultados e Discursão O percentual de animais em estro após a primeira (D0) e segunda (D10) PGF2α não diferiu (75% -15/20; 75% 15/20 – P > 0,05). O intervalo da aplicação da primeira (D0) e da segunda (D10) PGF2α ao inicio do estro, a duração dos estros e o intervalo do início do estro à IA não diferiram (P > 0,05) entre T1 (50,0 ± 20,0; 48,0 ± 0,0; 24,0 ± 7,6 e 15,9 ± 0,2 h) e T2 (47,1 ± 6,2; 48,0 ± 12,0; 33,3 ± 14,4 h e 16,3 ± 0,3 h), respectivamente. O intervalo de aplicação da segunda dose de PGF2α à ovulação diferiu (P < 0,05) entre os tratamentos T1 (73,0 ± 0,5) e T2 (86,3 ± 10,6). O intervalo do inicio do estro à ovulação diferiu (P < 0,05) T1 (25,0 ± 0,5h) e T2 (40,1 ± 14,7h). O número médio de ovulações diferiu (P < 0,05) entre os tratamentos T1 (2,2 ± 0,4) e T2 (1,7 ± 0,5). A taxa de gestação foi semelhante (P > 0,05) entre T1 (33,3%; 2/6) e T2 (55,5%; 5/9). Conclui-se que a utilização de duas doses de prostaglandina intervaladas de 10 dias sincroniza eficientemente o estro em cabras Toggenburg. A administração da hCG no inicio do estro é capaz de antecipar a ovulação e promover um aumento no numero de ovulações. Estes resultados devem ser observados para estabelecimento momento ideal para a IA. Referências bibliográficas Frazão TN, Maldonado AR, Mazieiro F, Alves PAM. Avaliação da eficiência do uso de dose e meia dose de cloprostenol sódico para a sincronização de cio em vacas mestiças leiteiras. Vet News. v.13, n.82, p.5-7, 2006. Palavras-chave: d-cloprostenol, hCG, ovulação, sincronização do estro. Keywords: d-cloprostenol, hCG, ovulation, synchronization estrus. Suporte financeiro: Embrapa Caprinos 02080200500.04.




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Substituição de eCG por FSH em protocolos de sincronização de oocitação em cabras variando o momento da inseminação e o tipo do sêmen

Replacement of eCG by FSH in synchronization protocol of oocytation in goats varying the time of insemination and type of semen

M.C. Nascimento1,3, L.P. Barbosa2,3, B.M. Cardoso Neto2, P.A. Dutra2, R.L. Oliveira1, T.C.B.S.C.

Bittencourt1, C.K. Kiya1, R.S. Souza1

1Universidade Federal da Bahia, Salvador, BA; 2Universidade Federal do Recôncavo da Bahia, Cruz das Almas, BA. 3E-mail: [email protected], [email protected]

Introdução A utilização da eCG em protocolos de sincronização de oocitação em caprinos tem demonstrado ótimos resultados. Contudo, seu uso contínuo induz a formação de anti-corpos (Maffili et. al, 2006). Uma alternativa à utilização de eCG é a utilização do FSH, visando uma maior utilização desses protocolos. Objetivou-se avaliar a substituição da eCG pelo FSH em protocolos de sincronização de oocitação em cabras, variando o momento da inseminação e o tipo de sêmen. Material e Métodos Selecionou-se 207 cabras distribuídas em 8 grupos (G): G1- Inseminação artificial (IA) com sêmen fresco (SF) e observação de estro (OBE), utilizando eCG na sincronização da oocitação (SO) (n = 32); G2 - IA com SF e OBE, utilizando FSH na SO (n = 22); G3 - IA com sêmen criopreservado (SC) e OBE, utilizando eCG na SO (n = 26); G4 - IA com SC e OBE, utilizando FSH na SO (n = 20); G5 - Inseminação artificial em tempo fixo (IATF) com SF, utilizando eCG na SO (n = 27); G6 - IATF com SF, utilizando FSH na SO (n = 26); G7 – IATF com SC, utilizando eCG na SO (n=26); G8 – IATF com SC, utilizando FSH na SO (n = 28). Para a SO utilizou-se esponjas com progestágenos, por dez dias, e após a retirada, 5ml de d-cloprostenol mais 200UI de eCG ou 20mg de FSH. A IA com OBE foi realizada na mudança das características físicas do muco vaginal. A IATF foi realizada 40 horas após a retirada das esponjas. Avaliou-se a: porcentagem de animais em estro (E), de cabras inseminadas (CI) e taxa de gestação (TG). Utilizou-se o teste de Qui-quadrado a 5% de probabilidade.

Resultados e Discussão O percentual de estro para os grupos com eCG (G1-100%, G3-89,6%, G5-85,2%) foi maior do que para os grupos com FSH (G2-78,6%, G4-64,5%, G6-73,0%, G8-60,7%), excetuando o G7 (76,9%), com índice de estro equivalente aos grupos com FSH (P < 0,05). O número de cabras inseminadas com OBE utilizando o eCG foi superior (G1-100% e G3-89,6%) em relação aos grupos que receberam FSH (G2-78,6% e G4-64,5%) (P < 0,05). Houve diferença significativa (P < 0,05) na TG entre os grupos com eCG (G1-75%, G3-65,5%, G5-48% e G7-38,4%) e os tratamentos com FSH (G2, G4, G6 e G8 com 0%). Com base no percentual de exibição de estro, no número de cabras inseminadas e principalmente na taxa de gestação obtida, existe superioridade nos resultados quando se utiliza a eCG em relação ao FSH, na dose utilizada, independente do tipo de sêmen utilizado e do momento de realização das inseminações. Referências bibliográficas Maffili VV, Torres CAA, Bruschi JH. et al. Indução de estro em cabras da raça Toggemburg com dois diferentes dispositivos intravaginais. Arq Bras Med Vet Zootec, v.58, n.3, p.367-372, 2006. Palavras-chave: hormônio, inseminação, oocitação. Keywords: hormone, insemination, oocytation.



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Estrus synchronization of dairy goats subjected to artificial light and the male effect Sincronização de estro em cabras leiteiras submetidas à luz artificial e efeito macho

M. Christilis1, J.M.G. Souza, C. Carneiro, G.D. Oliveira, J.D. Guimarães, C.A.A. Torres

Laboratório de Reprodução Animal, Departamento de Zootecnia, UFV, Viçosa, MG.

1E-mail: [email protected] Introduction Animals exposed to a decreasing photoperiod after the provision of artificial light, showed the next estrus similar to the natural occurency, ie, about eight to 10 weeks after the largest day of the year (FAO, 1987). The response may be varied occurring between 15 and 100 days, depending on the female goats category being lower for young (15 to 45 days) and higher for lactating females (60 to 100 days; Cordeiro, 1991). The objective was to evaluate the differences in response to estrus synchronization, fertility rate among nulliparous and multiparous goats submitted to artificial photoperiod plus male effect (AP+ME), and also the fertility rate in response to different methods of mating (controlled natural mating and artificial insemination (AI) by transcervical route, with the female standing). Materials and methods Two female groups were formed (30 nulliparous and 35 multiparous) allocating the matings in T1: nulliparous (n=15) and pluriparous (n=18) for natural mating and T2: nulliparous (n=15) and pluriparous (n=17) by AI with fresh diluted semen. These goats were subjected to artificial light for 60 days between June 15 and August 15 in 2009, in the absence of the male, which was reintroduced in the groups after 60 days of the end of light exposure. After the 1st estrus manifestation induced by AP + ME the animals received 02 applications of 125 mg of cloprostenol on D0 and D10. On D10, in addition to cloprostenol was applied 200 IU of eCG. The estrus detection was performed twice daily until 96 hours after 2nd application. The mating was performed 24 hours after detection of estrus. Pregnancy diagnosis was performed by ultrasound uterus 30 days after mating. Results and Discussion The protocol for estrus synchronization did not differ (P>0.05) between nulliparous (73.33%, n = 30) and pluriparous goats (68.57%, n = 35) by X2 test. No difference in the fertility rate among nulliparous (72.73%, n=22) and pluriparous (73.86%, 24; P 0.05) was found by X² test. The AI with diluted fresh semen showed frequency of females with a positive pregnancy diagnosis (T2=78.26%, n=23) superior than controlled natural mating (T1=69.56%, n=23; P <0.05 ) by X² test. It should be noted that the evaluated categories did not influence the response of the female to estrus synchronization protocol and the fertility rate. The AI with diluted fresh semen may be used without any loss in the fertility rate, being sometimes higher, as in this study. References FAO. Reproduccion. In: Tecnologia de la produccion caprina. Santiago, Chile: FAO, 1987. p.132-157. Cordeiro PRC. Sincronização de estro em cabras leiteiras puras de origem com fotoperiodismo artificial. In: Congresso Mundial de Veterinária, 24, 1991, Rio de Janeiro. 7p. Palavras chave: cabras, fertilidade, fotoperíodo, nulíparas, pluríparas. Keywords: fertility, goat, nulliparous, photoperiod, pluriparous.



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Avaliação da formação de corpos lúteos acessórios e dosagem de progesterona em cabras da raça Saanen após o uso de hCG

Evaluation of formation of accessories corpora lutea and plasma progesterone concentration in Saanen goats treated with hCG

A.C.C.A. Pietroski1,3, L.D.P. Sinedino1, F.Z. Brandão1, O. Facó2, J.F. Fonseca2

1Universidade Federal Fluminense, Niterói, RJ, 2Embrapa Caprinos e Ovinos


Introdução Caprinos são animais que dependem da progesterona luteal durante toda a gestação (GORDON, 1997) e são frequentemente acometidos de falha luteal (SANGHA et al., 2002). Desta forma, a administração de hCG no 5° dia poderia promover a formação de corpo lúteo acessório (CLa) e/ou estimular o desenvolvimento do CL original do ciclo estral. Com base nisto, este estudo teve o objetivo de avaliar a formação de CLa e concentração plasmática de progesterona em decorrência da administração de hCG em cabras cinco dias após a última monta natural. Material e Métodos Para sincronização do estro foi realizado o protocolo de 6 dias com esponja intravaginal impregnada com 60 mg de Acetato de Medroxiprogesterona (Progespon®, Shering Plough Saúde Animal, São Paulo, Brasil) associado à administração de 37,5 µg de d-cloprostenol (Veteglan®, Lab. Hertape-Calier Saúde Animal S/A, MG, Brasil) e 200 UI de eCG (Gonadotrofina Coriônica Equina - Novormon 5000®, Syntex Ind. Bioquímica, Buenos Aires, Argentina) latero-vulvar 24h antes da retirada da esponja em 14 cabras. A partir do momento da retirada da esponja, os animais foram submetidos a acompanhamento do comportamento sexual a cada 12h, onde apenas os animais que manifestaram sinais de estro formaram os grupos experimentais (Gsalina - n=6; GhCG - n=5). O Gsalina recebeu 1 mL de solução salina e GhCG recebeu 250 UI de hCG (Gonadotrofina Coriônica Humana - Vetecor®, Hertape-Calier, São Paulo, Brasil) latero-vulvar cinco dias após a última MN. Foi realizado acompanhamento das concentrações plasmáticas de progesterona a cada 24h até que se completassem 30 dias e foi realizada a contagem de CL através de laparoscopia 20 dias após a colocação das esponjas.

Resultados e Discussão Não houve diferença entre os grupos quanto à concentração plasmática de progesterona (P>0,05), mas sim entre os dias dentro de cada grupo (P<0,05), onde o Gsalina apresentou um aumento significativo no 11° dia (10,43 ± 4,18 ng/mL) e o GhCG no 9° dia (10,56 ± 1,53 ng/mL). De acordo com a laparoscopia, foram visualizados 1,50 ± 0,58 CL no Gsalina e 1,40 ± 0,55 CL no GhCG, não havendo diferença (P>0,05). Quanto à fertilidade, 80,00% (Gsalina: 80,00% e GhCG: 80,00%) dos animais apresentaram resultado positivo de gestação. Desta forma, conclui-se que o tratamento com hCG 5 dias após a última MN induziu um efeito luteotrópico, e não a formação de CLa, antecipando o momento da ocorrência da elevação das concentração de progesterona plasmática. Referências bibliográficas Gordon I. Controlled reproduction in sheep and goats. New York CAB International, 1997.450 p. Sangha GK, Sharma R.K, Guraya SS. Biology of corpus luteum in small ruminants. Small Rumin Res, v. 43, p. 53-64, 2002. Palavras-chave: caprino, corpo lúteo, hCG, progesterona. Keywords: corpus luteum, goat, hCG, progesterone. Suporte financeiro: Embrapa Projeto 02.08.02.005.00.04.



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Níveis de RNAm para proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs), receptores de BMPs e seus mensageiros intracelulares em folículos ovarianos caprinos crescidos in vivo

Levels of mRNA for bone morphogenetic proteins (BMPs), BMP receptors and their intracellular messengers in goat ovarian follicles grown in vivo

M.J. Passos1, J.J.N. Costa, G.L. Vasconcelos, A.M.L.R. Portela, A.W.B. Silva,

R.O.D.S. Rossi, J.R.V. Silva

1Núcleo de Biotecnologia de Sobral (NUBIS), Universidade Federal do Ceará, Sobral, CE. 1E-mail: [email protected]

Introdução As proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs) são membros da superfamília de fatores de crescimento transformante-β (TGF-β) e possuem diferentes papéis na regulação da oogênese e foliculogênese. Estas proteínas ligam-se a receptores de BMPs (BMPR-IA, -IB e –II) e as proteínas SMADs 1, 5 e 8 atuam como mensageiros intracelulares para conduzir o sinal ao núcleo Gong e Mcgee (2009). Entretanto, ainda não há dados sobre a expressão das BMPs, seus receptores e seus mensageiros intracelulares em folículos ovarianos caprinos. O objetivo deste trabalho foi quantificar os níveis de RNAm para BMP-2, -4, -6, -7 e -15; seus receptores e SMADs-1, -5 e -8; em folículos caprinos de 0.2, 0.5 e 1 mm de diâmetro. Material e Métodos Ovários caprinos (n=10) foram coletados em abatedouros locais e folículos de 0.2, 0.5 e 1 mm foram isolados mecanicamente. Para cada categoria folicular, três grupos de 10 folículos foram coletados e armazenados a -80°C até extração do RNA total. O RNA total foi extraído com o reagente Trizol®. Em seguida, realizou-se a transcrição reversa e quantificação dos níveis de RNAm para BMP-2, -4, -6, -7, -15; BMPR-IA, -IB e –II, bem como para SMAD-1, -5 e -8, por PCR em tempo real. O teste Kruskal-Wallis foi utilizado para comparar os níveis de RNAm (P<0,05). Resultados e Discussão Os níveis de expressão do RNAm para BMP-2 foram maiores em folículos de 0.2 mm em comparação com folículos de 0.5 e 1 mm. Já BMP-4, BMP-6 e BMP-7 foram mais expressas em folículos de 1 mm. Os níveis de BMP-15 não diferiram entre as categorias foliculares analisadas. No tocante aos receptores, a expressão de BMPR-IB foi maior em folículos de 0.2 mm, enquanto que os níveis de BMPR-II foram maiores em folículos de 0.5 mm e BMPR-IA não apresentou diferenças significativas na sua expressão. O RNAm para SMAD-5 foi significativamente maior em 0.2 mm em relação a 0.5 e 1 mm. SMAD-8 foi mais expresso em folículos de 0.5 mm, enquanto que os níveis de RNAm para SMAD-1 não diferiu entre as categorias. Em conclusão, durante o crescimento folicular ocorre uma redução da expressão de BMP-2 e aumento das BMPs dos tipos 4, 6 e 7, enquanto que seus receptores e SMADs apresentam variações significativas durante o crescimento folicular.

Referências bibliográficas Gong X, McGee EA. Smad3 is required for normal follicular follicle-stimulating hormone responsiveness in the mouse. Biol Reprod, v.81, p.730-738, 2009. Palavras-chave: BMPs, caprinos, folículos, ovário, RNAm. Keywords: BMPs, follicles, goat, ovary, mRNA.




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Níveis de RNAm para as proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs) e seus receptores em folículos ovarianos caprinos cultivados in vitro

Levels of mRNA for bone morphogenetic proteins and their receptors in goat ovarian follicles cultured in vitro

G.L.Vasconcelos1, A.W.B. Silva, R.O.D.S. Rossi, R.P. Ribeiro, A.M.L.R. Portela, J.J.N. Costa, J.R.V. Silva

Núcleo de Biotecnologia de Sobral (NUBIS), Universidade Federal do Ceará, Sobral, CE.

¹E-mail: [email protected] Introdução As BMPs dos tipos -2, -4, -6, -7 e -15 regulam o crescimento dos folículos ovarianos em diferentes estágios de desenvolvimento. As BMPs se ligam com receptores do tipo IA, IB e tipo II (BMPR IA, IB e II) que utilizam os mensageiros intracelulares SMAD-1, SMAD-5 e SMAD-8 para enviar o sinal ao núcleo (Miyazono et al., 2010). No entanto, os níveis de RNAm para BMPs, seus receptores e SMADs em folículos cultivados in vitro ainda não foram relatados. Este trabalho tem como objetivo avaliar a expressão das BMPs (2, 4, 6, 7 e 15), seus receptores e SMADs-1, 5 e 8 em folículos caprinos antes e após 18 dias de cultivo. Material e Métodos Ovários caprinos (n=5) foram coletados e utilizados para o isolamento de folículos (n=60, ~0,2 mm). Três grupos de 10 folículos foram imediatamente armazenados a -70ºC (controle). Para o cultivo in vitro, 30 folículos foram cultivados por 18 dias em α-MEM suplementado com FSH recombinante (100 ng/mL: dias 0 - 6, 500 ng/mL: dias 6 - 12 e 1000 ng/mL: dias 12 -a 18 dias). Após o cultivo, os folículos foram armazenados a – 70ºC até a extração do RNA, que foi realizada usando o reagente Trizol. Após síntese do cDNA, a quantificação do RNAm para a BMP-2, -4, -6, -7, -15, seus receptores e SMAD -1, -5 e -8 foi realizada em folículos do dia 0 e após cultivo in vitro. Teste t pareado foi utilizado para comparar os níveis de RNAm nos folículos antes e após 18 dias de cultivo (P<0,05).

Resultados e Discussão Após o cultivo, os folículos atingiram um diâmetro de 0,59 ± 0,5 mm e apresentaram um aumento significativo no nível de RNAm para BMP-2, em relação ao controle. Em contraste, os níveis de RNAm para BMP-4 e BMP-7 diminuíram significativamente nos folículos cultivados, mas os níveis de RNAm para BMP-6 e BMP-15 não sofreram alteração. Além disso, após o cultivo, observou-se uma redução significativa de RNAm para BMPR-IA, BMPR-II, SMAD-8, enquanto que os níveis de RNAm para SMAD-1 e SMAD-5 permaneceram constantes. Desta forma, é provável que variações nos níveis de RNAm para fatores de crescimento, como por exemplo para os componentes do sistema BMP após o cultivo in vitro, podem estar associados a baixa eficiência nas taxas de maturação in vitro e PIV de embriões, especialmente na espécie caprina. Em conclusão, ocorre um aumento na expressão de RNAm para BMP-2 e redução de RNAm para BMP-4, BMP-7, BMPR-IA, BMPR-II e SMAD-8 em folículos crescidos in vitro.

Referências bibliográficas Miyazono K, Kamiya Y, Morikawa M. Bone morphogenetic protein receptors and signal transduction. J Biochem, v.147, p.35-51, 2010. Palavras-chave: BMPs, caprinos, folículos, ovário, RNAm. Keywords: BMPs, follicles, goat, housekeeping genes, mRNA, ovary.



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Determinação da estabilidade de genes de referência em folículos ovarianos caprinos Determination of stability of housekeeping genes in goat ovarian follicles

A.M.L.R. Portela1, R.P. Ribeiro1, M.J. Passos1, K.F. Santos1, G.B. Souza1, J.R.V. Silva1

1Núcleo de Biotecnologia de Sobral (NUBIS), Universidade Federal do Ceará, Sobral, CE.

E-mail: [email protected] Introdução Recentemente, o isolamento e cultivo de folículos secundários (~0,2 mm) tem sido realizado com o objetivo de produzir um grande número de oócitos aptos a maturação. Desta forma é de grande importância estudos de perfil de expressão gênica, bem como dos genes de referência ideais. Os genes de referência são expressos de forma constitutiva em diferentes tipos celulares e aparecem como normalizadores dos níveis de RNAm na técnica de PCR em tempo real, pois representam um controle interno (Ohl et al., 2005). O gene de referência ideal deve apresentar níveis de RNAm constante nos diferentes estágios do desenvolvimento folicular ovariano. Entretanto, não há dados sobre quais genes de referência são os mais estáveis em folículos ovarianos caprinos. O objetivo deste trabalho foi investigar a estabilidade de sete genes de referência em folículos ovarianos de 0,2, 0,5 e 1,0 µm de diâmetro, em caprinos. Material e Métodos Os folículos foram isolados mecanicamente de ovários caprinos (n=10). Em seguida grupos de 10 folículos de 0,2mm, 0,5mm e 1,0mm de diâmetro foram armazenados a -80°C até extração do RNA total. O RNA total foi extraído com o reagente Trizol®. Foi realizada a transcrição reversa para obtenção do cDNA e em seguida realizou-se a quantificação dos níveis de RNAm por PCR em tempo real utilizando SYBRGreen. O programa geNorm foi utilizado para avaliar a estabilidade dos genes gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (GAPDH), β-tubulina, β-actina, fosfoglicerato quinase (PGK), RNA ribossômico 18S (RNAr 18S), ubiquitina (UBQ ) e proteína ribossomal 19 (RPL-19). O programa geNorm calcula valor M, que é a variação média de pares de genes em comparação com todos os outros genes testados. Resultados e Discussão Os genes PGK e β-tubulina foram mais estáveis, sendo os mais adequados para serem utilizados como parâmetros para normalizar os dados de futuros estudos com estas categorias foliculares. O RNAr 18S foi o menos estável e os genes GAPDH, RPL-19, UBQ e β-actina apresentaram-se de forma intermediária. Os dados confirmam que a avaliação dos genes de referência mais adequados para diferentes tipos de tecidos e células de origem animal é inevitável. Em conclusão, PGK e β-tubulina são os genes housekeeping mais estáveis e o gene RNAr 18S foi o menos estável em folículos ovarianos caprinos.

Referências bibliográficas Ohl F, Jung M, Xu C. Gene expression studies in prostate cancer tissue: which reference gene should be selected for normalization? J Mol Med, v.83, p.1014-1024, 2005. Palavras-chave: caprinos, folículos, ovario, RNAm. Keywords: follicles, goat, housekeeping genes, mRNA, ovary.



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Acompanhamento ultrassonográfico de folículos ovarianos em cabras da raça Canindé submetidas a protocolos superestimulatórios para coleta oocitária por vídeo-

laparoscopia (COL) Ultrasound monitoring of follicles in Canindé goats subjected to superstimulatory protocols for oocyte recovery

by video-laparoscopy (LOPU)

P.M.P. Nascimento1,4, J.M.G. Souza2, A.P. Oliveira1,3, R.R. Moura2, V.J.F. Freitas2, R.C. Leite1

1Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Laboratório de Retroviroses, Escola de Veterinária UFMG, Belo Horizonte, MG; 2Departamento de Reprodução Animal, Laboratório de Fisiologia e Controle da Reprodução de Pequenos Ruminantes, UECE, Fortaleza, CE; 3Empresa de Pesquisa Agropecuária do Estado de Minas Gerais, Belo Horizonte, MG.

4E-mail: [email protected] Introdução A caprinocultura no país vem crescendo exponencialmente nos últimos anos e juntamente o desenvolvimento e aperfeiçoamento das bioténicas da reprodução, sendo a produção in vitro (PIV) de embriões uma delas. Logo, o estudo teve como objetivo fazer o acompanhamento ultrassonográfico do diâmetro dos folículos ovarianos durante a aplicação do protocolo de superestimulação e no momento da coleta oocitária por vídeo-laparoscopia (COL) para posterior PIV, uma vez que há uma discussão em torno do diâmetro ideal para a COL em pequeno ruminante. Material e Métodos O trabalho foi realizado no Laboratório de Fisiologia e Controle da Reprodução de Pequenos Ruminantes – UECE – Ceará. Foram utilizadas 10 cabras da raça Canindé, sendo estas pluríparas secas que encontravam-se com escore da condição corporal 2,5, numa escala de 1-5. O protocolo utilizado para a superestimulação ovariana consistiu na inserção de esponjas impregnadas com progesterona (Progespon® - Intervet Schering-Plough –Argentina) perfazendo um total de 10 dias consecutivos. No sétimo dia foi administrado 1mL de PGF2α (Lutalyse® – Pfizer Saúde Animal – USA) i.m. e no oitavo dia 3,5mL FSH (Folltropin® – Tecnopec – Brasil) i.m. juntamente com 1mL de eCG (Novormon® - Intervet Schering-Plough – Argentina) i.m. Juntamente com o protocolo hormonal (10 dias), foram realizados exames ultrassonográficos a cada 4 dias e antes do início da COL para o acompanhamento do perfil folicular. Após aferir o diâmetro dos folículos presentes nos ovários superestimulados e os mesmos serem compatíveis com a COL (≥ 30mm) os animais foram anestesiados e submetidos ao procedimento. Resultados A primeira avaliação revelou 3 animais com corpo lúteo e 7 animais folículos de tamanhos variados, não sendo superior a 3,0mm. O ovário esquerdo 2,5 ± 0,4 mm e ovário direito 2,5 ± 0,2 mm. Apenas 1 animal dos 10 estudados demonstrou corpo lúteo na segunda avaliação e folículos superiores a 3,0mm, sendo ovário esquerdo 3,7 ± 1,8mm e ovário direito 3,5 ± 1,6mm. No momento antes da COL foi realizada a última avaliação que nos revelou folículos ≥ 4,0mm (ovário esquerdo 4,0 ± 0,6mm e ovário direito 4,2 ± 0,3mm).

Discussão De acordo com os resultados encontrados, os animais encontravam-se em atividade reprodutiva, devido ao número e tamanho variado de folículos e corpos lúteos presentes ao primeiro exame ultrassonográfico. Os mesmos responderam ao tratamento de superestimulação, demonstrando crescimento folicular compatível com o tratamento. Pode-se afirmar que folículos que apresentam, no momento da COL, diâmetro ≥ 4,0mm são os ideais para a punçã o folicular, pois são de mais fácil visualização e coleta oocitária. Palavras-chave: COL, aspiração folicular, pequeno ruminante. Keywords: LOPU, follicular aspiration, small ruminant. Este trabalho faz parte do INCT-IGSPB.



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Expressão de IGF-IR e IGF-2 em embriões de cabras alimentadas com bagaço de caju ou raspa da mandioca

Expression of IGF-IR and IGF-2 in embryos from goats fed with cashew apple bagasse dehydrated or cassava scrapings

I.J. Arruda1, S.S. Duarte1, D. Rondina1 , M.A. Gomes Filho2, L.M. Silva1, F.V. Rodrigues1

, C.H.A. Oliveira1, A.M. Silva1

, A.B. Leal1 , M.P. D´Alencar1

1Laboratório de Nutrição e Produção de Ruminantes, FAVET, UECE, Fortaleza, CE; 2Laboratório Fisiologia Animal

Molecular Aplicada, UFRPE, Recife, PE. E-mail: [email protected]

Introdução O objetivo deste experimento foi verificar os efeitos da utilização de subprodutos da agroindústria como bagaço de caju ou raspa de mandioca sobre a expressão dos genes IGF-IR e IGF-2 em embriões caprinos. Material e Métodos Foram utilizadas 28 cabras mestiças, dividias em 3 grupos, alimentadas com volumoso e concentrado (Controle), concentrado com bagaço de caju ou raspa de mandioca, submetidas a superovulação e colheita de embriões. O RNA total foi isolado com tri-reagent, utilizando embriões de grau I e II em pools de10 embriões. A PCR feita em 20 µl contendo 1-2µl de DNAc, e demais componentes para a reação. O programa de PCR foi inicial de 91°C por 4 min seguido de ciclos específicos dos primers. A quantificação da expressão gênica feita pelo software ImageJ (National Institute of Health). Os níveis de transcritos foram comparados mediante o teste de Mann-Whitney.

Resultados e Discussão Nos resultados obtidos podemos observar que a dieta utilizada não influenciou a expressão de IGF-IR e IGF-2 nos grupos experimentais, como o sucesso de um embrião no estágio de pré-implantação depende do meio endócrino em que ele se desenvolve (Bonilla et al., 2011) observa-se que as dietas utilizadas não promoveram mudanças endócrinas maternas drásticas a ponto de afetar a expressão dos fatores de crescimento estudados.

Figura 1. Níveis de expressão de IGF-IR e IGF-2 em embriões caprinos Referências bibliográficas Bonillaa AQS, Oliveiraa LJ, Ozawaa M, Newsomb EM, Lucyb MC. Hansena PJ. Developmental changes in thermoprotective actions of insulin-like growth factor-1 on the preimplantation bovine embryo. Mol Cell Endocrinol, v.332. p.170-179, 2011. Palavras-chave: caju, caprino, embrião, IGF-IR, IGF-2, mandioca. Keywords: cashew, cassava, embryo, goat, IGF-IR, IGF-2.

0,0 0,4 0,8 1,2 1,6 2,0

IGF-IR IGF-2 GLUT-1

Unidade arbitrária de RNAm Controle Caju Mnadioca




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Utilização da ultrasonografia para avaliação do estado nutricional em cabras com estro sincronizado

Use of ultrasonography to evaluate the nutritional state in goats with estrus synchronized

D. Rondina, K.L.S .Góes1, L.M. Silva, F.V. Rodrigues, C.H.A. Oliveira, L.C.F. Cavalcante, J.C. Lemos, E.P. Azevedo, A.A. Araújo

Laboratório de Nutrição e Produção de Ruminantes, FAVET, UECE, Fortaleza, CE.

1E-mail: [email protected] Introdução Na espécie caprina, a região esternal representa uma das áreas anatômicas mais relacionadas ao estado nutricional (Hervieu et. al., 1991), e este ultimo por sua vez é conditio sine qua non no sucesso de técnicas como a sincronização do estro. Objetivo do presente trabalho foi avaliar a relação entre deposição de gordura interna esternal mediante ultrasonografia, estado nutricional e resposta ao tratamento de sincronização do estro em cabras. Material e Métodos Em 32 cabras adultas Anglo-nubianas foi medida a espessura da deposição de gordura interna esternal (GIE), com um aparelho de ultrassom acoplado a um transdutor linear de 5,0 MHz e a condição corporal (CC) foi estimada de acordo com Morand-Fehr & Hervieu (1999). Nos animais o estro foi sincronizado com duas aplicações intramusculares de 0,75 μg/animal de d-clorprostenol, intervalada por 11 dias. A ocorrência de estro foi observada, através de rufiões. Os dados foram correlacionados pelo teste de Pearson do programa software SAS. Resultados e Discussão No presente trabalho a GIE resultou altamente correlacionada com a nota de condição corporal (CC) (r=0,90; P=0,0001). A espessura media (±DP) da GIE foi de 7,08±0,49, 8,98±0,55 e 11,11 ±0,73 mm para uma CC de 1,5, 2,0 e 2,5. Também em relação ao numero de animais em estro (Figura 1) a relação com a GIE mostrou-se positiva e altamente significativa (r=0,45; P=0,0089). Diante disso é possível considerar a utilização da espessura da GIE medida mediante ultrasonografia como uma possível alternativa na avaliação em campo do estado nutricional em cabras.

r = 0,45 (P = 0,0089)

3/8

11/14 8/10

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

6 - 7,99 8 - 9,99 10 - 11,99Espessura gordura esternal interna (mm)

Cab

ras e

m e

stro

(%)

Figura 1. relação entre GIE (mm) e freqüência de estro em cabra com diferentes CC.

Referências bibliográficas Hervieu J, Morand-Fehr P, Schmidely Ph, Fedele V, Delfa R. Mesures anatomiques permettant d’expliquer les variations des notes sternales, lombaires et caudales utilisées pour estimar l’état corporel des chèvres laitières. Options Méditerranéennes, Série Séminaires, n.13, p.43-56, 1991 Morand-Fehr P, Hervieu J. Apprécier l’éat corporel des chèvres: Intérêt et méthod. Reussir La Chevre, n.231, p.22-34, 1999 Palavras-chave: cabra, estro sincronizado, região esternal, ultrasonografia. Keywords: estrus synchronization, goat, sternal region, ultrasonograph.



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Efeito de sucessivos tratamentos superovulatórios com pFSH na resposta ovulatória e sobrevivência embrionária pós inovulação em cabras Boer

Effect of successive superovulatory treatments with pFSH upon the ovulatory response and embryo survival after inovulation in Boer goats

C.H.N. Medeiros 1, A.L.N. Medeiros1, A.W.U. Monteiro1, A.N.L.Costa2,

M.G.F. Salles3, A.A. Araújo3,4

1GP caprinos, Quixadá, CE, Brasil; 2Universidade Federal do Cariri, Juazeiro do Norte, CE; 3Universidade Estadual do

Ceará, Fortaleza, CE. 4E-mail: [email protected]

Introdução A técnica de transferência de embriões (TE) é um instrumento poderoso para a multiplicação de animais de alto valor zootécnico e econômico, usando o material genético da fêmea. Uma série de fatores pode interferir e alterar os resultados da TE. Dentre os fatores, a droga utilizada para a superovulação pode diminuir a eficiência da TE após várias repetições (Scudamore et al., 1991; Pinheiro, 1993). No que se refere ao uso do pFSH em tratamentos superovulatórios sucessivos em cabras, os dados são raros na literatura e praticamente inexistentes em cabras criadas no Brasil. Portanto, o objetivo deste trabalho foi verificar o desempenho reprodutivo de cabras Boer submetidas a vários tratamentos superovulatórios com pFSH, bem como a fertilidade das receptoras após inovulação dos embriões produzidos. Material e Métodos O experimento foi realizado na GP - Genética e Produção de Caprinos e Ovinos LTDA (Quixadá-CE). Foram realizados 05 tratamentos superovulatórios sucessivos em cinco cabras doadoras da raça Boer com uso de esponjas vaginais impregnadas com medroxi-progesterona - MAP (Promone-e® -Tuco, USA) mais aplicação intramuscular de 250 UI de pFSH (Pluset® - Serono,Uruguai), dividida em seis doses decrescentes intervaladas em 12 h. As inseminações foram realizadas por via transcervical, 12 e 24 horas após detecção de estro, utilizando o sêmen diluído em solução a base de água de coco numa concentração de 200 x 106 espermatozóides por palheta de 0,25 ml. O sêmen foi obtido de um reprodutor Boer de fertilidade comprovada. A colheita dos embriões foi realizada pelo método transcervical. As receptoras tiveram o estro sincronizado pelo uso do mesmo progestágeno das doadoras e receberam 400 UI de eCG (Novormon® -Sintex, Argentina) e 75 µg de Cloprostenol (Ciosin® - Coopers, Brasil). A inovulação foi realizada por semi-laparoscopia. Os dados foram avaliados pelo procedimento GLM do SAS (SAS, 2000) e submetidos à transformação logarítimica, em seguida, as comparações entre as repetições (efeito da repetição do tratamento de superovulação) foram avaliadas pelo teste de Tukey a 5% de significância.

Resultados e Discussão O número médio das ovulações obtido pela contagem dos corpos lúteos visualizados variou de 9,8 a 0,8, apresentando uma diferença significativa a partir do terceiro tratamento, mostrando que a repetição do tratamento de superovulação afeta a resposta ovariana, uma vez que o número médio de ovulações diminui significativamente a partir da terceira repetição. Consequentemente, o numero de estruturas colhidas também foi afetado variando de 7,4 a 0,4 entre o primeiro e a quinta repetição respectivamente, com diferença significativa a partir do quarto tratamento (Tab. 1). As taxas de sobrevivência embrionária ao parto reduziram de 48,4% a 0%, entre a primeira e quinta colheita respectivamente (Tab. 1). Estas taxas dependeram da qualidade dos embriões inovulados, confirmando, assim, que a repetição do tratamento de superovulação diminui o numero de embriões viáveis, mas não afeta sua qualidade para inovulação. Conclui-se que cabras da raça Boer doadoras de embriões apresentam boa resposta superovulatória até o 3° tratamento consecutivo com pFSH e a diminuição da resposta superovulatória é proporcional à produção de embriões. Tabela 1. Rendimento da transferência de embriões em cabra Boer após 05 tratamentos sucessivos com pFSH.

Ordem de colheita 1 2 3 4 5 Ovulações médias 9,8 7,8 3,8 1,4 0,8 Embriões recuperados 7,4 5,6 2,4 0,8 0,4 Taxa de parição 48 32 33 33 0

Referências bibliográficas Pinheiro AA. de. Métodos de colheita e de inovulação de embriões caprinos (Capra hircus, Linnaeus, 1758) e os efeitos de repetidas colheitas na vida reprodutiva de doadoras. 1993. 100f. Tese (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, SP, 1993. Scudamore CL, Robinson JJ, Aitken RP, Kennedy DJ Ireland S, Robertson IS. Laparoscopy for intrauterine insemination and embryo recovery in superovulated ewes at a commercial embryo transfer unit. Theriogenology, v. 35, p. 329-337, 1991.

Palavras-chave: caprinos, embrião, pFSH, superovulação. Keywords: embryo, goats; pFSH, superovulation.



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Uso de diferentes gonadotrofinas na indução de estro em cabras Toggenburg Use of different gonadotrophins to induce estrus in Toggenburg goats

R.C. Cruz1,4, A.B. Mancio1, L.V. Esteves2, J.F. Fonseca3

1Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG; 2Universidade Federal Fluminense, Niteroi, RJ; 3Embrapa Caprinos e Ovinos, Sobral, CE;


Introdução O uso da gonadotrofina coriônica equina (eCG) em programas de indução do estro em cabras estimula a formação de anticorpos anti-eCG. Estes anticorpos podem inibir a atividade estimulatória da eCG, levando a um atraso ou ausência do estro e da ovulação e comprometendo a fertilidade do rebanho (Baril et al., 1996). Com base nisto, o desenvolvimento de protocolos alternativos à eCG é necessário para que a eficiência da indução do estro permaneça elevada. Material e Métodos Um total de 27 cabras foram equitativamente divididas em três tratamentos (T1, T2 e T3). Todas as cabras receberam esponjas intravaginais contendo 60 mg de acetato de medroxiprogesterona por 6 dias e 30 μg de d-cloprostenol latero-vulvar e as respectivas gonadotrofinas pela via intramuscular 24 horas antes da retirada da esponja. Em T1 (n = 9), T2 (n = 9) e T3 (n = 9) foram administradas 20 UI de FSH, 200 UI de eCG e 250 UI de hCG, respectivamente. Após a remoção da esponja, o início e a duração do estro foram monitorados com auxílio de reprodutores duas vezes ao dia (8:00 - 17:00 horas), durante 4 dias. As fêmeas foram acasaladas no momento da detecção do estro e a cada 12 horas até o seu fim.

Resultados e Discussão Como a porcentagem de animais em estro não diferiu (P > 0,05) entre os tratamentos (FSH: 88,9%; eCG: 100%; hCG: 88,9%), o total de 92,6% demonstra a eficiência dos três protocolos utilizados neste estudo. O intervalo da retirada da esponja ao aparecimento do estro (FSH: 51,0 ± 11,3; eCG: 39,1 ± 12,9; hCG: 56,0 ± 31,4 h) e a duração do estro (FSH: 32,0 ± 21,8; eCG: 26,7 ± 12,0; hCG: 28,0 ± 17,1 h) também não diferiram (P > 0,05) entre os tratamentos, sendo as médias encontradas de 48 e 28 horas, respectivamente. Os animais que receberam eCG manifestaram estro até 60 horas da retirada da esponja, enquanto a manifestação do estro dos animais dos demais tratamentos foi dispersa. As taxas de gestação não diferiram (P > 0,05) entre o FSH (50%), eCG (88,89) e hCG (75%), sendo o total de 72%, considerado elevado, semelhante ao reportado por Fonseca et al. (2005). Isto sugere que o atraso no aparecimento do estro (acima de 30 h) pode ser causa importante de subfertilidade somente em programas com IATF, como foi reportado por Baril et al. (1996), não influenciando negativamente os programas de acasalamento natural. A hCG e FSH podem ser consideradas para a substituição da eCG em programas de indução de estro sincronizado em cabras. Referências bibliográficas Baril G, Remy B, Leboeuf B, Beckers JF, Saumande J. Synchromzation of estrus in goats: the relationship between eCG binding in plasma, time of occurrence of estrus and fertility following artificial insemination. Theriogenology, v.45, p.1553-1559, 1996. Fonseca JF, Bruschi JH Zambrini FN, Demczuk E, Viana JHM, Palhão MP. Induction of synchronized estrus in dairy goats with different gonadotrophins. Anim Reprod, v. 2, n.1, p.50-53, 2005. Palavras-chave: cabras, gonadotrofinas, indução de estro. Keywords: estrous induction, goats, Gonadotrophins. Suporte financeiro: CNPq Projeto 559151 / 2010 – 1.



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Mudanças na biota vaginal de cabras submetidas a protocolo de indução de estro sincronizado

Changes on the vaginal biota of goats following protocol of estrus induction and synchronization

J.S.K. Oliveira1,3, J.F. Fonseca², L.V. Esteves¹, G. Martins¹, B. Penna¹, W. Lilenbaum¹, L.M. Figueira1, F.Z. Brandão¹

¹Universidade Federal Fluminense, Niterói, RJ; ²Embrapa, Núcleo Caprinos e Ovinos, Coronel Pacheco,MG.

3E-mail: [email protected] Introdução Esponjas intravaginais vêm sendo o tratamento de escolha para sincronização de estro em pequenos ruminantes (Wildeus, 2000). Entretanto, estes dispositivos são um fator predisponente para infecções vaginais, levando os animais a um quadro de vaginite (Padula e Macmillan, 2006). O objetivo deste estudo foi avaliar as mudanças na biota vaginal de cabras submetidas a protocolo curto de indução de estro sincronizado. Material e Métodos Trinta e duas cabras tiveram estro induzido com uso de esponjas intravaginais impregnadas com 40mg de medroxiprogesterona, que permaneceram por um período de seis dias. No dia que antecedeu a retirada da esponja, foram aplicados por via intramuscular 200 UI de eCG e 0,4mg de d-Cloprostenol. O muco vaginal foi coletado da vagina do animal com o uso de swabs estéreis e as amostras destinadas à cultura. As amostras foram coletadas antes da inserção do implante (T1), na retirada do implante (T2) e 24h (T3), 48h (T4) e uma semana após a retirada (T5). Resultados e Discussão Os resultados encontram-se apresentados nas tabelas abaixo. Tabela 1Contagem de UFC ao longo dos períodos avaliados de Tabela 2 Principais bactérias isoladas ao longo dos períodos avaliados cabras submetidas a protocolo curto de indução hormonal de cabras submetidas a protocolo curto de indução hormonal

UFC >2.0x104

UFC ≤2.0x104

UFC ≥105 T1 T2 T3 T4 T5

T1 39,39% (13/33)

54,54% (18/33)

6,06% (2/33)

Staphylococcus sp.

63,63% (21/33)

17,24% (5/29)

53,12% (17/32)

56,00% (14/25)

76,00% (19/24)

T2 27,58% (8/29)

10,34% (3/29)

62,06% (18/29)

Klebsiella pneumoniae

12,12% (4/33)

27,58% (8/29)

12,50% (4/32)

24,00% (6/25)

12,50% (3/24)

T3 50,00% (16/32)

9,37% (3/32)

40,62% (13/32)

Echerichia coli

12,12% (4/33)

44,82% (13/29)

34,37% (11/32)

16,00% (4/25)

8,3% (2/24)

T4 40,00% (10/25)

24,00% (6/25)

36,00% (9/25)

Proteus vulgaris

12,12% (4/33)

3,44% (1/29)

0,00% (0/32)

0,00% (0/25)

0,00% (0/24)

T5 29,16% (7/24)

37,50% (9/24)

33,33% (8/24)

Pseudomonas aeruginosa

0,00% (0/33)

6,89% (2/29)

0,00% (0/32)

0,00% (0/25)

0,00% (0/24)

No T1 a contagem de UFC foi a mais baixa, com predomínio do gênero Staphylococcus. Isso ocorre possivelmente em razão desse gênero fazer parte da microbiota normal. A partir de T2, a contagem de UFC aumentou exponencialmente. Esse achado claramente indica que a presença do implante favorece o aparecimento de vaginites bacterianas. A partir de T4 pode-se observar o restabelecimento da microbiota normal, novamente com predomínio do gênero Staphylococcus. Referências bibliográficas Wildeus, S. Current concepts in synchronization of estrus: sheep and goats. J Anim Sci, v.77, p.1-14, 2000. Padula AM, Macmillan KL. Effect of treatment with two intravaginal inserts on the uterine and vaginal microflora of early postpartum beef cows. Aust Vet J, v.84, p.204-208, 2006. Palavra-chave: biota, estro, sincronização, vaginite. Keywords: biota, estrus, synchronization, vaginits. Financiamento: FAPERJ.




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Efeito da suplementação mineral sobre o desempenho reprodutivo de fêmeas caprinas Effect of mineral supplementation on reproductive performance of the female goats

A.A. Simplício1,6, E.C.D. Muniz2, M.S. Maia3, F.C.E. Fonseca4, C.H.P. Portela5

¹CNPq/FAPERN/EMPARN-UFRN, Natal, RN; 2,4UFRN, Natal, RN; ³Embrapa/EMPARN,

Parnamirim, RN; 5Zootecnista. 6E-mail: [email protected]

Introdução Deficiências de um ou mais elementos minerais podem resultar em desordens nutricionais, levando o animal a desempenhos, reprodutivo e produtivo, aquém de seu potencial biológico (MIRANDA et al., 2006). Evidencie-se que o desfrute dos caprinos de corte é fortemente influenciado pela fertilidade ao parto, a prolificidade e a sobrevivência, particularmente das crias. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da suplementação mineral sobre a fertilidade e a prolificidade de cabras da raça Canindé. Material e Métodos Foram usadas 79 matrizes e três reprodutores da raça Canindé. As fêmeas foram submetidas à avaliação da condição corporal e, com base nesta, grupadas três a três e sorteadas para três tratamentos: T0 – cloreto de sódio (n = 25), TI – mistura mineral completa (MMC) não pronta para uso (n = 27) e TII – MMC pronta para uso (n = 27). Independente de tratamento, durante o dia, as fêmeas permaneciam numa mesma área de pastagem nativa e a noite tinham livre acesso a mistura mineral de acordo com o tratamento. A suplementação foi disponibilizada a partir de 63 dias antes do início da estação de monta (EM) até o desmame. A EM durou 49 dias, sendo a monta natural. O diagnóstico de gestação, por ultrassonografia, foi feito, em média, aos 35 dias e aos 60 dias após as coberturas. No último terço da gestação cada matriz recebeu 250 g de milho em grão, diariamente. O teste exato de Fisher foi aplicado, ao nível de significância de 5,0%, para verificar o efeito dos tratamentos sobre a fertilidade e a prolificidade. Resultados e Discussão Ao diagnóstico de gestação 92,4% das fêmeas estavam prenhes, sendo 100,0%; 95,6% e 85,2% do T0; TI e TII. Independente de tratamento, a fertilidade ao parto foi de 84,8% sendo 92,0%; 85,2% e 77,8% para T0, TI e TII, respectivamente. Pelo teste exato de Fisher, não houve diferença (P > 0,05) entre os tratamentos. A prolificidade foi de 1,51 sendo 1,57 no T0; 1,48 no TI e 1,48 no TII não havendo diferença estatística (P > 0,05) entre os tratamentos. Na fase de produção a precipitação pluviométrica ficou acima da média histórica para a região, o que, possivelmente, favoreceu a maior produção de biomassa na pastagem nativa e retardou a perda da sua qualidade forrageira. Esses aspectos, em parte, podem explicar a menor exigência ou a não necessidade de suplementação mineral ao longo das épocas, chuvosa e seca e, desta forma, independente de tratamento, ter favorecido o desempenho dos animais. Conclui-se que, independente da mistura mineral, esta não favoreceu a fertilidade ao parto e nem a prolificidade. Referências bibliográficas Miranda EM, Queiroz AC, Lana RP, Mello R, Gesualdi Júnior A. et al. Composição corporal e exigências nutricionais de macrominerais de bovinos Caracu selecionados e Nelore selecionados ou não para peso ao sobreano. Rev Bras Zootec, v.35, n.3, p.1201-1211, 2006. Palavras-chave: caprinos, fertilidade, matrizes, minerais, prolificidade. Keywords: goats, females, fertility, mineral supplementation, prolificacy.



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Prevalência de anticorpos para Brucella abortus em cabras leiteiras da raça Saanen no Nordeste Paraense

Prevalence of antibody to Brucella abortus in Saanen dairy goats in Northeastern Pará

C.A. Costa¹, W.F. Lima, A. Chaves Neto, C.T. Machado, A.L. Oliveira, A.R. Casseb, S.T. Rolim Filho

Universidade Federal Rural da Amazônia (UFRA), Belém, PA.

¹E-mail: [email protected] Introdução A brucelose caprina é causada predominantemente por Brucella mellitensis, mas existe a possibilidade de infecção pela Brucella abortus, principalmente em locais em que ocorre a criação consorciada de bovinos e de caprinos (Eloy et al., 1998). Considerando a importância da brucelose na cadeia produtiva da caprinocultura, conciliada à escassez de dados sobre a doença, em caprinos, no Estado do Pará, objetivou-se determinar a prevalência de casos positivos no Nordeste Paraense. Material e Métodos O presente estudo foi realizado no município de Igarapé-Açu, na Região Nordeste do Estado do Pará. Foram coletadas amostras de sangue de 50 caprinos da raça Saanen, com idade variando de um a três anos. As amostras foram coletadas em tubos de vácuo, sem anticoagulante para posterior extração do soro sanguíneo e em seguida foram encaminhadas ao Laboratório de Imunologia e Microbiologia Veterinária da Universidade Federal Rural da Amazônia (UFRA). As amostras de sangue foram centrifugadas à 3000 rpm para a separação do soro, do qual foi recolhida uma amostra de 0,03 ml para 0,03 ml de antígeno, para a realização do teste de Antígeno Acidificado Tamponado de acordo com metodologia preconizada por Brasil (2010). Resultados e Discussão Dos 50 animais avaliados nenhuma amostra apresentou reação positiva para brucelose, demonstrando que o rebanho apresenta um bom controle sanitário. Entretanto, devido ao aumento da atividade na região existe a necessidade da realização de quarentenas e exames em animais que venham a ser introduzidos, oriundos de outras regiões. Estes resultados corroboram com dados de Simão et al. (2004) no Rio de Janeiro, que ao analisarem 953 amostras de soros caprinos encontraram positividade de 0,2%. Entretanto, Carneiro et al. (2005) relataram frequência de 9,0% (36/400) de animais soro-reagentes no Estado da Bahia. Para Brasil (2010), a brucelose por Brucella mellitensis não ocorre no Brasil. Contudo, estudos voltados à sorologia e isolamento do agente devem ser realizados, uma vez que há a possibilidade de reações cruzadas no teste de Antígeno Acidificado Tamponado. Referências bibliográficas Carneiro J, Zacharias F, Pacheco ST, Mendonça Lima FW. Investigação da soropositividade para brucelose em rebanhos caprinos produtores de leite para consumo humano. Rev Bras Saúde Prod Anim, v.6, n.2, p.53-58, 2005. Eloy AMX, Araújo AM, Alves FSF, Moura Sobrinho PA. Testes sorológicos para brucelose caprina no estado do Ceará. Sobral. CE: Embrapa Caprinos, 1998. (Comunicado técnico). Simão SAF, Ristow P, Cardoso VS, Souza GN, Lilenbaum W. Ocorrência de brucelose caprina em propriedades de exploração leiteira do estado do Rio de Janeiro. Rev Bras Med Vet, v.26, n.1, p.21-25, 2004. Brasil. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Instrução Normativa nº. 12, de 5 fev. 2004. Brasília: MAPA, 2004. Palavras-chave: brucelose, cabras, Pará. Keywords: brucellosis, goats, Pará.



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Peso e idade de cabritas Canindé à puberdade filhas de matrizes suplementadas a partir da pré-estação de monta com diferentes misturas minerais

Weight and age at puberty of female kids Canindé daughters matrix supplemented from pre-breeding season with different mineral mixtures

E.C.D. Muniz1,5, A.A. Simplício2,5, F.C.E. Fonseca3, C.H.P. Portela4

¹Zootecnista, mestrando em produção animal na UFRN; ²Médico Veterinário, PhD;

³Engenheiro Agronômo, doutor; 4Zootecnista. 5E-mail: [email protected]; [email protected]

Introdução O alcance da puberdade marca o início da atividade reprodutiva cíclica e sob o ponto de vista fisiológico, pode ser definido, como o momento em que a fêmea manifesta seu primeiro estro clínico (Delgadillo et al., 2007). Ao atingirem essa fase as fêmeas estão aptas à reprodução, mas, em geral, ainda apresentam desenvolvimento corporal incompatível para assumir e exercer a função reprodutiva em plenitude (Simplício, 2006). O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da suplementação mineral sobre a idade e o peso à puberdade de cabritas da raça Canindé. Material e Métodos Foram usadas 53 cabritas filhas de matrizes suplementadas com minerais a partir de 63 dias anteriores ao início da estação de monta: T0 – ClNa; TI – mistura mineral completa (MMC) não pronta para uso e TII – MMC pronta para uso. Do nascimento a puberdade as crias tiveram acesso livre as misturas minerais das mães. As pesagens foram feitas ao nascimento e daí em diante a cada 28 dias. Para identificar as fêmeas em estro foram usados rufiões deferentectomizados, untados na região das axilas e do esterno com a mistura de tinta xadrez em pó e graxa lubrificante, que permaneciam juntos as cabritas das 16:00 horas às 07:00 horas do dia seguinte. Uma vez em estro a cabrita era pesada. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Turkey a 5,0% de probabilidade. Resultados e Discussão Das 53 fêmeas, apenas três (5,7%) não apresentaram estro até os 10 meses de idade, sendo todas do TI. As fêmeas do TII atingiram a puberdade com peso médio de 16,6 kg, essas foram 16,9% (P < 0,05) e 6,63% (P > 0,05) mais pesadas do que as do T0 (13,8 kg) e TI (15,5 kg), respectivamente. Entretanto, a idade à puberdade não diferiu (P > 0,05) entre os tratamentos. Em média as fêmeas atingiram a puberdade aos 223,8 dias de idade. O peso é um fator positivo e pode influenciar a idade ao primeiro parto, em função de servir de parâmetro para orientar quando a fêmea deve ser coberta ou inseminada pela primeira vez. Conclui-se que o tratamento influenciou o peso vivo, mas, não a idade a puberdade. Referências bibliográficas Delgadillo JA, Santiago MA, Carrillo E. Season of birth modifies puberty in female and male goats raised under subtropical conditions. Anim J, v.1, n.6, p.858-864, 2007. Simplício AA. Manejo reprodutivo de caprinos e ovinos de corte em regiões tropicais. In: Criação Familiar de Caprinos e Ovinos no Rio Grande do Norte. Natal: EMPARN, 2006. p.319-390. Palavras-chave: caprino, fêmea, idade, peso, puberdade. Keywords: age, female, goat, puberty, weight.



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Taxas de prenhez e abortos de cabras das raças Anglonubiana e Saanen do Nordeste do Pará

Pregnancy rates and abortions in goats and Saanen breeds Anglonubiana northeastern Pará

W.F. Lima1, C.A. Costa, A.C. Oliveira Neta, C.T. Machado, L.T.A. Fonseca, S.T. Rolim Filho

Universidade Federal Rural da Amazônia (UFRA), Belém-PA. 1E-mail:[email protected]

Introdução As raças Anglo nunbiana e Saanen são de origem européia, a cabra Anglonubiana tem um excelente comportamento no ambiente tropical. Por ser uma cabra rústica bem adaptada ao clima quente(Radal, 2002), a raça Saanen tendo origem européia(Suíça) também se adaptou ao clima torpical, a nível regional as duas raças tiveram grande aceitação entre os produtores, com destaque para a produção leiteira da raça Saanen. Este trabalho tem por objetivo, avaliar a eficiência e o desempenho reprodutivo dos caprinos no Nordeste do Pará, tendo em vista que há uma enorme deficiência do presente estudo na região. Material e Métodos Este trabalho foi desenvolvido na região nordeste paraense no município de Igarapé-Açú. Foram utilizados animais das raças Saanen (11) e Anglonubiana (9) com idade entre 1 e 3 anos. Foram realizados testes de brucelose em todos os animais, sendo todos negativos para esta doença. O acasalamento foi realizado com um reprodutor da raça Anglonubiana durante 3 meses e realizado o diagnóstico de gestação através da ultrassonografia após 60 dias da retirada do reprodutor. Resultados e Discussão Das 20 cabras avaliadas quatro (4) não foram diagnósticas gestantes (20%) e 16 encontravam-se gestantes (80%). Das 16 cabras gestantes 3 abortaram (18,7%). A taxa de gestação apresentada no presente estudo foi de 80% o que está dentro do relatado na literatura nacional, o que pode ter ocorrido devido ao uso de reprodutores testados, como foi confirmado num trabalho realizado por Soares et al (2007) no Nordeste brasileiro em que a taxa de gestação de 83% de cabras submetidas a monta natural. A taxa de abortamento foi bastante elevada de 18,7% o que representa sérias perdas econômicas para a atividade da caprinocultura de leite da região. Porém, esta taxa deve-se provavelmente aos problemas nutricionais do rebanho bem como ao alto índice de infestação parasitaria detectado após realização de exames parasitológicos (OPG). O Toxoplasma gondii pode ser considerado como um dos principais parasitas causadores de abortos. Os caprinos são os animais domésticos mais seriamente acometidos e sua infecção, durante a prenhez, pode ocasionar morte embrionária precoce, morte fetal a reabsorção do feto, mumificação, natimortos, abortos, morte perinatal ou o nascimento de animais debilitados, acarretando grandes perdas econômicas aos caprinocultores (Dubey, 1990). Com uma taxa de gestação relativamente alta, e a taxa de aborto levemente alta também, demonstra que é preciso um melhor manejo das cabras gestantes e até mesmo de cabras não-prenhas como vermifugação, higiene e alimentação corretas. Referências bibliográficas Padovani CR, Modolo JR. et al. Soroprevalência de Toxoplasma gondii em rebanho de caprinos no Estado de São Paulo. 2000. Radel T. Leite de Anglonubiana, o mais saudável. (2002) Soares AT. et al. Recomendações técnicas para produção da caprinos e ovinos. 2007. Palavras chaves: Anglonubiana, desempenho reprodutivo, Saanen. Keywords: Anglonubiana, reproductive performance, Saanen.



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Estudos preliminares do perfil proteico das membranas de espermatozóides de caprinos da raça Saanen na época seca e chuvosa no Nordeste do Brasil

Preliminary studies of protein profile of the sperm membranes of Saanen goats at dry and raining seasons in Brazilian Northeast.

M.F. van Tilburg1, I.C.S. Lima, R.V. Oliveira, J.A.M. Martins, M.M. Silva, M.G.F. Salles,

A.A. Araújo, A.A.A. Moura

Universidade Federal do Ceará, Latoratório de Fisiologia Animal, Fortaleza, CE 1E-mail: [email protected]*

Introdução As proteínas de membranas são importantes na motilidade espermática e interação com o oócito. Entretanto, é necessário definir os tipos de proteínas e os mecanismos de ação que afetam a viabilidade desses gametas. O objetivo deste estudo foi identificar as proteínas de membranas de caprinos da raça Saanen criados na região Nordeste do Brasil que estão relacionadas ao índice pluviométrico e à qualidade do sêmen. Material e Métodos O sêmen foi coletado quinzenalmente de sete caprinos da raça Saanen na época seca (setembro, outubro e novembro) e chuvosa (março, abril e maio) por vagina artificial e analisado os parâmetros espermáticos. As células espermáticas foram separadas do plasma seminal por centrifugação e armazenadas a -20°C. As amostras foram descongeladas e feito um “pool” de cada animal referente a época seca e chuvosa. Os espermatozóides foram lavados com PBS e homogenizados vigorosamente com um homogenizador tipo crusher. As células espermáticas foram novamente lavadas com PBS, ressuspendidas no mesmo tampão contendo 1% de Triton X-100 e mantidas por duas horas à 4°C. Em seguida foram submetidos a sonicação por 30 minutos e centrifugados à 5000 x G por uma hora à 4°C. O sobrenadante foi então precipitados com acetona e ressuspendito em tampão de amostra. A concentração protéica foi determinada por Bradford (1976) e as amostras submetidas a eletroforese 2-D (12,5% PAGE). Resultados e Discussão Dentro dos parâmetros seminais a concentração e a motilidade total foram superiores (p<0,05) na época chuvosa. As análises preliminares dos géis detectaram 238 “spots” proteicos, dos quais 29 diferiram (p<0,05) entre a época seca e chuvosa. Desses 29 “spots”, quatro apresentaram uma maior concentração na época chuvosa correspondendo a massa molecular relativa de 15 a 45 kDa e ponto isoelétrico de 4,94 a 6,94. É conhecido que proteínas de baixa massa molecular do plasma semial estão correlacionadas com a motilidade e que muitas destas são incorporadas a membrana espermática (Manjunath, 1984; Jobim et al., 2003; Cardozo et al. (2006). Mais estudos necessitam ser realizados para identiticar, caracterizar e elucidar o papel particular de cada proteína na fisiologia do espermatozóide. Referências bibliográficas Bradford DMM. A rapid and sensitive method for the quantitaton of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochemy, v.722: p.248-254, 1976. Cardozo JA et al. Monthly variations in ovine seminal plasma proteins analyzed by two dimensional polyacrylamide gel electrophoresis. Theriogenology, v.66, n.4, p.841-850, 2006. Jobim MIM et al. Proteínas de baixo peso molecular do plasma seminal bovino relacionadas com a congelabilidade do sêmen através de eletroforese bidimensional em gel de poliacrilamida. Acta Sci Vet, v.31, n.1, p.21-30, 2003. Manjunath P. Gonadotropin release stimulatory and inhibitory proteins in Bull seminal plasma. In: Sairam MR, Atkinson LE (Ed.) Gonadal proteins and peptides and their biological significance. Singapore: World Scientific, 1984. p.49-61. Palavras-chave: espermatozóide, proteínas de membrana, Saanen e eletroforese 2-D. Keywords: membrane protein, Saanen and 2-D eletrophorese, Spermatozoa.



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Viabilidade do sêmen caprino congelado em diluente contendo OEP Viability of goat sperm cryopreserved in extender with OEP

M.S. Maia1,4, M.T.M.M Moura2, I.K.F Sousa2, W.S. Leal3, I.M Medeiros3

1Embrapa/EMPARN, Parnamirim, RN, Brasil; 2UFERSA, Mossoró, RN; 3EMPARN, Parnamirim, RN.

4E-mail: [email protected] Introdução A criopreservação do sêmen produz danos ao espermatozóide resultando na diminuição da motilidade, integridade de membrana e capacidade fecundante. Na criopreservação do sêmen caprino, o plasma seminal tem um efeito prejudicial ao espermatozóide ao se usar diluidor contendo gema de ovo. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da adição do detergente Orvus es Paste (OEP) ao diluidor Tris-gema, sobre a motilidade e viabilidade do espermatozóide caprino, submetidos ou não à centrifugação antes da criopreservação. Material e Métodos Foram obtidos quatro ejaculados de três reprodutores da raça Alpina Americana (n = 12). Os ejaculados foram divididos em quatro alíquotas, compondo os seguintes tratamentos: lavado+Tris, lavado + Tris/OEP, não lavado+Tris, não lavado + Tris/OEP. Para a retirada do plasma seminal o sêmen foi diluído (1:9) com solução tampão-Tris e submetido a duas centrifugações (600 x g por 10 min). Duas alíquotas foram re-suspensas em diluidor a base de Tris (Tris 4,543 g, acido cítrico tado 2,606 g, glicose 0,750 g, gema de ovo 9%, penicilina potássica 100.000 UI, estreptomicina 100 mg, água destilada qsp 100ml e glicerol 5% v/v no meio II, pH 6,8) e as outras duas no mesmo diluidor contendo 0,5% de OEP. A congelação foi feita em sistema automatizado (TK 3000, curva P4S1) e após a descongelação (37°C/30 s) o sêmen foi avaliado quanto ao vigor, motilidade (subjetiva) e viabilidade (eosina-nigrosina). Resultados e Discussão Após a descongelação, a motilidade, vigor e viabilidade foram 11,5 ± 2,8 %, 2,5 ± 0,4 e 18,0 ± 3,4% no sêmen lavado + TRIS; 43,8 ± 2,8%, 2,6± 0,4 e 51,5 ± 3,4% no sêmen lavado + TRIS/OEP; 20,5 ± 2,8%, 2,2±0,4 e 21,5 ± 3,4% no não lavado +TRIS e 27,9 ± 2,8%, 2,2 ± 0,4 e 36,5 ± 3,4% no não lavado + TRIS/OEP havendo diferença significativa (P > 0,05) entre os tratamentos. O uso do diluidor contendo OEP, no sêmen submetido à lavagem antes da criopreservação, teve um efeito positivo sobre a qualidade do sêmen descongelado. Efeito benéfico do detergente na qualidade do sêmen pós-descongelação foi observado por Bittencourt et al., (2008) no caprino e no sêmen ovino por Maia et al. (2008).

Referências bibliográficas Bittencourt RF, Ribeiro Filho AL, Lima MCC, Alves SGG, Vasconcelos MF, Biscarde CE, Leal LS, OBA E. Efeito de um quelante de cálcio, um detergente e da lecitina de soja sobre a qualidade do sêmen caprino congelado-descongelado. Braz J Vet Res Anim Sci, v.45, n.4, p.305-312, 2008. Maia MS, Bicudo SD, Azevedo HC, Sousa DB, Rodello L, Meira C. Efeito da adição de lauril sulfato de sódio (OEP) ao diluidor na viabilidade do sêmen congelado de ovinos Santa Inês. Vet e Zootec, v.15, n.3, p.521-530, 2008. Pavras-chave: criopreservação, detergente, sêmen caprino. Keywords: cryopreservation, detergent, goat semen.



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Viabilidade espermática de caprinos em diferentes condições climáticas Sperm viability of goats in different seasons

A.T. Soares1,4, S.V. Silva2, P.F.B. de Araújo-Lemos1, F.F. de Freitas1, J.A. Viana1, F.Q. Cartaxo1,

M.M.P. Guerra3

1EMEPA-PB, João Pessoa, PB; 2Bolsista Pós-Doutor CAPES; 3UFRPE, Recife, PE. 4E-mail: [email protected]

Introdução A variação estacional, muito distinta na região semi-árida do Nordeste, delimita dois importantes períodos (verão e inverno), influenciando a produção quanti-qualitativa do sêmen de reprodutores caprinos. Em amostras de sêmen criopreservado, ocorrem alterações funcionais que reduzem a viabilidade espermática e sua capacidade fecundante (Watson, 2000). O objetivo deste trabalho foi avaliar o comportamento das células espermáticas de caprinos criados na região Agreste do Estado da Paraíba em diferentes condições climáticas.

Material e Métodos Sêmen (n= 60 amostras) de cinco reprodutores Boer criados no Agreste Paraibano foi criopreservado nos períodos de inverno e verão. Após descongelação (37oC; 30 s), alíquotas de cada grupo foram avaliadas quanto à motilidade individual progressiva, vigor, integridade de membranas plasmática (Diacetato de Carboxifluoresceina e Iodeto de Propídio) e acrossomal (FITC-PNA) e potencial de membrana mitocondrial (JC-1). Os dados foram submetidos à análise de variância, utilizando-se o teste F para comparação dos quadrados médios e as médias comparadas pelo teste Tukey a 5%.

Resultados e Discussão A integridade do acrossoma (Tabela 1) foi menor (P>0,05) no inverno, quando comparado ao verão. Apesar da temperatura ambiente no inverno (24,20+1,20oC) ser mais amena do que no verão (29,12+0,99oC), os altos índices pluviométricos observados no inverno devem ser a causa da menor viabilidade de espermatozoides criopreservados, decorrente da incidência de doenças que debilitam os animais. Conclui-se que amostras de sêmen de reprodutores caprinos criados na região Agreste da Paraíba devem ser criopreservadas no período de verão. Tabela 1. Média e desvio padrão de espermatozóides criopreservados no inverno e verão, obtidos de reprodutores caprinos da raça Boer criados no Agreste Paraibano

Parâmetros Condição climática Inverno Verão

Motilidade (MIP) 40,15+4,42 44,04+4,34 Vigor 2,50+0,55 3,00+0,00

Integridade de acrossoma (iAc) 24,52+10,0b 59,02+8,05a Integridade da membrana plasmática (iMP) 42,42+7,40 34,11+6,33

Alto Potencial Mitocondrial (PMM) 45,66+12,63 38,91+10,32 letras diferentes na mesma linha indicam P < 0,05.

Referências bibliográficas Watson PF. The causes of reduced fertility with cryopreserved semen. Anim Reprod Sci, v.60/61, p.481-492, 2000. Palavras-chave: estacionalidade, membrana mitocondrial, membrana plasmática, sêmen. Keywords: mitocondrial membrane, seasonality, sêmen, sperm membrane.



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Evaluation of the functionality of the plasma membrane of frozen goat sperm with different cholesterol concentrations

Avaliação da funcionalidade da membrana plasmática dos espermatozóides caprinos congelados com diferentes concentrações de colesterol

C.O. Silveira1,3, M. Christilis2, J.C.O. Dias2, G.D. Oliveira1, C.T.S.A.M. Oliveira2,

J.D. Guimarães1

1Departamento de Veterinária, Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG; 2Departamento de Zootecnia, Universidade Federal de Viçosa, MG.

3E-mail: [email protected] Introduction The stability of the plasma membrane (PM) depends on the amount of cholesterol in their composition. The cholesterol preloaded into the cyclodextrin is inserted into the cell membrane, increasing the stability of the PM during semen cryopreservation (Navratil et al., 2003). We aim was to evaluate by the hypoosmotic test the functionality of the PM of goat semen frozen using different concentrations of cholesterol-cyclodextrin complex (CCC). Material and Methods Four samples were taken from five male goats, where each ejaculate was diluted in the extender base Tris-glycerol + Soya Lecithin and subjected to seven treatments with different concentrations of CCC. Where: T1 = 0,5 mg ml-1; T2= 1,0 mg ml-1; T3 = 1,5 mg ml-1; T4 = 2,0 mg ml-1; T5= 2,5 mg ml-1; T6= 3,0 mg ml-1 e T7 = negative control (without CCC), totaling 140 observations. The total semen was submitted to the cryopreservation process by cooling for one hour at 5°C, followed by 15 min in nitrogen vapor and then immersed in liquid nitrogen. The assessment of membrane integrity was performed according CBRA (Manual…, 1998) using a hyposmotic solution of fructose at 100 mOsm kg-1 for 30 min at 37°C. Results and Discussion After thawing, all samples showed the minimum parameters of motility and strength required by the CBRA for goat semen post-thaw, no difference was observed on hypoosmotic test between all treatments: T1 = 24,2% (n = 19); T2 = 23,7% (n = 19); T3 = 21,9% (n = 19); T4 = 21,2% (n = 19); T5 = 24,5% (n = 19); T6 = 19,7% (n = 19) and T7 = 28,5% (n = 19) by Kruskal-Wallis test with 5% probability, showing that there was no interference of the CCC in the functionality of the goat sperm plasmatic membrane. References Manual para exame andrológico e avaliação de sêmen animal. 2.ed., Belo Horizonte, MG; CBNRA, 1998. 49p. Navratil, A.M., et al. Constitutive localization of the gonadotropin-releasing hormone (GnRH) receptor to low density membrane microdomains is necessary for GnRH signaling to ERK. J Biol Chem, v.278, p.31593-31602, 2003. Palavras-chave: bodes, ciclodextrina, colesterol, criopreservação, hiposmótico. Keywords: cholesterol, cryopreservation, cyclodextin, goats, hypoosmotic.




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Vitamin E on cryopreservation of goat semen Adição da vitamina E na criopreservação do sêmen caprino

J.M. Penitente Filho1, C.A.A. Torres, M.C.R. Santos, J.C.O. Dias, G.D. Oliveira, J.D.

Guimarães, F.A. Oliveira, M.M.N.F. Oliveira


Introduction Sperm membrane is rich in polyunsaturated fatty acids, which in hypothermic conditions become highly sensitive to reactive oxygen species (ROS). According to Surai et al. (1998) Vitamin E (Vit. E) is considered a primary component of the sperm antioxidant system and is a major membrane protective against ROS. The aim of this study was to investigate the potential use of this vitamin in extenders medium for cryopreservation of goat semen. Material and Methods Two adult males were used and eight ejaculates per animal were collected. Semen was diluted with the following treatments: BIOXCELL® (Control), BIOXCELL® + Equex, BIOXCELL® + Vit.E 25µM, BIOXCELL® + Vit.E 50µM and BIOXCELL® + Vit.E 100µM. The semen was packaged in 0.25 ml straws and cooled at 5 °C for 1 hour. Pre-freezing was performed in liquid nitrogen vapor for 15 minutes. Then, the straws were immersed in liquid nitrogen. Thawing was done in water bath at 37°C for 30 seconds with immediate analysis of sperm motility, vigor and incubation of semen for thermorresistance test (TRT) and hyposmotic swelling test (HOST). Variables were subjected to ANOVA, applying Tukey test at 5% probability. Results and Discussion Values of sperm motility and vigor after thawing and during the TTR and after the HOST showed no significant difference (P > 0.05) among treatments. In cattle, vitamin E did not improve sperm motility and vigor or the functional integrity of sperm membrane, but improved sperm membrane integrity when analyzed by fluorescence (Borges, 2003). In ram, Upreti et al. (1997) showed that addition of vitamin E to semen extender did not improve semen quality. In this study vitamin E on goat semen extender did not affect sperm motility and vigor or the functional integrity of sperm membrane.

References Borges JC. Utilização de Antioxidantes Associados ou não a Emulsificante na Criopreservação do Sêmen Bovino. 2003. 73f. Dissertação (Mestrado em Medicina Veterinária) – Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, 2003. Surai P, Kostjuk I, Wishart G, Macpherson A, Speake B, Noble R, Ionov I, Kutz E. Effect of Vitamin E and selenium supplementation of cockerel diets on glutathione peroxidase activity and lipid peroxidation susceptibility in sperm, testes, and liver. Biol Trace Elem Res, v.64, p.119-132, 1998. Upreti GC, Jensen K, Oliver JE, Duganzich DM, Munday R, Smith JF. Motility of ram spermatozoa during storage in a chemically-defined diluent containing antioxidants. Anim Reprod Sci, v.48, p.269-278, 1997. Keywords: antioxidant, freezing, spermatozoa, tocopherol. Palavras-chaves: antioxidante, congelamento, espermatozóide, tocoferol.



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Efeito de diferentes concentrações e tempos de incubação na acuidade do teste hiposmótico

Effect of different concentrations and incubation time in the acuity of the hyposmotic test

R.O. Silveira1,3, C.O. Silveira², M. Christilis2, B.L.F. Rodrigues2, C.A.S. Bispo2, J.D. Guimarães2

1Faculdade de Ciências Biológicas e da Saúde (FACISA/Univiçosa), Viçosa, MG; 2Universidade Federal de Viçosa (UFV),

Viçosa, MG. 3E-mail: [email protected]

Introdução A membrana plasmática (MP) é responsável pelas trocas com o meio externo e pelo equilíbrio osmótico celular. Quando os espermatozoides (SPTZ) são submetidos a solução hiposmótica ocorre o influxo de líquidos para o interior do SPTZ, havendo um aumento de volume celular e expansão da MP e, consequentemente dobramento da cauda. Os espermatozoides que não sofrem dobramento de cauda apresentam perda da funcionalidade da MP (England e Plumer, 1993). Objetivou-se com este estudo avaliar a funcionalidade da MP do sêmen caprino fresco, observando a acuidade do teste hiposmótico (HOST) com a utilização de soluções de diferentes concentrações de frutose em diferentes tempos. Material e Métodos Foram realizadas 16 coletas de cinco reprodutores caprinos do Departamento de Zootecnia da UFV, sendo utilizado o sêmen fresco total onde cada ejaculado foi submetido a 03 tratamentos, contendo diferentes concentrações de Frutose, em que T1: 60 mOsm Kg-1, T2: 100 mOsm Kg-1 e T3: 150 mOsm Kg-1. Estes tratamentos foram incubados em Banho Maria a 37 ºC, por 15, 30 ou 60 minutos, após esse tempo foi adicionado 0,5 mL de formol salino, e estocado para análise posterior. A avaliação da integridade de membrana do espermatozóide foi realizada segundo o CBRA (Manual..., 1998) para o sêmen caprino. Resultados e Discussão Todas as amostras utilizadas encontravam-se dentro dos parâmetros mínimos de motilidade e vigor exigidos pelo CBRA para sêmen caprino. Não foram encontradas diferenças no teste hiposmótico entre os diferentes tempos (P>0,05) pelo teste de Tukey. As concentrações de 100 e 150 mOsm Kg-1 não diferiram (P>0,05) pelo teste de Tukey. No entanto a concentração de 60 mOsm Kg-1 foi inferior as demais concentrações (P<0,05) pelo teste de Tukey. Com isto, conclui-se que a solução de 60 mOsm Kg-1 tem menor acurácia e pode apresentar víeis nos resultados, não sendo indicada para realização do HOST. Referências Bibliográficas England GCW, Plumer JM. Hypo-osmotic swelling of dog spermatozoa. J Reprod Fertil Suppl, n.47, p.261-270, 1993. Manual para exame andrológico e avaliação de sêmen animal. 2 ed. Belo Horizonte, MG, 1998. 49 p. Palavras-chave: caprino, espermatozóide, membrana, osmolaridade, tempo. Keywords: caprine, membrane, osmolarity, spermatozoon, time.



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Use of Cholesterol-Cyclodextrin Complex on cryopreservation of goat semen Utilização do complexo ciclodextrina-colesterol na criopreservação do sêmen caprino

J.C.O. Dias1, M. Christilis, G.D. Oliveira, C.O. Silveira, C.T.S.A.M. Oliveira, C.M. Veloso

Department of Animal Science, University Federal from Viçosa, Viçosa, MG.


Introduction The process for cryopreservation of sperm cells induces changes in the composition of the membranes and injuries that lead to decreased sperm viability. Cholesterol controls the cell membrane structure at low temperatures and allows greater stability. The Cyclodextrins are cyclic oligosaccharides with high affinity for sterols, and if cholesterol is loaded by ciclodextrins. It can be inserted in the cell membrane, allowing greater protection to sperm during cryopreservation (Mocé et al., 2010). We aimed to analyze through sperm motility and strength, the effectiveness of inclusion of cholesterol-cyclodextrin complex (CCC) in six different concentration levels in the cryopreservation of goat semen. Material and Methods Six collections of semen from five male goats were diluted in a commercial extender base Tris-glycerol + Soya Lecithin and distributed in seven treatments, reaching 210 observations. The inclusion of the CCC to the extender the following order: T1= 0.5 mg/mL, T2= 1.0 mg/mL, T3= 1.5 mg/mL, T4= 2.0 mg/mL; T5= 2.5 mg/mL, T6= 3.0 mg/mL; T7= control (without CCC). The semen was cooled for one hour at 5 ° C, 15 min. in nitrogen steam and then immersed in liquid nitrogen. Thawing was done in a water bath at 37 °C for 30 seconds, followed by assessments of sperm motility and strength and the means were analyzed by Duncan test at 5% probability.

Results and Discussion There was no variation (P>0.05) in effect between treatments. All treatments showed differences (P<0.05) for the parameter motility. The treatments T1 and T2 showed the highest value (33.4 ± 15.0% and 32.6% ± 13.8, respectively) compared to control (28.6% ± 14.4) and over 30 %, as recommended by the CBRA (Manual…, 1998) for thawed. The motility of T3, T5, T6 and T4 were 27.4 ± 13.2%, 26.6 ± 12.9%, 26.0 ± 14.0% and 25.2 ± 14.3%, respectively. We conclude that the addition of 1.0 mg/mL of the CCC provides a better result to freeze the goat sperm, providing greater conservation motility in thawed goat semen.

References Manual para exame andrológico e avaliação de sêmen animal. 2 ed., Belo Horizonte, MG: CBRA, 1998. 49 p. Mocé E, Purdy PH, Graham JK. Treating ram sperm with cholesterol-loaded cyclodextrins improves cryosurvival. Anim Reprod Sci, v.118, p.236-247, 2010. Palavras-chave: caprino, ciclodextrina, colesterol, sêmen. Keywords: cholesterol, cyclodextrin, goat, semen.



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Efeito do complexo ciclodextrina-colesterol (CCC) sobre a longevidade do sêmen caprino descongelado durante o teste de termorresistência

Effect of cholesterol cyclodextrin complex (CCC) on the longevity of thawed goat semen during thermo resistance test

G.D. Oliveira1, M. Christilis, M.C.R. Santos, L.A. Benjamim, J.C.O.Dias,

C.T.S.A.M. Oliveira, C.O. Silveira


Introdução Ciclodextrinas são oligossacarídeos cíclicos capazes de incorporar colesterol à membrana espermática (Ohvo e Slotte, 1996). O teste de termorresistência (TTR) consiste na incubação de uma amostra de sêmen por tempo pré-estabelecido e sob determinada temperatura, avaliando-se, ao longo do tempo, a motilidade progressiva e o vigor espermático (Dimitropoulos, 1967). O objetivo deste estudo foi verificar o efeito do CCC sobre viabilidade dos espermatozóides caprinos após seu descongelamento. Material e Métodos Foram utilizados 05 reprodutores caprinos, sendo coletado 06 ejaculados por animal. O sêmen foi diluído com diluente a base de Tris-glicerol+Lecitina de Soja, e a inclusão do CCC ao diluente obedeceu à seguinte ordem: T1=0,5 mg/mL; T2=1,0 mg/mL; T3=1,5 mg/mL; T4=2,0 mg/mL; T5=2,5 mg/mL; T6=3,0 mg/mL; T7=controle (sem CCC). O sêmen foi envasado em palhetas de 0,25mL e resfriado a 5 oC por 1 hora. O pré-congelamento foi realizado em vapor de nitrogênio líquido por 15 minutos e em seguida, as palhetas foram imersas no nitrogênio liquido. As partidas foram descongeladas a 38 ºC, por 30 segundos. Para o TTR as amostras foram incubadas a 38 oC por 3 horas de modo que a cada 30 minutos fossem avaliados a motilidade progressiva e vigor espermático. As variáveis foram submetidas à ANOVA associada ao teste de Duncan a 5% de probabilidade. Resultados e Discussão Os valores de motilidade progressiva e vigor espermático após o descongelamento e ao longo do TTR não apresentaram diferenças significativas entre os tratamentos (P>0,05), ao contrário do observado por Mocé et al. (2010) que relataram melhora na motilidade do sêmen ovino descongelado tratado com CCC.

Referências bibliográficas Dimitropoulos E. La signification du test de la thermoresistence dans l’appreciation de valeur fécondante du sperme congelé. Ann Méd Vet, v.4, p.215-224, 1967. Mocéa E, Purdyb PH, Graham JK. Treating ram sperm with cholesterol-loaded cyclodextrins improves cryosurvival. Anim Reprod Sci, v.118, p.236-247, 2010. Ohvo H, Slotte JP. Cyclodextrin-mediated removal of sterols from monolayers: effects of sterol structure and phospholipids on desorption rate. Biochem, v.35, p.8018-8024, 1996. Palavras-chave: células espermáticas, lipídios. Keywords: lipids, sperm cells. Agradecimentos a FAPEMIG pelo apoio financeiro.



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Efeito do complexo ciclodextrina-colesterol na integridade da membrana plasmática no sêmen caprino descongelado

Effect of cyclodextrin-cholesterol complex on plasma membrane integrity of goat thawed semen

C.T.S.A.M. Oliveira1, M. Chistilis, J.C.O. Dias, G.D. Oliveira, C.O. Silveira, C.A.A. Torres

Departamento de Zootecnia, Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG. 1E-mail: [email protected]

Introdução O aumento da relação colesterol:fosfolipídio da membrana espermática reduz as lesões sobre o espermatozóide durante a criopreservação (Combes et al., 1998). Quando ciclodextrinas, oligossacarídeos cíclicos de glicose, que possuem um centro hidrofóbico capaz de incorporar lipídios são pré-carregados com o colesterol e então incubados com sêmen bovino antes do congelamento, ocorre um aumento na viabilidade espermática no descongelamento (Amorim et al., 2009). Objetivou-se com este estudo, analisar a eficácia de seis diferentes concentrações do complexo colesterol-ciclodextrina (CCC) em aumentar a integridade espermática após o processo de criopreservação do sêmen caprino. Material e Métodos Cinco machos adultos foram utilizados, sendo coletados seis ejaculados por animal, diluídos em meio comercial à base de Tris-glicerol+Lecitina de soja. A inclusão do CCC ao diluente obedeceu à seguinte ordem: T1=0,5 mg/mL; T2=1,0 mg/mL; T3=1,5 mg/mL; T4=2,0 mg/mL; T5=2,5 mg/mL; T6=3,0 mg/mL; T7=controle (sem CCC). No processo de criopreservação, o sêmen foi resfriado por uma hora a 5° C, 15 min. no vapor de nitrogênio e posterior imersão em nitrogênio líquido. O sêmen foi descongelado em banho-maria a 37 °C por 30 seg., seguido da avaliação da integridade de membrana pela coloração supra-vital (Eosina-Nigrosina), sendo as médias analisadas pelo teste de Duncan a 5% de probabilidade. Resultados e Discussão O percentual de células integras de T1 (41,5%, n=29) foi superior (P<0,05) ao grupo controle (37,3%, n=29), não houve diferença entre os tratamentos (P>0,05) T4, T7, T5, T2 e T6 (38,1%,37,3%, 36,2%, 35,7% e 35,2%, respectivamente, n=29 para todos os tratamentos) e T3 (30,6, n=29) foi inferior (P<0,05) ao controle. A inclusão do CCC na concentração de 0,5 mg/mL melhora a integridade de membrana nos espermatozóides caprinos descongelados. Referências bibliográficas Amorim E, Graham JK, Spizziri B, Meyers M, Amorim L, Torres C. Effect of cholesterol or cholesteryl conjugates on the cryosurvival of bull sperm. Cryob, v.58, p.210-214, 2009. Combes GB, Varner DD, Schroeder F, Burghardt RC, Blanchard TL. Effect of supplemental cholesterol on post-thaw motility and plasma membrane integrity of equine spermatozoa. In: Proc. Seventh Intern. Symp. Equi. Reprod., 1998, South Africa. p.35-36. Palavras-chave: Caprino, ciclodextrina, colesterol, sêmen. Keywords: goat, cyclodextrin, Cholesterol, sêmen. Agradecimentos à Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG) pelo apoio financeiro.



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Addition of vitamin E associated with rapid thawing of goat semen Adição de vitamina E associada ao descongelamento rápido do sêmen caprino

V.R.A. Mendes1, J.M. Penitente Filho, C.A.A. Torres, M.C.R. Santos, J.C.O. Dias, G.D. Oliveira


Introduction Vitamin E (Vit. E) is a major membrane protective against ROS (Akiyama, 1999). Goat semen is thawed at 37 oC/12 to 30 seconds (Purdy, 2006), but Kozdrowski et al. (2007) used a rate of thawing of 40 oC/30 seconds for goat semen, achieving considerable post-thaw motility.

Material and Methods Two adult males were used and eight ejaculates per animal were collected using artificial vagina. The semen was diluted with the following treatments: BIOXCELL®(Control), BIOXCELL®+Equex and BIOXCELL® +Vit.E 100µM. The semen was packaged in 0.25 ml straws and cooled at 5 °C for 1 hour. Pre-freezing was performed in liquid nitrogen vapor for 15 minutes. Then, the straws were immersed in liquid nitrogen. The straws were thawed at 38 °C/60 seconds or at 60 oC/7 seconds followed by 38 oC/60 seconds with immediate analysis of sperm motility and vigor. The variables were subjected to analysis of variance, applying Tukey test at 5% probability. Results and Discussion Vitamin E did not affect sperm motility and vigor among treatments, and there were no differences between thawing at 60 oC/7 seconds and 38 oC/60 seconds (P>0.05). Upreti et al. (1997) showed that addition of vitamin E to semen extender did not improve semen quality of ram. According to Bezerra (2009) there were no difference between goat semen thawing at 37 ºC/60 seconds and 55 ºC/7 seconds. References Akiyama M. In vivo scavenging effect of ethylcysteine on reactive oxygen species in human semen. Nip Hin Gak Zas, v.90, p.421-428, 1999. Bezerra FSB. Criopreservação do sêmen caprino: efeito de diferentes palhetas, taxas de descongelação e crioprotetores. 2009. 93f. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) – Universidade Federal Rural do Semi-Árido, Mossoró, 2009. Kozdrowski R, Dubiel A, Bielas W, Dzięcioł M. Two protocols of cryopreservation of goat semen with use of computer-assisted semen analysis system. A. Vet Br, v.76, p.601-604, 2007. Purdy PH. A review on goat sperm cryopreservation. Small Rumin Res, v.63, p. 215-225, 2006. Upreti GC, Jensen K, Oliver JE, Duganzich DM, Munday R, Smith JF. Motility of ram spermatozoa during storage in chemically-defined diluent containing antioxidants. Anim Reprod Sci, v.48, p.269-278, 1997. Keywords: antioxidant, caprine, freezing, spermatozoa, tocopherol. Palavras-chave: antioxidante, caprino, congelamento, espermatozóide, tocoferol. Agradecimentos a FAPEMIG pelo apoio financeiro.



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Monitoramento da glicose como parâmetro para qualidade seminal de reprodutores caprinos

Glucose monitoring as a parameter for semen quality in male goats

A.H. Vidal1, L.B. Lira 2, D.M. Haas2, D.C. Burgos1, C.N.R. César3, G.R. Santos1, G.M. Santos4, M.P.B. Ferreira5, G.F. Carneiro1,4, M.M.P Guerra1,2

1PPGSRR, UAG, UFRPE, Garanhuns, PE; 2DMV, UFRPE, Recife, PE.; 3PPGCAT, UFRPE, Recife, PE.; 4UAG, UFRPE, Recife, PE; 5DZ, UFRPE, Recife, PE.

E-mail: [email protected] Introdução Na reprodução de pequenos ruminantes o aporte energético é de fundamental relevância, sendo a glicose uma fonte metabólica básica importante para o metabolismo (Lehnninger et al., 1995). Durante o processo de maturação das gônadas e de reprodução, o organismo animal mobiliza bastante energia. Todos estes processos, em geral, são sustentados pela energia fornecida pelos carboidratos (Zaiden, 2000). Segundo Simões et al. (2005), a glicose sérica está correlacionada ao ciclo reprodutivo do pato doméstico, fornecendo suporte energético para os processos de reprodução desta espécie. Objetivou-se, com este trabalho, verificar as concentrações de glicose sanguínea com a qualidade seminal de caprinos. Materiais e Métodos Foram utilizados dois caprinos Saanen (R1 e R2), com fertilidade comprovada, sendo colhidas três amostras de sêmen de cada animal, com vagina artificial, em dias alternados. No momento de cada colheita seminal, os reprodutores foram submetidos à dosagem de glicose sanguínea através de sistema Accu-Chek Performa® (ROCHE, Germany), sendo utilizada uma gota de sangue extraída do pavilhão auricular. O sêmen in natura foi imediatamente avaliado quanto aos parâmetros de motilidade progressiva (MIP) e vigor, segundo o Manual para exame andrológico e avaliação de sêmen animal do CBRA (1998), em microscópio óptico (Olympus, Germany). Resultados e Discussão À medida que se observou elevação das concentrações de glicose, a qualidade seminal (MIP e Vigor) melhorou; da mesma forma que o inverso também foi observado. Ao avaliar o R1, observou-se que quando houve redução de 5% nas concentrações de glicose sanguínea, a MIP foi reduzida em 20% e o Vigor passou de 3 para 2. Para o R2, observou-se que, quando o nível de glicose aumentou em 4%, a MIP foi aumentada em 10% e o Vigor permaneceu em 4. Os carboidratos que se encontram acessíveis ao organismo na forma de glicose são responsáveis em parte pelos processos reprodutivos, como produção e maturação de espermatozóides (Simões et al., 2005). Por conseguinte, se ocorre redução da concentração de glicose disponível, não haverá energia suficiente para a produção e a maturação das células espermáticas, resultando, assim, em menores valores de MIP e Vigor do sêmen.

Conclusão As concentrações de glicose no sangue, associada à qualidade seminal dos reprodutores caprinos, devem ser avaliados com um maior número de animais com intuito de padronizar esse parâmetro com as características seminais, o que poderá ser de grande importância na avaliação andrológica a campo. Referências bibliográficas Lehninger AL, Nelson DL, Cox MM. Princípios de Bioquímica. São Paulo: Sarvier, 1995. Manual para exame andrológico e avaliação de sêmen animal do CBRA. 2.ed. Minas Gerais: Colégio Brasileiro de Reprodução Animal, 1998. 49 p. Simões K, Orsi AM et al. Estudo morfológico do ciclo reprodutivo e variabilidade nos níveis de glicose, de glicogênio e de lipídeo ao longo do ano em pato doméstico (Anas platyrhynchus). Acta Scientiarum Animal, v. 27, n. 3, p. 319-325, 2005. Zaiden SF. Morfologia gonadal e metabolismo energético da piraputanga Brycon hilarii (Curvier e Valenciennes, 1849) anual. 2000. Tese (Doutorado)-Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal.

Palavras-chave: caprino, glicose, qualidade seminal. Keywords: caprine, glucose, seminal quality.




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Estudo do desenvolvimento corporal e reprodutivo de caprinos machos obtidos por cruzamento de cabras mestiças com reprodutor Boer

Study of the body and reproductive development of male goats obtained by crossing of halfbred she-goat and Boer reproductor

M.A.V. Silva1, R.F. Solano1, L.C. Leal1, A. O. Sousa1, R.M. Chaves1

1

Laboratório de Biotecnologia da Reprodução Animal –UEMA. E-mail: [email protected]

Introdução O melhoramento dos rebanhos de caprinos no Brasil ainda se utiliza basicamente das raças exóticas, especializadas na produção de leite e carne, sendo a melhoria dos rebanhos feita pelaimportação de animais e embriões, como a raça bôer, oriunda da África do Sul (SOUSA et al., 2010). O presente trabalho objetiva estudar o desenvolvimento corporal e reprodutivo de caprinos machos obtidos por cruzamento de cabras mestiças com reprodutor da raça Bôer, avaliando as médias de ganho de peso e as características reprodutivas com o exame físico do sêmen e testimetria. Material e Métodos Foram selecionadas 35 cabras mestiças, sendo que 15 foram cobertas por monta natural por reprodutor mestiço e 20 cabras inseminadas com sêmen de reprodutor da raça Bôer. As crias obtidas foram divididas em dois grupos: G-I obtidas por cruzamento de cabras mestiças e reprodutor mestiço e G-II obtidas por cruzamento de cabras mestiças com sêmen de reprodutor Bôer. Desde o nascimento até os 180 dias de idade os dois grupos tiveram seus dados de ganho de peso e medidas de largura, comprimento e altura anotados, sendo depois comparados entre os grupos. Os machos nascidos foram submetidos a exame andrológico entre 5 e 6 meses de idade e depois entre 6 e 7 meses, sendo realizada aferição de medidas de escroto, testículos e circunferência escrotal. Realizou-se a avaliação dos parâmetros físico-químicos do sêmen em laboratório analisando volume, motilidade (%), concentração espermática (x 106/ml) e morfologia, entre 165 e 175 dias de idade dos animais. Resultados e Discussão Os parâmetros de altura, largura e comprimento estudados foram inferiores para os nascidos do G-I quando comparados ao G-II. Tal resultado confirma o que Santana (2000) relata ao dizer que produtos descendentes de cruzamentos com a raça Bôer têm um desenvolvimento corporal superior a descendentes de pais mestiços. Quando comparados os ganhos de peso entre os animais dos grupos G-I e G-II percebeu-se que animais do G-I apresentaram pesos inferiores aos do G-II, desde o nascimento até os 180 dias. As fêmeas do grupo G-II obtiveram maior ganho de peso em relação aos machos do mesmo grupo, sendo que ao nascer apresentaram média de 4,5 kg e machos com 4 kg. Já aos 180 dias o peso médio ficou de 30,3 kg para fêmeas e 28 kg aos machos. Quanto a avaliação físico-química do sêmen observou-se que as médias de volume ejaculado, grau de motilidade, concentração espermática e morfologia, ficaram em torno de 0,8 ml, 90%, 4x106ml e 12% (espermatozóides anormais), respectivamente. Referencias bilibiográficas Santana, A.F. Aspectos produtivos da raça bôer, 2000, 20. Monografia – Escola de Medicina Veterinária da Universidade Federal da Bahia. SOUSA, W.H de; FCÓ, O.; OJEDA, M.D.B. Melhoramento Genético de Caprinos no Brasil. Empresa Estadual de Pesquisa Agropecuária da Paraíba S.A. – Emepa, Embrapa caprinos e Ovinos, 2010, 13p. Palavras-chave: Caprinos, desenvolvimento, cruzamento, bôer. Key-word: Goats, development, crossing, boer.



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Atividade da fosfolipase A2 no plasma seminal caprino e a viabilidade de espermatozóides epididimários conservados a 4ºC

Phospholipase A2 activity in goat seminal plasma and epididymal spermatozoa viability cooling at 4ºC

G.V. Aguiar1,3, A.G.V. Catunda1, J.F. Pereira2, M.M. Silva2, A.C.N. Campos2, J.F. Nunes1

1Universidade Estadual do Ceará, Fortaleza, CE; 2Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, CE. 3E-mail: [email protected]

Introdução Em caprinos, estudos tem sido conduzidos para elucidar a composição bioquímica do plasma seminal e seus efeitos sobre os espermatozóides, especialmente da Fosfolipase A2 (FLA2) (Sias et al., 2005). Em adição, a recuperação e conservação de espermatozóides epididimários (EEp) permitem a utilização de reprodutores quando estes sofrem alguma injúria que lhe provocam infertilidade (Blash et al., 2000). Dessa forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a ausência ou adição de plasma seminal (PS) caprino com diferentes níveis de atividade de FLA2 sobre o desempenho de espermatozóides epididimários diluídos em água de coco com 2,5% gema de ovo e resfriados a 4 ºC. Material e Métodos Oito bodes foram divididos em dois grupos de acordo com o nível de atividade de FLA2 no PS: grupo I (< 6,7 U/mL) e grupo II (> 11,0 U /mL). Outros seis bodes foram utilizados apenas como doadores de EEp. O “pool” de EEp foi fracionado em nove alíquotas, na qual, uma destas foi adicionada apenas de diluidor (grupo controle) enquanto as demais receberam PS de cada um dos animais dos grupos I e II. Em seguida, procedeu-se a diluição final em todas as amostras (200 x 106 sptz/mL). O sêmen diluído foi resfriado a 4 ºC, conservado por 48 horas e avaliado para vigor e motilidade às 0, 2, 12, 24 e 48 horas de conservação, pelo teste de termorresistência lento (TTR). Esfregaços do sêmen foram confeccionados durante o TTR e 200 células foram avaliadas e classificadas como morfologicamente normais ou anormais. Resultados e Discussão A adição do PS interferiu negativamente sobre o vigor e a motilidade espermática, principalmente quando o PS adicionado foi do grupo II e, contudo, reduziu a incidência das alterações morfológicas totais. Dessa forma pode-se concluir que a adição de PS caprino aos EEp promoveu efeito deletério à qualidade espermática e esta influência foi mais pronunciada quando a atividade da FLA2 é superior a 11,0 U/mL. Os dados demonstram também que os EEp conservados sem PS mantiveram a qualidade espermática ao longo de 48 horas de conservação. Referências bibliográficas Blash S, Malican D, Gavin, W. Cryopreservation of epididymal sperm obtained at necropsy from goats Theriogenology, v.54, p.899-905, 2000. Sias B, Ferrato F, Pellicer-Rubio MT, Forgerit Y, Guillouet P, Leboeuf B, Carrière F. Cloning and seasonal secretion of the pancreatic lipase-related protein 2 present in goat seminal plasma. Biochim Biophys Acta, v.1686, p.169-180, 2005. Palavras-chave: bode, bioquímica seminal, sêmen. Keywords: buck, sêmen, seminal biochemistry.



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Grânulo corticais pós-fertilização na espécie equina: um novo conceito Cortical granules post fertilization in equine specie: a new concept

G.F. Carneiro1,4, I.K.M. Liu2, P.L. Lorenzo3

1UFRPE-UAG, Garanhuns, PE; 2University of California Davis, CA; 3Universidad Complutense de Madrid, Espanha. 4E-mail: [email protected]

Introdução Grânulos corticais (GC) são organelas derivadas do Aparelho de Golgi formados durante os primeiros estágios do desenvolvimento e maturação oocitárias localizadas na região cortical dos oócitos. Após a fusão espermatozóide-oócito, ocorre reação cortical com exocitose do conteúdo dos GC que modificam a morfologia da zona pelúcida prevenindo assim a polispermia (Hoodbhoy and Talbot, 1994). Em roedores e masurpiais, foi demonstrada (Dandekar and Talbot, 1992) a presença de algumas proteínas dos GC no espaço perivitelino pós-fertilização se mantendo até a eclosão do blastocisto. O objetivo desse trabalho foi identificar a presença ou não de conteúdo do GC pós-fertilização na espécie eqüina. Material e Métodos Ovários foram coletados de éguas cíclicas após 15 minutos de eutanásia no Hospital de Ensino de Medicina Veterinária da Universidade da California, Davis. Maturação dos oócitos foi realizada com TCM-199 com 0.1% BSA (Sigma; A-3311 Fraction V), penicilina (100 IU/ml), e estreptomicina (50 µg/ml). Sêmen foi coletado de garanhão de fertilidade comprovada adicionado a extensor translúcido na ausência de leite desnatado (Merckt Extender, Minitube Inc.). A ICSI foi realizada com microscópio Nikon invertido com sistema óptico de Nomarski e micromanipulador de Narigishe (NT-88; Narigishe, Tokyo, Japan). Dois a três oócitos denudados foram colocados de cada vez em uma gota de 5 µl de meio HEPES localizado no fundo da gota contendo espermatozóide. Uma única célula espermática foi isolada e aspirada. Todos os oócitos injetados (18) foram observados 5 minutos após ICSI para se estimar alguma perda pós-injeção. Supostos zigotos foram colocados em microgotas (100 µL) coberto por óleo mineral e cultivados a 38,5° C em 5% de CO2 por 7 dias (8 dias pós-ICSI). No oitavo dia, supostos zigotos foram removidos do meio de cultivo e zona pellucida foi removida com Pronasa a 0.1% (Sigma; P-0652). Supostos zigotos foram encubados em 10 µg/ml de fluorescein isothiocyanate (FITC)-labelled LCA (LCA,FL-1041, Vector Labs, Inc, Burlingame, CA) e a cromatina corada com 10 µg/ml de propidium iodide (Sigma; P-4170). Supostos zigotos foram montados em laminas com uma solução de “antifade” (Vectashield; Vector Labs Inc., Burlingame, CA), e a lamínula selada com esmalte de unha. As amostras foram examinadas com microscopia confocal a laser com um Bio-Rad MRC 1024 ES equipado com laser Krypto-argon. As imagens foram gravadas digitalmente e arquivadas em CD óptico.

Resultados e Discussão Dos 18 oócitos microinjetados, 5 fertilizaram (27,7%); 1 oócito apresentou 2 corpúsculos polares, 3 atingiram o estágio de 2 células, um suposto zigoto atingiu o estágio de 8-células e um atingiu o estágio de mórula. Os demais oócitos não fertilizaram tendo um apresentado a presença da cabeça do espermatozóide sem a decondensação espermática ter ocorrido. Todos os oócitos fertilizados apresentaram conteúdo de GC próximos aos blastômeros. Apesar de serem dados preliminares pudemos confirmar a presença de GC pós-fertilização na espécie eqüina. Futuros estudos serão necessários com o intuito de compreender a função reguladora dessa organela durante a clivagem ou o desenvolvimento embrionário prévio e como ocorre sua presença se mantida no espaço perivitelino pré-fertilização ou se é sintetizado de novo pós clivagem

Referências bibliográficas Dandekar P, Talbot P. Perivitelline space of mammalian oocytes: extracellular matrix of unfertilized oocytes and formation of a cortical granule envelope following fertilization. Mol Reprod Dev, v.31, p.135-143, 1992. Hoodbhoy, T. and Talbot, P. Mammalian cortical granules: Contents, fate and function. Mol Reprod Dev, v.39, p.439-448, 1994. Palavras-chave: eqüino, fertilização, grânulos corticais, ICSI, oócito. Keywords: cortical granules, equine, fertilization, ICSI, oocyte.



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Dinâmica folicular de éguas da raça Bretão Postier submetidas a hormonioterapia: resultados preliminares

Follicular dynamic from Breton mares submitted a hormone therapy: preliminary results

M.A.F. Sá1, P.C.A. Silva, C.S. Santos, M.P. Moreno, G.A. Dutra, J.C.F. Jacob

Departamento de Reprodução e Avaliação Animal, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica, RJ. 1E-mail: [email protected]

Introdução Algumas raças equina, como a Bretão Postier, possuem resposta aos tratamentos hormonais pouco estudadas. Entretanto, este conhecimento é de grande importância para o entendimento da fisiologia eqüina. Diante disto, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da hormonioterapia luteolítica e indutora de ovulação sobre as características da dinâmica folicular nesta raça. Material e Métodos Foram utilizadas sete éguas da raça Bretão Postier, com idade entre três e 13 anos, ciclando regularmente. A atividade ovariana das éguas foi monitorada diariamente através de ultra-sonografia transretal durante a estação de monta 2010/2011 (de outubro a janeiro), totalizando 20 ciclos estrais (três não tratados; oito tratados com 5mg de Dinoprost Trometamina + 1000UI hCG; nove tratados somente com 5mg de Dinoprost Trometamina). A luteólise foi induzida nove dias após a detecção da ovulação (D0). Como agente indutor de ovulação, foi utilizado 1000UI de Gonadotrofina Coriônica Humana (hCG), na presença de folículo ≥ 35mm de diâmetro e edema endometrial condizente com estro. Os dados foram avaliados estatisticamente pelo test T e Mann Whitney, de acordo com a normalidade dos dados. Resultados e Discussão Sem influência hormonal, o tempo médio de duração do ciclo estral foi de 19±4,4 dias e quando se utilizou o agente luteolítico, a duração média do ciclo foi 17,9±2,4 dias. Não houve diferença significativa (p>0,05). Maior duração do ciclo foi encontrada por Jacob (2008) para éguas jovens (22,6 ± 0,48) e de meia idade (22,4 ± 0,38 dias). Quando associou-se PGF2α + hCG, a duração média do ciclo foi de 17,7±2,9 dias. Não houve diferença significativa entre os esses dois ciclos (p>0,05). A taxa de crescimento folicular médio diário do folículo dominante até um dia antes da ovulação foi 3,2±0,9mm para ciclos não tratados com PGF2α e 2,7±0,4mm para éguas tratadas, não havendo diferença significativa (p>0,05). Taxa de crescimento diário próxima foi relatada por Ginther (1986). Jacob (2008) observou em éguas jovens crescimento diário de 3,0±0,18mm e 22,4 ± 0,38mm para éguas de meia idade. Referências bibliográficas Ginther OJ. Ultrasonic imaging and reproductive events in the mare. Equiservices, Cross Plains, WI. 1986. p.87-97, 155-171, 195-208. Jacob JCF. Dinâmica ovariana e endócrina de éguas em diferentes em diferentes idades. 2008. Tese (Doutorado) - Universidade Estadual de Viçosa, MG, 2008. Palavras-chave: desenvolvimento folicular, hCG, prostaglandina. Keywords: follicular development, hCG, prostaglandin.



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Endometrite em éguas: uma das causas na baixa eficiência reprodutiva Endometritis in mares: a causes in the low reproductive efficiency

M.P. Matta1,3, C.O. Silveira2, L.S. Fernandes2 , J.D. Guimarães2

1Departamento de Zootecnia, UFV, Viçosa, MG; 2Departamento de Veterinária, UFV, Viçosa, MG. 3E-mail: [email protected]

Introdução A inseminação artificial (IA) e a transferência de embriões (TE) impulsionaram a reprodução equina. Dentre as limitações encontradas que resultam na ineficiência do programa de TE, cita-se a falha na recuperação embrionária, sendo esta ocasionada por baixas taxas de prenhez, tendo como provável causa afecções uterinas e/ou distúrbios hormonais. A endometrite é um processo inflamatório que acomete o endométrio, podendo ser causada por processos não-venéreos ou pela cobertura com garanhões infectados. A contratilidade miometrial é considerada um potente mecanismo de limpeza uterina, drenando os agentes contaminantes depositados no lúmen do útero por ocasião da cobertura, no que é auxiliado pelo relaxamento da cérvix no período do estro (LeBlanc et al., 1989). Esta enfermidade interfere na eficiência reprodutiva, aumentando a ocorrência de repetição de cio, e o intervalo entre partos. Material e Métodos Foram acompanhadas durante a estação de monta em uma central de reprodução cerca de 12 éguas doadoras de embriões que apresentavam casos de endometrite clínica: presença de lavados turvos e/ou falhas na fertilização resultando na ausência de embriões. A etiologia da infecção uterina foi diagnosticada através das características do lavado uterino associado ao exame de citologia uterina, onde foram observados mais de 1 neutrófilo para cada 10 células do epitélio endometrial (McKinnon,1993). Após a confirmação do agente causador, bactérias ou fungos preconizou-se o tratamento local através de infusões e lavagens uterinas com Ringer Lactato associando á administração sistêmica de antibióticos ou antifúngicos. Os lavados e infusões eram realizados no dia anterior a inseminação e quando necessários repetidos cerca de 6 horas após a inseminação. Resultados e Discussão Após a realização das coletas de embriões, verificou-se que em 9 (75%) lavados não houve turbidez e em 7 (58%) deles houve presença de embriões. Pode-se concluir então que o monitoramento periódico das éguas leva a um diagnóstico e um tratamento precoce que quando realizado próximo a data da ovulação (quando a cérvix está relaxada) são importantes no intuito de reduzir perdas embrionárias. Referências bibliográficas Leblanc MM, Asbury AC, Lyle SK. 1989. Uterine clearance mechanisms during the early postovulatory period in mares. Am J Vet Res 50:864-867. McKinnon AO, Voss JL. Equine reproduction. Malvern, PA: Lea & Febinger, 1993. p.381-391. Palavras-chave: eficiência reprodutiva, éguas, endometrite. Keywords: eficciency reproductive, endometrits, mares. Agradecimento a FAPEMIG pelo apoio financeiro.



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Placentite associada a laminite em égua prenhe Placentitis associated with laminitis in pregnant mare

P.B.C. Gomes1, C.A.M. Bonfim1,5 , C.A. Rodrigues2 , S. Bernardo3, J.T. Trevisan4

1Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba , UNESP, Araçatuba, SP; 2Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia,

UNESP, Botucatu, SP; 3Médica Veterinária Autônoma, Paranavaí, PR; 4Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, UNESP, Jaboticaba, SP.

5E-mail : [email protected]

Introdução A placentite é uma das principais causas de aborto e parto prematuro. A laminite é o processo inflamatório das estruturas sensíveis da parede do casco (lâminas), geralmente está associada a fatores genéticos, idade, falta de exercícios, umidade ou quadros de toxemia. Material e Métodos Ao serviço de Reprodução Animal da FMVA foi encaminhada, uma égua da raça Paint Horse com 10 anos de idade, período gestacional de 336 dias e com dificuldade severa na locomoção. Utilizou-se exames físicos gerais, exames ginecológicos, tratamentos medicamentosos, manobras obstétricas, avaliações clínicas do feto e macroscópicas dos anexos fetais.

Resultados e Discussão A égua apresentava dificuldade severa na locomoção sendo diagnosticada laminite aguda pelo serviço de Clínica Cirúrgica de Grandes Animais. Aos exames ginecológicos, observou-se ausência de secreção láctea com feto viável e desenvolvimento compatível com a idade gestacional. Devido o quadro de laminite aguda em que o animal necessitava de tratamento urgente com drogas não recomendadas para uso em égua prenhe, optou-se pela indução imediata do parto com três aplicações de ocitocina (10 – 20 UI) em solução fisiológica (500 mL) por via intravenosa lentamente. Transcorridas duas horas de aplicação foram adicionados estímulos mecânicos por meio de palpação cérvico/vaginal e depois de mais duas horas, um feto viável do sexo feminino foi expulso com auxílio de tração leve. A placenta somente foi expelida após 3,5 horas do parto e 30 minutos de uma aplicação da medicação acima descrita. Assim, pode-se diagnosticar que houve a retenção placentária (RP), pois não ocorreu a expulsão da placenta até três horas após o parto. A RP pode se desenvolver devido à inflamação placentária ou indução do parto. Verificou-se, na placenta, áreas enegrecidas e hiperêmicas nas porções craniais compatíveis com placentite. Possível explicação, para este tipo de placentite, seria o deslocamento placentário precoce e, esta, poderia ter influenciado na existência da laminite aguda. Segundo Johnson et al. (2009) a associação de laminite com prenhez em éguas tem sido discutida na literatura, pois veterinários freqüentemente relatam que algumas éguas parecem desenvolver ou agravar os sintomas de laminite na gestação, podendo haver uma síndrome de laminite associada a gestação. Mas, tal afirmação necessita de estudos para entendimento de suas causas. Este relato tem como objetivo contribuir para discussão do assunto em que a placentite de extremidades craniais poderá ser incluída como fator desencadeante de laminite.

Referências bibliográficas Johnson PJ, Messer IV NT, Ganjam SK, Wiedmeyer CE. Pregnancy – associated laminitis in mare. J Equine Vet Sci, v.29, n1, p.42-6, 2009. Palavras-chave: eqüino, laminite, gestação, placentite, reprodução. Keywords: equine, laminitis, placentitis, pregnancy, reproduction.



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Microbiota uterina de éguas Bretão Postier inseminadas com sêmen de jumento Pêga Breton mares's uterine Microbiota inseminated with Pêga's donkey semen

C.S. Santos1, R.C.G. Pereira1, C.C.A. Santos2, V.L.T. Jesus3, J.C.F. Jacob3

Curso de Pós-graduação em Medicina Veterinária, Curso de graduação em Medicina Veterinária, DRAA/IZ, UFRRJ,

Seropédica, RJ. E-mail: [email protected]

Introdução Diversos microrganismos potencialmente patogênicos são introduzidos durante a cópula, inseminação artificial, parto e exames ginecológicos no útero da égua. Os microrganismos isolados com maior freqüência do útero de éguas incluem: Streptococcus do grupo do C, Escherichia coli, Sthaphilococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Enterobacteriaceae. Infecções bacterianas uterinas estão relacionadas a falhas na concepção, perda embrionária precoce entre outros (Frontoso, 2008). Material e Métodos Durante dois ciclos estrais, nos meses de agosto de 2010 a março de 2011, sete éguas da raça Bretão Postier, com idade de 15 anos, sem histórico de acúmulo de liquido intra-uterino, foram inseminadas com sêmen fresco proveniente de um jumento da raça Pêga. Em cada ciclo foi coletado o swab uterino, para o isolamento da microbiota seguindo este protocolo, baseado na Inseminação Artificial (IA): antes da IA (Ao – controle); quatro horas após IA (A1) e 24 horas após IA (A2). As amostras foram obtidas através de um swab estéril introduzido no útero com auxilio de uma haste de metal esterilizada, e acondicionado no meio de Stuart e mantido sob refrigeração. No laboratório foram plaqueados no Agar MacConkey e Agar Sangue, incubados à 37 ºC em aerobiose. Após 24 a 72 horas foram observadas as morfologias das colônias isoladas, e as mesmas classificadas de acordo com Bergey´s Manual of Sistematic Bacteriology (Krieg; HOLT, 1984). Resultados e Discussão Houve isolamento de 45 microrganismos de 24 amostras coletadas, com a seguinte distribuição: 13/45 Streptococcus β hemolítico (28,8%); 12/45 Escherichia coli (26,6%); 5/45 Enterobacter spp (11,1%); 5/45 Klebsiella spp (11,1%); 2/45 Serratia spp (4,4%); 8/45 sem crescimento (17,7%), esses achados estão em concordância com Frontoso et al. (2008). Quando comparado os isolamentos com o momento da coleta, houve predomínio de Streptococcus β hemolítico (41,6%) no Ao e A1 e Escherichia coli (30,7%) no grupo A2. Entretanto, ressalta-se que o isolamento bacteriológico do útero, necessita de outros exames complementares, como a citologia e a ultrassonografia para o diagnóstico de endometrite. Referências bibliográficas Frontoso R, De Carlo E, Pasolini MP, Van Der Meulen K, Pagnini U, Iovane G, De Martino L. Retrospective study of bacterial isolates and their antimicrobial susceptibilities in equine uteri during fertility problems. Vet. Sci., v. 84, p.1-6, 2008. Krieg NR, Holt JG (Ed.). Bergey's manual of systematic bacteriology. Baltimore: Williams & Wilkins, 1984. v.1. Palavras-chave: endometrite, eqüino, swab. Keywords: endometritis, equine, swab.



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Fertilidade e gestação em uma égua com idade avançada: relato de caso Fertility and gestation in a mare with advanced age: case report

B.D. Smaniotto1, E.P. Rosa

Universidade Paulista UNIP, Bauru, SP.

1E-mail: [email protected] Introdução A subfertilidade em éguas constitui um dos maiores problemas na criação comercial equina, causando grande perda econômica por impossibilitar a produção de um potro por ano. A idade avançada da égua é considerada uma de suas causas já que está relacionada com maior perda gestacional e complicações reprodutivas mais graves (Carnevale e Ginther, 1992; Ginther, 1985). O objetivo deste trabalho foi relatar o estudo da fertilidade de uma égua de 20 anos e o acompanhamento de sua gestação entre agosto de 2009 a outubro de 2010. Relato do caso Foi estudada uma égua de 20 anos de idade, meio sangue Mangalarga Marchador, com histórico de dois partos desde 2001, no Hospital Veterinário da Universidade Paulista UNIP, Campus Bauru – São Paulo. O acompanhamento do desenvolvimento folicular e a detecção do estro foram obtidos por aparelho de ultrassom com transdutor linear de 7,5 MHz e por palpação retal. A cobertura ocorreu em piquete de areia de 500 m2 por garanhão da raça Paint Horse apto para a reprodução. Realizamos ultrassonografia para diagnóstico de gestação no 14º dia pós-cobertura e para o seu acompanhamento até o 36o dia, quando passamos a utilizar a palpação retal mensalmente até o parto. Observou crescimento embrionário e fetal normais. A gestação durou 11 meses e 26 dias, com o nascimento de um potro viável sem complicações para a égua e o neonato.

Discussão Segundo Carnevale e Ginther (1992) e Ginther (1985) éguas com idade avançada apresentam grande dificuldade para reprodução, porém é possível obter resultados positivos na reprodução de éguas idosas, como ocorreu neste relato, quando se utiliza métodos eficazes de diagnóstico e controle de patologias uterinas, ovarianas e sistêmicas, além da manutenção de certos pontos como o enriquecimento e suplementação alimentar, ausência de patologias e acompanhamento gestacional. A fêmea relatada apresentou resultados satisfatórios em relação ao ciclo estral, ovulação e gestação, resultando na produção de um produto viável.

Referências bibliográficas Carnevale EM, Ginther OJ. Relationships of age to uterine function and reproductive efficiency in mares. Theriogenology, v.37, n.5, p.1101-1115, 1992. Ginther OJ. Embryonic loss in mare: incidence, time of occurrence and hormonal involvement. Theriogenology, v.23, n.1, p.77-89, 1985. Palavras-chave: égua idosa, gestação, subfertilidade. Keywords: gestation, old mare, subfertility.



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Influência do momento de inseminação no sexo fetal em éguas de programa de transferência de embriões

Influence of insemination moment in fetal gender determination in mares of embryo transfer program

A.P.L. Maia1,3, C.K. Kiya2, M.V. Resende2, C.E.A. Biscarde2, M.A.F. Souza2, L.E.P. Martins2, J.C. Andrade Moura, A.L. Gusmão2

1EAO Agropec, Ibicuí, BA; 2Escola de Medicina Veterinária, UFBA, Salvador, BA 3E-mail: [email protected]

Introdução A indústria equina é uma atividade de elevada importância para o agronegócio brasileiro movimentando cerca de 7,5 bilhões de reais e gerando cerca de 3,2 milhões de empregos diretos e indiretos. O conhecimento do sexo do potro antes do seu nascimento é de suma importância para que se realizem estratégias de comercialização próprias àqueles animais. O objetivo deste trabalho foi observar a relação entre o momento de inseminação e a ovulação das éguas com os resultados da sexagem fetal. Material e Métodos O experimento foi realizado no município de Itagibá – Bahia, com éguas da raça Mangalarga Marchador. Utilizando-se as gestações de 35 matrizes e 74 receptoras embriões. Das 35 matrizes, 19 foram inseminadas entre 12 e 24 horas da ovulação e 16 entre 24 e 36 horas. Dos 74 embriões, 35 foram inseminados entre 12 e 24 horas e 39 entre 24 e 36 horas do momento de ovulação das doadoras. O controle folicular foi realizado via ultrassonografia a cada 12 horas, sendo utilizado sêmen fresco. A sexagem fetal foi realizada pela observação do tubérculo genital aos 100 dias de gestação via ultrassonografia utilizando transdutor linear de 5MHz. Na análise estatística foi realizado o teste Qui-quadrado, utilizando o controle com a proporção de macho:fêmea esperada de 1:1. O nível de significância utilizado foi de 5%. Resultados e Discussão Observou-se uma proporção de 94,7% de fetos machos nas matrizes que foram inseminadas 12 a 24 horas antes da ovulação, sendo observada diferença estatística (p<0,01), já nas matrizes inseminadas entre 24 e 48 horas antes da ovulação foram observados 81,3 % de fêmeas, mas sem diferença estatística (p>0,01), isto devido ao menor número, apenas 16 matrizes. Em relação às receptoras, os embriões produzidos com inseminações entre 24 e 36 horas antes da ovulação apresentaram um número maior de fêmeas 89,7% (p<0,01), por outro lado quando as inseminações foram realizadas entre 12 e 24 horas o número de machos foi de 68,6%, porém sem diferença estatística(p>0,01). Em equinos, Ferraz (2005) observou que éguas submetidas à monta natural entre 36 e 48 horas antes da ovulação pariram 67,6% de fêmeas, sendo que esta proporção diminuiu quanto mais próximo desse fenômeno biológico. Maior número de indivíduos do sexo masculino (64,4%) nasceram no grupo de éguas submetidas à monta entre 0 e 12 horas após ovulação. Os achados do presente estudo corroboram com os encontrados por Martinez et al. (2004) em bovinos, onde a proporção de fêmeas aumenta conforme a distância entre as inseminações e o momento de ovulação. Concluiu-se que houve desvio da proporção do sexo de acordo com o momento de inseminação artificial em relação à ovulação em éguas. Referências bibliográficas Ferraz LD. Estudo clínico do efeito do momento da cópula em relação à ovulação nas taxas de concepção e prenhez, proporção sexual e morte embrionária precoce na raça PSI. 2005. 68f. tese (doutorado em medicina veterinária) FCAV, UNESP, Jaboticabal, 2005. Martinez F, Kaabi M, Martinez-Pastor F, Alvarez M, Anel E, Boixo JC, De Paz P, Anel L. Effect of the interval between estrus onset and artificial insemination on sex ratio and fertility in cattle: a field study. Theriogenology, v.62, p.1264-1270, 2004. Palavras-chave: éguas, momento de inseminação, sexagem fetal. Keywords: fetal gender, insemination moment, mare.



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Efeitos da ocitocina e enrofloxacina em receptoras de embrião equino Effects of oxytocin and enrofloxacin in recipient of equine embryo

M.S. Ribeiro1, A.P. Maia2, C.E.A. Biscarde1, C.K. Kiya1, M.V. Resende1, L.E.P. Martins1, A.L.

Gusmão1, J.C. Andrade Moura1

1Escola de Medicina Veterinária, UFBA, Salvador, BA.

2EAO Agropecuária, Ibicuí, Bahia E-mail: [email protected]

Introdução A presença de líquido intrauterino após a ovulação em algumas éguas receptoras é um indicativo da falha do processo de limpeza do útero tornando-se um meio de cultivo ideal para proliferação de bactérias, podendo afetar o sucesso em programas de transferência de embrião. Para isso é necessário o uso de algumas estratégias para estimular a contração do útero ou de antibióticos para evitar infecções uterinas. Objetivou-se avaliar os efeitos da aplicação da ocitocina e enrofloxacina sobre a taxa de prenhez em receptoras de embrião equino. Material e Métodos Foram utilizadas 162 receptoras para embriões de éguas da raça Mangalarga Marchador, sendo divididas em dois grupos, de acordo com os tratamentos no dia da ovulação: no grupo I (controle) foram administrados 2 mL e 20 mL de soro fisiológico na tábua do pescoço e na garupa, respectivamente; no grupo II os animais foram tratados com 2mL (20 UI) de ocitocina (Decomoton, Hertape-Calier, São Paulo, Brasil) e 20 mL de enrofloxacina (Flotril, Schering-Plough, São Paulo, Brasil) por via intramuscular. Foram transferidos somente embriões classificados em grau 1 e 2. O diagnóstico de prenhez foi realizado 7 dias após a inovulação por ultrassonografia utilizando transdutor linear de 5MHz. Na análise estatística foi realizado o teste Qui-quadrado com nível de significância de 5%. Resultados e Discussão Observou-se que 81,1% das éguas tratadas com ocitocina e enrofloxacina apresentaram prenhez positiva, enquanto que no grupo I a taxa de prenhez foi de 63,6%, sendo observada diferença estatística (p<0,05). Esse resultado foi semelhante ao encontrado por Rasch et al. (1996) onde obtiveram melhores taxas de prenhez, as éguas tratadas com 15 e 25 UI de ocitocina do que as não tratadas, após a inseminação. A ocitocina é comumente utilizada após a cobertura ou inseminação artificial para remover o líquido intrauterino pelo aumento da contração do miométrio propiciando um ambiente uterino adequado para uma gestação. A enrofloxacina age prevenindo a aderência bacteriana no útero e, consequentemente, a endometrite (González et al., 2009). Conclui-se que o uso profilático de ocitocina e enrofloxacina no dia da ovulação influencia positivamente na taxa de prenhez em receptoras de embrião equino.

Referências bibliográficas González C, Moreno L, Fumuso E, García J, Rivulgo M, Confalonieri A, Sparo M, Sánchez Bruni S. Enrofloxacin-based therapeutic strategy for the prevention of endometritis in susceptible mares. J Vet Pharmacol Ther, v.33, p.287-294, 2009. Rasch K, Schoon HA, Sieme H, Klug E. Histomorphological endometrial status and influence of oxytocin on the uterine drainage and pregnancy rate in mares. Equine Vet J, v.28, n.6, p.455-460, 1996. Palavras-chave: égua, taxa de prenhez, transferência de embrião. Keywords: embryo transfer, mare, pregnancy rate.



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Influências do sêmen na taxa de concepção em transferência de embrião em éguas Quarto de milha e Paint horse no nordeste Paraense

Influence of semen on conception rate in embryo transfer in mares Quarter and Paint horse northeast of Pará

A.C. Farias, E.Y.E. Mesquita, H.F.L. Ribeiro, S.T. Rolim Filho, H.G.S. Favacho, A.C. Oliveira Neta, S.M.K.C. Sousa, P.N. Magalhães

Setor de Reprodução Animal (SRA)

Email: [email protected] Introdução Visando um maior aproveitamento e intensificação do ritmo do melhoramento genético e a eficiência reprodutivas em equinos, criou-se a necessidade de utilização de biotecnologias reprodutivas, com o objetivo de suprir a demanda existente em relação a cavalos com alto potencial genético, nos sistemas de produção equina (Machado, 2002). A criopreservação do sêmen eqüino representa importante instrumento no melhoramento genético da espécie, pela maximização do uso de bons reprodutores. Porém, os índices de fertilidade obtidos com eqüinos são ainda muito inferiores aos obtidos com sêmen congelado de bovinos. Segundo Kloppe et al. (1988), a menor taxa de fertilidade do sêmen congelado, comparada à do sêmen fresco, constitui um dos maiores entraves à plena difusão dessa biotecnologia. O presente trabalho visa comparar a eficiência do sêmen freco, resfriado e congelado na taxa de concepção de éguas, no nordeste Paraense. Material e métodos Foram utilizadas 120 éguas, sendo elas 43 doadoras de embrião, puras das raças Quarto de Milha e Paint Horse (com a idade variando entre 3 e 18 anos ) pesando entre 350 e 600 kg e 77 éguas receptoras de embrião, sem raça definida com idade variando entre 3 e 10 anos, pesando entre 350 e 500 kg. AS doadoras com folículos acima de 35 mm foram induzidas (D0) com Deslorelina e inseminadas com 48 horas após a indução, sendo os embriões coletados e transferidos no D7. Foram inseminados 59 éguas com sêmen fresco, 19 com sêmen resfriado e 26 com sêmen congelado. Resultados e Discussão No presente trabalho encontrou-se uma taxa de concepção de 88,13%, 68,42%, 73,07%, com uso de sêmen fresco, resfriado e congelado respectivamente. Houve diferença significativa na taxa de concepção da doadora, com o uso sêmen fresco e resfriado (P<0,05), não diferindo em relação ao sêmen congelado (P>0,05), o que difere da literatura, que afirma que o semên congelado se obtém resultados inferiores ao fresco (Vandervall, 1997; NEWCOMBE,1999) A diferença de concepção entre o sêmen fresco e resfriado provavelmente se deve à dificuldade em relação transporte, o que pode ter determinado a baixa taxa de concepção. Segundo, O sucesso do uso do sêmen resfriado/estocado depende de muitos fatores que se confundem, como: taxa de resfriamento, temperatura de armazenamento, composição do meio extensor (diluidor), dose inseminante, número de inseminações, qualidade do sêmen a fresco, manuseio do sêmen (Malmgren, 1998; Batelier et al., 2001). A partir disso, conclui-se que a taxa de concepção entre sêmen fresco e congelado não apresenta diferença estatística, porem o sêmen resfriado, apesar de se obter taxas aceitáveis de concepção, sua viabilidade está diretamente relacionada a manipulação e acondicionamento corretos. Referências bibliográficas Batellier F.; Vidament M.; Fauquant J.; Duchamp G.; Arnaud G.; Yvon, J.M.; Magistrini M. Advances in cooled semen technology. Anim Reprod Sci, v.68, p.181-190, 2001. Malmgren L. Effectiveness of two systems for transporting equine semen.Theriogenology, v.50, p.833-839, 1998. Newcombe JR. Practical evaluation of the fertilizing capacity of frozenthawed horse semen. Vet Rec, v.145, p.46-47, 1999. Vanderwall DK. The challenges of using frozen semen in horse breeding. In: Annual Conference of the Society for Theriogenology, 1997, Canadá. Proceeding... Canadá: Society for Theriogenology, 1997, p.178-179. Palavras-chave: éguas, prenhez, reprodução, sêmen. Keywords: mares, pregnancy, reproduction, semen.



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Resposta ovulatória em éguas Bretão Postier tratadas com Deslorelina Ovulatory response of Breton-Postier mares treated with Deslorelina

P.C.A. Silva1, M.A.F. Sá, L.L. Bezerra, D.F. Caram, R.G.C. Junqueira, J.C.F. Jacob

Departamento de Reprodução e Avaliação Animal, UFRRJ, Seropédica, RJ.

1E-mail: [email protected] Introdução A indução da ovulação é uma estratégia utilizada para melhorar a eficiência reprodutiva. Os agentes indutores são capazes de aumentar a taxa de concepção, possibilitar uma única cobertura ou inseminação, além de permitir a sincronização de doadoras e receptoras de embrião. Deste modo o estudo teve como objetivo avaliar o tempo entre a indução e a ovulação em éguas Bretão-Postier utilizando a Deslorelina. Material e Métodos Foram utilizados 18 ciclos estrais de sete éguas Bretão Postier provenientes da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, divididas em grupo 1 - controle, n = 10 ciclos (1 ml de solução salina i.v.) e um grupo 2 - tratado, n = 8 ciclos (750µg de Deslorelina i.v.). As éguas foram avaliadas diariamente por palpação e ultrasonografia retal até que atingissem um folículo ovariano ≥ 35mm, quando foi realizada a indução da ovulação. Vinte e quatro horas após a indução as éguas passaram a ser avaliadas a cada 6 horas até que fosse detectada a ovulação. Os dados foram avaliados pelo Teste T ou Mann-Whitney de acordo com a normalidade dos dados.

Resultados e Discussão A média do intervalo do tratamento à ovulação foi menor (P ≤ 0,05) no grupo 2 (48 ± 10.1h) do que no grupo 1 (88.8 ± 34h). Palmer (1993) utilizando deslorelina verificou que a maioria das éguas ovulam entre 36 e 48 horas. O diâmetro do folículo dominante no dia do tratamento não diferiu (P ˃ 0,05) entre os ciclos tratados com Deslorelina (36.6 ± 1.17mm) e salina (37.6 ± 1.64mm). Porém o diâmetro do folículo pré ovulatório seis horas antes de detectar a ovulação no grupo 2 (39 ± 3.46mm) foi menor (P ≤ 0,05) que o grupo 1 (43 ± 3.22mm). Maio et al. (2010) obteve resultados semelhantes avaliando o diâmetro do folículo ovulatório e o tempo entre o tratamento e a ovulação, onde houve diferença significativa (P=0,001) entre os grupos tratados ( 2500UI de hCG, 750 e 1000µg de Deslorelina) e controle. A média do maior diâmetro folicular após a indução da ovulação foi maior (P ≤ 0,05) no grupo 1 (45.9 ± 3.78mm) do que no grupo 2 (40.6 ± 2.2mm). Referências bibliográficas Palmer E. Induction of ovulation. In: McKinnon AO, Voss JL. Equine reproduction. Malvern: Lea & Febiger, 1993. p.344-347. Maio JRG, Fleury PDC, Sales JNS, Crepaldi GA, Teixeira AA, Souza EDF, Baruselli PS. Dinâmica folicular de éguas adultas cíclicas tratadas com diferentes indutores de ovulação. In: Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Tecnologia de Embrioes, 24, 2010, Porto de Galinhas, PE. Anais... 2010. p.365. Palavras-chave: Deslorelina, éguas, tempo de ovulação. Keywords: Deslorelina, mares, ovulation time.



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Carcinoma de células escamosas em prepúcio de equino com invasão da coluna vertebral: relato de caso

Equine foreskin squamous carcinoma cell with spine invasion: case report

B.F. Agostinho1,3, K.M. Basso2, M.G.M. Chacur1, V.M. Pessoa1, O.C. Sanches2, L. Yamasaki2

1Setor de Reprodução Animal, 2Setor de Patologia Veterinária, Universidade do Oeste Paulista (UNOESTE), Presidente

Prudente, SP. 3E-mail: [email protected]

Introdução O carcinoma de células escamosas é uma neoplasia maligna que se origina na epiderme a partir da diferenciação de queratinócitos (Vail e Withrow, 2007). Nos equinos ocorre com frequência em junções mucocutâneas sendo a região do pênis e prepúcio a mais acometida com maior incidência em garanhões acima de 16 anos com o diagnóstico feito pelo exame histopatológico e o tratamento por exérese cirúrgica com alta tendência a recidiva local e metástases para linfonodos e pulmão (Head et al., 2002). Descrição do caso clínico Foi atendido no Hospital Veterinário Escola da UNOESTE um equino com 7 anos de idade mestiço e castrado com pelagem pampa e mucosa do prepúcio despigmentada. Ao exame físico foi observada no prepúcio uma formação esférica granulomatosa (25cm x 12cm) com superfície irregular e secreção serosanguinolenta. Foi realizada biópsia da massa para fins de diagnóstico. Resultados e Discussão A histopatologia revelou proliferação do epitélio pavimentoso estratificado com pleomorfismo, anisocitose, anisocariose, nucléolos evidentes e pérolas córneas com infiltrado inflamatório polimorfonuclear, caracterizando carcinoma de células escamosas. A exérese cirúrgica foi realizada com recidiva da neoplasia após 2 meses, constatada por novo exame histopatológico. A segunda cirurgia foi realizada e nova recidiva ocorreu após 3 meses. Optou-se pela eutanásia do paciente 9 meses após o diagnóstico devido à intensificação da debilidade física. A necropsia revelou os seguintes achados: massa peri-prepucial de 30cm ulcerada e hiperêmica com compressão do pênis, infiltração na musculatura abdominal estendendo-se até as vértebras sacrais (S1 e S2) e aderida ao rim direito e a artéria mesentérica. Conforme as informações descritas no caso clínico, constatou-se a importância da avaliação por tempo prolongado do paciente visando detectar a recidiva local do carcinoma, bem como em regiões anatômicas adjacentes, concordando com o relato de Head et al. (2002).

Referências bibliográficas Head KW, Else RW, Dubielzig A. Tumors of the alimentary tract. In: Meuten, DJ Tumors in Domestic Animals. 4.ed. Iowa State: Blackwell Publishing, 2002. p.450-451. Vail DM, Withrow SJ. Tumors of the skin and subcutaneous tissues In: Withrow S J, Vail D M Small Animal Clinical Oncology. 4.ed. St. Louis: Saunders Elsevier, 2007. p.382-384. Palavras-chave: carcinoma, equino, metástase, vertebral prepúcio. Keywords: carcinoma, equine, prepuce, vertebral metastasis.



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Resfriamento e criopreservação de sêmen eqüino com diluidores modificados com caseína

Cooling and cryopreservation of equine semen with casein modified extenders

M.A. Lagares1, H.S. Martins, I.A. Carvalho, C.A. Oliveira Junior, B.C. Cruz, M.R. Souza, C.F.A.M. Penna,C.A. Rezende, M.R.J.M. Henry

Escola de Veterinária da Universidade Federal de Minas Gerais, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução A composição química dos diluidores de sêmen é um dos principais fatores na sobrevivência do espermatozóide durante a criopreservação. Embora a maioria dos diluidores contenha leite, é possível que apenas algumas frações do leite sejam necessárias para exercer o efeito benéfico sobre a função espermática. Entre elas, a caseína, proteína em maior concentração no leite bovino (2,7%), parece ser a responsável por esse efeito protetor. Os objetivos do presente trabalho foram aumentar a qualidade do sêmen resfriado e congelado eqüino por meio da substituição do leite desnatado, de um meio usado na rotina de inseminação artificial, pela caseína e verificar a concentração de caseína que melhora a qualidade seminal. Material e Métodos Foi coletado sêmen de 6 garanhões e avaliada a motilidade e vigor espermático com microscopia de campo claro (100x). Para o resfriamento do sêmen foi adicionado um diluidor de cada grupo de forma a se obter entre 25 a 50 x106 esp./ml. Os tratamentos foram distribuídos em TR1: controle, diluidor de Kenney et al. (1975) (leite em pó desnatado+glicose; 0,6% caseína); TR2: TR1 +substituição do leite desnatado por caseína a 0,6%; TR3: TR1+ adição de caseína até a concentração de 2,7%; TR4: TR1 + substituição do leite desnatado por caseína a 2,7%. Após a diluição, as amostras de sêmen foram avaliadas quanto à motilidade espermática e vigor com microscopia de campo claro (100x). Posteriormente foram resfriadas até +5°C (0,27°C/min) em aproximadamente 2 horas, armazenadas em refrigerador, e reavaliadas em 24 horas. Para o congelamento, as amostras de sêmen foram centrifugadas com diluidor de Kenney e ressuspendidas com diluidores para congelamento: TC1) controle, diluidor INRA 82 (Battelier et al., 1997), TC2) INRA 82 + substituição do leite por caseína 1,35% (concentração encontrada no diluidor) e TC3) INRA 82 + substituição do leite por caseína 2,7%. As amostras de sêmen foram congeladas, posteriormente descongeladas e submetidas à análise computadorizada da motilidade espermática. Para análise das características do sêmen resfriado foi utilizado o teste não-paramétrico de Friedman e posterior análise pareada com o teste de Willcoxon e para o congelado foi usada ANOVA blocando garanhão e o teste t para os diluidores. Foi utilizado o programa SAEG para as análises. Resultados e Discussão As médias do percentual de motilidade total, progressiva e vigor do sêmen resfriado foram TR1) 56,7%; 41,3%; 3; TR2) 48,3%; 26,7%; 2,4; TR3) 57,5%; 42,9%; 3,1 e TR4) 53,3%; 39,2%; 2,6, respectivamente. Após o descongelamento, as médias do percentual de motilidade total e progressiva obtidas com os diluidores foram TC1) 17,6% e 4,4%; TC2) 21,1% e 12,3%; e TC3) 18,5 e 8,2%, respectivamente. Não houve diferença estatística significativa quanto às características seminais avaliadas com os diluidores para sêmen resfriado e congelado (P>0,05). As concentrações de 0,6 e 1,35% de caseína nos diluidores de resfriamento e congelamento, respectivamente, exerceram efeito protetor semelhante aos diluidores controle e com concentrações superiores. Portanto, a caseína parece ser a responsável pelo efeito protetor do espermatozóide eqüino durante a criopreservação e o aumento de sua concentração não melhorou a qualidade seminal. Palavras-chave: caseína, criopreservação, espermatozóide, garanhão, resfriamento. Keywords: casein, cooling, cryopreservation, sperm, stallion.



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Avaliação da variação sazonal da congelabilidade do sêmen de cavalos Pantaneiros Evaluation of seasonal variation of semen freezability in Pantaneiro’s horses

J.A.S. Ribas1,3, J.F.S. Silva2, I.C.N Cunha2, C.R. Quirino2

1Departamento de Fisiologia, Universidade Federal Fluminense, Niterói, RJ; 2 Laboratório de Reprodução Animal, Universidade Estadual do Norte Fluminense, Campos dos Goytacazes, RJ.

3E-mail: [email protected] Introdução Em regiões subtropicais e boreais, espécies que apresentam reprodução sazonal como os eqüinos, têm a congelabilidade do sêmen influenciada pelas estações do ano (Janett et al., 2003). No entanto, pouco se conhece sobre esta variação em regiões tropicais, como o Pantanal Mato-Grosssense, onde as estações se resumem a seca e cheia, a variação anual do fotoperíodo é muito pequena e devido ao relevo, os animais estão bem nutridos durante todo o ano. Como o congelamento do sêmen e a inseminação artificial são importantes instrumentos para a preservação e democratização do material genético da raça Pantaneira, esta pesquisa objetivou avaliar a influência das estações da seca (S) e cheia (C) sobre a congelabilidade do sêmen de cavalos Pantaneiros, no Pantanal de Mato Grosso. Material e Métodos No município de Poconé/MT (Latitude 16o 15’ S, Longitude 56o 37’ W, altitude de 80 m) foram realizadas, ao final de cada estação (abril-final da cheia e outubro-final da seca), cinco colheitas de sêmen, por meio de vagina artificial, de sete garanhões da raça Pantaneira. Após cada colheita, examinou-se o sêmen (CBRA, 1998), que em seguida foi processado e congelado em meio MP 50 como proposto por Papa et al. (2002). Após cada estação, descongelou-se o sêmen a 37o C/30 seg. e avaliou-se quanto à motilidade total e progressiva (CASA), patologia espermática; integridade (carboxifluoresceina e iodeto de propídio) e funcionalidade (teste hiposmótico) da membrana espermática (Papa et al., 2002). Os resultados foram submetidos a análise de variância (ANOVA), comparando-se as médias pelo teste de Tukey com α=0,05. Resultados e Discussão Analisando-se o sêmen pós-descongelamento, observou-se que não houve variação, entre as estações, nos parâmetros avaliados (todos em %): motilidade total (C- 26,2 ± 10,7; S -26,8 ± 8,2); motilidade progressiva (C- 18,5 ± 8,3; S- 19,7 ± 6,9); espermatozóides anormais (C- 29,9±5,4; S- 29,0± 4,0); espermatozóides com membranas íntegras (fluorescência) (C- 19,2± 6,9; S- 19,6±5,5); espermatozóides reativos ao teste hiposmótico (membrana funcional) (C- 16,9±6,8; S- 17,9±5,1). Estes resultados chamam a atenção, uma vez que pesquisas realizadas em paises de clima temperado sempre demonstram variação sazonal da qualidade tanto do sêmen fresco quanto do congelado (Jannet et al., 2003). Pode-se explicar esta discordância entre os resultados pois: (1) A qualidade dos ejaculados dos equinos no Pantanal de Poconé não varia entre as estações devido as pequenas mudanças anuais no fotoperíodo da região e pela excelente qualidade das pastagens durante todo o ano (Ribas, 2005); (2) as proteínas do plasma seminal, que na Europa oscilam sazonalmente influenciando na congelabilidade do sêmen (Jannet et al., 2003), variam pouco entre as estações do ano na região do Pantanal, como observado por Ribas (2005). Conclui-se que nas condições experimentais as estações do ano não influenciaram a congelabilidade do sêmen, podendo-se utilizar esta biotecnologia em ambas. Referências bibliográficas Janett F, Thun R, Niederer K, Burger D, Hassig M. Seasonal changes in semen quality and freezability in Warmblood stallion. Theriogenology, v.60, p.453-461, 2003. Manual para exame andrológico e avaliação de sêmen. 2.ed. Belo Horizonte, 1998. 49p. Papa FO, Zahn FS, Dell’Aqua Jr JA. Alverenga MA.Utilização do diluente MP 50 para criopreservação de sêmen eqüino. Rev Bras Reprod Anim, v.26, p. 184-187, 2002. Ribas JAS. Influência das estações cheia e seca nas características reprodutivas e seminais de garanhões da raça Pantaneira no pantanal de Poconé, MT. 2005. 139f. Tese (Mestrado) - UENF, 2005. 139f. Palavras chave: congelamento, equinos, sazonalidade, sêmen, Keywords: equine, freezability, seasonality, semen.



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Efeito da adição de glutationa peroxidase e cisteína aos diluidores Botu-sêmen® e ACP-105® na viabilidade de espermatozóides eqüinos refrigerados

Effect of glutathione peroxidase and cysteine addition to Botu-Semen® and ACP-105® extenders on the viability of equine chilled spermatozoa

V.N. Maia1,2,4, G.F. Carneiro3, S.V. Silva1, F.C. Almeida1, M.M.P. Guerra1

1Laboratório de Andrologia (ANDROLAB), UFRPE, Recife, PE; 2CEPE, Gravatá, PE; 3Universidade Federal Rural de Pernambuco, UAG, Garanhuns, PE.

4E-mail: [email protected] Introdução A refrigeração do sêmen é uma técnica importante na reprodução eqüina por possibilitar a manutenção da motilidade e da fertilidade do espermatozóide durante um prazo de até 72 horas (Ball et al., 2001). No entanto, para que estas células permaneçam viáveis, é fundamental o uso de diluidores que proporcione uma interação de seus diferentes componentes com as células espermáticas (Cunha e Lopes, 2001). Dessa forma, este trabalho teve como objetivo estudar o efeito da adição dos antioxidantes glutationa peroxidase e cisteína aos diluentes Botu-Sêmen® e ACP-105® na viabilidade de espermatozoides eqüinos refrigerados. Material e Métodos Quatro garanhões Mangalarga Marchador, com idade de 4 a 8 anos, foram submetido a colheitas de sêmen (n=3) com vagina artificial a intervalos de 24 horas, totalizando 12 amostras de sêmen. Duas alíquotas de cada ejaculado foram submetidas a diluição utilizando Botu-sêmen® ou ACP-105®. A amostra de diluente + sêmen foi dividida para formar os grupos experimentais, de acordo com a adição de glutationa peroxidase (GPx; 5U) ou cisteína (Cist; 5mM): G1 = Botu-sêmen; G2 = ACP-105®; G3 = Botu-sêmen + GPx1; G4 = Botu-sêmen + Cist4; G5 = ACP-105® + GPx; G6 = ACP-105® + Cist; G7= Botu-sêmen + GPx + Cist e G8 = ACP-105® + GPx + Cist. As amostras de sêmen foram avaliadas quanto à motilidade total (MT), vigor, integridade de membrana (iM) e de acrossoma (iAc), e potencial da membrana mitocondrial (PMM), após 0 (T0), 12 (T12h), 24 (T24h) e 36 horas (T36h) de refrigeração. Os dados foram submetidos à análise de variância (Teste F) que separou como causa de variação o efeito de grupos e tempos de análise do sêmen (0h, 12h, 24h e 36h de refrigeração). Para todas as análises estatísticas foi adotado P<0,05.

Resultados e Discussão No T12h, as amostras do grupo Botu-sêmen®, Botu-sêmen® + GPx e Botu-sêmen® + GPx + cisteína apresentaram maior MT (P<0,05) do que a de ACP-105® + cisteína. Enquanto no T24h, as amostras diluídas em Botu-sêmen® + GPx + cisteína apresentaram maior MT (P < 0,05) do que as diluídas em ACP-105® e ACP-105® + cisteína. O vigor no T12h foi maior (P < 0,05) nas amostras de Botu-sêmen® + GPx + cisteína do que nas de ACP-105® e ACP-105® + cisteína. No T24h, o vigor do ACP-105® + GPx e Botu-sêmen® + GPx + cisteína foram maiores (P<0,05) do que as de ACP-105® e ACP-105® + cisteína. A iM e o PMM não diferiram (P > 0,05) entre grupos, em todos os tempos de avaliação, enquanto a iAc no T24h foi maior (P < 0,05) nas amostras de ACP-105® + cisteína do que nas de Botu-sêmen®. Com base nos resultados, conclui-se que o ACP-105® se mostrou um diluente inferior para a preservação de sêmen eqüino refrigerado quando comparado com o Botu-sêmen e que o uso da GPx e da cisteína pode contribuir com a preservação das células espermáticas diluídas em Botu-sêmen durante 24 horas de refrigeração. Referências bibliográficas Ball BA, Medina V, Gravance CG, Baumber J. Effect of antioxidants on preservation of motility, viability and acrossomal integrity of equine spermatozoa during storage at 5ºC. Theriogenology, v.56, p.577-589, 2001. Cunha ICN, Lopes MD. Efeito de diferentes períodos de equilíbrio e meios diluidores sobre o sêmen canino congelado e descongelado. Rev Bras Reprod Anim, v.25, n.3, p.470-471, 2001.



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Efeito da refrigeração a16ºC e glutationa em espermatozóides equinos criopreservados Efect of storage at 16ºC and glutathione on cryopreserved equine spermatozoa

R.A. Oliveira, S.F. Lima, R.L.F. Piersanti, C.A. Salvagni, M.L. Gambarini

Escola de Veterinária e Zootecnia, Universidade Federal de Goias

[email protected] Introdução A refrigeração e crispreservação do espermatozóide equino estão sujeitas a problemas relativos à redução na viabilidade e fertilidade em consequência de lesões que incluem a peroxidação de lipídios da membrana, o que pode ser diminuído pela adição de antioxidantes ao plasma seminal ou aos diluentes. Nesse estudo objetivou-se avaliar a resposta do espermatozoide equino à criopreservação após refrigeração passiva por 24 hs, seguida da adição de diluente com glutationa e submetidos ao sistema automatizado ou manual de resfriamento pré-congelamento. Material e Métodos Tres ejaculados de 12 garanhões foram diluidos em Botu-Semen®, refrigerados a 16ºC/24hs, centrifugados, ressuspendidos com Botucrio® e usados para os tratamentos com glutationa (GSH): controle; 2,5; 5; 7,5 e 10mM. Após envase as amostras foram refrigeradas automatica ou manualmente e congeladas na máquina TK 3000®. Ao descongelamento avaliou-se a motilidade progressiva (MP), vigor, integridade da membrana plasmática, reação ao teste hiposmótico e integridade do acrossoma.

Resultados e Discussão A MP reduziu após refrigeração por 24hs, mas as demais variáveis não foram afetadas. O tratamento 2,5mM não alterou as variáveis, mas quanto maior a concentração adicionada maior a perda de MP e vigor (P < 0,05). maiores concentrações de GSH reduziram o pH (P < 0,05) sem alterar a osmolaridade. Ao descongelamento as amostras com 2,5 mM e resfriadas manualmente mostraram maior homogeneidade de resposta em todas as variáveis, com exceção da integridade de acrossoma (P < 0,05). O resfriamento dos espermatozóides pode provocar danos à membrana plasmática e resultar em perda da MP e danos acrossomais. No semen equino a oxidação ocorre por células lesadas e leucócitos (Almog et al. 2008), e o resfriamento induz a ruptura do acrossoma e a capacitação espermática (Pommer et al. 2002). O pH baixo reduz a longevidade espermática na ausencia de mecanismos de redução dos íons hidrogenio no meio extracelular, e induz a diminuição reversível da MP, o que mascara a ação da GSH. Os resultados com 2,5mM em refrigeração manual sugerem ser essa uma alternativa para garanhões cujos espermatozóides apresentam baixa tolerancia ao resfriamento e/ou criopreservação. Referências bibliográficas Almog T, Naor Z. Mitogen activated protein kinases (MAPKs) as regulators of spermatogenesis and spermatozoa functions. Mol Cell Endocrinol v.282,p. 39–44, 2008. Pommer AC, Rutllant J, Meyers SA. the role of osmotic resistance on equine spermatozoal function. Theriogenology v.58, p.1373-84, 2002. Palavras-chave: semen equino, antioxidante, resfriamento passivo, criopreservação. Keywords: equine semen, antioxidant, passive cooled storage, cryopreservation.



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Comparação da fragmentação do DNA espermático de sêmen congelado de equinos da raça Mangalarga Marchador com relação a outras raças

Comparison between sperm DNA fragmentation in frozen semen from Mangalarga Marchador and others breeds stallions

M.C. Farrás1, H.N. Ferreira, E.G. Fioratti, C.P. Freitas-Dell'Aqua, C. Ramires Neto, M.F.S.

Reghini, F.O. Papa, M.A. Alvarenga

1Departamento de Reprodução Animal e Radiologia Veterinária, FMVZ, UNESP, Botucatu, SP. 1E-mail: [email protected]

Introdução Nas últimas décadas, muitos estudos têm sido realizados nas diferentes espécies com o intuito de se determinar os fatores envolvidos no processo da fragmentação do DNA espermático. Em trabalhos recentes, um novo teste denominado Sperm-Halomax test® tem se mostrado tão eficiente quanto a outros tradicionais para avaliar a fragmentação do DNA do espermatozóide. O presente experimento teve por objetivo utilizar o Teste Dispersão de Cromatina Espermática para avaliar a fragmentação da cromatina espermática de sêmen congelado de garanhões das raças Mangalarga Marchador em comparação a outras raças (Brasileiro de Hipismo, Puro Sangue Árabe e Quarto de Milha). Material e Métodos Foram analisadas 22 amostras de sêmen congelado de 12 garanhões da raça Mangalarga Marchador (Grupo 01) e 10 de garanhões pertencentes a outras raças como Brasileiro de Hipismo, Puro Sangue Árabe e Quarto de Milha (Grupo 02), com idades entre 04 e 12 anos. Após o processo de descongelação, essas amostras foram submetidas ao processo de avaliação da fragmentação do DNA espermático através da técnica de Dispersão da Cromatina Espermática (SCDtest), denominado Sperm-Halomax test® (ChromaCell SL, Madrid, Espanha). As avaliações foram realizadas no momento logo após a descongelação (H0) e após um período de 04 horas de incubação das amostras a 37oC (H4), sendo então definido o Índice de Fragmentação do DNA Espermático (sIDF). Para análise estatística foi utilizado o teste de variância (ANOVA) em blocos aleatórios e o contraste entre as médias pelo teste Tukey, com nível de significância p<0,05. Resultados e Discussão Foi observado, para os garanhões do Grupo 01, que o sIDF no momento H0 foi de 10,3 ± 7,4% e no momento H4 foi de 23,0 ± 13,0%. Nos garanhões das outras raças constatou-se que o sIDF no momento H0 foi de 9,1 ± 3,9 e no momento H4 foi de 14,5 ±7,7. De acordo com a análise estatística os garanhões do grupo 01 apresentaram diferença significativa entre os momentos avaliados (H0 e H4), diferentemente dos indivíduos pertencentes ao grupo 02, onde não foi averiguada diferença estatística significativa no decorrer do período de incubação. Comparando-se os momentos H0 e H4 dos garanhões do Grupo 01 com os do Grupo 02, foi constatado que após 4 horas de incubação a 37oC, os animais da raça Mangalarga Marchador apresentaram um maior índice de dano à cromática espermática que os animais das outras raças. Dessa forma, outros estudos estão sendo realizados a fim de se determinar a correlação entre os resultados obtidos através da avaliação da fragmentação espermática e a taxa fertilidade. Palavras-chave: fragmentação de DNA espermático, garanhão, sêmen congelado. Keywords: frozen semen, sperm DNA fragmentation, stallion. Apoio Financeiro: FAPESP.



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Triplex Doppler da veia cava caudal fetal felina Triplex Dopler in feline fetal caudal cava vein

B.S. Pereira1,3, L.M.P. Freire1, J.N. Pinto1, L.A. Freitas1, S.F.S. Domingues2, L.D.M. Silva1

1 Laboratório de Reprodução de Carnívoros/FAVET/UECE, Fortaleza, CE; 2 Laboratório de Biologia e Medicina de

Mamíferos Selvagens da Amazônia/ UFPA, Belém, PA. 3E-mail: [email protected]

Introdução O fluxo sanguíneo da veia cava caudal fetal (VCCF) depende da força de contração cardíaca, complacência e pós-carga adequadas, refletindo diretamente a atividade sistólica e diastólica do ciclo cardíaco (Polisca et al., 2010). A maturidade fetal está correlacionada com o aumento do fluxo sangüíneo e da velocidade de pulsação cardíaca (Ji et al., 2003). O objetivo foi avaliar a velocidade do pico sistólico (VPS), velocidade diastólica final (VDF), índice de resistência (IR) e índice de pulsatilidade (IP) da VCCF. Material e Métodos Foram utilizadas dez gatas gestantes, 2-5 anos, pesando 3-5 kg. As medições foram realizadas com um aparelho ultrassonografia SonoAce PICO da Médison, com sonda linear (5-9 MHz). Os fetos mais caudais foram avaliados semanalmente do D14 ao D63 da gestação, com o auxílo do triplex Doppler. O fluxo sanguíneo da VCCF (PVS, EDV, PI e RI) foram registrados. Após análise estatística os dados foram expressos em média e erro padrão.

Resultados e Discussão Os valores da VPS aumentam do D14 para D21 e elevaram até D56, aumentando no D63. A VDF manteve-se estável e aumentou D63. O crescimento das velocidades pode ser influenciado pelo crescimento do cordão umbilical (Paranace et al., 2008). O IR foi constante, apresentando discreto declínio no D21. O IP foi relativamente estável, porém, com redução entre D 21 e D28. A diminuição do IP pode ser atribuída em parte ao desenvolvimento progressivo do leito vascular distal do feto, e a mudanças no tônus e no calibre vascular (Paranace et al., 2006). Segundo Paranace et al. (2008), este fato talvez possa estar correlacionado com a idade do concepto, aumento do comprimento do ventrículo direito e/ou com dimuição da rigidez ventricular. Além disso, a redução do IP está relacionada com o incremento observado na VPS. Estas alterações no IP e na VPS podem ser preditivas da data do parto.

Referências bibliográficas Panarace M, Garnil C, Marfil M, Jauregui G, Lagioia J, Luther E, Medina M. Transrectal Doppler sonography for evaluation of uterine blood flow throughout pregnancy in 13 cows. Theriogenology v.66, p.2113-2119, 2006. Panarace M, Garnil C, Cané L, Rodríguez E, Medina M. Echo-Doppler ultrasonographic assessment of resistance and velocity of blood flow in the ductus venosus throughout gestation in fetal lambs. Theriogenology, v.70, p.648-654, 2008. Polisca A, Scotti L, Orlandi R, Brecchia G, Boiti C. Doppler evaluation of maternal and fetal vessels during normal gestation in rabbits. Theriogenology, v.73, p.358-366, 2010. Palavras-chave: Doppler, gestação, ultrassonografia, veia cava caudal, felino. Keywords: caudal cava vein, Doppler, feline, pregnancy, ultrasonography.



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Indução do estro e ovulação em gatas domésticas após tratamento contraceptivo com acetato de deslorelina (Suprelorin®)

Estrus and ovulation induction in queens after contraceptive treatment with deslorelin acetate (Suprelorin®)

C.L. Ackermann, F.C. Destro, R. Volpato, E. Trevisol, N.R. Sousa, A.A.P. Derussi, M.D. Lopes

Departamento de Reprodução Animal e Radiologia Veterinária, FMVZ, UNESP, Botucatu, SP. 1E-mail: [email protected]

Introdução O controle populacional em carnívoros se constitui em um problema difícil e atual. Entre os métodos contraceptivos reversíveis já utilizados em felinos destacam-se os andrógenos, progestágenos e os agonistas do GnRH(hormônio liberador de gonadotrofinas; Munson et al., 2001). Os agonistas do GnRH inibem a atividade reprodutiva pela supressão direta do eixo hipotalâmico-hipofisário-gonadal tanto em machos como em fêmeas e são considerados uma alternativa a métodos associados a efeitos adversos. A exposição contínua ao GnRH reduz sua secreção pela regulação dos receptores de GnRH. Ainda são necessários estudos para elucidar o retorno da fertilidade das fêmeas submetidas a tal tratamento. O objetivo deste trabalho foi avaliar a reversibilidade do acetato de deslorelina através da indução do estro e da ovulação em gatas domésticas. Material e Métodos Quatro fêmeas felinas, adultas (B, H, I e J) foram submetidas a exames de citologia vaginal (CV) três vezes por semana, para identificação das fases do ciclo estral. Quando apresentaram CV característica da fase de interestro, caracterizada por uma porcentagem igual ou superior a 70% de células parabasais e intermediárias, as fêmeas foram submetidas a protocolo anestésico e introduzidos um implante de acetato de deslorelina (Suprelorin® 4,7 mg) no tecido subcutâneo da região interescapular. Após aplicação dos implantes foram realizadas CV a cada 48 horas e no 60º dia (D60) os implantes foram retirados. Nas fêmeas I e J, o estro e a ovulação foram induzidas utilizando o protocolo - 100UI ECG (gonadotrofina coriônica equina) e 84 horas após, 100UI hCG (gonadotrofina coriônica humana),10 dias após a retirada do implante. Três dias após o tratamento hormonal, as fêmeas foram submetidas a ovariohisterectomia (OSH), os ovários foram isolados, fatiados em seu comprimento longitudinal e os corpos luteis quantificados. As gatas B e H não foram submetidas ao protocolo hormonal e após a retirada dos implantes permaneceram sendo monitoradas por meio de CV até apresentarem estro espontâneo. Resultados e Discussão Em média, quatro dias após aplicação de acetato de deslorelina, três gatas I, J e B apresentaram CV característica de estro. O estro durou 18 dias na fêmea I e 8 dias nas fêmeas J e B. O aparecimento do estro após a introdução do implante era esperada e os resultados obtidos foram similares aos observados por Munson et. al. (2001). Após o estro todas as fêmeas apresentaram inibição da atividade ovariana até o D60. Nas fêmeas I e J após a OSH foram quantificados 13 corpos luteis na fêmea I e 08 na J. Não há relatos de indução de estro e ovulação em gatas domésticas após o uso de agonistas do GnRH. As fêmeas H e B apresentaram estro espontâneo após 42 dias da retirada do implante, demonstrando a reversibilidade espontânea da atividade ovariana após o tratamento. A partir destes resultados conclui-se que a inibição da atividade reprodutiva induzida pelo acetato de deslorelina em felinos domésticos é reversível tanto na indução de um estro fértil como no aparecimento de um estro espontâneo. Referências bibliográficas Munson L, Bauman JE, Asa CS, Jöchele W, TriggTE. Efficacy of the GnRH analogue deslorelin for suppression of oestrous cycles in cats. J Reprod Fertil Suppl, n.57, p.269-273, 2001. Palavras-chave: contracepção, deslorelina, gatos domésticos, ovulação. Keywords: contraception, deslorelin, domestic cats, ovulation.



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Monitoramento das alterações clínicas, fisiológicas e comportamentais em gestação de gata doméstica (Felis catus)

P.C.S. Lima1, E.B. Araújo, G.S. Leite

Universidade Federal Rural da Amazônia, UFRA, Belém, PA.

1E-mail: [email protected] Introdução Os gatos sem raça definida (SRD) estão entre os animais domésticos mais criados nos lares brasileiros, e seus proprietários necessitam, com frequência, de informações sobre manejo reprodutivo das fêmeas, para cuidados gestacionais, relacionados à nutrição do feto, e às adaptações maternas dirigidas a essa finalidade. A gestação dura, em média, 65 dias tendo seus sinais evidenciados após três a quatro semanas do acasalamento (Jainudeen & Hafez, 2004). A falta de orientação leva o proprietário a utilizar métodos errôneos, que podem ocasionar problemas ao organismo do animal (Silva et al. 2002). Assim, o presente estudo objetivou evidenciar as alterações clínicas, fisiológicas e comportamentais ocorridas durante a gestação de gatas. Material e Métodos Efetuou-se o acompanhamento gestacional de uma gata, SRD, adulta com 1 ano de idade. Foi realizado exame clínico da paciente, ressaltando o monitoramento da frequência cardíaca (FC), frequência respiratória (FR), temperatura retal (TR), e tempo de preenchimento capilar (TPC) entre a quarta e oitava semanas de gestação, duas vezes por semana, com intervalo de dois dias, observando-se ainda, as alterações comportamentais neste período. Além disso, foi feito exame ultrassonográfico na sexta semana de gestação.

Resultados e Discussão No exame clínico o animal apresentou os parâmetros TR, FC e FR dentro da normalidade, com valores médios de 38,5°C, 17bpm, 27mpm, respectivamente. Mucosas normocoradas, TPC de 2s, reflexos e turgor cutâneo normais. No inicio do monitoramento, a gata já se encontrava na quarta semana de gestação, quando, através da palpação abdominal, foi feito o diagnóstico. O animal não teve retorno de cio e apresentava ganho de peso e mamilos avermelhados, corroborando com o exposto por Toniollo e Vicente (1993), ao afirmarem que o aumento de volume abdominal da fêmea gestante se torna externamente visível após a segunda metade da gestação, porque, segundo Christiansen (1988), com o peso dos fetos, o útero se dirige ventralmente formando um arco desde a borda anterior da pelve até a região sublombar posterior. O declínio na TR em cadelas normalmente precede o nascimento dos filhotes por, cerca de, 12 horas (Feldman e Nelson, 1996) o que, de acordo com Johnson (1994), não foi relatado em gatas, não sendo, portanto, um indicador confiável do inicio do parto nessa espécie, acordando com os resultados obtidos no presente estudo. No exame ultrassonográfico, a gestação apresentava-se na sexta semana, possibilitando a observação da viabilidade fetal através dos batimentos cardíacos, além da coluna vertebral dos filhotes, estimando em 3 conceptos, embora este método não seja o melhor para quantificar o número de filhotes. Segundo Johnson (1994) o parto é dividido em três fases: contração uterina e dilatação da cérvice; passagem dos fetos pelo canal do nascimento; e passagem da placenta pelo mesmo; sendo que na gata, por ser uma fêmea multípara, as fases do parto são repetidas várias vezes (Beaver, 2005). Tais fatores foram observados em 22 de novembro de 2010, com o nascimento de 3 filhotes, tendo o parto ocorrido de forma natural por volta das 13h. Cerca de 24 horas antes do parto, a gata esteve irrequieta e recusou a alimentação habitual, corroborando com Johnson (1994) que afirma que a maioria das gatas recusa o alimento entre 24 a 48 horas antes do parto. Referências bibliográficas Beaver BV. Comportamento felino – Um guia para veterinários. 2.ed. Editora Roca, 2005. p.276. Christiansen IJ. Reprodução no cão e no gato. São Paulo: Manole Ltda., 1988. p.362. Feldman EC, Nelson RW. Canine and feline endocrinology and reproduction. Philadelphia: W.B. Saunders, 1996. p.785. Jainudeen MR, Hafez ESE. Gestação, fisiologia pré-natal e parto. In: Hafez ESE, Hafez B. Reprodução animal. 7.ed. São Paulo: Manole, 2004. Johnson CA. Female reproduction and disorders of the female reproductive tract. In: Sherding, R. G. The cat diseases and clinical management. 2.ed. New York, Churchill Livingstone, 1994. v.2 p.1855-1876. Silva TFP, Uchoa DC, Silva LDM. Fibroadenoma mamário felino após administração única de acetato de medroxiprogesterona. Rev Bras Reprod Anim Supl, n.5, p.154-156, 2002. Toniollo GH, Vicente WRR. Manual de Obstetrícia Veterinária. São Paulo: Varela, 1993. p.23-29. Palavras-chave: ciclo estral, gata, gestação. Keywords: estrous cycle, female cat, pregnancy.



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Características gerais de gatas com piometra atendidas no Hospital Veterinário da Universidade Federal do Piauí

General characteristics of cats with pyometra treated at the Veterinary Hospital Federal University of Piauí

L.S.M. Evangelista1, R.P.A. Alves, F.J.M. Aragão, L.A. Gomes, L.M.F. Gonçalves, A.M. Quessada

Universidade Federal do Piauí, Teresina, PI.

1E-mail: [email protected] Introdução A piometra é uma inflamação do útero que ocorre na fase do diestro, período em que a concentração sérica de progesterona está mais alta, promovendo um acúmulo de secreção endometrial no lúmen uterino (Fransson e Rangle, 2003). É mais comum em fêmeas de meia-idade. Nos felinos, a ovulação é induzida através da cópula, portanto gatas não estão tão expostas ao aumento dos níveis de progesterona (Silveira et al., 2007). A piometra pode se apresentar com a cérvix aberta e sinais clínicos de menor gravidade, já em casos nos quais a cérvix está fechada, os sinais clínicos são agudos e graves, e este tipo parece ser mais comum na gata (Brito Filho, 2008). Devido à escassez de estudos dessa enfermidade na espécie felina, pretendeu-se avaliar as características gerais de gatas com piometra atendidas no Hospital Veterinário da Universidade Federal do Piauí – HVU/UFPI. Material e Métodos Foram selecionadas as fichas de atendimento de gatas diagnosticadas com piometra, atendidas no HVU/UFPI, no período de janeiro de 2008 a dezembro de 2009, que continham informações completas da anamnese, exame clínico, exames complementares e diagnóstico da doença. Resultados e Discussão Foram atendidas 22 gatas com piometra no período analisado, 12 em 2008 e 10 em 2009, com idades variando entre 07 meses e 08 anos e a grande maioria (77,3%) eram SRD, refletindo a clientela do HVU/UFPI. Das gatas analisadas, 14 (63,6%) possuíam menos de 02 anos de idade, e gatas mais jovens também podem ser acometidas, principalmente devido à administração de anticoncepcionais, o que ocorreu em 08 animais desse estudo. Nas gatas, a piometra de cérvix fechada parece ser mais freqüente (Brito Filho, 2008). No entanto, nesta pesquisa, a piometra de cérvix aberta apresentou maior incidência, 54,5%. Tal diferença pode ser atribuída a descarga vaginal, que por vezes, não é observada externamente devido ao hábito da lambedura. É muito importante analisar essas variáveis para obter um padrão dos parâmetros de animais acometidos por esta enfermidade comum do trato reprodutivo de animais domésticos. Referências bibliográficas Brito Filho FB. Estudo Retrospectivo das enfermidades relacionadas à Clínica da Reprodução de pequenos animais no período de 2001-2007 no HV-CSTR-UFCG. 2008. 28f. Monografia (Graduação) - Universidade Federal de Campina Grande, Centro de Saúde e Tecnologia Rural Campus de Patos-PB, Curso de Medicina Veterinária. 2008. Fransson BA, Rangle CA. Canine Pyometra: an update on pathogenesis and treatment. Compendium, Washington, v.25, n.8, p.602-611, 2003. Silveira DS, Bassi PB, Otero B, Silveira LW, Soares NN, Mendes TC. Piometra em caninos e felinos: Perfil leucocitário, prevalência nas espécies e sinais clínicos. In: Congresso de Iniciação Científica, 25, 2007, Anais... Pelotas: 2007. CD-ROM. Palavras-chave: felinos, sinais clínicos, piometra. Keywords: cats, clinical signs, pyometra.



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Epitélio seminífero de Leopardus tigrinus (SCHREBER, 1775): Caracterização Seminiferous epithelium of the Leopardus tigrinus(SCHREBER, 1775):Characterization

M.K. Balarini1, T.A.R. Paula, S.L.P. Matta, J.V.Peixoto, D.B. Morais, P.K.A. Campos

Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução Os gatos selvagens estão entre as espécies em maior risco de extinção do planeta, e neste contexto encontra-se o Leopardus tigrinus, a menor espécie de felino do Brasil. Como agravante, pouco se sabe sobre a biologia reprodutiva desta espécie, e estudo que visem fornecer características relevantes da dinâmica de formação de gametas em L. tigrinus são necessários. Material e Métodos Fragmentos testiculares foram coletados em 6 animais machos adultos por meio de biopsia, processados histologicamente para inclusão em resina e analisados em microscopia de luz. O epitélio seminífero de L. tigrinus, foi caracterizados de acordo com o método da morfologia tubular, considerando-se a forma, presença e localização dos núcleos de espermatogônias (sptg), espermatócitos primários e espermátides. Resultados e Discussão Os arranjos celulares encontados no epitélio seminífero de L. tigrinus são compatíveis ao descrito por Berndtson, (1977) no método da morfologia tubular, que os agrupa em 8 estádios. Nesta espécie, as células de Sertoli mostraram nucléolo desenvolvido em todos os estádios (Ø 2,5 μm) e cromatina frouxa. Sptg tipo-A foram observadas próximas á lâmina basal do estádio 1 ao 5. No estágio 6, sptg intermediárias apresentando núcleo menor e mais escuro em comparação à sptg-A foram vistas. No estádio 7, observou-se a presença de sptg tipo-B, com núcleo arredondado e heterocromatina abundante. No estádio 8 espermatócitos primários em preleptóteno foram vistos. Estas células apresentaram núcleos menores, cromatina homogênea e um ou dois nucléolos. No estádio 1, espermatócitos primários em transição preleptóteno/leptóteno foram vistos, e no estágio 2 estas células já apresentaram características típicas de leptóteno: citoplasma claro e clusters de heterocromatina periférica no núcleo. Estas células se diferenciaram em zigóteno e rapidamente em paquíteno no estádio 3. Paquítenos tem núcleos maiores, cromossomos condensados e nucléolo não evidente. Este tipo celular foi observado em todos os estádios na seqüência até o próximo estádio 3, quando se diferenciaram em diplótenos, as maiores células germinativas no epitélio seminífero. No estágio 4, ocorrem duas divisões meióticas e placas metafisárias foram observados possivelmente em diplóteno e em espermatócitos secundários. Após a segunda divisão meiótica, espermátides arredondadas foram identificadas, marcando o início do estádio 5. Espermátides arredondadas são pequenas e formam 3 a 4 camadas no epitélio seminífero do estágio 5 ao próximo estádio 1. No estádio 2, as espermátides iniciam o processo de alongamento que culmina na suas diferenciação em espermatozóides, que serão liberados no lúmen tubular no próximo estádio 8. Referências bibliográficas Berndtson, WE. Methods for quantifying mammalian spermatogenesis: a review. J Anim Sci, v.44, n.5, p.818-883, 1977; Palavras-chave: epitélio seminífeo, espermtogênese, felinos selvagens. Keywords: seminiferous epithelium, spermatogenesis, wild cats.



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Uso do método de eletroejaculação para exame andrológico em gatos domésticos (Felis catus)

Use of the electroejaculation method in the andrological examination in domestic cats (Felis catus)

D.K. Vieira, S.M.C. Suzano, F.B. Knackfuss, A.F. Brasil, A.M.R. Ferreira

Universidade Castelo Branco, Centro Universitário Plínio Leite, Universidade Federal Fluminense E-mail: [email protected]

Introdução A contribuição de machos para a eficiência reprodutiva dos felinos é de grande importância, uma vez que, além do aporte genético, neles pode-se aplicar uma pressão de seleção maior que nas fêmeas. O estudo do sêmen é de grande importância para resguardar seu potencial genético e auxiliar nas biotécnicas da reprodução. Os objetivos desse trabalho foram avaliar a técnica de coleta de sêmen em felinos por meio da eletroejaculação e as características do ejaculado.

Material e Métodos Foram examinados 20 gatos domésticos (Felis catus), com idade entre um e três anos, sem raça definida, oriundos da Clínica Escola UCB-RJ. Foi realizado exame andrológico completo. Os animais foram sedados e anestesiados. A coleta do sêmen foi realizada pelo método da eletroejaculação (Eletrovet) e examinadas quanto às características macro e microscópicas.

Resultados e Discussão Os animais apresentaram normalidade ao exame clínico. A técnica de coleta utilizada revelou-se eficiente para avaliação quantos aos parâmetros reprodutivos (Axner, 2006). Foram encontrados pH (6,75 ± 0,34) e coloração transparente a branco leitoso (Vieira et al., 2009). A média da motilidade observada foi de 60,0 ± 29,91% e o vigor variou de 0 a 4 (Zambelli e Cunto, 2006, Vieira et al., 2009). A média e o desvio padrão do total de defeitos (38,75 ± 17,11) foram elevados nos felinos. Na família Felidae, a maioria dos felinos produz, em média, menos de 50,0% de células normais, prevalecendo a teratospermia (Pukazhenthi et al., 2006, Saake, 2008). No teste de Mann-Whitney não foi verificada diferença estatisticamente significativa (p > 0,05) nas características avaliadas. Conclui-se que, a técnica de eletroejaculação permite obter ejaculado de boa qualidade para avaliação macro e microscópica; a análise seminal é essencial para avaliar a fertilidade e que 60,0% dos felinos avaliados apresentaram aptos para reprodução. Referências bibliográficas Axner E. Sperm maturation in the domestic cat. Theriogenology, v.66, p.14-24, 2006. Pukazhenthi BS. et al. The impact and potencial etiology of teratospermia in the domestic cat and its wild relatives. Theriogenology, v.66, p.112-121, 2006. Saake RG. Sperm morphology:its relevance to compensable and uncompensabel traits semens. Theriogenology, v.70, p.473-478, 2008 Vieira et al. Andrological examination in domestic cats by use of the electroejaculation method. Clinica Veterinaria , XIV, supplement, p.231-233, 2009. Zambelli D, Cunto M. Semen collection in cats: techniques and analysis.Theriogenology, p.165, 2006. Palavras-chave: eletroejaculação, felinos, sêmen. Keywords: eletroejaculation, felines, sêmen.



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Utilização de dipirona sódica em gatos submetidos à castração química por meio de injeção intratesticular de gluconato de zinco – Resultados preliminares

Use of dipyrone in cats after chemical castration with intratesticular injection of zinc gluconate – Preliminary results

A.K.F. Fagundes¹,3, L.T. Brito², C.C.S. Melo², E.C.S. Oliveira², V.A. Silva Júnior¹

¹Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal,UFRPE, Recife, PE; ²Departamento de Medicina Veterinária, UFRPE,

Recife, PE. 3E-mail:[email protected]

Introdução A castração cirúrgica tem sido o método de eleição para o controle populacional de gatos machos, no entanto técnicas menos invasivas têm sido estudadas, tais como a utilização de agentes esclerosantes no testículo ou epidídimo, como o gluconato de zinco (GZ) (Oliveira et al., 2007; Oliveira et al., 2009, Moura et al., 2010). Silva et al (2010) observaram que alguns cães apresentam desconforto após a injeção intratesticular de GZ (Testoblock), e para estes animais foi preconizada a administração oral de dipirona. Este trabalho teve como objetivo relatar a utilização de dipirona em gatos submetidos à esterilização química por meio da injeção intratesticular de GZ. Material e Métodos Foram utilizados 10 gatos, machos, púberes, de diferentes raças, oriundos de propriedades privadas, que foram divididos em dois grupos e submetidos à injeção intratesticular de solução salina (controle, n=4) ou GZ (Testoblock) (tratado, n=6). A solução salina ou GZ foram administradas com base no diâmetro testicular dos animais. Os proprietários foram orientados a administrar dipirona sódica (25mg/kg, TID) caso os animais apresentassem desconforto após o procedimento. Resultados e Discussão Apenas um animal do grupo tratado apresentou desconforto nas primeiras horas após a injeção de GZ, caracterizado por ausência de apetite. Para este animal foi prescrita a dipirona sódica. Esta tem ação anti-inflamatória apenas secundária. Como parte do mecanismo de ação do GZ sobre os testículos baseia-se no desencadeamento de uma resposta inflamatória exarcebada, a administração de uma droga com ação antiinflamatória, mesmo que secundária, poderia comprometer a eficácia da castração química. Entretanto, não foi observado comprometimento da eficácia da injeção de GZ em cães machos que utilizaram a dipirona (Oliveira ECS, Comunicação pessoal). Acredita-se que o mesmo aconteça com os gatos submetidos à injeção de zinco e que receberam dipirona após o procedimento e pesquisas estão sendo realizadas para se confirmar esta hipótese.

Referências bibliográficas Moura MRP, Mascarenhas RM, Lanna LL et al. Anim Reprod.,v.7,n.3, p.250, 2010. Oliveira ECS, Moura MR, Muller PM et al. Chemical sterilization of male cats - Preliminary results. In: Anais do XVIII CBRA, Belo Horizonte, Brasil, 2009. P.534-534. Oliveira ECS, Moura MR, Silva Jr VA et al. Theriogenology, v.68, p.137-145, 2007. Silva FLM, Silva LG, Muller PM et al. Efeito da administração oral de dipirona sódica em cães submetidos á injeção intratesticular de gluconato de zinco. Resultados preliminares. In: Anais do V Conera, Patos,PB,Brasil. Wang M. Neutersol: intratesticular injection induces sterility in dogs. In: Proceedings of the 2002 International Symposium on nonsurgical methods for pet population control. 2002. p.62-65. Palavras-chave: castração química, dipirona, gluconato de zinco Keywords: chemical castration, dipyrone, zinc gluconate



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Esterilização química de gatos por injeção intratesticular de solução à base de zinco: resultados preliminares

M.R.P. Moura

1,4, R.M. Mascarenhas1, L.L. Lanna1, P.R. Xavier1, A.P. Marques Jr.1,

E.C.S. Oliveira2, R.W.C. Melado3

1Departamento de Clínica e Cirurgia, Veterinária, UFMG, Belo Horizonte, MG; 2Departamento de Medicina Veterinária, UFRPE, Recife, PE; 3Médico Veterinário, Belo Horizonte, MG.


Introdução Dos animais de estimação o gato doméstico encontra-se entre as espécies de maior número, e a esterilização química é uma boa alternativa para interromper a reprodução do macho e controlar a superpopulação de animais de rua. Para cães foi desenvolvida, pelo Laboratório BioRelease Technologies Physiological Vehicle (B.E.T. Labs, Lexington, Kentucky, USA), uma solução neutra a base de zinco para de esterilização química através de injeção intratesticular (1). Entretanto, sobre gatos, pouca informação sobre a esterilização química, e mesmo sobre a estrutura e função dos testículos está disponível na literatura (2). Material e Métodos Foram administrados em oito gatos adultos machos, por via intratesticular, 0,2-0,3 mL de uma solução a base de zinco (Grupo Tratado). Em quatro gatos machos adultos (Grupo Controle), foi administrado, da mesma forma, solução salina. A dosagem da droga e da solução salina foi determinada com base no diâmetro testicular de cada animal. Antes do tratamento foi coletado sêmen, por eletroejaculação, e fotografadas as espículas penianas. Este procedimento foi repetido mensalmente durante 130 dias após a injeção. Resultados e Discussão Os resultados preliminares mostram que, dos oito gatos tratados seis ficaram azoospérmicos e 2 oligospérmicos após 130 dias do tratamento, o que sinaliza para a ação contraceptiva do medicamento. Cranialmente o pênis possui na sua superfície de 100 a 200 espículas de tecido conectivo recobertos por epitélio cornificado, medindo de 0,75 a 1 mm de comprimento. Estas espículas são andrógeno dependentes e desenvolvem-se plenamente na maturidade sexual, tendo importância no estímulo copulatório, essencial para a ovulação (3). Todos os animais tratados e não tratados mantiveram as espículas penianas intactas, o que sugere que a droga não atuou nas células de Leydig, principais produtoras de testosterona. Até o presente, este é o primeiro relato, em gatos, sobre a potencial ação contraceptiva desta droga após o tratamento com a injeção intratesticular de solução à base de zinco, com potencial para utilização prática no controle populacional de gatos. Referências bibliográficas (1) Oliveira ECS, Moura MRP, Silva Jr VA, Peixoto CA, Saraiva KLA, Sá MJC, Douglas RH, Marques Jr AP. Intratesticular injection of a zinc-based solution as a contraceptive for dogs. Theriogenology, n. , p137-45, 2007. (2) Godinho CL. Análise histométrica do testículo e duração da espermatogênese em gatos (felis domestica). Sexualmente maduros. 1999. Tese. 80p. (Mestrado) - Biologia Celular do Instituto de ciências Biológicas da UFMG, Belo Horizonte. (3) Feldman EC, Nelson RW. Canine and feline endocrinology and reproduction. Third edition. Saunders. Elsevier imprint, 2004. 1089p. Suporte financeiro: CNPq.



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Morfologia de corpos lúteos de ovelhas da raça Santa Inês coletados em matadouro Morphology of the corpus luteum of Santa Ines breed collected in slaughterhouse

T.A.H. Arrebola1, D.B. Ibrahim1, M.G.M. Chacur2,6, O.C. Sanches3,

L.R.A. Gabriel Filho4, E. Oba5

1Mestrando em Ciência Animal (UNOESTE), Presidente Prudente, SP; 2Lab. Reprodução Animal (UNOESTE), Presidente Prudente, SP; 3Lab. Patologia Veterinária (UNOESTE), Presidente Prudente, SP; 4CET/UNESP, Tupã, SP; 5FMVZ-UNESP,

Botucatu, SP. 6E-mail: [email protected]

Introdução O estudo da morfologia das estruturas do ovário está diretamente ligado às aplicações práticas na interpretação do ciclo estral e para o uso de biotécnicas da reprodução na ovinocultura que atualmente ocupa um lugar de importância nos criatórios de interesse zootécnico. As raças deslanadas de ovinos vêm ganhando atenção devido a sua adaptação aos ambientes quentes e a sua prolificidade, sendo importante conhecer suas peculiaridades reprodutivas (Traldi, 2006). Material e Métodos Coletou-se no matadouro 102 pares de ovários de ovelhas da raça Santa Inês, não prenhes, entre 9 e 11 meses de idade, criadas extensivamente na região de Presidente Prudente-SP, nos meses de fevereiro e março. Identificados quanto ao lado em ovário direito (OD) ou esquerdo (OE), foram armazenados e transportados em solução salina a 37ºC até o laboratório para a classificação morfológica dos corpos lúteos (CL) em: CL cavitário e incluso; CL cavitário e protruso; CL maciço e incluso; e CL maciço e protruso, após a secção longitudinal do ovário. Para a análise dos resultados, utilizou-se o teste do Qui-quadrado, com nível de significância a 5%.

Resultados e Discussão Dos 204 ovários coletados, 87 (42,65%) possuíam algum dos tipos de CL, com 41 (47,12%) do tipo maciço e incluso. Não houve diferença (P<0,05) entre os lados direito e esquerdo para o número de CLs (Tabela 1), semelhante aos relatos de Moakhar et al. (2010). Tabela 1. Número de corpos lúteos (CL) cavitários ou maciços; e inclusos ou protrusos depares de ovários de animais não prenhes.

CL OD OE Total Teste de Qui - quadrado (?2) CL cavitário e incluso 7 4 11 ?2 = 0,82NS CL cavitário e protruso 4 6 10 ?2 = 0,40NS

CL maciço e incluso 21 20 41 ?2 = 0,02 NS CL maciço e protruso 12 13 25 ?2 = 0,04NS Total 87 NS não significativo a 5%. Conclui-se que houve predomínio do CL maciço e incluso, seguido pelo maciço e protruso. Houve homogeneidade entre os ovários direito e esquerdo para a presença de corpos lúteos. Referências bibliográficas Moakhar HK, Kohram H, Salehi R, Shahneh AZ. Follicular and ovulatory responses of the right versus left ovaries to eCG treatment in Shall Iranian ewes. Afr J Biotechinol,v.9, n.10, p.1523-1527, 2010. Traldi AS. Biotécnicas Aplicadas em reprodução de pequenos ruminantes. In: FEINCO, 3, 2006, Pirassununga, SP. Anais… Pirassununga, FEINCO, 2006. Palavras-chave: corpo lúteo, matadouro, ovelha. Keywords: corpus luteum, ewe, slaughterhouse.



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Efeito da suplementação calórica sobre a taxa de ovulação e parâmetros metabólicos em ovelhas

Effect of energy supplementation on the ovulation rate and metabolic parameters in ewes

S.S. Venturi1, I.R. Soares1, A.L.R. Rodrigues1, E.C. Cardoso1, J.F. Fonseca2, F.Z. Brandão1

1Universidade Federal Fluminense, Niterói, RJ; 2Embrapa Caprinos e Ovinos, Sobral CE.

E-mail: [email protected]; [email protected] Introdução O aumento do nível de nutrição antes da cobertura é praticado comumente em ovinos para aumentar a taxa de ovulação e melhorar a fertilidade. Os efeitos diretos dos nutrientes na produção dos hormônios hipofisários são responsáveis pelo aumento na prolificidade e na taxa de ovulação ou, indiretamente, pela melhora do escore corporal do animal ou pela combinação de ambos (VIÑOLES, 2009). O presente estudo teve como objetivo avaliar o aumento em 20% da energia na dieta durante o protocolo de indução e sincronização do estro em ovelhas sobre a taxa de ovulação e as concentrações circulantes de glicose e insulina. Material e Métodos Foram utilizadas quarenta e três ovelhas da raça Santa Inês, sendo estas separadas em dois grupos experimentais, nos quais o Gcontrole recebia dieta de mantença, e o GM+20% recebia dieta de mantença com aumento de 20% da energia durante o período do protocolo de indução e sincronização do estro. As ovelhas foram submetidas a protocolo curto de indução e sincronização de estro, sendo aplicada esponja intravaginal impregnada com 60 mg de Acetato de Medroxiprogesterona por 6 dias (Progespon®, Shering Plough Saúde Animal, Brasil) associado à administração de 37,5 µg de d-cloprostenol (Veteglan®, Lab. Hertape-Calier Saúde Animal, Brasil) e 200 UI de eCG (Gonadotrofina Coriônica Equina - Novormon 5000®, Syntex Ind. Bioquímica, Argentina) 24h antes da retirada da esponja. Foram feitas avaliações ultrassonográficas para avaliação da taxa de ovulação e colheitas de sangue para determinação das concentrações plasmáticas de insulina e glicose.

Resultados e Discussão Os resultados demonstram que não houve diferença na taxa de ovulação (1,00 vs 1,13 - P>0,05). Nas análises de concentrações plasmáticas de glicose, não houve alteração das concentrações (70,20 ± 7,72 dL/mL vs 69,70 ± 25,46 dL/mL – P>0,05). Em relação às concentrações plasmáticas de insulina, observamos que o GM+20% apresentou maiores concentrações (1,66 ± 1,51 ng/mL vs 3,04 ± 3,66 ng/mL – P<0,05). Os resultados encontrados para a insulina estão de acordo com os encontrados por Viñoles et al. (2009), que também observaram aumento deste hormônio quando da suplementação por seis dias. Entretanto, quanto à taxa de ovulação, o presente estudo diferiu de alguns autores, sendo que estes obtiveram aumento na taxa de ovulação (GUNN et al.,1991). Desta forma, a suplementação ofertada no presente estudo permitiu o aumento das concentrações de insulina, entretanto, não alteraram a taxa de ovulação. Referências bibliográficas Gunn RG, Maxwell TJ, Sim DA. The effect of level of nutrition prior to mating on the reproductive performance of ewes of two welsh breeds in different levels of body condition. Anim Prod, v. 52, p.157-163, 1991. Vinõles C, Meikleb A, Martina GB. Short-term nutritional treatments grazing legumes or feeding concentrates increase prolificacy in Corriedale ewes. Anim Reprod Sci, v.113, p.82-92, 2009. Palavras-chave: glicose, insulina, taxa de ovulação. Keywords: glicose, insulin, ovulation rate. Financiamento: FAPERJ.



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Influência do controle de mamada no estro pós parto de ovelhas Santa Inês criadas a pasto

Influence of controlled suck on postpartum estrus by Santa Inês ewes created at pasture

C.T.G. Alvares1,5, A.J. Del Rei2, C.C. Bartolomeu3, J.F. Cruz4

1DCAA, UESC, Ilhéus, BA; 2DTRA ,UESB, Vitória da Conquista, BA; 3DMV, UFRPE, Recife, PE; 4LRCO, UESB, Vitória da Conquista, BA

5E-mail: [email protected] .br

Introdução No Estado da Bahia, a oferta de carne ovina ainda não supre a demanda, tendo como principais motivos a desorganização da produção e conseqüente precariedade de índices reprodutivos, sendo necessárias propostas de manejo que possibilitem melhoria destes índices. A utilização da mamada controlada das crias pós-parto já é bastante difundida em bovinos para melhoria do desempenho reprodutivo das matrizes. Este trabalho teve como objetivo avaliar a influência do controle de mamada no retorno ao estro de ovelhas Santa Inês criadas a pasto sob clima tropical úmido. Material e Métodos Trinta ovelhas Santa Inês, pluríparas, com idade entre 24 e 36 meses, peso vivo ao parto 46,5±5,7 e escore corporal entre 2,5 a 3, foram separadas em: Grupo 1 com 15 ovelhas e suas crias submetidas ao controle de mamada da segunda a 11ª semana pós-parto, Grupo 2 com 15 ovelhas mantidas com suas crias em amamentação contínua até a 11ª semana pós-parto. Os cordeiros do Grupo 1 permaneceram separados das mães durante o dia, de 08:00 às 17:00h, em piquete específicos, tendo acesso às mamadas a partir das 17h, quando recolhidos com as mães. Os cordeiros do Grupo 2 acompanharam integralmente suas mães. Para identificação do estro pós-parto, foi utilizado um rufião vasectomizado. Resultados e Discussão As ovelhas do G1 apresentaram um intervalo médio entre o parto e o primeiro estro clínico pós-parto mais curto do que as ovelhas do G2, 52,4±14,5 e 60±23,5 dias, respectivamente, corroborando Souza & Simplício (1999). Silva Junior et al (2009) observaram folículos com diâmetro superior a três milímetros na primeira semana pós-parto em ovelhas bem nutridas o que indica retorno a ciclicidade reprodutiva. A porcentagem de ovelhas que apresentou estro durante o período experimental foi superior no G1 (60%), comparada ao G2 (47%), o que indica que o controle de mamada pode favorecer o manejo reprodutivo, visto que contribui para a manutenção das reservas de gordura corporal das matrizes, possibilitando a ocorrência de um menor período de serviço. Referências bibliográficas Silva Junior, L.S; Hatamoto-Zervoudakis, L.K, et al.. Retorno a atividade cíclica em ovelhas deslanadas submetidas à restrição calórica ou protéica durante o período de lactação. Rev. Bras. Saúde Prod. An., v.10, n.2, p.479-488, 2009. Souza, P.H.F, Simplício, A.A. Efeito da amamentação sobre o desempenho reprodutivo pós-parto em ovelhas da raça Santa Inês. Ciência Veterinária nos Trópicos, v.2, p.115-124, 1999. Palavras-chave: ovinos, puerpério, tropical úmido. Keywords: puerperium, sheep, tropical humid climate.



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Efeito do sombreamento artificial na resposta à superovulação de ovelhas Santa Inês nos meses de maiores e menores temperaturas no semiárido brasileiro

Effect of shading on superovulatory response of Santa Inês ewes during the months of highest and lowest temperatures in the brazilian semiarid

C.A.A. Clemente1,4, J.B. Loiola Filho2, D.M. Nogueira2, E.S. Lopes Junior3, M.L.L. Andrade3,

M.F. Cordeiro3, S.H.N. Turco3, T.V. Voltolini2, I. Borges1, M. Henry1

1Escola de Veterinária da UFMG, Belo Horizonte, MG; 2Embrapa Semiárido, Petrolina PE; 3Universidade Federal do Vale do

São Francisco, Petrolina, PE. 4E-mail: [email protected]

Introdução A eficiência reprodutiva das ovelhas é conhecida por ser adversamente afetada por hipertermia, onde o estresse térmico por radiação também influencia a resposta à superovulação em ovinos (Naqvi et al, 2004) em programas de múltipla ovulação e transferência de embriões, pricipalmente nos 2 primeiro dias pós fecundação. Assim, este estudo teve o objetivo avaliar a resposta superovulatória em ovelhas Santa Inês mantidas em piquetes com e sem fonte de sombra artificial em duas épocas do ano (maior e menor amplitude térmica). Material e Métodos O experimento foi realizado no campo experimental de Bebedouro da Embrapa Semiárido em Petrolina/PE, nos meses de julho e novembro de 2010, utilizando 11 ovelhas da raça Santa Inês por tratamento. As ovelhas foram mantidas em pastagem irrigada de Tiffton 85, sendo que para um destes grupos foi oferecido sombreamento artificial (Tela preta de polipropileno) com 80% de retenção luminosa com área de 2,5m2/animal. Para superovulação foram utilizadas esponjas vaginais contendo 60mg de MAP (Progespon®) por 12 dias, 200 mg de FSH (Folltropin®) em seis doses decrescentes de 12 em 12 horas, do 10º ao 13º dia e 37,5µg de D-cloprostenol (Veteglan®) no 10º dia. As coberturas foram realizadas por monta natural no inicio do estro e 24 horas após. A coleta dos embriões foi realizada cirurgicamente, seis dias após o inicio do estro. Esta foi realizada apenas nas ovelhas com mais de quatro corpos lúteos.

Resultados e Discussão O percentual de ovelhas que responderam à superovulação foi de 59,1% x 31,8%, a média de ovulações foi 8,04 ± 7,72 x 6,9 5± 10,02 e a média de embriões por ovelha coletada foi de 7,17 ± 5,33 x 9,37 ± 7,95, com e sem sombra respectivamente, independentemente da estação do ano (p > 0,05). Nos meses de menor e maior amplitude térmica, os percentuais de ovelhas que responderam a superovulação foram 50% x 40,9%, as médias de ovulação foram 9,3 ± 10,75 x 5,04 ± 5,87 e as médias de embriões por ovelha coletada foram 8,04 ± 7,44 x 8,5 ± 5,29 respectivamente (p > 0,05), independentemente da presença de sombreamento ou não. Pode-se concluir que o uso de sombreamento e a maior amplitude de temperatura do meio não alteraram significativamente a resposta superovulatória nas ovelhas Santa Inês. Referências bibliográficas Naqvi SMK, Maurya VP, Gulyani R, Joshi A, Mittal JP. The effect of thermal stress on superovulatory response and embryo production in Bharat Merino. Small Rumin Res, v.55, p.57-63, 2004. Palavras-chave: estresse termico, ovelhas, semiárido, superovulação. Keywords: ewes, semiarido, superovulation, thermal stress.



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Avaliação da inseminação laparoscópica de ovelhas em decúbito lateral The evaluation of a laparoscopic insemination of ewes in lateral recumbence

P.O. Fonseca, F.F. Souza1, M.V. Brun, D.S. Moura, T.T. Lourenço, M.M. Moscardini

Hospital Veterinário, Universidade de Franca, Franca - SP

1E-mail: [email protected] Introdução A criação e a comercialização de carne ovina estão em amplo crescimento no Brasil (SIMPLÍCIO, 2008). O aumento da produtividade implica no uso de novas tecnologias. Neste sentido, a inseminação artificial (IA) é uma ferramenta imprescindível para o aprimoramento da criação (EVANS; MAXWELL, 1987). Atualmente, a cirurgia laparoscópica é o método mais utilizado para IA em ovelhas. Para tanto, utiliza-se a posição de Trendelemburg, a qual ocasiona compressão diafragmática, causa hipoxemia e está associada ao risco de aspiração do conteúdo de regurgitação, além de provocar desconforto ao paciente pelo posicionamento supino (ALLEN, BORKOWSKI, 1999). Desta forma, o presente estudo teve como objetivo avaliar a laparoscopia utilizando o acesso ventrolateral direito, com o paciente em decúbito lateral. Material e métodos Foram utilizadas 32 ovelhas, da raça Morada Nova, divididas em 3 grupos: 11 IA vaginal, 10 IA cervical e 11 IA laparoscópica em decúbito lateral. O ciclo estral foi sincronizado utilizando-se pressários intravaginais de progesterona e eCG. A IA foi efetuada de 54 a 56h após o eCG. Para IA foi utilizado sêmen do mesmo macho, descongelado no momento da inseminação (dose inseminante 300x106). A IA vaginal foi realizada depositando-se o sêmen no fundo da vagina. Na transcervical utilizou-se um cateter rígido de inox (sonda norueguesa), sem o tracionamento da cérvice. A IA laparoscópica foi realizada após jejum de 24 horas, sedação com xilazina 10% e anestesia local, dos pontos de introdução dos trocartes. Os animais foram posicionados em decúbito lateral esquerdo e duas incisões, na região lateral direita, crânio-dorsal a glândula mamária, foram usadas para inserção dos trocartes. O abdome foi insuflado com CO2, o útero localizado e a IA realizada. As incisões foram suturadas. Resultados e discussão O tempo cirúrgico médio foi 15 minutos, contados desde o momento da aplicação da anestesia local até a sutura da pele. Duas ovelhas, as quais não foram submetidas ao jejum hídrico e alimentar, a incisão para a introdução da bainha do trocarte, lesionou a parede ruminal, porém sem extravasamento do conteúdo para dentro da cavidade abdominal. Estas ovelhas foram descartadas do grupo experimental. Nenhum animal submetido ao jejum pré-cirúgico apresentou complicação trans ou pós-cirúrgica. O diagnóstico de gestação foi realizado aos 30 e 60 dias após a IA. A taxa de gestação foi de 10% nas fêmeas inseminadas por via vaginal e 54% nas fêmeas inseminadas por laparoscopia. Nenhuma fêmea inseminada pela via cervical apresentou-se gestante aos 30 e 60 dias. A técnica de inseminação laparoscópica em decúbito lateral foi realizada com sucesso, reduziu o desconforto e apresentou taxa de gestação aceitável. Referências bibliográficas Allen MJ, Borkowski GL. Laboratory small ruminant. In: Allen MJ, Borkowski GL (Ed.). Veterinary care. Boca Raton, FL: CRC Press, 1999. p.49-98. Evans G, Maxwell WMC. (Ed.). Salamon’s artificial insemination of sheep and goats. Sydney: Butterworths, 1987. Simplício AA. Estratégias de manejo reprodutivo como ferramenta para prolonger o período de oferta de carnes caprina e ovina no Brasil. Tecnol Ciênc Agropec, v.2, n.3, p.29-39, 2008. Palavras chaves: inseminação, laparoscopia, ovino. Keywords: insemination, laparoscopy, ovine.



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Taxa de recuperação embrionária de ovelhas Santa Inês superovuladas sob a condição de estresse pelo calor

Embryo recovery rate in Santa Ines ewes superovulated under heat stress

M.G.T. Gomes1, F.C. Varago2, L.F.L. Cavalcanti3, E.K.N. Arashiro3, C.A. Clemente3, B.C. Cruz3, I. Borges4, M. Henry5

¹Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia UFT, Araguaína, TO; 2 FEAD, Belo Horizonte, MG; 3Escola de Veterinária,

UFMG, Belo Horizonte, MG. E-mail: [email protected]

Introdução A ampla variabilidade na resposta superovulatória a tratamentos com gonadotrofinas continua sendo o fator limitante aos programas de superovulação em ovinos. Além disso, observa-se redução na fertilidade de animais sob a condição de estresse pelo calor. O objetivo deste trabalho foi avaliar a resposta superovulatória em ovelhas Santa Inês sob a condição de estresse pelo calor. Material e Métodos Trabalho realizado na Escola de Veterinária da UFMG. Quarenta ovelhas Santa Inês adultas vazias passaram por 15 dias em cada tratamento térmico em câmara climatizada, conforto e estresse pelo calor. Para o protocolo de superovulação foi utilizada 250 UI de FSH da espécie suína (Pluset® – Hertapie Calier - Brasil), divididas em seis doses decrescentes, aplicadas em intervalo de 12 horas (Baldassare, 2008). As fêmeas foram inseminadas pela técnica transcervical com sêmen a fresco. A coleta de embriões foi realizada por laparotomia. Doadoras que apresentaram quatro ou mais corpos lúteos foram consideradas como responsivas ao tratamento e submetidas à lavagem uterina. Para análise da resposta superovulatória utilizou-se o teste de Qui-Quadrado. Resultados e Discussão As respostas ao tratamento superovulatório está apresentado na tabela 4. Tabela 4. Resposta de ovelhas vazias da raça Santa Inês ao tratamento superovulatório entre os tratamentos térmicos, conforto (24°C e 65%UR) e estresse pelo calor (34°C e 50%UR).

Resposta ao Tratamento Superovulatório Ambiente Não Sim Total Tx Resp(%) Conforto 15 25 40 62,5 Estresse 27 13 40 32,5

A significância foi de P = 0,0133 pelo teste de Fisher. Observou-se decréscimo no número de ovelhas que responderam ao tratamento sob condição de estresse pelo calor. Animais sob condição de estresse apresentam superestimulação do eixo hipotalâmico hipofisário adrenal, resultando em menores estímulos hormonais às gônadas (Morberg, 2000). Além disso, Segundo González-Bulnes et. al. (2000) a resposta ovulatória ao protocolo de superovulação está relacionada ao número de pequenos folículos presentes no ovário no início do tratamento com o FSH e com a habilidade destes de crescer até estágios pré-ovulatórios. Referências bibliográficas González-Bulnes A, Santiago-Moreno J, Cocero MJ, López-Sebastían A. Effects of FSH commercial preparation and follicular status on follicular growth and superovulatory response in Spanish Merino ewes. Theriogenology, v.54, p.1055-1064, 2000. Moberg GP. A model for assessing the impact of behavioral stress on domestic animals. J Anim Sci, v.65, p.1228-1235, 1987. Palavras-chave: estresse pelo calor, pFSH, Santa Inês. Keywords: heat stress, pFSH, Santa Inês.



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Bem-estar e eficiência reprodutiva de ovelhas submetidas à inseminação artificial transcervical sob anestesia subaracnóidea

Welfare and reproductive performance of ewes transcervically inseminated under subarachnoid anestesia

R.P.B. Carneiro1, E.V. Costa e Silva, G.G. Macedo, A.G. Francisco da Silva, C.E.S.N. Zúccari

Lab. de Reprodução Animal, GERA-MS/CNPq/UFMS, Campo Grande, MS.


Introdução A inseminação artificial (IA) com sêmen congelado em ovelhas pode ser realizada via transcervical (TCV) ou por laparoscopia. A exposição do óstio cervical externo, necessária para a realização da IA via TCV, supõe-se ser um fator causador estresse agudo pela dor intensa (DeRossi et al., 2009). Atualmente a adoção de técnicas de manejo que melhorem o bem-estar animal é valorizada no mercado internacional. Este trabalho objetivou verificar o efeito da anestesia subaracnóidea, duas dosagens diferentes, durante os procedimentos de IA por via TCV, e se melhora o bem-estar animal e a eficiência reprodutiva de ovelhas. Material e Métodos Utilizou-se 90 ovelhas Suffolk, submetidas à sincronização do cio com duas aplicações de Prostaglandina F2α (0,125 mg, IM) intercaladas de 7 dias (Gonsalves et al., 2008) e inseminadas após observação do estro auxiliada por rufião, distribuídas aleatoriamente em três grupos: Controle (C) - IA via TCV convencional; IA via TCV sob anestesia subaracnóidea utilizando 1,5 mg/kgPV de quetamina, conforme proposto por DeRossi et al (2009) - T1; IA via TCV sob anestesia subaracnóidea com 0,75 mg/kgPV de quetamina- T2. Registrou-se: carneiro (n = 2), contração abdominal, facilidade da tração cervical e tempo de pinçamento da cérvix. A taxa de prenhez (TP) foi obtida 40 dias após a IA, via ultrassonografia transretal. Registrou-se as vocalizações emitidas, tentativas de fuga e posicionamento da orelha. Aferiu-se ainda a frequência cardíaca (FC), respiratória (FR) e temperatura de pele (tp) em quatro momentos: basal, após contenção, após tração cervical e após IA. As variáveis fisiológicas foram submetidas a ANOVA de duas vias para medidas repetidas e as médias comparadas por teste de Dunnet; variáveis comportamentais por teste de Kruskal-Wallis e em caso de significância, por Teste de Mann-Whitney par-a-par. A TP foi comparada por Qui-quadrado.

Resultados e Discussão O uso de anestesia diminuiu as vocalizações e a contração abdominal (P < 0,05) durante a manipulação genital e melhorou a TP (P < 0,05), 40, 56,67 e 66,67% para C, T1 e T2, respectivamente. A TP variou significativamente em função da contração abdominal e do sucesso na tração cervical. Não foi observado efeito dos machos utilizados (P > 0,05). Os animais do grupo C apresentaram comportamentos associados à imobilidade absoluta sugestiva de distresse, pois houve diminuição da FR (P < 0,05) após tração cervical e aumento desta após os procedimentos de IA, o que reforça essa hipótese. O uso da anestesia subaracnóidea com quetamina, em procedimentos de IA via TCV ovina, facilitou a tração cervical, melhorou a TP e beneficiou o bem-estar dos animais. Portanto, recomenda-se o uso de 0,75 mg/kgPV de quetamina, dose menor, em anestesia subaracnóidea, para realizar inseminação artificial transcervical. Referências bibliográficas Derossi R, Carneiro RPB, Ossuna MR, et al. Sub-arachnoid ketamine administration combined with or without misoprostol/oxytocin to facilitate cervical dilation in ewes: A case study. Small Rumin Res, v.83, p.74-78. 2009. Gonsalves PBD, Figueiredo JR, Freitas VJF. Biotécnicas aplicadas à reprodução animal. 2.ed, São Paulo, SP: Roca, 2008. Palavras-chave: biotecnologia da reprodução, dor, estresse, fertilidade. Keywords: fertility, pain, reproduction technologies, stress.



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Peso e índice de massa corporal em borregas submetidas a estímulo com medroxiprogesterona ou progesterona de longa ação na pré-puberdade

Weight and body mass index in lambs with medroxyprogesterone or long-acting progesterone priming in pre-puberty

C.D. Monteiro1, S.D. Bicudo, H.S. Toma, C.E.A. Biscarde, T.M. Oliveira,

M.B. Falleiros, L.C. Bicudo

Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, UNESP, Botucatu, SP. 1E-mail: [email protected]

Introdução A avaliação da condição corporal dos animais por diferentes métodos tem sido largamente empregada nas mais variadas espécies como forma de se obter um monitoramento intensivo do status do rebanho, objetivando assim uma maior eficiência na produção e reprodução. Embora o peso e o escore de condição corporal sejam amplamente utilizados para esta finalidade, o índice de massa corporal (IMC) é a alternativa que melhor representa as variações apresentadas pelo organismo nas diversas fases de desenvolvimento (Monteiro et al., 2010). Material e Métodos Fêmeas pré-púberes (n = 75), sem raça definida (SRD) de um plantel com aptidão para produção de carne, no município de Arandú – SP, foram mantidas em sistema de produção preconizado por Villas Bôas et al. (2003). As borregas foram divididas equitativamente em 3 grupos (Grupos Controle – GC; GMAPesp e GP4LA) de 25 animais. No GMAPesp as fêmeas foram tratadas por 12 dias com esponjas intravaginais (medroxiprogesterona - 60mg) e nas fêmeas do GP4LA aplicou-se dose única de progesterona de longa ação (225 mg). Ao longo do experimento que teve duração de 82 dias e composto por 9 observações, as fêmeas dos três Grupos permaneceram juntas em um único ambiente e na presença de três machos vasectomizados. Para acompanhamento do desenvolvimento corporal, biometrias envolvendo aferições de Altura da Cernelha (AC) e Comprimento Esterno Isquiático (CEI) em cm e Peso em kg foram realizadas nas 9 observações e então determinado o IMC (IMC = peso.[(AC.100-1)(CEI.100-1)]-1) (Monteiro et al., 2010). No início das observações as borregas apresentavam idade média de 179 ± 1,2 dias, peso médio de 30,0 ± 0,124 kg e IMC médio de 80,97 ± 0,4. Quantificações de progesterona plasmática foram realizadas para se aferir a ciclicidade das fêmeas. Resultados e Discussão A maioria das borregas passou a ciclar após a indução com esponjas de medroxiprogesterona ou progesterona de longa ação associadas à bioestimulação (70/75 - 93,3%) e mantiveram-se cíclicas até final do experimento (69/75 - 92%) confirmado pelos valores de progesterona plasmática (≥1 ng/dL) em pelo menos uma das dosagens pareadas em 7 dias. A evolução do peso(y) em função do tempo (x) (y = 0,6587x+ 29,207; r2 = 0,96) e do IMC (y) em função do tempo (x) (y = 1,362x+ 79,772; r2 = 0,75) apresentou tendência ascendente. As fêmeas do GP4LA apresentaram maior peso no final do experimento (P < 0,05), sem diferenças quanto ao IMC (P > 0,05) em relação às do GC e GMAPesp. Há a necessidade de se determinar no futuro a magnitude do efeito anabólico da aplicação exógena de progesterona e a adequada relação do IMC com a idade à puberdade, desencadeada de forma natural. Referências bibliográficas Monteiro CD, Bicudo SD, Toma HS, Biscarde CEA, Oliveira TM, Falleiros MB, Bicudo LC, Magalhães LCO. Medroxyprogesterone acetate or long-acting progesterone in the biostimulation of lambs. Ital J Anim Sci,v.9, p.e64, 2010. Villas Bôas AS, Arrigoni MDB, Siveira AC, Costa C. Idade à desmama e manejo alimentar na produção de cordeiros superprecoces. Rev Bras Zootec, v.32, n.6, p.1969-1980, 2003. Palavras-chave: borregas, índice de massa corporal e puberdade. Keywords: body mass índex and prepuberty, ewe lambs.



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Avaliação do estresse causado por métodos de inseminação artificial em ovinos Assessment of stress caused by methods of artificial insemination in sheep

R.C.S.A. Araújo, B.M. Cardoso Neto, L.P. Barbosa1, C.S. Aguiar, P.A. Dutra, R.S. Souza,

A.L.A. Santana, W.M. Machado

1Universidade Federal do Recôncavo da Bahia, Cruz das Almas, BA 1E-mail: [email protected]

Introdução A inseminação artificial transcervical apresenta baixa fertilidade em ovinos, devido a diversos fatores, incluindo o estresse causado pela técnica (Kershaw et al., 2005). O estresse pode ser definido como a reação do organismo do animal à agentes nocivos que manifestam-se por alterações comportamentais e fisiológicas (Maffei, 2009). Dessa forma, objetivou-se avaliar o estresse causado pelos métodos de inseminação artificial em ovinos, por meio da avaliação de parâmetros fisiológicos.

Material e Métodos Foram utilizadas 114 fêmeas distribuídas em cinco grupos (G), sendo: G1: inseminação artificial transcervical (IAT) sem utilização de dilatador cervical (n=23); G2 - IAT com aplicação de 500UI de ocitocina via intramuscular (IM), 11h antes da IAT (n=23); G3 - IAT com aplicação de 1mg de estrógeno via IM, 11h antes (n=22); G4 - IAT com aplicação de 0,0375 mg de PF2α via IM, 11h antes (n= 23) e G5 - IA por laparoscopia (n=23). Foi utilizado sêmen resfriado diluído, com 150x106 espermatozóides por dose. Para a avaliação do estresse foi aferida a temperatura retal, frequência cardíaca e respiratória, após a realização da IA. Para análise dos dados foi utilizada análise de variância com 5% de significância. Resultados e Discussão A temperatura retal foi 38,57; 38,01; 38,05; 37,27 e 37,65°C, para os grupos 1, 2, 3, 4 e 5, respectivamente, sendo o grupo 1 superior aos demais (P<0,05) e o grupo 4 semelhante ao grupo 5 e inferior aos demais, valores estes, abaixo da média fisiológica normal (39,1°C) para a espécie. As médias relacionadas à frequência cardíaca foram de 78,60; 79,04; 73,81; 80,78 e 55,04 bat/min, para os grupos 1, 2, 3, 4 e 5, respectivamente, com o grupo 5 apresentando valores inferiores aos demais (P<0,05), apenas o grupo 5 apresentou valor fora do intervalo normal para ovinos. Para freqüência respiratória, as médias encontradas foram de 38,43; 38,60; 37,63; 38,52 e 58,86 mov/min, para os respectivos grupos 1, 2, 3, 4 e 5. O grupo 5 apresentou média superior (P<0,05) aos demais e à média fisiológica nessas condições. As alterações observadas no grupo 5 foram provavelmente consequência da sedação e anestesia dos animais. Referências bibliográficas Maffei W E. Reatividade animal. Rev Bras Zootec, v.38, p.81-92, 2009. Kershaw CM, Khalid M, McGowan MR, Ingram K, Leethongdee S, Wax G, et al. The anatomy of the sheep cervix and its influence on the transcervical passage of an inseminating pipette into the uterine lumen. Theriogenology, v.64, p.1225-1235, 2005. Palavras-chave: dilatador cervical, inseminação transcervical; laparoscopia. Keywords: cervical dilator, laparoscopy, transcervical insemination.



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Características cervicais de ovelhas Santa Inês inseminadas por via transcervical com e sem aplicação de dilatadores cervicais

Cervical characteristics of Santa Inês ewes inseminated with and without use of dilators

J. Figueredo Júnior, B.M. Cardoso Neto, L.P. Barbosa1, P.A. Dutra, A.L.A. Santana, R.S. Souza, C.S. Aguiar, A.B. Ferreira

1Universidade Federal do Recôncavo da Bahia, Cruz das Almas, BA


Introdução A cérvix da ovelha é uma estrutura complexa, que se estreita à medida que se aproxima do lúmen uterino, apresentando anéis que se dispõem excentricamente (Halbert et al., 1990; Kershaw et al., 2005). Dessa forma, objetivou-se avaliar as caracteristicas cervicais de ovelhas submetidas à inseminação transcervical com ou sem aplicação de dilatadores cervicais.

Material e Métodos Foram utilizadas 114 fêmeas distribuídas em cinco grupos (G) descritos a seguir: G1: inseminação artificial transcervical (IAT) sem utilização de dilatador cervical (n = 23); G2 - IAT com aplicação de 500UI de ocitocina via intramuscular (IM), 11h antes da inseminação (n = 23); G3 - IAT com aplicação de 1mg de estrógeno via IM, 11h antes (n = 22); G4 - IAT com aplicação de 0,0375 mg de prostaglandina F2α via IM, 11h antes (n = 23). Foi utilizado sêmen resfriado diluido, em uma concentração de 150x106 espermatozóides por dose inseminante. Foi avaliado o local de deposição do sêmen na cérvix, tipo e abertura cervical e tempo para realização da IA. Para análise dos dados foi utilizada análise de variância, para parâmetros quantitativos, e o teste de qui-quadrado, para parâmetros qualitativos, com 5% de significância. Resultados e Discussão Não houve diferença entre os grupos (P > 0,05) com relação ao tipo de cérvix, sendo encontrado 18,07 % de cérvix tipo bico de pato; 16,86%, tipo cratera; 16,86%, tipo flap e 48,19%, tipo roseta. No que tange a abertura cervical, não houve diferença (P > 0,05) entre os grupos, sendo encontrado 42,85% de cérvix com menor abertura; 47,25%, com abertura média e 9,89%, com abertura maior. Com relação ao tempo de IA não houve diferença (P > 0,05) entre os tratamentos, sendo em média 5,64 minutos por IA. Não houve diferença (P > 0,05) entre os grupos com relação ao local de deposição do sêmen no aparelho genital, sendo realizadas 25,27% das IA cervical superficial; 26,37%, cervical média; 16,48%, cervical profunda e 31,86%, intrauterina. Com base nas características avaliadas, o uso de dilatadores químicos cervicais não facilita a transposição cervical e o depósito do sêmen em sítios mais profundos da cérvix de ovelhas. Referências bibliográficas Kershaw CM, Khalid M, McGowan M.R, et al. The anatomy of the sheep cervix and its influenc. Theriogenology, v. 64, p.1225-1235, 2005. Halbert GW, Dobson H, Walton JS, et.al. The structure of the cervical canal of the ewe. Theriogenology, v.33, p.977-992, 1990. Palavras-chave: cérvix, dilatador cervical, muco cervical. Keywords: cervical dilator, cervical mucus, cervix.



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Taxa de gestação e avaliação econômica de diferentes métodos de inseminação artificial em ovinos

Pregnancy rate and economic evaluation of methods of artificial insemination in sheep

A.B. Ferreira, B.M. Cardoso Neto, L.P. Barbosa1, V.F. Almeida, M.A.A. Silva, J. Figueredo Júnior, M.O. Ribeiro, M.C.P. Leite

1Universidade Federal do Recôncavo da Bahia, Cruz das Almas, BA.

1E-mail: [email protected] Introdução A inseminação artificial é uma prática que está crescendo em ovinos (Campbell et al., 1996). Em razão da passagem do aplicador pela cérvix ser o principal entrave para realização de inseminação artificial transcervical nessa espécie, algumas substâncias têm sido utilizadas com o objetivo de provocar o relaxamento da cérvix (Santos et al., 2009). Desta forma, objetivou-se avaliar diferentes métodos de inseminação artificial em ovinos, por meio da taxa de gestação e avaliação econômica.

Material e Métodos Foram utilizadas 114 fêmeas distribuídas em cinco grupos (G) descritos a seguir: G1: inseminação artificial transcervical (IAT) sem utilização de dilatador cervical (n = 23); G2 - IAT com aplicação de 500UI de ocitocina via intramuscular (IM), 11h antes da IAT (n = 23); G3 - IAT com aplicação de 1mg de estrógeno via IM, 11h antes (n = 22); G4 - IAT com aplicação de 0,0375 mg de prostaglandina F2α via IM, 11h antes (n = 23) e G5 - IA por laparoscopia (n = 23). Foi utilizado sêmen resfriado diluído, em uma concentração de 150x106 espermatozóides por dose inseminante. Para avaliação econômica dos diferentes grupos foi considerado o custo do protocolo hormonal, da técnica utilizada e a taxa de gestação obtida em cada grupo. Resultados e Discussão O custo do protocolo hormonal foi de R$14,65; R$15,65; R$14,95; R$16,30 e R$14,65 para os grupos 1, 2, 3, 4 e 5, respectivamente. O custo para realização das inseminações foi de um salário mínimo para as inseminações transcervicais (R$ 510,00) e de dois salários para inseminação por laparoscopia (R$ 1.020,00). As taxas de gestação para os grupos 1, 2, 3, 4 e 5 foi de 30,4%; 8,6%, 0,0%; 13,0% e 68,1%, respectivamente. Com base nos valores acima, o custo de cada gestação por grupo foi de R$ 120,99; R$ 434.97; R$ 294,96 e R$ 89,48 para os grupos 1, 2, 4 e 5, respectivamente. O método laparoscópico apresentou o menor custo, com diferença de R$ 31,51 por prenhez em relação ao método transcervical sem dilatador cervical, caracterizando o melhor método em relação custo/benefício. Referências bibliográficas Santos ADF, Santos DC, Conceição JC, Carvalho ALC, Lisboa MLO. Taxa de gestação em fêmeas Santa Inês inseminadas pela via transcervical com sêmen fresco associada ou não à anestesia epidural. Rev Bras Saúde Prod Anim, v.10, n.1, p.224-230, 2009. Campbell JW, Harvey TG, Mcdonal MF, Sparksman RI. Transcervical insemination in sheep: an anatomical and histological evaluation. Theriogenology. v.45, p.1535-1544, 1996. Palavras-chave: custo.inseminação transcervical, laparoscopia. Keywords: cost, laparoscopy, transcervical insemination.



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Potencial da roscovitina em inibir reversivelmente a meiose em oócitos de ovinos Potencial of roscovitine to reversibly meiosis inhibit in ovine oocytes

L.F. Crocomo1, W.C. Marques Filho, M.J. Sudano, D.M. Paschoal, B.A. Monteiro, F.C. Landim-

Alvarenga, S.D. Bicudo

Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, FMVZ, UNESP, Botucatu, SP. 1E-mail: [email protected]; [email protected]

Introdução O cultivo in vtro dos COCs sob condições capazes de impedir temporariamente a progressão da meiose consiste numa estratégia para incrementar o potencial de desenvolvimento do oócito maturado in vitro (Gilchrist & Thompson, 2007). Desta forma, visou-se avaliar a eficiência e reversibilidade da inibição meiótica promovida pela roscovitina (inibidor das quinases dependentes de ciclina), na concentração de 100µM, em COCs de ovinos, cultivados in vitro. Material e métodos COCs grau 1 e 2 aspirados de ovários obtidos em frigoríficos foram distribuídos randomicamente em 2 experimentos. No experimento I, os COCs foram cultivados em estufa a 5% de CO2 em ar, por 24 horas, em meio de maturação constituído por TCM199, Soro Fetal Bovino, Cisteamina, Piruvato, Penicilina, LH e FSH (grupo controle) acrescido de 100 µM de roscovitina (Grupo Tratamento). No experimento II, os COCs foram submetidos às mesmas condições do experimento I e em seguida foram lavados por sete vezes e cultivados in vitro por mais 22 horas em meio de maturação isento de inibidores. Ao final de 24 horas e 46 horas, os COCs foram desnudos, corados com Hoechst 33342 e avaliados quanto ao estadio de maturação nuclear, em microscópio de fluorescência. Ao todo, 287 e 298 oócitos foram analisados nos experimentos I e II, respectivamente, sendo 142 e 148 no Grupo Controle e 145 e 150 no Grupo tratado com roscovitina. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância segundo delineamento inteiramente casualizado e as médias comparadas pelo teste de Scheffé a 5% de probabilidade Resultados e Discussão As condições de cultivo in vitro permitiram a progressão da meiose em 79,9% e 76,4% dos oócitos do Grupo Controle, cultivados por 24 e 46 horas, respectivamente. O tratamento por 24 horas com 100 µM de roscovitina promoveu adequado bloqueio meiótico em 53,1% dos oócitos, sendo que 15,9% e 37,2% foram mantidos em quebra de vesícula germinativa e metáfase I, respectivamente. No entanto, considerável proporção dos oócitos tratados com roscovitina (23,5%) atingiu o estadio de metáfase II e também degenerou. O bloqueio meiótico promovido pela roscovitina foi reversível, sendo que 60% dos oócitos atingiram o estadio de metáfase II após o cultivo in vitro por mais 22 horas em meio de maturação isento de inibidores. Estes resultados permitem inferir que a roscovitina, na concentração em estudo, foi eficiente em bloquear de maneira reversível a progressão da meiose em COCs de ovinos cultivados in vitro. Referências Bibliográficas Gilchrist RB, Thompson JG. Oocyte maturation: emerging concepts and technologies to improve developmental potencial in vitro. Theriogenology, v.67, p.6-15, 2007. Palavras-chave: inibidor da meiose, maturação nuclear, oócito, ovinos. Keywords: meiosis inhibitor, nuclear maturation, oocyte, ovine. Agradecimentos: FAPESP (2009/03627-9).



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Effect from the diet with three different protein concentrations on ovulation rates in superovulated dorper ewes

Efeito da dieta com três diferentes concentrações proteicas sobre as taxas de ovulação em ovelhas Dorper superovuladas

R.J.T.A. Pereira1,5, C.F. Guimarães2, M. Meireles3, C.B. Fernandes4

1,2Centro de Ensino Superior dos Campos Gerais (CESCAGE), Ponta Grossa, PR; 3Universidade Federal de Pelotas

(UFPEL), Pelotas, RS; 4Universidade de São Paulo (USP), São Paulo, SP. 5E-mail: [email protected]

Introduction The nutrition influences directly in the follicular development, maturation, ovulation, fertilization, embryo implantation and pregnancy processes (Robinson et al., 2006), however, the protein concentration effect on ovulation rates are still controversial. According to Saunders et al (2010), diets with high protein concentrations may alter the hepatic metabolism with effects on ovulation rates. Alves et al (2010) found no correlation between higher urea concentrations and hormonal ovulation control, oocety quality, and embryo development. Thus, this study purpose was to evaluate the diet effect with three different protein concentrations on the number of ovulations in superovulated ewes. Material and methods We used 15 Dorper ewes, between 3 and 4 years, pluriparous, kept in confinement system, under nutritional treatment for 30 days before superovulation. The animals were randomly divided into three groups: G 1, 5 females received diet with 32% CP; G2, 5 females received diet with sweet potato residue with 40% CP, and G 3, 5 females received 20% CP . All animals received corn silage (8.5% CP). For superovulation protocol it was used 320 IU FSHp, distributed in 8 applications, in decreasing doses at intervals of 12 hours. The animals were then subjected to laparoscopy for ovulation rate evaluation by counting the corpora lutea. Results and Discussion According to Siqueira (2010), the nutritional requirements for ewe maintenance is 13 to 14% CP, increasing the nutritional requirement in cases of pregnancy and lactation for up to 30% CP. Analyses were performed by SAS statistical software Windows 9.2 version. For the analyses, the GLIMMIX statistical procedure was used. However, there were no differences between the evaluated groups. References Alves FR, Martins CM, Braga, FA. Efeitos do fornecimento de dietas contendo nitrogênio não-protéico a fêmeas bovinas superovuladas sem prévia adaptação, durante curto tempo e em diferentes fases do ciclo estral. Rev Bras Zootec, v.39, p.1928-1936, 2010. Molle G, Landau S, Branca, A. Flushing with soybean meal can improve reproductive performances in lactating Sarda ewes on a mature pasture. Small Rumin Res, v.24, n.2, p.157-165, 1997. Robinson JJ, Ashworth CJ, Rooke, JA, Mitchell LM, Mcevoy TG. Nutrition and fertility in ruminant livestock. Anim Feed Sci Technol, v.126, p,259-276, 2006. Saunders GA, Alves NG, Pérez JRO, Souza JC, Muniz JA, Neto AJ. Efeito da sobrealimentação com fontes de proteína de diferentes degradabilidades sobre a ovulação em ovelhas Santa Inês. Rev Bras Zootec, v.39, n.12, p.2731-2738, 2010. Siqueira GB. de Ingestão de proteína para cordeiros da raça Santa Inês: Digestibilidade e desempenho. 2009. 95p. Tese (Doutorado em Zootecnia) - Universidade Federal de Lavras, Lavras. Palavras-chave: ovelhas, ovulação, reprodução, suplemento proteico. Keywords: ewes, ovulation, protein supplement, reproduction.



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Fatores relacionados à inseminação artificial transcervical que influenciam a taxa de fertilidade em ovinos Santa Inês1

Factors related to transcervical insemination influence the fertility’s rate in sheep Santa Inês breed

G.S. Taqueda2,5, E. Matos2, E.M. Santos3, R.F. Bittencourt4, H.C. Azevedo5

1Parte da dissertação de mestrado do primeiro autor, financiada pela FAPITEC, 2Universidade Federal de Sergipe, Aracajú, SE; 3Faculdade Pio Décimo, 4UNESP, Botucatu, SP: 5Embrapa Tabuleiros Costeiros

5E-mail: [email protected] Introdução Este trabalho teve por objetivo avaliar a influência de fatores relacionados à inseminação artificial transcervical, como local presumido de deposição do sêmen, grau de dificuldade na aplicação da técnica, tipos de orifício superficial externo da cérvix e duração do ato inseminatório sobre a fertilidade em ovelhas da raça Santa Inês. Material e Métodos Foram realizadas inseminações artificiais transcervicais com tração da cérvix em 122 ovelhas sendo utilizado sêmen congelado de 11 carneiros, todos os animais da raça Santa Inês. Durante a inseminação foram coletados dados como o tipo de orifício superficial da cérvix (OS: P - papila; FL – flap; BP - bico de pato; ES – espiral; FD - flor desabrochada), duração da manipulação cervical (2 a 3, 4 a 5 e 6 a 7 minutos), grau de dificuldade na transposição cervical (baixo, moderado e alto) e local presumido de deposição do sêmen (CS – cervical superficial; CP – cervical profundo; IU – intrauterino). Avaliou-se a influência destas variáveis sobre a fertilidade refletida pela taxa de prenhez. Utilizou-se qui-quadrado e o teste Z na análise dos dados com auxílio do programa Minitab, versão 15. Resultados e Discussão Os tipos de OS e a duração da manipulação cervical não apresentaram influência (p > 0,05) sobre a fertilidade. O grau de dificuldade na manipulação cervical influenciou (p < 0,05) a taxa de prenhez: fêmeas que apresentaram baixo grau obtiveram 52,0%, enquanto aquelas com alto grau de dificuldade obtiveram apenas 20,0% de prenhez. Da mesma forma, o local presumido de deposição do sêmen influenciou significativamente (p < 0,05) a taxa de fertilidade. As taxas de prenhez em cada local de deposição foram: IU - 45,83%; CP – 25,7%; CS - 15,4%. Como era esperado, deposições mais profundas acarretaram em maior fertilidade. Esses dados corroboram Paulenz et al. (2005), que relatam taxas de concepção de 50 % em fêmeas inseminadas pela via transcervical e deposição intrauterina. Conclui-se que o desempenho da IATC independe da classificação anatômica do orifício superficial cervical da ovelha e da duração da manipulação cervical dentro do intervalo testado (2 a 7 minutos). A IATC pode apresentar maiores taxas de fertilidade desde que se diminua a dificuldade em sua aplicação e se promova a deposição do sêmen mais profundamente. Referências bibliográficas Paulenz H et al. Effect of vaginal and cervical deposition of semen on the fertility of sheep inseminated with frozen-thawed semen. Vet Rec, v.156, p.372-375, 2005.

Palavras-chave: anel cervical externo, local de deposição do sêmen, tração cervical. Keywords: cervical opening, cervix traction, semen deposition.



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Taxa de prenhez em receptoras Santa Inês tratadas ou não com rbST no estro Pregnancy rate in Santa Inês recipient treated or untreated with rbST at estrus

I.M.R. Nascimento1,3, A. Sousa Junior1, L.H.C.M. Mota1, Y.N.T. Carvalho1, S.B. Ferreira1,

M.A. Castelo Branco1, I.O.T. Souza1, L.P. Morais1, T.M. Leal2, J.A.T. Souza1

1Universidade Federal do Piauí, Teresina, PI; 2Embrapa Meio-Norte, Teresina, PI. 3E-mail: [email protected]

Introdução As biotécnicas reprodutivas são importantes ferramentas para maximizar o sistema de produção animal. A transferência de embriões (TE) permite a multiplicação rápida de indivíduos geneticamente superiores, favorecendo a redução do intervalo entre gerações e a obtenção de um grande número de embriões de fêmeas doadoras. Objetivou-se com o presente trabalho avaliar o efeito do rbST na taxa de prenhez em receptoras Santa Inês, inovuladas com embriões de doadoras tratadas ou não com rbST. Material e Métodos Foram utilizadas 13 doadoras, divididas em dois grupos, G1 (n=6) e G2 (n=7). Em ambos os grupos as doadoras foram sincronizadas com implante vaginal de progesterona (CIDR®) por 14 dias, 100µg de PGF2α (Ciosin®) no 7° dia e foram superovuladas com 250UI de FSH (Folltropin-V®) do 12° ao 14° dia, em duas aplicações por dia. No dia da retirada do implante as doadoras do G2 receberam 125mg de rbST (Boostin®). As doadoras foram cobertas a cada 12 horas até o final do estro. As receptoras foram sincronizadas com esponja intravaginal impregnadas com medroxiprogesterona (Progespon®) por 14 dias e receberam, no dia da retirada, 250UI de eCG (Novormon®). No momento da detecção do estro, as receptoras foram divididas em dois grupos, R1 (n=19) que receberam soro fisiológico (controle) e R2 (n=19) que receberam 125mg de rbST (Boostin®). As colheitas foram realizaram por laparotomia, no 6º dia após a primeira cobertura. Embriões provenientes do G1 foram inovulados tanto em receptoras R1 como R2, o mesmo ocorrendo em relação ao G2. Os embriões foram inovulados aos pares, por semi-laparoscopia, no corno uterino ipsilateral ao corpo lúteo. O diagnóstico de gestação, por ultra-sonografia, foi realizado 30 dias após a inovulação.

Resultados e Discussão Tabela 1. Taxa de prenhez (%) em receptoras Santa Inês tratadas com ou sem rbST no estro, inovuladas com embriões de doadoras tratadas ou não com rbST

Receptora Doadora G1 G2

R1 (n=12) 5/12 (41,67)b 7/12 (58,33)a

R2 (n=10) 4/10 (40,00)b 6/10 (60,00)a

Total 9/22 (40,91)b 13/22 (59,09)a

Letras diferentes, na linha, diferem estatisticamente entre si pelo teste χ2 a 5% de probabilidade (p < 0,05). A Tab. 1 demonstra que houve diferença significativa na taxa de prenhez das receptoras inovuladas com embriões provenientes de doadoras que receberam ou não rbST. O rbST acelera o crescimento embrionário, aumentando as células trofoblásticas e elevando a secreção de INF-τ (Moreira et al. 2002), além de inibir a luteólise (Mann e Lamming, 2001), aumentando os índices de prenhez. Conclui-se que o rbST promoveu uma melhor sobrevivência embrionária em receptoras Santa Inês. Referências bibliográficas Moreira F, Badinga L, Burnley C. Bovine somatotropin increases embryonic development in superovulated cows and improves post-transfer pregnancy rates when given to lactating recipient cows. Theriogenology, v.57, p.1371-1387, 2002. Mann GE, Lamming GE. Relationship between maternal endocrine environment, early embryo development and inhibition of luteolytic mechanism in cows. Reproduction, v.121, p.175-180, 2001. Palavras-chave: embrião, prenhez, rbST. Keywords: embryo, pregnancy, rbST.



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Primeiros cordeiros nascidos a partir da produção in vivo de embriões executada pelo LAFIBRA/UNIVASF, em Petrolina-PE

First lambs born from in vivo embryo production performed by LAFIBRA/UNIVASF in Petrolina, PE

C.H.S.C. Barros1, M.S. Miranda1, T.V.C. Nascimento2, D.M. Nogueira3, M.L.L. Andrade-Lopes4, M.F. Cordeiro5, E.S. Lopes Júnior5

Laboratório de Fisiologia e Biotecnologia da Reprodução Animal (LAFIBRA), Universidade Federal do Vale do São

Francisco (UNIVASF), Petrolina, PE E-mail: [email protected];

Introdução Dentre as universidades de ensino superior, a Universidade Federal do Vale do São Francisco (UNIVASF), através do Laboratório de Fisiologia e Biotecnologia da Reprodução Animal (LAFIBRA), tem buscado formar profissionais capacitados na produção in vivo de embriões em pequenos ruminantes junto aos cursos de Medicina Veterinária e Zootecnia. Neste sentido, o presente resumo de propõe a descrever o primeiro processo de múltipla ovulação e transferência de embriões em ovelhas Dorper, bem como do nascimento dos primeiros cordeiros oriundos dessa prática, realizada inteiramente pela equipe do LAFIBRA/UNIVASF. Material e Métodos Estros de doadoras (n = 9; raça Dorper) e receptoras (n = 27; raça Santa Inês) de embriões ovinos foram sincronizados, utilizando esponjas intravaginais, impregnadas com acetato de medroxiprogesterona (Progespon®, Pfizer, Brasil). As doadoras foram tratadas, a partir de 48 horas antes da retirada da esponja, com 400 UI de pFSH (Pluset®, Pfizer, Brasil), e a cada 12 horas. As receptoras não receberam pFSH, mas sim 200 UI de eCG (Novormon®, Intervet/Schering-Plough, Brasil), no dia da remoção da esponja. A detecção de estro foi iniciada 12 horas após a retirada da esponja, sendo as doadoras cobertas no início do estro e 24 horas após. Seis dias a partir da primeira cobertura, após laparoscopia, doadoras que responderam ao tratamento superovulatório foram submetidas à colheita cirúrgica (Baril et al., 1995) de embriões. Após procura, identificação e qualificação dos embriões do lavado, estes foram separados aos pares em cateteres plásticos (Tom Cat®, Nutricell, Brasil) para transferência de embriões (TE), a qual foi realizada por semilaparoscopia (Baril et al., 1995) As receptoras que ovularam, receberam embriões no corno uterino ipsilateral ao ovário com corpo lúteo. Por ultrassonografia transretal, foi feito o diagnóstico de gestação, 35 dias após a TE. Resultados e Discussão Aproximadamente, 44% das doadoras superovularam, das quais foi obtida uma taxa de recuperação embrionária de 45,18%, totalizando 34 embriões recuperados. Dentre as receptoras que ovularam, 11 receberam embriões de grau I. As taxas de gestação e de parição foram de 81,8% (9/11), resultando em oito partos simples e um duplo. Assim, o LAFIBRA e a UNIVASF, tanto nos aspectos de ensino e pesquisa, quanto extensão, é capaz de realizar de forma eficaz um processo completo de MOTE em ovinos, sob condições semiáridas. Referências bibliográficas Baril G, Brebion P, Chesné P. Manual de formación práctica para el trasplante de embriones en ovejas y cabras. Roma: FAO, 1995. 182p. Palavras-chave: ovino, tranferência de embriões, Vale do São Francisco. Keywords: embryo transfer, San Francisco Valley, sheep.



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Efeito do sombreamento artificial na manifestação do estro de ovelhas Santa Inês nos meses de maiores e menores temperaturas no semiárido brasileiro

Shading effect on estrus manifestation of Santa Ines ewes during the months of highest and lowest temperatures in the brazilian semiarid

M. Henry1, C.A.A. Clemente1,4, F.A. Oliveira2, T.V.C. Nascimento2, C.H.S.C. Barros2, M.S. Miranda2, L.C. Magalhães2, V.C.D. Ferreira2, G.G.L. Araújo3, I. Borges1, T.V. Voltolini3

1Escola de Veterinária da UFMG, Belo Horizonte, MG; 2Universidade Federal do Vale do São Francisco, Petrolina, PE;

3Embrapa semiárido, Petrolina – PE. 4E-mail: [email protected]

Introdução A eficiência reprodutiva das ovelhas é conhecida por ser adversamente afetada por hipertermia, onde o estresse térmico também influencia a resposta à superovulação e manifestação do estro em ovinos (Naqvi et al, 2004) em programas de múltipla ovulação e transferência de embriões. Assim, este estudo teve por objetivo avaliar o momento do inicio do estro após retirada das esponjas em ovelhas Santa Inês submetidas a superovulação e mantidas em piquetes com e sem fonte de sombra artificial em duas distintas épocas do ano (maior e menor amplitude térmica). Material e Métodos O experimento foi realizado no campo experimental de Bebedouro da Embrapa Semiárido em Petrolina/PE, nos meses de julho e novembro de 2010, utilizando 11 ovelhas da raça Santa Inês por tratamento. As ovelhas foram mantidas em pastagem irrigada de Tiffton 85, sendo que para um destes grupos foi oferecido sombreamento artificial (Tela preta de polipropileno) com 80% de retenção luminosa com área de 2,5m2/animal. Para superovulação foram utilizadas esponjas vaginais contendo 60mg de MAP (Progespon®) por 12 dias, 200 mg de FSH (Folltropin®) em seis doses decrescentes de 12 em 12 horas, do 10º ao 13º dia e 37,5µg de D-cloprostenol (Veteglan®) no 10º dia. Doze horas após a retirada das esponjas, as doadoras foram expostas a machos de fertilidade comprovada, a cada 4 horas até a detecção do estro, momento que foi realizada a primeira cobertura por monta natural.

Resultados e Discussão O percentual de ovelhas que apresentaram sinais de estro foi de 86,34% x 68,18%, e as médias de tempo gasto por estas para manifestação do estro após a retirada das esponjas foi 23,80 ± 6,6 x 26,82 ± 5,6 horas nos tratamentos com e sem sombra respectivamente, independentemente da estação do ano (p>0,05). Nos meses de menor e maior amplitude térmica, os percentuais de ovelhas que manifestaram sinais de estro também foram 86,34% x 68,18%, e as médias de tempo de intervalo entre esponja e estro foram 24,51 ± 6,4 x 26,11 ± 6,4 horas respectivamente (p>0,05), independentemente da presença de sombreamento ou não. Valores próximos foram encontrados por Naqvi et al. (2004) em ovelhas Bharat Merino no semiárido da índia. Pode-se concluir que o uso de sombreamento e a maior amplitude de temperatura do meio não alteraram significativamente a manifestação de estro nas ovelhas Santa Inês. Referências bibliográficas Naqvi SMK, Maurya VP, Gulyani R, Joshi A, Mittal JP. The effect of thermal stress on superovulatory response and embryo production in Bharat Merino. Small Rumin Res, v55, p57-63, 2004. Palavras-chave: Estresse térmico, estro, ovelhas, semiárido. Keywords: estrus, ewes, semiarido, thermal stress.



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Cinética da maturação nuclear in vitro de oócitos obtidos de ovários de fêmeas ovinas abatidas

Nuclear maturation kinetcs in vitro of oocyte of ovaries ovine (Ovis aries) slaughterhouse

D.S. Almeida1,3, H.P. Santos1, A.O. Sousa1, F.Q.G. Bezerra2, C.R Aguiar Filho2, E.R. Santos Junior2, P.F. Lima2, M.A.L. Oliveira2, R.M. Chaves1,2

1Laboratório de Reprodução Animal, UEMA, São Luís, MA; 2Laboratório de Biotécnicas da Reprodução,

UFRPE, Recife, PE. 3E-mail: [email protected]

Introdução O presente trabalho teve como objetivo analisar a cinética da maturação nuclear in vitro de oócitos de fêmeas ovinas, pois poucos estudos são direcionados a essa espécie e além disso o conhecimento da regulação do crescimento folicular e da maturação oocitária é de grande importância no desenvolvimento de novas biotecnologias. Material e Métodos Os ovários de ovelhas foram coletados nos matadouros da região Metropolitana do Recife-PE e dos mesmos foram cultivados 968 oócitos com cumulus oophorus compacto em quatro diferentes tratamentos: T1 - TCM 199 com 10% de Soro Fetal Bovino (meio base); T2 - Meio base e 10 μg/mL de FSH e 10 μg/ml de LH; T3 - Meio base, 10 μg/ml de FSH e 10 μg/ml de LH e 10 UI de gonadotrofina coriônica humana (hCG); T4 - Meio base, 10 μg/ml de FSH e 10 μg/mL de LH , 10UI de hCG e 1 μg de 17b-estradiol/ml, em tempos de 20 a 22h, 23 a 24h, 26h e 28 horas de cultivo em estufa de CO2 a 5% e temperatura de 39ºC. Resultados e Discussão Nos tempos de 20 a 22h, 23 a 24h, 26h e 28 horas de cultivo respectivamente observamos no tratamento 1, que 45,43, 44,32, 53,73 e 54,04% dos oócitos reiniciaram a meiose, mostrando assim que o meio sem suplementação faz com que o inicio da meiose se torne retardado. No tratamento 2, as taxas de reinicio da meiose foram de 53,42, 58,94, 53,11 e 68,78% observando que a associação da gonodotrofina com o maior tempo de cultivo acelera o reinicio da meiose. Já no tratamento 3, estes percentuais foram de 69,50, 72,60, 74,94 e 78,85% evidenciando resultados inferiores aos encontrados por Dode e Adona (2001), em bubalinos. Além disso observamos que adição de gonadotrofinas ao cultivo permite maior percentual de maturação nuclear que com os tratamentos 1 e 2. No tratamento 4 os índices foram de 83,42, 79,46, 87,47 e 87,76% sendo assim as taxas de maturação obtidas nos diferentes tempos foram superiores aos encontrados por Xu et al. (1986) em bovinos. Referências bibliográficas Dode MA.N, Adona PR. Developmental capacity of Bos indicus oocytes after inhibition of meiotic resumption by 6-dimethylaminopurine. Anim Reprod Sci, v.65, p.171-180, 2001. Xu KP, Greve T, Smith S, Hyttel P. Chronological changes of bovine follicular oocyte maturation in vitro. Acta Vet Scand, v.27, p.505-519, 1986. Palavras-chave: maturação in vitro, oócito, ovino. Keywords: in vitro maturation, oocytes, ovine.



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Comparação da recuperação e viabilidade oocitária entre ovelhas da raça Dorper e Santa Inês submetidas a aspiração folicular por vídeolaparoscopia

Comparison of oocyte recovery and viability between Dorper and Santa Inês ewes subjected to sessions of follicular aspiration by videolaparoscopy

M. Chalhoub1, A.F. Tabet, J.S. Chacon, A.L. Ribeiro Filho, A.S. Rodrigues, M.V.G. Loiola,

E.A.B. Araújo, S.N. Oliveira, P.A. Ferraz, B.H.A. Andrade

Escola de Medicina Veterinária, UFBA, Salvador, BA. 1E-mail: [email protected]

Introdução A obtenção de oócitos é etapa fundamental para a realização da biotécnica de produção in vitro de embriões (PIVE) em animais domésticos. A vídeolaparoscopia se destaca por ser pouco invasiva, podendo ser realizada diversas vezes na mesma fêmea. No entanto, vários fatores relacionados a esta técnica necessitam ainda serem avaliados (TEIXEIRA et al., 2011). Sendo assim, o propósito deste estudo foi comparar a recuperação e viabilidade oocitária entre ovelhas das raças Dorper e Santa Inês submetidas à aspiração folicular por vídeolaparoscopia. Material e Métodos Utilizou-se 53 ovelhas doadoras de oócitos, adultas com três anos de idade em média, das quais 34 da raça Dorper e 19 da raça Santa Inês. Todos os animais tiveram a onda folicular sincronizadas de acordo com Teixeira et al. (2011). As aspirações foliculares foram feitas por vídeolaparoscopia por meio de três portais laparoscópicos na cavidade abdominal. As mesmas foram realizadas por um cateter de 16 G acoplado a um sistema de aspiração constituído por uma bomba a vácuo e um recipiente para coleta dos oócitos. Os folículos observados foram puncionados independe do seu tamanho ou grau de maturação e a lavagem do sistema feita periodicamente. O conteúdo folicular aspirado foi lavado e filtrado com uma solução a 37°C constituída de DPBS acrescido de heparina, colocado em placas de petri e observado ao esteriomicroscópio, afim de se identificar e selecionar os oócitos recuperados. Estes oócitos foram posteriormente classificados conforme os critérios morfológicos adotados por Hewitt e England (1997) e apenas aqueles com pelo menos uma camada de células do cumulus e eventuais granulações citoplasmáticas foram considerados viáveis. Comparou-se as variáveis número de oócitos recuperados e viáveis, por meio do PROC GLM, utilizando-se o teste de Student – Newman – Keuls (SNK), disponível no pacote estatístico Statistical Analysis System (SAS) - versão 6 (1996). Resultados e Discussão Na comparação entre as médias das quantidades totais de oócitos recuperados por vídeolaparoscopia nas ovelhas das raças Dorper (12,85±7,44) e Santa Inês (8,73±5,17) verificou-se diferença significativa (P<0,05). Os resultados superaram os 6,36 oócitos recuperados por Teixeira et al. (2011), utilizando esta mesma técnica e ovelhas da raça Santa Inês. Quanto à viabilidade oocitária, apesar de não haver diferença significativa, houve uma tendência (P=0,07) das doadoras da raça Dorper apresentarem uma maior produção de oócitos viáveis em relação aquelas da raça Santa Inês, com médias de 8,88±5,80 e 6,10±4,05, respectivamente. Os resultados obtidos demonstram que ovelhas da raça Dorper apresentaram uma maior recuperação oocitária realizada por vídeolaparoscopia quando comparadas com a obtida da raça Santa Inês, porém, essa característica não interferiu na viabilidade oocitária entre as raças. Referências bibliográficas Hewitt DA, England GCW. Effect of preovulatory endocrine events upon maturation of oocytes of domestic bitches. J Reprod Fertil Suppl, n.51, p.83-91, 1997. Teixeira PPM, Padilha LC, Oliveira MEF, Motheo TF, Silva ASL, Barros FFPC, Coutinho LN, Flores FN, Lopes MCS, Bandarra MB, Rodrigues LFS, Vicente WRR. Aspiração folicular por vídeolaparoscopia em ovelhas. Rev Cient Eletr Med Vet, v.16, p.1-10, 2011. Palavras-chave: aspiração folicular, oócito, ovino, vídeolaparoscopia. Keywords: oocyte, ovine, ovum pick-up, videolaparoscopy.



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Avaliação da qualidade dos oócitos obtidos por aspiração folicular por vídeolaparoscopia em ovinos das raças Dorper e Santa Inês

Rating quality of oocytes obtained by follicular aspiration by videolaparoscopy in Dorper and Santa Inês sheep

S.N. Oliveira, A.F. Tabet, J.S. Chacon, E.A.B. Araújo, A. de L. Ribeiro filho, P.A. Ferraz, A.S. Rodrigues, M.V.G. Loiola, B.H.A. Andrade, M. Chalhoub1

Escola de Medicina Veterinária, UFBA, Salvador, BA.

1E-mail: [email protected] Introdução A biotécnica de produção in vitro de embriões (PIVE) em pequenos ruminantes obteve avanços e foi rapidamente incorporada à reprodução destas espécies. A aspiração folicular por laparoscopia em pequenos ruminantes, consagrada como procedimento pouco traumático, firma-se como técnica ideal para exploração eficiente do potencial reprodutivo das doadoras (BALDASSARRE e KARATZAS, 2004). Deste modo, objetivou-se comparar a qualidade dos oócitos produzidos por meio da aspiração folicular por vídeolaparoscopia (LOPU) entre ovelhas das raças Dorper e Santa Inês. Material e Métodos Para esta pesquisa foram efetuadas 50 LOPUs em ovelhas, com três anos de idade em média, das quais 32 aspirações foram realizadas em ovelhas da raça Dorper e 18 aspirações foram realizadas em ovelhas da raça Santa Inês. Todos os animais tiveram a onda folicular sincronizada de acordo com Teixeira et al. (2011). As LOPUs foram feitas por meio de três portais laparoscópicos na cavidade abdominal utilizando um cateter de 16 G acoplado a um sistema de aspiração constituído por uma bomba a vácuo e um recipiente para coleta dos oócitos. Os folículos observados foram puncionados independe do seu tamanho ou grau de maturação e a lavagem do sistema feita periodicamente. O conteúdo folicular aspirado foi lavado e filtrado com uma solução a 37°C constituída de DPBS acrescido de heparina, colocado em placas de petri e observado ao esteriomicroscópio, afim de se identificar e selecionar os oócitos recuperados. Estes foram classificados qualitativamente segundo Hewitt e England (1997), sendo subdivididos em três grupos: G1- oócitos grau I (excelente), G2- oócitos grau II (bom) e G3- oócitos grau III (regular). Para se comparar a média da qualidade oocitária entre os animais da raça Dorper e Santa Inês, utilizou-se a análise de variância por meio do PROC GLM, aplicando-se o teste SNK disponível no pacote estatístico SAS, versão 6. Resultados e Discussão Obteve-se um total de 418 oócitos viáveis. Em relação à qualidade oocitária, observou-se que de um total de 302 oócitos viáveis provenientes das aspirações das ovelhas da raça Dorper, 18 (5,96%), 60 (19,87%) e 224 (74,17%) oócitos foram classificados como G1, G2 e G3, respectivamente, com uma qualidade oocitária média de 2,68±0,58. Já para a raça Santa Inês, de um total de 116 oócitos viáveis, foram classificados, respectivamente, 2 (1,72%), 36 (31,03%) e 78 (67,24%) oócitos, como G1, G2 e G3, perfazendo uma média de qualidade oocitária de 2,65±0,51. Não verificou-se diferença entre as raças. Esses resultados divergem dos obtidos por Teixeira et al. (2011) que trabalharam com LOPU em ovelhas da raça Santa Inês e verificaram que mais de 85% dos oócitos recuperados foram qualificados entre excelentes (47,6%) e bons (42,5%). Também há divergência dos resultados reportados por Baldassare e Karatzas (2004) que encontraram mais de 80% dos oócitos entre Grau I e II. Não houve influência das raças estudadas sobre a qualidade dos oócitos obtidos por LOPU, entretanto, mais estudos precisam ser realizados para se melhorar os índices de qualidade oocitária. Referências bibliográficas Baldassare H, Karatzas CN. Advances assited reproduction technologies (ART) in goots. Anim Reprod Sci, v.82/83, p.255-266. 2004. Hewitt DA, England GCW. Effect of preovulatory endocrine events upon maturation of oocytes of domestic bitches. J Reprod Fertil, v.2, p.83-91,1997. Teixeira PPM, Padilha LC, Oliveira MEF, Barros FFPC, Coutinho LN, Flores FN, Lopes MCS, Bandarra MB, Rodrigues LFS, Vicente WRR. Aspiração folicular por vídeolaparoscopia em ovelhas. Rev Cient Eletrôn Med Vet, v.16, p.1-10, 2011. Palavras-chave: oócito, ovino, vídeolaparoscopia, Aspiração folicular Keywords: oocyte, ovine, Videolaparoscopy, ovum pick-up.




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Influência da proporção macho:fêmea, nos períodos seco e chuvoso, sobre o desempenho reprodutivo de ovelhas da raça Santa Inês

Influence of male: female proportion in the dry and wet periods on reproductive performance of ewes Santa Ines

A.M. Fraga Junior2,3, A.M.S. Conceição1, M.D. Oliveira1, M.O. Paixão1, R.S. Silva1, D.A.F. Viana1, L.M. Freitas Neto1

1Departamento de Medicina Veterinária, Faculdade Pio Décimo, Aracaju, SE; 2Unidade Acadêmica de Garanhuns,

Universidade Federal Rural de Pernambuco, Garanhuns, PE. 3E-mail: [email protected]

Introdução Uns dos métodos mais simples e eficientes para a reprodução dos ovinos é a monta natural. Com este trabalho objetivou-se avaliar o efeito da proporção macho:fêmea nos períodos seco (PS) e chuvoso (PC) sobre o desempenho reprodutivo de ovelhas pluríparas (n = 90) da raça Santa Inês com idade de 24 a 60 meses. Material e Métodos Foram utilizadas 90 fêmeas pluríparas da raça Santa Inês, com idade variando entre 24 e 60 meses e três reprodutores que foram avaliados pelo exame clínico andrológico. Os animais fora divididos de forma aleatória em três grupos, G1 (n=1/20 fêmeas), G2 (n=1/30 fêmeas) e G3 (n=1/40 fêmeas). A estação de monta tanto no período seco (PS) quanto no período chuvoso (PC) durou 42 dias. Os resultados foram avaliados estatisticamente pelos testes t e Tukey.

Resultados e Discussão Nas condições do presente experimento foi possível concluir que não existem diferenças estatísticas significativas (P≥0,05) quanto às taxas de prenhez nos diferentes grupos. Tabela 1. Taxa de prenhez nas proporções macho:fêmea

Estação Proporção Macho:Fêmea 1:20 1:30 1:40

Seca 80a (16/20) 90a (27/30) 85a (34/40) Chuvosa 85a (17/20) 83,3a (25/30) 95a (38/40)

A manutenção em torno de 4-5% de carneiros com relação ao número de ovelhas em idade reprodutiva (Azambuja, 2002; Souza et. al. 2005) não influencia nas taxas de prenhez. De um modo geral, em rebanhos comerciais são utilizados de 2 a 3% de carneiros com essa finalidade, o que representa em torno de 30 a 50 ovelhas para cada carneiro num período de 17 dias, ou ainda, em média duas ou três ovelhas cobertas diariamente por cada carneiro. Referências bibliográficas Azambuja R. Censo de ovinos. Bagé: Insp. Veterinária Zootécnica de Bagé, 2002. 15p. Souza CJ et. al. Como aumentar a fertilidade do rebanho ovino. Bagé: Embrapa Pecuária Sul, 2005. 2p. Palavras-chave: fêmea, ovelhas, prenhez, proporção macho. Keywords: ewes, female, pregnancy, proportion male.



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Aspectos reprodutivos de ovelhas Santa Inês criados em clima quente e úmido do Pará Reproductive characteristics of Santa Inês ewes bred in hot and humid climate of Pará

F.N. Soares, L.F.S. Rodrigues1, Y.M. Santos, S.S. Rodrigues Filho, M.E.F. Oliveira,

P.P.M. Teixeira. V.J.C. Santos, E.L. Carvalho.

Centro de Pesquisa em Ovinos e Caprinos/Universidade Federal Rural da Amazônia (UFRA), 1E-mail: [email protected]

Introdução A reação dos animais quando postos nos trópicos, é um decréscimo das funções reprodutivas pelas alterações na fisiologia e no seu comportamento e tem como conseqüência final, sua baixa produtividade (Furtado e Araújo Filho, 2002). Devido a carência de informações a respeito da produção, aliada a falta de conhecimento sobre o comportamento reprodutivo de fêmeas ovinas da raça Santa Inês criadas em clima topical amazônico, este estudo teve por objetivo comparar o desempenho reprodutivo destas fêmeas ovinas em diferentes estações de reprodução ao longo de um ano. Material e Métodos O experimento foi realizado no ano de 2010, na região nordeste do Pará, com latitude 01º12'S, longitude 47º36'W, temperatura média de 25°C, precipitação pluviométrica média anual de 2.350 mm e umidade relativa do ar próxima a 85%. Foram utilizadas cento e cinqüenta e seis fêmeas pluríparas, com idade e peso médios de 48 meses e 39,6 kg respectivamente, divididas aleatoriamente em quatro grupos A(31), B(45), C(38) e D(42), todos mantidos em sistema semi-intensivo de criação, com água e sal mineral a vontade. O sistema de acasalamento utilizado foi monta natural, com duração de quarenta e cinco dias cada período assim distribuídos A: janeiro/fevereiro, B: abril/maio, C: julho/agosto, D: outubro/novembro. Para avaliar a performance reprodutiva das fêmeas foram analisadas as seguintes características: Taxa de cobertura (TC), Taxa de fertilidade (TF), Taxa de aborto (TA), Taxa de parição (TP), Prolificidade (PF). Resultados e Discussão Os resultados mostram que os parâmetros observados nas quatro estações de reprodução foram os seguintes: No grupo A, TC de 100%, TF de 81,25%, TA de 19,23%, TP de 62,51% e PF de 110%. No grupo B, as média obtidas foram 100%, 88,88%, 15%,77,77%,108,8% para TC, TF, TA, TP e PF respectivamente. Para o grupo C, as respectivas médias para TC, TF, TA, TP, e PF foram, 100%, 89,47%, 2,94%, 89,47%, 100%. Os dados parciais da quarta estação de reprodução que se estenderá até o dia 15 de abril, mostram uma TC de 100% e TF 90,47, sendo possível, entretanto, visualizar valores crescentes nos parâmetros reprodutivos do período chuvoso para o seco, mostrando claramente que embora com forragens de melhor qualidade, o rigor do clima tropical amazônico submete esses animais a um maior estresse no período das chuvas conforme observações de Moura (2009) e Sousa (2009). Referências bibliográficas Moura ACB. Desempenho reprodutivo de ovelhas Santa Inês criadas no Nordeste Paraense, 2009. Dissertação de Mestrado. Universidade Federal do Ceará - Departamento de Zootecnia. Sousa HLL. Comparação dos efeitos das estações do ano e sistema de amamentação sobre o período de puerpério de ovelhas Santa Inêz no nordeste do Pará. 2009. Dissertação de Mestrado. Universidade Federal do Ceará - Departamento de Zootecnia. Palavras-chaves: clima, fertilidade, ovino, reprodução. Keywords: climate, fertility, reproduction, sheep. Parte de dissertação de mestrado do Primeiro autor - Bolsa CAPES/REUNI.



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Parâmetros reprodutivos ao parto em ovelhas alimentadas com farelo de mamona detoxificada

Reproductives parameters on delivery in sheep fed with detoxified castor meal

C.C.L. Fernandes1, D. Rondina, C.H.A. Oliveira, L.M. Silva, F. V. Rodrigues, C.G. Barroso, I.L. Medeiros, E.C. Pinheiro

Laboratório de Nutrição e Produção de Ruminantes, FAVET, UECE, Fortaleza, CE.


Introdução Sabe-se que o farelo de mamona tem um elevado valor nutritivo, sendo rico em proteínas, fibras, minerais e gorduras, mostrando ter um grande potencial para ser utilizado na alimentação animal. Porém, sabe-se que a sua utilização para este fim tem sido limitada devido à presença de elementos tóxicos e alergênicos na sua composição, como por exemplo, a ricina. No entanto, esta proteína é facilmente desativada por um processo de detoxificação envolvendo óxido de cálcio. Diante disso, este estudo objetivou avaliar o efeito da utilização do farelo de mamona detoxificada sobre os parâmetros reprodutivos ao parto de ovinos. Material e Métodos O experimento foi realizado na fazenda do Centro Educacional da Juventude Padre João Piamarta, localizada no município de Itaitinga/CE. Foram selecionadas 43 fêmeas ovinas. Estes animais foram divididos em dois grupos: Grupo Controle (23 animais) e Grupo Mamona Detoxificada (20 animais). Os grupos eram alimentados com feno de tifton e uma ração concentrada (Grupo Controle) ou uma ração concentrada onde a fonte protéica (farelo de soja) foi substituída por farelo de mamona detoxificado (Grupo Mamona Detoxificada). O plano alimentar iniciou-se 15 dias antes da monta e estendeu-se até o parto. Para a detoxificação da mamona, foi adicionado ao subproduto uma solução de óxido de cálcio (CaO) (1 kg/9 L de água) na proporção de 60 g de CaO/kg de farelo (Oliveira, 2008). O material foi secado por uma noite (12-18 horas) para posterior armazenamento e utilização. Após a sincronização do estro, dois machos foram introduzidos junto às fêmeas, permanecendo com as mesmas por 72 horas. Os dados obtidos foram submetidos ao teste Qui-quadrado, considerando diferença significativa quando p < 0,05. Resultados e Discussão As taxas de parições foram de 52,17% para o Grupo Controle e 55% para o grupo Mamona Detoxificada, não havendo assim diferença significativa entre os dois grupos alimentares (p > 0,05). A taxa de gemelaridade no Grupo Controle foi de 8,33%, enquanto no Grupo Mamona Detoxificada foi de 27,27%. Este resultado pode ter ocorrido devido à eficácia do método de detoxificação com óxido de cálcio, no Grupo Mamona Detoxificada. Conclui-se, então, que o farelo de mamona detoxificado não interferiu negativamente nos parâmetros reprodutivos ao parto de ovelhas Santa Inês. Referências bibliográficas Oliveira AS. Co-produtos da extração de óleo de sementes de mamona e de girassol na alimentação de ruminantes. 2008. 183f. Tese (Doutorado em Zootecnia) – UFV, Viçosa, MG. Palavras-chave: farelo de mamona, ovino, parto. Keywords: castor meal, delivery, sheep.



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Histopatologia e sorologia de T. gondii e N. caninum ovina no Rio de Janeiro Histopathology and serology ovine T. gondii and N. caninum in Rio de Janeiro

A.F. Silva1, M.F.V. Mello,1 J.S. Silva1, R.I.J. Cosendey1, F.Z. Brandão1, W. Lilenbaum1,

G. Martins1, F.C.R. Oliveira2, A.M.R. Ferreira1

1UFF, Niterói, RJ; 2UENF, Campos, RJ. E-mail: [email protected]

Introdução Em pequenos ruminantes a infecção toxoplásmica é causa de morte fetal, mumificação, natimortalidade, abortos ou nascimentos de animais debilitados (Dubey, 1990). A neosporose é responsável por quadros de abortamento, morte embrionária, malformação fetal e nascimento de cordeiros fracos ou persistentemente infectados (Almeida, 2004). O objetivo deste estudo foi avaliar estes animais por meio da histopatologia e sorologia de T. gondii e N. caninum, tendo em vista os problemas reprodutivos que estes parasitos causam aos ovinos. Material e Métodos Foram utilizados 32 ovinos selecionados de um total de 342 animais provenientes do Estado do RJ para estudos histopatológicos e sorológicos de T. gondii pelo MAT e N. caninum pelo Elisa. Estes animais foram divididos em 3 grupos: 27 soropositivos para T. gondii, 8 para N. caninum, e 5 soronegativos, sendo 7 animais soropositivos tanto para T. gondii quanto para N. caninum. Foram coletadas amostras de cérebro, coração, fígado, rim, pulmão e diafragma em formol tamponado 10%, processadas, incluídas em parafina e coradas pelo HE. Resultados e Discussão Nos testes sorológicos detectamos 59,23% de soropositividade para T. gondii. Este resultado está de acordo com o obtido por Bártová et al., 2009. Para neosporose a porcentagem encontrada foi de 4,97%, menor que a relata em ovinos de outras regiões do Brasil (Faria et al., 2009). Estas diferenças poderiam ser explicadas pelos diferentes testes utilizados, clima ou até mesmo o uso de amostras de rebanho com problemas reprodutivos. Dos animais infectados por T. gondii e avaliados pela histopatologia 69,88% apresentavam alterações microscópicas similares a outros estudos (Motta et al., 2008). Assim como na toxoplasmose as lesões encontradas nos animais soropositivos a N. caninum também foram relatadas em outros trabalhos (Kobayashi et al., 2001). Até o presente momento, não há relatos de abortos ou infecção de toxoplasmose ou neosporose em ovinos no RJ. Este estudo descreveu a infecção das enfermidades por meio dos métodos diagnósticos demonstrando que as infecções estão presentes em ovinos no estado e podem trazer problemas reprodutivos e consequentemente prejuízos econômicos. Referências bibliográficas Almeida MAO. Epidemiologia da Neospora caninum. Rev Bras Parasitol Vet, v.13, n.1, p.37-40, 2004. Dubey J. Status of toxoplasmosis in sheep and goats in the United States. J Am Vet Med Ass, v.196, n.2, p.259-262, 1990. Motta AC, Vieira MIB, Bondan C, Edelweiss MIA, Dametto MA, Gomes A. Aborto em ovinos associada à toxoplasmose: Caracterização sorológica, anátomo-patológica e imunoistoquímica. Rev Bras Parasitol Vet, v.17, n.1, 204-208, 2008. Kobayashi Y, Yamada M, Omata Y, Koyama T, Saito A, Matsuda T, Okuyama K, Fujimoto S, Furuoka H, Matsui T. Naturally-occurring Neospora caninum infection in an adult sheep and her twin fetuses. J Parasitol, v.87, n.2, p.434-436, 2001. Palavras-chave: histopatologia, N. caninum, ovino, sorologia, T. gondii. Keywords: histopathology, N. caninum, ovine, serology, T. gondii.



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Frequência de aglutininas anti-Leptospira em ovinos na Microrregião de Presidente Dutra, Maranhão

Frequency of anti-Leptospira agglutinins in sheep in the microregion in the Presidente Dutra, Maranhão, Brazil

S.M. Carvalho, C.B. Mendes1, A.L.B.B. Mineiro, J.M. Muniz, I.V. Nascimento, L.S. Lima, M.S. Carneiro, D.F.M. Pessoa, F.A.L. Costa

Laboratório de Fisiopatologia da Reprodução, Universidade Federal do Piauí, Teresina, PI.

1E-mail: [email protected] Introdução A leptospirose em ovinos tem sido relatada em todos os continentes e a infecção com diferentes sorovares foram relatadas em diversos países. A evolução da doença é assintomática, mas pode ocorrer surtos na forma de abortamento e morte de cordeiros. O estudo objetivou-se determinar a freqüência de aglutininas anti-leptospiras em rebanhos ovinos de 11 municípios da Microrregião de Presidente Dutra, Maranhão. Material e Métodos Colheram-se 379 amostras de sangue de ovinos, de várias raças, machos e fêmeas, acima de 06 meses de idade, provenientes de 37 propriedades, de 11 municípios da Microrregião de Presidente Dutra – MA, para pesquisa de aglutininas anti-leptospiras durante o período de março a junho de 2010. As amostras de soro obtidas foram submetidas a prova de soroaglutinação microscópica (SAM).

Resultados e Discussão Das 37 propriedades amostradas 30 (81,08%) apresentaram animais reagentes. Das 379 amostras coletadas, 121 (31,93%) apresentaram títulos de anticorpos iguais ou superiores a 100. Os sorovares detectados foram: grippotyphosa (66,94%), Bratislava (9,09%), Wolffi/Hardjo (9,09%), Hardjo (4,96%), Icterohaemorragiae (4,96%), Pomona (2,48%), Castellonis (1,65%) e Copenhageni (0,83%). Este resultado foi superior aos encontrados por Salaberry (2010) no município de Uberlândia – MG e Azevedo et al. (2004) no Estado do Rio Grande do Norte (2004) e inferior ao obtido por Aguiar et al. (2010) no município de Monte Negro, Estado da Rondônia. A infecção por leptospira está presente nos ovinos da Microrregião de Presidente Dutra – MA. Referências bibliográficas Aguiar DM et al. Anticorpos anti-Leptospira spp em ovinos no município de Monte Negro, Estado de Rondônia, Arq Inst Biol, v.77, p.529-2, 2010. Azevedo SS et al. Ocorrência de aglutininas anti-leptospira em ovinos do Estado do Rio Grande do Norte, Brasil. Rev Bras Cienc Vet, v.11, p.167-0, 2004. Salaberry SRS. Epidemiologia das principais doenças infecciosas de ovinos do município de Uberlândia, MG. Dissertação (Mestrado) – Universidade Federal de Uberlândia, Programa de Pós-graduação em Ciências Veterinárias, 2010. Palavras-chave: Leptospira, ovino. Keywords: Leptospira, sheep.



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Pesquisa de anticorpos anti-Brucella ovis em ovinos na microrregião de Presidente Dutra, MA

Detection of Anti-Brucella ovis antibodies in ovine in the Microregion of Presidente Dutra, Maranhão, Brazil

L.E.S. Nascimento, S.M. Carvalho, R.J. Vieira1, C.B. Nascimento, J.M. Muniz, J.C. Farias, F.A.L Costa, A.L.B.B. Mineiro

Laboratório de Fisiopatologia da Reprodução, Universidade Federal do Piauí, Teresina, PI

1E-mail: [email protected] Introdução A Brucelose ovina é uma doença infecto-contagiosa que leva à redução da fertilidade nos animais e mortalidade de cordeiros, causando epididimite e orquite nos machos e aborto e placentite nas fêmeas (Nozaki et al., 2004). Este estudo teve como objetivo pesquisar a presença de anticorpos anti-Brucella ovis, na Microrregião de Presidente Dutra, Maranhão. Material e Métodos Foram colhidas 379 amostras de sangue para obtenção de soro de ovinos, no período de março a junho de 2010, provenientes de 37 propriedades da Microrregião de Presidente Dutra – MA e procedeu-se a técnica de imunodifusão em gel Agar (IDGA), utilizando-se antígenos produzidos pelo Instituto de Tecnologia do Paraná (TECPAR). Resultados e Discussão Das 379 amostras de ovinos analisadas, dezoito (4,75%) foram reagentes. Este percentual é superior a resultados obtidos por Silva et al. (2009) no estado da Bahia (3,27%) e inferior ao obtido por Azevedo et al. (2004) no Rio Grande do Norte (11,3%). As diferenças na porcentagem de reagentes podem ser explicadas por diversos fatores, tais como: fatores espaciais e temporais e manejo sanitário conforme for citado por Estein ET al. (2002). A doença encontra-se presente na Microrregião de Presidente Dutra, MA. A adoção de medidas profiláticas e sanitárias devem ser realizadas visto as grandes perdas que esta patologia pode causar. Referências bibliográficas Azevedo SS et al. Ocorrência de Anticorpos anti- Brucella ovis em ovinos procedentes de quatro municípios do Estado do Rio Grande do Norte, Brasil. Agrop Téc, v.25, p.45-50, 2004. Estein SM, Baldi PC, Bowden RA. Comparison of serological tests based on outermembrane or internal antigens for detecting antibodies to Brucella ovis in infected flocks. J Vet Diag Invest, v.14, p.407-411, 2002. Nozaki CN, Megid J, Lima KC. Comparação das técnicas de imunodifusão em gel de Agar e ELISA no diagnóstico da brucelose ovina em cabanhas da região Centro-oeste do Estado de São Paulo. Arq Inst Biol SP, v.71, p.1-5, 2004. Silva NS et al. Detecção de anticorpos anti-Brucella ovis em ovinos do estado da Bahia. Rev Bras Saúde Prod Anim, v.10, p.852-859, 2009. Palavras-chave: Brucella ovis, ovino. Keywords: Brucella ovis, ovine.



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Screening of molecular markers like RAPD for prolificity factors in sheep

D.M.F. Silva1, I.L.V.L. Santos, S.S.N. Rocha, M. Adrião, A. Wischral

Universidade Federal Rural de Pernambuco, Laboratório de Fisiologia Animal Molecular Aplicada (FAMA), Recife, PE. 1E-mail: [email protected]

Introdução A prolificidade de ovelhas é uma característica economicamente muito importante por propiciar maior número de prole por indivíduo. Alguns autores responsabilizam certos genes e SNPs por conferirem essa característica para o rebanho ovino. Contudo, a influencia de apenas alguns genes nessa característica pode ser uma conclusão simplória sobre esta capacidade. Os marcadores genéticos moleculares têm inúmeras vantagens, destacando-se o fato de não serem influenciados pelo ambiente e serem independentes do estágio da vida do animal, sendo uma poderosa ferramenta dos programas de melhoramento genético. Dito isto, este trabalho tem como objetivo desenvolver e analisar marcadores do tipo RAPD em ovelhas para verificar se polimorfismos genômicos aleatórios podem ser utilizados como indicadores da maior prolificidade de certos indivíduos, quando comparados com outros da mesma espécie. Material e Métodos O DNA genômico das ovelhas, Morada Nova, foram extraído no laboratório de Fisiologia Animal Molecular Aplicada (FAMA) da Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE). A extração de tecido sanguíneo foi realizada de acordo com o descrito por Sambrook et al., 1989 [1]. Os primers utilizados neste trabalho foram sintetizados pela (Gene link, Inc). Para os testes utilizou-se um total de 20 “primers” decâmeros dos kits Operon – OP (OPG12, OPH05, OPH06, OPH09, OPH10, OPH13, OPH15, OPH16, OPH17, OPH18). Após uma análise inicial os primers mais responsivos foram aplicados para os animais com parto simples, duplo ou triplo. Foram eles o G12 e o H18. Cada reação de amplificação foi preparada para um volume final de 10 μL. As amplificações foram conduzidas no Termociclador Mastercycler (MJ Research, Inc), empregando-se um programa com um ciclo inicial de 95ºC por 5 min, seguido por 30 ciclos de 1 min a 95ºC, 40ºC por 1min, 72ºC por 1 min e uma incubação final a 72ºC por 5 min. Os produtos foram analisados em gel de agarose a 2,5% com Blue Green. Resultados e Discussão Dos 10 primers RAPD testados 8 produziram bandas, mas nem sempre com presença de polimorfismos. Os primers OPG12 e OPH18 se mostraram mais eficientes na produção de bandas nos animais analisados, estes foram utilizados para otimização do processo de amplificação das amostras. Os mesmos produziram uma média de 9 bandas por amostra. Foram obtidas um total de 37 bandas com o primer OPG12 e 15 bandas com o primer OPH18 para as três amostras em estudo, dessas, 94% até o momento foram monomórficas. O polimorfismo por RAPD depende dos tipos de iniciadores utilizados e da sua temperatura de anelamento na PCR, para que produzam fragmentos visíveis e de tamanhos diferentes [2]. Quanto mais iniciadores forem testados, maiores serão as chances de se detectarem os polimorfismos e conseqüentemente os resultados serão mais confiáveis [3]. Baseados nos resultados encontrados até o momento podemos concluir que o primer OPG12 e OPH18 se mostraram mais eficientes na produção de bandas, isto favorecerá trabalhos posteriores na busca de polimorfismos. Num futuro próximo, outros marcadores moleculares genéticos tais como os do tipo ISSR (Inter Simple Sequence Repeats) podem ser utilizados como ferramentas adicionais para a identificação de polimorfismos envolvidos nessa característica tão importante economicamente.

Referências bibliográficas [1] Sambrook J. et al. Molecular cloning, 2.ed. New York: CSH, 1989. v.1.2.3. [2] Williams JCG, Kulbelik AR, Livak KJ, Rafalski JA, Tingey SV. DNA polymorphisms amplified by arbitrary primers are useful as genetic markers. Nucleic Acids Research, 18:6531-6535, 1990. [1] Welsh J, McCleland M. 1990. Fingerprinting genomes using PCR with arbitrary primers. Nucleic Acids Research, 18:7213-7218. Palavras-chave: polimorfismos, primers, prolificidade, RAPD. Keywords: polymorphisms, primers, prolificity, RAPD.



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Influência da variação climática sobre alguns parâmetros reprodutivos de machos ovinos criados em clima tropical amazônico

Influence of climatic variation on some reproductive parameters of male sheep reared under tropical Amazon climate

V.J.C. Santos1, L.C. Lechinoski1, E.P.M. Gonçalves1, S.S. Rodrigues Filho1, T.C. Brito,

M.E.F. Oliveira2, C. Faturi1, M.C. Manno1, L.F.S. Rodrigues1,3

1Universidade Federal Rural da Amazônia, Belém, PA; 2UNESP, Jaboticabal, SP. 3E-mail: [email protected]

Introdução Segundo Barbosa e Silva (1995), fatores como temperatura e umidade do ar limitam a produção em regiões de clima tropical. Muller et al., (1994) referem que o estresse térmico provoca alterações fisiológicas, incluindo as do mecanismo de termorregulação testicular, com marcante degeneração seminal Vogler et al. (1991). Dado essas características de clima limitantes para a produção de ovinos, faz-se necessário conhecer melhor as influências da variação climática sobre alguns parâmetros reprodutivos de ovinos criados nas condições de clima tropical amazônico. Material e Métodos Foram utilizados dez carneiros puros de origem da raça Santa Inês e dois mestiços, criados em sistema semi-intensivo, com médias de idade e peso de 48 meses e 70 Kg respectivamente. Uma vez por semana eram feitas as coletas de sêmen para o exame andrológico de acordo com as recomendações do CBRA. Em dias diferentes e duas vezes por semana, as 8,12 e 18 horas, era feita a medição da distensão peduncular e a determinação da taxa de sudorese testicular segundo o método de Berman (1957), modificado por Schleger e Turner (1965). Resultados e Discussão Os resultados mostram que no período chuvoso somente a libido, a concentração espermática e o distendimento peduncular foram significativamente maiores que no período seco. As duas primeiras, como variáveis testosterona dependentes, podem ter sido influenciadas pela melhor oferta de alimento, já que a atividade androgênica tem uma estreita aproximação com o perfil de testosterona plasmática (Singh e Purbey, 1995). Segundo Armstrong (1994), temperatura elevada com alta umidade do ar é altamente estressante. Essa relação pode explicar o maior distendimento peduncular, já que nessa região a temperatura não diferiu nos períodos, enquanto que a umidade relativa apresentou significativa elevação no período chuvoso. A taxa de sudorese apresentou apenas uma tendência de elevação no mesmo período. Referências bibliográficas Berman A. Influence of some factors on the relative evaporative rate from the skin of cattle.Nature, 1957. Manual para exame andrológico e avaliação de sêmen animal. Belo Horizonte; CBRA, 1998. Schleger AV, Turner HG. Sweating rate of cattle in the field and their reaction to diurnal and seasonal changes. Aust J Agric Res, 1965. Palavras-chave: carneiros, estresse térmico, clima, adaptação Keywords: ram, heat stress, climate, adaptation



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Influência da Variação Climática na Taxa de Sudorese em Ovinos da Raça Santa Inês Criados na Região Metropolitana de Belém do Pará

Influence of Climate Change in Rate of Sweating in Sheep Breed Santa Ines Reared in the metropolitan area of Belém do Pará

L.F.S. Rodrigues1,3, L.C. Lechinoski1, V.J.C. Santos1, E.P.M. Gonçalves1, P.H.L. Bertolo1,

P. P. M. Teixeira2, C. Faturi1, S.S. Rodrigues Filho1

1CPCOP/UFRA, Belém, PA; 2UNESP, Jaboticabal, SP 3E-mail: [email protected]

Introdução O conhecimento das variáveis climáticas, sua interação com os animais e as respostas comportamentais, fisiológicas e produtivas são importantes na adequação do sistema de produção aos objetivos da atividade (NEIVA et al., 2004). Para Hopkins (1978), o estresse térmico tem sido reconhecido como um importante fator limitante da produção ovina nos trópicos. Com o objetivo de atender a demanda de mercado em expansão do Estado do Pará, o presente trabalho avaliou a influência da variação climática tropical úmida da região amazônica marcada pelos períodos seco e chuvoso, sobre a evaporação cutânea de ovinos da raça Santa Inês criados no município de Belém do Pará. Material e Métodos O estudo foi realizado no Centro de Pesquisa de Caprinos e Ovinos do Pará da Universidade Federal Rural da Amazônia. Foram utilizados dez carneiros e dez ovelhas da raça Santa Inês, criados em sistema semi-intensivo. As colheitas dos dados foram realizadas nos períodos de agosto de 2009 a julho de 2010, respeitando sempre os mesmos dias (segunda e sexta-feira) e horários (8h às 10h, 12h às 14h e 18h às 20h). Para a determinação da taxa de sudorese utilizou-se o método de Berman (1957), modificado por Schleger e Turner (1965). O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado. Os dados foram expressos em média e desvio padrão analisados por ANOVA a 5% de probabilidade para o teste “F”.

Resultados e Discussão No período seco, que apresentou valores médios maiores que o período chuvoso, a taxa de sudorese foi mais elevada no horário das 12h (134,27 g.m-2 h-1), por outro lado, o horário das 8h apresentou a menor média (104,21 g.m-2 h-1), enquanto nas 18h obteve-se um valor médio de 123,53 g.m-2 h-1. No período chuvoso, entretanto, os valores médios relativos aos mesmos horários (12, 8 e 18 h), foram de 106,60 g.m-2 h-1, 122,51 g.m-2 h-1, 96,27 g.m-2 h-1 respectivamente, evidenciando ainda, a maior taxa de sudorese nesse período, às 8 horas. Assim, nos períodos de maior elevação térmica, os ovinos buscam por processos de compensação, pois quando os animais são expostos a temperaturas ambientes elevadas, estão sujeitos à hipertermia, onde os processos termorreguladores de perda de calor são requeridos para manter a sua homeotermia (Hansen, 2005). Em situação estressante, a energia se torna um fator limitante, devido ao seu maior requerimento e menor fornecimento, em virtude da redução da ingestão de alimentos L.U (1989).

Referências bibliográficas Berman A. Influence of some factors on the relative evaporative rate from the akin of cattle, Nature, v.179, p.1256, 1957. Schleger AV, Tuner, HG. Sweating rates of catlle in the Field and their reaction to diurnal and seasonal changes. Aust J Agric Res, v.16, p.92-106, 1965. Palavras-chave: clima, ovino, sudorese, tropical. Keywords: climate, sheep, sweating, tropical.



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Avaliação da sazonalidade reprodutiva de carneiros Santa Inês, em Cachoeiras de Macacu- RJ

Evaluation of the reproductive seasonality of Santa Inês rams at Rio de Janeiro state

L.R. Santos, V.P. Reig, R.A. Torres Filho, F.Z. Brandão, J.A.S. Ribas1

Universidade Federal Fluminense, Niterói, RJ.

1E-mail: [email protected] Introdução A procura por carne ovina vem crescendo consideravelmente no Brasil e com isso, o estudo da fisiologia reprodutiva destes animais nos trópicos se faz necessária. Nos países de clima temperado os ovinos são reprodutores estacionais, porém pouco se conhece sobre a sazonalidade reprodutiva dos pequenos ruminantes nos trópicos (Martínez et al., 2004). Portanto este trabalho teve por objetivo avaliar a variação sazonal das características sexuais e seminais de carneiros Santa Inês, no município de Cachoeiras de Macacu - RJ. Material e Métodos Foram utilizados cinco carneiros da raça Santa Inês, entre 4 e 6 anos, criados em Cachoeiras de Macacu, RJ (Lat. 22o27’90’’ S, Long. 43o39’95’’ W). Estes permaneciam a pasto sendo suplementados com sal mineral, ração comercial e cana de açúcar picada por todo o ano. Durante dois anos consecutivos, coletou-se 10 ejaculados/animal (um a cada 48 horas) por estação do ano (50 ejaculados/estação/ano) iniciando-se as coletas na mudança de cada estação, momento em que se mensurou a circunferência escrotal (CE- em cm) de cada animal. Durante todas as coletas avaliou-se a libido (L) dos carneiros (1 a 5), o volume ejaculado (VE- mL), o no de espermatozóides ejaculados (EJ), a motilidade (M), a patologia (PE), o turbilhonamento (T) e o vigor espermáticos (VI) conforme recomendado pelo CBRA (Manual..., 1998). Utilizou-se o programa SAS (2002-2003) para analisar a variância dos dados através do ANOVA. Para a (L), (T) e (VI) utilizou-se o teste de Kruskal-Wallis. A significância foi de 5% para todas as variáveis. Resultados e Discussão Não houve variação sazonal (P> 0,05) para nenhuma das características avaliadas: CE - inverno (I) 30,50 ± 2,51, primavera (P) 30,25 ± 1,89, verão (V) 31,50 ± 2,38, outono (O)30,87 ± 2,78; L- (I) 3,95 ± 0,55, (P) 3,92 ± 0,70, (V) 3,95 ± 0,68, (O) 4,07 ± 0,47; VE- (I) 1,03 ± 0,39, (P) 1,00 ± 0,30, (V) 1,00 ± 0,30, (O) 1,02 ± 0,36; T- (I) 4,35 ± 0,66, (P) 4,35 ± 0,73, (V) 4,32 ± 0,73, (O) 4,20 ± 0,56; M- (I) 73,62 ± 7,59, (P) 74,12 ± 7,06, (V) 73,00 ± 7,99, (O) 74,50 ± 7,40, VI- (I) 4,02 ± 0,53, (P) 3,98 ± 0,66, (V) 4,00 ± 0,45, (O) 4,22 ± 0,48; EJ- (x 10 6/ejaculado)(I) 4275,90 ± 1792,38, (P) 4274,94 ± 1815,48, (V) 4271,73 ± 1959,50, (O) 4279,42 ± 1910,30; PE- (I) 12,05 ± 1,15, (P) 12,40 ± 1,41, (V) 12,20 ± 1,33, (O) 11,99 ± 1,23. Este fato chamou a atenção, uma vez que os carneiros são sabidamente reprodutores sazonais, apresentando sêmen de melhor qualidade na estação reprodutiva. Estes resultados podem ser explicados pela pequena variação do fotoperíodo encontrado em regiões tropicais e pelo oferecimento constante de alimentos durante todo o ano, como sugerido por Martínez et al. (2004). Além disso, utilizou-se a raça Santa Inês desenvolvida e selecionada no Brasil, fato que pode ter contribuído com os estes resultados. É sabido que existem raças mais ou menos susceptíveis a influência do fotoperíodo sobre a reprodução (Ibrahim, 1997). Conclui-se que carneiros Santa Inês, nestas condições experimentais, não apresentaram sazonalidade reprodutiva. Referências bibliográficas Ibrahim SA. Seasonal variations in semen quality of local and crossbred rams raised in the United Arab Emirates. Anim Reprod Sci, v.49, p.161-167, 1997. Manual para exame andrológico e avaliação de sêmen. 2.ed. Belo Horizonte, 1998.49p. Martínez JL. et al. Características Del eyaculado de sementales caprinos de la raza Bôer durante el año en condiciones de Cuba. Rev Cub Reprod Anim, v.30, p. 65-73, 2004. SAS, Statistical analysis system. Cary, SAS Institute, 2002-2003. Palavras chave: ovino, Santa Inês, sazonalidade, sêmen, trópicos. Keywords: ram, Santa Inês, seasonality, semen, tropics.



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Níveis seminais da Adenosina Desaminase (ADA) e a qualidade espermática de ovinos no período seco e chuvoso do estado do Pará

Levels of seminal Adenosine Desaminase (ADA) and sperm quality of sheep during the dry and rainy in the state of Pará

C.P. Gadelha, T.C. Brito, A.C.O. Amaral, E.P.M. Gonçalves, S.S. Rodrigues Filho,

L.F.S. Rodrigues1, M.C. Manno, C. Faturi

CPCOP/UFRA, Belém, PA. 1E-mail: [email protected]

Introdução Com a expansão da ovinocultura no estado do Pará tornam-se necessários avanços tecnológicos para melhorar a eficiência reprodutiva, na qual incluem indução e controle do estro e a Inseminação Artificial (IA) (Mazzoni-Gonzalez e Oliveira, 1991). Alternativas técnicas que incrementem o processo de conservação do sêmen para melhoria da capacitação espermática, devem ser estudadas e, nesse sentido é importante o conhecimento da ação da Adenosina Desaminase – ADA. Rodrigues (2001), afirma que a enzima tem ação detoxificante, por ser uma enzima especializada em regular os níveis de adenosina, o que poderá contribuir para o melhor desempenho metabólico dos espermatozóides. Este estudo investiga se há primariamente relação entre os níveis de ADA e a qualidade seminal nos períodos seco e chuvoso. Material e Métodos O estudo foi realizado no Centro de Pesquisa em Caprinos e Ovinos do Pará, campus UFRA. Foram utilizadas 5 machos puros da raça Santa Inês, criados em sistema semi-intensivo, com idades entre 24 e 48 meses em bom estado nutricional e sanitário. Foram realizadas duas coletas semanais as 8 e 10 horas, por meio da vagina artificial, para avaliação dos aspectos físicos e morfológicos. A determinação dos níveis da ADA foi através do método de Giust (1974) que se fundamenta na quantificação da amônia formada pela desaminação da adenosina. Resultados e Discussão As amostras foram analisadas e distribuídas utilizando-se média e desvio padrão. A análise de variância foi realizada segundo os procedimentos do GML do SAS (1990). Observou-se diferença (P < 0,05), para libido e vigor expressando valores maiores no período seco. A diferença para a ADA (P < 0,05) mais elevada no período seco, sugere que seus níveis enzimáticos acompanham a qualidade seminal.

Referências bibliográficas Mazzoni-Gonzalez CI, Oliveira VS. Técnicas para incrementar a eficiência reprodutiva de caprinos e ovinos. In: Reunião da Sociedade Brasileira de Zootecnia /Caprinocultura e Ovinocultura, João Pessoa. 1991, n.23, p.71-102. Rodrigues LFS. Caracterização da Adenosina Desaminase (ADA) e suas isoenzimas em tecidos de caprinos: um modelo para o estudo da artrite encefálica caprina (CAE). Universidade Federal do Ceará Faculdade de Medicina, 2001.

Palavras-chave: Adenosina Desaminase, enzima, plasma seminal, Santa Inês. Keywords: Adenosine Deaminase, enzyme, seminal plasma, Santa Inês.



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Variações de forma e calor irradiado pelo testículo de ovinos adultos Variations in shape and heat radiated by the testis of adult sheep

M.S. Araújo1, C.A. Cruz Júnior1,3, C.M. Lucci1, L.M. Ribeiro1, C. McManus2

1FAV, UnB, Brasília, DF; 2Departamento de Zootecnia, UFRGS, RS.


Introdução A temperatura na pele do escroto aumenta quando ocorre aumento na temperatura ambiente, ocorrendo a dissipação do calor em excesso principalmente pela evaporação de água (MARAI et al., 2007). O objetivo do presente estudo foi de analisar as variações de forma e calor irradiado pelo testículo de ovinos adultos criados no Distrito Federal. Material e Métodos Avaliou-se durante 3 dias consecutivos 18 animais adultos aptos à reprodução (Santa Inês-SI, Bergamácia-BG, Dorper-DR, Texel-TX, Ile de France-IF e Hampshire Down-HD), no Campo Experimental da Fazenda Sucupira (Embrapa-CENARGEN) em Brasília - DF, sendo três representantes por raça. Verificou-se o perímetro escrotal(PE) o comprimento(CT) a largura (LT) e espessura testicular(ET). A forma dos testículos foi calculada, segundo Bailey et al. (1996), pela razão entre largura e comprimento, sendo os resultados expressos em uma escala de 1,0 a 0,5 e estabelecidas as seguintes classes de formas: Classe 1: <= 0,5 = longo(L), Classe 2: de 0,510 a 0,625 = longo-moderado (LM), Classe 3: de 0,625 a 0,750 = longo-oval (LO), Classe 4: de 0,751 a 0,875 = oval-esférico (OE), Classe 5: de 0,876 a 1,0 = esférico (E). A temperatura escrotal (TE) foi obtida com termômetro infravermelho Raytek™. Utilizou-se delineamento inteiramente casualizado testando o efeito da forma testicular sobre a radiação infravermelha. Os dados foram analisados com o programa SAS® 9.2, por meio de ANOVA e correlações.

Resultados e Discussão A raça HD apresentou os maiores valores de PE, CT, LT e ET(36,67cm;10,33cm;6,83cm; 13,17cm). Os menor valores de PE(27,00cm), CT(7,83cm), LT(5,67cm) e ET(10,33cm) foram encontrados respectivamente nas raças BG e TX. O PE, CT, LT e ET apresentaram correlações estreitas entre si (r = 0,83; 0,78; 0,81). Verificou-se diferença altamente significativa (P<0,01) nas características biométricas testiculares entre as raças estudadas. As formas L e E não ocorreram na amostra estudada. A forma LO foi observada em todas as raças, apresentando as raças HD e DR apenas formas dessa classe. A forma do testículo afetou a TE, irradiando significativamente mais calor em LM(31,22±1,61

oC) que LO(30,18±2,42 oC) sendo verificado diferença de até 5oC entre os formatos. Nas mesmas condições ambientais, animais aptos à reprodução podem apresentar distinção nas formas testiculares e na irradiação de calor escrotal.

Referências bibliográficas Bailey TL et al. Testicular shape and its relationship to sperm production in mature Holsteins bulls. Theriogenology, v.46, n.5, p.881-887, 1996. Marai IFM et al. Physiological traits as affected by heat stress in sheep-A review. Small Rumin Res, v.71. p.1-12, 2007. Palavras-chave: biometria, reprodução, temperatura. Keywords: Biometrics, reproduction, temperature.



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Perfil eletroforético bidimensional das proteínas seminais com afinidade à heparina de carneiros da raça Morada Nova Branco

Two-dimensional electrophoresis profile of White Morada Nova rams seminal plasma heparin binding proteins

V. Gonzalez Cadavid¹, J.A.M. Martins, D.R. Rocha, J.P.A. Rêgo, O. O. Brasil, A.A.A. Moura

Depto. de Zootecnia, Universidade Federal do Ceará (UFC), Fortaleza, CE. 1E-mail: [email protected]

Introdução O presente estudo caracterizou o perfil eletroforético bidimensional das proteínas ligadoras de heparina (HBPs), presentes no plasma seminal de carneiros Morada Nova Branco criados no nordeste do Brasil. Material e Métodos Amostras de sêmen de carneiros Morada Nova Branco adultos foram coletadas por meio de vagina artificial e centrifugadas (700 x g, 15min, 4°C) para a obtenção do plasma seminal, o qual foi submetido à cromatografia líquida (FPLC) de afinidade à heparina segundo Martins, et al. (2010). As frações correspondentes aos picos sem e com afinidade foram coletadas e submetidas à precipitação protéica com acetona para a concentração e a remoção de sais. As frações foram ressuspensas em 200µl de tampão Tris-Cl. Seiscentos microgramas de proteínas do plasma seminal e das frações sem e com afinidade à heparina foram submetidas à eletroforese bidimensional (2D PAGE) para a caracterização dos mapas de cada amostra. Os géis foram revelados com Coomassie Blue Coliodal (G250), digitalizados e analisados com o programa PDQuest (BioRad). Resultados e Discussão Foram detectados 219 spots no gel do pico com afinidade à heparina (HBPs). Os spots com peso molecular (PM) entre 66 e 68 kDa e ponto isoelétrico (pI) 5,1 a 5,4 detectadas no gel das HBPs, estão compreendidas na mesma faixa de PM e pI correspondentes a MMP-2 (Rego, 2010). Estas proteínas atuam na remodelação da matriz extracelular. Outros dois grupos de proteínas também foram identificados; o primeiros encontram-se na mesma faixa das RSVP 22 com 16,9 a 18,2 kDa e pI entre 4,6 e 5,5. O ultimo grupo de PM entre 11 a 11,2 kDa e pI 5,5 a 5,7 coincidem com os spots da Bodhesin-1, (Rego, 2010). Algumas isoformas de RSVP 22 (spots de 16,8 a 23,4 kDa e pI 4,0 a 4,5 ) não ligaram na heparina, estando presentes apenas no gel das proteínas sem afinidade. Modificacoes pos-traducional na proteína podem ter alterado a sua capacidade de interação com o glicosaminoglicano. Não foram detectados spots semelhantes às RSVPs 14 no gel das HBPs. Tal resultado corrobora com Bergeron, et al. (2005) que verificaram que as RSVPs 22 e 14, pré-purificadas por uma cromatografia de afinidade pela gelatina, podem ser separadas por uma cromatografia de afinidade pela heparina. Devido à importância destas proteínas para a função espermática, a cromatografia de afinidade pela heparina constitui uma etapa complementar para a purificação de proteínas do plasma seminal associadas à fertilidade de ovinos deslanados. Referências bibliográficas Bergeron A, Villemure M, Lazure C et al. Isolation and characterization of the major proteins of ram seminal plasma. Mol Reprod Dev, v.71, p.461-470, 2005. Bradford MM. A Rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochem, v.72, p.248-254, 1976. Martins JAM, Souza CEA, Silva FDA et al. Electrophoretical characterization of Morada Nova rams seminal plasma heparin-binding proteins. In: International Symposium on Animal Biology of Reproduction, 3, 2010, Águas de São Pedro, SP. Belo Horizonte: CBRA, 2010. Rêgo JPA. Análise proteômica do plasma seminal de carneiros Santa Inês adultos. 2010. 107f. Dissertaçao (Mestrado em Zootecnia) - Universidade Federal do Ceara, Fortaleza. Palavras-chave: fertilidade, ovino, proteômica, sêmen. Keywords: fertility, ovine, proteomics, semen.



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Integridade do acrossoma e da membrana plasmática e função mitocondrial de espermatozóides de carneiros Dorper nos períodos seco

e chuvoso na região Norte do Piauí Acrosome integrity and plasma membrane and mitochondrial function of spermatozoa of Dorper sheep in the

dry and rainy seasons in northern Piaui

M.A. Castelo Branco1, J.M. Frazão Sobrinho1, H.S. Correia1, A. Sousa Júnior, I.M.R. Nascimento, Y.N.T. Carvalho, I.O.T. Souza, S.B. Ferreira, D.N.M. Costa,

L.H.C.M. Mota, F.J. Moraes Júnior, J.A.T. Souza

Universidade Federal do Piauí-UFPI, Laboratório de Biotecnologia da Reprodução (LBR), Teresina, PI. 1E-mail: [email protected]

Introdução O carneiro é um animal que manifesta sazonalidade reprodutiva a qual pode ser avaliada pela variabilidade anual de algumas características seminais quantitativas e qualitativas (Ibrahim, 1997). Sabe-se que a célula espermática pode ser móvel, mas apresentar lesões em diferentes compartimentos estruturais. O trabalho objetivou avaliar, por meio de sondas fluorescentes, a integridade do acrossoma e da membrana plasmática e a função mitocondrial de espermatozóides de carneiros Dorper nos períodos seco e chuvoso na região Norte do Piauí. Material e Métodos Foram utilizados seis carneiros adultos da raça Dorper. O sêmen foi obtido por meio de vagina artificial e avaliado quanto aos aspectos macroscópicos (volume e aspecto) e microscópicos (turbilhonamento, motilidade e vigor), sendo retirada uma alíquota de 10ul e diluída em 2 mL de formol salina para posterior avaliação morfologia e concentração espermática. O sêmen foi diluído em Tris-Gema, envasado em palhetas de 0,25 mL, congelado em máquina automatizada (TK3000) e armazenadas em botijão criogênico (-1960C). Após descongelação (37oC/30 segundos) as amostras foram avaliadas quanto à motilidade e vigor, e, uma vez consideradas viáveis, foram avaliadas a integridade do acrossomo (sonda florescentes FITC-PNA), membrana plasmática (associação de Diacetato de Carboxifluoresceína e Iodeto de Propídio) e função mitocondrial (sonda JC-1), todas através de sondas sob microscopia de epifluorescência.

Resultados e Discussão Tabela1. Valores médios e desvios padrão das características da célula espermática de ovinos Dorper nos períodos seco e chuvoso, na região Norte do Piauí.

Parâmetros (%) Período Seca Chuvosa

Integridade da membrana plasmática 39,4±6,0a 44,8±10,4a

Integridade do acrossoma 50,3±9,3a 31,4±4,2b

Atividade mitocondrial 35,5±7,0a 44.9±8,1a

Médias seguida das mesmas letras nas linhas não diferem entre si pelo teste de SNK (P ≥ 5%). Constata-se, na Tab. 1, que não houve diferença significativa para integridade da membrana plasmática e atividade mitocondrial, entre os períodos seco e chuvoso, ao passo que a integridade do acrossoma foi significativamente diferente nos mesmos períodos. Segundo Bittencourt (1999), um dos fatores mais importantes na avaliação da morfologia é a integridade do acrossoma, a qual é indispensável para uma boa fertilização. Conclui-se que a integridade do acrossoma foi a característica menos afetada durante o período seco. Referências bibliográficas Bittencourt RF, Ribeiro Filho AL, Santos ADF et al. Utilização do teste hiposmótico para avaliar a eficácia de diferentes protocolos de criopreservação do sêmen caprino. Ciênc Anim Bras, v.6, p.213-218, 2005 Ibrahim S. Seasonal variations in semen quality of local and crossbred rams raised in United Arab Emirates. Anim Reprod Sci, v.49, p.161-167, 1997. Palavras-chave: estrutura espermática, ovino, sêmen. Keywords: semen, sheep, sperm structure.



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Perfil bioquímico do plasma seminal de carneiros Dorper nas épocas seca e chuvosa na região norte do Piauí

Biochemical profile of seminal plasma of Dorper ram in the dry and rainy in Northern Piaui

J.M. Frazão Sobrinho1,3, M.A. Castelo Branco, D.N.M. Costa1, S.B. Ferreira1, L.H.C.M. Mota1, H.S. Correia1, I.M.R. Nascimento1, A. Sousa Júnior1, A.M.E. Xavier2, J.A.T Souza1

1Laboratório Biotecnologia da Reprodução (UFPI), Teresina, PI; 2Laboratório de Proteoma, CNCPC.

3E-mail: [email protected] Introdução Dada a limitação na análise dos parâmetros físicos e morfológicos da célula espermática em predizer a fertilidade de um reprodutor, a análise do plasma torna-se imprescindível, visto que algumas substâncias identificadas no plasma seminal podem ser associadas com a congelabilidade e qualidade do sêmen (Jobim et al., 2005). Desta forma, a detecção de fatores protéicos do plasma seminal que possam ser empregados como marcadores bioquímicos pode ser usada como um critério para a predição da fertilidade masculina (Fraser et al. 2006). Este trabalho objetivou avaliar possíveis variações na composição do plasma seminal de carneiros Doper nas épocas seca e chuvosa na região Norte do Piauí. Material e Métodos Foram utilizados seis carneiros Dorper adultos. As colheitas foram feitas através de vaginal artificial, quinzenalmente, nas épocas chuvosa (janeiro a abril) e seca (agosto a novembro). Após a colheita, o sêmen foi centrifugado a 1500G para extração do plasma seminal que foi acondicionado em palheta de 0,25 mL e armazenado em nitrogênio líquido. Por ocasião da análise, o plasma descongelado, foi centrifugado a 3000G para retirada dos debris celulares. A proteína total foi mensurada pelo método de Bradford (1976), ao passo que a frutose e ácido cítrico foram medidos de acordo com o proposto por Man (1946). O pH foi medido pela imersão de papel específico graduado de 5,5 a 9,0. Os dados obtidos foram analisados pelo teste Tukey a 5% de probabilidade.

Resultados e Discussão Tabela 1. Médias dos parâmetros bioquímicos do plasma seminal de ovinos Dorper, nas épocas seca e chuvosa do ano, na região norte do Piauí.

Parâmetros Época Chuvosa Seca

Proteínas Totais (µg/µL) 13,2b 19,6a Ácido Cítrico (mg /100mL) 233,2b 322,4a Frutose (mg/100mL) 207,5a 237,7a pH (0 a 14) 6,3a 6,8a

*médias seguidas de mesma letra não diferem pelo teste de Tukey a 5%. Como visto na tabela, no tocante às proteínas e ácido cítrico observou-se níveis mais elevados na época seca, já em relação ao pH e frutose não foram observadas diferenças. Segundo Aisen (2008), nos ovinos, a composição do plasma sofre influência das épocas do ano, levando à diminuição da congelabilidade e qualidade espermática, fora da estação reprodutiva. Referências bibliográficas Jobim MIM, Oberst ER, Salbego CG, Wald VB, Horn AP, Mattos RC. BSP A1/A2-like proteins in ram seminal plasma.Theriogenology v.63, p.2053-2062, 2005 Fraser L, Wysocki P, Ciereszko A, Plucienniczak G, Kotlowska M, Kordan W, Wojtczak M, Dietrich G, Strzezek J. Application of biochemical markers for identification of biological properties of animal semen. Reproductive Biology, v.6, p.5-20, 2006. Aisen, E.G. Reprodução ovina e caprina. São Paulo: MedVet. Cap 11, p.143-152, 2008. Palavras-chave: Sêmen Carneiros. Keywords: Semen Ram.



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Proteomics of cauda epididymal and vesicular gland fluid of Brazilian hairy rams Análise proteômica dos fluidos epididimário e das glândulas vesiculares de ovinos deslanados

C.E.A. Souza1, J.P.A. Rêgo1, J.T.A. Oliveira2, F.C. Gozzo3, M. Fioramonte3, A.A. Moura1

1Departamentos de Zootecnia e 2Bioquímica, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, CE; 3Instituto de Química,

Universidade de Campinas, Campinas SP. E-mail: [email protected]; [email protected]

Introduction The seminal plasma of the adult male is a mixture of secretions of the epididymis and accessory sex glands. Recently, we have shown that the expression of seminal plasma proteins change according to the developmental phase of the Santa Inês ram, and these changes coincided with puberty (Souza et al., 2010). The identification of seminal plasma proteins has been recently reported (Souza et al., 2011). Yet, the relative contribution of epididymal and vesicular gland secretions to the seminal plasma protein is still unknown. Thus, this study was conducted to identify the major proteins from cauda epididymal (CEF) and vesicular gland fluid (VGF) protein maps of Brazilian hairy rams. Material and Methods CEF was obtained by micro-perfusion, and VGF by gentle massage of the glands from 14 rams. Samples from both fluids containing 400 µg of protein were separated by 2D-PAGE, and the maps analyzed using PDQuest. Spots were then individually cut from at least three gels, run in different days, digested with trypsin, and identified by ESI-Q-ToF tandem mass spectrometry.

Resultados e Discussão On average, we detected 113 ± 7.3 spots per gel of CEF, with a maximum of 120 and a minimum of 86 spots per map. Sixty-two spots were consistently present on all maps, corresponding to twelve different proteins. Combined, these spots represented 46.87 ± 3.18% of the intensities of all spots detected in the 2-D maps. The most abundant proteins in the maps were identified as albumin and transferrin. Other proteins were identified in the CEF maps, including clusterin, α-1-anti-trypsin, serine protease inhibitors, prostaglandin D synthase, peroxiredoxin, α-2-HS-glycoprotein, actin, glutathione peroxidase and calpastatin. Concerning the VGF, 215 ± 11.9 spots per gel were detected, on average, with a maximum of 268 and a minimum of 193 spots per map. One hundred and four spots were present on all maps. The combined intensity of these spots represented 38.03 ± 2.21% of the intensities of all spots. Nineteen different proteins were identified in the VGF maps, being RSVPs 14 and 22, bodhesin 2 and albumin the most abundant proteins in the maps. The VGF of the rams also contained cystatin B, apolipoproteins A1 and A4, clusterin, disulfide isomerase, aldose reductase, enolase, transferrin, heat shock proteins, creatine kinase B, ERP29 and PH4B. The most abundant proteins in the CEF appear to be involved in sperm protection against oxidative stress, protease inhibitors or chaperones. On the other hand, for the VGF, the major proteins are involved mainly in sperm capacitation and formation of the oviduct reservoir. Their identities suggest an orchestration for the action of these proteins in sperm before and after ejaculation. Referências bibliográficas Souza CE, Araújo A, Oliveira JT, et al. Reprod Domest Anim, v.45, p.644-653, 2010. Souza CE, Rego, JP, Oliveira JT, et al. Reprod Fertil Dev, 2011. Accepted for publication. Palavras-chave: carneiro, epidídimo, glândula vesicular, plasma seminal, proteômica. Keywords: epididymis, proteomics, ram, vesicular glands, seminal plasma.



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Avaliação da ecogenicidade do parênquima testicular e correlação com as características físicas do sêmen em carneiros

Evaluation of the testicular parenchyma echogenicity and correlation of the semen physical characteristics in rams

P.P.M. Teixeira1,3, M.E.F. Oliveira1, L.C. Padilha1, T.F. Motheo1, C.C. D’Amato1,

L.F.S. Rodrigues2, W.R.R. Vicente1

1FCAV/UNESP, Jaboticabal, SP; 2CPCOP/UFRA, Belém, PA. 3E-mail: [email protected].

Introdução O objetivo deste estudo foi padronizar um método de avaliação ultrassonográfica da ecogenicidade do parênquima testicular em ovinos. Material e métodos Foram avaliados 6 animais adultos em idade reprodutiva, da raça Dorper e Santa Inês, já em uma rotina de colheitas de sêmen duas vezes semanais, mantidos em uma central de andrologia no Município de Jaboticabal-SP. Foi utilizado um aparelho Áquila Vet, ligado ao transdutor linear 6 MHz, utilizando gel acústico sobre a bolsa testicular previamente tricotomizada nas regiões de aferição. Foram feitas imagens em planos sagitais, transversais e frontais nos testículos direito e esquerdo. Com a função de aferição de ecogenicidade da imagem (escala de cinza), no próprio aparelho foram selecionadas três áreas predeterminadas do parênquima testicular. Os exames andrológicos foram realizados segundo CBRA (1998). Os dados foram expressos em média e desvio padrão, realizando o teste one-way ANOVA (não paramétricos) e regressão linear para correlação entre os dados de ecogenicidade e do exame andrológico, empregado o pacote estatístico Grafped Prisma 4. Resultados e discussão O Parênquima testicular apresentou-se, de uma forma geral, homogêneo, com ecogenicidade 37,91±5,2%. Verificou-se que não houve diferença entre a ecogenicidade entre os planos aferidos (p>0,05), o que já era esperado pela homogeneidade do parênquima testicular. Também se verificou uma correlação entre a ecogenicidade com o turbilhonamento do sêmen (P= 0,0358, r2= 0,37), e da ecogenicidade com a concentração espermática (P= 0,0192, r2= 0,43), sendo uma correlação moderada, podendo ser influenciada pelo baixo número de animais. Verificou-se que um dos animais apresentou ecogenicidade 32±7,763%, abaixo da média do grupo, apresentando pontos hiperecóicos e regiões hipoecóicas no parênquima testicular, manifestando na qualidade seminal inferior aos demais. Sendo este apresentado 22% de defeitos espermáticos totais resultado muito mais elevado que a média do grupo (5,15± 6,939%). Conclusões O estudo demonstrou que a metodologia empregada se mostrou confiável e com grande aplicação prática. Ainda, esta fornece dados adicionais sobre o perfil reprodutivo dos carneiros. Referências bibliográficas: Cardilli DJ. et al. Padrão ultrassonográfico do parênquima, mediastino e túnicas testiculares em bovinos jovens da raça nelore. Ciênc Anim Bras, v.11, n.4, p.899-905, 2010. Jucá AF. et al. Avaliação ultrassonográfica dos testículos e das glândulas sexuais anexas de carneiros Santa Inês. Ciênc Anim Bras, v.10, n.2, p.650-659, 2009. Palavras-chave: carneiros, exame andrológico, ultrassom, parênquima testicular. Keywords: andrological examination, rams, testicular parenchyma, ultrasound.



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Testículo bipartido em ovino Morada Nova – Relato de caso Testis bipartite in Morada Nova sheep - A case report

T.M.V. Melo¹, J.A.C. Lima Filho, J.G. Silva, C.R.A. Amaral, F.R. Correia, M.O. Sampaio,

N.C.T. Vasconcelos, W.M.A. Souza, M.C.O.C. Coelho

Universidade Federal Rural Pernambuco, Recife, PE. ¹Email: [email protected]

Introdução Vários fatores, como o ambiental, contribuem para a aparição de características morfológicas, que podem refletir sobre a capacidade reprodutiva dos animais (Almeida et al., 2010). Um exemplo de adaptação é a bipartição escrotal. Como relatos na literatura sobre testículos bipartidos em ovinos são escassos e tendo em vista a importância do esclarecimento sobre esta alteração anatômica, o objetivo do presente trabalho é relatar o caso de um ovino da raça Morada Nova que apresentava bipartição testicular. Material e Métodos Em visita técnica a um sítio localizado no município de Venturosa – PE, foi atendido um ovino, macho, de cinco meses de idade; da raça Morada Nova. O animal foi submetido a um exame físico geral e exame andrológico, que teve como indicadores a conformação testicular, a consistência, o comprimento do testículo, a temperatura, a elasticidade e a simetria; bem como comportamento reprodutivo ativo. Após a avaliação, optou-se pela cirurgia de desvio lateral do pênis em 45° com a linha mediana do abdômen para a utilização do animal como rufião. Resultados e Discussão No exame físico, o paciente encontrava-se em estação, com escore corporal três, aprumos sem defeitos e parâmetros fisiológicos normais. No exame testicular, notou-se consistência tenso-elástica, sensibilidade e mobilidade normais com tração e retração, ausência de líquido ou fibrose, e temperatura normal. Verificou-se que eram simétricos, localizados logo acima do jarrete e dispostos em bolsas escrotais com pedúnculos independentes com separação a partir da parede inguinal, demonstrando assim alto grau de bipartição dos escrotos, que de acordo Almeida et al. (2008) corresponde a mais de 50% de separação testicular. Para Machado Júnior et al. (2008) animais com bipartição escrotal, como neste caso, possuem maior produção espermática devido a maior capacidade do escroto em perder calor, garantindo termorregulação adequada ao testículo para realização da espermatogênese. Levando em consideração o clima e temperatura local, Vieira et al. (2008) sugere que este animal deveria ter sido priorizado para reprodução, tendo em vista seus estudos em caprinos com bipartição, onde estes apresentavam sêmen de melhor qualidade. No entanto, apesar dos diversos indicadores positivos para permanência do animal na reprodução, o proprietário optou pelo rufião por não considerar esta característica desejável para seu plantel. A despeito da escassez de relatos de casos de bipartição testicular ovina, fica demonstrada a possibilidade de ocorrência desta alteração na espécie. Referências bibliográficas Almeida MM et al. Efeito do grau de bipartição escrotal sobre a vascularização arterial do escroto de caprinos nativos do Estado do Piauí. Braz J Vet Res anim Sci, v.45, n.3, p.167-173, 2008. Almeida MM et al. Influência do grau de bipartição escrotal sobre parâmetros reprodutivos de caprinos. Pesq Vet Bras, v30, n.4, p.345-350, 2010. Machado Júnior AAN et al. Cellular characterization and quantification of seminiferous ephitelium in goats with and without bipatition of the scrotum. Braz J Morphol Sci, v.25, n.1-4, p.35-108, 2008. Vieira RJ et al. Influência da morfologia escrotal e da época do ano na qualidade do sêmen de caprinos criados no Estado do Piauí. Rev Bras Ciênc Agrár, v.3, n.4, p.376-380, 2008.

Palavras-chave: bolsa escrotal, pequenos ruminantes, reprodução, termorregulação. Keywords: reproduction, scrotum, small ruminants, thermoregulation.



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Qualidade pós-descongelação do semen ovino mantido por 0 e 12 h a 5ºC antes da criopreservação

The post-thaw quality of ram semen held for 0 and 12 h at 5ºC prior to cryopreservation

D.R. Câmara1,2,4, S.V. Silva2, F.C. Almeida2, J.F. Nunes3, M.M.P. Guerra2

1RENORBIO; 2ANDROLAB-UFRPE, Recife, PE; 3LATSCO-UECE, Fortaleza, CE.

4E-mail: [email protected] Introdução Apesar do sucesso na criopreservação com sêmen bovino, na espécie ovina ainda não foram observados os mesmos resultados, apesar das diversas técnicas adotadas. É possível que a manutenção do sêmen ovino por um período do equilíbrio pré-congelação permita uma melhor adequação dos microdomínios da membrana às modificações durante o resfriamento (Holt, 2000). Assim, objetivou-se com esse estudo avaliar o efeito de 0 e 12 h de tempos de equilíbrio sobre a qualidade pós-descongelação do sêmen ovino.

Material e Métodos Ejaculados provenientes de quatro carneiros foram agrupados em pool com no mínimo 3×109

espermatozoides/mL e 80% de motilidade, diluídos em Tris-gema (100×106 sptz/mL), envasados em palhetas de 0,25 mL e conduzidos à refrigeração a 5 ºC até obtenção do equilíbrio térmico. Nesse momento, metade das doses foi submetida à congelação (-12,5 ºC/min até -120 ºC, TK-3000, Brasil) e, em seguida, imersas e armazenadas em N2 líquido (-196 oC). O procedimento foi repetido com a segunda metade após 12 h de tempo de equilíbrio. As amostras foram avaliadas quanto a integridade do acrossoma (FITC-PNA), da membrana plasmática (IP-DCF) e potencial de membrana mitocondrial (JC-1) do sêmen fresco/diluído, 0 e 12 h após atingir 5 ºC e pós-descongelação. A motilidade pós-descongelação também foi determinada (CASA; Sperm Class AnalyserTM, Espanha). O experimento foi realizado em quadruplicata e os dados obtidos foram comparados utilizando-se ANOVA e teste t, sendo considerados significantes a P < 0,05. Resultados e Discussão A motilidade progressiva não diferiu entre os diferentes tratamentos (≅10%), bem como não foi observada influência da refrigeração ou congelação sobre a integridade do acrossoma ou potencial de membrana mitocondrial. Independentemente do tratamento, a congelação induziu redução (P<0,01) no porcentual de espermatozóides com membrana plasmática intacta em relação às amostras de semen fresco/diluido. Vale ressaltar que a adoção de 12 h de tempo de equilíbrio gerou maior porcentual (P<0,05) de células com membrana plasmática intacta (≅38%) quando comparado à 0 h (≅15%), sendo os resultados similares aos descritos por Purdy (2006), quando obteve 28 e 38% de membranas intactas após 0 e 24 h de tempo de equilíbrio pré-congelação, respectivamente. Foram observados valores numericamente superiores de motilidade total após 12 h de tempo de equilíbrio (≅92%), quando comparado à 0 h (≅72%), o que pode estar relacionado com o maior porcentual de membranas intactas observadas, provavelmente por permitir uma reorganização da membrana após a ocorrência das alterações inerentes à refrigeração, especialmente na espécie ovina, que apresenta alta concentração de ácidos graxos polinsaturados na membrana espermática (Holt, 2000).

Referências bibliográficas Purdy PH. The post-thaw quality of ram sperm held for 0 to 48 h at 5˚C prior to cryopreservation. Anim Reprod Sci, v.93, p.114-123, 2006. Holt WV. Fundamental aspects of sperm cryobiology: the importance of species and individual differences. Theriogenology, v.53, p.47-58, 2000. Palavras-chave: membrana espermática, ovino, tempo de equilíbrio. Keywords: equilibration time, ram, sperm membrane.



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Análise comparativa dos parâmetros espermáticos e de testosterona de ovinos da raça Hampshire Down coletados por eletroejaculação ou vagina artificial

Comparative analysis of sperm parameters and testosterone of ovine breed Hampshire Down collected by artificial vagina or eletroejaculation

M. Piagentini1,3, R.L. Ereno1, C.F. Moya-Araujo2, G.H.M. Araujo1, E. Oba1

1Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (UNESP), Botucatu, SP; 2Faculdades Integradas de Ourinhos (FIO),

Ourinhos, SP. 3E-mail: [email protected].

Introdução Em rebanhos que utilizam biotécnicas reprodutivas, tal como inseminação artificial, ou então monta natural, torna-se imprescindível o exame andrológico dos reprodutores. Por meio da avaliação andrológica, podem-se identificar reprodutores sub-férteis, os quais acarretam grandes perdas econômicas para os criadores e programas de inseminação artificial. (Hafez e Hafez, 2004). O presente estudo teve por objetivo avaliar a influência do método de colheita de sêmen na qualidade do ejaculado em ovinos da raça Hampshire Down. Material e Métodos O experimento foi realizado em uma fazenda situada no município de Avaré – SP, durante o mês de maio. Foram utilizados 59 machos da raça Hampshire Down, com idade entre dois a cinco anos. Os animais estavam em regime semi-confinado, em pastagem de coast cross, recebendo 0,5 kg da ração, por dia, com 16% proteína bruta e 70% nutrientes digestíveis totais e acesso a água e sal mineralizado irrestrito. A colheita de sêmen foi realizada por meio de eletroejaculação (n = 39) ou vagina artificial (n = 20). Procedeu-se a análise de volume e pH, além da avaliação convencional (subjetiva) de turbilhonamento, da motilidade e do vigor do sêmen em microscopia óptica. Determinou-se a concentração espermática em câmara hematimétrica de Neubauer. Para análise da morfologia espermática empregou-se a preparação úmida em formol salina tamponado. Resultados e Discussão Os valores que diferiram em relação a técnica de colheita foram o volume do ejaculado, turbilhonamento e morfologia espermática. Os animais utilizados nesse estudo apresentaram todos os parâmetros dentro dos padrões estabelecidos pelo Colégio Brasileiro de Reprodução Animal, com exceção da morfologia espermática, contudo Moraes (1997) relata uma maior tolerância em relação a esse parâmetro (>60% normais). Referências bibliográficas Hafez ESSE, Hafez B. Reprodução animal. Barueri: Editora Manole, 2004. 356p. Moraes JCF. Avaliação reprodutiva do carneiro. Rev Bras Reprod Anim, v.21, p.10-19, 1997. Palavras chave: Hampshire Down, métodos de colheita, sêmen. Keywords: Hampshire Down, collection methods, semen.



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Estudio de la variación individual de la congelabilidad de semen mediante microscopía de fluorescencia y electrónica

Study of the individual variation of ovine semen to cryopreservation with fluorescent probes and electron microscopy

V.H. Medina1,3, E.G. Aisen1, A. Venturino1, S.B. Jurado2, R.L. de la Sota2

1Facultad de Ciencias Agraria, Universidad Nacional del Comahue, Cinco Saltos, RN, Argentina; 2Facultad de Ciencias

Veterinarias, Universidad Nacional de La Plata, La Plata, BA, Argentina 3E-mail: [email protected]

Introducción En trabajos previos (AISEN et al., 2005) se ha desarrollado un diluyente hipertónico con el agregado de trealosa que mejora los parámetros de calidad seminal y la fertilidad a campo del semen congelado-descongelado (SCD). Recientemente se ha desarrollado un modelo animal que posibilitó estudiar la variación individual del proceso de criopreservación en semen ovino y permitió caracterizar cambios en los parámetros de calidad seminal por la utilización de un diluyente isotónico o hipertónico entre carneros de buena o mala congelabilidad (MEDINA, 2010). El objetivo de este trabajo fue de cuantificar mediante microscopia de fluorescencia (MF) y electrónica (MET) los daños ocasionados por el proceso de criopreservación del SCD con un diluyente isotónico o hipertónico en carneros de buena o mala congelabilidad. Para cumplir con este objetivo se llevaron a cabo 2 experimentos (EXP). Materiales y Métodos En el EXP1, se utilizó una combinación de sondas fluorescentes de diacetato de carboxifluoresceína (DIC) y yoduro de propídeo (YP) para estudiar los daños de membrana plasmática en un diseño factorial de 2 x 2 (diluyente, isotónico [B1] vs. hipertónico [B2]; congelabilidad, buena vs. mala; n=16). Además se utilizó una sonda fluorescente de aglutinina Pisum sativum (PSA) para estudiar los daños de membrana acrosomal en un diseño factorial similar. En el EXP2, se evaluó mediante MET el porcentaje de cabezas, y colas normales y anormales en SF y en SCD en un diseño factorial de 3 x 2 (SF, diluyente, isotónico [B1] y diluyente hipertónico [B2]; congelabilidad, buena vs. mala; SF, n = 4 [1/carnero], SCD, n = 8 [1/diluyente y carnero]). Resultados y Discusión En el EXP1, el porcentaje de membranas intactas detectado mediante fluorescencia verde con DIC fue superior en carneros de buena que en los de mala congelabilidad (P < 0,05); y en el semen congelado con el diluyente B2 que el diluyente B1 (P < 0,01). El porcentaje de membranas acrosomales intactas detectado mediante fluorescencia verde fue superior en carneros de buena que en los de mala congelabilidad (P < 0,01); y en el semen congelado con el diluyente B2 que el diluyente B1 (P < 0,001). En el EXP2, el porcentaje de cabezas y colas normales detectado mediante MET fue superior en carneros de buena que en los de mala congelabilidad (P < 0,02); y en el semen congelado con el diluyente B2 que el diluyente B1 (P < 0,02). Podemos concluir que los carneros de buena congelabilidad tienen mejores parámetros de calidad seminal, y menores daños de membrana plasmática, acrosomal, cabeza y cola; y que el uso de un diluyente hipertónico con el agregado de trealosa también mejora los parámetros de calidad seminal, y disminuye los daños de las membranas del espermatozoide. Referencias bibliográficas Aisen EG, Quintana M, Medina V, Morello H, Venturino A. Ultramicroscopic and biochemical changes in ram spermatozoa cryopreserved with trehalose-based hypertonic extenders. Theriogenology, v.50, p.239-249, 2005. Medina VH. Estudio de características biológicas que afectan la variación individual en la criopreservación del semen ovino. Tesis (Doctoral) - FCV-UNLP, Argentina. p.118. Palabras claves: criopreservación, microscopia electrónica, ovinos, semen, sondas fluorescentes. Keywords: cryopreservation, electron microscopy, fluorescent probes, ovine, semen.



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Viabilidade do sêmen ovino refrigerado com Trolox e Glutationa reduzida Viability of ovine semen cooled with Trolox and Reduced Glutathione

L.C.P. Arruda1, F.A.P. Soares, W.A. Gomes, A.V. Borba Neto, E.C.B. Silva, A.M. Batista,

S.V. Silva, P.C. Soares, M.M.P. Guerra

Universidade Federal Rural de Pernambuco, Recife, PE. 1E-mail: [email protected]

Introdução Os espermatozóides são susceptíveis a danos peroxidativos por apresentarem em suas membranas grandes quantidades de ácidos graxos poliinsaturados (Poulos et al., 1973), que consistem no principal substrato das espécies reativas de oxigênio (ROS) (Sanocka e Kurpisz, 2004). Deste modo, objetivou-se neste estudo avaliar a viabilidade in vitro de espermatozóides ovinos refrigerados na presença de Trolox e Glutationa reduzida (GSH). Material e Métodos Foram usados três polls de sêmen de quatro carneiros adultos, mestiços da raça Santa Inês, obtidos com vagina artificial. Alíquotas de sêmen foram diluídas em Tris-Gema (G1 = Grupo controle; G2 = 60 μm/ml de Trolox; G3 = 2mM/ml de GSH; G4 = 60 μm/ml de Trolox+2mM/ml de GSH) para a concentração de 60 X 106 sptz/0,25 ml e refrigeradas (4ºC). As amostras foram avaliadas nos tempos 0, 8, 24 e 48 horas, pós-refrigeração, quanto a motilidade progrssiva (MP), vigor, integridade do acrossoma (iAC), integridade da membrana plasmática (iMP), potencial de membrana mitocondrial (PMM), lipoperoxidação (LPO) e estresse oxidativo (EO). Para análise dos dados, usou-se Análise de Variância (ANOVA) e as diferenças significativas comparadas pelo teste de Tukey (P < 0,05). Resultados e Discussão Não foi observada diferença (P > 0,05) entre os grupos experimentais nos intervalos de 0, 8, 24 e 48 horas para a MP, vigor, iAC, iMP, PMM, LPO e EO, embora tenha havido diferença significativa (P < 0,05) entre os tempos 0 e 48 horas para a MP em todos os tratamentos (G1: 0h = 70,0 ± 10,0 e 48h = 41,6 ± 5,7; G2: 0h = 70,0 ± 10,0 e 48h = 38,3 ± 2,8; G3: 0h = 68,3 ± 7,6 e 48h = 38,3 ± 10,4; G4: 0h = 68,3 ± 2,8 e 48h = 41,6 ± 2,8). Estes achados evidenciam a possibilidade da ação protetora dos antioxidantes usados neste estudo ter sido comprometida por fatores como modificações em suas atividades e distribuição, a exemplo do que acontece com as enzimas antioxidantes (SOD, GSH-Px, GSH-Red) presentes em espermatozóides ovinos (Marti et al., 2008). Conclui-se que os antioxidantes Trolox (60 µM) e glutationa reduzida (2 mM) não preservam a MP, vigor, iAC, iMP e PMM, bem como não reduzem a LPO e o EO de espermatozoides ovinos submetidos a refrigeração durante 48 horas. Referências bibliográficas Marti E, Marti JI, Muiño-Blanco T, Cebrián-Pérez JA. Effect of the cryopreservation process on the activity and immunolocalization of antioxidante enzimes in ram spermatozoa. J Androl, v.29, n.4, p.459-467, 2008. Poulos A, Darin-Bennett A, White IG. The phospholipid-bound fatty acids and aldehydes of mammalian spermatozoa. Comp Biochem Phys, v.46, p.541-549, 1973. Sanocka D, Kurpisz M. Reactive oxygen species and sperm cells. Reprod Biol. Endocrinol, v. 2, n.12, p.1-7, 2004. Palavras-chave: antioxidantes, espermatozóides, refrigeração, vitamina E. Keywords: antioxidants, sperm, cooling, vitamin E.



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Avaliação da toxidade de crioprotetores utilizados no congelamento de sêmen ovino

Evaluation of toxicity cryoprotectants used for freezing ram semen

A.M. Arrais1, F.P. Carvalho, F.Q. Costa, B.P. Carvalho, I.R. Santos, E.M. Mogollón, A.J.B. Dias

LRMGA, Universidade Estadual do Norte Fluminense, Campos dos Goytacazes, RJ. 1E-mail: [email protected]

Introdução Espermatozóides ovinos são extremamente sensíveis ao processo de congelamento. O glicerol é o crioprotetor mais utilizado para congelamento de sêmen em animais domésticos, na concentração de 7%, porém esse crioprotetor apresenta um efeito tóxico aos espermatozóides de ovinos alterando a viabilidade dos mesmos após o descongelamento. O etilenoglicol tem sido utilizado com sucesso no congelamento de embriões mostrando-se menos tóxico que o glicerol. Esse trabalho tem por objetivo avaliar a toxicidade de ambos os crioprotetores, bem como definir a concentração ideal de etilenoglicol para congelamento de sêmen ovino. Material e Métodos Foram utilizados 12 ejaculados de carneiros diluídos em meio à base de TRIS-gema (El - Alamy e Foote, 2001), os quais foram distribuídos em quatro grupos experimentais: glicerol a 7% (Gc 7%) (controle) e etilenoglicol a 3% (Eg 3%); a 6%(Eg 6%) e a 10% (Eg 10%). As amostras foram submetidas ao teste de termo- resistência (TTR) rápido (46° C/ 30 min.). O sêmen foi avaliado por método computadorizado (Hamilton Thorn ResearchTM). Foram analisados os parâmetros de motilidade total (MT), motilidade progressiva (MP) e vigor (V). A análise estatística foi realizada no ambiente R versão 2.11.1(2010), pelo teste de Tukey HSD para MT e MP e pelo teste de Wilcoxon Rank Sum para V com nível de significância de 5%. Resultados e Discussão Após o TTR as amostras incubadas em Gc 7% e Eg 3%, apresentaram resultados semelhantes de MT (56,3 ± 5,9%, 60,3 ± 5,3%, respectivamente), porém superiores às amostras de Eg 6% (42,0 ± 5,5%) e Eg 10 % (31,6 ± 5,0%). Amostras incubadas em Eg 3% apresentaram resultados de MP e V significativamente superiores às de Gc 7%, Eg 6 % e Eg 10 % (39,4±3,9a % e 1,8 ± 0,8b; 32,7 ± 5,4b % e 2,5 ± 0,6a; 27,4 ± 4,3c % e 1,6 ± 0,5b; 16,5 ± 3,8d % e 0,8 ± 0,4c, respectivamente). Durante a avaliação das amostras também foi possível observar um maior percentual de espermatozoides com movimentos circulares nos grupos Eg 6% e Eg 10%. O etilenoglicol 3% promoveu menores alterações dos parâmetros avaliados que os demais tratamentos, sendo considerado menos tóxico. A utilização de diluentes com menor efeito tóxico pode contribuir para elevar as taxas de prenhez decorrentes da inseminação com sêmen congelado de ovinos.

Referências bibliográficas El-Alamy MA, Foote RH. Freezability of spermatozoa from Finn and Dorset rams in multiple semen extenders. Anim Reprod Sci, v 65, p.245-254, 2001. Palavras-chave: criopreservação, diluentes, espermatozóides. Keywords: cryopreservation, extender, sperm.



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Efeito da adição de trolox e glutationa reduzida sobre a viabilidade in vitro de espermatozoides congelados de ovinos

Effect of trolox and reduced glutathione addition on in vitro viability of frozen ram sperm

Á.V. Borba Neto1, F.A.P. Soares, L.C.P. Arruda, W.A. Gomes, E.C.B. Silva, S.V. Silva, A.M. Batista, M.M.P. Guerra

1DMV/UFRPE, Recife;PE.

1E-mail: [email protected] Introdução Os espermatozóides são susceptíveis a danos peroxidativos por apresentarem em suas membranas grandes quantidades de ácidos graxos poliinsaturados (Poulos et al., 1973), substratos mais freqüentes das espécies reativas de oxigênio (ROS). Acredita-se que a Glutationa (GSH) proteja a membrana dos espermatozóides, inibindo o processo de peroxidação lipídica (Sinha et al., 1996), enquanto a vitamina E (Trolox) remova radicais peroxil, provavelmente o mais importante inibidor da reação em cadeia da peroxidação de lipídios em animais (Halliwell e Gutteridge, 1999). Objetivou-se com este estudo avaliar o efeito da adição de Trolox e GSH sobre a viabilidade in vitro de espermatozoides congelados de ovinos.

Material e Métodos Foram usados quatro ovinos adultos, com fertilidade comprovada. Os ejaculados foram colhidos com vagina artificial e, após análise, as amostras de sêmen foram diluídas em Tris-Gema, contendo antioxidantes (G1= Controle; G2= 1mM de GSH; G3= 2 mM de GSH; G4= 3 mM de GSH; G5= 60μM de Trolox; G6= 120μM de Trolox; G7= 180μM de Trolox), na concentração de 100 X 10 6 espermatozoides/0,25mL, envasadas em palhetas e congeladas em máquina TK 3000 (TK, Uberaba, Brasil). Amostras de sêmen fresco e congelado foram avaliadas quanto à motilidade total (MT), vigor espermático (VIG), integridade do acrossoma (IAC), integridade da membrana plasmática (iMM), potencial de membrana mitocondrial (PMM), grau de estresse oxidativo (EO) e lipoperoxidação (LPO). A análise estatística foi realizada pelo teste de ANOVA, sendo P < 0,05 considerado como significante. Resultados e Discussão Após 0, 60 e 120 min não foi observada diferença (P<0,05) dos grupos tratados com antioxidantes e o grupo controle, para iAC, iMM, PMM, EO e LPO. No entanto, amostras do G5 (44,3%), G6 (43,7%) e G7 (45,00%) apresentaram maior (P<0,05) MT do que as dos demais grupos. O vigor do G1 (controle) foi menor (P<0,05) do que nos demais grupos. Estes resultados divergem de Maia et al. (2009), ao relatarem que o Trolox não melhora a MT de espermatozoides congelados de ovinos, mas preserva a iAC e IMM. Conclui-se que a adição de Trolox nas concentrações de 60, 120 e 170 μM melhora a motilidade total de espermatozoides ovinos submetidos à congelação.

Referências bibliográficas Halliwell B, Gutteridge JMC. Free Radicals in Biology and Medicine. 3ed. New York:Oxford University Press. 1999. 936p. Maia MS, Bicudo SD, Azevedo HC, Sicherle CC, Souza DB, Rodello L. Motility and viability of RAM sperm cryopreserved in a Tris-egg yolk extender with anti-oxidants.Small Rumin Res, v.85, p.85-90, 2009. Poulos A, Darin-Bennett A, White IG. The phospholippid-bound fatty acids and aldehydes of mammalian spermatozoa. Comp. Biochem. Physiol., v.46, p.541-549, 1973. Sinha MP, Sinha AK, Sing BK, Prasad RL. The effect of glutathione on the motility, enzyme leakage and fertility of frozen goat semen. Anim. Reprod. Sci., v.41, p.237-243, 1996. Palavras-chave: congelação, antioxidantes, sêmen, ovino. Keywords:freezing, antioxidants, semen, ovine.




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Comparação de dois métodos para criopreservação de sêmen ovino Comparison of two methods for cryopreservation of ram semen

M.A.F. Souza1,3, M.V. Resende1, A.L. Gusmão1, C.K. Kiya1, R.S. Santos1, C.E. Biscarde1,

L.E.P. Martins1, J.C. Andrade Moura1, A.P. Maia2

1Escola de Medicina Veterinária, UFBA, Salvador, BA; 2Haras EAO, Salvador, BA. 3E-mail: [email protected]

Introdução Com o interesse em intensificar a produção ovina, a inseminação artificial (IA) com sêmen criopreservado apresenta papel fundamental no melhoramento genético. Durante o processo de criopreservação e descongelação os espermatozoides sofrem injurias que prejudicam sua viabilidade e capacidade fertilizante, sendo necessárias adequações que minimizem estes prejuízos. Dentro destas Perspectivas, o presente trabalho objetivou comparar os parâmetros espermáticos do sêmen ovino (motilidade, vigor), testes complementares (termo-resistência - TTR e hiposmótico - HO), em dois sistemas de criopreservação de sêmen ovino. Material e métodos Três ejaculados de um reprodutor Dorper foram colhidos por vagina artificial, sendo cada ejaculado dividido em dois grupos, os quais diferiam entre si pela apresentação na exposição ao vapor de nitrogênio: Grupo controle (não-raqueado); Grupo teste (raqueado). Após a colheita o sêmen foi processado e diluído, as amostras submetidas ao processo de resfriamento, envase em palhetas de 0,25 mL, expostos ao vapor de nitrogênio e mergulhadas em nitrogênio líquido para finalização do processo, sendo armazenadas em botijão criogênico para posterior avaliação in vitro. Após a descongelação das palhetas em água a 37 ºC durante 30 segundos foram realizadas as avaliações da motilidade progressiva e vigor espermático, além dos testes hiposmótico (HOST) e de termorresistência lento (TTR). Para análise estatística dos resultados foi utilizada a análise de variância seguida pelo teste de Tukey para comparação das médias, sendo adotado um nível de significância de 5%. Resultados e discussão Pelos resultados obtidos neste estudo foi possível observar que não houve diferença (p>0,05) entre os parâmetros de motilidade e vigor entre os grupos experimentais analisados imediatamente após a descongelação, assim como a avaliação após o TTR que não diferiram estatisticamente, predizendo a manutenção da capacidade fertilizante dos espermatozoides (SIQUEIRA et al., 2007). O percentual encontrado no teste HO foi maior no grupo teste em relação ao grupo controle, o que pode estar ocorrendo por uma possível proteção das membranas espermáticas pela raque refletida em uma curva de criopreservação mais lenta. O mecanismo de crioproteção do iodixanol ainda não está totalmente elucidado. Mais estudos são necessários para esclarecer o mecanismo de ação protetor do iodixanol, a concentração adequada, assim como o seu efeito sobre a fertilidade. Referências bibliográficas Siqueira, J.B., Guimaraes, J.D., Costa, E.P., Henry, M., Torres, C.A.A. Silva, M.V.G.B., Silveira, T.S. Relação da taxa de gestação com sêmen bovino congelado e testes de avaliação espermática in vitro. Revista Brasileira de Zootecnia, v. 36, n. 2, p. 387-395, 2007. Palavras-chave: Criopreservação, raqueado, sêmen. Keywords: Cryopreservation, raqueado, semen.



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Diferentes fontes de gema de ovo como componente do diluidor do sêmen ovino Different sources of egg yolk as a component of semen extender sheep

A.D. Rocha Junior1, A.D.F. Santos, C.T.G. Carvalho, L.K.S. Aragão, F.F. Almeida

Faculdade Pio Décimo, Aracajú, SE.

1E-mail: [email protected] Introdução Diluidores são soluções que aumentam o volume de ejaculado sem alterar sua qualidade, potencializando a sua capacidade de fecundação. O diluidor é toda substância que, adicionada ao sêmen, permite o aumento de volume sem alterar sua qualidade. Selecionados os ejaculados processáveis, passa-se para a fase de diluição (NUNES, 1999). Material e Métodos Este estudo foi realizado no Laboratório de Reprodução da Faculdade Pio Décimo. Foram selecionados, como doadores de sêmen, dois reprodutores adultos e distribuídos em três grupos: T1 – diluente à base de citrato acrescido de 20% de gema de ovo de galinha caipira; T2 - diluente à base de citrato acrescido de 20% de gema de ovo de codorna; T3 - diluente à base de citrato acrescido de 20% de gema de ovo de pata. Resultados e Discussão Tabela 1. Motilidade (Mot.) espermática progressiva e vigor espermático durante o processo de diluição e resfriamento do sêmen nos diferentes tratamentos.

Tratamento 1 Tratamento 2 Tratamento 3 Mot. Sêmen diluído (%) 70 65 80 Vigor (0 – 5) 3,0 3,33 3,0

Motilidade (%) e Vigor do Sêmen resfriado 1,0 h Motilidade (%) 60 55 55 Vigor (0–5) 2,87 2,82 2,37 24 h Motilidade (%) 50 53,75 41,25 Vigor (0–5) 2,62 2,75 2,0 48 h Motilidade (%) 60,0a 50,0b 47,5b

Vigor (0–5) 3,0 3,0 2,75 72 h Motilidade (%) 31,25 32,5 20,0 Vigor (0–5) 1,75 2,5 1,5

a,b Médias seguidas pelas mesmas letras sobrescritas na mesma linha não diferem entre si, SNK (P < , 0 5). De acordo com os dados apresentados o sêmen diluído não submetido a resfriamento é o que apresentou valores maiores de motilidade e vigor, uma vez que a membrana permaneceu íntegra, pois não foi submetida ao estresse térmico. Nas análises realizadas 1 hora após a diluição houve decréscimo nos resultados obtidos, sendo o Tratamento 3 o que mostrou maior queda de motilidade e vigor. Referências bibliográficas Nunes JF, CombarnousY. Utilização de uma substância ativa de água de coco (JYP) como diluidor de sêmen de ovinos, 1999. Palavras-chave: conservação, ovino, espermatozóide, gema de ovo. Keywords: conservation, egg yolk, sheep, sperm.



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Utilização do teste hiposmótico avaliando eficácia de diferentes protocolos de criopreservação de sêmen ovino

Using the hypoosmotic test evaluating efficacy of different protocols for cryopreservation of ram semen

F.F. Almeida1, A.D.F. Santos, C.T.G. Carvalho, A.D. Rocha Júnior, K.M.A. Brito

Faculdade Pio Décimo, Aracajú, SE. 1E-mail: [email protected]

Introdução Os diluidores atuam como nutrientes, fazem a manutenção do pH do meio, melhoram o aproveitamento do ejaculado, promovem a manutenção da pressão osmótica e sobrevivência dos espermatozóides após o procedimento de resfriamento e criopreservação Santos (1997). Material e Métodos Este estudo foi realizado no Laboratório de Reprodução Animal da Faculdade Pio Décimo. Foram selecionados, como doadores de sêmen, dois ovinos reprodutores adultos e distribuídos em três grupos: T1 – diluente à base de citrato acrescido de 20% de gema de ovo de galinha caipira; T2 - diluente à base de citrato acrescido de 20% de gema de ovo de codorna; T3 - diluente à base de citrato acrescido de 20% de gema de ovo de pata.

Resultados e Discussão Tabela 1. Valores de Hipoosmótico (HOST) durante o processo de diluição e resfriamento do sêmen nos diferentes tratamentos.

Tratamento 1 Tratamento 2 Tratamento 3

HOST diluído (%) 70,5 64 66

HOST do Sêmen resfriado

1,0 h 67,5a 49,0b 47,5b

24 h 65,37 50,0 46,75

48 h - - -

72 h 62,75 63,75 60,5

a,b Médias seguidas pelas mesmas letras sobrescritas na mesma linha não diferem entre si, SNK (P < 0,05). Como verificado na Tab. 1, o HOST apresentou o mesmo padrão de comportamento para os três tratamentos, com redução na qualidade da membrana plasmática com o decorrer do tempo. De uma maneira geral, a redução média na porcentagem de caldas dobradas com relação ao sêmen diluído foi de 4,5%, indicando que os diluentes utilizados foram eficientes em preservar a qualidade espermática quando avaliados pelo HOST durante o período estudado. Referências bibliográficas Santos SEC. Comparação entre cinco diluidores na congelação do sêmen de cães. Dissertação (Mestrado em Medicina Veterinária e Zootécnica) – Curso de Pós Graduação em Medicina Veterinária e Zootécnica, Universidade de São Paulo, 1997.

Palavras-chave: criopreservação, gema de ovo, ovino, sêmen. Keywords: cryopreservation, egg yolk, ovine, semen.



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Tempo e método de estocagem de diluidores contendo lipoproteína de baixa densidade e sua influência na motilidade dos espermatozóides ovinos criopreservados

Time and storage method of extenders containing low-density lipoprotein and its influence on the motility of ovine spermatozoa cryopreserved

P.P.N. Snoeck1, L.C.O. Moura1, M.C. Silva1, B.C. Cruz2, C.A.A. Clemente2, M.I.V. Melo3, J.V.M.

Mambrini4, L.G.D. Heneine5, M. Henry2

1Universidade Estadual de Santa Cruz, Ilhéus-BA. 2Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, MG; 3PUC Minas, Betim, MG; 4Consultor estatístico; 5FUNED, Belo Horizonte, MG.

E-mail: [email protected]; [email protected]; [email protected]; [email protected] Introdução Foi observado que lipoproteínas de baixa densidade (LBD) do sangue podem ser estruturalmente preservadas sob temperaturas de -20oC (Eldestein et al. 2001). Não foram encontrados trabalhos testando métodos de estocagem das LBD oriundas da gema de ovo de galinha. Objetivou-se avaliar o efeito do tempo e de duas formas de estocagem de diluidor contendo LBD sobre a motilidade de espermatozóides ovino criopreservados. Material e Métodos Doze ejaculados de seis carneiros da raça Santa Inês foram utilizados em cada fase experimental para testar o tempo de estocagem de 30, 60 e 120 dias do diluidor Tris-glicose com 5% de glicerol e 8% (g/v) de LBD, preservado na forma natural ou liofilizado, congelado a -20oC e -80 oC. Adicionalmente foi testado a congelação da LBD na forma natural a -20 oC, adicionada ao meio diluidor no momento do uso. Foi utilizado como meio controle o diluidor Tris-glicose + 5% de glicerol (TGG) + 16% de gema de ovo. Para cada tempo testado, o sêmen foi coletado, avaliado de acordo com as características macro e microscópicas, diluído para atingir a concentração de 100x106 de espermatozóides/mL e envasado em palhetas de 0,25mL. As taxas de resfriamento e congelação foram de -0,25oC/min e -25oC/min (TK4000®) respectivamente, mantendo o sêmen em equilíbrio por duas horas a 5oC. O descongelamento foi a 38oC/30 segundos. A motilidade espermática foi avaliada por sistema computadorizado (SCA® v.4). O delineamento experimental foi de blocos ao acaso, considerando o animal como bloco e as médias comparadas por diferença mínima significativa (P<0,05).

Resultados e Discussão O diluidor controle foi o que pior preservou a motilidade (32,6% ± 16,8) (P<0,05), independente do tempo que ficou estocado. Não houve diferença na motilidade espermática pós-descongelação (variação de 45,6% ± 20,8 a 48,6% ± 20,9) considerando as diferentes formas e tempos de conservação. Pode-se concluir que diluidores contendo LBD podem ser conservados pelos métodos propostos por até 120 dias. Referências bibliográficas Eldestein C, Hinman J, Marcovina S, Scanu AM. Properties of human free apolipoprotein(a) and lipoprotein(a) after either freezing or lyophilization in the presence and absence of cryopreservatives. Anal Biochem, v.288, p.201-208, 2001. Palavras-chave: carneiro, gema de ovo, preservação, Santa Inês, sêmen. Keywords: egg-yolk, preservation, ram, Santa Inês, semen.



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Criopreservação de sêmen ovino utilizando diluidores contendo lipoproteínas de baixa densidade, armazenados nas formas natural ou liofilizados

Cryopreservation of ram semen using extenders containing low-density lipoproteins, stored in natural or lyophilized form

B.C. Cruz1, P.P.N. Snoeck2, V.S. Moustacas1, M.C. Silva2, P.G. Lage1, D.A. Miranda1,

M.F. Coelho1, A. Zolini1, L.G.D. Heneine3, M. Henry1

1Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte-MG,. 2Universidade Estadual de Santa Cruz, Ilhéus-BA, 3Fundação Ezequiel Dias, Belo Horizonte-MG.

E-mail: [email protected]; [email protected]; [email protected] Introdução As lipoproteínas de baixa densidade (LBD) na forma natural têm sido testadas com sucesso em meios diluidores para o congelamento de sêmen de várias espécies. A liofilização é a forma de obter apresentações estáveis de substâncias instáveis em soluções aquosas (Boyer, 1986). O objetivo desse trabalho foi testar diferentes concentrações de LBD em um meio diluidor base, previamente estocados na forma natural ou liofilizados e congelados, para a criopreservação de sêmen ovino. Material e Métodos O sêmen de seis carneiros Santa Inês foi coletado, avaliado e diluído para a concentração final de 100x106 espermatozóides/mL usando o meio diluidor base Tris glicose + 5% de glicerol (TG) e 16% de gema de ovo (1- controle) substituindo a gema usando diversas concentrações de LBD, a saber: 2) TG + 2% LBD (v/v); 3) TG + 4% LBD; 4) TG + 6% LBD; 5) TG +8% LBD, estocados congelados na forma natural; 6) TG + 2% LBD; 7) TG + 4% LBD; 8) TG + 6% LBD e 9) TG +8% LBD, liofilizados e congelados. O sêmen foi envasado em palhetas de 0,25 mL, resfriadas (-0,25°C/min) até 5°C, mantidas em equilíbrio por 2 horas e congeladas (-25°C/min) em máquina TK4000®. A motilidade foi avaliada por análise computadorizada (SCA®-v.4.0) após descongelamento a 37°C/30 segundos e após teste de termorresistência (TTR) por 3 horas. A integridade da membrana plasmática foi avaliada por teste hiposmótico (HO) e sondas fluorescentes. As médias foram consideradas diferentes ao nível de significância P<0,05. Resultados e Discussão As amostras congeladas em diluidor contendo diferentes concentrações de LBD tiveram motilidade maior que o meio controle, em média 56,8% ± 4,0 contra 32,6% ± 8,06, respectivamente (P < 0,05). A porcentagem de espermatozóides reativos ao HO e íntegros no teste de fluorescência não diferiu usando as diferentes concentrações de LBD e formas de armazenamento. No TTR também não houve diferença entre tratamentos e a motilidade final foi em média 35,4% ± 4,7. Assim como em bovinos (Moussa et al., 2002), o diluidor contendo LBD preservou melhor o sêmen ovino quando comparado ao diluidor com gema de ovo, inclusive na forma liofilizada, diferente dos achados de Moustacas et al. (2010). Referências bibliográficas Boyer RF. Modern experimental biochemistry. Califórnia: Addison-Wesley, 1986.584p. Moustacas VS, Zaffalon FG, Lagares MA, et al. Natural, but not lyophilized, low density lypoproteins were an acceptable alternative to egg yolk for cryopreservation of ram semen. Theriogenology, v.75, p.300-307, 2010. Moussa M, Martinet V, Trimeche A, et al. Low density lipoproteins extracted from hen egg yolk by an easy method: cryoprotective effect on frozen-thawed bull semen. Theriogenology, v.57, p.1695-1706, 2002. Palavras-chave: Santa Inês, Lipoproteína de baixa densidade, sêmen. Keywords: Santa Ines, Low-density lipoprotein, semen.






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Viabilidade de espermatozóides ovinos congelados em vapor de nitrogênio em meio contendo diferentes concentrações de lipoproteína de baixa densidade

Viability of ovine spermatozoa frozen in nitrogen vapor in extender containing different concentrations of low density lipoproteins

V.S. Moustacas1, B.C. Cruz1, P.P.N. Snoeck2, M.C. Silva2, E.K.N. Arashiro1 , L.C.O. Moura2,

A.M. Loaiza-Echeverri1, A.C.D. Oliveira1, L.G.D. Heneine3, M. Henry1

1Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte-MG, 2Universidade Estadual de Santa Cruz, Ilhéus-BA, 3Fundação Ezequiel Dias, Belo Horizonte-MG.

E-mail: [email protected]; [email protected]; [email protected] Introdução As lipoproteínas de baixa densidade (LBD) mais testadas na congelação de espermatozoides de várias espécies têm sido as recém obtidas da extração, podendo ser denominadas de naturais. Objetivou-se com esse experimento avaliar o efeito protetor de diluidores contendo diferentes concentrações de LBD em substituição a gema do ovo, preservados nas formas natural ou liofilizados usando o vapor de N2L para a congelação de espermatozóides ovinos. Material e Métodos Seis ejaculados de seis carneiros da raça Santa Inês foram coletados, avaliados e diluídos para concentração final de 100x106 espermatozóides/mL em diluidor Tris-glicose + 5% de glicerol (TG) +16% de gema de ovo (1 - controle) e, neste diluidor, substituindo a gema do ovo pelas diferentes concentrações de LBD, a saber: 2) TG + 2% LBD (v/v); 3) TG + 4% LBD; 4) TG + 6% LBD; 5) TG +8% LBD, mantidos na forma natural; e 6) TG + 2% LBD; 7) TG + 4% LBD; 8) TG + 6% LBD; 9) TG +8% LBD, liofilizados. Todos os diluidores foram preservados congelados até o uso. Após diluição, o sêmen foi envasado em palhetas de 0,25mL, resfriado em máquina TK4000® (-0,25°C/min), mantido em equilíbrio de 2 horas a 5°C e congelação no vapor de N2L, em estante, a 3cm do N2L, por 10 minutos. A motilidade espermática foi avaliada por análise computadorizada (SCA® v.4.0) após a descongelação em banho-maria a 37°C/30 segundos e após 3 horas de teste de termo-resistência (TTR). A integridade de membrana foi avaliada pelo teste hiposmótico (HO) e por meio das sondas fluorescentes. Resultados e Discussão A motilidade espermática pós-descongelação foi de 62,% ± 14,8; 66,3% ± 27,5; 59,0% ± 22,0 e 60,6% ± 16,67 para os tratamentos 2, 5,7 e 9 , respectivamente, superior à encontrada nos demais tratamentos (P < 0,05). Não houve diferença entre tratamentos na preservação da integridade espermática pelo teste HO e pela fluorescência. A motilidade espermática após o TTR foi semelhante usando qualquer das concentrações de LBD e formas de preservação, em média 35,5% ± 4,1. Os resultados indicam que a LBD pode ser usada nas concentrações testadas em diluidor mantido na forma natural ou liofilizado para a congelação de espermatozóides ovinos no vapor de nitrogênio. Os resultados com diluidor contendo LBD liofilizado divergiram dos encontrados por Moustacas et al. (2010). Referências bibliográficas Moustacas VS, Zaffalon FG, Lagares MA, et al. Natural, but not lyophilized, low density lypoproteins were an acceptable alternative to egg yolk for cryopreservation of ram semen. Theriogenology, v.75, p.300-307, 2010. Palavras-chave: Carneiro, Santa Inês, gema de ovo, sêmen. Keywords: Ram, Santa Inês, egg-yolk, semen.






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Avaliação da irradiação de calor emitido pela superfície do escroto ovino por termografia

Evaluation of heat radiation emitted from the surface of the scrotum sheep by thermography

C.A. Cruz Júnior1,4, C.M. Lucci1, H. Louvandini2, C. McManus3

1FAV-UnB, Brasília, DF; 2CENA USP, Piracicaba, SP; 3Departamento de Zootecnia, UFRGS, Porto Alegre, RS.

4E-mail: [email protected] Introdução A termografia infravermelha (TIV) é uma técnica moderna, não-invasiva e segura para visualizar o perfil térmico de uma estrutura (KNÍŽKOVÁ, 2007). Kastelic et al. (1997) ao utilizarem TIV verificaram que o sangue dentro da artéria testicular de bovinos tem uma temperatura similar na parte superior do testículo comparado com o fundo, mas depois esfria antes de entrar no parênquima testicular. O objetivo do presente estudo foi de determinar com a termografia o padrão de distribuição do calor irradiado pela superfície posterior do escroto (CISPE) ovino e a influência do período do dia e da raça na irradiação do calor. Material e Métodos Em 2010 no Campo Experimental da Fazenda Sucupira (Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia) em Brasília, DF foram avaliados 18 animais adultos de seis raças (Santa Inês, Bergamácia, Dorper, Texel, Ile de France e Hampshire Down), sendo três representantes por raça. Foram coletadas amostras às 7am e 2pm durante três dias consecutivos. A temperatura retal (TR) foi obtida com termômetro digital. O CISPE foi aferido com TERMACAM® a 1 metro do animal no pólo norte (TENT), pólo sul (TEST), pólo oeste (TEOT), pólo leste (TELT) e região central (TECT). O delineamento estatístico utilizado foi o inteiramente casualizado em esquema fatorial 6X2, com três repetições. Os dados foram analisados com o programa SAS® 8.2, por meio de ANOVA e correlações.

Resultados e Discussão A média do CISPE foi de 32,29 oC, sendo 6,57 oC inferior à temperatura retal (38,86 oC). Correlações baixas foram constatadas entre TR e TENT, TEST, TEOT, TELT, TECT sendo respectivamente os seguintes valores: 0,11; 0,27; 0,09; 0,08; 0,19. O TENT foi em média, 4,02°C mais quente que o TEST demonstrando um gradiente de irradiação decrescente no sentido norte – sul do escroto. Não foi verificado efeito significativo do período do dia sobre o CISPE, podendo a termografia ser realizada a qualquer hora do dia. Verificou-se diferença altamente significativa (P < 0,01) no CISPE nos pólos norte (maior valor na Bergamácia – 35,49oC), oeste, leste e central, não havendo diferença de irradiação entre as raças para o pólo sul (menor valor na Dorper – 29,49oC). A termografia demonstrou ser eficiente para distinguir o CISPE. Referências bibliográficas Knížková I. et al. Applications of infrared thermography in animal production. J Fac Agric, OMU, v.22, n.3, p.329-336, 2007. Kastelic JP, Cook RB, Coulter GH. Scrotal/testicular thermoregulation and the effects of increased testicular temperature in the bull. Vet Clin North Am Food Anim Pract, v.13, p.271-282, 1997. Palavras-chave: gradiente, reprodução, espermatozóide, temperatura. Keywords: gradient, reproduction, sperm, temperature.



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Identificação das proteínas nos testículos de ovinos Somalis e Santa Inês Proteins identification in Somalis and Santa Inês testes

A.M.X. Eloy1, N.M.M. Silva, R.V. Valle, F.W.V. Santos, J.R. Furtado

Embrapa Caprinos e Ovinos, Sobral,CE.

1E-mail: [email protected] Introdução O estudo da proteômica representa uma ferramenta importante para caracterizar e identificar características reprodutivas que possam vir a influenciar o desempenho reprodutivo e produtivo do animal. Este trabalho teve como objetivo identificar as bandas protéicas presentes no tecido testicular de ovinos das raças Santa Inês e Somalis. Material e Métodos O experimento foi realizado na Embrapa Caprinos e Ovinos, Ceará. Foram abatidos 13 ovinos, sendo seis Somalis e sete Santa Inês, com idade entre cinco e seis meses. O tecido testicular (100 µg) foi homogeneizado em 250 mM de EDTA e 10 mM de Tris-EDTA, pH 7,4 e centrifugadas a 1.500 rpm x 10 min. O precipitado foi ressuspenso em 176 mM de KCl, 10 mM de Tris-HCL e 2 mM de EDTA, pH 7,2. A proteína total foi analizada pelo método Bradford (1976). Utilizou-se a eletroforese unidimensional (SDS-PAGE a 12%) para separação das bandas protéicas. Resultados e Discussão Observou-se uma variação de 17 a 23 bandas entre as raças, sendo de 17 a 23 na raça Somalis e de 17 a 21 na raça Santa Inês. As bandas de massa molecular 29, 30, 42, 46, 55, 74 e 85 kDa foram identificadas nas duas raças analisadas, sendo as bandas 26, 28 e 30 kDa encontradas apenas na raça Somalis e as bandas 22 e 36 na raça Santa Inês. Em ovinos as proteínas de 26-28 kDa aparecem no testículo e no epidídimo durante o desenvolvimento fetal, sendo detectada na puberdade uma isoforma com peso de 30 kDa, a qual é convertida em outra isoforma de 27 kDa com o amadurecimento do animal (Fouchécourt et al., 2000). Gonçalves et al. (2008) observaram que a incubação de oócitos bovinos em fluido do oviduto/folicular adicionado de anticorpos contra a isoforma de 36 kDa da osteopontina isolada do leite reduziu significativamente a capacidade dos espermatozoides de se ligarem à zona pelúcida, em comparação com o meio sem os anticorpos. As raças estudadas apresentaram diferentes bandas protéicas nos testículos na fase púbere, e que mais estudos devem ser realizados sobre o assunto.

Referências bibliográficas Bradford MM. A rapid and sensitive method for the quatitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochem, v.72, p.248-254, 1976. Fouchécourt S. Stallion epididymal fluid proteome: qualitative and quantitative characterization; secretion and dynamic changes of major proteins. Biol Reprod, v.62, p.1790-1803, 2000. Gonçalves RF, Staros AL, Killian GJ. Oviductal fluid proteins associated with the bovine zona pellucida and the effect on in vitro sperm-egg binding, fertilization and embryo 582 development. Reprod Domest Anim, v.43, p.720-729, 2008. Palavras-chave: eletroforese unidimensional, proteômica, tecido testicular. Keywords: dimensional electrophoresis, proteomic, testicular tissue.



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Efeitos do iodixanol sobre a criopreservação de sêmen ovino Effects of iodixanol in cryopreservation of ovine semen

A.L. Gusmão1, C.K. Kiya, C.E.A. Biscarde, R.S. Santos, M.A.F. Souza, L.E.P. Martins,

J.C. Andrade Moura, M.V. Resende

Escola de Medicina Veterinária, UFBA, Salvador, Bahia

1E-mail: [email protected] Introdução A viabilidade e fertilidade dos espermatozoides são prejudicadas durante a congelação e descongelação, devido às crioinjúrias durante esses processos. Diversos diluidores com diferentes crioprotetores vêm sendo estudadas para atenuar estes efeitos deletérios. Dentre estas alternativas, o iodixanol demonstrou ser um bom protetor de membranas, preservando a motilidade espermática no processo de criopreservação e descongelação. Este trabalho teve como objetivo avaliar in vitro os efeitos do iodixanol adicionado em diluidor para criopreservação de sêmen sobre a viabilidade dos espermatozoides ovino. Material e Métodos Três ejaculados de um reprodutor Dorper foram colhidos por vagina artificial, sendo cada ejaculado dividido em três grupos correspondentes a composição do diluente: Grupo controle (0% de iodixanol, OptiPrep™); Grupo G1 (iodixanol 1,25%); e Grupo G2 (iodixanol 2,5%). Após a diluição, as amostras passaram pelo processo de resfriamento, envase, pré-congelação e mergulhadas em nitrogênio líquido para finalização do processo, sendo armazenadas em botijão criogênico para posterior avaliação in vitro. Os testes hiposmótico (HOST) e de termorresistência lento (TTR), assim como a avaliação da motilidade progressiva e vigor espermático foram realizados após a descongelação das palhetas em água a 37 ºC durante 30 segundos. A análise estatística foi realizada com o Teste de Tukey para comparação das médias e a análise de variância. O nível de significância adotado foi de 5%.

Resultados e Discussão No presente estudo, observamos que a motilidade e o vigor pós-descongelação não diferiram entre os grupos (p>0,05) contendo as diferentes concentrações de iodixanol (Grupo controle – 38,33% e 3; G1 – 45% e 3,33; G2 – 36,67% e 3,33), assim como o percentual de reação dos espermatozoides ao HOST e a avaliação da longevidade espermática após o TTR não diferiram estatisticamente. A semelhança encontrada entre o grupo controle, G1 e G2 pode ser devido à semelhança do iodixanol ao glicerol, sugerindo que sua baixa concentração pode exercer um efeito similar a essa substância (Saragusty et al., 2009). O mecanismo de crioproteção do iodixanol ainda não está totalmente elucidado. Mais estudos são necessários para esclarecer o mecanismo de ação protetor do iodixanol, a concentração adequada, assim como o seu efeito sobre a fertilidade. Referências bibliográficas Saragusty J, Gacitua H, Rozenboim I, Arav A. Protective effects of iodixanol during bovine sperm cryopreservation. Theriogenology, v.71, p.1425-1432, 2009. Palavras-chave: colheita de sêmen, crioprotetor, diluente, espermatozóide. Keywords: cryoprotectant, semen collection, spermatozoa, extender.



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Associação entre a viabilidade espermática e parâmetros de motilidade avaliados em sistema CASA em carneiros

Association of sperm viability and CASA motility parameters in rams

J.M.M. Cavalcante1, O.O. Brasil, G.V. Aguiar, S.P. Maia Filho, J.F. Nunes

Núcleo Integrado de Biotecnologia, FAVET/UECE, Fortaleza, CE. 1E-mail: [email protected]

Introdução A integridade da membrana espermática e acrossomal é essencial na avaliação reprodutiva em ovinos, bem como a motilidade espermática, já que é expressão da viabilidade e integridade dos espermatozóides. A motilidade espermática obtida em sistemas computadorizados de análise de sêmen (CASA) permite maior precisão da avaliação do movimento seminal. Este trabalho tem como objetivo correlacionar a viabilidade espermática e acrossomal de ejaculados ovinos com parâmetros de motilidade obtidos em sistema CASA. Material e Métodos Sêmen de ovinos Santa Inês (n=2) e Dorper (n = 2) foram avaliados para motilidade total (MOT), progressiva (PROG), velocidade curvilinear (VCL), linearidade (LIN) e deslocamento lateral da cabeça (ALH) em sistema CASA (Sperm Class Analyser®, Microptic S.L.), percentual de espermatozóides vivos (EN) por coloração com eosina-nigrosina (Chemineau et al., 1991), endosmose positiva (HOST) pelo teste hiposmótico (Bucak et al., 2007) e percentual de espermatozóides com acrossoma integro (ACRO) pela a técnica de coloração por Rosa Bengala (Talbot e Chacon, 1981). Os resultados foram submetidos à correlação de Pearson, comparando os parâmetros EN, ACRO e HOST com os avaliados pelo sistema CASA. Resultados e Discussão Os valores médios para EN, ACRO e HOST foram respectivamente 86,0±8,3%; 94,8±5,4%; 61,7±13,0% e para MOT, PROG, VCL, LIN e ALH foram 88,5± 6,0%; 52,7± 8,0%; 144,3± 18,3 µm/s; 71,0±4,8%; 3,0±0,5µm. Foram encontradas associações significativas entre EN com MOT (r=0,37) e VCL (r=-0,29) assim como HOST com MOT(r=0,42), PROG (r=0,50) e VCL (r=-0,42). Não foi verificada correlação significativa entre ACRO e os parâmetros de motilidade. Estes resultados confirmam que avaliações obtidas pelas técnicas de coloração com eosina-nigrosina e teste hiposmótico são compatíveis com a motilidade total e progressiva de espermatozóides de ejaculados ovinos em sistema CASA e que a integridade da membrana espermática é essencial para manutenção progressividade de espermatozóides ovinos. Referências bibliográficas Bucak MN, Atessahin A, Yüce A. Effect of anti-oxidants and oxidative stress parameters on ram semen after freeze-thawing process. Small Rumin Res, v.67, p.1060-1067, 2007. Chemineau P, Cagnie Y, Guerin Y. Training manual on artificial insemination in sheep and goats. Rpme: FAO, 1991. Talbot P, Chacon R. A triple-stain technique for evaluating normal acrosome reaction of human sperm. J. Exp. Zool, v.215, p.201-208, 1981. Palavras-chave: CASA, correlação, ovino, viabilidade espermática. Keywords: CASA, correlation, ram, sperm viability.



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Suplementação do meio de congelamento com antioxidantes e fertilidade do sêmen congelado de ovinos da raça Santa Inês

Supplementation of extender with antioxidant and Santa Inês sheep frozen semen fertility P.P. Tsuneda1, L.K.Hatamoto-Zervoudakis, P.H.D. Gomes, M.F. Duarte-Júnior, L.M. Thiesen,

F.M. Wingert, A.C.S. Souza, L.E.S. Silva, R.A. Coelho

Universidade Federal de Mato Grosso, Cuiabá, MT. 1E-mail: [email protected]

Introdução A criopreservação possibilita um melhor resultado da utilização do sêmen. O congelamento e o descongelamento promovem uma redução na fertilidade espermática, talvez por aumento do estresse oxidativo. Novas técnicas têm sido estudadas a fim de se melhorar os índices de fertilidade e produtividade do reprodutor. A vitamina E apresenta como principal função inibir a ação dos radicais livres e conseqüentemente o estresse oxidativo. Objetivou-se com este trabalho avaliar se a suplementação de vitamina E no meio de congelamento alteraria a viabilidade e a qualidade de sêmen ovino congelado. Material e Métodos Utilizou-se 07 ovinos da raça Santa Inês com idade e pesos médios de 18 meses e 45 quilos. O ejaculado foi obtido por eletro-estimulação. Os tratamentos testados foram: meio TRIS gema citrato (meio base), meio base suplementado com 30,0 mM de vitamina E e meio base suplementado com 60,0 mM de vitamina E. Foram retiradas alíquotas do ejaculado e diluídas de modo a obter-se uma concentração final de 100 x106 espermatozóides/mL. No sêmen fresco, resfriado e pós congelamento foram avaliadas: vigor (VIG) e motilidade (MOT) espermática, viabilidade (EOS) e estresse oxidativo (TBARS). Os dados foram avaliados através da ANAVA com α de 10% Resultados e Discussão Não foi possível observar efeito da suplementação de vitamina E dos meios de congelamento sobre VIG, MOT, EOS e TBARS (p>0,10). Por isso, mais estudos nesta área são necessários uma vez que a ovinocultura tem crescido no Brasil demandando cada vez mais novas tecnologias que aumentem a sua produtividade. Com base nos resultados a suplementação do meio de congelamento com vitamina E não altera a viabilidade e a qualidade do sêmen ovino congelado. Referências bibliográficas Bilodeau JF, Blanchette S, Cormier N, Sirard MA. Reactive oxygen species-mediated loss of bovine sperm motility in egg yolk Tris extender: protection by pyruvate, metal chelators and bovine liver or oviductal fluid catalase. Laval, QB: Département des Sciences Animales, Faculté des Sciences de l’Agriculture et de l’Alimentation, Université Laval, 2000. Palavras-chave: criopreservação, espermatozóide, estresse oxidativo. Keywords: cryopreservation, oxidative stress, sperm.



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Adaptabilidade de reprodutores ovinos aferida pelo índice túnica dartos Adaptability of breeding sheep as measured by the tunica dartos index

S.R.L. Morais1, T.M. Barbosa1, C.A. Cruz Júnior1,3, C.M. Lucci1, C. McManus2

1FAV, UnB, Brasília, DF; 2Departamento de Zootecnia, UFRGS, Porto Alegre, RS.


Introdução O índice túnica dartos (ITD), é um parâmetro que se correlaciona bem com a capacidade reprodutiva de carneiros (Abdel Hafez, 2002). A túnica muscular dartos (TD) controla a distância entre a parede abdominal anterior e a porção superior dos testículos (Marai, 2006). O presente trabalho teve por objetivo avaliar a adaptabilidade de ovinos adultos criados no Distrito Federal por meio do ITD. Material e Métodos Foram avaliados 18 animais adultos de seis raças (Santa Inês−SI, Bergamácia−BG, Dorper−DR, Texel−TX, Ile de France−IL e Hampshire Down−HD) no Campo Experimental da Fazenda Sucupira (Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia) em Brasília - DF, sendo três representantes por raça. Foram coletadas amostras às 7am e 2pm durante três dias consecutivos. A temperatura retal (TR) foi obtida com termômetro digital e a temperatura escrotal (TE) foi obtida com termômetro infravermelho Raytek ™. O ITD foi estimado utilizando-se três métodos ITDa (mudança percentual em comprimento escrotal no frio e calor), ITDb (diferença porcentual entre temperatura retal e temperatura da pele escrotal ) e uma combinação de ambos (ITDc) (Marai 2006). Os dados foram analisados com o programa SAS® 9.2, por meio de ANOVA e teste de Duncan. Resultados e Discussão Existem diferenças altamente significativas (P<0,01) entre as raças pelos três métodos. No método ITDa ocorreram dois grupamentos sendo o primeiro composto pelas raças HD e SI que obtiveram os maiores valores (116,67). O método ITDb obteve quatro categorias com as raças DR−grupo1, HD e IL−grupo2, SI−grupo 3, BG e TX−grupo 4 em ordem decrescente de valores. No método ITDc, foi observado três grupamentos, o primeiro com a HD de maior valor (melhor tolerância) observado (32,11), o segundo composto pelas raças IL (25,74) e SI (25,55) e o terceiro pelas raças DR (20,86), BG (18,17) e TX (17,24). O ITD pode ser utilizado em reprodutores como um indicador de adaptação ao meio ambiente, sob condições de calor tropical. Referências bibliográficas Abdel-Hafez MAM. Studies on reproductive performance in sheep. 2002. PhD thesis - Faculty of Agriculture, Zagazig University, Zagazig, Egypt, 2002. Marai IFM et al. Tunica dartos index as a parameter for measurement of adaptability of rams to subtropical conditions of Egypt. Anim Sci J, v.77, p.487494, 2006. Palavras-chave: estresse por calor, reprodução, temperatura. Keywords: heat stress, reproduction, temperature.



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Suplementação do meio extensor com vitamina E: viabilidade espermática, estresse oxidativo e qualidade do sêmen resfriado de ovinos da raça Santa Inês

Extender supplemention with vitamin E: sperm viability, oxidative stress and cooled semen quality in Santa Inês ovine

M.F. Duarte Júnior1, L.K. Hatamoto-Zervoudakis, P.P. Tsuneda, P.H.D. Gomes, M.S.M. Costa,

L.M. Thiesen, A.C.S. Souza

Faculdade de Agronomia Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Federal de Mato Grosso, Cuiabá, MF 1E-mail: [email protected]

Introdução O estresse oxidativo é deletério à célula espermática. A vitamina E atua nos lipídeos e proteínas da membrana protegendo a contra a ação oxidante. O objetivo com este trabalho foi analisar a viabilidade espermática, estresse oxidativo e qualidade do sêmen resfriado de ovinos com meio extensor suplementados com diferentes concentrações de vitamina E. Material e Métodos Foram utilizados 6 animais da raça Santa Inês com idade e peso vivo médios de 18 meses e 45 kg. Avaliou-se três suplementos do meio extensor TRIS-gema com vitamina E: sem suplemento (TC), suplementado com 2 mM (T2) e suplementado com 6 mM (T6). A coleta de sêmen foi realizada através de eletroestimulação. A concentração espermática utilizada foi de 100 x106 de espermatozóides/dose. Amostras foram coletadas em 7 tempos: a fresco e 0, 2, 4, 12, 24 e 72 horas de resfriamento a 4°C, para análise de viabilidade (EOS), motilidade(MOT) e vigor(VIG) espermáticos e estresse oxidativo (TBARS). O experimento foi analisado através da ANAVA, SNK e Person para correlacionamento com 10% de nível de significância. Resultados e Discussão Não foi verificado efeito significativo da suplementação com vitamina E (p>0,10) sobre os valores encontrados para TBARS do sêmen fresco e nos tempos 0, 4, 12, 24 e 72 horas pós-coleta, assim como para as variáveis: EOS, MOT e VIG espermáticos. Por outro lado, houve efeito positivo da suplementação com vitamina E sobre TBARS (p=0,064) no horário 2h pós-coleta, TC(638,01±116,96), T2(424,13±44,03) e T6(389,1±27,96) ng/ml de sêmen. Os valores encontrados para VIG são altamente correlacionados com TBARS(r=0,86823, p<0,001) no sêmen fresco. A suplementação do meio extensor com vitamina E, nos níveis utilizados promoveu redução dos níveis de estresse oxidativo 2 horas pós-coleta, do sêmen resfriado de ovinos adultos da raça Santa Inês. Referências bibliográficas Andrade ER, Melo-Sterza FA, Seneda MM, Alfieri AA. Consequências da produção das espécies reativas de oxigênio na reprodução e principais mecanismos antioxidantes. Rev Bras Reprod Anim, v.34, n.2, p.79-85, 2010. SAS. The statistical analyze systems for Windows v.8. Cary, NC: Sas Institute, 1999-2001. Palavras-chave: antioxidantes, espécies reativas ao oxigênio, espermatozóide. Keywords: antioxidants, reactive oxygen species, sperm.



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Adição da gelatina no meio diluidor para congelação de sêmen ovino Gelatin addition in frozen ram semen extender

A.M.P. Bandeira1, H.C. Azevedo2,4, A.N. Maria2, P.C.F. Carneiro2, J.E. Matos3,

A.T. Andrade1, M.S. Chaves4 1NPGBIOTEC/UFS, Aracajú, SE; 2Embrapa Tabuleiros Costeiros, Aracajú, SE; 3PROZOOTEC-UFS/CAPES, 3CNPq/PIBIC.

4E-mail: [email protected] Introdução A gelatina previne a sedimentação dos espermatozóides, evitando as variações na composição do meio e pH (Yániz et al., 2005) podendo ainda minimizar as injúrias espermáticas provocadas pela formação de cristais de gelo intracelular durante a criopreservação (Schiavon et al., 2006). A gelatinização limita o refluxo do sêmen para a vagina na sua aplicação durante a inseminação (Paulenz et al., 2010), o que pode favorecer as deposições cervicais. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da adição de gelatina na qualidade e fertilidade do sêmen ovino congelado. Material e Métodos Foram utilizados seis carneiros e 92 ovelhas da raça Santa Inês. Amostras de sêmen foram, diluídas sem (controle) e com (tratamento) adição de gelatina a 1,5% ao meio, envasadas em palhetas de 0,25 mL, congeladas automaticamente e, submetidas às seguintes avaliações: cinética computadorizada (MT – motilidade total, MP – motilidade progressiva, VCL - velocidade curvilínea, VSL - velocidade em linha reta, VAP - velocidade média do percurso, ALH - deslocamento lateral da cabeça), integridades das membranas plasmática e acrossomal (IMP e IMA: diacetato de carboxifluoresceína + iodeto de propídio) e, taxa de prenhez à inseminação transcervical em tempo fixo em ovelhas submetidas à sincronização do estro. Resultados e Discussão As amostras de sêmen com gelatina apresentaram redução (p<0,05) nos parâmetros de cinética em relação ao controle: MT – 91 e 85%; MP - 31 e 38%; VCL - 221 e 269 µm/s; VSL - 135 e 166 µm/s; VAP - 173 e 209 µm/s e; ALH - 2,5 e 2,8 µm; respectivamente. Não foram observadas diferenças (p>0,05) entre o controle e o tratamento quanto à IMP (30 e 37%) e IMA (56 e 62%) e à taxa de prenhez (21,7 e 19,6%) respectivamente. Benefícios da adição da gelatina ao sêmen refrigerado de ovinos têm sido relatados (Yániz et al., 2005), entretanto, no processo de congelação este efeito não foi observado (Schiavon et al., 2006) o que corrobora com os resultados deste trabalho. Desta forma, concluiu-se que a adição da gelatina não melhora a qualidade e fertilidade do sêmen congelado de ovinos e que, apesar dos prejuízos observados na cinética, estes não se refletiram em diminuição da fertilidade à inseminação artificial.

Referências bibliográficas Schiavon RS, Amaral JI, Gastal GDA, Viana LL, Corcini CD, Goularte KL, Ulguim RR, Scheid Filho VB, Varela Junior AS, Deschamps JC, Lucia T. Efeito da gelatina e da lipoproteína de baixa densidade sobre a motilidade do sêmen ovino após o descongelamento. In: XVII Cong. Est. Med. Vet., 2006, Gramado-RS. Anais... 2006. Yániz J, Martí JI, Silvestre MA, Folch J, Santolaria P, Alabart JL, López-Gatius F. Effects of solid storage of sheep spermatozoa at 15ºC on their survival and penetrating capacity. Theriogenology, v.64, p.1844 -1851, 2005. Paulenz H, Adnøy T, Fossen OH, Söderquist L. Effect on field fertility of addition of gelatine, different dilution rates and storage times of cooled ram semen after vaginal insemination. Rep. Dom. Anim., v. 45, n.4, p.706 – 710, 2009. Palavras-chave: cinética espermática, gelatinização, integridade espermática, taxa de prenhez. Keywords: gelatinization, pregnancy rate, sperm integrity, sperm kinetic.



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Efecto del estrés por confinamiento restrictivo sobre la calidad seminal ovina Effect of restrictive confinement-stress on ovine semen quality

A. Schuh, A. Jorge, M. Miralles, E. Decaminada, M. Coppola, M.P. Ghirardi, J. Veksler Hess1

Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina.


Introducción La baja productividad individual en las majadas ovinas hace necesario implementar programas de mejora genética, siendo la ejecución de programas de inseminación artificial, una herramienta fundamental. La tecnología en los sistemas de producción intensivos ha provocado profundas modificaciones en las características genéticas y fisiológicas de los animales, dependiendo los resultados del control de la nutrición, del medio ambiente y del manejo de los mismos. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la influencia de factores ambientales productores de estrés, como el confinamiento restrictivo, sobre ciertos parámetros de calidad seminal. Materiales y Métodos Se utilizaron 4 carneros de raza frisona de 1 año y medio de edad de los cuales 3 siguieron el tratamiento CR (confinamiento restrictivo) en corrales de 1,5 m2 por un período de 28 días, clasificándolos en 2 etapas Etapa Normal (EN), al inicio del confinamiento y Etapa Estresado (ET) luegode la primer semana de confinamiento. Como testigo se utilizó 1 carnero (en un potrero de 40 m2). Todos ingiriendo fardo de alfalfa ad libitum con libre acceso al agua de bebida. Se tomó como parámetro del estrés inducido los niveles del cortisol plasmático através de un radioinmunoanálisis competitivo, con la metodología del tubo recubierto, Inmunotech IM1841 – 3438. Se realizaron las determinaciones morfológicas y fisiológicas de semen de los carneros .Se evaluaron 36 eyaculados (n = 36). Se realizarán valoraciones del volumen (V), pH, concentración (C), motilidad masal (MM), Test de Endósmosis (Hos), integridad acrosómica (I.Acr.), y morfología(Morf.).. Para la determinación de comparación de medias se utilizó el Test de Tukey con una p< = 0,05. Resultados y Discusión Los resultados mostraron que en los eyaculados de los animales sometidos al tratamiento CR con respecto al testigo, en la etapa EN previo a producirse el estrés por confinamiento, no hubo diferencias significativas con los valores tomados al comienzo de la experiencia. En cambio una vez producido el estado de estrés por confinamiento restrictivo (ET), hubo diferencias significativas en MM, Hos , I.Acr. y Morf., no así en el V, C y pH. Relacionando dichos parámetros seminales con el cortisol, no se produjeron diferencias significativas entre el carnero testigo y los que se encontraban en EN, pero sí entre estos 2 grupos y los de la ET. Dichas diferencias significativas marcarían el efecto que produce el estrés por confinamiento restrictivo en la calidad seminal de los carneros sometidos a estrés por CR.

Referencias bibliográficas Dobson H, Smith R. What is stress, and how does it affect reproduction? Anim Reprod Sci, v.60/61, p.743-52. 2000 Iorio G, Bidone M, Ghirardi P, Veksler Hess J. Recuperación de un pool de germoplasma para la formación de un núcleo genético de ovejas frisonas. Ias. Jornadas Internacionales INITRA. Buenos Aires, 2008. Veksler Hess, J.; Schuh, A.; Coppola, M.; Decaminada,E.; Miralles,M.; Ghirardi,M.P. Effects of husbandry practices and animal welfare on reproductive indicator in Sheep. Reproduction in Domestic Animals”. p 209. Vol. 43.2008. Palabras claves: estrés, confinamiento, semen, carnero Keywords: stress, confinement semen ram.



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Identificação de lipídeos por espectometria de massa de embriões individuias de suínos

L.S. Amorim1,4, C.R. Ferreira2, E.C. Cabral2, F.C. Gozzo3, E.J. Pilau3, H.H. Shiomi1, F.S. Gomide1, S.E.F. Guimarães1, P.S. Lopes1, M.N. Eberlin2, J.D. Guimarães1

1Federal University of Viçosa, Veterinary and Animal Science Department, Viçosa, MG; 2ThoMSon Mass Spectrometry

Laboratory, State University of Campinas, Institute of Chemistry, Campinas, SP; 3 Dalton Mass Spectrometry Laboratory, State University of Campinas, Institute of Chemistry, Campinas, SP.

4E-mail: [email protected] Introduction Information concerning lipid structure and fatty acid composition on embryos is considered important to better understanding the metabolism and cryosensitivity of mammalian gametes and embryos, which would directly contribute with better protocols of embryo in vitro production and cryopreservation. The objective of this study was to report the lipid profile of swine embryos by Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization – Time-of-Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOF MS). Material and Methods Swine embryos from Piau (nature breed) (n=11) and Commercial line (Landrade x Large White x Pietram) (n=11) were recovered at 6 days after matting in gilts under normal estrus by flushing uterus post-mortem with PBS and stored in 50% solution of PBS and 50% methanol for few days at -80oC until MALDI-TOF MS analysis. Sample preparation was performed by placing each intact embryo in a spot of a metal MALDI target plate under stereomicroscope and covering the samples with 1μL of 2,5-dihydroxybenzoic acid (DHB). A Synapt HDMS (High Definition Mass SpectrometryTM) (Waters Corp. Milford, MA, USA) equipped with a Matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) source was used. All spectra were manually collected for around 1 min in the positive ion mode, at the m/z range of 700-1.000. Spectra collected from individual embryos were processed using the software MassLynx 4.1 (Waters Corp. Milford, MA, USA). Results and Discussion This is the first report about lipid fingerprint of swine embryos by MALDI-MS. The technique has been already reported for bovine oocytes and embryos, as well as human and sheep oocytes (Ferreira et al., 2010). Besides the analysis workflow simplicity (no lipid extraction), intact complex lipid species such as sphingomyelins (SM), phosphocholines (PC) and triacylgycerols (TAG) can be detected because lipids are easily ionizable by MALDI using DHB as the matrix. By gas chromatography (GC), traditionally used for lipid analysis in gametes and embryos, only fatty acyl residues can be detected and structural information of lipids is lost. Based on the lipid attribution previously reported (Ferreira et al, 2010), the profile of swine embryos showed most prominent ions of PC species with 32 to 38 carbons and 1 to 5 unsaturations, such as m/z 723.5, 756.6, 782.6, 804.6, 808.6, 810.7, 830.7 and 832.7. Triacyglycerol ions are normally suppressed by the presence of PC, but were present in the spectra as low intense ions of m/z 853.7 and 855.7, 881.7, 903.7 and 905.7. We observed differences in lipid profiles among individuals, independent of the breed, and visually no fingerprinting pattern characteristic of each breed was observed. Reference Ferreira CR, Saraiva SA, Catharino RR, et al. Single embryo and oocyte lipid fingerprinting by mass spectrometry. J Lipid Res, v.51, n.5, p.1218-27, 2010. Palavras chave: bovino, embriões, espectometria de massa, lipídeos, suíno.



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In vitro fertilization of pig oocytes submitted to differents co-culture times Fertilização in vitro de ovócitos suínos submetidos a diferentes tempos de co-cultivo

G. Oberlender1,3, S.R. López2, L.D.S. Murgas1, M.G. Zangeronimo1, P. Coy2, A.D.O. Sánchez2,

A.C. Silva1, L.J. Pereira1

1Department of Veterinary Medicine, Federal University of Lavras, MG; 2Department of Physiology, Faculty of Veterinary, University of Murcia, Murcia, Spain

3E-mail: [email protected] Introduction For many years, studies about in vitro fertilization in pigs have been conducted as an important tool for reproduction. Among the factors that affect the efficiency of this technique, we can highlight the high rates of polyspermy, which occur due to several factors, such as sperm concentration, the fertilization of immature oocytes and as a main factor, the spermatic co-culture period (Coy e Romar, 2002). The aim of this study was to analyze the results of in vitro fertilization of pig oocytes subjected to three different spermatic co-culture periods. Material and Methods A total of 508 oocytes were collected from prepubertal gilts. The oocytes were collected from antral follicles of 3-6 mm of diameter. The oocytes were cultured in groups of 50 at 500 µl of maturation medium for a total period of 44 hours. After that, the oocytes were partially denuded and transferred to four-well multidish plates containing 250 µl of TALP fertilization medium. Oocytes were divided in three experimental groups according to spermatic co-culture period (1, 2 or 3 hours, respectively for G1, G2 and G3). Respectively for G1, G2 and G3, 173, 170 and 165 oocytes were evaluated. Semen was diluted at a final concentration of 4 x 105 sperm/mL and 250 µl of this final solution was added to the oocytes. After fertilization period, the oocytes were washed by gentle aspiration through a pipette and placed on plates that contained only fresh TALP medium and culture continued for another 18 hours. After this period, the oocytes were fixed and stained with Hoechst solution. Descriptive analysis and a tukey multiple comparison test (P<0.05) were conducted. All analyses were conducted using SPSS software.

Results and Discussion Optimum results were obtained after one and two hours of co-culture (P<0.05), when 70 and 76% of the oocytes were fertilized by a single spermatozoa. The three hours time interval of co-culture increased polyspermic fertilization rates. The average number of sperm per penetrated oocyte did not differ (P<0.05) between two and three hours of co-culture. Under these conditions assays, especially in relation to the sperm concentration used, fertilization rates showed that polyspermic fertilization has a positive relation with spermatic co-culture period and thereby reduces the efficiency of the technique. References Coy P, Romar R. In vitro production of pig embryos: a point of view. Reprod Fertil Dev, v.14, p.275-286, 2002. Palavras-chave: ovócitos, polispermia, reprodução, reprodutor suíno. Keywords: boar, oocytes, polyspermy, reproduction.



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Qualidade seminal em suínos da raça Piau Seminal quality in Piau boars

H.H. Shiomi1,5, R.O. Pinho1, D.M.A. Lima1, V.R. de Faria1, J.B. Siqueira2, M.H.C. Barros3,

A.Y. Chaya1, E.V. Costa1, K.A. Costa1, P.S. Lopes4, S.E.F. Guimarães4, J.D. Guimarães4

1Universidade Federal de Viçosa, MG; 2Universidade Federal do Espírito Santo, Vitória, ES, Brasil; 3Empresa Perdigão,

Videira, SC; 4Coordenadores, Universidade Federal de Viçosa, MG. 5E-mail: [email protected]

Introdução Dentre as raças naturalizadas brasileiras em alto risco de extinção, a Piau é considerada a melhor e mais importante, no entanto, estes animais permanecem ainda ignorados quanto aos padrões seminais (Sollero et al., 2006). Desta forma o presente estudo teve como objetivo avaliar os parâmetros de qualidade seminal em suínos da raça Piau.

Material e Métodos Foi realizada a avaliação das características físicas e morfológicas do sêmen de 6 varrões da raça Piau, com idades variando de 0,8 a 6,4 anos, totalizando 60 ejaculados. Os animais foram avaliados quanto às características físicas: volume do ejaculado (VOL), volume da porção gelatinosa (VOLGEL), aspecto (ASP - 1 a 4), motilidade espermática progressiva (MOT - %), vigor espermático (VIG – 1 a 5), concentração espermática total (CONCT); e morfológicas (defeitos maiores - DEFM, menores - DEFMEN e totais - DEFT) do ejaculado.

Resultados e Discussão Todos os animais demonstraram padrão semelhante de ejaculados, sem diferença entre eles (P > 0,05), sendo as médias de VOL, VOLGEL, MOT, VIG e CONCT: 149,1 ± 51,1 ml; 29,7 ± 10,0 g; 76,2 ± 9,5%; 3,3 ± 0,5; e 29,4 ± 19,5 x109 espermatozóides totais no ejaculado, respectivamente. Dentre os aspectos morfológicos foram observados 5,9 ± 2,6% de DEFM; 10,2 ± 4,0% de DEFMEN; e 16,2 ± 5,5% de DEFT, caracterizando todos os animais estudados como aptos à reprodução. Houve correlação média e negativa do VOL e VOLGEL com MOT e VIG. As características físicas e morfológicas do sêmen dos animais avaliados apresentaram padrão semelhante ao de suínos de linhagens comerciais, estando dentro dos padrões estabelecidos pelo Colégio Brasileiro de Reprodução Animal para a espécie. Não foram registradas diferenças para as características estudadas entre machos e entre os ejaculados de cada macho. Referências Bibliográficas Sollero BP, et al. Estrutura genética de cinco raças naturalizadas e comercias de suínos do Brasil, João Pessoa, PB, 2006. In: Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Zootecnia, 43, 2006, João Pessoa, PB. Anais... João Pessoa: SBZ, 2006. Palavras-chave: morfologia espermática, sêmen, varrões. Keywords: boars, semen, sperm morphology. Agradecimentos: À FAPEMIG pelo apoio financeiro.



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Correlation of the ejaculation time and sperm quality parameters in high performance boars

Correlação entre o tempo de ejaculação e parâmetros de qualidade seminal em reprodutores suínos de alta performance

T.A. Menezes, G. Oberlender1, L.D.S. Murgas, M.G. Zangeronimo, C.D. Fernandes,

L.J. Pereira, A.C. Silva, T.P. Pontelo

Department of Veterinary Medicine, Federal University of Lavras, MG, Brazil 1E-mail: [email protected]

Introduction The ejaculation time is a able parameter to demonstrate the boar libido. Boars that have high ejaculation time can be regarded as having good libido, but not necessarily a high semen quality (Cameron, 1985). Because of this, the evaluation of sperm quality is essential in order to investigate whether this longer ejaculation time does not lead to an injury to the spermatozoa characteristics. The study aim was to evaluate the influence of the ejaculation time on some sperm quality parameters of high performance boars. Material and Methods Were analyzed 358 samples of fresh semen from the Experimental Farm of Pigs of the Federal University of Lavras – UFLA/MG. The determination of the ejaculation time was performed from the moment when the animal jumped on the dummy and the collection process semen was initiated. The ejaculates were collected in its entirety and evaluated on the characteristics of volume, sperm concentration (Neubauer chamber), motility, vigor and total morphological changes following the routine technical. For comparison the ejaculation time with the parameters of semen quality was performed the Pearson correlation test among all variables except the vitality variable which was analyzed by Spearman correlation test. All statistical analyses were performed using the statistical package SPSS for Windows version 17.0.

Results and Discussion There was a moderate positive correlation (0.57, P<0.01) between semen volume and ejaculation time, as expected, and low negative correlation (-0.189, P<0.01) between the ejaculation time and sperm concentration. Considering the motility and vitality there were low negative correlation (P<0.05) compared to the ejaculation time (-0.121, -0.121) and with respect to morphology a low positive correlation (0.110). Despite to exist the correlation between motility and vitality with the ejaculation time, this is not high, and can be explained because even if the ejaculation time is high the sperm produced can be more viable and thus the variables not be affected. So even if the animal showed good libido and staying a longer time in the ejaculation process, the seminal analysis must be performed properly to avoid influencing the results. References Cameron RDA. Measurement of semen production rates of boars. Aust Vet J, v.62, n.9, p.301-304, 1985. Palavras-chave: alterações espermáticas, libido, reprodução, varrão. Keywords: boar, libido, reproduction, spermatic alterations. Financial support by Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG)



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Influência da sazonalidade na congelação do sêmen suíno Influence of seasonality on the freezing of boar semen

N.M. Velloso1, G.A. Monteiro, S.C.O.R. Vexenat, J.A. Dell`Aqua Junior, F.O. Papa, E. Oba

Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Departamento de Reprodução Animal, Universidade Estadual Paulista “Júlio

de Mesquita Filho”, Botucatu, SP. 1E-mail: [email protected]

Introdução O comprometimento sazonal dos índices reprodutivos de suínos é evidente em todo o mundo. Uma clara redução da fertilidade ocorre durante o verão e o início do outono (Suriyasomboon, 2005) devido ao estresse fisiológico (Yang et al., 2010). Material e Métodos O objetivo do trabalho foi avaliar a influencia das estações do ano nos níveis de cortisol, qualidade do sêmen e capacidade de congelação seminal. Semanalmente, foram colhidas amostras de sêmen e fezes de dez animais. Os dados de temperatura e umidade do ambiente foram obtidos através de dataloggers. A verificação da concentração de metabólitos hormonais de cortisol nas fezes foi realizada por meio de radioimunoensaio. Após a colheita dos ejaculados, o sêmen foi diluído em BTS na proporção 1:1 (v:v), centrifugado e o pellet foi ressupendido em meio de congelação à base de Tris-Gema de Ovo acrescido da associação dos crioproterores glicerol (2%) e metilformamida (2%) (v:v). Após o envase do sêmen em palhetas de 0,5 mL, as mesmas foram submetidas à temperatura de 15oC por 2 horas (0,04oC/min), e a 5oC por 5 horas (0,03oC/min). Seguindo a congelação em nitrogênio liquido, a descongelação das palhetas foi realizada. Os parâmetros da cinética espermática foram avaliados através do CASA (Computer Assited Sperm Analyser) e a integridade da membrana plasmática por microscopia de epifluorescência com sonda simples. Resultados e Discussão Os valores médios de temperaturas e umidade relativa do ar entre as estações avaliadas diferiram (P < 0,0001) sendo, respectivamente, 26oC e 70% no verão e 19oC e 49% no inverno. As concentrações de metabólitos de cortisol nas fezes, a morfologia espermática do sêmen fresco e a integridade de membranas dos espermatozóides descongelados não diferiram entre as estações (P > 0,05). Dos parâmetros espermáticos avaliados após a descongelação, apenas o percentual de espermatozóides com motilidade progressiva apresentou diferença significativa (P < 0,003), sendo a média do verão 30,6 e do inverno 23,8. Estes resultados indicam que, a despeito das grandes variações climáticas encontradas em regiões de clima tropical, os animais encontram-se adaptados a tais condições. Referências bibliográficas Suriyasomboon A. Herd Investigations on sperm production in boars, and sow fertility under tropical conditions. 2005. 52f. Tese (Doutorado) - Swedish University of Agricultural Sciences. Uppsala, 2005. Yang CC, Lin YS, Hsu CC, Tsai MH, Wu SC, Cheng WTK. Seasonal effect on sperm messenger RNA profile of domestic swine (Sus Scrofa). Anim Reprod Sci, v.119, p.76-84. 2010. Palavras-chave: congelação, sazonalidade sêmen, suínos. Keywords: freezing, semen, seasonality, swine.



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Spermatic quality of boar sperm after the freezing by different methods# Qualidade espermática do sêmen suíno após o congelamento por diferentes métodos

L.G.P. Rocha1, S.S. Rabelo, B.A. Pereira, L.D.S. Murgas, T.P. Pontelo,

T.A. Menezes, M.B. Nunes

Department of Veterinary Medicine, Federal University of Lavras, MG, Brazil. 1E-mail: [email protected]

Introduction The improvement of techniques for freezing involves a gain in swine breeding industry, reflecting improvement in the supply chain. This study aimed to analyze the sperm quality of boar semen after freezing by different methods. The methods studied were those proposed by Westendorf et al. (1975) and Paquignon et al. (1974) that are the basis for all current protocols for freezing of boar semen. Thus the improvement of methods of freezing will contribute to an increased application of cryopreserved semen in the systems of production. Material and Methods Were used in July 2010, seven pigs breeding farm owned by Sao Paulo and the Experimental Center of Porcine Department of Animal Science UFLA, and collected a semen of each animal by the method of gloved hand with the aid of dummy fixed. After collection, semen was taken to the Laboratory of Animal Physiology and Pharmacology (DMV-UFLA), which was frozen as modification of the methodologies proposed by Westendorf et al. (1975) and Paquignon et al. (1974). The thawing of straws of semen was performed in a water bath at 50°C for eight seconds, and its contents subsequently re-suspended in thinner BTSE incubated at 37°C water bath. Analyses of motility and vitality were performed on days 0, 30, 60, 90 and 120 minutes of incubation. At 0 and 120 minutes of incubation, were also performed the analysis of sperm viability, osmotic resistance rate (ORT), sperm morphology and motility degradation test (MDT). Results and Discussion There were differences (P<0.05) between sperm viability of the two methods under study, and the methodology of Westendorf et al. showed viability greater than that proposed by Paquignom et al. This increased viability may be explained by the fact that the methodology proposed by Westendorf et al. seminal plasma remained until the temperature of the semen reached 15ºC and also by the fact occur less exposure to glycerol in the pre-freeze, as this may present a cytotoxic effect, keeping then in a more effective, cryoprotection physical sperm. No significant differences (P>0.05) between the methodologies for motility and vitality, osmotic resistance test, morphology and motility rate of degradation.

References Paquignon M, Mergounis D, Courot M, Du Menils Du Buisson F. Technologie de la congélation de la semence de verrat: étude in vitro. Journ Rech Porcine France, v.6, p.71-76, 1974. Westendorf P, Richter L, Treu H. Zur tiefgefrierung von ebersperma. Dtsch Tierartzt Wacherisch, v.82, p.26-67, 1975. Palavras-chave: biotecnologia, criopreservação, reprodução animal, varrão. Keywords: animal reproduction, biotechnology, boar, cryopreservation. Financial support by Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais – FAPEMIG.



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Biometria testicular em suínos da raça Piau Testicular measurements in Piau boars

D.M.A. Lima1,3, R.O. Pinho1, H.H. Shiomi1, D.B. Diniz1, K.A. Costa1, E.V. Costa1, V.R. Faria1,

A.Y. Chaya1, H.T. Silva1, P.S. Lopes2, S.E.F. Guimarães2, J.D. Guimarães2

1Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG; 2Coordenadores – Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG.

3E-mail: [email protected] Introdução Dentre as raças naturalizadas brasileiras em alto risco de extinção, a Piau é considerada a melhor e mais importante (Sollero, et al. 2006). Na realização do exame andrológico, as mensurações das dimensões testiculares podem fornecer informações seguras sobre a capacidade de produção e de reserva espermática do animal, pois mostram o desenvolvimento testicular do reprodutor e a sua capacidade em produzir espermatozóides. Desta forma o presente estudo teve como objetivo avaliar as mensurações testiculares em suínos da raça Piau.

Material e Métodos Foi realizada a mensuração mensal das dimensões testiculares de 10 animais da raça Piau com idades variando de 0,8 a 6,4 anos, durante quatro meses, totalizando 40 aferições. As mensurações realizadas foram comprimento (CT) e largura testicular (LT), formato testicular (FT; 1 – 5) e volume testicular (VT), além das concentrações espermáticas por mililitro (CONCML) e total (CONCT). Os animais foram ainda subdivididos em 3 classes de idade, sendo: 1 (0,8 a 2,0 anos); 2 (2,1 a 3,6 anos); e 3 (3,7 a 6,4 anos).

Resultados e Discussão As médias de CT, LT e VT foram 11,8±2,2 cm; 6,2±1,3 cm; e 754,1±283,5 cm3, respectivamente. A concentração espermática observada foi de 0,23±0,17x109 e 29,4±19,5 x109 espermatozóides para CONCML e CONCT, respectivamente. Os animais mais velhos obtiveram médias mais elevadas para as mensurações testiculares (p<0,05), embora tenham obtidos médias menores de CONCML e CONCT (p<0,05). A freqüência dos FT foi de 34,2% para o FT1 e 65,8% para FT2. Houve correlação da idade de 0,32 com VT e -0,28 com CONCT. As características biométricas testiculares dos animais avaliados apresentaram padrão semelhante ao de suínos de linhagens comerciais, não sendo registradas diferenças para as características estudadas entre os machos avaliados. Referências Bibliográficas Sollero BP, et al. Estrutura genética de cinco raças naturalizadas e comerciais de suínos do Brasil, João Pessoa, PB, 2006. In: Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Zootecnia, 43, João Pessoa, PB. Anais... João Pessoa, 2006. Palavras-chave: concentração espermática, varrões, volume testicular. Keywords: boars, sperm concentration, testicular volume. Agradecimentos: À FAPEMIG pelo apoio financeiro.



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Motility, vitality and sperm viability of boar semen supplemented with differents concentrations of IGF-I after thawing #

Motilidade, vigor e viabilidade espermática do sêmen suíno adicionado de diferentes concentrações de IGF-I após o descongelamento#

B.A. Pereira1, M.F.B. Mendez1, B.G. Faria1, M.G. Zangeronimo1, L.G.P Rocha1,

C.D. Fernandes1, T.P. Pontelo1

Departament of Veterinary Medicine, Federal University of Lavras, MG; 1E-mail: [email protected]

Introduction The knowledge of the functions of the hormones regulating nutrients metabolism in swine reproduction have received increased attention. The insulin-like growth factor I (IGF-I) plays an important role in control of the testicular function and is involved in sperm development, maturation and activation of sperm motility during the ejaculation. The study aim was to evaluate the motility, vitality and viability of thawed boar semen supplemented with different concentrations of IGF-I. Material and Methods We used seven boars belonging to Farm São Paulo. One ejaculate from each animal was collected and frozen following the methodology proposed by Westendorf et al. (1975). The thawing was performed in a water bath at 50°C for eight seconds being that four samples were diluted in BTS® at 37°C and added to different concentrations of human recombinant IGF-I (0, 50, 100 and 150 ng/mL). At 0, 30, 60, 90 and 120 minutes of incubation at 37°C was observed under an optical microscope (100x) a drop of semen between slide and coverslip for evaluation of sperm motility and vitality. The sperm viability was analyzed at 0 and 120 minutes of incubation by semen smears with eosin-nigrosin stained observed in optical microscopy (400x). All statistical analyzes were performed using the statistical package SAS (1996). Results and Discussion At the time 0 of incubation the sperm motility was higher (p<0,01) when added 100 ng/mL of IGF-I than when the hormone is not added, with an increase of 10%. No significant differences (p>0,05) between concentrations of IGF-I on the spermatic vitality. There was a quadratic effect (p<0,05) of IGF-I on sperm viability being 68 ng/mL the best level of the hormone for this variable. The addition of IGF-I to thawed boar improved sperm motility and viability but did not affect the vitality. References SAS User´s Manual. Cary, NC, SAS Institute, 1996. Westendorf P, Richter L, Treu H. Zur Tiefgefrierung von Ebersperma: Labor- und besamungsergebnisse mit dem hülsenberger pailletten-verfähren. Dtsch Tierarztl Wschr, v.82, p.261-267, 1975. Palavras-chave: criopreservação, hormônio, qualidade seminal, Somatomedina C. Keywords: cryopreservation, hormone, semen quality Somatomedin C. Financed by the Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais – FAPEMIG. Support Fazenda São Paulo/Oliveira – MG.



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Motility and vitality of cooled boar semen submitted to the addition of caffeine# Motilidade e vigor do sêmen suíno resfriado submetido à adição de cafeína

E.C.P. Cunha1, M.B. Nunes1, M.G. Zangeronimo1, B.G. Faria1, T.A. Menezes1,

L.C. Torido2, L.C. Vieira1

1Department of Veterinary Medicine, Federal University of Lavras, Lavras, MG; 2Department of Veterinary Medicine, Federal University of Uberlândia, Uberlândia, MG.

E-mail: [email protected]

Introduction One of the main causes of the decline in fertility of boar semen stored energy is the wear of the energy on their sperm (Ford and Waites, 1986). Addition to semen of phosphodiesterase inhibitors such as caffeine, promotes an increase in the concentration of cAMP in sperm by raising your metabolism, thus improving the quality of sperm (Garbers et al., 1971). The objective was to evaluate the motility and vitality of swine semen cooled and subjected to the addition of different concentrations of caffeine. Material and Methods We used four boars (three ejaculates/animal) belonging to the Fazenda São Paulo, Oliveira/MG. The semen was processed at doses of 100 ml diluted in BTS® with three billion spermatozoa, cooled to 17°C. At 0 (day of collection), 24 and 48 hours of cooling rates of the five dose were incubated in a water bath at 37 ° C and they added different concentrations of caffeine (0, 2, 4, 6 and 8 mM). At 0 and 120 minutes after incubation with caffeine was performed under a optical microscopy evaluation of sperm motility and vitality of all samples. A randomized blocks design with five treatments (caffeine levels) and 12 repetitions was used. The averages was compared by Kruskal-Walis test. Results and Discussion The averages for sperm motility showed a decrease over time of incubation (P<0,05) between different concentrations of caffeine and storage time, while the mean sperm vitality showed an increase after the addition of caffeine at 48 hours storage, which can be justified by the likely increase in the energy metabolism of spermatozoa (Garbers et al., 1971). Thus, we conclude that the addition of caffeine to swine semen cooled does not influence sperm motility, but may improve the vitality of sperm that is kept cold for 48 hours after collection.

References Ford WCL, Waites GMH. Sperm maturation and the potential for contraceptive interference. In: Zatuchni CI, Goldsmith A, Spieler JM, Sciarra JJ. (Ed.). Malecontraception: advances and future propects. Philadelphia, Harper e Row, 1986. p.89-106. Gargers DL, Lust WD, First NL, Lardy HA. Effect of phosphodiesterase inhibitorsand cyclic nucleotides on sperm respiration and motility. Biochemistry, v.10, n.10, p.1825-1831, 1971. Keywords: boar, cooling, metabolism, reproduction, spermatozoa. Palavras-chave: espermatozóide, metabolismo, reprodução, resfriamento, varrão. Financed by the Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG) and Support Fazenda São Paulo, Oliveira, MG.



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Motility and vitality of thawed boar semen submitted to the addition of caffeine# Motilidade e vigor do sêmen suíno descongelado submetido à adição de cafeína

T.P. Pontelo, M.G. Zangeronimo1, M.B. Nunes, L.G.R. Pessoa, B.R. Chaves,

B.A. Pereira, L.C. Vieira

Department of Veterinary Medicine, Federal University of Lavras, Lavras, MG.

1E-mail: [email protected] Introduction The improvement of the freezing of boar semen by the addition of substances that semen has been studied to keep the sperm quality, since the freezing process damages sperm (Martinez et al., 2005). Caffeine is a compound that inhibits phosphodiesterase, which degrades cAMP, thus providing an increase of its concentration with an increase in the energy metabolism of sperm (Garbers et al., 1971). The objective was to evaluate the motility and vitality of movements of thawed boar semen subjected to the addition of different concentrations of caffeine. Material and Methods We used four boars (three ejaculates/animal) belonging to the Fazenda São Paulo, Oliveira/MG. The ejaculates were frozen by Westendorf et al. (1975) protocol. After the semen was thawed in a water bath at 50°C for eight seconds and five aliquots of thawed semen were added in BTS® comprehending different concentrations of caffeine (0; 0,5; 1,0; 1,5 and 2,0 mM) and incubated at 37°C. At 0, 15, 30, 45 and 60 minutes of incubation were evaluated by an optical microscope motility and vitality. A randomized blocks design with five treatments (caffeine levels) and 12 repetitions was used. The averages was compared by Kruskal-Walis test. Results and Discussion The average results for sperm motility and vitality of movements showed a similar decrease (from 20% and 3 to 7% and 2 for motility and vitality, respectively, until 30 minutes) over time of incubation (P<0.05) between the different levels of caffeine used, probably by the fragility of sperm cells post-thawed. Actually, more researches need to be conducted to improve the quality of boar semen in this conditions. In this case, it can be concluded that the addition of caffeine did not affect the motility and vitality of movements of thawed boar semen.

References Garbers DL, Lust WD, First NL, Lardy HA. Effect of phosphodiesterase inhibitorsand cyclic nucleotides on sperm respiration and motility. Biochemistry, v.10, n.10, p.1825-1831, 1971. Martinez EA, Vazquez JM, Roca J, Cuello C, Gil MA, Parrilla I, Vazquez JL. Na update on reproductive Technologies with potential short-term application in pig production. Reproduction Domestic Animal, Berlin, v.40, p.300-309, 2005. Westendorf P, Richter L, Treu H. Zur Tiefgefrierung Von Ebersperma: Labor-uns besamungsergebnisse mit dem hüsenberger pailletten-verfähren. Dtsch Tierarztl Wschr, v.82, p.261-267, 1975. Keywords: cryopreservation, metabolism, reproduction, spermatozoa, swine. Palavras-chave: criopreservação, espermatozóide, metabolismo, reprodução, suíno. Financed by the Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais – FAPEMIG and Support Fazenda São Paulo/Oliveira – MG.



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Motility and vitality of boar semen cooled at 15ºC submitted to addition of different caffeine concentrations#

Motilidade e vigor do sêmen suíno resfriado a 15ºC submetido a adição de diferentes concentrações de cafeína

B.R. Chaves1, D.E. Braga, E.C.P. Cunha, A.C.N. Vasconcelos, C.D. Fernandes, M.G. Zangeronimo, G. Oberlender

Department of Veterinary Medicine, Federal University of Lavras, MG.

1E-mail: [email protected] Introduction One of the main causes of the fertility decline of boar semen stored is the sperm energy wear and this is directly related to its internal concentration of cyclic adenosine monophosphate (cAMP) (Ford & Waites, 1986). Therefore, the addition of phosphodiesterase inhibitors in the semen, such as caffeine, promotes an increase in the cAMP concentration, increasing the spermatozoa metabolism. The study aim was to evaluate the behavior of boar semen diluted in BTS® medium supplemented with different concentrations of caffeine, through the evaluation of motility and vitality of the semen cooled at 15°C. Material and Methods We used 16 ejaculates of four boars from the Fazenda São Paulo, in the city of Oliveira/MG. and was used a randomized block design with four treatments (levels of caffeine) and 16 repetitions, being the blocks consist by ejaculated. After collection, the semen was diluted in BTS® and were prepared insemination doses of 100 mL with 3.0 x 109 sperm cells , which were stored in refrigerator at 15°C. At the time of 0, 24, 48 and 72 hours of storage, eight semen aliquots of 2.0 mL were removed, heated at 37°C in water bath and added to different amounts of caffeine, being 0, 0.5, 1.0 and 1.50 mg/100mL. After five minutes of incubation, we evaluated the sperm motility and vitality. Analyses were performed using a drop of semen placed between slide and coverslip pre-heated to 37°C and observed under an optical microscope (x 10 magnification). Was used the Statistical Package SAS (1996) for all statistical analysis.

Results and Discussion For the spermatic motility there was no difference (P> 0.05) between caffeine levels and the storage times. This may be due to the high quality semen presented since the first evaluation. For the motility and vitality was found significant linear regression (P <0.05) for the incubation times, showing a decrease of these variables over time. This fall is expected, because with the increasing of storage period occurs a decrease of energy reserves and also a reduction in spermatic metabolism, which leads to a smaller capacity of moviment. The addition of different caffeine concentrations increased the average of vitality compared with the samples that were not added (P <0.05). This may be due to nutrient utilization by spermatozoa. References Ford WCL, Waites GMH. Sperm maturation and the potential for contraceptive interference. In: Zatuchni CI, Goldsmith A, Spieler JM, Sciarra JJ. (eds.). Malecontraception: advances and future propects. Philadelphia, Harper e Row, p.89-106, 1986. Palavras-chave: espermatozóide, metabolismo, reprodução, varrão. Keywords: boar, metabolism, reproduction, spermatozoa. Financial support by Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG).



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Morfometria do aparelho genital de coelhas (Oryctolagus cuniculus) suplementadas com geleia real in natura

Morphometry of the genital tract of female rabbits (Oryctolagus cuniculus) supplemented with in natura royal jelly

M.A.A. Silva, P.A. Dutra, L.P. Barbosa1, A.L.A. Santana, C.S. Mendes,

R.S. Souza, B.M. Cardoso Neto, C.S. Aguiar

1Universidade Federal do Recôncavo da Bahia, Cruz das Almas, BA. E-mail: [email protected]

Introdução A geleia real para a abelha rainha é importante para sua diferenciação morfológica, aumento da massa corporal, longevidade e desenvolvimento de estruturas relacionadas à reprodução, com desenvolvimento dos órgãos sexuais e consequentemente da fertilidade (Ohashi et al., 1997). Desta forma, objetivou-se avaliar o efeito da suplementação com geleia real in natura na morfometria do aparelho genital de coelhas (Oryctolagus cuniculus) em crescimento. Material e Métodos Foram utilizadas 36 coelhas das raças California e Nova Zelândia. As fêmeas foram distribuídas aleatoriamente em quatro grupos, sendo: Grupo 1 (n = 9): sem suplementação com geleia real; Grupo 2, 3 e 4 (n = 9): suplementação com 10, 20 e 40 mg/dia de geleia real (Cia do Mel®, Ba - Brasil) in natura, via oral. A suplementação com geleia real foi iniciada após o desmame, com 30 dias de idade, até o segundo parto das mesmas, totalizando 11 meses. Avaliou-se o peso do aparelho genital feminino, o peso do ovário direito e esquerdo, o índice gonadossomático, largura, comprimento e altura do ovário direito e esquerdo. Para análise dos dados utilizou-se Análise de Variância, com um nível de significância de 5%. Resultados e Discussão A utilização de geleia real, independente dos níveis utilizados, não influenciou (P > 0,05) nos parâmetros avaliados de morfometria do aparelho genital. A média apresentada pelos grupos para peso total do aparelho genital foi de 10,89 g; os pesos dos ovários direito e esquerdo foram de 0,298 g e 0,291 g, respectivamente. O índice gonadossomático médio dos grupos foi de 0,020%. Não houve diferença significativa (P > 0,05) para os parâmetros de morfometria ovariana, com média para largura do ovário direito de 0,426 cm; largura do ovário esquerdo de 0,430cm; comprimento do ovário direito de 1,62 cm e do ovário esquerdo de 1,56cm; altura do ovário direito de 0,21 cm e do ovário esquerdo de 0,21 cm. Conclui-se que a suplementação crônica com até 40 mg de geleia real in natura não influenciou na morfometria do aparelho genital de coelhas em crescimento. Referências bibliográficas Ohashi K Natori S, Kubo T. Change in the mode of gene expression of the hypopharyngeal gland cells with an age-dependent role change of the worker honeybee Apis mellifera L. Eur J Biochem, v.249, p.797-802, 1997. Palavras-chave: abelha, coelho, reprodução. Keywords: bee, rabbit, reproduction.



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Morfometria testicular de caprinos alimentados com óleo de licuri (Syagrus coronata) Morphometry testicular of goats fed licuri oil (Syagrus coronata)

C.S. Aguiar, A.L.A. Santana, L.P. Barbosa¹, C.S. Mendes, M.L. Araújo, R.C.S.A. Araújo¹,

M.A.A. Silva, J. Figueredo Júnior

Universidade Federal do Recôncavo da Bahia, Cruz das Almas, BA. ¹E-mail: [email protected]

Introdução As características morfométricas do sistema genital masculino, especialmente as testiculares, podem auxiliar na escolha de bons reprodutores, devido à correlação entre as características testiculares e seminais (Rege et al., 2000). Pesquisas são realizadas para avaliar o efeito das dietas nos processos reprodutivos, sendo os lipídios considerados fontes energéticas com alta concentração de energia prontamente disponível e, o óleo de licuri, uma alternativa para alimentação de animais no período de seca na região Nordeste (Crepaldi et al., 2001). Desta forma, objetivou-se avaliar o efeito da inclusão de níveis de óleo de licuri (Syagrus coronata) na dieta de caprinos, por meio da morfometria testicular. Material e Métodos Utilizou-se 16 caprinos púberes ¾ Boer, distribuídos aleatoriamente em quatro grupos (G) (n=4), sendo: G1= grupo controle, sem lipídio adicional na dieta; G2, G3 e G4 com 1,5; 3,0 e 4,5% de óleo de licuri na dieta, respectivamente, com base na matéria seca. Os parâmetros morfométricos avaliados foram pesos testicular e epididimário, comprimento total dos túbulos seminíferos (CTT(m)) e comprimento dos túbulos seminíferos por grama de testículo (CTT(g/m)). Para avaliação dos dados utilizou-se análise de regressão ao nível de 5% de probabilidade. Resultados e Discussão Não houve diferença (P>0,05) para os parâmetros avaliados. O peso médio dos testículos direito e esquerdo entre os grupos foi de 89,4 e 88,6g, respectivamente. Para o peso epididimário houve pequena variação nas médias, de 13,1g para epidídimo esquerdo a 13,7g para epidídimo direito. O comprimento total dos túbulos seminíferos em metros (CTT) variou entre os grupos de 3,2g a 4,6g e o comprimento total dos túbulos seminíferos por grama de testículo (g/m) (CTT) apresentou média entre os grupos de 0,02g/m. O óleo de licuri é um resíduo que pode ser utilizado como alternativa para alimentação dos animais, visto que sua inclusão até 4,5% não influenciou negativamente nos parâmetros reprodutivos avaliados. Referências bibliográficas Rege, J.E.O.; Toe, F.; Mukasa-Mugerwa, E. et al. Reproductive characteristics of Ethiopian highland sheep: II. Genetic parameters of semen characteristics and their relationships with testicular measurements in ram lambs. Small Rumin. Research, v.37, n.3, p.173-187, 2000. Crepaldi, I.C.; Muradian, L.B. de. A.; Rios, M.D.G.; et. al. Composição nutricional do fruto de licuri (Syagrus coronata (Martius) Beccari). Revista Brasileira de Botânica. v.24, n.2, São Paulo, 2001. Palavras-chave: lipídios, morfometria, reprodução Keywords: lipids, morphometry, reproduction



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Parâmetros reprodutivos de coelhas suplementadas com geleia real in natura Reproductive parameters of female rabbits supplemented with in natura royal jelly

M.O. Ribeiro, A.L.A. Santana, L.P. Barbosa¹, M.S. Ferreira, W.M. Machado,

A.M. Pinheiro, C.S. Aguiar, P.A. Dutra

Universidade Federal do Recôncavo da Bahia, Cruz das Almas, BA. ¹E-mail: [email protected]

Introdução Nos últimos anos, tem-se observado interesse pelo uso da geleia real, justificado pelo fato deste produto apresentar propriedades singulares medicinais e nutritivas, tendo sido utilizada para melhorar a fertilidade de animais (Barbosa et al., 2009) e humanos (Al-Masri, 1986). Desta forma, objetivou-se avaliar a influência da suplementação com geleia real in natura em parâmetros reprodutivos de coelhas (Oryctolagus cuniculus).

Material e Métodos Trinta e seis fêmeas pós-desmama, 30 dias de idade, foram distribuídas em quatro grupos (G) (n = 9), sendo: G1 (controle) = fornecimento de água destilada; G2, G3 e G4 = fornecimento de 10, 20 e 40 mg de geleia real in natura, respectivamente. O fornecimento de água e de geleia real foi feito diariamente e por via oral. Avaliou-se peso à puberdade, idade à puberdade, idade à primeira cobertura, idade ao primeiro parto, peso ao primeiro parto e intervalo entre partos. Para os parâmetros quantitativos utilizou-se análise de variância pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade e para os parâmetros qualitativos, utilizou-se a metodologia de modelos lineares generalizados, com distribuição binomial. Resultados e Discussão Houve diferença (P<0,05) apenas para peso e idade à puberdade. O grupo controle apresentou maior peso à puberdade, com 2.522g em relação aos demais grupos, com 2.048g (G2), 2.075g (G3) e 2.240g (G4). As fêmeas tratadas com geleia real entraram em puberdade mais cedo, com média de 116 dias, em relação ao grupo controle, com 126 dias. Esse fato pode ter ocorrido devido ao efeito produzido pelos hormônios esteroides presentes na geleia real (Hidaka et al., 2006). A média para a idade a primeira cobertura entre os grupos foi de 18 semanas. Para idade ao primeiro parto, obteve-se uma média de 166 dias. A média de peso ao primeiro parto para os grupos foi de 2.905g. A média para intervalo entre partos nos grupos foi de 73 dias. A suplementação diária via oral com até 40mg de geleia real melhorou a precocidade de coelhas.

Referências bibliográficas Al-Masri A. The royal jelly: honeybee kingdomand its derivation. Arabic Book House Publishers, 1986. p.291-300. Barbosa LP, Rodrigues MV, Balarini MK. Qualidade embrionária de camundongos (Mus musculus) suplementados com geleia real. Rev Bras Saúde Prod Anim, v.10, n.1, p.146-152, 2009. Hidaka S, Okamoto Y, Uchiyama S. et al. Royal Jelly prevents osteoporosis in rats: beneficial effects in ovariectomymodel and in bone tissue culture model. Evidence-based Compl Altern Med, v.3, n.3, p.339-348, 2006. Palavras-chave: abelha, coelho, reprodução. Keywords: bee, rabbit, reproduction.




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Fístula retovestibular em carcinoma espinocelular queratinizado em trato genital feminino de bovino e equino – relato de dois casos

Retovestibular fistulae in keratinizing squamous cell carcinoma of the female genital tract in bovine and equine – two case reports

F.F.P.C. Barros1, D.J. Cardilli, F.A. Voorwald, L.C. Padilha, W.R.R. Vicente, G.H. Toniollo

FCAV, UNESP, Jaboticabal, SP. 1E-mail: [email protected]

Introduçao Carcinoma de células escamosas (CCE) é uma neoplasia maligna dos queratinócitos, que pode acometer regiões mucocutâneas como trato genital de equinos e bovinos. Falta de pigmentação da epiderme, radiação ultravioleta emitida pela luz solar, ausência de pêlos na região afetada e injúria epidérmica predispõem o início do CCE. Objetiva-se com este trabalho relatar CCE invasivo em vulva, vagina e períneo de uma fêmea bovina e equina, resultando em fístula retovestibular. Materiais e Métodos Foram atendidas no Hospital Veterinário da FCAV/UNESP, uma vaca holandesa de três anos, e uma fêmea equina (Pônei), com dois anos, tordilho, apresentando CCE queratinizado na vulva, vagina e períneo. Os tumores apresentavam-se firmes, hemorrágicos, com contornos irregulares, caráter infiltrativo, com regiões ulceradas, contaminadas e necróticas. O diagnóstico foi confirmado após exame histopatológico. A pônei foi tratada com cisplatina intratumoral, quatro aplicações com intervalo de duas semanas, na dose de 1mg/cm3 de tumor, enquanto que a vaca, por opção do proprietário, foi submetida apenas a tratamento das feridas existentes. Resultados e Discussão Na égua, observou-se regressão tumoral de aproximadamente 30% apenas nas duas primeiras aplicações, optando-se por cessar o tratamento quimioterápico após a quarta aplicação, devido ao alto custo da medicação. Após 30 dias do término do tratamento, o animal apresentava invasão tumoral em vagina, cérvix, cólon e reto, optando-se por eutanásia. Já o proprietário da vaca optou logo pela eutanásia após ser instruído quanto ao prognóstico e possível tratamento. Em ambos os casos as proliferações tumorais situavam-se nas regiões despigmentadas da vulva, confirmando a influência da radiação solar em regiões despigmentadas e glabras na patogênese do CCE. Alguns autores enfatizam que tal neoplasia ocorre com maior frequência em animais de origem européia criados em regiões de clima tropical, como a fêmea bovina deste relato. O tratamento do CCE de vulva é mais eficiente quando diagnosticado precocemente e quando a região acometida é pequena e superficial, possibilitando remoção cirúrgica, criocirurgia, terapia fotodinâmica, radiação ionizante, injeções intralesionais de BCG ou terapias locais com cisplatina ou interleucina 2. Apesar da extensa área tumoral, foi realizada na pônei a tentativa de tratamento com aplicação in situ de quimioterápico, que resultou em melhora inicial, o que possibilitaria excisão tumoral cirúrgica e reconstrução retovestibular, não autorizada pelo proprietário. Devido ao diagnostico tardio, a fêmea bovina apresentava extensa área tumoral, com regiões de necrose e contaminação bacteriana, caracterizando prognóstico desfavorável. Conclui-se que a precocidade no diagnóstico do CCE tem efeito fundamental no prognóstico, assim como a extensão da região acometida, que quando pequena e superficial, possibilita a adoção das condutas terapêuticas supracitadas. Referências bibliográficas Ramos AT et al. Carcinoma de células escamosas em bovinos, ovinos e eqüinos: estudo de 50 casos no sul do Rio Grande do Sul. Braz J Vet Res Anim Sci, v.44, p. 5-13, 2007. Palavras-chave: carcinoma células escamosas, vagina, vulva. Keywords: squamous cell carcinoma, vagina, vulva.



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Qualidade embrionária de coelhas (Oryctolagus cuniculus) suplementadas com geleia real in natura

Embryo quality in rabbits (Oryctolagus cuniculus) supplemented with in natura royal jelly

C.S. Mendes, P.A. Dutra, L.P.Barbosa1, A.L.A. Santana, M.C.P. Leite, B.M. Cardoso Neto, R.C.S.A. Araújo, M.L. Araújo



Introdução A geleia real vem sendo estudada com objetivo de melhorar os resultados com reprodução assistida de espécies domésticas de interesse econômico e em estudos com modelos experimentais, visando auxiliar a reprodução humana (Barbosa et al., 2009). Desta forma, objetivou-se estudar o efeito da suplementação com geleia real in natura por meio da qualidade embrionária de coelhas (Oryctolagus cuniculus) adultas. Material e Métodos Foram utilizadas 36 coelhas das raças California e Nova Zelândia. As fêmeas foram distribuídas aleatoriamente em quatro grupos, sendo: Grupo 1 (n = 9): sem suplementação com geleia real, Grupo 2, 3 e 4 (n = 9): suplementação com 10, 20 e 40 mg/dia de geleia real in natura (Cia do Mel®, BA - Brasil) via oral, durante 11 meses consecutivos. O protocolo superovulatório consistiu na aplicação de uma dose de 40 UI de eCG, seguida por uma dose de 40 UI de hCG, via intramuscular, 48 horas após, e submetidas à cobertura natural. Os animais foram eutanasiados e os embriões coletados 72 horas após a cópula. Avaliou-se o número de embriões viáveis; número de embriões degenerados e qualidade morfológica dos embriões viáveis. Para análise dos dados utilizou-se Análise de Variância, com 5% de probabilidade.

Resultados e Discussão Não houve diferença significativa (P < 0,05) para o número de embriões viáveis (10,86), para o número de embriões degenerados (0,64) e para qualidade morfológica dos embriões viáveis com a suplementação de geleia real in natura nas doses utilizadas. Os embriões viáveis foram classificados morfologicamente como grau I: sendo, 6,5; 8,0; 4,3 e 9,5; grau II: 4,1; 3,1; 2,6 e 2,9 e grau III: 1,3; 1,6; 1,3 e 0,0; para os grupos G1 (0 mg), G2 (10 mg), G3 (20 mg) e G4 (40 mg), respectivamente. Este estudo corrobora com os achados de Barbosa et al. (2009) que não obtiveram diferença significativa na qualidade embrionária de camundongas superovuladas e suplementadas com geléia real. Conclui-se que a suplementação com geléia real in natura em até 40mg, não melhorou a qualidade embrionária de coelhas adultas superovuladas. Referências bibliográficas Barbosa LP, Rodrigues MV, Balarini MK, et al. Qualidade embrionária de camundongos (Mus musculus) suplementados com geléia real. Rev Bras Saúde Prod Anim, v.10, p.146-152, 2009. Palavras-chave: abelha, embrião, reprodução. Keywords: bee, embryo, reproduction.



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Resposta superovulatória de coelhas (Oryctolagus cuniculus) suplementadas com geleia real in natura

Superovulatory response in rabbits (Oryctolagus cuniculus) supplemented with in natura royal jelly

M.L. Araújo, P.A. Dutra, L.P. Barbosa1, A.L.A. Santana, M.C.P. Leite, C.S. Aguiar, R.S. Souza, B.M. Cardoso Neto



Introdução Kridli e Al-Khetib (2006) demonstraram que a geléia real pode ter efeitos positivos sobre a taxa de gestação e de nascidos e aumenta a incidência de estro em ovelhas O modo exato da ação da geleia real sobre a reprodução ainda não foi totalmente elucidado. Objetivou-se estudar o efeito da suplementação com geleia real in natura na resposta superovulatória de coelhas adultas. Material e Métodos Foram utilizadas 36 coelhas das raças Califórnia e Nova Zelândia. As fêmeas foram distribuídas aleatoriamente em quatro grupos, sendo: Grupo 1 (n=9): sem suplementação com geleia real, Grupo 2, 3 e 4 (n=9): suplementação com 10, 20 e 40 mg/dia de geleia real in natura (Cia do Mel®, Ba - Brasil), via oral, durante um período de 11 meses. O protocolo superovulatório consistiu na aplicação de uma dose de 40 UI de eCG, seguida por uma dose de 40 UI de hCG, via intramuscular, 48 horas após, e submetidas à cobertura natural. Avaliou-se o número de folículos e de corpos lúteos nos ovários direito e esquerdo; a taxa de recuperação embrionária e o número de estruturas totais recuperadas após superovulação. Para análise dos dados utilizou-se Análise de Variância, com um nível de significância de 5%. Resultados e Discussão Não foi encontrada diferença (P > 0,05) na resposta superovulatória de coelhas suplementadas com geleia real in natura. O número de folículos no ovário direito foi de 23, 26, 15 e 19; no ovário esquerdo foi de 19, 24, 17 e 14, para os grupos 1, 2, 3 e 4, respectivamente. O número de corpo lúteo no ovário direito foi de 6, 7, 7 e 5; e no ovário esquerdo foi de 8, 7, 5 e 7, para os grupos 1, 2, 3 e 4, respectivamente. O número de estruturas totais recuperadas foi de 8, 10, 8 e 10, com taxa de recuperação de 43, 57, 57 e 68%, para os grupos recebendo 0mg, 10mg, 20mg e 40mg de geleia real, respectivamente. O presente trabalho difere dos resultados encontrados por Kridli & Kheitib (2006) que relataram que as ovelhas tratadas com geleia real natural obtiveram aumento no desenvolvimento folicular. Conclui-se que a suplementação com até 40mg de geleia real in natura não influencia a resposta superovulatória de coelhas adultas. Referências bibliográficas Kridli RT, Al-Khetib SS. Reproductive responses in ewes treated with eCG or increasing doses of royal jelly. Anim. Reprod. Sci., v.92, p.75-85, 2006. Palavras-chave: corpo lúteo, folículo, reprodução. Keywords: corpus luteum, follicle, reproduction.



345

Qualidade e quantidade de oócitos caprinos (Capra hircus) e ovinos (Ovis aries) recuperados por aspiração e fatiamento

(Quality and quantity of oocytes goats (Capra hircus) and sheep (Ovis Aries) recovered by aspiration and slicing)

R.L. Galvão1, L.C. Leal, R.J. Pereira, R.F. Solano, H.M. Pereira,

N.W.B. Carvalho Filho, R.M. Chaves

Laboratório de Reprodução Animal, UEMA, São Luís, MA. 1E-mail: [email protected].

Introdução Ovários oriundos de abatedouro constituem uma abundante fonte de oócitos para a colheita do conteúdo folicular. Numerosas pesquisas têm estudado as diferentes características foliculares, como competência para o crescimento, tamanho folicular, folículos saudáveis, perfil hormonal e status ovariano (Castilho e Garcia, 2005). Objetivou-se comparar as técnicas de aspiração e fatiamento, e avaliar a quantidade e qualidade dos oócitos obtidos. Material e Métodos Foram utilizados oócitos caprinos e ovinos provenientes de animais abatidos da região metropolitana de São Luis - MA. Metade foi aspirada com seringa de 5 mL e agulha 18G e a outra metade processada pela técnica de fatiamento “slicing”. Os oócitos foram colocados em placas de Petri com DMPBS e líquido folicular, para serem observados, quantificados e selecionados em lupa estereomicroscópica (Nikon, SMZ800), com objetiva de 4x. Foi observado o aspecto morfológico do CCO, segundo Lonergan et al. (1994). Para correlacionar a qualidade e a quantidade por espécie e técnica empregou-se o teste de Spearman (P < 0,05). Resultados e Discussão Foram coletados 62 ovários ovinos, sendo 32 ovários aspirados, resultando em 145 oócitos e 19 oócitos Grau I, 29 Grau II, 32 Grau III, 34 Desnudos, e 31 atrésicos. Foram fatiados 30 ovários, com 158 oócitos recuperados sendo 21 Grau I, 27 Grau II, 36, Grau III, 36 desnudos e 38 atrésicos. Não foi observada diferença significativa (P > 0,05) entre as duas técnicas utilizadas por qualidade de oócito. Em caprinos foram 76 ovários, 34 aspirados, fornecendo 140 oócitos sendo 13 oócitos Grau I, 27 Grau II, 29 Grau III, 37 Desnudos e 34 Atrésicos. 32 foram fatiados, fornecendo 162 oócitos, destes foram 15 células Grau I, 32 Grau II, 34 Grau III, 42 Desnudos e 39 Atrésico, não sendo observada diferença significativa (P > 0,05) entre as duas técnicas utilizadas por qualidade de oócito. Ambas as técnicas podem ser utilizadas na obtenção de oócitos caprinos e ovinos. Referências bibliográficas Castilho C, Garcia JM. Divergência no crescimento folicular: efeito na competência oocitária para o desenvolvimento in vitro de embriões: revisão. Arch Vet Sci, v.10, n.3, p.17-23, 2005. Lonergan P, Monaghan P, Rizos D. Effect of follicle size on bovine oocyte quality and development competence following maturation, fertilization and culture in vitro. Mol Reprod Dev, v.37, p.48 -53, 1994. Palavras-chave: caprinos, oócitos, qualidade, ovinos. Keywords: goats, oocytes, quality, sheep.




346

Características bioquímicas do sêmen de coelhos criados em clima tropical Biochemistry of the rabbit semen in tropical climate

J.M.A Alencar, A.G.V. Catunda, G.V. Aguiar, H.M. Meneses, R.R.S. Rios, C.R.F. Gadelha1,

M.E.F. Guerreiro, A.C.N. Campos

Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, CE. 1E-mail: [email protected]

Introdução O plasma seminal (PS) desempenha um papel ativo na atividade e proteção dos espermatozóides, por meio da ação de vários constituintes, até a fertilização. O objetivo deste estudo foi caracterizar a composição bioquímica do plasma seminal de coelhos criados no NE do Brasil, identificando ainda as variações que possam ocorrer ao longo do ano. Material e Métodos O experimento foi conduzido nas instalações do Setor de Cunicultura do Departamento de Zootecnia/UFC. O índice de conforto térmico foi calculado de acordo com a fórmula do ITU, modificada para coelhos. Foram utilizados 20 coelhos da raça Nova Zelândia Branca, criados em sistema flat-deck e alimentados com ração comercial. Os ejaculados foram coletados duas vezes por semana (outubro/2009 a setembro/2010), utilizando-se uma vagina artificial. Para realização das análises bioquímicas foi feito um “pool” mensal de PS de cada animal, dos quais foram avaliadas as concentrações de glicose, frutose, colesterol total e proteínas totais.

Resultados e Discussão Foram constatadas diferenças significativas nas concentrações de frutose entre os diferentes meses do ano. A glicose foi identificada como um constituinte frequente no PS de coelhos. A concentração de colesterol total, nesse estudo, foi mais baixa que o encontrado em outras avaliações, provavelmente porque à metodologia empregada não mensura os lipídios presentes nas vesículas comumente encontradas no PS de coelhos. As proteínas totais estavam elevadas em meses de estresse térmico muito severo e na ausência de estresse térmico. Os resultados demonstram que os coelhos criados no nordeste do Brasil estão adaptados, apresentando características bioquímicas normais apesar da existência de estresse térmico. Referências bibliográficas Castellini C, Cardinali R, Dal Bosco. A. Lipid composition of the main fractions of rabbit semen. Theriogenology, v.65, n.4, p.703-712, 2006. Marai IFM, Habeeb AAM, Gad AE. Reproductive traits of male rabbit as affected by climatic conditions, in the sub-tropical environment of Egypt. J Anim Sci, v.77, n.3, p.451- 458, 2002. Okab AB. Semen characteristics and plasma testosterone of New-Zealand male rabbits as affected by environmental temperatures. Slovak J Anim Sci, v.40, n.4, p.161-167, 2007. Palavras-chave: coelhos, estresse térmico, plasma seminal, reprodução. Keywords: heat stress, rabbits, reproduction, seminal plasma.



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Uso da gema do ovo de codorna (Cuturnix japonica) na criopreservação do sêmen de jumentos da raça Pêga (Asinus equi)

Quail egg yolk (Cuturnix japonica) on cryopreservation of Pêga donkey semen (Asinus Equi).

L.S. Fernandes1, T.P.Machado, C.O. Silveira, J.C.O. Dias, B.W. Freitas, L.S. Amorim, J.D. Guimarães1

Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG.

1E-mail: [email protected] Introdução Os protocolos de criopreservação utilizados para o sêmen equino não possuem resultados satisfatórios quando aplicados ao sêmen de jumentos. O efeito crioprotetor da gema do ovo de galinha no processo de congelamento de asininos é satisfatório, porém não há sucesso nas taxas de fertilidade in vivo. Trimeche et al. (1997) demonstraram que a gema do ovo de codorna confere maior proteção aos espermatozóides de jumentos durante o processo de criopreservação. Objetivou-se com este estudo avaliar a viabilidade espermática do sêmen congelado de jumentos da raça Pêga em meio contendo gema de ovo de codorna. Material e Métodos Foram feitas seis coletas de dois reprodutores asininos. O sêmen, foi então submetido ás seguintes análises: Teste de termorresistência (TTR) e coloração Supravital, onde o sêmen foi incubado em banho-maria a 37ºC durante 2 horas de modo que a cada 30 minutos fossem avaliados a motilidade progressiva, vigor espermático e número de células coradas. A avaliação da integridade funcional da membrana espermática foi realizada pelo teste hiposmótico (HOST), tanto no sêmen fresco quanto no descongelamento. Após as análises, o sêmen fresco foi diluído em um meio contendo gema de ovo de codorna resfriado por 1 hora a 5 ºC, seguido por 15 min em vapor de nitrogênio líquido e, então imerso no mesmo. As variáveis foram submetidas à estatística descritiva para obtenção das médias e erro-padrão da média.

Resultados e Discussão Os valores de motilidade progressiva e vigor espermático ao longo do TTR foram, respectivamente: Sêmen fresco-77,08±1,56 e 3,71±0,10; Sêmen congelado: 0h–47,08±2,17 e 3,04±0,11; 30min–32,08±3,91 e 2,79±0,14; 1h –22,92±3,34 e 2,54±0,17. Para os mesmos tempos do TTR, os valores do teste supravital foram: 77,21±1,57; 44,08±2,61; 36,58±2,21; 37,75±2,69, respectivamente. O sêmen fresco apresentou porcentagem média de 71,08±3,46 e o descongelado de 29,17±2,95 de espermatozóides reativos ao HOST. Os valores de motilidade progressiva e vigor espermático mantiveram-se dentro dos parâmetros preconizados pelo CBRA (Manual..., 1998). Concluiu-se que a gema do ovo de codorna foi eficaz em manter a mobilidade espermática no pós-descongelamento.

Referências bibliográficas Manual para exame andrológico e avaliação de sêmen animal. 2 ed. Belo Horizonte, MG: CBRA, 1998.49p. Trimeche A, Anton M, Renard P, Gandemer G, Tainturier D. Quail egg yolk: a novel cryoprotectant for the freeze preservation of poitou jackass sperm. Cryobiology, v.34, p.385-393, 1997. Palavras-chave: codorna, criopreservação, gema de ovo, hiposmótico, jumentos. Keywords: cryopreservation, donkey, egg yolk, hypoosmotic, quail.



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Padronização da concentração espermática para a extração de DNA Standardization of sperm concentration for DNA extraction

E.C.B. Silva1, D.M.F. Silva, L.C.P. Arruda, W.A. Gomes, A. Wischral, M.A.

Gomes Filho, M.M.P. Guerra

UFRPE, Recife, PE. 1E-mail: [email protected]

Introdução Com o desenvolvimento das técnicas de sexagem de espermatozóides surgiu a necessidade de validá-las por análise de DNA espermático. Entretanto, o número de células recuperadas após sexagem é baixo (Resende et al., 2009), o que dificulta a extração de DNA para amplificação na reação em cadeia da polimerase (PCR). Assim, foi objetivado neste estudo padronizar a concentração espermática necessária para a extração de suficiente DNA a ser usado na PCR. Material e Métodos Foram utilizadas três palhetas (0,25mL; 100x106 sptz) de sêmen ovino e três de caprino, as quais foram, individualmente, lavadas e ressuspensas em PBS para 50x106 sptz. A extração do DNA espermático foi realizada com Kit DNeasy Blood & Tissue (QUIAGEN GmbH, Germany), segundo protocolo do fabricante para sangue animal, com modificação das amostras usadas: G1=2x106, G2=10x106, G3=20x106 spz, correspondentes a 10, 50 e 100µL da amostra, respectivamente. O DNA extraído foi quantificado em espectrofotômetro e analisado em gel de agarose a 1%. Os resultados de concentração de DNA foram analisados pela análise de variância (ANOVA) e as diferenças significativas comparadas pelo teste de Tukey (P<0,05). Resultados e Discussão Na espectrofotometria foi quantificado o DNA extraído de todos os grupos experimentais, obtendo-se as concentrações de 34,45±11,23 (G1), 36,69±7,19 (G2) e 46,42±14,60 (G3) ng/uL para ovino e 21,00±5,67 (G1), 40,54±8,10 (G2) e 43,10±7,48 (G3) ng/uL para caprino. Estes valores não diferiram significativamente (P>0,05) na espécie ovina, enquanto que na caprina a concentração de DNA obtida no G1 foi menor (P<0,05) do que as de G2 e G3. A diferença nas concentrações de DNA resultou no aparecimento de bandas no gel de eletroforese, apenas no G2 e G3 de ovino (Fig. 1a). Conclui-se que é possível extrair DNA de espermatozoides ovinos mesmo em amostras com baixa concentração e que na espécie caprina a extração é limitada, sendo as amostras com 10x106 e 20x106 sptz mais adequadas para este fim.

Figura 1. Eletroforese do DNA extraído de espermatozoides ovinos (a) e caprinos (b).

Referências bibliográficas Resende MV, Bezerra MB, Perecin F, Almeida AO, Lucio AC, Lima VFMH. Separation of X-bearing bovine sperm by centrifugation in continuous percoll and optiprep density gradient: effect in sperm viability and in vitro embryo production. Ciênc Anim Bras, v.10, n.2, p.581-587, 2009. Palavras-chaves: espermatozóides, extração de DNA, sexagem. Keywords: DNA extraction, sexing, sperm.

a b 2x106 _ 10x106__ 20x106__ 2x106 _ 10x106__ 20x106__



349

Índice de autores autores pag

A

Abreu CO 118 Abreu JT 055 Abreu RA 155 Ackermanna CL 262 Adrião M 295 Agostinho BF 138, 255 Aguiar CS 018, 277, 278, 339,

340, 341, 344 Aguiar Filho CR 286 Aguiar GV 244, 322,

346 Aisen EG 309 Alberton C 140 Albuquerque RS 102 Alcoléa M 210 Alencar JMA 346 Almeida DS 286 Almeida DVC 044, 046 Almeida FC 077, 258, 307 Almeida FF 314, 315 Almeida HM 027 Almeida J 152 Almeida MVD 181 Almeida Neto JRM 062, 063 Almeida VF 279 Alvarenga MA 260 Alvares CTG 101, 175, 271 Alvarez RH 108 Alves BG 056, 075, 131,

132, 191, 193 Alves JDR 070, 119 Alves KA 075, 131, 132, 191,

193 Alves MF 078 Alves PAM 080 Alves RPA 264 Alvim MTT 178 Amaral ACO 299 Amaral CRA 306 Amaral JB 060 Américo LC 184 Amorim Júnior AA 022

Amorim LS 328, 347 Amorim MJAAL 022 Amorim RNL 049 Amorin RL 197, 198 Andrade AFC 160, 162 Andrade AT 326 Andrade BHA 115, 116,

287, 288 Andrade DV 033 Andrade ES 009, 011, 015 Andrade MLL 272 Andrade Moura JC 251, 252,

313, 321 Andrade VJ 089, 126, 142,

143, 144, 145, 146, 149, 156,

164, 173 Andrade-Lopes MLL 284 Antonângelo RP 174 Aragão FJM 121, 264 Aragão GSJ 200 Aragão LKS 314 Arashiro EKN 067, 274, 318 Araujo AA 225, 112, 224,

232 Araújo EAB 115, 116, 287,

288 Araújo EB 184, 263 Araújo GGL 285 Araujo GHM 308 Araujo GR 041 Araújo ML 340, 343, 344 Araújo MS 300 Araújo RCSA 277, 340, 343 Araújo-Lemos PFB 086 Araújo-Lemos PFBA 234 Arckerman CL 199 Arguello FAPB 166, 167, 168 Arrais AM 058, 311 Arrebola TAH 269 Arruda IJ 223 Arruda LCP 310, 312, 348 Arruda RP 072, 073, 123,

160, 162 Assis Neto AC 039 Assumpção TI 145, 140 Ayala HDM 180 Azedo MR 123 Azevedo EP 224

Azevedo HC 282, 326 Azevedo MV 070, 119 Azevedo NA 142, 156, 173

B

Baêta JVPB 024 Balarin MRS 196 Balarini MK 020, 036, 265 Balieiro JCC 128, 185 Balthazar DA 045 Bandeira AMP 326 Báo SN 179 Barbosa CC 030 Barbosa CP 129, 163 Barbosa EA 137, 148, 168 Barbosa EM 177, 180 Barbosa FA 126, 142, 143, 144,

145, 146, 164, 173 Barbosa LP 018, 172, 214,

216, 277, 278, 279, 339, 340, 341, 343, 344

Barbosa TM 324 Barros CHSC 284, 285 Barros FFPC 342 Barros LO 065, 066 Barros MBS 119 Barros MHC 330 Barros MS 033 Barros RF 129, 159, 163 Barroso CG 291 Bartolomeu CC 070, 079, 101,

106, 175, 271 Baruselli PS 113, 176, 178 Basso KM 255 Bastianetto E 178 Batista AM 014, 077, 310,

312 Batista LA 163 Bayão HXS 178 Beletti ME 056, 061, 075,

131, 132, 139, 141, 154, 160,

191, 193 Benjamim LA 239, 091 Bergamaschi MA 082 Bergmann JAG 170 Bergo CF L 040, 041 Berlim AT 183



350

Bernardo S 248 Bertolo PHL 102, 297 Beserra EEA 121 Bezerra DO 027 Bezerra FQG 286 Bezerra JAB 042, 050, 053 Bezerra LL 254 Bicudo LC 155, 276 Bicudo SD 150, 276, 280 Biscarde CEA 172, 251, 252,

276, 313, 321 Bispo CAS 237 Bittencourt RF 115, 282 Bittencourt TCBSC 214, 216 Blume H 179 Boakari YL 211 Bomfim CAM 150 Bomfim SRM 150 Bonato GL 074 Bonfim CAM 248 Borba Neto ÁV 310, 312 Borges I 272, 274,

285 Bortoletto N 125 Braga DE 338 Braga LS 056, 075, 131,

132, 191, 193 Branco E 029 Brandão FZ 212, 215, 218, 227,

270, 292, 298 Brasil AF 026, 045, 266 Brasil OO 147, 301, 322 Breda JC 068, 069, 117 Brito AB 044, 046 Brito KMA 315 Brito LT 194, 195, 267 Brito MBS 028 Brito MF 169, 205 Brito TC 296, 299 Brun MV 273 Burgos DC 085, 120, 242

C

Cabral EC 328 Calazans N 014 Caliari MV 181 Calixto Júnior FJ 188

Câmara DR 307 Câmara TS 016 Camargo Filho ST 094, 130 Camargo LSA 091, 095 Camargo NI 183 Camargos AS 060 Campos ACN 244, 346 Campos DB 065, 066 Campos LB 042 Campos MDSM 070 Campos PKA 035, 265 Campos TL 124 Caram DF 254 Cardilli DJ 190, 342 Cardoso BO 076, 094, 130 Cardoso D 150 Cardoso EC 270 Cardoso GS 199 Cardoso IR 111 Cardoso JFS 103 Cardoso Neto BM 018, 172,

214, 216, 277, 278, 279, 339, 343, 344

Carlis AC 140 Carneiro C 217 Carneiro FT 037, 038, 051 Carneiro GF 085, 120,

242, 245, 258 Carneiro LC 074, 124, 125 Carneiro MS 017, 293 Carneiro PCF 326 Carneiro RPB 275 Carreira JT 182 Carrera ALM 093 Carretta Junior M 035, 037,

051, 038, 040 Cartaxo FQ 234 Carvalho AF 029 Carvalho AFS 009 Carvalho AS 184 Carvalho BP 058, 083,

087, 088, 110, 114, 311

Carvalho CTG 314, 315 Carvalho DS 195 Carvalho EL 290 Carvalho ER 162

Carvalho Filho NWB 345 Carvalho FP 311 Carvalho GMC 151 Carvalho IA 256 Carvalho IR 182 Carvalho JA 175 Carvalho MAM 027, 039 Carvalho MRS 156 Carvalho NAT 176 Carvalho RAC 033 Carvalho SM 293, 294 Carvalho TTC 169, 205 Carvalho YKP 027 Carvalho YNT 017, 283, 302 Casseb AR 229 Castelo Branco MA 017, 151,

283, 302, 303 Castelo TS 025, 042, 043, 048,

050 Castro MM 038, 051 Castro PHG 028 Castro TS 149 Catunda AGV 244, 346 Cavalcante AKS 085, 120 Cavalcante JMM 322 Cavalcante LCF 224 Cavalcanti LFL 274 Cavichiolo F 054 Celeghini ECC 072, 073, 123,

162 César CNR 242 Chacon JS 287, 288 Chacur MGM 032, 136, 138,

255, 269 Chalhoub M 115, 116, 287, 288 Chaves BR 337, 338 Chaves MS 326 Chaves Neto A 229 Chaves RM 243, 286, 345 Chaves RT 165 Chaves T 014 Chaya AY 330, 334 Chistilis M 217, 240, 210, 235,

237, 238, 239 Clemente CA 274 Clemente CAA 272, 285, 316 Cochito CS 098

Coelho MCOC 306

Sumário

Indice de autores



351

Coelho MF 317 Coelho RA 323 Coelho WS 093 Conceição AMS 107, 201,

289 Coppola M 327 Cordeiro MF 272, 284 Cordeiro NIS 055 Correia FR 306 Correia GS 201 Correia HS 017, 302, 303 Cosendey RIJ 292 Cosentino PN 127 Costa AC 010 Costa ANL 112, 225 Costa APR 017, 211 Costa C 019 Costa CA 029, 229, 231 Costa DNM 151, 302, 303 Costa DS 135, 158 Costa e Silva EV 157, 275 Costa EP 091 Costa EV 330, 334 Costa FAL 121, 293, 294 Costa FQ 058, 087, 088, 114,

311 Costa FS 195 Costa JJN 100, 219, 220 Costa Junior JL 085, 120 Costa KA 330, 334 Costa KLC 021, 024 Costa MSM 325 Costa PM 111, 165 Coutinho LL 128 Coutinho LN 028 Coutinho R 014 Coy P 329 Crocomo LF 280 Crusco SE 206 Cruz BC 169, 205, 256, 274, 316,

317, 318 Cruz JF 271 Cruz Júnior CA 300, 319,

324 Cruz RC 215, 226 Csermak Junior AC 051 Cucco DC 128 Cunha ECP 336, 338

Cunha ICN 207, 209, 257

Cunha MO 074 Cunha-Santos R 161 Cupertino MC 021, 051 Curtivo CP 099

D

D´Alencar MP 223 D'Amato CC 305 D'Angelo M 078 Dantas TC 043 de Cesare AG 136 de la Sota RL 309 Decaminada E 327 Deco S T 038, 041 Del Rei AJ 101, 175, 271 Dell`Aqua Junior JA 332, 134,

174 Denadai R 212 Deragon LG 129, 159 Derussi AAP 199, 262 Destro FC 060, 262 Detoni D 088 Dias AJB 058, 083, 087, 088,

110, 114, 311 Dias JC 143, 149, 173 Dias JCO 210, 235, 236, 238,

239, 240, 241, 347 Dias M 081, 090 Diniz DB 334 Domingues SFS 044, 046, 261 Dominguez JHE 135 Dórea MD 067 Dornelas e Silva VH 037, 038,

040, 051 Dourado AP 098 Duarte IN 139, 141,

154 Duarte Junior MF 099,127,

166, 167, 168, 323,

325 Duarte SS 223 Dutra GA 246 Dutra PA 018, 172,

214, 216, 277, 278, 339, 341, 343, 344

E

Eberlin MN 328 Eler JP 128 Eloy AMX 320 Emerenciano KDM 048 Emerick LL 126, 142, 143, 144,

145, 146, 149, 156, 164, 173

Ereno RL 308 Esteves LV 215, 226, 227 Evangelista LSM 264

F

Facó O 218 Fagundes AKF 194, 200, 267 Falleiros MB 276 Faria BG 335, 336 Faria FJC 135 Faria VR 330, 334 Farias AC 105, 253 Farias JC 294 Farrás MC 260 Fátima LA 065, 066 Faturi C 296, 297, 299 Favacho HGS 097, 102, 253 Feitosa JV 112 Feitosa LCS 016, 211 Felizardo VO 009, 010, 011 Fernandes ACC 070 Fernandes CAC 109, 067 Fernandes CB 072, 213, 281 Fernandes CCL 291 Fernandes CD 331, 335, 338 Fernandes CE 153 Fernandes GM 118

Fernandes GO 171 Fernandes LS 247, 347 Fernandes Neto VP 016, 027, 211 Ferraro CC 155 Ferraz MS 027, 039 Ferraz PA 115, 116, 287, 288 Ferraz PC 101 Ferreira AB 278, 279 Ferreira AF 124, 125 Ferreira AM 062, 063



352

Ferreira AMR 026, 045, 266, 292 Ferreira BX 157 Ferreira CR 328 Ferreira FG 172 Ferreira HN 260 Ferreira JC 060 Ferreira JCP 059, 060, Ferreira JE 076, 080, 094,130 Ferreira LC 082 Ferreira LFL 205 Ferreira MBD 163 Ferreira MPB 242 Ferreira MR 009, 010,

011, 015 Ferreira MS 341 Ferreira Neto JS 121 Ferreira NM 187 Ferreira RN 180 Ferreira SB 151, 283, 302, 303 Ferreira VCD 285 Ferrer JBS 041 Figueira LM 227 Figueiredo JR 031 Figueredo Junior J 278, 279, 340 Fioramonte M 304 Fioratti EG 260 Fonseca CHPJ 062, 063 Fonseca FCE 228, 230 Fonseca JF 212, 215, 218,

226, 227, 270 Fonseca LTA 231 Fonseca PO 273 Fontes RS 083 Fortunato AAAD 157 Fraga Junior AM 107, 120,

201, 289 França DQ 208 Francisco da Silva AG 275 Frares LF 134, 174 Frazão Sobrinho JM 017, 302,

303 Freire LMP 030, 052,

203, 261 Freitas BW 347 Freitas CIA 049 Freitas CKN 016 Freitas FF 234 Freitas LA 030, 261

Freitas LC 168 Freitas MBD 033 Freitas MR 177, 180 Freitas Neto LM 107, 201, 289 Freitas VJF 222 Freitas-Dell´Aqua CP 260 Fujita AS 134, 174 Furtado JR 320

G

Gabriel AMA 054 Gabriel Filho LRA 136, 269 Gadelha CP 299 Gadelha CRF 346 Gallo JMS 056, 061 Galvão A 152 Galvão C 152 Galvão RL 345 Gambarini ML 104, 259 Garay RM 041 Garcia RC 029 Garcia RG 054 Gasparrini B 178 Gerhardt BT 098 Ghirardi MP 327 Gimenes LU 178 Gioso MM 109 Góes KLS 224 Goes RHTB 054 Gomes Filho MA 223, 348 Gomes LA 264 Gomes LH 111 Gomes MGT 274 Gomes PBC 182, 248 Gomes PHD 099, 127, 166, 167,

323, 325 Gomes WA 310, 312, 348 Gomide FS 328 Gonçalves EPM 296, 297, 299 Gonçalves LMF 264 Gonçalves MTC 111, 165 Gonçalves PBD 122 Gonçalves PEM 126, 142,

143, 144, 146, 164, 173

Gontijo AO 169

Gonzalez Cadavid V 147, 301 Goulart IL 062, 063

Gouveia FF 171 Gozzo FC 304, 328 Gradela A 187 Graff HB 162 Grázia JGV 091 Grebogi AM 068, 069 Greselle FVN 134 Guaitolini CR 199 Guaitolini CRF 192 Gueiros OG 023 Guerra M 014 Guerra MMP 077, 234, 242,

258, 307, 310, 312, 348

Guerreiro MEF 346 Guido FI 079 Guido SI 106 Guiesi RF 082 Guimarães CDO 184 Guimarães CF 073, 213, 281 Guimarães JD 158, 210, 217,

235, 236, 237, 247, 328, 330,

334, 347 Guimarães Junior V 160 Guimarães KO 044, 046 Guimarães SEF 158, 328,

330, 334 Günzel-Apel AR 207 Gurjão TA 039 Gusmão AL 251, 252,

313, 321 Gutierrez RR 084, 186,

189 H

Haas DM 242 Hatamoto-Zervoudakis LK

127, 099, 166, 167, 168, 323,

325 Heneine LGD 316, 317, 318 Henning H 207 Henry M 169, 170, 205, 256,

272, 274, 285, 316, 317, 318

Hossepian de Lima VFM 160, 162



353

I

Ibrahim DB 269 Ivo JC 143 Izidoro LS 063

J

Jacob JCF 246, 249,

254 Jacomini JO 056, 075, 131, 132,

139, 154, 160, 191, 193

Jesus VLT 019, 249 Joao CF 190 Jojot VC 135 Jorge A 327 Juliano RS 137 Junqueira RGC 254 Jurado SB 309

K

KiyaCK 214, 216, 251, 252,

313, 321 Knackfuss FB 266 Koivisto MB 182 Kozicki LE 068, 069, 117, 134,

174 L

Lacreta Jr ACC 028 Lagares MA 256 Lage PG 170, 317 Landim-Alvarenga FC 192, 280 Lanna LL 188, 204, 268 Leal AB 223 Leal DR 171 Leal LC 243, 345, Leal LS 082 Leal TM 283 Leal WS 233 Leão DL 044, 046 Leão RAC 057, 146 Lechinoski LC 105, 296, 297 Leitão CCF 064, 092, 100 Leite DKV 026

Leite GS 263 Leite JPV 024 Leite JS 012 Leite LT 012 Leite LV 013 Leite MCP 279, 343, 344 Leite RC 178, 222 Leite RMH 086 Leite TG 126, 142, 143, 144,

145, 146, 156, 173 Lemos JC 224 Lemos MS 139, 141, 154 Lemos PFBA 077 Lilenbaum W 227, 292 Lima AR 029 Lima DMA 330, 334 Lima Filho JAC 306 Lima FSM 010, 011 Lima FTR 095, 096 Lima GL 031, 034 Lima ICS 232 Lima JMS 024 Lima LS 031, 293 Lima PCS 184, 263 Lima PF 070, 119,

286 Lima SF 259 Lima WF 229, 231 Lins e Lins FLM 028 Lira ADB 065, 066 Lira LB 242 Liu IKM 245 Loaiza-Echeverri AM 170, 318 Loiola Filho JB 272 Loiola MVG 115, 116,

287, 288 Lopes JT 013 Lopes Junior ES 272, 284 Lopes MD 185, 192, 197,

198, 199, 262 Lopes PS 328, 330,

334 Lopes RA 027 López SR 329 Lorenzo PL 245 Lourenço TT 273 Louvandini H 319 Lucci CM 300, 319, 324

Lucia RFS 118 Luz MR 067, 192 Luz VB 031

M

Macedo AGC 187 Macedo ATM 119 Macedo GG 275 Macente BI 084, 186, 189 Machado CT 029, 229, 231 Machado R 082 Machado TF 033 Machado TP 347 Machado WM 277, 341 Maciel TT 099 Magalhães FJR 183 Magalhães LC 285 Magalhães PN 097, 253 Magão JVP 158 Mahecha GAB 143, 173 Maia ALRS 212 Maia AP 251, 252, 313 Maia Filho SP 322 Maia KM 025 Maia MS 228, 233 Maia RC 110, 114 Maia VN 258 Maidana AD 054 Maio JRG 176 Maitan PP 210 Mambrini JVM 055, 169,

205, 316 Mancio AB 226 Manno MC 296, 299, Mansano CFM 084, 189 Manso Filho H C 183 Mansur VFR 009 Mansur VR 015 Maria AN 326 Marinho WAS 166, 167, 168 Marques Filho WC 060, 280,

059 Marques JA 172 Marques Júnior AP 057, 133,

188, 204, 268

Marques VS 133



354

Martin I 059 Martinez AC 118 Martins EA 138 Martins EAF 032 Martins Filho FR 079, 106 Martins G 227, 292 Martins HS 256 Martins I 197,198 Martins JAM 126, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 149, 156, 164, 173, 232,

301 Martins Júnior B 176 Martins LEP 251, 252,

313, 321 Martins LF 158 Martins MC 056, 075, 131, 132,

138, 191, 193 Martins MIM 196 Martins T 162 Martins YS 290 Mascarenhas LM 076, 094,

130 Mascarenhas RM 188, 204,

208, 268 Matos E 282 Matos JE 326 Matos LF 083 Matos MHT 187 Matta APLF; 024 Matta MP 247 Matta SLP 020, 021, 024, 033,

036, 047, 265 Mattos BO 010 Mattos EC 128 Maturana Filho M 072, 073,

123 Maximiano AS 109 McManus C 300, 319,

324 Medeiros ALN 225 Medeiros CHN 225 Medeiros IL 291 Medeiros IM 233 Medeiros SR 012 Medina VH 309 Meira C 060 Meireles M 213, 281 Melado RWC 268 Mello MFV 292

Mello MRB 076, 080, 094, 130, 152

Mello RRC 076, 080, 094, 130 Melo AJF 108 Melo CCS 195, 200,

267 Melo MAP 012 Melo MIV 055, 169, 205, 316 Melo PMA 105 Melo TMV 306 Mendes CB 016, 293 Mendes CS 339, 340,

343 Mendes VRA 241 Mendez MFB 335 Meneses HM 346 Menezes DJA 027, 039 Menezes ESB 148 Menezes RBR 158 Menezes TA 331, 333, 336 Menezes TP 020 Mesquita EYE 097, 102,

177, 253 Minazaki CK 206 Mineiro ALBB 121, 293,

294 Miralles M 327 Miranda DA 170, 317 Miranda DC 033

Miranda KL 171 Miranda MS 284, 285 Miranda Neto T 158 Miranda SA 044, 046 Mizusaki KT 136 Mogollón EM 311 Monção FP 054 Monteiro AWU 225 Monteiro BA 280 Monteiro CD 276 Monteiro FOB 028 Monteiro GA 332 Monteiro JEC 085 Monteiro Junior PLJ 077 Moraes AS 141 Moraes GP 126, 142, 144, 145,

146, 156 Moraes Júnior FJ 302 Morais ACT 036 Morais DB 036, 047,

265 Morais LP 283 Morais SRL 324 Morandi Filho R 154, 141 Moreira NH 137 Moreira PFS 141 Moreira UCP 139, 154 Moreno MP 246 Moscardini MM 273 Mota CA 133 Mota Filho AC 052, 202, 203 Mota GB 095, 096, 179 Mota LHCM 017, 151, 283, 302,

303 Mota MF 118 Motheo TF 305 Moura AAA 147, 148, 232, 301,

304 Moura DS 273 Moura GS 126, 142, 144, 145,

146, 156, 164 Moura LCO 316, 318 Moura LV 054 Moura MRP 268 Moura MTMM 233 Moura RR 222 Moura VMBD 185 Moustacas VS 317, 318 Moya-Araujo CF 308 Mucci FL 108 Mukai LS 084 Muniz JM 293 Muniz ECD 228, 230 Muniz JAPC 028 Muniz JM 294 Murgas LDS 009, 010, 011, 015,

329, 331, 333 Murta EA 089 Murta JEJ 089, 143, 173

N

Nascimento CB 294 Nascimento IMR 017, 151,

283, 302, 303 Nascimento IV 293 Nascimento JA 107 Nascimento JVP 158



355

Nascimento LES 294 Nascimento MC 214, 216 Nascimento NV 137, 148 Nascimento PMP 222 Nascimento TVC 284, 285 Nascimento VA 081, 090 Neves AC 021 Neves JP 071, 171 Neves KAL 113 Neves MM 020, 033, 036 Nicacio AC 111, 165 Nobre CS 095, 096 Nogueira DM 272, 284 Nogueira LAG 080, 098 Noronha CF 045 Norte DF 055, 126, 145 Nunes IMM 017 Nunes JF 012, 244, 307, 322 Nunes KB 177, 180 Nunes LT 013 Nunes MB 333, 336, 337 Nunes Viana GE 016

O

Oba E 032, 136, 138, 212, 269,

308, 332 Oberlender G 329, 331, 338 Ohta BB 062, 063 Oliveira ACD 170, 318 Oliveira ACS 103 Oliveira AL 229 Oliveira AP 222 Oliveira AR 037, 038, 040, 051 Oliveira BMM 072, 073, 123 Oliveira CHA 223, 224, 291 Oliveira CMM 119 Oliveira CTSAM 235, 238,

239, 240 Oliveira e Silva I 095, 096, 179 Oliveira ECS 194, 195,

200, 267, 268 Oliveira ER 054 Oliveira F 141 Oliveira FA 081, 090, 236, 285 Oliveira FCE 013 Oliveira FCR 292

Oliveira Filho BD 104 Oliveira GC 072, 073, 123 Oliveira GD 210, 217, 235, 236,

238, 239, 240, 241 Oliveira JA 021, 190 Oliveira JCV 079, 106 Oliveira JFC 122 Oliveira Jr S 085 Oliveira JS 149 Oliveira JSK 227 Oliveira JTA 304 Oliveira Junior CA 256 Oliveira Junior S 120 Oliveira KS 190 Oliveira LZ 160, 162 Oliveira MAL 286 Oliveira MD 107, 201, 289 Oliveira MEF 290, 296, 305 Oliveira MF 025, 031, 034, 043 Oliveira ML 111 Oliveira MMNF 081, 090, 236 Oliveira Neta AC 097, 102,

177, 231, 253 Oliveira Neto MJ 020, 036 Oliveira PC 185 Oliveira RA 259 Oliveira RF 209 Oliveira RL 214, 216 Oliveira RV 148, 232 Oliveira SN 115, 116, 287, 288 Oliveira TM 276 Oliveira VM 157 Oliveira VVG 023 Ortega HH 181

P

Padilha LC 305, 342 Pádua MFS 125 Paes de Carvalho CS 088, 110 Paiva ALC 049 Paixão MO 107, 201, 289 Palazzi EG 078 Palhano HB 076 Palhão MP 067 Pallaoro R 140 Paludo F 091

Papa FO 260, 332 Papa PC 065, 066 Paschoal DM 280 Passos MJ 092, 100, 219, 221 Patricio FAC 146, 164, 142, 144,

145, 156 Paula DAJ 009, 010, 011, 015 Paula NRO 103 Paula TAR 035, 037, 038,

040,041, 047, 051, 208, 265

Paula VV 049 Pavão DL 078 Peixoto GCX 025, 034, 042, 050,

053 Peixoto JV 051, 265 Peixoto S 014 Penitente Filho JM 081, 090,

236, 241 Penna B 227 Penna CFAM 256 Pereira BA 333, 335, 337 Pereira BS 030, 052, 261 Pereira ECM 091 Pereira GR 122 Pereira HM 345 Pereira JF 244 Pereira JL 110 Pereira LC 029 Pereira LJ 329, 331 Pereira MAN 015 Pereira MM 095 Pereira PAC 062, 063 Pereira PM 196 Pereira RCG 019, 249 Pereira RJ 345 Pereira RJTA 213, 281 Peres AAC 108 Peres AR 084 Peres RFG 162 Pérez-Gutiérrez JF 190 Pessoa DFM 293 Pessoa GT 039 Pessoa LGR 337 Pessoa VM 255 Piagentini M 308 Piersanti RLF 259 Pietroski ACCA 218



356

Pilau EJ 328 Pinheiro AM 341 Pinheiro EC 291 Pinheiro JPS 013 Pinho FP 079, 106 Pinho RO 158, 330, 334 Pinto DA 061, 139, 154 Pinto JN 030, 052, 261 Pinto PFB 126, 142, 143, 144,

146, 164, 173 Pinto PHN 215 Pinto SCC 111, 165 Pinto-Neto A 118 Pires Júnior JB 086 Pires TF 079 Pissinatti A 026 Pogliani FC 123 Poncio VAP 108 Pontelo TP 331, 333, 335, 337 Portela AMLR 100, 219, 220,

221 Portela CHP 228, 230

Q

Queiroz GCD 023 Queiroz RK 078 Quessada AM 264 Quirino CR 257

R

Rabelo SS 333 Ramires Neto C 260 Ramos AF 137, 148 Ramos CLG 209 Ramos LG 209 Raposo Costa AP 016 Rebouças EL 064, 092, 100 Reghini MFS 260 Rego JPA 304, 147, 301 Rêgo WMF 103 Reig VP 298 Reis AM 211 Reis AN 161 Reis SM 024

Resende MV 251, 252, 313, 321 Resende OA 152 Retamal C 087 Rezende CA 256 Ribas JAS 257, 298 Ribeiro AA 199 Ribeiro APC 093 Ribeiro Filho AL 115, 116, 287,

288 Ribeiro GM 093 Ribeiro HFL 097, 102, 105,

177, 180, 253 Ribeiro LM 300 Ribeiro MO 018, 279,

341 Ribeiro MS 252 Ribeiro RP 064, 100, 220, 221 Ribeiro TN 015 Ricarte ARF 025, 034, 043, 048,

049 Rios RRS 346 Rizzo MS 121 Rocha AS 197, 198 Rocha BD 055 Rocha DR 301 Rocha JS 024 Rocha Junior AD 314, 315 Rocha LGP 333, 335 Rocha SSN 295 Rodrigues ALR 270 Rodrigues APR 031 Rodrigues AS 115, 116,

287, 288 Rodrigues BLF 237 Rodrigues CA 248 Rodrigues Filho SS 290, 296,

297, 299 Rodrigues FV 223, 224, 291 Rodrigues LFS 290, 296, 297,

299, 305 Rolim Filho ST 097, 102, 105,

177, 180, 229, 231, 253

Rondina D 223, 224, 291 Rosa e Silva AAM 095, 096, 179 Rosa EP 250 Rosa FB 058, 087,

114 Rosado MM 083 Rosse I 156

Rossi RODS 064, 092, 219, 220

S

Sá Filho MF 113 Sá MAF 246, 254 Sabino M 083 Sales FABM 079 Salgado B 108 Saliba WP 178 Salles MGF 232 Salles MGG 225 Salmito-Vanderley CSB 012, 013 Salvagni CA 259 Salvetti N 181 Sampaio MO 306 Sanavria A 152 Sanches OC 032, 255,

269 Sánchez ADO 329 Sant`Ana ACS 120 Santana ALA 018, 277, 278, 339,

340, 341, 343, 344 Santana JLO 168 Sant'Anna CN 085 Sant'Anna MC 196 Santoro MM 149 Santos ADF 314, 315 Santos CCA 249 Santos CLF 142, 145 Santos CRO 022 Santos CS 246, 249 Santos DCM 021 Santos DGR 062 Santos DJA 084 Santos EAA 031, 048, 053 Santos EM 282 Santos FH 136 Santos Filho AS 079, 106 Santos FWV 320 Santos GM 091, 242 Santos GR 242 Santos HP 286

Santos ILVL 295 Santos IP 110, 114, 209, 058,

088, 311 Santos IV 155

Sumário



357

Santos IW 068, 069, 117 Santos JDR 187 Santos Junior DA 070 Santos Junior ER 286 Santos KF 221 Santos KJG 104 Santos LO 187 Santos LR 298 Santos MCR 236, 239, 241 Santos MO 020, 024 Santos RM 074, 124, 125, 131,

132, 160, 162, 191, 193

Santos RS 313, 321 Santos VJC 290, 296, 297 Sarmento LS 165 Sartori R 059, 060 Saut JPE 125 Schuh A 327 Segui MS 068, 069, 117 Serapião RV 080 Sherr MC 201 Shiomi HH 328, 330, 334 Silva AA 032, 138 Silva AC 329, 331 Silva AF 292 Silva AM 050, 053, 223 Silva AOA 161 Silva APTB 076, 094, 130 Silva AR 025, 030, 031, 034,

042, 043, 048, 049, 050, 052, 053

Silva ARN 039 Silva ATC 020 Silva AWB 064, 092, 219, 220 Silva BJF 076, 094, 130 Silva DMF 295, 348 Silva ECB 310, 312, 348 Silva ECS 195 Silva EF 014 Silva GG 117 Silva GGA 022 Silva HT 334 Silva HVR 030, 052, 203 Silva IR 187 Silva JFS 257 Silva JG 306

Silva JRV 064, 092, 100, 219, 220, 221

Silva JS 292 Silva Júnior AE 065, 066 Silva Júnior VA 022,023,

267 Silva LA 072, 073 Silva LC 040 Silva LCS 041 Silva LDM 030, 052, 202, 203,

261 Silva LES 323 Silva LHX 054 Silva LM 223, 224, 291 Silva MA 034, 042, 043, 050,

053, 156 Silva MAA 279, 339, 340 Silva MAV 243 Silva MC 316, 317, 318 Silva MM 232, 244 Silva MNN 027 Silva NAM 140 Silva NMM 320 Silva PCA 246, 254 Silva PVDO 057, 204 Silva RCG 128 Silva RJ 070 Silva RS 107, 201, 289 Silva SR 111 Silva SV 077, 234, 258, 307,

310, 312 Silva SVS 061 Silva TF 161 Silva TFP 202 Silva TH 056, 075, 131, 132,

191, 193 Silva WG 095 Silva-Filho ML 103 Silveira CO 210, 235, 237, 238,

239, 240, 247, 347 Silveira Jr JA 101 Silveira RO 237 Silveira TCA 184 Simon HM 084 Simplício AA 228, 230 Sinedino LDP 080, 098, 218 Siqueira JB 158, 330 Smaniotto BD 250 Snel-Oliveira MV 179

Snoeck PPN 316, 317, 318 Soares AT 077, 086,

234 Soares FAP 310, 312 Soares FN 290 Soares IR 270 Soares JG 176 Soares M 014 Soares MJ 153 Soares PC 310 Soares R 014 Sodré IS 044, 046 Solano RF 243, 345 Solini A 170 Solis J 009 Sousa AO 243, 286 Sousa IKF 113, 233 Sousa JMG 217 Sousa JS 161 Sousa Júnior A 017, 151, 283,

302, 303 Sousa KC 184 Sousa LF 093 Sousa MS 103 Sousa NR 262 Sousa PC 048 Sousa SMKC 097, 102, 253 Souto PFMP 079, 106 Souza ACB 029 Souza ACS 099, 127, 167, 323,

325 Souza ALB 117 Souza CC 157 Souza CCV 194 Souza CEA 147, 304 Souza DC 176 Souza DO 018 Souza F 078 Souza FA 126, 142, 143, 145,

146, 156, 164, 173 Souza FAL 121 Souza FF 273 Souza FR 124 Souza GB 221 Souza IOT 017, 151,

283, 302 Souza JAT 017, 151, 283, 302,

303 Souza JMG 212, 222



358

Souza MA 140 Souza MAF 313, 251,

321 Souza MR 256 Souza NC 182 Souza NM 070, 119 Souza RS 172, 214, 216,

277, 278, 339, 344

Souza SS 187 Souza VA 144 Souza WMA 306 Strada ESO 172 Sudano MJ 082, 192,

199, 280 Suzano SMC 045, 266

T

Tabet AF 287, 288 Taffarel MO 192, 199 Takeshita RSC 028 Taqueda GS 282 Teixeira LA 129, 159,

163 Teixeira MJCD 194 Teixeira NS 192 Teixeira PPM 290, 297,

305 Tenorio BM 023 Thiesen LM 099, 127, 166,

167, 323, 325 Thomé HE 072, 073, 123 Toledo GA 093 Toma HS 276 Toniollo GH 190, 342 Torido LC 336 Torres CAA 081, 090,

212, 217, 236, 240, 241

Torres Filho RA 098, 298 Tortorella RD 071 Trece AS 035, 037 Treml TE 155 Trés JE 019 Trevisan JT 248

Trevisol E 059, 060, 262 Trevizan JT 182 Tsuneda BH 166, 167, 168 Tsuneda PP 099, 127, 166,

167, 323, 325 Turco SHN 272

U

Uchoa DC 202 Urhausen C 207

V

Valadares AL 179 Vale Filho VR 089, 126, 142,

143, 144, 145, 146, 149, 156,

164, 173 Valle B 014 Valle GR 181, 205 Valle RV 320 van Tilburg MF 147, 232 Vanderlei SRS 022 Varago FC 274 Vasconcelos AB 129, 159, 163 Vasconcelos ACN 338 Vasconcelos GL 064, 092, 219,

220 Vasconcelos GSC 035 Vasconcelos NCT 306 Veksler Hess JD 327 Velloso NM 332 Veloso CM 238 Veloso Neto HF 070 Venturi S S 270 Venturino A 309 Veras GA 079, 106, Veras GC 009, 011, 015 Vettorato ED 196 Vexenat SCOR 332 Viana DAF 107, 201, 289 Viana GEN 017, 211 Viana JA 234 Viana JHM 067

Viana KS 083 Vicente WRR 028, 186, 189,

305, 342 Vidal AH 120, 242 Vieira DK 045, 266 Vieira LC 336, 337 Vieira RJ 294, 121 Vieira RLA 018 Viu MAO 104 Vogel FSF 122 Volpato R 198, 197, 199, 262 Voltolini TV 272, 285 Voorwald FA 186, 190, 342

W

Wabeski D 207 Weiss RR 068, 069, 117, 134,

155, 174 Wicke AA 120 Wingert FM 099, 127,

166, 167, 323

Wischral A 183, 295, 348

X

Xavier AME 303 Xavier PR 057, 133, 268

Y

Yamasaki L 255

Z

Zangeronimo MG 329, 331,

335, 336, 337, 338

Zart AL 153 Zervoudakis JT 166, 167, 168 Zini LD 083 Zolini A 317 Zorzenon M 082 Zúccari CESN 157, 275

Sumário

Indice de autores

Indice de autores


359

Atividade antioxidante enzimática no parênquima testicular e epidídimo eqüino Enzymatic antioxidant activity in stallion’s testis and epididymal tissues

I.C. Bustamante-Filho1,3, A.P. Neves3, A.P. Rosa2, L.S. Van der Linden3, C.D. Pederzolli2, C.S. Dutra-

Filho2, M.I.M. Jobim3, R.C. Mattos2

1 Centro Universitário UNIVATES, Lajeado, RS; 2 Laboratório de Erros Inatos do Metabolismo, Depto. Bioquímica, UFRGS; 3

REPROLAB – FAVET, UFRGS, Porto Alegre, RS. E-mail: [email protected]

Introdução A produção de espermatozóides em um ambiente protegido de espécies reativas de oxigênio, bem como a manutenção da reserva espermática livre de agentes oxidativos têm importante papel na fertilidade de um ejaculado. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a atividade antioxidante enzimática no parênquima testicular e epidídimo eqüino.

Material e Métodos As amostras de tecido testicular e epidídimo de 7 garanhões (2 a 4 anos) foram lavadas em PBS gelado, homogeneizadas, sendo avaliadas as atividades das enzimas catalase (Aebi, 1981), superóxido dismutase (SOD, Marklund, 1985) e Glutationa Peroxidase (GPx; Wendel, 1981). Para análise estatística foi usada ANOVA seguida do teste Tukey, com nível α = 5%.

Resultados e Discussão Os resultados das atividades das enzimas Catalase, SOD e GPx estão representadas na figura 1.

Figura 1. Atividade das enzimas antioxidantes no testículo e epidídimo equino. A: Atividade da catalase; B: Atividade da SOD; C: Atividade da GPx. Dados representados como média±EP.

Foi identificada atividade antioxidante em todos os tecidos analisados. Dentre as enzimas analisadas, comparando as regiões, foi encontrado diferença significativa apenas na atividade da GPx entre cabeça e corpo do epidídimo. A presença de enzimas antioxidantes nos tecidos de produção, maturação e armazenamento de espermatozóides demonstra a importância dos sistemas antioxidantes para a espermatogênese. Referências bibliográficas Aebi H. Catalase in vitro. Methods Enzymol, 105:121-126, 1984. Maklund SL. Pyrogallol oxidation. In: Greenwald RA (Ed.). Handbook of methods for oxygen radical research. Boca Raton, USA: CRC Press, 1985. pp. 243-247. Wendel A. Glutathione peroxidase. Methods Enzymol, 77:325-333, 1981. Palavras-chave: catalase, epidídimo, glutationa peroxidase, superóxido dismutase, testículo. Keywords: catalase, epidydimis, glutathion peroxidase, superoxide dismutase, testis.
