1

UNIVERSIDADE FEDERAL DE CAMPINA GRANDE

CENTRO DE SAÚDE E TECNOLOGIA RURAL

UNIDADE ACADÊMICA DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS

CURSO DE LICENCIATURA PLENA EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS

CAMPUS DE PATOS

Citotoxicidade em raízes de Allium cepa expostas aos contaminantes do

sedimento do rio Apodi-Mossoró-RN

LUCAS OLIVEIRA DA NÓBREGA

PATOS – PARAÍBA

2016

2

LUCAS OLIVEIRA DA NÓBREGA

CITOTOXICIDADE EM RAÍZES DE ALLIUM CEPA EXPOSTAS AOS

CONTAMINANTES DO SEDIMENTO DO RIO APODI-MOSSORÓ-RN

Monografia apresentada ao curso de

Ciências Biológicas da Universidade

Federal de Campina Grande, campus

de Patos, PB, para obtenção do grau

de Licenciado em Ciências Biológicas.

Orientador Prof Dr. Carlos Eduardo Alves Soares

PATOS – PARAÍBA

2016

3

FICHA CATALOGRÁFICA ELABORADA PELA BIBLIOTECA DO CSTR

N754c

Nóbrega, Lucas Oliveira da

Citotoxicidade em raízes de Alluim cepa L. expostas aos contaminantes do sedimento do rio Apodi/Mossoró-RN / Lucas Oliveira da Nóbrega. –

Patos, 2016.

28f.: il.color.

Trabalho de Conclusão de Curso (Ciências Biológicas) – Universidade Federal de Campina Grande, Centro de Saúde e Tecnologia Rural.

“Orientação: Prof. Dr. Carlos Eduardo Alves Soares”.

Referências.

1. Sedimento. 2. Rio. 3. Citotóxico. I. Título.

CDU 551.3.051

4

5

AGRADECIMENTOS

A Deus por ter me propiciado as oportunidades, por ter me abençoado

todos os dias de minha e por ter sido minha fonte de segurança não me

deixando fraquejar nos momentos de fraqueza.

A toda minha família que sempre me apoiou, desde a viagem para

pesquisa até a defesa, em especial a meus pais Marilene Lira de Oliveira

Nóbrega e Germano Araújo da Nóbrega, a meus irmãos Gabriel Oliveira da

Nóbrega e Juliano Oliveira da Nóbrega, a minha cunhada Rosely Oliveira da

Silva Nóbrega e minha sobrinha Laura Oliveira da Nóbrega que foi o maior

motivo para seguir em frente.

À meu orientador, Carlos Eduardo Alves Soares, por ter acreditado em

mim e ter depositado sua confiança, pelo seu compromisso, sua educação,

carisma, companheirismo e por abrir portas e oportunidades para que eu

pudesse ter um olhar mais vitorioso para o futuro.

À Professora Aline Campagna da UFERSA que foi um anjo na minha

vida, dedicando parte do seu pouquíssimo tempo disponível para doar

conhecimento e sugerir ideias para realização de minha pesquisa, sendo assim

de total importância.

Aos professores Marcos A. N. de Sousa e Merilane Calixto por terem

aceitado o convite e participarem da banca do meu TCC.

Aos colegas Allen Karlos e Lucas alunos de Biotecnologia na UFERSA

que abdicaram de seu tempo para poder me auxiliar com os experimentos

realizados no laboratório, passando cansativas horas ao meu lado me

apoiando e dando forças para continuar.

Ao melhor amigo, Ovídio Angelino, por ter sido um grande companheiro

durante todo o curso, e no fim, mesmo a distancia ter me dado apoio e palavras

de motivação para que finalizasse minha pesquisa.

Aos amigos Antônio José, Larissa Sátiro, Marianne Oliveira, Jéssica

Rosa, Mary Lindsay por terem sido minhas “âncoras” durante todo o curso,

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onde eu me refugiei nos momentos difíceis, com quem tive grandes momentos

de descontração juntos, e a melhor amiga Jamylle Medeiros, que foi uma

pessoa que não mediu esforços para me auxiliar, teve paciência comigo, serviu

de confidente nos momentos de tristeza, e compartilhou ao meu lado grandes

momentos felizes em minha vida.

Aos amigos que vou levar para vida toda Thauan Rodrigues, Karl

Augusto, Pedro Ferreira, Thúlio Sampaio, Nathan Sousa, entre outros, que

fizeram e fazem parte do meu cotidiano, responsáveis por grandes momentos

em minha vida, descontrações, lazer, além de motivadores, conselheiros e

grandes irmãos.

Em especial a Gaby, por ser essa pessoa maravilhosa em minha vida.

À todos os professores da UACB, que transmitiram seus conhecimentos

com propósito de tornar seus alunos grandes profissionais.

À turma 2012.1, minha maravilhosa turma, ao qual compartilhamos

momentos inesquecíveis e a todos que de forma direta ou indireta torceram

para que tudo desse certo.

7

Sumário RESUMO ..................................................................................................................................... 8

ABSTRACT: ................................................................................................................................ 9

1. INTRODUÇÃO .................................................................................................................. 10

2. MATERIAL E MÉTODOS ............................................................................................... 13

2.1 OBTENÇÃO DAS AMOSTRAS ................................................................................... 13

2.2 TRATAMENTO DAS AMOSTRAS .............................................................................. 14

2.3 TOXICIDADE EM A. CEPA .......................................................................................... 15

2.4 ANÁLISE ESTATÍSTICA DOS DADOS ..................................................................... 15

3. RESUTADOS .................................................................................................................... 16

4. DISCUSSÃO ..................................................................................................................... 20

5. CONCLUSÕES ................................................................................................................. 22

6. REFERÊNCIAS ................................................................................................................ 22

7. ANEXOS ............................................................................................................................ 26

8

RESUMO

A preocupação com a preservação ambiental deixou de ser algo

exclusivamente dos ambientalistas, para se tornar algo de responsabilidade de

toda população, a poluição dos rios é considerado um dos impactos mais

visíveis em zonas urbanas. Este estudo objetivou utilizar Allium cepa como

modelo experimental para avaliar a citotoxicidade de sedimentos coletados em

distintos pontos do rio Apodi/Mossoró-RN. O organismo teste utilizado foi à

cebola, para verificação de possíveis alterações citotóxicas causadas por

agentes tóxicos em cinco pontos localizados no rio Apodi-Mossoró-RN. Duas

coletas de sedimento do rio foram realizadas, em dezembro de 2015 (período

seco) e janeiro de 2016 (período chuvoso). Foram realizados dois

procedimentos com o sedimento coletado, elutriato e solubilizado, submetendo

assim o sedimento a duas condições naturais, uma de repouso (7 dias) para o

solubilizado e outra de agitação (30 min) para o elutriato. Foram produzidas

lâminas de microscopia e observadas em microscópio utilizando objetiva de

40x, a técnica de coloração utilizada foi Giemsa. Neste trabalho foram

analisados o tamanho médio do crescimento das raízes dos tratamentos, o

índice mitótico e a variação do pH antes e após o enraizamento dos bulbos de

cebola. Os resultados obtidos demonstram que as raízes de cebolas do

procedimento elutriato cresceram mais do que o controle, e as raízes do

solubilizado obtiveram um crescimento abaixo da média do controle. O índice

mitótico em ambas as coletas e em ambos os procedimentos estiveram abaixo

do valor do controle negativo para os pontos 1, 2 e 4. Foram constatados

efeitos citotóxicos nos três pontos específicos, alterando a divisão mitótica e o

crescimento das raízes, comprovando que o sedimento do rio Apodi/Mossoró

possui potencial citotóxico para o organismo teste A. cepa.

Palavras chave: sedimento, rio, citotóxico.

9

ABSTRACT:

The concern with environmental preservation is no longer something only

environmentalists, to become something of the whole population responsibility,

pollution of rivers is considered one of the most visible impacts in urban areas.

This study aimed to use Allium Cepa as an experimental model to evaluate the

cytotoxicity of sediments collected in different points of the river Apodi /

Mossoró-RN. The test organism used was the onion, to check for possible

cytotoxic changes caused by toxic agents in five points located on the river

Apodi-Mossoró-RN. Two river sediment samples were taken in December 2015

(dry season) and January 2016 (rainy season). Two procedures with the

collected sediment were performed, elutriate and solubilized, thereby subjecting

the pellet to two natural condition, a break (7 days) for the solubilised and

another stirring (30 min) to elutriate. Microscope slides were produced and

observed under a microscope using a 40x objective, the staining technique

used was Giemsa. In this work we analyzed the average size of the root growth

of the treatments, the mitotic index and the change in pH before and after

rooting of onion bulbs. The results show that the roots of the elutriate procedure

onions grew more than the control, and the solubilized roots achieved a growth

below the control average. The mitotic index in both collections and both

procedures were below the value of the negative control for the points 1, 2 and

4. cytotoxic effects were observed in the three specific points by changing the

mitotic division and root growth, proving that river sediment Apodi / Mossoró

has cytotoxic potential for the test organism A. strain.

Keywords: sediment, river, cytotoxic.

10

1. INTRODUÇÃO

Um dos maiores bens da natureza, a água é um recurso natural

essencial para a vida de qualquer ser vivo no planeta. É de responsabilidade

do homem cuidar e zelar por esse recurso tão precioso. O Brasil é um país

privilegiado por ser considerado como um dos lugares no mundo mais ricos em

recursos hídricos (TRINDADE, 2010).

Com o surgimento da agricultura e da pecuária, o homem praticamente

migrou para as regiões ribeirinhas. A terra fértil e a água potável lá presentes

forneceram as condições indispensáveis para a produção dos seus alimentos.

Por outro lado, a forma como esses lugares foram ocupados, de forma

desregulada, acarretaram diversos impactos ambientais, além da coleta

exagerada de recursos naturais. Sendo que a poluição dos rios está entre os

impactos mais facilmente observados em áreas urbanas (MEDEIROS, 2015).

A preocupação com a preservação ambiental deixou de ser algo

exclusivamente dos ambientalistas, para tornar-se algo de responsabilidade de

todos nós. Para ser preservado, um ambiente primeiramente precisa ser

conhecido, estudado sua natureza e de que forma ela se apresenta, realizando

levantamentos qualitativos e quantitativos sobre o mesmo (FERREIRA, 2001).

Estudos ecotoxicológicos adotados nos concedem fazer predições sobre

o perigo de extinção, constituindo-se em ferramenta para melhor entendimento

da extensão dos impactos, pois os organismos vivos utilizados nos testes de

toxicidade funcionam como verdadeiros “biosensores” que reagem a presença

de contaminantes (COSTA; ESPÍNDOLA, 2003).

A região do semiárido no nordeste brasileiro é caracterizada pela

escassez (VIANNA, et al., 2006). As principais zonas úmidas em regiões

semiáridas são as lagoas temporárias, os rios e açudes. Esses ambientes,

nesta região, servem de refúgio para muitos animais e plantas, contribuindo

11

assim, para o aumento da diversidade e da produtividade regional (MALTCHIK,

1999; SILVA-FILHO, 2004).

Silva 2003 diz que de modo geral, as regiões semiáridas são definidas

pela aridez do clima, pela deficiência hídrica com imprevisibilidade das

precipitações pluviométricas e pela presença de solos pobres e matéria

orgânica. Desta forma, estratégias de conservação dos recursos hídricos e seu

gerenciamento em regiões semi-áridas são ainda mais importantes e

necessários, em decorrência da presença de um fator perturbador natural: a

seca.

É neste sentido que a presente pesquisa se torna indispensável, uma

vez que tem como meta principal a avaliação do risco genotóxico e

desenvolvimento de indicadores para a avaliação e monitoramento da

qualidade ambiental no rio Apodi/Mossoró, um importante ecossistema

aquático inserido no sertão nordestino.

O rio Apodi/Mossoró é o principal curso d’água da segunda maior bacia

hidrográfica do estado do Rio Grande do Norte, localizada no Oeste Potiguar e

genuinamente Norte Rio-grandense (SOUZA et al. 2012). Apesar de sua

importância socioeconômica, como por exemplo, atividades de extração do

petróleo, produção de sal marinho, utilização dos solos para agricultura e

fruticultura irrigada, pecuária extensiva, carcinicultura e mineração de calcário

(CARVALHO et al., 2011)

Apenas a cidade de Mossoró, apresenta algum tipo de saneamento, que

é em torno de 75% (SANTOS, 2016). Apesar disto, os problemas com

saneamento básico e educação ambiental são bastante evidentes na cidade,

principalmente, no trecho urbano do rio Apodi/Mossoró.

Um estudo realizado por Rebouças et al., (2001), mostrou que, dentre 24

bacias hidrográficas do Nordeste, a bacia hidrográfica Apodi/Mossoró está

predisposta a situações críticas em sua sustentabilidade, quando são

considerados o acesso, disponibilidade, armazenamento de água e o aporte de

contaminantes, baseando-se em um estudo de tendências entre os anos de

1991 a 2020, em relação ao Índice de regularidade fluvial, déficit de

evapotranspiração potencial relativo e índice de comprometimento com a

poluição.

12

Apesar disto, foi realizada uma revisão bibliográfica e os estudos

ecotoxicológicos no rio Apodi/Mossoró foram incipientes, deixando uma lacuna

no conhecimento sobre os potenciais riscos da poluição ecotóxica na bacia

hidrográfica.

A ecotoxicologia e a toxicologia ambiental são termos utilizados para

descrever os efeitos de substâncias químicas liberadas no ambiente na biota

nível celular, individual, populacional e nas comunidades (FERNICOLA et al.,

2003).

Os testes de ecotoxicologia devem ser considerados como ferramentas

indispensáveis na avaliação da qualidade da água e do sedimento de

ambientes aquáticos, uma vez que as análises físicas e químicas dos

poluentes fornecem apenas informações sobre o tipo e quantidade das

substâncias não refletindo os reais efeitos destas nos organismos (ZAGATTO,

1999).

A metodologia de Avaliação de Risco Ecológico permite integrar

resultados químicos, ecológicos, ecotoxicológicos e genotóxicos,

estabelecendo informações únicas e conclusivas sobre os riscos da poluição

para as comunidades biológicas, além de estabelecer indicadores específicos

de qualidade ambiental para o ecossistema que se pretende monitorar

(CORSEUIL; FATORELLI, 2004)

O estudo realizado é de total importância, pois como seria possível

saber se ali existia algum potencial citotóxico para organismos como a cebola,

outros organismos bentônicos ou até mesmo o próprio ser humano, se não

fossem realizados testes laboratoriais, para fins de alertar órgãos responsáveis

pelo monitoramento do rio, para ficarem cientes da situação em que o mesmo

se encontra.

Por fim, o objetivo geral foi utilizar Allium cepa como organismo

experimental para avaliar a citotoxicidade de sedimentos coletados em distintos

pontos do rio Apodi/Mossoró-RN.

13

2. MATERIAL E MÉTODOS

2.1 OBTENÇÕES DAS AMOSTRAS

Amostras de sedimento foram coletadas em 5 pontos distintos da bacia

hidrográfica do rio Apodi-Mossoró no período seco (dez/2015), e em outros 5

pontos distintos no período chuvoso (jan/2016) onde três pontos estiveram

inseridos na área rural da bacia (Pontos 1, 2 e 3) e dois pontos na área urbana

(Pontos 4 e 5), caracterizando sistemas com diferentes fontes poluidoras. (Fig.

1).

Figura 1. Localização dos pontos de coleta do sedimento no rio Apodi-Mossoró.

Posteriormente encaminhadas para o Laboratório de Ecotoxicologia do

CEPAS (Centro de Pesquisa em Aquicultura e Pesca Sustentável do

Semiárido), onde foi armazenado. Em seguida os sedimentos foram

encaminhados para o Laboratório de Genética e Evolução (LAGENE)

14

localizado na Universidade Federal Rural do Semi-Árido (UFERSA) no

município de Mossoró-RN, onde as amostras foram submetidas a testes de

toxicidade aguda com A. cepa segundo NBR 12713 (ABNT, 2016). O

transporte foi feito em garrafas de polipropileno esterilizadas para evitar

contaminação por outros materiais. Nos testes com sedimento, utilizou-se a

proporção de 1:4 de sedimento e água destilada, segundo recomendações de

Burton; MacPherson (1995) (Fig. 2).

Figura 2. Amostras do procedimento Solubilizado 1:4

2.2 TRATAMENTO DAS AMOSTRAS

Foram realizadas duas metodologias, o solubilizado do sedimento e o

elutriato, após isso, o sedimento foi pesado em 25g de para cada copo

descartável 180 mL (30 copos, coleta 1 + coleta 2) e uma proporção de uma

parte de sedimento para quatro de água destilada será devidamente

acondicionada em copos descartáveis e deixada em contato por sete dias para

15

o procedimento solubilizado, passados sete dias, foi feita a analise de pH de

todos os exemplares das amostras.

Já para o elutriato as amostras de sedimentos foram pesadas 25g para

cada copo e colocado para agitar num agitador magnético por 30 minutos para

que a mistura ficasse totalmente homogênea, em seguida o líquido

sobrenadante foi filtrado e medido o pH, só assim foram colocados bulbos de

A. cepa para enraizar nas amostras de água.

2.3 CITOTOXICIDADE EM A. CEPA

66 bulbos de cebola sem deterioração externa e em boas condições

fitossanitárias foram adquiridos comercialmente em um mercado local,

escolhidos com base em sua biomassa. O procedimento constituiu na retirada

dos catafilos externos, remoção das raízes secas e velhas, feito pequenos

furos na base do bulbo e colocados em copos descartáveis contendo as

soluções, em uma temperatura média de 20C º, onde apenas a base do bulbo

ficou em contato com a água. Ali permaneceu por 72 horas.

Os bulbos foram distribuídos em grupos com triplicatas para cada um

dos pontos obtidos em ambas as coletas, além do controle negativo com água

destilada para os dois procedimentos o controle positivo com 0,153g/ mL de

sulfato de cobre (CuSO4) para elutriato e 0,18g/ mL de sulfato de cobre

(CuSO4) para solubilizado segundo Rego et al. (2015).

Os bulbos foram enraizados sempre em triplicata. Após passarem pelo

processo de enraizamento durante três dias, em ambos os processos de

elutriato e solubilização, respectivamente, as raízes foram coletadas e

processadas, foi utilizado o protocolo de coloração com o reagente Giemsa

(GUERRA e SOUZA 2002) para visualização das células.

2.4 ANÁLISE ESTATÍSTICA DOS DADOS

Foram produzidas três lâminas para cada um dos pontos que

apresentaram resultados significativos de toxicidade conforme o trabalho de

16

Silva 2016 no qual utilizaram os mesmo pontos de coleta, porém os

organismos bioindicadores utilizados foram Daphnia similis, Danio rerio e

Poecilia reticulata.

Pontos 1, 2 e 4, além do controle negativo de ambas as coletas e dos

dois procedimentos (elutriato e solubilizado). Após produzidas as lâminas,

foram observadas em microscópio óptico em objetiva de 40X. Foi avaliada uma

quantia de 500 células por amostra, considerando que foram feitas sempre em

triplicatas, totalizando 1500 células por tratamento e controle negativo. O índice

mitótico (IM) foi obtido através da seguinte equação (IGANCI et al., 2006): IM=

(m/T) x 100, sendo que m = número de células em mitose; T = número total de

células. Foi utilizado o teste de Tukey (p

17

isso ocorre devido o crescimento das raízes ser bastante variado, ou seja,

quando enraizando as cebolas apresentam na maioria das vezes grandes

raízes e pequenas raízes no mesmo bulbo.

Tabela 1. Valores do crescimento médio das raízes e DP da 1º e 2º coleta de cada ponto para o procedimento elutriato.

Tratamento Crescimento médio (cm)± DP

P1

P2

P3

P4

P5

CN

1º coleta 2º coleta

*2,13±36,15a

*2,38±32,07c,e

*2,15±35,48d

*1,86±55,17e

*2,56±45,44c,f

1,20±13,93b

*1,84±46,79a

0,66±11,82b

*1,45±42,22b

*2,16±16,29c

*1,84±10,33c,d

1,20±13,93b

a, b, c, d, e, f - Os valores seguidos da mesma letra não possuem diferenças estatisticamente significativas de acordo com o teste de Tukey, p

18

controle negativo, das coletas 1 e 2, dos procedimentos de solubilizado e

elutriato.

Houve um decréscimo do índice mitótico dos pontos específicos (1, 2 e

4) quando comparado ao controle negativo no procedimento elutriato. Já no

solubilizado os pontos 1 e 2 da primeira coleta foram os únicos que estiveram

acima da média do controle negativo. Demonstrando de forma geral que após

estarem em contato com as soluções, as raízes de fato cresceram mais do que

os controles, porém, em relação a seu índice mitótico, estiveram abaixo quando

comparados em ambos os procedimentos.

Tabela 3. Índices mitóticos (IM) médios obtidos em células meristemáticas de raízes de A. cepa de 3 pontos específicos. Coletas realizadas em Dez/2015 e Jan/2016.

GRUPOS

CÉLULAS EM DIVISÃO ELUTRIATO (fases mitóticas)

P1

P2

P4

P-M-A-T P-M-A-T (1º C) (2º C)

(1° Coleta) (2° coleta) Co. Neg. (ELUT) P - M - A - T

5 – 6 – 4 – 0 4 – 3 – 5 – 3 3 – 2 – 3 – 1 6 – 4 – 4 – 3 5 – 3 – 3 – 2 2 – 2 – 2 – 1

1,00* 1,00* 0,60* 1,13* 1,73 8 - 5 - 6 - 7 0,86* 0,46*

IM de 1500 células/grupo. Abreviatura: Co, controle; ELUT, elutriato. (*) Valores significativos

em comparação ao controle.

Tabela 4. Índices mitóticos (IM) médios obtidos em células meristemáticas de raízes de A. cepa de 3 pontos nos quais apresentaram toxicidade em trabalho semelhante. Coletas realizadas em Dez/2015 e Jan/2016.

GRUPOS

CÉLULAS EM DIVISÃO SOLUBILIZADO (fases mitóticas)

P1

P2

P4

P-M-A-T P-M-A-T (1º C) (2º C)

(1° Coleta) (2° coleta) Co. Neg. (ELUT) P - M - A - T

10 – 8 – 8 – 7 4 – 6 – 3 – 1 8 – 9 – 5 – 6 6 – 2 – 1 – 4 7 – 4 – 0 – 4 5 – 5 – 4 – 2

2,20* 0,93* 1,80* 0,87* 1,4 9 – 5 – 5 – 2 1,00* 1,06*

IM de 1500 células/grupo. Abreviatura: Co, controle; SOLUB, solubilizado. (*) Valores

significativos em comparação ao controle.

19

Os valores de pH expressos nas tabelas 5 e 6, mostram que todos os

tratamentos possuíam um pH acima do valor do controle, todos estavam a nível

de pH básico, no entanto, após o contato da base da cebola com a solução por

72 horas, o nível do pH de todos os tratamentos além dos controles ocorreu um

decréscimo bastante significativo, passando de básico para ácido em todos os

tratamentos das coletas 1 e 2 dos procedimentos Solubilizado e Elutriato.

Tabela 5. Média dos valores de pH e o DP dos tratamentos e controles da 1º e 2º coleta antes e após enraizamento dos bulbos de cebola no elutriato.

PONTOS PH

ANTES DEPOIS 1º COL 2º COL 1º COL 2º COL

P1

7,1±0 7,47±0,047 5,77±0,0067 5,83±0,087 a a a a,b

P2

7,4±0 7,3±0 6,23±0,027 6,17±0,047 c a b b

P3

8,1±0 8,2±0,06 6,67±0,027 5,87±0,027 d c b c

P4

7,97±0,0067 8,37±0,0067 6,57±0,11 6,63±0,0067 d d b d

P5

7,83±0,0067 d

8,17±0,0067 d

6,67±0,027

c

6,5±0,02

b,d

CoN

6,93±0,027

b

6,17±0,0067 b

a, b, c, d - Os valores seguidos da mesma letra não possuem diferenças estatisticamente significativas de acordo com o teste de Tukey, p

20

Tabela 6. Média dos valores de pH e o DP dos tratamentos e controles da 1º e 2º coleta antes e após enraizamento dos bulbos de cebola no solubilizado.

PONTOS PH

ANTES DEPOIS 1º COL 2º COL 1º COL 2º COL

P1 7,57±0,0067 7,43±0,0067 6,2±0,02 5,8±0,06 a a a a

P2 8,1±0 7,6±0 6,6±0,02 6,43±0,0067 c a,c b a

P3 7,87±0,0067 8,0±0 7,07±0,0067 6,57±0,087 d d c b

P4 7,6±0,02 8,07±0,0067 6,83±0,027 6,73±0,047 a,e e c,d a,c

P5

8,03±0,0067

c,d,f

8,1±0,02

c,d,f

6,87±0,047

b,e

6,67±0,127

d

CoN

7,03±0,0067

b

6,0±0,08

a

a, b, c, d, e, f - Os valores seguidos da mesma letra não possuem diferenças estatisticamente significativas de acordo com o teste de Tukey, p

21

celular, em tecidos expostos a compostos químicos de interesse (TABREZ et

al., 2011).

Devido o procedimento elutriato prover uma situação de agitação,

fazendo assim com que haja um contato maior da solução com o sedimento

contaminado, é possível que essas raízes tenham crescido mais do que o

controle por estarem em maior contato com matérias orgânicas que

provavelmente nutriram mais as cebolas, obtendo assim um crescimento maior.

No solubilizado quase todos os pontos obtiveram um crescimento abaixo da

média do controle negativo, isso é provável, pois no solubilizado água fica em

condição repouso no sedimento por uma semana, então qualquer matéria

orgânica sobrenadante em contato com as raízes de fato possa ser em menor

concentração em comparação com o outro procedimento.

Resultados semelhantes encontrados no trabalho de Jardim (2004),

pesquisa realizada no rio Corumbataí, SP onde estatisticamente o crescimento

médio das raízes teve um resultado significativo em relação ao controle.

Os valores do índice mitótico nos tratamentos de ambas as coletas e dos

dois procedimentos abaixo do controle negativo são resultados que apontam

toxicidade no sedimento do rio para os determinados pontos, pois alterou

diretamente na divisão celular. Resultados semelhantes encontrados no

trabalho de Paula et al., (2015), onde utilizando também a A.cepa como bio

indicador, houve um decréscimo nos valores do índice mitótico.

O pH dos tratamentos e dos controles alteraram de forma significativa

após o enraizamento, como não foi analisado a água dos enraizados, supõe-se

que as cebolas tenham liberado um grupo de substâncias para que as mesmas

pudessem se manter numa condição favorável, pois Embrapa (2007), diz que

as cebolas são sensíveis a acidez, ou seja, elas são mais favoráveis a seu

desenvolvimento em ambientes com níveis de pH ácido.

Com as alterações no índice mitótico, e na média do crescimento das

raízes, constata-se que houve efeito toxicológico no modelo teste A. cepa. Em

um trabalho semelhante, realizado por Junior et al. (2016) no rio Apodi-

Mossoró não apresentou efeitos significativos de toxicidade para as espécies

22

de peixe como organismos testes. Já no trabalho de Silva. (2016), onde se

foram utilizadas das mesmas amostras de sedimentos coletadas, os mesmo

pontos 1, 2 e 4 apresentaram imobilidade na espécie de zooplancton. Essas

consequências podem estar diretamente ligadas aos impactos resultantes no

entorno da bacia, nas quais foram agricultura, pecuária, mineração e lazer

juntamente com as más condições de preservação das margens e da

vegetação ciliar.

5. CONCLUSÕES

Os resultados desse estudo permitem concluir que o sedimento do rio

Apodi-Mossoró possui potencial de citotoxicidade relevante, utilizando a cebola

como organismo teste, percebeu-se alterações no índice mitótico e no

crescimento de suas raízes. A maior causa desses danos citotóxicos está

relacionada ao potencial poluidor do rio, onde são principalmente esgotos

domésticos.

6. REFERÊNCIAS

TRINDADE, A.L. Educação ambiental como uma alternativa na

preservação do rio Espinharas. Monografia. Universidade Estadual da

Paraíba. 2010. p. 59.

MEDEIROS, F. S.Impactos ambientais e delimitação da área de

preservação permanente no rio Espinharas no trecho urbano de Patos-

PB. Monografia. Universidade Federal de Campina Grande, 2015. p. 89.

FERREIRA, R. J. S. Determinação de metais traço em sedimentos de rios:

caso da bacia do baixo Itajaí-Açu. Mestrado. Universidade Federal de Santa

Catarina. 2001. p. 14.

23

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26

7. ANEXOS

Anexo 01: Normas da revista Genetical molecular research.

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mas a seleção continua a ser prerrogativa dos editores. Para facilitar o

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citado aceites mas ainda não publicada, papéis que podem ser importantes

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(nomes e iniciais (apenas) pensar em serviços de indexação), e afiliação dos

autores. A afiliação deve incluir o departamento, instituição (normalmente

universidade ou empresa), cidade e estado (ou nação). A página de título deve

incluir o nome e endereço completo e e-mail do autor designado para rever as

provas. devem ser fornecidas Um título consecutivo de não mais de 60

caracteres (incluindo espaços).

Título

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título corrente (não mais do que 60 personagens).

Abstrato

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Dados

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Nomenclatura

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Abreviaturas

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As figuras e tabelas

Todas as figuras e tabelas chamaram no manuscrito em ordem numérica

ascendente após a primeira aparência. Arquivos das figuras originais devem

ser enviados com alta resolução (300-600 dpi) formato TIFF. E se qualquer um

dos seus dados é protegido por direitos autorais, por favor, notifique o escritório

diário.

Equação

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line, uma vez que irá fornecer o mais resultado fiável. Se isso não for possível,

a equação Editora é aceitável.

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