universidade federal da bahia faculdade de medicina … · faculdade de medicina da bahia . ......

86
UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA Programa de Pós-graduação em Ciências da Saúde DISSERTAÇÃO DE MESTRADO HILDA CAROLINA RIOS FRAGA Salvador (Bahia), 2011 IMPLANTAÇÃO DE UM SISTEMA DA QUALIDADE EM UM LABORATÓRIO PÚBLICO DE PESQUISA: ESTUDO DA VIABILIDADE e dos IMPACTOS

Upload: lytu

Post on 18-Jan-2019

216 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA

FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA

Programa de Pós-graduação em Ciências da Saúde

DISSERTAÇÃO DE MESTRADO

HILDA CAROLINA RIOS FRAGA

Salvador (Bahia), 2011

IMPLANTAÇÃO DE UM SISTEMA DA QUALIDADE

EM UM LABORATÓRIO PÚBLICO DE PESQUISA:

ESTUDO DA VIABILIDADE e dos IMPACTOS

Page 2: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA

FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA

Programa de Pós-graduação em Ciências da Saúde

IMPLANTAÇÃO DE UM SISTEMA DA QUALIDADE

EM UM LABORATÓRIO PÚBLICO DE PESQUISA:

ESTUDO DA VIABILIDADE e dos IMPACTOS

HILDA CAROLINA RIOS FRAGA

Professora-orientadora: Camila Indiani de Oliveira

Dissertação apresentada ao Colegiado do

Programa de Pós-Graduação em

Ciências da Saúde, da Faculdade de

Medicina da Universidade Federal da

Bahia, como pré-requisito obrigatório

para obtenção do grau de Mestre em

Ciências da Saúde.

Salvador (Bahia), 2011

Page 3: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

Ficha Catalográfica elaborada pela Biblioteca do Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz / FIOCRUZ - Salvador - Bahia.

Fraga, Hilda Carolina RiosF811i Implantação de um sistema da qualidade em um laboratório público de pesquisa:

estudo da viabilidade e dos impactos [manuscrito] / Hilda Carolina Rios Fraga. - 2011.

f. : il. ; 30 cm.

Datilografado (fotocópia).

Dissertação (mestrado) – Universidade Federal da Bahia, Faculdade de Medicina. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz, 2011.

OrientadorA: Profª. Drª. Camila Indiani de Oliveira, Laboratório de Imunoparasitologia.

1. Laboratório. 2. Pesquisa. 3. Qualidade. I.Título. CDU 001.891:519.873

85

Page 4: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

IMPLANTAÇÃO DE UM SISTEMA DA QUALIDADE EM UM LABORATÓRIO PÚBLICO

DE PESQUISA: ESTUDO DA VIABILIDADE e dos IMPACTOS

HILDA CAROLINA RIOS FRAGA

Folha de Aprovação

Comissão Examinadora

____________________________________________________

I. Camila Indiani de Oliveira

Doutora em Ciências pela Universidade de São Paulo

Pesquisadora do Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz - CPqGM / FIOCRUZ

______________________________________________

II. Letícia de Alencar Pereira Rodrigues

Mestre em Ciência de Alimentos pela UFBA

Coordenadora dos laboratórios análise de alimentos (microbiologia e físico-química) do

SENAI-CETIND

______________________________________________

III. Maria Julia Alves de Souza

Doutora em Letras pela UFBA

Analista de Gestão em Saúde e Presidente da Comissão de Qualidade do Centro de

Pesquisas Gonçalo Moniz - CPqGM / FIOCRUZ

______________________________________________

IV. Songeli Menezes Freire

Doutora em Imunologia pela Universidad de Buenos Aires – UBA Argentina

Professora do Programa de Pós-Graduação em Processos Interativos dos Órgãos e

Sistemas do ICS e colaboradora do Curso de Doutorado da Renorbio / UFBA

Page 5: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

AGRADECIMENTOS

A Deus todos os dias e sempre ...

A minha mãe e aos meus irmãos, que mesmo sem perceberem, sempre foram os maiores

incentivadores da minha escalada profissional.

Ao meu esposo Monclar pelo companheirismo e apoio incondicional e por não ter permitido que

eu desistisse!

A minha orientadora Dra. Camila Indiani e a Dr. Manoel Barral por terem sido os primeiros a

acreditarem neste projeto.

Ao Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz nas pessoas de Dr. Mitermayer Galvão, Dra. Aldina

Barral e Maria Julia por terem permitido que este trabalho fosse desenvolvido.

Aos profissionais do Laboratório de Imunoparasitologia que participaram diretamente deste

trabalho – Kiyoshi Fukutani, Juqueline Cristal e Fabiana Celes.

A Ana Maria Fiscina, bibliotecária do CPqGM pela dedicação na arrumação deste trabalho.

As minhas colegas e amigas Dalva e Paula que tive o prazer de encontrar durante as aulas da

Pós, pelo incentivo e amizade.

Page 6: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

Dedico este trabalho aos meus

filhos Heitor e Helisa, que são

seguramente, a razão da minha vida!

Page 7: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

SUMÁRIO

Lista de Figuras

Lista de Tabelas

Lista de Siglas

I RESUMO 11

II INTRODUÇÃO

II.1 GESTÃO DA QUALIDADE EM PESQUISA & DESENVOLVIMENTO 13

II.2 SISTEMA DE GESTÃO DA QUALIDADE 15

II.3 SISTEMA DE GESTÃO BPL – BOAS PRÁTICAS DE LABORATÓRIO 18

II.4 A FIOCRUZ NA BAHIA: O CENTRO DE PESQUISAS GONÇALO MONIZ 24

III JUSTIFICATIVA 26

IV OBJETIVOS

IV.1 OBJETIVO GERAL 27

IV.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS 27

V DESENHO EXPERIMENTAL 28

VI METODOLOGIA

VI.1 CONSIDERAÇÕES ÉTICAS 29

VI.2 NATUREZA DO ESTUDO 29

VI.3 LEVANTAMENTO DAS NORMAS E SELEÇÃO DO LABORATÓRIO 29

VI.4 DEFINIÇÃO DAS ETAPAS DO PROCESSO DE IMPLANTAÇÃO 30

VII RESULTADOS

VII.1 ETAPA DE PLANEJAMENTO 34

VII.2 ETAPA DE IMPLANTAÇÃO/EXECUÇÃO 37

VII.3 ETAPA DE AVALIAÇÃO 39

VIII DISCUSSÃO 47

IX PERSPECTIVAS DE ESTUDO 53

X CONCLUSÃO 54

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 55

ANEXO 58

APÊNDICES 59

Page 8: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

7

LISTA DE FIGURAS

Figura 1. Ciclo PDCA - etapas para o processo de implantação do sistema BPL

Figura 2. Gráfico - número de empresas certificadas e laboratórios acreditados no Brasil

Figura 3. Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL

Figura 4. Esquema orientativo dos itens a serem considerados em certificação BPL

Figura 5. Desenho experimental do trabalho

Figura 6. Organograma funcional do Laboratório de Imunoparasitologia – LIP

Figura 7. Gráfico - nível de adequação do Laboratório aos requisitos BPL

Figura 8. Gráfico - há quanto tempo os entrevistados utilizam ferramentas da Qualidade no

desenvolvimento de suas pesquisas

Figura 9. Gráfico - os entrevistados dariam ao grau de importância que um Sistema da Qualidade

tem no seu trabalho

Figura 10. Gráfico - os entrevistados já foram impedidos de realizar algum trabalho ou publicação

por não ter um Sistema da Qualidade implementado

Figura 11. Gráfico – os entrevistados já participaram de alguma capacitação em Qualidade

Figura 12. Gráfico - os entrevistados têm conhecimento sobre como se dá o processo de

implantação de um Sistema da Qualidade

Figura 13. Gráfico – os entrevistados já participaram de cursos na Fiocruz Bahia

Figura 14. Gráfico - os entrevistados têm vontade de participar de curso / palestra ou treinamento

na área de Qualidade.

Page 9: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

8

LISTA DE TABELAS

Tabela 1. Indicadores propostos para avaliação do impacto do processo de implantação BPL

Tabela 2. Modelo de padronização de documentos

Tabela 3. Resultado dos indicadores para avaliação do impacto do processo de implantação BPL

Tabela 4. Resultado do diagnóstico do nível de adequação do Laboratório aos requisitos BPL

Page 10: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

9

LISTA DE SIGLAS

ABMES Associação Brasileira das Mantenedoras de Ensino Superior

ABNT Associação Brasileira de Normas Técnicas

ANVISA Agência Nacional de Vigilância Sanitária

BPF Boas Práticas de Fabricação

BPL Boas Práticas de Laboratório

CEP Comitê de Ética em Pesquisa

Cgcre Coordenação Geral de Acreditação do Inmetro

CNPq Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico

CONMETRO Conselho Nacional de Metrologia, Normalização e Qualidade Industrial

CPqGM Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz

ELISA Ensaio imunoenzimático

FDA Food and Drug Administration

Fiocruz Fundação Oswaldo Cruz

HEMOBA Fundação Hematologia e Hemoterapia da Bahia

HIV Human Immunodeficiency Virus – Virus da Imunodeficiência Humana

HTLV Human T Lymphotropic Virus Type – Virus Linfotrópico T humano

IBAMA Instituto Brasileiro de Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis

IgG Imunoglobulina G

INMETRO Instituto Nacional de Metrologia, Normalização e Qualidade Industrial

ISO International Organization for Standardization – Organização Internacional para

Padronização

LIP Laboratório de Imunoparasitologia

LSH Leishmania

MAD Mutual Acceptance of Data

NBR Norma Brasileira

NC Não Conformidade

NIH National Institute of Health

NIT-DICLA Norma Inmetro - Divisão de Acreditação de Laboratórios

Page 11: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

10

OECD Organization for Economic Cooperation and Development

OCDE Organização para a Cooperação e Desenvolvimento Econômico

PCR Reação de polimerase em cadeia

PDCA Plan-Do-Check-Act (Planejar – Implantar – Avaliar – Melhorar)

PE Plano de Estudo

POP Procedimento Operacional Padrão

RFE Relatório Final de Estudo

SGQ Sistema de Gestão da Qualidade

SINMETRO Sistema Nacional de Metrologia, Normalização e Qualidade Industrial

SLA Antígeno Solúvel de Leishmania

TCLE Termo de Consentimento Livre e Esclarecido

Page 12: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

11

I RESUMO

A finalidade de um laboratório de pesquisa é produzir trabalhos de pesquisa e serviços com

qualidade e eficiência, nos mais altos padrões, atendendo de forma consistente, os requisitos

dos protocolos de cada experimento ou pesquisa. Para que estes ideais sejam alcançados,

alguns passos devem ser seguidos, tais como: i) realizar experimentos de excelente qualidade

assegurados pelo rigoroso cumprimento dos requisitos das boas práticas de laboratório, ii)

possuir um quadro de funcionários envolvido, comprometido e motivado em todos os níveis do

laboratório e iii) implementar, controlar e manter um Sistema da Qualidade baseado nos

requisitos exigidos pela ANVISA, Ministério da Saúde e demais normas reguladoras

específicas. A aplicação de Sistemas da Qualidade em atividades de pesquisa e

desenvolvimento em instituições de pesquisa de um modo geral ainda é incipiente, mas

durante os últimos anos tem havido um crescente interesse no desenvolvimento de uma

estratégia para aplicação destes Sistemas. Uma vez que existe cada vez mais a necessidade

de comprovar e assegurar a rastreabilidade dos resultados das pesquisas publicadas que

possibilitam a sua repetição ou melhoria a qualquer tempo, este trabalho teve como objetivo

avaliar o processo de implantação de um sistema de gestão da qualidade em um laboratório de

pesquisa básica de uma instituição pública, avaliando sobretudo, a viabilidade e os impactos

desta melhoria. Os resultados revelam que a implantação do Sistema de Qualidade BPL

aplicado no Laboratório de Imunoparasitologia LIP da Fundação Oswaldo Cruz – Bahia é viável

desde que para isso mudanças comportamentais e estruturais sejam feitas. Impactos positivos

foram percebidos durante o processo, os quais foram relacionados com diversas melhorias.

Palavras-chave: Laboratório. Pesquisa. Qualidade.

Page 13: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

12

SUMMARY

The purpose of a research laboratory is to produce research studies and services with quality

and efficiency to the highest standards, consistently meeting the protocols requirements of each

experiment or research. To achieve these ideals, steps must be followed, such as: i) perform

experiments with excellent quality guaranteed by strict compliance with the requirements of the

good laboratory practice, ii) have a staff involved, committed and motivated in all levels of a

laboratory and iii) implement, monitor and maintain a Quality System based on the

requirements required by ANVISA, Ministry of Health and other specific regulatory standards.

The application of Quality Systems in activities of research and development at research

institutes in general is still incipient, but during the last years there has been a growing interest

in developing a strategy for the implementation of these Systems. Once there is an increasing

need to check and ensure the traceability of the results of published research, allowing

reproduction or improvement at any time, this study aimed to evaluate the process of

implementing a quality management system in a basic research laboratory of a public

institution, especially considering the feasibility and impacts of this improvement. The results

show that the implementation of the Quality System used in GLP at Laboratory of

Immunoparasitology (CPqGM/FIOCRUZ) - Bahia is feasible once certain behavioral and

structural changes are made. Positive impacts were noticed during the process, which were

related to several improvements.

Keywords: Laboratory. Search. Quality

Page 14: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

13

II INTRODUÇÃO

II.1 GESTÃO DA QUALIDADE EM PESQUISA & DESENVOLVIMENTO

As atividades de pesquisa seguem duas orientações: a pesquisa básica (teórica ou

experimental) que representa investigações iniciais com o objetivo principal de adquirir

conhecimentos fundamentais e compreensão sem considerações prévias para aplicações

científicas e a pesquisa aplicada que envolve investigações originais ou de melhoria de

informações já existentes para aplicações práticas ou industriais (Mathur, 1997).

Porém é importante lembrar que, independente de sua vertente, a finalidade de um

laboratório de pesquisa é produzir trabalhos e, quando aplicável, oferecer serviços com

qualidade e eficiência, nos mais altos padrões, atendendo de forma consistente, os requisitos

dos protocolos de cada projeto. A aplicação de Sistemas da Qualidade em atividades de

pesquisa e desenvolvimento em instituições de pesquisa de um modo geral ainda é incipiente,

mas durante os últimos anos tem havido um crescente interesse no desenvolvimento de uma

estratégia para aplicação destes Sistemas. A força motriz por trás deste movimento, tem sido a

necessidade de conformidade com as normas internacionais de qualidade implementadas

inicialmente pela ISO - International Organization for Standardization além da necessidade de

comércio internacional (Cammann & Kleibohmer, 1998).

Durante a década de 1990, alguns pesquisadores e patrocinadores começaram a

questionar a avaliação das pesquisas que definiam a “boa investigação”. Um interesse

crescente do público na ciência, alimentada pela mídia, levantou a percepção objetiva da

investigação e aumentou a desconfiança dos motivos e métodos dos cientistas. Com isso,

tornou-se ainda mais importante demonstrar para o público que o financiamento era utilizado

de forma imparcial na aplicação da investigação apropriada e de alto nível. Tornou-se

necessário aí estabelecer princípios de Controle de Qualidade de modo a permitir que todos os

domínios da pesquisa e desenvolvimento fossem julgados de forma imparcial (Robins et al.,

2006). Em paralelo, tornou-se necessário demonstrar também que a pesquisa realizada

deveria ser comparável àquelas realizadas em outros lugares, que cada vez mais cientistas

requeriam um sistema de gestão da qualidade na instituição e além disso que a pesquisa

básica deveria ser compreensível a terceiros (Cammann & Kleibohmer, 1998).

Page 15: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

14

Para a pesquisa em instituições públicas, que são dependentes de subsídios estatais,

a distribuição de recursos, aos olhos do contribuinte, deve ser feita com base na qualidade

individual da instituição. Devem ser estabelecidos princípios de Gestão da Qualidade que

permitam estabelecer critérios e padrões por meio dos quais as pesquisas possam ser

avaliadas pela comunidade científica. Em alguns países europeus, há leis que controlam a

qualidade das pesquisas em instituições públicas de forma periódica e estas Instituições

recebem valores de subsídios e financiamentos a depender destes relatórios de avaliação

(Cammann & Kleibohmer, 1998).

A gestão das atividades de pesquisa vista sob uma perspectiva estratégica poderá

agregar valor tanto científico e tecnológico como econômico à instituição. Do ponto de vista

científico, o valor poderá ser expresso sob a forma dos novos conhecimentos gerados, das

publicações obtidas e da divulgação do nome da instituição; do ponto de vista do tecnológico,

pela transferência de resultados à sociedade; e do econômico, pela captação de recursos para

a pesquisa e pela redução dos custos operacionais (Schlatter et al., 2006).

De acordo com a ABMES - Associação Brasileira das Mantenedoras de Ensino

Superior - o grande desafio nas próximas décadas não se trata simplesmente de formar mais

pesquisadores, mas de ter uma sociedade preparada para o futuro, baseada fortemente no

conhecimento (Schlatter et al., 2006). A ampliação e a estabilidade do fomento à pesquisa pelo

Ministério da Ciência e Tecnologia, promovida pelos fundos setoriais, proporciona um novo

padrão de financiamento, permitindo: aplicação plurianual; gestão compartilhada (setores

públicos e privado e pesquisadores); estabilidade do financiamento (fontes vinculadas e

diversas); transparência na aplicação dos recursos; avaliação de resultados e garantia de

qualidade das pesquisas.

Hoje no Brasil, não existe uma norma diretamente aplicada aos laboratórios de

pesquisa básica muito menos uma obrigatoriedade de tais segmentos aderirem aos sistemas

de gestão. O que se observa na realidade atual é o fato de diferentes grupos estarem sofrendo

pressões externas para garantir a melhoria dos resultados alcançados, como é a pressão feita

pelos editores de publicações científicas internacionais. Por outro lado, as instituições de

fomento, tais como o NIH – National Institute of Health (EUA), exigem, para a concessão de

Page 16: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

15

recursos, que as pesquisas utilizem na sua condução, processos que podem ser reconhecidos

e rigorosamente documentados. Estas vêm exigindo a aderência dos laboratórios de pesquisa

aos critérios de Boas Práticas Laboratoriais devido à necessidade de comprovar e assegurar a

rastreabilidade dos resultados das pesquisas publicadas, possibilitando a sua repetição ou

melhoria a qualquer tempo. Percebe-se então que existe uma necessidade de equilibrar a

liberdade fundamental à pesquisa com o compromisso social da utilidade pública e o bom uso

dos recursos em instituições públicas (Schlatter et al., 2006).

Além do mais, outro ponto importante a ser considerado é que a aplicabilidade dos

resultados da pesquisa está se tornando cada vez mais importante e a sociedade está exigindo

respostas verdadeiras, comprovação e a responsabilidade da comunidade científica para com

os subsídios financeiros gastos em pesquisa.

II.2 SISTEMA DE GESTÃO DA QUALIDADE

Os sistemas de gestão da qualidade no mundo inteiro tendem a convergir em critérios

e requisitos comuns. O que os diferencia, em termos gerais, é o foco (objetivo) do sistema e os

aspectos específicos complementares aplicáveis a determinados processos (FIOCRUZ, 2009).

Já os processos são definidos na ISO 9001:2008 como sendo um conjunto de

atividades interativas que transformam entradas (exemplo: pedido de exame) em saídas

(exemplo: resultado de exame). A abordagem por processos consiste em identificar e gerenciar

processos de maneira interligada com a finalidade de melhorar a eficácia da organização na

tomada de decisões e atendimento aos seus objetivos. De maneira geral os principais tipos de

processos de uma empresa são: gestão da organização, gestão de recursos, processo de

produção e processo de medição, análise e melhoria (ISO 9001).

Implementar um Sistema de Gestão da Qualidade envolve ações de planejamento,

preparação de documentação, treinamento de recursos humanos em processos de acreditação

e condução de auditorias internas para avaliar se o sistema implementado garante a qualidade

com base em políticas e objetivos estabelecidos pela direção. Além disso, requer organização

de seus processos e flexibilidade para avaliação e melhoria contínua de seus produtos e/ou

processos (Benoliel, 1999). Para ser funcional, um Sistema de Gestão da Qualidade deve ser

Page 17: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

16

aberto e dinâmico e sua complexidade deve ser medida de acordo com a diversidade de

produtos e serviços oferecidos, quantidade de pessoas envolvidas, número de processos a

serem gerenciados, assim como indicadores e documentos utilizados para medir e padronizar

os processos (Andrade, 2003). A implementação de um sistema da qualidade é um processo

lento e caro, mas que pode trazer inúmeras vantagens tanto internamente quanto

externamente à Instituição, dentre elas uma melhor imagem da empresa frente à seus clientes

(Benoliel, 1999). A implementação permite ainda vantagens para os diretores, funcionários e

clientes, como a padronização e maior controle dos processos, maior poder de detecção e

correção de erros e maior confiabilidade analítica respectivamente (Almeida & Pires, 2006).

O primeiro passo para esta implementação é a formalização, pela alta direção, de sua

política da qualidade, ou seja, a definição do sistema da qualidade adotado pela empresa,

deixando claro o objetivo pretendido (WHO, 2009). A evidência de comprometimento da alta

direção com a integridade física e capacitação dos funcionários, assim como a definição de

objetivos claros onde estes se sintam inseridos, proporciona maior comprometimento e

envolvimento dos funcionários com as diretrizes da organização (Oliveira, 2004). Porém,

alguns recursos mínimos, como por exemplo, um funcionário com acesso a alta direção, que

conheça as atividades administrativas, técnicas e suas interações e que tenha capacidade de

interpretar os requisitos dos clientes, as legislações aplicáveis e a norma escolhida para

descrever os processos da empresa alinhados a estes requisitos, são necessários.

De acordo com a ISO 9001:2008, para a implantação de um sistema de gestão de

qualidade pode ser utilizada a abordagem oferecida pela ferramenta PDCA – Plan-Do-Check-

Act (Planejar – Implantar – Avaliar – Melhorar). Esta ferramenta tornou-se popular na década

de cinquenta quando foi aprimorada e aplicada em processos de qualidade por W. Edwards

Deming que a denominou de Shewhart PDCA Cycle em homenagem ao criador (Souza, 1997).

Esta ferramenta baseia-se em detalhamento das atividades em etapas a serem cumpridas,

conforme pode ser verificado na Figura 1.

Page 18: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

17

Figura 1. Ciclo PDCA com as etapas para o processo de implantação do sistema BPL

A ferramenta PDCA – Plan-Do-Check-Act, é aplicável no gerenciamento e melhoria

de projetos, pois permite a identificação dos objetivos, metas e método do projeto (planejar),

treinamento dos envolvidos e implementação do que foi planejado (implantar/executar), análise

de resultados e avaliação do atendimento aos objetivos e metas propostas (avaliar) realização

de melhoria no método, objetivos e metas para otimização do projeto com base no objetivo

definido (melhoria) (Andrade, 2003).

Outra ferramenta que também podem facilitar a implantação de sistemas de gestão

da qualidade e de acordo com estudo realizado por Mendes (1998), o programa 5S é

indispensável para a implantação e consolidação de um sistema de gestão da qualidade. Seu

nome é proveniente de palavras, que em japonês, soam com a letra S: Seiri (senso de

utilização), Seiton (senso de ordenação), Seiso (senso de limpeza), Seiketsu (sendo de

padronização) e Shitsuke (senso de autodisciplina) (Mendes, 1998).

Os principais sistemas de gestão da qualidade aplicados hoje no Brasil, são: Normas

da Família ISO 9000, Norma NBR ISO 17025, Norma 14001 (Gestão Ambiental), ISO 15189

que trata dos “Requisitos de Competência para Laboratórios Clínicos”, Boas Práticas de

Laboratório – BPL e Boas Práticas de Fabricação – BPF (Presot & Silva, 2006). Segundo

informações do INMETRO, o número de empresas certificadas e laboratórios acreditados no

Brasil em normas diversas ainda é pequeno conforme pode ser verificado abaixo.

Page 19: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

18

Figura 2. Número de empresas certificadas e laboratórios acreditados no Brasil até 06 de novembro de

2011. Fonte: www.inmetro.gov.br.

II.3 SISTEMA DE GESTÃO BPL – BOAS PRÁTICAS DE LABORATÓRIO

O conceito formal para regulamentação de Boas Práticas de Laboratório – BPL, teve

origem nos Estados Unidos, na década de 70, devido a preocupações sobre a validade de

dados de segurança não-clínicos no contexto de ”aplicações de novas drogas” submetidos à

FDA - Food and Drug Administration. A inspeção de estudos e laboratórios revelou

planejamento inadequado e execução incompetente de estudos, documentação insuficiente de

métodos e resultados e até mesmo fraude. Essas deficiências foram divulgadas em audiências

do Congresso dos EUA e os resultados políticos destas levaram à publicação do FDA de

propostas para regulamentação sobre BPL em 1976 com a definição em junho de 1979. Esta

regulamentação forneceu a base para a garantia de que os relatórios submetidos à FDA

refletissem fielmente o trabalho experimental realizado (WHO, 2009).

Para atender a demanda internacional da qualidade no campo das pesquisas e nas

mais diversas áreas de saúde e de meio ambiente, a OECD formulou diretrizes que

contemplam as características de um sistema da qualidade, que avalia a segurança através

dos Princípios das Boas Práticas de Laboratório - BPL (FIOCRUZ, 2009). Os Princípios

Básicos da OECD para BPL foram publicados em 1995 e revisados em 1998. O protocolo de

reconhecimento de uso do sistema garante que todos os signatários do protocolo, Estados

Page 20: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

19

membros, aceitam a validade de Estudos desenvolvidos na sua integralidade em concordância

com os Princípios Básicos da Organização para BPL (Schlatter et al., 2006). Em 2007, foi

definido que a Cgcre/Inmetro seria a Autoridade Brasileira de Monitoramento da Conformidade

aos Princípios das BPL, fazendo parte do Programa Brasileiro de Monitoramento BPL junto à

OCDE. A definição das autoridades de monitoramento no país possibilitou que o Brasil

solicitasse adesão aos atos da OCDE, visando o reconhecimento mútuo de dados segundo as

BPL (MAD – Mutual Acceptance of Data). Assim, o reconhecimento da Cgcre/Inmetro pela

OCDE como Autoridade de Monitoramento permite que os estudos/testes realizados em

instalações de teste monitoradas e reconhecidas pela Cgcre/Inmetro sejam aceitos pelos

países membros da OCDE. Compete à Cgcre/Inmetro atuar como organismo de acreditação de

organismos de avaliação da conformidade. A Cgcre/Inmetro é, portanto, dentro da estrutura

organizacional do Inmetro, a unidade organizacional principal que tem total responsabilidade e

autoridade sobre todos os aspectos referentes à acreditação, incluindo as decisões de

acreditação. Já a Divisão de Acreditação de Laboratórios - Dicla é a unidade da Cgcre/Inmetro

responsável pela coordenação, gerenciamento e execução das atividades relacionadas ao

monitoramento e reconhecimento de instalações de teste segundo os Princípios das BPL.

O processo de reconhecimento da conformidade em BPL no Brasil deve ser feito

através de solicitação ao INMETRO, e está ilustrada a seguir:

Page 21: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

20

Figura 3. Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Fonte: www.inmetro.gov.br

Segundo a NIT DICLA 035, “BPL é um sistema de qualidade que abrange o processo

organizacional e as condições nas quais estudos não-clínicos de saúde e de segurança ao

meio ambiente são planejados, desenvolvidos, monitorados, registrados, arquivados e

relatados” (INMETRO, 2009). Os princípios das BPL podem auxiliar o pesquisador a realizar

seu trabalho científico de acordo com o projeto pré-estabelecido, uma vez que ajudam a definir

e padronizar o planejamento, execução, registro, relato, acompanhamento e arquivamento de

processos dentro de instituições de pesquisa. Os regulamentos da BPL não oferecem análise

sobre o conteúdo científico ou técnico dos estudos por si só e não têm o objetivo de avaliar o

valor científico dos estudos: essa função é reservada inicialmente para os pesquisadores que

trabalham, em seguida, para as Autoridades de Registro e, eventualmente, para a comunidade

científica internacional como um todo. Os requisitos de BPL estão voltados para o

planejamento adequado, para o desempenho de técnicas de controle, para registro fiel de

todas as observações, para um acompanhamento adequado das atividades e para o

arquivamento completo de todos os dados brutos obtidos, e servem para eliminar muitas fontes

de erro (WHO, 2009).

Page 22: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

21

Os Princípios das BPL devem ser aplicados aos itens dos ensaios de segurança de

testes não-clínicos contidas em produtos farmacêuticos, pesticidas, cosméticos, medicamentos

veterinários, bem como os aditivos alimentares, aditivos para alimentos e produtos químicos

industriais. Esses itens de teste são frequentemente produtos químicos sintéticos, mas podem

ser de origem natural ou biológica e, em algumas circunstâncias, podem ser os organismos

vivos. O objetivo do ensaio destas substâncias é obter dados sobre suas propriedades e / ou a

sua segurança com relação à saúde humana e/ou o ambiente (WHO, 2009). O objetivo dos

princípios das BPL é promover o desenvolvimento de dados de teste de qualidade. A

possibilidade de comparação dos dados de ensaios constitui a base para a aceitação mútua

entre diferentes países. Se cada país puder confiar nos dados de ensaios desenvolvidos em

outros países, a duplicação de testes pode ser evitada, economizando tempo e recursos. Em

tempo, a aplicação destes princípios deve contribuir para evitar a criação de barreiras técnicas

ao comércio, e melhorar a proteção da saúde humana e ao meio ambiente (WHO, 2009).

Para a implementação dos princípios da BPL dois aspectos críticos devem ser

considerados: em primeiro lugar, ao invés de regras (comuns às demais normas) existem

diretrizes que necessitam de interpretação durante a aplicação; em segundo lugar, estes

princípios exigem a melhoria contínua que está ligada ao avanço do conhecimento técnico e

científico a fim de manter o sistema da qualidade. A autora defende ainda que a interpretação

dos princípios da BPL exige flexibilidade e especialização por parte dos responsáveis pela

implementação do sistema (Brunetti, 2002).

A implementação dos princípios das BPL representa um desafio significativo para as

organizações iniciantes e deve ser um esforço colaborativo, apoiada pela alta administração e

envolvendo pessoal de uma variedade de setores, incluindo pesquisa, qualidade, manutenção,

metrologia, recursos humanos, gestão de documentos e arquivos, etc (WHO, 2009).

Tanto a NIT DICLA 035 quanto a WHO salientam a importância de seguir alguns ítens

para a implementação da BPL, destacados abaixo e ilustrados na Figura 4:

1. Recursos: Organização, pessoal, instalações e equipamentos

Os regulamentos da BPL exigem a definição da estrutura organizacional e as

responsabilidades do pessoal envolvido no Estudo. Salienta também sobre o número suficiente

Page 23: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

22

de pessoas bem como suas qualificações e competências. Outro ponto importante é a

nomeação de um Diretor de Estudos que representa o ponto central de controle de todas as

etapas relacionadas ao estudo. A norma NIT DICLA 035 detalha todas as funções e

responsabilidades do Diretor.

Quanto às instalações e os equipamentos, devem ser suficientes e adequadas para

realizar os estudos; todos os equipamentos devem estar em condições de funcionamento

tendo um programa de validação / qualificação, calibração e manutenção que proporcione isso

(WHO, 2009).

2. Caracterização: Os itens de ensaio e sistemas de teste

Tanto para os ítens de ensaio quanto para os sistemas de teste, condições

apropriadas de identificação, estocagem, cultivo, guarda, manuseio, etc devem ser

estabelecidas para assegurar a qualidade dos dados gerados (NIT DICLA 035, 2009)

3. Regras: protocolos, procedimentos operacionais padronizados (POPs)

Um plano de estudos deve ser elaborado antes do início do mesmo; descreve a

concepção do estudo e fornece prova de que o estudo foi planejado e elaborado em

conformidade com os princípios BPL descritos. A obrigação de formular um plano de estudo

com um propósito científico definido para o estudo irá evitar falsos começos e diminuir a

incidência de estudos incompletos ou inconclusivos, respeitando os princípios de BPL e assim,

otimizar a produção científica de estudos (NIT DICLA 035, 2009 e WHO, 2009).

A elaboração dos POP – Procedimentos Operacionais Padrão, serve para padronizar

as técnicas executadas com frequência de modo a facilitar a comparação dos resultados entre

os estudos e facilitar a reconstituição destas; os procedimentos devem ser adaptados à medida

que for necessário (para evitar a utilização de métodos ultrapassados) e devem estar

disponíves a todos no local em sua versão atual. Através da aplicação de técnicas válidas e

aprovadas muitas fontes de erro sistemático podem ser evitados (WHO, 2009).

Page 24: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

23

4. Resultados: Os dados brutos, o relatório final e arquivos

Os dados brutos são os resultados do experimento em que foram baseadas as

conclusões; são dados originais coletados durante a realização do Estudo bem como as

circunstâncias em que este foi conduzido; são, portanto, essenciais para a reconstrução de

estudo e resgate de informações bem como para a rastreabilidade dos eventos do Estudo

(WHO, 2009).

O Relatório Final é de responsabilidade do Diretor de Estudos que faz a interpretação

científica do Estudo e onde estão descritos com precisão as informações deste; é no Relatório

que deve estar descrita a informação de que o Estudo foi ou não conduzido conforme os

requisitos da BPL (WHO, 2009).

O armazenamento dos dados de forma conservada, sem perda ou deteriorações e de

fácil recupreação permite que um estudo possa ser reconstruído anos após sua conclusão

(WHO, 2009).

5. Garantia de qualidade: monitoramento independente dos processos de investigação

A Garantia da Qualidade é definida pela BPL como sendo uma equipe de pessoas

responsáveis por garantir o cumprimento da norma; deve ser independente do estudo e

conduzir inspeções para verificar a adequação do processo aos requisitos BPL (NIT DICLA

035, 2009).

Page 25: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

24

Figura 4. Esquema orientativo dos ítens a serem considerados em certificação BPL. Fonte:

www.inmetro.gov.br

A criação de um sistema BPL implica em compromisso a longo prazo não só pela

direção mas por cada um dos envolvidos. Segundo Xavier (2005), um processo que tem como

objetivo principal obter apenas uma certificação ao invés de atingir a melhoria contínua de seus

processos, não será bem aceito e está susceptível ao fracasso (Abad Xavier et al., 2005).

II.4 A FIOCRUZ NA BAHIA: O CENTRO DE PESQUISAS GONÇALO MONIZ - CPqGM

A Fundação Oswaldo Cruz (Fiocruz) é uma instiuição federal vinculada ao Ministério

da Saúde que atua na área de ciência e tecnologia em Saúde. O CPqGM é uma unidade

técnico científica na Bahia ligado à Fiocruz que tem como missão “Promover a melhoria da

qualidade de vida da população através da geração e difusão de conhecimento científico e

tecnológico no Estado da Bahia e no Brasil”. Atualmente, na área biomédica, são

Page 26: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

25

desenvolvidas pesquisas científicas sobre doenças infecciosas e parasitárias, de importância

regional e nacional.

O CPqGM fomenta uma crescente consciência institucional sobre a necessidade de

se implantar sistemas de gestão da qualidade em todos os laboratórios e apesar de ser

referência no estudo de diversas linhas de pesquisa, ainda não possui um Sistema de Gestão

de Qualidade estruturado e implantado. Isso se deve, possivelmente, ao fato de não ter havido

exigência ou orientação da Alta Direção da Fiocruz para implementação de Sistema de Gestão

da Qualidade nas unidades de pesquisa, mas apenas um esforço em relação aos Laboratórios

de Referência, uma vez que há legislação definindo isto, a exemplo da Portaria 2031/2004

(Ministério da Saúde), Portaria 70/2004 (Sistema de Vigilância Sanitária) e Portaria 140/2008

(Fiocruz). Um dos fatos que comprovam esta ausência de orientação para a Qualidade é o fato

da Política da Qualidade da Fiocruz somente ter sido aprovada em 2010 a ainda não estar

amplamente divulgada. Outro fato a contribuir para a falta de implementação de Sistema da

Qualidade na Fiocruz é que não existe hoje no Brasil uma norma diretamente aplicada aos

laboratórios de pesquisa básica muito menos uma obrigatoriedade de tais segmentos aderirem

aos sistemas de gestão, como BPL, por exemplo, mas a sedimentação da cultura da qualidade

é fundamental para mudar este cenário.

Hoje porém, existe cada vez mais a necessidade de comprovar e assegurar a

rastreabilidade dos resultados das pesquisas publicadas que possibilitam a sua repetição ou

melhoria a qualquer tempo. Seguindo neste direcionamento, nossa hipótese de trabalho foi a

que é viável a implantação de um sistema de gestão da qualidade em laboratórios de pesquisa

de uma instituição pública. A partir desta hipótese, trabalhamos com os procedimentos para

esta implantação e avaliamos a viabilidade e os impactos desta melhoria.

Page 27: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

26

III JUSTIFICATIVA

Todas as instituições têm seus próprios sistemas “naturais” de qualidade, embora

muitas vezes estes sejam informais e não sigam um padrão específico. No entanto em um

laboratório de pesquisa, a investigação é um processo de constante evolução que visa

descobrir novos fatos. Por sua própria natureza, o trabalho de pesquisa está sujeito a

mudanças de direção em resposta a novos e frequentes resultados, muitas vezes inesperados.

Na verdade, o resultado final da pesquisa pode nem estar relacionado com os objetivos iniciais

do projeto. Enquanto esta realidade pode trazer um vigor para a pesquisa, pode também

prejudicar a criação de mecanismos que garantam a coerência e a confiabilidade dos dados à

longo prazo.

Considerando ainda que não há no CPqGM nenhum sistema de gestão

implementado e verificado e ainda que o CPqGM é uma Instituição de referência justifica-se a

execução deste trabalho. A adesão a normas de qualidade e a conquista de prêmios de

excelência são ações que vêm se tornando essenciais para responder às expectativas e

exigências das revistas científicas indexadas, das instituições de fomento nacionais e

internacionais, e, especialmente, de órgãos reguladores da sociedade civil.

Page 28: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

27

IV OBJETIVOS

IV.1 OBJETIVO GERAL:

Avaliar o processo de implantação de um sistema de gestão da qualidade em um

laboratório de pesquisa básica de uma instituição pública.

IV.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

Verificar a viabilidade da implantação de um sistema de gestão da qualidade.

Descrever os impactos do processo de implantação de acordo com indicadores

selecionados.

Analisar a percepção dos pesquisadores acerca de sistemas de gestão da qualidade.

Page 29: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

28

V DESENHO EXPERIMENTAL

Figura 5. Desenho experimental do trabalho

Page 30: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

29

VI METODOLOGIA

VI.1 CONSIDERAÇÕES ÉTICAS

Este trabalho foi submetido CEP – Comitê de Ética em Pesquisa do CPqGM (A

provação número 237/2011 - Anexo 1). O método utilizado na avaliação do objetivo foi a

utilização de um questionário (Apêndice 2) realizado com pesquisadores e estudantes de Pós

Graduação, uma vez que estes estão diretamente envolvidos nas pesquisas realizadas pelo

Centro. Esta metodologia foi adotada por não apresentar prejuízo aos seus participantes, uma

vez que o questionário tem participação voluntária e não necessita a identificação dos mesmos.

Todos os envolvidos foram informados sobre a natureza da pesquisa e assinaram um Termo

de Consentimento Livre e Esclarecido (Apêndice 1), respeitando as considerações contidas na

Resolução Nº 196 de 10/10/1996, do Conselho Nacional de Saúde - MS.

VI.2 NATUREZA DO ESTUDO

Este é um estudo qualitativo prospectivo. Com o estudo pode-se descrever o

planejamento e o processo de implantação de um sistema de gestão de qualidade em um

laboratório de pesquisa, analisando a viabilidade e os impactos deste processo sob vários

aspectos entre os quais a percepção das pessoas em relação à importância do tema.

VI.3 LEVANTAMENTO DAS NORMAS APLICÁVEIS E SELEÇÃO DO LABORATÓRIO

PARTICIPANTE

Realizamos um levantamento das normas nacionais que poderiam serem utilizadas

como guia para um laboratório de pesquisa básica implantar sistemas de gestão da qualidade,

tendo como critérios de seleção a aplicabilidade ao escopo do laboratório e reconhecimento

nacional e internacional, uma vez que no CPqGM o laboratório LIP – Laboratório de

Imunoparasitologia, participa de projetos internacionais.

Selecionou-se a Norma NIT DICLA 035 – Princípios das Boas Práticas de

Laboratório, uma vez que esta atendeu aos critérios previamente definidos para a seleção e

considerando que não há uma norma direcionada a Laboratórios de Pesquisa exclusivamente.

Page 31: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

30

Documentos de orientação da OECD: Princípios para Boas Práticas Laboratoriais (OECD,

1992) também foram utilizados de modo complementar.

VI.4 DEFINIÇÃO DAS ETAPAS PARA O PROCESSO DE IMPLANTAÇÃO DO SISTEMA

Para implantação do sistema, foi necessário pensar em uma forma de dinamizar e

esquematizar o processo, uma vez que várias etapas precisariam ser cumpridas e a forma

como o processo aconteceria seria fundamental para o sucesso do projeto. Assim foi escolhida

a ferramenta PDCA - Planejamento, Execução, Avaliação e Melhoria (Andrade, 2003), muito

utilizada nos estudos e processos de implantação de sistemas da qualidade. A etapa de

Melhoria não foi contemplada neste projeto, por entendermos tratar-se de estudos futuros.

1ª. Etapa - Planejamento

1.1 Definição da política, objetivos e organograma do Laboratório LIP

A política da qualidade do Laboratório LIP foi redigida de forma simples, clara e de fácil

entendimento para todos os níveis hierárquicos do Laboratório. Tanto a política quanto os

objetivos foram elaborados pelos envolvidos no projeto e foi aprovado pela Chefia do

Laboratório.

1.2 Definição do Estudo a ser implantado o sistema e elaboração do Plano

Uma vez selecionada a Norma NIT DICLA 035 – Princípios das Boas Práticas de

Laboratório – a qual determina que a implantação das boas práticas deverá ocorrer em

Estudos, foi definido o estudo ”Pesquisa de prevalência de leishmaniose em doadores de

sangue assintomáticos na cidade de Salvador”. Este estudo teve como objetivo principal avaliar

a prevalência da leishmaniose em doadores de sangue assintomáticos. O intuito foi realizar o

estudo seguindo as diretrizes e conceitos da norma NIT DICLA 035. O Plano de Estudo foi

elaborado conforme os requisitos da norma NIT DICLA 035 e contempla itens relacionados à

Instalação onde foi executado, Diretor do Estudo, Pesquisador, entre outros que estão

detalhadamente descritos no Apêndice 3.

Page 32: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

31

1.3 Definição de indicadores para avaliação do impacto do processo de implantação de

um sistema de gestão da qualidade

Foram definidos indicadores de processo qualitativos e/ou quantitativos objetivos,

rastreáveis, de fácil coleta e entendimento. Apesar destes indicadores terem sido selecionados

com o objetivo de acompanhar o processo de implantação, poderiam ser analisados

independentemente da implantação de um sistema de gestão da qualidade.

Tabela 1. Indicadores propostos para avaliação do impacto do processo de implantação BPL:

Processo

Atividade Indicador

Gestão do Processo

BPL

Reunião com o Diretor de

Estudos – discussão de

assuntos

Nº de reuniões realizadas / Nº de reuniões planejadas

Gestão da

Qualidade

Identificação e tratamento

de não conformidades

Nº de NC tratadas / Nº de NC registradas

Gestão de

Equipamentos

Calibração ou manutenção

preventiva

Nº de instrumentos calibrados / Nº de instrumentos

utilizados

Gestão de

Documentos Controle de documentos

Nº de POP descritos / Nº de POP exigidos pela norma NIT

DICLA 035 e demais relacionados

2ª. Etapa – Implantação/Execução do Sistema BPL

2.1 Capacitação dos envolvidos no processo de implantação

Foi realizado um levantamento para verificar se as pessoas envolvidas no processo já

haviam participado de cursos relacionados.

2.2 Realização de Diagnóstico do nível de adequação do Laboratório aos requisitos da

norma selecionada

Continuando a etapa de implantação do sistema de gestão da qualidade BPL, foi

realizado um diagnóstico para avaliar a adequação do Laboratório aos critérios normativos

descritos. Esta etapa foi feita aplicando-se um questionário antes e após o processo de

Page 33: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

32

implantação do sistema BPL, de modo que fosse realizado um comparativo dos dois momentos

(Apêndice 4).

Para elaboração do questionário, foram escolhidos requisitos descritos na norma NIT

DICLA 035 e outros relacionados à Gestão da Qualidade desejáveis à organização de um

Laboratório; para cada requisito foram elaboradas 5 perguntas e para cada pergunta 2

respostas possíveis: Atende ao Requisito e Não Atende ao requisito. Para cada resposta

“Atende” foi atribuído um percentual de 20%; o desejável era que ao final, no questionário

realizado posteriormente ao processo de implantação, o percentual de atendimento ao requisito

fosse de 100%, o que equivaleria ao atendimento das 05 perguntas elaboradas; para a

resposta “Não Atende”, não foi atribuída porcentagem de acerto. Foi realizada a comparação

dos percentuais de atendimento ao requisito antes e após a realização do projeto (Tabela 4).

Com este questionário, foi possível visualizar em quais itens o Laboratório estava falho,

permitindo a identificação de pontos de melhoria.

2.3 Elaboração, revisão e aprovação da documentação necessária à implantação do

sistema

O passo seguinte durante a etapa de Implantação foi redigir procedimentos

necessários à realização das atividades do estudo escolhido e demais atividades do

Laboratório. Para tanto, inicialmente foram elaborados procedimentos para controle de

documentação (POP DIR.05.002); este documento inicial foi elaborado pela Comissão Interna

da Qualidade com o objetivo de criar um modelo de documento e padronizar a elaboração dos

demais documentos relacionados ao estudo e à implantação do sistema. Os documentos do

estudo foram feitos de acordo modelo padronizado e encaixaram-se em níveis hierárquicos

pré-definidos (Tabela 2).

No POP DIR.05.002 foram definidos critérios como arquivamento dos procedimentos

(em meio físico ou eletrônico), etapas de elaboração, revisão e aprovação, bem como a

periodicidade dos mesmos, o qual foi redigido seguindo requisitos de Controle de Documentos,

Controle de Registros e Controle de Dados da norma ISO 17025:2005 uma vez que a norma

BPL não especifica requisitos para documentação (ISO 17025, 2005).

Page 34: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

33

Tabela 2 – Modelo de padronização de documentos

Nível

Tipo Sigla Função

1

Manual da Qualidade

do Laboratório

MQ

Dispor a estratégia para a Gestão do Laboratório e as preconizações nele contidas têm caráter obrigatório.

Neste nível está descrito “o que o Laboratório se propõe a fazer para assegurar a qualidade de suas pesquisas e

serviços”.

2

Procedimentos

Operacionais Padrão

POP

Descrever quais serão as técnicas e táticas utilizadas para manter funcionante suas pesquisas e processos

operacionais, “como a empresa se organiza para fazer o que diz que faz com qualidade”.

3

Registros

R

Provar o que o Laboratório faz; é a evidência objetiva de que o laboratório tem um sistema de qualidade efetivo.

A confecção e aprovação dos documentos teve a participação dos envolvidos

diretamente com o estudo, conforme pode ser verificado nos POP, listados no Apêndice 5.

2.4 Execução do Estudo selecionado para Implantação do Sistema BPL

O Estudo selecionado (“Pesquisa de prevalência de leishmaniose em doadores de

sangue assintomáticos na cidade de Salvador”) foi executado entre em março de 2010 e

fevereiro de 2011.

3ª. Etapa - Avaliação

Para avaliação de todo o processo, bem como para identificar o impacto e os

desafios durante a implantação do sistema de gestão da qualidade no laboratório, foram

analisadas as informações coletadas referentes à:

1. Porcentagem de atendimento pelo laboratório aos requisitos da norma escolhida após a

implantação.

2. Realização de pesquisa (Apêndice 2) para avaliar a percepção dos pesquisadores e

estudantes da Instituição sobre sistema da qualidade.

3. Levantamento das dificuldades encontradas pelos envolvidos nas etapas de planejamento e

implantação do sistema BPL.

Page 35: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

34

VII RESULTADOS

VII.1 ETAPA - PLANEJAMENTO

Foi definida a política da qualidade e seus objetivos, bem como o organograma do

Laboratório, os quais estão descritos e publicados no Manual da Qualidade do Laboratório e

podem ser verificados abaixo:

Política de Qualidade do LIP

“A Política da Qualidade do LIP visa garantir a qualidade das pesquisas realizadas, assegurar a

confiabilidade analítica e atender aos requisitos regulatórios do sistema de gestão da qualidade do

CPqGM, mantendo sua eficácia e melhorando continuamente através de instalações apropriadas,

qualidade de reagentes e materiais além de treinamento e desenvolvimento de pessoal.”

Objetivos do LIP

O LIP tem como um dos objetivos principais a formação de pessoal para pesquisa, atuando nos níveis de

graduação (iniciação científica) e pós-graduação (mestrado e doutorado). Além disso, o LIP

tem promovido a interação científica com grupos no Brasil e exterior, para atender

aos objetivos de seus projetos.

Organograma funcional do LIP

Figura 6. Organograma funcional do Laboratório de Imunoparasitologia – LIP.

Uma vez que não são muitos os cargos do Laboratório, foi possível criar apenas um

organograma institucional.

Page 36: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

35

Foi escolhido o Estudo: “Pesquisa de prevalência de leishmaniose em doadores de

sangue assintomáticos na cidade de Salvador”. Como critérios para escolha deste estudo estão

o fato de tratar-se de um estudo rápido – ponto fundamental por ser inserido como objeto de

estudo em um projeto de mestrado - ter importância para a saúde pública, e ainda ser de

execução clara e simples utilizando apenas duas metodologias que não possuíam alterações

nos seus procedimentos durante seu andamento. Além disto, é importante destacar que a

equipe executora do estudo já havia participado do treinamento da norma BPL e teve total

interesse e disponibilidade para participar do projeto, ponto importante para o sucesso de um

projeto de qualidade, que depende de disponibilidade e interesse do pessoal envolvido.

Conforme recomenda a norma NT DICLA 035, o Plano foi elaborado previamente ao

estudo; porém, considerando ser este um trabalho pioneiro na Unidade da Fiocruz Bahia, a

elaboração do Plano foi considerada um pouco mais demorada e difícil, uma vez que não

haviam modelos a serem seguidos e/ou consultorias a serem feitas. A elaboração do Plano

obedeceu aos requisitos definidos pela norma e pode ser verificado no Apêndice 3.

Durante a elaboração deste Plano, verificou-se a necessidade de acrescentar ao

projeto uma norma complementar, NIT DICLA 043 – Aplicação dos princípios de BPL à

organização e ao gerenciamento de estudos em múltiplas localidades (Multi-site) – uma vez

que a etapa de coleta de amostra presente no estudo escolhido aconteceu fora do CPqGM.

Os indicadores para avaliação do impacto do processo de implantação de um sistema

de gestão da qualidade (Tabela 3) foram analisados após a conclusão do projeto.

Page 37: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

36

Tabela 3. Resultado dos indicadores para avaliação do impacto do processo de

implantação/execução.

Processo

Atividade Indicador Antes Depois

Gestão do Processo

BPL

Reunião com o Diretor de

Estudos – discussão de

assuntos

Nº de reuniões realizadas / Nº de

reuniões planejadas NR 0

Gestão da

Qualidade

Identificação e tratamento

de não conformidades

Nº de NC tratadas / Nº de NC

registradas NR 0

Gestão de

Equipamentos

Calibração ou manutenção

preventiva

Nº de instrumentos calibrados / Nº de

instrumentos utilizados R

3 / 14 =

21%

Gestão de

Documentos Controle de documentos

Nº de POP descritos / Nº de POP

exigidos pela norma NIT DICLA 035 e

demais relacionados

R 19 / 19 =

100%

NR – Não registrado R – Registrado

Os resultados revelam que não foram identificados registros de reuniões ocorridas

entre o Diretor de Estudos e o pessoal envolvido no Estudo durante o processo de implantação

BPL; apesar do relato de terem ocorridos alguns encontros com os envolvidos não houve o

registro dos mesmos. Segundo informações do Diretor de Estudos, estes encontros ocorreram

principalmente para verificar o andamento do Estudo e se o mesmo estava ocorrendo conforme

requisitos BPL. Mesmo após o processo de implantação, não foram evidenciados registros de

reuniões.

O laboratório tem uma folha onde são registrados fatos considerados pelos mesmos,

como sendo não-conformes; porém estes fatos não são tratadas como não-conformidades uma

vez que que não há o registro de tratamento dos mesmos. Algumas não-conformidades foram

identificadas pela autora do projeto durante a execução do Estudo tais como: utilização de

equipamentos que não foram calibrados; ausência de registro das atividades diárias no Livro

de Registros (dados brutos) para garantir a rastreabilidade de informações fundamentais

referentes aos materiais e lotes de reagentes utilizados, condições de transporte das amostras,

equipamentos utilizados, condições de descarte; a falta da sistematização e de rotina no

registro diário destas informações pode ter ocasionado perda de dados referentes ao estudo.

De todos os equipamentos utilizados durante a execução das análises (Apêndice 7),

apenas as Micropipetas, o PCR Real Time e o Fluxo Laminar foram calibrados. Os demais, não

Page 38: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

37

são calibrados e/ou verificados quanto ao seu funcionamento, devido ao Laboratório e a

Instituição como um todo não ter uma política de verificação ou calibração de equipamentos.

Entretanto, apesar das dificuldades relatadas pela Chefia do Laboratório, como falta de verba

para a calibração, falta de política e sistematização por parte da própria Instituição, há uma

preocupação com o assunto e boa vontade por parte dos envolvidos no processo para sua

solução.

A elaboração dos documentos foi o único requisito que pode ser considerado como

atendido, uma vez que quase todos os documentos considerados necessários e que são

solicitados pela Norma NIT DICLA 035 foram elaborados e utilizados pela equipe executora do

estudo a exceção de um documento para treinamento dos envolvidos.

VII.2 ETAPA – IMPLANTAÇÃO/EXECUÇÃO

A capacitação dos envolvidos foi realizada anteriormente ao início do projeto e

ocorreu através de treinamento dado a várias pessoas entre elas os futuros envolvidos no

projeto, na norma NIT DICLA 035 – Princípios das BPL. O treinamento foi feito através de aulas

expositivas com realização de exercícios teórico-práticos, teve duração de 16 horas e ocorreu

no período de 13 e 14 de Agosto de 2009.

O diagnóstico para avaliar o nível de adequação dos laboratórios aos requisitos da

norma, realizado em dois momentos (antes e após o processo de implantação) foi capaz de

fornecer informações importantes para identificação dos principais pontos a serem melhorados

pelo Laboratório e deverá auxiliar na elaboração de melhorias.

Os oito requisitos escolhidos foram considerados pela equipe como sendo suficientes

para demonstrar uma visão geral do Laboratório. Destes requisitos, apenas “Sistema de

Gestão” e “Aquisição” não são exigidos pelas normas NIT DICLA 035 e 043, mas foram

acrescentados pelo grupo considerarmos que trata-se de requisitos importantes na Gestão da

Qualidade como um todo e ajudam no bom andamento do Laboratório.

Page 39: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

38

Tabela 4. Resultado do diagnóstico do nível de adequação do Laboratório aos requisitos da

norma.

Requisitos Antes da

implantação Após a

implantação

Pessoal 40% 60%

Ambiente de Trabalho / Instalações 20% 60%

Controle de Dados Bruto 20% 20%

Equipamentos, Materiais e Reagentes 20% 80%

Sistema de Gestão 20% 80%

Controle de Documentos zero 80%

Aquisição 20% 40%

Controle de Registros 20% 80%

No diagnóstico realizado antes do processo de implantação ser iniciado, nenhum

requisito havia alcançado o percentual de 50% de atendimento. Entre os requisitos que tiveram

o menor índice podemos destacar “Controle de Documentos”, o mesmo que, quando avaliado

após o processo de implantação obteve a maior evolução, alcançando 80% de atendimento. O

requisito “Dados Brutos” não obteve melhoria mesmo após o processo de implantação,

demonstrando ser este o item de maior falha no Laboratório atualmente.

Durante todo o andamento do projeto houve uma preocupação dos envolvidos em

sistematizar as rotinas e para isso todos os procedimentos de relevância e aplicáveis ao

Projeto foram elaborados. Os POPs – Procedimentos Operacionais Padrão foram sendo

elaborados a medida que foi sendo identificada sua necessidade, ou seja, antes e durante a

realização do trabalho. Já a Matriz de Atribuições e Responsabilidades já havia sido elaborada

previamente ao início do Projeto. Não foi evidenciada a elaboração de Registros, uma vez que

as informações foram registradas no Livro de Registro do Projeto. Além dos procedimentos

considerados necessários, alguns outros documentos tais como um Manual da Qualidade do

Laboratório, Matriz de Perfil de Pessoal e Matriz de Signatários, já haviam sido elaborados e

Page 40: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

39

apesar de não ser uma das exigências da implementação de sistema BPL ou da norma NIT

DICLA 035, demonstra a disponibilidade do Laboratório em definir e organizar suas rotinas.

O Estudo foi conduzido conforme o Plano de Estudo previamente elaborado,

considerando os requisitos da norma selecionada. Após o término do estudo, um relatório final

foi redigido conforme recomendado pela NIT DICLA 035 com as informações do estudo

executado (Apêndice 8).

VII.3 ETAPA - AVALIAÇÃO

Conforme colocado na metodologia, foram escolhidas três situações para avaliar o

processo de implantação do sistema BPL no LIP.

A primeira avaliação a ser considerada nesta etapa é o diagnóstico sobre o nível de

adequação aos requisitos da norma após todo o processo, demonstrado na Figura 7.

0% 50% 100%

Pessoal

Ambiente de Trabalho / Instalações

Controle de Dados Bruto

Equipamentos, Materiais e Reagentes

Sistema de Gestão

Controle de Documentos

Aquisição

Controle de Registros

Antes da implantação

Após a implantação

Figura 7. Diagnóstico do nível de adequação do Laboratório aos requisitos BPL

O requisito com melhor avaliação e, portanto o que teve melhor desempenho foi

“Controle de Documentos”, com 100% de atendimento, o que realmente pode ser evidenciado

Page 41: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

40

na rotina do Laboratório. Atualmente o laboratório disponibiliza um conjunto de documentos

que direcionam as rotinas consideradas importantes e que estão disponibilizados a todos;

estes documentos são identificados e foram aprovados pela Chefia do Laboratório.

Os resultados obtidos através da realização do diagnóstico para verificar o

atendimento pelo laboratório aos requisitos da norma após o processo de implantação,

demonstram que, ainda que este processo não tenha ocorrido em sua totalidade, houve uma

melhoria no Laboratório. Rotinas foram implementadas através da elaboração de

procedimentos e registros, as instalações foram melhoradas considerando que alguns

equipamentos foram calibrados, os registros do controle de registro de uso estão sendo

acompanhados e um melhor detalhamento do seu manuseio foi elaborado. Isto garantirá a

rastreabilidade da utilização e evitará uso indevido. Outra melhoria pode ser observada através

do controle de reagentes, considerando que todos estão identificados quanto ao seu

armazenamento e um controle mais rigoroso foi implementado. O Laboratório implantou um

formulário de registro das não conformidades encontradas, que pode ser utilizado em projetos

futuros de modo que o registro das informações torne-se sistematizado e seu tratamento possa

ser evidenciado.

O segundo requisito escolhido para a etapa de avaliação foi o questionário (Apêndice

2) realizado com pesquisadores e estudantes para avaliar a percepção dos mesmos acerca de

sistema de gestão da qualidade. Este questionário foi realizado com vinte pessoas, sendo dez

pesquisadores e dez estudantes.

A avaliação das respostas demonstrou em sua primeira questão que, de um modo

geral, todas as pessoas têm um entendimento correto sobre a definição de Qualidade e os

conceitos gerais não são uma nova revelação aos pesquisadores e/ou estudantes. Talvez, o

que seja novo e até certo ponto polêmico, é o fato de consolidar os conceitos de Sistema da

Qualidade aos processos inerentes às pesquisas e com isso demonstrar a “solidez” do trabalho

de investigação.

Quando perguntamos na questão nº 2, de que forma a Qualidade poderia ser

identificada ou aplicada no trabalho, foram encontradas respostas condizentes que relatavam o

registro em livros de registros para controle dos dados, a realização dos experimentos

Page 42: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

41

seguindo princípios estabelecidos e planejados (POPs), utilização de calibração e manutenção

de equipamentos, dentre outros.

Na questão nº 3, quando questionamos há quanto tempo são praticadas ou utilizadas

ferramentas da qualidade, 50% responderam que utilizam as ferramentas há algum tempo,

antes mesmo de entrar no CPqGM enquanto a outra metade começou a utilizá-las apenas

após o ingresso na Instituição (Figura 8).

50% 50%

Antes mesmo de entrar no CPqGM Após entrar no CPqGM

Tempo que pratica/utiliza ferramentas

da Qualidade no desenvolvimento da

sua pesquisa

Figura 8. Porcentagem de entrevistados que relataram há quanto tempo utilizam ferramentas da

Qualidade no desenvolvimento de suas pesquisas.

Na pergunta nº 4 foi questionado que pontuação os entrevistados dariam ao grau de

importância que um Sistema da Qualidade tem no trabalho de cada um. 75% das pessoas

responderam que “é muito importante para o bom andamento e resultados do trabalho” e 25%

responderam que “é importante, mas não sabem como implementar” (Figura 9).

Page 43: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

42

25%

75%

4 a 7 - É importante, mas não

sei como implementar

8 a 10 – É muito importante

para o bom andamento e

resultados do trabalho

Pontuação da importância que um

Sistema da Qualidade tem no trabalho

Figura 9. Porcentagem de entrevistados que atribuíram pontuação para o grau de importância que um

Sistema da Qualidade tem no seu trabalho.

Na pergunta nº 5, 91% das pessoas entrevistadas relataram nunca ter sido impedidas

de realizar algum trabalho ou publicação por não ter na instituição um Sistema da Qualidade

implementado. Apenas 9% dos entrevistados relataram já terem sido impedidos de publicar ou

realizar algum trabalho em função da ausência de um Sistema de Gestão. Isso evidencia e

ratifica o quanto este é um tema que necessita de divulgação e o quanto este processo ainda é

incipiente (Figura 10)

Figura 10. Porcentagem de entrevistados impedidos de realizar de algum trabalho ou publicação por não

ter um Sistema da Qualidade implementado.

Page 44: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

43

Quanto à participação em capacitação no tema, na pergunta nº 6, 42% relataram já

ter participado de alguma capacitação, sendo os cursos BPL e ISO 17025, os mais relatados

(Figura 11).

Figura 11. Porcentagem de entrevistados que já participaram de alguma capacitação em Qualidade

Já na questão nº 7, quando perguntado se os entrevistados tinham conhecimento

sobre como acontece o processo de implantação de um Sistema da Qualidade, 66% das

pessoas relataram desconhecerem o processo. Apenas 34% relataram ter conhecimento sobre

como se dá o processo de implantação de um Sistema (Figura 12).

Figura 12. Porcentagem de entrevistados que têm conhecimento sobre como se dá o processo de

implantação de um Sistema da Qualidade

Page 45: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

44

Para as pessoas que têm conhecimento sobre o processo de implantação de um

sistema da qualidade foi questionado na pergunta nº 8 de que forma este conhecimento foi

adquirido e todos relataram terem sido em palestras e/ou cursos promovidos pela própria

Fiocruz.

Dentre os entrevistados que responderam à pergunta nº 9, 58% relataram já ter

participado de eventos / cursos sobre Qualidade na Fiocruz Bahia (Figura 13).

58%

42%

Sim Não

Já participou de algum evento / curso

sobre Qualidade realizado na Fiocruz

Figura 13. Porcentagem de entrevistados que já participaram de cursos na Fiocruz Bahia

Na pergunta de nº 10, 75% das pessoas demonstraram ter vontade de participar de

curso / palestra ou treinamento na área de Qualidade. Estes dados revelam de um modo geral

que tanto os pesquisadores quanto os estudantes têm um entendimento adequado em relação

ao tema e reconhecem a importância deste processo caracterizada pelo alto percentual de

pessoas que demonstraram interesse em estudá-lo (Figura 14)

Page 46: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

45

Figura 14. Porcentagem de entrevistados que têm vontade de participar de curso / palestra ou

treinamento na área de Qualidade.

O terceiro e último item a ser considerado na etapa de avaliação do trabalho, foi o

levantamento das dificuldades encontradas pelos envolvidos nas etapas de planejamento e

implantação do sistema BPL. Foram elas:

Falta de informação sobre o tema;

Escolha de um modelo de Plano de Estudos;

Adequação e flexibilização da norma adotada ao desenvolvimento do Estudo

escolhido;

Manter a motivação de uma equipe de pesquisadores acostumados inicialmente a uma

rotina sem regras e convencê-los a seguir protocolos agora pré-estabelecidos;

Adequação à rotina de uma Instituição Pública;

Falta de uma equipe de auditores internos;

Falta de apoio institucional de forma clara por parte da alta direção;

O tempo disponível para realizar um trabalho como este;

Por fim, a ausência de uma norma direcionada às atividades de pesquisa também foi

um impeditivo neste processo, pois requereu tempo superior por parte dos envolvidos

na interpretação da norma escolhida.

Page 47: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

46

Neste trabalho o encontro com as dificuldades não foi diferente de tantos outros, uma

vez que muitas questões polêmicas cercam a aplicação de um Sistema da Qualidade para

laboratórios de Pesquisa e Desenvolvimento por causa das diferenças básicas entre as

atividades de pesquisa e serviços. Considerando ainda ter sido este um projeto experimental,

foi muito mais demorado e difícil, pois desde a interpretação da norma escolhida até a escolha

dos documentos necessários a este processo a inexperiência da equipe diante do processo foi

decisiva. Porém a maturidade e a experiência conquistadas durante a execução do projeto

possibilitará a equipe a implantação de critérios BPL em outros estudos se assim o desejar.

Page 48: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

47

VIII. DISCUSSÃO

Todo processo de implantação de sistema de gestão da qualidade, seja em qualquer

norma utilizada, implica na necessidade de dedicação, disponibilidade e empenho por parte

dos envolvidos. Por outro lado, uma das recompensas deste processo é que a implantação de

sistemas de gestão hoje vem se tornando um dos diferenciais de qualidade e sobrevivência de

laboratórios de um modo geral (Mathur, 2000).

Na pesquisa, este processo ainda é pouco visível e caminha a passos lentos. Prova

disso é o fato de atualmente, no Brasil, os órgãos de fomento à pesquisa não exigirem

comprovação de competência dos Laboratórios e nem a apresentação dos requisitos de

garantia da qualidade. Porém, nos EUA e em países da Europa e Ásia, o financiamento está

condicionado a estas evidências (Robins et al., 2006).

Apesar da introdução de um Sistema da Qualidade em Pesquisa e Desenvolvimento

suscitar preocupação e ceticismo entre alguns grupos - especialmente de pesquisa acadêmica,

em função, segundo eles, de uma rigidez e abordagem excessivamente normativa - há um

interesse crescente entre os organismos de acreditação e certificação bem como na

comunidade científica de desenvolver uma estratégia para ampliar esta tendência (Mathur,

2000).

Este estudo teve como objetivo principal avaliar o processo de implantação de um

sistema de gestão da qualidade em um laboratório de pesquisa básica de uma instituição

pública, do ponto de vista de sua viabilidade e impactos gerados.

Já na etapa inicial de escolha da metodologia e consequentemente da norma a ser

aplicada, foi possível verificar que a escassez de referências bibliográficas voltadas sobre o

tema no Brasil ainda é inicialmente o maior desafio e demonstra como este processo ainda é

incipiente, ao tempo em que ratifica a necessidade de vencer a resistência e as dificuldades

dos laboratórios de pesquisa, sejam eles clínicos ou básicos neste processo. Pesquisadores

em trabalhos semelhantes sobre o tema, relataram sobre a dificuldade e a escassez de

publicações brasileiras e internacionais além de mencionar a resistência dos laboratórios na

Page 49: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

48

implantação de sistema de gestão da qualidade e que poucos têm sido os relatos de

experiências bem sucedidas na área (Bordini, 2009).

Ficou claro que, como na maioria dos processos, a escolha da metodologia assim

como os modelos de documentos e registros necessários e definição das etapas do processo é

fundamental para o sucesso do trabalho e neste caso, como a equipe executora foi pequena,

foi fácil a comunicação e a definição deste ponto. Foi preciso em alguns momentos, recorrer a

outras unidades da Fiocruz que já haviam passado por processos semelhantes, como por

exemplo, quando da definição do modelo de Plano de Estudos, uma vez que não há na

literatura relatos sobre modelos a serem adotados para implantação de BPL em instituições de

pesquisa.

Em outros trabalhos semelhantes, existem relatos que um dos grandes desafios

durante a implantação de um sistema da qualidade em centros de pesquisa é a limitação

decorrente da maioria das normas que não são direcionadas à Pesquisa e uma necessidade

de maior flexibilização na aplicação das normas existentes (Brunetti, 2002). Com base nisto,

estabelecer inicialmente um planejamento para direcionar quais pontos seriam abordados

neste projeto, procedimentos a serem elaborados e seguidos, estudo a ser escolhido, dentre

outros foi considerado fundamental, uma vez que a pesquisa requer uma abordagem flexível e

independente que investiga um grande número de fatores desconhecidos e parâmetros

indefinidos.

Porém, apesar da característica básica da pesquisa que requer flexibilização, em um

processo de implantação de sistema de gestão da qualidade, estabelecer uma estrutura

hierárquica de documentos e requisitos mínimos de controle dos dados que são gerados

durante o processo / pesquisa é necessário. Convencer um pesquisador e/ou estudante de que

os resultados inesperados e errados fornecem uma valiosa contribuição para o avanço da

ciência e que o registro das falhas é tão importante quanto o registro dos resultados positivos,

foi considerado primordial durante a execução deste trabalho. Consideramos então que, dentre

os impactos que consideramos fundamentais, está o fato de se conseguir implementar, ainda

que de forma modesta, a rastreabilidade dos dados que estão sendo gerados nas pesquisas

realizadas pelo laboratório LIP, elemento fundamental para qualquer laboratório independente

Page 50: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

49

do seu fim. Não se pode perder de vista que o objetivo de um laboratório desta natureza é

gerar dados confiáveis e rastreáveis, que a sua missão é proporcionar saúde aos indivíduos de

um modo geral. Um outro impacto considerado importante neste processo está o fato de hoje o

Laboratório já ser capaz de iniciar um processo uma vez que já é sabido o que é necessário e

o que pode ser dispensável neste.

A implantação de um Sistema de Gestão da Qualidade requer mudanças estruturais,

comportamentais e culturais e é natural que estas mudanças causem insegurança e resistência

por parte de alguns, principalmente quando os conceitos e benefícios ainda não foram

devidamente sedimentados. Em um estudo que avaliou processos de implantação em 66

instituições de saúde, realizado por Greenfield & Braithwaite (2008), foi possível verificar que

os funcionários possuem expectativas e percepções diferentes a respeito do impacto do

processo. Na maioria das instituições, os funcionários relataram que o processo de

implantação pode gerar conflitos quando as partes envolvidas possuem objetivos e interesses

diferentes. Para esses pesquisadores, a definição clara e única por parte da alta direção com

relação à Qualidade, é uma das conseqüências positivas deste processo Greenfield &

Braithwaite (2008).

Em maio de 2011 foi realizada uma visita ao Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães,

Unidade Técnico-Científica da Fiocruz em Recife e foi possível perceber, através do relato dos

envolvidos, que o processo de implantação da qualidade foi iniciado apenas após a Direção

assumir o compromisso institucional e apoiar as demandas do setor da qualidade. Dificuldades

semelhantes às do CPqGM, como a ausência de uma norma direcionada às atividades de

pesquisa também foram identificadas no processo. Porém, aos poucos a comunidade foi

aderindo a idéia e apoiando as iniciativas do Setor da Qualidade, através de normativas que

partiam inicialmente da Direção. Este apoio implica necessariamente em uma mudança de

cultura corporativa e em a Instituição reconhecer a importância e urgência de um processo

como este através inclusive da contratação de profissionais terceirizados. Hoje, o processo

está em andamento – em fase de auditoria externa – com a implantação do sistema ISO 15189

e implantação de outras normas, como BPL.

Page 51: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

50

No CPqGM dentre as dificuldades citadas podemos destacar a falta de informação

sobre o tema ainda durante as aulas da Pós Graduação, pois poucos profissionais

reconheciam neste projeto a significância e importância do mesmo para a pesquisa científica; a

falta de modelos a serem seguidos, como por exemplo para elaboração do Plano de Estudos;.

Considerando que em pesquisa, os resultados e observações dos processos de investigação

não podem ser definidos ou previstos com precisão e podem divergir significativamente

daqueles esperados inicialmente e devem, portanto ser adaptados à realidade inerente a uma

rotina de pesquisa, a adequação e flexibilização da norma adotada ao desenvolvimento do

Estudo escolhido também foi considerada uma dificuldade a ser vencida além de manter a

motivação de uma equipe de pesquisadores acostumados inicialmente a uma rotina sem

regras e convencê-los a seguir protocolos agora pré-estabelecidos, principalmente em relação

a importância do registro diário do que é feito com seus resultados esperados e inesperados;

Ainda em relação às dificuldades encontradas, o projeto foi desenvolvido em uma

Instituição Pública e a adequação à rotina de uma Instituição Pública que tem um ritmo próprio

e algumas particularidades, como compra através de licitações (que acabam demorando e

travando um pouco o processo), aprovação de diretoria, etc foi considerado um ponto a ser

discutido para os próximos projetos assim como a falta de uma equipe de auditores internos

treinada para a realização de auditorias fundamentais ao andamento do processo dificultou o

trabalho também, pois esta seria uma das etapas fundamentais para a melhoria contínua dos

processos que estavam acontecendo.

Todo processo de implantação de sistema da qualidade implica em melhorias

institucionais que vão desde a adoção de políticas até mudanças estruturais, as quais

demandam apoio incondicional e total da direção da instituição, inclusive com a busca de

recursos financeiros para sua viabilização e a falta de apoio institucional de forma clara é um

fator limitante, bem como o tempo disponível para realizar um trabalho como este. Por ser um

processo inovador na Instituição e para o Laboratório envolvido, o tempo disponibilizado pela

autora do projeto e pelos envolvidos foi considerado insuficiente para iniciar e concluir o

processo, até porque a Instituição não dispõe de um Setor de Qualidade e/ou pessoas voltadas

apenas a esta atividade e portanto qualificadas para auxiliar no processo.

Page 52: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

51

Para os processos de pesquisa do CPqGM, a norma NIT DICLA 035 pode ser

considerada satisfatória e aplicável, desde que os conceitos relacionados na mesma e em suas

complementares sejam adequados à rotina na pesquisa. Porém ainda sente-se a necessidade

de se estabelecer normas mais direcionadas à pesquisa que permitam a flexibilidade e

originalidade indispensável para pesquisa e desenvolvimento. Os pesquisadores precisam de

orientação prática para adaptar os princípios já existentes em Gestão da Qualidade para

trabalhos não rotineiros como são os trabalhos de experimentação.

É possível citar como outro grande desafio e ponto fundamental, fazer com que

pesquisadores e futuros pesquisadores acreditem nos benefícios de um processo como este, o

que pode ser conquistado através de treinamentos e após o andamento do trabalho.

Estabelecer um Sistema de Gestão da Qualidade em pesquisa e desenvolvimento ou em

qualquer outro segmento só é possível se as pessoas envolvidas estão convencidas ou

acreditam plenamente nas suas vantagens.

É importante ressaltar que os conceitos gerais de qualidade na prática das

investigações não é uma nova revelação aos cientistas (Mathur, 2000). O que talvez seja novo

e polêmico é o fato de integrar a qualidade intrínseca dos processos de pesquisa com funções

de gestão do sistema de gestão da qualidade, identificando a solidez do trabalho. Isto pode

levar os pesquisadores a pensarem que as práticas e os métodos científicos hoje utilizados e já

existentes são suficientes e que as despesas gerais para implantação de um Sistema da

Qualidade levariam a uma perda significativa de tempo de pesquisa.

Por fim, é importante destacar que no caso do Sistema BPL, os princípios da norma

são diretrizes ao invés de regras e que têm como objetivo garantir a qualidade e validade dos

dados gerados nos ensaios. Seu objetivo maior, no entanto, é facilitar a aceitação dos dados,

tanto a nível nacional quanto internacional no âmbito de seus processos mas as autoridades

terão de avaliar a necessidade intrínseca de interpretação durante a aplicação (Brunetti, 2002).

Além disso, o sistema BPL é um processo dinâmico que exige a melhoria contínua em relação

à evolução tanto a nível técnico / científico, quanto operacional. Consideramos ser este o

principal aprendizado neste trabalho, pois muitas dificuldades e as possíveis interpretações

Page 53: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

52

devem ser consideradas durante a aplicação dos princípios BPL e a experiência dos envolvidos

com certeza foi reforçada durante a realização do mesmo.

Apesar de não termos implementado o Sistema BPL de maneira global, melhorias no

Laboratório LIP foram implementadas e agora tanto a Chefia quanto a equipe que se envolveu

neste projeto já é capaz de suscitar uma iniciativa como esta e afirmar que a implantação é

completamente viável e benéfica.

Page 54: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

53

IX PERSPECTIVAS DE ESTUDO

Sugerimos como propostas de estudo que o Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz tenha

funcionários direcionados para a implantação de sistemas de gestão da qualidade e que

capacite uma equipe de pessoas como auditores de modo que possam contribuir para a

adequação das rotinas dos Laboratórios ainda que a finalidade não seja a certificação. Ampliar

a gestão a outros projetos de pesquisa inicialmente pode ser uma boa iniciativa, bem como

trabalhar para a modificação da visão atual dos gestores sobre a importância de um processo

como este.

Page 55: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

54

X CONCLUSÃO

Concluímos que a implantação do Sistema de Qualidade BPL aplicado no Laboratório

de Imunoparasitologia LIP da Fundação Oswaldo Cruz – Bahia é viável em relação aos

aspectos econômico e estrutural mas depende da geração de recursos humanos através da

absorção de pessoas e/ou capacitação dos existentes. Além disto,o processo de implantação

gerou impactos positivos no desenvolvimento do estudo e na equipe envolvida.

Page 56: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

55

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Abad X, Bosch A, Navarro C. Implementation of Good Laboratory Practice in a University Research Unit. Quality Assurance Journal 9: 304-11, 2005.

2. ABNT NBR ISO/IEC 17025:2005. Requisitos gerais para a competência de laboratórios de ensaio e calibração. Rio de Janeiro: 2005.

3. ABNT NBR ISO 9001:2008. Sistema de Gestão da Qualidade – Requisitos Gerais.

4. Albutt KJ. An accredited laboratory’s view of customer expecctations. Accredidation and Quality Assurance 3: 279-80, 1998.

5. Almeida JS, Pires AC. Acreditação: Vantagens e dificuldades da implementação de um Sistema da Qualidade em um laboratório de ensaio e /ou calibração. Revista Portuguesa de Química 34-9, 2006.

6. Andrade FF. O método de melhorias PDCA. (Dissertação de mestrado). São Paulo: Universidade de São Paulo, 2003.

7. Brasil 2001. Critérios para a habilitação de laboratórios segundo os princípios das boas práticas de laboratório (BPL): revisão 00 procedimento GGLAS 02/BPL. 1ª ed. Brasília, 2001b

8. Brasil 2006. Questionário Questionário sobre sistema de qualidade. Disponível em: <URL:www.anvisa.gov.br/reblas/lacens/.../06_sistema_qualidade.xls>. Acesso em: 22 de outubro de 2010

9. Benoliel M J. Step-by-step Implementation of a Quality System in the Laboratory. Trends Analytical Chemistry 18: 632-8, 1999.

10. Bordini M E B. Implantação de um sistema de gestão da qualidade em laboratórios de pesquisa em saúde: planejamento, viabilidade e impacto do processo de implantação sobre indicadores selecionados. Dissertação (Mestrado em Ciências). São Paulo: Universidade Federal de São Paulo, 2009.

11. Brunetti M M. Critical aspects in the application of the principles of good laboratory practice (GLP). Annali dell Istitute Superiore di Sanita 38: 41-5, 2002.

12. Brunetti H, Caroli S, Clausing P, Doherty B, Edelmann A, Hede R, Helder T. Analisi critica del Decreto 5 agosto 1999, disposiozioni relative all’ispezione e verifica della buona pratica di laboratorio in recepimento delle Direttive 1999/11/CE e 1999/12/CE. Cron Farm 43: 29-35, 2000.

13. Cammann K, Kleibohmer W. Need for quality management in research and development. Accreditation Quality Assurance 3: 403-5, 1998.

14. Cavalcanti M de P, Silva P dos S, Brito M E F, Filho S P B. Gestão da qualidade: implementação no serviço de referência em leishmanioses de Pernambuco-Brasil. Revista de Patologia Tropical 39: 151-6, 2010.

15. Fiocruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Projeto de implantação de sistemas de gestão da qualidade. Salvador, 2009.

16. Fiocruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Manual de organização e gestão da qualidade. Salvador, 2010.

Page 57: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

56

17. Fukutani K F. Pesquisa de prevalência de leishmaniose em doadores de sangue

assintomáticos na cidade de Salvador Dissertação (mestrado). Universidade Federal da Bahia,

Salvador, 2011.

18. Greenfield D, Braithwaite J. Health sector accreditation research: a systematic review. International Journal for Quality in Health Care 20: 172-83, 2008.

19. INMETRO, 2009. Norma NIT-DICLA N° 035. Princípios das boas práticas de laboratório – BPL. Julho 2009. Disponível no site: <http://www.inmetro.gov.br/>. Acesso em: 18 de maio de 2011.

20. ________. Norma NIT DICLA Nº 036. Papel e responsabilidade do diretor de estudo em estudos BPL. Julho 2009. Disponível no site: <http://www.inmetro.gov.br/>. Acesso em: 18 de maio de 2011

21. ________. Norma NIT DICLA Nº 039. O Papel e responsabilidades do patrocinador na aplicação dos princípios BPL. Julho 2009. Disponível no site: <http://www.inmetro.gov.br/>. Acesso em: 18 de maio de 2011

22. ________. Norma NIT DICLA Nº 043. Aplicação dos princípios de BPL à organização e ao gerenciamento de estudos em múltiplas localidades (Multi-site). Fevereiro 2010. Disponível no site: <http://www.inmetro.gov.br/>. Acesso em: 18 de maio de 2011

23. Mathur-De-Vré. Approach to Quality System in Research and Development. Accredidation Quality Assurance 2: 63-8, 1997.

24. ________. The scope and limitations of QA system in research. Accredidation Quality Assurance 5: 3-10, 2000.

25. Mendes ME. Avaliação da implantação de um sistema de qualidade em um laboratório clínico público Tese (doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo, 1998.

26. Namiki H, Shigeta T, Ino Y, Kimura K, Inaba K, Kawasaki S, Yasuhide K, Imada S. Test Article Analyses in Compliance with Good Laboratory Practice in Japan: Circumstances and Changes. Quality Assurance Journal 11: 44-52, 2007.

27. OECD. The OECD Principles of good laboratory practice. 1998. Disponível em URL: <www.oecd.org>. Acesso em: 23 de julho 2011

28. Oliveira O J. Gestão da Qualidade: tópicos avançados. São Paulo: Pioneira Thomson Learning, 2004. p. 21.

29. Presot I M, Silva A B M. Sistema de gestão da qualidade laboratorial e biossegurança. Minas Gerais, 2006.

30. Robins M M, Scarll SJ, Key PE. Quality assurance in research laboratories. Accredidation Quality Assurance 11: 214-23, 2006.

31. Schlatter PR, Bordin R, Matte US. Perspectiva estratégica em gestão na área da saúde. Revista do HCPA 26: 24-31, 2006.

32. Souza R. Metodologia para desenvolvimento e implantação de sistemas de gestão da qualidade em empresas construtoras de pequeno e médio porte Tese (doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo, 1997.

33. Visschedijk M, Hendriks R, Nuyts Katrien. How to Set Up and Manage Quality Control and

Page 58: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

57

Quality Assurance. Quality Assurance Journal, 9, 95-107, 2005.

34. WHO, Word Health Organization. Guidance on developing quality and safety strategies with a health system approach. Disponível em: <http://www.euro.who.int/Document/E91317.pdf>. Acesso em 22 de agosto de 2011

35. WHO. Word Health Organization. Good laboratory practice (GLP): quality practices for regulated non-clinical research and development. 2 ed., 2009.

Page 59: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

58

ANEXO

Anexo 1. Parecer final de aprovação do Comitê de Ética em Pesquisa - CEP

Page 60: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

59

APENDICES

Apêndice 1. Termo de Consentimento Livre e Esclarecido – TCLE

Apêndice 2. Questionário para avaliação da percepção de pesquisadores e alunos acerca de Sistema

da Qualidade

Apêndice 3. Plano de Estudo – Projeto Leishmaniose

Apêndice 4. Questionário de diagnóstico do nível de adequação do Laboratório aos requisitos da

norma antes da implantação do Sistema de Boas Práticas de Laboratório – BPL

Apêndice 5. Lista de documentos elaborados necessários ao Estudo - Projeto Leishmaniose

Apêndice 6. Lista de equipamentos utilizados durante o Estudo - Projeto Leishmaniose

Apêndice 7. Questionário de diagnóstico do nível de adequação do Laboratório aos requisitos da

norma após a implantação do Sistema de Boas Práticas de Laboratório – BPL

Apêndice 8. Relatório Final do Estudo Lista - Projeto Leishmaniose

Page 61: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

60

ANEXO 1. Parecer final de aprovação do Comitê de Ética em Pesquisa - CEP

Page 62: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

61

APÊNDICE 1. Termo de Consentimento Livre e Esclarecido – TCLE

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO

Você está sendo convidado a participar do estudo chamado: “Implantação de um sistema da qualidade em

um laboratório de pesquisa público: estudo da viabilidade e impactos”, que será realizado no Centro de

Pesquisa Gonçalo Moniz – FIOCRUZ-BA. A sua participação é totalmente voluntária e a sua permissão para

participar do estudo pode ser retirada a qualquer momento, não resultando em punições.

A finalidade de um laboratório de pesquisa é produzir trabalhos de pesquisa e serviços com qualidade e

eficiência, nos mais altos padrões, atendendo de forma consistente, os requisitos dos protocolos de cada

experimento ou pesquisa. Para que estes ideais sejam alcançados, alguns passos devem ser seguidos, tais

como realizar experimentos de excelente qualidade assegurados pelo rigoroso cumprimento dos requisitos das

boas práticas de laboratório, possuir um quadro de funcionários envolvido, comprometido e motivado em todos

os níveis do laboratório, implementar, controlar e manter um sistema da qualidade baseado nos requisitos

exigidos pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária - ANVISA, Ministério da Saúde e demais normas

reguladoras específicas.

Um dos objetivos desse trabalho é avaliar a percepção de pesquisadores e alunos de pós graduação do

CPqGM acerca de Sistema de Gestão da Qualidade. Para tanto será utilizado um questionário não

necessariamente identificado e desta forma, a sua identidade será mantida em segredo e nenhum outro grupo

terá acesso às informações coletadas.

Os registros da sua participação no estudo serão mantidos confidencialmente, sendo do conhecimento apenas

do próprio autor e do orientador do projeto. A sua anuência sobre a participação no estudo implica na permissão

para aplicar o questionário em anexo. Também queremos que você concorde com a publicação dos resultados

coletados, sempre seguindo os aspectos éticos determinados na resolução 196/96.

A sua participação no estudo poderá trazer benefícios futuros na medida em que auxiliará na elaboração de um

trabalho de conscientização das pessoas acerca do tema em questão e na elaboração de propostas mais

consistente e condizente com as necessidades relativas ao assunto.

Caso consinta com a participação no estudo, você deverá assinar uma cópia do presente termo.

Você teve todas as explicações sobre o projeto e receberá uma cópia deste termo de consentimento livre e

esclarecido. Esse estudo será desenvolvido na FIOCRUZ, instituição pública brasileira.

Assinatura do responsável ______________________________________________Data ___/___/___

Nome em letras de forma _____________________________________________________________

Contato dos pesquisadores responsáveis:

Drª Camila Indiani de Oliveira – Orientadora do projeto – e-mail: [email protected] / Fone (71)

3176-2211 e Hilda Carolina de Jesus Rios Fraga – Aluna do Programa de Pós Graduação em Ciências da

Saúde da Faculdade de Medicina da Universidade Federal da Bahia – autora do projeto. e-mail:

[email protected]

Page 63: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

62

APÊNDICE 2. Questionário para avaliação da percepção de pesquisadores e alunos acerca de Sistema da Qualidade

AVALIAÇÃO DA PERCEPÇÃO DOS PESQUISADORES e ALUNOS ACERCA DE SISTEMA DA QUALIDADE

Laboratório: ( ) Pesquisador ( ) Aluno de Pós Graduação Data: Nome (opcional):

1. O que é Qualidade na sua percepção?

2. Cite de que forma ou em que situação, a Qualidade pode ser identificada ou aplicada no

desenvolvimento do seu trabalho no CPqGM.

3. Há quanto tempo você pratica/utiliza ferramentas da Qualidade no desenvolvimento da sua

pesquisa?

( ) Há algum tempo, antes mesmo de entrar no CPqGM

( ) Comecei a utilizar as ferramentas da Qualidade após entrar no CPqGM

( ) Nunca utilizei ferramentas da Qualidade.

4. Se tivesse que dar uma pontuação ao grau de importância que um Sistema da Qualidade tem no seu

trabalho, qual seria?

( ) 0 – Não tem importância

( ) 1 a 3 – Pode até ser importante, mas não faz falta no meu trabalho

( ) 4 a 7 - É importante, mas não sei como implementar

( ) 8 a 10 – É muito importante para o bom andamento e resultados do trabalho

Page 64: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

63

5. Você já foi impedido de realizar algum trabalho/publicação por não ter um Sistema da Qualidade

implementado?

( ) Sim ( ) Não

6. Você já participou de alguma capacitação em Qualidade?

( ) Sim ( ) Não

Qual?______________________________________________________________________

7. Você tem conhecimento sobre como se dá o processo de implantação de um Sistema da Qualidade?

( ) Sim ( ) Não

8. Como foi adquirido o conhecimento referente à pergunta 7?

( ) Curso / palestra promovida pela Fiocruz

( ) Curso / palestra promovida por outra Instituição

( ) Outro:__________________________________________

( ) Não se aplica

9. Você já participou de algum evento / curso sobre Qualidade realizado na Fiocruz?

( ) Sim ( ) Não

10. Você tem vontade de participar de curso / palestra / treinamento na área de Qualidade?

( ) Sim ( ) Não

Muito Obrigada!

Page 65: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

64

APÊNDICE 3. Plano de Estudo – Projeto Leishmaniose

PLANO DE ESTUDO

Patrocinador Instalação

de Teste

Gerente da

Instalação de Teste

Garantia da

Qualidade Código do Estudo

Camila Indiani

de Oliveira LIP - Laboratório de

Imunoparasitologia Aldina Barral Maria Julia PE.13.001

DIRETOR DE ESTUDO

Camila Indiani de Oliveira

PESQUISADOR PRINCIPAL

Kiyoshi Ferreira Fukutani

1. TITULO DESCRITIVO

Pesquisa de prevalência de leishmaniose em doadores de sangue assintomáticos na cidade de Salvador

2. PROPÓSITO DO ESTUDO

Avaliar a prevalência da leishmaniose em doadores de sangue assintomáticos e direcionar ações de

saúde pública necessárias à sua prevenção. Este estudo propõe avaliar a presença de anticorpos na

população de doadores de sangue da Hemorrede pública estadual. Para tanto, serão pesquisados cerca

de 1800 doadores, os quais serão avaliados por ELISA para a presença de sorologia positiva anti-

Leishmania. Em paralelo, faremos a avaliação da presença de DNA do parasita por meio de PCR. Nossos

resultados permitirão, caso necessário, propor a adoção de medidas de triagem laboratorial na

população de doadores de sangue a partir dos resultados encontrados.

As Leishmanioses, doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania são um complexo de sinais

clínicos que variam desde brandos até fatais. Esta doença afeta cerca de dois milhões de pessoas em

praticamente todos os continentes, com exceção da Oceania, sendo endêmica em 88 países (na

Américas do Sul e Central, África e Ásia). De acordo com a Organização Mundial de Saúde,

aproximadamente 350 milhões de pessoas em todo o planeta vivem sob risco de infecção, 12 milhões

delas estão infectadas e, a cada ano, cerca de 1,5 a 2 milhões de novos casos surgem, causando 57 mil

mortes anualmente, sendo considerada a segunda doença mais importante causada por protozoários

(WORLD HEALTH ORGANIZATION, 2007).

No Brasil, as Leishmanioses eram consideradas uma endemia focal e rural até a década de 80, quando

ocorreu uma expansão para regiões peri-urbanas e urbanas. Revelando uma maior incidência na região

Nordeste, somando 92% dos casos, sendo 66% destes na Bahia, Maranhão, Ceará e Piauí. Atualmente,

há relatos da doença em todas as regiões do país (SECRETARIA DE VIGILÂNCIA EM SAÚDE / MS, 2001;

2003; 2005; 2007), afetando em 80% dos casos crianças com menos de 10 anos, podendo levar a óbito

em 10% desses pacientes, quando não se institui o tratamento adequado (GONTIJO & MELO, 2004).

3. NATUREZA DO ESTUDO

Page 66: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

65

Biológico

4. IDENTIFICAÇÃO DA SUBSTÂNCIA TESTE

Sangue humano

5. IDENTIFICAÇÃO DA SUBSTÂNCIA DE REFERÊNCIA

Sangue humano positivo e/ou negativo para Leishmania

6. PROJETO EXPERIMENTAL 6.1 Delineamento do Estudo

Trata-se de um estudo observacional, transversal e descritivo. A amostragem será não-casual, de

conveniência.

6.2 Cronologia do Estudo Fase Inicial: - Obtenção do Consentimento Livre e Esclarecido pelo doador - Coleta das amostras de sangue A fase inicial do estudo e apenas esta, ocorrerá na Unidade de Teste Hemoba.

Fase Intermediária: - Processamento das amostras para obtenção do soro e extração de DNA; - Realização dos ensaios de ELISA para determinar a presença de anticorpos anti-Leishmania e realização de PCR em tempo real para determinar a presença de DNA de Leishmania.

Fase Final:

- Análise de dados e confecção de relatório.

6.3 Metodologia - COLETA DE AMOSTRAS

Serão coletadas alíquotas de 5ml de sangue periférico, em anticoagulante EDTA de doadores de sangue.

Os componentes serão fracionados em 2 a 12 horas após a coleta para a obtenção do plasma e creme

leucocitário.

- ELISA Para quantificação dos anticorpos específicos para Leishmania, será adotado o protocolo de ELISA

descrito por Badaró e cols. (1986). O antígeno a ser utilizado é um antígeno solúvel, obtido de

homogeneizado de Leishmania, cepa isolada de paciente com leishmaniose visceral, já caracterizada por

anticorpos monoclonais e por isoenzimas como sendo Leishmania chagasi (cepa MHOM Ba 62), cedido

Page 67: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

66

pela Dra Aldina Barral (FIOCRUZ-BA). As placas serão sensibilizadas com o antígeno por um pernoite.

Após lavagens, serão colocadas as amostras dos soros diluídos 1:100. Uma amostra será considerada

positiva, quando a OD for >média + 3DP da absorbância obtida dos soros de indivíduos sem exposição

prévia a leishmania.

- PCR em tempo real

Para a reação de PCR em tempo real serão utilizados iniciadores desenhados pelo programa Primer Express (Applied Biosystems, EUA), com base no gene G6PD (Glicose-6-fosfato deshidrogenase), de cópia única. São eles: G6PD Fwd – 5’-CCCGAGGGCAGCACTTG-3’ e G6PD Rev 3’-CCACCGGTCGTTGTTGATG-5’. A curva padrão para a quantificação dos parasitas será construída por meio do número de parasitas presentes em uma determinada concentração de DNA, diluída seriadamente a partir de um estoque. A especificidade dos iniciadores já foi testada e apresenta apenas

um pico na curva de dissociação.

6.4 Métodos de Referência

- Obtenção de plasma a partir de soro humano - BARKER. KATHY. Na Bancada. Manual De Iniciação

Científica Em Laboratórios. ARTMED. Primeira Edição 2002.

- Técnica de Extração de DNA, segundo as instruções dos fornecedores do kit Mini Spin Kit (Illustra/ GE

Healthcare código 28-9042-64).

- Cultivo de Leishmania segundo segundo Badaró R, Reed SG, Barral A, Orge G, Jones TC. Evaluation of

the micro enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for antibodies in American visceral

leishmaniasis: antigen selection for detection of infection-specific responses. Am J Trop Med

Hyg. 1986 35:72-8.

- Técnica de obtenção de Antígeno Solúvel de Leishmania segundo S. Iborra, J. Carrión, C. Anderson, C.

Alonso, D. Sacks, and M. Soto, “Vaccination with the Leishmania infantum acidic ribosomal P0

protein plus CpG oligodeoxynucleotides induces protection against cutaneous leishmaniasis in

C57BL/6 mice but does not prevent progressive disease in BALB/c mice,” Infect. Immun. 2005 73:

5842–5852.

- Técnica de quantificacão de proteína, segundo as instruções dos fornecedores do kit Micro BCA

(Promega) - Smith, P.K., et al. (1985). Anal. Biochem. 150, 76-85.

- Técnica de ELISA, segundo Badaró R, Reed SG, Barral A, Orge G, Jones TC. Evaluation of the micro

enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for antibodies in American visceral leishmaniasis:

antigen selection for detection of infection-specific responses.

- Técnica de PCR em tempo real segundo T. Castilho, L.M. Camargo, D. McMahon-Pratt, J. Shaw, L.

Floeter-Winter. A Real-Time Polymerase Chain Reaction Assay for the Identification and Quantification

of American Leishmania Species on the Basis of Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase .Am J Trop Med

Hyg 2008 78: 122-132

Page 68: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

67

6.5 Métodos estatísticos A casuística será composta por doadores voluntários de sangue, adultos, recebidos na Fundação de

Hematologia e Hemoterapia da Bahia (HEMOBA). Para se estimar uma prevalência de 9%, com um

intervalo de confiança de 95%, correspondendo a uma precisão de 15% (I.C. 95%: 7,65 a 10,35) será

necessária uma amostra de pelo menos 1.723 doadores. Neste estudo serão examinadas 1.800

amostras.

6.6 Caracterização do sistema teste

Os sistemas testes utilizados nesse estudo são os equipamentos Spectramax 190 e ABI 7500”:

Spectramax 190: O SpectraMax® 190 é um espectrofotômetro ideal para aplicações cientificas, inclusive

para quantificação de ácidos nucleicos. Para soluções e placas de 96 poços. Possui um sistema de

normalização de absorbância, deixando os resultados mais confiáveis.

ABI 7500: É aplicado para analise de expressão gênica (quantificação de DNA de patógenos,

diferenciação de genótipos e analises de concentração de ácidos nucléicos).

6.7 Justificativa para seleção do sistema teste

Para a detecção de DNA de Leishmania no sangue de doadores do HEMOBA, optamos pela técnica de

PCR em tempo real. Esta técnica permite a quantificação de parasitas em uma determinada amostras

e,como tal, já foi empregada em diversos estudos de detecção e diagnóstico de Leishmania tais como:

Castilho et al. 2008. Para a realização do ensaio de PCR em tempo real, é necessário um equipamento

capaz de fazer a detecção em tempo real do alvo de DNA amplificado. Assim, optamos pelo

equipamentoABI 7500 Real Time PCR System pois é que dispomos no nosso laboratório. Para a

realização do ensaio de ELISA, é necessário um espectrofotômetro capaz de ler placas de 96 poços.

Optamos pelo Spectramax 190 da Molecular Devices por ser um equipamento comumente utilizado

para esta técnica e por ser o equipamento disponível no laboratório.

7. PROCEDIMENTOS OPERACIONAIS PADRÃO UTILIZADOS NO ESTUDO

Número Nome Status de revisão

VDP.13.005 POP Extração de DNA de sangue total 00

VDP.13.006 POP Obtenção de plasma 00

VDP.13.007 POP de antígeno solúvel de Leishmania - SLA 00

VDP.13.008 POP Cultivo de Leishmania 00

Page 69: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

68

VDP.13.009 POP Coleta de amostras de sangue 00

VDP.13.010 POP Quantificação de proteína 00

VDP.13.011 POP ELISA indireto para detecção de IgG 0

VDP.13.012 POP Técnica de PCR em tempo real 00

VDP.13.013 POP Eletroforese em gel 00

VDP.13.014 POP Quantificação de ácidos nucleicos 00

VDP.13.015 POP Utilização do Leitor de ELISA 00

VDP.13.016 POP Utilização do SCANWASHER 300 00

VDP.13.017 Tabela de controle de calibração e utilização de

equipamentos

00

VDP.13.018 POP Controle e armazenamento de reagentes de

uso comum

00

VDP.13.016 POP Utilização de microscópio óptico 00

VDP.13.016 POP Utilização de centrífuga 00

VDP.13.016 POP Utilização de balança analítica 00

8. EQUIPE DE TRABALHO

8.1 Diretor do Estudo:

Camila Indiani de Oliveira

Fases do Estudo delegadas ao Diretor do Estudo

- Treinamento dos colaboradores nas técnicas experimentais utilizadas;

- Acompanhamento do desenvolvimento do projeto;

- Disponibilização de materiais necessários à execução do projeto;

- Aprovação da documentação (POPs e demais) elaborada para o desenvolvimento do projeto.

8.2 Pesquisador Principal:

Kiyoshi Ferreira Fukutani

Page 70: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

69

Fases do Estudo delegadas ao Pesquisador Principal:

- Coleta do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido

- Coleta e envio das amostras de sangue;

- Processamento das amostras de sangue;

- Realização das técnicas de processamento das amostras e amplificação por PCR em tempo real.

9. UNIDADES DE TESTES – NOME E ENDEREÇOS

LIP – Laboratório de Imunoparasitologia

Rua Waldemar Falcão, 121 – Candeal - CEP 40296-710 / Salvador-BA

HEMOBA - Fundação de Hemocentro e Hemoterapia da Bahia

Avenida Vasco da Gama, 1 - Acupe, Salvador - (0xx)71 3116-5600

10. CRONOLOGIA DO ESTUDO

Data do Fim Prevista - Março de 2011

11. CRONOLOGIA DOS ENSAIOS

Data do Fim Prevista - Fevereiro de 2011

12. ARQUIVAMENTO DOS DADOS

Os dados do estudo, bem como as amostras, os sistemas-testes e de referência serão armazenados no

Laboratório de Imunoparasitologia - LIP. Os dados escritos como Plano, POPs e Relatórios serão

arquivados por um período de 05 anos sob a responsabilidade do Diretor de Estudo.

13. RESPONSÁVEL PELOS DOCS BPL

Camila Indiani de Oliveira

14. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Page 71: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

70

- Costa C. H., Stewart J. M., Gomes R. B., Garcez L. M., Ramos P. K., Bozza M., Satoskar A., Dissanayake

S., Santos R. S., Silva M. R., Shaw J. J., David J. R. and Maguire J. H. (2002) Asymptomatic human carriers

of Leishmania chagasi. Am J Trop Med Hyg 66, 334-7.

- de Oliveira Camera P., Junger J., do Espirito Santo Silva Pires F., Mattos M., Oliveira-Neto M. P.,

Fernandes O. and Pirmez C. (2006) Haematogenous dissemination of Leishmania (Viannia) braziliensis in

human American tegumentary leishmaniasis. Trans R Soc Trop Med Hyg 100, 1112-7.

- Grogl M., Daugirda J. L., Hoover D. L., Magill A. J. and Berman J. D. (1993) Survivability and infectivity of

viscerotropic Leishmania tropica from Operation Desert Storm participants in human blood products

maintained under blood bank conditions. Am J Trop Med Hyg 49, 308-15.

- Guevara P., Ramirez J. L., Rojas E., Scorza J. V., Gonzalez N. and Anez N. (1993) Leishmania braziliensis

in blood 30 years after cure. Lancet 341, 1341.

- Guevara P., Rojas E., Gonzalez N., Scorza J. V., Anez N., Valera M. and Ramirez J. L. (1994) Presence of

Leishmania braziliensis in blood samples from cured patients or at different stages of immunotherapy.

Clin Diagn Lab Immunol 1, 385-9.

- le Fichoux Y., Quaranta J. F., Aufeuvre J. P., Lelievre A., Marty P., Suffia I., Rousseau D. and Kubar J.

(1999) Occurrence of Leishmania infantum parasitemia in asymptomatic blood donors living in an area

of endemicity in southern France. J Clin Microbiol 37, 1953-7.

- Otero A. C., da Silva V. O., Luz K. G., Palatnik M., Pirmez C., Fernandes O. and Palatnik de Sousa C. B.

(2000) Short report: occurrence of Leishmania donovani DNA in donated blood from seroreactive

Brazilian blood donors. Am J Trop Med Hyg 62, 128-31.

- Riera C., Fisa R., Udina M., Gallego M. and Portus M. (2004) Detection of Leishmania infantum cryptic

infection in asymptomatic blood donors living in an endemic area (Eivissa, Balearic Islands, Spain) by

different diagnostic methods. Trans R Soc Trop Med Hyg 98, 102-10.

Camila Indiani de Oliveira Salvador, 10 de janeiro de 2010

Diretora de Estudo

Page 72: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

71

APÊNDICE 4. Questionário de diagnóstico do nível de adequação do laboratório aos requisitos da norma antes da implantação do Sistema BPL

QUESTIONÁRIO DE DIAGNÓSTICO DO NÍVEL DE ADEQUAÇÃO DO

LABORATÓRIO AOS REQUISITOS DA NORMA

Nome do Laboratório: Laboratório de Imunoparasitologia - LIP Endereço: Rua Waldemar Falcão, 121 - Candeal Telefone: (71) 3176-2207 Responsável pelo Laboratório: Aldina Barral Responsável pelo Preenchimento: Camila Indiani de Oliveira Data do Preenchimento: Janeiro /2010

(*) Cada item de cada pergunta, que atende, corresponde a 20% de resultado descritivo e quantitativo.

REQUISITOS GERENCIAIS e TECNICOS

Pessoal 1 = Atende

2 = Não Atende

O laboratório tem definido pessoal tais como Diretor de Estudos, Gerente de Instalação, Pesquisador e demais, para realização das Boas Práticas de Laboratório?

x

O pessoal envolvido no estudo é capacitado segundo os princípios das BPL?

x

Existe disponível no laboratório um procedimento que define a sistemática de seleção de pessoal, identificação de necessidade de treinamento, avaliação e cronograma de treinamentos?

x

Os funcionários do laboratório dispõem e utilizam de EPI's e EPC's adequadas para os tipos de análise que realizam e foram treinados em procedimentos e/ou manuais de Biossegurança para preservar sua integridade física?

x

No laboratório se realiza treinamento de pessoal, mesmo que seja de maneira não procedimentada e faz registro destes treinamentos?

x

RESULTADO EM PERCENTAGEM (%)

40

Ambiente de Trabalho / Instalações 1 = Atende

2 = Não Atende

O laboratório possui dimensão, construção e localização adequadas para os tipos de atividades que realiza?

x

O laboratório possui um certo grau de separação entre as diferentes atividades para garantir que cada estudo seja conduzido adequadamente?

x

Existem áreas ou salas utilizadas para armazenamento de suprimentos separadas das demais áreas de modo que seja protegido contra infestação, contaminação ou deterioração?

x

O manuseio e descarte dos resíduos são realizados de maneira a não colocar em risco a integridade do estudo?

x

Existem mapas de risco ou qualquer outra sinalização que facilita a identificação do nível de risco da área e a saída das áreas em caso de emergência?

x

RESULTADO EM PERCENTAGEM (%)

20

Page 73: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

72

Controle de Dados Brutos 1 = Atende

2 = Não Atende

Existe sistemática de registro dos dados brutos gerados no Laboratório e estes são legíveis e controlados?

x

Os registros, cálculos e as transferências de dados são submetidos a verificação apropriadas de

maneira sistemática? x

Quando são utilizados sistemas computadorizados, existem POP para garantir que estes sistemas são mantidos de acordo com os Princípios das BPL?

x

São estabelecidos e implementados procedimentos para a proteção de dados em meio físico e eletrônico?

x

Os computadores e equipamentos automatizados são conservados, de forma a assegurar o funcionamento adequado, e estam em condições ambientais e operacionais necessárias para a manutenção da integridade dos dados de análises?

x

RESULTADO EM PERCENTAGEM (%)

20

Equipamentos, Materiais e Reagentes 1 = Atende

2 = Não Atende

No laboratório se disponibiliza equipamentos na quantidade e tipo adequados as suas necessidades?

x

É prática no laboratório se realizar periodicamente inspeções, manutenções e/ou calibrações mesmo que seja de forma não padronizada e programada em equipamentos utilizados no Estudo de acordo com POP?

x

Os equipamentos são identificados para assegurar a rastreabilidade?

x

Os produtos químicos, reagentes e soluções são rotulados para indicar identidade, data de validade e eventuais condições de armazenamento?

x

Existem procedimentos para garantir que os sistemas-testes, substâncias de referências, etc, são coletados e transportados à unidade teste em tempo hábil ao estudo?

x

RESULTADO EM PERCENTAGEM (%)

20

Sistema de Gestão 1 = Atende

2 = Não Atende

O laboratório possui política da qualidade (ou qualquer outra denominação) que define o escopo de serviço, o comprometimento do laboratório com as boas práticas profissionais, com a qualidade das análises e a conformidade e com o sistema de gestão da qualidade?

x

O laboratório possui um Plano de Estudos com definição de objetivos, instalação e pessoal para realização dos procedimentos?

x

Existe um manual da qualidade (ou qualquer outra denominação) que define a estrutura da documentação, cita os procedimentos e as diretrizes do laboratório para atendimento as requisitos da norma, as atribuições do pessoal gerência, bem como o escopo de trabalho?

x

O laboratório possui estrutura organizacional e gerencial definida, com especificação de responsabilidades?

x

Há um programa de Garantia da Qualidade responsável por fazer inspeções de Estudo, das instalações para assegurar que o Estudo está sendo executado de acordo com as BPL?

x

RESULTADO EM PERCENTAGEM (%)

20

Controle de Documentos 1 = Atende

2 = Não Atende

O laboratório tem uma estrutura de documentos que dão as diretrizes de como as atividades devem ser realizadas? Estes documentos contêm: identificação unívoca, título, responsável pela aprovação, paginação.

x

O laboratório possui procedimentos apropriados e tecnicamente válidos que definem as técnicas utilizadas no estudo BPL, disponibilizados aos envolvidos no processo?

x

Existe uma lista mestra (ou qualquer que seja a denominação) que evidencie o controle de x

Page 74: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

73

revisões, bem como o controle de distribuição de documentos?

Há um arquivo histórico de todos os Procedimentos Operacionais Padrão (POP) utilizados no Estudo?

x

Existe procedimentos da Garantia da Qualidade que assegure o planejamento, agenda, condução, documentação e relatórios das inspeções?

x

RESULTADO EM PERCENTAGEM (%)

zero

Aquisição 1 = Atende

2 = Não Atende

Existe uma sistemática definida em procedimento para seleção e compra de insumos e serviços que possam afetar a qualidade das análises?

x

Existe uma lista de fornecedores homologados (qualificados) de insumos e serviços que possam afetar a qualidade das análises, a saúde dos funcionários e integridade do meio ambiente?

x

Existem procedimentos de inspeção e quando aplicável realização de testes antes do uso de insumos e serviços que possam afetar a qualidade das análises, a saúde dos funcionários e integridade do meio ambiente?

x

Existem procedimentos para recebimento, armazenamento e gerenciamento de estoque de insumos considerados críticos que assegura a qualidade e disponibilidade destes insumos?

x

Os documentos que atestam a qualidade de insumos recebidos, bem como os certificados de que os fornecedores tem um sistema de gestão da qualidade implementada são solicitados e verificados por pessoal do Laboratório?

x

RESULTADO EM PERCENTAGEM (%)

20

Controle de Registros 1 = Atende

2 = Não Atende

É elaborado um Plano de Estudos antes de cada estudo (pesquisa) ser iniciado?

x

O laboratório estabelece e mantém procedimentos para identificar, coletar, indexar, acessar, arquivar, armazenar, manter e dispor os registros técnicos e da qualidade?

x

Os registros são legíveis, armazenados e preservados, por um período determinado, de tal forma que podem ser prontamente recuperados, em instalações que ofereçam ambiente adequado, prevenindo danos, deterioração ou perda?

x

Após o término do estudo, o Plano, o Relatório Final, os dados brutos e demais materiais são arquivados adequadamente?

x

Existe pessoal responsável pelo gerenciamento dos registros e arquivamento dos mesmos referentes aos protocolos de estudos?

x

RESULTADO EM PERCENTAGEM (%)

20

Desenvolvido com base no questionário da Anvisa e Normas NIT DICLA 035 – Princípios para Boas Práticas de Laboratório e NIT DICLA 043 – Aplicação dos Princípios de BPL à Organização e ao Gerenciamento de Estudos Multi- Site

Referência: http://www.inmetro.gov.br/monitoramento_BPL/documentos_aplic.asp

Page 75: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

74

APÊNDICE 5. Lista de documentos necessários ao Estudo – Projeto Leishmaniose

LISTA DE DOCUMENTOS NECESSÁRIOS AO ESTUDO

Nome do Laboratório: Laboratório de Imunoparasitologia - LIP Endereço: Rua Waldemar Falcão Responsável pelo Laboratório: Aldina Barral Projeto: Pesquisa de prevalência de leishmaniose em doadores de sangue assintomáticos na cidade de Salvador

Número Nome Status de revisão

PE.13.001 Plano de Estudos 00

RFE.13.001 Relatório Final de Estudo 00

VDP.13.003 Matriz de Atribuições e Responsabilidades dos

envolvidos no Estudo

00

VDP.13.005 POP Extração de DNA de sangue total 00

VDP.13.006 POP Obtenção de plasma 00

VDP.13.007 POP de antígeno solúvel de Leishmania SLA 00

VDP.13.008 POP Cultivo de Leishmania 00

VDP.13.009 POP Coleta de amostras de sangue 00

VDP.13.010 POP Quantificação de proteína por micro BCA 00

VDP.13.011 POP Elisa indireto para detecção de IgG 00

VDP.13.012 POP Técnica de PCR real em tempo real 00

VDP.13.013 POP Eletroforese em gel 00

VDP.13.014 POP Quantificação de ácido nucleico 00

VDP.13.015 POP Utilização do leitor de ELISA 00

VDP.13.016 POP Utilização do SCANWASHER 300 00

Page 76: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

75

VDP.13.017 Tabela de controle de calibração e manutenção de

equipamentos

00

VDP.13.018 POP Controle e armazenamento de reagentes de

uso comum

00

VDP.13.019 POP Utilização de microscópio óptico 00

VDP.13.020 POP Utilização de centrífuga 00

VDP.13.021 POP Utilização de balança analítica 00

Page 77: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

76

APÊNDICE 6. Lista de equipamentos utilizados no Estudo – Projeto Leishmaniose

LISTA DE EQUIPAMENTOS UTILIZADOS NO ESTUDO

Nome do Laboratório: Laboratório de Imunoparasitologia - LIP Endereço: Rua Waldemar Falcão Responsável pelo Laboratório: Aldina Barral Projeto: Pesquisa de prevalência de leishmaniose em doadores de sangue assintomáticos na cidade de Salvador

Nome Patrimônio Marca Calibração/ Manutenção

Banho Seco Dry Bath T-CPqGM-5402 Isotemp 125D NR

Centrifuga Mini Spin T-CPqGM-527 Eppendorf NR

Centrífuga Refrigerada Sem patrimônio Eppendorf NR

Estufa Thermostatic T-CPqGM-1199 Isotemp 125D NR

Fluxo Laminar T-CPqGM-2937 Nuaire R

Leitor de Elisa T-CPqGM-872 Spectra Max 190 NR

Mesa Agitadora Orbital T-CPqGM-962 CT-145 NA

Microcentrífuga T-CPqGM-1209 MiniStar NR

Micropipeta Sem patrimônio LG-Technologic R

Microscópio Optico T-CPqGM-1319 Nikon NR

Nanodrop T-CPqGM-1292 Não Identificado NR

PCR Real Time System T-CPqGM-771 Applied Biosystems R

Skanwasher 300 T-CPqGM-1754 Skaton NR

Sonicador T-CPqGM-779 Sonifier 250 NR

Termociclador T-CPqGM-425 Eppendorf NR

Vortex T-CPqGM-878 VWR Genie 2 NA

NR: Não Realizado NA: Não Aplicável R: Realizado

Page 78: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

77

APÊNDICE 7. Questionário de diagnóstico do nível de adequação do laboratório

aos requisitos da norma após a implantação do Sistema BPL

QUESTIONÁRIO DE DIAGNÓSTICO DO NÍVEL DE ADEQUAÇÃO

DO LABORATÓRIO AOS REQUISITOS DA NORMA

Nome do Laboratório: Laboratório de Imunoparasitologia - LIP Endereço: Rua Waldemar Falcão, 121 - Candeal Telefone: (71) 3176-2207 Responsável pelo Laboratório: Aldina Barral Responsável pelo Preenchimento: Camila Indiani de Oliveira Data do Preenchimento: Março /2011

(*) Cada item de cada pergunta, que atende, corresponde a 20% de resultado descritivo e quantitativo.

REQUISITOS GERENCIAIS e TECNICOS

Pessoal 1 = Atende

2 = Não Atende

O laboratório tem definido pessoal tais como Diretor de Estudos, Gerente de Instalação, Pesquisador e demais, para realização das Boas Práticas de Laboratório?

x

O pessoal envolvido no estudo é capacitado segundo os princípios das BPL?

x

Existe disponível no laboratório um procedimento que define a sistemática de seleção de pessoal, identificação de necessidade de treinamento, avaliação e cronograma de treinamentos?

x

Os funcionários do laboratório dispõem e utilizam de EPI's e EPC's adequadas para os tipos de análise que realizam e foram treinados em procedimentos e/ou manuais de Biossegurança para preservar sua integridade física?

x

No laboratório é realizado treinamento de pessoal, mesmo que seja de maneira não procedimentada e faz registro destes treinamentos?

x

RESULTADO EM PERCENTAGEM (%)

60

Ambiente de Trabalho / Instalações 1 = Atende

2 = Não Atende

O laboratório possui dimensão, construção e localização adequadas para os tipos de atividades que realiza?

x

O laboratório possui um certo grau de separação entre as diferentes atividades para garantir que cada estudo seja conduzido adequadamente?

x

Existem áreas ou salas utilizadas para armazenamento de suprimentos separadas das demais áreas de modo que seja protegido contra infestação, contaminação ou deterioração?

x

O manuseio e descarte dos resíduos são realizados de maneira a não colocar em risco a integridade do estudo?

x

Existem mapas de risco ou qualquer outra sinalização que facilita a identificação do nível de risco da área e a saída das áreas em caso de emergência?

x

RESULTADO EM PERCENTAGEM (%)

60

Page 79: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

78

Controle de Dados Brutos 1 = Atende

2 = Não Atende

Existe sistemática de registro dos dados brutos gerados no Laboratório e estes são legíveis e controlados?

x

Os registros, cálculos e as transferências de dados são submetidos a verificação apropriadas de

maneira sistemática? x

Quando são utilizados sistemas computadorizados, existem POP para garantir que estes sistemas são mantidos de acordo com os Princípios das BPL?

x

São estabelecidos e implementados procedimentos para a proteção de dados em meio físico e eletrônico?

x

Os computadores e equipamentos automatizados são conservados, de forma a assegurar o funcionamento adequado, e estam em condições ambientais e operacionais necessárias para a manutenção da integridade dos dados de análises?

x

RESULTADO EM PERCENTAGEM (%)

20

Equipamentos, Materiais e Reagentes 1 = Atende

2 = Não Atende

No laboratório se disponibiliza equipamentos na quantidade e tipo adequados as suas necessidades?

x

É prática no laboratório se realizar periodicamente inspeções, manutenções e/ou calibrações mesmo que seja de forma não padronizada e programada em equipamentos utilizados no Estudo de acordo com POP?

x

Os equipamentos são identificados para assegurar a rastreabilidade?

x

Os produtos químicos, reagentes e soluções são rotulados para indicar identidade, data de validade e eventuais condições de armazenamento?

x

Existem procedimentos para garantir que os sistemas-testes, substâncias de referências, etc, são coletados e transportados à unidade teste em tempo hábil ao estudo?

x

RESULTADO EM PERCENTAGEM (%)

80

Sistema de Gestão 1 = Atende

2 = Não Atende

O laboratório possui política da qualidade (ou qualquer outra denominação) que define o escopo de serviço, o comprometimento do laboratório com as boas práticas profissionais, com a qualidade das análises e a conformidade e com o sistema de gestão da qualidade?

x

O laboratório possui um Plano de Estudos com definição de objetivos, instalação e pessoal para realização dos procedimentos?

x

Existe um manual da qualidade (ou qualquer outra denominação) que define a estrutura da documentação, cita os procedimentos e as diretrizes do laboratório para atendimento as requisitos da norma, as atribuições do pessoal gerência, bem como o escopo de trabalho?

x

O laboratório possui estrutura organizacional e gerencial definida, com especificação de responsabilidades?

x

Há um programa de Garantia da Qualidade responsável por fazer inspeções de Estudo, das instalações para assegurar que o Estudo está sendo executado de acordo com as BPL?

x

RESULTADO EM PERCENTAGEM (%)

80

Controle de Documentos 1 = Atende

2 = Não Atende

O laboratório tem uma estrutura de documentos que dão as diretrizes de como as atividades devem ser realizadas? Estes documentos contêm: identificação unívoca, título, responsável pela aprovação, paginação.

x

O laboratório possui procedimentos apropriados e tecnicamente válidos que definem as técnicas utilizadas no estudo BPL, disponibilizados aos envolvidos no processo?

x

Page 80: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

79

Existe uma lista mestra (ou qualquer que seja a denominação) que evidencie o controle de revisões, bem como o controle de distribuição de documentos?

x

Há um arquivo histórico de todos os Procedimentos Operacionais Padrão (POP) utilizados no Estudo?

x

Existe procedimentos da Garantia da Qualidade que assegure o planejamento, agenda, condução, documentação e relatórios das inspeções?

x

RESULTADO EM PERCENTAGEM (%)

80

Aquisição 1 = Atende

2 = Não Atende

Existe uma sistemática definida em procedimento para seleção e compra de insumos e serviços que possam afetar a qualidade das análises?

x

Existe uma lista de fornecedores homologados (qualificados) de insumos e serviços que possam afetar a qualidade das análises, a saúde dos funcionários e integridade do meio ambiente?

x

Existem procedimentos de inspeção e quando aplicável realização de testes antes do uso de insumos e serviços que possam afetar a qualidade das análises, a saúde dos funcionários e integridade do meio ambiente?

x

Existem procedimentos para recebimento, armazenamento e gerenciamento de estoque de insumos considerados críticos que assegura a qualidade e disponibilidade destes insumos?

x

Os documentos que atestam a qualidade de insumos recebidos, bem como os certificados de que os fornecedores tem um sistema de gestão da qualidade implementada são solicitados e verificados por pessoal do Laboratório?

x

RESULTADO EM PERCENTAGEM (%)

40

Controle de Registros 1 = Atende

2 = Não Atende

É elaborado um Plano de Estudos antes de cada estudo (pesquisa) ser iniciado?

x

O laboratório estabelece e mantém procedimentos para identificar, coletar, indexar, acessar, arquivar, armazenar, manter e dispor os registros técnicos e da qualidade?

x

Os registros são legíveis, armazenados e preservados, por um período determinado, de tal forma que podem ser prontamente recuperados, em instalações que ofereçam ambiente adequado, prevenindo danos, deterioração ou perda?

x

Após o término do estudo, o Plano, o Relatório Final, os dados brutos e demais materiais são arquivados adequadamente?

x

Existe pessoal responsável pelo gerenciamento dos registros e arquivamento dos mesmos referentes aos protocolos de estudos?

x

RESULTADO EM PERCENTAGEM (%)

80

Desenvolvido com base no questionário da Anvisa e Normas NIT DICLA 035 – Princípios para Boas Práticas de Laboratório e NIT DICLA 043 – Aplicação dos Princípios de BPL à Organização e ao Gerenciamento de Estudos Multi- Site

Referência: http://www.inmetro.gov.br/monitoramento_BPL/documentos_aplic.asp

Page 81: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

80

APÊNDICE 8. Relatório Final do Estudo – Projeto Leishmaniose

RELATÓRIO FINAL DE ESTUDO

Patrocinador Instalação

de Teste

Gerente da Instalação

de Teste

Garantia da

Qualidade Código do Estudo

Camila Indiani

de Oliveira LIP - Laboratório de

Imunoparasitologia Aldina Barral Maria Julia PFE.13.001

DIRETOR DE ESTUDO

Camila Indiani de Oliveira

PESQUISADOR PRINCIPAL

Kiyoshi Ferreira Fukutani

1. TITULO DESCRITIVO

Pesquisa de prevalência de leishmaniose em doadores de sangue assintomáticos na cidade de Salvador

2. CRONOLOGIA DO ESTUDO

Início do Estudo

Início dos Ensaios

Final dos Ensaios

Auditoria do Estudo

Número do Registro

Janeiro / 2010

Janeiro / 2010 Fevereiro/2011 Não realizada N/A

3. DECLARAÇÃO DE CONFORMIDADE À BPL

Não informado

4. FASES CRÍTICAS DO ESTUDO

Não houve dificuldades na execução do projeto.

5. IDENTIFICAÇÃO DA SUBSTÂNCIA TESTE

Sangue humano

6. IDENTIFICAÇÃO DA SUBSTÂNCIA DE REFERÊNCIA

Sangue humano positivo e/ou negativo para Leishmania

7. METODOLOGIA

Page 82: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

81

7.1 Descrição

- COLETA DE AMOSTRAS

Serão coletadas alíquotas de 5ml de sangue periférico, em anticoagulante EDTA de doadores de sangue.

Os componentes serão fracionados em 2 a 12 horas após a coleta para a obtenção do plasma e creme

leucocitário.

- ELISA Para quantificação dos anticorpos específicos para Leishmania, será adotado o protocolo de ELISA

descrito por Badaró e cols. (1986). O antígeno a ser utilizado é um antígeno solúvel, obtido de

homogeneizado de Leishmania, cepa isolada de paciente com leishmaniose visceral, já caracterizada por

anticorpos monoclonais e por isoenzimas como sendo Leishmania chagasi (cepa MHOM Ba 62), cedido

pela Dra Aldina Barral (FIOCRUZ-BA). As placas serão sensibilizadas com o antígeno por um pernoite.

Após lavagens, serão colocadas as amostras dos soros diluídos 1:100. Uma amostra será considerada

positiva, quando a OD for >média + 3DP da absorbância obtida dos soros de indivíduos sem exposição

prévia a leishmania.

- PCR em tempo real

Para a reação de PCR em tempo real serão utilizados iniciadores desenhados pelo programa Primer Express (Applied Biosystems, EUA), com base no gene G6PD (Glicose-6-fosfato deshidrogenase), de cópia única. São eles: G6PD Fwd – 5’-CCCGAGGGCAGCACTTG-3’ e G6PD Rev 3’-CCACCGGTCGTTGTTGATG-5’. A curva padrão para a quantificação dos parasitas será construída por meio do número de parasitas presentes em uma determinada concentração de DNA, diluída seriadamente a partir de um estoque. A especificidade dos iniciadores já foi testada e apresenta apenas um pico na curva de dissociação. 7.2 Referência Normativa

- Obtenção de plasma a partir de soro humano - BARKER. KATHY. Na Bancada. Manual De Iniciação

Científica Em Laboratórios. ARTMED. Primeira Edição 2002.

- Técnica de Extração de DNA, segundo as instruções dos fornecedores do kit Mini Spin Kit (Illustra/ GE

Healthcare código 28-9042-64).

- Cultivo de Leishmania segundo segundo Badaró R, Reed SG, Barral A, Orge G, Jones TC. Evaluation of

the micro enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for antibodies in American visceral

leishmaniasis: antigen selection for detection of infection-specific responses. Am J Trop Med

Hyg. 1986 35:72-8.

- Técnica de obtenção de Antígeno Solúvel de Leishmania segundo S. Iborra, J. Carrión, C. Anderson, C.

Alonso, D. Sacks, and M. Soto, “Vaccination with the Leishmania infantum acidic ribosomal P0

protein plus CpG oligodeoxynucleotides induces protection against cutaneous leishmaniasis in

C57BL/6 mice but does not prevent progressive disease in BALB/c mice,” Infect. Immun. 2005 73:

5842–5852.

- Técnica de quantificacão de proteína, segundo as instruções dos fornecedores do kit Micro BCA

(Promega) - Smith, P.K., et al. (1985). Anal. Biochem. 150, 76-85.

Page 83: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

82

- Técnica de ELISA, segundo Badaró R, Reed SG, Barral A, Orge G, Jones TC. Evaluation of the micro

enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for antibodies in American visceral leishmaniasis:

antigen selection for detection of infection-specific responses.

- Técnica de PCR em tempo real segundo T. Castilho, L.M. Camargo, D. McMahon-Pratt, J. Shaw, L.

Floeter-Winter. A Real-Time Polymerase Chain Reaction Assay for the Identification and Quantification

of American Leishmania Species on the Basis of Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase .Am J Trop Med

Hyg 2008 78: 122-132

7.3 Métodos estatísticos A casuística será composta por doadores voluntários de sangue, adultos, recebidos na Fundação de

Hematologia e Hemoterapia da Bahia (HEMOBA). Para se estimar uma prevalência de 9%, com um

intervalo de confiança de 95%, correspondendo a uma precisão de 15% (I.C. 95%: 7,65 a 10,35) será

necessária uma amostra de pelo menos 1.723 doadores. Neste estudo serão examinadas 1.800

amostras.

7.4 Procedimentos operacionais padrão – POPs – utilizados no estudo

Número Nome Status de revisão

VDP.13.005 POP Extração de DNA 00

VDP.13.006 POP Obtenção de Plasma 00

VDP.13.007 POP de antígeno solúvel de Leishmania SLA 00

VDP.13.008 POP Cultivo de Leishmania 00

VDP.13.009 POP Coleta de Amostras 00

VDP.13.010 POP Quantificação de proteina 00

VDP.13.011 POP Elisa 00

VDP.13.012 POP PCR Real Time 00

VDP.13.013 POP Eletroforese em Gel 00

VDP.13.014 POP Quantificação de Ac. Nucleicos 00

VDP.13.015 POP Utilização do Leitor de ELISA 00

VDP.13.016 POP Utilização do SCANWASHER 300 00

Page 84: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

83

VDP.13.017 Tabela de Controle de Calibração e Manutenção de

Equipamentos do LIP

00

VDP.13.018 POP Controle e armazenamento de reagentes 00

VDP.13.019 POP Utilização de Microscópio Optico 00

VDP.13.020 POP Utilização de Centrífuga 00

VDP.13.021 POP Utilização de balança analítica 00

8. IDENTIFICAÇÃO DE INSUMOS E MATERIAIS

Reagente Marca Lotes Armazenamento

Ácido acético Isofar 40875 T.A.

Ácido Bórico USB 115004 T.A.

Acrilamida LGC Biotechnology 180509 T.A.

Água para injeção Sapp Flex 50356/1 T.A.

Álcool Etílico Isofar 100091 T.A.

Antibiótico Penicilina &

Streptomicina

Gibco 730853 Freezer

Anticorpo anti IgG humana Sigma Aldrich 085K6060 Geladeira

Bicarbonato de Sódio (NaHCO3) Vetec 706740 T.A.

Bis-acrilamida LGC Biotechnology 9374 T.A.

Blood genomicPrep Mini Spin Kit Illustra Ge Healthcare 373000 T.A.

BSA Sigma Aldrich 087K0691 Geladeira

Carbonato de Sódio (Na2CO3) Synth 95354 T.A.

Cloreto de Magnésio (MgCl2) Synth 96119 T.A.

EDTA Dinamica 9374 T.A.

Formaldeído Synth 108579 T.A.

Hidróxido de Sódio (NaOH) Sigma Aldrich 54H3487 T.A.

Meio Schneider LGC Biotechnology 271209 Geladeira

Micro Amp Optical 96 well

reaction plate

Applied Biosystems P29D9 QA53 T.A.

Micro Amp optical adhesive film Applied Biosystems 200912340 T.A.

Micro BCA Protein Assay Kit Thermo Scientific CK48589A T.A.

Page 85: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

84

Nitrato de Prata Cannabras N.I. T.A.

PCR Supermix Invitrogen 1329500 Freezer

Persulfato de amônio N.I. N.I. Freezer

Peso molecular Invitrogen 398064 Freezer

Rox Invitrogen 791871

Solução Isotônica de Cloreto de

Sódio

JP Industrias

Farmacêuticas

138909 T.A.

Soro Bovino Fetal Gibco 210120K Freezer

Substrato PMN (p-

nitrofenilfosfato)

Sigma Aldrich 085K8207 Geladeira

Syber Green Invitrogen 828847 Geladeira

Syber Green para coloração de

gel

Invitrogen 506471 Freezer

TEMED Amresco 2196A08 T.A.

TRIS-base USB 115164 T.A.

Tween 20 Sigma Aldrich 029K01856V T.A.

T.A – Temperatura Ambiente

9. IDENTIFICAÇÃO DOS EQUIPAMENTOS

Conforme documento VDP.13.017 em anexo.

10. APRESENTAÇÃO DE SUMÁRIO DE RESULTADOS

A leishmaniose é causada por protozoários do gênero Leishmania e constitui um grave problema de

saúde pública na Bahia. A transmissão do protozoário pela transfusão de sangue já foi relatada e existe a

possibilidade dos hemoderivados serem um potencial risco para a transmissão da doença. O presente

trabalho teve como objetivo avaliar positividade sorológica contra Leishmania e a presença deste

parasita no sangue periférico de doadores, na cidade de Salvador, BA. Para avaliar a soroprevalência de

leishmaniose em doadores de sangue, foram coletadas amostras de sangue periférico de 700 indivíduos,

no Hemocentro da Bahia (HEMOBA), de janeiro a setembro de 2010. As amostras foram processadas

para a obtenção de plasma e de DNA. A sorologia anti-Leishmania foi feita por ELISA, empregando

antígeno solúvel de Leishmania chagasi (SLA). A presença de parasitas foi determinada por PCR

quantitativo (qPCR). A população amostral foi composta por 74.5% de indivíduos masculinos, com

média de idade de 34 anos. A partir de uma curva ROC, empregando soros de pacientes com

Page 86: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA FACULDADE DE MEDICINA … · FACULDADE DE MEDICINA DA BAHIA . ... Fluxo operacional para o processo de reconhecimento em BPL Figura 4. Esquema orientativo

85

leishmaniose visceral e soros de pacientes residentes em área não endêmica, o ponto de corte para o

teste sorológico foi estabelecido em 0,0167 (DO em 405nm). A sorologia anti-Leishmania foi positiva em

5.4% (38/700) das amostras. Empregando o qPCR, foi possível determinar a presença de parasitas em

0.4% (3/700) amostras e, nestas, a quantificação foi inferior a 100 parasitas. Nossos resultados mostram

a prevalência de sorologia anti-Leishmania é de 5.4%, em doadores do HEMOBA, similar ao encontrado

em outras regiões endêmicas.

11. AVALIAÇÃO DOS RESULTADOS E CONCLUSÕES

A soro prevalência do anticorpo anti-Leishmania na população doadora de sangue do HEMOBA

é de 5.4%.

A reação de PCR quantitativa só foi capaz de detectar a presença de DNA de Leishmania em 3

amostras e, em todas elas, o número de cópias foi inferior a 100 parasitas.

12. CRONOGRAMA DE AUDITORIAS INTERNAS

Não foram realizadas auditorias internas no Estudo

13. ARQUIVAMENTO DOS DADOS

Todos os dados brutos do estudo - documentos, registros, desenhos, cadernos de laboratórios e quaisquer outras informações necessárias para garantir, assegurar e, estabelecer as condições de repetibilidade deste Estudo, estão arquivados no arquivo BPL, do Laboratório LIP, sob a guarda do Diretor do Estudo e sob a responsabilidade da Gerente da Instalação de Teste O arquivo se encontra no andar térreo do Pavilhão Zilton Andrade – Laboratório de Imunoparasitologia - LIP, situado na rua Waldemar Falcão, 121 – Candeal – Salvador/Bahia, Brasil. Dessa forma, se mantém a condição de confidencialidade e de integridade deste estudo que pertence

ao seu Patrocinador.

Salvador, 02 de março de 2011

Patrocinador Diretor de Estudo Gerente da

Instalação de Teste Pesquisador

Principal Garantia da Qualidade

Camila Indiani de Oliveira

Camila Indiani de Oliveira

Aldina Barral Kiyoshi Ferreira

Fukutani Maria Julia

Souza