UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MARINGAacute CENTRO DE CIEcircNCIAS AGRAacuteRIAS

NIacuteVEIS DE ARGININA DIGESTIacuteVEL PARA FEcircMEAS REPRODUTORAS DE FRANGOS DE CORTE E SUA

PROGEcircNIE

Autora Luciana Mordf Garcia de Souza da Silva Orientadora Profordf Dra Alice Eiko Murakami

Tese apresentada como parte das exigecircncias para a obtenccedilatildeo do tiacutetulo de DOUTOR EM ZOOTECNIA no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Zootecnia da Universidade Estadual de Maringaacute ndash Aacuterea de Concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal

MARINGAacute

Estado do Paranaacute Novembro de 2010

UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MARINGAacute CENTRO DE CIEcircNCIAS AGRAacuteRIAS

NIacuteVEIS DE ARGININA DIGESTIacuteVEL PARA FEcircMEAS REPRODUTORAS DE FRANGOS DE CORTE E SUA

PROGEcircNIE

Autora Luciana Mordf Garcia de Souza da Silva Orientadora Profordf Dra Alice Eiko Murakami

Tese apresentada como parte das exigecircncias para a obtenccedilatildeo do tiacutetulo de DOUTOR EM ZOOTECNIA no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Zootecnia da Universidade Estadual de Maringaacute ndash Aacuterea de Concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal

MARINGAacute Estado do Paranaacute

Novembro de 2010

iii

O Senhor eacute meu pastor nada me faltaraacute Em verdes prados ele me faz repousar Conduz-me junto agraves aacuteguas refrescantes

restaura as forccedilas de minha alma Pelos caminhos retos ele me leva

por amor do seu nome

Ainda que eu atravesse o vale escuro nada temerei pois estais comigo

Vosso bordatildeo e vosso baacuteculo satildeo o meu amparo

Preparais para mim a mesa agrave vista de meus inimigos Derramais o perfume sobre minha cabeccedila

e transborda minha taccedila A vossa bondade e misericoacuterdia hatildeo de seguir-me

por todos os dias de minha vida E habitarei na casa do Senhor por longos dias

(Salmo 22)

iv

Ao meu pai e minha matildee pela forccedila amor carinho e incentivo nos momentos mais difiacuteceis da minha vida Ao meu marido Junior pelo amor incondicional pela cumplicidade e incentivo

pela compreensatildeo pelos momentos de ausecircncia

Aos meus irmatildeos Sara e Jonatah pela amizade e companheirismo Ao meu filho Eduardo por suportar as dificuldades ao meu lado

DEDICO

v

AGRADECIMENTOS

Agrave Universidade Estadual de Maringaacute por ter possibilitado desenvolver este trabalho

Agrave minha orientadora Profa Dra Alice Eiko Murakami pela sua orientaccedilatildeo pelo

reconhecimento do meu trabalho pelos ldquopuxotildees de orelhardquo que sempre me ajudaram em

todos os momentos a ser uma pessoa melhor pelos conselhos e pela dedicaccedilatildeo agrave minha

pessoa por todos esses anos e principalmente pela amizade construiacuteda com respeito e

carinho ao longo desta caminhada

Aos professores do Programa de Poacutes-graduaccedilatildeo em Zootecnia da Universidade Estadual

de Maringaacute pelo acesso ao conhecimento e pela paciecircncia a mim dispensada em especial

ao Prof Dr Elias Nunes Martins pelos valiosos conselhos e amizade e pelos auxiacutelios as

ldquoestatiacutesticasrdquo muito obrigada

Aos secretaacuterios do Programa de Poacutes- graduaccedilatildeo Rose e Denilson por todo ldquosocorrordquo

durante o meu periacuteodo no programa pelas conversas e amizade obrigada por tudo

As ldquoMariasrdquo teacutecnicas do laboratoacuterio de Histologia da UEM Eurides e Dos Anjos pela

amizade e auxiacutelio e toda ajuda durante as minhas anaacutelises

Aos funcionaacuterios da Fazenda Experimental de Iguatemi da UEM pelo precioso auxiacutelio

durante a conduccedilatildeo deste e todos os trabalhos realizados durante o meu periacuteodo nessa

universidade

A todos os colegas que fizeram parte da minha caminhada pela ajuda e companheirismos

em todos os momentos faacuteceis e difiacuteceis desta jornada pelo auxiacutelio durante a coleta e

conduccedilatildeo dos experimentos que me permitiram esta tese Ana Ton Jovanir Maacutercia

vi

Suelen Rodrigo Luis Daniel Ana Carolina Ana Flaacutevia Leandro Rafael Fernando

Karla Alexandra Mariana Celma Andressa Faacutebio

Agraves minhas eternas irmatildes Jovanir Inecircs Muller Fernandes e Maacutercia Izumi Sakamoto pela

amizade companheirismo pela forccedila em todos os momentos de alegria e em que estive

em dificuldades minha eterna gratidatildeo por tudo que vocecircs fizeram por mim

A minha irmatildezinha Sussu e seu ldquomaridatildeordquo Mauriacutecio pelo apoio e amizade pelo

companheirismo e auxiacutelio nos momentos em que precisei muito obrigada por tudo

As mais novas amigas e companheiras Cinthia e Cris muito obrigada pela amizade

incondicional que vocecircs me dedicaram durante esse tempo que apesar de natildeo ter sido tatildeo

longo valeu por uma eternidade muito obrigada por tudo

A minha irmatilde Sara que durante a minha gravidez foi meu braccedilo direito na conduccedilatildeo deste

trabalho auxiliando e principalmente me levantando nos momentos de dificuldade

obrigada por vocecirc fazer parte da minha vida

Ao Waldir Pereira da Silva Junior meu profundo agradecimento pelo companheirismo

incentivo amizade por estar ao meu lado e compreender meus momentos de ausecircncia

pelo amor incondicional a mim dedicado meu eterno amor a vocecirc

A todos que direta ou indiretamente contribuiacuteram para esse trabalho meu muito obrigada

vii

BIOGRAFIA

LUCIANA MARIA GARCIA DE SOUZA DA SILVA filha de Vera Luacutecia

Aparecida Garcia de Souza e Joatildeo Gusman de Souza nasceu em Maringaacute Paranaacute no dia

18 de maio de 1981

Em marccedilo de 2005 conclui o curso de Zootecnia pela Universidade Estadual de

Maringaacute

Em marccedilo de 2005 iniciou no curso de Poacutes- graduaccedilatildeo em Zootecnia em niacutevel de

mestrado aacuterea de concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal na Universidade Estadual de Maringaacute e

no dia 3 de marccedilo de 2007 submeteu-se a banca para defesa de Dissertaccedilatildeo

Em marccedilo de 2007 iniciou no curso de Poacutes-graduaccedilatildeo em Zootecnia em niacutevel de

doutorado aacuterea de concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal na Universidade Estadual de Maringaacute

realizando estudos na aacuterea de nutriccedilatildeo de frangos de corte No dia 17 de novembro de

2010 submeteu-se a banca para defesa da Tese

viii

IacuteNDICE

Paacutegina

LISTA DE TABELAS ix LISTA DE FIGURAS xi I - INTRODUCcedilAtildeO 17 11 REVISAtildeO DA LITERATURA 19

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie 19 112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves 20 REFEREcircNCIAS 32

II - OBJETIVOS GERAIS 39 21 Objetivos Especiacuteficos 39

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo 40

Resumo 40 Introduccedilatildeo 42 Material e meacutetodos 43 Resultados e Discussatildeo 47 Conclusatildeo 52 Referecircncias 53

IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie 57

Resumo 57 Introduccedilatildeo 59 Material e Meacutetodos 60 Resultados e discussatildeo 67 Conclusatildeo 83 Referecircncias 83

V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie 89

Resumo 89 Introduccedilatildeo 91 Material e Meacutetodos 92 Resultados e Discussatildeo 101 Conclusatildeo 110 Referecircncias 110

VI - CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 113

ix

LISTA DE TABELAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental 45 Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 48 Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 50 Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico 51 Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 52

Capiacutetulo IV Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg48 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)50 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)51 Tabela 4 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg55 Tabela 5 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg56 Tabela 6 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg60 Tabela 7 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementadas provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg64 Tabela 8 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento da progecircnie suplementada com dietas suplementadas contendo niacuteveis de Arg64

x

Tabela 9 ndash Meacutedias de porcentagem de carcaccedila (CARC) porcentagem de peito (PEITO) porcentagem de coxa (COXA) porcentagem de asa (ASA) porcentagem de gordura abdominal (GORDURA) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg65 Tabela 10 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de arginina67 Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg69 Tabela 12 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade72

Capiacutetulo V Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das dietas experimentais das matrizes de frangos de corte no periacuteodo experimental83 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg85 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)86 Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (21-42 dias)86 Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de arginina89 Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg90 Tabela 7 ndash Meacutedias do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade91 Tabela 8 ndash Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg92 Tabela 10 ndash Meacutedias e erro padratildeo da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg94 Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades94

xi

LISTA DE FIGURAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel33 Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg34 Capiacutetulo IV Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 70 Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 71 Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 72 Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 72 Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 75 Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 77 Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 81 Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade 82 Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade 83

xii

Capiacutetulo IV Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 106 Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 108

RESUMO

Foram realizados trecircs experimentos com o objetivo de avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na nutriccedilatildeo de matrizes de corte e a modulaccedilatildeo da resposta imune e do desenvolvimento esqueleacutetico na progecircnie No primeiro experimento avaliou-se o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e qualidade de ovos Para tanto foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se um aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve uma queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arginina respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo O segundo experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo

xiv

suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos O terceiro experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos 7 dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavras-chave desempenho produtivo qualidade de ovos qualidade oacutessea sistema imune

ABSTRACT

Three experiments were conducted to evaluate the effect of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder nutrition and modulation of the immune systems and skeletal development in the progeny In the first experiment the effect of Arg supplementation on heavy breed henrsquos productive performance and egg quality was evaluated ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance In the second experiment the effects of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder hens diet on performance carcass yield and bone parameters was evaluated in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units The body weight gain feed intake and feed gain ratio was calculated to evaluate the performance The carcass yield was evaluated by the carcass percentage leg breast and wing yield and abdominal fat The bone quality was assessed by the analysis of the femur and tibia lengths diameters and Seedor index In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that

16

just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) In third experiment the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses was evaluated in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by the diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses According to the results it is possible to conclude that supplementation with Arg provided improvements in the eggs weight of broilers and evaluations in the progeny demonstrated that there is a need to supplement the diet with Arg in order to get the best performance index bone quality and humoral and cellular immunity

Key-words bone quality egg quality productive performance immune system

17

I - INTRODUCcedilAtildeO

Vaacuterios fatores afetam o desempenho de frangos de corte como a geneacutetica

nutriccedilatildeo sanidade manejo e ambiecircncia Entretanto fatores estabelecidos antes mesmo da

incubaccedilatildeo e da eclosatildeo como a idade das matrizes e o peso dos ovos satildeo preponderantes

para o desenvolvimento inicial das aves tendo consequecircncia em todo o crescimento

(Pedroso et al 2005)

As exigecircncias nutricionais de uma reprodutora leve ou pesada devem atender agraves

necessidades do embriatildeo em desenvolvimento fora do organismo materno (Campos

2003) O ovo eacute formado basicamente pela casca (10) clara (60) e gema (30) Desse

modo os niacuteveis nutricionais da matriz devem ser dirigidos para formaccedilatildeo desses

componentes porque estes satildeo responsaacuteveis pela nutriccedilatildeo do embriatildeo

O ovo tem aacutegua proteiacutena gordura e cinza na sua composiccedilatildeo quiacutemica A gema

apresenta papel importante no desenvolvimento do embriatildeo visto que este formaraacute o saco

vitelino apoacutes o quarto dia de vida O saco vitelino constitui a uacutenica fonte fornecedora de

energia para o desenvolvimento do embriatildeo Deste satildeo absorvidos todos os nutrientes pelo

embriatildeo como partiacuteculas lipoproteicas e proteicas Estas uacuteltimas podem ser absorvidas

intactas porque a produccedilatildeo de proteinases pelo embriatildeo aumenta de acordo com o seu

desenvolvimento Aleacutem disso parte da absorccedilatildeo de proteiacutenas ocorre na forma de

aminoaacutecidos (Campos 2003) O saco viteliacutenico tambeacutem eacute a uacutenica fonte de

18

imunoglobulinas produzidas pelo organismo materno capazes de manter certa imunidade

ao pintinho no periacuteodo inicial de sua vida

Os aminoaacutecidos presentes na gema podem ser suficientes durante o processo de

eclosatildeo apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

processo de crescimento (Ohta et al 2004)

Logo apoacutes a eclosatildeo a maior parte da demanda de energia e de proteiacutena das aves eacute

direcionada para o desenvolvimento do trato digestoacuterio principalmente intestinos (Fisher

da Silva 2001) Este crescimento preferencial ocorre tanto na presenccedila quanto na ausecircncia

do alimento (Laurentiz et al 2001) Quando estes nutrientes natildeo satildeo fornecidos pela

raccedilatildeo os neonatos utilizam o saco vitelino como suplemento energeacutetico e como fonte

proteica para o crescimento intestinal Entretanto segundo Dibner et al (1998) 20 da

proteiacutena residual do saco vitelino satildeo representadas pelas imunoglobulinas maternais e

que a gordura bruta residual eacute constituiacuteda basicamente de trigliceacuterides fosfoliacutepides e

colesterol

Assim a nutriccedilatildeo das matrizes de corte pode enriquecer a gema e produzir pintos

de alta qualidade Entretanto com o passar dos anos natildeo houve muita diferenccedila nos niacuteveis

nutricionais propostos para nutriccedilatildeo das matrizes de corte o que ocorre principalmente em

razatildeo das grandes diferenccedilas existentes entre as linhagens comerciais existentes Segundo

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) para matrizes pesadas existe uma pausa nas pesquisas orientadas

para a determinaccedilatildeo das exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos essenciais

Dentre os aminoaacutecidos utilizados na formulaccedilatildeo de raccedilotildees principalmente as

voltadas para o conceito de proteiacutena ideal a arginina (Arg) pode exercer efeitos positivos

pois este aleacutem de ser constituintes de proteiacutenas ainda estaacute envolvido na siacutentese de creatina

e de poliaminas de prolina como substrato para a siacutentese de colaacutegeno e do oacutexido niacutetrico

(NO) e na secreccedilatildeo do hormocircnio de crescimento (GH) e dos fatores de crescimento

19

semelhantes agrave insulina (IGF) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave (Harvey et

al 2001)

Como as aves natildeo apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem

exclusivamente da Arg sinteacutetica principalmente no periacuteodo inicial de produccedilatildeo (Allen amp

Baker 1972) Aleacutem disso em dietas agrave base de milho e de farelo de soja a Arg eacute

considerada o quinto aminoaacutecido limitante para frangos de corte apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Vaacuterios autores tecircm proposto que a nutriccedilatildeo das matrizes afeta o desempenho dos

pintos (Uni amp Ferket 2004) Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem

nos primeiros dias de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com

funccedilatildeo imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade

materna e na resposta imune dos pintos

11 REVISAtildeO DA LITERATURA

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie

O sistema imune das aves eacute complexo e compreende uma seacuterie de funccedilotildees

celulares e fatores soluacuteveis que trabalham juntos para produzir uma resposta imune

protetora Os oacutergatildeos linfoides primaacuterios das aves satildeo a bolsa cloacal e o timo Os oacutergatildeos

como medula oacutessea baccedilo glacircndula Harderiana placas de Payer e tonsilas cecais satildeo

considerados oacutergatildeos linfoides secundaacuterios

Com base nesses componentes as aves podem apresentar respostas a vaacuterios

antiacutegenos divididas em dois tipos a imunidade passiva e a ativa A imunidade passiva eacute

transferida para a progecircnie pelas reprodutoras via saco viteliacutenico Atraveacutes da imunidade

passiva eacute possiacutevel desenvolver a resposta imune especiacutefica sem que haja um envolvimento

do organismo pela transferecircncia de ceacutelulas ou de anticorpos de outro indiviacuteduo jaacute

20

imunizado A imunidade ativa por sua vez eacute decorrente da exposiccedilatildeo das aves a um

antiacutegeno estranho que pode ser de origem vacinal ou um agente patoacutegeno

Nas aves a imunidade passiva eacute passada da matriz ateacute o pintinho pelo do ovo no

processo de produccedilatildeo de ovo imunoglobulinas (Ig) Y presentes no sangue das matrizes

chega ateacute o oviduto e se deposita na gema do ovo enquanto durante a secreccedilatildeo do

albuacutemen que ocorre na porccedilatildeo magnum do oviduto secreta tambeacutem IgA e IgM Eacute essa

imunidade enviada pela matildee que protege esses pintos nos primeiros dias de vida contra

vaacuterios agentes que estatildeo presentes no campo (Santin 2009) Haacute relaccedilatildeo direta entre os

tiacutetulos de seacutericos de Ig da matildee e a quantidade repassada ao ovo Assim eacute de extrema

importacircncia que o pintinho absorva adequadamente e rapidamente essa gema para que ele

tenha acesso a estas Ig (Santin 2009) Maiorka (2002) demonstrou que jejum de aacutegua e de

alimento por 12 horas apoacutes a eclosatildeo diminui a absorccedilatildeo da gema e afetam o

desenvolvimento da mucosa intestinal de frangos de corte Vargas et al (2009) mostraram

que os tiacutetulos seacutericos de anticorpos contra a vacina de doenccedila de Newcastle (NDV) foram

mais baixos em pintos submetidos a 12 horas de jejum poacutes eclosatildeo quando comparados

agravequeles que consumiram aacutegua e alimento logo apoacutes a eclosatildeo De fato o atraso no

consumo de alimento dos animais pode diminuir a absorccedilatildeo da gema e consequentemente

a passagem da imunidade passiva da matildee para o pintinho Dibner et al(1998) sugerem que

quando o pintinho natildeo recebe rapidamente aacutegua e alimento apoacutes a eclosatildeo acaba utilizando

as Ig e os fosfolipiacutedios da gema como alimento diminuindo assim sua funccedilatildeo na proteccedilatildeo

animal

112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves

A Arg eacute um aminoaacutecido essencial em aves principalmente na fase inicial Isso

ocorre porque as aves diferentemente dos mamiacuteferos natildeo possuem o ciclo da ureia

funcional necessitando da fonte exoacutegena de suplementaccedilatildeo Evoy et al (1998) em seu

21

trabalho relataram o papel da Arg como essencial na estimulaccedilatildeo do sistema imune do

hospedeiro

As vias metaboacutelicas que envolvem a Arg satildeo complexas e demonstradas

resumidamente a seguir

Adaptado de Duff amp Daly (2002)

Juntamente com a complexidade dessas vias soma-se a variada localizaccedilatildeo das

enzimas envolvidas no meio intracelular como nos tecidos Com exceccedilatildeo dos enteroacutecitos

22

em receacutem-nascidos nenhum outro tipo de ceacutelula conteacutem todas as enzimas necessaacuterias para

a siacutentese de Arg (Wu amp Morris 1998)

A Arg eacute ativamente absorvida pelo intestino pelo sistema de transporte soacutedio-

dependente A alta atividade da arginase no enteroacutecito converte cerca de 40 da dieta de

Arg em citrulina a qual eacute liberada na circulaccedilatildeo (Castillo et al 1993) Quando a Arg cai

na corrente sanguiacutenea cerca de 15 eacute eliminada pelo fiacutegado e o restante entra na

circulaccedilatildeo sistecircmica (OrsquoSullivan et al 1998) A Arginina eacute sintetizada a partir da

citrulina principalmente nos rins e eacute entatildeo liberada na circulaccedilatildeo para ser utilizada pelos

demais tecidos

O oacutexido niacutetrico (NO) constitui uma das menores e mais simples moleacuteculas

biossintetizadas (Morris et al 1994) O NO eacute um radical livre gasoso inorgacircnico e

identificado como mensageiro molecular extremamente laacutebil (meia vida bioloacutegica em

torno de segundos) O NO media vaacuterios fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente

do endoteacutelio citotoxicidade mediada por macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria Eacute produzido pelas ceacutelulas endoteliais neurocircnios macroacutefagos e

tecidos entre eles a hipoacutefise que age paracrinamente exercendo efeitos intra e

extracelulares em vaacuterios sistemas fisioloacutegicos (Kutchai 1998)

Palmer et al (1988) demonstraram que a L-Arg eacute o precursor fisioloacutegico do NO

nas ceacutelulas endoteliais Com base nesta informaccedilatildeo vaacuterios grupos de investigadores

suspeitaram que o NO fosse o provaacutevel precursor da siacutentese de NO3- e NO2

- pelos

macroacutefagos Subsequentemente esta hipoacutetese foi comprovada e ficou demonstrado que o

NO eacute o principal mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a

mais importante moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al 1988 e Marletta

et al 1988 citados por Dusse et al 2003)

23

Este composto eacute produzido a partir da oxidaccedilatildeo da L-arginina pela accedilatildeo da enzima

oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) uma enzima Ca++-calmodulina-dependente Por este

mecanismo eacute gerado citrulina como produto final (Kiechele amp Malinski 1993)

O surgimento do NO como agente da sinalizaccedilatildeo celular eacute uma importante

descoberta da fisiologia humana e animal nos uacuteltimos anos O NO participa de vaacuterios

fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente do endoteacutelio citotoxicidade mediada por

macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O NO eacute o principal

mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a mais importante

moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al1988 e Marletta et al 1988 citados

por Dusse et al 2003)

Existem trecircs formas de NOS sendo a NOS induzida (iNOS) e duas NOS

constitutivas (cNOS) O NO eacute sintetizado pela ativaccedilatildeo da cNOS basal (em ceacutelulas

endoteliais vasculares e neurocircnios) segundos a minutos apoacutes o aumento na concentraccedilatildeo

de caacutelcio em resposta agrave ativaccedilatildeo de receptores da superfiacutecie celular e mecanismos de

transduccedilatildeo de sinal (Adams 1996)

Ao contraacuterio a iNOS natildeo depende de caacutelcio para ativaccedilatildeo mas a siacutentese de

mRNA da iNOS eacute necessaacuteria para sua atividade A NOS induzida natildeo eacute detectaacutevel em

condiccedilotildees basais As LPS ou endotoxinas bacterianas junto com citocinas como TNFα

IL-1β ou IF-γ induzem a siacutentese de iNOS de duas a quatro horas apoacutes a exposiccedilatildeo ao

agente A iNOS requer siacutentese proteica para sua expressatildeo e sua atividade persiste por

mais de 24 horas e sintetiza NO em concentraccedilotildees nanomolares 1000 vezes maior que

cNOS (Davies et al 1995)

A expressatildeo da iNOS eacute o resultado da resposta inflamatoacuteria localizada ou difusa

resultante da infecccedilatildeo ou dano tecidual Segundo Salvemini et al (1996) o NO eacute potente

vasodilatador e seu envolvimento na resposta inflamatoacuteria pode ter relaccedilatildeo com sua

24

habilidade em aumentar a permeabilidade vascular e o edema atraveacutes de mudanccedilas no

fluxo sanguiacuteneo local e do aumento na produccedilatildeo de prostaglandinas proinflamatoacuterias

A expressatildeo de iNOS em endotoxemia eacute citoprotetoacuteria inibindo microtrombose

pela prevenccedilatildeo de adesatildeo plaquetaacuteria e danos mediados por radicais Por outro lado a

citotoxidade do NO resulta da sua accedilatildeo direta ou da sua reaccedilatildeo com outros compostos

liberados durante o processo inflamatoacuterio A base bioquiacutemica para a accedilatildeo direta do NO

consiste na sua reaccedilatildeo com metais (especialmente o ferro) presentes nas enzimas do seu

alvo (Moncada 1991 James 1995) Desta forma satildeo inativadas enzimas cruciais para o

ciclo de Krebs para a cadeia de transporte de eleacutetrons para a siacutentese de DNA e para o

mecanismo de proliferaccedilatildeo celular Em processos infecciosos ceacutelulas ativadas como

macroacutefagos neutroacutefilos e ceacutelulas endoteliais secretam simultaneamente NO e

intermediaacuterios reativos do oxigecircnio a accedilatildeo citotoacutexica indireta do NO consiste

principalmente na sua reaccedilatildeo com esses intermediaacuterios do oxigecircnio

Durante a resposta imune mediada por ceacutelulas a maioria das ceacutelulas adquire a

capacidade de expressar a forma de NO induzida (Nathan amp Xie 1994) A accedilatildeo do NO

depende da ceacutelula T reconhecer um antiacutegeno especiacutefico embora sua accedilatildeo na resposta

imune mediada por ceacutelulas natildeo seja especiacutefica (Schmidt amp Walter 2004)

Costa et al (2003) corroboram com o fato de que a fagocitose por si soacute natildeo induz a

siacutentese de NO A fagocitose de partiacuteculas inertes por macroacutefagos peritoniais em cultura

ou por macroacutefagos murinos estimulados por citocinas natildeo satildeo estiacutemulos suficientes para

a induccedilatildeo expressiva de iONS No entanto a fagocitose de agentes bioloacutegicos nas

mesmas condiccedilotildees induz altos niacuteveis de NO sugerindo que a produccedilatildeo de NO seja

dependente de estiacutemulo imunoloacutegico e que faccedila parte dos mecanismos de defesa do

organismo

25

Todas estas investigaccedilotildees estabeleceram de forma definitiva uma associaccedilatildeo entre

arginina oacutexido niacutetrico e resposta imune Por isso nas uacuteltimas duas deacutecadas a arginina tem

sido o foco de estudos como regulador de muitos processos imunoloacutegicos e fisioloacutegicos

(Tayade et al 2006)

Trabalhos desenvolvidos com mamiacuteferos demonstraram que as respostas imunes

podem ser influenciadas pela arginina dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al

1998 Lewis amp Langkamp-Henken 2000) Em experimentos desenvolvidos com animais

jovens os efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina foram demonstrados

como o aumento do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos

tiacutemicos Os efeitos imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais

estressados ou imunossupremidos

Os efeitos beneacuteficos da arginina natildeo se limitam agrave imunidade celular Segundo

LeBien (2002) em mamiacuteferos geneticamente modificados a arginina eacute utilizada para

diferenciaccedilatildeo de proacute-linfoacutecitos B para preacute-linfoacutecitos B na medula oacutessea e estaacute envolvida na

liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da medula

Por outro lado Deng et al (2005) relatam que relevantes pesquisas em espeacutecies

aviaacuterias satildeo esparsas Estas pesquisas apontaram o aumento da produccedilatildeo de oacutexido niacutetrico

por macroacutefagos de aves suplementadas com arginina (Sung et al 1991) aumento do peso

dos oacutergatildeos linfoides (Kwak et al 1999) melhora da relaccedilatildeo heteroacutefilolinfoacutecito em pintos

suplementados e desafiados com o agente viral da bronquite infecciosa e maior percentual

de ceacutelulas CD8+ (Lee et al 2002)

Entretanto para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de arginina

foram observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

estabelecidos Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de arginina

plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular

26

Outros autores obtiveram respostas positivas com a suplementaccedilatildeo de arginina na

reduccedilatildeo na mortalidade de frangos desafiados com Eimeria acervulina Eimeria tenella e

Eimeria maacutexima alterando a relaccedilatildeo argininalisina de 09 para 13 (Kidd et al 2002) e na

siacutendrome da hipertensatildeo pulmonar (Wideman et al 1995) Tambeacutem Corzo et al (2003)

observaram reduccedilatildeo linear de arranhotildees infectados em carcaccedilas de frangos alimentados

com niacuteveis crescentes de arginina (08 a 125 da dieta) Embora esses paracircmetros sejam

indicativos indiretos da imunidade mas apontam a importacircncia da arginina na melhora da

imunidade e no restabelecimento do status sanitaacuterio dos planteacuteis aviacutecolas

Tayade et al (2006) demonstraram recentemente que frangos vacinados com uma

vacina intermediaacuteria atenuada contra a doenccedila de Gumboro e suplementados com 2 de

arginina mostraram 100 de proteccedilatildeo apoacutes desafio com o viacuterus da doenccedila de Gumboro

comparado com 80 de proteccedilatildeo induzido apenas pela vacina sem adiccedilatildeo de arginina

suplementar na dieta

Aleacutem disso Deng et al (2005) verificaram aumento no niacutevel de anticorpos contra

eritroacutecitos de carneiro em frangas de postura somente na oitova semana de idade quando

estas aves foram suplementadas com niacuteveis de arginina em 150 acima do recomendado

pelo NRC do primeiro dia ateacute a quarta semana de vida Os autores concluiacuteram que a

suplementaccedilatildeo com arginina por um periacuteodo curto de tempo tem pouco efeito sobre a

imunidade e que a imunocompetecircncia pode ser permanentemente moldada pelo status

nutricional nos estaacutegios mais precoces do desenvolvimento

Para a melhora da resposta imune deve-se garantir que as matrizes desenvolvam

tiacutetulos elevados de anticorpos e assim buscar atingir o controle contra surtos de doenccedilas

via imunidade materna como meio de prevenccedilatildeo na progecircnie Kidd et al (1993)

observaram que a diferenccedila no niacutevel de anticorpos contra eritroacutecitos de carneiro em

27

matrizes pesadas recebendo dietas compostas por gratildeos de vaacuterias origens foi detectada na

progecircnie recebendo a mesma dieta

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo dos

niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes Segundo Kidd (2004) trabalhos desenvolvidos a

cerca das exigecircncias nutricionais das matrizes estatildeo focados apenas na questatildeo produtiva

Brake (1997) mostrou que a suplementaccedilatildeo de dietas para matrizes com vitaminas E e C

promoveu melhoria na transferecircncia de imunidade materna e na resposta imune dos pintos

pela proteccedilatildeo aos anticorpos no ovo durante a incubaccedilatildeo

Segundo Gore amp Qureshi (1997) um dos mecanismos pelo qual a vitamina E atua

nesta fase de crescimento embrionaacuterio pode estar relacionado a uma maior produccedilatildeo de

oacutexido niacutetrico nitritos e nitratos pelo fato de que a Vitamina E pode aumentar a afinidade

dos receptores de membrana dos macroacutefagos para a ativaccedilatildeo dos estiacutemulos tais como os

lipopolissacariacutedeos o que resulta em maior atividade da oacutexido niacutetrico sintetase

Na literatura consultada natildeo existem relatos da suplementaccedilatildeo das dietas das

matrizes com arginina e o efeito na resposta imune da progecircnie

A produccedilatildeo de NO pelos macroacutefagos das aves eacute arginina dependente de forma

similar aos macroacutefagos de mamiacuteferos (Dietert amp Golemboski 1998) Entretanto ao

contraacuterio dos mamiacuteferos as aves natildeo podem sintetizar arginina As aves por natildeo

apresentarem o ciclo da ureia funcional dependem exclusivamente da arginina dieteacutetica

(Allen amp Baker 1972) O quadro eacute ainda mais grave nas aves uma vez que dependem de

arginina suplementar tambeacutem para a para a formaccedilatildeo de ornitina que em mamiacuteferos eacute

obtida atraveacutes do aacutecido glutacircmico A siacutentese de ornitina eacute fundamental pois estaacute envolvida

na obtenccedilatildeo de prolina e eacute utilizada tambeacutem na formaccedilatildeo de poliaminas (espermidina

espermina e putrescina) que satildeo moleacuteculas associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

28

Desta forma a arginina eacute um aminoaacutecido essencial para as aves na fase inicial A

dieta eacute um fator particularmente sensiacutevel na disponibilidade de arginina e

consequentemente de NO considerando ainda que a arginina eacute um aminoaacutecido dos mais

limitantes em dietas agrave base milho e farelo de soja (Edmonds et al 1985)

A suplementaccedilatildeo adicional de Arg nas dietas de aves imunocomprometidas

poderia aumentar ainda mais a atividade da arginase e com isso menos Arg seria

disponiacutevel para a siacutentese de NO (Kepka-Lenhart et al 2000) Alternativamente Bansal et

al (2004) sugerem como estrateacutegia dieteacutetica para restaurar as concentraccedilotildees plasmaacuteticas

de Arg a suplementaccedilatildeo de citrulina principalmente em condiccedilotildees de imunodeficiecircncia

associadas com elevada atividade plasmaacutetica da arginase Nas espeacutecies uricoteacutelicas o ciclo

Arg-citrulina eacute funcional A citrulina eacute um aminoaacutecido que natildeo eacute encontrado em nenhuma

proteiacutena corporal aleacutem da inabilidade das aves na siacutentese endoacutegena de citrulina a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica se constitui na uacutenica fonte de Arg para os macroacutefagos via ciclo

NO-citrulina (Wiesinger 2001)

A suplementaccedilatildeo de aminoaacutecidos sinteacuteticos tem propiciado facilidades no ajuste

das foacutermulas de raccedilatildeo possibilitando a obtenccedilatildeo dos niacuteveis exigidos de aminoaacutecidos

essenciais A utilizaccedilatildeo de niacuteveis elevados de lisina proporciona um maior crescimento

muscular principalmente o incremento no rendimento de peito e coxas dos frangos de

corte Entretanto esse aumento da taxa de crescimento pode alterar o equiliacutebrio

metaboacutelico ideal entre os aminoaacutecidos especialmente a relaccedilatildeo argininalisina

O antagonismo entre arginina e lisina envolve a diminuiccedilatildeo da siacutentese de

creatinina compromete a siacutentese de prolina ornitina promove o aumento da atividade da

arginase renal e da excreccedilatildeo de ureia aleacutem de que quando os niacuteveis de lisina satildeo

excessivamente altos tambeacutem ocorre a excreccedilatildeo renal de arginina (Austic amp Scott 1975)

29

Os sinais claacutessicos da deficiecircncia de Arg satildeo fraqueza e paralisia das pernas penas

deformadas e ericcediladas sobre o dorso e asa das aves reduccedilatildeo do ganho de peso lesotildees

histoloacutegicas na medula oacutessea e desenvolvimento oacutesseo afetado (Jungherr et al 1958

Newbern et al 1960) A arginina aleacutem de servir como substrato para a siacutentese de NO

estaacute envolvida na secreccedilatildeo do GH

Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram um aumento na

concentraccedilatildeo plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez

secretado pela hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio

receptor e indiretamente via IGF-I e II (insulin-like growth factor ou somatomedina C)

sobre os tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos do GH ocorre em niacutevel do

disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no

crescimento dos ossos longos (Isaksson et al 1987)

Os efeitos dos aminoaacutecidos essenciais no tecido oacutesseo em crescimento satildeo

provavelmente mediados pelo IGF-I (Baylink et al1993) De fato Chevalley et al (1998)

demonstraram que arginina e lisina aumentaram a produccedilatildeo in vitro de IGF-I por

osteoblastos mantidos em cultura Aleacutem disso Conconi et al (2001) trabalhando com

cultura de osteoblastos enriquecida com soluccedilatildeo de aminoaacutecidos essenciais (Arg Lis Met

Thr e Trp) encontraram niacuteveis significativamente aumentados de fosfatase alcalina e

siacutentese de colaacutegeno Estes resultados segundo os autores sugerem que os aminoaacutecidos

podem atuar diretamente na formaccedilatildeo da matriz oacutessea e podem tambeacutem modular o

crescimento e a diferenciaccedilatildeo de osteoblastos

Por outro lado eacute conhecido que a arginina eacute precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo

pelo qual ela poderia exercer os seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo O NO pode

participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento (Hukkanem et

30

al 1999) Estes autores demonstraram a expressatildeo do mRNA da cNOS basal (oacutexido

niacutetrico sintetase endotelial) em condroacutecitos hipertroacuteficos de placas de crescimento de ratos

neonatos

Na placa de crescimento o NO poderia facilitar a vascularizaccedilatildeo e a formaccedilatildeo

oacutessea (Rath et al 2000) a exemplo de sua accedilatildeo na cartilagem articular em que induz

respostas bioloacutegicas que levam a degradaccedilatildeo irreversiacutevel (Pelletier et al1998) Segundo

Amin amp Abramson (1998) nas osteoartrites o NO induz a apoptose dos condroacutecitos

Teixeira et al (2005) comprovaram que o NO tem duas funccedilotildees distintas nos

condroacutecitos da placa de crescimento Uma vez iniciado o processo de maturaccedilatildeo o NO

estimula a hipertrofia por meio do aumento da expressatildeo da fosfatase alcalina e colaacutegeno

tipo X sendo conhecido que a expressatildeo de ambas proteiacutenas eacute um requerimento para a

completa hipertrofia dos condroacutecitos Aleacutem disso o NO estaacute associado ao estaacutegio mais

tardio do processo de maturaccedilatildeo Condroacutecitos totalmente diferenciados tratados com

ativadores da apoptose sofrem morte celular a inibiccedilatildeo da siacutentese de NO bloqueia a

apoptose enquanto a exposiccedilatildeo aos doadores de NO estimula a apoptose Estes autores

concluiacuteram que os sistemas NOS ndash NO atuam como promotores da maturaccedilatildeo dos

condroacutecitos

Por outro lado Vanacutet amp Ralston (2001) advertem que o efeito do NO na atividade

dos osteoblastos pode ser bifaacutesico Estudos in vitro tecircm indicado que pequenas

quantidades de NO que satildeo produzidas constitutivamente pelos osteoblastos podem agir

como um estimulador autoacutecrino do crescimento oacutesseo Entretanto altas concentraccedilotildees de

NO tais como aquelas observadas apoacutes estimulaccedilatildeo das citocinas inflamatoacuterias em que a

iNOS eacute a isoforma envolvida tecircm efeito inibitoacuterio no crescimento e diferenciaccedilatildeo

osteoblaacutestica

31

O crescimento e a remodelaccedilatildeo dos tecidos satildeo regulados por complexas interaccedilotildees

entre potencial geneacutetico fatores de crescimento influecircncias ambientais e nutriccedilatildeo

(Gonzales amp Sartori 2002) A resposta imune e a inflamaccedilatildeo podem modificar as

necessidades de alguns nutrientes

As alteraccedilotildees metaboacutelicas decorrentes podem interromper os eventos envolvidos

no processo de condrogecircnese e osteogecircnese e desencadear o processo de formaccedilatildeo das

lesotildees no tecido oacutesseo que levam a dificuldade locomotora deformaccedilatildeo oacutessea predispotildeem

agraves infecccedilotildees e agraves desordens esqueleacuteticas tais como a discondroplasia tibial (Thorp 1994)

Aleacutem das perdas econocircmicas eacute clara a percepccedilatildeo que as disfunccedilotildees do aparelho locomotor

comprometem o bem-estar das aves

Aleacutem de interagirem com o sistema imune os processos que modulam o

crescimento oacutesseo satildeo complexos e muacuteltiplos e mais estudos satildeo necessaacuterios para elucidar

estes mecanismos

32

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II - OBJETIVOS GERAIS

Essa pesquisa foi desenvolvida com a finalidade de estudar o efeito da

suplementaccedilatildeo de Arg na dieta de fecircmeas reprodutoras de frangos de corte na qualidade

dos ovos e nas caracteriacutesticas produtivas na qualidade oacutessea no desenvolvimento dos

oacutergatildeos linfoide e do sistema imune da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo

niacuteveis crescentes de Arg

21 Objetivos Especiacuteficos Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis

crescentes de Arg no desempenho produtivo e na qualidade dos ovos

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg no desempenho no

rendimento de carcaccedila e na qualidade oacutessea da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas

contendo niacuteveis crescentes de Arg

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg nas respostas imune e

celular da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo

Resumo ndash Este estudo avaliou o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e reprodutivo e qualidade de ovos Foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e reprodutivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo

Palavras-chave embriodiagnoacutestico incubaccedilatildeo qualidade de ovos

III - Effect of arginine supplementation on productive performance and egg quality of broiler breeder hens

Abstract - This study investigated the effect of arginine (Arg) supplementation on broiler breeder productive performance and egg quality ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance Supplementation of broiler diets with increasing levels of Arg provided an increase in the egg production and eggs with higher weights in the levels of 1262 and 1543 respectively The increased levels of Arg did not influence the reproduction variables studied suggesting that it may be used without any harmful risk

Key words embryo diagnosis hatching egg quality

42

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo e alimentaccedilatildeo animal estatildeo direcionadas para garantir oacutetimo aporte de

nutrientes para os animais de acordo com sua finalidade comercial e fase fisioloacutegica

Na produccedilatildeo de frangos de corte a taxa de crescimento acelerada imposta pela seleccedilatildeo

geneacutetica os vaacuterios fatores estressantes (ambientais e de manejo) e de desafio

imunoloacutegico (vacinaccedilatildeo e infecccedilatildeo) nas condiccedilotildees de produccedilatildeo comercial fazem com

que as exigecircncias das matrizes de corte para alguns nutrientes sejam maiores para que a

progecircnie possa expressar seu potencial geneacutetico

O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo dependem completamente dos

nutrientes contidos no ovo e estes satildeo originados da dieta e do metabolismo das

matrizes O ovo eacute um sistema fechado assim todos os nutrientes necessaacuterios para o

desenvolvimento do embriatildeo devem ser fornecidos pela matriz quando o ovo eacute formado

(Oviedo-Roacutendon amp Murakami 1998)

Aleacutem disso existe correlaccedilatildeo positiva entre peso do ovo e peso do pinto ao

nascer e deste com o peso do frango ao abate (Lara et al 2005) De fato Whiting amp

Pesti (1984) verificaram que para cada grama a mais no peso do ovo correspondia a

107 e 60g adicionais para o peso final de machos e fecircmeas respectivamente

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas No ovo os aminoaacutecidos

presentes na gema satildeo suficientes durante o processo de eclosatildeo poreacutem apoacutes o

nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o processo de

crescimento (Otha et al 2004) Nos uacuteltimos anos o impacto da nutriccedilatildeo das matrizes

no estado nutricional e desempenho da progecircnie bem como a melhora do estado

imunoloacutegico tem recebido especial atenccedilatildeo (Pappas et al 2006)

43

A nutriccedilatildeo das matrizes com dietas com arginina seria uma alternativa para o

enriquecimento da gema dos ovos com esse aminoaacutecido A Arg eacute um aminoaacutecido

baacutesico que pode influenciar a reposta imune e a resistecircncia agraves doenccedilas A Arg ainda eacute

conhecida pela funccedilatildeo estimuladora sobre o processo de ovulaccedilatildeo atraveacutes do aumento

da liberaccedilatildeo de hormocircnio luteinizante (LH) (Basiouni et al 2006) e como parte do

hormocircnio arginina vasotocina envolvido com a contraccedilatildeo uterina e a oviposiccedilatildeo

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias

de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo

dos niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes De acordo com Kidd (2004) os trabalhos

desenvolvidos em relaccedilatildeo agraves exigecircncias nutricionais das matrizes para melhorar o

sistema imune da progecircnie satildeo poucos quando comparados a questatildeo produtiva das

aves

Com isso objetivou-se com o trabalho avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de

arginina sobre o desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte

Material e meacutetodos

O experimento foi conduzido no aviaacuterio experimental da Universidade Federal

do Paranaacute ndash Campus Palotina constituiacutedo de 32 boxes com dimensotildees de 25 x 15 m

com cama de maravalha (plusmn10 cm) sobre o piso Foram utilizados boxes telados e

providos de um bebedouro pendular e de dois comedouros um deles com grade de

restriccedilatildeo aos machos e outro instalado mais alto natildeo permitindo somente o acesso das

fecircmeas Em cada boxe experimental foram utilizados ninhos convencionais de um

andar com quatro bocas de madeira com dimensotildees de 030 m x 030 m x 030 m a

030 m acima do niacutevel do piso sendo uma boca para cada quatro fecircmeas

Foram utilizados 390 reprodutores de frangos de corte sendo 360 fecircmeas e 30

machos da linhagem Ross As aves foram selecionadas na 18ordf semana de idade a partir

de um plantel de reprodutores dentro da faixa de peso de 1850 a 1950 g para as

fecircmeas e de 2450 a 2550 g para os machos O delineamento experimental utilizado foi

o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 e

1543 de Arg digestiacutevel) seis repeticcedilotildees e 12 fecircmeas e um macho por unidade

44

experimental O acasalamento foi realizado na 18ordf semana de idade das aves na

proporccedilatildeo de um macho para cada 12 fecircmeas

O periacuteodo experimental iniciou na 25ordf semana quando o plantel alcanccedilou 5 de

produccedilatildeo e finalizou na 56ordf semana de idade das aves O programa de iluminaccedilatildeo

iniciou na 19ordf semana de idade com fornecimento inicial de 14 horas de luz diaacuteria e

aplicados aumentos semanais de 30 minutos de luz ateacute o fornecimento de 17 horas de

luz diaacuteria na 25ordf semana de idade das aves

O fornecimento de raccedilatildeo foi limitado e controlado diariamente enquanto o de

aacutegua foi ad libitum As exigecircncias nutricionais utilizadas para formulaccedilatildeo das dietas das

fecircmeas e dos machos foram baseadas nas recomendaccedilotildees contidas no manual da

linhagem

A partir da 23ordf semana de idade as fecircmeas passaram a receber as dietas

experimentais constituiacutedas da dieta basal suplementada com cinco niacuteveis de L ndash

Arginina variando de 0 a 600 mgkg na dieta basal em substituiccedilatildeo ao caulin que

corresponderam aos niacuteveis de 0943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg

digestiacutevel (Tabela 1) Os machos receberam uma uacutenica dieta durante todo o periacuteodo

experimental O periacuteodo experimental teve iniacutecio na 25ordf semana Para determinaccedilatildeo da

produccedilatildeo de ovos os mesmos foram coletados diariamente e a produccedilatildeo diaacuteria anotada

em planilhas por repeticcedilatildeo Semanalmente foi obtida a produccedilatildeo total de ovos e a

porcentagem de postura de cada unidade experimental Na 30ordf 34ordf e 38ordf semana de

idade foram coletados todos os ovos produzidos em um dia para avaliaccedilatildeo da qualidade

(peso meacutedio gravidade especiacutefica porcentagem de albuacutemen e gema porcentagem e

espessura da casca)

A quantidade de raccedilatildeo oferecida para as fecircmeas foi calculada de acordo com a

produccedilatildeo de ovos e do peso corporal Para os machos forneceu-se raccedilatildeo em funccedilatildeo do

peso corporal (conforme manual da linhagem) O peso foi controlado semanalmente ateacute

a 35ordf semana e quinzenalmente a partir da 36ordf semana de idade das aves ateacute o final do

experimento

A avaliaccedilatildeo do rendimento de incubaccedilatildeo foi realizada na 40ordf semana de idade

das aves Foram incubados 80 ovos de cada tratamento totalizando 400 ovos Os ovos

foram pesados e incubados em cada idade avaliada de acordo com o tratamento e

repeticcedilatildeo e avaliadas as seguintes caracteriacutesticas peso meacutedio do ovo incubado peso

meacutedio dos pintos ao nascer percentual do peso da progecircnie ao nascer em relaccedilatildeo ao

peso do ovo e taxa de eclosatildeo Apoacutes a eclosatildeo foi realizado o embriodiagnoacutestico dos

45

ovos que natildeo eclodiram os quais foram classificados em mortalidade por fase (inicial

intermediaacuteria e final) ovos contaminados bicados vivos e bicados mortos

Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental

Ingredientes () Raccedilatildeo postura I Milho 6072 Farelo de Trigo 420 Oacuteleo de Soja 200 Farelo de Soja 2260 Sal Comum 032 Caulim 050 Calcaacutereo 38 647 Fosfato Bicaacutelcico 131 Bicarbonato de Soacutedio 010 DL-Metionina 98 014 Colina 60 016 Milbond 010 Mycofix 015 Carbonato Potaacutessio 99 021 Premix vit e mineral1 050 Hy D2 005 Eur Bactiguard L 020 Valores Calculados Proteiacutena 1551 EM Kcalkg 2815 Gordura 477 AcLinoleico 248 Caacutelcio 295 Foacutesforo disponiacutevel 044 Lisina dig 071 Met + cistina dig 060 Treonina dig 051 Arginina dig 094 Soacutedio 019 Cloro 026 Potaacutessio 080 Mongin Meq100g 21388

1 Conteuacutedo por kg de premix Vit A 8000000 UI Vit D3 2200000 UI Vit E 6200 mg Vit K 3 2000 mg Vit B 1 2000 mg Vit B2 3000 mg Vit B6 6000 mg Vit B12 10000 mcg Pantotenato de caacutelcio 6000 mg Niacina 25000 mg Aacutec foacutelico 400 mg Se 100 mg Mn 65000 mg Fe40000 mg Cu 10000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg 2 Rovimix Hy D ndash DSM Nutritional Products

Para gravidade especiacutefica foi utilizado o meacutetodo da imersatildeo dos ovos em

soluccedilatildeo salina Foram preparadas seis soluccedilotildees (aacutegua e sal comum) com densidades que

variaram de 1070 a 1090 com variaccedilatildeo de 0004 para cada soluccedilatildeo As gravidades

foram aferidas com utilizaccedilatildeo de densiacutemetro de Petroacuteleo

46

O peso meacutedio do albuacutemen de cada repeticcedilatildeo foi obtido pela diferenccedila entre o

peso meacutedio do ovo e o peso meacutedio da gema somados ao peso meacutedio da casca de cada

repeticcedilatildeo Apoacutes a pesagem das cascas a espessura das mesmas foi medida com auxiacutelio

de um microcircmetro digital (Mitutoyoreg) em quatro pontos na regiatildeo central de cada casca

Para a medida de peso da casca os ovos foram quebrados e as cascas lavadas e secas agrave

temperatura ambiente por 48 horas em seguida foram pesadas em balanccedila analiacutetica e os

pesos anotados

Anaacutelise Estatiacutestica

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados de acordo com o seguinte modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243 4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os dados de embriodiagnoacutestico natildeo apresentaram distribuiccedilatildeo normal e foram

analisados pela anaacutelise Bayesiana assumindo que a porcentagem observada ri a cada

niacutevel de concentraccedilatildeo de Arg xi segue distribuiccedilatildeo Binomial com paracircmetros ni

(tamanho de amostra) e pi (taxa de eclosatildeo) pi = en1+en com funccedilatildeo de ligaccedilatildeo logit

ii

i

plog it(p ) log1 p⎛ ⎞

equiv = μ⎜ ⎟minus⎝ ⎠ nas formas linear e quadraacutetica dadas respectivamente por

n=α+ β1xi e n = α + β1xi + β2x2i Para a modelagem foram considerados um conhecimento

vago a priori sobre os paracircmetros de regressatildeo isto eacute com distribuiccedilotildees natildeo

informativas 3~ (010 )Nα e 3~ (010 )k Nβ k=12

A obtenccedilatildeo das distribuiccedilotildees marginais a posteriori para os paracircmetros foi por

meio do pacote BRugs do programa R (R Development Core Team 2007)

Para cada paracircmetro foram gerados 510000 valores em um processo MCMC

(Monte Carlo Markov Chain) considerando um periacuteodo de descarte amostral de 10000

47

valores iniciais A amostra final tomada com saltos de tamanho 20 conteacutem 25000

valores gerados A convergecircncia das cadeias foi verificada por meio do pacote CODA

(Best et al 1995) do programa R pelos criteacuterios de Geweke (1992) e de Heidelberger amp

Welch (1983)

Resultados e Discussatildeo

Os resultados de produccedilatildeo e de qualidade dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg estatildeo apresentados na Tabela 2 Os niacuteveis de

Arg digestiacutevel utilizados nas dietas das matrizes de corte influenciaram de forma

quadraacutetica (Plt005) a porcentagem de postura em que o niacutevel de 1262 de Arg

proporcionou a maior porcentagem de postura para as matrizes de corte (Figura 1)

Outros autores tambeacutem encontraram resultados semelhantes em relaccedilatildeo ao

aumento da taxa de postura em funccedilatildeo da suplementaccedilatildeo de Arg Segundo Najib amp

Basiouni (2004) a produccedilatildeo de ovos de matrizes elevou de 52 para 6786 quando

utilizaram niacuteveis de Arg e Lys na dieta de 15 e 12 respectivamente Adicionalmente

Basiouni et al (2006) observaram aumento no peso de foliacuteculos F1 em poedeiras que

receberam dietas com 205 Arg comparado com dietas que continham 154 de Arg

Esse efeito sugere que o aumento na produccedilatildeo de ovos possa ser atribuiacutedo do efeito

estimulatoacuterio especiacutefico da Arg na secreccedilatildeo de LH (Hormocircnio Luteinizante) o qual tem

accedilatildeo direta sobre o ovaacuterio e seus foliacuteculos (Basiouni 2009)

O comportamento observado na curva de produccedilatildeo de ovos demonstra aumento

da produccedilatildeo ateacute o niacutevel de 1262 de Arg e posterior queda ateacute o niacutevel de 1543 o

que provavelmente pode estar associado ao desequiliacutebrio aminoaciacutedico das dietas nos

niacuteveis extremos de Arg na raccedilatildeo Os altos niacuteveis de Arg utilizados podem ter afetado a

produccedilatildeo de ovos principalmente pelo antagonismo existente entre Arg e Lisina (Lys)

Baixas relaccedilotildees ArgLys em dietas de matrizes reduzem o consumo de raccedilatildeo e

deprimem a produccedilatildeo de ovos (Basiouni et al 2006) Altos niacuteveis de Lys associados a

baixos niacuteveis de Arg satildeo deleteacuterios agraves aves pois niacuteveis elevados de Lys promovem

expressiva elevaccedilatildeo da atividade da arginase renal e consequentemente induz agrave

degradaccedilatildeo da Arg (Austic amp Scott 1975) causando sintomas de deficiecircncia de Arg em

virtude das aves natildeo possuiacuterem o ciclo da ureia funcional (Drsquo Mello 2003) Esse

antagonismo ainda leva agrave diminuiccedilatildeo da atividade da glicina-amidinotransferase no

fiacutegado enzima que utiliza Arg e glicina como substratos juntamente com a metionina na

siacutentese da creatina muscular (Jones et al 1967 Andriguetto et al 1999)

48

Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg

()

Postura

()

Peso

Ovo

(g)

Gema

()

Clara

()

Casca

()

Casca

(mm)

Gravidade

Especiacutefica

(gml)

0943 7741plusmn460 6046plusmn048 2998plusmn035 5955plusmn045 876plusmn015 0577plusmn0004 1082plusmn0001

1093 8101plusmn544 6081plusmn052 2972plusmn042 5974plusmn040 902plusmn014 0584plusmn0005 1082plusmn0001

1243 8240plusmn370 6086plusmn051 2971plusmn043 6035plusmn031 875plusmn011 0569plusmn0004 1081plusmn0001

1393 8158plusmn368 6133plusmn057 2986plusmn041 5984plusmn043 880plusmn009 0571plusmn0003 1080plusmn0001

1543 7855plusmn600 6167plusmn046 2964plusmn030 6015plusmn038 876plusmn010 0573plusmn0004 1081plusmn0001

CV() 664 183 195 116 351 198 0133

Anaacutelise Variacircncia

Arg Quadratico1 Linear2 ns ns ns ns Linear3

R2 043 096 ----- ----- ----- ----- 066 1 Y= 421330+01239X-00004908X2 2 Y = 585813+000196527X 3 Y = 108413-000000249943X ns ndash natildeo significativo

77

78

79

80

81

82

83

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Pro

duccedilatilde

o de

ovo

s (

)

Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel

Ao avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arg no peso dos ovos das matrizes de

corte verificou-se aumento linear (Plt005) no peso dos ovos com o aumento de Arg

digestiacutevel nas raccedilotildees por outro lado houve queda linear (Plt005) na gravidade

especiacutefica dos ovos dessas matrizes (Figura 1)

Basiouni et al (2006) encontraram efeito dos niacuteveis de Arg e de Lys sobre na

gravidade especiacutefica dos ovos Estes autores observaram que baixos niacuteveis de Arg e

altos niacuteveis de Lys proporcionaram a melhor gravidade especifica dos ovos e quando a

1262

Arginina dig ()

Y = 421330+011239X-00004908X2 R2=043

49

relaccedilatildeo ArgLys era alta a gravidade especiacutefica piora significativamente Por outro lado

Lima amp Silva (2007) natildeo verificaram efeito das diferentes relaccedilotildees ArgLys digestiacutevel

nos paracircmetros de qualidade de ovos

O aumento do peso do ovo e a queda na gravidade especiacutefica desses ovos

possuem relaccedilatildeo direta Isso ocorre porque segundo Basiouni et al (2006) a siacutentese da

quantidade de casca dos ovos nas galinhas eacute constante Aleacutem disso com o aumento da

idade das galinhas ocorre aumento no tamanho dos ovos Do iniacutecio ateacute o final do ciclo

de postura o ovo chega a aumentar ateacute 40 do seu tamanho e por isso haveraacute menos

caacutelcio na superfiacutecie da casca o que reduz a espessura da casca (Baiatildeo amp Aguilar 2001)

e consequentemente a gravidade especiacutefica dos ovos

Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados de rendimento da incubaccedilatildeo dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel estatildeo apresentados na Tabela 3 Os

niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis de

incubaccedilatildeo Demonstra-se portanto que a Arg pode ser utilizada na dieta das matrizes

sem trazer prejuiacutezos agrave reproduccedilatildeo

A fertilidade e a eclosatildeo dos ovos das matrizes satildeo dois paracircmetros importantes

na incubaccedilatildeo dos ovos Valores proacuteximos de 96 para fertilidade e 88 para eclosatildeo

satildeo indicativos de bom manejo de reprodutoras (Rosa amp Aacutevila 2000) Segundo Rosa amp

Aacutevila (2000) o rendimento da incubaccedilatildeo estaacute diretamente relacionado com a

mortalidade embrionaacuteria a qual sofre influecircncia da gravidade especiacutefica e da

capacidade do ovo em perder umidade No presente trabalho observou-se que a

utilizaccedilatildeo de dietas suplementadas com Arg natildeo afetou nenhuma dessas variaacuteveis

apesar de ter interferido na gravidade especiacutefica dos ovos conforme demonstrado em

tabelas anteriores

10795

108

10805

1081

10815

1082

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Gra

vida

de e

spec

iacutefica

(gm

l)

59860

602604606608

61612614616618

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Peso

(g)

Y = 108413-000000249943X R2=066 Y = 585813+000196527X R2=096

50

O peso do pinto natildeo foi influenciado pelos niacuteveis de Arg na dieta das matrizes

de corte eacute considerado muito importante na cadeia de produccedilatildeo por estar diretamente

relacionado ao desempenho produtivo do frango A variaccedilatildeo de peso do pinto no

momento da eclosatildeo pode ser causada por fatores como linhagem idade da matriz peso

e niacuteveis de nutrientes do ovo (Vieira amp Moran Jr 1999) Okada (1994) e Castro (1996)

ressaltam que pintos de corte com mais de 40g no primeiro dia de vida devem ser

considerados de boa qualidade Os pintos desse experimento podem ser considerados de

boa qualidade jaacute que o menor peso dos pintos ao nascer foi de 439g Embora neste

estudo os niacuteveis de Arg na dieta das matrizes natildeo tenham afetado o peso dos pintos esse

aminoaacutecido eacute essencial para o bom desenvolvimento da progecircnie Kita et al (2002)

relatam que dietas com alta proteiacutena suplementadas com aminoaacutecidos essenciais (Arg

metionina+cistina) aumentam os niacuteveis plasmaacuteticos do fator de crescimento semelhante

agrave insulina (IGF-I) e o ganho de peso em aves jovens

Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Variaacuteveis Niacuteveis de Arginina

()

Fertilidade ()

Eclosatildeo ()

Peso ovo (g)

Peso Pinto (g)

Relaccedilatildeo Peso OvoPeso Pinto

0943 9750plusmn218 7875plusmn450 6269plusmn042 4507plusmn053 7168plusmn045 1093 9513plusmn212 8038plusmn459 6212plusmn033 4390plusmn045 7115plusmn054 1243 9250plusmn206 8125plusmn464 6200plusmn047 4487plusmn066 7234plusmn047 1393 9750plusmn218 8000plusmn457 6314plusmn072 4514plusmn086 7173plusmn082 1543 9625plusmn215 7750plusmn443 6351plusmn055 4529plusmn039 7127plusmn045 Meacutedia 9578 7958 6269 4486 7163

CV () 656 1641 231 374 222 Anaacutelise de Variacircncia Arginina ns ns ns ns ns

R2 ------ ------ ----- ------- ------- ns = natildeo significativo

O peso dos ovos eacute outra caracteriacutestica de grande importacircncia relacionada com a

idade da matriz os quais satildeo preponderantes para o desenvolvimento inicial das aves e

tem consequecircncias em todo o crescimento (Pedroso et al 2005) Essa influecircncia eacute bem

conhecida e o peso do pinto representa entre 66 e 71 do peso do ovo (Fiuacuteza et al

2006 Marinho et al 2006 Pappas et al 2006) Segundo North amp Bell (1990) cada

51

grama a mais no peso do pinto representa 13 gramas no peso do frango ao abate por

isso a nutriccedilatildeo das matrizes eacute de grande importacircncia jaacute que a Arg tem relaccedilatildeo positiva

com o hormocircnio de crescimento (GH) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave

(Harvey et al 2001)

Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico

Estimativas Bayesianas

Ligaccedilatildeo Ligaccedilatildeo Meacutedias Desvio Padratildeo P25 P975 DIC

Embriodiagnoacutestico

Linear α β

-07512 -25980

2078 1798

-4811 -6367

3426 0784 4783 Mortalidade

Embrionaacuteria (1 a 5 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-8444 10690 -5607

10610 18020 7538

-3015 -2406 -2104

11790 47550 8874

4813

Linear α β

2259 -6267

3790 3615

-4602 -14470

10570 -

01174 3137

Mortalidade (11 a 17 dias)

Quadraacutetica α β1 β2

5057 -11090 1958

12960 22430 9632

-2027 -5093 -1714

3112 3253 2052

3167

Linear α β

-3726 1274

10390 07968

-58110 -02681

-1730 2882 1079

Mortalidade (18 a 21 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-1634 -2195 1387

6330 10280 4084

-14020 -22380 -6539

10690 17840 9441

1095

Linear α β

-1927 -2266

2562 2359

-7233 -7321

2739 1993 0070

Bicado Vivo Quadraacutetica

α β1 β2

-1451 -1692 -2019

2749 2821 2539

-7044 -7313 -7290

3755 3682 2565

0057

Linear α β

-2564 -1628

2860 2418

-8103 -6479

2823 2755 3417

Bicado Morto Quadraacutetica

α β1 β2

3692 -12350 4412

11930 19920 8139

-1936 -5206 -1148

2739 2609 2054

3428

Linear α β

-513600 -004923

3798 3023

-13000 -6154

2041 5809 2522

Morte por Contaminaccedilatildeo Quadraacutetica

α β1 β2

-009106 -71940 28920

13200 21610 8744

-2704 -4965 -1428

2480 3473 2016

2555

Na Tabela 4 satildeo apresentadas as estimativas Bayesianas para as equaccedilotildees de

regressatildeo ajustadas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos provenientes das

matrizes de corte alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg Natildeo foi verificado efeito da

dieta das matrizes sobre nenhuma das variaacuteveis paracircmetros avaliadas (Pgt005)

52

Contudo no periacuteodo final do desenvolvimento embrionaacuterio (18 a 21 dias) haacute maior

mortalidade (Tabela 5) Nesse periacuteodo haacute mudanccedila draacutestica do meio aquoso protegido

para o meio aeroacutebio totalmente diferente Nas aves essa fase final de desenvolvimento

inclui absorccedilatildeo de aacutegua retraccedilatildeo do saco vitelino maturaccedilatildeo funcional do pulmatildeo

transiccedilatildeo da respiraccedilatildeo coacuterio-alantoide para pulmonar bicagem e nascimento Ocorre

ao mesmo tempo o desenvolvimento da resposta homeoteacutermica (Oviedo-Roacutendon amp

Murakami 1998) Aleacutem disso nesse periacuteodo ocorre a mudanccedila pronunciada em

hormocircnios tireoideanos corticosteroideos hormocircnios do eixo somatotroacutepico

prolactina vasotocina e melatonina

Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg Morte

Embrionaacuteria (1 a 5 dias)

Morte (11 a 17 dias)

Morte (18 a 21

dias)

Bicado Morto

Morte por Contaminaccedilatildeo

Arg () 0943 264 416 889 264 125 1093 514 000 764 125 000 1243 250 000 836 000 125 1393 000 125 1514 125 000 1543 125 000 1406 125 125 CV () 20962 50785 9999 27439 36515 (Pgt005)

Conclusatildeo

A suplementaccedilatildeo das dietas de matrizes de corte com niacuteveis crescentes de

Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o

niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os

niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas

podendo ser utilizado o menor niacutevel de suplementaccedilatildeo ou seja 0943 de Arg

digestiacutevel sem prejuiacutezos

53

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56

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and diverse strains Journal Applied Poultry Research v 7 p 339-346 1998 WHITING TS PESTI GM Broiler performance and hatching egg weight to

marketing weight relatioships of progeny from standard and dwarf broiler dams Poultry Science v63 p 425-429 1984

IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e

paracircmetros oacutesseos da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos

Palavras-chave avaliaccedilatildeo de carcaccedila desempenho produtivo osso

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IV - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

performance carcass yield and bone parameters of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine

(Arg) supplementation in broiler breeder henrsquos diet on performance carcass yield and bone parameters in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) These results indicate that it is necessary to feed the progeny with an Arg-supplemented diet to obtained better performance and bone quality Key words bone carcass evaluation productive performance

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Introduccedilatildeo

As exigecircncias nutricionais para a maioria dos nutrientes satildeo estabelecidas com

base nas respostas produtivas mas em alguns casos a sauacutede eacute o criteacuterio principal A

nutriccedilatildeo de reprodutoras pesadas deve atender as exigecircncias da ave alcanccedilando bom

desempenho produtivo e ainda suprir as necessidades dos embriotildees e dos pintos

neonatos originados de seus ovos O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo

dependem completamente dos nutrientes contidos no ovo os quais satildeo originados da

dieta e do metabolismo das galinhas (Baiatildeo amp Lucio 2005) Assim a concentraccedilatildeo de

nutrientes disponiacuteveis no ovo para o desenvolvimento do embriatildeo eacute criacutetico e pode

influenciar o potencial de ganho de peso da progecircnie e caracteriacutesticas importantes de

desenvolvimento imunitaacuterio oacutesseo e muscular

O crescimento precoce no periacuteodo poacutes-eclosatildeo eacute influenciado por vaacuterios

fatores entre eles o conteuacutedo de resiacuteduos do saco viteliacutenico a ingestatildeo de alimento e de

aacutegua os niacuteveis de enzimas pancreaacuteticas e intestinais a aacuterea de superfiacutecie intestinal e a

digestibilidade global de nutrientes (Dibner 1996) As reservas contidas no saco

vitelino satildeo as primeiras fontes de nutrientes utilizadas pelo pintainho ao nascer Desse

modo quanto maior o tempo decorrido entre a eclosatildeo e o iniacutecio da ingestatildeo de

alimento e aacutegua maior a dependecircncia que o pintainho teraacute dessas reservas (Vieira amp

Pophal 2000) a dieta materna eacute a origem dos nutrientes para o embriatildeo (Vieira 2007)

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) afirmam que para matrizes pesadas existe uma pausa nas

pesquisas que visam determinar as exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos Embora os

aminoaacutecidos presentes na gema possam ser suficientes durante o processo de eclosatildeo

apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

desenvolvimento inicial (Otha et al 2004)

Os aminoaacutecidos sinteacuteticos disponiacuteveis no mercado proporcionam o atendimento

das exigecircncias nutricionais das aves principalmente em relaccedilatildeo aos aminoaacutecidos

60

limitantes Dentre esses aminoaacutecidos a arginina (Arg) eacute considerada o quinto

aminoaacutecido limitante para frangos de corte em dietas agrave base de milho e de farelo de

soja apoacutes metionina+cistina lisina treonina e valina (Corzo 2007) Como as aves natildeo

apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem exclusivamente da Arg sinteacutetica

principalmente no periacuteodo inicial de criaccedilatildeo (Allen amp Baker 1972) A suplementaccedilatildeo

da Arg eacute necessaacuteria para a formaccedilatildeo da ornitina a qual estaacute envolvida na siacutentese da

prolina que eacute utilizada para a formaccedilatildeo das poliaminas (espermidina espermina e

putrescina) Estas moleacuteculas estatildeo associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

A Arg aleacutem de serem constituintes de proteiacutenas participa como coadjuvante na

secreccedilatildeo de insulina pelas ceacutelulas β do pacircncreas (Bolea et al 1997) e na secreccedilatildeo do

hormocircnio de crescimento (GH) (Ghigo et al 1994) Os efeitos do GH satildeo mediados

pelos fatores de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Le Roith et al 2001) O

IGF-I eacute conhecido por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo

esqueleacutetico como a proliferaccedilatildeo e diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelite (Florini et al 1996)

e a agregaccedilatildeo de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos sobre a siacutentese e a

degradaccedilatildeo proteica (Duclos et al 1991 Coleman et al 1995 Duclos et al2005)

Outro efeito do GH ocorre em niacutevel do disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de

IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no crescimento dos ossos longos (Isaksson et

al 1987)

O enriquecimento dos ovos das matrizes com Arg bem como sua suplementaccedilatildeo

logo apoacutes a eclosatildeo pode trazer inuacutemeros benefiacutecios sobre o desenvolvimento da

progecircnie jaacute que o GH influenciado pela Arg tem sua siacutentese iniciada na fase

embrionaacuteria da ave (Harvey et al 2001)

Diante do exposto com este estudo objetivou-se testar a influecircncia da

suplementaccedilatildeo com L-Arginina na dieta das matrizes de corte sobre a progecircnie com

dieta suplementada ou natildeo suplementada com L-Arginina sobre o desempenho

paracircmetros oacutesseos e rendimento de carcaccedila dos frangos de corte

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

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Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

no delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina

incluiacutedos na dieta materna variando de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal (0

943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 35

aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada box foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado o

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

em todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as sobras de raccedilatildeo dos boxes foram pesadas para

ajustar o consumo de raccedilatildeo e da conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 2) As

dietas experimentais agrave base de milho e de farelo de soja foram formuladas de acordo

com os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e as recomendaccedilotildees nutricionais

62

propostas por Rostagno et al (2005) As aves controle receberam dieta sem

suplementaccedilatildeo de arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz

sobre o desempenho da progecircnie

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais basais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 017 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 1000 10000 Valores calculados PB () 2000 1850 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

63

Experimento 3 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina digestiacutevel na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes utilizando o delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina e seis repeticcedilotildees

com 32 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal inicial e de crescimento em

substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial corresponderam a 1300

1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela 2) A partir dos 22

dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300 1450 1600

e 1750 de arginina digestiacutevel (Tabela 3) O manejo realizado nesse experimento foi

conduzido conforme descrito no experimento anterior

Desempenho

Para ambos os experimentos com a progecircnie foram avaliados o desempenho

zooteacutecnico (ganho de peso consumo de raccedilatildeo e conversatildeo alimentar) Para avaliaccedilatildeo do

desempenho as raccedilotildees e as aves foram pesadas no iniacutecio do experimento aos 7 21 e 42

dias de idade

Paracircmetros oacutesseos

Os paracircmetros oacutesseos avaliados foram comprimento diacircmetro peso e calculado

o Iacutendice de Seedor Para avaliaccedilatildeo dos paracircmetros oacutesseos em ambos os experimentos

com a progecircnie apoacutes o sacrifiacutecio por meio de atordoamento seguido de sangria foram

coletados os fecircmures e as tiacutebias esquerdas de duas avesrepeticcedilatildeo aos 7 e 21 dias de

idade As amostras ficaram congeladas (-18ordmC) ateacute o iniacutecio das anaacutelises dos paracircmetros

oacutesseos que foram executadas conforme descrito a seguir

Apoacutes o descongelamento dos ossos foram retirados os tecidos envolventes

(tecido muscular aderido) com auxiacutelio de tesouras e pinccedilas Os ossos descongelados

foram pesados em balanccedila analiacutetica (g plusmn 00001) e o comprimento e o diacircmetro (na

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porccedilatildeo meacutedia do osso) foram medidos usando paquiacutemetro eletrocircnico digital (capacidade

de 0 a 150 mm e resoluccedilatildeo de 001 mm)

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900

Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6456 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl Vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 1300 1450 1600 1750 1900 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

65

A partir do peso do osso e do seu comprimento foi calculado o Iacutendice de Seedor

(Seedor et al 1993) de acordo com a seguinte foacutermula Iacutendice de Seedor = Peso do

osso (mg)comprimento do osso (mm)

Este iacutendice eacute utilizado como indicativo da densidade oacutessea Quanto maior o

Iacutendice de Seedor maior a densidade da peccedila oacutessea e vice-versa

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000

mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

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Rendimento de carcaccedila

Para determinaccedilatildeo do rendimento de carcaccedila foram utilizadas trecircs aves por

unidade experimental (15 avestratamento) identificadas com anilhas numeradas e

submetidas ao jejum por seis horas atordoadas com eletricidade (220W) e com

posterior sangria no final de cada experimento realizado com a progecircnie

Para caacutelculo do rendimento de carcaccedila foi considerado o peso da carcaccedila

eviscerada quente sem os peacutes cabeccedila e gordura abdominal em relaccedilatildeo ao peso vivo

que foi obtido individualmente antes do abate das aves Para rendimento dos cortes

nobres foi considerado o rendimento do peito inteiro com pele e ossos das pernas

(coxa e sobrecoxa) e das asas que foi calculado em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila

eviscerada

Para caacutelculo da gordura abdominal foi considerada a gordura presente ao redor da

cloaca da bolsa cloacal moela proventriacuteculo e dos muacutesculos abdominais adjacentes foi

retirada conforme descrito por Smith (1993) Em seguida foi pesada e tambeacutem

calculada em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila eviscerada

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

67

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

Resultados e discussatildeo

Os valores meacutedios de desempenho de frangos de corte provenientes de matrizes

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg com dieta suplementada e natildeo suplementada

com Arg estatildeo demonstrados nas Tabelas 5 e 6 respectivamente

No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) os frangos que receberam dietas

suplementadas com Arg apresentaram efeito linear positivo (Plt005) dos niacuteveis

crescentes de suplementaccedilatildeo com Arg sobre o ganho de peso O consumo de raccedilatildeo e a

conversatildeo alimentar foram influenciados de forma quadraacutetica (Plt005) e o niacutevel de

1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649

proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente (Figura 2)

Esses niacuteveis satildeo superiores aos encontrados por Atencio et al (2004) que apresentaram

os niacuteveis de 127 e 128 de Arg digestiacutevel para ganho de peso e conversatildeo

alimentar respectivamente Mendes et al (1997) e Brake et al (1998) observaram

melhor conversatildeo alimentar agrave medida que a Arg foi adicionada agraves dietas dos frangos de

corte

68Tabela 5 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito

0943 1093 1243 1393 1543

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 68749plusmn651 69813plusmn1553 69498plusmn876 71393plusmn2071 71148plusmn1009 466 ns

Consumo de raccedilatildeo g 108937plusmn973 108077plusmn2506 106938plusmn1143 108570plusmn2584 109617plusmn1424 420 ns

Conversatildeo alimentar gg 1585plusmn0015 1548plusmn0006 1539plusmn0014 1523plusmn0023 1541plusmn0004 224 Quadraacutetico1

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 182410plusmn1786 178280plusmn1963 183209plusmn2355 170699plusmn3272 177743plusmn3493 366 ns

Consumo de raccedilatildeo g 339169plusmn2597 332944plusmn4420 334432plusmn4460 328563plusmn5011 335512plusmn4351 311 ns

Conversatildeo alimentar gg 1859plusmn0017 1868plusmn0017 1825plusmn0008 1926plusmn0027 1889plusmn0014 230 ns

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 251160plusmn2118 248093plusmn2721 252708plusmn2327 242092plusmn4528 248891plusmn3614 314 ns

Consumo de raccedilatildeo g 448106plusmn3333 441022plusmn6500 441370plusmn5178 437133plusmn7327 445129plusmn4655 309 ns

Conversatildeo alimentar gg 1784plusmn0013 1777plusmn0011 1746plusmn0005 1807plusmn0021 1789plusmn0008 177 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 15844-0000270801X+0000000325260X2 R2 = 070

69Tabela 6 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito

1300 1450 1600 1750 1900

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 75785plusmn402 77320plusmn1073 78103plusmn635 79648plusmn670 80151plusmn344 212 Linear1

Consumo de raccedilatildeo g 89299plusmn1140 92124plusmn2246 103470plusmn4037 104782plusmn562 96677plusmn1665 557 Quadraacutetico2

Conversatildeo alimentar gg 1179plusmn0007 1192plusmn0031 1326plusmn0055 1316plusmn0012 1207plusmn0026 613 Quadraacutetico3

1150 1300 1450 1600 1750

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 177261plusmn2817 177088plusmn2760 180666plusmn2220 182398plusmn3067 177484plusmn2109 359 ns

Consumo de raccedilatildeo g 358840plusmn5051 353952plusmn5112 356084plusmn2723 358440plusmn6584 354362plusmn2670 322 ns

Conversatildeo alimentar gg 2025plusmn0013 1999plusmn0017 1972plusmn0016 1965plusmn0006 1997plusmn0013 165 Quadraacutetico4

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 253047plusmn2782 254408plusmn3313 258769plusmn2443 262046plusmn3324 257635plusmn2041 269 Linear5

Consumo de raccedilatildeo g 448139plusmn5104 446076plusmn6429 459554plusmn4864 463275plusmn6840 451039plusmn3651 297 ns

Conversatildeo alimentar gg 1771plusmn0009 1754plusmn0015 1777plusmn0022 1768plusmn0005 1751plusmn0012 192 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 759898+00737276X R2 = 081 2 Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=085 3 Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 = 096 4 Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031 5 Y = 253818+0112096X R2 = 017

70

149150151152153154155156157158159

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo A

limen

tar

Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Na progecircnie natildeo suplementada com dieta contendo Arg verificou-se efeito

quadraacutetico (Plt005) da nutriccedilatildeo das matrizes na conversatildeo alimentar (CA) (Figura 1)

sendo que 1359 de Arg dig proporcionou o melhor iacutendice Jaacute o consumo de raccedilatildeo e o

ganho de peso natildeo foram afetados (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo da matriz

O efeito observado da suplementaccedilatildeo com Arg das matrizes na CA de frangos de

corte natildeo suplementados com Arg ser atribuiacuteda ao aumento na concentraccedilatildeo desse

aminoaacutecido na gema a qual eacute responsaacutevel pela nutriccedilatildeo dos pintos durante o seu

desenvolvimento embrionaacuterio e nas primeiras horas de vida poacutes-eclosatildeo Esse aumento

pode ter efeito positivo no desenvolvimento muscular dos pintos uma vez que esse

aminoaacutecido tem accedilatildeo indireta na formaccedilatildeo muscular atraveacutes da siacutentese do hormocircnio de

crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO) Aleacutem disso a Arg ainda estaacute envolvida na

siacutentese da creatina e de poliaminas As poliaminas satildeo consideradas de importacircncia

nutricional no crescimento e desenvolvimento do intestino do neonato (Quinn et al

2002) Segundo Foye et al(2005) o acesso do embriatildeo a nutrientes pode melhorar o

desenvolvimento do sistema digestoacuterio a eclodibilidade e o desempenho dos frangos

Quando o comportamento da curva do consumo de raccedilatildeo dos frangos de corte

que receberam dietas suplementadas com Arg foi analisada verifica-se que apoacutes o

ponto de maior consumo de raccedilatildeo ocorre uma queda na curva (Figura 2) Esse efeito

pode ter sido ocasionado por um desequiliacutebrio dos aminoaacutecidos na dieta afetando

principalmente a relaccedilatildeo LysArg O antagonismo entre esses aminoaacutecidos prejudica a

absorccedilatildeo desses uma vez que ambos competem pelo mesmo siacutetio de absorccedilatildeo

Segundo Fernandes et al (2009) o efeito negativo da suplementaccedilatildeo de Arg

pode estar associado agrave incapacidade funcional dos rins em eliminar o excesso de ureia

formado pela degradaccedilatildeo da Arg Niacuteveis elevados de Arg promovem aumento na

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 070

1359

71

atividade da arginase renal produzindo ornitina e ureia (Stuz et al 1971) Este aumento

pode comprometer a siacutentese de NO visto que a Arg eacute a uacutenica via fisioloacutegica de

produccedilatildeo deste composto Adicionalmente a isso a elevaccedilatildeo da ureia plasmaacutetica de

acordo com Prabhakar et al (1997) pode inibir a accedilatildeo da oacutexido niacutetrico sintetase (NOS)

enzima que cataliza a reaccedilatildeo que converte Arg em NO O NO aleacutem de

neurotransmissor tambeacutem modula a liberaccedilatildeo de outros neurotransmissores (Estrada amp

Murilo-Carretero 2005) cujo envolvimento destas moleacuteculas na regulaccedilatildeo do apetite

vem sendo discutido (Denbow 1999)

750

800

850

900

950

1000

1050

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

sum

o de

raccedilatilde

o (g

)

730

740

750

760

770

780

790

800

810

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Gan

ho d

e pe

so (g

)

105

11

115

12

125

13

135

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo das matrizes com dietas com Arg natildeo afetou as variaacuteveis de

desempenho da progecircnie natildeo suplementada com Arg no periacuteodo de 21 a 42 dias de

idade (Pgt005) Poreacutem quando a progecircnie recebeu dieta com Arg verificou-se efeito

quadraacutetico para conversatildeo alimentar (Plt005) e o melhor resultado foi alcanccedilado com

1669 de Arg (Figura 3)

Sabe-se que a conversatildeo alimentar indica a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo da dieta para

o crescimento e deposiccedilatildeo muscular Assim o crescimento consiste em parte do

resultado da siacutentese proteica e a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo dependem da quantidade de

aminoaacutecidos que estatildeo sendo catabolizados (Sklan amp Noy 2004) Este processo

depende de energia para a biotransformaccedilatildeo e a eliminaccedilatildeo com custo metaboacutelico para

Y = 759898+00737276X R2 = 085

Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 =0 96

Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=081

1690

1649

72

incorporar um aminoaacutecido na cadeia proteica de 4 mol de ATP e de 6 mol de ATPg de

N para eliminaacute-lo (Mc Leoad 1997)

194195196197198199

2201202203204

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo de Arg durante todo o periacuteodo de criaccedilatildeo eacute essencial para que

a ave expresse todo o seu potencial geneacutetico principalmente em relaccedilatildeo ao ganho de

peso Para a progecircnie suplementada no periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade)

observou-se efeito linear positivo (Pgt005) no ganho de peso e para a progecircnie que natildeo

recebeu suplementaccedilatildeo natildeo foi observado efeito(Pgt005) da suplementaccedilatildeo das

matrizes nas variaacuteveis de desempenho (Figura 4)

2500

2520

2540

2560

2580

2600

2620

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Gan

ho d

e Pe

so (g

)

Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

De fato segundo Fernandes et al (2009) a suplementaccedilatildeo de Arg acima das

exigecircncias nas raccedilotildees iniciais (1 a 21 dias) dos frangos melhora o desempenho

produtivo das aves entretanto esse efeito eacute transiente natildeo havendo diferenccedila nestas

caracteriacutesticas na idade de abate

Na fase inicial de criaccedilatildeo a Arg eacute considerada um aminoaacutecido essencial na dieta

das aves visto que o ciclo da ureia natildeo eacute funcional nas aves Assim a incapacidade

desses animais em sintetizar Arg implica na necessidade do fornecimento desse

aminoaacutecido na dieta Aleacutem disso a Arg eacute considerada o quinto aminoaacutecido limitante

Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031

1669

Y = 253818+0112096X R2 = 017

73

para frangos em dietas agrave base de milho e de farelo de soja apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Segundo Ball et al (2007) a exigecircncia de Arg pelas aves eacute a mais alta entre as

espeacutecies de animais estudadas isso porque aleacutem da falta da siacutentese endoacutegena a taxa de

deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento das atuais linhagens de corte eacute muito alta

Os valores meacutedios de desempenho (Tabelas 5 e 6) apresentados durante o

periacuteodo experimental total (1 a 42 dias) satildeo muito proacuteximos Assim foi realizada a

anaacutelise conjunta de ambos os experimentos para confirmar a necessidade ou natildeo de

suplementaccedilatildeo da progecircnie com Arg na dieta No periacuteodo total de 1 a 42 dias (Tabela

7) a CA foi melhor na progecircnie que recebeu dieta suplementada apesar do CR ter sido

superior nessas aves demonstrando assim que a progecircnie suplementada com Arg

converte mais eficientemente a raccedilatildeo em massa muscular

Tabela 7 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg

1 a 21 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 70120plusmn585 108428plusmn789 1547plusmn0007

Progecircnie (suplementada) 78202plusmn406 97271plusmn1456 1243plusmn0018

CV () 473 913 0011 22 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 178468plusmn1380 334124plusmn1877 1874plusmn010

Progecircnie (suplementada) 178979plusmn1160 356346plusmn1981 1992plusmn0007

CV () 1182 1999 0007 1 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 248588plusmn1487 442552plusmn2419b 1781plusmn0006b

Progecircnie (suplementada) 257181plusmn1315 453617plusmn2597a 1764plusmn0006a

CV () 1347 2477 0006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Dentre os paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada

apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis

suplementares de Arg recebidos pelas matrizes (Figura 5)

74

Tabela 8 ndash Meacutedias e erro padratildeo de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito Paracircmetros 0943 1093 1243 1393 1543

de Carcaccedila 6944plusmn025 6863plusmn044 6987plusmn033 6953plusmn028 7009plusmn029 115 Linear1

de Peito 3587plusmn028 3519plusmn017 3662plusmn032 3639plusmn041 3618plusmn042 228 ns

de Coxa 3041plusmn032 3085plusmn019 2970plusmn033 2999plusmn032 3021plusmn022 229 ns

de Asa 1142plusmn016 1129plusmn014 1118plusmn006 1104plusmn020 1110plusmn014 329 ns

de Dorso 2279plusmn020 2352plusmn026 2267plusmn014 2287plusmn030 2262plusmn030 266 ns

de Gordura abdominal 295plusmn015 325plusmn014 292plusmn016 367plusmn019 290plusmn011 1220 ns ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 690720+000146984X R2 = 081 Tabela 9 ndash Meacutedias e erros padratildeo de rendimento da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito Paracircmetros 1150 1300 1450 1600 1750

de Carcaccedila 6993plusmn029 7022plusmn028 7138plusmn033 7128plusmn020 7160plusmn031 099 Linear1

de Peito 3579plusmn030 3584plusmn077 3690plusmn021 3651plusmn028 3698plusmn019 277 Linear2

de Coxa 3126plusmn030 3108plusmn066 3027plusmn025 3026plusmn023 3045plusmn020 295 Linear3

de Asa 1137plusmn022 1123plusmn015 1105plusmn017 1095plusmn015 1096plusmn021 398 Linear4

de Dorso 2272plusmn033 2286plusmn057 2263plusmn028 2273plusmn028 2260plusmn048 436 ns

de Gordura abdominal 314plusmn013 311plusmn013 238plusmn007 279plusmn014 285plusmn007 964 Quadraacutetico5 1 Y = 700017+000293620X R2= 045 2 Y = 357918+000203737X R2 = 027 3 Y = 311542-000163610X R2=021 4 Y = 113323-000072978X R2 = 085 5 Y = 322863-000316200X+000000424975X2R2=030 ns = natildeo significativo

75

686

688

69

692

694

696

698

70

702

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

d

e C

arca

ccedila

Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Al-Murrani (1982) demonstrou que injetando uma mistura de aminoaacutecidos nos

embriotildees em crescimento nos ovos de matrizes de corte resultam em aumento no peso

do pinto e no ganho de peso dos frangos de corte aos 56 dias de idade quando estes

foram comparados com os natildeo tratados De fato o peso do embriatildeo e dos pintos eacute

influenciado pelo perfil nutricional da gema por sua utilizaccedilatildeo pelo pintos apoacutes o

nascimento (Otha et al 1999)

Quando os frangos receberam dietas suplementadas com Arg houve aumento

linear positivo (Plt005) da porcentagem de carcaccedila e de peito poreacutem as porcentagens

de pernas e de asa apresentaram queda linear (Plt005) (Figura 6) Esses efeitos

provavelmente ocorreram pela accedilatildeo indireta da Arg pela formaccedilatildeo muscular atraveacutes da

siacutentese do hormocircnio do crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO)

A Arg eacute constituinte de proteiacutenas e estaacute envolvida na secreccedilatildeo de insulina pelo

pacircncreas (Bolea et al 1997) e do GH pela hipoacutefise (Merimee et al 1969) Os efeitos

desses hormocircnios se manifestam por meio da secreccedilatildeo secundaacuteria dos fatores de

crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Roith et al 2001) O IGF-I eacute conhecido

por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo esqueleacutetico como

a proliferaccedilatildeo e a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelites (Florini et al 1996) e a agregaccedilatildeo

de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos na siacutentese e na degradaccedilatildeo proteica

(Duclos et al 2005)

Outro mecanismo de accedilatildeo da Arg nas fibras musculares estaacute relacionada com agrave

accedilatildeo do oacutexido niacutetrico O NO eacute sintetizado pela oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) a qual eacute

expressada pelas fibras do muacutesculo esqueleacutetico (Reid 2001) A atividade da NOS

variam nos diferentes tipos de muacutesculos sendo que nos muacutesculos de contraccedilatildeo raacutepida

verifica-se maior accedilatildeo desta do que nos muacutesculos de contraccedilatildeo lenta (Reid 2001)

Y = 690720+000146984X R2 = 081

76

Assim o efeito observado nos diferentes cortes provavelmente ocorreu em virtude da

predominacircncia de fibras brancas ou Fast Glycolytic (FG) no peito Em contrapartida os

muacutesculos da coxa sobrecoxa e da asa possuem predominacircncia de fibras vermelhas ou

Slow Oxidative (SO) que satildeo de contraccedilatildeo lenta (Sartori amp Gonzaacuteles 2002) e pouco

afetada pela accedilatildeo da NOS

O teor de gordura abdominal presente na carcaccedila de frangos eacute um dos melhores

indicativos de qualidade da carcaccedila Quando os frangos foram suplementados com

niacuteveis de Arg verificou-se efeito quadraacutetico (Plt005) para essa caracteriacutestica em que o

menor teor de gordura abdominal foi obtido com 1672 de Arg dig (Figura 6) A

queda observada ateacute esse niacutevel pode ser explicada pela accedilatildeo do GH via IGF-I que induz

a siacutentese de proteiacutenas por estimular a captaccedilatildeo de aminoaacutecidos e a transcriccedilatildeo e a

traduccedilatildeo do mRNA em vaacuterios tecidos-alvo Diminui o catabolismo de proteiacutenas por

atuar diretamente na liberaccedilatildeo de aacutecidos graxos do tecido adiposo aumentando a sua

conversatildeo em acetil-CoA fonte de energia para os tecidos perifeacutericos A partir desse

ponto onde verifica-se o menor acuacutemulo de gordura ocorre novamente o aumento na

deposiccedilatildeo de gordura abdominal Isso provavelmente se deve ao excesso de aminoaacutecido

na dieta A degradaccedilatildeo desse excesso leva a excreccedilatildeo de nitrogecircnio na urina na forma

de amocircnia e a produccedilatildeo de moleacuteculas com esqueleto carbocircnico que satildeo usadas na

gliconeogecircnese e na lipogecircnese

Segundo Shutte amp Pack (1995) e Leclerq (1998) a suplementaccedilatildeo e o

balanceamento dos aminoaacutecidos das dietas podem promover aumento no ganho de

carcaccedila principalmente em relaccedilatildeo ao peito (Pophal et al 2004) e reduccedilatildeo de gordura

abdominal (Vieira et al 2004)

Mendes et al (1997) verificaram que o aumento da relaccedilatildeo ArgLys melhorou o

rendimento de carcaccedila e reduziu a gordura abdominal em frangos de corte Costa et al

(2001) observaram que agrave medida em que se aumentou a relaccedilatildeo ArgLys houve efeito

linear crescente para o rendimento de perna e decrescente para a gordura abdominal Jaacute

Fernandes et al (2009) natildeo observaram efeito da suplementaccedilatildeo de Arg nas variaacuteveis de

rendimento de carcaccedila analisadas o que provavelmente ocorreu porque diferentemente

do presente trabalho a suplementaccedilatildeo de Arg foi realizada apenas na fase inicial de

criaccedilatildeo (1 a 21 dias de idade)

77

69

695

70

705

71

715

72

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

arca

ccedila

35352354356358

36362364366368

37372

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

P

eito

296298

30302304306308

31312314

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

oxa

106

107

108

109

11

111

112

113

114

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

A

sa

2

22

24

26

28

3

32

34

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

G

ordu

ra a

bdom

inal

Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Outra possibilidade eacute que essas caracteriacutesticas de rendimento de carcaccedila foram

influenciadas pelos niacuteveis dieteacuteticos de Arg que estatildeo acima da exigecircncia das aves

Resultado contraacuterio foi obtido por Atencio et al (2004) que trabalhando com niacuteveis

crescentes de Arg natildeo verificaram efeito no rendimento de carcaccedila e de cortes

avaliados e estes concluiacuteram que os niacuteveis estudados estavam dentro da exigecircncia das

aves

Na anaacutelise conjunta do rendimento de carcaccedila dos experimentos da progecircnie

que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg (Tabela 10) demonstrou-se que a

presenccedila de Arg na dieta promove maior deposiccedilatildeo muscular na coxa e menor acuacutemulo

de gordura abdominal na carcaccedila

Y = 322863-000316200X+000000424975X2 R2 = 030

1672

Y = 700017+000293620X R2 = 045 Y = 357918+000203737X R2 = 027

Y = 113323-000072978X R2 = 085 Y = 311542-000163610X R2 = 021

Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

78

Tabela 10 ndash Meacutedias de percentagem de carcaccedila (CARC) percentagem de peito (PEITO) percentagem de coxa (COXA) percentagem de asa (ASA) percentagem de gordura abdominal (GORDURA) das progecircnies suplementadas ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

CARC PEITO COXA ASA GORDURAProgecircnie

(ssuplementaccedilatildeo) 6951plusmn016 3605plusmn017 3023plusmn014b 1121plusmn007 307plusmn007ordf

Progecircnie (suplementada) 7088plusmn017 3640plusmn020 3066plusmn017ordf 1111plusmn008 285plusmn007b

CV () 014 017 015 007 006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Com relaccedilatildeo aos paracircmetros oacutesseos dos frangos de corte que receberam dietas

sem suplementaccedilatildeo de Arg (Tabela 11) apenas o diacircmetro de tiacutebia aos sete dias de

idade foi afetado de forma quadraacutetica (Plt005) pela suplementaccedilatildeo das matrizes a

partir do niacutevel 1196 de Arg (Figura 7) demonstrando assim que inclusotildees de Arg

acima da exigecircncia promove a melhora dessa caracteriacutestica Segundo Wu amp Morris

(1998) a suplementaccedilatildeo de Arg em niacuteveis elevados promove aumento na atividade da

arginase renal eleva os niacuteveis de ornitina que participa da biossiacutentese das poliaminas

envolvidas no processo de multiplicaccedilatildeo celular melhorando desta forma o suporte

oacutesseo Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram aumento na concentraccedilatildeo

plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez secretado pela

hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio receptor e

indiretamente via IGF-I e II nos tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos

do GH ocorre no disco epifisaacuterio em que atua estimulando a siacutentese de IGF-I o qual

atua paracrinamente induzindo mitogecircnese o que resulta no crescimento dos ossos

longos (Isaksson et al 1987)

Para os paracircmetros morfoloacutegicos dos ossos dos frangos que receberam dietas

contendo suplementaccedilatildeo de Arg verifica-se efeito linear crescente (Plt005) dos niacuteveis

de arginina para o comprimento e diacircmetro do fecircmur e da tiacutebia O mesmo

comportamento foi observado para o iacutendice de Seedor medida indireta da densidade

oacutessea para ambos os ossos aos 7 dias de idade (Figura 8)

79

Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Fecircmur Tiacutebia Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arg na dieta materna

()

7 dias

0943 2930plusmn034 286plusmn008 2803plusmn027 4154plusmn047 271plusmn005 2925plusmn078 1093 2929plusmn042 293plusmn008 2990plusmn123 4162plusmn062 265plusmn005 2945plusmn096 1243 2911plusmn031 283plusmn008 2603plusmn078 4175plusmn042 258plusmn004 2733plusmn063 1393 2912plusmn046 295plusmn008 2920plusmn086 4172plusmn062 273plusmn003 3008plusmn117 1543 2983plusmn031 293plusmn009 2877plusmn068 4269plusmn039 275plusmn002 2897plusmn038

CV 313 690 712 306 377 701 Regressatildeo ns ns ns Ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- ----- ----- 081 -----

21 dias

0943 5001plusmn056 594plusmn019 10198plusmn294 7128plusmn141 526plusmn012 9621plusmn202 1093 5064plusmn036 632plusmn015 10928plusmn175 7197plusmn086 576plusmn008 10720plusmn182 1243 4937plusmn065 574plusmn013 9956plusmn396 6911plusmn094 514plusmn023 9899plusmn357 1393 5002plusmn062 569plusmn011 9822plusmn346 6912plusmn123 512plusmn009 9537plusmn341 1543 5035plusmn026 613plusmn020 11288plusmn337 7005plusmn135 535plusmn011 10928plusmn339

CV 252 657 747 411 635 711 Regressatildeo ns ns ns Ns ns ns R2 ----- ----- ----- ----- ----- -----

ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

80

Tabela 12 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Paracircmetros oacutesseos Fecircmur Tiacutebia

Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arginina () 7 dias 1300 3007plusmn042 309plusmn011 3194plusmn102 4260plusmn041 285plusmn012 3164plusmn122 1450 3022plusmn036 313plusmn007 3333plusmn098 4311plusmn055 293plusmn008 3202plusmn087 1600 3074plusmn023 321plusmn007 3435plusmn102 4352plusmn024 292plusmn004 3405plusmn101 1750 3098plusmn011 322plusmn007 3348plusmn089 4324plusmn044 293plusmn003 3315plusmn114 1900 3058plusmn015 322plusmn012 3540plusmn140 4350plusmn019 305plusmn005 3503plusmn108 CV 225 712 781 220 608 789 Regressatildeo Linear1 ns Linear2 Ns Linear3 Linear4 R2 023 ----- 020 ----- 030 045

21 dias 1300 1300 1450 1600 1750 553plusmn016 9974plusmn408 1450 5032plusmn031 595plusmn015 9973plusmn343 7122plusmn058 533plusmn019 9675plusmn313 1600 5062plusmn068 614plusmn009 10623plusmn306 7102plusmn041 566plusmn015 10453plusmn286 1750 5134plusmn043 597plusmn013 10024plusmn226 7341plusmn180 548plusmn007 9577plusmn168 1900 5111plusmn044 615plusmn013 10942plusmn185 7145plusmn064 562plusmn008 10751plusmn333 CV 231 567 732 333 619 757 Regressatildeo ns ns Linear5 Ns ns ns R2 ----- ----- 030 ----- ---- -----

NS = natildeo significativo 1 Y = 301662+000117500X 2 Y = 322856+000471280X 3 Y = 285333+0000799183X 4 Y = 315921+000526700X 5 Y = 983310+00149518X

255

26

265

27

275

28

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Diacirc

met

ro d

a Tiacute

bia

(mm

)

Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados encontrados para essa idade estatildeo de acordo com os encontrados

por Fernandes (2007) que encontrou efeito linear crescente para o iacutendice de Seedor

quando as aves foram alimentadas com Arg na dieta Aos 21 dias de idade apenas o

iacutendice de Seedor foi afetado de forma linear (Plt005) crescente com o aumento dos

niacuteveis de Arg (Figura 9) O comportamento positivo da suplementaccedilatildeo de arginina sobre

a morfologia do fecircmur e da tiacutebia pressupotildee melhor densidade desses ossos Segundo

Sekine et al (1994) os aminoaacutecidos no o crescimento transverso do osso e essa accedilatildeo

facilita a formaccedilatildeo da matriz e a calcificaccedilatildeo oacutessea

Aleacutem da accedilatildeo da Arg sobre os ossos indiretamente via IGF-I esta tambeacutem eacute

conhecida como precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo pelo qual ela poderia exercer os

seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo Hukkanem et al (1999) sugerem que o

NO pode participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento

298

30

302

304

306

308

31

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Com

prim

ento

- Fecirc

mur

(mm

)

30531

31532

32533

33534

34535

355

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - F

ecircmur

Y = 301662+000117500X R2 = 023 Y = 322856+000471280X R2 = 020

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

Arginina dig ()

82

26

27

28

29

3

31

32

33

34

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Diacirc

met

ro -

Tiacutebi

a (m

m)

30305

31315

32325

33335

34345

35

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - T

iacutebia

Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada ou natildeo com Arg avaliados em

conjunto mostraram que a suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg melhorou o comprimento do

fecircmur e a espessura da tiacutebia Este resultado pode contribuir para melhorar a qualidade

dos ossos dos frangos uma vez que esse eacute um dos maiores problemas enfrentados na

atualidade na avicultura comercial

Tabela 13 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

FC (mm)

FE (mm) FSEE TC

(mm) TE

(mm) TSEE

7 dias Progecircnie

(ssuplementaccedilatildeo)

2933plusmn016

290plusmn003

2838plusmn042

4186plusmn023

268plusmn002

2902plusmn038

Progecircnie (suplementada)

3052plusmn013

317plusmn004

3369plusmn049

4319plusmn017

293plusmn003

3317plusmn050

CV () 014 004 042 021 0026 043 21 dias

Progecircnie (ssuplementaccedil

atildeo)

5008plusmn023b

596plusmn008

10438plusmn170

7031plusmn053

533plusmn007b

10141plusmn162

Progecircnie (suplementada)

5079plusmn021ordf

607plusmn006

10282plusmn150

7157plusmn044

552plusmn006ordf

10086plusmn154

CV () 016 007 140 048 006 136 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Y = 315921+000526700X R2 = 045 Y = 285333+0000799183X R2 = 030

83

96597

97598

98599

995100

1005101

1015102

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig

Iacutendi

ce d

e Se

edor

- Fecirc

mur

Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade

Conclusatildeo

De acordo com os resultados observados conclui-se que os niacuteveis dieteacuteticos de

Arg na dieta das matrizes de corte foram suficientes para melhorar o desempenho da

progecircnie somente na fase inicial de crescimento (1-21 dias de idade) Quando a dieta da

progecircnie tambeacutem foi suplementada com Arg os paracircmetros de desempenho

rendimento de carcaccedila e qualidade oacutessea satildeo melhorados em ambas as fases de criaccedilatildeo

(1-21 dias e 22 a 42 dias de idade) com melhorias imprescindiacuteveis para a qualidade de

carne como a reduccedilatildeo da gordura abdominal

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V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos sete dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavra-chave arginina ELISA fitohemaglutinina sistema imune

V - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

humoral and cellular immunity response of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level being considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses

Key words arginine ELISA phytohemagglutinin immune system

91

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo da matriz afeta o desempenho dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias de

vida portanto a necessidade da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos O sistema imune das aves difere dos mamiacuteferos em algumas

caracteriacutesticas particularmente nos aspectos de estrutura e de diferenciaccedilatildeo dos oacutergatildeos

linfoides (Jeurissen et al 1994) cujo desenvolvimento se inicia durante a vida

embrionaacuteria e se prolonga apoacutes a eclosatildeo ou nascimento

As uacuteltimas horas de incubaccedilatildeo e os primeiros dias de vida poacutes-eclosatildeo satildeo

fundamentais para que este desenvolvimento se complete Somente apoacutes a segunda

semana de vida a ave seraacute capaz de produzir suas proacuteprias imunoglobulinas Ateacute laacute a

imunidade herdada da matildee pela absorccedilatildeo das imunoglobulinas presentes no ovo eacute o

uacutenico mecanismo de defesa do neonato contra as agressotildees do meio externo apoacutes a

eclosatildeo (Maiorka et al 2006)

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas A arginina (Arg) eacute

considerada um aminoaacutecido essencial para aves sobretudo na fase inicial por que o

ciclo bioquiacutemico da ureia natildeo eacute funcional em aves Assim estas natildeo podem sintetizar

Arg e satildeo portanto dependentes do fornecimento deste aminoaacutecido nas dietas Dentre

as espeacutecies animais estudadas as aves tecircm a mais alta exigecircncia de Arg (Ball et al

2007) que se deve tambeacutem agrave alta taxa de deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento

das atuais linhagens de corte e o antagonismo com a Lys

A Arg eacute necessaacuteria para siacutentese de vaacuterias compostos tais como ornitina

poliaminas prolina creatina de proteiacutenas oacutexido niacutetrico (NO) e citrulina aleacutem de

92

glutamato e agmatina em mamiacuteferos A Arg eacute tambeacutem considerada um potente

secretagogo aumentando a liberaccedilatildeo na corrente sanguiacutenea da insulina hormocircnio do

crescimento (GH) e fator de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I) (Newsholme et

al 2005) Esta accedilatildeo eacute em consequecircncia da raacutepida despolarizaccedilatildeo da membrana

plasmaacutetica ligada ao transporte de aminoaacutecidos com a cadeia lateral positiva

De acordo com Le Flocrsquoh et al (2004) os animais estimulados

imunologicamente podem ter suas necessidades de Arg aumentadas Duas rotas do

metabolismo da Arg satildeo identificadas e conhecidas por ter efeitos imunomodulatoacuterios

diretos A primeira na qual a Arg eacute convertida a ornitina gerando poliaminas que tecircm

papel chave na divisatildeo celular siacutentese de DNA e regulaccedilatildeo do ciclo celular A segunda

corresponde agrave siacutentese do NO induzida por vaacuterios de estiacutemulos inflamatoacuterios como as

endotoxinas bacterianas e as citocinas Essa rota eacute essencial para a atividade citotoacutexica

de macroacutefagos O NO tambeacutem estimula a vasodilataccedilatildeo local e favorece ainda a

reparaccedilatildeo tecidual (Bredt amp Snyder 1994)

Com este trabalho objetivou-se avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina na

dieta das matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie

suplementadas ou natildeo

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

93

dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

em um delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-

Arginina incluiacutedos na dieta materna (0 150 300 450 e 600 mgkg da dieta materna)

que equivaleram aos niacuteveis de 0 9431093 12431393 e 1 543 de Arg

digestiacutevel com seis repeticcedilotildees com 35 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo estes substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada boxe foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado um

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

durante todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as aves e as sobras de raccedilatildeo do boxe foram pesadas

ao mesmo tempo para ajustar o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 1) As

dietas experimentais agrave base de milho e farelo de soja foram formuladas de acordo com

os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e recomendaccedilotildees nutricionais de

Rostagno et al (2005) As aves receberam uma uacutenica raccedilatildeo sem suplementaccedilatildeo de

arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz sobre o desempenho

da progecircnie

94

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 018 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 18500 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

95

Experimento 2 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes atraveacutes de um delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na

dieta materna de 0 a 600 mgkg da dieta de Arg digestiacutevel acima da recomendaccedilatildeo dos

frangos de corte e seis repeticcedilotildees com 32 aves cada totalizando 30 unidades

experimentais

O manejo realizado nesse experimento foi conduzido conforme descrito no

experimento anterior com diferenccedila com relaccedilatildeo ao tipo de dieta utilizada

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg da dieta acima da exigecircncia dos frangos de corte agrave raccedilatildeo

basal inicial em substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial

corresponderam a 1300 1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela

2) A partir dos 22 dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300

1450 1600 e 1750 de Arg digestiacutevel (Tabela 3)

96

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900 Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6457 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 130 145 160 175 190 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

97

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 075 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 1000 1000 1000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI

VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

Colheita de Sangue e Anaacutelise de Tiacutetulos vacinais

No 7ordm dia de vida antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm foram coletadas

amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo As aves foram vacinadas contra a

doenccedila de New Castle (Fort-Dodgereg) via ocular na dose de 003 mL por ave aos sete e

21 dias de idade A venopunccedilatildeo foi realizada mediante contenccedilatildeo fiacutesica manual dos

98

animais preferencialmente na veia jugular direita com seringa de 3 mL e agulha 13x45

e uma quantia de sangue coletada em torno de 1 do peso corporal dos animais O

sangue foi acondicionado em tubos de vidro identificados sem anticoagulante para

obtenccedilatildeo de soro sanguiacuteneo No soro foi avaliada a titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais

contra o viacuterus de Doenccedila Newcastle pelo teste imunoenzimaacutetico (ELISA-teste) As

anaacutelises foram processadas em kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent

Assay) do Laboratoacuterio Idexxreg e os dados obtidos foram expressos em absorbacircncia Os

dados de titulaccedilatildeo de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Anaacutelise Histomorfomeacutetrica

No 7ordm e 21ordm dia de idade o timo a bolsa cloacal o baccedilo e o fiacutegado de duas aves

por repeticcedilatildeo foram coletados totalizando doze aves por tratamento Para a realizaccedilatildeo

dessa coleta as aves foram submetidas ao atordoamento por choque e posterior sangria

Apoacutes o sacrifiacutecio as aves foram pesadas individualmente e as carcaccedilas dessecadas para

remoccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides (Timo Baccedilo e Bolsa de Fabricius) O peso dos oacutergatildeos

linfoides foi obtido imediatamente apoacutes a dessecaccedilatildeo e remoccedilatildeo dos tecidos exoacutegenos

Os oacutergatildeos coletados foram pesados em balanccedila de precisatildeo e o peso da ave foi

devidamente anotado

O peso relativo de cada oacutergatildeo foi obtido pela foacutermula

Peso relativo = (peso oacutergatildeopeso vivo) x 100

Para a medida histomorfomeacutetrica dos foliacuteculos linfoides as bolsas cloacais e o

fiacutegado foram acondicionadas em frascos contendo soluccedilatildeo de formol tamponado a 10

(De Tolosa et al 2003) com finalidade de manter a integridade dos tecidos apoacutes a

morte preservando a arquitetura celular As peccedilas foram incluiacutedas em parafina e levadas

ao microacutetomo rotativo para a realizaccedilatildeo dos cortes transversais no centro do oacutergatildeo com

sete microcircmetros de espessura e corados pelo meacutetodo da hematoxilina e eosina (HE) As

lacircminas foram escaneadas usando-se um ldquoscaner HP ScanJet II v25rdquo sendo o

ldquosoftwarerdquo utilizado para o tratamento das imagens o ldquoPaint Shop Pro v50rdquo A

imagem foi digitalizada brilho (variaacutevel entre 125 e 145) contraste 185 e escala de

800 As imagens foram gravadas com extensatildeo jpg e levadas ao analisador de

imagens Para a leitura das imagens foi utilizado um analisador de imagem

computadorizado IMAGE PROPLUS 52 da Miacutedia Cibertecnics Foi mensurada a

altura de trecircs dobras do tecido linfoide de cada repeticcedilatildeo (12 aves por tratamento) e

destes valores foi obtida a meacutedia

99

Nas amostras de fiacutegado foi analisada a presenccedila de aglomerados linfoides As

lacircminas com porccedilotildees do fiacutegado foram analisadas em toda sua extensatildeo e os

aglomerados linfoides foram quantificados atraveacutes de microscopia de luz com aumento

de 10X (Olympus BH2 Olympus America INC NY USA)

Fitohemaglutinina (PHA)

Aos 35 dias de idade duas aves por repeticcedilatildeo totalizando 12 aves por tratamento

foram marcadas com anilhas numeradas e utilizadas para avaliar a imunidade mediada

por ceacutelulas in vivo (Corrier amp DeLoach 1990) Cada ave foi inoculada

intradermicamente no espaccedilo interdigital entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata direita com 01

mL de uma soluccedilatildeo fitohemaglutinina PHA-Mreg (1057601 - Invitrogen) Como controle

negativo 01 mL de soro fisioloacutegico esteacuteril foi inoculado entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata

esquerda O espessamento da pele de ambas as patas foi aferido em miliacutemetros

utilizando-se um paquiacutemetro digital antes da inoculaccedilatildeo e apoacutes trecircs seis 12 e 24 horas

apoacutes a inoculaccedilatildeo O caacutelculo (Corrier amp DeLoach 1990) apresentou-se da seguinte

forma Reaccedilatildeo = resposta a fitohemaglutinina ndash resposta do controle na qual a resposta

a fitohemaglutinina eacute medida pela espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo menos

a espessura no tempo zero (antes da inoculaccedilatildeo) A resposta do controle eacute medida pela

espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo (Soro) menos a espessura no tempo zero

(antes da inoculaccedilatildeo)

Avaliaccedilatildeo da Atividade Fagociacutetica de Macroacutefagos

Para avaliaccedilatildeo da atividade fagociacutetica de macroacutefagos foram utilizadas duas aves

por repeticcedilatildeo totalizando quatro aves por tratamento As aves foram inoculadas no 35ordm

dia de vida atraveacutes de injeccedilatildeo intra-abdominal de Sephadex G-50reg (Sigma) a 3 (10

mL100g de peso vivo) (Qureshi et al 1986 Gore amp Qureshi 1997 Konjufca 2004)

Utilizaram-se para esse procedimento cateteres intravasculares G-14 Apoacutes 42

horas as aves foram submetidas a atordoamento por eletronarcose e sacrificadas atraveacutes

de desligamento cervical Foram lavadas (detergente neutro) e sanitizadas (aacutelcool 70)

As aves foram transportadas ao laboratoacuterio onde se procedeu a abertura da cavidade

abdominal que foi posteriormente lavada com 20 mL de soluccedilatildeo de PBS esteacuteril

heparinizada contendo 05 UIL (Liqueminereg 25000 UI5mL ndash Roche)

Coletaram-se aproximadamente 15 mL de liacutequido abdominal com auxiacutelio de

pipetas Pasteur que foi imediatamente acondicionado em tubos Falcon em banho de

100

gelo O material foi centrifugado a 1500 rpm10 minutos sendo o ldquopelletrdquo

ressuspendido em 2 mL de meio RPMI 1640reg (Sigma) Adicionou-se 150 μL dessa

suspensatildeo a cada well da placa de cultura (24 poccedilos) contendo lamiacutenula de 13 mm de

diacircmetro Incubou-se a temperatura ambiente por uma hora Lavou-se a placa com PBS

esteacuteril gelado para remover as ceacutelulas natildeo aderentes Em seguida adicionou-se 150 μL

de suspensatildeo a 3 de eritroacutecitos de carneiros em meio RPMI 1640reg (Sigma)

incubando-se em temperatura ambiente em concentraccedilatildeo de 5 de gaacutes carbocircnico por

uma hora Lavou-se com PBS esteacuteril gelado para remover os eritroacutecitos que natildeo

aderiram Em seguida realizou-se a coloraccedilatildeo utilizando-se kit comercial (Panoacutetico

Raacutepido LBreg - Laborclin)

Apoacutes 24 horas as lacircminas foram montadas utilizando-se Permountreg Foram

contados em cada lamiacutenula 300 macroacutefagos e verificado o nuacutemero destas ceacutelulas que

continham hemaacuteceas fagocitadas A atividade fagociacutetica foi calculada considerando-se o

nuacutemero de macroacutefagos contendo hemaacuteceas fagocitadas dividido pelo nuacutemero total de

macroacutefagos contados

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

101

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Resultados e Discussatildeo

Os dados meacutedios dos pesos relativos de oacutergatildeos linfoides de frangos de corte

alimentados com dietas natildeo suplementadas estatildeo na Tabela 5 A suplementaccedilatildeo das

matrizes de corte natildeo influenciou o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie

natildeo suplementada com Arg (Pgt005) Da mesma maneira quando houve a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg para a progecircnie tambeacutem natildeo foi verificado (Pgt005)

efeito sobre o peso relativo dos oacutergatildeos linfoides dessas aves (Tabela 6)

102

Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg das Matrizes () 7 dias 21 dias

0943 058plusmn003 054plusmn004 1093 055plusmn003 056plusmn005 1243 056plusmn003 057plusmn003 1393 052plusmn004 057plusmn004 1543 052plusmn003 051plusmn005 CV 1410 1840

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

0943 006plusmn0005 011plusmn001 1093 008plusmn0007 011plusmn001 1243 012plusmn0036 009plusmn001 1393 007plusmn0007 010plusmn001 1543 009plusmn0007 010plusmn001 CV 4968 2463

Regressatildeo ns ns Baccedilo()

0943 015plusmn001 024plusmn001 1093 017plusmn001 022plusmn002 1243 016plusmn001 021plusmn001 1393 015plusmn001 022plusmn003 1543 013plusmn001 021plusmn001 CV 1885 1868

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

O timo e a bolsa cloacal satildeo oacutergatildeos linfoides primaacuterios que representam siacutetios

de maturaccedilatildeo de linfoacutecitos T e B respectivamente Estes oacutergatildeos tecircm fundamental

importacircncia no periacuteodo poacutes-eclosatildeo poreacutem agrave medida que as aves se desenvolvem e se

aproximam da maturidade sexual sofrem involuccedilatildeo fisioloacutegica (Morgullis 2002)

No contexto do desenvolvimento e maturaccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides trabalhos

desenvolvidos com mamiacuteferos demonstram que as respostas imunes podem ser

influenciadas pela Arg dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al 1998 Lewis amp

Langkamp-Henken 2000) Experimentos desenvolvidos com animais jovens

demonstraram efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina como o aumento

do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos tiacutemicos Os efeitos

imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais estressados ou

imunossupremidos

103

Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias

1300 053plusmn005 056plusmn004 1450 057plusmn004 057plusmn003 1600 059plusmn004 059plusmn003 1750 051plusmn003 048plusmn005 1900 058plusmn004 053plusmn004 CV 1910 1790

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

1300 016plusmn0011 025plusmn002 1450 015plusmn0012 020plusmn001 1600 018plusmn0007 022plusmn002 1750 019plusmn0016 026plusmn003 1900 015plusmn0007 023plusmn001 CV 1621 2021

Regressatildeo ns ns Baccedilo ()

1300 007plusmn0009 008plusmn001 1450 009plusmn0008 010plusmn001 1600 008plusmn0006 009plusmn001 1750 008plusmn0005 011plusmn001 1900 007plusmn0007 010plusmn001 CV 2227 2151

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

Para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de Arg foram

observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

nutricionais estabelecidas Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de

Arg plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular (Kidd 2004)

Ao contraacuterio dos resultados observados nesse experimento Jahanian (2009)

observou que animais na fase inicial com dietas suplementadas com Arg e com baixo

niacutevel proteico apresentaram aumento do peso relativo do timo indicando assim que a

Arg eacute necessaacuteria para a resposta oacutetima da imunidade celular

Quando se contrastam os dados do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (Tabela 7)

verificou-se a influencia da suplementaccedilatildeo de Arg no peso da bolsa cloacal (Plt005) no

periacuteodo inicial de criaccedilatildeo Esse aumento eacute de grande importacircncia uma vez que a bolsa

cloacal eacute o principal siacutetio de maturaccedilatildeo dos linfoacutecitos B que satildeo essenciais ao sistema

imune das aves Na fase de 1 a 7 dias de idade esse incremento pode refletir a melhoria

104

das condiccedilotildees imunitaacuterias jaacute que nesse periacuteodo os desafios sanitaacuterios podem

comprometer todo desempenho dessa ave ateacute o final de sua criaccedilatildeo

Tabela 7 ndash Meacutedias e erro padratildeo do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

7 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada) 054plusmn001 015plusmn0005b 0085plusmn0008

Progecircnie (suplementada) 056plusmn002 017plusmn0006ordf 0079plusmn0003

CV () 002 0005 0006 21 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada)

055plusmn001 022plusmn0007 011plusmn0005

Progecircnie (suplementada)

054plusmn002 023plusmn0009 009plusmn0004

CV () 002 008 0004 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

A anaacutelise histomorfomeacutetrica do fiacutegado natildeo mostrou influecircncia (Pgt005) das

dietas das matrizes nos aglomerados linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo (Tabela

8) Da mesma maneira as dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal natildeo foram

influenciadas (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo ou natildeo de Arg na dieta (Tabela 8)

Existe relaccedilatildeo direta entre o fiacutegado e a bolsa cloacal Nas aves os linfoacutecitos B

responsaacuteveis pela produccedilatildeo de anticorpos envolvidos na resposta imunoloacutegica humoral

satildeo produzidos no fiacutegado do embriatildeo no saco viteliacutenico e na medula oacutessea na fase

inicial da incubaccedilatildeo Apoacutes isso migram para a bolsa cloacal e sofrem amadurecimento

e diferenciaccedilatildeo por ateacute dez semanas Daiacute partem para colonizar outros oacutergatildeos como o

baccedilo e a glacircndula de Harder (Butcher amp Miles 2003) A bolsa cloacal eacute constituiacuteda de

linfoacutecitos incrustados em tecido epitelial cujas dobras se estendem no interior do

luacutemen onde se espalham os foliacuteculos linfoides Seus foliacuteculos contecircm mais de 90 de

ceacutelulas B (Tizard 1998)

105

Tabela 8 - Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg

Aglomerados Linfoacuteides Comprimento das dobras Progecircnie natildeo Suplementada Progecircnie natildeo Suplementada

Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 0943 105plusmn010 196plusmn041 1443plusmn097 3247plusmn198 1093 098plusmn028 137plusmn021 1394plusmn225 3066plusmn240 1243 077plusmn004 178plusmn029 1503plusmn060 3042plusmn109 1393 080plusmn015 170plusmn043 1449plusmn068 3112plusmn187 1543 096plusmn018 232plusmn037 1464plusmn149 3222plusmn195 CV() 4398 4708 563 915 Regressatildeo ns ns ns ns Progecircnie Suplementada Progecircnie Suplementada 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 1300 076plusmn010 168plusmn035 1936plusmn206 3535plusmn191 1450 049plusmn015 216plusmn041 1865plusmn022 4027plusmn1244 1600 072plusmn024 189plusmn022 2035plusmn064 3331plusmn036 1750 053plusmn005 192plusmn036 2195plusmn139 4487plusmn1540 1900 053plusmn012 213plusmn025 1905plusmn128 2562plusmn111 CV() 5807 4141 473 5359 Regressatildeo ns ns ns ns

Assim a progecircnie que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg natildeo

apresentou produccedilatildeo de linfoacutecitos B aumentada nem a aacuterea de desenvolvimento e

diferenciaccedilatildeo dos linfoacutecitos B prejudicada ou melhorada pela Arg (Pgt005)

Na Tabela 9 estatildeo agraves meacutedias obtidas da resposta imune celular da progecircnie com

dieta suplementada medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) para estiacutemulo de

proliferaccedilatildeo celular Dentro desse contexto observou-se que 12 horas apoacutes a injeccedilatildeo de

PHA foi possiacutevel verificar efeito quadraacutetico com aumento (Plt005) na resposta celular

das aves alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg em que a maior

resposta foi obtida com 1574 de Arg dig (Figura 1)

Segundo Corrier amp DeLoach (1990) a aplicaccedilatildeo desse teste permite a raacutepida

avaliaccedilatildeo da competecircncia imunoloacutegica celular Os basoacutefilos ceacutelulas comumente

associadas a esses processos apresentam heparina e proteases na composiccedilatildeo de seus

gracircnulos agindo intensamente nos processos de hipersensibilidade Aleacutem disso

produzem citocinas cuja participaccedilatildeo estaacute ligada aos processos inflamatoacuterios (Abbas et

al 2007)

106

Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Arginina 3 horas 6 horas 12 horas 24 horas

1300 1010plusmn0062 0793plusmn0041 0549plusmn0097 0506plusmn0036 1450 0853plusmn0077 0639plusmn0065 0631plusmn0051 0450plusmn0133 1600 0918plusmn0053 0738plusmn0040 0702plusmn0052 0543plusmn0065 1750 0797plusmn0074 0783plusmn0058 0597plusmn0061 0552plusmn0066 1900 0933plusmn0044 0777plusmn0038 0499plusmn0059 0453plusmn0062 CV 1715 1630 2724 3875 Regresatildeo ns ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- 093 -----

ns = Natildeo significativo 1 Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2 R2 = 093

Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Quando se avaliou a atividade fagociacutetica dos macroacutefagos da progecircnie

suplementada e natildeo suplementada verificou-se que os niacuteveis crescentes de Arg na dieta

natildeo afetaram (Pgt005) essa funccedilatildeo (Tabela 10) Os macroacutefagos satildeo ceacutelulas do sistema

mononuclear fagocitaacuterio (McCorkle 1998) integrantes da imunidade inata das aves

importantes tambeacutem para a imunidade adaptativa (Abbas et al 2008) atuando nos

processos de defesa do organismo destruindo agentes estranhos e tambeacutem secretando

citocinas que atuam no processo inflamatoacuterio As principais funccedilotildees executadas por essa

ceacutelula satildeo a fagocitose destruiccedilatildeo de bacteacuterias (Qureshi et al 1986) secreccedilatildeo de

prostaglandinas e citocinas e apresentaccedilatildeo de antiacutegeno para desenvolvimento da

resposta imune celular (Abbas et al 2008)

Segundo Johaniam (2009) satildeo identificadas duas vias de accedilatildeo

imunomodulatoacuteria da Arg in vivo A primeira ocorre atraveacutes da accedilatildeo da arginase que

converte a Arg em ureia e ornitina Neste processo ocorre a produccedilatildeo de poliaminas

pela accedilatildeo da ornitina decarboxilase Esta rota da siacutentese de poliaminas pode ser o

Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2R2 = 093

1574

107

caminho pelo qual a Arg aumenta a mitogecircnese dos linfoacutecitos (Klein amp Morris 1978)

A segunda via ocorre pela siacutentese de NO a partir da a partir da Arg pela accedilatildeo do oacutexido

niacutetrico sintetase resultando na formaccedilatildeo de oacutexido niacutetrico e citrulina Essa rota eacute

essencial para atividade citotoacutexica dos macroacutefagos

Tabela 10 ndash Meacutedias e erros padrotildees da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Macroacutefagos com eritroacutecitosmacroacutefagos contados Arginina Progecircnie Suplementada

1300 1570plusmn529 1450 2030plusmn480 1600 1650plusmn359 1750 2150plusmn500 1900 1830plusmn250 CV 545 Regresatildeo ns ns = Natildeo significativo

Quando avaliados os tiacutetulos de anticorpos da progecircnie verificou-se que a

alimentaccedilatildeo das matrizes com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg natildeo influenciou

os tiacutetulos de anticorpos (Pgt005) da progecircnie natildeo suplementada (Tabela 11) Para as

aves suplementadas verifica-se um efeito linear decrescente (Plt005) aos sete dias de

idade e efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade em que o niacutevel de 1674 de

Arg dig proporcionou o maior tiacutetulo de anticorpos (Tabela 12)

Os resultados observados na progecircnie suplementada mostraram-se compatiacuteveis

com as respostas das aves a campo nas quais inicialmente satildeo observados maiores

tiacutetulos de anticorpos decorrentes da imunidade materna seguido de uma queda que nas

condiccedilotildees experimentais eacute resultado da neutralizaccedilatildeo desses anticorpos pelos antiacutegenos

vacinais e por fim uma nova elevaccedilatildeo dos tiacutetulos

Este resultado concorda com o observado por outros autores Tayade et al

(2006) demonstraram que a resposta vacinal contra o viacuterus da doenccedila de Gumboro de

frangos suplementados com 2 de Arg foi 20 mais eficiente que a resposta induzida

apenas pela vacina A elevada resposta humoral e a proteccedilatildeo observada no grupo de

aves vacinado e com dieta suplementada com Arg segundo estes autores pode ser

atribuiacuteda ao nuacutemero de funccedilotildees imunorregulatoacuterias da Arg sobre o sistema

imunoloacutegico A Arg eacute necessaacuteria para a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas B e tambeacutem estaacute

envolvida na liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da bolsa ou da medula oacutessea (De Jonge et al

108

2002) Ainda segundo Abdukalykova e Ruiz-Feria (2006) niacuteveis adicionais de Arg

podem acelerar a produccedilatildeo de anticorpos em frangos de corte

29

295

3

305

31

315

32

325

33

335

34

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s(7

dia

s)

0

05

1

15

2

25

3

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s (2

8 di

as)

Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

1674

109

Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Niacuteveis de Arginina na dieta materna ()

Idade 0943 1093 1243 1393 1543 CV() Regressatildeo R2

07 dias 317plusmn099 323plusmn011 301plusmn008 324plusmn007 316plusmn015 831 ns -----

14 dias 262plusmn009 257plusmn003 242plusmn011 262plusmn011 257plusmn003 792 ns -----

21 dias 232plusmn010 247plusmn005 211plusmn010 228plusmn011 241plusmn007 941 ns -----

28 dias 241plusmn028 186plusmn014 248plusmn022 231plusmn019 214plusmn024 2378 ns -----

35 dias 275plusmn017 284plusmn015 271plusmn013 286plusmn020 291plusmn011 1361 ns -----

Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades

Niacuteveis de Arginina ()

Idade 1300 1450 1600 1750 1900 CV() Regressatildeo R2

07 dias 331plusmn012 336plusmn010 301plusmn012 329plusmn009 299plusmn009 798 Linear1 012

14 dias 226plusmn008 218plusmn019 219plusmn023 207plusmn014 245plusmn009 1715 ns -----

21 dias 232plusmn007 239plusmn006 236plusmn006 246plusmn012 240plusmn009 829 ns -----

Niacuteveis de Arginina ()

1150 1300 1450 1600 1750 CV() Regressatildeo R2

28 dias 171plusmn035 279plusmn009 298plusmn006 278plusmn019 240plusmn012 1961 Quadraacutetica2 026

35 dias 268plusmn023 299plusmn012 296plusmn018 280plusmn023 313plusmn011 1535 ns -----

110

Conclusatildeo

As dietas suplementadas com Arg mostraram-se necessaacuterias para o oacutetimo

desempenho do sistema imune celular e humoral da progecircnie natildeo bastando somente agrave

suplementaccedilatildeo das matrizes de corte

Referecircncias

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111

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aves e suiacutenos ndash Composiccedilatildeo de alimentos e exigecircncias nutricionais Viccedilosa UFV Departamento de Zootecnia186p2005

UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MARINGAacute CENTRO DE CIEcircNCIAS AGRAacuteRIAS

NIacuteVEIS DE ARGININA DIGESTIacuteVEL PARA FEcircMEAS REPRODUTORAS DE FRANGOS DE CORTE E SUA

PROGEcircNIE

Autora Luciana Mordf Garcia de Souza da Silva Orientadora Profordf Dra Alice Eiko Murakami

Tese apresentada como parte das exigecircncias para a obtenccedilatildeo do tiacutetulo de DOUTOR EM ZOOTECNIA no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Zootecnia da Universidade Estadual de Maringaacute ndash Aacuterea de Concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal

MARINGAacute Estado do Paranaacute

Novembro de 2010

iii

O Senhor eacute meu pastor nada me faltaraacute Em verdes prados ele me faz repousar Conduz-me junto agraves aacuteguas refrescantes

restaura as forccedilas de minha alma Pelos caminhos retos ele me leva

por amor do seu nome

Ainda que eu atravesse o vale escuro nada temerei pois estais comigo

Vosso bordatildeo e vosso baacuteculo satildeo o meu amparo

Preparais para mim a mesa agrave vista de meus inimigos Derramais o perfume sobre minha cabeccedila

e transborda minha taccedila A vossa bondade e misericoacuterdia hatildeo de seguir-me

por todos os dias de minha vida E habitarei na casa do Senhor por longos dias

(Salmo 22)

iv

Ao meu pai e minha matildee pela forccedila amor carinho e incentivo nos momentos mais difiacuteceis da minha vida Ao meu marido Junior pelo amor incondicional pela cumplicidade e incentivo

pela compreensatildeo pelos momentos de ausecircncia

Aos meus irmatildeos Sara e Jonatah pela amizade e companheirismo Ao meu filho Eduardo por suportar as dificuldades ao meu lado

DEDICO

v

AGRADECIMENTOS

Agrave Universidade Estadual de Maringaacute por ter possibilitado desenvolver este trabalho

Agrave minha orientadora Profa Dra Alice Eiko Murakami pela sua orientaccedilatildeo pelo

reconhecimento do meu trabalho pelos ldquopuxotildees de orelhardquo que sempre me ajudaram em

todos os momentos a ser uma pessoa melhor pelos conselhos e pela dedicaccedilatildeo agrave minha

pessoa por todos esses anos e principalmente pela amizade construiacuteda com respeito e

carinho ao longo desta caminhada

Aos professores do Programa de Poacutes-graduaccedilatildeo em Zootecnia da Universidade Estadual

de Maringaacute pelo acesso ao conhecimento e pela paciecircncia a mim dispensada em especial

ao Prof Dr Elias Nunes Martins pelos valiosos conselhos e amizade e pelos auxiacutelios as

ldquoestatiacutesticasrdquo muito obrigada

Aos secretaacuterios do Programa de Poacutes- graduaccedilatildeo Rose e Denilson por todo ldquosocorrordquo

durante o meu periacuteodo no programa pelas conversas e amizade obrigada por tudo

As ldquoMariasrdquo teacutecnicas do laboratoacuterio de Histologia da UEM Eurides e Dos Anjos pela

amizade e auxiacutelio e toda ajuda durante as minhas anaacutelises

Aos funcionaacuterios da Fazenda Experimental de Iguatemi da UEM pelo precioso auxiacutelio

durante a conduccedilatildeo deste e todos os trabalhos realizados durante o meu periacuteodo nessa

universidade

A todos os colegas que fizeram parte da minha caminhada pela ajuda e companheirismos

em todos os momentos faacuteceis e difiacuteceis desta jornada pelo auxiacutelio durante a coleta e

conduccedilatildeo dos experimentos que me permitiram esta tese Ana Ton Jovanir Maacutercia

vi

Suelen Rodrigo Luis Daniel Ana Carolina Ana Flaacutevia Leandro Rafael Fernando

Karla Alexandra Mariana Celma Andressa Faacutebio

Agraves minhas eternas irmatildes Jovanir Inecircs Muller Fernandes e Maacutercia Izumi Sakamoto pela

amizade companheirismo pela forccedila em todos os momentos de alegria e em que estive

em dificuldades minha eterna gratidatildeo por tudo que vocecircs fizeram por mim

A minha irmatildezinha Sussu e seu ldquomaridatildeordquo Mauriacutecio pelo apoio e amizade pelo

companheirismo e auxiacutelio nos momentos em que precisei muito obrigada por tudo

As mais novas amigas e companheiras Cinthia e Cris muito obrigada pela amizade

incondicional que vocecircs me dedicaram durante esse tempo que apesar de natildeo ter sido tatildeo

longo valeu por uma eternidade muito obrigada por tudo

A minha irmatilde Sara que durante a minha gravidez foi meu braccedilo direito na conduccedilatildeo deste

trabalho auxiliando e principalmente me levantando nos momentos de dificuldade

obrigada por vocecirc fazer parte da minha vida

Ao Waldir Pereira da Silva Junior meu profundo agradecimento pelo companheirismo

incentivo amizade por estar ao meu lado e compreender meus momentos de ausecircncia

pelo amor incondicional a mim dedicado meu eterno amor a vocecirc

A todos que direta ou indiretamente contribuiacuteram para esse trabalho meu muito obrigada

vii

BIOGRAFIA

LUCIANA MARIA GARCIA DE SOUZA DA SILVA filha de Vera Luacutecia

Aparecida Garcia de Souza e Joatildeo Gusman de Souza nasceu em Maringaacute Paranaacute no dia

18 de maio de 1981

Em marccedilo de 2005 conclui o curso de Zootecnia pela Universidade Estadual de

Maringaacute

Em marccedilo de 2005 iniciou no curso de Poacutes- graduaccedilatildeo em Zootecnia em niacutevel de

mestrado aacuterea de concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal na Universidade Estadual de Maringaacute e

no dia 3 de marccedilo de 2007 submeteu-se a banca para defesa de Dissertaccedilatildeo

Em marccedilo de 2007 iniciou no curso de Poacutes-graduaccedilatildeo em Zootecnia em niacutevel de

doutorado aacuterea de concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal na Universidade Estadual de Maringaacute

realizando estudos na aacuterea de nutriccedilatildeo de frangos de corte No dia 17 de novembro de

2010 submeteu-se a banca para defesa da Tese

viii

IacuteNDICE

Paacutegina

LISTA DE TABELAS ix LISTA DE FIGURAS xi I - INTRODUCcedilAtildeO 17 11 REVISAtildeO DA LITERATURA 19

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie 19 112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves 20 REFEREcircNCIAS 32

II - OBJETIVOS GERAIS 39 21 Objetivos Especiacuteficos 39

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo 40

Resumo 40 Introduccedilatildeo 42 Material e meacutetodos 43 Resultados e Discussatildeo 47 Conclusatildeo 52 Referecircncias 53

IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie 57

Resumo 57 Introduccedilatildeo 59 Material e Meacutetodos 60 Resultados e discussatildeo 67 Conclusatildeo 83 Referecircncias 83

V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie 89

Resumo 89 Introduccedilatildeo 91 Material e Meacutetodos 92 Resultados e Discussatildeo 101 Conclusatildeo 110 Referecircncias 110

VI - CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 113

ix

LISTA DE TABELAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental 45 Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 48 Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 50 Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico 51 Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 52

Capiacutetulo IV Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg48 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)50 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)51 Tabela 4 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg55 Tabela 5 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg56 Tabela 6 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg60 Tabela 7 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementadas provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg64 Tabela 8 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento da progecircnie suplementada com dietas suplementadas contendo niacuteveis de Arg64

x

Tabela 9 ndash Meacutedias de porcentagem de carcaccedila (CARC) porcentagem de peito (PEITO) porcentagem de coxa (COXA) porcentagem de asa (ASA) porcentagem de gordura abdominal (GORDURA) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg65 Tabela 10 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de arginina67 Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg69 Tabela 12 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade72

Capiacutetulo V Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das dietas experimentais das matrizes de frangos de corte no periacuteodo experimental83 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg85 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)86 Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (21-42 dias)86 Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de arginina89 Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg90 Tabela 7 ndash Meacutedias do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade91 Tabela 8 ndash Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg92 Tabela 10 ndash Meacutedias e erro padratildeo da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg94 Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades94

xi

LISTA DE FIGURAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel33 Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg34 Capiacutetulo IV Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 70 Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 71 Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 72 Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 72 Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 75 Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 77 Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 81 Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade 82 Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade 83

xii

Capiacutetulo IV Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 106 Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 108

RESUMO

Foram realizados trecircs experimentos com o objetivo de avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na nutriccedilatildeo de matrizes de corte e a modulaccedilatildeo da resposta imune e do desenvolvimento esqueleacutetico na progecircnie No primeiro experimento avaliou-se o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e qualidade de ovos Para tanto foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se um aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve uma queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arginina respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo O segundo experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo

xiv

suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos O terceiro experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos 7 dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavras-chave desempenho produtivo qualidade de ovos qualidade oacutessea sistema imune

ABSTRACT

Three experiments were conducted to evaluate the effect of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder nutrition and modulation of the immune systems and skeletal development in the progeny In the first experiment the effect of Arg supplementation on heavy breed henrsquos productive performance and egg quality was evaluated ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance In the second experiment the effects of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder hens diet on performance carcass yield and bone parameters was evaluated in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units The body weight gain feed intake and feed gain ratio was calculated to evaluate the performance The carcass yield was evaluated by the carcass percentage leg breast and wing yield and abdominal fat The bone quality was assessed by the analysis of the femur and tibia lengths diameters and Seedor index In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that

16

just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) In third experiment the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses was evaluated in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by the diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses According to the results it is possible to conclude that supplementation with Arg provided improvements in the eggs weight of broilers and evaluations in the progeny demonstrated that there is a need to supplement the diet with Arg in order to get the best performance index bone quality and humoral and cellular immunity

Key-words bone quality egg quality productive performance immune system

17

I - INTRODUCcedilAtildeO

Vaacuterios fatores afetam o desempenho de frangos de corte como a geneacutetica

nutriccedilatildeo sanidade manejo e ambiecircncia Entretanto fatores estabelecidos antes mesmo da

incubaccedilatildeo e da eclosatildeo como a idade das matrizes e o peso dos ovos satildeo preponderantes

para o desenvolvimento inicial das aves tendo consequecircncia em todo o crescimento

(Pedroso et al 2005)

As exigecircncias nutricionais de uma reprodutora leve ou pesada devem atender agraves

necessidades do embriatildeo em desenvolvimento fora do organismo materno (Campos

2003) O ovo eacute formado basicamente pela casca (10) clara (60) e gema (30) Desse

modo os niacuteveis nutricionais da matriz devem ser dirigidos para formaccedilatildeo desses

componentes porque estes satildeo responsaacuteveis pela nutriccedilatildeo do embriatildeo

O ovo tem aacutegua proteiacutena gordura e cinza na sua composiccedilatildeo quiacutemica A gema

apresenta papel importante no desenvolvimento do embriatildeo visto que este formaraacute o saco

vitelino apoacutes o quarto dia de vida O saco vitelino constitui a uacutenica fonte fornecedora de

energia para o desenvolvimento do embriatildeo Deste satildeo absorvidos todos os nutrientes pelo

embriatildeo como partiacuteculas lipoproteicas e proteicas Estas uacuteltimas podem ser absorvidas

intactas porque a produccedilatildeo de proteinases pelo embriatildeo aumenta de acordo com o seu

desenvolvimento Aleacutem disso parte da absorccedilatildeo de proteiacutenas ocorre na forma de

aminoaacutecidos (Campos 2003) O saco viteliacutenico tambeacutem eacute a uacutenica fonte de

18

imunoglobulinas produzidas pelo organismo materno capazes de manter certa imunidade

ao pintinho no periacuteodo inicial de sua vida

Os aminoaacutecidos presentes na gema podem ser suficientes durante o processo de

eclosatildeo apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

processo de crescimento (Ohta et al 2004)

Logo apoacutes a eclosatildeo a maior parte da demanda de energia e de proteiacutena das aves eacute

direcionada para o desenvolvimento do trato digestoacuterio principalmente intestinos (Fisher

da Silva 2001) Este crescimento preferencial ocorre tanto na presenccedila quanto na ausecircncia

do alimento (Laurentiz et al 2001) Quando estes nutrientes natildeo satildeo fornecidos pela

raccedilatildeo os neonatos utilizam o saco vitelino como suplemento energeacutetico e como fonte

proteica para o crescimento intestinal Entretanto segundo Dibner et al (1998) 20 da

proteiacutena residual do saco vitelino satildeo representadas pelas imunoglobulinas maternais e

que a gordura bruta residual eacute constituiacuteda basicamente de trigliceacuterides fosfoliacutepides e

colesterol

Assim a nutriccedilatildeo das matrizes de corte pode enriquecer a gema e produzir pintos

de alta qualidade Entretanto com o passar dos anos natildeo houve muita diferenccedila nos niacuteveis

nutricionais propostos para nutriccedilatildeo das matrizes de corte o que ocorre principalmente em

razatildeo das grandes diferenccedilas existentes entre as linhagens comerciais existentes Segundo

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) para matrizes pesadas existe uma pausa nas pesquisas orientadas

para a determinaccedilatildeo das exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos essenciais

Dentre os aminoaacutecidos utilizados na formulaccedilatildeo de raccedilotildees principalmente as

voltadas para o conceito de proteiacutena ideal a arginina (Arg) pode exercer efeitos positivos

pois este aleacutem de ser constituintes de proteiacutenas ainda estaacute envolvido na siacutentese de creatina

e de poliaminas de prolina como substrato para a siacutentese de colaacutegeno e do oacutexido niacutetrico

(NO) e na secreccedilatildeo do hormocircnio de crescimento (GH) e dos fatores de crescimento

19

semelhantes agrave insulina (IGF) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave (Harvey et

al 2001)

Como as aves natildeo apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem

exclusivamente da Arg sinteacutetica principalmente no periacuteodo inicial de produccedilatildeo (Allen amp

Baker 1972) Aleacutem disso em dietas agrave base de milho e de farelo de soja a Arg eacute

considerada o quinto aminoaacutecido limitante para frangos de corte apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Vaacuterios autores tecircm proposto que a nutriccedilatildeo das matrizes afeta o desempenho dos

pintos (Uni amp Ferket 2004) Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem

nos primeiros dias de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com

funccedilatildeo imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade

materna e na resposta imune dos pintos

11 REVISAtildeO DA LITERATURA

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie

O sistema imune das aves eacute complexo e compreende uma seacuterie de funccedilotildees

celulares e fatores soluacuteveis que trabalham juntos para produzir uma resposta imune

protetora Os oacutergatildeos linfoides primaacuterios das aves satildeo a bolsa cloacal e o timo Os oacutergatildeos

como medula oacutessea baccedilo glacircndula Harderiana placas de Payer e tonsilas cecais satildeo

considerados oacutergatildeos linfoides secundaacuterios

Com base nesses componentes as aves podem apresentar respostas a vaacuterios

antiacutegenos divididas em dois tipos a imunidade passiva e a ativa A imunidade passiva eacute

transferida para a progecircnie pelas reprodutoras via saco viteliacutenico Atraveacutes da imunidade

passiva eacute possiacutevel desenvolver a resposta imune especiacutefica sem que haja um envolvimento

do organismo pela transferecircncia de ceacutelulas ou de anticorpos de outro indiviacuteduo jaacute

20

imunizado A imunidade ativa por sua vez eacute decorrente da exposiccedilatildeo das aves a um

antiacutegeno estranho que pode ser de origem vacinal ou um agente patoacutegeno

Nas aves a imunidade passiva eacute passada da matriz ateacute o pintinho pelo do ovo no

processo de produccedilatildeo de ovo imunoglobulinas (Ig) Y presentes no sangue das matrizes

chega ateacute o oviduto e se deposita na gema do ovo enquanto durante a secreccedilatildeo do

albuacutemen que ocorre na porccedilatildeo magnum do oviduto secreta tambeacutem IgA e IgM Eacute essa

imunidade enviada pela matildee que protege esses pintos nos primeiros dias de vida contra

vaacuterios agentes que estatildeo presentes no campo (Santin 2009) Haacute relaccedilatildeo direta entre os

tiacutetulos de seacutericos de Ig da matildee e a quantidade repassada ao ovo Assim eacute de extrema

importacircncia que o pintinho absorva adequadamente e rapidamente essa gema para que ele

tenha acesso a estas Ig (Santin 2009) Maiorka (2002) demonstrou que jejum de aacutegua e de

alimento por 12 horas apoacutes a eclosatildeo diminui a absorccedilatildeo da gema e afetam o

desenvolvimento da mucosa intestinal de frangos de corte Vargas et al (2009) mostraram

que os tiacutetulos seacutericos de anticorpos contra a vacina de doenccedila de Newcastle (NDV) foram

mais baixos em pintos submetidos a 12 horas de jejum poacutes eclosatildeo quando comparados

agravequeles que consumiram aacutegua e alimento logo apoacutes a eclosatildeo De fato o atraso no

consumo de alimento dos animais pode diminuir a absorccedilatildeo da gema e consequentemente

a passagem da imunidade passiva da matildee para o pintinho Dibner et al(1998) sugerem que

quando o pintinho natildeo recebe rapidamente aacutegua e alimento apoacutes a eclosatildeo acaba utilizando

as Ig e os fosfolipiacutedios da gema como alimento diminuindo assim sua funccedilatildeo na proteccedilatildeo

animal

112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves

A Arg eacute um aminoaacutecido essencial em aves principalmente na fase inicial Isso

ocorre porque as aves diferentemente dos mamiacuteferos natildeo possuem o ciclo da ureia

funcional necessitando da fonte exoacutegena de suplementaccedilatildeo Evoy et al (1998) em seu

21

trabalho relataram o papel da Arg como essencial na estimulaccedilatildeo do sistema imune do

hospedeiro

As vias metaboacutelicas que envolvem a Arg satildeo complexas e demonstradas

resumidamente a seguir

Adaptado de Duff amp Daly (2002)

Juntamente com a complexidade dessas vias soma-se a variada localizaccedilatildeo das

enzimas envolvidas no meio intracelular como nos tecidos Com exceccedilatildeo dos enteroacutecitos

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em receacutem-nascidos nenhum outro tipo de ceacutelula conteacutem todas as enzimas necessaacuterias para

a siacutentese de Arg (Wu amp Morris 1998)

A Arg eacute ativamente absorvida pelo intestino pelo sistema de transporte soacutedio-

dependente A alta atividade da arginase no enteroacutecito converte cerca de 40 da dieta de

Arg em citrulina a qual eacute liberada na circulaccedilatildeo (Castillo et al 1993) Quando a Arg cai

na corrente sanguiacutenea cerca de 15 eacute eliminada pelo fiacutegado e o restante entra na

circulaccedilatildeo sistecircmica (OrsquoSullivan et al 1998) A Arginina eacute sintetizada a partir da

citrulina principalmente nos rins e eacute entatildeo liberada na circulaccedilatildeo para ser utilizada pelos

demais tecidos

O oacutexido niacutetrico (NO) constitui uma das menores e mais simples moleacuteculas

biossintetizadas (Morris et al 1994) O NO eacute um radical livre gasoso inorgacircnico e

identificado como mensageiro molecular extremamente laacutebil (meia vida bioloacutegica em

torno de segundos) O NO media vaacuterios fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente

do endoteacutelio citotoxicidade mediada por macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria Eacute produzido pelas ceacutelulas endoteliais neurocircnios macroacutefagos e

tecidos entre eles a hipoacutefise que age paracrinamente exercendo efeitos intra e

extracelulares em vaacuterios sistemas fisioloacutegicos (Kutchai 1998)

Palmer et al (1988) demonstraram que a L-Arg eacute o precursor fisioloacutegico do NO

nas ceacutelulas endoteliais Com base nesta informaccedilatildeo vaacuterios grupos de investigadores

suspeitaram que o NO fosse o provaacutevel precursor da siacutentese de NO3- e NO2

- pelos

macroacutefagos Subsequentemente esta hipoacutetese foi comprovada e ficou demonstrado que o

NO eacute o principal mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a

mais importante moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al 1988 e Marletta

et al 1988 citados por Dusse et al 2003)

23

Este composto eacute produzido a partir da oxidaccedilatildeo da L-arginina pela accedilatildeo da enzima

oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) uma enzima Ca++-calmodulina-dependente Por este

mecanismo eacute gerado citrulina como produto final (Kiechele amp Malinski 1993)

O surgimento do NO como agente da sinalizaccedilatildeo celular eacute uma importante

descoberta da fisiologia humana e animal nos uacuteltimos anos O NO participa de vaacuterios

fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente do endoteacutelio citotoxicidade mediada por

macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O NO eacute o principal

mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a mais importante

moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al1988 e Marletta et al 1988 citados

por Dusse et al 2003)

Existem trecircs formas de NOS sendo a NOS induzida (iNOS) e duas NOS

constitutivas (cNOS) O NO eacute sintetizado pela ativaccedilatildeo da cNOS basal (em ceacutelulas

endoteliais vasculares e neurocircnios) segundos a minutos apoacutes o aumento na concentraccedilatildeo

de caacutelcio em resposta agrave ativaccedilatildeo de receptores da superfiacutecie celular e mecanismos de

transduccedilatildeo de sinal (Adams 1996)

Ao contraacuterio a iNOS natildeo depende de caacutelcio para ativaccedilatildeo mas a siacutentese de

mRNA da iNOS eacute necessaacuteria para sua atividade A NOS induzida natildeo eacute detectaacutevel em

condiccedilotildees basais As LPS ou endotoxinas bacterianas junto com citocinas como TNFα

IL-1β ou IF-γ induzem a siacutentese de iNOS de duas a quatro horas apoacutes a exposiccedilatildeo ao

agente A iNOS requer siacutentese proteica para sua expressatildeo e sua atividade persiste por

mais de 24 horas e sintetiza NO em concentraccedilotildees nanomolares 1000 vezes maior que

cNOS (Davies et al 1995)

A expressatildeo da iNOS eacute o resultado da resposta inflamatoacuteria localizada ou difusa

resultante da infecccedilatildeo ou dano tecidual Segundo Salvemini et al (1996) o NO eacute potente

vasodilatador e seu envolvimento na resposta inflamatoacuteria pode ter relaccedilatildeo com sua

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habilidade em aumentar a permeabilidade vascular e o edema atraveacutes de mudanccedilas no

fluxo sanguiacuteneo local e do aumento na produccedilatildeo de prostaglandinas proinflamatoacuterias

A expressatildeo de iNOS em endotoxemia eacute citoprotetoacuteria inibindo microtrombose

pela prevenccedilatildeo de adesatildeo plaquetaacuteria e danos mediados por radicais Por outro lado a

citotoxidade do NO resulta da sua accedilatildeo direta ou da sua reaccedilatildeo com outros compostos

liberados durante o processo inflamatoacuterio A base bioquiacutemica para a accedilatildeo direta do NO

consiste na sua reaccedilatildeo com metais (especialmente o ferro) presentes nas enzimas do seu

alvo (Moncada 1991 James 1995) Desta forma satildeo inativadas enzimas cruciais para o

ciclo de Krebs para a cadeia de transporte de eleacutetrons para a siacutentese de DNA e para o

mecanismo de proliferaccedilatildeo celular Em processos infecciosos ceacutelulas ativadas como

macroacutefagos neutroacutefilos e ceacutelulas endoteliais secretam simultaneamente NO e

intermediaacuterios reativos do oxigecircnio a accedilatildeo citotoacutexica indireta do NO consiste

principalmente na sua reaccedilatildeo com esses intermediaacuterios do oxigecircnio

Durante a resposta imune mediada por ceacutelulas a maioria das ceacutelulas adquire a

capacidade de expressar a forma de NO induzida (Nathan amp Xie 1994) A accedilatildeo do NO

depende da ceacutelula T reconhecer um antiacutegeno especiacutefico embora sua accedilatildeo na resposta

imune mediada por ceacutelulas natildeo seja especiacutefica (Schmidt amp Walter 2004)

Costa et al (2003) corroboram com o fato de que a fagocitose por si soacute natildeo induz a

siacutentese de NO A fagocitose de partiacuteculas inertes por macroacutefagos peritoniais em cultura

ou por macroacutefagos murinos estimulados por citocinas natildeo satildeo estiacutemulos suficientes para

a induccedilatildeo expressiva de iONS No entanto a fagocitose de agentes bioloacutegicos nas

mesmas condiccedilotildees induz altos niacuteveis de NO sugerindo que a produccedilatildeo de NO seja

dependente de estiacutemulo imunoloacutegico e que faccedila parte dos mecanismos de defesa do

organismo

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Todas estas investigaccedilotildees estabeleceram de forma definitiva uma associaccedilatildeo entre

arginina oacutexido niacutetrico e resposta imune Por isso nas uacuteltimas duas deacutecadas a arginina tem

sido o foco de estudos como regulador de muitos processos imunoloacutegicos e fisioloacutegicos

(Tayade et al 2006)

Trabalhos desenvolvidos com mamiacuteferos demonstraram que as respostas imunes

podem ser influenciadas pela arginina dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al

1998 Lewis amp Langkamp-Henken 2000) Em experimentos desenvolvidos com animais

jovens os efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina foram demonstrados

como o aumento do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos

tiacutemicos Os efeitos imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais

estressados ou imunossupremidos

Os efeitos beneacuteficos da arginina natildeo se limitam agrave imunidade celular Segundo

LeBien (2002) em mamiacuteferos geneticamente modificados a arginina eacute utilizada para

diferenciaccedilatildeo de proacute-linfoacutecitos B para preacute-linfoacutecitos B na medula oacutessea e estaacute envolvida na

liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da medula

Por outro lado Deng et al (2005) relatam que relevantes pesquisas em espeacutecies

aviaacuterias satildeo esparsas Estas pesquisas apontaram o aumento da produccedilatildeo de oacutexido niacutetrico

por macroacutefagos de aves suplementadas com arginina (Sung et al 1991) aumento do peso

dos oacutergatildeos linfoides (Kwak et al 1999) melhora da relaccedilatildeo heteroacutefilolinfoacutecito em pintos

suplementados e desafiados com o agente viral da bronquite infecciosa e maior percentual

de ceacutelulas CD8+ (Lee et al 2002)

Entretanto para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de arginina

foram observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

estabelecidos Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de arginina

plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular

26

Outros autores obtiveram respostas positivas com a suplementaccedilatildeo de arginina na

reduccedilatildeo na mortalidade de frangos desafiados com Eimeria acervulina Eimeria tenella e

Eimeria maacutexima alterando a relaccedilatildeo argininalisina de 09 para 13 (Kidd et al 2002) e na

siacutendrome da hipertensatildeo pulmonar (Wideman et al 1995) Tambeacutem Corzo et al (2003)

observaram reduccedilatildeo linear de arranhotildees infectados em carcaccedilas de frangos alimentados

com niacuteveis crescentes de arginina (08 a 125 da dieta) Embora esses paracircmetros sejam

indicativos indiretos da imunidade mas apontam a importacircncia da arginina na melhora da

imunidade e no restabelecimento do status sanitaacuterio dos planteacuteis aviacutecolas

Tayade et al (2006) demonstraram recentemente que frangos vacinados com uma

vacina intermediaacuteria atenuada contra a doenccedila de Gumboro e suplementados com 2 de

arginina mostraram 100 de proteccedilatildeo apoacutes desafio com o viacuterus da doenccedila de Gumboro

comparado com 80 de proteccedilatildeo induzido apenas pela vacina sem adiccedilatildeo de arginina

suplementar na dieta

Aleacutem disso Deng et al (2005) verificaram aumento no niacutevel de anticorpos contra

eritroacutecitos de carneiro em frangas de postura somente na oitova semana de idade quando

estas aves foram suplementadas com niacuteveis de arginina em 150 acima do recomendado

pelo NRC do primeiro dia ateacute a quarta semana de vida Os autores concluiacuteram que a

suplementaccedilatildeo com arginina por um periacuteodo curto de tempo tem pouco efeito sobre a

imunidade e que a imunocompetecircncia pode ser permanentemente moldada pelo status

nutricional nos estaacutegios mais precoces do desenvolvimento

Para a melhora da resposta imune deve-se garantir que as matrizes desenvolvam

tiacutetulos elevados de anticorpos e assim buscar atingir o controle contra surtos de doenccedilas

via imunidade materna como meio de prevenccedilatildeo na progecircnie Kidd et al (1993)

observaram que a diferenccedila no niacutevel de anticorpos contra eritroacutecitos de carneiro em

27

matrizes pesadas recebendo dietas compostas por gratildeos de vaacuterias origens foi detectada na

progecircnie recebendo a mesma dieta

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo dos

niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes Segundo Kidd (2004) trabalhos desenvolvidos a

cerca das exigecircncias nutricionais das matrizes estatildeo focados apenas na questatildeo produtiva

Brake (1997) mostrou que a suplementaccedilatildeo de dietas para matrizes com vitaminas E e C

promoveu melhoria na transferecircncia de imunidade materna e na resposta imune dos pintos

pela proteccedilatildeo aos anticorpos no ovo durante a incubaccedilatildeo

Segundo Gore amp Qureshi (1997) um dos mecanismos pelo qual a vitamina E atua

nesta fase de crescimento embrionaacuterio pode estar relacionado a uma maior produccedilatildeo de

oacutexido niacutetrico nitritos e nitratos pelo fato de que a Vitamina E pode aumentar a afinidade

dos receptores de membrana dos macroacutefagos para a ativaccedilatildeo dos estiacutemulos tais como os

lipopolissacariacutedeos o que resulta em maior atividade da oacutexido niacutetrico sintetase

Na literatura consultada natildeo existem relatos da suplementaccedilatildeo das dietas das

matrizes com arginina e o efeito na resposta imune da progecircnie

A produccedilatildeo de NO pelos macroacutefagos das aves eacute arginina dependente de forma

similar aos macroacutefagos de mamiacuteferos (Dietert amp Golemboski 1998) Entretanto ao

contraacuterio dos mamiacuteferos as aves natildeo podem sintetizar arginina As aves por natildeo

apresentarem o ciclo da ureia funcional dependem exclusivamente da arginina dieteacutetica

(Allen amp Baker 1972) O quadro eacute ainda mais grave nas aves uma vez que dependem de

arginina suplementar tambeacutem para a para a formaccedilatildeo de ornitina que em mamiacuteferos eacute

obtida atraveacutes do aacutecido glutacircmico A siacutentese de ornitina eacute fundamental pois estaacute envolvida

na obtenccedilatildeo de prolina e eacute utilizada tambeacutem na formaccedilatildeo de poliaminas (espermidina

espermina e putrescina) que satildeo moleacuteculas associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

28

Desta forma a arginina eacute um aminoaacutecido essencial para as aves na fase inicial A

dieta eacute um fator particularmente sensiacutevel na disponibilidade de arginina e

consequentemente de NO considerando ainda que a arginina eacute um aminoaacutecido dos mais

limitantes em dietas agrave base milho e farelo de soja (Edmonds et al 1985)

A suplementaccedilatildeo adicional de Arg nas dietas de aves imunocomprometidas

poderia aumentar ainda mais a atividade da arginase e com isso menos Arg seria

disponiacutevel para a siacutentese de NO (Kepka-Lenhart et al 2000) Alternativamente Bansal et

al (2004) sugerem como estrateacutegia dieteacutetica para restaurar as concentraccedilotildees plasmaacuteticas

de Arg a suplementaccedilatildeo de citrulina principalmente em condiccedilotildees de imunodeficiecircncia

associadas com elevada atividade plasmaacutetica da arginase Nas espeacutecies uricoteacutelicas o ciclo

Arg-citrulina eacute funcional A citrulina eacute um aminoaacutecido que natildeo eacute encontrado em nenhuma

proteiacutena corporal aleacutem da inabilidade das aves na siacutentese endoacutegena de citrulina a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica se constitui na uacutenica fonte de Arg para os macroacutefagos via ciclo

NO-citrulina (Wiesinger 2001)

A suplementaccedilatildeo de aminoaacutecidos sinteacuteticos tem propiciado facilidades no ajuste

das foacutermulas de raccedilatildeo possibilitando a obtenccedilatildeo dos niacuteveis exigidos de aminoaacutecidos

essenciais A utilizaccedilatildeo de niacuteveis elevados de lisina proporciona um maior crescimento

muscular principalmente o incremento no rendimento de peito e coxas dos frangos de

corte Entretanto esse aumento da taxa de crescimento pode alterar o equiliacutebrio

metaboacutelico ideal entre os aminoaacutecidos especialmente a relaccedilatildeo argininalisina

O antagonismo entre arginina e lisina envolve a diminuiccedilatildeo da siacutentese de

creatinina compromete a siacutentese de prolina ornitina promove o aumento da atividade da

arginase renal e da excreccedilatildeo de ureia aleacutem de que quando os niacuteveis de lisina satildeo

excessivamente altos tambeacutem ocorre a excreccedilatildeo renal de arginina (Austic amp Scott 1975)

29

Os sinais claacutessicos da deficiecircncia de Arg satildeo fraqueza e paralisia das pernas penas

deformadas e ericcediladas sobre o dorso e asa das aves reduccedilatildeo do ganho de peso lesotildees

histoloacutegicas na medula oacutessea e desenvolvimento oacutesseo afetado (Jungherr et al 1958

Newbern et al 1960) A arginina aleacutem de servir como substrato para a siacutentese de NO

estaacute envolvida na secreccedilatildeo do GH

Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram um aumento na

concentraccedilatildeo plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez

secretado pela hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio

receptor e indiretamente via IGF-I e II (insulin-like growth factor ou somatomedina C)

sobre os tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos do GH ocorre em niacutevel do

disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no

crescimento dos ossos longos (Isaksson et al 1987)

Os efeitos dos aminoaacutecidos essenciais no tecido oacutesseo em crescimento satildeo

provavelmente mediados pelo IGF-I (Baylink et al1993) De fato Chevalley et al (1998)

demonstraram que arginina e lisina aumentaram a produccedilatildeo in vitro de IGF-I por

osteoblastos mantidos em cultura Aleacutem disso Conconi et al (2001) trabalhando com

cultura de osteoblastos enriquecida com soluccedilatildeo de aminoaacutecidos essenciais (Arg Lis Met

Thr e Trp) encontraram niacuteveis significativamente aumentados de fosfatase alcalina e

siacutentese de colaacutegeno Estes resultados segundo os autores sugerem que os aminoaacutecidos

podem atuar diretamente na formaccedilatildeo da matriz oacutessea e podem tambeacutem modular o

crescimento e a diferenciaccedilatildeo de osteoblastos

Por outro lado eacute conhecido que a arginina eacute precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo

pelo qual ela poderia exercer os seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo O NO pode

participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento (Hukkanem et

30

al 1999) Estes autores demonstraram a expressatildeo do mRNA da cNOS basal (oacutexido

niacutetrico sintetase endotelial) em condroacutecitos hipertroacuteficos de placas de crescimento de ratos

neonatos

Na placa de crescimento o NO poderia facilitar a vascularizaccedilatildeo e a formaccedilatildeo

oacutessea (Rath et al 2000) a exemplo de sua accedilatildeo na cartilagem articular em que induz

respostas bioloacutegicas que levam a degradaccedilatildeo irreversiacutevel (Pelletier et al1998) Segundo

Amin amp Abramson (1998) nas osteoartrites o NO induz a apoptose dos condroacutecitos

Teixeira et al (2005) comprovaram que o NO tem duas funccedilotildees distintas nos

condroacutecitos da placa de crescimento Uma vez iniciado o processo de maturaccedilatildeo o NO

estimula a hipertrofia por meio do aumento da expressatildeo da fosfatase alcalina e colaacutegeno

tipo X sendo conhecido que a expressatildeo de ambas proteiacutenas eacute um requerimento para a

completa hipertrofia dos condroacutecitos Aleacutem disso o NO estaacute associado ao estaacutegio mais

tardio do processo de maturaccedilatildeo Condroacutecitos totalmente diferenciados tratados com

ativadores da apoptose sofrem morte celular a inibiccedilatildeo da siacutentese de NO bloqueia a

apoptose enquanto a exposiccedilatildeo aos doadores de NO estimula a apoptose Estes autores

concluiacuteram que os sistemas NOS ndash NO atuam como promotores da maturaccedilatildeo dos

condroacutecitos

Por outro lado Vanacutet amp Ralston (2001) advertem que o efeito do NO na atividade

dos osteoblastos pode ser bifaacutesico Estudos in vitro tecircm indicado que pequenas

quantidades de NO que satildeo produzidas constitutivamente pelos osteoblastos podem agir

como um estimulador autoacutecrino do crescimento oacutesseo Entretanto altas concentraccedilotildees de

NO tais como aquelas observadas apoacutes estimulaccedilatildeo das citocinas inflamatoacuterias em que a

iNOS eacute a isoforma envolvida tecircm efeito inibitoacuterio no crescimento e diferenciaccedilatildeo

osteoblaacutestica

31

O crescimento e a remodelaccedilatildeo dos tecidos satildeo regulados por complexas interaccedilotildees

entre potencial geneacutetico fatores de crescimento influecircncias ambientais e nutriccedilatildeo

(Gonzales amp Sartori 2002) A resposta imune e a inflamaccedilatildeo podem modificar as

necessidades de alguns nutrientes

As alteraccedilotildees metaboacutelicas decorrentes podem interromper os eventos envolvidos

no processo de condrogecircnese e osteogecircnese e desencadear o processo de formaccedilatildeo das

lesotildees no tecido oacutesseo que levam a dificuldade locomotora deformaccedilatildeo oacutessea predispotildeem

agraves infecccedilotildees e agraves desordens esqueleacuteticas tais como a discondroplasia tibial (Thorp 1994)

Aleacutem das perdas econocircmicas eacute clara a percepccedilatildeo que as disfunccedilotildees do aparelho locomotor

comprometem o bem-estar das aves

Aleacutem de interagirem com o sistema imune os processos que modulam o

crescimento oacutesseo satildeo complexos e muacuteltiplos e mais estudos satildeo necessaacuterios para elucidar

estes mecanismos

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II - OBJETIVOS GERAIS

Essa pesquisa foi desenvolvida com a finalidade de estudar o efeito da

suplementaccedilatildeo de Arg na dieta de fecircmeas reprodutoras de frangos de corte na qualidade

dos ovos e nas caracteriacutesticas produtivas na qualidade oacutessea no desenvolvimento dos

oacutergatildeos linfoide e do sistema imune da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo

niacuteveis crescentes de Arg

21 Objetivos Especiacuteficos Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis

crescentes de Arg no desempenho produtivo e na qualidade dos ovos

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg no desempenho no

rendimento de carcaccedila e na qualidade oacutessea da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas

contendo niacuteveis crescentes de Arg

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg nas respostas imune e

celular da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo

Resumo ndash Este estudo avaliou o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e reprodutivo e qualidade de ovos Foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e reprodutivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo

Palavras-chave embriodiagnoacutestico incubaccedilatildeo qualidade de ovos

III - Effect of arginine supplementation on productive performance and egg quality of broiler breeder hens

Abstract - This study investigated the effect of arginine (Arg) supplementation on broiler breeder productive performance and egg quality ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance Supplementation of broiler diets with increasing levels of Arg provided an increase in the egg production and eggs with higher weights in the levels of 1262 and 1543 respectively The increased levels of Arg did not influence the reproduction variables studied suggesting that it may be used without any harmful risk

Key words embryo diagnosis hatching egg quality

42

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo e alimentaccedilatildeo animal estatildeo direcionadas para garantir oacutetimo aporte de

nutrientes para os animais de acordo com sua finalidade comercial e fase fisioloacutegica

Na produccedilatildeo de frangos de corte a taxa de crescimento acelerada imposta pela seleccedilatildeo

geneacutetica os vaacuterios fatores estressantes (ambientais e de manejo) e de desafio

imunoloacutegico (vacinaccedilatildeo e infecccedilatildeo) nas condiccedilotildees de produccedilatildeo comercial fazem com

que as exigecircncias das matrizes de corte para alguns nutrientes sejam maiores para que a

progecircnie possa expressar seu potencial geneacutetico

O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo dependem completamente dos

nutrientes contidos no ovo e estes satildeo originados da dieta e do metabolismo das

matrizes O ovo eacute um sistema fechado assim todos os nutrientes necessaacuterios para o

desenvolvimento do embriatildeo devem ser fornecidos pela matriz quando o ovo eacute formado

(Oviedo-Roacutendon amp Murakami 1998)

Aleacutem disso existe correlaccedilatildeo positiva entre peso do ovo e peso do pinto ao

nascer e deste com o peso do frango ao abate (Lara et al 2005) De fato Whiting amp

Pesti (1984) verificaram que para cada grama a mais no peso do ovo correspondia a

107 e 60g adicionais para o peso final de machos e fecircmeas respectivamente

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas No ovo os aminoaacutecidos

presentes na gema satildeo suficientes durante o processo de eclosatildeo poreacutem apoacutes o

nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o processo de

crescimento (Otha et al 2004) Nos uacuteltimos anos o impacto da nutriccedilatildeo das matrizes

no estado nutricional e desempenho da progecircnie bem como a melhora do estado

imunoloacutegico tem recebido especial atenccedilatildeo (Pappas et al 2006)

43

A nutriccedilatildeo das matrizes com dietas com arginina seria uma alternativa para o

enriquecimento da gema dos ovos com esse aminoaacutecido A Arg eacute um aminoaacutecido

baacutesico que pode influenciar a reposta imune e a resistecircncia agraves doenccedilas A Arg ainda eacute

conhecida pela funccedilatildeo estimuladora sobre o processo de ovulaccedilatildeo atraveacutes do aumento

da liberaccedilatildeo de hormocircnio luteinizante (LH) (Basiouni et al 2006) e como parte do

hormocircnio arginina vasotocina envolvido com a contraccedilatildeo uterina e a oviposiccedilatildeo

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias

de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo

dos niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes De acordo com Kidd (2004) os trabalhos

desenvolvidos em relaccedilatildeo agraves exigecircncias nutricionais das matrizes para melhorar o

sistema imune da progecircnie satildeo poucos quando comparados a questatildeo produtiva das

aves

Com isso objetivou-se com o trabalho avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de

arginina sobre o desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte

Material e meacutetodos

O experimento foi conduzido no aviaacuterio experimental da Universidade Federal

do Paranaacute ndash Campus Palotina constituiacutedo de 32 boxes com dimensotildees de 25 x 15 m

com cama de maravalha (plusmn10 cm) sobre o piso Foram utilizados boxes telados e

providos de um bebedouro pendular e de dois comedouros um deles com grade de

restriccedilatildeo aos machos e outro instalado mais alto natildeo permitindo somente o acesso das

fecircmeas Em cada boxe experimental foram utilizados ninhos convencionais de um

andar com quatro bocas de madeira com dimensotildees de 030 m x 030 m x 030 m a

030 m acima do niacutevel do piso sendo uma boca para cada quatro fecircmeas

Foram utilizados 390 reprodutores de frangos de corte sendo 360 fecircmeas e 30

machos da linhagem Ross As aves foram selecionadas na 18ordf semana de idade a partir

de um plantel de reprodutores dentro da faixa de peso de 1850 a 1950 g para as

fecircmeas e de 2450 a 2550 g para os machos O delineamento experimental utilizado foi

o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 e

1543 de Arg digestiacutevel) seis repeticcedilotildees e 12 fecircmeas e um macho por unidade

44

experimental O acasalamento foi realizado na 18ordf semana de idade das aves na

proporccedilatildeo de um macho para cada 12 fecircmeas

O periacuteodo experimental iniciou na 25ordf semana quando o plantel alcanccedilou 5 de

produccedilatildeo e finalizou na 56ordf semana de idade das aves O programa de iluminaccedilatildeo

iniciou na 19ordf semana de idade com fornecimento inicial de 14 horas de luz diaacuteria e

aplicados aumentos semanais de 30 minutos de luz ateacute o fornecimento de 17 horas de

luz diaacuteria na 25ordf semana de idade das aves

O fornecimento de raccedilatildeo foi limitado e controlado diariamente enquanto o de

aacutegua foi ad libitum As exigecircncias nutricionais utilizadas para formulaccedilatildeo das dietas das

fecircmeas e dos machos foram baseadas nas recomendaccedilotildees contidas no manual da

linhagem

A partir da 23ordf semana de idade as fecircmeas passaram a receber as dietas

experimentais constituiacutedas da dieta basal suplementada com cinco niacuteveis de L ndash

Arginina variando de 0 a 600 mgkg na dieta basal em substituiccedilatildeo ao caulin que

corresponderam aos niacuteveis de 0943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg

digestiacutevel (Tabela 1) Os machos receberam uma uacutenica dieta durante todo o periacuteodo

experimental O periacuteodo experimental teve iniacutecio na 25ordf semana Para determinaccedilatildeo da

produccedilatildeo de ovos os mesmos foram coletados diariamente e a produccedilatildeo diaacuteria anotada

em planilhas por repeticcedilatildeo Semanalmente foi obtida a produccedilatildeo total de ovos e a

porcentagem de postura de cada unidade experimental Na 30ordf 34ordf e 38ordf semana de

idade foram coletados todos os ovos produzidos em um dia para avaliaccedilatildeo da qualidade

(peso meacutedio gravidade especiacutefica porcentagem de albuacutemen e gema porcentagem e

espessura da casca)

A quantidade de raccedilatildeo oferecida para as fecircmeas foi calculada de acordo com a

produccedilatildeo de ovos e do peso corporal Para os machos forneceu-se raccedilatildeo em funccedilatildeo do

peso corporal (conforme manual da linhagem) O peso foi controlado semanalmente ateacute

a 35ordf semana e quinzenalmente a partir da 36ordf semana de idade das aves ateacute o final do

experimento

A avaliaccedilatildeo do rendimento de incubaccedilatildeo foi realizada na 40ordf semana de idade

das aves Foram incubados 80 ovos de cada tratamento totalizando 400 ovos Os ovos

foram pesados e incubados em cada idade avaliada de acordo com o tratamento e

repeticcedilatildeo e avaliadas as seguintes caracteriacutesticas peso meacutedio do ovo incubado peso

meacutedio dos pintos ao nascer percentual do peso da progecircnie ao nascer em relaccedilatildeo ao

peso do ovo e taxa de eclosatildeo Apoacutes a eclosatildeo foi realizado o embriodiagnoacutestico dos

45

ovos que natildeo eclodiram os quais foram classificados em mortalidade por fase (inicial

intermediaacuteria e final) ovos contaminados bicados vivos e bicados mortos

Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental

Ingredientes () Raccedilatildeo postura I Milho 6072 Farelo de Trigo 420 Oacuteleo de Soja 200 Farelo de Soja 2260 Sal Comum 032 Caulim 050 Calcaacutereo 38 647 Fosfato Bicaacutelcico 131 Bicarbonato de Soacutedio 010 DL-Metionina 98 014 Colina 60 016 Milbond 010 Mycofix 015 Carbonato Potaacutessio 99 021 Premix vit e mineral1 050 Hy D2 005 Eur Bactiguard L 020 Valores Calculados Proteiacutena 1551 EM Kcalkg 2815 Gordura 477 AcLinoleico 248 Caacutelcio 295 Foacutesforo disponiacutevel 044 Lisina dig 071 Met + cistina dig 060 Treonina dig 051 Arginina dig 094 Soacutedio 019 Cloro 026 Potaacutessio 080 Mongin Meq100g 21388

1 Conteuacutedo por kg de premix Vit A 8000000 UI Vit D3 2200000 UI Vit E 6200 mg Vit K 3 2000 mg Vit B 1 2000 mg Vit B2 3000 mg Vit B6 6000 mg Vit B12 10000 mcg Pantotenato de caacutelcio 6000 mg Niacina 25000 mg Aacutec foacutelico 400 mg Se 100 mg Mn 65000 mg Fe40000 mg Cu 10000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg 2 Rovimix Hy D ndash DSM Nutritional Products

Para gravidade especiacutefica foi utilizado o meacutetodo da imersatildeo dos ovos em

soluccedilatildeo salina Foram preparadas seis soluccedilotildees (aacutegua e sal comum) com densidades que

variaram de 1070 a 1090 com variaccedilatildeo de 0004 para cada soluccedilatildeo As gravidades

foram aferidas com utilizaccedilatildeo de densiacutemetro de Petroacuteleo

46

O peso meacutedio do albuacutemen de cada repeticcedilatildeo foi obtido pela diferenccedila entre o

peso meacutedio do ovo e o peso meacutedio da gema somados ao peso meacutedio da casca de cada

repeticcedilatildeo Apoacutes a pesagem das cascas a espessura das mesmas foi medida com auxiacutelio

de um microcircmetro digital (Mitutoyoreg) em quatro pontos na regiatildeo central de cada casca

Para a medida de peso da casca os ovos foram quebrados e as cascas lavadas e secas agrave

temperatura ambiente por 48 horas em seguida foram pesadas em balanccedila analiacutetica e os

pesos anotados

Anaacutelise Estatiacutestica

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados de acordo com o seguinte modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243 4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os dados de embriodiagnoacutestico natildeo apresentaram distribuiccedilatildeo normal e foram

analisados pela anaacutelise Bayesiana assumindo que a porcentagem observada ri a cada

niacutevel de concentraccedilatildeo de Arg xi segue distribuiccedilatildeo Binomial com paracircmetros ni

(tamanho de amostra) e pi (taxa de eclosatildeo) pi = en1+en com funccedilatildeo de ligaccedilatildeo logit

ii

i

plog it(p ) log1 p⎛ ⎞

equiv = μ⎜ ⎟minus⎝ ⎠ nas formas linear e quadraacutetica dadas respectivamente por

n=α+ β1xi e n = α + β1xi + β2x2i Para a modelagem foram considerados um conhecimento

vago a priori sobre os paracircmetros de regressatildeo isto eacute com distribuiccedilotildees natildeo

informativas 3~ (010 )Nα e 3~ (010 )k Nβ k=12

A obtenccedilatildeo das distribuiccedilotildees marginais a posteriori para os paracircmetros foi por

meio do pacote BRugs do programa R (R Development Core Team 2007)

Para cada paracircmetro foram gerados 510000 valores em um processo MCMC

(Monte Carlo Markov Chain) considerando um periacuteodo de descarte amostral de 10000

47

valores iniciais A amostra final tomada com saltos de tamanho 20 conteacutem 25000

valores gerados A convergecircncia das cadeias foi verificada por meio do pacote CODA

(Best et al 1995) do programa R pelos criteacuterios de Geweke (1992) e de Heidelberger amp

Welch (1983)

Resultados e Discussatildeo

Os resultados de produccedilatildeo e de qualidade dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg estatildeo apresentados na Tabela 2 Os niacuteveis de

Arg digestiacutevel utilizados nas dietas das matrizes de corte influenciaram de forma

quadraacutetica (Plt005) a porcentagem de postura em que o niacutevel de 1262 de Arg

proporcionou a maior porcentagem de postura para as matrizes de corte (Figura 1)

Outros autores tambeacutem encontraram resultados semelhantes em relaccedilatildeo ao

aumento da taxa de postura em funccedilatildeo da suplementaccedilatildeo de Arg Segundo Najib amp

Basiouni (2004) a produccedilatildeo de ovos de matrizes elevou de 52 para 6786 quando

utilizaram niacuteveis de Arg e Lys na dieta de 15 e 12 respectivamente Adicionalmente

Basiouni et al (2006) observaram aumento no peso de foliacuteculos F1 em poedeiras que

receberam dietas com 205 Arg comparado com dietas que continham 154 de Arg

Esse efeito sugere que o aumento na produccedilatildeo de ovos possa ser atribuiacutedo do efeito

estimulatoacuterio especiacutefico da Arg na secreccedilatildeo de LH (Hormocircnio Luteinizante) o qual tem

accedilatildeo direta sobre o ovaacuterio e seus foliacuteculos (Basiouni 2009)

O comportamento observado na curva de produccedilatildeo de ovos demonstra aumento

da produccedilatildeo ateacute o niacutevel de 1262 de Arg e posterior queda ateacute o niacutevel de 1543 o

que provavelmente pode estar associado ao desequiliacutebrio aminoaciacutedico das dietas nos

niacuteveis extremos de Arg na raccedilatildeo Os altos niacuteveis de Arg utilizados podem ter afetado a

produccedilatildeo de ovos principalmente pelo antagonismo existente entre Arg e Lisina (Lys)

Baixas relaccedilotildees ArgLys em dietas de matrizes reduzem o consumo de raccedilatildeo e

deprimem a produccedilatildeo de ovos (Basiouni et al 2006) Altos niacuteveis de Lys associados a

baixos niacuteveis de Arg satildeo deleteacuterios agraves aves pois niacuteveis elevados de Lys promovem

expressiva elevaccedilatildeo da atividade da arginase renal e consequentemente induz agrave

degradaccedilatildeo da Arg (Austic amp Scott 1975) causando sintomas de deficiecircncia de Arg em

virtude das aves natildeo possuiacuterem o ciclo da ureia funcional (Drsquo Mello 2003) Esse

antagonismo ainda leva agrave diminuiccedilatildeo da atividade da glicina-amidinotransferase no

fiacutegado enzima que utiliza Arg e glicina como substratos juntamente com a metionina na

siacutentese da creatina muscular (Jones et al 1967 Andriguetto et al 1999)

48

Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg

()

Postura

()

Peso

Ovo

(g)

Gema

()

Clara

()

Casca

()

Casca

(mm)

Gravidade

Especiacutefica

(gml)

0943 7741plusmn460 6046plusmn048 2998plusmn035 5955plusmn045 876plusmn015 0577plusmn0004 1082plusmn0001

1093 8101plusmn544 6081plusmn052 2972plusmn042 5974plusmn040 902plusmn014 0584plusmn0005 1082plusmn0001

1243 8240plusmn370 6086plusmn051 2971plusmn043 6035plusmn031 875plusmn011 0569plusmn0004 1081plusmn0001

1393 8158plusmn368 6133plusmn057 2986plusmn041 5984plusmn043 880plusmn009 0571plusmn0003 1080plusmn0001

1543 7855plusmn600 6167plusmn046 2964plusmn030 6015plusmn038 876plusmn010 0573plusmn0004 1081plusmn0001

CV() 664 183 195 116 351 198 0133

Anaacutelise Variacircncia

Arg Quadratico1 Linear2 ns ns ns ns Linear3

R2 043 096 ----- ----- ----- ----- 066 1 Y= 421330+01239X-00004908X2 2 Y = 585813+000196527X 3 Y = 108413-000000249943X ns ndash natildeo significativo

77

78

79

80

81

82

83

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Pro

duccedilatilde

o de

ovo

s (

)

Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel

Ao avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arg no peso dos ovos das matrizes de

corte verificou-se aumento linear (Plt005) no peso dos ovos com o aumento de Arg

digestiacutevel nas raccedilotildees por outro lado houve queda linear (Plt005) na gravidade

especiacutefica dos ovos dessas matrizes (Figura 1)

Basiouni et al (2006) encontraram efeito dos niacuteveis de Arg e de Lys sobre na

gravidade especiacutefica dos ovos Estes autores observaram que baixos niacuteveis de Arg e

altos niacuteveis de Lys proporcionaram a melhor gravidade especifica dos ovos e quando a

1262

Arginina dig ()

Y = 421330+011239X-00004908X2 R2=043

49

relaccedilatildeo ArgLys era alta a gravidade especiacutefica piora significativamente Por outro lado

Lima amp Silva (2007) natildeo verificaram efeito das diferentes relaccedilotildees ArgLys digestiacutevel

nos paracircmetros de qualidade de ovos

O aumento do peso do ovo e a queda na gravidade especiacutefica desses ovos

possuem relaccedilatildeo direta Isso ocorre porque segundo Basiouni et al (2006) a siacutentese da

quantidade de casca dos ovos nas galinhas eacute constante Aleacutem disso com o aumento da

idade das galinhas ocorre aumento no tamanho dos ovos Do iniacutecio ateacute o final do ciclo

de postura o ovo chega a aumentar ateacute 40 do seu tamanho e por isso haveraacute menos

caacutelcio na superfiacutecie da casca o que reduz a espessura da casca (Baiatildeo amp Aguilar 2001)

e consequentemente a gravidade especiacutefica dos ovos

Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados de rendimento da incubaccedilatildeo dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel estatildeo apresentados na Tabela 3 Os

niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis de

incubaccedilatildeo Demonstra-se portanto que a Arg pode ser utilizada na dieta das matrizes

sem trazer prejuiacutezos agrave reproduccedilatildeo

A fertilidade e a eclosatildeo dos ovos das matrizes satildeo dois paracircmetros importantes

na incubaccedilatildeo dos ovos Valores proacuteximos de 96 para fertilidade e 88 para eclosatildeo

satildeo indicativos de bom manejo de reprodutoras (Rosa amp Aacutevila 2000) Segundo Rosa amp

Aacutevila (2000) o rendimento da incubaccedilatildeo estaacute diretamente relacionado com a

mortalidade embrionaacuteria a qual sofre influecircncia da gravidade especiacutefica e da

capacidade do ovo em perder umidade No presente trabalho observou-se que a

utilizaccedilatildeo de dietas suplementadas com Arg natildeo afetou nenhuma dessas variaacuteveis

apesar de ter interferido na gravidade especiacutefica dos ovos conforme demonstrado em

tabelas anteriores

10795

108

10805

1081

10815

1082

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Gra

vida

de e

spec

iacutefica

(gm

l)

59860

602604606608

61612614616618

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Peso

(g)

Y = 108413-000000249943X R2=066 Y = 585813+000196527X R2=096

50

O peso do pinto natildeo foi influenciado pelos niacuteveis de Arg na dieta das matrizes

de corte eacute considerado muito importante na cadeia de produccedilatildeo por estar diretamente

relacionado ao desempenho produtivo do frango A variaccedilatildeo de peso do pinto no

momento da eclosatildeo pode ser causada por fatores como linhagem idade da matriz peso

e niacuteveis de nutrientes do ovo (Vieira amp Moran Jr 1999) Okada (1994) e Castro (1996)

ressaltam que pintos de corte com mais de 40g no primeiro dia de vida devem ser

considerados de boa qualidade Os pintos desse experimento podem ser considerados de

boa qualidade jaacute que o menor peso dos pintos ao nascer foi de 439g Embora neste

estudo os niacuteveis de Arg na dieta das matrizes natildeo tenham afetado o peso dos pintos esse

aminoaacutecido eacute essencial para o bom desenvolvimento da progecircnie Kita et al (2002)

relatam que dietas com alta proteiacutena suplementadas com aminoaacutecidos essenciais (Arg

metionina+cistina) aumentam os niacuteveis plasmaacuteticos do fator de crescimento semelhante

agrave insulina (IGF-I) e o ganho de peso em aves jovens

Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Variaacuteveis Niacuteveis de Arginina

()

Fertilidade ()

Eclosatildeo ()

Peso ovo (g)

Peso Pinto (g)

Relaccedilatildeo Peso OvoPeso Pinto

0943 9750plusmn218 7875plusmn450 6269plusmn042 4507plusmn053 7168plusmn045 1093 9513plusmn212 8038plusmn459 6212plusmn033 4390plusmn045 7115plusmn054 1243 9250plusmn206 8125plusmn464 6200plusmn047 4487plusmn066 7234plusmn047 1393 9750plusmn218 8000plusmn457 6314plusmn072 4514plusmn086 7173plusmn082 1543 9625plusmn215 7750plusmn443 6351plusmn055 4529plusmn039 7127plusmn045 Meacutedia 9578 7958 6269 4486 7163

CV () 656 1641 231 374 222 Anaacutelise de Variacircncia Arginina ns ns ns ns ns

R2 ------ ------ ----- ------- ------- ns = natildeo significativo

O peso dos ovos eacute outra caracteriacutestica de grande importacircncia relacionada com a

idade da matriz os quais satildeo preponderantes para o desenvolvimento inicial das aves e

tem consequecircncias em todo o crescimento (Pedroso et al 2005) Essa influecircncia eacute bem

conhecida e o peso do pinto representa entre 66 e 71 do peso do ovo (Fiuacuteza et al

2006 Marinho et al 2006 Pappas et al 2006) Segundo North amp Bell (1990) cada

51

grama a mais no peso do pinto representa 13 gramas no peso do frango ao abate por

isso a nutriccedilatildeo das matrizes eacute de grande importacircncia jaacute que a Arg tem relaccedilatildeo positiva

com o hormocircnio de crescimento (GH) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave

(Harvey et al 2001)

Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico

Estimativas Bayesianas

Ligaccedilatildeo Ligaccedilatildeo Meacutedias Desvio Padratildeo P25 P975 DIC

Embriodiagnoacutestico

Linear α β

-07512 -25980

2078 1798

-4811 -6367

3426 0784 4783 Mortalidade

Embrionaacuteria (1 a 5 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-8444 10690 -5607

10610 18020 7538

-3015 -2406 -2104

11790 47550 8874

4813

Linear α β

2259 -6267

3790 3615

-4602 -14470

10570 -

01174 3137

Mortalidade (11 a 17 dias)

Quadraacutetica α β1 β2

5057 -11090 1958

12960 22430 9632

-2027 -5093 -1714

3112 3253 2052

3167

Linear α β

-3726 1274

10390 07968

-58110 -02681

-1730 2882 1079

Mortalidade (18 a 21 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-1634 -2195 1387

6330 10280 4084

-14020 -22380 -6539

10690 17840 9441

1095

Linear α β

-1927 -2266

2562 2359

-7233 -7321

2739 1993 0070

Bicado Vivo Quadraacutetica

α β1 β2

-1451 -1692 -2019

2749 2821 2539

-7044 -7313 -7290

3755 3682 2565

0057

Linear α β

-2564 -1628

2860 2418

-8103 -6479

2823 2755 3417

Bicado Morto Quadraacutetica

α β1 β2

3692 -12350 4412

11930 19920 8139

-1936 -5206 -1148

2739 2609 2054

3428

Linear α β

-513600 -004923

3798 3023

-13000 -6154

2041 5809 2522

Morte por Contaminaccedilatildeo Quadraacutetica

α β1 β2

-009106 -71940 28920

13200 21610 8744

-2704 -4965 -1428

2480 3473 2016

2555

Na Tabela 4 satildeo apresentadas as estimativas Bayesianas para as equaccedilotildees de

regressatildeo ajustadas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos provenientes das

matrizes de corte alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg Natildeo foi verificado efeito da

dieta das matrizes sobre nenhuma das variaacuteveis paracircmetros avaliadas (Pgt005)

52

Contudo no periacuteodo final do desenvolvimento embrionaacuterio (18 a 21 dias) haacute maior

mortalidade (Tabela 5) Nesse periacuteodo haacute mudanccedila draacutestica do meio aquoso protegido

para o meio aeroacutebio totalmente diferente Nas aves essa fase final de desenvolvimento

inclui absorccedilatildeo de aacutegua retraccedilatildeo do saco vitelino maturaccedilatildeo funcional do pulmatildeo

transiccedilatildeo da respiraccedilatildeo coacuterio-alantoide para pulmonar bicagem e nascimento Ocorre

ao mesmo tempo o desenvolvimento da resposta homeoteacutermica (Oviedo-Roacutendon amp

Murakami 1998) Aleacutem disso nesse periacuteodo ocorre a mudanccedila pronunciada em

hormocircnios tireoideanos corticosteroideos hormocircnios do eixo somatotroacutepico

prolactina vasotocina e melatonina

Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg Morte

Embrionaacuteria (1 a 5 dias)

Morte (11 a 17 dias)

Morte (18 a 21

dias)

Bicado Morto

Morte por Contaminaccedilatildeo

Arg () 0943 264 416 889 264 125 1093 514 000 764 125 000 1243 250 000 836 000 125 1393 000 125 1514 125 000 1543 125 000 1406 125 125 CV () 20962 50785 9999 27439 36515 (Pgt005)

Conclusatildeo

A suplementaccedilatildeo das dietas de matrizes de corte com niacuteveis crescentes de

Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o

niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os

niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas

podendo ser utilizado o menor niacutevel de suplementaccedilatildeo ou seja 0943 de Arg

digestiacutevel sem prejuiacutezos

53

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IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e

paracircmetros oacutesseos da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos

Palavras-chave avaliaccedilatildeo de carcaccedila desempenho produtivo osso

58

IV - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

performance carcass yield and bone parameters of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine

(Arg) supplementation in broiler breeder henrsquos diet on performance carcass yield and bone parameters in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) These results indicate that it is necessary to feed the progeny with an Arg-supplemented diet to obtained better performance and bone quality Key words bone carcass evaluation productive performance

59

Introduccedilatildeo

As exigecircncias nutricionais para a maioria dos nutrientes satildeo estabelecidas com

base nas respostas produtivas mas em alguns casos a sauacutede eacute o criteacuterio principal A

nutriccedilatildeo de reprodutoras pesadas deve atender as exigecircncias da ave alcanccedilando bom

desempenho produtivo e ainda suprir as necessidades dos embriotildees e dos pintos

neonatos originados de seus ovos O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo

dependem completamente dos nutrientes contidos no ovo os quais satildeo originados da

dieta e do metabolismo das galinhas (Baiatildeo amp Lucio 2005) Assim a concentraccedilatildeo de

nutrientes disponiacuteveis no ovo para o desenvolvimento do embriatildeo eacute criacutetico e pode

influenciar o potencial de ganho de peso da progecircnie e caracteriacutesticas importantes de

desenvolvimento imunitaacuterio oacutesseo e muscular

O crescimento precoce no periacuteodo poacutes-eclosatildeo eacute influenciado por vaacuterios

fatores entre eles o conteuacutedo de resiacuteduos do saco viteliacutenico a ingestatildeo de alimento e de

aacutegua os niacuteveis de enzimas pancreaacuteticas e intestinais a aacuterea de superfiacutecie intestinal e a

digestibilidade global de nutrientes (Dibner 1996) As reservas contidas no saco

vitelino satildeo as primeiras fontes de nutrientes utilizadas pelo pintainho ao nascer Desse

modo quanto maior o tempo decorrido entre a eclosatildeo e o iniacutecio da ingestatildeo de

alimento e aacutegua maior a dependecircncia que o pintainho teraacute dessas reservas (Vieira amp

Pophal 2000) a dieta materna eacute a origem dos nutrientes para o embriatildeo (Vieira 2007)

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) afirmam que para matrizes pesadas existe uma pausa nas

pesquisas que visam determinar as exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos Embora os

aminoaacutecidos presentes na gema possam ser suficientes durante o processo de eclosatildeo

apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

desenvolvimento inicial (Otha et al 2004)

Os aminoaacutecidos sinteacuteticos disponiacuteveis no mercado proporcionam o atendimento

das exigecircncias nutricionais das aves principalmente em relaccedilatildeo aos aminoaacutecidos

60

limitantes Dentre esses aminoaacutecidos a arginina (Arg) eacute considerada o quinto

aminoaacutecido limitante para frangos de corte em dietas agrave base de milho e de farelo de

soja apoacutes metionina+cistina lisina treonina e valina (Corzo 2007) Como as aves natildeo

apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem exclusivamente da Arg sinteacutetica

principalmente no periacuteodo inicial de criaccedilatildeo (Allen amp Baker 1972) A suplementaccedilatildeo

da Arg eacute necessaacuteria para a formaccedilatildeo da ornitina a qual estaacute envolvida na siacutentese da

prolina que eacute utilizada para a formaccedilatildeo das poliaminas (espermidina espermina e

putrescina) Estas moleacuteculas estatildeo associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

A Arg aleacutem de serem constituintes de proteiacutenas participa como coadjuvante na

secreccedilatildeo de insulina pelas ceacutelulas β do pacircncreas (Bolea et al 1997) e na secreccedilatildeo do

hormocircnio de crescimento (GH) (Ghigo et al 1994) Os efeitos do GH satildeo mediados

pelos fatores de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Le Roith et al 2001) O

IGF-I eacute conhecido por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo

esqueleacutetico como a proliferaccedilatildeo e diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelite (Florini et al 1996)

e a agregaccedilatildeo de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos sobre a siacutentese e a

degradaccedilatildeo proteica (Duclos et al 1991 Coleman et al 1995 Duclos et al2005)

Outro efeito do GH ocorre em niacutevel do disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de

IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no crescimento dos ossos longos (Isaksson et

al 1987)

O enriquecimento dos ovos das matrizes com Arg bem como sua suplementaccedilatildeo

logo apoacutes a eclosatildeo pode trazer inuacutemeros benefiacutecios sobre o desenvolvimento da

progecircnie jaacute que o GH influenciado pela Arg tem sua siacutentese iniciada na fase

embrionaacuteria da ave (Harvey et al 2001)

Diante do exposto com este estudo objetivou-se testar a influecircncia da

suplementaccedilatildeo com L-Arginina na dieta das matrizes de corte sobre a progecircnie com

dieta suplementada ou natildeo suplementada com L-Arginina sobre o desempenho

paracircmetros oacutesseos e rendimento de carcaccedila dos frangos de corte

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

61

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

no delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina

incluiacutedos na dieta materna variando de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal (0

943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 35

aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada box foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado o

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

em todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as sobras de raccedilatildeo dos boxes foram pesadas para

ajustar o consumo de raccedilatildeo e da conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 2) As

dietas experimentais agrave base de milho e de farelo de soja foram formuladas de acordo

com os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e as recomendaccedilotildees nutricionais

62

propostas por Rostagno et al (2005) As aves controle receberam dieta sem

suplementaccedilatildeo de arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz

sobre o desempenho da progecircnie

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais basais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 017 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 1000 10000 Valores calculados PB () 2000 1850 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

63

Experimento 3 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina digestiacutevel na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes utilizando o delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina e seis repeticcedilotildees

com 32 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal inicial e de crescimento em

substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial corresponderam a 1300

1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela 2) A partir dos 22

dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300 1450 1600

e 1750 de arginina digestiacutevel (Tabela 3) O manejo realizado nesse experimento foi

conduzido conforme descrito no experimento anterior

Desempenho

Para ambos os experimentos com a progecircnie foram avaliados o desempenho

zooteacutecnico (ganho de peso consumo de raccedilatildeo e conversatildeo alimentar) Para avaliaccedilatildeo do

desempenho as raccedilotildees e as aves foram pesadas no iniacutecio do experimento aos 7 21 e 42

dias de idade

Paracircmetros oacutesseos

Os paracircmetros oacutesseos avaliados foram comprimento diacircmetro peso e calculado

o Iacutendice de Seedor Para avaliaccedilatildeo dos paracircmetros oacutesseos em ambos os experimentos

com a progecircnie apoacutes o sacrifiacutecio por meio de atordoamento seguido de sangria foram

coletados os fecircmures e as tiacutebias esquerdas de duas avesrepeticcedilatildeo aos 7 e 21 dias de

idade As amostras ficaram congeladas (-18ordmC) ateacute o iniacutecio das anaacutelises dos paracircmetros

oacutesseos que foram executadas conforme descrito a seguir

Apoacutes o descongelamento dos ossos foram retirados os tecidos envolventes

(tecido muscular aderido) com auxiacutelio de tesouras e pinccedilas Os ossos descongelados

foram pesados em balanccedila analiacutetica (g plusmn 00001) e o comprimento e o diacircmetro (na

64

porccedilatildeo meacutedia do osso) foram medidos usando paquiacutemetro eletrocircnico digital (capacidade

de 0 a 150 mm e resoluccedilatildeo de 001 mm)

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900

Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6456 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl Vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 1300 1450 1600 1750 1900 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

65

A partir do peso do osso e do seu comprimento foi calculado o Iacutendice de Seedor

(Seedor et al 1993) de acordo com a seguinte foacutermula Iacutendice de Seedor = Peso do

osso (mg)comprimento do osso (mm)

Este iacutendice eacute utilizado como indicativo da densidade oacutessea Quanto maior o

Iacutendice de Seedor maior a densidade da peccedila oacutessea e vice-versa

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000

mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

66

Rendimento de carcaccedila

Para determinaccedilatildeo do rendimento de carcaccedila foram utilizadas trecircs aves por

unidade experimental (15 avestratamento) identificadas com anilhas numeradas e

submetidas ao jejum por seis horas atordoadas com eletricidade (220W) e com

posterior sangria no final de cada experimento realizado com a progecircnie

Para caacutelculo do rendimento de carcaccedila foi considerado o peso da carcaccedila

eviscerada quente sem os peacutes cabeccedila e gordura abdominal em relaccedilatildeo ao peso vivo

que foi obtido individualmente antes do abate das aves Para rendimento dos cortes

nobres foi considerado o rendimento do peito inteiro com pele e ossos das pernas

(coxa e sobrecoxa) e das asas que foi calculado em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila

eviscerada

Para caacutelculo da gordura abdominal foi considerada a gordura presente ao redor da

cloaca da bolsa cloacal moela proventriacuteculo e dos muacutesculos abdominais adjacentes foi

retirada conforme descrito por Smith (1993) Em seguida foi pesada e tambeacutem

calculada em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila eviscerada

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

67

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

Resultados e discussatildeo

Os valores meacutedios de desempenho de frangos de corte provenientes de matrizes

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg com dieta suplementada e natildeo suplementada

com Arg estatildeo demonstrados nas Tabelas 5 e 6 respectivamente

No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) os frangos que receberam dietas

suplementadas com Arg apresentaram efeito linear positivo (Plt005) dos niacuteveis

crescentes de suplementaccedilatildeo com Arg sobre o ganho de peso O consumo de raccedilatildeo e a

conversatildeo alimentar foram influenciados de forma quadraacutetica (Plt005) e o niacutevel de

1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649

proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente (Figura 2)

Esses niacuteveis satildeo superiores aos encontrados por Atencio et al (2004) que apresentaram

os niacuteveis de 127 e 128 de Arg digestiacutevel para ganho de peso e conversatildeo

alimentar respectivamente Mendes et al (1997) e Brake et al (1998) observaram

melhor conversatildeo alimentar agrave medida que a Arg foi adicionada agraves dietas dos frangos de

corte

68Tabela 5 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito

0943 1093 1243 1393 1543

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 68749plusmn651 69813plusmn1553 69498plusmn876 71393plusmn2071 71148plusmn1009 466 ns

Consumo de raccedilatildeo g 108937plusmn973 108077plusmn2506 106938plusmn1143 108570plusmn2584 109617plusmn1424 420 ns

Conversatildeo alimentar gg 1585plusmn0015 1548plusmn0006 1539plusmn0014 1523plusmn0023 1541plusmn0004 224 Quadraacutetico1

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 182410plusmn1786 178280plusmn1963 183209plusmn2355 170699plusmn3272 177743plusmn3493 366 ns

Consumo de raccedilatildeo g 339169plusmn2597 332944plusmn4420 334432plusmn4460 328563plusmn5011 335512plusmn4351 311 ns

Conversatildeo alimentar gg 1859plusmn0017 1868plusmn0017 1825plusmn0008 1926plusmn0027 1889plusmn0014 230 ns

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 251160plusmn2118 248093plusmn2721 252708plusmn2327 242092plusmn4528 248891plusmn3614 314 ns

Consumo de raccedilatildeo g 448106plusmn3333 441022plusmn6500 441370plusmn5178 437133plusmn7327 445129plusmn4655 309 ns

Conversatildeo alimentar gg 1784plusmn0013 1777plusmn0011 1746plusmn0005 1807plusmn0021 1789plusmn0008 177 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 15844-0000270801X+0000000325260X2 R2 = 070

69Tabela 6 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito

1300 1450 1600 1750 1900

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 75785plusmn402 77320plusmn1073 78103plusmn635 79648plusmn670 80151plusmn344 212 Linear1

Consumo de raccedilatildeo g 89299plusmn1140 92124plusmn2246 103470plusmn4037 104782plusmn562 96677plusmn1665 557 Quadraacutetico2

Conversatildeo alimentar gg 1179plusmn0007 1192plusmn0031 1326plusmn0055 1316plusmn0012 1207plusmn0026 613 Quadraacutetico3

1150 1300 1450 1600 1750

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 177261plusmn2817 177088plusmn2760 180666plusmn2220 182398plusmn3067 177484plusmn2109 359 ns

Consumo de raccedilatildeo g 358840plusmn5051 353952plusmn5112 356084plusmn2723 358440plusmn6584 354362plusmn2670 322 ns

Conversatildeo alimentar gg 2025plusmn0013 1999plusmn0017 1972plusmn0016 1965plusmn0006 1997plusmn0013 165 Quadraacutetico4

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 253047plusmn2782 254408plusmn3313 258769plusmn2443 262046plusmn3324 257635plusmn2041 269 Linear5

Consumo de raccedilatildeo g 448139plusmn5104 446076plusmn6429 459554plusmn4864 463275plusmn6840 451039plusmn3651 297 ns

Conversatildeo alimentar gg 1771plusmn0009 1754plusmn0015 1777plusmn0022 1768plusmn0005 1751plusmn0012 192 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 759898+00737276X R2 = 081 2 Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=085 3 Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 = 096 4 Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031 5 Y = 253818+0112096X R2 = 017

70

149150151152153154155156157158159

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo A

limen

tar

Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Na progecircnie natildeo suplementada com dieta contendo Arg verificou-se efeito

quadraacutetico (Plt005) da nutriccedilatildeo das matrizes na conversatildeo alimentar (CA) (Figura 1)

sendo que 1359 de Arg dig proporcionou o melhor iacutendice Jaacute o consumo de raccedilatildeo e o

ganho de peso natildeo foram afetados (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo da matriz

O efeito observado da suplementaccedilatildeo com Arg das matrizes na CA de frangos de

corte natildeo suplementados com Arg ser atribuiacuteda ao aumento na concentraccedilatildeo desse

aminoaacutecido na gema a qual eacute responsaacutevel pela nutriccedilatildeo dos pintos durante o seu

desenvolvimento embrionaacuterio e nas primeiras horas de vida poacutes-eclosatildeo Esse aumento

pode ter efeito positivo no desenvolvimento muscular dos pintos uma vez que esse

aminoaacutecido tem accedilatildeo indireta na formaccedilatildeo muscular atraveacutes da siacutentese do hormocircnio de

crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO) Aleacutem disso a Arg ainda estaacute envolvida na

siacutentese da creatina e de poliaminas As poliaminas satildeo consideradas de importacircncia

nutricional no crescimento e desenvolvimento do intestino do neonato (Quinn et al

2002) Segundo Foye et al(2005) o acesso do embriatildeo a nutrientes pode melhorar o

desenvolvimento do sistema digestoacuterio a eclodibilidade e o desempenho dos frangos

Quando o comportamento da curva do consumo de raccedilatildeo dos frangos de corte

que receberam dietas suplementadas com Arg foi analisada verifica-se que apoacutes o

ponto de maior consumo de raccedilatildeo ocorre uma queda na curva (Figura 2) Esse efeito

pode ter sido ocasionado por um desequiliacutebrio dos aminoaacutecidos na dieta afetando

principalmente a relaccedilatildeo LysArg O antagonismo entre esses aminoaacutecidos prejudica a

absorccedilatildeo desses uma vez que ambos competem pelo mesmo siacutetio de absorccedilatildeo

Segundo Fernandes et al (2009) o efeito negativo da suplementaccedilatildeo de Arg

pode estar associado agrave incapacidade funcional dos rins em eliminar o excesso de ureia

formado pela degradaccedilatildeo da Arg Niacuteveis elevados de Arg promovem aumento na

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 070

1359

71

atividade da arginase renal produzindo ornitina e ureia (Stuz et al 1971) Este aumento

pode comprometer a siacutentese de NO visto que a Arg eacute a uacutenica via fisioloacutegica de

produccedilatildeo deste composto Adicionalmente a isso a elevaccedilatildeo da ureia plasmaacutetica de

acordo com Prabhakar et al (1997) pode inibir a accedilatildeo da oacutexido niacutetrico sintetase (NOS)

enzima que cataliza a reaccedilatildeo que converte Arg em NO O NO aleacutem de

neurotransmissor tambeacutem modula a liberaccedilatildeo de outros neurotransmissores (Estrada amp

Murilo-Carretero 2005) cujo envolvimento destas moleacuteculas na regulaccedilatildeo do apetite

vem sendo discutido (Denbow 1999)

750

800

850

900

950

1000

1050

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

sum

o de

raccedilatilde

o (g

)

730

740

750

760

770

780

790

800

810

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Gan

ho d

e pe

so (g

)

105

11

115

12

125

13

135

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo das matrizes com dietas com Arg natildeo afetou as variaacuteveis de

desempenho da progecircnie natildeo suplementada com Arg no periacuteodo de 21 a 42 dias de

idade (Pgt005) Poreacutem quando a progecircnie recebeu dieta com Arg verificou-se efeito

quadraacutetico para conversatildeo alimentar (Plt005) e o melhor resultado foi alcanccedilado com

1669 de Arg (Figura 3)

Sabe-se que a conversatildeo alimentar indica a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo da dieta para

o crescimento e deposiccedilatildeo muscular Assim o crescimento consiste em parte do

resultado da siacutentese proteica e a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo dependem da quantidade de

aminoaacutecidos que estatildeo sendo catabolizados (Sklan amp Noy 2004) Este processo

depende de energia para a biotransformaccedilatildeo e a eliminaccedilatildeo com custo metaboacutelico para

Y = 759898+00737276X R2 = 085

Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 =0 96

Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=081

1690

1649

72

incorporar um aminoaacutecido na cadeia proteica de 4 mol de ATP e de 6 mol de ATPg de

N para eliminaacute-lo (Mc Leoad 1997)

194195196197198199

2201202203204

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo de Arg durante todo o periacuteodo de criaccedilatildeo eacute essencial para que

a ave expresse todo o seu potencial geneacutetico principalmente em relaccedilatildeo ao ganho de

peso Para a progecircnie suplementada no periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade)

observou-se efeito linear positivo (Pgt005) no ganho de peso e para a progecircnie que natildeo

recebeu suplementaccedilatildeo natildeo foi observado efeito(Pgt005) da suplementaccedilatildeo das

matrizes nas variaacuteveis de desempenho (Figura 4)

2500

2520

2540

2560

2580

2600

2620

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Gan

ho d

e Pe

so (g

)

Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

De fato segundo Fernandes et al (2009) a suplementaccedilatildeo de Arg acima das

exigecircncias nas raccedilotildees iniciais (1 a 21 dias) dos frangos melhora o desempenho

produtivo das aves entretanto esse efeito eacute transiente natildeo havendo diferenccedila nestas

caracteriacutesticas na idade de abate

Na fase inicial de criaccedilatildeo a Arg eacute considerada um aminoaacutecido essencial na dieta

das aves visto que o ciclo da ureia natildeo eacute funcional nas aves Assim a incapacidade

desses animais em sintetizar Arg implica na necessidade do fornecimento desse

aminoaacutecido na dieta Aleacutem disso a Arg eacute considerada o quinto aminoaacutecido limitante

Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031

1669

Y = 253818+0112096X R2 = 017

73

para frangos em dietas agrave base de milho e de farelo de soja apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Segundo Ball et al (2007) a exigecircncia de Arg pelas aves eacute a mais alta entre as

espeacutecies de animais estudadas isso porque aleacutem da falta da siacutentese endoacutegena a taxa de

deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento das atuais linhagens de corte eacute muito alta

Os valores meacutedios de desempenho (Tabelas 5 e 6) apresentados durante o

periacuteodo experimental total (1 a 42 dias) satildeo muito proacuteximos Assim foi realizada a

anaacutelise conjunta de ambos os experimentos para confirmar a necessidade ou natildeo de

suplementaccedilatildeo da progecircnie com Arg na dieta No periacuteodo total de 1 a 42 dias (Tabela

7) a CA foi melhor na progecircnie que recebeu dieta suplementada apesar do CR ter sido

superior nessas aves demonstrando assim que a progecircnie suplementada com Arg

converte mais eficientemente a raccedilatildeo em massa muscular

Tabela 7 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg

1 a 21 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 70120plusmn585 108428plusmn789 1547plusmn0007

Progecircnie (suplementada) 78202plusmn406 97271plusmn1456 1243plusmn0018

CV () 473 913 0011 22 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 178468plusmn1380 334124plusmn1877 1874plusmn010

Progecircnie (suplementada) 178979plusmn1160 356346plusmn1981 1992plusmn0007

CV () 1182 1999 0007 1 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 248588plusmn1487 442552plusmn2419b 1781plusmn0006b

Progecircnie (suplementada) 257181plusmn1315 453617plusmn2597a 1764plusmn0006a

CV () 1347 2477 0006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Dentre os paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada

apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis

suplementares de Arg recebidos pelas matrizes (Figura 5)

74

Tabela 8 ndash Meacutedias e erro padratildeo de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito Paracircmetros 0943 1093 1243 1393 1543

de Carcaccedila 6944plusmn025 6863plusmn044 6987plusmn033 6953plusmn028 7009plusmn029 115 Linear1

de Peito 3587plusmn028 3519plusmn017 3662plusmn032 3639plusmn041 3618plusmn042 228 ns

de Coxa 3041plusmn032 3085plusmn019 2970plusmn033 2999plusmn032 3021plusmn022 229 ns

de Asa 1142plusmn016 1129plusmn014 1118plusmn006 1104plusmn020 1110plusmn014 329 ns

de Dorso 2279plusmn020 2352plusmn026 2267plusmn014 2287plusmn030 2262plusmn030 266 ns

de Gordura abdominal 295plusmn015 325plusmn014 292plusmn016 367plusmn019 290plusmn011 1220 ns ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 690720+000146984X R2 = 081 Tabela 9 ndash Meacutedias e erros padratildeo de rendimento da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito Paracircmetros 1150 1300 1450 1600 1750

de Carcaccedila 6993plusmn029 7022plusmn028 7138plusmn033 7128plusmn020 7160plusmn031 099 Linear1

de Peito 3579plusmn030 3584plusmn077 3690plusmn021 3651plusmn028 3698plusmn019 277 Linear2

de Coxa 3126plusmn030 3108plusmn066 3027plusmn025 3026plusmn023 3045plusmn020 295 Linear3

de Asa 1137plusmn022 1123plusmn015 1105plusmn017 1095plusmn015 1096plusmn021 398 Linear4

de Dorso 2272plusmn033 2286plusmn057 2263plusmn028 2273plusmn028 2260plusmn048 436 ns

de Gordura abdominal 314plusmn013 311plusmn013 238plusmn007 279plusmn014 285plusmn007 964 Quadraacutetico5 1 Y = 700017+000293620X R2= 045 2 Y = 357918+000203737X R2 = 027 3 Y = 311542-000163610X R2=021 4 Y = 113323-000072978X R2 = 085 5 Y = 322863-000316200X+000000424975X2R2=030 ns = natildeo significativo

75

686

688

69

692

694

696

698

70

702

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

d

e C

arca

ccedila

Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Al-Murrani (1982) demonstrou que injetando uma mistura de aminoaacutecidos nos

embriotildees em crescimento nos ovos de matrizes de corte resultam em aumento no peso

do pinto e no ganho de peso dos frangos de corte aos 56 dias de idade quando estes

foram comparados com os natildeo tratados De fato o peso do embriatildeo e dos pintos eacute

influenciado pelo perfil nutricional da gema por sua utilizaccedilatildeo pelo pintos apoacutes o

nascimento (Otha et al 1999)

Quando os frangos receberam dietas suplementadas com Arg houve aumento

linear positivo (Plt005) da porcentagem de carcaccedila e de peito poreacutem as porcentagens

de pernas e de asa apresentaram queda linear (Plt005) (Figura 6) Esses efeitos

provavelmente ocorreram pela accedilatildeo indireta da Arg pela formaccedilatildeo muscular atraveacutes da

siacutentese do hormocircnio do crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO)

A Arg eacute constituinte de proteiacutenas e estaacute envolvida na secreccedilatildeo de insulina pelo

pacircncreas (Bolea et al 1997) e do GH pela hipoacutefise (Merimee et al 1969) Os efeitos

desses hormocircnios se manifestam por meio da secreccedilatildeo secundaacuteria dos fatores de

crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Roith et al 2001) O IGF-I eacute conhecido

por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo esqueleacutetico como

a proliferaccedilatildeo e a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelites (Florini et al 1996) e a agregaccedilatildeo

de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos na siacutentese e na degradaccedilatildeo proteica

(Duclos et al 2005)

Outro mecanismo de accedilatildeo da Arg nas fibras musculares estaacute relacionada com agrave

accedilatildeo do oacutexido niacutetrico O NO eacute sintetizado pela oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) a qual eacute

expressada pelas fibras do muacutesculo esqueleacutetico (Reid 2001) A atividade da NOS

variam nos diferentes tipos de muacutesculos sendo que nos muacutesculos de contraccedilatildeo raacutepida

verifica-se maior accedilatildeo desta do que nos muacutesculos de contraccedilatildeo lenta (Reid 2001)

Y = 690720+000146984X R2 = 081

76

Assim o efeito observado nos diferentes cortes provavelmente ocorreu em virtude da

predominacircncia de fibras brancas ou Fast Glycolytic (FG) no peito Em contrapartida os

muacutesculos da coxa sobrecoxa e da asa possuem predominacircncia de fibras vermelhas ou

Slow Oxidative (SO) que satildeo de contraccedilatildeo lenta (Sartori amp Gonzaacuteles 2002) e pouco

afetada pela accedilatildeo da NOS

O teor de gordura abdominal presente na carcaccedila de frangos eacute um dos melhores

indicativos de qualidade da carcaccedila Quando os frangos foram suplementados com

niacuteveis de Arg verificou-se efeito quadraacutetico (Plt005) para essa caracteriacutestica em que o

menor teor de gordura abdominal foi obtido com 1672 de Arg dig (Figura 6) A

queda observada ateacute esse niacutevel pode ser explicada pela accedilatildeo do GH via IGF-I que induz

a siacutentese de proteiacutenas por estimular a captaccedilatildeo de aminoaacutecidos e a transcriccedilatildeo e a

traduccedilatildeo do mRNA em vaacuterios tecidos-alvo Diminui o catabolismo de proteiacutenas por

atuar diretamente na liberaccedilatildeo de aacutecidos graxos do tecido adiposo aumentando a sua

conversatildeo em acetil-CoA fonte de energia para os tecidos perifeacutericos A partir desse

ponto onde verifica-se o menor acuacutemulo de gordura ocorre novamente o aumento na

deposiccedilatildeo de gordura abdominal Isso provavelmente se deve ao excesso de aminoaacutecido

na dieta A degradaccedilatildeo desse excesso leva a excreccedilatildeo de nitrogecircnio na urina na forma

de amocircnia e a produccedilatildeo de moleacuteculas com esqueleto carbocircnico que satildeo usadas na

gliconeogecircnese e na lipogecircnese

Segundo Shutte amp Pack (1995) e Leclerq (1998) a suplementaccedilatildeo e o

balanceamento dos aminoaacutecidos das dietas podem promover aumento no ganho de

carcaccedila principalmente em relaccedilatildeo ao peito (Pophal et al 2004) e reduccedilatildeo de gordura

abdominal (Vieira et al 2004)

Mendes et al (1997) verificaram que o aumento da relaccedilatildeo ArgLys melhorou o

rendimento de carcaccedila e reduziu a gordura abdominal em frangos de corte Costa et al

(2001) observaram que agrave medida em que se aumentou a relaccedilatildeo ArgLys houve efeito

linear crescente para o rendimento de perna e decrescente para a gordura abdominal Jaacute

Fernandes et al (2009) natildeo observaram efeito da suplementaccedilatildeo de Arg nas variaacuteveis de

rendimento de carcaccedila analisadas o que provavelmente ocorreu porque diferentemente

do presente trabalho a suplementaccedilatildeo de Arg foi realizada apenas na fase inicial de

criaccedilatildeo (1 a 21 dias de idade)

77

69

695

70

705

71

715

72

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

arca

ccedila

35352354356358

36362364366368

37372

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

P

eito

296298

30302304306308

31312314

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

oxa

106

107

108

109

11

111

112

113

114

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

A

sa

2

22

24

26

28

3

32

34

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

G

ordu

ra a

bdom

inal

Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Outra possibilidade eacute que essas caracteriacutesticas de rendimento de carcaccedila foram

influenciadas pelos niacuteveis dieteacuteticos de Arg que estatildeo acima da exigecircncia das aves

Resultado contraacuterio foi obtido por Atencio et al (2004) que trabalhando com niacuteveis

crescentes de Arg natildeo verificaram efeito no rendimento de carcaccedila e de cortes

avaliados e estes concluiacuteram que os niacuteveis estudados estavam dentro da exigecircncia das

aves

Na anaacutelise conjunta do rendimento de carcaccedila dos experimentos da progecircnie

que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg (Tabela 10) demonstrou-se que a

presenccedila de Arg na dieta promove maior deposiccedilatildeo muscular na coxa e menor acuacutemulo

de gordura abdominal na carcaccedila

Y = 322863-000316200X+000000424975X2 R2 = 030

1672

Y = 700017+000293620X R2 = 045 Y = 357918+000203737X R2 = 027

Y = 113323-000072978X R2 = 085 Y = 311542-000163610X R2 = 021

Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

78

Tabela 10 ndash Meacutedias de percentagem de carcaccedila (CARC) percentagem de peito (PEITO) percentagem de coxa (COXA) percentagem de asa (ASA) percentagem de gordura abdominal (GORDURA) das progecircnies suplementadas ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

CARC PEITO COXA ASA GORDURAProgecircnie

(ssuplementaccedilatildeo) 6951plusmn016 3605plusmn017 3023plusmn014b 1121plusmn007 307plusmn007ordf

Progecircnie (suplementada) 7088plusmn017 3640plusmn020 3066plusmn017ordf 1111plusmn008 285plusmn007b

CV () 014 017 015 007 006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Com relaccedilatildeo aos paracircmetros oacutesseos dos frangos de corte que receberam dietas

sem suplementaccedilatildeo de Arg (Tabela 11) apenas o diacircmetro de tiacutebia aos sete dias de

idade foi afetado de forma quadraacutetica (Plt005) pela suplementaccedilatildeo das matrizes a

partir do niacutevel 1196 de Arg (Figura 7) demonstrando assim que inclusotildees de Arg

acima da exigecircncia promove a melhora dessa caracteriacutestica Segundo Wu amp Morris

(1998) a suplementaccedilatildeo de Arg em niacuteveis elevados promove aumento na atividade da

arginase renal eleva os niacuteveis de ornitina que participa da biossiacutentese das poliaminas

envolvidas no processo de multiplicaccedilatildeo celular melhorando desta forma o suporte

oacutesseo Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram aumento na concentraccedilatildeo

plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez secretado pela

hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio receptor e

indiretamente via IGF-I e II nos tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos

do GH ocorre no disco epifisaacuterio em que atua estimulando a siacutentese de IGF-I o qual

atua paracrinamente induzindo mitogecircnese o que resulta no crescimento dos ossos

longos (Isaksson et al 1987)

Para os paracircmetros morfoloacutegicos dos ossos dos frangos que receberam dietas

contendo suplementaccedilatildeo de Arg verifica-se efeito linear crescente (Plt005) dos niacuteveis

de arginina para o comprimento e diacircmetro do fecircmur e da tiacutebia O mesmo

comportamento foi observado para o iacutendice de Seedor medida indireta da densidade

oacutessea para ambos os ossos aos 7 dias de idade (Figura 8)

79

Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Fecircmur Tiacutebia Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arg na dieta materna

()

7 dias

0943 2930plusmn034 286plusmn008 2803plusmn027 4154plusmn047 271plusmn005 2925plusmn078 1093 2929plusmn042 293plusmn008 2990plusmn123 4162plusmn062 265plusmn005 2945plusmn096 1243 2911plusmn031 283plusmn008 2603plusmn078 4175plusmn042 258plusmn004 2733plusmn063 1393 2912plusmn046 295plusmn008 2920plusmn086 4172plusmn062 273plusmn003 3008plusmn117 1543 2983plusmn031 293plusmn009 2877plusmn068 4269plusmn039 275plusmn002 2897plusmn038

CV 313 690 712 306 377 701 Regressatildeo ns ns ns Ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- ----- ----- 081 -----

21 dias

0943 5001plusmn056 594plusmn019 10198plusmn294 7128plusmn141 526plusmn012 9621plusmn202 1093 5064plusmn036 632plusmn015 10928plusmn175 7197plusmn086 576plusmn008 10720plusmn182 1243 4937plusmn065 574plusmn013 9956plusmn396 6911plusmn094 514plusmn023 9899plusmn357 1393 5002plusmn062 569plusmn011 9822plusmn346 6912plusmn123 512plusmn009 9537plusmn341 1543 5035plusmn026 613plusmn020 11288plusmn337 7005plusmn135 535plusmn011 10928plusmn339

CV 252 657 747 411 635 711 Regressatildeo ns ns ns Ns ns ns R2 ----- ----- ----- ----- ----- -----

ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

80

Tabela 12 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Paracircmetros oacutesseos Fecircmur Tiacutebia

Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arginina () 7 dias 1300 3007plusmn042 309plusmn011 3194plusmn102 4260plusmn041 285plusmn012 3164plusmn122 1450 3022plusmn036 313plusmn007 3333plusmn098 4311plusmn055 293plusmn008 3202plusmn087 1600 3074plusmn023 321plusmn007 3435plusmn102 4352plusmn024 292plusmn004 3405plusmn101 1750 3098plusmn011 322plusmn007 3348plusmn089 4324plusmn044 293plusmn003 3315plusmn114 1900 3058plusmn015 322plusmn012 3540plusmn140 4350plusmn019 305plusmn005 3503plusmn108 CV 225 712 781 220 608 789 Regressatildeo Linear1 ns Linear2 Ns Linear3 Linear4 R2 023 ----- 020 ----- 030 045

21 dias 1300 1300 1450 1600 1750 553plusmn016 9974plusmn408 1450 5032plusmn031 595plusmn015 9973plusmn343 7122plusmn058 533plusmn019 9675plusmn313 1600 5062plusmn068 614plusmn009 10623plusmn306 7102plusmn041 566plusmn015 10453plusmn286 1750 5134plusmn043 597plusmn013 10024plusmn226 7341plusmn180 548plusmn007 9577plusmn168 1900 5111plusmn044 615plusmn013 10942plusmn185 7145plusmn064 562plusmn008 10751plusmn333 CV 231 567 732 333 619 757 Regressatildeo ns ns Linear5 Ns ns ns R2 ----- ----- 030 ----- ---- -----

NS = natildeo significativo 1 Y = 301662+000117500X 2 Y = 322856+000471280X 3 Y = 285333+0000799183X 4 Y = 315921+000526700X 5 Y = 983310+00149518X

255

26

265

27

275

28

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Diacirc

met

ro d

a Tiacute

bia

(mm

)

Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados encontrados para essa idade estatildeo de acordo com os encontrados

por Fernandes (2007) que encontrou efeito linear crescente para o iacutendice de Seedor

quando as aves foram alimentadas com Arg na dieta Aos 21 dias de idade apenas o

iacutendice de Seedor foi afetado de forma linear (Plt005) crescente com o aumento dos

niacuteveis de Arg (Figura 9) O comportamento positivo da suplementaccedilatildeo de arginina sobre

a morfologia do fecircmur e da tiacutebia pressupotildee melhor densidade desses ossos Segundo

Sekine et al (1994) os aminoaacutecidos no o crescimento transverso do osso e essa accedilatildeo

facilita a formaccedilatildeo da matriz e a calcificaccedilatildeo oacutessea

Aleacutem da accedilatildeo da Arg sobre os ossos indiretamente via IGF-I esta tambeacutem eacute

conhecida como precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo pelo qual ela poderia exercer os

seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo Hukkanem et al (1999) sugerem que o

NO pode participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento

298

30

302

304

306

308

31

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Com

prim

ento

- Fecirc

mur

(mm

)

30531

31532

32533

33534

34535

355

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - F

ecircmur

Y = 301662+000117500X R2 = 023 Y = 322856+000471280X R2 = 020

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

Arginina dig ()

82

26

27

28

29

3

31

32

33

34

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Diacirc

met

ro -

Tiacutebi

a (m

m)

30305

31315

32325

33335

34345

35

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - T

iacutebia

Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada ou natildeo com Arg avaliados em

conjunto mostraram que a suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg melhorou o comprimento do

fecircmur e a espessura da tiacutebia Este resultado pode contribuir para melhorar a qualidade

dos ossos dos frangos uma vez que esse eacute um dos maiores problemas enfrentados na

atualidade na avicultura comercial

Tabela 13 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

FC (mm)

FE (mm) FSEE TC

(mm) TE

(mm) TSEE

7 dias Progecircnie

(ssuplementaccedilatildeo)

2933plusmn016

290plusmn003

2838plusmn042

4186plusmn023

268plusmn002

2902plusmn038

Progecircnie (suplementada)

3052plusmn013

317plusmn004

3369plusmn049

4319plusmn017

293plusmn003

3317plusmn050

CV () 014 004 042 021 0026 043 21 dias

Progecircnie (ssuplementaccedil

atildeo)

5008plusmn023b

596plusmn008

10438plusmn170

7031plusmn053

533plusmn007b

10141plusmn162

Progecircnie (suplementada)

5079plusmn021ordf

607plusmn006

10282plusmn150

7157plusmn044

552plusmn006ordf

10086plusmn154

CV () 016 007 140 048 006 136 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Y = 315921+000526700X R2 = 045 Y = 285333+0000799183X R2 = 030

83

96597

97598

98599

995100

1005101

1015102

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig

Iacutendi

ce d

e Se

edor

- Fecirc

mur

Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade

Conclusatildeo

De acordo com os resultados observados conclui-se que os niacuteveis dieteacuteticos de

Arg na dieta das matrizes de corte foram suficientes para melhorar o desempenho da

progecircnie somente na fase inicial de crescimento (1-21 dias de idade) Quando a dieta da

progecircnie tambeacutem foi suplementada com Arg os paracircmetros de desempenho

rendimento de carcaccedila e qualidade oacutessea satildeo melhorados em ambas as fases de criaccedilatildeo

(1-21 dias e 22 a 42 dias de idade) com melhorias imprescindiacuteveis para a qualidade de

carne como a reduccedilatildeo da gordura abdominal

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V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos sete dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavra-chave arginina ELISA fitohemaglutinina sistema imune

V - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

humoral and cellular immunity response of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level being considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses

Key words arginine ELISA phytohemagglutinin immune system

91

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo da matriz afeta o desempenho dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias de

vida portanto a necessidade da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos O sistema imune das aves difere dos mamiacuteferos em algumas

caracteriacutesticas particularmente nos aspectos de estrutura e de diferenciaccedilatildeo dos oacutergatildeos

linfoides (Jeurissen et al 1994) cujo desenvolvimento se inicia durante a vida

embrionaacuteria e se prolonga apoacutes a eclosatildeo ou nascimento

As uacuteltimas horas de incubaccedilatildeo e os primeiros dias de vida poacutes-eclosatildeo satildeo

fundamentais para que este desenvolvimento se complete Somente apoacutes a segunda

semana de vida a ave seraacute capaz de produzir suas proacuteprias imunoglobulinas Ateacute laacute a

imunidade herdada da matildee pela absorccedilatildeo das imunoglobulinas presentes no ovo eacute o

uacutenico mecanismo de defesa do neonato contra as agressotildees do meio externo apoacutes a

eclosatildeo (Maiorka et al 2006)

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas A arginina (Arg) eacute

considerada um aminoaacutecido essencial para aves sobretudo na fase inicial por que o

ciclo bioquiacutemico da ureia natildeo eacute funcional em aves Assim estas natildeo podem sintetizar

Arg e satildeo portanto dependentes do fornecimento deste aminoaacutecido nas dietas Dentre

as espeacutecies animais estudadas as aves tecircm a mais alta exigecircncia de Arg (Ball et al

2007) que se deve tambeacutem agrave alta taxa de deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento

das atuais linhagens de corte e o antagonismo com a Lys

A Arg eacute necessaacuteria para siacutentese de vaacuterias compostos tais como ornitina

poliaminas prolina creatina de proteiacutenas oacutexido niacutetrico (NO) e citrulina aleacutem de

92

glutamato e agmatina em mamiacuteferos A Arg eacute tambeacutem considerada um potente

secretagogo aumentando a liberaccedilatildeo na corrente sanguiacutenea da insulina hormocircnio do

crescimento (GH) e fator de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I) (Newsholme et

al 2005) Esta accedilatildeo eacute em consequecircncia da raacutepida despolarizaccedilatildeo da membrana

plasmaacutetica ligada ao transporte de aminoaacutecidos com a cadeia lateral positiva

De acordo com Le Flocrsquoh et al (2004) os animais estimulados

imunologicamente podem ter suas necessidades de Arg aumentadas Duas rotas do

metabolismo da Arg satildeo identificadas e conhecidas por ter efeitos imunomodulatoacuterios

diretos A primeira na qual a Arg eacute convertida a ornitina gerando poliaminas que tecircm

papel chave na divisatildeo celular siacutentese de DNA e regulaccedilatildeo do ciclo celular A segunda

corresponde agrave siacutentese do NO induzida por vaacuterios de estiacutemulos inflamatoacuterios como as

endotoxinas bacterianas e as citocinas Essa rota eacute essencial para a atividade citotoacutexica

de macroacutefagos O NO tambeacutem estimula a vasodilataccedilatildeo local e favorece ainda a

reparaccedilatildeo tecidual (Bredt amp Snyder 1994)

Com este trabalho objetivou-se avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina na

dieta das matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie

suplementadas ou natildeo

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

93

dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

em um delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-

Arginina incluiacutedos na dieta materna (0 150 300 450 e 600 mgkg da dieta materna)

que equivaleram aos niacuteveis de 0 9431093 12431393 e 1 543 de Arg

digestiacutevel com seis repeticcedilotildees com 35 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo estes substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada boxe foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado um

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

durante todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as aves e as sobras de raccedilatildeo do boxe foram pesadas

ao mesmo tempo para ajustar o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 1) As

dietas experimentais agrave base de milho e farelo de soja foram formuladas de acordo com

os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e recomendaccedilotildees nutricionais de

Rostagno et al (2005) As aves receberam uma uacutenica raccedilatildeo sem suplementaccedilatildeo de

arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz sobre o desempenho

da progecircnie

94

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 018 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 18500 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

95

Experimento 2 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes atraveacutes de um delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na

dieta materna de 0 a 600 mgkg da dieta de Arg digestiacutevel acima da recomendaccedilatildeo dos

frangos de corte e seis repeticcedilotildees com 32 aves cada totalizando 30 unidades

experimentais

O manejo realizado nesse experimento foi conduzido conforme descrito no

experimento anterior com diferenccedila com relaccedilatildeo ao tipo de dieta utilizada

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg da dieta acima da exigecircncia dos frangos de corte agrave raccedilatildeo

basal inicial em substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial

corresponderam a 1300 1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela

2) A partir dos 22 dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300

1450 1600 e 1750 de Arg digestiacutevel (Tabela 3)

96

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900 Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6457 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 130 145 160 175 190 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

97

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 075 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 1000 1000 1000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI

VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

Colheita de Sangue e Anaacutelise de Tiacutetulos vacinais

No 7ordm dia de vida antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm foram coletadas

amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo As aves foram vacinadas contra a

doenccedila de New Castle (Fort-Dodgereg) via ocular na dose de 003 mL por ave aos sete e

21 dias de idade A venopunccedilatildeo foi realizada mediante contenccedilatildeo fiacutesica manual dos

98

animais preferencialmente na veia jugular direita com seringa de 3 mL e agulha 13x45

e uma quantia de sangue coletada em torno de 1 do peso corporal dos animais O

sangue foi acondicionado em tubos de vidro identificados sem anticoagulante para

obtenccedilatildeo de soro sanguiacuteneo No soro foi avaliada a titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais

contra o viacuterus de Doenccedila Newcastle pelo teste imunoenzimaacutetico (ELISA-teste) As

anaacutelises foram processadas em kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent

Assay) do Laboratoacuterio Idexxreg e os dados obtidos foram expressos em absorbacircncia Os

dados de titulaccedilatildeo de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Anaacutelise Histomorfomeacutetrica

No 7ordm e 21ordm dia de idade o timo a bolsa cloacal o baccedilo e o fiacutegado de duas aves

por repeticcedilatildeo foram coletados totalizando doze aves por tratamento Para a realizaccedilatildeo

dessa coleta as aves foram submetidas ao atordoamento por choque e posterior sangria

Apoacutes o sacrifiacutecio as aves foram pesadas individualmente e as carcaccedilas dessecadas para

remoccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides (Timo Baccedilo e Bolsa de Fabricius) O peso dos oacutergatildeos

linfoides foi obtido imediatamente apoacutes a dessecaccedilatildeo e remoccedilatildeo dos tecidos exoacutegenos

Os oacutergatildeos coletados foram pesados em balanccedila de precisatildeo e o peso da ave foi

devidamente anotado

O peso relativo de cada oacutergatildeo foi obtido pela foacutermula

Peso relativo = (peso oacutergatildeopeso vivo) x 100

Para a medida histomorfomeacutetrica dos foliacuteculos linfoides as bolsas cloacais e o

fiacutegado foram acondicionadas em frascos contendo soluccedilatildeo de formol tamponado a 10

(De Tolosa et al 2003) com finalidade de manter a integridade dos tecidos apoacutes a

morte preservando a arquitetura celular As peccedilas foram incluiacutedas em parafina e levadas

ao microacutetomo rotativo para a realizaccedilatildeo dos cortes transversais no centro do oacutergatildeo com

sete microcircmetros de espessura e corados pelo meacutetodo da hematoxilina e eosina (HE) As

lacircminas foram escaneadas usando-se um ldquoscaner HP ScanJet II v25rdquo sendo o

ldquosoftwarerdquo utilizado para o tratamento das imagens o ldquoPaint Shop Pro v50rdquo A

imagem foi digitalizada brilho (variaacutevel entre 125 e 145) contraste 185 e escala de

800 As imagens foram gravadas com extensatildeo jpg e levadas ao analisador de

imagens Para a leitura das imagens foi utilizado um analisador de imagem

computadorizado IMAGE PROPLUS 52 da Miacutedia Cibertecnics Foi mensurada a

altura de trecircs dobras do tecido linfoide de cada repeticcedilatildeo (12 aves por tratamento) e

destes valores foi obtida a meacutedia

99

Nas amostras de fiacutegado foi analisada a presenccedila de aglomerados linfoides As

lacircminas com porccedilotildees do fiacutegado foram analisadas em toda sua extensatildeo e os

aglomerados linfoides foram quantificados atraveacutes de microscopia de luz com aumento

de 10X (Olympus BH2 Olympus America INC NY USA)

Fitohemaglutinina (PHA)

Aos 35 dias de idade duas aves por repeticcedilatildeo totalizando 12 aves por tratamento

foram marcadas com anilhas numeradas e utilizadas para avaliar a imunidade mediada

por ceacutelulas in vivo (Corrier amp DeLoach 1990) Cada ave foi inoculada

intradermicamente no espaccedilo interdigital entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata direita com 01

mL de uma soluccedilatildeo fitohemaglutinina PHA-Mreg (1057601 - Invitrogen) Como controle

negativo 01 mL de soro fisioloacutegico esteacuteril foi inoculado entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata

esquerda O espessamento da pele de ambas as patas foi aferido em miliacutemetros

utilizando-se um paquiacutemetro digital antes da inoculaccedilatildeo e apoacutes trecircs seis 12 e 24 horas

apoacutes a inoculaccedilatildeo O caacutelculo (Corrier amp DeLoach 1990) apresentou-se da seguinte

forma Reaccedilatildeo = resposta a fitohemaglutinina ndash resposta do controle na qual a resposta

a fitohemaglutinina eacute medida pela espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo menos

a espessura no tempo zero (antes da inoculaccedilatildeo) A resposta do controle eacute medida pela

espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo (Soro) menos a espessura no tempo zero

(antes da inoculaccedilatildeo)

Avaliaccedilatildeo da Atividade Fagociacutetica de Macroacutefagos

Para avaliaccedilatildeo da atividade fagociacutetica de macroacutefagos foram utilizadas duas aves

por repeticcedilatildeo totalizando quatro aves por tratamento As aves foram inoculadas no 35ordm

dia de vida atraveacutes de injeccedilatildeo intra-abdominal de Sephadex G-50reg (Sigma) a 3 (10

mL100g de peso vivo) (Qureshi et al 1986 Gore amp Qureshi 1997 Konjufca 2004)

Utilizaram-se para esse procedimento cateteres intravasculares G-14 Apoacutes 42

horas as aves foram submetidas a atordoamento por eletronarcose e sacrificadas atraveacutes

de desligamento cervical Foram lavadas (detergente neutro) e sanitizadas (aacutelcool 70)

As aves foram transportadas ao laboratoacuterio onde se procedeu a abertura da cavidade

abdominal que foi posteriormente lavada com 20 mL de soluccedilatildeo de PBS esteacuteril

heparinizada contendo 05 UIL (Liqueminereg 25000 UI5mL ndash Roche)

Coletaram-se aproximadamente 15 mL de liacutequido abdominal com auxiacutelio de

pipetas Pasteur que foi imediatamente acondicionado em tubos Falcon em banho de

100

gelo O material foi centrifugado a 1500 rpm10 minutos sendo o ldquopelletrdquo

ressuspendido em 2 mL de meio RPMI 1640reg (Sigma) Adicionou-se 150 μL dessa

suspensatildeo a cada well da placa de cultura (24 poccedilos) contendo lamiacutenula de 13 mm de

diacircmetro Incubou-se a temperatura ambiente por uma hora Lavou-se a placa com PBS

esteacuteril gelado para remover as ceacutelulas natildeo aderentes Em seguida adicionou-se 150 μL

de suspensatildeo a 3 de eritroacutecitos de carneiros em meio RPMI 1640reg (Sigma)

incubando-se em temperatura ambiente em concentraccedilatildeo de 5 de gaacutes carbocircnico por

uma hora Lavou-se com PBS esteacuteril gelado para remover os eritroacutecitos que natildeo

aderiram Em seguida realizou-se a coloraccedilatildeo utilizando-se kit comercial (Panoacutetico

Raacutepido LBreg - Laborclin)

Apoacutes 24 horas as lacircminas foram montadas utilizando-se Permountreg Foram

contados em cada lamiacutenula 300 macroacutefagos e verificado o nuacutemero destas ceacutelulas que

continham hemaacuteceas fagocitadas A atividade fagociacutetica foi calculada considerando-se o

nuacutemero de macroacutefagos contendo hemaacuteceas fagocitadas dividido pelo nuacutemero total de

macroacutefagos contados

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

101

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Resultados e Discussatildeo

Os dados meacutedios dos pesos relativos de oacutergatildeos linfoides de frangos de corte

alimentados com dietas natildeo suplementadas estatildeo na Tabela 5 A suplementaccedilatildeo das

matrizes de corte natildeo influenciou o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie

natildeo suplementada com Arg (Pgt005) Da mesma maneira quando houve a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg para a progecircnie tambeacutem natildeo foi verificado (Pgt005)

efeito sobre o peso relativo dos oacutergatildeos linfoides dessas aves (Tabela 6)

102

Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg das Matrizes () 7 dias 21 dias

0943 058plusmn003 054plusmn004 1093 055plusmn003 056plusmn005 1243 056plusmn003 057plusmn003 1393 052plusmn004 057plusmn004 1543 052plusmn003 051plusmn005 CV 1410 1840

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

0943 006plusmn0005 011plusmn001 1093 008plusmn0007 011plusmn001 1243 012plusmn0036 009plusmn001 1393 007plusmn0007 010plusmn001 1543 009plusmn0007 010plusmn001 CV 4968 2463

Regressatildeo ns ns Baccedilo()

0943 015plusmn001 024plusmn001 1093 017plusmn001 022plusmn002 1243 016plusmn001 021plusmn001 1393 015plusmn001 022plusmn003 1543 013plusmn001 021plusmn001 CV 1885 1868

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

O timo e a bolsa cloacal satildeo oacutergatildeos linfoides primaacuterios que representam siacutetios

de maturaccedilatildeo de linfoacutecitos T e B respectivamente Estes oacutergatildeos tecircm fundamental

importacircncia no periacuteodo poacutes-eclosatildeo poreacutem agrave medida que as aves se desenvolvem e se

aproximam da maturidade sexual sofrem involuccedilatildeo fisioloacutegica (Morgullis 2002)

No contexto do desenvolvimento e maturaccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides trabalhos

desenvolvidos com mamiacuteferos demonstram que as respostas imunes podem ser

influenciadas pela Arg dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al 1998 Lewis amp

Langkamp-Henken 2000) Experimentos desenvolvidos com animais jovens

demonstraram efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina como o aumento

do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos tiacutemicos Os efeitos

imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais estressados ou

imunossupremidos

103

Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias

1300 053plusmn005 056plusmn004 1450 057plusmn004 057plusmn003 1600 059plusmn004 059plusmn003 1750 051plusmn003 048plusmn005 1900 058plusmn004 053plusmn004 CV 1910 1790

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

1300 016plusmn0011 025plusmn002 1450 015plusmn0012 020plusmn001 1600 018plusmn0007 022plusmn002 1750 019plusmn0016 026plusmn003 1900 015plusmn0007 023plusmn001 CV 1621 2021

Regressatildeo ns ns Baccedilo ()

1300 007plusmn0009 008plusmn001 1450 009plusmn0008 010plusmn001 1600 008plusmn0006 009plusmn001 1750 008plusmn0005 011plusmn001 1900 007plusmn0007 010plusmn001 CV 2227 2151

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

Para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de Arg foram

observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

nutricionais estabelecidas Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de

Arg plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular (Kidd 2004)

Ao contraacuterio dos resultados observados nesse experimento Jahanian (2009)

observou que animais na fase inicial com dietas suplementadas com Arg e com baixo

niacutevel proteico apresentaram aumento do peso relativo do timo indicando assim que a

Arg eacute necessaacuteria para a resposta oacutetima da imunidade celular

Quando se contrastam os dados do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (Tabela 7)

verificou-se a influencia da suplementaccedilatildeo de Arg no peso da bolsa cloacal (Plt005) no

periacuteodo inicial de criaccedilatildeo Esse aumento eacute de grande importacircncia uma vez que a bolsa

cloacal eacute o principal siacutetio de maturaccedilatildeo dos linfoacutecitos B que satildeo essenciais ao sistema

imune das aves Na fase de 1 a 7 dias de idade esse incremento pode refletir a melhoria

104

das condiccedilotildees imunitaacuterias jaacute que nesse periacuteodo os desafios sanitaacuterios podem

comprometer todo desempenho dessa ave ateacute o final de sua criaccedilatildeo

Tabela 7 ndash Meacutedias e erro padratildeo do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

7 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada) 054plusmn001 015plusmn0005b 0085plusmn0008

Progecircnie (suplementada) 056plusmn002 017plusmn0006ordf 0079plusmn0003

CV () 002 0005 0006 21 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada)

055plusmn001 022plusmn0007 011plusmn0005

Progecircnie (suplementada)

054plusmn002 023plusmn0009 009plusmn0004

CV () 002 008 0004 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

A anaacutelise histomorfomeacutetrica do fiacutegado natildeo mostrou influecircncia (Pgt005) das

dietas das matrizes nos aglomerados linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo (Tabela

8) Da mesma maneira as dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal natildeo foram

influenciadas (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo ou natildeo de Arg na dieta (Tabela 8)

Existe relaccedilatildeo direta entre o fiacutegado e a bolsa cloacal Nas aves os linfoacutecitos B

responsaacuteveis pela produccedilatildeo de anticorpos envolvidos na resposta imunoloacutegica humoral

satildeo produzidos no fiacutegado do embriatildeo no saco viteliacutenico e na medula oacutessea na fase

inicial da incubaccedilatildeo Apoacutes isso migram para a bolsa cloacal e sofrem amadurecimento

e diferenciaccedilatildeo por ateacute dez semanas Daiacute partem para colonizar outros oacutergatildeos como o

baccedilo e a glacircndula de Harder (Butcher amp Miles 2003) A bolsa cloacal eacute constituiacuteda de

linfoacutecitos incrustados em tecido epitelial cujas dobras se estendem no interior do

luacutemen onde se espalham os foliacuteculos linfoides Seus foliacuteculos contecircm mais de 90 de

ceacutelulas B (Tizard 1998)

105

Tabela 8 - Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg

Aglomerados Linfoacuteides Comprimento das dobras Progecircnie natildeo Suplementada Progecircnie natildeo Suplementada

Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 0943 105plusmn010 196plusmn041 1443plusmn097 3247plusmn198 1093 098plusmn028 137plusmn021 1394plusmn225 3066plusmn240 1243 077plusmn004 178plusmn029 1503plusmn060 3042plusmn109 1393 080plusmn015 170plusmn043 1449plusmn068 3112plusmn187 1543 096plusmn018 232plusmn037 1464plusmn149 3222plusmn195 CV() 4398 4708 563 915 Regressatildeo ns ns ns ns Progecircnie Suplementada Progecircnie Suplementada 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 1300 076plusmn010 168plusmn035 1936plusmn206 3535plusmn191 1450 049plusmn015 216plusmn041 1865plusmn022 4027plusmn1244 1600 072plusmn024 189plusmn022 2035plusmn064 3331plusmn036 1750 053plusmn005 192plusmn036 2195plusmn139 4487plusmn1540 1900 053plusmn012 213plusmn025 1905plusmn128 2562plusmn111 CV() 5807 4141 473 5359 Regressatildeo ns ns ns ns

Assim a progecircnie que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg natildeo

apresentou produccedilatildeo de linfoacutecitos B aumentada nem a aacuterea de desenvolvimento e

diferenciaccedilatildeo dos linfoacutecitos B prejudicada ou melhorada pela Arg (Pgt005)

Na Tabela 9 estatildeo agraves meacutedias obtidas da resposta imune celular da progecircnie com

dieta suplementada medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) para estiacutemulo de

proliferaccedilatildeo celular Dentro desse contexto observou-se que 12 horas apoacutes a injeccedilatildeo de

PHA foi possiacutevel verificar efeito quadraacutetico com aumento (Plt005) na resposta celular

das aves alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg em que a maior

resposta foi obtida com 1574 de Arg dig (Figura 1)

Segundo Corrier amp DeLoach (1990) a aplicaccedilatildeo desse teste permite a raacutepida

avaliaccedilatildeo da competecircncia imunoloacutegica celular Os basoacutefilos ceacutelulas comumente

associadas a esses processos apresentam heparina e proteases na composiccedilatildeo de seus

gracircnulos agindo intensamente nos processos de hipersensibilidade Aleacutem disso

produzem citocinas cuja participaccedilatildeo estaacute ligada aos processos inflamatoacuterios (Abbas et

al 2007)

106

Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Arginina 3 horas 6 horas 12 horas 24 horas

1300 1010plusmn0062 0793plusmn0041 0549plusmn0097 0506plusmn0036 1450 0853plusmn0077 0639plusmn0065 0631plusmn0051 0450plusmn0133 1600 0918plusmn0053 0738plusmn0040 0702plusmn0052 0543plusmn0065 1750 0797plusmn0074 0783plusmn0058 0597plusmn0061 0552plusmn0066 1900 0933plusmn0044 0777plusmn0038 0499plusmn0059 0453plusmn0062 CV 1715 1630 2724 3875 Regresatildeo ns ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- 093 -----

ns = Natildeo significativo 1 Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2 R2 = 093

Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Quando se avaliou a atividade fagociacutetica dos macroacutefagos da progecircnie

suplementada e natildeo suplementada verificou-se que os niacuteveis crescentes de Arg na dieta

natildeo afetaram (Pgt005) essa funccedilatildeo (Tabela 10) Os macroacutefagos satildeo ceacutelulas do sistema

mononuclear fagocitaacuterio (McCorkle 1998) integrantes da imunidade inata das aves

importantes tambeacutem para a imunidade adaptativa (Abbas et al 2008) atuando nos

processos de defesa do organismo destruindo agentes estranhos e tambeacutem secretando

citocinas que atuam no processo inflamatoacuterio As principais funccedilotildees executadas por essa

ceacutelula satildeo a fagocitose destruiccedilatildeo de bacteacuterias (Qureshi et al 1986) secreccedilatildeo de

prostaglandinas e citocinas e apresentaccedilatildeo de antiacutegeno para desenvolvimento da

resposta imune celular (Abbas et al 2008)

Segundo Johaniam (2009) satildeo identificadas duas vias de accedilatildeo

imunomodulatoacuteria da Arg in vivo A primeira ocorre atraveacutes da accedilatildeo da arginase que

converte a Arg em ureia e ornitina Neste processo ocorre a produccedilatildeo de poliaminas

pela accedilatildeo da ornitina decarboxilase Esta rota da siacutentese de poliaminas pode ser o

Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2R2 = 093

1574

107

caminho pelo qual a Arg aumenta a mitogecircnese dos linfoacutecitos (Klein amp Morris 1978)

A segunda via ocorre pela siacutentese de NO a partir da a partir da Arg pela accedilatildeo do oacutexido

niacutetrico sintetase resultando na formaccedilatildeo de oacutexido niacutetrico e citrulina Essa rota eacute

essencial para atividade citotoacutexica dos macroacutefagos

Tabela 10 ndash Meacutedias e erros padrotildees da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Macroacutefagos com eritroacutecitosmacroacutefagos contados Arginina Progecircnie Suplementada

1300 1570plusmn529 1450 2030plusmn480 1600 1650plusmn359 1750 2150plusmn500 1900 1830plusmn250 CV 545 Regresatildeo ns ns = Natildeo significativo

Quando avaliados os tiacutetulos de anticorpos da progecircnie verificou-se que a

alimentaccedilatildeo das matrizes com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg natildeo influenciou

os tiacutetulos de anticorpos (Pgt005) da progecircnie natildeo suplementada (Tabela 11) Para as

aves suplementadas verifica-se um efeito linear decrescente (Plt005) aos sete dias de

idade e efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade em que o niacutevel de 1674 de

Arg dig proporcionou o maior tiacutetulo de anticorpos (Tabela 12)

Os resultados observados na progecircnie suplementada mostraram-se compatiacuteveis

com as respostas das aves a campo nas quais inicialmente satildeo observados maiores

tiacutetulos de anticorpos decorrentes da imunidade materna seguido de uma queda que nas

condiccedilotildees experimentais eacute resultado da neutralizaccedilatildeo desses anticorpos pelos antiacutegenos

vacinais e por fim uma nova elevaccedilatildeo dos tiacutetulos

Este resultado concorda com o observado por outros autores Tayade et al

(2006) demonstraram que a resposta vacinal contra o viacuterus da doenccedila de Gumboro de

frangos suplementados com 2 de Arg foi 20 mais eficiente que a resposta induzida

apenas pela vacina A elevada resposta humoral e a proteccedilatildeo observada no grupo de

aves vacinado e com dieta suplementada com Arg segundo estes autores pode ser

atribuiacuteda ao nuacutemero de funccedilotildees imunorregulatoacuterias da Arg sobre o sistema

imunoloacutegico A Arg eacute necessaacuteria para a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas B e tambeacutem estaacute

envolvida na liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da bolsa ou da medula oacutessea (De Jonge et al

108

2002) Ainda segundo Abdukalykova e Ruiz-Feria (2006) niacuteveis adicionais de Arg

podem acelerar a produccedilatildeo de anticorpos em frangos de corte

29

295

3

305

31

315

32

325

33

335

34

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s(7

dia

s)

0

05

1

15

2

25

3

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s (2

8 di

as)

Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

1674

109

Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Niacuteveis de Arginina na dieta materna ()

Idade 0943 1093 1243 1393 1543 CV() Regressatildeo R2

07 dias 317plusmn099 323plusmn011 301plusmn008 324plusmn007 316plusmn015 831 ns -----

14 dias 262plusmn009 257plusmn003 242plusmn011 262plusmn011 257plusmn003 792 ns -----

21 dias 232plusmn010 247plusmn005 211plusmn010 228plusmn011 241plusmn007 941 ns -----

28 dias 241plusmn028 186plusmn014 248plusmn022 231plusmn019 214plusmn024 2378 ns -----

35 dias 275plusmn017 284plusmn015 271plusmn013 286plusmn020 291plusmn011 1361 ns -----

Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades

Niacuteveis de Arginina ()

Idade 1300 1450 1600 1750 1900 CV() Regressatildeo R2

07 dias 331plusmn012 336plusmn010 301plusmn012 329plusmn009 299plusmn009 798 Linear1 012

14 dias 226plusmn008 218plusmn019 219plusmn023 207plusmn014 245plusmn009 1715 ns -----

21 dias 232plusmn007 239plusmn006 236plusmn006 246plusmn012 240plusmn009 829 ns -----

Niacuteveis de Arginina ()

1150 1300 1450 1600 1750 CV() Regressatildeo R2

28 dias 171plusmn035 279plusmn009 298plusmn006 278plusmn019 240plusmn012 1961 Quadraacutetica2 026

35 dias 268plusmn023 299plusmn012 296plusmn018 280plusmn023 313plusmn011 1535 ns -----

110

Conclusatildeo

As dietas suplementadas com Arg mostraram-se necessaacuterias para o oacutetimo

desempenho do sistema imune celular e humoral da progecircnie natildeo bastando somente agrave

suplementaccedilatildeo das matrizes de corte

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iii

O Senhor eacute meu pastor nada me faltaraacute Em verdes prados ele me faz repousar Conduz-me junto agraves aacuteguas refrescantes

restaura as forccedilas de minha alma Pelos caminhos retos ele me leva

por amor do seu nome

Ainda que eu atravesse o vale escuro nada temerei pois estais comigo

Vosso bordatildeo e vosso baacuteculo satildeo o meu amparo

Preparais para mim a mesa agrave vista de meus inimigos Derramais o perfume sobre minha cabeccedila

e transborda minha taccedila A vossa bondade e misericoacuterdia hatildeo de seguir-me

por todos os dias de minha vida E habitarei na casa do Senhor por longos dias

(Salmo 22)

iv

Ao meu pai e minha matildee pela forccedila amor carinho e incentivo nos momentos mais difiacuteceis da minha vida Ao meu marido Junior pelo amor incondicional pela cumplicidade e incentivo

pela compreensatildeo pelos momentos de ausecircncia

Aos meus irmatildeos Sara e Jonatah pela amizade e companheirismo Ao meu filho Eduardo por suportar as dificuldades ao meu lado

DEDICO

v

AGRADECIMENTOS

Agrave Universidade Estadual de Maringaacute por ter possibilitado desenvolver este trabalho

Agrave minha orientadora Profa Dra Alice Eiko Murakami pela sua orientaccedilatildeo pelo

reconhecimento do meu trabalho pelos ldquopuxotildees de orelhardquo que sempre me ajudaram em

todos os momentos a ser uma pessoa melhor pelos conselhos e pela dedicaccedilatildeo agrave minha

pessoa por todos esses anos e principalmente pela amizade construiacuteda com respeito e

carinho ao longo desta caminhada

Aos professores do Programa de Poacutes-graduaccedilatildeo em Zootecnia da Universidade Estadual

de Maringaacute pelo acesso ao conhecimento e pela paciecircncia a mim dispensada em especial

ao Prof Dr Elias Nunes Martins pelos valiosos conselhos e amizade e pelos auxiacutelios as

ldquoestatiacutesticasrdquo muito obrigada

Aos secretaacuterios do Programa de Poacutes- graduaccedilatildeo Rose e Denilson por todo ldquosocorrordquo

durante o meu periacuteodo no programa pelas conversas e amizade obrigada por tudo

As ldquoMariasrdquo teacutecnicas do laboratoacuterio de Histologia da UEM Eurides e Dos Anjos pela

amizade e auxiacutelio e toda ajuda durante as minhas anaacutelises

Aos funcionaacuterios da Fazenda Experimental de Iguatemi da UEM pelo precioso auxiacutelio

durante a conduccedilatildeo deste e todos os trabalhos realizados durante o meu periacuteodo nessa

universidade

A todos os colegas que fizeram parte da minha caminhada pela ajuda e companheirismos

em todos os momentos faacuteceis e difiacuteceis desta jornada pelo auxiacutelio durante a coleta e

conduccedilatildeo dos experimentos que me permitiram esta tese Ana Ton Jovanir Maacutercia

vi

Suelen Rodrigo Luis Daniel Ana Carolina Ana Flaacutevia Leandro Rafael Fernando

Karla Alexandra Mariana Celma Andressa Faacutebio

Agraves minhas eternas irmatildes Jovanir Inecircs Muller Fernandes e Maacutercia Izumi Sakamoto pela

amizade companheirismo pela forccedila em todos os momentos de alegria e em que estive

em dificuldades minha eterna gratidatildeo por tudo que vocecircs fizeram por mim

A minha irmatildezinha Sussu e seu ldquomaridatildeordquo Mauriacutecio pelo apoio e amizade pelo

companheirismo e auxiacutelio nos momentos em que precisei muito obrigada por tudo

As mais novas amigas e companheiras Cinthia e Cris muito obrigada pela amizade

incondicional que vocecircs me dedicaram durante esse tempo que apesar de natildeo ter sido tatildeo

longo valeu por uma eternidade muito obrigada por tudo

A minha irmatilde Sara que durante a minha gravidez foi meu braccedilo direito na conduccedilatildeo deste

trabalho auxiliando e principalmente me levantando nos momentos de dificuldade

obrigada por vocecirc fazer parte da minha vida

Ao Waldir Pereira da Silva Junior meu profundo agradecimento pelo companheirismo

incentivo amizade por estar ao meu lado e compreender meus momentos de ausecircncia

pelo amor incondicional a mim dedicado meu eterno amor a vocecirc

A todos que direta ou indiretamente contribuiacuteram para esse trabalho meu muito obrigada

vii

BIOGRAFIA

LUCIANA MARIA GARCIA DE SOUZA DA SILVA filha de Vera Luacutecia

Aparecida Garcia de Souza e Joatildeo Gusman de Souza nasceu em Maringaacute Paranaacute no dia

18 de maio de 1981

Em marccedilo de 2005 conclui o curso de Zootecnia pela Universidade Estadual de

Maringaacute

Em marccedilo de 2005 iniciou no curso de Poacutes- graduaccedilatildeo em Zootecnia em niacutevel de

mestrado aacuterea de concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal na Universidade Estadual de Maringaacute e

no dia 3 de marccedilo de 2007 submeteu-se a banca para defesa de Dissertaccedilatildeo

Em marccedilo de 2007 iniciou no curso de Poacutes-graduaccedilatildeo em Zootecnia em niacutevel de

doutorado aacuterea de concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal na Universidade Estadual de Maringaacute

realizando estudos na aacuterea de nutriccedilatildeo de frangos de corte No dia 17 de novembro de

2010 submeteu-se a banca para defesa da Tese

viii

IacuteNDICE

Paacutegina

LISTA DE TABELAS ix LISTA DE FIGURAS xi I - INTRODUCcedilAtildeO 17 11 REVISAtildeO DA LITERATURA 19

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie 19 112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves 20 REFEREcircNCIAS 32

II - OBJETIVOS GERAIS 39 21 Objetivos Especiacuteficos 39

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo 40

Resumo 40 Introduccedilatildeo 42 Material e meacutetodos 43 Resultados e Discussatildeo 47 Conclusatildeo 52 Referecircncias 53

IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie 57

Resumo 57 Introduccedilatildeo 59 Material e Meacutetodos 60 Resultados e discussatildeo 67 Conclusatildeo 83 Referecircncias 83

V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie 89

Resumo 89 Introduccedilatildeo 91 Material e Meacutetodos 92 Resultados e Discussatildeo 101 Conclusatildeo 110 Referecircncias 110

VI - CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 113

ix

LISTA DE TABELAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental 45 Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 48 Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 50 Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico 51 Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 52

Capiacutetulo IV Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg48 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)50 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)51 Tabela 4 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg55 Tabela 5 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg56 Tabela 6 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg60 Tabela 7 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementadas provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg64 Tabela 8 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento da progecircnie suplementada com dietas suplementadas contendo niacuteveis de Arg64

x

Tabela 9 ndash Meacutedias de porcentagem de carcaccedila (CARC) porcentagem de peito (PEITO) porcentagem de coxa (COXA) porcentagem de asa (ASA) porcentagem de gordura abdominal (GORDURA) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg65 Tabela 10 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de arginina67 Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg69 Tabela 12 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade72

Capiacutetulo V Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das dietas experimentais das matrizes de frangos de corte no periacuteodo experimental83 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg85 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)86 Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (21-42 dias)86 Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de arginina89 Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg90 Tabela 7 ndash Meacutedias do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade91 Tabela 8 ndash Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg92 Tabela 10 ndash Meacutedias e erro padratildeo da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg94 Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades94

xi

LISTA DE FIGURAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel33 Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg34 Capiacutetulo IV Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 70 Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 71 Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 72 Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 72 Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 75 Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 77 Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 81 Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade 82 Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade 83

xii

Capiacutetulo IV Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 106 Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 108

RESUMO

Foram realizados trecircs experimentos com o objetivo de avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na nutriccedilatildeo de matrizes de corte e a modulaccedilatildeo da resposta imune e do desenvolvimento esqueleacutetico na progecircnie No primeiro experimento avaliou-se o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e qualidade de ovos Para tanto foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se um aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve uma queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arginina respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo O segundo experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo

xiv

suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos O terceiro experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos 7 dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavras-chave desempenho produtivo qualidade de ovos qualidade oacutessea sistema imune

ABSTRACT

Three experiments were conducted to evaluate the effect of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder nutrition and modulation of the immune systems and skeletal development in the progeny In the first experiment the effect of Arg supplementation on heavy breed henrsquos productive performance and egg quality was evaluated ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance In the second experiment the effects of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder hens diet on performance carcass yield and bone parameters was evaluated in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units The body weight gain feed intake and feed gain ratio was calculated to evaluate the performance The carcass yield was evaluated by the carcass percentage leg breast and wing yield and abdominal fat The bone quality was assessed by the analysis of the femur and tibia lengths diameters and Seedor index In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that

16

just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) In third experiment the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses was evaluated in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by the diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses According to the results it is possible to conclude that supplementation with Arg provided improvements in the eggs weight of broilers and evaluations in the progeny demonstrated that there is a need to supplement the diet with Arg in order to get the best performance index bone quality and humoral and cellular immunity

Key-words bone quality egg quality productive performance immune system

17

I - INTRODUCcedilAtildeO

Vaacuterios fatores afetam o desempenho de frangos de corte como a geneacutetica

nutriccedilatildeo sanidade manejo e ambiecircncia Entretanto fatores estabelecidos antes mesmo da

incubaccedilatildeo e da eclosatildeo como a idade das matrizes e o peso dos ovos satildeo preponderantes

para o desenvolvimento inicial das aves tendo consequecircncia em todo o crescimento

(Pedroso et al 2005)

As exigecircncias nutricionais de uma reprodutora leve ou pesada devem atender agraves

necessidades do embriatildeo em desenvolvimento fora do organismo materno (Campos

2003) O ovo eacute formado basicamente pela casca (10) clara (60) e gema (30) Desse

modo os niacuteveis nutricionais da matriz devem ser dirigidos para formaccedilatildeo desses

componentes porque estes satildeo responsaacuteveis pela nutriccedilatildeo do embriatildeo

O ovo tem aacutegua proteiacutena gordura e cinza na sua composiccedilatildeo quiacutemica A gema

apresenta papel importante no desenvolvimento do embriatildeo visto que este formaraacute o saco

vitelino apoacutes o quarto dia de vida O saco vitelino constitui a uacutenica fonte fornecedora de

energia para o desenvolvimento do embriatildeo Deste satildeo absorvidos todos os nutrientes pelo

embriatildeo como partiacuteculas lipoproteicas e proteicas Estas uacuteltimas podem ser absorvidas

intactas porque a produccedilatildeo de proteinases pelo embriatildeo aumenta de acordo com o seu

desenvolvimento Aleacutem disso parte da absorccedilatildeo de proteiacutenas ocorre na forma de

aminoaacutecidos (Campos 2003) O saco viteliacutenico tambeacutem eacute a uacutenica fonte de

18

imunoglobulinas produzidas pelo organismo materno capazes de manter certa imunidade

ao pintinho no periacuteodo inicial de sua vida

Os aminoaacutecidos presentes na gema podem ser suficientes durante o processo de

eclosatildeo apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

processo de crescimento (Ohta et al 2004)

Logo apoacutes a eclosatildeo a maior parte da demanda de energia e de proteiacutena das aves eacute

direcionada para o desenvolvimento do trato digestoacuterio principalmente intestinos (Fisher

da Silva 2001) Este crescimento preferencial ocorre tanto na presenccedila quanto na ausecircncia

do alimento (Laurentiz et al 2001) Quando estes nutrientes natildeo satildeo fornecidos pela

raccedilatildeo os neonatos utilizam o saco vitelino como suplemento energeacutetico e como fonte

proteica para o crescimento intestinal Entretanto segundo Dibner et al (1998) 20 da

proteiacutena residual do saco vitelino satildeo representadas pelas imunoglobulinas maternais e

que a gordura bruta residual eacute constituiacuteda basicamente de trigliceacuterides fosfoliacutepides e

colesterol

Assim a nutriccedilatildeo das matrizes de corte pode enriquecer a gema e produzir pintos

de alta qualidade Entretanto com o passar dos anos natildeo houve muita diferenccedila nos niacuteveis

nutricionais propostos para nutriccedilatildeo das matrizes de corte o que ocorre principalmente em

razatildeo das grandes diferenccedilas existentes entre as linhagens comerciais existentes Segundo

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) para matrizes pesadas existe uma pausa nas pesquisas orientadas

para a determinaccedilatildeo das exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos essenciais

Dentre os aminoaacutecidos utilizados na formulaccedilatildeo de raccedilotildees principalmente as

voltadas para o conceito de proteiacutena ideal a arginina (Arg) pode exercer efeitos positivos

pois este aleacutem de ser constituintes de proteiacutenas ainda estaacute envolvido na siacutentese de creatina

e de poliaminas de prolina como substrato para a siacutentese de colaacutegeno e do oacutexido niacutetrico

(NO) e na secreccedilatildeo do hormocircnio de crescimento (GH) e dos fatores de crescimento

19

semelhantes agrave insulina (IGF) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave (Harvey et

al 2001)

Como as aves natildeo apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem

exclusivamente da Arg sinteacutetica principalmente no periacuteodo inicial de produccedilatildeo (Allen amp

Baker 1972) Aleacutem disso em dietas agrave base de milho e de farelo de soja a Arg eacute

considerada o quinto aminoaacutecido limitante para frangos de corte apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Vaacuterios autores tecircm proposto que a nutriccedilatildeo das matrizes afeta o desempenho dos

pintos (Uni amp Ferket 2004) Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem

nos primeiros dias de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com

funccedilatildeo imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade

materna e na resposta imune dos pintos

11 REVISAtildeO DA LITERATURA

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie

O sistema imune das aves eacute complexo e compreende uma seacuterie de funccedilotildees

celulares e fatores soluacuteveis que trabalham juntos para produzir uma resposta imune

protetora Os oacutergatildeos linfoides primaacuterios das aves satildeo a bolsa cloacal e o timo Os oacutergatildeos

como medula oacutessea baccedilo glacircndula Harderiana placas de Payer e tonsilas cecais satildeo

considerados oacutergatildeos linfoides secundaacuterios

Com base nesses componentes as aves podem apresentar respostas a vaacuterios

antiacutegenos divididas em dois tipos a imunidade passiva e a ativa A imunidade passiva eacute

transferida para a progecircnie pelas reprodutoras via saco viteliacutenico Atraveacutes da imunidade

passiva eacute possiacutevel desenvolver a resposta imune especiacutefica sem que haja um envolvimento

do organismo pela transferecircncia de ceacutelulas ou de anticorpos de outro indiviacuteduo jaacute

20

imunizado A imunidade ativa por sua vez eacute decorrente da exposiccedilatildeo das aves a um

antiacutegeno estranho que pode ser de origem vacinal ou um agente patoacutegeno

Nas aves a imunidade passiva eacute passada da matriz ateacute o pintinho pelo do ovo no

processo de produccedilatildeo de ovo imunoglobulinas (Ig) Y presentes no sangue das matrizes

chega ateacute o oviduto e se deposita na gema do ovo enquanto durante a secreccedilatildeo do

albuacutemen que ocorre na porccedilatildeo magnum do oviduto secreta tambeacutem IgA e IgM Eacute essa

imunidade enviada pela matildee que protege esses pintos nos primeiros dias de vida contra

vaacuterios agentes que estatildeo presentes no campo (Santin 2009) Haacute relaccedilatildeo direta entre os

tiacutetulos de seacutericos de Ig da matildee e a quantidade repassada ao ovo Assim eacute de extrema

importacircncia que o pintinho absorva adequadamente e rapidamente essa gema para que ele

tenha acesso a estas Ig (Santin 2009) Maiorka (2002) demonstrou que jejum de aacutegua e de

alimento por 12 horas apoacutes a eclosatildeo diminui a absorccedilatildeo da gema e afetam o

desenvolvimento da mucosa intestinal de frangos de corte Vargas et al (2009) mostraram

que os tiacutetulos seacutericos de anticorpos contra a vacina de doenccedila de Newcastle (NDV) foram

mais baixos em pintos submetidos a 12 horas de jejum poacutes eclosatildeo quando comparados

agravequeles que consumiram aacutegua e alimento logo apoacutes a eclosatildeo De fato o atraso no

consumo de alimento dos animais pode diminuir a absorccedilatildeo da gema e consequentemente

a passagem da imunidade passiva da matildee para o pintinho Dibner et al(1998) sugerem que

quando o pintinho natildeo recebe rapidamente aacutegua e alimento apoacutes a eclosatildeo acaba utilizando

as Ig e os fosfolipiacutedios da gema como alimento diminuindo assim sua funccedilatildeo na proteccedilatildeo

animal

112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves

A Arg eacute um aminoaacutecido essencial em aves principalmente na fase inicial Isso

ocorre porque as aves diferentemente dos mamiacuteferos natildeo possuem o ciclo da ureia

funcional necessitando da fonte exoacutegena de suplementaccedilatildeo Evoy et al (1998) em seu

21

trabalho relataram o papel da Arg como essencial na estimulaccedilatildeo do sistema imune do

hospedeiro

As vias metaboacutelicas que envolvem a Arg satildeo complexas e demonstradas

resumidamente a seguir

Adaptado de Duff amp Daly (2002)

Juntamente com a complexidade dessas vias soma-se a variada localizaccedilatildeo das

enzimas envolvidas no meio intracelular como nos tecidos Com exceccedilatildeo dos enteroacutecitos

22

em receacutem-nascidos nenhum outro tipo de ceacutelula conteacutem todas as enzimas necessaacuterias para

a siacutentese de Arg (Wu amp Morris 1998)

A Arg eacute ativamente absorvida pelo intestino pelo sistema de transporte soacutedio-

dependente A alta atividade da arginase no enteroacutecito converte cerca de 40 da dieta de

Arg em citrulina a qual eacute liberada na circulaccedilatildeo (Castillo et al 1993) Quando a Arg cai

na corrente sanguiacutenea cerca de 15 eacute eliminada pelo fiacutegado e o restante entra na

circulaccedilatildeo sistecircmica (OrsquoSullivan et al 1998) A Arginina eacute sintetizada a partir da

citrulina principalmente nos rins e eacute entatildeo liberada na circulaccedilatildeo para ser utilizada pelos

demais tecidos

O oacutexido niacutetrico (NO) constitui uma das menores e mais simples moleacuteculas

biossintetizadas (Morris et al 1994) O NO eacute um radical livre gasoso inorgacircnico e

identificado como mensageiro molecular extremamente laacutebil (meia vida bioloacutegica em

torno de segundos) O NO media vaacuterios fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente

do endoteacutelio citotoxicidade mediada por macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria Eacute produzido pelas ceacutelulas endoteliais neurocircnios macroacutefagos e

tecidos entre eles a hipoacutefise que age paracrinamente exercendo efeitos intra e

extracelulares em vaacuterios sistemas fisioloacutegicos (Kutchai 1998)

Palmer et al (1988) demonstraram que a L-Arg eacute o precursor fisioloacutegico do NO

nas ceacutelulas endoteliais Com base nesta informaccedilatildeo vaacuterios grupos de investigadores

suspeitaram que o NO fosse o provaacutevel precursor da siacutentese de NO3- e NO2

- pelos

macroacutefagos Subsequentemente esta hipoacutetese foi comprovada e ficou demonstrado que o

NO eacute o principal mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a

mais importante moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al 1988 e Marletta

et al 1988 citados por Dusse et al 2003)

23

Este composto eacute produzido a partir da oxidaccedilatildeo da L-arginina pela accedilatildeo da enzima

oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) uma enzima Ca++-calmodulina-dependente Por este

mecanismo eacute gerado citrulina como produto final (Kiechele amp Malinski 1993)

O surgimento do NO como agente da sinalizaccedilatildeo celular eacute uma importante

descoberta da fisiologia humana e animal nos uacuteltimos anos O NO participa de vaacuterios

fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente do endoteacutelio citotoxicidade mediada por

macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O NO eacute o principal

mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a mais importante

moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al1988 e Marletta et al 1988 citados

por Dusse et al 2003)

Existem trecircs formas de NOS sendo a NOS induzida (iNOS) e duas NOS

constitutivas (cNOS) O NO eacute sintetizado pela ativaccedilatildeo da cNOS basal (em ceacutelulas

endoteliais vasculares e neurocircnios) segundos a minutos apoacutes o aumento na concentraccedilatildeo

de caacutelcio em resposta agrave ativaccedilatildeo de receptores da superfiacutecie celular e mecanismos de

transduccedilatildeo de sinal (Adams 1996)

Ao contraacuterio a iNOS natildeo depende de caacutelcio para ativaccedilatildeo mas a siacutentese de

mRNA da iNOS eacute necessaacuteria para sua atividade A NOS induzida natildeo eacute detectaacutevel em

condiccedilotildees basais As LPS ou endotoxinas bacterianas junto com citocinas como TNFα

IL-1β ou IF-γ induzem a siacutentese de iNOS de duas a quatro horas apoacutes a exposiccedilatildeo ao

agente A iNOS requer siacutentese proteica para sua expressatildeo e sua atividade persiste por

mais de 24 horas e sintetiza NO em concentraccedilotildees nanomolares 1000 vezes maior que

cNOS (Davies et al 1995)

A expressatildeo da iNOS eacute o resultado da resposta inflamatoacuteria localizada ou difusa

resultante da infecccedilatildeo ou dano tecidual Segundo Salvemini et al (1996) o NO eacute potente

vasodilatador e seu envolvimento na resposta inflamatoacuteria pode ter relaccedilatildeo com sua

24

habilidade em aumentar a permeabilidade vascular e o edema atraveacutes de mudanccedilas no

fluxo sanguiacuteneo local e do aumento na produccedilatildeo de prostaglandinas proinflamatoacuterias

A expressatildeo de iNOS em endotoxemia eacute citoprotetoacuteria inibindo microtrombose

pela prevenccedilatildeo de adesatildeo plaquetaacuteria e danos mediados por radicais Por outro lado a

citotoxidade do NO resulta da sua accedilatildeo direta ou da sua reaccedilatildeo com outros compostos

liberados durante o processo inflamatoacuterio A base bioquiacutemica para a accedilatildeo direta do NO

consiste na sua reaccedilatildeo com metais (especialmente o ferro) presentes nas enzimas do seu

alvo (Moncada 1991 James 1995) Desta forma satildeo inativadas enzimas cruciais para o

ciclo de Krebs para a cadeia de transporte de eleacutetrons para a siacutentese de DNA e para o

mecanismo de proliferaccedilatildeo celular Em processos infecciosos ceacutelulas ativadas como

macroacutefagos neutroacutefilos e ceacutelulas endoteliais secretam simultaneamente NO e

intermediaacuterios reativos do oxigecircnio a accedilatildeo citotoacutexica indireta do NO consiste

principalmente na sua reaccedilatildeo com esses intermediaacuterios do oxigecircnio

Durante a resposta imune mediada por ceacutelulas a maioria das ceacutelulas adquire a

capacidade de expressar a forma de NO induzida (Nathan amp Xie 1994) A accedilatildeo do NO

depende da ceacutelula T reconhecer um antiacutegeno especiacutefico embora sua accedilatildeo na resposta

imune mediada por ceacutelulas natildeo seja especiacutefica (Schmidt amp Walter 2004)

Costa et al (2003) corroboram com o fato de que a fagocitose por si soacute natildeo induz a

siacutentese de NO A fagocitose de partiacuteculas inertes por macroacutefagos peritoniais em cultura

ou por macroacutefagos murinos estimulados por citocinas natildeo satildeo estiacutemulos suficientes para

a induccedilatildeo expressiva de iONS No entanto a fagocitose de agentes bioloacutegicos nas

mesmas condiccedilotildees induz altos niacuteveis de NO sugerindo que a produccedilatildeo de NO seja

dependente de estiacutemulo imunoloacutegico e que faccedila parte dos mecanismos de defesa do

organismo

25

Todas estas investigaccedilotildees estabeleceram de forma definitiva uma associaccedilatildeo entre

arginina oacutexido niacutetrico e resposta imune Por isso nas uacuteltimas duas deacutecadas a arginina tem

sido o foco de estudos como regulador de muitos processos imunoloacutegicos e fisioloacutegicos

(Tayade et al 2006)

Trabalhos desenvolvidos com mamiacuteferos demonstraram que as respostas imunes

podem ser influenciadas pela arginina dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al

1998 Lewis amp Langkamp-Henken 2000) Em experimentos desenvolvidos com animais

jovens os efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina foram demonstrados

como o aumento do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos

tiacutemicos Os efeitos imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais

estressados ou imunossupremidos

Os efeitos beneacuteficos da arginina natildeo se limitam agrave imunidade celular Segundo

LeBien (2002) em mamiacuteferos geneticamente modificados a arginina eacute utilizada para

diferenciaccedilatildeo de proacute-linfoacutecitos B para preacute-linfoacutecitos B na medula oacutessea e estaacute envolvida na

liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da medula

Por outro lado Deng et al (2005) relatam que relevantes pesquisas em espeacutecies

aviaacuterias satildeo esparsas Estas pesquisas apontaram o aumento da produccedilatildeo de oacutexido niacutetrico

por macroacutefagos de aves suplementadas com arginina (Sung et al 1991) aumento do peso

dos oacutergatildeos linfoides (Kwak et al 1999) melhora da relaccedilatildeo heteroacutefilolinfoacutecito em pintos

suplementados e desafiados com o agente viral da bronquite infecciosa e maior percentual

de ceacutelulas CD8+ (Lee et al 2002)

Entretanto para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de arginina

foram observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

estabelecidos Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de arginina

plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular

26

Outros autores obtiveram respostas positivas com a suplementaccedilatildeo de arginina na

reduccedilatildeo na mortalidade de frangos desafiados com Eimeria acervulina Eimeria tenella e

Eimeria maacutexima alterando a relaccedilatildeo argininalisina de 09 para 13 (Kidd et al 2002) e na

siacutendrome da hipertensatildeo pulmonar (Wideman et al 1995) Tambeacutem Corzo et al (2003)

observaram reduccedilatildeo linear de arranhotildees infectados em carcaccedilas de frangos alimentados

com niacuteveis crescentes de arginina (08 a 125 da dieta) Embora esses paracircmetros sejam

indicativos indiretos da imunidade mas apontam a importacircncia da arginina na melhora da

imunidade e no restabelecimento do status sanitaacuterio dos planteacuteis aviacutecolas

Tayade et al (2006) demonstraram recentemente que frangos vacinados com uma

vacina intermediaacuteria atenuada contra a doenccedila de Gumboro e suplementados com 2 de

arginina mostraram 100 de proteccedilatildeo apoacutes desafio com o viacuterus da doenccedila de Gumboro

comparado com 80 de proteccedilatildeo induzido apenas pela vacina sem adiccedilatildeo de arginina

suplementar na dieta

Aleacutem disso Deng et al (2005) verificaram aumento no niacutevel de anticorpos contra

eritroacutecitos de carneiro em frangas de postura somente na oitova semana de idade quando

estas aves foram suplementadas com niacuteveis de arginina em 150 acima do recomendado

pelo NRC do primeiro dia ateacute a quarta semana de vida Os autores concluiacuteram que a

suplementaccedilatildeo com arginina por um periacuteodo curto de tempo tem pouco efeito sobre a

imunidade e que a imunocompetecircncia pode ser permanentemente moldada pelo status

nutricional nos estaacutegios mais precoces do desenvolvimento

Para a melhora da resposta imune deve-se garantir que as matrizes desenvolvam

tiacutetulos elevados de anticorpos e assim buscar atingir o controle contra surtos de doenccedilas

via imunidade materna como meio de prevenccedilatildeo na progecircnie Kidd et al (1993)

observaram que a diferenccedila no niacutevel de anticorpos contra eritroacutecitos de carneiro em

27

matrizes pesadas recebendo dietas compostas por gratildeos de vaacuterias origens foi detectada na

progecircnie recebendo a mesma dieta

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo dos

niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes Segundo Kidd (2004) trabalhos desenvolvidos a

cerca das exigecircncias nutricionais das matrizes estatildeo focados apenas na questatildeo produtiva

Brake (1997) mostrou que a suplementaccedilatildeo de dietas para matrizes com vitaminas E e C

promoveu melhoria na transferecircncia de imunidade materna e na resposta imune dos pintos

pela proteccedilatildeo aos anticorpos no ovo durante a incubaccedilatildeo

Segundo Gore amp Qureshi (1997) um dos mecanismos pelo qual a vitamina E atua

nesta fase de crescimento embrionaacuterio pode estar relacionado a uma maior produccedilatildeo de

oacutexido niacutetrico nitritos e nitratos pelo fato de que a Vitamina E pode aumentar a afinidade

dos receptores de membrana dos macroacutefagos para a ativaccedilatildeo dos estiacutemulos tais como os

lipopolissacariacutedeos o que resulta em maior atividade da oacutexido niacutetrico sintetase

Na literatura consultada natildeo existem relatos da suplementaccedilatildeo das dietas das

matrizes com arginina e o efeito na resposta imune da progecircnie

A produccedilatildeo de NO pelos macroacutefagos das aves eacute arginina dependente de forma

similar aos macroacutefagos de mamiacuteferos (Dietert amp Golemboski 1998) Entretanto ao

contraacuterio dos mamiacuteferos as aves natildeo podem sintetizar arginina As aves por natildeo

apresentarem o ciclo da ureia funcional dependem exclusivamente da arginina dieteacutetica

(Allen amp Baker 1972) O quadro eacute ainda mais grave nas aves uma vez que dependem de

arginina suplementar tambeacutem para a para a formaccedilatildeo de ornitina que em mamiacuteferos eacute

obtida atraveacutes do aacutecido glutacircmico A siacutentese de ornitina eacute fundamental pois estaacute envolvida

na obtenccedilatildeo de prolina e eacute utilizada tambeacutem na formaccedilatildeo de poliaminas (espermidina

espermina e putrescina) que satildeo moleacuteculas associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

28

Desta forma a arginina eacute um aminoaacutecido essencial para as aves na fase inicial A

dieta eacute um fator particularmente sensiacutevel na disponibilidade de arginina e

consequentemente de NO considerando ainda que a arginina eacute um aminoaacutecido dos mais

limitantes em dietas agrave base milho e farelo de soja (Edmonds et al 1985)

A suplementaccedilatildeo adicional de Arg nas dietas de aves imunocomprometidas

poderia aumentar ainda mais a atividade da arginase e com isso menos Arg seria

disponiacutevel para a siacutentese de NO (Kepka-Lenhart et al 2000) Alternativamente Bansal et

al (2004) sugerem como estrateacutegia dieteacutetica para restaurar as concentraccedilotildees plasmaacuteticas

de Arg a suplementaccedilatildeo de citrulina principalmente em condiccedilotildees de imunodeficiecircncia

associadas com elevada atividade plasmaacutetica da arginase Nas espeacutecies uricoteacutelicas o ciclo

Arg-citrulina eacute funcional A citrulina eacute um aminoaacutecido que natildeo eacute encontrado em nenhuma

proteiacutena corporal aleacutem da inabilidade das aves na siacutentese endoacutegena de citrulina a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica se constitui na uacutenica fonte de Arg para os macroacutefagos via ciclo

NO-citrulina (Wiesinger 2001)

A suplementaccedilatildeo de aminoaacutecidos sinteacuteticos tem propiciado facilidades no ajuste

das foacutermulas de raccedilatildeo possibilitando a obtenccedilatildeo dos niacuteveis exigidos de aminoaacutecidos

essenciais A utilizaccedilatildeo de niacuteveis elevados de lisina proporciona um maior crescimento

muscular principalmente o incremento no rendimento de peito e coxas dos frangos de

corte Entretanto esse aumento da taxa de crescimento pode alterar o equiliacutebrio

metaboacutelico ideal entre os aminoaacutecidos especialmente a relaccedilatildeo argininalisina

O antagonismo entre arginina e lisina envolve a diminuiccedilatildeo da siacutentese de

creatinina compromete a siacutentese de prolina ornitina promove o aumento da atividade da

arginase renal e da excreccedilatildeo de ureia aleacutem de que quando os niacuteveis de lisina satildeo

excessivamente altos tambeacutem ocorre a excreccedilatildeo renal de arginina (Austic amp Scott 1975)

29

Os sinais claacutessicos da deficiecircncia de Arg satildeo fraqueza e paralisia das pernas penas

deformadas e ericcediladas sobre o dorso e asa das aves reduccedilatildeo do ganho de peso lesotildees

histoloacutegicas na medula oacutessea e desenvolvimento oacutesseo afetado (Jungherr et al 1958

Newbern et al 1960) A arginina aleacutem de servir como substrato para a siacutentese de NO

estaacute envolvida na secreccedilatildeo do GH

Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram um aumento na

concentraccedilatildeo plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez

secretado pela hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio

receptor e indiretamente via IGF-I e II (insulin-like growth factor ou somatomedina C)

sobre os tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos do GH ocorre em niacutevel do

disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no

crescimento dos ossos longos (Isaksson et al 1987)

Os efeitos dos aminoaacutecidos essenciais no tecido oacutesseo em crescimento satildeo

provavelmente mediados pelo IGF-I (Baylink et al1993) De fato Chevalley et al (1998)

demonstraram que arginina e lisina aumentaram a produccedilatildeo in vitro de IGF-I por

osteoblastos mantidos em cultura Aleacutem disso Conconi et al (2001) trabalhando com

cultura de osteoblastos enriquecida com soluccedilatildeo de aminoaacutecidos essenciais (Arg Lis Met

Thr e Trp) encontraram niacuteveis significativamente aumentados de fosfatase alcalina e

siacutentese de colaacutegeno Estes resultados segundo os autores sugerem que os aminoaacutecidos

podem atuar diretamente na formaccedilatildeo da matriz oacutessea e podem tambeacutem modular o

crescimento e a diferenciaccedilatildeo de osteoblastos

Por outro lado eacute conhecido que a arginina eacute precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo

pelo qual ela poderia exercer os seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo O NO pode

participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento (Hukkanem et

30

al 1999) Estes autores demonstraram a expressatildeo do mRNA da cNOS basal (oacutexido

niacutetrico sintetase endotelial) em condroacutecitos hipertroacuteficos de placas de crescimento de ratos

neonatos

Na placa de crescimento o NO poderia facilitar a vascularizaccedilatildeo e a formaccedilatildeo

oacutessea (Rath et al 2000) a exemplo de sua accedilatildeo na cartilagem articular em que induz

respostas bioloacutegicas que levam a degradaccedilatildeo irreversiacutevel (Pelletier et al1998) Segundo

Amin amp Abramson (1998) nas osteoartrites o NO induz a apoptose dos condroacutecitos

Teixeira et al (2005) comprovaram que o NO tem duas funccedilotildees distintas nos

condroacutecitos da placa de crescimento Uma vez iniciado o processo de maturaccedilatildeo o NO

estimula a hipertrofia por meio do aumento da expressatildeo da fosfatase alcalina e colaacutegeno

tipo X sendo conhecido que a expressatildeo de ambas proteiacutenas eacute um requerimento para a

completa hipertrofia dos condroacutecitos Aleacutem disso o NO estaacute associado ao estaacutegio mais

tardio do processo de maturaccedilatildeo Condroacutecitos totalmente diferenciados tratados com

ativadores da apoptose sofrem morte celular a inibiccedilatildeo da siacutentese de NO bloqueia a

apoptose enquanto a exposiccedilatildeo aos doadores de NO estimula a apoptose Estes autores

concluiacuteram que os sistemas NOS ndash NO atuam como promotores da maturaccedilatildeo dos

condroacutecitos

Por outro lado Vanacutet amp Ralston (2001) advertem que o efeito do NO na atividade

dos osteoblastos pode ser bifaacutesico Estudos in vitro tecircm indicado que pequenas

quantidades de NO que satildeo produzidas constitutivamente pelos osteoblastos podem agir

como um estimulador autoacutecrino do crescimento oacutesseo Entretanto altas concentraccedilotildees de

NO tais como aquelas observadas apoacutes estimulaccedilatildeo das citocinas inflamatoacuterias em que a

iNOS eacute a isoforma envolvida tecircm efeito inibitoacuterio no crescimento e diferenciaccedilatildeo

osteoblaacutestica

31

O crescimento e a remodelaccedilatildeo dos tecidos satildeo regulados por complexas interaccedilotildees

entre potencial geneacutetico fatores de crescimento influecircncias ambientais e nutriccedilatildeo

(Gonzales amp Sartori 2002) A resposta imune e a inflamaccedilatildeo podem modificar as

necessidades de alguns nutrientes

As alteraccedilotildees metaboacutelicas decorrentes podem interromper os eventos envolvidos

no processo de condrogecircnese e osteogecircnese e desencadear o processo de formaccedilatildeo das

lesotildees no tecido oacutesseo que levam a dificuldade locomotora deformaccedilatildeo oacutessea predispotildeem

agraves infecccedilotildees e agraves desordens esqueleacuteticas tais como a discondroplasia tibial (Thorp 1994)

Aleacutem das perdas econocircmicas eacute clara a percepccedilatildeo que as disfunccedilotildees do aparelho locomotor

comprometem o bem-estar das aves

Aleacutem de interagirem com o sistema imune os processos que modulam o

crescimento oacutesseo satildeo complexos e muacuteltiplos e mais estudos satildeo necessaacuterios para elucidar

estes mecanismos

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II - OBJETIVOS GERAIS

Essa pesquisa foi desenvolvida com a finalidade de estudar o efeito da

suplementaccedilatildeo de Arg na dieta de fecircmeas reprodutoras de frangos de corte na qualidade

dos ovos e nas caracteriacutesticas produtivas na qualidade oacutessea no desenvolvimento dos

oacutergatildeos linfoide e do sistema imune da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo

niacuteveis crescentes de Arg

21 Objetivos Especiacuteficos Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis

crescentes de Arg no desempenho produtivo e na qualidade dos ovos

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg no desempenho no

rendimento de carcaccedila e na qualidade oacutessea da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas

contendo niacuteveis crescentes de Arg

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg nas respostas imune e

celular da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo

Resumo ndash Este estudo avaliou o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e reprodutivo e qualidade de ovos Foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e reprodutivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo

Palavras-chave embriodiagnoacutestico incubaccedilatildeo qualidade de ovos

III - Effect of arginine supplementation on productive performance and egg quality of broiler breeder hens

Abstract - This study investigated the effect of arginine (Arg) supplementation on broiler breeder productive performance and egg quality ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance Supplementation of broiler diets with increasing levels of Arg provided an increase in the egg production and eggs with higher weights in the levels of 1262 and 1543 respectively The increased levels of Arg did not influence the reproduction variables studied suggesting that it may be used without any harmful risk

Key words embryo diagnosis hatching egg quality

42

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo e alimentaccedilatildeo animal estatildeo direcionadas para garantir oacutetimo aporte de

nutrientes para os animais de acordo com sua finalidade comercial e fase fisioloacutegica

Na produccedilatildeo de frangos de corte a taxa de crescimento acelerada imposta pela seleccedilatildeo

geneacutetica os vaacuterios fatores estressantes (ambientais e de manejo) e de desafio

imunoloacutegico (vacinaccedilatildeo e infecccedilatildeo) nas condiccedilotildees de produccedilatildeo comercial fazem com

que as exigecircncias das matrizes de corte para alguns nutrientes sejam maiores para que a

progecircnie possa expressar seu potencial geneacutetico

O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo dependem completamente dos

nutrientes contidos no ovo e estes satildeo originados da dieta e do metabolismo das

matrizes O ovo eacute um sistema fechado assim todos os nutrientes necessaacuterios para o

desenvolvimento do embriatildeo devem ser fornecidos pela matriz quando o ovo eacute formado

(Oviedo-Roacutendon amp Murakami 1998)

Aleacutem disso existe correlaccedilatildeo positiva entre peso do ovo e peso do pinto ao

nascer e deste com o peso do frango ao abate (Lara et al 2005) De fato Whiting amp

Pesti (1984) verificaram que para cada grama a mais no peso do ovo correspondia a

107 e 60g adicionais para o peso final de machos e fecircmeas respectivamente

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas No ovo os aminoaacutecidos

presentes na gema satildeo suficientes durante o processo de eclosatildeo poreacutem apoacutes o

nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o processo de

crescimento (Otha et al 2004) Nos uacuteltimos anos o impacto da nutriccedilatildeo das matrizes

no estado nutricional e desempenho da progecircnie bem como a melhora do estado

imunoloacutegico tem recebido especial atenccedilatildeo (Pappas et al 2006)

43

A nutriccedilatildeo das matrizes com dietas com arginina seria uma alternativa para o

enriquecimento da gema dos ovos com esse aminoaacutecido A Arg eacute um aminoaacutecido

baacutesico que pode influenciar a reposta imune e a resistecircncia agraves doenccedilas A Arg ainda eacute

conhecida pela funccedilatildeo estimuladora sobre o processo de ovulaccedilatildeo atraveacutes do aumento

da liberaccedilatildeo de hormocircnio luteinizante (LH) (Basiouni et al 2006) e como parte do

hormocircnio arginina vasotocina envolvido com a contraccedilatildeo uterina e a oviposiccedilatildeo

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias

de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo

dos niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes De acordo com Kidd (2004) os trabalhos

desenvolvidos em relaccedilatildeo agraves exigecircncias nutricionais das matrizes para melhorar o

sistema imune da progecircnie satildeo poucos quando comparados a questatildeo produtiva das

aves

Com isso objetivou-se com o trabalho avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de

arginina sobre o desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte

Material e meacutetodos

O experimento foi conduzido no aviaacuterio experimental da Universidade Federal

do Paranaacute ndash Campus Palotina constituiacutedo de 32 boxes com dimensotildees de 25 x 15 m

com cama de maravalha (plusmn10 cm) sobre o piso Foram utilizados boxes telados e

providos de um bebedouro pendular e de dois comedouros um deles com grade de

restriccedilatildeo aos machos e outro instalado mais alto natildeo permitindo somente o acesso das

fecircmeas Em cada boxe experimental foram utilizados ninhos convencionais de um

andar com quatro bocas de madeira com dimensotildees de 030 m x 030 m x 030 m a

030 m acima do niacutevel do piso sendo uma boca para cada quatro fecircmeas

Foram utilizados 390 reprodutores de frangos de corte sendo 360 fecircmeas e 30

machos da linhagem Ross As aves foram selecionadas na 18ordf semana de idade a partir

de um plantel de reprodutores dentro da faixa de peso de 1850 a 1950 g para as

fecircmeas e de 2450 a 2550 g para os machos O delineamento experimental utilizado foi

o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 e

1543 de Arg digestiacutevel) seis repeticcedilotildees e 12 fecircmeas e um macho por unidade

44

experimental O acasalamento foi realizado na 18ordf semana de idade das aves na

proporccedilatildeo de um macho para cada 12 fecircmeas

O periacuteodo experimental iniciou na 25ordf semana quando o plantel alcanccedilou 5 de

produccedilatildeo e finalizou na 56ordf semana de idade das aves O programa de iluminaccedilatildeo

iniciou na 19ordf semana de idade com fornecimento inicial de 14 horas de luz diaacuteria e

aplicados aumentos semanais de 30 minutos de luz ateacute o fornecimento de 17 horas de

luz diaacuteria na 25ordf semana de idade das aves

O fornecimento de raccedilatildeo foi limitado e controlado diariamente enquanto o de

aacutegua foi ad libitum As exigecircncias nutricionais utilizadas para formulaccedilatildeo das dietas das

fecircmeas e dos machos foram baseadas nas recomendaccedilotildees contidas no manual da

linhagem

A partir da 23ordf semana de idade as fecircmeas passaram a receber as dietas

experimentais constituiacutedas da dieta basal suplementada com cinco niacuteveis de L ndash

Arginina variando de 0 a 600 mgkg na dieta basal em substituiccedilatildeo ao caulin que

corresponderam aos niacuteveis de 0943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg

digestiacutevel (Tabela 1) Os machos receberam uma uacutenica dieta durante todo o periacuteodo

experimental O periacuteodo experimental teve iniacutecio na 25ordf semana Para determinaccedilatildeo da

produccedilatildeo de ovos os mesmos foram coletados diariamente e a produccedilatildeo diaacuteria anotada

em planilhas por repeticcedilatildeo Semanalmente foi obtida a produccedilatildeo total de ovos e a

porcentagem de postura de cada unidade experimental Na 30ordf 34ordf e 38ordf semana de

idade foram coletados todos os ovos produzidos em um dia para avaliaccedilatildeo da qualidade

(peso meacutedio gravidade especiacutefica porcentagem de albuacutemen e gema porcentagem e

espessura da casca)

A quantidade de raccedilatildeo oferecida para as fecircmeas foi calculada de acordo com a

produccedilatildeo de ovos e do peso corporal Para os machos forneceu-se raccedilatildeo em funccedilatildeo do

peso corporal (conforme manual da linhagem) O peso foi controlado semanalmente ateacute

a 35ordf semana e quinzenalmente a partir da 36ordf semana de idade das aves ateacute o final do

experimento

A avaliaccedilatildeo do rendimento de incubaccedilatildeo foi realizada na 40ordf semana de idade

das aves Foram incubados 80 ovos de cada tratamento totalizando 400 ovos Os ovos

foram pesados e incubados em cada idade avaliada de acordo com o tratamento e

repeticcedilatildeo e avaliadas as seguintes caracteriacutesticas peso meacutedio do ovo incubado peso

meacutedio dos pintos ao nascer percentual do peso da progecircnie ao nascer em relaccedilatildeo ao

peso do ovo e taxa de eclosatildeo Apoacutes a eclosatildeo foi realizado o embriodiagnoacutestico dos

45

ovos que natildeo eclodiram os quais foram classificados em mortalidade por fase (inicial

intermediaacuteria e final) ovos contaminados bicados vivos e bicados mortos

Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental

Ingredientes () Raccedilatildeo postura I Milho 6072 Farelo de Trigo 420 Oacuteleo de Soja 200 Farelo de Soja 2260 Sal Comum 032 Caulim 050 Calcaacutereo 38 647 Fosfato Bicaacutelcico 131 Bicarbonato de Soacutedio 010 DL-Metionina 98 014 Colina 60 016 Milbond 010 Mycofix 015 Carbonato Potaacutessio 99 021 Premix vit e mineral1 050 Hy D2 005 Eur Bactiguard L 020 Valores Calculados Proteiacutena 1551 EM Kcalkg 2815 Gordura 477 AcLinoleico 248 Caacutelcio 295 Foacutesforo disponiacutevel 044 Lisina dig 071 Met + cistina dig 060 Treonina dig 051 Arginina dig 094 Soacutedio 019 Cloro 026 Potaacutessio 080 Mongin Meq100g 21388

1 Conteuacutedo por kg de premix Vit A 8000000 UI Vit D3 2200000 UI Vit E 6200 mg Vit K 3 2000 mg Vit B 1 2000 mg Vit B2 3000 mg Vit B6 6000 mg Vit B12 10000 mcg Pantotenato de caacutelcio 6000 mg Niacina 25000 mg Aacutec foacutelico 400 mg Se 100 mg Mn 65000 mg Fe40000 mg Cu 10000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg 2 Rovimix Hy D ndash DSM Nutritional Products

Para gravidade especiacutefica foi utilizado o meacutetodo da imersatildeo dos ovos em

soluccedilatildeo salina Foram preparadas seis soluccedilotildees (aacutegua e sal comum) com densidades que

variaram de 1070 a 1090 com variaccedilatildeo de 0004 para cada soluccedilatildeo As gravidades

foram aferidas com utilizaccedilatildeo de densiacutemetro de Petroacuteleo

46

O peso meacutedio do albuacutemen de cada repeticcedilatildeo foi obtido pela diferenccedila entre o

peso meacutedio do ovo e o peso meacutedio da gema somados ao peso meacutedio da casca de cada

repeticcedilatildeo Apoacutes a pesagem das cascas a espessura das mesmas foi medida com auxiacutelio

de um microcircmetro digital (Mitutoyoreg) em quatro pontos na regiatildeo central de cada casca

Para a medida de peso da casca os ovos foram quebrados e as cascas lavadas e secas agrave

temperatura ambiente por 48 horas em seguida foram pesadas em balanccedila analiacutetica e os

pesos anotados

Anaacutelise Estatiacutestica

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados de acordo com o seguinte modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243 4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os dados de embriodiagnoacutestico natildeo apresentaram distribuiccedilatildeo normal e foram

analisados pela anaacutelise Bayesiana assumindo que a porcentagem observada ri a cada

niacutevel de concentraccedilatildeo de Arg xi segue distribuiccedilatildeo Binomial com paracircmetros ni

(tamanho de amostra) e pi (taxa de eclosatildeo) pi = en1+en com funccedilatildeo de ligaccedilatildeo logit

ii

i

plog it(p ) log1 p⎛ ⎞

equiv = μ⎜ ⎟minus⎝ ⎠ nas formas linear e quadraacutetica dadas respectivamente por

n=α+ β1xi e n = α + β1xi + β2x2i Para a modelagem foram considerados um conhecimento

vago a priori sobre os paracircmetros de regressatildeo isto eacute com distribuiccedilotildees natildeo

informativas 3~ (010 )Nα e 3~ (010 )k Nβ k=12

A obtenccedilatildeo das distribuiccedilotildees marginais a posteriori para os paracircmetros foi por

meio do pacote BRugs do programa R (R Development Core Team 2007)

Para cada paracircmetro foram gerados 510000 valores em um processo MCMC

(Monte Carlo Markov Chain) considerando um periacuteodo de descarte amostral de 10000

47

valores iniciais A amostra final tomada com saltos de tamanho 20 conteacutem 25000

valores gerados A convergecircncia das cadeias foi verificada por meio do pacote CODA

(Best et al 1995) do programa R pelos criteacuterios de Geweke (1992) e de Heidelberger amp

Welch (1983)

Resultados e Discussatildeo

Os resultados de produccedilatildeo e de qualidade dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg estatildeo apresentados na Tabela 2 Os niacuteveis de

Arg digestiacutevel utilizados nas dietas das matrizes de corte influenciaram de forma

quadraacutetica (Plt005) a porcentagem de postura em que o niacutevel de 1262 de Arg

proporcionou a maior porcentagem de postura para as matrizes de corte (Figura 1)

Outros autores tambeacutem encontraram resultados semelhantes em relaccedilatildeo ao

aumento da taxa de postura em funccedilatildeo da suplementaccedilatildeo de Arg Segundo Najib amp

Basiouni (2004) a produccedilatildeo de ovos de matrizes elevou de 52 para 6786 quando

utilizaram niacuteveis de Arg e Lys na dieta de 15 e 12 respectivamente Adicionalmente

Basiouni et al (2006) observaram aumento no peso de foliacuteculos F1 em poedeiras que

receberam dietas com 205 Arg comparado com dietas que continham 154 de Arg

Esse efeito sugere que o aumento na produccedilatildeo de ovos possa ser atribuiacutedo do efeito

estimulatoacuterio especiacutefico da Arg na secreccedilatildeo de LH (Hormocircnio Luteinizante) o qual tem

accedilatildeo direta sobre o ovaacuterio e seus foliacuteculos (Basiouni 2009)

O comportamento observado na curva de produccedilatildeo de ovos demonstra aumento

da produccedilatildeo ateacute o niacutevel de 1262 de Arg e posterior queda ateacute o niacutevel de 1543 o

que provavelmente pode estar associado ao desequiliacutebrio aminoaciacutedico das dietas nos

niacuteveis extremos de Arg na raccedilatildeo Os altos niacuteveis de Arg utilizados podem ter afetado a

produccedilatildeo de ovos principalmente pelo antagonismo existente entre Arg e Lisina (Lys)

Baixas relaccedilotildees ArgLys em dietas de matrizes reduzem o consumo de raccedilatildeo e

deprimem a produccedilatildeo de ovos (Basiouni et al 2006) Altos niacuteveis de Lys associados a

baixos niacuteveis de Arg satildeo deleteacuterios agraves aves pois niacuteveis elevados de Lys promovem

expressiva elevaccedilatildeo da atividade da arginase renal e consequentemente induz agrave

degradaccedilatildeo da Arg (Austic amp Scott 1975) causando sintomas de deficiecircncia de Arg em

virtude das aves natildeo possuiacuterem o ciclo da ureia funcional (Drsquo Mello 2003) Esse

antagonismo ainda leva agrave diminuiccedilatildeo da atividade da glicina-amidinotransferase no

fiacutegado enzima que utiliza Arg e glicina como substratos juntamente com a metionina na

siacutentese da creatina muscular (Jones et al 1967 Andriguetto et al 1999)

48

Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg

()

Postura

()

Peso

Ovo

(g)

Gema

()

Clara

()

Casca

()

Casca

(mm)

Gravidade

Especiacutefica

(gml)

0943 7741plusmn460 6046plusmn048 2998plusmn035 5955plusmn045 876plusmn015 0577plusmn0004 1082plusmn0001

1093 8101plusmn544 6081plusmn052 2972plusmn042 5974plusmn040 902plusmn014 0584plusmn0005 1082plusmn0001

1243 8240plusmn370 6086plusmn051 2971plusmn043 6035plusmn031 875plusmn011 0569plusmn0004 1081plusmn0001

1393 8158plusmn368 6133plusmn057 2986plusmn041 5984plusmn043 880plusmn009 0571plusmn0003 1080plusmn0001

1543 7855plusmn600 6167plusmn046 2964plusmn030 6015plusmn038 876plusmn010 0573plusmn0004 1081plusmn0001

CV() 664 183 195 116 351 198 0133

Anaacutelise Variacircncia

Arg Quadratico1 Linear2 ns ns ns ns Linear3

R2 043 096 ----- ----- ----- ----- 066 1 Y= 421330+01239X-00004908X2 2 Y = 585813+000196527X 3 Y = 108413-000000249943X ns ndash natildeo significativo

77

78

79

80

81

82

83

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Pro

duccedilatilde

o de

ovo

s (

)

Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel

Ao avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arg no peso dos ovos das matrizes de

corte verificou-se aumento linear (Plt005) no peso dos ovos com o aumento de Arg

digestiacutevel nas raccedilotildees por outro lado houve queda linear (Plt005) na gravidade

especiacutefica dos ovos dessas matrizes (Figura 1)

Basiouni et al (2006) encontraram efeito dos niacuteveis de Arg e de Lys sobre na

gravidade especiacutefica dos ovos Estes autores observaram que baixos niacuteveis de Arg e

altos niacuteveis de Lys proporcionaram a melhor gravidade especifica dos ovos e quando a

1262

Arginina dig ()

Y = 421330+011239X-00004908X2 R2=043

49

relaccedilatildeo ArgLys era alta a gravidade especiacutefica piora significativamente Por outro lado

Lima amp Silva (2007) natildeo verificaram efeito das diferentes relaccedilotildees ArgLys digestiacutevel

nos paracircmetros de qualidade de ovos

O aumento do peso do ovo e a queda na gravidade especiacutefica desses ovos

possuem relaccedilatildeo direta Isso ocorre porque segundo Basiouni et al (2006) a siacutentese da

quantidade de casca dos ovos nas galinhas eacute constante Aleacutem disso com o aumento da

idade das galinhas ocorre aumento no tamanho dos ovos Do iniacutecio ateacute o final do ciclo

de postura o ovo chega a aumentar ateacute 40 do seu tamanho e por isso haveraacute menos

caacutelcio na superfiacutecie da casca o que reduz a espessura da casca (Baiatildeo amp Aguilar 2001)

e consequentemente a gravidade especiacutefica dos ovos

Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados de rendimento da incubaccedilatildeo dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel estatildeo apresentados na Tabela 3 Os

niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis de

incubaccedilatildeo Demonstra-se portanto que a Arg pode ser utilizada na dieta das matrizes

sem trazer prejuiacutezos agrave reproduccedilatildeo

A fertilidade e a eclosatildeo dos ovos das matrizes satildeo dois paracircmetros importantes

na incubaccedilatildeo dos ovos Valores proacuteximos de 96 para fertilidade e 88 para eclosatildeo

satildeo indicativos de bom manejo de reprodutoras (Rosa amp Aacutevila 2000) Segundo Rosa amp

Aacutevila (2000) o rendimento da incubaccedilatildeo estaacute diretamente relacionado com a

mortalidade embrionaacuteria a qual sofre influecircncia da gravidade especiacutefica e da

capacidade do ovo em perder umidade No presente trabalho observou-se que a

utilizaccedilatildeo de dietas suplementadas com Arg natildeo afetou nenhuma dessas variaacuteveis

apesar de ter interferido na gravidade especiacutefica dos ovos conforme demonstrado em

tabelas anteriores

10795

108

10805

1081

10815

1082

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Gra

vida

de e

spec

iacutefica

(gm

l)

59860

602604606608

61612614616618

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Peso

(g)

Y = 108413-000000249943X R2=066 Y = 585813+000196527X R2=096

50

O peso do pinto natildeo foi influenciado pelos niacuteveis de Arg na dieta das matrizes

de corte eacute considerado muito importante na cadeia de produccedilatildeo por estar diretamente

relacionado ao desempenho produtivo do frango A variaccedilatildeo de peso do pinto no

momento da eclosatildeo pode ser causada por fatores como linhagem idade da matriz peso

e niacuteveis de nutrientes do ovo (Vieira amp Moran Jr 1999) Okada (1994) e Castro (1996)

ressaltam que pintos de corte com mais de 40g no primeiro dia de vida devem ser

considerados de boa qualidade Os pintos desse experimento podem ser considerados de

boa qualidade jaacute que o menor peso dos pintos ao nascer foi de 439g Embora neste

estudo os niacuteveis de Arg na dieta das matrizes natildeo tenham afetado o peso dos pintos esse

aminoaacutecido eacute essencial para o bom desenvolvimento da progecircnie Kita et al (2002)

relatam que dietas com alta proteiacutena suplementadas com aminoaacutecidos essenciais (Arg

metionina+cistina) aumentam os niacuteveis plasmaacuteticos do fator de crescimento semelhante

agrave insulina (IGF-I) e o ganho de peso em aves jovens

Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Variaacuteveis Niacuteveis de Arginina

()

Fertilidade ()

Eclosatildeo ()

Peso ovo (g)

Peso Pinto (g)

Relaccedilatildeo Peso OvoPeso Pinto

0943 9750plusmn218 7875plusmn450 6269plusmn042 4507plusmn053 7168plusmn045 1093 9513plusmn212 8038plusmn459 6212plusmn033 4390plusmn045 7115plusmn054 1243 9250plusmn206 8125plusmn464 6200plusmn047 4487plusmn066 7234plusmn047 1393 9750plusmn218 8000plusmn457 6314plusmn072 4514plusmn086 7173plusmn082 1543 9625plusmn215 7750plusmn443 6351plusmn055 4529plusmn039 7127plusmn045 Meacutedia 9578 7958 6269 4486 7163

CV () 656 1641 231 374 222 Anaacutelise de Variacircncia Arginina ns ns ns ns ns

R2 ------ ------ ----- ------- ------- ns = natildeo significativo

O peso dos ovos eacute outra caracteriacutestica de grande importacircncia relacionada com a

idade da matriz os quais satildeo preponderantes para o desenvolvimento inicial das aves e

tem consequecircncias em todo o crescimento (Pedroso et al 2005) Essa influecircncia eacute bem

conhecida e o peso do pinto representa entre 66 e 71 do peso do ovo (Fiuacuteza et al

2006 Marinho et al 2006 Pappas et al 2006) Segundo North amp Bell (1990) cada

51

grama a mais no peso do pinto representa 13 gramas no peso do frango ao abate por

isso a nutriccedilatildeo das matrizes eacute de grande importacircncia jaacute que a Arg tem relaccedilatildeo positiva

com o hormocircnio de crescimento (GH) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave

(Harvey et al 2001)

Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico

Estimativas Bayesianas

Ligaccedilatildeo Ligaccedilatildeo Meacutedias Desvio Padratildeo P25 P975 DIC

Embriodiagnoacutestico

Linear α β

-07512 -25980

2078 1798

-4811 -6367

3426 0784 4783 Mortalidade

Embrionaacuteria (1 a 5 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-8444 10690 -5607

10610 18020 7538

-3015 -2406 -2104

11790 47550 8874

4813

Linear α β

2259 -6267

3790 3615

-4602 -14470

10570 -

01174 3137

Mortalidade (11 a 17 dias)

Quadraacutetica α β1 β2

5057 -11090 1958

12960 22430 9632

-2027 -5093 -1714

3112 3253 2052

3167

Linear α β

-3726 1274

10390 07968

-58110 -02681

-1730 2882 1079

Mortalidade (18 a 21 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-1634 -2195 1387

6330 10280 4084

-14020 -22380 -6539

10690 17840 9441

1095

Linear α β

-1927 -2266

2562 2359

-7233 -7321

2739 1993 0070

Bicado Vivo Quadraacutetica

α β1 β2

-1451 -1692 -2019

2749 2821 2539

-7044 -7313 -7290

3755 3682 2565

0057

Linear α β

-2564 -1628

2860 2418

-8103 -6479

2823 2755 3417

Bicado Morto Quadraacutetica

α β1 β2

3692 -12350 4412

11930 19920 8139

-1936 -5206 -1148

2739 2609 2054

3428

Linear α β

-513600 -004923

3798 3023

-13000 -6154

2041 5809 2522

Morte por Contaminaccedilatildeo Quadraacutetica

α β1 β2

-009106 -71940 28920

13200 21610 8744

-2704 -4965 -1428

2480 3473 2016

2555

Na Tabela 4 satildeo apresentadas as estimativas Bayesianas para as equaccedilotildees de

regressatildeo ajustadas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos provenientes das

matrizes de corte alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg Natildeo foi verificado efeito da

dieta das matrizes sobre nenhuma das variaacuteveis paracircmetros avaliadas (Pgt005)

52

Contudo no periacuteodo final do desenvolvimento embrionaacuterio (18 a 21 dias) haacute maior

mortalidade (Tabela 5) Nesse periacuteodo haacute mudanccedila draacutestica do meio aquoso protegido

para o meio aeroacutebio totalmente diferente Nas aves essa fase final de desenvolvimento

inclui absorccedilatildeo de aacutegua retraccedilatildeo do saco vitelino maturaccedilatildeo funcional do pulmatildeo

transiccedilatildeo da respiraccedilatildeo coacuterio-alantoide para pulmonar bicagem e nascimento Ocorre

ao mesmo tempo o desenvolvimento da resposta homeoteacutermica (Oviedo-Roacutendon amp

Murakami 1998) Aleacutem disso nesse periacuteodo ocorre a mudanccedila pronunciada em

hormocircnios tireoideanos corticosteroideos hormocircnios do eixo somatotroacutepico

prolactina vasotocina e melatonina

Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg Morte

Embrionaacuteria (1 a 5 dias)

Morte (11 a 17 dias)

Morte (18 a 21

dias)

Bicado Morto

Morte por Contaminaccedilatildeo

Arg () 0943 264 416 889 264 125 1093 514 000 764 125 000 1243 250 000 836 000 125 1393 000 125 1514 125 000 1543 125 000 1406 125 125 CV () 20962 50785 9999 27439 36515 (Pgt005)

Conclusatildeo

A suplementaccedilatildeo das dietas de matrizes de corte com niacuteveis crescentes de

Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o

niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os

niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas

podendo ser utilizado o menor niacutevel de suplementaccedilatildeo ou seja 0943 de Arg

digestiacutevel sem prejuiacutezos

53

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IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e

paracircmetros oacutesseos da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos

Palavras-chave avaliaccedilatildeo de carcaccedila desempenho produtivo osso

58

IV - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

performance carcass yield and bone parameters of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine

(Arg) supplementation in broiler breeder henrsquos diet on performance carcass yield and bone parameters in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) These results indicate that it is necessary to feed the progeny with an Arg-supplemented diet to obtained better performance and bone quality Key words bone carcass evaluation productive performance

59

Introduccedilatildeo

As exigecircncias nutricionais para a maioria dos nutrientes satildeo estabelecidas com

base nas respostas produtivas mas em alguns casos a sauacutede eacute o criteacuterio principal A

nutriccedilatildeo de reprodutoras pesadas deve atender as exigecircncias da ave alcanccedilando bom

desempenho produtivo e ainda suprir as necessidades dos embriotildees e dos pintos

neonatos originados de seus ovos O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo

dependem completamente dos nutrientes contidos no ovo os quais satildeo originados da

dieta e do metabolismo das galinhas (Baiatildeo amp Lucio 2005) Assim a concentraccedilatildeo de

nutrientes disponiacuteveis no ovo para o desenvolvimento do embriatildeo eacute criacutetico e pode

influenciar o potencial de ganho de peso da progecircnie e caracteriacutesticas importantes de

desenvolvimento imunitaacuterio oacutesseo e muscular

O crescimento precoce no periacuteodo poacutes-eclosatildeo eacute influenciado por vaacuterios

fatores entre eles o conteuacutedo de resiacuteduos do saco viteliacutenico a ingestatildeo de alimento e de

aacutegua os niacuteveis de enzimas pancreaacuteticas e intestinais a aacuterea de superfiacutecie intestinal e a

digestibilidade global de nutrientes (Dibner 1996) As reservas contidas no saco

vitelino satildeo as primeiras fontes de nutrientes utilizadas pelo pintainho ao nascer Desse

modo quanto maior o tempo decorrido entre a eclosatildeo e o iniacutecio da ingestatildeo de

alimento e aacutegua maior a dependecircncia que o pintainho teraacute dessas reservas (Vieira amp

Pophal 2000) a dieta materna eacute a origem dos nutrientes para o embriatildeo (Vieira 2007)

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) afirmam que para matrizes pesadas existe uma pausa nas

pesquisas que visam determinar as exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos Embora os

aminoaacutecidos presentes na gema possam ser suficientes durante o processo de eclosatildeo

apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

desenvolvimento inicial (Otha et al 2004)

Os aminoaacutecidos sinteacuteticos disponiacuteveis no mercado proporcionam o atendimento

das exigecircncias nutricionais das aves principalmente em relaccedilatildeo aos aminoaacutecidos

60

limitantes Dentre esses aminoaacutecidos a arginina (Arg) eacute considerada o quinto

aminoaacutecido limitante para frangos de corte em dietas agrave base de milho e de farelo de

soja apoacutes metionina+cistina lisina treonina e valina (Corzo 2007) Como as aves natildeo

apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem exclusivamente da Arg sinteacutetica

principalmente no periacuteodo inicial de criaccedilatildeo (Allen amp Baker 1972) A suplementaccedilatildeo

da Arg eacute necessaacuteria para a formaccedilatildeo da ornitina a qual estaacute envolvida na siacutentese da

prolina que eacute utilizada para a formaccedilatildeo das poliaminas (espermidina espermina e

putrescina) Estas moleacuteculas estatildeo associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

A Arg aleacutem de serem constituintes de proteiacutenas participa como coadjuvante na

secreccedilatildeo de insulina pelas ceacutelulas β do pacircncreas (Bolea et al 1997) e na secreccedilatildeo do

hormocircnio de crescimento (GH) (Ghigo et al 1994) Os efeitos do GH satildeo mediados

pelos fatores de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Le Roith et al 2001) O

IGF-I eacute conhecido por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo

esqueleacutetico como a proliferaccedilatildeo e diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelite (Florini et al 1996)

e a agregaccedilatildeo de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos sobre a siacutentese e a

degradaccedilatildeo proteica (Duclos et al 1991 Coleman et al 1995 Duclos et al2005)

Outro efeito do GH ocorre em niacutevel do disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de

IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no crescimento dos ossos longos (Isaksson et

al 1987)

O enriquecimento dos ovos das matrizes com Arg bem como sua suplementaccedilatildeo

logo apoacutes a eclosatildeo pode trazer inuacutemeros benefiacutecios sobre o desenvolvimento da

progecircnie jaacute que o GH influenciado pela Arg tem sua siacutentese iniciada na fase

embrionaacuteria da ave (Harvey et al 2001)

Diante do exposto com este estudo objetivou-se testar a influecircncia da

suplementaccedilatildeo com L-Arginina na dieta das matrizes de corte sobre a progecircnie com

dieta suplementada ou natildeo suplementada com L-Arginina sobre o desempenho

paracircmetros oacutesseos e rendimento de carcaccedila dos frangos de corte

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

61

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

no delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina

incluiacutedos na dieta materna variando de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal (0

943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 35

aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada box foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado o

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

em todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as sobras de raccedilatildeo dos boxes foram pesadas para

ajustar o consumo de raccedilatildeo e da conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 2) As

dietas experimentais agrave base de milho e de farelo de soja foram formuladas de acordo

com os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e as recomendaccedilotildees nutricionais

62

propostas por Rostagno et al (2005) As aves controle receberam dieta sem

suplementaccedilatildeo de arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz

sobre o desempenho da progecircnie

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais basais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 017 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 1000 10000 Valores calculados PB () 2000 1850 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

63

Experimento 3 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina digestiacutevel na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes utilizando o delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina e seis repeticcedilotildees

com 32 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal inicial e de crescimento em

substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial corresponderam a 1300

1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela 2) A partir dos 22

dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300 1450 1600

e 1750 de arginina digestiacutevel (Tabela 3) O manejo realizado nesse experimento foi

conduzido conforme descrito no experimento anterior

Desempenho

Para ambos os experimentos com a progecircnie foram avaliados o desempenho

zooteacutecnico (ganho de peso consumo de raccedilatildeo e conversatildeo alimentar) Para avaliaccedilatildeo do

desempenho as raccedilotildees e as aves foram pesadas no iniacutecio do experimento aos 7 21 e 42

dias de idade

Paracircmetros oacutesseos

Os paracircmetros oacutesseos avaliados foram comprimento diacircmetro peso e calculado

o Iacutendice de Seedor Para avaliaccedilatildeo dos paracircmetros oacutesseos em ambos os experimentos

com a progecircnie apoacutes o sacrifiacutecio por meio de atordoamento seguido de sangria foram

coletados os fecircmures e as tiacutebias esquerdas de duas avesrepeticcedilatildeo aos 7 e 21 dias de

idade As amostras ficaram congeladas (-18ordmC) ateacute o iniacutecio das anaacutelises dos paracircmetros

oacutesseos que foram executadas conforme descrito a seguir

Apoacutes o descongelamento dos ossos foram retirados os tecidos envolventes

(tecido muscular aderido) com auxiacutelio de tesouras e pinccedilas Os ossos descongelados

foram pesados em balanccedila analiacutetica (g plusmn 00001) e o comprimento e o diacircmetro (na

64

porccedilatildeo meacutedia do osso) foram medidos usando paquiacutemetro eletrocircnico digital (capacidade

de 0 a 150 mm e resoluccedilatildeo de 001 mm)

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900

Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6456 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl Vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 1300 1450 1600 1750 1900 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

65

A partir do peso do osso e do seu comprimento foi calculado o Iacutendice de Seedor

(Seedor et al 1993) de acordo com a seguinte foacutermula Iacutendice de Seedor = Peso do

osso (mg)comprimento do osso (mm)

Este iacutendice eacute utilizado como indicativo da densidade oacutessea Quanto maior o

Iacutendice de Seedor maior a densidade da peccedila oacutessea e vice-versa

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000

mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

66

Rendimento de carcaccedila

Para determinaccedilatildeo do rendimento de carcaccedila foram utilizadas trecircs aves por

unidade experimental (15 avestratamento) identificadas com anilhas numeradas e

submetidas ao jejum por seis horas atordoadas com eletricidade (220W) e com

posterior sangria no final de cada experimento realizado com a progecircnie

Para caacutelculo do rendimento de carcaccedila foi considerado o peso da carcaccedila

eviscerada quente sem os peacutes cabeccedila e gordura abdominal em relaccedilatildeo ao peso vivo

que foi obtido individualmente antes do abate das aves Para rendimento dos cortes

nobres foi considerado o rendimento do peito inteiro com pele e ossos das pernas

(coxa e sobrecoxa) e das asas que foi calculado em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila

eviscerada

Para caacutelculo da gordura abdominal foi considerada a gordura presente ao redor da

cloaca da bolsa cloacal moela proventriacuteculo e dos muacutesculos abdominais adjacentes foi

retirada conforme descrito por Smith (1993) Em seguida foi pesada e tambeacutem

calculada em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila eviscerada

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

67

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

Resultados e discussatildeo

Os valores meacutedios de desempenho de frangos de corte provenientes de matrizes

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg com dieta suplementada e natildeo suplementada

com Arg estatildeo demonstrados nas Tabelas 5 e 6 respectivamente

No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) os frangos que receberam dietas

suplementadas com Arg apresentaram efeito linear positivo (Plt005) dos niacuteveis

crescentes de suplementaccedilatildeo com Arg sobre o ganho de peso O consumo de raccedilatildeo e a

conversatildeo alimentar foram influenciados de forma quadraacutetica (Plt005) e o niacutevel de

1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649

proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente (Figura 2)

Esses niacuteveis satildeo superiores aos encontrados por Atencio et al (2004) que apresentaram

os niacuteveis de 127 e 128 de Arg digestiacutevel para ganho de peso e conversatildeo

alimentar respectivamente Mendes et al (1997) e Brake et al (1998) observaram

melhor conversatildeo alimentar agrave medida que a Arg foi adicionada agraves dietas dos frangos de

corte

68Tabela 5 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito

0943 1093 1243 1393 1543

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 68749plusmn651 69813plusmn1553 69498plusmn876 71393plusmn2071 71148plusmn1009 466 ns

Consumo de raccedilatildeo g 108937plusmn973 108077plusmn2506 106938plusmn1143 108570plusmn2584 109617plusmn1424 420 ns

Conversatildeo alimentar gg 1585plusmn0015 1548plusmn0006 1539plusmn0014 1523plusmn0023 1541plusmn0004 224 Quadraacutetico1

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 182410plusmn1786 178280plusmn1963 183209plusmn2355 170699plusmn3272 177743plusmn3493 366 ns

Consumo de raccedilatildeo g 339169plusmn2597 332944plusmn4420 334432plusmn4460 328563plusmn5011 335512plusmn4351 311 ns

Conversatildeo alimentar gg 1859plusmn0017 1868plusmn0017 1825plusmn0008 1926plusmn0027 1889plusmn0014 230 ns

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 251160plusmn2118 248093plusmn2721 252708plusmn2327 242092plusmn4528 248891plusmn3614 314 ns

Consumo de raccedilatildeo g 448106plusmn3333 441022plusmn6500 441370plusmn5178 437133plusmn7327 445129plusmn4655 309 ns

Conversatildeo alimentar gg 1784plusmn0013 1777plusmn0011 1746plusmn0005 1807plusmn0021 1789plusmn0008 177 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 15844-0000270801X+0000000325260X2 R2 = 070

69Tabela 6 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito

1300 1450 1600 1750 1900

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 75785plusmn402 77320plusmn1073 78103plusmn635 79648plusmn670 80151plusmn344 212 Linear1

Consumo de raccedilatildeo g 89299plusmn1140 92124plusmn2246 103470plusmn4037 104782plusmn562 96677plusmn1665 557 Quadraacutetico2

Conversatildeo alimentar gg 1179plusmn0007 1192plusmn0031 1326plusmn0055 1316plusmn0012 1207plusmn0026 613 Quadraacutetico3

1150 1300 1450 1600 1750

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 177261plusmn2817 177088plusmn2760 180666plusmn2220 182398plusmn3067 177484plusmn2109 359 ns

Consumo de raccedilatildeo g 358840plusmn5051 353952plusmn5112 356084plusmn2723 358440plusmn6584 354362plusmn2670 322 ns

Conversatildeo alimentar gg 2025plusmn0013 1999plusmn0017 1972plusmn0016 1965plusmn0006 1997plusmn0013 165 Quadraacutetico4

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 253047plusmn2782 254408plusmn3313 258769plusmn2443 262046plusmn3324 257635plusmn2041 269 Linear5

Consumo de raccedilatildeo g 448139plusmn5104 446076plusmn6429 459554plusmn4864 463275plusmn6840 451039plusmn3651 297 ns

Conversatildeo alimentar gg 1771plusmn0009 1754plusmn0015 1777plusmn0022 1768plusmn0005 1751plusmn0012 192 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 759898+00737276X R2 = 081 2 Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=085 3 Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 = 096 4 Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031 5 Y = 253818+0112096X R2 = 017

70

149150151152153154155156157158159

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo A

limen

tar

Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Na progecircnie natildeo suplementada com dieta contendo Arg verificou-se efeito

quadraacutetico (Plt005) da nutriccedilatildeo das matrizes na conversatildeo alimentar (CA) (Figura 1)

sendo que 1359 de Arg dig proporcionou o melhor iacutendice Jaacute o consumo de raccedilatildeo e o

ganho de peso natildeo foram afetados (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo da matriz

O efeito observado da suplementaccedilatildeo com Arg das matrizes na CA de frangos de

corte natildeo suplementados com Arg ser atribuiacuteda ao aumento na concentraccedilatildeo desse

aminoaacutecido na gema a qual eacute responsaacutevel pela nutriccedilatildeo dos pintos durante o seu

desenvolvimento embrionaacuterio e nas primeiras horas de vida poacutes-eclosatildeo Esse aumento

pode ter efeito positivo no desenvolvimento muscular dos pintos uma vez que esse

aminoaacutecido tem accedilatildeo indireta na formaccedilatildeo muscular atraveacutes da siacutentese do hormocircnio de

crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO) Aleacutem disso a Arg ainda estaacute envolvida na

siacutentese da creatina e de poliaminas As poliaminas satildeo consideradas de importacircncia

nutricional no crescimento e desenvolvimento do intestino do neonato (Quinn et al

2002) Segundo Foye et al(2005) o acesso do embriatildeo a nutrientes pode melhorar o

desenvolvimento do sistema digestoacuterio a eclodibilidade e o desempenho dos frangos

Quando o comportamento da curva do consumo de raccedilatildeo dos frangos de corte

que receberam dietas suplementadas com Arg foi analisada verifica-se que apoacutes o

ponto de maior consumo de raccedilatildeo ocorre uma queda na curva (Figura 2) Esse efeito

pode ter sido ocasionado por um desequiliacutebrio dos aminoaacutecidos na dieta afetando

principalmente a relaccedilatildeo LysArg O antagonismo entre esses aminoaacutecidos prejudica a

absorccedilatildeo desses uma vez que ambos competem pelo mesmo siacutetio de absorccedilatildeo

Segundo Fernandes et al (2009) o efeito negativo da suplementaccedilatildeo de Arg

pode estar associado agrave incapacidade funcional dos rins em eliminar o excesso de ureia

formado pela degradaccedilatildeo da Arg Niacuteveis elevados de Arg promovem aumento na

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 070

1359

71

atividade da arginase renal produzindo ornitina e ureia (Stuz et al 1971) Este aumento

pode comprometer a siacutentese de NO visto que a Arg eacute a uacutenica via fisioloacutegica de

produccedilatildeo deste composto Adicionalmente a isso a elevaccedilatildeo da ureia plasmaacutetica de

acordo com Prabhakar et al (1997) pode inibir a accedilatildeo da oacutexido niacutetrico sintetase (NOS)

enzima que cataliza a reaccedilatildeo que converte Arg em NO O NO aleacutem de

neurotransmissor tambeacutem modula a liberaccedilatildeo de outros neurotransmissores (Estrada amp

Murilo-Carretero 2005) cujo envolvimento destas moleacuteculas na regulaccedilatildeo do apetite

vem sendo discutido (Denbow 1999)

750

800

850

900

950

1000

1050

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

sum

o de

raccedilatilde

o (g

)

730

740

750

760

770

780

790

800

810

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Gan

ho d

e pe

so (g

)

105

11

115

12

125

13

135

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo das matrizes com dietas com Arg natildeo afetou as variaacuteveis de

desempenho da progecircnie natildeo suplementada com Arg no periacuteodo de 21 a 42 dias de

idade (Pgt005) Poreacutem quando a progecircnie recebeu dieta com Arg verificou-se efeito

quadraacutetico para conversatildeo alimentar (Plt005) e o melhor resultado foi alcanccedilado com

1669 de Arg (Figura 3)

Sabe-se que a conversatildeo alimentar indica a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo da dieta para

o crescimento e deposiccedilatildeo muscular Assim o crescimento consiste em parte do

resultado da siacutentese proteica e a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo dependem da quantidade de

aminoaacutecidos que estatildeo sendo catabolizados (Sklan amp Noy 2004) Este processo

depende de energia para a biotransformaccedilatildeo e a eliminaccedilatildeo com custo metaboacutelico para

Y = 759898+00737276X R2 = 085

Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 =0 96

Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=081

1690

1649

72

incorporar um aminoaacutecido na cadeia proteica de 4 mol de ATP e de 6 mol de ATPg de

N para eliminaacute-lo (Mc Leoad 1997)

194195196197198199

2201202203204

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo de Arg durante todo o periacuteodo de criaccedilatildeo eacute essencial para que

a ave expresse todo o seu potencial geneacutetico principalmente em relaccedilatildeo ao ganho de

peso Para a progecircnie suplementada no periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade)

observou-se efeito linear positivo (Pgt005) no ganho de peso e para a progecircnie que natildeo

recebeu suplementaccedilatildeo natildeo foi observado efeito(Pgt005) da suplementaccedilatildeo das

matrizes nas variaacuteveis de desempenho (Figura 4)

2500

2520

2540

2560

2580

2600

2620

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Gan

ho d

e Pe

so (g

)

Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

De fato segundo Fernandes et al (2009) a suplementaccedilatildeo de Arg acima das

exigecircncias nas raccedilotildees iniciais (1 a 21 dias) dos frangos melhora o desempenho

produtivo das aves entretanto esse efeito eacute transiente natildeo havendo diferenccedila nestas

caracteriacutesticas na idade de abate

Na fase inicial de criaccedilatildeo a Arg eacute considerada um aminoaacutecido essencial na dieta

das aves visto que o ciclo da ureia natildeo eacute funcional nas aves Assim a incapacidade

desses animais em sintetizar Arg implica na necessidade do fornecimento desse

aminoaacutecido na dieta Aleacutem disso a Arg eacute considerada o quinto aminoaacutecido limitante

Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031

1669

Y = 253818+0112096X R2 = 017

73

para frangos em dietas agrave base de milho e de farelo de soja apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Segundo Ball et al (2007) a exigecircncia de Arg pelas aves eacute a mais alta entre as

espeacutecies de animais estudadas isso porque aleacutem da falta da siacutentese endoacutegena a taxa de

deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento das atuais linhagens de corte eacute muito alta

Os valores meacutedios de desempenho (Tabelas 5 e 6) apresentados durante o

periacuteodo experimental total (1 a 42 dias) satildeo muito proacuteximos Assim foi realizada a

anaacutelise conjunta de ambos os experimentos para confirmar a necessidade ou natildeo de

suplementaccedilatildeo da progecircnie com Arg na dieta No periacuteodo total de 1 a 42 dias (Tabela

7) a CA foi melhor na progecircnie que recebeu dieta suplementada apesar do CR ter sido

superior nessas aves demonstrando assim que a progecircnie suplementada com Arg

converte mais eficientemente a raccedilatildeo em massa muscular

Tabela 7 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg

1 a 21 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 70120plusmn585 108428plusmn789 1547plusmn0007

Progecircnie (suplementada) 78202plusmn406 97271plusmn1456 1243plusmn0018

CV () 473 913 0011 22 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 178468plusmn1380 334124plusmn1877 1874plusmn010

Progecircnie (suplementada) 178979plusmn1160 356346plusmn1981 1992plusmn0007

CV () 1182 1999 0007 1 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 248588plusmn1487 442552plusmn2419b 1781plusmn0006b

Progecircnie (suplementada) 257181plusmn1315 453617plusmn2597a 1764plusmn0006a

CV () 1347 2477 0006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Dentre os paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada

apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis

suplementares de Arg recebidos pelas matrizes (Figura 5)

74

Tabela 8 ndash Meacutedias e erro padratildeo de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito Paracircmetros 0943 1093 1243 1393 1543

de Carcaccedila 6944plusmn025 6863plusmn044 6987plusmn033 6953plusmn028 7009plusmn029 115 Linear1

de Peito 3587plusmn028 3519plusmn017 3662plusmn032 3639plusmn041 3618plusmn042 228 ns

de Coxa 3041plusmn032 3085plusmn019 2970plusmn033 2999plusmn032 3021plusmn022 229 ns

de Asa 1142plusmn016 1129plusmn014 1118plusmn006 1104plusmn020 1110plusmn014 329 ns

de Dorso 2279plusmn020 2352plusmn026 2267plusmn014 2287plusmn030 2262plusmn030 266 ns

de Gordura abdominal 295plusmn015 325plusmn014 292plusmn016 367plusmn019 290plusmn011 1220 ns ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 690720+000146984X R2 = 081 Tabela 9 ndash Meacutedias e erros padratildeo de rendimento da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito Paracircmetros 1150 1300 1450 1600 1750

de Carcaccedila 6993plusmn029 7022plusmn028 7138plusmn033 7128plusmn020 7160plusmn031 099 Linear1

de Peito 3579plusmn030 3584plusmn077 3690plusmn021 3651plusmn028 3698plusmn019 277 Linear2

de Coxa 3126plusmn030 3108plusmn066 3027plusmn025 3026plusmn023 3045plusmn020 295 Linear3

de Asa 1137plusmn022 1123plusmn015 1105plusmn017 1095plusmn015 1096plusmn021 398 Linear4

de Dorso 2272plusmn033 2286plusmn057 2263plusmn028 2273plusmn028 2260plusmn048 436 ns

de Gordura abdominal 314plusmn013 311plusmn013 238plusmn007 279plusmn014 285plusmn007 964 Quadraacutetico5 1 Y = 700017+000293620X R2= 045 2 Y = 357918+000203737X R2 = 027 3 Y = 311542-000163610X R2=021 4 Y = 113323-000072978X R2 = 085 5 Y = 322863-000316200X+000000424975X2R2=030 ns = natildeo significativo

75

686

688

69

692

694

696

698

70

702

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

d

e C

arca

ccedila

Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Al-Murrani (1982) demonstrou que injetando uma mistura de aminoaacutecidos nos

embriotildees em crescimento nos ovos de matrizes de corte resultam em aumento no peso

do pinto e no ganho de peso dos frangos de corte aos 56 dias de idade quando estes

foram comparados com os natildeo tratados De fato o peso do embriatildeo e dos pintos eacute

influenciado pelo perfil nutricional da gema por sua utilizaccedilatildeo pelo pintos apoacutes o

nascimento (Otha et al 1999)

Quando os frangos receberam dietas suplementadas com Arg houve aumento

linear positivo (Plt005) da porcentagem de carcaccedila e de peito poreacutem as porcentagens

de pernas e de asa apresentaram queda linear (Plt005) (Figura 6) Esses efeitos

provavelmente ocorreram pela accedilatildeo indireta da Arg pela formaccedilatildeo muscular atraveacutes da

siacutentese do hormocircnio do crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO)

A Arg eacute constituinte de proteiacutenas e estaacute envolvida na secreccedilatildeo de insulina pelo

pacircncreas (Bolea et al 1997) e do GH pela hipoacutefise (Merimee et al 1969) Os efeitos

desses hormocircnios se manifestam por meio da secreccedilatildeo secundaacuteria dos fatores de

crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Roith et al 2001) O IGF-I eacute conhecido

por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo esqueleacutetico como

a proliferaccedilatildeo e a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelites (Florini et al 1996) e a agregaccedilatildeo

de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos na siacutentese e na degradaccedilatildeo proteica

(Duclos et al 2005)

Outro mecanismo de accedilatildeo da Arg nas fibras musculares estaacute relacionada com agrave

accedilatildeo do oacutexido niacutetrico O NO eacute sintetizado pela oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) a qual eacute

expressada pelas fibras do muacutesculo esqueleacutetico (Reid 2001) A atividade da NOS

variam nos diferentes tipos de muacutesculos sendo que nos muacutesculos de contraccedilatildeo raacutepida

verifica-se maior accedilatildeo desta do que nos muacutesculos de contraccedilatildeo lenta (Reid 2001)

Y = 690720+000146984X R2 = 081

76

Assim o efeito observado nos diferentes cortes provavelmente ocorreu em virtude da

predominacircncia de fibras brancas ou Fast Glycolytic (FG) no peito Em contrapartida os

muacutesculos da coxa sobrecoxa e da asa possuem predominacircncia de fibras vermelhas ou

Slow Oxidative (SO) que satildeo de contraccedilatildeo lenta (Sartori amp Gonzaacuteles 2002) e pouco

afetada pela accedilatildeo da NOS

O teor de gordura abdominal presente na carcaccedila de frangos eacute um dos melhores

indicativos de qualidade da carcaccedila Quando os frangos foram suplementados com

niacuteveis de Arg verificou-se efeito quadraacutetico (Plt005) para essa caracteriacutestica em que o

menor teor de gordura abdominal foi obtido com 1672 de Arg dig (Figura 6) A

queda observada ateacute esse niacutevel pode ser explicada pela accedilatildeo do GH via IGF-I que induz

a siacutentese de proteiacutenas por estimular a captaccedilatildeo de aminoaacutecidos e a transcriccedilatildeo e a

traduccedilatildeo do mRNA em vaacuterios tecidos-alvo Diminui o catabolismo de proteiacutenas por

atuar diretamente na liberaccedilatildeo de aacutecidos graxos do tecido adiposo aumentando a sua

conversatildeo em acetil-CoA fonte de energia para os tecidos perifeacutericos A partir desse

ponto onde verifica-se o menor acuacutemulo de gordura ocorre novamente o aumento na

deposiccedilatildeo de gordura abdominal Isso provavelmente se deve ao excesso de aminoaacutecido

na dieta A degradaccedilatildeo desse excesso leva a excreccedilatildeo de nitrogecircnio na urina na forma

de amocircnia e a produccedilatildeo de moleacuteculas com esqueleto carbocircnico que satildeo usadas na

gliconeogecircnese e na lipogecircnese

Segundo Shutte amp Pack (1995) e Leclerq (1998) a suplementaccedilatildeo e o

balanceamento dos aminoaacutecidos das dietas podem promover aumento no ganho de

carcaccedila principalmente em relaccedilatildeo ao peito (Pophal et al 2004) e reduccedilatildeo de gordura

abdominal (Vieira et al 2004)

Mendes et al (1997) verificaram que o aumento da relaccedilatildeo ArgLys melhorou o

rendimento de carcaccedila e reduziu a gordura abdominal em frangos de corte Costa et al

(2001) observaram que agrave medida em que se aumentou a relaccedilatildeo ArgLys houve efeito

linear crescente para o rendimento de perna e decrescente para a gordura abdominal Jaacute

Fernandes et al (2009) natildeo observaram efeito da suplementaccedilatildeo de Arg nas variaacuteveis de

rendimento de carcaccedila analisadas o que provavelmente ocorreu porque diferentemente

do presente trabalho a suplementaccedilatildeo de Arg foi realizada apenas na fase inicial de

criaccedilatildeo (1 a 21 dias de idade)

77

69

695

70

705

71

715

72

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

arca

ccedila

35352354356358

36362364366368

37372

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

P

eito

296298

30302304306308

31312314

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

oxa

106

107

108

109

11

111

112

113

114

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

A

sa

2

22

24

26

28

3

32

34

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

G

ordu

ra a

bdom

inal

Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Outra possibilidade eacute que essas caracteriacutesticas de rendimento de carcaccedila foram

influenciadas pelos niacuteveis dieteacuteticos de Arg que estatildeo acima da exigecircncia das aves

Resultado contraacuterio foi obtido por Atencio et al (2004) que trabalhando com niacuteveis

crescentes de Arg natildeo verificaram efeito no rendimento de carcaccedila e de cortes

avaliados e estes concluiacuteram que os niacuteveis estudados estavam dentro da exigecircncia das

aves

Na anaacutelise conjunta do rendimento de carcaccedila dos experimentos da progecircnie

que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg (Tabela 10) demonstrou-se que a

presenccedila de Arg na dieta promove maior deposiccedilatildeo muscular na coxa e menor acuacutemulo

de gordura abdominal na carcaccedila

Y = 322863-000316200X+000000424975X2 R2 = 030

1672

Y = 700017+000293620X R2 = 045 Y = 357918+000203737X R2 = 027

Y = 113323-000072978X R2 = 085 Y = 311542-000163610X R2 = 021

Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

78

Tabela 10 ndash Meacutedias de percentagem de carcaccedila (CARC) percentagem de peito (PEITO) percentagem de coxa (COXA) percentagem de asa (ASA) percentagem de gordura abdominal (GORDURA) das progecircnies suplementadas ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

CARC PEITO COXA ASA GORDURAProgecircnie

(ssuplementaccedilatildeo) 6951plusmn016 3605plusmn017 3023plusmn014b 1121plusmn007 307plusmn007ordf

Progecircnie (suplementada) 7088plusmn017 3640plusmn020 3066plusmn017ordf 1111plusmn008 285plusmn007b

CV () 014 017 015 007 006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Com relaccedilatildeo aos paracircmetros oacutesseos dos frangos de corte que receberam dietas

sem suplementaccedilatildeo de Arg (Tabela 11) apenas o diacircmetro de tiacutebia aos sete dias de

idade foi afetado de forma quadraacutetica (Plt005) pela suplementaccedilatildeo das matrizes a

partir do niacutevel 1196 de Arg (Figura 7) demonstrando assim que inclusotildees de Arg

acima da exigecircncia promove a melhora dessa caracteriacutestica Segundo Wu amp Morris

(1998) a suplementaccedilatildeo de Arg em niacuteveis elevados promove aumento na atividade da

arginase renal eleva os niacuteveis de ornitina que participa da biossiacutentese das poliaminas

envolvidas no processo de multiplicaccedilatildeo celular melhorando desta forma o suporte

oacutesseo Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram aumento na concentraccedilatildeo

plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez secretado pela

hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio receptor e

indiretamente via IGF-I e II nos tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos

do GH ocorre no disco epifisaacuterio em que atua estimulando a siacutentese de IGF-I o qual

atua paracrinamente induzindo mitogecircnese o que resulta no crescimento dos ossos

longos (Isaksson et al 1987)

Para os paracircmetros morfoloacutegicos dos ossos dos frangos que receberam dietas

contendo suplementaccedilatildeo de Arg verifica-se efeito linear crescente (Plt005) dos niacuteveis

de arginina para o comprimento e diacircmetro do fecircmur e da tiacutebia O mesmo

comportamento foi observado para o iacutendice de Seedor medida indireta da densidade

oacutessea para ambos os ossos aos 7 dias de idade (Figura 8)

79

Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Fecircmur Tiacutebia Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arg na dieta materna

()

7 dias

0943 2930plusmn034 286plusmn008 2803plusmn027 4154plusmn047 271plusmn005 2925plusmn078 1093 2929plusmn042 293plusmn008 2990plusmn123 4162plusmn062 265plusmn005 2945plusmn096 1243 2911plusmn031 283plusmn008 2603plusmn078 4175plusmn042 258plusmn004 2733plusmn063 1393 2912plusmn046 295plusmn008 2920plusmn086 4172plusmn062 273plusmn003 3008plusmn117 1543 2983plusmn031 293plusmn009 2877plusmn068 4269plusmn039 275plusmn002 2897plusmn038

CV 313 690 712 306 377 701 Regressatildeo ns ns ns Ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- ----- ----- 081 -----

21 dias

0943 5001plusmn056 594plusmn019 10198plusmn294 7128plusmn141 526plusmn012 9621plusmn202 1093 5064plusmn036 632plusmn015 10928plusmn175 7197plusmn086 576plusmn008 10720plusmn182 1243 4937plusmn065 574plusmn013 9956plusmn396 6911plusmn094 514plusmn023 9899plusmn357 1393 5002plusmn062 569plusmn011 9822plusmn346 6912plusmn123 512plusmn009 9537plusmn341 1543 5035plusmn026 613plusmn020 11288plusmn337 7005plusmn135 535plusmn011 10928plusmn339

CV 252 657 747 411 635 711 Regressatildeo ns ns ns Ns ns ns R2 ----- ----- ----- ----- ----- -----

ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

80

Tabela 12 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Paracircmetros oacutesseos Fecircmur Tiacutebia

Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arginina () 7 dias 1300 3007plusmn042 309plusmn011 3194plusmn102 4260plusmn041 285plusmn012 3164plusmn122 1450 3022plusmn036 313plusmn007 3333plusmn098 4311plusmn055 293plusmn008 3202plusmn087 1600 3074plusmn023 321plusmn007 3435plusmn102 4352plusmn024 292plusmn004 3405plusmn101 1750 3098plusmn011 322plusmn007 3348plusmn089 4324plusmn044 293plusmn003 3315plusmn114 1900 3058plusmn015 322plusmn012 3540plusmn140 4350plusmn019 305plusmn005 3503plusmn108 CV 225 712 781 220 608 789 Regressatildeo Linear1 ns Linear2 Ns Linear3 Linear4 R2 023 ----- 020 ----- 030 045

21 dias 1300 1300 1450 1600 1750 553plusmn016 9974plusmn408 1450 5032plusmn031 595plusmn015 9973plusmn343 7122plusmn058 533plusmn019 9675plusmn313 1600 5062plusmn068 614plusmn009 10623plusmn306 7102plusmn041 566plusmn015 10453plusmn286 1750 5134plusmn043 597plusmn013 10024plusmn226 7341plusmn180 548plusmn007 9577plusmn168 1900 5111plusmn044 615plusmn013 10942plusmn185 7145plusmn064 562plusmn008 10751plusmn333 CV 231 567 732 333 619 757 Regressatildeo ns ns Linear5 Ns ns ns R2 ----- ----- 030 ----- ---- -----

NS = natildeo significativo 1 Y = 301662+000117500X 2 Y = 322856+000471280X 3 Y = 285333+0000799183X 4 Y = 315921+000526700X 5 Y = 983310+00149518X

255

26

265

27

275

28

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Diacirc

met

ro d

a Tiacute

bia

(mm

)

Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados encontrados para essa idade estatildeo de acordo com os encontrados

por Fernandes (2007) que encontrou efeito linear crescente para o iacutendice de Seedor

quando as aves foram alimentadas com Arg na dieta Aos 21 dias de idade apenas o

iacutendice de Seedor foi afetado de forma linear (Plt005) crescente com o aumento dos

niacuteveis de Arg (Figura 9) O comportamento positivo da suplementaccedilatildeo de arginina sobre

a morfologia do fecircmur e da tiacutebia pressupotildee melhor densidade desses ossos Segundo

Sekine et al (1994) os aminoaacutecidos no o crescimento transverso do osso e essa accedilatildeo

facilita a formaccedilatildeo da matriz e a calcificaccedilatildeo oacutessea

Aleacutem da accedilatildeo da Arg sobre os ossos indiretamente via IGF-I esta tambeacutem eacute

conhecida como precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo pelo qual ela poderia exercer os

seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo Hukkanem et al (1999) sugerem que o

NO pode participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento

298

30

302

304

306

308

31

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Com

prim

ento

- Fecirc

mur

(mm

)

30531

31532

32533

33534

34535

355

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - F

ecircmur

Y = 301662+000117500X R2 = 023 Y = 322856+000471280X R2 = 020

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

Arginina dig ()

82

26

27

28

29

3

31

32

33

34

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Diacirc

met

ro -

Tiacutebi

a (m

m)

30305

31315

32325

33335

34345

35

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - T

iacutebia

Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada ou natildeo com Arg avaliados em

conjunto mostraram que a suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg melhorou o comprimento do

fecircmur e a espessura da tiacutebia Este resultado pode contribuir para melhorar a qualidade

dos ossos dos frangos uma vez que esse eacute um dos maiores problemas enfrentados na

atualidade na avicultura comercial

Tabela 13 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

FC (mm)

FE (mm) FSEE TC

(mm) TE

(mm) TSEE

7 dias Progecircnie

(ssuplementaccedilatildeo)

2933plusmn016

290plusmn003

2838plusmn042

4186plusmn023

268plusmn002

2902plusmn038

Progecircnie (suplementada)

3052plusmn013

317plusmn004

3369plusmn049

4319plusmn017

293plusmn003

3317plusmn050

CV () 014 004 042 021 0026 043 21 dias

Progecircnie (ssuplementaccedil

atildeo)

5008plusmn023b

596plusmn008

10438plusmn170

7031plusmn053

533plusmn007b

10141plusmn162

Progecircnie (suplementada)

5079plusmn021ordf

607plusmn006

10282plusmn150

7157plusmn044

552plusmn006ordf

10086plusmn154

CV () 016 007 140 048 006 136 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Y = 315921+000526700X R2 = 045 Y = 285333+0000799183X R2 = 030

83

96597

97598

98599

995100

1005101

1015102

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig

Iacutendi

ce d

e Se

edor

- Fecirc

mur

Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade

Conclusatildeo

De acordo com os resultados observados conclui-se que os niacuteveis dieteacuteticos de

Arg na dieta das matrizes de corte foram suficientes para melhorar o desempenho da

progecircnie somente na fase inicial de crescimento (1-21 dias de idade) Quando a dieta da

progecircnie tambeacutem foi suplementada com Arg os paracircmetros de desempenho

rendimento de carcaccedila e qualidade oacutessea satildeo melhorados em ambas as fases de criaccedilatildeo

(1-21 dias e 22 a 42 dias de idade) com melhorias imprescindiacuteveis para a qualidade de

carne como a reduccedilatildeo da gordura abdominal

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89

V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos sete dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavra-chave arginina ELISA fitohemaglutinina sistema imune

V - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

humoral and cellular immunity response of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level being considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses

Key words arginine ELISA phytohemagglutinin immune system

91

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo da matriz afeta o desempenho dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias de

vida portanto a necessidade da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos O sistema imune das aves difere dos mamiacuteferos em algumas

caracteriacutesticas particularmente nos aspectos de estrutura e de diferenciaccedilatildeo dos oacutergatildeos

linfoides (Jeurissen et al 1994) cujo desenvolvimento se inicia durante a vida

embrionaacuteria e se prolonga apoacutes a eclosatildeo ou nascimento

As uacuteltimas horas de incubaccedilatildeo e os primeiros dias de vida poacutes-eclosatildeo satildeo

fundamentais para que este desenvolvimento se complete Somente apoacutes a segunda

semana de vida a ave seraacute capaz de produzir suas proacuteprias imunoglobulinas Ateacute laacute a

imunidade herdada da matildee pela absorccedilatildeo das imunoglobulinas presentes no ovo eacute o

uacutenico mecanismo de defesa do neonato contra as agressotildees do meio externo apoacutes a

eclosatildeo (Maiorka et al 2006)

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas A arginina (Arg) eacute

considerada um aminoaacutecido essencial para aves sobretudo na fase inicial por que o

ciclo bioquiacutemico da ureia natildeo eacute funcional em aves Assim estas natildeo podem sintetizar

Arg e satildeo portanto dependentes do fornecimento deste aminoaacutecido nas dietas Dentre

as espeacutecies animais estudadas as aves tecircm a mais alta exigecircncia de Arg (Ball et al

2007) que se deve tambeacutem agrave alta taxa de deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento

das atuais linhagens de corte e o antagonismo com a Lys

A Arg eacute necessaacuteria para siacutentese de vaacuterias compostos tais como ornitina

poliaminas prolina creatina de proteiacutenas oacutexido niacutetrico (NO) e citrulina aleacutem de

92

glutamato e agmatina em mamiacuteferos A Arg eacute tambeacutem considerada um potente

secretagogo aumentando a liberaccedilatildeo na corrente sanguiacutenea da insulina hormocircnio do

crescimento (GH) e fator de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I) (Newsholme et

al 2005) Esta accedilatildeo eacute em consequecircncia da raacutepida despolarizaccedilatildeo da membrana

plasmaacutetica ligada ao transporte de aminoaacutecidos com a cadeia lateral positiva

De acordo com Le Flocrsquoh et al (2004) os animais estimulados

imunologicamente podem ter suas necessidades de Arg aumentadas Duas rotas do

metabolismo da Arg satildeo identificadas e conhecidas por ter efeitos imunomodulatoacuterios

diretos A primeira na qual a Arg eacute convertida a ornitina gerando poliaminas que tecircm

papel chave na divisatildeo celular siacutentese de DNA e regulaccedilatildeo do ciclo celular A segunda

corresponde agrave siacutentese do NO induzida por vaacuterios de estiacutemulos inflamatoacuterios como as

endotoxinas bacterianas e as citocinas Essa rota eacute essencial para a atividade citotoacutexica

de macroacutefagos O NO tambeacutem estimula a vasodilataccedilatildeo local e favorece ainda a

reparaccedilatildeo tecidual (Bredt amp Snyder 1994)

Com este trabalho objetivou-se avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina na

dieta das matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie

suplementadas ou natildeo

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

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dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

em um delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-

Arginina incluiacutedos na dieta materna (0 150 300 450 e 600 mgkg da dieta materna)

que equivaleram aos niacuteveis de 0 9431093 12431393 e 1 543 de Arg

digestiacutevel com seis repeticcedilotildees com 35 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo estes substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada boxe foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado um

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

durante todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as aves e as sobras de raccedilatildeo do boxe foram pesadas

ao mesmo tempo para ajustar o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 1) As

dietas experimentais agrave base de milho e farelo de soja foram formuladas de acordo com

os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e recomendaccedilotildees nutricionais de

Rostagno et al (2005) As aves receberam uma uacutenica raccedilatildeo sem suplementaccedilatildeo de

arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz sobre o desempenho

da progecircnie

94

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 018 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 18500 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

95

Experimento 2 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes atraveacutes de um delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na

dieta materna de 0 a 600 mgkg da dieta de Arg digestiacutevel acima da recomendaccedilatildeo dos

frangos de corte e seis repeticcedilotildees com 32 aves cada totalizando 30 unidades

experimentais

O manejo realizado nesse experimento foi conduzido conforme descrito no

experimento anterior com diferenccedila com relaccedilatildeo ao tipo de dieta utilizada

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg da dieta acima da exigecircncia dos frangos de corte agrave raccedilatildeo

basal inicial em substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial

corresponderam a 1300 1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela

2) A partir dos 22 dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300

1450 1600 e 1750 de Arg digestiacutevel (Tabela 3)

96

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900 Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6457 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 130 145 160 175 190 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

97

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 075 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 1000 1000 1000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI

VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

Colheita de Sangue e Anaacutelise de Tiacutetulos vacinais

No 7ordm dia de vida antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm foram coletadas

amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo As aves foram vacinadas contra a

doenccedila de New Castle (Fort-Dodgereg) via ocular na dose de 003 mL por ave aos sete e

21 dias de idade A venopunccedilatildeo foi realizada mediante contenccedilatildeo fiacutesica manual dos

98

animais preferencialmente na veia jugular direita com seringa de 3 mL e agulha 13x45

e uma quantia de sangue coletada em torno de 1 do peso corporal dos animais O

sangue foi acondicionado em tubos de vidro identificados sem anticoagulante para

obtenccedilatildeo de soro sanguiacuteneo No soro foi avaliada a titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais

contra o viacuterus de Doenccedila Newcastle pelo teste imunoenzimaacutetico (ELISA-teste) As

anaacutelises foram processadas em kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent

Assay) do Laboratoacuterio Idexxreg e os dados obtidos foram expressos em absorbacircncia Os

dados de titulaccedilatildeo de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Anaacutelise Histomorfomeacutetrica

No 7ordm e 21ordm dia de idade o timo a bolsa cloacal o baccedilo e o fiacutegado de duas aves

por repeticcedilatildeo foram coletados totalizando doze aves por tratamento Para a realizaccedilatildeo

dessa coleta as aves foram submetidas ao atordoamento por choque e posterior sangria

Apoacutes o sacrifiacutecio as aves foram pesadas individualmente e as carcaccedilas dessecadas para

remoccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides (Timo Baccedilo e Bolsa de Fabricius) O peso dos oacutergatildeos

linfoides foi obtido imediatamente apoacutes a dessecaccedilatildeo e remoccedilatildeo dos tecidos exoacutegenos

Os oacutergatildeos coletados foram pesados em balanccedila de precisatildeo e o peso da ave foi

devidamente anotado

O peso relativo de cada oacutergatildeo foi obtido pela foacutermula

Peso relativo = (peso oacutergatildeopeso vivo) x 100

Para a medida histomorfomeacutetrica dos foliacuteculos linfoides as bolsas cloacais e o

fiacutegado foram acondicionadas em frascos contendo soluccedilatildeo de formol tamponado a 10

(De Tolosa et al 2003) com finalidade de manter a integridade dos tecidos apoacutes a

morte preservando a arquitetura celular As peccedilas foram incluiacutedas em parafina e levadas

ao microacutetomo rotativo para a realizaccedilatildeo dos cortes transversais no centro do oacutergatildeo com

sete microcircmetros de espessura e corados pelo meacutetodo da hematoxilina e eosina (HE) As

lacircminas foram escaneadas usando-se um ldquoscaner HP ScanJet II v25rdquo sendo o

ldquosoftwarerdquo utilizado para o tratamento das imagens o ldquoPaint Shop Pro v50rdquo A

imagem foi digitalizada brilho (variaacutevel entre 125 e 145) contraste 185 e escala de

800 As imagens foram gravadas com extensatildeo jpg e levadas ao analisador de

imagens Para a leitura das imagens foi utilizado um analisador de imagem

computadorizado IMAGE PROPLUS 52 da Miacutedia Cibertecnics Foi mensurada a

altura de trecircs dobras do tecido linfoide de cada repeticcedilatildeo (12 aves por tratamento) e

destes valores foi obtida a meacutedia

99

Nas amostras de fiacutegado foi analisada a presenccedila de aglomerados linfoides As

lacircminas com porccedilotildees do fiacutegado foram analisadas em toda sua extensatildeo e os

aglomerados linfoides foram quantificados atraveacutes de microscopia de luz com aumento

de 10X (Olympus BH2 Olympus America INC NY USA)

Fitohemaglutinina (PHA)

Aos 35 dias de idade duas aves por repeticcedilatildeo totalizando 12 aves por tratamento

foram marcadas com anilhas numeradas e utilizadas para avaliar a imunidade mediada

por ceacutelulas in vivo (Corrier amp DeLoach 1990) Cada ave foi inoculada

intradermicamente no espaccedilo interdigital entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata direita com 01

mL de uma soluccedilatildeo fitohemaglutinina PHA-Mreg (1057601 - Invitrogen) Como controle

negativo 01 mL de soro fisioloacutegico esteacuteril foi inoculado entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata

esquerda O espessamento da pele de ambas as patas foi aferido em miliacutemetros

utilizando-se um paquiacutemetro digital antes da inoculaccedilatildeo e apoacutes trecircs seis 12 e 24 horas

apoacutes a inoculaccedilatildeo O caacutelculo (Corrier amp DeLoach 1990) apresentou-se da seguinte

forma Reaccedilatildeo = resposta a fitohemaglutinina ndash resposta do controle na qual a resposta

a fitohemaglutinina eacute medida pela espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo menos

a espessura no tempo zero (antes da inoculaccedilatildeo) A resposta do controle eacute medida pela

espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo (Soro) menos a espessura no tempo zero

(antes da inoculaccedilatildeo)

Avaliaccedilatildeo da Atividade Fagociacutetica de Macroacutefagos

Para avaliaccedilatildeo da atividade fagociacutetica de macroacutefagos foram utilizadas duas aves

por repeticcedilatildeo totalizando quatro aves por tratamento As aves foram inoculadas no 35ordm

dia de vida atraveacutes de injeccedilatildeo intra-abdominal de Sephadex G-50reg (Sigma) a 3 (10

mL100g de peso vivo) (Qureshi et al 1986 Gore amp Qureshi 1997 Konjufca 2004)

Utilizaram-se para esse procedimento cateteres intravasculares G-14 Apoacutes 42

horas as aves foram submetidas a atordoamento por eletronarcose e sacrificadas atraveacutes

de desligamento cervical Foram lavadas (detergente neutro) e sanitizadas (aacutelcool 70)

As aves foram transportadas ao laboratoacuterio onde se procedeu a abertura da cavidade

abdominal que foi posteriormente lavada com 20 mL de soluccedilatildeo de PBS esteacuteril

heparinizada contendo 05 UIL (Liqueminereg 25000 UI5mL ndash Roche)

Coletaram-se aproximadamente 15 mL de liacutequido abdominal com auxiacutelio de

pipetas Pasteur que foi imediatamente acondicionado em tubos Falcon em banho de

100

gelo O material foi centrifugado a 1500 rpm10 minutos sendo o ldquopelletrdquo

ressuspendido em 2 mL de meio RPMI 1640reg (Sigma) Adicionou-se 150 μL dessa

suspensatildeo a cada well da placa de cultura (24 poccedilos) contendo lamiacutenula de 13 mm de

diacircmetro Incubou-se a temperatura ambiente por uma hora Lavou-se a placa com PBS

esteacuteril gelado para remover as ceacutelulas natildeo aderentes Em seguida adicionou-se 150 μL

de suspensatildeo a 3 de eritroacutecitos de carneiros em meio RPMI 1640reg (Sigma)

incubando-se em temperatura ambiente em concentraccedilatildeo de 5 de gaacutes carbocircnico por

uma hora Lavou-se com PBS esteacuteril gelado para remover os eritroacutecitos que natildeo

aderiram Em seguida realizou-se a coloraccedilatildeo utilizando-se kit comercial (Panoacutetico

Raacutepido LBreg - Laborclin)

Apoacutes 24 horas as lacircminas foram montadas utilizando-se Permountreg Foram

contados em cada lamiacutenula 300 macroacutefagos e verificado o nuacutemero destas ceacutelulas que

continham hemaacuteceas fagocitadas A atividade fagociacutetica foi calculada considerando-se o

nuacutemero de macroacutefagos contendo hemaacuteceas fagocitadas dividido pelo nuacutemero total de

macroacutefagos contados

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

101

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Resultados e Discussatildeo

Os dados meacutedios dos pesos relativos de oacutergatildeos linfoides de frangos de corte

alimentados com dietas natildeo suplementadas estatildeo na Tabela 5 A suplementaccedilatildeo das

matrizes de corte natildeo influenciou o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie

natildeo suplementada com Arg (Pgt005) Da mesma maneira quando houve a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg para a progecircnie tambeacutem natildeo foi verificado (Pgt005)

efeito sobre o peso relativo dos oacutergatildeos linfoides dessas aves (Tabela 6)

102

Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg das Matrizes () 7 dias 21 dias

0943 058plusmn003 054plusmn004 1093 055plusmn003 056plusmn005 1243 056plusmn003 057plusmn003 1393 052plusmn004 057plusmn004 1543 052plusmn003 051plusmn005 CV 1410 1840

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

0943 006plusmn0005 011plusmn001 1093 008plusmn0007 011plusmn001 1243 012plusmn0036 009plusmn001 1393 007plusmn0007 010plusmn001 1543 009plusmn0007 010plusmn001 CV 4968 2463

Regressatildeo ns ns Baccedilo()

0943 015plusmn001 024plusmn001 1093 017plusmn001 022plusmn002 1243 016plusmn001 021plusmn001 1393 015plusmn001 022plusmn003 1543 013plusmn001 021plusmn001 CV 1885 1868

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

O timo e a bolsa cloacal satildeo oacutergatildeos linfoides primaacuterios que representam siacutetios

de maturaccedilatildeo de linfoacutecitos T e B respectivamente Estes oacutergatildeos tecircm fundamental

importacircncia no periacuteodo poacutes-eclosatildeo poreacutem agrave medida que as aves se desenvolvem e se

aproximam da maturidade sexual sofrem involuccedilatildeo fisioloacutegica (Morgullis 2002)

No contexto do desenvolvimento e maturaccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides trabalhos

desenvolvidos com mamiacuteferos demonstram que as respostas imunes podem ser

influenciadas pela Arg dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al 1998 Lewis amp

Langkamp-Henken 2000) Experimentos desenvolvidos com animais jovens

demonstraram efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina como o aumento

do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos tiacutemicos Os efeitos

imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais estressados ou

imunossupremidos

103

Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias

1300 053plusmn005 056plusmn004 1450 057plusmn004 057plusmn003 1600 059plusmn004 059plusmn003 1750 051plusmn003 048plusmn005 1900 058plusmn004 053plusmn004 CV 1910 1790

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

1300 016plusmn0011 025plusmn002 1450 015plusmn0012 020plusmn001 1600 018plusmn0007 022plusmn002 1750 019plusmn0016 026plusmn003 1900 015plusmn0007 023plusmn001 CV 1621 2021

Regressatildeo ns ns Baccedilo ()

1300 007plusmn0009 008plusmn001 1450 009plusmn0008 010plusmn001 1600 008plusmn0006 009plusmn001 1750 008plusmn0005 011plusmn001 1900 007plusmn0007 010plusmn001 CV 2227 2151

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

Para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de Arg foram

observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

nutricionais estabelecidas Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de

Arg plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular (Kidd 2004)

Ao contraacuterio dos resultados observados nesse experimento Jahanian (2009)

observou que animais na fase inicial com dietas suplementadas com Arg e com baixo

niacutevel proteico apresentaram aumento do peso relativo do timo indicando assim que a

Arg eacute necessaacuteria para a resposta oacutetima da imunidade celular

Quando se contrastam os dados do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (Tabela 7)

verificou-se a influencia da suplementaccedilatildeo de Arg no peso da bolsa cloacal (Plt005) no

periacuteodo inicial de criaccedilatildeo Esse aumento eacute de grande importacircncia uma vez que a bolsa

cloacal eacute o principal siacutetio de maturaccedilatildeo dos linfoacutecitos B que satildeo essenciais ao sistema

imune das aves Na fase de 1 a 7 dias de idade esse incremento pode refletir a melhoria

104

das condiccedilotildees imunitaacuterias jaacute que nesse periacuteodo os desafios sanitaacuterios podem

comprometer todo desempenho dessa ave ateacute o final de sua criaccedilatildeo

Tabela 7 ndash Meacutedias e erro padratildeo do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

7 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada) 054plusmn001 015plusmn0005b 0085plusmn0008

Progecircnie (suplementada) 056plusmn002 017plusmn0006ordf 0079plusmn0003

CV () 002 0005 0006 21 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada)

055plusmn001 022plusmn0007 011plusmn0005

Progecircnie (suplementada)

054plusmn002 023plusmn0009 009plusmn0004

CV () 002 008 0004 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

A anaacutelise histomorfomeacutetrica do fiacutegado natildeo mostrou influecircncia (Pgt005) das

dietas das matrizes nos aglomerados linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo (Tabela

8) Da mesma maneira as dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal natildeo foram

influenciadas (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo ou natildeo de Arg na dieta (Tabela 8)

Existe relaccedilatildeo direta entre o fiacutegado e a bolsa cloacal Nas aves os linfoacutecitos B

responsaacuteveis pela produccedilatildeo de anticorpos envolvidos na resposta imunoloacutegica humoral

satildeo produzidos no fiacutegado do embriatildeo no saco viteliacutenico e na medula oacutessea na fase

inicial da incubaccedilatildeo Apoacutes isso migram para a bolsa cloacal e sofrem amadurecimento

e diferenciaccedilatildeo por ateacute dez semanas Daiacute partem para colonizar outros oacutergatildeos como o

baccedilo e a glacircndula de Harder (Butcher amp Miles 2003) A bolsa cloacal eacute constituiacuteda de

linfoacutecitos incrustados em tecido epitelial cujas dobras se estendem no interior do

luacutemen onde se espalham os foliacuteculos linfoides Seus foliacuteculos contecircm mais de 90 de

ceacutelulas B (Tizard 1998)

105

Tabela 8 - Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg

Aglomerados Linfoacuteides Comprimento das dobras Progecircnie natildeo Suplementada Progecircnie natildeo Suplementada

Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 0943 105plusmn010 196plusmn041 1443plusmn097 3247plusmn198 1093 098plusmn028 137plusmn021 1394plusmn225 3066plusmn240 1243 077plusmn004 178plusmn029 1503plusmn060 3042plusmn109 1393 080plusmn015 170plusmn043 1449plusmn068 3112plusmn187 1543 096plusmn018 232plusmn037 1464plusmn149 3222plusmn195 CV() 4398 4708 563 915 Regressatildeo ns ns ns ns Progecircnie Suplementada Progecircnie Suplementada 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 1300 076plusmn010 168plusmn035 1936plusmn206 3535plusmn191 1450 049plusmn015 216plusmn041 1865plusmn022 4027plusmn1244 1600 072plusmn024 189plusmn022 2035plusmn064 3331plusmn036 1750 053plusmn005 192plusmn036 2195plusmn139 4487plusmn1540 1900 053plusmn012 213plusmn025 1905plusmn128 2562plusmn111 CV() 5807 4141 473 5359 Regressatildeo ns ns ns ns

Assim a progecircnie que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg natildeo

apresentou produccedilatildeo de linfoacutecitos B aumentada nem a aacuterea de desenvolvimento e

diferenciaccedilatildeo dos linfoacutecitos B prejudicada ou melhorada pela Arg (Pgt005)

Na Tabela 9 estatildeo agraves meacutedias obtidas da resposta imune celular da progecircnie com

dieta suplementada medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) para estiacutemulo de

proliferaccedilatildeo celular Dentro desse contexto observou-se que 12 horas apoacutes a injeccedilatildeo de

PHA foi possiacutevel verificar efeito quadraacutetico com aumento (Plt005) na resposta celular

das aves alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg em que a maior

resposta foi obtida com 1574 de Arg dig (Figura 1)

Segundo Corrier amp DeLoach (1990) a aplicaccedilatildeo desse teste permite a raacutepida

avaliaccedilatildeo da competecircncia imunoloacutegica celular Os basoacutefilos ceacutelulas comumente

associadas a esses processos apresentam heparina e proteases na composiccedilatildeo de seus

gracircnulos agindo intensamente nos processos de hipersensibilidade Aleacutem disso

produzem citocinas cuja participaccedilatildeo estaacute ligada aos processos inflamatoacuterios (Abbas et

al 2007)

106

Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Arginina 3 horas 6 horas 12 horas 24 horas

1300 1010plusmn0062 0793plusmn0041 0549plusmn0097 0506plusmn0036 1450 0853plusmn0077 0639plusmn0065 0631plusmn0051 0450plusmn0133 1600 0918plusmn0053 0738plusmn0040 0702plusmn0052 0543plusmn0065 1750 0797plusmn0074 0783plusmn0058 0597plusmn0061 0552plusmn0066 1900 0933plusmn0044 0777plusmn0038 0499plusmn0059 0453plusmn0062 CV 1715 1630 2724 3875 Regresatildeo ns ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- 093 -----

ns = Natildeo significativo 1 Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2 R2 = 093

Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Quando se avaliou a atividade fagociacutetica dos macroacutefagos da progecircnie

suplementada e natildeo suplementada verificou-se que os niacuteveis crescentes de Arg na dieta

natildeo afetaram (Pgt005) essa funccedilatildeo (Tabela 10) Os macroacutefagos satildeo ceacutelulas do sistema

mononuclear fagocitaacuterio (McCorkle 1998) integrantes da imunidade inata das aves

importantes tambeacutem para a imunidade adaptativa (Abbas et al 2008) atuando nos

processos de defesa do organismo destruindo agentes estranhos e tambeacutem secretando

citocinas que atuam no processo inflamatoacuterio As principais funccedilotildees executadas por essa

ceacutelula satildeo a fagocitose destruiccedilatildeo de bacteacuterias (Qureshi et al 1986) secreccedilatildeo de

prostaglandinas e citocinas e apresentaccedilatildeo de antiacutegeno para desenvolvimento da

resposta imune celular (Abbas et al 2008)

Segundo Johaniam (2009) satildeo identificadas duas vias de accedilatildeo

imunomodulatoacuteria da Arg in vivo A primeira ocorre atraveacutes da accedilatildeo da arginase que

converte a Arg em ureia e ornitina Neste processo ocorre a produccedilatildeo de poliaminas

pela accedilatildeo da ornitina decarboxilase Esta rota da siacutentese de poliaminas pode ser o

Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2R2 = 093

1574

107

caminho pelo qual a Arg aumenta a mitogecircnese dos linfoacutecitos (Klein amp Morris 1978)

A segunda via ocorre pela siacutentese de NO a partir da a partir da Arg pela accedilatildeo do oacutexido

niacutetrico sintetase resultando na formaccedilatildeo de oacutexido niacutetrico e citrulina Essa rota eacute

essencial para atividade citotoacutexica dos macroacutefagos

Tabela 10 ndash Meacutedias e erros padrotildees da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Macroacutefagos com eritroacutecitosmacroacutefagos contados Arginina Progecircnie Suplementada

1300 1570plusmn529 1450 2030plusmn480 1600 1650plusmn359 1750 2150plusmn500 1900 1830plusmn250 CV 545 Regresatildeo ns ns = Natildeo significativo

Quando avaliados os tiacutetulos de anticorpos da progecircnie verificou-se que a

alimentaccedilatildeo das matrizes com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg natildeo influenciou

os tiacutetulos de anticorpos (Pgt005) da progecircnie natildeo suplementada (Tabela 11) Para as

aves suplementadas verifica-se um efeito linear decrescente (Plt005) aos sete dias de

idade e efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade em que o niacutevel de 1674 de

Arg dig proporcionou o maior tiacutetulo de anticorpos (Tabela 12)

Os resultados observados na progecircnie suplementada mostraram-se compatiacuteveis

com as respostas das aves a campo nas quais inicialmente satildeo observados maiores

tiacutetulos de anticorpos decorrentes da imunidade materna seguido de uma queda que nas

condiccedilotildees experimentais eacute resultado da neutralizaccedilatildeo desses anticorpos pelos antiacutegenos

vacinais e por fim uma nova elevaccedilatildeo dos tiacutetulos

Este resultado concorda com o observado por outros autores Tayade et al

(2006) demonstraram que a resposta vacinal contra o viacuterus da doenccedila de Gumboro de

frangos suplementados com 2 de Arg foi 20 mais eficiente que a resposta induzida

apenas pela vacina A elevada resposta humoral e a proteccedilatildeo observada no grupo de

aves vacinado e com dieta suplementada com Arg segundo estes autores pode ser

atribuiacuteda ao nuacutemero de funccedilotildees imunorregulatoacuterias da Arg sobre o sistema

imunoloacutegico A Arg eacute necessaacuteria para a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas B e tambeacutem estaacute

envolvida na liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da bolsa ou da medula oacutessea (De Jonge et al

108

2002) Ainda segundo Abdukalykova e Ruiz-Feria (2006) niacuteveis adicionais de Arg

podem acelerar a produccedilatildeo de anticorpos em frangos de corte

29

295

3

305

31

315

32

325

33

335

34

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s(7

dia

s)

0

05

1

15

2

25

3

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s (2

8 di

as)

Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

1674

109

Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Niacuteveis de Arginina na dieta materna ()

Idade 0943 1093 1243 1393 1543 CV() Regressatildeo R2

07 dias 317plusmn099 323plusmn011 301plusmn008 324plusmn007 316plusmn015 831 ns -----

14 dias 262plusmn009 257plusmn003 242plusmn011 262plusmn011 257plusmn003 792 ns -----

21 dias 232plusmn010 247plusmn005 211plusmn010 228plusmn011 241plusmn007 941 ns -----

28 dias 241plusmn028 186plusmn014 248plusmn022 231plusmn019 214plusmn024 2378 ns -----

35 dias 275plusmn017 284plusmn015 271plusmn013 286plusmn020 291plusmn011 1361 ns -----

Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades

Niacuteveis de Arginina ()

Idade 1300 1450 1600 1750 1900 CV() Regressatildeo R2

07 dias 331plusmn012 336plusmn010 301plusmn012 329plusmn009 299plusmn009 798 Linear1 012

14 dias 226plusmn008 218plusmn019 219plusmn023 207plusmn014 245plusmn009 1715 ns -----

21 dias 232plusmn007 239plusmn006 236plusmn006 246plusmn012 240plusmn009 829 ns -----

Niacuteveis de Arginina ()

1150 1300 1450 1600 1750 CV() Regressatildeo R2

28 dias 171plusmn035 279plusmn009 298plusmn006 278plusmn019 240plusmn012 1961 Quadraacutetica2 026

35 dias 268plusmn023 299plusmn012 296plusmn018 280plusmn023 313plusmn011 1535 ns -----

110

Conclusatildeo

As dietas suplementadas com Arg mostraram-se necessaacuterias para o oacutetimo

desempenho do sistema imune celular e humoral da progecircnie natildeo bastando somente agrave

suplementaccedilatildeo das matrizes de corte

Referecircncias

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metabolism beta-cell function and diabetes Clinical Science v108 p185194 2005

ROSTAGNO HS ALBINO LFT DONZELE JL et al Tabelas brasileiras para

aves e suiacutenos ndash Composiccedilatildeo de alimentos e exigecircncias nutricionais Viccedilosa UFV Departamento de Zootecnia186p2005

iv

Ao meu pai e minha matildee pela forccedila amor carinho e incentivo nos momentos mais difiacuteceis da minha vida Ao meu marido Junior pelo amor incondicional pela cumplicidade e incentivo

pela compreensatildeo pelos momentos de ausecircncia

Aos meus irmatildeos Sara e Jonatah pela amizade e companheirismo Ao meu filho Eduardo por suportar as dificuldades ao meu lado

DEDICO

v

AGRADECIMENTOS

Agrave Universidade Estadual de Maringaacute por ter possibilitado desenvolver este trabalho

Agrave minha orientadora Profa Dra Alice Eiko Murakami pela sua orientaccedilatildeo pelo

reconhecimento do meu trabalho pelos ldquopuxotildees de orelhardquo que sempre me ajudaram em

todos os momentos a ser uma pessoa melhor pelos conselhos e pela dedicaccedilatildeo agrave minha

pessoa por todos esses anos e principalmente pela amizade construiacuteda com respeito e

carinho ao longo desta caminhada

Aos professores do Programa de Poacutes-graduaccedilatildeo em Zootecnia da Universidade Estadual

de Maringaacute pelo acesso ao conhecimento e pela paciecircncia a mim dispensada em especial

ao Prof Dr Elias Nunes Martins pelos valiosos conselhos e amizade e pelos auxiacutelios as

ldquoestatiacutesticasrdquo muito obrigada

Aos secretaacuterios do Programa de Poacutes- graduaccedilatildeo Rose e Denilson por todo ldquosocorrordquo

durante o meu periacuteodo no programa pelas conversas e amizade obrigada por tudo

As ldquoMariasrdquo teacutecnicas do laboratoacuterio de Histologia da UEM Eurides e Dos Anjos pela

amizade e auxiacutelio e toda ajuda durante as minhas anaacutelises

Aos funcionaacuterios da Fazenda Experimental de Iguatemi da UEM pelo precioso auxiacutelio

durante a conduccedilatildeo deste e todos os trabalhos realizados durante o meu periacuteodo nessa

universidade

A todos os colegas que fizeram parte da minha caminhada pela ajuda e companheirismos

em todos os momentos faacuteceis e difiacuteceis desta jornada pelo auxiacutelio durante a coleta e

conduccedilatildeo dos experimentos que me permitiram esta tese Ana Ton Jovanir Maacutercia

vi

Suelen Rodrigo Luis Daniel Ana Carolina Ana Flaacutevia Leandro Rafael Fernando

Karla Alexandra Mariana Celma Andressa Faacutebio

Agraves minhas eternas irmatildes Jovanir Inecircs Muller Fernandes e Maacutercia Izumi Sakamoto pela

amizade companheirismo pela forccedila em todos os momentos de alegria e em que estive

em dificuldades minha eterna gratidatildeo por tudo que vocecircs fizeram por mim

A minha irmatildezinha Sussu e seu ldquomaridatildeordquo Mauriacutecio pelo apoio e amizade pelo

companheirismo e auxiacutelio nos momentos em que precisei muito obrigada por tudo

As mais novas amigas e companheiras Cinthia e Cris muito obrigada pela amizade

incondicional que vocecircs me dedicaram durante esse tempo que apesar de natildeo ter sido tatildeo

longo valeu por uma eternidade muito obrigada por tudo

A minha irmatilde Sara que durante a minha gravidez foi meu braccedilo direito na conduccedilatildeo deste

trabalho auxiliando e principalmente me levantando nos momentos de dificuldade

obrigada por vocecirc fazer parte da minha vida

Ao Waldir Pereira da Silva Junior meu profundo agradecimento pelo companheirismo

incentivo amizade por estar ao meu lado e compreender meus momentos de ausecircncia

pelo amor incondicional a mim dedicado meu eterno amor a vocecirc

A todos que direta ou indiretamente contribuiacuteram para esse trabalho meu muito obrigada

vii

BIOGRAFIA

LUCIANA MARIA GARCIA DE SOUZA DA SILVA filha de Vera Luacutecia

Aparecida Garcia de Souza e Joatildeo Gusman de Souza nasceu em Maringaacute Paranaacute no dia

18 de maio de 1981

Em marccedilo de 2005 conclui o curso de Zootecnia pela Universidade Estadual de

Maringaacute

Em marccedilo de 2005 iniciou no curso de Poacutes- graduaccedilatildeo em Zootecnia em niacutevel de

mestrado aacuterea de concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal na Universidade Estadual de Maringaacute e

no dia 3 de marccedilo de 2007 submeteu-se a banca para defesa de Dissertaccedilatildeo

Em marccedilo de 2007 iniciou no curso de Poacutes-graduaccedilatildeo em Zootecnia em niacutevel de

doutorado aacuterea de concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal na Universidade Estadual de Maringaacute

realizando estudos na aacuterea de nutriccedilatildeo de frangos de corte No dia 17 de novembro de

2010 submeteu-se a banca para defesa da Tese

viii

IacuteNDICE

Paacutegina

LISTA DE TABELAS ix LISTA DE FIGURAS xi I - INTRODUCcedilAtildeO 17 11 REVISAtildeO DA LITERATURA 19

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie 19 112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves 20 REFEREcircNCIAS 32

II - OBJETIVOS GERAIS 39 21 Objetivos Especiacuteficos 39

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo 40

Resumo 40 Introduccedilatildeo 42 Material e meacutetodos 43 Resultados e Discussatildeo 47 Conclusatildeo 52 Referecircncias 53

IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie 57

Resumo 57 Introduccedilatildeo 59 Material e Meacutetodos 60 Resultados e discussatildeo 67 Conclusatildeo 83 Referecircncias 83

V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie 89

Resumo 89 Introduccedilatildeo 91 Material e Meacutetodos 92 Resultados e Discussatildeo 101 Conclusatildeo 110 Referecircncias 110

VI - CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 113

ix

LISTA DE TABELAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental 45 Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 48 Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 50 Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico 51 Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 52

Capiacutetulo IV Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg48 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)50 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)51 Tabela 4 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg55 Tabela 5 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg56 Tabela 6 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg60 Tabela 7 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementadas provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg64 Tabela 8 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento da progecircnie suplementada com dietas suplementadas contendo niacuteveis de Arg64

x

Tabela 9 ndash Meacutedias de porcentagem de carcaccedila (CARC) porcentagem de peito (PEITO) porcentagem de coxa (COXA) porcentagem de asa (ASA) porcentagem de gordura abdominal (GORDURA) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg65 Tabela 10 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de arginina67 Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg69 Tabela 12 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade72

Capiacutetulo V Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das dietas experimentais das matrizes de frangos de corte no periacuteodo experimental83 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg85 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)86 Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (21-42 dias)86 Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de arginina89 Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg90 Tabela 7 ndash Meacutedias do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade91 Tabela 8 ndash Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg92 Tabela 10 ndash Meacutedias e erro padratildeo da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg94 Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades94

xi

LISTA DE FIGURAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel33 Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg34 Capiacutetulo IV Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 70 Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 71 Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 72 Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 72 Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 75 Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 77 Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 81 Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade 82 Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade 83

xii

Capiacutetulo IV Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 106 Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 108

RESUMO

Foram realizados trecircs experimentos com o objetivo de avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na nutriccedilatildeo de matrizes de corte e a modulaccedilatildeo da resposta imune e do desenvolvimento esqueleacutetico na progecircnie No primeiro experimento avaliou-se o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e qualidade de ovos Para tanto foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se um aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve uma queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arginina respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo O segundo experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo

xiv

suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos O terceiro experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos 7 dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavras-chave desempenho produtivo qualidade de ovos qualidade oacutessea sistema imune

ABSTRACT

Three experiments were conducted to evaluate the effect of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder nutrition and modulation of the immune systems and skeletal development in the progeny In the first experiment the effect of Arg supplementation on heavy breed henrsquos productive performance and egg quality was evaluated ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance In the second experiment the effects of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder hens diet on performance carcass yield and bone parameters was evaluated in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units The body weight gain feed intake and feed gain ratio was calculated to evaluate the performance The carcass yield was evaluated by the carcass percentage leg breast and wing yield and abdominal fat The bone quality was assessed by the analysis of the femur and tibia lengths diameters and Seedor index In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that

16

just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) In third experiment the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses was evaluated in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by the diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses According to the results it is possible to conclude that supplementation with Arg provided improvements in the eggs weight of broilers and evaluations in the progeny demonstrated that there is a need to supplement the diet with Arg in order to get the best performance index bone quality and humoral and cellular immunity

Key-words bone quality egg quality productive performance immune system

17

I - INTRODUCcedilAtildeO

Vaacuterios fatores afetam o desempenho de frangos de corte como a geneacutetica

nutriccedilatildeo sanidade manejo e ambiecircncia Entretanto fatores estabelecidos antes mesmo da

incubaccedilatildeo e da eclosatildeo como a idade das matrizes e o peso dos ovos satildeo preponderantes

para o desenvolvimento inicial das aves tendo consequecircncia em todo o crescimento

(Pedroso et al 2005)

As exigecircncias nutricionais de uma reprodutora leve ou pesada devem atender agraves

necessidades do embriatildeo em desenvolvimento fora do organismo materno (Campos

2003) O ovo eacute formado basicamente pela casca (10) clara (60) e gema (30) Desse

modo os niacuteveis nutricionais da matriz devem ser dirigidos para formaccedilatildeo desses

componentes porque estes satildeo responsaacuteveis pela nutriccedilatildeo do embriatildeo

O ovo tem aacutegua proteiacutena gordura e cinza na sua composiccedilatildeo quiacutemica A gema

apresenta papel importante no desenvolvimento do embriatildeo visto que este formaraacute o saco

vitelino apoacutes o quarto dia de vida O saco vitelino constitui a uacutenica fonte fornecedora de

energia para o desenvolvimento do embriatildeo Deste satildeo absorvidos todos os nutrientes pelo

embriatildeo como partiacuteculas lipoproteicas e proteicas Estas uacuteltimas podem ser absorvidas

intactas porque a produccedilatildeo de proteinases pelo embriatildeo aumenta de acordo com o seu

desenvolvimento Aleacutem disso parte da absorccedilatildeo de proteiacutenas ocorre na forma de

aminoaacutecidos (Campos 2003) O saco viteliacutenico tambeacutem eacute a uacutenica fonte de

18

imunoglobulinas produzidas pelo organismo materno capazes de manter certa imunidade

ao pintinho no periacuteodo inicial de sua vida

Os aminoaacutecidos presentes na gema podem ser suficientes durante o processo de

eclosatildeo apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

processo de crescimento (Ohta et al 2004)

Logo apoacutes a eclosatildeo a maior parte da demanda de energia e de proteiacutena das aves eacute

direcionada para o desenvolvimento do trato digestoacuterio principalmente intestinos (Fisher

da Silva 2001) Este crescimento preferencial ocorre tanto na presenccedila quanto na ausecircncia

do alimento (Laurentiz et al 2001) Quando estes nutrientes natildeo satildeo fornecidos pela

raccedilatildeo os neonatos utilizam o saco vitelino como suplemento energeacutetico e como fonte

proteica para o crescimento intestinal Entretanto segundo Dibner et al (1998) 20 da

proteiacutena residual do saco vitelino satildeo representadas pelas imunoglobulinas maternais e

que a gordura bruta residual eacute constituiacuteda basicamente de trigliceacuterides fosfoliacutepides e

colesterol

Assim a nutriccedilatildeo das matrizes de corte pode enriquecer a gema e produzir pintos

de alta qualidade Entretanto com o passar dos anos natildeo houve muita diferenccedila nos niacuteveis

nutricionais propostos para nutriccedilatildeo das matrizes de corte o que ocorre principalmente em

razatildeo das grandes diferenccedilas existentes entre as linhagens comerciais existentes Segundo

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) para matrizes pesadas existe uma pausa nas pesquisas orientadas

para a determinaccedilatildeo das exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos essenciais

Dentre os aminoaacutecidos utilizados na formulaccedilatildeo de raccedilotildees principalmente as

voltadas para o conceito de proteiacutena ideal a arginina (Arg) pode exercer efeitos positivos

pois este aleacutem de ser constituintes de proteiacutenas ainda estaacute envolvido na siacutentese de creatina

e de poliaminas de prolina como substrato para a siacutentese de colaacutegeno e do oacutexido niacutetrico

(NO) e na secreccedilatildeo do hormocircnio de crescimento (GH) e dos fatores de crescimento

19

semelhantes agrave insulina (IGF) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave (Harvey et

al 2001)

Como as aves natildeo apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem

exclusivamente da Arg sinteacutetica principalmente no periacuteodo inicial de produccedilatildeo (Allen amp

Baker 1972) Aleacutem disso em dietas agrave base de milho e de farelo de soja a Arg eacute

considerada o quinto aminoaacutecido limitante para frangos de corte apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Vaacuterios autores tecircm proposto que a nutriccedilatildeo das matrizes afeta o desempenho dos

pintos (Uni amp Ferket 2004) Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem

nos primeiros dias de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com

funccedilatildeo imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade

materna e na resposta imune dos pintos

11 REVISAtildeO DA LITERATURA

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie

O sistema imune das aves eacute complexo e compreende uma seacuterie de funccedilotildees

celulares e fatores soluacuteveis que trabalham juntos para produzir uma resposta imune

protetora Os oacutergatildeos linfoides primaacuterios das aves satildeo a bolsa cloacal e o timo Os oacutergatildeos

como medula oacutessea baccedilo glacircndula Harderiana placas de Payer e tonsilas cecais satildeo

considerados oacutergatildeos linfoides secundaacuterios

Com base nesses componentes as aves podem apresentar respostas a vaacuterios

antiacutegenos divididas em dois tipos a imunidade passiva e a ativa A imunidade passiva eacute

transferida para a progecircnie pelas reprodutoras via saco viteliacutenico Atraveacutes da imunidade

passiva eacute possiacutevel desenvolver a resposta imune especiacutefica sem que haja um envolvimento

do organismo pela transferecircncia de ceacutelulas ou de anticorpos de outro indiviacuteduo jaacute

20

imunizado A imunidade ativa por sua vez eacute decorrente da exposiccedilatildeo das aves a um

antiacutegeno estranho que pode ser de origem vacinal ou um agente patoacutegeno

Nas aves a imunidade passiva eacute passada da matriz ateacute o pintinho pelo do ovo no

processo de produccedilatildeo de ovo imunoglobulinas (Ig) Y presentes no sangue das matrizes

chega ateacute o oviduto e se deposita na gema do ovo enquanto durante a secreccedilatildeo do

albuacutemen que ocorre na porccedilatildeo magnum do oviduto secreta tambeacutem IgA e IgM Eacute essa

imunidade enviada pela matildee que protege esses pintos nos primeiros dias de vida contra

vaacuterios agentes que estatildeo presentes no campo (Santin 2009) Haacute relaccedilatildeo direta entre os

tiacutetulos de seacutericos de Ig da matildee e a quantidade repassada ao ovo Assim eacute de extrema

importacircncia que o pintinho absorva adequadamente e rapidamente essa gema para que ele

tenha acesso a estas Ig (Santin 2009) Maiorka (2002) demonstrou que jejum de aacutegua e de

alimento por 12 horas apoacutes a eclosatildeo diminui a absorccedilatildeo da gema e afetam o

desenvolvimento da mucosa intestinal de frangos de corte Vargas et al (2009) mostraram

que os tiacutetulos seacutericos de anticorpos contra a vacina de doenccedila de Newcastle (NDV) foram

mais baixos em pintos submetidos a 12 horas de jejum poacutes eclosatildeo quando comparados

agravequeles que consumiram aacutegua e alimento logo apoacutes a eclosatildeo De fato o atraso no

consumo de alimento dos animais pode diminuir a absorccedilatildeo da gema e consequentemente

a passagem da imunidade passiva da matildee para o pintinho Dibner et al(1998) sugerem que

quando o pintinho natildeo recebe rapidamente aacutegua e alimento apoacutes a eclosatildeo acaba utilizando

as Ig e os fosfolipiacutedios da gema como alimento diminuindo assim sua funccedilatildeo na proteccedilatildeo

animal

112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves

A Arg eacute um aminoaacutecido essencial em aves principalmente na fase inicial Isso

ocorre porque as aves diferentemente dos mamiacuteferos natildeo possuem o ciclo da ureia

funcional necessitando da fonte exoacutegena de suplementaccedilatildeo Evoy et al (1998) em seu

21

trabalho relataram o papel da Arg como essencial na estimulaccedilatildeo do sistema imune do

hospedeiro

As vias metaboacutelicas que envolvem a Arg satildeo complexas e demonstradas

resumidamente a seguir

Adaptado de Duff amp Daly (2002)

Juntamente com a complexidade dessas vias soma-se a variada localizaccedilatildeo das

enzimas envolvidas no meio intracelular como nos tecidos Com exceccedilatildeo dos enteroacutecitos

22

em receacutem-nascidos nenhum outro tipo de ceacutelula conteacutem todas as enzimas necessaacuterias para

a siacutentese de Arg (Wu amp Morris 1998)

A Arg eacute ativamente absorvida pelo intestino pelo sistema de transporte soacutedio-

dependente A alta atividade da arginase no enteroacutecito converte cerca de 40 da dieta de

Arg em citrulina a qual eacute liberada na circulaccedilatildeo (Castillo et al 1993) Quando a Arg cai

na corrente sanguiacutenea cerca de 15 eacute eliminada pelo fiacutegado e o restante entra na

circulaccedilatildeo sistecircmica (OrsquoSullivan et al 1998) A Arginina eacute sintetizada a partir da

citrulina principalmente nos rins e eacute entatildeo liberada na circulaccedilatildeo para ser utilizada pelos

demais tecidos

O oacutexido niacutetrico (NO) constitui uma das menores e mais simples moleacuteculas

biossintetizadas (Morris et al 1994) O NO eacute um radical livre gasoso inorgacircnico e

identificado como mensageiro molecular extremamente laacutebil (meia vida bioloacutegica em

torno de segundos) O NO media vaacuterios fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente

do endoteacutelio citotoxicidade mediada por macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria Eacute produzido pelas ceacutelulas endoteliais neurocircnios macroacutefagos e

tecidos entre eles a hipoacutefise que age paracrinamente exercendo efeitos intra e

extracelulares em vaacuterios sistemas fisioloacutegicos (Kutchai 1998)

Palmer et al (1988) demonstraram que a L-Arg eacute o precursor fisioloacutegico do NO

nas ceacutelulas endoteliais Com base nesta informaccedilatildeo vaacuterios grupos de investigadores

suspeitaram que o NO fosse o provaacutevel precursor da siacutentese de NO3- e NO2

- pelos

macroacutefagos Subsequentemente esta hipoacutetese foi comprovada e ficou demonstrado que o

NO eacute o principal mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a

mais importante moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al 1988 e Marletta

et al 1988 citados por Dusse et al 2003)

23

Este composto eacute produzido a partir da oxidaccedilatildeo da L-arginina pela accedilatildeo da enzima

oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) uma enzima Ca++-calmodulina-dependente Por este

mecanismo eacute gerado citrulina como produto final (Kiechele amp Malinski 1993)

O surgimento do NO como agente da sinalizaccedilatildeo celular eacute uma importante

descoberta da fisiologia humana e animal nos uacuteltimos anos O NO participa de vaacuterios

fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente do endoteacutelio citotoxicidade mediada por

macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O NO eacute o principal

mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a mais importante

moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al1988 e Marletta et al 1988 citados

por Dusse et al 2003)

Existem trecircs formas de NOS sendo a NOS induzida (iNOS) e duas NOS

constitutivas (cNOS) O NO eacute sintetizado pela ativaccedilatildeo da cNOS basal (em ceacutelulas

endoteliais vasculares e neurocircnios) segundos a minutos apoacutes o aumento na concentraccedilatildeo

de caacutelcio em resposta agrave ativaccedilatildeo de receptores da superfiacutecie celular e mecanismos de

transduccedilatildeo de sinal (Adams 1996)

Ao contraacuterio a iNOS natildeo depende de caacutelcio para ativaccedilatildeo mas a siacutentese de

mRNA da iNOS eacute necessaacuteria para sua atividade A NOS induzida natildeo eacute detectaacutevel em

condiccedilotildees basais As LPS ou endotoxinas bacterianas junto com citocinas como TNFα

IL-1β ou IF-γ induzem a siacutentese de iNOS de duas a quatro horas apoacutes a exposiccedilatildeo ao

agente A iNOS requer siacutentese proteica para sua expressatildeo e sua atividade persiste por

mais de 24 horas e sintetiza NO em concentraccedilotildees nanomolares 1000 vezes maior que

cNOS (Davies et al 1995)

A expressatildeo da iNOS eacute o resultado da resposta inflamatoacuteria localizada ou difusa

resultante da infecccedilatildeo ou dano tecidual Segundo Salvemini et al (1996) o NO eacute potente

vasodilatador e seu envolvimento na resposta inflamatoacuteria pode ter relaccedilatildeo com sua

24

habilidade em aumentar a permeabilidade vascular e o edema atraveacutes de mudanccedilas no

fluxo sanguiacuteneo local e do aumento na produccedilatildeo de prostaglandinas proinflamatoacuterias

A expressatildeo de iNOS em endotoxemia eacute citoprotetoacuteria inibindo microtrombose

pela prevenccedilatildeo de adesatildeo plaquetaacuteria e danos mediados por radicais Por outro lado a

citotoxidade do NO resulta da sua accedilatildeo direta ou da sua reaccedilatildeo com outros compostos

liberados durante o processo inflamatoacuterio A base bioquiacutemica para a accedilatildeo direta do NO

consiste na sua reaccedilatildeo com metais (especialmente o ferro) presentes nas enzimas do seu

alvo (Moncada 1991 James 1995) Desta forma satildeo inativadas enzimas cruciais para o

ciclo de Krebs para a cadeia de transporte de eleacutetrons para a siacutentese de DNA e para o

mecanismo de proliferaccedilatildeo celular Em processos infecciosos ceacutelulas ativadas como

macroacutefagos neutroacutefilos e ceacutelulas endoteliais secretam simultaneamente NO e

intermediaacuterios reativos do oxigecircnio a accedilatildeo citotoacutexica indireta do NO consiste

principalmente na sua reaccedilatildeo com esses intermediaacuterios do oxigecircnio

Durante a resposta imune mediada por ceacutelulas a maioria das ceacutelulas adquire a

capacidade de expressar a forma de NO induzida (Nathan amp Xie 1994) A accedilatildeo do NO

depende da ceacutelula T reconhecer um antiacutegeno especiacutefico embora sua accedilatildeo na resposta

imune mediada por ceacutelulas natildeo seja especiacutefica (Schmidt amp Walter 2004)

Costa et al (2003) corroboram com o fato de que a fagocitose por si soacute natildeo induz a

siacutentese de NO A fagocitose de partiacuteculas inertes por macroacutefagos peritoniais em cultura

ou por macroacutefagos murinos estimulados por citocinas natildeo satildeo estiacutemulos suficientes para

a induccedilatildeo expressiva de iONS No entanto a fagocitose de agentes bioloacutegicos nas

mesmas condiccedilotildees induz altos niacuteveis de NO sugerindo que a produccedilatildeo de NO seja

dependente de estiacutemulo imunoloacutegico e que faccedila parte dos mecanismos de defesa do

organismo

25

Todas estas investigaccedilotildees estabeleceram de forma definitiva uma associaccedilatildeo entre

arginina oacutexido niacutetrico e resposta imune Por isso nas uacuteltimas duas deacutecadas a arginina tem

sido o foco de estudos como regulador de muitos processos imunoloacutegicos e fisioloacutegicos

(Tayade et al 2006)

Trabalhos desenvolvidos com mamiacuteferos demonstraram que as respostas imunes

podem ser influenciadas pela arginina dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al

1998 Lewis amp Langkamp-Henken 2000) Em experimentos desenvolvidos com animais

jovens os efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina foram demonstrados

como o aumento do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos

tiacutemicos Os efeitos imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais

estressados ou imunossupremidos

Os efeitos beneacuteficos da arginina natildeo se limitam agrave imunidade celular Segundo

LeBien (2002) em mamiacuteferos geneticamente modificados a arginina eacute utilizada para

diferenciaccedilatildeo de proacute-linfoacutecitos B para preacute-linfoacutecitos B na medula oacutessea e estaacute envolvida na

liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da medula

Por outro lado Deng et al (2005) relatam que relevantes pesquisas em espeacutecies

aviaacuterias satildeo esparsas Estas pesquisas apontaram o aumento da produccedilatildeo de oacutexido niacutetrico

por macroacutefagos de aves suplementadas com arginina (Sung et al 1991) aumento do peso

dos oacutergatildeos linfoides (Kwak et al 1999) melhora da relaccedilatildeo heteroacutefilolinfoacutecito em pintos

suplementados e desafiados com o agente viral da bronquite infecciosa e maior percentual

de ceacutelulas CD8+ (Lee et al 2002)

Entretanto para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de arginina

foram observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

estabelecidos Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de arginina

plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular

26

Outros autores obtiveram respostas positivas com a suplementaccedilatildeo de arginina na

reduccedilatildeo na mortalidade de frangos desafiados com Eimeria acervulina Eimeria tenella e

Eimeria maacutexima alterando a relaccedilatildeo argininalisina de 09 para 13 (Kidd et al 2002) e na

siacutendrome da hipertensatildeo pulmonar (Wideman et al 1995) Tambeacutem Corzo et al (2003)

observaram reduccedilatildeo linear de arranhotildees infectados em carcaccedilas de frangos alimentados

com niacuteveis crescentes de arginina (08 a 125 da dieta) Embora esses paracircmetros sejam

indicativos indiretos da imunidade mas apontam a importacircncia da arginina na melhora da

imunidade e no restabelecimento do status sanitaacuterio dos planteacuteis aviacutecolas

Tayade et al (2006) demonstraram recentemente que frangos vacinados com uma

vacina intermediaacuteria atenuada contra a doenccedila de Gumboro e suplementados com 2 de

arginina mostraram 100 de proteccedilatildeo apoacutes desafio com o viacuterus da doenccedila de Gumboro

comparado com 80 de proteccedilatildeo induzido apenas pela vacina sem adiccedilatildeo de arginina

suplementar na dieta

Aleacutem disso Deng et al (2005) verificaram aumento no niacutevel de anticorpos contra

eritroacutecitos de carneiro em frangas de postura somente na oitova semana de idade quando

estas aves foram suplementadas com niacuteveis de arginina em 150 acima do recomendado

pelo NRC do primeiro dia ateacute a quarta semana de vida Os autores concluiacuteram que a

suplementaccedilatildeo com arginina por um periacuteodo curto de tempo tem pouco efeito sobre a

imunidade e que a imunocompetecircncia pode ser permanentemente moldada pelo status

nutricional nos estaacutegios mais precoces do desenvolvimento

Para a melhora da resposta imune deve-se garantir que as matrizes desenvolvam

tiacutetulos elevados de anticorpos e assim buscar atingir o controle contra surtos de doenccedilas

via imunidade materna como meio de prevenccedilatildeo na progecircnie Kidd et al (1993)

observaram que a diferenccedila no niacutevel de anticorpos contra eritroacutecitos de carneiro em

27

matrizes pesadas recebendo dietas compostas por gratildeos de vaacuterias origens foi detectada na

progecircnie recebendo a mesma dieta

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo dos

niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes Segundo Kidd (2004) trabalhos desenvolvidos a

cerca das exigecircncias nutricionais das matrizes estatildeo focados apenas na questatildeo produtiva

Brake (1997) mostrou que a suplementaccedilatildeo de dietas para matrizes com vitaminas E e C

promoveu melhoria na transferecircncia de imunidade materna e na resposta imune dos pintos

pela proteccedilatildeo aos anticorpos no ovo durante a incubaccedilatildeo

Segundo Gore amp Qureshi (1997) um dos mecanismos pelo qual a vitamina E atua

nesta fase de crescimento embrionaacuterio pode estar relacionado a uma maior produccedilatildeo de

oacutexido niacutetrico nitritos e nitratos pelo fato de que a Vitamina E pode aumentar a afinidade

dos receptores de membrana dos macroacutefagos para a ativaccedilatildeo dos estiacutemulos tais como os

lipopolissacariacutedeos o que resulta em maior atividade da oacutexido niacutetrico sintetase

Na literatura consultada natildeo existem relatos da suplementaccedilatildeo das dietas das

matrizes com arginina e o efeito na resposta imune da progecircnie

A produccedilatildeo de NO pelos macroacutefagos das aves eacute arginina dependente de forma

similar aos macroacutefagos de mamiacuteferos (Dietert amp Golemboski 1998) Entretanto ao

contraacuterio dos mamiacuteferos as aves natildeo podem sintetizar arginina As aves por natildeo

apresentarem o ciclo da ureia funcional dependem exclusivamente da arginina dieteacutetica

(Allen amp Baker 1972) O quadro eacute ainda mais grave nas aves uma vez que dependem de

arginina suplementar tambeacutem para a para a formaccedilatildeo de ornitina que em mamiacuteferos eacute

obtida atraveacutes do aacutecido glutacircmico A siacutentese de ornitina eacute fundamental pois estaacute envolvida

na obtenccedilatildeo de prolina e eacute utilizada tambeacutem na formaccedilatildeo de poliaminas (espermidina

espermina e putrescina) que satildeo moleacuteculas associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

28

Desta forma a arginina eacute um aminoaacutecido essencial para as aves na fase inicial A

dieta eacute um fator particularmente sensiacutevel na disponibilidade de arginina e

consequentemente de NO considerando ainda que a arginina eacute um aminoaacutecido dos mais

limitantes em dietas agrave base milho e farelo de soja (Edmonds et al 1985)

A suplementaccedilatildeo adicional de Arg nas dietas de aves imunocomprometidas

poderia aumentar ainda mais a atividade da arginase e com isso menos Arg seria

disponiacutevel para a siacutentese de NO (Kepka-Lenhart et al 2000) Alternativamente Bansal et

al (2004) sugerem como estrateacutegia dieteacutetica para restaurar as concentraccedilotildees plasmaacuteticas

de Arg a suplementaccedilatildeo de citrulina principalmente em condiccedilotildees de imunodeficiecircncia

associadas com elevada atividade plasmaacutetica da arginase Nas espeacutecies uricoteacutelicas o ciclo

Arg-citrulina eacute funcional A citrulina eacute um aminoaacutecido que natildeo eacute encontrado em nenhuma

proteiacutena corporal aleacutem da inabilidade das aves na siacutentese endoacutegena de citrulina a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica se constitui na uacutenica fonte de Arg para os macroacutefagos via ciclo

NO-citrulina (Wiesinger 2001)

A suplementaccedilatildeo de aminoaacutecidos sinteacuteticos tem propiciado facilidades no ajuste

das foacutermulas de raccedilatildeo possibilitando a obtenccedilatildeo dos niacuteveis exigidos de aminoaacutecidos

essenciais A utilizaccedilatildeo de niacuteveis elevados de lisina proporciona um maior crescimento

muscular principalmente o incremento no rendimento de peito e coxas dos frangos de

corte Entretanto esse aumento da taxa de crescimento pode alterar o equiliacutebrio

metaboacutelico ideal entre os aminoaacutecidos especialmente a relaccedilatildeo argininalisina

O antagonismo entre arginina e lisina envolve a diminuiccedilatildeo da siacutentese de

creatinina compromete a siacutentese de prolina ornitina promove o aumento da atividade da

arginase renal e da excreccedilatildeo de ureia aleacutem de que quando os niacuteveis de lisina satildeo

excessivamente altos tambeacutem ocorre a excreccedilatildeo renal de arginina (Austic amp Scott 1975)

29

Os sinais claacutessicos da deficiecircncia de Arg satildeo fraqueza e paralisia das pernas penas

deformadas e ericcediladas sobre o dorso e asa das aves reduccedilatildeo do ganho de peso lesotildees

histoloacutegicas na medula oacutessea e desenvolvimento oacutesseo afetado (Jungherr et al 1958

Newbern et al 1960) A arginina aleacutem de servir como substrato para a siacutentese de NO

estaacute envolvida na secreccedilatildeo do GH

Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram um aumento na

concentraccedilatildeo plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez

secretado pela hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio

receptor e indiretamente via IGF-I e II (insulin-like growth factor ou somatomedina C)

sobre os tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos do GH ocorre em niacutevel do

disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no

crescimento dos ossos longos (Isaksson et al 1987)

Os efeitos dos aminoaacutecidos essenciais no tecido oacutesseo em crescimento satildeo

provavelmente mediados pelo IGF-I (Baylink et al1993) De fato Chevalley et al (1998)

demonstraram que arginina e lisina aumentaram a produccedilatildeo in vitro de IGF-I por

osteoblastos mantidos em cultura Aleacutem disso Conconi et al (2001) trabalhando com

cultura de osteoblastos enriquecida com soluccedilatildeo de aminoaacutecidos essenciais (Arg Lis Met

Thr e Trp) encontraram niacuteveis significativamente aumentados de fosfatase alcalina e

siacutentese de colaacutegeno Estes resultados segundo os autores sugerem que os aminoaacutecidos

podem atuar diretamente na formaccedilatildeo da matriz oacutessea e podem tambeacutem modular o

crescimento e a diferenciaccedilatildeo de osteoblastos

Por outro lado eacute conhecido que a arginina eacute precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo

pelo qual ela poderia exercer os seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo O NO pode

participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento (Hukkanem et

30

al 1999) Estes autores demonstraram a expressatildeo do mRNA da cNOS basal (oacutexido

niacutetrico sintetase endotelial) em condroacutecitos hipertroacuteficos de placas de crescimento de ratos

neonatos

Na placa de crescimento o NO poderia facilitar a vascularizaccedilatildeo e a formaccedilatildeo

oacutessea (Rath et al 2000) a exemplo de sua accedilatildeo na cartilagem articular em que induz

respostas bioloacutegicas que levam a degradaccedilatildeo irreversiacutevel (Pelletier et al1998) Segundo

Amin amp Abramson (1998) nas osteoartrites o NO induz a apoptose dos condroacutecitos

Teixeira et al (2005) comprovaram que o NO tem duas funccedilotildees distintas nos

condroacutecitos da placa de crescimento Uma vez iniciado o processo de maturaccedilatildeo o NO

estimula a hipertrofia por meio do aumento da expressatildeo da fosfatase alcalina e colaacutegeno

tipo X sendo conhecido que a expressatildeo de ambas proteiacutenas eacute um requerimento para a

completa hipertrofia dos condroacutecitos Aleacutem disso o NO estaacute associado ao estaacutegio mais

tardio do processo de maturaccedilatildeo Condroacutecitos totalmente diferenciados tratados com

ativadores da apoptose sofrem morte celular a inibiccedilatildeo da siacutentese de NO bloqueia a

apoptose enquanto a exposiccedilatildeo aos doadores de NO estimula a apoptose Estes autores

concluiacuteram que os sistemas NOS ndash NO atuam como promotores da maturaccedilatildeo dos

condroacutecitos

Por outro lado Vanacutet amp Ralston (2001) advertem que o efeito do NO na atividade

dos osteoblastos pode ser bifaacutesico Estudos in vitro tecircm indicado que pequenas

quantidades de NO que satildeo produzidas constitutivamente pelos osteoblastos podem agir

como um estimulador autoacutecrino do crescimento oacutesseo Entretanto altas concentraccedilotildees de

NO tais como aquelas observadas apoacutes estimulaccedilatildeo das citocinas inflamatoacuterias em que a

iNOS eacute a isoforma envolvida tecircm efeito inibitoacuterio no crescimento e diferenciaccedilatildeo

osteoblaacutestica

31

O crescimento e a remodelaccedilatildeo dos tecidos satildeo regulados por complexas interaccedilotildees

entre potencial geneacutetico fatores de crescimento influecircncias ambientais e nutriccedilatildeo

(Gonzales amp Sartori 2002) A resposta imune e a inflamaccedilatildeo podem modificar as

necessidades de alguns nutrientes

As alteraccedilotildees metaboacutelicas decorrentes podem interromper os eventos envolvidos

no processo de condrogecircnese e osteogecircnese e desencadear o processo de formaccedilatildeo das

lesotildees no tecido oacutesseo que levam a dificuldade locomotora deformaccedilatildeo oacutessea predispotildeem

agraves infecccedilotildees e agraves desordens esqueleacuteticas tais como a discondroplasia tibial (Thorp 1994)

Aleacutem das perdas econocircmicas eacute clara a percepccedilatildeo que as disfunccedilotildees do aparelho locomotor

comprometem o bem-estar das aves

Aleacutem de interagirem com o sistema imune os processos que modulam o

crescimento oacutesseo satildeo complexos e muacuteltiplos e mais estudos satildeo necessaacuterios para elucidar

estes mecanismos

32

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II - OBJETIVOS GERAIS

Essa pesquisa foi desenvolvida com a finalidade de estudar o efeito da

suplementaccedilatildeo de Arg na dieta de fecircmeas reprodutoras de frangos de corte na qualidade

dos ovos e nas caracteriacutesticas produtivas na qualidade oacutessea no desenvolvimento dos

oacutergatildeos linfoide e do sistema imune da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo

niacuteveis crescentes de Arg

21 Objetivos Especiacuteficos Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis

crescentes de Arg no desempenho produtivo e na qualidade dos ovos

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg no desempenho no

rendimento de carcaccedila e na qualidade oacutessea da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas

contendo niacuteveis crescentes de Arg

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg nas respostas imune e

celular da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo

Resumo ndash Este estudo avaliou o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e reprodutivo e qualidade de ovos Foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e reprodutivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo

Palavras-chave embriodiagnoacutestico incubaccedilatildeo qualidade de ovos

III - Effect of arginine supplementation on productive performance and egg quality of broiler breeder hens

Abstract - This study investigated the effect of arginine (Arg) supplementation on broiler breeder productive performance and egg quality ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance Supplementation of broiler diets with increasing levels of Arg provided an increase in the egg production and eggs with higher weights in the levels of 1262 and 1543 respectively The increased levels of Arg did not influence the reproduction variables studied suggesting that it may be used without any harmful risk

Key words embryo diagnosis hatching egg quality

42

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo e alimentaccedilatildeo animal estatildeo direcionadas para garantir oacutetimo aporte de

nutrientes para os animais de acordo com sua finalidade comercial e fase fisioloacutegica

Na produccedilatildeo de frangos de corte a taxa de crescimento acelerada imposta pela seleccedilatildeo

geneacutetica os vaacuterios fatores estressantes (ambientais e de manejo) e de desafio

imunoloacutegico (vacinaccedilatildeo e infecccedilatildeo) nas condiccedilotildees de produccedilatildeo comercial fazem com

que as exigecircncias das matrizes de corte para alguns nutrientes sejam maiores para que a

progecircnie possa expressar seu potencial geneacutetico

O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo dependem completamente dos

nutrientes contidos no ovo e estes satildeo originados da dieta e do metabolismo das

matrizes O ovo eacute um sistema fechado assim todos os nutrientes necessaacuterios para o

desenvolvimento do embriatildeo devem ser fornecidos pela matriz quando o ovo eacute formado

(Oviedo-Roacutendon amp Murakami 1998)

Aleacutem disso existe correlaccedilatildeo positiva entre peso do ovo e peso do pinto ao

nascer e deste com o peso do frango ao abate (Lara et al 2005) De fato Whiting amp

Pesti (1984) verificaram que para cada grama a mais no peso do ovo correspondia a

107 e 60g adicionais para o peso final de machos e fecircmeas respectivamente

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas No ovo os aminoaacutecidos

presentes na gema satildeo suficientes durante o processo de eclosatildeo poreacutem apoacutes o

nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o processo de

crescimento (Otha et al 2004) Nos uacuteltimos anos o impacto da nutriccedilatildeo das matrizes

no estado nutricional e desempenho da progecircnie bem como a melhora do estado

imunoloacutegico tem recebido especial atenccedilatildeo (Pappas et al 2006)

43

A nutriccedilatildeo das matrizes com dietas com arginina seria uma alternativa para o

enriquecimento da gema dos ovos com esse aminoaacutecido A Arg eacute um aminoaacutecido

baacutesico que pode influenciar a reposta imune e a resistecircncia agraves doenccedilas A Arg ainda eacute

conhecida pela funccedilatildeo estimuladora sobre o processo de ovulaccedilatildeo atraveacutes do aumento

da liberaccedilatildeo de hormocircnio luteinizante (LH) (Basiouni et al 2006) e como parte do

hormocircnio arginina vasotocina envolvido com a contraccedilatildeo uterina e a oviposiccedilatildeo

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias

de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo

dos niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes De acordo com Kidd (2004) os trabalhos

desenvolvidos em relaccedilatildeo agraves exigecircncias nutricionais das matrizes para melhorar o

sistema imune da progecircnie satildeo poucos quando comparados a questatildeo produtiva das

aves

Com isso objetivou-se com o trabalho avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de

arginina sobre o desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte

Material e meacutetodos

O experimento foi conduzido no aviaacuterio experimental da Universidade Federal

do Paranaacute ndash Campus Palotina constituiacutedo de 32 boxes com dimensotildees de 25 x 15 m

com cama de maravalha (plusmn10 cm) sobre o piso Foram utilizados boxes telados e

providos de um bebedouro pendular e de dois comedouros um deles com grade de

restriccedilatildeo aos machos e outro instalado mais alto natildeo permitindo somente o acesso das

fecircmeas Em cada boxe experimental foram utilizados ninhos convencionais de um

andar com quatro bocas de madeira com dimensotildees de 030 m x 030 m x 030 m a

030 m acima do niacutevel do piso sendo uma boca para cada quatro fecircmeas

Foram utilizados 390 reprodutores de frangos de corte sendo 360 fecircmeas e 30

machos da linhagem Ross As aves foram selecionadas na 18ordf semana de idade a partir

de um plantel de reprodutores dentro da faixa de peso de 1850 a 1950 g para as

fecircmeas e de 2450 a 2550 g para os machos O delineamento experimental utilizado foi

o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 e

1543 de Arg digestiacutevel) seis repeticcedilotildees e 12 fecircmeas e um macho por unidade

44

experimental O acasalamento foi realizado na 18ordf semana de idade das aves na

proporccedilatildeo de um macho para cada 12 fecircmeas

O periacuteodo experimental iniciou na 25ordf semana quando o plantel alcanccedilou 5 de

produccedilatildeo e finalizou na 56ordf semana de idade das aves O programa de iluminaccedilatildeo

iniciou na 19ordf semana de idade com fornecimento inicial de 14 horas de luz diaacuteria e

aplicados aumentos semanais de 30 minutos de luz ateacute o fornecimento de 17 horas de

luz diaacuteria na 25ordf semana de idade das aves

O fornecimento de raccedilatildeo foi limitado e controlado diariamente enquanto o de

aacutegua foi ad libitum As exigecircncias nutricionais utilizadas para formulaccedilatildeo das dietas das

fecircmeas e dos machos foram baseadas nas recomendaccedilotildees contidas no manual da

linhagem

A partir da 23ordf semana de idade as fecircmeas passaram a receber as dietas

experimentais constituiacutedas da dieta basal suplementada com cinco niacuteveis de L ndash

Arginina variando de 0 a 600 mgkg na dieta basal em substituiccedilatildeo ao caulin que

corresponderam aos niacuteveis de 0943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg

digestiacutevel (Tabela 1) Os machos receberam uma uacutenica dieta durante todo o periacuteodo

experimental O periacuteodo experimental teve iniacutecio na 25ordf semana Para determinaccedilatildeo da

produccedilatildeo de ovos os mesmos foram coletados diariamente e a produccedilatildeo diaacuteria anotada

em planilhas por repeticcedilatildeo Semanalmente foi obtida a produccedilatildeo total de ovos e a

porcentagem de postura de cada unidade experimental Na 30ordf 34ordf e 38ordf semana de

idade foram coletados todos os ovos produzidos em um dia para avaliaccedilatildeo da qualidade

(peso meacutedio gravidade especiacutefica porcentagem de albuacutemen e gema porcentagem e

espessura da casca)

A quantidade de raccedilatildeo oferecida para as fecircmeas foi calculada de acordo com a

produccedilatildeo de ovos e do peso corporal Para os machos forneceu-se raccedilatildeo em funccedilatildeo do

peso corporal (conforme manual da linhagem) O peso foi controlado semanalmente ateacute

a 35ordf semana e quinzenalmente a partir da 36ordf semana de idade das aves ateacute o final do

experimento

A avaliaccedilatildeo do rendimento de incubaccedilatildeo foi realizada na 40ordf semana de idade

das aves Foram incubados 80 ovos de cada tratamento totalizando 400 ovos Os ovos

foram pesados e incubados em cada idade avaliada de acordo com o tratamento e

repeticcedilatildeo e avaliadas as seguintes caracteriacutesticas peso meacutedio do ovo incubado peso

meacutedio dos pintos ao nascer percentual do peso da progecircnie ao nascer em relaccedilatildeo ao

peso do ovo e taxa de eclosatildeo Apoacutes a eclosatildeo foi realizado o embriodiagnoacutestico dos

45

ovos que natildeo eclodiram os quais foram classificados em mortalidade por fase (inicial

intermediaacuteria e final) ovos contaminados bicados vivos e bicados mortos

Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental

Ingredientes () Raccedilatildeo postura I Milho 6072 Farelo de Trigo 420 Oacuteleo de Soja 200 Farelo de Soja 2260 Sal Comum 032 Caulim 050 Calcaacutereo 38 647 Fosfato Bicaacutelcico 131 Bicarbonato de Soacutedio 010 DL-Metionina 98 014 Colina 60 016 Milbond 010 Mycofix 015 Carbonato Potaacutessio 99 021 Premix vit e mineral1 050 Hy D2 005 Eur Bactiguard L 020 Valores Calculados Proteiacutena 1551 EM Kcalkg 2815 Gordura 477 AcLinoleico 248 Caacutelcio 295 Foacutesforo disponiacutevel 044 Lisina dig 071 Met + cistina dig 060 Treonina dig 051 Arginina dig 094 Soacutedio 019 Cloro 026 Potaacutessio 080 Mongin Meq100g 21388

1 Conteuacutedo por kg de premix Vit A 8000000 UI Vit D3 2200000 UI Vit E 6200 mg Vit K 3 2000 mg Vit B 1 2000 mg Vit B2 3000 mg Vit B6 6000 mg Vit B12 10000 mcg Pantotenato de caacutelcio 6000 mg Niacina 25000 mg Aacutec foacutelico 400 mg Se 100 mg Mn 65000 mg Fe40000 mg Cu 10000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg 2 Rovimix Hy D ndash DSM Nutritional Products

Para gravidade especiacutefica foi utilizado o meacutetodo da imersatildeo dos ovos em

soluccedilatildeo salina Foram preparadas seis soluccedilotildees (aacutegua e sal comum) com densidades que

variaram de 1070 a 1090 com variaccedilatildeo de 0004 para cada soluccedilatildeo As gravidades

foram aferidas com utilizaccedilatildeo de densiacutemetro de Petroacuteleo

46

O peso meacutedio do albuacutemen de cada repeticcedilatildeo foi obtido pela diferenccedila entre o

peso meacutedio do ovo e o peso meacutedio da gema somados ao peso meacutedio da casca de cada

repeticcedilatildeo Apoacutes a pesagem das cascas a espessura das mesmas foi medida com auxiacutelio

de um microcircmetro digital (Mitutoyoreg) em quatro pontos na regiatildeo central de cada casca

Para a medida de peso da casca os ovos foram quebrados e as cascas lavadas e secas agrave

temperatura ambiente por 48 horas em seguida foram pesadas em balanccedila analiacutetica e os

pesos anotados

Anaacutelise Estatiacutestica

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados de acordo com o seguinte modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243 4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os dados de embriodiagnoacutestico natildeo apresentaram distribuiccedilatildeo normal e foram

analisados pela anaacutelise Bayesiana assumindo que a porcentagem observada ri a cada

niacutevel de concentraccedilatildeo de Arg xi segue distribuiccedilatildeo Binomial com paracircmetros ni

(tamanho de amostra) e pi (taxa de eclosatildeo) pi = en1+en com funccedilatildeo de ligaccedilatildeo logit

ii

i

plog it(p ) log1 p⎛ ⎞

equiv = μ⎜ ⎟minus⎝ ⎠ nas formas linear e quadraacutetica dadas respectivamente por

n=α+ β1xi e n = α + β1xi + β2x2i Para a modelagem foram considerados um conhecimento

vago a priori sobre os paracircmetros de regressatildeo isto eacute com distribuiccedilotildees natildeo

informativas 3~ (010 )Nα e 3~ (010 )k Nβ k=12

A obtenccedilatildeo das distribuiccedilotildees marginais a posteriori para os paracircmetros foi por

meio do pacote BRugs do programa R (R Development Core Team 2007)

Para cada paracircmetro foram gerados 510000 valores em um processo MCMC

(Monte Carlo Markov Chain) considerando um periacuteodo de descarte amostral de 10000

47

valores iniciais A amostra final tomada com saltos de tamanho 20 conteacutem 25000

valores gerados A convergecircncia das cadeias foi verificada por meio do pacote CODA

(Best et al 1995) do programa R pelos criteacuterios de Geweke (1992) e de Heidelberger amp

Welch (1983)

Resultados e Discussatildeo

Os resultados de produccedilatildeo e de qualidade dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg estatildeo apresentados na Tabela 2 Os niacuteveis de

Arg digestiacutevel utilizados nas dietas das matrizes de corte influenciaram de forma

quadraacutetica (Plt005) a porcentagem de postura em que o niacutevel de 1262 de Arg

proporcionou a maior porcentagem de postura para as matrizes de corte (Figura 1)

Outros autores tambeacutem encontraram resultados semelhantes em relaccedilatildeo ao

aumento da taxa de postura em funccedilatildeo da suplementaccedilatildeo de Arg Segundo Najib amp

Basiouni (2004) a produccedilatildeo de ovos de matrizes elevou de 52 para 6786 quando

utilizaram niacuteveis de Arg e Lys na dieta de 15 e 12 respectivamente Adicionalmente

Basiouni et al (2006) observaram aumento no peso de foliacuteculos F1 em poedeiras que

receberam dietas com 205 Arg comparado com dietas que continham 154 de Arg

Esse efeito sugere que o aumento na produccedilatildeo de ovos possa ser atribuiacutedo do efeito

estimulatoacuterio especiacutefico da Arg na secreccedilatildeo de LH (Hormocircnio Luteinizante) o qual tem

accedilatildeo direta sobre o ovaacuterio e seus foliacuteculos (Basiouni 2009)

O comportamento observado na curva de produccedilatildeo de ovos demonstra aumento

da produccedilatildeo ateacute o niacutevel de 1262 de Arg e posterior queda ateacute o niacutevel de 1543 o

que provavelmente pode estar associado ao desequiliacutebrio aminoaciacutedico das dietas nos

niacuteveis extremos de Arg na raccedilatildeo Os altos niacuteveis de Arg utilizados podem ter afetado a

produccedilatildeo de ovos principalmente pelo antagonismo existente entre Arg e Lisina (Lys)

Baixas relaccedilotildees ArgLys em dietas de matrizes reduzem o consumo de raccedilatildeo e

deprimem a produccedilatildeo de ovos (Basiouni et al 2006) Altos niacuteveis de Lys associados a

baixos niacuteveis de Arg satildeo deleteacuterios agraves aves pois niacuteveis elevados de Lys promovem

expressiva elevaccedilatildeo da atividade da arginase renal e consequentemente induz agrave

degradaccedilatildeo da Arg (Austic amp Scott 1975) causando sintomas de deficiecircncia de Arg em

virtude das aves natildeo possuiacuterem o ciclo da ureia funcional (Drsquo Mello 2003) Esse

antagonismo ainda leva agrave diminuiccedilatildeo da atividade da glicina-amidinotransferase no

fiacutegado enzima que utiliza Arg e glicina como substratos juntamente com a metionina na

siacutentese da creatina muscular (Jones et al 1967 Andriguetto et al 1999)

48

Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg

()

Postura

()

Peso

Ovo

(g)

Gema

()

Clara

()

Casca

()

Casca

(mm)

Gravidade

Especiacutefica

(gml)

0943 7741plusmn460 6046plusmn048 2998plusmn035 5955plusmn045 876plusmn015 0577plusmn0004 1082plusmn0001

1093 8101plusmn544 6081plusmn052 2972plusmn042 5974plusmn040 902plusmn014 0584plusmn0005 1082plusmn0001

1243 8240plusmn370 6086plusmn051 2971plusmn043 6035plusmn031 875plusmn011 0569plusmn0004 1081plusmn0001

1393 8158plusmn368 6133plusmn057 2986plusmn041 5984plusmn043 880plusmn009 0571plusmn0003 1080plusmn0001

1543 7855plusmn600 6167plusmn046 2964plusmn030 6015plusmn038 876plusmn010 0573plusmn0004 1081plusmn0001

CV() 664 183 195 116 351 198 0133

Anaacutelise Variacircncia

Arg Quadratico1 Linear2 ns ns ns ns Linear3

R2 043 096 ----- ----- ----- ----- 066 1 Y= 421330+01239X-00004908X2 2 Y = 585813+000196527X 3 Y = 108413-000000249943X ns ndash natildeo significativo

77

78

79

80

81

82

83

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Pro

duccedilatilde

o de

ovo

s (

)

Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel

Ao avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arg no peso dos ovos das matrizes de

corte verificou-se aumento linear (Plt005) no peso dos ovos com o aumento de Arg

digestiacutevel nas raccedilotildees por outro lado houve queda linear (Plt005) na gravidade

especiacutefica dos ovos dessas matrizes (Figura 1)

Basiouni et al (2006) encontraram efeito dos niacuteveis de Arg e de Lys sobre na

gravidade especiacutefica dos ovos Estes autores observaram que baixos niacuteveis de Arg e

altos niacuteveis de Lys proporcionaram a melhor gravidade especifica dos ovos e quando a

1262

Arginina dig ()

Y = 421330+011239X-00004908X2 R2=043

49

relaccedilatildeo ArgLys era alta a gravidade especiacutefica piora significativamente Por outro lado

Lima amp Silva (2007) natildeo verificaram efeito das diferentes relaccedilotildees ArgLys digestiacutevel

nos paracircmetros de qualidade de ovos

O aumento do peso do ovo e a queda na gravidade especiacutefica desses ovos

possuem relaccedilatildeo direta Isso ocorre porque segundo Basiouni et al (2006) a siacutentese da

quantidade de casca dos ovos nas galinhas eacute constante Aleacutem disso com o aumento da

idade das galinhas ocorre aumento no tamanho dos ovos Do iniacutecio ateacute o final do ciclo

de postura o ovo chega a aumentar ateacute 40 do seu tamanho e por isso haveraacute menos

caacutelcio na superfiacutecie da casca o que reduz a espessura da casca (Baiatildeo amp Aguilar 2001)

e consequentemente a gravidade especiacutefica dos ovos

Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados de rendimento da incubaccedilatildeo dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel estatildeo apresentados na Tabela 3 Os

niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis de

incubaccedilatildeo Demonstra-se portanto que a Arg pode ser utilizada na dieta das matrizes

sem trazer prejuiacutezos agrave reproduccedilatildeo

A fertilidade e a eclosatildeo dos ovos das matrizes satildeo dois paracircmetros importantes

na incubaccedilatildeo dos ovos Valores proacuteximos de 96 para fertilidade e 88 para eclosatildeo

satildeo indicativos de bom manejo de reprodutoras (Rosa amp Aacutevila 2000) Segundo Rosa amp

Aacutevila (2000) o rendimento da incubaccedilatildeo estaacute diretamente relacionado com a

mortalidade embrionaacuteria a qual sofre influecircncia da gravidade especiacutefica e da

capacidade do ovo em perder umidade No presente trabalho observou-se que a

utilizaccedilatildeo de dietas suplementadas com Arg natildeo afetou nenhuma dessas variaacuteveis

apesar de ter interferido na gravidade especiacutefica dos ovos conforme demonstrado em

tabelas anteriores

10795

108

10805

1081

10815

1082

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Gra

vida

de e

spec

iacutefica

(gm

l)

59860

602604606608

61612614616618

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Peso

(g)

Y = 108413-000000249943X R2=066 Y = 585813+000196527X R2=096

50

O peso do pinto natildeo foi influenciado pelos niacuteveis de Arg na dieta das matrizes

de corte eacute considerado muito importante na cadeia de produccedilatildeo por estar diretamente

relacionado ao desempenho produtivo do frango A variaccedilatildeo de peso do pinto no

momento da eclosatildeo pode ser causada por fatores como linhagem idade da matriz peso

e niacuteveis de nutrientes do ovo (Vieira amp Moran Jr 1999) Okada (1994) e Castro (1996)

ressaltam que pintos de corte com mais de 40g no primeiro dia de vida devem ser

considerados de boa qualidade Os pintos desse experimento podem ser considerados de

boa qualidade jaacute que o menor peso dos pintos ao nascer foi de 439g Embora neste

estudo os niacuteveis de Arg na dieta das matrizes natildeo tenham afetado o peso dos pintos esse

aminoaacutecido eacute essencial para o bom desenvolvimento da progecircnie Kita et al (2002)

relatam que dietas com alta proteiacutena suplementadas com aminoaacutecidos essenciais (Arg

metionina+cistina) aumentam os niacuteveis plasmaacuteticos do fator de crescimento semelhante

agrave insulina (IGF-I) e o ganho de peso em aves jovens

Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Variaacuteveis Niacuteveis de Arginina

()

Fertilidade ()

Eclosatildeo ()

Peso ovo (g)

Peso Pinto (g)

Relaccedilatildeo Peso OvoPeso Pinto

0943 9750plusmn218 7875plusmn450 6269plusmn042 4507plusmn053 7168plusmn045 1093 9513plusmn212 8038plusmn459 6212plusmn033 4390plusmn045 7115plusmn054 1243 9250plusmn206 8125plusmn464 6200plusmn047 4487plusmn066 7234plusmn047 1393 9750plusmn218 8000plusmn457 6314plusmn072 4514plusmn086 7173plusmn082 1543 9625plusmn215 7750plusmn443 6351plusmn055 4529plusmn039 7127plusmn045 Meacutedia 9578 7958 6269 4486 7163

CV () 656 1641 231 374 222 Anaacutelise de Variacircncia Arginina ns ns ns ns ns

R2 ------ ------ ----- ------- ------- ns = natildeo significativo

O peso dos ovos eacute outra caracteriacutestica de grande importacircncia relacionada com a

idade da matriz os quais satildeo preponderantes para o desenvolvimento inicial das aves e

tem consequecircncias em todo o crescimento (Pedroso et al 2005) Essa influecircncia eacute bem

conhecida e o peso do pinto representa entre 66 e 71 do peso do ovo (Fiuacuteza et al

2006 Marinho et al 2006 Pappas et al 2006) Segundo North amp Bell (1990) cada

51

grama a mais no peso do pinto representa 13 gramas no peso do frango ao abate por

isso a nutriccedilatildeo das matrizes eacute de grande importacircncia jaacute que a Arg tem relaccedilatildeo positiva

com o hormocircnio de crescimento (GH) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave

(Harvey et al 2001)

Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico

Estimativas Bayesianas

Ligaccedilatildeo Ligaccedilatildeo Meacutedias Desvio Padratildeo P25 P975 DIC

Embriodiagnoacutestico

Linear α β

-07512 -25980

2078 1798

-4811 -6367

3426 0784 4783 Mortalidade

Embrionaacuteria (1 a 5 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-8444 10690 -5607

10610 18020 7538

-3015 -2406 -2104

11790 47550 8874

4813

Linear α β

2259 -6267

3790 3615

-4602 -14470

10570 -

01174 3137

Mortalidade (11 a 17 dias)

Quadraacutetica α β1 β2

5057 -11090 1958

12960 22430 9632

-2027 -5093 -1714

3112 3253 2052

3167

Linear α β

-3726 1274

10390 07968

-58110 -02681

-1730 2882 1079

Mortalidade (18 a 21 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-1634 -2195 1387

6330 10280 4084

-14020 -22380 -6539

10690 17840 9441

1095

Linear α β

-1927 -2266

2562 2359

-7233 -7321

2739 1993 0070

Bicado Vivo Quadraacutetica

α β1 β2

-1451 -1692 -2019

2749 2821 2539

-7044 -7313 -7290

3755 3682 2565

0057

Linear α β

-2564 -1628

2860 2418

-8103 -6479

2823 2755 3417

Bicado Morto Quadraacutetica

α β1 β2

3692 -12350 4412

11930 19920 8139

-1936 -5206 -1148

2739 2609 2054

3428

Linear α β

-513600 -004923

3798 3023

-13000 -6154

2041 5809 2522

Morte por Contaminaccedilatildeo Quadraacutetica

α β1 β2

-009106 -71940 28920

13200 21610 8744

-2704 -4965 -1428

2480 3473 2016

2555

Na Tabela 4 satildeo apresentadas as estimativas Bayesianas para as equaccedilotildees de

regressatildeo ajustadas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos provenientes das

matrizes de corte alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg Natildeo foi verificado efeito da

dieta das matrizes sobre nenhuma das variaacuteveis paracircmetros avaliadas (Pgt005)

52

Contudo no periacuteodo final do desenvolvimento embrionaacuterio (18 a 21 dias) haacute maior

mortalidade (Tabela 5) Nesse periacuteodo haacute mudanccedila draacutestica do meio aquoso protegido

para o meio aeroacutebio totalmente diferente Nas aves essa fase final de desenvolvimento

inclui absorccedilatildeo de aacutegua retraccedilatildeo do saco vitelino maturaccedilatildeo funcional do pulmatildeo

transiccedilatildeo da respiraccedilatildeo coacuterio-alantoide para pulmonar bicagem e nascimento Ocorre

ao mesmo tempo o desenvolvimento da resposta homeoteacutermica (Oviedo-Roacutendon amp

Murakami 1998) Aleacutem disso nesse periacuteodo ocorre a mudanccedila pronunciada em

hormocircnios tireoideanos corticosteroideos hormocircnios do eixo somatotroacutepico

prolactina vasotocina e melatonina

Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg Morte

Embrionaacuteria (1 a 5 dias)

Morte (11 a 17 dias)

Morte (18 a 21

dias)

Bicado Morto

Morte por Contaminaccedilatildeo

Arg () 0943 264 416 889 264 125 1093 514 000 764 125 000 1243 250 000 836 000 125 1393 000 125 1514 125 000 1543 125 000 1406 125 125 CV () 20962 50785 9999 27439 36515 (Pgt005)

Conclusatildeo

A suplementaccedilatildeo das dietas de matrizes de corte com niacuteveis crescentes de

Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o

niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os

niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas

podendo ser utilizado o menor niacutevel de suplementaccedilatildeo ou seja 0943 de Arg

digestiacutevel sem prejuiacutezos

53

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IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e

paracircmetros oacutesseos da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos

Palavras-chave avaliaccedilatildeo de carcaccedila desempenho produtivo osso

58

IV - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

performance carcass yield and bone parameters of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine

(Arg) supplementation in broiler breeder henrsquos diet on performance carcass yield and bone parameters in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) These results indicate that it is necessary to feed the progeny with an Arg-supplemented diet to obtained better performance and bone quality Key words bone carcass evaluation productive performance

59

Introduccedilatildeo

As exigecircncias nutricionais para a maioria dos nutrientes satildeo estabelecidas com

base nas respostas produtivas mas em alguns casos a sauacutede eacute o criteacuterio principal A

nutriccedilatildeo de reprodutoras pesadas deve atender as exigecircncias da ave alcanccedilando bom

desempenho produtivo e ainda suprir as necessidades dos embriotildees e dos pintos

neonatos originados de seus ovos O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo

dependem completamente dos nutrientes contidos no ovo os quais satildeo originados da

dieta e do metabolismo das galinhas (Baiatildeo amp Lucio 2005) Assim a concentraccedilatildeo de

nutrientes disponiacuteveis no ovo para o desenvolvimento do embriatildeo eacute criacutetico e pode

influenciar o potencial de ganho de peso da progecircnie e caracteriacutesticas importantes de

desenvolvimento imunitaacuterio oacutesseo e muscular

O crescimento precoce no periacuteodo poacutes-eclosatildeo eacute influenciado por vaacuterios

fatores entre eles o conteuacutedo de resiacuteduos do saco viteliacutenico a ingestatildeo de alimento e de

aacutegua os niacuteveis de enzimas pancreaacuteticas e intestinais a aacuterea de superfiacutecie intestinal e a

digestibilidade global de nutrientes (Dibner 1996) As reservas contidas no saco

vitelino satildeo as primeiras fontes de nutrientes utilizadas pelo pintainho ao nascer Desse

modo quanto maior o tempo decorrido entre a eclosatildeo e o iniacutecio da ingestatildeo de

alimento e aacutegua maior a dependecircncia que o pintainho teraacute dessas reservas (Vieira amp

Pophal 2000) a dieta materna eacute a origem dos nutrientes para o embriatildeo (Vieira 2007)

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) afirmam que para matrizes pesadas existe uma pausa nas

pesquisas que visam determinar as exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos Embora os

aminoaacutecidos presentes na gema possam ser suficientes durante o processo de eclosatildeo

apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

desenvolvimento inicial (Otha et al 2004)

Os aminoaacutecidos sinteacuteticos disponiacuteveis no mercado proporcionam o atendimento

das exigecircncias nutricionais das aves principalmente em relaccedilatildeo aos aminoaacutecidos

60

limitantes Dentre esses aminoaacutecidos a arginina (Arg) eacute considerada o quinto

aminoaacutecido limitante para frangos de corte em dietas agrave base de milho e de farelo de

soja apoacutes metionina+cistina lisina treonina e valina (Corzo 2007) Como as aves natildeo

apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem exclusivamente da Arg sinteacutetica

principalmente no periacuteodo inicial de criaccedilatildeo (Allen amp Baker 1972) A suplementaccedilatildeo

da Arg eacute necessaacuteria para a formaccedilatildeo da ornitina a qual estaacute envolvida na siacutentese da

prolina que eacute utilizada para a formaccedilatildeo das poliaminas (espermidina espermina e

putrescina) Estas moleacuteculas estatildeo associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

A Arg aleacutem de serem constituintes de proteiacutenas participa como coadjuvante na

secreccedilatildeo de insulina pelas ceacutelulas β do pacircncreas (Bolea et al 1997) e na secreccedilatildeo do

hormocircnio de crescimento (GH) (Ghigo et al 1994) Os efeitos do GH satildeo mediados

pelos fatores de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Le Roith et al 2001) O

IGF-I eacute conhecido por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo

esqueleacutetico como a proliferaccedilatildeo e diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelite (Florini et al 1996)

e a agregaccedilatildeo de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos sobre a siacutentese e a

degradaccedilatildeo proteica (Duclos et al 1991 Coleman et al 1995 Duclos et al2005)

Outro efeito do GH ocorre em niacutevel do disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de

IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no crescimento dos ossos longos (Isaksson et

al 1987)

O enriquecimento dos ovos das matrizes com Arg bem como sua suplementaccedilatildeo

logo apoacutes a eclosatildeo pode trazer inuacutemeros benefiacutecios sobre o desenvolvimento da

progecircnie jaacute que o GH influenciado pela Arg tem sua siacutentese iniciada na fase

embrionaacuteria da ave (Harvey et al 2001)

Diante do exposto com este estudo objetivou-se testar a influecircncia da

suplementaccedilatildeo com L-Arginina na dieta das matrizes de corte sobre a progecircnie com

dieta suplementada ou natildeo suplementada com L-Arginina sobre o desempenho

paracircmetros oacutesseos e rendimento de carcaccedila dos frangos de corte

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

61

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

no delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina

incluiacutedos na dieta materna variando de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal (0

943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 35

aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada box foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado o

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

em todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as sobras de raccedilatildeo dos boxes foram pesadas para

ajustar o consumo de raccedilatildeo e da conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 2) As

dietas experimentais agrave base de milho e de farelo de soja foram formuladas de acordo

com os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e as recomendaccedilotildees nutricionais

62

propostas por Rostagno et al (2005) As aves controle receberam dieta sem

suplementaccedilatildeo de arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz

sobre o desempenho da progecircnie

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais basais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 017 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 1000 10000 Valores calculados PB () 2000 1850 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

63

Experimento 3 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina digestiacutevel na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes utilizando o delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina e seis repeticcedilotildees

com 32 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal inicial e de crescimento em

substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial corresponderam a 1300

1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela 2) A partir dos 22

dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300 1450 1600

e 1750 de arginina digestiacutevel (Tabela 3) O manejo realizado nesse experimento foi

conduzido conforme descrito no experimento anterior

Desempenho

Para ambos os experimentos com a progecircnie foram avaliados o desempenho

zooteacutecnico (ganho de peso consumo de raccedilatildeo e conversatildeo alimentar) Para avaliaccedilatildeo do

desempenho as raccedilotildees e as aves foram pesadas no iniacutecio do experimento aos 7 21 e 42

dias de idade

Paracircmetros oacutesseos

Os paracircmetros oacutesseos avaliados foram comprimento diacircmetro peso e calculado

o Iacutendice de Seedor Para avaliaccedilatildeo dos paracircmetros oacutesseos em ambos os experimentos

com a progecircnie apoacutes o sacrifiacutecio por meio de atordoamento seguido de sangria foram

coletados os fecircmures e as tiacutebias esquerdas de duas avesrepeticcedilatildeo aos 7 e 21 dias de

idade As amostras ficaram congeladas (-18ordmC) ateacute o iniacutecio das anaacutelises dos paracircmetros

oacutesseos que foram executadas conforme descrito a seguir

Apoacutes o descongelamento dos ossos foram retirados os tecidos envolventes

(tecido muscular aderido) com auxiacutelio de tesouras e pinccedilas Os ossos descongelados

foram pesados em balanccedila analiacutetica (g plusmn 00001) e o comprimento e o diacircmetro (na

64

porccedilatildeo meacutedia do osso) foram medidos usando paquiacutemetro eletrocircnico digital (capacidade

de 0 a 150 mm e resoluccedilatildeo de 001 mm)

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900

Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6456 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl Vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 1300 1450 1600 1750 1900 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

65

A partir do peso do osso e do seu comprimento foi calculado o Iacutendice de Seedor

(Seedor et al 1993) de acordo com a seguinte foacutermula Iacutendice de Seedor = Peso do

osso (mg)comprimento do osso (mm)

Este iacutendice eacute utilizado como indicativo da densidade oacutessea Quanto maior o

Iacutendice de Seedor maior a densidade da peccedila oacutessea e vice-versa

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000

mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

66

Rendimento de carcaccedila

Para determinaccedilatildeo do rendimento de carcaccedila foram utilizadas trecircs aves por

unidade experimental (15 avestratamento) identificadas com anilhas numeradas e

submetidas ao jejum por seis horas atordoadas com eletricidade (220W) e com

posterior sangria no final de cada experimento realizado com a progecircnie

Para caacutelculo do rendimento de carcaccedila foi considerado o peso da carcaccedila

eviscerada quente sem os peacutes cabeccedila e gordura abdominal em relaccedilatildeo ao peso vivo

que foi obtido individualmente antes do abate das aves Para rendimento dos cortes

nobres foi considerado o rendimento do peito inteiro com pele e ossos das pernas

(coxa e sobrecoxa) e das asas que foi calculado em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila

eviscerada

Para caacutelculo da gordura abdominal foi considerada a gordura presente ao redor da

cloaca da bolsa cloacal moela proventriacuteculo e dos muacutesculos abdominais adjacentes foi

retirada conforme descrito por Smith (1993) Em seguida foi pesada e tambeacutem

calculada em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila eviscerada

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

67

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

Resultados e discussatildeo

Os valores meacutedios de desempenho de frangos de corte provenientes de matrizes

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg com dieta suplementada e natildeo suplementada

com Arg estatildeo demonstrados nas Tabelas 5 e 6 respectivamente

No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) os frangos que receberam dietas

suplementadas com Arg apresentaram efeito linear positivo (Plt005) dos niacuteveis

crescentes de suplementaccedilatildeo com Arg sobre o ganho de peso O consumo de raccedilatildeo e a

conversatildeo alimentar foram influenciados de forma quadraacutetica (Plt005) e o niacutevel de

1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649

proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente (Figura 2)

Esses niacuteveis satildeo superiores aos encontrados por Atencio et al (2004) que apresentaram

os niacuteveis de 127 e 128 de Arg digestiacutevel para ganho de peso e conversatildeo

alimentar respectivamente Mendes et al (1997) e Brake et al (1998) observaram

melhor conversatildeo alimentar agrave medida que a Arg foi adicionada agraves dietas dos frangos de

corte

68Tabela 5 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito

0943 1093 1243 1393 1543

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 68749plusmn651 69813plusmn1553 69498plusmn876 71393plusmn2071 71148plusmn1009 466 ns

Consumo de raccedilatildeo g 108937plusmn973 108077plusmn2506 106938plusmn1143 108570plusmn2584 109617plusmn1424 420 ns

Conversatildeo alimentar gg 1585plusmn0015 1548plusmn0006 1539plusmn0014 1523plusmn0023 1541plusmn0004 224 Quadraacutetico1

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 182410plusmn1786 178280plusmn1963 183209plusmn2355 170699plusmn3272 177743plusmn3493 366 ns

Consumo de raccedilatildeo g 339169plusmn2597 332944plusmn4420 334432plusmn4460 328563plusmn5011 335512plusmn4351 311 ns

Conversatildeo alimentar gg 1859plusmn0017 1868plusmn0017 1825plusmn0008 1926plusmn0027 1889plusmn0014 230 ns

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 251160plusmn2118 248093plusmn2721 252708plusmn2327 242092plusmn4528 248891plusmn3614 314 ns

Consumo de raccedilatildeo g 448106plusmn3333 441022plusmn6500 441370plusmn5178 437133plusmn7327 445129plusmn4655 309 ns

Conversatildeo alimentar gg 1784plusmn0013 1777plusmn0011 1746plusmn0005 1807plusmn0021 1789plusmn0008 177 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 15844-0000270801X+0000000325260X2 R2 = 070

69Tabela 6 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito

1300 1450 1600 1750 1900

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 75785plusmn402 77320plusmn1073 78103plusmn635 79648plusmn670 80151plusmn344 212 Linear1

Consumo de raccedilatildeo g 89299plusmn1140 92124plusmn2246 103470plusmn4037 104782plusmn562 96677plusmn1665 557 Quadraacutetico2

Conversatildeo alimentar gg 1179plusmn0007 1192plusmn0031 1326plusmn0055 1316plusmn0012 1207plusmn0026 613 Quadraacutetico3

1150 1300 1450 1600 1750

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 177261plusmn2817 177088plusmn2760 180666plusmn2220 182398plusmn3067 177484plusmn2109 359 ns

Consumo de raccedilatildeo g 358840plusmn5051 353952plusmn5112 356084plusmn2723 358440plusmn6584 354362plusmn2670 322 ns

Conversatildeo alimentar gg 2025plusmn0013 1999plusmn0017 1972plusmn0016 1965plusmn0006 1997plusmn0013 165 Quadraacutetico4

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 253047plusmn2782 254408plusmn3313 258769plusmn2443 262046plusmn3324 257635plusmn2041 269 Linear5

Consumo de raccedilatildeo g 448139plusmn5104 446076plusmn6429 459554plusmn4864 463275plusmn6840 451039plusmn3651 297 ns

Conversatildeo alimentar gg 1771plusmn0009 1754plusmn0015 1777plusmn0022 1768plusmn0005 1751plusmn0012 192 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 759898+00737276X R2 = 081 2 Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=085 3 Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 = 096 4 Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031 5 Y = 253818+0112096X R2 = 017

70

149150151152153154155156157158159

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo A

limen

tar

Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Na progecircnie natildeo suplementada com dieta contendo Arg verificou-se efeito

quadraacutetico (Plt005) da nutriccedilatildeo das matrizes na conversatildeo alimentar (CA) (Figura 1)

sendo que 1359 de Arg dig proporcionou o melhor iacutendice Jaacute o consumo de raccedilatildeo e o

ganho de peso natildeo foram afetados (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo da matriz

O efeito observado da suplementaccedilatildeo com Arg das matrizes na CA de frangos de

corte natildeo suplementados com Arg ser atribuiacuteda ao aumento na concentraccedilatildeo desse

aminoaacutecido na gema a qual eacute responsaacutevel pela nutriccedilatildeo dos pintos durante o seu

desenvolvimento embrionaacuterio e nas primeiras horas de vida poacutes-eclosatildeo Esse aumento

pode ter efeito positivo no desenvolvimento muscular dos pintos uma vez que esse

aminoaacutecido tem accedilatildeo indireta na formaccedilatildeo muscular atraveacutes da siacutentese do hormocircnio de

crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO) Aleacutem disso a Arg ainda estaacute envolvida na

siacutentese da creatina e de poliaminas As poliaminas satildeo consideradas de importacircncia

nutricional no crescimento e desenvolvimento do intestino do neonato (Quinn et al

2002) Segundo Foye et al(2005) o acesso do embriatildeo a nutrientes pode melhorar o

desenvolvimento do sistema digestoacuterio a eclodibilidade e o desempenho dos frangos

Quando o comportamento da curva do consumo de raccedilatildeo dos frangos de corte

que receberam dietas suplementadas com Arg foi analisada verifica-se que apoacutes o

ponto de maior consumo de raccedilatildeo ocorre uma queda na curva (Figura 2) Esse efeito

pode ter sido ocasionado por um desequiliacutebrio dos aminoaacutecidos na dieta afetando

principalmente a relaccedilatildeo LysArg O antagonismo entre esses aminoaacutecidos prejudica a

absorccedilatildeo desses uma vez que ambos competem pelo mesmo siacutetio de absorccedilatildeo

Segundo Fernandes et al (2009) o efeito negativo da suplementaccedilatildeo de Arg

pode estar associado agrave incapacidade funcional dos rins em eliminar o excesso de ureia

formado pela degradaccedilatildeo da Arg Niacuteveis elevados de Arg promovem aumento na

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 070

1359

71

atividade da arginase renal produzindo ornitina e ureia (Stuz et al 1971) Este aumento

pode comprometer a siacutentese de NO visto que a Arg eacute a uacutenica via fisioloacutegica de

produccedilatildeo deste composto Adicionalmente a isso a elevaccedilatildeo da ureia plasmaacutetica de

acordo com Prabhakar et al (1997) pode inibir a accedilatildeo da oacutexido niacutetrico sintetase (NOS)

enzima que cataliza a reaccedilatildeo que converte Arg em NO O NO aleacutem de

neurotransmissor tambeacutem modula a liberaccedilatildeo de outros neurotransmissores (Estrada amp

Murilo-Carretero 2005) cujo envolvimento destas moleacuteculas na regulaccedilatildeo do apetite

vem sendo discutido (Denbow 1999)

750

800

850

900

950

1000

1050

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

sum

o de

raccedilatilde

o (g

)

730

740

750

760

770

780

790

800

810

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Gan

ho d

e pe

so (g

)

105

11

115

12

125

13

135

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo das matrizes com dietas com Arg natildeo afetou as variaacuteveis de

desempenho da progecircnie natildeo suplementada com Arg no periacuteodo de 21 a 42 dias de

idade (Pgt005) Poreacutem quando a progecircnie recebeu dieta com Arg verificou-se efeito

quadraacutetico para conversatildeo alimentar (Plt005) e o melhor resultado foi alcanccedilado com

1669 de Arg (Figura 3)

Sabe-se que a conversatildeo alimentar indica a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo da dieta para

o crescimento e deposiccedilatildeo muscular Assim o crescimento consiste em parte do

resultado da siacutentese proteica e a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo dependem da quantidade de

aminoaacutecidos que estatildeo sendo catabolizados (Sklan amp Noy 2004) Este processo

depende de energia para a biotransformaccedilatildeo e a eliminaccedilatildeo com custo metaboacutelico para

Y = 759898+00737276X R2 = 085

Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 =0 96

Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=081

1690

1649

72

incorporar um aminoaacutecido na cadeia proteica de 4 mol de ATP e de 6 mol de ATPg de

N para eliminaacute-lo (Mc Leoad 1997)

194195196197198199

2201202203204

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo de Arg durante todo o periacuteodo de criaccedilatildeo eacute essencial para que

a ave expresse todo o seu potencial geneacutetico principalmente em relaccedilatildeo ao ganho de

peso Para a progecircnie suplementada no periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade)

observou-se efeito linear positivo (Pgt005) no ganho de peso e para a progecircnie que natildeo

recebeu suplementaccedilatildeo natildeo foi observado efeito(Pgt005) da suplementaccedilatildeo das

matrizes nas variaacuteveis de desempenho (Figura 4)

2500

2520

2540

2560

2580

2600

2620

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Gan

ho d

e Pe

so (g

)

Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

De fato segundo Fernandes et al (2009) a suplementaccedilatildeo de Arg acima das

exigecircncias nas raccedilotildees iniciais (1 a 21 dias) dos frangos melhora o desempenho

produtivo das aves entretanto esse efeito eacute transiente natildeo havendo diferenccedila nestas

caracteriacutesticas na idade de abate

Na fase inicial de criaccedilatildeo a Arg eacute considerada um aminoaacutecido essencial na dieta

das aves visto que o ciclo da ureia natildeo eacute funcional nas aves Assim a incapacidade

desses animais em sintetizar Arg implica na necessidade do fornecimento desse

aminoaacutecido na dieta Aleacutem disso a Arg eacute considerada o quinto aminoaacutecido limitante

Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031

1669

Y = 253818+0112096X R2 = 017

73

para frangos em dietas agrave base de milho e de farelo de soja apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Segundo Ball et al (2007) a exigecircncia de Arg pelas aves eacute a mais alta entre as

espeacutecies de animais estudadas isso porque aleacutem da falta da siacutentese endoacutegena a taxa de

deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento das atuais linhagens de corte eacute muito alta

Os valores meacutedios de desempenho (Tabelas 5 e 6) apresentados durante o

periacuteodo experimental total (1 a 42 dias) satildeo muito proacuteximos Assim foi realizada a

anaacutelise conjunta de ambos os experimentos para confirmar a necessidade ou natildeo de

suplementaccedilatildeo da progecircnie com Arg na dieta No periacuteodo total de 1 a 42 dias (Tabela

7) a CA foi melhor na progecircnie que recebeu dieta suplementada apesar do CR ter sido

superior nessas aves demonstrando assim que a progecircnie suplementada com Arg

converte mais eficientemente a raccedilatildeo em massa muscular

Tabela 7 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg

1 a 21 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 70120plusmn585 108428plusmn789 1547plusmn0007

Progecircnie (suplementada) 78202plusmn406 97271plusmn1456 1243plusmn0018

CV () 473 913 0011 22 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 178468plusmn1380 334124plusmn1877 1874plusmn010

Progecircnie (suplementada) 178979plusmn1160 356346plusmn1981 1992plusmn0007

CV () 1182 1999 0007 1 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 248588plusmn1487 442552plusmn2419b 1781plusmn0006b

Progecircnie (suplementada) 257181plusmn1315 453617plusmn2597a 1764plusmn0006a

CV () 1347 2477 0006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Dentre os paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada

apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis

suplementares de Arg recebidos pelas matrizes (Figura 5)

74

Tabela 8 ndash Meacutedias e erro padratildeo de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito Paracircmetros 0943 1093 1243 1393 1543

de Carcaccedila 6944plusmn025 6863plusmn044 6987plusmn033 6953plusmn028 7009plusmn029 115 Linear1

de Peito 3587plusmn028 3519plusmn017 3662plusmn032 3639plusmn041 3618plusmn042 228 ns

de Coxa 3041plusmn032 3085plusmn019 2970plusmn033 2999plusmn032 3021plusmn022 229 ns

de Asa 1142plusmn016 1129plusmn014 1118plusmn006 1104plusmn020 1110plusmn014 329 ns

de Dorso 2279plusmn020 2352plusmn026 2267plusmn014 2287plusmn030 2262plusmn030 266 ns

de Gordura abdominal 295plusmn015 325plusmn014 292plusmn016 367plusmn019 290plusmn011 1220 ns ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 690720+000146984X R2 = 081 Tabela 9 ndash Meacutedias e erros padratildeo de rendimento da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito Paracircmetros 1150 1300 1450 1600 1750

de Carcaccedila 6993plusmn029 7022plusmn028 7138plusmn033 7128plusmn020 7160plusmn031 099 Linear1

de Peito 3579plusmn030 3584plusmn077 3690plusmn021 3651plusmn028 3698plusmn019 277 Linear2

de Coxa 3126plusmn030 3108plusmn066 3027plusmn025 3026plusmn023 3045plusmn020 295 Linear3

de Asa 1137plusmn022 1123plusmn015 1105plusmn017 1095plusmn015 1096plusmn021 398 Linear4

de Dorso 2272plusmn033 2286plusmn057 2263plusmn028 2273plusmn028 2260plusmn048 436 ns

de Gordura abdominal 314plusmn013 311plusmn013 238plusmn007 279plusmn014 285plusmn007 964 Quadraacutetico5 1 Y = 700017+000293620X R2= 045 2 Y = 357918+000203737X R2 = 027 3 Y = 311542-000163610X R2=021 4 Y = 113323-000072978X R2 = 085 5 Y = 322863-000316200X+000000424975X2R2=030 ns = natildeo significativo

75

686

688

69

692

694

696

698

70

702

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

d

e C

arca

ccedila

Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Al-Murrani (1982) demonstrou que injetando uma mistura de aminoaacutecidos nos

embriotildees em crescimento nos ovos de matrizes de corte resultam em aumento no peso

do pinto e no ganho de peso dos frangos de corte aos 56 dias de idade quando estes

foram comparados com os natildeo tratados De fato o peso do embriatildeo e dos pintos eacute

influenciado pelo perfil nutricional da gema por sua utilizaccedilatildeo pelo pintos apoacutes o

nascimento (Otha et al 1999)

Quando os frangos receberam dietas suplementadas com Arg houve aumento

linear positivo (Plt005) da porcentagem de carcaccedila e de peito poreacutem as porcentagens

de pernas e de asa apresentaram queda linear (Plt005) (Figura 6) Esses efeitos

provavelmente ocorreram pela accedilatildeo indireta da Arg pela formaccedilatildeo muscular atraveacutes da

siacutentese do hormocircnio do crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO)

A Arg eacute constituinte de proteiacutenas e estaacute envolvida na secreccedilatildeo de insulina pelo

pacircncreas (Bolea et al 1997) e do GH pela hipoacutefise (Merimee et al 1969) Os efeitos

desses hormocircnios se manifestam por meio da secreccedilatildeo secundaacuteria dos fatores de

crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Roith et al 2001) O IGF-I eacute conhecido

por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo esqueleacutetico como

a proliferaccedilatildeo e a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelites (Florini et al 1996) e a agregaccedilatildeo

de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos na siacutentese e na degradaccedilatildeo proteica

(Duclos et al 2005)

Outro mecanismo de accedilatildeo da Arg nas fibras musculares estaacute relacionada com agrave

accedilatildeo do oacutexido niacutetrico O NO eacute sintetizado pela oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) a qual eacute

expressada pelas fibras do muacutesculo esqueleacutetico (Reid 2001) A atividade da NOS

variam nos diferentes tipos de muacutesculos sendo que nos muacutesculos de contraccedilatildeo raacutepida

verifica-se maior accedilatildeo desta do que nos muacutesculos de contraccedilatildeo lenta (Reid 2001)

Y = 690720+000146984X R2 = 081

76

Assim o efeito observado nos diferentes cortes provavelmente ocorreu em virtude da

predominacircncia de fibras brancas ou Fast Glycolytic (FG) no peito Em contrapartida os

muacutesculos da coxa sobrecoxa e da asa possuem predominacircncia de fibras vermelhas ou

Slow Oxidative (SO) que satildeo de contraccedilatildeo lenta (Sartori amp Gonzaacuteles 2002) e pouco

afetada pela accedilatildeo da NOS

O teor de gordura abdominal presente na carcaccedila de frangos eacute um dos melhores

indicativos de qualidade da carcaccedila Quando os frangos foram suplementados com

niacuteveis de Arg verificou-se efeito quadraacutetico (Plt005) para essa caracteriacutestica em que o

menor teor de gordura abdominal foi obtido com 1672 de Arg dig (Figura 6) A

queda observada ateacute esse niacutevel pode ser explicada pela accedilatildeo do GH via IGF-I que induz

a siacutentese de proteiacutenas por estimular a captaccedilatildeo de aminoaacutecidos e a transcriccedilatildeo e a

traduccedilatildeo do mRNA em vaacuterios tecidos-alvo Diminui o catabolismo de proteiacutenas por

atuar diretamente na liberaccedilatildeo de aacutecidos graxos do tecido adiposo aumentando a sua

conversatildeo em acetil-CoA fonte de energia para os tecidos perifeacutericos A partir desse

ponto onde verifica-se o menor acuacutemulo de gordura ocorre novamente o aumento na

deposiccedilatildeo de gordura abdominal Isso provavelmente se deve ao excesso de aminoaacutecido

na dieta A degradaccedilatildeo desse excesso leva a excreccedilatildeo de nitrogecircnio na urina na forma

de amocircnia e a produccedilatildeo de moleacuteculas com esqueleto carbocircnico que satildeo usadas na

gliconeogecircnese e na lipogecircnese

Segundo Shutte amp Pack (1995) e Leclerq (1998) a suplementaccedilatildeo e o

balanceamento dos aminoaacutecidos das dietas podem promover aumento no ganho de

carcaccedila principalmente em relaccedilatildeo ao peito (Pophal et al 2004) e reduccedilatildeo de gordura

abdominal (Vieira et al 2004)

Mendes et al (1997) verificaram que o aumento da relaccedilatildeo ArgLys melhorou o

rendimento de carcaccedila e reduziu a gordura abdominal em frangos de corte Costa et al

(2001) observaram que agrave medida em que se aumentou a relaccedilatildeo ArgLys houve efeito

linear crescente para o rendimento de perna e decrescente para a gordura abdominal Jaacute

Fernandes et al (2009) natildeo observaram efeito da suplementaccedilatildeo de Arg nas variaacuteveis de

rendimento de carcaccedila analisadas o que provavelmente ocorreu porque diferentemente

do presente trabalho a suplementaccedilatildeo de Arg foi realizada apenas na fase inicial de

criaccedilatildeo (1 a 21 dias de idade)

77

69

695

70

705

71

715

72

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

arca

ccedila

35352354356358

36362364366368

37372

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

P

eito

296298

30302304306308

31312314

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

oxa

106

107

108

109

11

111

112

113

114

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

A

sa

2

22

24

26

28

3

32

34

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

G

ordu

ra a

bdom

inal

Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Outra possibilidade eacute que essas caracteriacutesticas de rendimento de carcaccedila foram

influenciadas pelos niacuteveis dieteacuteticos de Arg que estatildeo acima da exigecircncia das aves

Resultado contraacuterio foi obtido por Atencio et al (2004) que trabalhando com niacuteveis

crescentes de Arg natildeo verificaram efeito no rendimento de carcaccedila e de cortes

avaliados e estes concluiacuteram que os niacuteveis estudados estavam dentro da exigecircncia das

aves

Na anaacutelise conjunta do rendimento de carcaccedila dos experimentos da progecircnie

que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg (Tabela 10) demonstrou-se que a

presenccedila de Arg na dieta promove maior deposiccedilatildeo muscular na coxa e menor acuacutemulo

de gordura abdominal na carcaccedila

Y = 322863-000316200X+000000424975X2 R2 = 030

1672

Y = 700017+000293620X R2 = 045 Y = 357918+000203737X R2 = 027

Y = 113323-000072978X R2 = 085 Y = 311542-000163610X R2 = 021

Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

78

Tabela 10 ndash Meacutedias de percentagem de carcaccedila (CARC) percentagem de peito (PEITO) percentagem de coxa (COXA) percentagem de asa (ASA) percentagem de gordura abdominal (GORDURA) das progecircnies suplementadas ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

CARC PEITO COXA ASA GORDURAProgecircnie

(ssuplementaccedilatildeo) 6951plusmn016 3605plusmn017 3023plusmn014b 1121plusmn007 307plusmn007ordf

Progecircnie (suplementada) 7088plusmn017 3640plusmn020 3066plusmn017ordf 1111plusmn008 285plusmn007b

CV () 014 017 015 007 006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Com relaccedilatildeo aos paracircmetros oacutesseos dos frangos de corte que receberam dietas

sem suplementaccedilatildeo de Arg (Tabela 11) apenas o diacircmetro de tiacutebia aos sete dias de

idade foi afetado de forma quadraacutetica (Plt005) pela suplementaccedilatildeo das matrizes a

partir do niacutevel 1196 de Arg (Figura 7) demonstrando assim que inclusotildees de Arg

acima da exigecircncia promove a melhora dessa caracteriacutestica Segundo Wu amp Morris

(1998) a suplementaccedilatildeo de Arg em niacuteveis elevados promove aumento na atividade da

arginase renal eleva os niacuteveis de ornitina que participa da biossiacutentese das poliaminas

envolvidas no processo de multiplicaccedilatildeo celular melhorando desta forma o suporte

oacutesseo Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram aumento na concentraccedilatildeo

plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez secretado pela

hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio receptor e

indiretamente via IGF-I e II nos tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos

do GH ocorre no disco epifisaacuterio em que atua estimulando a siacutentese de IGF-I o qual

atua paracrinamente induzindo mitogecircnese o que resulta no crescimento dos ossos

longos (Isaksson et al 1987)

Para os paracircmetros morfoloacutegicos dos ossos dos frangos que receberam dietas

contendo suplementaccedilatildeo de Arg verifica-se efeito linear crescente (Plt005) dos niacuteveis

de arginina para o comprimento e diacircmetro do fecircmur e da tiacutebia O mesmo

comportamento foi observado para o iacutendice de Seedor medida indireta da densidade

oacutessea para ambos os ossos aos 7 dias de idade (Figura 8)

79

Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Fecircmur Tiacutebia Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arg na dieta materna

()

7 dias

0943 2930plusmn034 286plusmn008 2803plusmn027 4154plusmn047 271plusmn005 2925plusmn078 1093 2929plusmn042 293plusmn008 2990plusmn123 4162plusmn062 265plusmn005 2945plusmn096 1243 2911plusmn031 283plusmn008 2603plusmn078 4175plusmn042 258plusmn004 2733plusmn063 1393 2912plusmn046 295plusmn008 2920plusmn086 4172plusmn062 273plusmn003 3008plusmn117 1543 2983plusmn031 293plusmn009 2877plusmn068 4269plusmn039 275plusmn002 2897plusmn038

CV 313 690 712 306 377 701 Regressatildeo ns ns ns Ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- ----- ----- 081 -----

21 dias

0943 5001plusmn056 594plusmn019 10198plusmn294 7128plusmn141 526plusmn012 9621plusmn202 1093 5064plusmn036 632plusmn015 10928plusmn175 7197plusmn086 576plusmn008 10720plusmn182 1243 4937plusmn065 574plusmn013 9956plusmn396 6911plusmn094 514plusmn023 9899plusmn357 1393 5002plusmn062 569plusmn011 9822plusmn346 6912plusmn123 512plusmn009 9537plusmn341 1543 5035plusmn026 613plusmn020 11288plusmn337 7005plusmn135 535plusmn011 10928plusmn339

CV 252 657 747 411 635 711 Regressatildeo ns ns ns Ns ns ns R2 ----- ----- ----- ----- ----- -----

ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

80

Tabela 12 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Paracircmetros oacutesseos Fecircmur Tiacutebia

Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arginina () 7 dias 1300 3007plusmn042 309plusmn011 3194plusmn102 4260plusmn041 285plusmn012 3164plusmn122 1450 3022plusmn036 313plusmn007 3333plusmn098 4311plusmn055 293plusmn008 3202plusmn087 1600 3074plusmn023 321plusmn007 3435plusmn102 4352plusmn024 292plusmn004 3405plusmn101 1750 3098plusmn011 322plusmn007 3348plusmn089 4324plusmn044 293plusmn003 3315plusmn114 1900 3058plusmn015 322plusmn012 3540plusmn140 4350plusmn019 305plusmn005 3503plusmn108 CV 225 712 781 220 608 789 Regressatildeo Linear1 ns Linear2 Ns Linear3 Linear4 R2 023 ----- 020 ----- 030 045

21 dias 1300 1300 1450 1600 1750 553plusmn016 9974plusmn408 1450 5032plusmn031 595plusmn015 9973plusmn343 7122plusmn058 533plusmn019 9675plusmn313 1600 5062plusmn068 614plusmn009 10623plusmn306 7102plusmn041 566plusmn015 10453plusmn286 1750 5134plusmn043 597plusmn013 10024plusmn226 7341plusmn180 548plusmn007 9577plusmn168 1900 5111plusmn044 615plusmn013 10942plusmn185 7145plusmn064 562plusmn008 10751plusmn333 CV 231 567 732 333 619 757 Regressatildeo ns ns Linear5 Ns ns ns R2 ----- ----- 030 ----- ---- -----

NS = natildeo significativo 1 Y = 301662+000117500X 2 Y = 322856+000471280X 3 Y = 285333+0000799183X 4 Y = 315921+000526700X 5 Y = 983310+00149518X

255

26

265

27

275

28

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Diacirc

met

ro d

a Tiacute

bia

(mm

)

Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados encontrados para essa idade estatildeo de acordo com os encontrados

por Fernandes (2007) que encontrou efeito linear crescente para o iacutendice de Seedor

quando as aves foram alimentadas com Arg na dieta Aos 21 dias de idade apenas o

iacutendice de Seedor foi afetado de forma linear (Plt005) crescente com o aumento dos

niacuteveis de Arg (Figura 9) O comportamento positivo da suplementaccedilatildeo de arginina sobre

a morfologia do fecircmur e da tiacutebia pressupotildee melhor densidade desses ossos Segundo

Sekine et al (1994) os aminoaacutecidos no o crescimento transverso do osso e essa accedilatildeo

facilita a formaccedilatildeo da matriz e a calcificaccedilatildeo oacutessea

Aleacutem da accedilatildeo da Arg sobre os ossos indiretamente via IGF-I esta tambeacutem eacute

conhecida como precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo pelo qual ela poderia exercer os

seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo Hukkanem et al (1999) sugerem que o

NO pode participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento

298

30

302

304

306

308

31

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Com

prim

ento

- Fecirc

mur

(mm

)

30531

31532

32533

33534

34535

355

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - F

ecircmur

Y = 301662+000117500X R2 = 023 Y = 322856+000471280X R2 = 020

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

Arginina dig ()

82

26

27

28

29

3

31

32

33

34

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Diacirc

met

ro -

Tiacutebi

a (m

m)

30305

31315

32325

33335

34345

35

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - T

iacutebia

Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada ou natildeo com Arg avaliados em

conjunto mostraram que a suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg melhorou o comprimento do

fecircmur e a espessura da tiacutebia Este resultado pode contribuir para melhorar a qualidade

dos ossos dos frangos uma vez que esse eacute um dos maiores problemas enfrentados na

atualidade na avicultura comercial

Tabela 13 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

FC (mm)

FE (mm) FSEE TC

(mm) TE

(mm) TSEE

7 dias Progecircnie

(ssuplementaccedilatildeo)

2933plusmn016

290plusmn003

2838plusmn042

4186plusmn023

268plusmn002

2902plusmn038

Progecircnie (suplementada)

3052plusmn013

317plusmn004

3369plusmn049

4319plusmn017

293plusmn003

3317plusmn050

CV () 014 004 042 021 0026 043 21 dias

Progecircnie (ssuplementaccedil

atildeo)

5008plusmn023b

596plusmn008

10438plusmn170

7031plusmn053

533plusmn007b

10141plusmn162

Progecircnie (suplementada)

5079plusmn021ordf

607plusmn006

10282plusmn150

7157plusmn044

552plusmn006ordf

10086plusmn154

CV () 016 007 140 048 006 136 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Y = 315921+000526700X R2 = 045 Y = 285333+0000799183X R2 = 030

83

96597

97598

98599

995100

1005101

1015102

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig

Iacutendi

ce d

e Se

edor

- Fecirc

mur

Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade

Conclusatildeo

De acordo com os resultados observados conclui-se que os niacuteveis dieteacuteticos de

Arg na dieta das matrizes de corte foram suficientes para melhorar o desempenho da

progecircnie somente na fase inicial de crescimento (1-21 dias de idade) Quando a dieta da

progecircnie tambeacutem foi suplementada com Arg os paracircmetros de desempenho

rendimento de carcaccedila e qualidade oacutessea satildeo melhorados em ambas as fases de criaccedilatildeo

(1-21 dias e 22 a 42 dias de idade) com melhorias imprescindiacuteveis para a qualidade de

carne como a reduccedilatildeo da gordura abdominal

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V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos sete dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavra-chave arginina ELISA fitohemaglutinina sistema imune

V - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

humoral and cellular immunity response of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level being considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses

Key words arginine ELISA phytohemagglutinin immune system

91

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo da matriz afeta o desempenho dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias de

vida portanto a necessidade da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos O sistema imune das aves difere dos mamiacuteferos em algumas

caracteriacutesticas particularmente nos aspectos de estrutura e de diferenciaccedilatildeo dos oacutergatildeos

linfoides (Jeurissen et al 1994) cujo desenvolvimento se inicia durante a vida

embrionaacuteria e se prolonga apoacutes a eclosatildeo ou nascimento

As uacuteltimas horas de incubaccedilatildeo e os primeiros dias de vida poacutes-eclosatildeo satildeo

fundamentais para que este desenvolvimento se complete Somente apoacutes a segunda

semana de vida a ave seraacute capaz de produzir suas proacuteprias imunoglobulinas Ateacute laacute a

imunidade herdada da matildee pela absorccedilatildeo das imunoglobulinas presentes no ovo eacute o

uacutenico mecanismo de defesa do neonato contra as agressotildees do meio externo apoacutes a

eclosatildeo (Maiorka et al 2006)

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas A arginina (Arg) eacute

considerada um aminoaacutecido essencial para aves sobretudo na fase inicial por que o

ciclo bioquiacutemico da ureia natildeo eacute funcional em aves Assim estas natildeo podem sintetizar

Arg e satildeo portanto dependentes do fornecimento deste aminoaacutecido nas dietas Dentre

as espeacutecies animais estudadas as aves tecircm a mais alta exigecircncia de Arg (Ball et al

2007) que se deve tambeacutem agrave alta taxa de deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento

das atuais linhagens de corte e o antagonismo com a Lys

A Arg eacute necessaacuteria para siacutentese de vaacuterias compostos tais como ornitina

poliaminas prolina creatina de proteiacutenas oacutexido niacutetrico (NO) e citrulina aleacutem de

92

glutamato e agmatina em mamiacuteferos A Arg eacute tambeacutem considerada um potente

secretagogo aumentando a liberaccedilatildeo na corrente sanguiacutenea da insulina hormocircnio do

crescimento (GH) e fator de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I) (Newsholme et

al 2005) Esta accedilatildeo eacute em consequecircncia da raacutepida despolarizaccedilatildeo da membrana

plasmaacutetica ligada ao transporte de aminoaacutecidos com a cadeia lateral positiva

De acordo com Le Flocrsquoh et al (2004) os animais estimulados

imunologicamente podem ter suas necessidades de Arg aumentadas Duas rotas do

metabolismo da Arg satildeo identificadas e conhecidas por ter efeitos imunomodulatoacuterios

diretos A primeira na qual a Arg eacute convertida a ornitina gerando poliaminas que tecircm

papel chave na divisatildeo celular siacutentese de DNA e regulaccedilatildeo do ciclo celular A segunda

corresponde agrave siacutentese do NO induzida por vaacuterios de estiacutemulos inflamatoacuterios como as

endotoxinas bacterianas e as citocinas Essa rota eacute essencial para a atividade citotoacutexica

de macroacutefagos O NO tambeacutem estimula a vasodilataccedilatildeo local e favorece ainda a

reparaccedilatildeo tecidual (Bredt amp Snyder 1994)

Com este trabalho objetivou-se avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina na

dieta das matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie

suplementadas ou natildeo

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

93

dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

em um delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-

Arginina incluiacutedos na dieta materna (0 150 300 450 e 600 mgkg da dieta materna)

que equivaleram aos niacuteveis de 0 9431093 12431393 e 1 543 de Arg

digestiacutevel com seis repeticcedilotildees com 35 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo estes substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada boxe foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado um

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

durante todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as aves e as sobras de raccedilatildeo do boxe foram pesadas

ao mesmo tempo para ajustar o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 1) As

dietas experimentais agrave base de milho e farelo de soja foram formuladas de acordo com

os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e recomendaccedilotildees nutricionais de

Rostagno et al (2005) As aves receberam uma uacutenica raccedilatildeo sem suplementaccedilatildeo de

arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz sobre o desempenho

da progecircnie

94

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 018 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 18500 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

95

Experimento 2 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes atraveacutes de um delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na

dieta materna de 0 a 600 mgkg da dieta de Arg digestiacutevel acima da recomendaccedilatildeo dos

frangos de corte e seis repeticcedilotildees com 32 aves cada totalizando 30 unidades

experimentais

O manejo realizado nesse experimento foi conduzido conforme descrito no

experimento anterior com diferenccedila com relaccedilatildeo ao tipo de dieta utilizada

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg da dieta acima da exigecircncia dos frangos de corte agrave raccedilatildeo

basal inicial em substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial

corresponderam a 1300 1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela

2) A partir dos 22 dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300

1450 1600 e 1750 de Arg digestiacutevel (Tabela 3)

96

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900 Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6457 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 130 145 160 175 190 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

97

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 075 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 1000 1000 1000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI

VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

Colheita de Sangue e Anaacutelise de Tiacutetulos vacinais

No 7ordm dia de vida antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm foram coletadas

amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo As aves foram vacinadas contra a

doenccedila de New Castle (Fort-Dodgereg) via ocular na dose de 003 mL por ave aos sete e

21 dias de idade A venopunccedilatildeo foi realizada mediante contenccedilatildeo fiacutesica manual dos

98

animais preferencialmente na veia jugular direita com seringa de 3 mL e agulha 13x45

e uma quantia de sangue coletada em torno de 1 do peso corporal dos animais O

sangue foi acondicionado em tubos de vidro identificados sem anticoagulante para

obtenccedilatildeo de soro sanguiacuteneo No soro foi avaliada a titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais

contra o viacuterus de Doenccedila Newcastle pelo teste imunoenzimaacutetico (ELISA-teste) As

anaacutelises foram processadas em kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent

Assay) do Laboratoacuterio Idexxreg e os dados obtidos foram expressos em absorbacircncia Os

dados de titulaccedilatildeo de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Anaacutelise Histomorfomeacutetrica

No 7ordm e 21ordm dia de idade o timo a bolsa cloacal o baccedilo e o fiacutegado de duas aves

por repeticcedilatildeo foram coletados totalizando doze aves por tratamento Para a realizaccedilatildeo

dessa coleta as aves foram submetidas ao atordoamento por choque e posterior sangria

Apoacutes o sacrifiacutecio as aves foram pesadas individualmente e as carcaccedilas dessecadas para

remoccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides (Timo Baccedilo e Bolsa de Fabricius) O peso dos oacutergatildeos

linfoides foi obtido imediatamente apoacutes a dessecaccedilatildeo e remoccedilatildeo dos tecidos exoacutegenos

Os oacutergatildeos coletados foram pesados em balanccedila de precisatildeo e o peso da ave foi

devidamente anotado

O peso relativo de cada oacutergatildeo foi obtido pela foacutermula

Peso relativo = (peso oacutergatildeopeso vivo) x 100

Para a medida histomorfomeacutetrica dos foliacuteculos linfoides as bolsas cloacais e o

fiacutegado foram acondicionadas em frascos contendo soluccedilatildeo de formol tamponado a 10

(De Tolosa et al 2003) com finalidade de manter a integridade dos tecidos apoacutes a

morte preservando a arquitetura celular As peccedilas foram incluiacutedas em parafina e levadas

ao microacutetomo rotativo para a realizaccedilatildeo dos cortes transversais no centro do oacutergatildeo com

sete microcircmetros de espessura e corados pelo meacutetodo da hematoxilina e eosina (HE) As

lacircminas foram escaneadas usando-se um ldquoscaner HP ScanJet II v25rdquo sendo o

ldquosoftwarerdquo utilizado para o tratamento das imagens o ldquoPaint Shop Pro v50rdquo A

imagem foi digitalizada brilho (variaacutevel entre 125 e 145) contraste 185 e escala de

800 As imagens foram gravadas com extensatildeo jpg e levadas ao analisador de

imagens Para a leitura das imagens foi utilizado um analisador de imagem

computadorizado IMAGE PROPLUS 52 da Miacutedia Cibertecnics Foi mensurada a

altura de trecircs dobras do tecido linfoide de cada repeticcedilatildeo (12 aves por tratamento) e

destes valores foi obtida a meacutedia

99

Nas amostras de fiacutegado foi analisada a presenccedila de aglomerados linfoides As

lacircminas com porccedilotildees do fiacutegado foram analisadas em toda sua extensatildeo e os

aglomerados linfoides foram quantificados atraveacutes de microscopia de luz com aumento

de 10X (Olympus BH2 Olympus America INC NY USA)

Fitohemaglutinina (PHA)

Aos 35 dias de idade duas aves por repeticcedilatildeo totalizando 12 aves por tratamento

foram marcadas com anilhas numeradas e utilizadas para avaliar a imunidade mediada

por ceacutelulas in vivo (Corrier amp DeLoach 1990) Cada ave foi inoculada

intradermicamente no espaccedilo interdigital entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata direita com 01

mL de uma soluccedilatildeo fitohemaglutinina PHA-Mreg (1057601 - Invitrogen) Como controle

negativo 01 mL de soro fisioloacutegico esteacuteril foi inoculado entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata

esquerda O espessamento da pele de ambas as patas foi aferido em miliacutemetros

utilizando-se um paquiacutemetro digital antes da inoculaccedilatildeo e apoacutes trecircs seis 12 e 24 horas

apoacutes a inoculaccedilatildeo O caacutelculo (Corrier amp DeLoach 1990) apresentou-se da seguinte

forma Reaccedilatildeo = resposta a fitohemaglutinina ndash resposta do controle na qual a resposta

a fitohemaglutinina eacute medida pela espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo menos

a espessura no tempo zero (antes da inoculaccedilatildeo) A resposta do controle eacute medida pela

espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo (Soro) menos a espessura no tempo zero

(antes da inoculaccedilatildeo)

Avaliaccedilatildeo da Atividade Fagociacutetica de Macroacutefagos

Para avaliaccedilatildeo da atividade fagociacutetica de macroacutefagos foram utilizadas duas aves

por repeticcedilatildeo totalizando quatro aves por tratamento As aves foram inoculadas no 35ordm

dia de vida atraveacutes de injeccedilatildeo intra-abdominal de Sephadex G-50reg (Sigma) a 3 (10

mL100g de peso vivo) (Qureshi et al 1986 Gore amp Qureshi 1997 Konjufca 2004)

Utilizaram-se para esse procedimento cateteres intravasculares G-14 Apoacutes 42

horas as aves foram submetidas a atordoamento por eletronarcose e sacrificadas atraveacutes

de desligamento cervical Foram lavadas (detergente neutro) e sanitizadas (aacutelcool 70)

As aves foram transportadas ao laboratoacuterio onde se procedeu a abertura da cavidade

abdominal que foi posteriormente lavada com 20 mL de soluccedilatildeo de PBS esteacuteril

heparinizada contendo 05 UIL (Liqueminereg 25000 UI5mL ndash Roche)

Coletaram-se aproximadamente 15 mL de liacutequido abdominal com auxiacutelio de

pipetas Pasteur que foi imediatamente acondicionado em tubos Falcon em banho de

100

gelo O material foi centrifugado a 1500 rpm10 minutos sendo o ldquopelletrdquo

ressuspendido em 2 mL de meio RPMI 1640reg (Sigma) Adicionou-se 150 μL dessa

suspensatildeo a cada well da placa de cultura (24 poccedilos) contendo lamiacutenula de 13 mm de

diacircmetro Incubou-se a temperatura ambiente por uma hora Lavou-se a placa com PBS

esteacuteril gelado para remover as ceacutelulas natildeo aderentes Em seguida adicionou-se 150 μL

de suspensatildeo a 3 de eritroacutecitos de carneiros em meio RPMI 1640reg (Sigma)

incubando-se em temperatura ambiente em concentraccedilatildeo de 5 de gaacutes carbocircnico por

uma hora Lavou-se com PBS esteacuteril gelado para remover os eritroacutecitos que natildeo

aderiram Em seguida realizou-se a coloraccedilatildeo utilizando-se kit comercial (Panoacutetico

Raacutepido LBreg - Laborclin)

Apoacutes 24 horas as lacircminas foram montadas utilizando-se Permountreg Foram

contados em cada lamiacutenula 300 macroacutefagos e verificado o nuacutemero destas ceacutelulas que

continham hemaacuteceas fagocitadas A atividade fagociacutetica foi calculada considerando-se o

nuacutemero de macroacutefagos contendo hemaacuteceas fagocitadas dividido pelo nuacutemero total de

macroacutefagos contados

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

101

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Resultados e Discussatildeo

Os dados meacutedios dos pesos relativos de oacutergatildeos linfoides de frangos de corte

alimentados com dietas natildeo suplementadas estatildeo na Tabela 5 A suplementaccedilatildeo das

matrizes de corte natildeo influenciou o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie

natildeo suplementada com Arg (Pgt005) Da mesma maneira quando houve a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg para a progecircnie tambeacutem natildeo foi verificado (Pgt005)

efeito sobre o peso relativo dos oacutergatildeos linfoides dessas aves (Tabela 6)

102

Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg das Matrizes () 7 dias 21 dias

0943 058plusmn003 054plusmn004 1093 055plusmn003 056plusmn005 1243 056plusmn003 057plusmn003 1393 052plusmn004 057plusmn004 1543 052plusmn003 051plusmn005 CV 1410 1840

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

0943 006plusmn0005 011plusmn001 1093 008plusmn0007 011plusmn001 1243 012plusmn0036 009plusmn001 1393 007plusmn0007 010plusmn001 1543 009plusmn0007 010plusmn001 CV 4968 2463

Regressatildeo ns ns Baccedilo()

0943 015plusmn001 024plusmn001 1093 017plusmn001 022plusmn002 1243 016plusmn001 021plusmn001 1393 015plusmn001 022plusmn003 1543 013plusmn001 021plusmn001 CV 1885 1868

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

O timo e a bolsa cloacal satildeo oacutergatildeos linfoides primaacuterios que representam siacutetios

de maturaccedilatildeo de linfoacutecitos T e B respectivamente Estes oacutergatildeos tecircm fundamental

importacircncia no periacuteodo poacutes-eclosatildeo poreacutem agrave medida que as aves se desenvolvem e se

aproximam da maturidade sexual sofrem involuccedilatildeo fisioloacutegica (Morgullis 2002)

No contexto do desenvolvimento e maturaccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides trabalhos

desenvolvidos com mamiacuteferos demonstram que as respostas imunes podem ser

influenciadas pela Arg dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al 1998 Lewis amp

Langkamp-Henken 2000) Experimentos desenvolvidos com animais jovens

demonstraram efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina como o aumento

do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos tiacutemicos Os efeitos

imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais estressados ou

imunossupremidos

103

Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias

1300 053plusmn005 056plusmn004 1450 057plusmn004 057plusmn003 1600 059plusmn004 059plusmn003 1750 051plusmn003 048plusmn005 1900 058plusmn004 053plusmn004 CV 1910 1790

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

1300 016plusmn0011 025plusmn002 1450 015plusmn0012 020plusmn001 1600 018plusmn0007 022plusmn002 1750 019plusmn0016 026plusmn003 1900 015plusmn0007 023plusmn001 CV 1621 2021

Regressatildeo ns ns Baccedilo ()

1300 007plusmn0009 008plusmn001 1450 009plusmn0008 010plusmn001 1600 008plusmn0006 009plusmn001 1750 008plusmn0005 011plusmn001 1900 007plusmn0007 010plusmn001 CV 2227 2151

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

Para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de Arg foram

observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

nutricionais estabelecidas Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de

Arg plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular (Kidd 2004)

Ao contraacuterio dos resultados observados nesse experimento Jahanian (2009)

observou que animais na fase inicial com dietas suplementadas com Arg e com baixo

niacutevel proteico apresentaram aumento do peso relativo do timo indicando assim que a

Arg eacute necessaacuteria para a resposta oacutetima da imunidade celular

Quando se contrastam os dados do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (Tabela 7)

verificou-se a influencia da suplementaccedilatildeo de Arg no peso da bolsa cloacal (Plt005) no

periacuteodo inicial de criaccedilatildeo Esse aumento eacute de grande importacircncia uma vez que a bolsa

cloacal eacute o principal siacutetio de maturaccedilatildeo dos linfoacutecitos B que satildeo essenciais ao sistema

imune das aves Na fase de 1 a 7 dias de idade esse incremento pode refletir a melhoria

104

das condiccedilotildees imunitaacuterias jaacute que nesse periacuteodo os desafios sanitaacuterios podem

comprometer todo desempenho dessa ave ateacute o final de sua criaccedilatildeo

Tabela 7 ndash Meacutedias e erro padratildeo do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

7 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada) 054plusmn001 015plusmn0005b 0085plusmn0008

Progecircnie (suplementada) 056plusmn002 017plusmn0006ordf 0079plusmn0003

CV () 002 0005 0006 21 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada)

055plusmn001 022plusmn0007 011plusmn0005

Progecircnie (suplementada)

054plusmn002 023plusmn0009 009plusmn0004

CV () 002 008 0004 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

A anaacutelise histomorfomeacutetrica do fiacutegado natildeo mostrou influecircncia (Pgt005) das

dietas das matrizes nos aglomerados linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo (Tabela

8) Da mesma maneira as dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal natildeo foram

influenciadas (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo ou natildeo de Arg na dieta (Tabela 8)

Existe relaccedilatildeo direta entre o fiacutegado e a bolsa cloacal Nas aves os linfoacutecitos B

responsaacuteveis pela produccedilatildeo de anticorpos envolvidos na resposta imunoloacutegica humoral

satildeo produzidos no fiacutegado do embriatildeo no saco viteliacutenico e na medula oacutessea na fase

inicial da incubaccedilatildeo Apoacutes isso migram para a bolsa cloacal e sofrem amadurecimento

e diferenciaccedilatildeo por ateacute dez semanas Daiacute partem para colonizar outros oacutergatildeos como o

baccedilo e a glacircndula de Harder (Butcher amp Miles 2003) A bolsa cloacal eacute constituiacuteda de

linfoacutecitos incrustados em tecido epitelial cujas dobras se estendem no interior do

luacutemen onde se espalham os foliacuteculos linfoides Seus foliacuteculos contecircm mais de 90 de

ceacutelulas B (Tizard 1998)

105

Tabela 8 - Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg

Aglomerados Linfoacuteides Comprimento das dobras Progecircnie natildeo Suplementada Progecircnie natildeo Suplementada

Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 0943 105plusmn010 196plusmn041 1443plusmn097 3247plusmn198 1093 098plusmn028 137plusmn021 1394plusmn225 3066plusmn240 1243 077plusmn004 178plusmn029 1503plusmn060 3042plusmn109 1393 080plusmn015 170plusmn043 1449plusmn068 3112plusmn187 1543 096plusmn018 232plusmn037 1464plusmn149 3222plusmn195 CV() 4398 4708 563 915 Regressatildeo ns ns ns ns Progecircnie Suplementada Progecircnie Suplementada 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 1300 076plusmn010 168plusmn035 1936plusmn206 3535plusmn191 1450 049plusmn015 216plusmn041 1865plusmn022 4027plusmn1244 1600 072plusmn024 189plusmn022 2035plusmn064 3331plusmn036 1750 053plusmn005 192plusmn036 2195plusmn139 4487plusmn1540 1900 053plusmn012 213plusmn025 1905plusmn128 2562plusmn111 CV() 5807 4141 473 5359 Regressatildeo ns ns ns ns

Assim a progecircnie que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg natildeo

apresentou produccedilatildeo de linfoacutecitos B aumentada nem a aacuterea de desenvolvimento e

diferenciaccedilatildeo dos linfoacutecitos B prejudicada ou melhorada pela Arg (Pgt005)

Na Tabela 9 estatildeo agraves meacutedias obtidas da resposta imune celular da progecircnie com

dieta suplementada medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) para estiacutemulo de

proliferaccedilatildeo celular Dentro desse contexto observou-se que 12 horas apoacutes a injeccedilatildeo de

PHA foi possiacutevel verificar efeito quadraacutetico com aumento (Plt005) na resposta celular

das aves alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg em que a maior

resposta foi obtida com 1574 de Arg dig (Figura 1)

Segundo Corrier amp DeLoach (1990) a aplicaccedilatildeo desse teste permite a raacutepida

avaliaccedilatildeo da competecircncia imunoloacutegica celular Os basoacutefilos ceacutelulas comumente

associadas a esses processos apresentam heparina e proteases na composiccedilatildeo de seus

gracircnulos agindo intensamente nos processos de hipersensibilidade Aleacutem disso

produzem citocinas cuja participaccedilatildeo estaacute ligada aos processos inflamatoacuterios (Abbas et

al 2007)

106

Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Arginina 3 horas 6 horas 12 horas 24 horas

1300 1010plusmn0062 0793plusmn0041 0549plusmn0097 0506plusmn0036 1450 0853plusmn0077 0639plusmn0065 0631plusmn0051 0450plusmn0133 1600 0918plusmn0053 0738plusmn0040 0702plusmn0052 0543plusmn0065 1750 0797plusmn0074 0783plusmn0058 0597plusmn0061 0552plusmn0066 1900 0933plusmn0044 0777plusmn0038 0499plusmn0059 0453plusmn0062 CV 1715 1630 2724 3875 Regresatildeo ns ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- 093 -----

ns = Natildeo significativo 1 Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2 R2 = 093

Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Quando se avaliou a atividade fagociacutetica dos macroacutefagos da progecircnie

suplementada e natildeo suplementada verificou-se que os niacuteveis crescentes de Arg na dieta

natildeo afetaram (Pgt005) essa funccedilatildeo (Tabela 10) Os macroacutefagos satildeo ceacutelulas do sistema

mononuclear fagocitaacuterio (McCorkle 1998) integrantes da imunidade inata das aves

importantes tambeacutem para a imunidade adaptativa (Abbas et al 2008) atuando nos

processos de defesa do organismo destruindo agentes estranhos e tambeacutem secretando

citocinas que atuam no processo inflamatoacuterio As principais funccedilotildees executadas por essa

ceacutelula satildeo a fagocitose destruiccedilatildeo de bacteacuterias (Qureshi et al 1986) secreccedilatildeo de

prostaglandinas e citocinas e apresentaccedilatildeo de antiacutegeno para desenvolvimento da

resposta imune celular (Abbas et al 2008)

Segundo Johaniam (2009) satildeo identificadas duas vias de accedilatildeo

imunomodulatoacuteria da Arg in vivo A primeira ocorre atraveacutes da accedilatildeo da arginase que

converte a Arg em ureia e ornitina Neste processo ocorre a produccedilatildeo de poliaminas

pela accedilatildeo da ornitina decarboxilase Esta rota da siacutentese de poliaminas pode ser o

Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2R2 = 093

1574

107

caminho pelo qual a Arg aumenta a mitogecircnese dos linfoacutecitos (Klein amp Morris 1978)

A segunda via ocorre pela siacutentese de NO a partir da a partir da Arg pela accedilatildeo do oacutexido

niacutetrico sintetase resultando na formaccedilatildeo de oacutexido niacutetrico e citrulina Essa rota eacute

essencial para atividade citotoacutexica dos macroacutefagos

Tabela 10 ndash Meacutedias e erros padrotildees da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Macroacutefagos com eritroacutecitosmacroacutefagos contados Arginina Progecircnie Suplementada

1300 1570plusmn529 1450 2030plusmn480 1600 1650plusmn359 1750 2150plusmn500 1900 1830plusmn250 CV 545 Regresatildeo ns ns = Natildeo significativo

Quando avaliados os tiacutetulos de anticorpos da progecircnie verificou-se que a

alimentaccedilatildeo das matrizes com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg natildeo influenciou

os tiacutetulos de anticorpos (Pgt005) da progecircnie natildeo suplementada (Tabela 11) Para as

aves suplementadas verifica-se um efeito linear decrescente (Plt005) aos sete dias de

idade e efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade em que o niacutevel de 1674 de

Arg dig proporcionou o maior tiacutetulo de anticorpos (Tabela 12)

Os resultados observados na progecircnie suplementada mostraram-se compatiacuteveis

com as respostas das aves a campo nas quais inicialmente satildeo observados maiores

tiacutetulos de anticorpos decorrentes da imunidade materna seguido de uma queda que nas

condiccedilotildees experimentais eacute resultado da neutralizaccedilatildeo desses anticorpos pelos antiacutegenos

vacinais e por fim uma nova elevaccedilatildeo dos tiacutetulos

Este resultado concorda com o observado por outros autores Tayade et al

(2006) demonstraram que a resposta vacinal contra o viacuterus da doenccedila de Gumboro de

frangos suplementados com 2 de Arg foi 20 mais eficiente que a resposta induzida

apenas pela vacina A elevada resposta humoral e a proteccedilatildeo observada no grupo de

aves vacinado e com dieta suplementada com Arg segundo estes autores pode ser

atribuiacuteda ao nuacutemero de funccedilotildees imunorregulatoacuterias da Arg sobre o sistema

imunoloacutegico A Arg eacute necessaacuteria para a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas B e tambeacutem estaacute

envolvida na liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da bolsa ou da medula oacutessea (De Jonge et al

108

2002) Ainda segundo Abdukalykova e Ruiz-Feria (2006) niacuteveis adicionais de Arg

podem acelerar a produccedilatildeo de anticorpos em frangos de corte

29

295

3

305

31

315

32

325

33

335

34

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s(7

dia

s)

0

05

1

15

2

25

3

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s (2

8 di

as)

Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

1674

109

Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Niacuteveis de Arginina na dieta materna ()

Idade 0943 1093 1243 1393 1543 CV() Regressatildeo R2

07 dias 317plusmn099 323plusmn011 301plusmn008 324plusmn007 316plusmn015 831 ns -----

14 dias 262plusmn009 257plusmn003 242plusmn011 262plusmn011 257plusmn003 792 ns -----

21 dias 232plusmn010 247plusmn005 211plusmn010 228plusmn011 241plusmn007 941 ns -----

28 dias 241plusmn028 186plusmn014 248plusmn022 231plusmn019 214plusmn024 2378 ns -----

35 dias 275plusmn017 284plusmn015 271plusmn013 286plusmn020 291plusmn011 1361 ns -----

Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades

Niacuteveis de Arginina ()

Idade 1300 1450 1600 1750 1900 CV() Regressatildeo R2

07 dias 331plusmn012 336plusmn010 301plusmn012 329plusmn009 299plusmn009 798 Linear1 012

14 dias 226plusmn008 218plusmn019 219plusmn023 207plusmn014 245plusmn009 1715 ns -----

21 dias 232plusmn007 239plusmn006 236plusmn006 246plusmn012 240plusmn009 829 ns -----

Niacuteveis de Arginina ()

1150 1300 1450 1600 1750 CV() Regressatildeo R2

28 dias 171plusmn035 279plusmn009 298plusmn006 278plusmn019 240plusmn012 1961 Quadraacutetica2 026

35 dias 268plusmn023 299plusmn012 296plusmn018 280plusmn023 313plusmn011 1535 ns -----

110

Conclusatildeo

As dietas suplementadas com Arg mostraram-se necessaacuterias para o oacutetimo

desempenho do sistema imune celular e humoral da progecircnie natildeo bastando somente agrave

suplementaccedilatildeo das matrizes de corte

Referecircncias

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aves e suiacutenos ndash Composiccedilatildeo de alimentos e exigecircncias nutricionais Viccedilosa UFV Departamento de Zootecnia186p2005

v

AGRADECIMENTOS

Agrave Universidade Estadual de Maringaacute por ter possibilitado desenvolver este trabalho

Agrave minha orientadora Profa Dra Alice Eiko Murakami pela sua orientaccedilatildeo pelo

reconhecimento do meu trabalho pelos ldquopuxotildees de orelhardquo que sempre me ajudaram em

todos os momentos a ser uma pessoa melhor pelos conselhos e pela dedicaccedilatildeo agrave minha

pessoa por todos esses anos e principalmente pela amizade construiacuteda com respeito e

carinho ao longo desta caminhada

Aos professores do Programa de Poacutes-graduaccedilatildeo em Zootecnia da Universidade Estadual

de Maringaacute pelo acesso ao conhecimento e pela paciecircncia a mim dispensada em especial

ao Prof Dr Elias Nunes Martins pelos valiosos conselhos e amizade e pelos auxiacutelios as

ldquoestatiacutesticasrdquo muito obrigada

Aos secretaacuterios do Programa de Poacutes- graduaccedilatildeo Rose e Denilson por todo ldquosocorrordquo

durante o meu periacuteodo no programa pelas conversas e amizade obrigada por tudo

As ldquoMariasrdquo teacutecnicas do laboratoacuterio de Histologia da UEM Eurides e Dos Anjos pela

amizade e auxiacutelio e toda ajuda durante as minhas anaacutelises

Aos funcionaacuterios da Fazenda Experimental de Iguatemi da UEM pelo precioso auxiacutelio

durante a conduccedilatildeo deste e todos os trabalhos realizados durante o meu periacuteodo nessa

universidade

A todos os colegas que fizeram parte da minha caminhada pela ajuda e companheirismos

em todos os momentos faacuteceis e difiacuteceis desta jornada pelo auxiacutelio durante a coleta e

conduccedilatildeo dos experimentos que me permitiram esta tese Ana Ton Jovanir Maacutercia

vi

Suelen Rodrigo Luis Daniel Ana Carolina Ana Flaacutevia Leandro Rafael Fernando

Karla Alexandra Mariana Celma Andressa Faacutebio

Agraves minhas eternas irmatildes Jovanir Inecircs Muller Fernandes e Maacutercia Izumi Sakamoto pela

amizade companheirismo pela forccedila em todos os momentos de alegria e em que estive

em dificuldades minha eterna gratidatildeo por tudo que vocecircs fizeram por mim

A minha irmatildezinha Sussu e seu ldquomaridatildeordquo Mauriacutecio pelo apoio e amizade pelo

companheirismo e auxiacutelio nos momentos em que precisei muito obrigada por tudo

As mais novas amigas e companheiras Cinthia e Cris muito obrigada pela amizade

incondicional que vocecircs me dedicaram durante esse tempo que apesar de natildeo ter sido tatildeo

longo valeu por uma eternidade muito obrigada por tudo

A minha irmatilde Sara que durante a minha gravidez foi meu braccedilo direito na conduccedilatildeo deste

trabalho auxiliando e principalmente me levantando nos momentos de dificuldade

obrigada por vocecirc fazer parte da minha vida

Ao Waldir Pereira da Silva Junior meu profundo agradecimento pelo companheirismo

incentivo amizade por estar ao meu lado e compreender meus momentos de ausecircncia

pelo amor incondicional a mim dedicado meu eterno amor a vocecirc

A todos que direta ou indiretamente contribuiacuteram para esse trabalho meu muito obrigada

vii

BIOGRAFIA

LUCIANA MARIA GARCIA DE SOUZA DA SILVA filha de Vera Luacutecia

Aparecida Garcia de Souza e Joatildeo Gusman de Souza nasceu em Maringaacute Paranaacute no dia

18 de maio de 1981

Em marccedilo de 2005 conclui o curso de Zootecnia pela Universidade Estadual de

Maringaacute

Em marccedilo de 2005 iniciou no curso de Poacutes- graduaccedilatildeo em Zootecnia em niacutevel de

mestrado aacuterea de concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal na Universidade Estadual de Maringaacute e

no dia 3 de marccedilo de 2007 submeteu-se a banca para defesa de Dissertaccedilatildeo

Em marccedilo de 2007 iniciou no curso de Poacutes-graduaccedilatildeo em Zootecnia em niacutevel de

doutorado aacuterea de concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal na Universidade Estadual de Maringaacute

realizando estudos na aacuterea de nutriccedilatildeo de frangos de corte No dia 17 de novembro de

2010 submeteu-se a banca para defesa da Tese

viii

IacuteNDICE

Paacutegina

LISTA DE TABELAS ix LISTA DE FIGURAS xi I - INTRODUCcedilAtildeO 17 11 REVISAtildeO DA LITERATURA 19

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie 19 112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves 20 REFEREcircNCIAS 32

II - OBJETIVOS GERAIS 39 21 Objetivos Especiacuteficos 39

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo 40

Resumo 40 Introduccedilatildeo 42 Material e meacutetodos 43 Resultados e Discussatildeo 47 Conclusatildeo 52 Referecircncias 53

IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie 57

Resumo 57 Introduccedilatildeo 59 Material e Meacutetodos 60 Resultados e discussatildeo 67 Conclusatildeo 83 Referecircncias 83

V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie 89

Resumo 89 Introduccedilatildeo 91 Material e Meacutetodos 92 Resultados e Discussatildeo 101 Conclusatildeo 110 Referecircncias 110

VI - CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 113

ix

LISTA DE TABELAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental 45 Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 48 Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 50 Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico 51 Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 52

Capiacutetulo IV Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg48 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)50 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)51 Tabela 4 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg55 Tabela 5 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg56 Tabela 6 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg60 Tabela 7 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementadas provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg64 Tabela 8 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento da progecircnie suplementada com dietas suplementadas contendo niacuteveis de Arg64

x

Tabela 9 ndash Meacutedias de porcentagem de carcaccedila (CARC) porcentagem de peito (PEITO) porcentagem de coxa (COXA) porcentagem de asa (ASA) porcentagem de gordura abdominal (GORDURA) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg65 Tabela 10 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de arginina67 Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg69 Tabela 12 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade72

Capiacutetulo V Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das dietas experimentais das matrizes de frangos de corte no periacuteodo experimental83 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg85 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)86 Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (21-42 dias)86 Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de arginina89 Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg90 Tabela 7 ndash Meacutedias do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade91 Tabela 8 ndash Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg92 Tabela 10 ndash Meacutedias e erro padratildeo da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg94 Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades94

xi

LISTA DE FIGURAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel33 Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg34 Capiacutetulo IV Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 70 Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 71 Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 72 Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 72 Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 75 Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 77 Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 81 Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade 82 Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade 83

xii

Capiacutetulo IV Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 106 Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 108

RESUMO

Foram realizados trecircs experimentos com o objetivo de avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na nutriccedilatildeo de matrizes de corte e a modulaccedilatildeo da resposta imune e do desenvolvimento esqueleacutetico na progecircnie No primeiro experimento avaliou-se o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e qualidade de ovos Para tanto foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se um aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve uma queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arginina respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo O segundo experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo

xiv

suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos O terceiro experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos 7 dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavras-chave desempenho produtivo qualidade de ovos qualidade oacutessea sistema imune

ABSTRACT

Three experiments were conducted to evaluate the effect of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder nutrition and modulation of the immune systems and skeletal development in the progeny In the first experiment the effect of Arg supplementation on heavy breed henrsquos productive performance and egg quality was evaluated ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance In the second experiment the effects of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder hens diet on performance carcass yield and bone parameters was evaluated in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units The body weight gain feed intake and feed gain ratio was calculated to evaluate the performance The carcass yield was evaluated by the carcass percentage leg breast and wing yield and abdominal fat The bone quality was assessed by the analysis of the femur and tibia lengths diameters and Seedor index In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that

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just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) In third experiment the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses was evaluated in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by the diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses According to the results it is possible to conclude that supplementation with Arg provided improvements in the eggs weight of broilers and evaluations in the progeny demonstrated that there is a need to supplement the diet with Arg in order to get the best performance index bone quality and humoral and cellular immunity

Key-words bone quality egg quality productive performance immune system

17

I - INTRODUCcedilAtildeO

Vaacuterios fatores afetam o desempenho de frangos de corte como a geneacutetica

nutriccedilatildeo sanidade manejo e ambiecircncia Entretanto fatores estabelecidos antes mesmo da

incubaccedilatildeo e da eclosatildeo como a idade das matrizes e o peso dos ovos satildeo preponderantes

para o desenvolvimento inicial das aves tendo consequecircncia em todo o crescimento

(Pedroso et al 2005)

As exigecircncias nutricionais de uma reprodutora leve ou pesada devem atender agraves

necessidades do embriatildeo em desenvolvimento fora do organismo materno (Campos

2003) O ovo eacute formado basicamente pela casca (10) clara (60) e gema (30) Desse

modo os niacuteveis nutricionais da matriz devem ser dirigidos para formaccedilatildeo desses

componentes porque estes satildeo responsaacuteveis pela nutriccedilatildeo do embriatildeo

O ovo tem aacutegua proteiacutena gordura e cinza na sua composiccedilatildeo quiacutemica A gema

apresenta papel importante no desenvolvimento do embriatildeo visto que este formaraacute o saco

vitelino apoacutes o quarto dia de vida O saco vitelino constitui a uacutenica fonte fornecedora de

energia para o desenvolvimento do embriatildeo Deste satildeo absorvidos todos os nutrientes pelo

embriatildeo como partiacuteculas lipoproteicas e proteicas Estas uacuteltimas podem ser absorvidas

intactas porque a produccedilatildeo de proteinases pelo embriatildeo aumenta de acordo com o seu

desenvolvimento Aleacutem disso parte da absorccedilatildeo de proteiacutenas ocorre na forma de

aminoaacutecidos (Campos 2003) O saco viteliacutenico tambeacutem eacute a uacutenica fonte de

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imunoglobulinas produzidas pelo organismo materno capazes de manter certa imunidade

ao pintinho no periacuteodo inicial de sua vida

Os aminoaacutecidos presentes na gema podem ser suficientes durante o processo de

eclosatildeo apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

processo de crescimento (Ohta et al 2004)

Logo apoacutes a eclosatildeo a maior parte da demanda de energia e de proteiacutena das aves eacute

direcionada para o desenvolvimento do trato digestoacuterio principalmente intestinos (Fisher

da Silva 2001) Este crescimento preferencial ocorre tanto na presenccedila quanto na ausecircncia

do alimento (Laurentiz et al 2001) Quando estes nutrientes natildeo satildeo fornecidos pela

raccedilatildeo os neonatos utilizam o saco vitelino como suplemento energeacutetico e como fonte

proteica para o crescimento intestinal Entretanto segundo Dibner et al (1998) 20 da

proteiacutena residual do saco vitelino satildeo representadas pelas imunoglobulinas maternais e

que a gordura bruta residual eacute constituiacuteda basicamente de trigliceacuterides fosfoliacutepides e

colesterol

Assim a nutriccedilatildeo das matrizes de corte pode enriquecer a gema e produzir pintos

de alta qualidade Entretanto com o passar dos anos natildeo houve muita diferenccedila nos niacuteveis

nutricionais propostos para nutriccedilatildeo das matrizes de corte o que ocorre principalmente em

razatildeo das grandes diferenccedilas existentes entre as linhagens comerciais existentes Segundo

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) para matrizes pesadas existe uma pausa nas pesquisas orientadas

para a determinaccedilatildeo das exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos essenciais

Dentre os aminoaacutecidos utilizados na formulaccedilatildeo de raccedilotildees principalmente as

voltadas para o conceito de proteiacutena ideal a arginina (Arg) pode exercer efeitos positivos

pois este aleacutem de ser constituintes de proteiacutenas ainda estaacute envolvido na siacutentese de creatina

e de poliaminas de prolina como substrato para a siacutentese de colaacutegeno e do oacutexido niacutetrico

(NO) e na secreccedilatildeo do hormocircnio de crescimento (GH) e dos fatores de crescimento

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semelhantes agrave insulina (IGF) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave (Harvey et

al 2001)

Como as aves natildeo apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem

exclusivamente da Arg sinteacutetica principalmente no periacuteodo inicial de produccedilatildeo (Allen amp

Baker 1972) Aleacutem disso em dietas agrave base de milho e de farelo de soja a Arg eacute

considerada o quinto aminoaacutecido limitante para frangos de corte apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Vaacuterios autores tecircm proposto que a nutriccedilatildeo das matrizes afeta o desempenho dos

pintos (Uni amp Ferket 2004) Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem

nos primeiros dias de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com

funccedilatildeo imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade

materna e na resposta imune dos pintos

11 REVISAtildeO DA LITERATURA

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie

O sistema imune das aves eacute complexo e compreende uma seacuterie de funccedilotildees

celulares e fatores soluacuteveis que trabalham juntos para produzir uma resposta imune

protetora Os oacutergatildeos linfoides primaacuterios das aves satildeo a bolsa cloacal e o timo Os oacutergatildeos

como medula oacutessea baccedilo glacircndula Harderiana placas de Payer e tonsilas cecais satildeo

considerados oacutergatildeos linfoides secundaacuterios

Com base nesses componentes as aves podem apresentar respostas a vaacuterios

antiacutegenos divididas em dois tipos a imunidade passiva e a ativa A imunidade passiva eacute

transferida para a progecircnie pelas reprodutoras via saco viteliacutenico Atraveacutes da imunidade

passiva eacute possiacutevel desenvolver a resposta imune especiacutefica sem que haja um envolvimento

do organismo pela transferecircncia de ceacutelulas ou de anticorpos de outro indiviacuteduo jaacute

20

imunizado A imunidade ativa por sua vez eacute decorrente da exposiccedilatildeo das aves a um

antiacutegeno estranho que pode ser de origem vacinal ou um agente patoacutegeno

Nas aves a imunidade passiva eacute passada da matriz ateacute o pintinho pelo do ovo no

processo de produccedilatildeo de ovo imunoglobulinas (Ig) Y presentes no sangue das matrizes

chega ateacute o oviduto e se deposita na gema do ovo enquanto durante a secreccedilatildeo do

albuacutemen que ocorre na porccedilatildeo magnum do oviduto secreta tambeacutem IgA e IgM Eacute essa

imunidade enviada pela matildee que protege esses pintos nos primeiros dias de vida contra

vaacuterios agentes que estatildeo presentes no campo (Santin 2009) Haacute relaccedilatildeo direta entre os

tiacutetulos de seacutericos de Ig da matildee e a quantidade repassada ao ovo Assim eacute de extrema

importacircncia que o pintinho absorva adequadamente e rapidamente essa gema para que ele

tenha acesso a estas Ig (Santin 2009) Maiorka (2002) demonstrou que jejum de aacutegua e de

alimento por 12 horas apoacutes a eclosatildeo diminui a absorccedilatildeo da gema e afetam o

desenvolvimento da mucosa intestinal de frangos de corte Vargas et al (2009) mostraram

que os tiacutetulos seacutericos de anticorpos contra a vacina de doenccedila de Newcastle (NDV) foram

mais baixos em pintos submetidos a 12 horas de jejum poacutes eclosatildeo quando comparados

agravequeles que consumiram aacutegua e alimento logo apoacutes a eclosatildeo De fato o atraso no

consumo de alimento dos animais pode diminuir a absorccedilatildeo da gema e consequentemente

a passagem da imunidade passiva da matildee para o pintinho Dibner et al(1998) sugerem que

quando o pintinho natildeo recebe rapidamente aacutegua e alimento apoacutes a eclosatildeo acaba utilizando

as Ig e os fosfolipiacutedios da gema como alimento diminuindo assim sua funccedilatildeo na proteccedilatildeo

animal

112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves

A Arg eacute um aminoaacutecido essencial em aves principalmente na fase inicial Isso

ocorre porque as aves diferentemente dos mamiacuteferos natildeo possuem o ciclo da ureia

funcional necessitando da fonte exoacutegena de suplementaccedilatildeo Evoy et al (1998) em seu

21

trabalho relataram o papel da Arg como essencial na estimulaccedilatildeo do sistema imune do

hospedeiro

As vias metaboacutelicas que envolvem a Arg satildeo complexas e demonstradas

resumidamente a seguir

Adaptado de Duff amp Daly (2002)

Juntamente com a complexidade dessas vias soma-se a variada localizaccedilatildeo das

enzimas envolvidas no meio intracelular como nos tecidos Com exceccedilatildeo dos enteroacutecitos

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em receacutem-nascidos nenhum outro tipo de ceacutelula conteacutem todas as enzimas necessaacuterias para

a siacutentese de Arg (Wu amp Morris 1998)

A Arg eacute ativamente absorvida pelo intestino pelo sistema de transporte soacutedio-

dependente A alta atividade da arginase no enteroacutecito converte cerca de 40 da dieta de

Arg em citrulina a qual eacute liberada na circulaccedilatildeo (Castillo et al 1993) Quando a Arg cai

na corrente sanguiacutenea cerca de 15 eacute eliminada pelo fiacutegado e o restante entra na

circulaccedilatildeo sistecircmica (OrsquoSullivan et al 1998) A Arginina eacute sintetizada a partir da

citrulina principalmente nos rins e eacute entatildeo liberada na circulaccedilatildeo para ser utilizada pelos

demais tecidos

O oacutexido niacutetrico (NO) constitui uma das menores e mais simples moleacuteculas

biossintetizadas (Morris et al 1994) O NO eacute um radical livre gasoso inorgacircnico e

identificado como mensageiro molecular extremamente laacutebil (meia vida bioloacutegica em

torno de segundos) O NO media vaacuterios fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente

do endoteacutelio citotoxicidade mediada por macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria Eacute produzido pelas ceacutelulas endoteliais neurocircnios macroacutefagos e

tecidos entre eles a hipoacutefise que age paracrinamente exercendo efeitos intra e

extracelulares em vaacuterios sistemas fisioloacutegicos (Kutchai 1998)

Palmer et al (1988) demonstraram que a L-Arg eacute o precursor fisioloacutegico do NO

nas ceacutelulas endoteliais Com base nesta informaccedilatildeo vaacuterios grupos de investigadores

suspeitaram que o NO fosse o provaacutevel precursor da siacutentese de NO3- e NO2

- pelos

macroacutefagos Subsequentemente esta hipoacutetese foi comprovada e ficou demonstrado que o

NO eacute o principal mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a

mais importante moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al 1988 e Marletta

et al 1988 citados por Dusse et al 2003)

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Este composto eacute produzido a partir da oxidaccedilatildeo da L-arginina pela accedilatildeo da enzima

oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) uma enzima Ca++-calmodulina-dependente Por este

mecanismo eacute gerado citrulina como produto final (Kiechele amp Malinski 1993)

O surgimento do NO como agente da sinalizaccedilatildeo celular eacute uma importante

descoberta da fisiologia humana e animal nos uacuteltimos anos O NO participa de vaacuterios

fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente do endoteacutelio citotoxicidade mediada por

macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O NO eacute o principal

mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a mais importante

moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al1988 e Marletta et al 1988 citados

por Dusse et al 2003)

Existem trecircs formas de NOS sendo a NOS induzida (iNOS) e duas NOS

constitutivas (cNOS) O NO eacute sintetizado pela ativaccedilatildeo da cNOS basal (em ceacutelulas

endoteliais vasculares e neurocircnios) segundos a minutos apoacutes o aumento na concentraccedilatildeo

de caacutelcio em resposta agrave ativaccedilatildeo de receptores da superfiacutecie celular e mecanismos de

transduccedilatildeo de sinal (Adams 1996)

Ao contraacuterio a iNOS natildeo depende de caacutelcio para ativaccedilatildeo mas a siacutentese de

mRNA da iNOS eacute necessaacuteria para sua atividade A NOS induzida natildeo eacute detectaacutevel em

condiccedilotildees basais As LPS ou endotoxinas bacterianas junto com citocinas como TNFα

IL-1β ou IF-γ induzem a siacutentese de iNOS de duas a quatro horas apoacutes a exposiccedilatildeo ao

agente A iNOS requer siacutentese proteica para sua expressatildeo e sua atividade persiste por

mais de 24 horas e sintetiza NO em concentraccedilotildees nanomolares 1000 vezes maior que

cNOS (Davies et al 1995)

A expressatildeo da iNOS eacute o resultado da resposta inflamatoacuteria localizada ou difusa

resultante da infecccedilatildeo ou dano tecidual Segundo Salvemini et al (1996) o NO eacute potente

vasodilatador e seu envolvimento na resposta inflamatoacuteria pode ter relaccedilatildeo com sua

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habilidade em aumentar a permeabilidade vascular e o edema atraveacutes de mudanccedilas no

fluxo sanguiacuteneo local e do aumento na produccedilatildeo de prostaglandinas proinflamatoacuterias

A expressatildeo de iNOS em endotoxemia eacute citoprotetoacuteria inibindo microtrombose

pela prevenccedilatildeo de adesatildeo plaquetaacuteria e danos mediados por radicais Por outro lado a

citotoxidade do NO resulta da sua accedilatildeo direta ou da sua reaccedilatildeo com outros compostos

liberados durante o processo inflamatoacuterio A base bioquiacutemica para a accedilatildeo direta do NO

consiste na sua reaccedilatildeo com metais (especialmente o ferro) presentes nas enzimas do seu

alvo (Moncada 1991 James 1995) Desta forma satildeo inativadas enzimas cruciais para o

ciclo de Krebs para a cadeia de transporte de eleacutetrons para a siacutentese de DNA e para o

mecanismo de proliferaccedilatildeo celular Em processos infecciosos ceacutelulas ativadas como

macroacutefagos neutroacutefilos e ceacutelulas endoteliais secretam simultaneamente NO e

intermediaacuterios reativos do oxigecircnio a accedilatildeo citotoacutexica indireta do NO consiste

principalmente na sua reaccedilatildeo com esses intermediaacuterios do oxigecircnio

Durante a resposta imune mediada por ceacutelulas a maioria das ceacutelulas adquire a

capacidade de expressar a forma de NO induzida (Nathan amp Xie 1994) A accedilatildeo do NO

depende da ceacutelula T reconhecer um antiacutegeno especiacutefico embora sua accedilatildeo na resposta

imune mediada por ceacutelulas natildeo seja especiacutefica (Schmidt amp Walter 2004)

Costa et al (2003) corroboram com o fato de que a fagocitose por si soacute natildeo induz a

siacutentese de NO A fagocitose de partiacuteculas inertes por macroacutefagos peritoniais em cultura

ou por macroacutefagos murinos estimulados por citocinas natildeo satildeo estiacutemulos suficientes para

a induccedilatildeo expressiva de iONS No entanto a fagocitose de agentes bioloacutegicos nas

mesmas condiccedilotildees induz altos niacuteveis de NO sugerindo que a produccedilatildeo de NO seja

dependente de estiacutemulo imunoloacutegico e que faccedila parte dos mecanismos de defesa do

organismo

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Todas estas investigaccedilotildees estabeleceram de forma definitiva uma associaccedilatildeo entre

arginina oacutexido niacutetrico e resposta imune Por isso nas uacuteltimas duas deacutecadas a arginina tem

sido o foco de estudos como regulador de muitos processos imunoloacutegicos e fisioloacutegicos

(Tayade et al 2006)

Trabalhos desenvolvidos com mamiacuteferos demonstraram que as respostas imunes

podem ser influenciadas pela arginina dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al

1998 Lewis amp Langkamp-Henken 2000) Em experimentos desenvolvidos com animais

jovens os efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina foram demonstrados

como o aumento do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos

tiacutemicos Os efeitos imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais

estressados ou imunossupremidos

Os efeitos beneacuteficos da arginina natildeo se limitam agrave imunidade celular Segundo

LeBien (2002) em mamiacuteferos geneticamente modificados a arginina eacute utilizada para

diferenciaccedilatildeo de proacute-linfoacutecitos B para preacute-linfoacutecitos B na medula oacutessea e estaacute envolvida na

liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da medula

Por outro lado Deng et al (2005) relatam que relevantes pesquisas em espeacutecies

aviaacuterias satildeo esparsas Estas pesquisas apontaram o aumento da produccedilatildeo de oacutexido niacutetrico

por macroacutefagos de aves suplementadas com arginina (Sung et al 1991) aumento do peso

dos oacutergatildeos linfoides (Kwak et al 1999) melhora da relaccedilatildeo heteroacutefilolinfoacutecito em pintos

suplementados e desafiados com o agente viral da bronquite infecciosa e maior percentual

de ceacutelulas CD8+ (Lee et al 2002)

Entretanto para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de arginina

foram observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

estabelecidos Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de arginina

plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular

26

Outros autores obtiveram respostas positivas com a suplementaccedilatildeo de arginina na

reduccedilatildeo na mortalidade de frangos desafiados com Eimeria acervulina Eimeria tenella e

Eimeria maacutexima alterando a relaccedilatildeo argininalisina de 09 para 13 (Kidd et al 2002) e na

siacutendrome da hipertensatildeo pulmonar (Wideman et al 1995) Tambeacutem Corzo et al (2003)

observaram reduccedilatildeo linear de arranhotildees infectados em carcaccedilas de frangos alimentados

com niacuteveis crescentes de arginina (08 a 125 da dieta) Embora esses paracircmetros sejam

indicativos indiretos da imunidade mas apontam a importacircncia da arginina na melhora da

imunidade e no restabelecimento do status sanitaacuterio dos planteacuteis aviacutecolas

Tayade et al (2006) demonstraram recentemente que frangos vacinados com uma

vacina intermediaacuteria atenuada contra a doenccedila de Gumboro e suplementados com 2 de

arginina mostraram 100 de proteccedilatildeo apoacutes desafio com o viacuterus da doenccedila de Gumboro

comparado com 80 de proteccedilatildeo induzido apenas pela vacina sem adiccedilatildeo de arginina

suplementar na dieta

Aleacutem disso Deng et al (2005) verificaram aumento no niacutevel de anticorpos contra

eritroacutecitos de carneiro em frangas de postura somente na oitova semana de idade quando

estas aves foram suplementadas com niacuteveis de arginina em 150 acima do recomendado

pelo NRC do primeiro dia ateacute a quarta semana de vida Os autores concluiacuteram que a

suplementaccedilatildeo com arginina por um periacuteodo curto de tempo tem pouco efeito sobre a

imunidade e que a imunocompetecircncia pode ser permanentemente moldada pelo status

nutricional nos estaacutegios mais precoces do desenvolvimento

Para a melhora da resposta imune deve-se garantir que as matrizes desenvolvam

tiacutetulos elevados de anticorpos e assim buscar atingir o controle contra surtos de doenccedilas

via imunidade materna como meio de prevenccedilatildeo na progecircnie Kidd et al (1993)

observaram que a diferenccedila no niacutevel de anticorpos contra eritroacutecitos de carneiro em

27

matrizes pesadas recebendo dietas compostas por gratildeos de vaacuterias origens foi detectada na

progecircnie recebendo a mesma dieta

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo dos

niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes Segundo Kidd (2004) trabalhos desenvolvidos a

cerca das exigecircncias nutricionais das matrizes estatildeo focados apenas na questatildeo produtiva

Brake (1997) mostrou que a suplementaccedilatildeo de dietas para matrizes com vitaminas E e C

promoveu melhoria na transferecircncia de imunidade materna e na resposta imune dos pintos

pela proteccedilatildeo aos anticorpos no ovo durante a incubaccedilatildeo

Segundo Gore amp Qureshi (1997) um dos mecanismos pelo qual a vitamina E atua

nesta fase de crescimento embrionaacuterio pode estar relacionado a uma maior produccedilatildeo de

oacutexido niacutetrico nitritos e nitratos pelo fato de que a Vitamina E pode aumentar a afinidade

dos receptores de membrana dos macroacutefagos para a ativaccedilatildeo dos estiacutemulos tais como os

lipopolissacariacutedeos o que resulta em maior atividade da oacutexido niacutetrico sintetase

Na literatura consultada natildeo existem relatos da suplementaccedilatildeo das dietas das

matrizes com arginina e o efeito na resposta imune da progecircnie

A produccedilatildeo de NO pelos macroacutefagos das aves eacute arginina dependente de forma

similar aos macroacutefagos de mamiacuteferos (Dietert amp Golemboski 1998) Entretanto ao

contraacuterio dos mamiacuteferos as aves natildeo podem sintetizar arginina As aves por natildeo

apresentarem o ciclo da ureia funcional dependem exclusivamente da arginina dieteacutetica

(Allen amp Baker 1972) O quadro eacute ainda mais grave nas aves uma vez que dependem de

arginina suplementar tambeacutem para a para a formaccedilatildeo de ornitina que em mamiacuteferos eacute

obtida atraveacutes do aacutecido glutacircmico A siacutentese de ornitina eacute fundamental pois estaacute envolvida

na obtenccedilatildeo de prolina e eacute utilizada tambeacutem na formaccedilatildeo de poliaminas (espermidina

espermina e putrescina) que satildeo moleacuteculas associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

28

Desta forma a arginina eacute um aminoaacutecido essencial para as aves na fase inicial A

dieta eacute um fator particularmente sensiacutevel na disponibilidade de arginina e

consequentemente de NO considerando ainda que a arginina eacute um aminoaacutecido dos mais

limitantes em dietas agrave base milho e farelo de soja (Edmonds et al 1985)

A suplementaccedilatildeo adicional de Arg nas dietas de aves imunocomprometidas

poderia aumentar ainda mais a atividade da arginase e com isso menos Arg seria

disponiacutevel para a siacutentese de NO (Kepka-Lenhart et al 2000) Alternativamente Bansal et

al (2004) sugerem como estrateacutegia dieteacutetica para restaurar as concentraccedilotildees plasmaacuteticas

de Arg a suplementaccedilatildeo de citrulina principalmente em condiccedilotildees de imunodeficiecircncia

associadas com elevada atividade plasmaacutetica da arginase Nas espeacutecies uricoteacutelicas o ciclo

Arg-citrulina eacute funcional A citrulina eacute um aminoaacutecido que natildeo eacute encontrado em nenhuma

proteiacutena corporal aleacutem da inabilidade das aves na siacutentese endoacutegena de citrulina a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica se constitui na uacutenica fonte de Arg para os macroacutefagos via ciclo

NO-citrulina (Wiesinger 2001)

A suplementaccedilatildeo de aminoaacutecidos sinteacuteticos tem propiciado facilidades no ajuste

das foacutermulas de raccedilatildeo possibilitando a obtenccedilatildeo dos niacuteveis exigidos de aminoaacutecidos

essenciais A utilizaccedilatildeo de niacuteveis elevados de lisina proporciona um maior crescimento

muscular principalmente o incremento no rendimento de peito e coxas dos frangos de

corte Entretanto esse aumento da taxa de crescimento pode alterar o equiliacutebrio

metaboacutelico ideal entre os aminoaacutecidos especialmente a relaccedilatildeo argininalisina

O antagonismo entre arginina e lisina envolve a diminuiccedilatildeo da siacutentese de

creatinina compromete a siacutentese de prolina ornitina promove o aumento da atividade da

arginase renal e da excreccedilatildeo de ureia aleacutem de que quando os niacuteveis de lisina satildeo

excessivamente altos tambeacutem ocorre a excreccedilatildeo renal de arginina (Austic amp Scott 1975)

29

Os sinais claacutessicos da deficiecircncia de Arg satildeo fraqueza e paralisia das pernas penas

deformadas e ericcediladas sobre o dorso e asa das aves reduccedilatildeo do ganho de peso lesotildees

histoloacutegicas na medula oacutessea e desenvolvimento oacutesseo afetado (Jungherr et al 1958

Newbern et al 1960) A arginina aleacutem de servir como substrato para a siacutentese de NO

estaacute envolvida na secreccedilatildeo do GH

Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram um aumento na

concentraccedilatildeo plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez

secretado pela hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio

receptor e indiretamente via IGF-I e II (insulin-like growth factor ou somatomedina C)

sobre os tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos do GH ocorre em niacutevel do

disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no

crescimento dos ossos longos (Isaksson et al 1987)

Os efeitos dos aminoaacutecidos essenciais no tecido oacutesseo em crescimento satildeo

provavelmente mediados pelo IGF-I (Baylink et al1993) De fato Chevalley et al (1998)

demonstraram que arginina e lisina aumentaram a produccedilatildeo in vitro de IGF-I por

osteoblastos mantidos em cultura Aleacutem disso Conconi et al (2001) trabalhando com

cultura de osteoblastos enriquecida com soluccedilatildeo de aminoaacutecidos essenciais (Arg Lis Met

Thr e Trp) encontraram niacuteveis significativamente aumentados de fosfatase alcalina e

siacutentese de colaacutegeno Estes resultados segundo os autores sugerem que os aminoaacutecidos

podem atuar diretamente na formaccedilatildeo da matriz oacutessea e podem tambeacutem modular o

crescimento e a diferenciaccedilatildeo de osteoblastos

Por outro lado eacute conhecido que a arginina eacute precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo

pelo qual ela poderia exercer os seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo O NO pode

participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento (Hukkanem et

30

al 1999) Estes autores demonstraram a expressatildeo do mRNA da cNOS basal (oacutexido

niacutetrico sintetase endotelial) em condroacutecitos hipertroacuteficos de placas de crescimento de ratos

neonatos

Na placa de crescimento o NO poderia facilitar a vascularizaccedilatildeo e a formaccedilatildeo

oacutessea (Rath et al 2000) a exemplo de sua accedilatildeo na cartilagem articular em que induz

respostas bioloacutegicas que levam a degradaccedilatildeo irreversiacutevel (Pelletier et al1998) Segundo

Amin amp Abramson (1998) nas osteoartrites o NO induz a apoptose dos condroacutecitos

Teixeira et al (2005) comprovaram que o NO tem duas funccedilotildees distintas nos

condroacutecitos da placa de crescimento Uma vez iniciado o processo de maturaccedilatildeo o NO

estimula a hipertrofia por meio do aumento da expressatildeo da fosfatase alcalina e colaacutegeno

tipo X sendo conhecido que a expressatildeo de ambas proteiacutenas eacute um requerimento para a

completa hipertrofia dos condroacutecitos Aleacutem disso o NO estaacute associado ao estaacutegio mais

tardio do processo de maturaccedilatildeo Condroacutecitos totalmente diferenciados tratados com

ativadores da apoptose sofrem morte celular a inibiccedilatildeo da siacutentese de NO bloqueia a

apoptose enquanto a exposiccedilatildeo aos doadores de NO estimula a apoptose Estes autores

concluiacuteram que os sistemas NOS ndash NO atuam como promotores da maturaccedilatildeo dos

condroacutecitos

Por outro lado Vanacutet amp Ralston (2001) advertem que o efeito do NO na atividade

dos osteoblastos pode ser bifaacutesico Estudos in vitro tecircm indicado que pequenas

quantidades de NO que satildeo produzidas constitutivamente pelos osteoblastos podem agir

como um estimulador autoacutecrino do crescimento oacutesseo Entretanto altas concentraccedilotildees de

NO tais como aquelas observadas apoacutes estimulaccedilatildeo das citocinas inflamatoacuterias em que a

iNOS eacute a isoforma envolvida tecircm efeito inibitoacuterio no crescimento e diferenciaccedilatildeo

osteoblaacutestica

31

O crescimento e a remodelaccedilatildeo dos tecidos satildeo regulados por complexas interaccedilotildees

entre potencial geneacutetico fatores de crescimento influecircncias ambientais e nutriccedilatildeo

(Gonzales amp Sartori 2002) A resposta imune e a inflamaccedilatildeo podem modificar as

necessidades de alguns nutrientes

As alteraccedilotildees metaboacutelicas decorrentes podem interromper os eventos envolvidos

no processo de condrogecircnese e osteogecircnese e desencadear o processo de formaccedilatildeo das

lesotildees no tecido oacutesseo que levam a dificuldade locomotora deformaccedilatildeo oacutessea predispotildeem

agraves infecccedilotildees e agraves desordens esqueleacuteticas tais como a discondroplasia tibial (Thorp 1994)

Aleacutem das perdas econocircmicas eacute clara a percepccedilatildeo que as disfunccedilotildees do aparelho locomotor

comprometem o bem-estar das aves

Aleacutem de interagirem com o sistema imune os processos que modulam o

crescimento oacutesseo satildeo complexos e muacuteltiplos e mais estudos satildeo necessaacuterios para elucidar

estes mecanismos

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39

II - OBJETIVOS GERAIS

Essa pesquisa foi desenvolvida com a finalidade de estudar o efeito da

suplementaccedilatildeo de Arg na dieta de fecircmeas reprodutoras de frangos de corte na qualidade

dos ovos e nas caracteriacutesticas produtivas na qualidade oacutessea no desenvolvimento dos

oacutergatildeos linfoide e do sistema imune da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo

niacuteveis crescentes de Arg

21 Objetivos Especiacuteficos Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis

crescentes de Arg no desempenho produtivo e na qualidade dos ovos

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg no desempenho no

rendimento de carcaccedila e na qualidade oacutessea da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas

contendo niacuteveis crescentes de Arg

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg nas respostas imune e

celular da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo

Resumo ndash Este estudo avaliou o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e reprodutivo e qualidade de ovos Foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e reprodutivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo

Palavras-chave embriodiagnoacutestico incubaccedilatildeo qualidade de ovos

III - Effect of arginine supplementation on productive performance and egg quality of broiler breeder hens

Abstract - This study investigated the effect of arginine (Arg) supplementation on broiler breeder productive performance and egg quality ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance Supplementation of broiler diets with increasing levels of Arg provided an increase in the egg production and eggs with higher weights in the levels of 1262 and 1543 respectively The increased levels of Arg did not influence the reproduction variables studied suggesting that it may be used without any harmful risk

Key words embryo diagnosis hatching egg quality

42

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo e alimentaccedilatildeo animal estatildeo direcionadas para garantir oacutetimo aporte de

nutrientes para os animais de acordo com sua finalidade comercial e fase fisioloacutegica

Na produccedilatildeo de frangos de corte a taxa de crescimento acelerada imposta pela seleccedilatildeo

geneacutetica os vaacuterios fatores estressantes (ambientais e de manejo) e de desafio

imunoloacutegico (vacinaccedilatildeo e infecccedilatildeo) nas condiccedilotildees de produccedilatildeo comercial fazem com

que as exigecircncias das matrizes de corte para alguns nutrientes sejam maiores para que a

progecircnie possa expressar seu potencial geneacutetico

O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo dependem completamente dos

nutrientes contidos no ovo e estes satildeo originados da dieta e do metabolismo das

matrizes O ovo eacute um sistema fechado assim todos os nutrientes necessaacuterios para o

desenvolvimento do embriatildeo devem ser fornecidos pela matriz quando o ovo eacute formado

(Oviedo-Roacutendon amp Murakami 1998)

Aleacutem disso existe correlaccedilatildeo positiva entre peso do ovo e peso do pinto ao

nascer e deste com o peso do frango ao abate (Lara et al 2005) De fato Whiting amp

Pesti (1984) verificaram que para cada grama a mais no peso do ovo correspondia a

107 e 60g adicionais para o peso final de machos e fecircmeas respectivamente

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas No ovo os aminoaacutecidos

presentes na gema satildeo suficientes durante o processo de eclosatildeo poreacutem apoacutes o

nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o processo de

crescimento (Otha et al 2004) Nos uacuteltimos anos o impacto da nutriccedilatildeo das matrizes

no estado nutricional e desempenho da progecircnie bem como a melhora do estado

imunoloacutegico tem recebido especial atenccedilatildeo (Pappas et al 2006)

43

A nutriccedilatildeo das matrizes com dietas com arginina seria uma alternativa para o

enriquecimento da gema dos ovos com esse aminoaacutecido A Arg eacute um aminoaacutecido

baacutesico que pode influenciar a reposta imune e a resistecircncia agraves doenccedilas A Arg ainda eacute

conhecida pela funccedilatildeo estimuladora sobre o processo de ovulaccedilatildeo atraveacutes do aumento

da liberaccedilatildeo de hormocircnio luteinizante (LH) (Basiouni et al 2006) e como parte do

hormocircnio arginina vasotocina envolvido com a contraccedilatildeo uterina e a oviposiccedilatildeo

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias

de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo

dos niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes De acordo com Kidd (2004) os trabalhos

desenvolvidos em relaccedilatildeo agraves exigecircncias nutricionais das matrizes para melhorar o

sistema imune da progecircnie satildeo poucos quando comparados a questatildeo produtiva das

aves

Com isso objetivou-se com o trabalho avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de

arginina sobre o desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte

Material e meacutetodos

O experimento foi conduzido no aviaacuterio experimental da Universidade Federal

do Paranaacute ndash Campus Palotina constituiacutedo de 32 boxes com dimensotildees de 25 x 15 m

com cama de maravalha (plusmn10 cm) sobre o piso Foram utilizados boxes telados e

providos de um bebedouro pendular e de dois comedouros um deles com grade de

restriccedilatildeo aos machos e outro instalado mais alto natildeo permitindo somente o acesso das

fecircmeas Em cada boxe experimental foram utilizados ninhos convencionais de um

andar com quatro bocas de madeira com dimensotildees de 030 m x 030 m x 030 m a

030 m acima do niacutevel do piso sendo uma boca para cada quatro fecircmeas

Foram utilizados 390 reprodutores de frangos de corte sendo 360 fecircmeas e 30

machos da linhagem Ross As aves foram selecionadas na 18ordf semana de idade a partir

de um plantel de reprodutores dentro da faixa de peso de 1850 a 1950 g para as

fecircmeas e de 2450 a 2550 g para os machos O delineamento experimental utilizado foi

o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 e

1543 de Arg digestiacutevel) seis repeticcedilotildees e 12 fecircmeas e um macho por unidade

44

experimental O acasalamento foi realizado na 18ordf semana de idade das aves na

proporccedilatildeo de um macho para cada 12 fecircmeas

O periacuteodo experimental iniciou na 25ordf semana quando o plantel alcanccedilou 5 de

produccedilatildeo e finalizou na 56ordf semana de idade das aves O programa de iluminaccedilatildeo

iniciou na 19ordf semana de idade com fornecimento inicial de 14 horas de luz diaacuteria e

aplicados aumentos semanais de 30 minutos de luz ateacute o fornecimento de 17 horas de

luz diaacuteria na 25ordf semana de idade das aves

O fornecimento de raccedilatildeo foi limitado e controlado diariamente enquanto o de

aacutegua foi ad libitum As exigecircncias nutricionais utilizadas para formulaccedilatildeo das dietas das

fecircmeas e dos machos foram baseadas nas recomendaccedilotildees contidas no manual da

linhagem

A partir da 23ordf semana de idade as fecircmeas passaram a receber as dietas

experimentais constituiacutedas da dieta basal suplementada com cinco niacuteveis de L ndash

Arginina variando de 0 a 600 mgkg na dieta basal em substituiccedilatildeo ao caulin que

corresponderam aos niacuteveis de 0943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg

digestiacutevel (Tabela 1) Os machos receberam uma uacutenica dieta durante todo o periacuteodo

experimental O periacuteodo experimental teve iniacutecio na 25ordf semana Para determinaccedilatildeo da

produccedilatildeo de ovos os mesmos foram coletados diariamente e a produccedilatildeo diaacuteria anotada

em planilhas por repeticcedilatildeo Semanalmente foi obtida a produccedilatildeo total de ovos e a

porcentagem de postura de cada unidade experimental Na 30ordf 34ordf e 38ordf semana de

idade foram coletados todos os ovos produzidos em um dia para avaliaccedilatildeo da qualidade

(peso meacutedio gravidade especiacutefica porcentagem de albuacutemen e gema porcentagem e

espessura da casca)

A quantidade de raccedilatildeo oferecida para as fecircmeas foi calculada de acordo com a

produccedilatildeo de ovos e do peso corporal Para os machos forneceu-se raccedilatildeo em funccedilatildeo do

peso corporal (conforme manual da linhagem) O peso foi controlado semanalmente ateacute

a 35ordf semana e quinzenalmente a partir da 36ordf semana de idade das aves ateacute o final do

experimento

A avaliaccedilatildeo do rendimento de incubaccedilatildeo foi realizada na 40ordf semana de idade

das aves Foram incubados 80 ovos de cada tratamento totalizando 400 ovos Os ovos

foram pesados e incubados em cada idade avaliada de acordo com o tratamento e

repeticcedilatildeo e avaliadas as seguintes caracteriacutesticas peso meacutedio do ovo incubado peso

meacutedio dos pintos ao nascer percentual do peso da progecircnie ao nascer em relaccedilatildeo ao

peso do ovo e taxa de eclosatildeo Apoacutes a eclosatildeo foi realizado o embriodiagnoacutestico dos

45

ovos que natildeo eclodiram os quais foram classificados em mortalidade por fase (inicial

intermediaacuteria e final) ovos contaminados bicados vivos e bicados mortos

Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental

Ingredientes () Raccedilatildeo postura I Milho 6072 Farelo de Trigo 420 Oacuteleo de Soja 200 Farelo de Soja 2260 Sal Comum 032 Caulim 050 Calcaacutereo 38 647 Fosfato Bicaacutelcico 131 Bicarbonato de Soacutedio 010 DL-Metionina 98 014 Colina 60 016 Milbond 010 Mycofix 015 Carbonato Potaacutessio 99 021 Premix vit e mineral1 050 Hy D2 005 Eur Bactiguard L 020 Valores Calculados Proteiacutena 1551 EM Kcalkg 2815 Gordura 477 AcLinoleico 248 Caacutelcio 295 Foacutesforo disponiacutevel 044 Lisina dig 071 Met + cistina dig 060 Treonina dig 051 Arginina dig 094 Soacutedio 019 Cloro 026 Potaacutessio 080 Mongin Meq100g 21388

1 Conteuacutedo por kg de premix Vit A 8000000 UI Vit D3 2200000 UI Vit E 6200 mg Vit K 3 2000 mg Vit B 1 2000 mg Vit B2 3000 mg Vit B6 6000 mg Vit B12 10000 mcg Pantotenato de caacutelcio 6000 mg Niacina 25000 mg Aacutec foacutelico 400 mg Se 100 mg Mn 65000 mg Fe40000 mg Cu 10000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg 2 Rovimix Hy D ndash DSM Nutritional Products

Para gravidade especiacutefica foi utilizado o meacutetodo da imersatildeo dos ovos em

soluccedilatildeo salina Foram preparadas seis soluccedilotildees (aacutegua e sal comum) com densidades que

variaram de 1070 a 1090 com variaccedilatildeo de 0004 para cada soluccedilatildeo As gravidades

foram aferidas com utilizaccedilatildeo de densiacutemetro de Petroacuteleo

46

O peso meacutedio do albuacutemen de cada repeticcedilatildeo foi obtido pela diferenccedila entre o

peso meacutedio do ovo e o peso meacutedio da gema somados ao peso meacutedio da casca de cada

repeticcedilatildeo Apoacutes a pesagem das cascas a espessura das mesmas foi medida com auxiacutelio

de um microcircmetro digital (Mitutoyoreg) em quatro pontos na regiatildeo central de cada casca

Para a medida de peso da casca os ovos foram quebrados e as cascas lavadas e secas agrave

temperatura ambiente por 48 horas em seguida foram pesadas em balanccedila analiacutetica e os

pesos anotados

Anaacutelise Estatiacutestica

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados de acordo com o seguinte modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243 4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os dados de embriodiagnoacutestico natildeo apresentaram distribuiccedilatildeo normal e foram

analisados pela anaacutelise Bayesiana assumindo que a porcentagem observada ri a cada

niacutevel de concentraccedilatildeo de Arg xi segue distribuiccedilatildeo Binomial com paracircmetros ni

(tamanho de amostra) e pi (taxa de eclosatildeo) pi = en1+en com funccedilatildeo de ligaccedilatildeo logit

ii

i

plog it(p ) log1 p⎛ ⎞

equiv = μ⎜ ⎟minus⎝ ⎠ nas formas linear e quadraacutetica dadas respectivamente por

n=α+ β1xi e n = α + β1xi + β2x2i Para a modelagem foram considerados um conhecimento

vago a priori sobre os paracircmetros de regressatildeo isto eacute com distribuiccedilotildees natildeo

informativas 3~ (010 )Nα e 3~ (010 )k Nβ k=12

A obtenccedilatildeo das distribuiccedilotildees marginais a posteriori para os paracircmetros foi por

meio do pacote BRugs do programa R (R Development Core Team 2007)

Para cada paracircmetro foram gerados 510000 valores em um processo MCMC

(Monte Carlo Markov Chain) considerando um periacuteodo de descarte amostral de 10000

47

valores iniciais A amostra final tomada com saltos de tamanho 20 conteacutem 25000

valores gerados A convergecircncia das cadeias foi verificada por meio do pacote CODA

(Best et al 1995) do programa R pelos criteacuterios de Geweke (1992) e de Heidelberger amp

Welch (1983)

Resultados e Discussatildeo

Os resultados de produccedilatildeo e de qualidade dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg estatildeo apresentados na Tabela 2 Os niacuteveis de

Arg digestiacutevel utilizados nas dietas das matrizes de corte influenciaram de forma

quadraacutetica (Plt005) a porcentagem de postura em que o niacutevel de 1262 de Arg

proporcionou a maior porcentagem de postura para as matrizes de corte (Figura 1)

Outros autores tambeacutem encontraram resultados semelhantes em relaccedilatildeo ao

aumento da taxa de postura em funccedilatildeo da suplementaccedilatildeo de Arg Segundo Najib amp

Basiouni (2004) a produccedilatildeo de ovos de matrizes elevou de 52 para 6786 quando

utilizaram niacuteveis de Arg e Lys na dieta de 15 e 12 respectivamente Adicionalmente

Basiouni et al (2006) observaram aumento no peso de foliacuteculos F1 em poedeiras que

receberam dietas com 205 Arg comparado com dietas que continham 154 de Arg

Esse efeito sugere que o aumento na produccedilatildeo de ovos possa ser atribuiacutedo do efeito

estimulatoacuterio especiacutefico da Arg na secreccedilatildeo de LH (Hormocircnio Luteinizante) o qual tem

accedilatildeo direta sobre o ovaacuterio e seus foliacuteculos (Basiouni 2009)

O comportamento observado na curva de produccedilatildeo de ovos demonstra aumento

da produccedilatildeo ateacute o niacutevel de 1262 de Arg e posterior queda ateacute o niacutevel de 1543 o

que provavelmente pode estar associado ao desequiliacutebrio aminoaciacutedico das dietas nos

niacuteveis extremos de Arg na raccedilatildeo Os altos niacuteveis de Arg utilizados podem ter afetado a

produccedilatildeo de ovos principalmente pelo antagonismo existente entre Arg e Lisina (Lys)

Baixas relaccedilotildees ArgLys em dietas de matrizes reduzem o consumo de raccedilatildeo e

deprimem a produccedilatildeo de ovos (Basiouni et al 2006) Altos niacuteveis de Lys associados a

baixos niacuteveis de Arg satildeo deleteacuterios agraves aves pois niacuteveis elevados de Lys promovem

expressiva elevaccedilatildeo da atividade da arginase renal e consequentemente induz agrave

degradaccedilatildeo da Arg (Austic amp Scott 1975) causando sintomas de deficiecircncia de Arg em

virtude das aves natildeo possuiacuterem o ciclo da ureia funcional (Drsquo Mello 2003) Esse

antagonismo ainda leva agrave diminuiccedilatildeo da atividade da glicina-amidinotransferase no

fiacutegado enzima que utiliza Arg e glicina como substratos juntamente com a metionina na

siacutentese da creatina muscular (Jones et al 1967 Andriguetto et al 1999)

48

Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg

()

Postura

()

Peso

Ovo

(g)

Gema

()

Clara

()

Casca

()

Casca

(mm)

Gravidade

Especiacutefica

(gml)

0943 7741plusmn460 6046plusmn048 2998plusmn035 5955plusmn045 876plusmn015 0577plusmn0004 1082plusmn0001

1093 8101plusmn544 6081plusmn052 2972plusmn042 5974plusmn040 902plusmn014 0584plusmn0005 1082plusmn0001

1243 8240plusmn370 6086plusmn051 2971plusmn043 6035plusmn031 875plusmn011 0569plusmn0004 1081plusmn0001

1393 8158plusmn368 6133plusmn057 2986plusmn041 5984plusmn043 880plusmn009 0571plusmn0003 1080plusmn0001

1543 7855plusmn600 6167plusmn046 2964plusmn030 6015plusmn038 876plusmn010 0573plusmn0004 1081plusmn0001

CV() 664 183 195 116 351 198 0133

Anaacutelise Variacircncia

Arg Quadratico1 Linear2 ns ns ns ns Linear3

R2 043 096 ----- ----- ----- ----- 066 1 Y= 421330+01239X-00004908X2 2 Y = 585813+000196527X 3 Y = 108413-000000249943X ns ndash natildeo significativo

77

78

79

80

81

82

83

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Pro

duccedilatilde

o de

ovo

s (

)

Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel

Ao avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arg no peso dos ovos das matrizes de

corte verificou-se aumento linear (Plt005) no peso dos ovos com o aumento de Arg

digestiacutevel nas raccedilotildees por outro lado houve queda linear (Plt005) na gravidade

especiacutefica dos ovos dessas matrizes (Figura 1)

Basiouni et al (2006) encontraram efeito dos niacuteveis de Arg e de Lys sobre na

gravidade especiacutefica dos ovos Estes autores observaram que baixos niacuteveis de Arg e

altos niacuteveis de Lys proporcionaram a melhor gravidade especifica dos ovos e quando a

1262

Arginina dig ()

Y = 421330+011239X-00004908X2 R2=043

49

relaccedilatildeo ArgLys era alta a gravidade especiacutefica piora significativamente Por outro lado

Lima amp Silva (2007) natildeo verificaram efeito das diferentes relaccedilotildees ArgLys digestiacutevel

nos paracircmetros de qualidade de ovos

O aumento do peso do ovo e a queda na gravidade especiacutefica desses ovos

possuem relaccedilatildeo direta Isso ocorre porque segundo Basiouni et al (2006) a siacutentese da

quantidade de casca dos ovos nas galinhas eacute constante Aleacutem disso com o aumento da

idade das galinhas ocorre aumento no tamanho dos ovos Do iniacutecio ateacute o final do ciclo

de postura o ovo chega a aumentar ateacute 40 do seu tamanho e por isso haveraacute menos

caacutelcio na superfiacutecie da casca o que reduz a espessura da casca (Baiatildeo amp Aguilar 2001)

e consequentemente a gravidade especiacutefica dos ovos

Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados de rendimento da incubaccedilatildeo dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel estatildeo apresentados na Tabela 3 Os

niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis de

incubaccedilatildeo Demonstra-se portanto que a Arg pode ser utilizada na dieta das matrizes

sem trazer prejuiacutezos agrave reproduccedilatildeo

A fertilidade e a eclosatildeo dos ovos das matrizes satildeo dois paracircmetros importantes

na incubaccedilatildeo dos ovos Valores proacuteximos de 96 para fertilidade e 88 para eclosatildeo

satildeo indicativos de bom manejo de reprodutoras (Rosa amp Aacutevila 2000) Segundo Rosa amp

Aacutevila (2000) o rendimento da incubaccedilatildeo estaacute diretamente relacionado com a

mortalidade embrionaacuteria a qual sofre influecircncia da gravidade especiacutefica e da

capacidade do ovo em perder umidade No presente trabalho observou-se que a

utilizaccedilatildeo de dietas suplementadas com Arg natildeo afetou nenhuma dessas variaacuteveis

apesar de ter interferido na gravidade especiacutefica dos ovos conforme demonstrado em

tabelas anteriores

10795

108

10805

1081

10815

1082

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Gra

vida

de e

spec

iacutefica

(gm

l)

59860

602604606608

61612614616618

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Peso

(g)

Y = 108413-000000249943X R2=066 Y = 585813+000196527X R2=096

50

O peso do pinto natildeo foi influenciado pelos niacuteveis de Arg na dieta das matrizes

de corte eacute considerado muito importante na cadeia de produccedilatildeo por estar diretamente

relacionado ao desempenho produtivo do frango A variaccedilatildeo de peso do pinto no

momento da eclosatildeo pode ser causada por fatores como linhagem idade da matriz peso

e niacuteveis de nutrientes do ovo (Vieira amp Moran Jr 1999) Okada (1994) e Castro (1996)

ressaltam que pintos de corte com mais de 40g no primeiro dia de vida devem ser

considerados de boa qualidade Os pintos desse experimento podem ser considerados de

boa qualidade jaacute que o menor peso dos pintos ao nascer foi de 439g Embora neste

estudo os niacuteveis de Arg na dieta das matrizes natildeo tenham afetado o peso dos pintos esse

aminoaacutecido eacute essencial para o bom desenvolvimento da progecircnie Kita et al (2002)

relatam que dietas com alta proteiacutena suplementadas com aminoaacutecidos essenciais (Arg

metionina+cistina) aumentam os niacuteveis plasmaacuteticos do fator de crescimento semelhante

agrave insulina (IGF-I) e o ganho de peso em aves jovens

Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Variaacuteveis Niacuteveis de Arginina

()

Fertilidade ()

Eclosatildeo ()

Peso ovo (g)

Peso Pinto (g)

Relaccedilatildeo Peso OvoPeso Pinto

0943 9750plusmn218 7875plusmn450 6269plusmn042 4507plusmn053 7168plusmn045 1093 9513plusmn212 8038plusmn459 6212plusmn033 4390plusmn045 7115plusmn054 1243 9250plusmn206 8125plusmn464 6200plusmn047 4487plusmn066 7234plusmn047 1393 9750plusmn218 8000plusmn457 6314plusmn072 4514plusmn086 7173plusmn082 1543 9625plusmn215 7750plusmn443 6351plusmn055 4529plusmn039 7127plusmn045 Meacutedia 9578 7958 6269 4486 7163

CV () 656 1641 231 374 222 Anaacutelise de Variacircncia Arginina ns ns ns ns ns

R2 ------ ------ ----- ------- ------- ns = natildeo significativo

O peso dos ovos eacute outra caracteriacutestica de grande importacircncia relacionada com a

idade da matriz os quais satildeo preponderantes para o desenvolvimento inicial das aves e

tem consequecircncias em todo o crescimento (Pedroso et al 2005) Essa influecircncia eacute bem

conhecida e o peso do pinto representa entre 66 e 71 do peso do ovo (Fiuacuteza et al

2006 Marinho et al 2006 Pappas et al 2006) Segundo North amp Bell (1990) cada

51

grama a mais no peso do pinto representa 13 gramas no peso do frango ao abate por

isso a nutriccedilatildeo das matrizes eacute de grande importacircncia jaacute que a Arg tem relaccedilatildeo positiva

com o hormocircnio de crescimento (GH) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave

(Harvey et al 2001)

Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico

Estimativas Bayesianas

Ligaccedilatildeo Ligaccedilatildeo Meacutedias Desvio Padratildeo P25 P975 DIC

Embriodiagnoacutestico

Linear α β

-07512 -25980

2078 1798

-4811 -6367

3426 0784 4783 Mortalidade

Embrionaacuteria (1 a 5 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-8444 10690 -5607

10610 18020 7538

-3015 -2406 -2104

11790 47550 8874

4813

Linear α β

2259 -6267

3790 3615

-4602 -14470

10570 -

01174 3137

Mortalidade (11 a 17 dias)

Quadraacutetica α β1 β2

5057 -11090 1958

12960 22430 9632

-2027 -5093 -1714

3112 3253 2052

3167

Linear α β

-3726 1274

10390 07968

-58110 -02681

-1730 2882 1079

Mortalidade (18 a 21 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-1634 -2195 1387

6330 10280 4084

-14020 -22380 -6539

10690 17840 9441

1095

Linear α β

-1927 -2266

2562 2359

-7233 -7321

2739 1993 0070

Bicado Vivo Quadraacutetica

α β1 β2

-1451 -1692 -2019

2749 2821 2539

-7044 -7313 -7290

3755 3682 2565

0057

Linear α β

-2564 -1628

2860 2418

-8103 -6479

2823 2755 3417

Bicado Morto Quadraacutetica

α β1 β2

3692 -12350 4412

11930 19920 8139

-1936 -5206 -1148

2739 2609 2054

3428

Linear α β

-513600 -004923

3798 3023

-13000 -6154

2041 5809 2522

Morte por Contaminaccedilatildeo Quadraacutetica

α β1 β2

-009106 -71940 28920

13200 21610 8744

-2704 -4965 -1428

2480 3473 2016

2555

Na Tabela 4 satildeo apresentadas as estimativas Bayesianas para as equaccedilotildees de

regressatildeo ajustadas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos provenientes das

matrizes de corte alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg Natildeo foi verificado efeito da

dieta das matrizes sobre nenhuma das variaacuteveis paracircmetros avaliadas (Pgt005)

52

Contudo no periacuteodo final do desenvolvimento embrionaacuterio (18 a 21 dias) haacute maior

mortalidade (Tabela 5) Nesse periacuteodo haacute mudanccedila draacutestica do meio aquoso protegido

para o meio aeroacutebio totalmente diferente Nas aves essa fase final de desenvolvimento

inclui absorccedilatildeo de aacutegua retraccedilatildeo do saco vitelino maturaccedilatildeo funcional do pulmatildeo

transiccedilatildeo da respiraccedilatildeo coacuterio-alantoide para pulmonar bicagem e nascimento Ocorre

ao mesmo tempo o desenvolvimento da resposta homeoteacutermica (Oviedo-Roacutendon amp

Murakami 1998) Aleacutem disso nesse periacuteodo ocorre a mudanccedila pronunciada em

hormocircnios tireoideanos corticosteroideos hormocircnios do eixo somatotroacutepico

prolactina vasotocina e melatonina

Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg Morte

Embrionaacuteria (1 a 5 dias)

Morte (11 a 17 dias)

Morte (18 a 21

dias)

Bicado Morto

Morte por Contaminaccedilatildeo

Arg () 0943 264 416 889 264 125 1093 514 000 764 125 000 1243 250 000 836 000 125 1393 000 125 1514 125 000 1543 125 000 1406 125 125 CV () 20962 50785 9999 27439 36515 (Pgt005)

Conclusatildeo

A suplementaccedilatildeo das dietas de matrizes de corte com niacuteveis crescentes de

Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o

niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os

niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas

podendo ser utilizado o menor niacutevel de suplementaccedilatildeo ou seja 0943 de Arg

digestiacutevel sem prejuiacutezos

53

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IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e

paracircmetros oacutesseos da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos

Palavras-chave avaliaccedilatildeo de carcaccedila desempenho produtivo osso

58

IV - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

performance carcass yield and bone parameters of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine

(Arg) supplementation in broiler breeder henrsquos diet on performance carcass yield and bone parameters in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) These results indicate that it is necessary to feed the progeny with an Arg-supplemented diet to obtained better performance and bone quality Key words bone carcass evaluation productive performance

59

Introduccedilatildeo

As exigecircncias nutricionais para a maioria dos nutrientes satildeo estabelecidas com

base nas respostas produtivas mas em alguns casos a sauacutede eacute o criteacuterio principal A

nutriccedilatildeo de reprodutoras pesadas deve atender as exigecircncias da ave alcanccedilando bom

desempenho produtivo e ainda suprir as necessidades dos embriotildees e dos pintos

neonatos originados de seus ovos O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo

dependem completamente dos nutrientes contidos no ovo os quais satildeo originados da

dieta e do metabolismo das galinhas (Baiatildeo amp Lucio 2005) Assim a concentraccedilatildeo de

nutrientes disponiacuteveis no ovo para o desenvolvimento do embriatildeo eacute criacutetico e pode

influenciar o potencial de ganho de peso da progecircnie e caracteriacutesticas importantes de

desenvolvimento imunitaacuterio oacutesseo e muscular

O crescimento precoce no periacuteodo poacutes-eclosatildeo eacute influenciado por vaacuterios

fatores entre eles o conteuacutedo de resiacuteduos do saco viteliacutenico a ingestatildeo de alimento e de

aacutegua os niacuteveis de enzimas pancreaacuteticas e intestinais a aacuterea de superfiacutecie intestinal e a

digestibilidade global de nutrientes (Dibner 1996) As reservas contidas no saco

vitelino satildeo as primeiras fontes de nutrientes utilizadas pelo pintainho ao nascer Desse

modo quanto maior o tempo decorrido entre a eclosatildeo e o iniacutecio da ingestatildeo de

alimento e aacutegua maior a dependecircncia que o pintainho teraacute dessas reservas (Vieira amp

Pophal 2000) a dieta materna eacute a origem dos nutrientes para o embriatildeo (Vieira 2007)

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) afirmam que para matrizes pesadas existe uma pausa nas

pesquisas que visam determinar as exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos Embora os

aminoaacutecidos presentes na gema possam ser suficientes durante o processo de eclosatildeo

apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

desenvolvimento inicial (Otha et al 2004)

Os aminoaacutecidos sinteacuteticos disponiacuteveis no mercado proporcionam o atendimento

das exigecircncias nutricionais das aves principalmente em relaccedilatildeo aos aminoaacutecidos

60

limitantes Dentre esses aminoaacutecidos a arginina (Arg) eacute considerada o quinto

aminoaacutecido limitante para frangos de corte em dietas agrave base de milho e de farelo de

soja apoacutes metionina+cistina lisina treonina e valina (Corzo 2007) Como as aves natildeo

apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem exclusivamente da Arg sinteacutetica

principalmente no periacuteodo inicial de criaccedilatildeo (Allen amp Baker 1972) A suplementaccedilatildeo

da Arg eacute necessaacuteria para a formaccedilatildeo da ornitina a qual estaacute envolvida na siacutentese da

prolina que eacute utilizada para a formaccedilatildeo das poliaminas (espermidina espermina e

putrescina) Estas moleacuteculas estatildeo associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

A Arg aleacutem de serem constituintes de proteiacutenas participa como coadjuvante na

secreccedilatildeo de insulina pelas ceacutelulas β do pacircncreas (Bolea et al 1997) e na secreccedilatildeo do

hormocircnio de crescimento (GH) (Ghigo et al 1994) Os efeitos do GH satildeo mediados

pelos fatores de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Le Roith et al 2001) O

IGF-I eacute conhecido por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo

esqueleacutetico como a proliferaccedilatildeo e diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelite (Florini et al 1996)

e a agregaccedilatildeo de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos sobre a siacutentese e a

degradaccedilatildeo proteica (Duclos et al 1991 Coleman et al 1995 Duclos et al2005)

Outro efeito do GH ocorre em niacutevel do disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de

IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no crescimento dos ossos longos (Isaksson et

al 1987)

O enriquecimento dos ovos das matrizes com Arg bem como sua suplementaccedilatildeo

logo apoacutes a eclosatildeo pode trazer inuacutemeros benefiacutecios sobre o desenvolvimento da

progecircnie jaacute que o GH influenciado pela Arg tem sua siacutentese iniciada na fase

embrionaacuteria da ave (Harvey et al 2001)

Diante do exposto com este estudo objetivou-se testar a influecircncia da

suplementaccedilatildeo com L-Arginina na dieta das matrizes de corte sobre a progecircnie com

dieta suplementada ou natildeo suplementada com L-Arginina sobre o desempenho

paracircmetros oacutesseos e rendimento de carcaccedila dos frangos de corte

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

61

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

no delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina

incluiacutedos na dieta materna variando de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal (0

943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 35

aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada box foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado o

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

em todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as sobras de raccedilatildeo dos boxes foram pesadas para

ajustar o consumo de raccedilatildeo e da conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 2) As

dietas experimentais agrave base de milho e de farelo de soja foram formuladas de acordo

com os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e as recomendaccedilotildees nutricionais

62

propostas por Rostagno et al (2005) As aves controle receberam dieta sem

suplementaccedilatildeo de arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz

sobre o desempenho da progecircnie

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais basais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 017 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 1000 10000 Valores calculados PB () 2000 1850 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

63

Experimento 3 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina digestiacutevel na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes utilizando o delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina e seis repeticcedilotildees

com 32 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal inicial e de crescimento em

substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial corresponderam a 1300

1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela 2) A partir dos 22

dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300 1450 1600

e 1750 de arginina digestiacutevel (Tabela 3) O manejo realizado nesse experimento foi

conduzido conforme descrito no experimento anterior

Desempenho

Para ambos os experimentos com a progecircnie foram avaliados o desempenho

zooteacutecnico (ganho de peso consumo de raccedilatildeo e conversatildeo alimentar) Para avaliaccedilatildeo do

desempenho as raccedilotildees e as aves foram pesadas no iniacutecio do experimento aos 7 21 e 42

dias de idade

Paracircmetros oacutesseos

Os paracircmetros oacutesseos avaliados foram comprimento diacircmetro peso e calculado

o Iacutendice de Seedor Para avaliaccedilatildeo dos paracircmetros oacutesseos em ambos os experimentos

com a progecircnie apoacutes o sacrifiacutecio por meio de atordoamento seguido de sangria foram

coletados os fecircmures e as tiacutebias esquerdas de duas avesrepeticcedilatildeo aos 7 e 21 dias de

idade As amostras ficaram congeladas (-18ordmC) ateacute o iniacutecio das anaacutelises dos paracircmetros

oacutesseos que foram executadas conforme descrito a seguir

Apoacutes o descongelamento dos ossos foram retirados os tecidos envolventes

(tecido muscular aderido) com auxiacutelio de tesouras e pinccedilas Os ossos descongelados

foram pesados em balanccedila analiacutetica (g plusmn 00001) e o comprimento e o diacircmetro (na

64

porccedilatildeo meacutedia do osso) foram medidos usando paquiacutemetro eletrocircnico digital (capacidade

de 0 a 150 mm e resoluccedilatildeo de 001 mm)

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900

Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6456 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl Vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 1300 1450 1600 1750 1900 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

65

A partir do peso do osso e do seu comprimento foi calculado o Iacutendice de Seedor

(Seedor et al 1993) de acordo com a seguinte foacutermula Iacutendice de Seedor = Peso do

osso (mg)comprimento do osso (mm)

Este iacutendice eacute utilizado como indicativo da densidade oacutessea Quanto maior o

Iacutendice de Seedor maior a densidade da peccedila oacutessea e vice-versa

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000

mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

66

Rendimento de carcaccedila

Para determinaccedilatildeo do rendimento de carcaccedila foram utilizadas trecircs aves por

unidade experimental (15 avestratamento) identificadas com anilhas numeradas e

submetidas ao jejum por seis horas atordoadas com eletricidade (220W) e com

posterior sangria no final de cada experimento realizado com a progecircnie

Para caacutelculo do rendimento de carcaccedila foi considerado o peso da carcaccedila

eviscerada quente sem os peacutes cabeccedila e gordura abdominal em relaccedilatildeo ao peso vivo

que foi obtido individualmente antes do abate das aves Para rendimento dos cortes

nobres foi considerado o rendimento do peito inteiro com pele e ossos das pernas

(coxa e sobrecoxa) e das asas que foi calculado em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila

eviscerada

Para caacutelculo da gordura abdominal foi considerada a gordura presente ao redor da

cloaca da bolsa cloacal moela proventriacuteculo e dos muacutesculos abdominais adjacentes foi

retirada conforme descrito por Smith (1993) Em seguida foi pesada e tambeacutem

calculada em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila eviscerada

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

67

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

Resultados e discussatildeo

Os valores meacutedios de desempenho de frangos de corte provenientes de matrizes

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg com dieta suplementada e natildeo suplementada

com Arg estatildeo demonstrados nas Tabelas 5 e 6 respectivamente

No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) os frangos que receberam dietas

suplementadas com Arg apresentaram efeito linear positivo (Plt005) dos niacuteveis

crescentes de suplementaccedilatildeo com Arg sobre o ganho de peso O consumo de raccedilatildeo e a

conversatildeo alimentar foram influenciados de forma quadraacutetica (Plt005) e o niacutevel de

1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649

proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente (Figura 2)

Esses niacuteveis satildeo superiores aos encontrados por Atencio et al (2004) que apresentaram

os niacuteveis de 127 e 128 de Arg digestiacutevel para ganho de peso e conversatildeo

alimentar respectivamente Mendes et al (1997) e Brake et al (1998) observaram

melhor conversatildeo alimentar agrave medida que a Arg foi adicionada agraves dietas dos frangos de

corte

68Tabela 5 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito

0943 1093 1243 1393 1543

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 68749plusmn651 69813plusmn1553 69498plusmn876 71393plusmn2071 71148plusmn1009 466 ns

Consumo de raccedilatildeo g 108937plusmn973 108077plusmn2506 106938plusmn1143 108570plusmn2584 109617plusmn1424 420 ns

Conversatildeo alimentar gg 1585plusmn0015 1548plusmn0006 1539plusmn0014 1523plusmn0023 1541plusmn0004 224 Quadraacutetico1

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 182410plusmn1786 178280plusmn1963 183209plusmn2355 170699plusmn3272 177743plusmn3493 366 ns

Consumo de raccedilatildeo g 339169plusmn2597 332944plusmn4420 334432plusmn4460 328563plusmn5011 335512plusmn4351 311 ns

Conversatildeo alimentar gg 1859plusmn0017 1868plusmn0017 1825plusmn0008 1926plusmn0027 1889plusmn0014 230 ns

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 251160plusmn2118 248093plusmn2721 252708plusmn2327 242092plusmn4528 248891plusmn3614 314 ns

Consumo de raccedilatildeo g 448106plusmn3333 441022plusmn6500 441370plusmn5178 437133plusmn7327 445129plusmn4655 309 ns

Conversatildeo alimentar gg 1784plusmn0013 1777plusmn0011 1746plusmn0005 1807plusmn0021 1789plusmn0008 177 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 15844-0000270801X+0000000325260X2 R2 = 070

69Tabela 6 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito

1300 1450 1600 1750 1900

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 75785plusmn402 77320plusmn1073 78103plusmn635 79648plusmn670 80151plusmn344 212 Linear1

Consumo de raccedilatildeo g 89299plusmn1140 92124plusmn2246 103470plusmn4037 104782plusmn562 96677plusmn1665 557 Quadraacutetico2

Conversatildeo alimentar gg 1179plusmn0007 1192plusmn0031 1326plusmn0055 1316plusmn0012 1207plusmn0026 613 Quadraacutetico3

1150 1300 1450 1600 1750

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 177261plusmn2817 177088plusmn2760 180666plusmn2220 182398plusmn3067 177484plusmn2109 359 ns

Consumo de raccedilatildeo g 358840plusmn5051 353952plusmn5112 356084plusmn2723 358440plusmn6584 354362plusmn2670 322 ns

Conversatildeo alimentar gg 2025plusmn0013 1999plusmn0017 1972plusmn0016 1965plusmn0006 1997plusmn0013 165 Quadraacutetico4

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 253047plusmn2782 254408plusmn3313 258769plusmn2443 262046plusmn3324 257635plusmn2041 269 Linear5

Consumo de raccedilatildeo g 448139plusmn5104 446076plusmn6429 459554plusmn4864 463275plusmn6840 451039plusmn3651 297 ns

Conversatildeo alimentar gg 1771plusmn0009 1754plusmn0015 1777plusmn0022 1768plusmn0005 1751plusmn0012 192 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 759898+00737276X R2 = 081 2 Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=085 3 Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 = 096 4 Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031 5 Y = 253818+0112096X R2 = 017

70

149150151152153154155156157158159

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo A

limen

tar

Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Na progecircnie natildeo suplementada com dieta contendo Arg verificou-se efeito

quadraacutetico (Plt005) da nutriccedilatildeo das matrizes na conversatildeo alimentar (CA) (Figura 1)

sendo que 1359 de Arg dig proporcionou o melhor iacutendice Jaacute o consumo de raccedilatildeo e o

ganho de peso natildeo foram afetados (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo da matriz

O efeito observado da suplementaccedilatildeo com Arg das matrizes na CA de frangos de

corte natildeo suplementados com Arg ser atribuiacuteda ao aumento na concentraccedilatildeo desse

aminoaacutecido na gema a qual eacute responsaacutevel pela nutriccedilatildeo dos pintos durante o seu

desenvolvimento embrionaacuterio e nas primeiras horas de vida poacutes-eclosatildeo Esse aumento

pode ter efeito positivo no desenvolvimento muscular dos pintos uma vez que esse

aminoaacutecido tem accedilatildeo indireta na formaccedilatildeo muscular atraveacutes da siacutentese do hormocircnio de

crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO) Aleacutem disso a Arg ainda estaacute envolvida na

siacutentese da creatina e de poliaminas As poliaminas satildeo consideradas de importacircncia

nutricional no crescimento e desenvolvimento do intestino do neonato (Quinn et al

2002) Segundo Foye et al(2005) o acesso do embriatildeo a nutrientes pode melhorar o

desenvolvimento do sistema digestoacuterio a eclodibilidade e o desempenho dos frangos

Quando o comportamento da curva do consumo de raccedilatildeo dos frangos de corte

que receberam dietas suplementadas com Arg foi analisada verifica-se que apoacutes o

ponto de maior consumo de raccedilatildeo ocorre uma queda na curva (Figura 2) Esse efeito

pode ter sido ocasionado por um desequiliacutebrio dos aminoaacutecidos na dieta afetando

principalmente a relaccedilatildeo LysArg O antagonismo entre esses aminoaacutecidos prejudica a

absorccedilatildeo desses uma vez que ambos competem pelo mesmo siacutetio de absorccedilatildeo

Segundo Fernandes et al (2009) o efeito negativo da suplementaccedilatildeo de Arg

pode estar associado agrave incapacidade funcional dos rins em eliminar o excesso de ureia

formado pela degradaccedilatildeo da Arg Niacuteveis elevados de Arg promovem aumento na

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 070

1359

71

atividade da arginase renal produzindo ornitina e ureia (Stuz et al 1971) Este aumento

pode comprometer a siacutentese de NO visto que a Arg eacute a uacutenica via fisioloacutegica de

produccedilatildeo deste composto Adicionalmente a isso a elevaccedilatildeo da ureia plasmaacutetica de

acordo com Prabhakar et al (1997) pode inibir a accedilatildeo da oacutexido niacutetrico sintetase (NOS)

enzima que cataliza a reaccedilatildeo que converte Arg em NO O NO aleacutem de

neurotransmissor tambeacutem modula a liberaccedilatildeo de outros neurotransmissores (Estrada amp

Murilo-Carretero 2005) cujo envolvimento destas moleacuteculas na regulaccedilatildeo do apetite

vem sendo discutido (Denbow 1999)

750

800

850

900

950

1000

1050

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

sum

o de

raccedilatilde

o (g

)

730

740

750

760

770

780

790

800

810

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Gan

ho d

e pe

so (g

)

105

11

115

12

125

13

135

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo das matrizes com dietas com Arg natildeo afetou as variaacuteveis de

desempenho da progecircnie natildeo suplementada com Arg no periacuteodo de 21 a 42 dias de

idade (Pgt005) Poreacutem quando a progecircnie recebeu dieta com Arg verificou-se efeito

quadraacutetico para conversatildeo alimentar (Plt005) e o melhor resultado foi alcanccedilado com

1669 de Arg (Figura 3)

Sabe-se que a conversatildeo alimentar indica a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo da dieta para

o crescimento e deposiccedilatildeo muscular Assim o crescimento consiste em parte do

resultado da siacutentese proteica e a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo dependem da quantidade de

aminoaacutecidos que estatildeo sendo catabolizados (Sklan amp Noy 2004) Este processo

depende de energia para a biotransformaccedilatildeo e a eliminaccedilatildeo com custo metaboacutelico para

Y = 759898+00737276X R2 = 085

Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 =0 96

Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=081

1690

1649

72

incorporar um aminoaacutecido na cadeia proteica de 4 mol de ATP e de 6 mol de ATPg de

N para eliminaacute-lo (Mc Leoad 1997)

194195196197198199

2201202203204

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo de Arg durante todo o periacuteodo de criaccedilatildeo eacute essencial para que

a ave expresse todo o seu potencial geneacutetico principalmente em relaccedilatildeo ao ganho de

peso Para a progecircnie suplementada no periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade)

observou-se efeito linear positivo (Pgt005) no ganho de peso e para a progecircnie que natildeo

recebeu suplementaccedilatildeo natildeo foi observado efeito(Pgt005) da suplementaccedilatildeo das

matrizes nas variaacuteveis de desempenho (Figura 4)

2500

2520

2540

2560

2580

2600

2620

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Gan

ho d

e Pe

so (g

)

Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

De fato segundo Fernandes et al (2009) a suplementaccedilatildeo de Arg acima das

exigecircncias nas raccedilotildees iniciais (1 a 21 dias) dos frangos melhora o desempenho

produtivo das aves entretanto esse efeito eacute transiente natildeo havendo diferenccedila nestas

caracteriacutesticas na idade de abate

Na fase inicial de criaccedilatildeo a Arg eacute considerada um aminoaacutecido essencial na dieta

das aves visto que o ciclo da ureia natildeo eacute funcional nas aves Assim a incapacidade

desses animais em sintetizar Arg implica na necessidade do fornecimento desse

aminoaacutecido na dieta Aleacutem disso a Arg eacute considerada o quinto aminoaacutecido limitante

Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031

1669

Y = 253818+0112096X R2 = 017

73

para frangos em dietas agrave base de milho e de farelo de soja apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Segundo Ball et al (2007) a exigecircncia de Arg pelas aves eacute a mais alta entre as

espeacutecies de animais estudadas isso porque aleacutem da falta da siacutentese endoacutegena a taxa de

deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento das atuais linhagens de corte eacute muito alta

Os valores meacutedios de desempenho (Tabelas 5 e 6) apresentados durante o

periacuteodo experimental total (1 a 42 dias) satildeo muito proacuteximos Assim foi realizada a

anaacutelise conjunta de ambos os experimentos para confirmar a necessidade ou natildeo de

suplementaccedilatildeo da progecircnie com Arg na dieta No periacuteodo total de 1 a 42 dias (Tabela

7) a CA foi melhor na progecircnie que recebeu dieta suplementada apesar do CR ter sido

superior nessas aves demonstrando assim que a progecircnie suplementada com Arg

converte mais eficientemente a raccedilatildeo em massa muscular

Tabela 7 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg

1 a 21 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 70120plusmn585 108428plusmn789 1547plusmn0007

Progecircnie (suplementada) 78202plusmn406 97271plusmn1456 1243plusmn0018

CV () 473 913 0011 22 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 178468plusmn1380 334124plusmn1877 1874plusmn010

Progecircnie (suplementada) 178979plusmn1160 356346plusmn1981 1992plusmn0007

CV () 1182 1999 0007 1 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 248588plusmn1487 442552plusmn2419b 1781plusmn0006b

Progecircnie (suplementada) 257181plusmn1315 453617plusmn2597a 1764plusmn0006a

CV () 1347 2477 0006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Dentre os paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada

apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis

suplementares de Arg recebidos pelas matrizes (Figura 5)

74

Tabela 8 ndash Meacutedias e erro padratildeo de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito Paracircmetros 0943 1093 1243 1393 1543

de Carcaccedila 6944plusmn025 6863plusmn044 6987plusmn033 6953plusmn028 7009plusmn029 115 Linear1

de Peito 3587plusmn028 3519plusmn017 3662plusmn032 3639plusmn041 3618plusmn042 228 ns

de Coxa 3041plusmn032 3085plusmn019 2970plusmn033 2999plusmn032 3021plusmn022 229 ns

de Asa 1142plusmn016 1129plusmn014 1118plusmn006 1104plusmn020 1110plusmn014 329 ns

de Dorso 2279plusmn020 2352plusmn026 2267plusmn014 2287plusmn030 2262plusmn030 266 ns

de Gordura abdominal 295plusmn015 325plusmn014 292plusmn016 367plusmn019 290plusmn011 1220 ns ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 690720+000146984X R2 = 081 Tabela 9 ndash Meacutedias e erros padratildeo de rendimento da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito Paracircmetros 1150 1300 1450 1600 1750

de Carcaccedila 6993plusmn029 7022plusmn028 7138plusmn033 7128plusmn020 7160plusmn031 099 Linear1

de Peito 3579plusmn030 3584plusmn077 3690plusmn021 3651plusmn028 3698plusmn019 277 Linear2

de Coxa 3126plusmn030 3108plusmn066 3027plusmn025 3026plusmn023 3045plusmn020 295 Linear3

de Asa 1137plusmn022 1123plusmn015 1105plusmn017 1095plusmn015 1096plusmn021 398 Linear4

de Dorso 2272plusmn033 2286plusmn057 2263plusmn028 2273plusmn028 2260plusmn048 436 ns

de Gordura abdominal 314plusmn013 311plusmn013 238plusmn007 279plusmn014 285plusmn007 964 Quadraacutetico5 1 Y = 700017+000293620X R2= 045 2 Y = 357918+000203737X R2 = 027 3 Y = 311542-000163610X R2=021 4 Y = 113323-000072978X R2 = 085 5 Y = 322863-000316200X+000000424975X2R2=030 ns = natildeo significativo

75

686

688

69

692

694

696

698

70

702

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

d

e C

arca

ccedila

Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Al-Murrani (1982) demonstrou que injetando uma mistura de aminoaacutecidos nos

embriotildees em crescimento nos ovos de matrizes de corte resultam em aumento no peso

do pinto e no ganho de peso dos frangos de corte aos 56 dias de idade quando estes

foram comparados com os natildeo tratados De fato o peso do embriatildeo e dos pintos eacute

influenciado pelo perfil nutricional da gema por sua utilizaccedilatildeo pelo pintos apoacutes o

nascimento (Otha et al 1999)

Quando os frangos receberam dietas suplementadas com Arg houve aumento

linear positivo (Plt005) da porcentagem de carcaccedila e de peito poreacutem as porcentagens

de pernas e de asa apresentaram queda linear (Plt005) (Figura 6) Esses efeitos

provavelmente ocorreram pela accedilatildeo indireta da Arg pela formaccedilatildeo muscular atraveacutes da

siacutentese do hormocircnio do crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO)

A Arg eacute constituinte de proteiacutenas e estaacute envolvida na secreccedilatildeo de insulina pelo

pacircncreas (Bolea et al 1997) e do GH pela hipoacutefise (Merimee et al 1969) Os efeitos

desses hormocircnios se manifestam por meio da secreccedilatildeo secundaacuteria dos fatores de

crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Roith et al 2001) O IGF-I eacute conhecido

por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo esqueleacutetico como

a proliferaccedilatildeo e a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelites (Florini et al 1996) e a agregaccedilatildeo

de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos na siacutentese e na degradaccedilatildeo proteica

(Duclos et al 2005)

Outro mecanismo de accedilatildeo da Arg nas fibras musculares estaacute relacionada com agrave

accedilatildeo do oacutexido niacutetrico O NO eacute sintetizado pela oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) a qual eacute

expressada pelas fibras do muacutesculo esqueleacutetico (Reid 2001) A atividade da NOS

variam nos diferentes tipos de muacutesculos sendo que nos muacutesculos de contraccedilatildeo raacutepida

verifica-se maior accedilatildeo desta do que nos muacutesculos de contraccedilatildeo lenta (Reid 2001)

Y = 690720+000146984X R2 = 081

76

Assim o efeito observado nos diferentes cortes provavelmente ocorreu em virtude da

predominacircncia de fibras brancas ou Fast Glycolytic (FG) no peito Em contrapartida os

muacutesculos da coxa sobrecoxa e da asa possuem predominacircncia de fibras vermelhas ou

Slow Oxidative (SO) que satildeo de contraccedilatildeo lenta (Sartori amp Gonzaacuteles 2002) e pouco

afetada pela accedilatildeo da NOS

O teor de gordura abdominal presente na carcaccedila de frangos eacute um dos melhores

indicativos de qualidade da carcaccedila Quando os frangos foram suplementados com

niacuteveis de Arg verificou-se efeito quadraacutetico (Plt005) para essa caracteriacutestica em que o

menor teor de gordura abdominal foi obtido com 1672 de Arg dig (Figura 6) A

queda observada ateacute esse niacutevel pode ser explicada pela accedilatildeo do GH via IGF-I que induz

a siacutentese de proteiacutenas por estimular a captaccedilatildeo de aminoaacutecidos e a transcriccedilatildeo e a

traduccedilatildeo do mRNA em vaacuterios tecidos-alvo Diminui o catabolismo de proteiacutenas por

atuar diretamente na liberaccedilatildeo de aacutecidos graxos do tecido adiposo aumentando a sua

conversatildeo em acetil-CoA fonte de energia para os tecidos perifeacutericos A partir desse

ponto onde verifica-se o menor acuacutemulo de gordura ocorre novamente o aumento na

deposiccedilatildeo de gordura abdominal Isso provavelmente se deve ao excesso de aminoaacutecido

na dieta A degradaccedilatildeo desse excesso leva a excreccedilatildeo de nitrogecircnio na urina na forma

de amocircnia e a produccedilatildeo de moleacuteculas com esqueleto carbocircnico que satildeo usadas na

gliconeogecircnese e na lipogecircnese

Segundo Shutte amp Pack (1995) e Leclerq (1998) a suplementaccedilatildeo e o

balanceamento dos aminoaacutecidos das dietas podem promover aumento no ganho de

carcaccedila principalmente em relaccedilatildeo ao peito (Pophal et al 2004) e reduccedilatildeo de gordura

abdominal (Vieira et al 2004)

Mendes et al (1997) verificaram que o aumento da relaccedilatildeo ArgLys melhorou o

rendimento de carcaccedila e reduziu a gordura abdominal em frangos de corte Costa et al

(2001) observaram que agrave medida em que se aumentou a relaccedilatildeo ArgLys houve efeito

linear crescente para o rendimento de perna e decrescente para a gordura abdominal Jaacute

Fernandes et al (2009) natildeo observaram efeito da suplementaccedilatildeo de Arg nas variaacuteveis de

rendimento de carcaccedila analisadas o que provavelmente ocorreu porque diferentemente

do presente trabalho a suplementaccedilatildeo de Arg foi realizada apenas na fase inicial de

criaccedilatildeo (1 a 21 dias de idade)

77

69

695

70

705

71

715

72

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

arca

ccedila

35352354356358

36362364366368

37372

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

P

eito

296298

30302304306308

31312314

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

oxa

106

107

108

109

11

111

112

113

114

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

A

sa

2

22

24

26

28

3

32

34

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

G

ordu

ra a

bdom

inal

Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Outra possibilidade eacute que essas caracteriacutesticas de rendimento de carcaccedila foram

influenciadas pelos niacuteveis dieteacuteticos de Arg que estatildeo acima da exigecircncia das aves

Resultado contraacuterio foi obtido por Atencio et al (2004) que trabalhando com niacuteveis

crescentes de Arg natildeo verificaram efeito no rendimento de carcaccedila e de cortes

avaliados e estes concluiacuteram que os niacuteveis estudados estavam dentro da exigecircncia das

aves

Na anaacutelise conjunta do rendimento de carcaccedila dos experimentos da progecircnie

que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg (Tabela 10) demonstrou-se que a

presenccedila de Arg na dieta promove maior deposiccedilatildeo muscular na coxa e menor acuacutemulo

de gordura abdominal na carcaccedila

Y = 322863-000316200X+000000424975X2 R2 = 030

1672

Y = 700017+000293620X R2 = 045 Y = 357918+000203737X R2 = 027

Y = 113323-000072978X R2 = 085 Y = 311542-000163610X R2 = 021

Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

78

Tabela 10 ndash Meacutedias de percentagem de carcaccedila (CARC) percentagem de peito (PEITO) percentagem de coxa (COXA) percentagem de asa (ASA) percentagem de gordura abdominal (GORDURA) das progecircnies suplementadas ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

CARC PEITO COXA ASA GORDURAProgecircnie

(ssuplementaccedilatildeo) 6951plusmn016 3605plusmn017 3023plusmn014b 1121plusmn007 307plusmn007ordf

Progecircnie (suplementada) 7088plusmn017 3640plusmn020 3066plusmn017ordf 1111plusmn008 285plusmn007b

CV () 014 017 015 007 006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Com relaccedilatildeo aos paracircmetros oacutesseos dos frangos de corte que receberam dietas

sem suplementaccedilatildeo de Arg (Tabela 11) apenas o diacircmetro de tiacutebia aos sete dias de

idade foi afetado de forma quadraacutetica (Plt005) pela suplementaccedilatildeo das matrizes a

partir do niacutevel 1196 de Arg (Figura 7) demonstrando assim que inclusotildees de Arg

acima da exigecircncia promove a melhora dessa caracteriacutestica Segundo Wu amp Morris

(1998) a suplementaccedilatildeo de Arg em niacuteveis elevados promove aumento na atividade da

arginase renal eleva os niacuteveis de ornitina que participa da biossiacutentese das poliaminas

envolvidas no processo de multiplicaccedilatildeo celular melhorando desta forma o suporte

oacutesseo Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram aumento na concentraccedilatildeo

plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez secretado pela

hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio receptor e

indiretamente via IGF-I e II nos tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos

do GH ocorre no disco epifisaacuterio em que atua estimulando a siacutentese de IGF-I o qual

atua paracrinamente induzindo mitogecircnese o que resulta no crescimento dos ossos

longos (Isaksson et al 1987)

Para os paracircmetros morfoloacutegicos dos ossos dos frangos que receberam dietas

contendo suplementaccedilatildeo de Arg verifica-se efeito linear crescente (Plt005) dos niacuteveis

de arginina para o comprimento e diacircmetro do fecircmur e da tiacutebia O mesmo

comportamento foi observado para o iacutendice de Seedor medida indireta da densidade

oacutessea para ambos os ossos aos 7 dias de idade (Figura 8)

79

Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Fecircmur Tiacutebia Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arg na dieta materna

()

7 dias

0943 2930plusmn034 286plusmn008 2803plusmn027 4154plusmn047 271plusmn005 2925plusmn078 1093 2929plusmn042 293plusmn008 2990plusmn123 4162plusmn062 265plusmn005 2945plusmn096 1243 2911plusmn031 283plusmn008 2603plusmn078 4175plusmn042 258plusmn004 2733plusmn063 1393 2912plusmn046 295plusmn008 2920plusmn086 4172plusmn062 273plusmn003 3008plusmn117 1543 2983plusmn031 293plusmn009 2877plusmn068 4269plusmn039 275plusmn002 2897plusmn038

CV 313 690 712 306 377 701 Regressatildeo ns ns ns Ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- ----- ----- 081 -----

21 dias

0943 5001plusmn056 594plusmn019 10198plusmn294 7128plusmn141 526plusmn012 9621plusmn202 1093 5064plusmn036 632plusmn015 10928plusmn175 7197plusmn086 576plusmn008 10720plusmn182 1243 4937plusmn065 574plusmn013 9956plusmn396 6911plusmn094 514plusmn023 9899plusmn357 1393 5002plusmn062 569plusmn011 9822plusmn346 6912plusmn123 512plusmn009 9537plusmn341 1543 5035plusmn026 613plusmn020 11288plusmn337 7005plusmn135 535plusmn011 10928plusmn339

CV 252 657 747 411 635 711 Regressatildeo ns ns ns Ns ns ns R2 ----- ----- ----- ----- ----- -----

ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

80

Tabela 12 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Paracircmetros oacutesseos Fecircmur Tiacutebia

Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arginina () 7 dias 1300 3007plusmn042 309plusmn011 3194plusmn102 4260plusmn041 285plusmn012 3164plusmn122 1450 3022plusmn036 313plusmn007 3333plusmn098 4311plusmn055 293plusmn008 3202plusmn087 1600 3074plusmn023 321plusmn007 3435plusmn102 4352plusmn024 292plusmn004 3405plusmn101 1750 3098plusmn011 322plusmn007 3348plusmn089 4324plusmn044 293plusmn003 3315plusmn114 1900 3058plusmn015 322plusmn012 3540plusmn140 4350plusmn019 305plusmn005 3503plusmn108 CV 225 712 781 220 608 789 Regressatildeo Linear1 ns Linear2 Ns Linear3 Linear4 R2 023 ----- 020 ----- 030 045

21 dias 1300 1300 1450 1600 1750 553plusmn016 9974plusmn408 1450 5032plusmn031 595plusmn015 9973plusmn343 7122plusmn058 533plusmn019 9675plusmn313 1600 5062plusmn068 614plusmn009 10623plusmn306 7102plusmn041 566plusmn015 10453plusmn286 1750 5134plusmn043 597plusmn013 10024plusmn226 7341plusmn180 548plusmn007 9577plusmn168 1900 5111plusmn044 615plusmn013 10942plusmn185 7145plusmn064 562plusmn008 10751plusmn333 CV 231 567 732 333 619 757 Regressatildeo ns ns Linear5 Ns ns ns R2 ----- ----- 030 ----- ---- -----

NS = natildeo significativo 1 Y = 301662+000117500X 2 Y = 322856+000471280X 3 Y = 285333+0000799183X 4 Y = 315921+000526700X 5 Y = 983310+00149518X

255

26

265

27

275

28

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Diacirc

met

ro d

a Tiacute

bia

(mm

)

Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados encontrados para essa idade estatildeo de acordo com os encontrados

por Fernandes (2007) que encontrou efeito linear crescente para o iacutendice de Seedor

quando as aves foram alimentadas com Arg na dieta Aos 21 dias de idade apenas o

iacutendice de Seedor foi afetado de forma linear (Plt005) crescente com o aumento dos

niacuteveis de Arg (Figura 9) O comportamento positivo da suplementaccedilatildeo de arginina sobre

a morfologia do fecircmur e da tiacutebia pressupotildee melhor densidade desses ossos Segundo

Sekine et al (1994) os aminoaacutecidos no o crescimento transverso do osso e essa accedilatildeo

facilita a formaccedilatildeo da matriz e a calcificaccedilatildeo oacutessea

Aleacutem da accedilatildeo da Arg sobre os ossos indiretamente via IGF-I esta tambeacutem eacute

conhecida como precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo pelo qual ela poderia exercer os

seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo Hukkanem et al (1999) sugerem que o

NO pode participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento

298

30

302

304

306

308

31

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Com

prim

ento

- Fecirc

mur

(mm

)

30531

31532

32533

33534

34535

355

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - F

ecircmur

Y = 301662+000117500X R2 = 023 Y = 322856+000471280X R2 = 020

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

Arginina dig ()

82

26

27

28

29

3

31

32

33

34

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Diacirc

met

ro -

Tiacutebi

a (m

m)

30305

31315

32325

33335

34345

35

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - T

iacutebia

Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada ou natildeo com Arg avaliados em

conjunto mostraram que a suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg melhorou o comprimento do

fecircmur e a espessura da tiacutebia Este resultado pode contribuir para melhorar a qualidade

dos ossos dos frangos uma vez que esse eacute um dos maiores problemas enfrentados na

atualidade na avicultura comercial

Tabela 13 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

FC (mm)

FE (mm) FSEE TC

(mm) TE

(mm) TSEE

7 dias Progecircnie

(ssuplementaccedilatildeo)

2933plusmn016

290plusmn003

2838plusmn042

4186plusmn023

268plusmn002

2902plusmn038

Progecircnie (suplementada)

3052plusmn013

317plusmn004

3369plusmn049

4319plusmn017

293plusmn003

3317plusmn050

CV () 014 004 042 021 0026 043 21 dias

Progecircnie (ssuplementaccedil

atildeo)

5008plusmn023b

596plusmn008

10438plusmn170

7031plusmn053

533plusmn007b

10141plusmn162

Progecircnie (suplementada)

5079plusmn021ordf

607plusmn006

10282plusmn150

7157plusmn044

552plusmn006ordf

10086plusmn154

CV () 016 007 140 048 006 136 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Y = 315921+000526700X R2 = 045 Y = 285333+0000799183X R2 = 030

83

96597

97598

98599

995100

1005101

1015102

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig

Iacutendi

ce d

e Se

edor

- Fecirc

mur

Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade

Conclusatildeo

De acordo com os resultados observados conclui-se que os niacuteveis dieteacuteticos de

Arg na dieta das matrizes de corte foram suficientes para melhorar o desempenho da

progecircnie somente na fase inicial de crescimento (1-21 dias de idade) Quando a dieta da

progecircnie tambeacutem foi suplementada com Arg os paracircmetros de desempenho

rendimento de carcaccedila e qualidade oacutessea satildeo melhorados em ambas as fases de criaccedilatildeo

(1-21 dias e 22 a 42 dias de idade) com melhorias imprescindiacuteveis para a qualidade de

carne como a reduccedilatildeo da gordura abdominal

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V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos sete dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavra-chave arginina ELISA fitohemaglutinina sistema imune

V - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

humoral and cellular immunity response of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level being considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses

Key words arginine ELISA phytohemagglutinin immune system

91

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo da matriz afeta o desempenho dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias de

vida portanto a necessidade da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos O sistema imune das aves difere dos mamiacuteferos em algumas

caracteriacutesticas particularmente nos aspectos de estrutura e de diferenciaccedilatildeo dos oacutergatildeos

linfoides (Jeurissen et al 1994) cujo desenvolvimento se inicia durante a vida

embrionaacuteria e se prolonga apoacutes a eclosatildeo ou nascimento

As uacuteltimas horas de incubaccedilatildeo e os primeiros dias de vida poacutes-eclosatildeo satildeo

fundamentais para que este desenvolvimento se complete Somente apoacutes a segunda

semana de vida a ave seraacute capaz de produzir suas proacuteprias imunoglobulinas Ateacute laacute a

imunidade herdada da matildee pela absorccedilatildeo das imunoglobulinas presentes no ovo eacute o

uacutenico mecanismo de defesa do neonato contra as agressotildees do meio externo apoacutes a

eclosatildeo (Maiorka et al 2006)

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas A arginina (Arg) eacute

considerada um aminoaacutecido essencial para aves sobretudo na fase inicial por que o

ciclo bioquiacutemico da ureia natildeo eacute funcional em aves Assim estas natildeo podem sintetizar

Arg e satildeo portanto dependentes do fornecimento deste aminoaacutecido nas dietas Dentre

as espeacutecies animais estudadas as aves tecircm a mais alta exigecircncia de Arg (Ball et al

2007) que se deve tambeacutem agrave alta taxa de deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento

das atuais linhagens de corte e o antagonismo com a Lys

A Arg eacute necessaacuteria para siacutentese de vaacuterias compostos tais como ornitina

poliaminas prolina creatina de proteiacutenas oacutexido niacutetrico (NO) e citrulina aleacutem de

92

glutamato e agmatina em mamiacuteferos A Arg eacute tambeacutem considerada um potente

secretagogo aumentando a liberaccedilatildeo na corrente sanguiacutenea da insulina hormocircnio do

crescimento (GH) e fator de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I) (Newsholme et

al 2005) Esta accedilatildeo eacute em consequecircncia da raacutepida despolarizaccedilatildeo da membrana

plasmaacutetica ligada ao transporte de aminoaacutecidos com a cadeia lateral positiva

De acordo com Le Flocrsquoh et al (2004) os animais estimulados

imunologicamente podem ter suas necessidades de Arg aumentadas Duas rotas do

metabolismo da Arg satildeo identificadas e conhecidas por ter efeitos imunomodulatoacuterios

diretos A primeira na qual a Arg eacute convertida a ornitina gerando poliaminas que tecircm

papel chave na divisatildeo celular siacutentese de DNA e regulaccedilatildeo do ciclo celular A segunda

corresponde agrave siacutentese do NO induzida por vaacuterios de estiacutemulos inflamatoacuterios como as

endotoxinas bacterianas e as citocinas Essa rota eacute essencial para a atividade citotoacutexica

de macroacutefagos O NO tambeacutem estimula a vasodilataccedilatildeo local e favorece ainda a

reparaccedilatildeo tecidual (Bredt amp Snyder 1994)

Com este trabalho objetivou-se avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina na

dieta das matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie

suplementadas ou natildeo

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

93

dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

em um delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-

Arginina incluiacutedos na dieta materna (0 150 300 450 e 600 mgkg da dieta materna)

que equivaleram aos niacuteveis de 0 9431093 12431393 e 1 543 de Arg

digestiacutevel com seis repeticcedilotildees com 35 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo estes substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada boxe foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado um

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

durante todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as aves e as sobras de raccedilatildeo do boxe foram pesadas

ao mesmo tempo para ajustar o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 1) As

dietas experimentais agrave base de milho e farelo de soja foram formuladas de acordo com

os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e recomendaccedilotildees nutricionais de

Rostagno et al (2005) As aves receberam uma uacutenica raccedilatildeo sem suplementaccedilatildeo de

arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz sobre o desempenho

da progecircnie

94

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 018 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 18500 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

95

Experimento 2 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes atraveacutes de um delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na

dieta materna de 0 a 600 mgkg da dieta de Arg digestiacutevel acima da recomendaccedilatildeo dos

frangos de corte e seis repeticcedilotildees com 32 aves cada totalizando 30 unidades

experimentais

O manejo realizado nesse experimento foi conduzido conforme descrito no

experimento anterior com diferenccedila com relaccedilatildeo ao tipo de dieta utilizada

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg da dieta acima da exigecircncia dos frangos de corte agrave raccedilatildeo

basal inicial em substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial

corresponderam a 1300 1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela

2) A partir dos 22 dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300

1450 1600 e 1750 de Arg digestiacutevel (Tabela 3)

96

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900 Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6457 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 130 145 160 175 190 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

97

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 075 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 1000 1000 1000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI

VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

Colheita de Sangue e Anaacutelise de Tiacutetulos vacinais

No 7ordm dia de vida antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm foram coletadas

amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo As aves foram vacinadas contra a

doenccedila de New Castle (Fort-Dodgereg) via ocular na dose de 003 mL por ave aos sete e

21 dias de idade A venopunccedilatildeo foi realizada mediante contenccedilatildeo fiacutesica manual dos

98

animais preferencialmente na veia jugular direita com seringa de 3 mL e agulha 13x45

e uma quantia de sangue coletada em torno de 1 do peso corporal dos animais O

sangue foi acondicionado em tubos de vidro identificados sem anticoagulante para

obtenccedilatildeo de soro sanguiacuteneo No soro foi avaliada a titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais

contra o viacuterus de Doenccedila Newcastle pelo teste imunoenzimaacutetico (ELISA-teste) As

anaacutelises foram processadas em kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent

Assay) do Laboratoacuterio Idexxreg e os dados obtidos foram expressos em absorbacircncia Os

dados de titulaccedilatildeo de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Anaacutelise Histomorfomeacutetrica

No 7ordm e 21ordm dia de idade o timo a bolsa cloacal o baccedilo e o fiacutegado de duas aves

por repeticcedilatildeo foram coletados totalizando doze aves por tratamento Para a realizaccedilatildeo

dessa coleta as aves foram submetidas ao atordoamento por choque e posterior sangria

Apoacutes o sacrifiacutecio as aves foram pesadas individualmente e as carcaccedilas dessecadas para

remoccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides (Timo Baccedilo e Bolsa de Fabricius) O peso dos oacutergatildeos

linfoides foi obtido imediatamente apoacutes a dessecaccedilatildeo e remoccedilatildeo dos tecidos exoacutegenos

Os oacutergatildeos coletados foram pesados em balanccedila de precisatildeo e o peso da ave foi

devidamente anotado

O peso relativo de cada oacutergatildeo foi obtido pela foacutermula

Peso relativo = (peso oacutergatildeopeso vivo) x 100

Para a medida histomorfomeacutetrica dos foliacuteculos linfoides as bolsas cloacais e o

fiacutegado foram acondicionadas em frascos contendo soluccedilatildeo de formol tamponado a 10

(De Tolosa et al 2003) com finalidade de manter a integridade dos tecidos apoacutes a

morte preservando a arquitetura celular As peccedilas foram incluiacutedas em parafina e levadas

ao microacutetomo rotativo para a realizaccedilatildeo dos cortes transversais no centro do oacutergatildeo com

sete microcircmetros de espessura e corados pelo meacutetodo da hematoxilina e eosina (HE) As

lacircminas foram escaneadas usando-se um ldquoscaner HP ScanJet II v25rdquo sendo o

ldquosoftwarerdquo utilizado para o tratamento das imagens o ldquoPaint Shop Pro v50rdquo A

imagem foi digitalizada brilho (variaacutevel entre 125 e 145) contraste 185 e escala de

800 As imagens foram gravadas com extensatildeo jpg e levadas ao analisador de

imagens Para a leitura das imagens foi utilizado um analisador de imagem

computadorizado IMAGE PROPLUS 52 da Miacutedia Cibertecnics Foi mensurada a

altura de trecircs dobras do tecido linfoide de cada repeticcedilatildeo (12 aves por tratamento) e

destes valores foi obtida a meacutedia

99

Nas amostras de fiacutegado foi analisada a presenccedila de aglomerados linfoides As

lacircminas com porccedilotildees do fiacutegado foram analisadas em toda sua extensatildeo e os

aglomerados linfoides foram quantificados atraveacutes de microscopia de luz com aumento

de 10X (Olympus BH2 Olympus America INC NY USA)

Fitohemaglutinina (PHA)

Aos 35 dias de idade duas aves por repeticcedilatildeo totalizando 12 aves por tratamento

foram marcadas com anilhas numeradas e utilizadas para avaliar a imunidade mediada

por ceacutelulas in vivo (Corrier amp DeLoach 1990) Cada ave foi inoculada

intradermicamente no espaccedilo interdigital entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata direita com 01

mL de uma soluccedilatildeo fitohemaglutinina PHA-Mreg (1057601 - Invitrogen) Como controle

negativo 01 mL de soro fisioloacutegico esteacuteril foi inoculado entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata

esquerda O espessamento da pele de ambas as patas foi aferido em miliacutemetros

utilizando-se um paquiacutemetro digital antes da inoculaccedilatildeo e apoacutes trecircs seis 12 e 24 horas

apoacutes a inoculaccedilatildeo O caacutelculo (Corrier amp DeLoach 1990) apresentou-se da seguinte

forma Reaccedilatildeo = resposta a fitohemaglutinina ndash resposta do controle na qual a resposta

a fitohemaglutinina eacute medida pela espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo menos

a espessura no tempo zero (antes da inoculaccedilatildeo) A resposta do controle eacute medida pela

espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo (Soro) menos a espessura no tempo zero

(antes da inoculaccedilatildeo)

Avaliaccedilatildeo da Atividade Fagociacutetica de Macroacutefagos

Para avaliaccedilatildeo da atividade fagociacutetica de macroacutefagos foram utilizadas duas aves

por repeticcedilatildeo totalizando quatro aves por tratamento As aves foram inoculadas no 35ordm

dia de vida atraveacutes de injeccedilatildeo intra-abdominal de Sephadex G-50reg (Sigma) a 3 (10

mL100g de peso vivo) (Qureshi et al 1986 Gore amp Qureshi 1997 Konjufca 2004)

Utilizaram-se para esse procedimento cateteres intravasculares G-14 Apoacutes 42

horas as aves foram submetidas a atordoamento por eletronarcose e sacrificadas atraveacutes

de desligamento cervical Foram lavadas (detergente neutro) e sanitizadas (aacutelcool 70)

As aves foram transportadas ao laboratoacuterio onde se procedeu a abertura da cavidade

abdominal que foi posteriormente lavada com 20 mL de soluccedilatildeo de PBS esteacuteril

heparinizada contendo 05 UIL (Liqueminereg 25000 UI5mL ndash Roche)

Coletaram-se aproximadamente 15 mL de liacutequido abdominal com auxiacutelio de

pipetas Pasteur que foi imediatamente acondicionado em tubos Falcon em banho de

100

gelo O material foi centrifugado a 1500 rpm10 minutos sendo o ldquopelletrdquo

ressuspendido em 2 mL de meio RPMI 1640reg (Sigma) Adicionou-se 150 μL dessa

suspensatildeo a cada well da placa de cultura (24 poccedilos) contendo lamiacutenula de 13 mm de

diacircmetro Incubou-se a temperatura ambiente por uma hora Lavou-se a placa com PBS

esteacuteril gelado para remover as ceacutelulas natildeo aderentes Em seguida adicionou-se 150 μL

de suspensatildeo a 3 de eritroacutecitos de carneiros em meio RPMI 1640reg (Sigma)

incubando-se em temperatura ambiente em concentraccedilatildeo de 5 de gaacutes carbocircnico por

uma hora Lavou-se com PBS esteacuteril gelado para remover os eritroacutecitos que natildeo

aderiram Em seguida realizou-se a coloraccedilatildeo utilizando-se kit comercial (Panoacutetico

Raacutepido LBreg - Laborclin)

Apoacutes 24 horas as lacircminas foram montadas utilizando-se Permountreg Foram

contados em cada lamiacutenula 300 macroacutefagos e verificado o nuacutemero destas ceacutelulas que

continham hemaacuteceas fagocitadas A atividade fagociacutetica foi calculada considerando-se o

nuacutemero de macroacutefagos contendo hemaacuteceas fagocitadas dividido pelo nuacutemero total de

macroacutefagos contados

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

101

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Resultados e Discussatildeo

Os dados meacutedios dos pesos relativos de oacutergatildeos linfoides de frangos de corte

alimentados com dietas natildeo suplementadas estatildeo na Tabela 5 A suplementaccedilatildeo das

matrizes de corte natildeo influenciou o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie

natildeo suplementada com Arg (Pgt005) Da mesma maneira quando houve a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg para a progecircnie tambeacutem natildeo foi verificado (Pgt005)

efeito sobre o peso relativo dos oacutergatildeos linfoides dessas aves (Tabela 6)

102

Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg das Matrizes () 7 dias 21 dias

0943 058plusmn003 054plusmn004 1093 055plusmn003 056plusmn005 1243 056plusmn003 057plusmn003 1393 052plusmn004 057plusmn004 1543 052plusmn003 051plusmn005 CV 1410 1840

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

0943 006plusmn0005 011plusmn001 1093 008plusmn0007 011plusmn001 1243 012plusmn0036 009plusmn001 1393 007plusmn0007 010plusmn001 1543 009plusmn0007 010plusmn001 CV 4968 2463

Regressatildeo ns ns Baccedilo()

0943 015plusmn001 024plusmn001 1093 017plusmn001 022plusmn002 1243 016plusmn001 021plusmn001 1393 015plusmn001 022plusmn003 1543 013plusmn001 021plusmn001 CV 1885 1868

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

O timo e a bolsa cloacal satildeo oacutergatildeos linfoides primaacuterios que representam siacutetios

de maturaccedilatildeo de linfoacutecitos T e B respectivamente Estes oacutergatildeos tecircm fundamental

importacircncia no periacuteodo poacutes-eclosatildeo poreacutem agrave medida que as aves se desenvolvem e se

aproximam da maturidade sexual sofrem involuccedilatildeo fisioloacutegica (Morgullis 2002)

No contexto do desenvolvimento e maturaccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides trabalhos

desenvolvidos com mamiacuteferos demonstram que as respostas imunes podem ser

influenciadas pela Arg dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al 1998 Lewis amp

Langkamp-Henken 2000) Experimentos desenvolvidos com animais jovens

demonstraram efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina como o aumento

do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos tiacutemicos Os efeitos

imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais estressados ou

imunossupremidos

103

Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias

1300 053plusmn005 056plusmn004 1450 057plusmn004 057plusmn003 1600 059plusmn004 059plusmn003 1750 051plusmn003 048plusmn005 1900 058plusmn004 053plusmn004 CV 1910 1790

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

1300 016plusmn0011 025plusmn002 1450 015plusmn0012 020plusmn001 1600 018plusmn0007 022plusmn002 1750 019plusmn0016 026plusmn003 1900 015plusmn0007 023plusmn001 CV 1621 2021

Regressatildeo ns ns Baccedilo ()

1300 007plusmn0009 008plusmn001 1450 009plusmn0008 010plusmn001 1600 008plusmn0006 009plusmn001 1750 008plusmn0005 011plusmn001 1900 007plusmn0007 010plusmn001 CV 2227 2151

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

Para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de Arg foram

observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

nutricionais estabelecidas Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de

Arg plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular (Kidd 2004)

Ao contraacuterio dos resultados observados nesse experimento Jahanian (2009)

observou que animais na fase inicial com dietas suplementadas com Arg e com baixo

niacutevel proteico apresentaram aumento do peso relativo do timo indicando assim que a

Arg eacute necessaacuteria para a resposta oacutetima da imunidade celular

Quando se contrastam os dados do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (Tabela 7)

verificou-se a influencia da suplementaccedilatildeo de Arg no peso da bolsa cloacal (Plt005) no

periacuteodo inicial de criaccedilatildeo Esse aumento eacute de grande importacircncia uma vez que a bolsa

cloacal eacute o principal siacutetio de maturaccedilatildeo dos linfoacutecitos B que satildeo essenciais ao sistema

imune das aves Na fase de 1 a 7 dias de idade esse incremento pode refletir a melhoria

104

das condiccedilotildees imunitaacuterias jaacute que nesse periacuteodo os desafios sanitaacuterios podem

comprometer todo desempenho dessa ave ateacute o final de sua criaccedilatildeo

Tabela 7 ndash Meacutedias e erro padratildeo do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

7 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada) 054plusmn001 015plusmn0005b 0085plusmn0008

Progecircnie (suplementada) 056plusmn002 017plusmn0006ordf 0079plusmn0003

CV () 002 0005 0006 21 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada)

055plusmn001 022plusmn0007 011plusmn0005

Progecircnie (suplementada)

054plusmn002 023plusmn0009 009plusmn0004

CV () 002 008 0004 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

A anaacutelise histomorfomeacutetrica do fiacutegado natildeo mostrou influecircncia (Pgt005) das

dietas das matrizes nos aglomerados linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo (Tabela

8) Da mesma maneira as dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal natildeo foram

influenciadas (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo ou natildeo de Arg na dieta (Tabela 8)

Existe relaccedilatildeo direta entre o fiacutegado e a bolsa cloacal Nas aves os linfoacutecitos B

responsaacuteveis pela produccedilatildeo de anticorpos envolvidos na resposta imunoloacutegica humoral

satildeo produzidos no fiacutegado do embriatildeo no saco viteliacutenico e na medula oacutessea na fase

inicial da incubaccedilatildeo Apoacutes isso migram para a bolsa cloacal e sofrem amadurecimento

e diferenciaccedilatildeo por ateacute dez semanas Daiacute partem para colonizar outros oacutergatildeos como o

baccedilo e a glacircndula de Harder (Butcher amp Miles 2003) A bolsa cloacal eacute constituiacuteda de

linfoacutecitos incrustados em tecido epitelial cujas dobras se estendem no interior do

luacutemen onde se espalham os foliacuteculos linfoides Seus foliacuteculos contecircm mais de 90 de

ceacutelulas B (Tizard 1998)

105

Tabela 8 - Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg

Aglomerados Linfoacuteides Comprimento das dobras Progecircnie natildeo Suplementada Progecircnie natildeo Suplementada

Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 0943 105plusmn010 196plusmn041 1443plusmn097 3247plusmn198 1093 098plusmn028 137plusmn021 1394plusmn225 3066plusmn240 1243 077plusmn004 178plusmn029 1503plusmn060 3042plusmn109 1393 080plusmn015 170plusmn043 1449plusmn068 3112plusmn187 1543 096plusmn018 232plusmn037 1464plusmn149 3222plusmn195 CV() 4398 4708 563 915 Regressatildeo ns ns ns ns Progecircnie Suplementada Progecircnie Suplementada 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 1300 076plusmn010 168plusmn035 1936plusmn206 3535plusmn191 1450 049plusmn015 216plusmn041 1865plusmn022 4027plusmn1244 1600 072plusmn024 189plusmn022 2035plusmn064 3331plusmn036 1750 053plusmn005 192plusmn036 2195plusmn139 4487plusmn1540 1900 053plusmn012 213plusmn025 1905plusmn128 2562plusmn111 CV() 5807 4141 473 5359 Regressatildeo ns ns ns ns

Assim a progecircnie que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg natildeo

apresentou produccedilatildeo de linfoacutecitos B aumentada nem a aacuterea de desenvolvimento e

diferenciaccedilatildeo dos linfoacutecitos B prejudicada ou melhorada pela Arg (Pgt005)

Na Tabela 9 estatildeo agraves meacutedias obtidas da resposta imune celular da progecircnie com

dieta suplementada medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) para estiacutemulo de

proliferaccedilatildeo celular Dentro desse contexto observou-se que 12 horas apoacutes a injeccedilatildeo de

PHA foi possiacutevel verificar efeito quadraacutetico com aumento (Plt005) na resposta celular

das aves alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg em que a maior

resposta foi obtida com 1574 de Arg dig (Figura 1)

Segundo Corrier amp DeLoach (1990) a aplicaccedilatildeo desse teste permite a raacutepida

avaliaccedilatildeo da competecircncia imunoloacutegica celular Os basoacutefilos ceacutelulas comumente

associadas a esses processos apresentam heparina e proteases na composiccedilatildeo de seus

gracircnulos agindo intensamente nos processos de hipersensibilidade Aleacutem disso

produzem citocinas cuja participaccedilatildeo estaacute ligada aos processos inflamatoacuterios (Abbas et

al 2007)

106

Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Arginina 3 horas 6 horas 12 horas 24 horas

1300 1010plusmn0062 0793plusmn0041 0549plusmn0097 0506plusmn0036 1450 0853plusmn0077 0639plusmn0065 0631plusmn0051 0450plusmn0133 1600 0918plusmn0053 0738plusmn0040 0702plusmn0052 0543plusmn0065 1750 0797plusmn0074 0783plusmn0058 0597plusmn0061 0552plusmn0066 1900 0933plusmn0044 0777plusmn0038 0499plusmn0059 0453plusmn0062 CV 1715 1630 2724 3875 Regresatildeo ns ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- 093 -----

ns = Natildeo significativo 1 Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2 R2 = 093

Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Quando se avaliou a atividade fagociacutetica dos macroacutefagos da progecircnie

suplementada e natildeo suplementada verificou-se que os niacuteveis crescentes de Arg na dieta

natildeo afetaram (Pgt005) essa funccedilatildeo (Tabela 10) Os macroacutefagos satildeo ceacutelulas do sistema

mononuclear fagocitaacuterio (McCorkle 1998) integrantes da imunidade inata das aves

importantes tambeacutem para a imunidade adaptativa (Abbas et al 2008) atuando nos

processos de defesa do organismo destruindo agentes estranhos e tambeacutem secretando

citocinas que atuam no processo inflamatoacuterio As principais funccedilotildees executadas por essa

ceacutelula satildeo a fagocitose destruiccedilatildeo de bacteacuterias (Qureshi et al 1986) secreccedilatildeo de

prostaglandinas e citocinas e apresentaccedilatildeo de antiacutegeno para desenvolvimento da

resposta imune celular (Abbas et al 2008)

Segundo Johaniam (2009) satildeo identificadas duas vias de accedilatildeo

imunomodulatoacuteria da Arg in vivo A primeira ocorre atraveacutes da accedilatildeo da arginase que

converte a Arg em ureia e ornitina Neste processo ocorre a produccedilatildeo de poliaminas

pela accedilatildeo da ornitina decarboxilase Esta rota da siacutentese de poliaminas pode ser o

Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2R2 = 093

1574

107

caminho pelo qual a Arg aumenta a mitogecircnese dos linfoacutecitos (Klein amp Morris 1978)

A segunda via ocorre pela siacutentese de NO a partir da a partir da Arg pela accedilatildeo do oacutexido

niacutetrico sintetase resultando na formaccedilatildeo de oacutexido niacutetrico e citrulina Essa rota eacute

essencial para atividade citotoacutexica dos macroacutefagos

Tabela 10 ndash Meacutedias e erros padrotildees da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Macroacutefagos com eritroacutecitosmacroacutefagos contados Arginina Progecircnie Suplementada

1300 1570plusmn529 1450 2030plusmn480 1600 1650plusmn359 1750 2150plusmn500 1900 1830plusmn250 CV 545 Regresatildeo ns ns = Natildeo significativo

Quando avaliados os tiacutetulos de anticorpos da progecircnie verificou-se que a

alimentaccedilatildeo das matrizes com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg natildeo influenciou

os tiacutetulos de anticorpos (Pgt005) da progecircnie natildeo suplementada (Tabela 11) Para as

aves suplementadas verifica-se um efeito linear decrescente (Plt005) aos sete dias de

idade e efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade em que o niacutevel de 1674 de

Arg dig proporcionou o maior tiacutetulo de anticorpos (Tabela 12)

Os resultados observados na progecircnie suplementada mostraram-se compatiacuteveis

com as respostas das aves a campo nas quais inicialmente satildeo observados maiores

tiacutetulos de anticorpos decorrentes da imunidade materna seguido de uma queda que nas

condiccedilotildees experimentais eacute resultado da neutralizaccedilatildeo desses anticorpos pelos antiacutegenos

vacinais e por fim uma nova elevaccedilatildeo dos tiacutetulos

Este resultado concorda com o observado por outros autores Tayade et al

(2006) demonstraram que a resposta vacinal contra o viacuterus da doenccedila de Gumboro de

frangos suplementados com 2 de Arg foi 20 mais eficiente que a resposta induzida

apenas pela vacina A elevada resposta humoral e a proteccedilatildeo observada no grupo de

aves vacinado e com dieta suplementada com Arg segundo estes autores pode ser

atribuiacuteda ao nuacutemero de funccedilotildees imunorregulatoacuterias da Arg sobre o sistema

imunoloacutegico A Arg eacute necessaacuteria para a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas B e tambeacutem estaacute

envolvida na liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da bolsa ou da medula oacutessea (De Jonge et al

108

2002) Ainda segundo Abdukalykova e Ruiz-Feria (2006) niacuteveis adicionais de Arg

podem acelerar a produccedilatildeo de anticorpos em frangos de corte

29

295

3

305

31

315

32

325

33

335

34

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s(7

dia

s)

0

05

1

15

2

25

3

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s (2

8 di

as)

Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

1674

109

Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Niacuteveis de Arginina na dieta materna ()

Idade 0943 1093 1243 1393 1543 CV() Regressatildeo R2

07 dias 317plusmn099 323plusmn011 301plusmn008 324plusmn007 316plusmn015 831 ns -----

14 dias 262plusmn009 257plusmn003 242plusmn011 262plusmn011 257plusmn003 792 ns -----

21 dias 232plusmn010 247plusmn005 211plusmn010 228plusmn011 241plusmn007 941 ns -----

28 dias 241plusmn028 186plusmn014 248plusmn022 231plusmn019 214plusmn024 2378 ns -----

35 dias 275plusmn017 284plusmn015 271plusmn013 286plusmn020 291plusmn011 1361 ns -----

Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades

Niacuteveis de Arginina ()

Idade 1300 1450 1600 1750 1900 CV() Regressatildeo R2

07 dias 331plusmn012 336plusmn010 301plusmn012 329plusmn009 299plusmn009 798 Linear1 012

14 dias 226plusmn008 218plusmn019 219plusmn023 207plusmn014 245plusmn009 1715 ns -----

21 dias 232plusmn007 239plusmn006 236plusmn006 246plusmn012 240plusmn009 829 ns -----

Niacuteveis de Arginina ()

1150 1300 1450 1600 1750 CV() Regressatildeo R2

28 dias 171plusmn035 279plusmn009 298plusmn006 278plusmn019 240plusmn012 1961 Quadraacutetica2 026

35 dias 268plusmn023 299plusmn012 296plusmn018 280plusmn023 313plusmn011 1535 ns -----

110

Conclusatildeo

As dietas suplementadas com Arg mostraram-se necessaacuterias para o oacutetimo

desempenho do sistema imune celular e humoral da progecircnie natildeo bastando somente agrave

suplementaccedilatildeo das matrizes de corte

Referecircncias

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aves e suiacutenos ndash Composiccedilatildeo de alimentos e exigecircncias nutricionais Viccedilosa UFV Departamento de Zootecnia186p2005

vi

Suelen Rodrigo Luis Daniel Ana Carolina Ana Flaacutevia Leandro Rafael Fernando

Karla Alexandra Mariana Celma Andressa Faacutebio

Agraves minhas eternas irmatildes Jovanir Inecircs Muller Fernandes e Maacutercia Izumi Sakamoto pela

amizade companheirismo pela forccedila em todos os momentos de alegria e em que estive

em dificuldades minha eterna gratidatildeo por tudo que vocecircs fizeram por mim

A minha irmatildezinha Sussu e seu ldquomaridatildeordquo Mauriacutecio pelo apoio e amizade pelo

companheirismo e auxiacutelio nos momentos em que precisei muito obrigada por tudo

As mais novas amigas e companheiras Cinthia e Cris muito obrigada pela amizade

incondicional que vocecircs me dedicaram durante esse tempo que apesar de natildeo ter sido tatildeo

longo valeu por uma eternidade muito obrigada por tudo

A minha irmatilde Sara que durante a minha gravidez foi meu braccedilo direito na conduccedilatildeo deste

trabalho auxiliando e principalmente me levantando nos momentos de dificuldade

obrigada por vocecirc fazer parte da minha vida

Ao Waldir Pereira da Silva Junior meu profundo agradecimento pelo companheirismo

incentivo amizade por estar ao meu lado e compreender meus momentos de ausecircncia

pelo amor incondicional a mim dedicado meu eterno amor a vocecirc

A todos que direta ou indiretamente contribuiacuteram para esse trabalho meu muito obrigada

vii

BIOGRAFIA

LUCIANA MARIA GARCIA DE SOUZA DA SILVA filha de Vera Luacutecia

Aparecida Garcia de Souza e Joatildeo Gusman de Souza nasceu em Maringaacute Paranaacute no dia

18 de maio de 1981

Em marccedilo de 2005 conclui o curso de Zootecnia pela Universidade Estadual de

Maringaacute

Em marccedilo de 2005 iniciou no curso de Poacutes- graduaccedilatildeo em Zootecnia em niacutevel de

mestrado aacuterea de concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal na Universidade Estadual de Maringaacute e

no dia 3 de marccedilo de 2007 submeteu-se a banca para defesa de Dissertaccedilatildeo

Em marccedilo de 2007 iniciou no curso de Poacutes-graduaccedilatildeo em Zootecnia em niacutevel de

doutorado aacuterea de concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal na Universidade Estadual de Maringaacute

realizando estudos na aacuterea de nutriccedilatildeo de frangos de corte No dia 17 de novembro de

2010 submeteu-se a banca para defesa da Tese

viii

IacuteNDICE

Paacutegina

LISTA DE TABELAS ix LISTA DE FIGURAS xi I - INTRODUCcedilAtildeO 17 11 REVISAtildeO DA LITERATURA 19

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie 19 112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves 20 REFEREcircNCIAS 32

II - OBJETIVOS GERAIS 39 21 Objetivos Especiacuteficos 39

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo 40

Resumo 40 Introduccedilatildeo 42 Material e meacutetodos 43 Resultados e Discussatildeo 47 Conclusatildeo 52 Referecircncias 53

IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie 57

Resumo 57 Introduccedilatildeo 59 Material e Meacutetodos 60 Resultados e discussatildeo 67 Conclusatildeo 83 Referecircncias 83

V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie 89

Resumo 89 Introduccedilatildeo 91 Material e Meacutetodos 92 Resultados e Discussatildeo 101 Conclusatildeo 110 Referecircncias 110

VI - CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 113

ix

LISTA DE TABELAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental 45 Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 48 Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 50 Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico 51 Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 52

Capiacutetulo IV Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg48 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)50 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)51 Tabela 4 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg55 Tabela 5 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg56 Tabela 6 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg60 Tabela 7 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementadas provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg64 Tabela 8 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento da progecircnie suplementada com dietas suplementadas contendo niacuteveis de Arg64

x

Tabela 9 ndash Meacutedias de porcentagem de carcaccedila (CARC) porcentagem de peito (PEITO) porcentagem de coxa (COXA) porcentagem de asa (ASA) porcentagem de gordura abdominal (GORDURA) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg65 Tabela 10 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de arginina67 Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg69 Tabela 12 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade72

Capiacutetulo V Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das dietas experimentais das matrizes de frangos de corte no periacuteodo experimental83 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg85 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)86 Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (21-42 dias)86 Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de arginina89 Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg90 Tabela 7 ndash Meacutedias do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade91 Tabela 8 ndash Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg92 Tabela 10 ndash Meacutedias e erro padratildeo da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg94 Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades94

xi

LISTA DE FIGURAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel33 Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg34 Capiacutetulo IV Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 70 Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 71 Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 72 Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 72 Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 75 Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 77 Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 81 Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade 82 Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade 83

xii

Capiacutetulo IV Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 106 Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 108

RESUMO

Foram realizados trecircs experimentos com o objetivo de avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na nutriccedilatildeo de matrizes de corte e a modulaccedilatildeo da resposta imune e do desenvolvimento esqueleacutetico na progecircnie No primeiro experimento avaliou-se o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e qualidade de ovos Para tanto foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se um aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve uma queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arginina respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo O segundo experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo

xiv

suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos O terceiro experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos 7 dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavras-chave desempenho produtivo qualidade de ovos qualidade oacutessea sistema imune

ABSTRACT

Three experiments were conducted to evaluate the effect of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder nutrition and modulation of the immune systems and skeletal development in the progeny In the first experiment the effect of Arg supplementation on heavy breed henrsquos productive performance and egg quality was evaluated ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance In the second experiment the effects of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder hens diet on performance carcass yield and bone parameters was evaluated in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units The body weight gain feed intake and feed gain ratio was calculated to evaluate the performance The carcass yield was evaluated by the carcass percentage leg breast and wing yield and abdominal fat The bone quality was assessed by the analysis of the femur and tibia lengths diameters and Seedor index In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that

16

just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) In third experiment the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses was evaluated in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by the diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses According to the results it is possible to conclude that supplementation with Arg provided improvements in the eggs weight of broilers and evaluations in the progeny demonstrated that there is a need to supplement the diet with Arg in order to get the best performance index bone quality and humoral and cellular immunity

Key-words bone quality egg quality productive performance immune system

17

I - INTRODUCcedilAtildeO

Vaacuterios fatores afetam o desempenho de frangos de corte como a geneacutetica

nutriccedilatildeo sanidade manejo e ambiecircncia Entretanto fatores estabelecidos antes mesmo da

incubaccedilatildeo e da eclosatildeo como a idade das matrizes e o peso dos ovos satildeo preponderantes

para o desenvolvimento inicial das aves tendo consequecircncia em todo o crescimento

(Pedroso et al 2005)

As exigecircncias nutricionais de uma reprodutora leve ou pesada devem atender agraves

necessidades do embriatildeo em desenvolvimento fora do organismo materno (Campos

2003) O ovo eacute formado basicamente pela casca (10) clara (60) e gema (30) Desse

modo os niacuteveis nutricionais da matriz devem ser dirigidos para formaccedilatildeo desses

componentes porque estes satildeo responsaacuteveis pela nutriccedilatildeo do embriatildeo

O ovo tem aacutegua proteiacutena gordura e cinza na sua composiccedilatildeo quiacutemica A gema

apresenta papel importante no desenvolvimento do embriatildeo visto que este formaraacute o saco

vitelino apoacutes o quarto dia de vida O saco vitelino constitui a uacutenica fonte fornecedora de

energia para o desenvolvimento do embriatildeo Deste satildeo absorvidos todos os nutrientes pelo

embriatildeo como partiacuteculas lipoproteicas e proteicas Estas uacuteltimas podem ser absorvidas

intactas porque a produccedilatildeo de proteinases pelo embriatildeo aumenta de acordo com o seu

desenvolvimento Aleacutem disso parte da absorccedilatildeo de proteiacutenas ocorre na forma de

aminoaacutecidos (Campos 2003) O saco viteliacutenico tambeacutem eacute a uacutenica fonte de

18

imunoglobulinas produzidas pelo organismo materno capazes de manter certa imunidade

ao pintinho no periacuteodo inicial de sua vida

Os aminoaacutecidos presentes na gema podem ser suficientes durante o processo de

eclosatildeo apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

processo de crescimento (Ohta et al 2004)

Logo apoacutes a eclosatildeo a maior parte da demanda de energia e de proteiacutena das aves eacute

direcionada para o desenvolvimento do trato digestoacuterio principalmente intestinos (Fisher

da Silva 2001) Este crescimento preferencial ocorre tanto na presenccedila quanto na ausecircncia

do alimento (Laurentiz et al 2001) Quando estes nutrientes natildeo satildeo fornecidos pela

raccedilatildeo os neonatos utilizam o saco vitelino como suplemento energeacutetico e como fonte

proteica para o crescimento intestinal Entretanto segundo Dibner et al (1998) 20 da

proteiacutena residual do saco vitelino satildeo representadas pelas imunoglobulinas maternais e

que a gordura bruta residual eacute constituiacuteda basicamente de trigliceacuterides fosfoliacutepides e

colesterol

Assim a nutriccedilatildeo das matrizes de corte pode enriquecer a gema e produzir pintos

de alta qualidade Entretanto com o passar dos anos natildeo houve muita diferenccedila nos niacuteveis

nutricionais propostos para nutriccedilatildeo das matrizes de corte o que ocorre principalmente em

razatildeo das grandes diferenccedilas existentes entre as linhagens comerciais existentes Segundo

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) para matrizes pesadas existe uma pausa nas pesquisas orientadas

para a determinaccedilatildeo das exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos essenciais

Dentre os aminoaacutecidos utilizados na formulaccedilatildeo de raccedilotildees principalmente as

voltadas para o conceito de proteiacutena ideal a arginina (Arg) pode exercer efeitos positivos

pois este aleacutem de ser constituintes de proteiacutenas ainda estaacute envolvido na siacutentese de creatina

e de poliaminas de prolina como substrato para a siacutentese de colaacutegeno e do oacutexido niacutetrico

(NO) e na secreccedilatildeo do hormocircnio de crescimento (GH) e dos fatores de crescimento

19

semelhantes agrave insulina (IGF) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave (Harvey et

al 2001)

Como as aves natildeo apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem

exclusivamente da Arg sinteacutetica principalmente no periacuteodo inicial de produccedilatildeo (Allen amp

Baker 1972) Aleacutem disso em dietas agrave base de milho e de farelo de soja a Arg eacute

considerada o quinto aminoaacutecido limitante para frangos de corte apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Vaacuterios autores tecircm proposto que a nutriccedilatildeo das matrizes afeta o desempenho dos

pintos (Uni amp Ferket 2004) Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem

nos primeiros dias de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com

funccedilatildeo imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade

materna e na resposta imune dos pintos

11 REVISAtildeO DA LITERATURA

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie

O sistema imune das aves eacute complexo e compreende uma seacuterie de funccedilotildees

celulares e fatores soluacuteveis que trabalham juntos para produzir uma resposta imune

protetora Os oacutergatildeos linfoides primaacuterios das aves satildeo a bolsa cloacal e o timo Os oacutergatildeos

como medula oacutessea baccedilo glacircndula Harderiana placas de Payer e tonsilas cecais satildeo

considerados oacutergatildeos linfoides secundaacuterios

Com base nesses componentes as aves podem apresentar respostas a vaacuterios

antiacutegenos divididas em dois tipos a imunidade passiva e a ativa A imunidade passiva eacute

transferida para a progecircnie pelas reprodutoras via saco viteliacutenico Atraveacutes da imunidade

passiva eacute possiacutevel desenvolver a resposta imune especiacutefica sem que haja um envolvimento

do organismo pela transferecircncia de ceacutelulas ou de anticorpos de outro indiviacuteduo jaacute

20

imunizado A imunidade ativa por sua vez eacute decorrente da exposiccedilatildeo das aves a um

antiacutegeno estranho que pode ser de origem vacinal ou um agente patoacutegeno

Nas aves a imunidade passiva eacute passada da matriz ateacute o pintinho pelo do ovo no

processo de produccedilatildeo de ovo imunoglobulinas (Ig) Y presentes no sangue das matrizes

chega ateacute o oviduto e se deposita na gema do ovo enquanto durante a secreccedilatildeo do

albuacutemen que ocorre na porccedilatildeo magnum do oviduto secreta tambeacutem IgA e IgM Eacute essa

imunidade enviada pela matildee que protege esses pintos nos primeiros dias de vida contra

vaacuterios agentes que estatildeo presentes no campo (Santin 2009) Haacute relaccedilatildeo direta entre os

tiacutetulos de seacutericos de Ig da matildee e a quantidade repassada ao ovo Assim eacute de extrema

importacircncia que o pintinho absorva adequadamente e rapidamente essa gema para que ele

tenha acesso a estas Ig (Santin 2009) Maiorka (2002) demonstrou que jejum de aacutegua e de

alimento por 12 horas apoacutes a eclosatildeo diminui a absorccedilatildeo da gema e afetam o

desenvolvimento da mucosa intestinal de frangos de corte Vargas et al (2009) mostraram

que os tiacutetulos seacutericos de anticorpos contra a vacina de doenccedila de Newcastle (NDV) foram

mais baixos em pintos submetidos a 12 horas de jejum poacutes eclosatildeo quando comparados

agravequeles que consumiram aacutegua e alimento logo apoacutes a eclosatildeo De fato o atraso no

consumo de alimento dos animais pode diminuir a absorccedilatildeo da gema e consequentemente

a passagem da imunidade passiva da matildee para o pintinho Dibner et al(1998) sugerem que

quando o pintinho natildeo recebe rapidamente aacutegua e alimento apoacutes a eclosatildeo acaba utilizando

as Ig e os fosfolipiacutedios da gema como alimento diminuindo assim sua funccedilatildeo na proteccedilatildeo

animal

112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves

A Arg eacute um aminoaacutecido essencial em aves principalmente na fase inicial Isso

ocorre porque as aves diferentemente dos mamiacuteferos natildeo possuem o ciclo da ureia

funcional necessitando da fonte exoacutegena de suplementaccedilatildeo Evoy et al (1998) em seu

21

trabalho relataram o papel da Arg como essencial na estimulaccedilatildeo do sistema imune do

hospedeiro

As vias metaboacutelicas que envolvem a Arg satildeo complexas e demonstradas

resumidamente a seguir

Adaptado de Duff amp Daly (2002)

Juntamente com a complexidade dessas vias soma-se a variada localizaccedilatildeo das

enzimas envolvidas no meio intracelular como nos tecidos Com exceccedilatildeo dos enteroacutecitos

22

em receacutem-nascidos nenhum outro tipo de ceacutelula conteacutem todas as enzimas necessaacuterias para

a siacutentese de Arg (Wu amp Morris 1998)

A Arg eacute ativamente absorvida pelo intestino pelo sistema de transporte soacutedio-

dependente A alta atividade da arginase no enteroacutecito converte cerca de 40 da dieta de

Arg em citrulina a qual eacute liberada na circulaccedilatildeo (Castillo et al 1993) Quando a Arg cai

na corrente sanguiacutenea cerca de 15 eacute eliminada pelo fiacutegado e o restante entra na

circulaccedilatildeo sistecircmica (OrsquoSullivan et al 1998) A Arginina eacute sintetizada a partir da

citrulina principalmente nos rins e eacute entatildeo liberada na circulaccedilatildeo para ser utilizada pelos

demais tecidos

O oacutexido niacutetrico (NO) constitui uma das menores e mais simples moleacuteculas

biossintetizadas (Morris et al 1994) O NO eacute um radical livre gasoso inorgacircnico e

identificado como mensageiro molecular extremamente laacutebil (meia vida bioloacutegica em

torno de segundos) O NO media vaacuterios fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente

do endoteacutelio citotoxicidade mediada por macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria Eacute produzido pelas ceacutelulas endoteliais neurocircnios macroacutefagos e

tecidos entre eles a hipoacutefise que age paracrinamente exercendo efeitos intra e

extracelulares em vaacuterios sistemas fisioloacutegicos (Kutchai 1998)

Palmer et al (1988) demonstraram que a L-Arg eacute o precursor fisioloacutegico do NO

nas ceacutelulas endoteliais Com base nesta informaccedilatildeo vaacuterios grupos de investigadores

suspeitaram que o NO fosse o provaacutevel precursor da siacutentese de NO3- e NO2

- pelos

macroacutefagos Subsequentemente esta hipoacutetese foi comprovada e ficou demonstrado que o

NO eacute o principal mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a

mais importante moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al 1988 e Marletta

et al 1988 citados por Dusse et al 2003)

23

Este composto eacute produzido a partir da oxidaccedilatildeo da L-arginina pela accedilatildeo da enzima

oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) uma enzima Ca++-calmodulina-dependente Por este

mecanismo eacute gerado citrulina como produto final (Kiechele amp Malinski 1993)

O surgimento do NO como agente da sinalizaccedilatildeo celular eacute uma importante

descoberta da fisiologia humana e animal nos uacuteltimos anos O NO participa de vaacuterios

fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente do endoteacutelio citotoxicidade mediada por

macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O NO eacute o principal

mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a mais importante

moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al1988 e Marletta et al 1988 citados

por Dusse et al 2003)

Existem trecircs formas de NOS sendo a NOS induzida (iNOS) e duas NOS

constitutivas (cNOS) O NO eacute sintetizado pela ativaccedilatildeo da cNOS basal (em ceacutelulas

endoteliais vasculares e neurocircnios) segundos a minutos apoacutes o aumento na concentraccedilatildeo

de caacutelcio em resposta agrave ativaccedilatildeo de receptores da superfiacutecie celular e mecanismos de

transduccedilatildeo de sinal (Adams 1996)

Ao contraacuterio a iNOS natildeo depende de caacutelcio para ativaccedilatildeo mas a siacutentese de

mRNA da iNOS eacute necessaacuteria para sua atividade A NOS induzida natildeo eacute detectaacutevel em

condiccedilotildees basais As LPS ou endotoxinas bacterianas junto com citocinas como TNFα

IL-1β ou IF-γ induzem a siacutentese de iNOS de duas a quatro horas apoacutes a exposiccedilatildeo ao

agente A iNOS requer siacutentese proteica para sua expressatildeo e sua atividade persiste por

mais de 24 horas e sintetiza NO em concentraccedilotildees nanomolares 1000 vezes maior que

cNOS (Davies et al 1995)

A expressatildeo da iNOS eacute o resultado da resposta inflamatoacuteria localizada ou difusa

resultante da infecccedilatildeo ou dano tecidual Segundo Salvemini et al (1996) o NO eacute potente

vasodilatador e seu envolvimento na resposta inflamatoacuteria pode ter relaccedilatildeo com sua

24

habilidade em aumentar a permeabilidade vascular e o edema atraveacutes de mudanccedilas no

fluxo sanguiacuteneo local e do aumento na produccedilatildeo de prostaglandinas proinflamatoacuterias

A expressatildeo de iNOS em endotoxemia eacute citoprotetoacuteria inibindo microtrombose

pela prevenccedilatildeo de adesatildeo plaquetaacuteria e danos mediados por radicais Por outro lado a

citotoxidade do NO resulta da sua accedilatildeo direta ou da sua reaccedilatildeo com outros compostos

liberados durante o processo inflamatoacuterio A base bioquiacutemica para a accedilatildeo direta do NO

consiste na sua reaccedilatildeo com metais (especialmente o ferro) presentes nas enzimas do seu

alvo (Moncada 1991 James 1995) Desta forma satildeo inativadas enzimas cruciais para o

ciclo de Krebs para a cadeia de transporte de eleacutetrons para a siacutentese de DNA e para o

mecanismo de proliferaccedilatildeo celular Em processos infecciosos ceacutelulas ativadas como

macroacutefagos neutroacutefilos e ceacutelulas endoteliais secretam simultaneamente NO e

intermediaacuterios reativos do oxigecircnio a accedilatildeo citotoacutexica indireta do NO consiste

principalmente na sua reaccedilatildeo com esses intermediaacuterios do oxigecircnio

Durante a resposta imune mediada por ceacutelulas a maioria das ceacutelulas adquire a

capacidade de expressar a forma de NO induzida (Nathan amp Xie 1994) A accedilatildeo do NO

depende da ceacutelula T reconhecer um antiacutegeno especiacutefico embora sua accedilatildeo na resposta

imune mediada por ceacutelulas natildeo seja especiacutefica (Schmidt amp Walter 2004)

Costa et al (2003) corroboram com o fato de que a fagocitose por si soacute natildeo induz a

siacutentese de NO A fagocitose de partiacuteculas inertes por macroacutefagos peritoniais em cultura

ou por macroacutefagos murinos estimulados por citocinas natildeo satildeo estiacutemulos suficientes para

a induccedilatildeo expressiva de iONS No entanto a fagocitose de agentes bioloacutegicos nas

mesmas condiccedilotildees induz altos niacuteveis de NO sugerindo que a produccedilatildeo de NO seja

dependente de estiacutemulo imunoloacutegico e que faccedila parte dos mecanismos de defesa do

organismo

25

Todas estas investigaccedilotildees estabeleceram de forma definitiva uma associaccedilatildeo entre

arginina oacutexido niacutetrico e resposta imune Por isso nas uacuteltimas duas deacutecadas a arginina tem

sido o foco de estudos como regulador de muitos processos imunoloacutegicos e fisioloacutegicos

(Tayade et al 2006)

Trabalhos desenvolvidos com mamiacuteferos demonstraram que as respostas imunes

podem ser influenciadas pela arginina dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al

1998 Lewis amp Langkamp-Henken 2000) Em experimentos desenvolvidos com animais

jovens os efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina foram demonstrados

como o aumento do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos

tiacutemicos Os efeitos imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais

estressados ou imunossupremidos

Os efeitos beneacuteficos da arginina natildeo se limitam agrave imunidade celular Segundo

LeBien (2002) em mamiacuteferos geneticamente modificados a arginina eacute utilizada para

diferenciaccedilatildeo de proacute-linfoacutecitos B para preacute-linfoacutecitos B na medula oacutessea e estaacute envolvida na

liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da medula

Por outro lado Deng et al (2005) relatam que relevantes pesquisas em espeacutecies

aviaacuterias satildeo esparsas Estas pesquisas apontaram o aumento da produccedilatildeo de oacutexido niacutetrico

por macroacutefagos de aves suplementadas com arginina (Sung et al 1991) aumento do peso

dos oacutergatildeos linfoides (Kwak et al 1999) melhora da relaccedilatildeo heteroacutefilolinfoacutecito em pintos

suplementados e desafiados com o agente viral da bronquite infecciosa e maior percentual

de ceacutelulas CD8+ (Lee et al 2002)

Entretanto para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de arginina

foram observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

estabelecidos Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de arginina

plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular

26

Outros autores obtiveram respostas positivas com a suplementaccedilatildeo de arginina na

reduccedilatildeo na mortalidade de frangos desafiados com Eimeria acervulina Eimeria tenella e

Eimeria maacutexima alterando a relaccedilatildeo argininalisina de 09 para 13 (Kidd et al 2002) e na

siacutendrome da hipertensatildeo pulmonar (Wideman et al 1995) Tambeacutem Corzo et al (2003)

observaram reduccedilatildeo linear de arranhotildees infectados em carcaccedilas de frangos alimentados

com niacuteveis crescentes de arginina (08 a 125 da dieta) Embora esses paracircmetros sejam

indicativos indiretos da imunidade mas apontam a importacircncia da arginina na melhora da

imunidade e no restabelecimento do status sanitaacuterio dos planteacuteis aviacutecolas

Tayade et al (2006) demonstraram recentemente que frangos vacinados com uma

vacina intermediaacuteria atenuada contra a doenccedila de Gumboro e suplementados com 2 de

arginina mostraram 100 de proteccedilatildeo apoacutes desafio com o viacuterus da doenccedila de Gumboro

comparado com 80 de proteccedilatildeo induzido apenas pela vacina sem adiccedilatildeo de arginina

suplementar na dieta

Aleacutem disso Deng et al (2005) verificaram aumento no niacutevel de anticorpos contra

eritroacutecitos de carneiro em frangas de postura somente na oitova semana de idade quando

estas aves foram suplementadas com niacuteveis de arginina em 150 acima do recomendado

pelo NRC do primeiro dia ateacute a quarta semana de vida Os autores concluiacuteram que a

suplementaccedilatildeo com arginina por um periacuteodo curto de tempo tem pouco efeito sobre a

imunidade e que a imunocompetecircncia pode ser permanentemente moldada pelo status

nutricional nos estaacutegios mais precoces do desenvolvimento

Para a melhora da resposta imune deve-se garantir que as matrizes desenvolvam

tiacutetulos elevados de anticorpos e assim buscar atingir o controle contra surtos de doenccedilas

via imunidade materna como meio de prevenccedilatildeo na progecircnie Kidd et al (1993)

observaram que a diferenccedila no niacutevel de anticorpos contra eritroacutecitos de carneiro em

27

matrizes pesadas recebendo dietas compostas por gratildeos de vaacuterias origens foi detectada na

progecircnie recebendo a mesma dieta

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo dos

niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes Segundo Kidd (2004) trabalhos desenvolvidos a

cerca das exigecircncias nutricionais das matrizes estatildeo focados apenas na questatildeo produtiva

Brake (1997) mostrou que a suplementaccedilatildeo de dietas para matrizes com vitaminas E e C

promoveu melhoria na transferecircncia de imunidade materna e na resposta imune dos pintos

pela proteccedilatildeo aos anticorpos no ovo durante a incubaccedilatildeo

Segundo Gore amp Qureshi (1997) um dos mecanismos pelo qual a vitamina E atua

nesta fase de crescimento embrionaacuterio pode estar relacionado a uma maior produccedilatildeo de

oacutexido niacutetrico nitritos e nitratos pelo fato de que a Vitamina E pode aumentar a afinidade

dos receptores de membrana dos macroacutefagos para a ativaccedilatildeo dos estiacutemulos tais como os

lipopolissacariacutedeos o que resulta em maior atividade da oacutexido niacutetrico sintetase

Na literatura consultada natildeo existem relatos da suplementaccedilatildeo das dietas das

matrizes com arginina e o efeito na resposta imune da progecircnie

A produccedilatildeo de NO pelos macroacutefagos das aves eacute arginina dependente de forma

similar aos macroacutefagos de mamiacuteferos (Dietert amp Golemboski 1998) Entretanto ao

contraacuterio dos mamiacuteferos as aves natildeo podem sintetizar arginina As aves por natildeo

apresentarem o ciclo da ureia funcional dependem exclusivamente da arginina dieteacutetica

(Allen amp Baker 1972) O quadro eacute ainda mais grave nas aves uma vez que dependem de

arginina suplementar tambeacutem para a para a formaccedilatildeo de ornitina que em mamiacuteferos eacute

obtida atraveacutes do aacutecido glutacircmico A siacutentese de ornitina eacute fundamental pois estaacute envolvida

na obtenccedilatildeo de prolina e eacute utilizada tambeacutem na formaccedilatildeo de poliaminas (espermidina

espermina e putrescina) que satildeo moleacuteculas associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

28

Desta forma a arginina eacute um aminoaacutecido essencial para as aves na fase inicial A

dieta eacute um fator particularmente sensiacutevel na disponibilidade de arginina e

consequentemente de NO considerando ainda que a arginina eacute um aminoaacutecido dos mais

limitantes em dietas agrave base milho e farelo de soja (Edmonds et al 1985)

A suplementaccedilatildeo adicional de Arg nas dietas de aves imunocomprometidas

poderia aumentar ainda mais a atividade da arginase e com isso menos Arg seria

disponiacutevel para a siacutentese de NO (Kepka-Lenhart et al 2000) Alternativamente Bansal et

al (2004) sugerem como estrateacutegia dieteacutetica para restaurar as concentraccedilotildees plasmaacuteticas

de Arg a suplementaccedilatildeo de citrulina principalmente em condiccedilotildees de imunodeficiecircncia

associadas com elevada atividade plasmaacutetica da arginase Nas espeacutecies uricoteacutelicas o ciclo

Arg-citrulina eacute funcional A citrulina eacute um aminoaacutecido que natildeo eacute encontrado em nenhuma

proteiacutena corporal aleacutem da inabilidade das aves na siacutentese endoacutegena de citrulina a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica se constitui na uacutenica fonte de Arg para os macroacutefagos via ciclo

NO-citrulina (Wiesinger 2001)

A suplementaccedilatildeo de aminoaacutecidos sinteacuteticos tem propiciado facilidades no ajuste

das foacutermulas de raccedilatildeo possibilitando a obtenccedilatildeo dos niacuteveis exigidos de aminoaacutecidos

essenciais A utilizaccedilatildeo de niacuteveis elevados de lisina proporciona um maior crescimento

muscular principalmente o incremento no rendimento de peito e coxas dos frangos de

corte Entretanto esse aumento da taxa de crescimento pode alterar o equiliacutebrio

metaboacutelico ideal entre os aminoaacutecidos especialmente a relaccedilatildeo argininalisina

O antagonismo entre arginina e lisina envolve a diminuiccedilatildeo da siacutentese de

creatinina compromete a siacutentese de prolina ornitina promove o aumento da atividade da

arginase renal e da excreccedilatildeo de ureia aleacutem de que quando os niacuteveis de lisina satildeo

excessivamente altos tambeacutem ocorre a excreccedilatildeo renal de arginina (Austic amp Scott 1975)

29

Os sinais claacutessicos da deficiecircncia de Arg satildeo fraqueza e paralisia das pernas penas

deformadas e ericcediladas sobre o dorso e asa das aves reduccedilatildeo do ganho de peso lesotildees

histoloacutegicas na medula oacutessea e desenvolvimento oacutesseo afetado (Jungherr et al 1958

Newbern et al 1960) A arginina aleacutem de servir como substrato para a siacutentese de NO

estaacute envolvida na secreccedilatildeo do GH

Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram um aumento na

concentraccedilatildeo plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez

secretado pela hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio

receptor e indiretamente via IGF-I e II (insulin-like growth factor ou somatomedina C)

sobre os tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos do GH ocorre em niacutevel do

disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no

crescimento dos ossos longos (Isaksson et al 1987)

Os efeitos dos aminoaacutecidos essenciais no tecido oacutesseo em crescimento satildeo

provavelmente mediados pelo IGF-I (Baylink et al1993) De fato Chevalley et al (1998)

demonstraram que arginina e lisina aumentaram a produccedilatildeo in vitro de IGF-I por

osteoblastos mantidos em cultura Aleacutem disso Conconi et al (2001) trabalhando com

cultura de osteoblastos enriquecida com soluccedilatildeo de aminoaacutecidos essenciais (Arg Lis Met

Thr e Trp) encontraram niacuteveis significativamente aumentados de fosfatase alcalina e

siacutentese de colaacutegeno Estes resultados segundo os autores sugerem que os aminoaacutecidos

podem atuar diretamente na formaccedilatildeo da matriz oacutessea e podem tambeacutem modular o

crescimento e a diferenciaccedilatildeo de osteoblastos

Por outro lado eacute conhecido que a arginina eacute precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo

pelo qual ela poderia exercer os seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo O NO pode

participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento (Hukkanem et

30

al 1999) Estes autores demonstraram a expressatildeo do mRNA da cNOS basal (oacutexido

niacutetrico sintetase endotelial) em condroacutecitos hipertroacuteficos de placas de crescimento de ratos

neonatos

Na placa de crescimento o NO poderia facilitar a vascularizaccedilatildeo e a formaccedilatildeo

oacutessea (Rath et al 2000) a exemplo de sua accedilatildeo na cartilagem articular em que induz

respostas bioloacutegicas que levam a degradaccedilatildeo irreversiacutevel (Pelletier et al1998) Segundo

Amin amp Abramson (1998) nas osteoartrites o NO induz a apoptose dos condroacutecitos

Teixeira et al (2005) comprovaram que o NO tem duas funccedilotildees distintas nos

condroacutecitos da placa de crescimento Uma vez iniciado o processo de maturaccedilatildeo o NO

estimula a hipertrofia por meio do aumento da expressatildeo da fosfatase alcalina e colaacutegeno

tipo X sendo conhecido que a expressatildeo de ambas proteiacutenas eacute um requerimento para a

completa hipertrofia dos condroacutecitos Aleacutem disso o NO estaacute associado ao estaacutegio mais

tardio do processo de maturaccedilatildeo Condroacutecitos totalmente diferenciados tratados com

ativadores da apoptose sofrem morte celular a inibiccedilatildeo da siacutentese de NO bloqueia a

apoptose enquanto a exposiccedilatildeo aos doadores de NO estimula a apoptose Estes autores

concluiacuteram que os sistemas NOS ndash NO atuam como promotores da maturaccedilatildeo dos

condroacutecitos

Por outro lado Vanacutet amp Ralston (2001) advertem que o efeito do NO na atividade

dos osteoblastos pode ser bifaacutesico Estudos in vitro tecircm indicado que pequenas

quantidades de NO que satildeo produzidas constitutivamente pelos osteoblastos podem agir

como um estimulador autoacutecrino do crescimento oacutesseo Entretanto altas concentraccedilotildees de

NO tais como aquelas observadas apoacutes estimulaccedilatildeo das citocinas inflamatoacuterias em que a

iNOS eacute a isoforma envolvida tecircm efeito inibitoacuterio no crescimento e diferenciaccedilatildeo

osteoblaacutestica

31

O crescimento e a remodelaccedilatildeo dos tecidos satildeo regulados por complexas interaccedilotildees

entre potencial geneacutetico fatores de crescimento influecircncias ambientais e nutriccedilatildeo

(Gonzales amp Sartori 2002) A resposta imune e a inflamaccedilatildeo podem modificar as

necessidades de alguns nutrientes

As alteraccedilotildees metaboacutelicas decorrentes podem interromper os eventos envolvidos

no processo de condrogecircnese e osteogecircnese e desencadear o processo de formaccedilatildeo das

lesotildees no tecido oacutesseo que levam a dificuldade locomotora deformaccedilatildeo oacutessea predispotildeem

agraves infecccedilotildees e agraves desordens esqueleacuteticas tais como a discondroplasia tibial (Thorp 1994)

Aleacutem das perdas econocircmicas eacute clara a percepccedilatildeo que as disfunccedilotildees do aparelho locomotor

comprometem o bem-estar das aves

Aleacutem de interagirem com o sistema imune os processos que modulam o

crescimento oacutesseo satildeo complexos e muacuteltiplos e mais estudos satildeo necessaacuterios para elucidar

estes mecanismos

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39

II - OBJETIVOS GERAIS

Essa pesquisa foi desenvolvida com a finalidade de estudar o efeito da

suplementaccedilatildeo de Arg na dieta de fecircmeas reprodutoras de frangos de corte na qualidade

dos ovos e nas caracteriacutesticas produtivas na qualidade oacutessea no desenvolvimento dos

oacutergatildeos linfoide e do sistema imune da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo

niacuteveis crescentes de Arg

21 Objetivos Especiacuteficos Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis

crescentes de Arg no desempenho produtivo e na qualidade dos ovos

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg no desempenho no

rendimento de carcaccedila e na qualidade oacutessea da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas

contendo niacuteveis crescentes de Arg

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg nas respostas imune e

celular da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo

Resumo ndash Este estudo avaliou o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e reprodutivo e qualidade de ovos Foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e reprodutivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo

Palavras-chave embriodiagnoacutestico incubaccedilatildeo qualidade de ovos

III - Effect of arginine supplementation on productive performance and egg quality of broiler breeder hens

Abstract - This study investigated the effect of arginine (Arg) supplementation on broiler breeder productive performance and egg quality ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance Supplementation of broiler diets with increasing levels of Arg provided an increase in the egg production and eggs with higher weights in the levels of 1262 and 1543 respectively The increased levels of Arg did not influence the reproduction variables studied suggesting that it may be used without any harmful risk

Key words embryo diagnosis hatching egg quality

42

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo e alimentaccedilatildeo animal estatildeo direcionadas para garantir oacutetimo aporte de

nutrientes para os animais de acordo com sua finalidade comercial e fase fisioloacutegica

Na produccedilatildeo de frangos de corte a taxa de crescimento acelerada imposta pela seleccedilatildeo

geneacutetica os vaacuterios fatores estressantes (ambientais e de manejo) e de desafio

imunoloacutegico (vacinaccedilatildeo e infecccedilatildeo) nas condiccedilotildees de produccedilatildeo comercial fazem com

que as exigecircncias das matrizes de corte para alguns nutrientes sejam maiores para que a

progecircnie possa expressar seu potencial geneacutetico

O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo dependem completamente dos

nutrientes contidos no ovo e estes satildeo originados da dieta e do metabolismo das

matrizes O ovo eacute um sistema fechado assim todos os nutrientes necessaacuterios para o

desenvolvimento do embriatildeo devem ser fornecidos pela matriz quando o ovo eacute formado

(Oviedo-Roacutendon amp Murakami 1998)

Aleacutem disso existe correlaccedilatildeo positiva entre peso do ovo e peso do pinto ao

nascer e deste com o peso do frango ao abate (Lara et al 2005) De fato Whiting amp

Pesti (1984) verificaram que para cada grama a mais no peso do ovo correspondia a

107 e 60g adicionais para o peso final de machos e fecircmeas respectivamente

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas No ovo os aminoaacutecidos

presentes na gema satildeo suficientes durante o processo de eclosatildeo poreacutem apoacutes o

nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o processo de

crescimento (Otha et al 2004) Nos uacuteltimos anos o impacto da nutriccedilatildeo das matrizes

no estado nutricional e desempenho da progecircnie bem como a melhora do estado

imunoloacutegico tem recebido especial atenccedilatildeo (Pappas et al 2006)

43

A nutriccedilatildeo das matrizes com dietas com arginina seria uma alternativa para o

enriquecimento da gema dos ovos com esse aminoaacutecido A Arg eacute um aminoaacutecido

baacutesico que pode influenciar a reposta imune e a resistecircncia agraves doenccedilas A Arg ainda eacute

conhecida pela funccedilatildeo estimuladora sobre o processo de ovulaccedilatildeo atraveacutes do aumento

da liberaccedilatildeo de hormocircnio luteinizante (LH) (Basiouni et al 2006) e como parte do

hormocircnio arginina vasotocina envolvido com a contraccedilatildeo uterina e a oviposiccedilatildeo

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias

de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo

dos niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes De acordo com Kidd (2004) os trabalhos

desenvolvidos em relaccedilatildeo agraves exigecircncias nutricionais das matrizes para melhorar o

sistema imune da progecircnie satildeo poucos quando comparados a questatildeo produtiva das

aves

Com isso objetivou-se com o trabalho avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de

arginina sobre o desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte

Material e meacutetodos

O experimento foi conduzido no aviaacuterio experimental da Universidade Federal

do Paranaacute ndash Campus Palotina constituiacutedo de 32 boxes com dimensotildees de 25 x 15 m

com cama de maravalha (plusmn10 cm) sobre o piso Foram utilizados boxes telados e

providos de um bebedouro pendular e de dois comedouros um deles com grade de

restriccedilatildeo aos machos e outro instalado mais alto natildeo permitindo somente o acesso das

fecircmeas Em cada boxe experimental foram utilizados ninhos convencionais de um

andar com quatro bocas de madeira com dimensotildees de 030 m x 030 m x 030 m a

030 m acima do niacutevel do piso sendo uma boca para cada quatro fecircmeas

Foram utilizados 390 reprodutores de frangos de corte sendo 360 fecircmeas e 30

machos da linhagem Ross As aves foram selecionadas na 18ordf semana de idade a partir

de um plantel de reprodutores dentro da faixa de peso de 1850 a 1950 g para as

fecircmeas e de 2450 a 2550 g para os machos O delineamento experimental utilizado foi

o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 e

1543 de Arg digestiacutevel) seis repeticcedilotildees e 12 fecircmeas e um macho por unidade

44

experimental O acasalamento foi realizado na 18ordf semana de idade das aves na

proporccedilatildeo de um macho para cada 12 fecircmeas

O periacuteodo experimental iniciou na 25ordf semana quando o plantel alcanccedilou 5 de

produccedilatildeo e finalizou na 56ordf semana de idade das aves O programa de iluminaccedilatildeo

iniciou na 19ordf semana de idade com fornecimento inicial de 14 horas de luz diaacuteria e

aplicados aumentos semanais de 30 minutos de luz ateacute o fornecimento de 17 horas de

luz diaacuteria na 25ordf semana de idade das aves

O fornecimento de raccedilatildeo foi limitado e controlado diariamente enquanto o de

aacutegua foi ad libitum As exigecircncias nutricionais utilizadas para formulaccedilatildeo das dietas das

fecircmeas e dos machos foram baseadas nas recomendaccedilotildees contidas no manual da

linhagem

A partir da 23ordf semana de idade as fecircmeas passaram a receber as dietas

experimentais constituiacutedas da dieta basal suplementada com cinco niacuteveis de L ndash

Arginina variando de 0 a 600 mgkg na dieta basal em substituiccedilatildeo ao caulin que

corresponderam aos niacuteveis de 0943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg

digestiacutevel (Tabela 1) Os machos receberam uma uacutenica dieta durante todo o periacuteodo

experimental O periacuteodo experimental teve iniacutecio na 25ordf semana Para determinaccedilatildeo da

produccedilatildeo de ovos os mesmos foram coletados diariamente e a produccedilatildeo diaacuteria anotada

em planilhas por repeticcedilatildeo Semanalmente foi obtida a produccedilatildeo total de ovos e a

porcentagem de postura de cada unidade experimental Na 30ordf 34ordf e 38ordf semana de

idade foram coletados todos os ovos produzidos em um dia para avaliaccedilatildeo da qualidade

(peso meacutedio gravidade especiacutefica porcentagem de albuacutemen e gema porcentagem e

espessura da casca)

A quantidade de raccedilatildeo oferecida para as fecircmeas foi calculada de acordo com a

produccedilatildeo de ovos e do peso corporal Para os machos forneceu-se raccedilatildeo em funccedilatildeo do

peso corporal (conforme manual da linhagem) O peso foi controlado semanalmente ateacute

a 35ordf semana e quinzenalmente a partir da 36ordf semana de idade das aves ateacute o final do

experimento

A avaliaccedilatildeo do rendimento de incubaccedilatildeo foi realizada na 40ordf semana de idade

das aves Foram incubados 80 ovos de cada tratamento totalizando 400 ovos Os ovos

foram pesados e incubados em cada idade avaliada de acordo com o tratamento e

repeticcedilatildeo e avaliadas as seguintes caracteriacutesticas peso meacutedio do ovo incubado peso

meacutedio dos pintos ao nascer percentual do peso da progecircnie ao nascer em relaccedilatildeo ao

peso do ovo e taxa de eclosatildeo Apoacutes a eclosatildeo foi realizado o embriodiagnoacutestico dos

45

ovos que natildeo eclodiram os quais foram classificados em mortalidade por fase (inicial

intermediaacuteria e final) ovos contaminados bicados vivos e bicados mortos

Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental

Ingredientes () Raccedilatildeo postura I Milho 6072 Farelo de Trigo 420 Oacuteleo de Soja 200 Farelo de Soja 2260 Sal Comum 032 Caulim 050 Calcaacutereo 38 647 Fosfato Bicaacutelcico 131 Bicarbonato de Soacutedio 010 DL-Metionina 98 014 Colina 60 016 Milbond 010 Mycofix 015 Carbonato Potaacutessio 99 021 Premix vit e mineral1 050 Hy D2 005 Eur Bactiguard L 020 Valores Calculados Proteiacutena 1551 EM Kcalkg 2815 Gordura 477 AcLinoleico 248 Caacutelcio 295 Foacutesforo disponiacutevel 044 Lisina dig 071 Met + cistina dig 060 Treonina dig 051 Arginina dig 094 Soacutedio 019 Cloro 026 Potaacutessio 080 Mongin Meq100g 21388

1 Conteuacutedo por kg de premix Vit A 8000000 UI Vit D3 2200000 UI Vit E 6200 mg Vit K 3 2000 mg Vit B 1 2000 mg Vit B2 3000 mg Vit B6 6000 mg Vit B12 10000 mcg Pantotenato de caacutelcio 6000 mg Niacina 25000 mg Aacutec foacutelico 400 mg Se 100 mg Mn 65000 mg Fe40000 mg Cu 10000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg 2 Rovimix Hy D ndash DSM Nutritional Products

Para gravidade especiacutefica foi utilizado o meacutetodo da imersatildeo dos ovos em

soluccedilatildeo salina Foram preparadas seis soluccedilotildees (aacutegua e sal comum) com densidades que

variaram de 1070 a 1090 com variaccedilatildeo de 0004 para cada soluccedilatildeo As gravidades

foram aferidas com utilizaccedilatildeo de densiacutemetro de Petroacuteleo

46

O peso meacutedio do albuacutemen de cada repeticcedilatildeo foi obtido pela diferenccedila entre o

peso meacutedio do ovo e o peso meacutedio da gema somados ao peso meacutedio da casca de cada

repeticcedilatildeo Apoacutes a pesagem das cascas a espessura das mesmas foi medida com auxiacutelio

de um microcircmetro digital (Mitutoyoreg) em quatro pontos na regiatildeo central de cada casca

Para a medida de peso da casca os ovos foram quebrados e as cascas lavadas e secas agrave

temperatura ambiente por 48 horas em seguida foram pesadas em balanccedila analiacutetica e os

pesos anotados

Anaacutelise Estatiacutestica

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados de acordo com o seguinte modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243 4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os dados de embriodiagnoacutestico natildeo apresentaram distribuiccedilatildeo normal e foram

analisados pela anaacutelise Bayesiana assumindo que a porcentagem observada ri a cada

niacutevel de concentraccedilatildeo de Arg xi segue distribuiccedilatildeo Binomial com paracircmetros ni

(tamanho de amostra) e pi (taxa de eclosatildeo) pi = en1+en com funccedilatildeo de ligaccedilatildeo logit

ii

i

plog it(p ) log1 p⎛ ⎞

equiv = μ⎜ ⎟minus⎝ ⎠ nas formas linear e quadraacutetica dadas respectivamente por

n=α+ β1xi e n = α + β1xi + β2x2i Para a modelagem foram considerados um conhecimento

vago a priori sobre os paracircmetros de regressatildeo isto eacute com distribuiccedilotildees natildeo

informativas 3~ (010 )Nα e 3~ (010 )k Nβ k=12

A obtenccedilatildeo das distribuiccedilotildees marginais a posteriori para os paracircmetros foi por

meio do pacote BRugs do programa R (R Development Core Team 2007)

Para cada paracircmetro foram gerados 510000 valores em um processo MCMC

(Monte Carlo Markov Chain) considerando um periacuteodo de descarte amostral de 10000

47

valores iniciais A amostra final tomada com saltos de tamanho 20 conteacutem 25000

valores gerados A convergecircncia das cadeias foi verificada por meio do pacote CODA

(Best et al 1995) do programa R pelos criteacuterios de Geweke (1992) e de Heidelberger amp

Welch (1983)

Resultados e Discussatildeo

Os resultados de produccedilatildeo e de qualidade dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg estatildeo apresentados na Tabela 2 Os niacuteveis de

Arg digestiacutevel utilizados nas dietas das matrizes de corte influenciaram de forma

quadraacutetica (Plt005) a porcentagem de postura em que o niacutevel de 1262 de Arg

proporcionou a maior porcentagem de postura para as matrizes de corte (Figura 1)

Outros autores tambeacutem encontraram resultados semelhantes em relaccedilatildeo ao

aumento da taxa de postura em funccedilatildeo da suplementaccedilatildeo de Arg Segundo Najib amp

Basiouni (2004) a produccedilatildeo de ovos de matrizes elevou de 52 para 6786 quando

utilizaram niacuteveis de Arg e Lys na dieta de 15 e 12 respectivamente Adicionalmente

Basiouni et al (2006) observaram aumento no peso de foliacuteculos F1 em poedeiras que

receberam dietas com 205 Arg comparado com dietas que continham 154 de Arg

Esse efeito sugere que o aumento na produccedilatildeo de ovos possa ser atribuiacutedo do efeito

estimulatoacuterio especiacutefico da Arg na secreccedilatildeo de LH (Hormocircnio Luteinizante) o qual tem

accedilatildeo direta sobre o ovaacuterio e seus foliacuteculos (Basiouni 2009)

O comportamento observado na curva de produccedilatildeo de ovos demonstra aumento

da produccedilatildeo ateacute o niacutevel de 1262 de Arg e posterior queda ateacute o niacutevel de 1543 o

que provavelmente pode estar associado ao desequiliacutebrio aminoaciacutedico das dietas nos

niacuteveis extremos de Arg na raccedilatildeo Os altos niacuteveis de Arg utilizados podem ter afetado a

produccedilatildeo de ovos principalmente pelo antagonismo existente entre Arg e Lisina (Lys)

Baixas relaccedilotildees ArgLys em dietas de matrizes reduzem o consumo de raccedilatildeo e

deprimem a produccedilatildeo de ovos (Basiouni et al 2006) Altos niacuteveis de Lys associados a

baixos niacuteveis de Arg satildeo deleteacuterios agraves aves pois niacuteveis elevados de Lys promovem

expressiva elevaccedilatildeo da atividade da arginase renal e consequentemente induz agrave

degradaccedilatildeo da Arg (Austic amp Scott 1975) causando sintomas de deficiecircncia de Arg em

virtude das aves natildeo possuiacuterem o ciclo da ureia funcional (Drsquo Mello 2003) Esse

antagonismo ainda leva agrave diminuiccedilatildeo da atividade da glicina-amidinotransferase no

fiacutegado enzima que utiliza Arg e glicina como substratos juntamente com a metionina na

siacutentese da creatina muscular (Jones et al 1967 Andriguetto et al 1999)

48

Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg

()

Postura

()

Peso

Ovo

(g)

Gema

()

Clara

()

Casca

()

Casca

(mm)

Gravidade

Especiacutefica

(gml)

0943 7741plusmn460 6046plusmn048 2998plusmn035 5955plusmn045 876plusmn015 0577plusmn0004 1082plusmn0001

1093 8101plusmn544 6081plusmn052 2972plusmn042 5974plusmn040 902plusmn014 0584plusmn0005 1082plusmn0001

1243 8240plusmn370 6086plusmn051 2971plusmn043 6035plusmn031 875plusmn011 0569plusmn0004 1081plusmn0001

1393 8158plusmn368 6133plusmn057 2986plusmn041 5984plusmn043 880plusmn009 0571plusmn0003 1080plusmn0001

1543 7855plusmn600 6167plusmn046 2964plusmn030 6015plusmn038 876plusmn010 0573plusmn0004 1081plusmn0001

CV() 664 183 195 116 351 198 0133

Anaacutelise Variacircncia

Arg Quadratico1 Linear2 ns ns ns ns Linear3

R2 043 096 ----- ----- ----- ----- 066 1 Y= 421330+01239X-00004908X2 2 Y = 585813+000196527X 3 Y = 108413-000000249943X ns ndash natildeo significativo

77

78

79

80

81

82

83

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Pro

duccedilatilde

o de

ovo

s (

)

Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel

Ao avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arg no peso dos ovos das matrizes de

corte verificou-se aumento linear (Plt005) no peso dos ovos com o aumento de Arg

digestiacutevel nas raccedilotildees por outro lado houve queda linear (Plt005) na gravidade

especiacutefica dos ovos dessas matrizes (Figura 1)

Basiouni et al (2006) encontraram efeito dos niacuteveis de Arg e de Lys sobre na

gravidade especiacutefica dos ovos Estes autores observaram que baixos niacuteveis de Arg e

altos niacuteveis de Lys proporcionaram a melhor gravidade especifica dos ovos e quando a

1262

Arginina dig ()

Y = 421330+011239X-00004908X2 R2=043

49

relaccedilatildeo ArgLys era alta a gravidade especiacutefica piora significativamente Por outro lado

Lima amp Silva (2007) natildeo verificaram efeito das diferentes relaccedilotildees ArgLys digestiacutevel

nos paracircmetros de qualidade de ovos

O aumento do peso do ovo e a queda na gravidade especiacutefica desses ovos

possuem relaccedilatildeo direta Isso ocorre porque segundo Basiouni et al (2006) a siacutentese da

quantidade de casca dos ovos nas galinhas eacute constante Aleacutem disso com o aumento da

idade das galinhas ocorre aumento no tamanho dos ovos Do iniacutecio ateacute o final do ciclo

de postura o ovo chega a aumentar ateacute 40 do seu tamanho e por isso haveraacute menos

caacutelcio na superfiacutecie da casca o que reduz a espessura da casca (Baiatildeo amp Aguilar 2001)

e consequentemente a gravidade especiacutefica dos ovos

Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados de rendimento da incubaccedilatildeo dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel estatildeo apresentados na Tabela 3 Os

niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis de

incubaccedilatildeo Demonstra-se portanto que a Arg pode ser utilizada na dieta das matrizes

sem trazer prejuiacutezos agrave reproduccedilatildeo

A fertilidade e a eclosatildeo dos ovos das matrizes satildeo dois paracircmetros importantes

na incubaccedilatildeo dos ovos Valores proacuteximos de 96 para fertilidade e 88 para eclosatildeo

satildeo indicativos de bom manejo de reprodutoras (Rosa amp Aacutevila 2000) Segundo Rosa amp

Aacutevila (2000) o rendimento da incubaccedilatildeo estaacute diretamente relacionado com a

mortalidade embrionaacuteria a qual sofre influecircncia da gravidade especiacutefica e da

capacidade do ovo em perder umidade No presente trabalho observou-se que a

utilizaccedilatildeo de dietas suplementadas com Arg natildeo afetou nenhuma dessas variaacuteveis

apesar de ter interferido na gravidade especiacutefica dos ovos conforme demonstrado em

tabelas anteriores

10795

108

10805

1081

10815

1082

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Gra

vida

de e

spec

iacutefica

(gm

l)

59860

602604606608

61612614616618

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Peso

(g)

Y = 108413-000000249943X R2=066 Y = 585813+000196527X R2=096

50

O peso do pinto natildeo foi influenciado pelos niacuteveis de Arg na dieta das matrizes

de corte eacute considerado muito importante na cadeia de produccedilatildeo por estar diretamente

relacionado ao desempenho produtivo do frango A variaccedilatildeo de peso do pinto no

momento da eclosatildeo pode ser causada por fatores como linhagem idade da matriz peso

e niacuteveis de nutrientes do ovo (Vieira amp Moran Jr 1999) Okada (1994) e Castro (1996)

ressaltam que pintos de corte com mais de 40g no primeiro dia de vida devem ser

considerados de boa qualidade Os pintos desse experimento podem ser considerados de

boa qualidade jaacute que o menor peso dos pintos ao nascer foi de 439g Embora neste

estudo os niacuteveis de Arg na dieta das matrizes natildeo tenham afetado o peso dos pintos esse

aminoaacutecido eacute essencial para o bom desenvolvimento da progecircnie Kita et al (2002)

relatam que dietas com alta proteiacutena suplementadas com aminoaacutecidos essenciais (Arg

metionina+cistina) aumentam os niacuteveis plasmaacuteticos do fator de crescimento semelhante

agrave insulina (IGF-I) e o ganho de peso em aves jovens

Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Variaacuteveis Niacuteveis de Arginina

()

Fertilidade ()

Eclosatildeo ()

Peso ovo (g)

Peso Pinto (g)

Relaccedilatildeo Peso OvoPeso Pinto

0943 9750plusmn218 7875plusmn450 6269plusmn042 4507plusmn053 7168plusmn045 1093 9513plusmn212 8038plusmn459 6212plusmn033 4390plusmn045 7115plusmn054 1243 9250plusmn206 8125plusmn464 6200plusmn047 4487plusmn066 7234plusmn047 1393 9750plusmn218 8000plusmn457 6314plusmn072 4514plusmn086 7173plusmn082 1543 9625plusmn215 7750plusmn443 6351plusmn055 4529plusmn039 7127plusmn045 Meacutedia 9578 7958 6269 4486 7163

CV () 656 1641 231 374 222 Anaacutelise de Variacircncia Arginina ns ns ns ns ns

R2 ------ ------ ----- ------- ------- ns = natildeo significativo

O peso dos ovos eacute outra caracteriacutestica de grande importacircncia relacionada com a

idade da matriz os quais satildeo preponderantes para o desenvolvimento inicial das aves e

tem consequecircncias em todo o crescimento (Pedroso et al 2005) Essa influecircncia eacute bem

conhecida e o peso do pinto representa entre 66 e 71 do peso do ovo (Fiuacuteza et al

2006 Marinho et al 2006 Pappas et al 2006) Segundo North amp Bell (1990) cada

51

grama a mais no peso do pinto representa 13 gramas no peso do frango ao abate por

isso a nutriccedilatildeo das matrizes eacute de grande importacircncia jaacute que a Arg tem relaccedilatildeo positiva

com o hormocircnio de crescimento (GH) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave

(Harvey et al 2001)

Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico

Estimativas Bayesianas

Ligaccedilatildeo Ligaccedilatildeo Meacutedias Desvio Padratildeo P25 P975 DIC

Embriodiagnoacutestico

Linear α β

-07512 -25980

2078 1798

-4811 -6367

3426 0784 4783 Mortalidade

Embrionaacuteria (1 a 5 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-8444 10690 -5607

10610 18020 7538

-3015 -2406 -2104

11790 47550 8874

4813

Linear α β

2259 -6267

3790 3615

-4602 -14470

10570 -

01174 3137

Mortalidade (11 a 17 dias)

Quadraacutetica α β1 β2

5057 -11090 1958

12960 22430 9632

-2027 -5093 -1714

3112 3253 2052

3167

Linear α β

-3726 1274

10390 07968

-58110 -02681

-1730 2882 1079

Mortalidade (18 a 21 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-1634 -2195 1387

6330 10280 4084

-14020 -22380 -6539

10690 17840 9441

1095

Linear α β

-1927 -2266

2562 2359

-7233 -7321

2739 1993 0070

Bicado Vivo Quadraacutetica

α β1 β2

-1451 -1692 -2019

2749 2821 2539

-7044 -7313 -7290

3755 3682 2565

0057

Linear α β

-2564 -1628

2860 2418

-8103 -6479

2823 2755 3417

Bicado Morto Quadraacutetica

α β1 β2

3692 -12350 4412

11930 19920 8139

-1936 -5206 -1148

2739 2609 2054

3428

Linear α β

-513600 -004923

3798 3023

-13000 -6154

2041 5809 2522

Morte por Contaminaccedilatildeo Quadraacutetica

α β1 β2

-009106 -71940 28920

13200 21610 8744

-2704 -4965 -1428

2480 3473 2016

2555

Na Tabela 4 satildeo apresentadas as estimativas Bayesianas para as equaccedilotildees de

regressatildeo ajustadas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos provenientes das

matrizes de corte alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg Natildeo foi verificado efeito da

dieta das matrizes sobre nenhuma das variaacuteveis paracircmetros avaliadas (Pgt005)

52

Contudo no periacuteodo final do desenvolvimento embrionaacuterio (18 a 21 dias) haacute maior

mortalidade (Tabela 5) Nesse periacuteodo haacute mudanccedila draacutestica do meio aquoso protegido

para o meio aeroacutebio totalmente diferente Nas aves essa fase final de desenvolvimento

inclui absorccedilatildeo de aacutegua retraccedilatildeo do saco vitelino maturaccedilatildeo funcional do pulmatildeo

transiccedilatildeo da respiraccedilatildeo coacuterio-alantoide para pulmonar bicagem e nascimento Ocorre

ao mesmo tempo o desenvolvimento da resposta homeoteacutermica (Oviedo-Roacutendon amp

Murakami 1998) Aleacutem disso nesse periacuteodo ocorre a mudanccedila pronunciada em

hormocircnios tireoideanos corticosteroideos hormocircnios do eixo somatotroacutepico

prolactina vasotocina e melatonina

Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg Morte

Embrionaacuteria (1 a 5 dias)

Morte (11 a 17 dias)

Morte (18 a 21

dias)

Bicado Morto

Morte por Contaminaccedilatildeo

Arg () 0943 264 416 889 264 125 1093 514 000 764 125 000 1243 250 000 836 000 125 1393 000 125 1514 125 000 1543 125 000 1406 125 125 CV () 20962 50785 9999 27439 36515 (Pgt005)

Conclusatildeo

A suplementaccedilatildeo das dietas de matrizes de corte com niacuteveis crescentes de

Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o

niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os

niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas

podendo ser utilizado o menor niacutevel de suplementaccedilatildeo ou seja 0943 de Arg

digestiacutevel sem prejuiacutezos

53

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IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e

paracircmetros oacutesseos da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos

Palavras-chave avaliaccedilatildeo de carcaccedila desempenho produtivo osso

58

IV - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

performance carcass yield and bone parameters of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine

(Arg) supplementation in broiler breeder henrsquos diet on performance carcass yield and bone parameters in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) These results indicate that it is necessary to feed the progeny with an Arg-supplemented diet to obtained better performance and bone quality Key words bone carcass evaluation productive performance

59

Introduccedilatildeo

As exigecircncias nutricionais para a maioria dos nutrientes satildeo estabelecidas com

base nas respostas produtivas mas em alguns casos a sauacutede eacute o criteacuterio principal A

nutriccedilatildeo de reprodutoras pesadas deve atender as exigecircncias da ave alcanccedilando bom

desempenho produtivo e ainda suprir as necessidades dos embriotildees e dos pintos

neonatos originados de seus ovos O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo

dependem completamente dos nutrientes contidos no ovo os quais satildeo originados da

dieta e do metabolismo das galinhas (Baiatildeo amp Lucio 2005) Assim a concentraccedilatildeo de

nutrientes disponiacuteveis no ovo para o desenvolvimento do embriatildeo eacute criacutetico e pode

influenciar o potencial de ganho de peso da progecircnie e caracteriacutesticas importantes de

desenvolvimento imunitaacuterio oacutesseo e muscular

O crescimento precoce no periacuteodo poacutes-eclosatildeo eacute influenciado por vaacuterios

fatores entre eles o conteuacutedo de resiacuteduos do saco viteliacutenico a ingestatildeo de alimento e de

aacutegua os niacuteveis de enzimas pancreaacuteticas e intestinais a aacuterea de superfiacutecie intestinal e a

digestibilidade global de nutrientes (Dibner 1996) As reservas contidas no saco

vitelino satildeo as primeiras fontes de nutrientes utilizadas pelo pintainho ao nascer Desse

modo quanto maior o tempo decorrido entre a eclosatildeo e o iniacutecio da ingestatildeo de

alimento e aacutegua maior a dependecircncia que o pintainho teraacute dessas reservas (Vieira amp

Pophal 2000) a dieta materna eacute a origem dos nutrientes para o embriatildeo (Vieira 2007)

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) afirmam que para matrizes pesadas existe uma pausa nas

pesquisas que visam determinar as exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos Embora os

aminoaacutecidos presentes na gema possam ser suficientes durante o processo de eclosatildeo

apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

desenvolvimento inicial (Otha et al 2004)

Os aminoaacutecidos sinteacuteticos disponiacuteveis no mercado proporcionam o atendimento

das exigecircncias nutricionais das aves principalmente em relaccedilatildeo aos aminoaacutecidos

60

limitantes Dentre esses aminoaacutecidos a arginina (Arg) eacute considerada o quinto

aminoaacutecido limitante para frangos de corte em dietas agrave base de milho e de farelo de

soja apoacutes metionina+cistina lisina treonina e valina (Corzo 2007) Como as aves natildeo

apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem exclusivamente da Arg sinteacutetica

principalmente no periacuteodo inicial de criaccedilatildeo (Allen amp Baker 1972) A suplementaccedilatildeo

da Arg eacute necessaacuteria para a formaccedilatildeo da ornitina a qual estaacute envolvida na siacutentese da

prolina que eacute utilizada para a formaccedilatildeo das poliaminas (espermidina espermina e

putrescina) Estas moleacuteculas estatildeo associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

A Arg aleacutem de serem constituintes de proteiacutenas participa como coadjuvante na

secreccedilatildeo de insulina pelas ceacutelulas β do pacircncreas (Bolea et al 1997) e na secreccedilatildeo do

hormocircnio de crescimento (GH) (Ghigo et al 1994) Os efeitos do GH satildeo mediados

pelos fatores de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Le Roith et al 2001) O

IGF-I eacute conhecido por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo

esqueleacutetico como a proliferaccedilatildeo e diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelite (Florini et al 1996)

e a agregaccedilatildeo de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos sobre a siacutentese e a

degradaccedilatildeo proteica (Duclos et al 1991 Coleman et al 1995 Duclos et al2005)

Outro efeito do GH ocorre em niacutevel do disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de

IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no crescimento dos ossos longos (Isaksson et

al 1987)

O enriquecimento dos ovos das matrizes com Arg bem como sua suplementaccedilatildeo

logo apoacutes a eclosatildeo pode trazer inuacutemeros benefiacutecios sobre o desenvolvimento da

progecircnie jaacute que o GH influenciado pela Arg tem sua siacutentese iniciada na fase

embrionaacuteria da ave (Harvey et al 2001)

Diante do exposto com este estudo objetivou-se testar a influecircncia da

suplementaccedilatildeo com L-Arginina na dieta das matrizes de corte sobre a progecircnie com

dieta suplementada ou natildeo suplementada com L-Arginina sobre o desempenho

paracircmetros oacutesseos e rendimento de carcaccedila dos frangos de corte

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

61

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

no delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina

incluiacutedos na dieta materna variando de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal (0

943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 35

aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada box foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado o

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

em todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as sobras de raccedilatildeo dos boxes foram pesadas para

ajustar o consumo de raccedilatildeo e da conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 2) As

dietas experimentais agrave base de milho e de farelo de soja foram formuladas de acordo

com os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e as recomendaccedilotildees nutricionais

62

propostas por Rostagno et al (2005) As aves controle receberam dieta sem

suplementaccedilatildeo de arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz

sobre o desempenho da progecircnie

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais basais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 017 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 1000 10000 Valores calculados PB () 2000 1850 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

63

Experimento 3 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina digestiacutevel na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes utilizando o delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina e seis repeticcedilotildees

com 32 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal inicial e de crescimento em

substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial corresponderam a 1300

1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela 2) A partir dos 22

dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300 1450 1600

e 1750 de arginina digestiacutevel (Tabela 3) O manejo realizado nesse experimento foi

conduzido conforme descrito no experimento anterior

Desempenho

Para ambos os experimentos com a progecircnie foram avaliados o desempenho

zooteacutecnico (ganho de peso consumo de raccedilatildeo e conversatildeo alimentar) Para avaliaccedilatildeo do

desempenho as raccedilotildees e as aves foram pesadas no iniacutecio do experimento aos 7 21 e 42

dias de idade

Paracircmetros oacutesseos

Os paracircmetros oacutesseos avaliados foram comprimento diacircmetro peso e calculado

o Iacutendice de Seedor Para avaliaccedilatildeo dos paracircmetros oacutesseos em ambos os experimentos

com a progecircnie apoacutes o sacrifiacutecio por meio de atordoamento seguido de sangria foram

coletados os fecircmures e as tiacutebias esquerdas de duas avesrepeticcedilatildeo aos 7 e 21 dias de

idade As amostras ficaram congeladas (-18ordmC) ateacute o iniacutecio das anaacutelises dos paracircmetros

oacutesseos que foram executadas conforme descrito a seguir

Apoacutes o descongelamento dos ossos foram retirados os tecidos envolventes

(tecido muscular aderido) com auxiacutelio de tesouras e pinccedilas Os ossos descongelados

foram pesados em balanccedila analiacutetica (g plusmn 00001) e o comprimento e o diacircmetro (na

64

porccedilatildeo meacutedia do osso) foram medidos usando paquiacutemetro eletrocircnico digital (capacidade

de 0 a 150 mm e resoluccedilatildeo de 001 mm)

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900

Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6456 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl Vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 1300 1450 1600 1750 1900 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

65

A partir do peso do osso e do seu comprimento foi calculado o Iacutendice de Seedor

(Seedor et al 1993) de acordo com a seguinte foacutermula Iacutendice de Seedor = Peso do

osso (mg)comprimento do osso (mm)

Este iacutendice eacute utilizado como indicativo da densidade oacutessea Quanto maior o

Iacutendice de Seedor maior a densidade da peccedila oacutessea e vice-versa

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000

mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

66

Rendimento de carcaccedila

Para determinaccedilatildeo do rendimento de carcaccedila foram utilizadas trecircs aves por

unidade experimental (15 avestratamento) identificadas com anilhas numeradas e

submetidas ao jejum por seis horas atordoadas com eletricidade (220W) e com

posterior sangria no final de cada experimento realizado com a progecircnie

Para caacutelculo do rendimento de carcaccedila foi considerado o peso da carcaccedila

eviscerada quente sem os peacutes cabeccedila e gordura abdominal em relaccedilatildeo ao peso vivo

que foi obtido individualmente antes do abate das aves Para rendimento dos cortes

nobres foi considerado o rendimento do peito inteiro com pele e ossos das pernas

(coxa e sobrecoxa) e das asas que foi calculado em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila

eviscerada

Para caacutelculo da gordura abdominal foi considerada a gordura presente ao redor da

cloaca da bolsa cloacal moela proventriacuteculo e dos muacutesculos abdominais adjacentes foi

retirada conforme descrito por Smith (1993) Em seguida foi pesada e tambeacutem

calculada em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila eviscerada

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

67

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

Resultados e discussatildeo

Os valores meacutedios de desempenho de frangos de corte provenientes de matrizes

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg com dieta suplementada e natildeo suplementada

com Arg estatildeo demonstrados nas Tabelas 5 e 6 respectivamente

No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) os frangos que receberam dietas

suplementadas com Arg apresentaram efeito linear positivo (Plt005) dos niacuteveis

crescentes de suplementaccedilatildeo com Arg sobre o ganho de peso O consumo de raccedilatildeo e a

conversatildeo alimentar foram influenciados de forma quadraacutetica (Plt005) e o niacutevel de

1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649

proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente (Figura 2)

Esses niacuteveis satildeo superiores aos encontrados por Atencio et al (2004) que apresentaram

os niacuteveis de 127 e 128 de Arg digestiacutevel para ganho de peso e conversatildeo

alimentar respectivamente Mendes et al (1997) e Brake et al (1998) observaram

melhor conversatildeo alimentar agrave medida que a Arg foi adicionada agraves dietas dos frangos de

corte

68Tabela 5 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito

0943 1093 1243 1393 1543

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 68749plusmn651 69813plusmn1553 69498plusmn876 71393plusmn2071 71148plusmn1009 466 ns

Consumo de raccedilatildeo g 108937plusmn973 108077plusmn2506 106938plusmn1143 108570plusmn2584 109617plusmn1424 420 ns

Conversatildeo alimentar gg 1585plusmn0015 1548plusmn0006 1539plusmn0014 1523plusmn0023 1541plusmn0004 224 Quadraacutetico1

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 182410plusmn1786 178280plusmn1963 183209plusmn2355 170699plusmn3272 177743plusmn3493 366 ns

Consumo de raccedilatildeo g 339169plusmn2597 332944plusmn4420 334432plusmn4460 328563plusmn5011 335512plusmn4351 311 ns

Conversatildeo alimentar gg 1859plusmn0017 1868plusmn0017 1825plusmn0008 1926plusmn0027 1889plusmn0014 230 ns

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 251160plusmn2118 248093plusmn2721 252708plusmn2327 242092plusmn4528 248891plusmn3614 314 ns

Consumo de raccedilatildeo g 448106plusmn3333 441022plusmn6500 441370plusmn5178 437133plusmn7327 445129plusmn4655 309 ns

Conversatildeo alimentar gg 1784plusmn0013 1777plusmn0011 1746plusmn0005 1807plusmn0021 1789plusmn0008 177 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 15844-0000270801X+0000000325260X2 R2 = 070

69Tabela 6 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito

1300 1450 1600 1750 1900

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 75785plusmn402 77320plusmn1073 78103plusmn635 79648plusmn670 80151plusmn344 212 Linear1

Consumo de raccedilatildeo g 89299plusmn1140 92124plusmn2246 103470plusmn4037 104782plusmn562 96677plusmn1665 557 Quadraacutetico2

Conversatildeo alimentar gg 1179plusmn0007 1192plusmn0031 1326plusmn0055 1316plusmn0012 1207plusmn0026 613 Quadraacutetico3

1150 1300 1450 1600 1750

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 177261plusmn2817 177088plusmn2760 180666plusmn2220 182398plusmn3067 177484plusmn2109 359 ns

Consumo de raccedilatildeo g 358840plusmn5051 353952plusmn5112 356084plusmn2723 358440plusmn6584 354362plusmn2670 322 ns

Conversatildeo alimentar gg 2025plusmn0013 1999plusmn0017 1972plusmn0016 1965plusmn0006 1997plusmn0013 165 Quadraacutetico4

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 253047plusmn2782 254408plusmn3313 258769plusmn2443 262046plusmn3324 257635plusmn2041 269 Linear5

Consumo de raccedilatildeo g 448139plusmn5104 446076plusmn6429 459554plusmn4864 463275plusmn6840 451039plusmn3651 297 ns

Conversatildeo alimentar gg 1771plusmn0009 1754plusmn0015 1777plusmn0022 1768plusmn0005 1751plusmn0012 192 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 759898+00737276X R2 = 081 2 Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=085 3 Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 = 096 4 Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031 5 Y = 253818+0112096X R2 = 017

70

149150151152153154155156157158159

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo A

limen

tar

Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Na progecircnie natildeo suplementada com dieta contendo Arg verificou-se efeito

quadraacutetico (Plt005) da nutriccedilatildeo das matrizes na conversatildeo alimentar (CA) (Figura 1)

sendo que 1359 de Arg dig proporcionou o melhor iacutendice Jaacute o consumo de raccedilatildeo e o

ganho de peso natildeo foram afetados (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo da matriz

O efeito observado da suplementaccedilatildeo com Arg das matrizes na CA de frangos de

corte natildeo suplementados com Arg ser atribuiacuteda ao aumento na concentraccedilatildeo desse

aminoaacutecido na gema a qual eacute responsaacutevel pela nutriccedilatildeo dos pintos durante o seu

desenvolvimento embrionaacuterio e nas primeiras horas de vida poacutes-eclosatildeo Esse aumento

pode ter efeito positivo no desenvolvimento muscular dos pintos uma vez que esse

aminoaacutecido tem accedilatildeo indireta na formaccedilatildeo muscular atraveacutes da siacutentese do hormocircnio de

crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO) Aleacutem disso a Arg ainda estaacute envolvida na

siacutentese da creatina e de poliaminas As poliaminas satildeo consideradas de importacircncia

nutricional no crescimento e desenvolvimento do intestino do neonato (Quinn et al

2002) Segundo Foye et al(2005) o acesso do embriatildeo a nutrientes pode melhorar o

desenvolvimento do sistema digestoacuterio a eclodibilidade e o desempenho dos frangos

Quando o comportamento da curva do consumo de raccedilatildeo dos frangos de corte

que receberam dietas suplementadas com Arg foi analisada verifica-se que apoacutes o

ponto de maior consumo de raccedilatildeo ocorre uma queda na curva (Figura 2) Esse efeito

pode ter sido ocasionado por um desequiliacutebrio dos aminoaacutecidos na dieta afetando

principalmente a relaccedilatildeo LysArg O antagonismo entre esses aminoaacutecidos prejudica a

absorccedilatildeo desses uma vez que ambos competem pelo mesmo siacutetio de absorccedilatildeo

Segundo Fernandes et al (2009) o efeito negativo da suplementaccedilatildeo de Arg

pode estar associado agrave incapacidade funcional dos rins em eliminar o excesso de ureia

formado pela degradaccedilatildeo da Arg Niacuteveis elevados de Arg promovem aumento na

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 070

1359

71

atividade da arginase renal produzindo ornitina e ureia (Stuz et al 1971) Este aumento

pode comprometer a siacutentese de NO visto que a Arg eacute a uacutenica via fisioloacutegica de

produccedilatildeo deste composto Adicionalmente a isso a elevaccedilatildeo da ureia plasmaacutetica de

acordo com Prabhakar et al (1997) pode inibir a accedilatildeo da oacutexido niacutetrico sintetase (NOS)

enzima que cataliza a reaccedilatildeo que converte Arg em NO O NO aleacutem de

neurotransmissor tambeacutem modula a liberaccedilatildeo de outros neurotransmissores (Estrada amp

Murilo-Carretero 2005) cujo envolvimento destas moleacuteculas na regulaccedilatildeo do apetite

vem sendo discutido (Denbow 1999)

750

800

850

900

950

1000

1050

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

sum

o de

raccedilatilde

o (g

)

730

740

750

760

770

780

790

800

810

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Gan

ho d

e pe

so (g

)

105

11

115

12

125

13

135

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo das matrizes com dietas com Arg natildeo afetou as variaacuteveis de

desempenho da progecircnie natildeo suplementada com Arg no periacuteodo de 21 a 42 dias de

idade (Pgt005) Poreacutem quando a progecircnie recebeu dieta com Arg verificou-se efeito

quadraacutetico para conversatildeo alimentar (Plt005) e o melhor resultado foi alcanccedilado com

1669 de Arg (Figura 3)

Sabe-se que a conversatildeo alimentar indica a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo da dieta para

o crescimento e deposiccedilatildeo muscular Assim o crescimento consiste em parte do

resultado da siacutentese proteica e a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo dependem da quantidade de

aminoaacutecidos que estatildeo sendo catabolizados (Sklan amp Noy 2004) Este processo

depende de energia para a biotransformaccedilatildeo e a eliminaccedilatildeo com custo metaboacutelico para

Y = 759898+00737276X R2 = 085

Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 =0 96

Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=081

1690

1649

72

incorporar um aminoaacutecido na cadeia proteica de 4 mol de ATP e de 6 mol de ATPg de

N para eliminaacute-lo (Mc Leoad 1997)

194195196197198199

2201202203204

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo de Arg durante todo o periacuteodo de criaccedilatildeo eacute essencial para que

a ave expresse todo o seu potencial geneacutetico principalmente em relaccedilatildeo ao ganho de

peso Para a progecircnie suplementada no periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade)

observou-se efeito linear positivo (Pgt005) no ganho de peso e para a progecircnie que natildeo

recebeu suplementaccedilatildeo natildeo foi observado efeito(Pgt005) da suplementaccedilatildeo das

matrizes nas variaacuteveis de desempenho (Figura 4)

2500

2520

2540

2560

2580

2600

2620

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Gan

ho d

e Pe

so (g

)

Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

De fato segundo Fernandes et al (2009) a suplementaccedilatildeo de Arg acima das

exigecircncias nas raccedilotildees iniciais (1 a 21 dias) dos frangos melhora o desempenho

produtivo das aves entretanto esse efeito eacute transiente natildeo havendo diferenccedila nestas

caracteriacutesticas na idade de abate

Na fase inicial de criaccedilatildeo a Arg eacute considerada um aminoaacutecido essencial na dieta

das aves visto que o ciclo da ureia natildeo eacute funcional nas aves Assim a incapacidade

desses animais em sintetizar Arg implica na necessidade do fornecimento desse

aminoaacutecido na dieta Aleacutem disso a Arg eacute considerada o quinto aminoaacutecido limitante

Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031

1669

Y = 253818+0112096X R2 = 017

73

para frangos em dietas agrave base de milho e de farelo de soja apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Segundo Ball et al (2007) a exigecircncia de Arg pelas aves eacute a mais alta entre as

espeacutecies de animais estudadas isso porque aleacutem da falta da siacutentese endoacutegena a taxa de

deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento das atuais linhagens de corte eacute muito alta

Os valores meacutedios de desempenho (Tabelas 5 e 6) apresentados durante o

periacuteodo experimental total (1 a 42 dias) satildeo muito proacuteximos Assim foi realizada a

anaacutelise conjunta de ambos os experimentos para confirmar a necessidade ou natildeo de

suplementaccedilatildeo da progecircnie com Arg na dieta No periacuteodo total de 1 a 42 dias (Tabela

7) a CA foi melhor na progecircnie que recebeu dieta suplementada apesar do CR ter sido

superior nessas aves demonstrando assim que a progecircnie suplementada com Arg

converte mais eficientemente a raccedilatildeo em massa muscular

Tabela 7 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg

1 a 21 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 70120plusmn585 108428plusmn789 1547plusmn0007

Progecircnie (suplementada) 78202plusmn406 97271plusmn1456 1243plusmn0018

CV () 473 913 0011 22 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 178468plusmn1380 334124plusmn1877 1874plusmn010

Progecircnie (suplementada) 178979plusmn1160 356346plusmn1981 1992plusmn0007

CV () 1182 1999 0007 1 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 248588plusmn1487 442552plusmn2419b 1781plusmn0006b

Progecircnie (suplementada) 257181plusmn1315 453617plusmn2597a 1764plusmn0006a

CV () 1347 2477 0006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Dentre os paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada

apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis

suplementares de Arg recebidos pelas matrizes (Figura 5)

74

Tabela 8 ndash Meacutedias e erro padratildeo de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito Paracircmetros 0943 1093 1243 1393 1543

de Carcaccedila 6944plusmn025 6863plusmn044 6987plusmn033 6953plusmn028 7009plusmn029 115 Linear1

de Peito 3587plusmn028 3519plusmn017 3662plusmn032 3639plusmn041 3618plusmn042 228 ns

de Coxa 3041plusmn032 3085plusmn019 2970plusmn033 2999plusmn032 3021plusmn022 229 ns

de Asa 1142plusmn016 1129plusmn014 1118plusmn006 1104plusmn020 1110plusmn014 329 ns

de Dorso 2279plusmn020 2352plusmn026 2267plusmn014 2287plusmn030 2262plusmn030 266 ns

de Gordura abdominal 295plusmn015 325plusmn014 292plusmn016 367plusmn019 290plusmn011 1220 ns ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 690720+000146984X R2 = 081 Tabela 9 ndash Meacutedias e erros padratildeo de rendimento da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito Paracircmetros 1150 1300 1450 1600 1750

de Carcaccedila 6993plusmn029 7022plusmn028 7138plusmn033 7128plusmn020 7160plusmn031 099 Linear1

de Peito 3579plusmn030 3584plusmn077 3690plusmn021 3651plusmn028 3698plusmn019 277 Linear2

de Coxa 3126plusmn030 3108plusmn066 3027plusmn025 3026plusmn023 3045plusmn020 295 Linear3

de Asa 1137plusmn022 1123plusmn015 1105plusmn017 1095plusmn015 1096plusmn021 398 Linear4

de Dorso 2272plusmn033 2286plusmn057 2263plusmn028 2273plusmn028 2260plusmn048 436 ns

de Gordura abdominal 314plusmn013 311plusmn013 238plusmn007 279plusmn014 285plusmn007 964 Quadraacutetico5 1 Y = 700017+000293620X R2= 045 2 Y = 357918+000203737X R2 = 027 3 Y = 311542-000163610X R2=021 4 Y = 113323-000072978X R2 = 085 5 Y = 322863-000316200X+000000424975X2R2=030 ns = natildeo significativo

75

686

688

69

692

694

696

698

70

702

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

d

e C

arca

ccedila

Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Al-Murrani (1982) demonstrou que injetando uma mistura de aminoaacutecidos nos

embriotildees em crescimento nos ovos de matrizes de corte resultam em aumento no peso

do pinto e no ganho de peso dos frangos de corte aos 56 dias de idade quando estes

foram comparados com os natildeo tratados De fato o peso do embriatildeo e dos pintos eacute

influenciado pelo perfil nutricional da gema por sua utilizaccedilatildeo pelo pintos apoacutes o

nascimento (Otha et al 1999)

Quando os frangos receberam dietas suplementadas com Arg houve aumento

linear positivo (Plt005) da porcentagem de carcaccedila e de peito poreacutem as porcentagens

de pernas e de asa apresentaram queda linear (Plt005) (Figura 6) Esses efeitos

provavelmente ocorreram pela accedilatildeo indireta da Arg pela formaccedilatildeo muscular atraveacutes da

siacutentese do hormocircnio do crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO)

A Arg eacute constituinte de proteiacutenas e estaacute envolvida na secreccedilatildeo de insulina pelo

pacircncreas (Bolea et al 1997) e do GH pela hipoacutefise (Merimee et al 1969) Os efeitos

desses hormocircnios se manifestam por meio da secreccedilatildeo secundaacuteria dos fatores de

crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Roith et al 2001) O IGF-I eacute conhecido

por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo esqueleacutetico como

a proliferaccedilatildeo e a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelites (Florini et al 1996) e a agregaccedilatildeo

de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos na siacutentese e na degradaccedilatildeo proteica

(Duclos et al 2005)

Outro mecanismo de accedilatildeo da Arg nas fibras musculares estaacute relacionada com agrave

accedilatildeo do oacutexido niacutetrico O NO eacute sintetizado pela oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) a qual eacute

expressada pelas fibras do muacutesculo esqueleacutetico (Reid 2001) A atividade da NOS

variam nos diferentes tipos de muacutesculos sendo que nos muacutesculos de contraccedilatildeo raacutepida

verifica-se maior accedilatildeo desta do que nos muacutesculos de contraccedilatildeo lenta (Reid 2001)

Y = 690720+000146984X R2 = 081

76

Assim o efeito observado nos diferentes cortes provavelmente ocorreu em virtude da

predominacircncia de fibras brancas ou Fast Glycolytic (FG) no peito Em contrapartida os

muacutesculos da coxa sobrecoxa e da asa possuem predominacircncia de fibras vermelhas ou

Slow Oxidative (SO) que satildeo de contraccedilatildeo lenta (Sartori amp Gonzaacuteles 2002) e pouco

afetada pela accedilatildeo da NOS

O teor de gordura abdominal presente na carcaccedila de frangos eacute um dos melhores

indicativos de qualidade da carcaccedila Quando os frangos foram suplementados com

niacuteveis de Arg verificou-se efeito quadraacutetico (Plt005) para essa caracteriacutestica em que o

menor teor de gordura abdominal foi obtido com 1672 de Arg dig (Figura 6) A

queda observada ateacute esse niacutevel pode ser explicada pela accedilatildeo do GH via IGF-I que induz

a siacutentese de proteiacutenas por estimular a captaccedilatildeo de aminoaacutecidos e a transcriccedilatildeo e a

traduccedilatildeo do mRNA em vaacuterios tecidos-alvo Diminui o catabolismo de proteiacutenas por

atuar diretamente na liberaccedilatildeo de aacutecidos graxos do tecido adiposo aumentando a sua

conversatildeo em acetil-CoA fonte de energia para os tecidos perifeacutericos A partir desse

ponto onde verifica-se o menor acuacutemulo de gordura ocorre novamente o aumento na

deposiccedilatildeo de gordura abdominal Isso provavelmente se deve ao excesso de aminoaacutecido

na dieta A degradaccedilatildeo desse excesso leva a excreccedilatildeo de nitrogecircnio na urina na forma

de amocircnia e a produccedilatildeo de moleacuteculas com esqueleto carbocircnico que satildeo usadas na

gliconeogecircnese e na lipogecircnese

Segundo Shutte amp Pack (1995) e Leclerq (1998) a suplementaccedilatildeo e o

balanceamento dos aminoaacutecidos das dietas podem promover aumento no ganho de

carcaccedila principalmente em relaccedilatildeo ao peito (Pophal et al 2004) e reduccedilatildeo de gordura

abdominal (Vieira et al 2004)

Mendes et al (1997) verificaram que o aumento da relaccedilatildeo ArgLys melhorou o

rendimento de carcaccedila e reduziu a gordura abdominal em frangos de corte Costa et al

(2001) observaram que agrave medida em que se aumentou a relaccedilatildeo ArgLys houve efeito

linear crescente para o rendimento de perna e decrescente para a gordura abdominal Jaacute

Fernandes et al (2009) natildeo observaram efeito da suplementaccedilatildeo de Arg nas variaacuteveis de

rendimento de carcaccedila analisadas o que provavelmente ocorreu porque diferentemente

do presente trabalho a suplementaccedilatildeo de Arg foi realizada apenas na fase inicial de

criaccedilatildeo (1 a 21 dias de idade)

77

69

695

70

705

71

715

72

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

arca

ccedila

35352354356358

36362364366368

37372

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

P

eito

296298

30302304306308

31312314

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

oxa

106

107

108

109

11

111

112

113

114

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

A

sa

2

22

24

26

28

3

32

34

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

G

ordu

ra a

bdom

inal

Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Outra possibilidade eacute que essas caracteriacutesticas de rendimento de carcaccedila foram

influenciadas pelos niacuteveis dieteacuteticos de Arg que estatildeo acima da exigecircncia das aves

Resultado contraacuterio foi obtido por Atencio et al (2004) que trabalhando com niacuteveis

crescentes de Arg natildeo verificaram efeito no rendimento de carcaccedila e de cortes

avaliados e estes concluiacuteram que os niacuteveis estudados estavam dentro da exigecircncia das

aves

Na anaacutelise conjunta do rendimento de carcaccedila dos experimentos da progecircnie

que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg (Tabela 10) demonstrou-se que a

presenccedila de Arg na dieta promove maior deposiccedilatildeo muscular na coxa e menor acuacutemulo

de gordura abdominal na carcaccedila

Y = 322863-000316200X+000000424975X2 R2 = 030

1672

Y = 700017+000293620X R2 = 045 Y = 357918+000203737X R2 = 027

Y = 113323-000072978X R2 = 085 Y = 311542-000163610X R2 = 021

Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

78

Tabela 10 ndash Meacutedias de percentagem de carcaccedila (CARC) percentagem de peito (PEITO) percentagem de coxa (COXA) percentagem de asa (ASA) percentagem de gordura abdominal (GORDURA) das progecircnies suplementadas ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

CARC PEITO COXA ASA GORDURAProgecircnie

(ssuplementaccedilatildeo) 6951plusmn016 3605plusmn017 3023plusmn014b 1121plusmn007 307plusmn007ordf

Progecircnie (suplementada) 7088plusmn017 3640plusmn020 3066plusmn017ordf 1111plusmn008 285plusmn007b

CV () 014 017 015 007 006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Com relaccedilatildeo aos paracircmetros oacutesseos dos frangos de corte que receberam dietas

sem suplementaccedilatildeo de Arg (Tabela 11) apenas o diacircmetro de tiacutebia aos sete dias de

idade foi afetado de forma quadraacutetica (Plt005) pela suplementaccedilatildeo das matrizes a

partir do niacutevel 1196 de Arg (Figura 7) demonstrando assim que inclusotildees de Arg

acima da exigecircncia promove a melhora dessa caracteriacutestica Segundo Wu amp Morris

(1998) a suplementaccedilatildeo de Arg em niacuteveis elevados promove aumento na atividade da

arginase renal eleva os niacuteveis de ornitina que participa da biossiacutentese das poliaminas

envolvidas no processo de multiplicaccedilatildeo celular melhorando desta forma o suporte

oacutesseo Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram aumento na concentraccedilatildeo

plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez secretado pela

hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio receptor e

indiretamente via IGF-I e II nos tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos

do GH ocorre no disco epifisaacuterio em que atua estimulando a siacutentese de IGF-I o qual

atua paracrinamente induzindo mitogecircnese o que resulta no crescimento dos ossos

longos (Isaksson et al 1987)

Para os paracircmetros morfoloacutegicos dos ossos dos frangos que receberam dietas

contendo suplementaccedilatildeo de Arg verifica-se efeito linear crescente (Plt005) dos niacuteveis

de arginina para o comprimento e diacircmetro do fecircmur e da tiacutebia O mesmo

comportamento foi observado para o iacutendice de Seedor medida indireta da densidade

oacutessea para ambos os ossos aos 7 dias de idade (Figura 8)

79

Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Fecircmur Tiacutebia Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arg na dieta materna

()

7 dias

0943 2930plusmn034 286plusmn008 2803plusmn027 4154plusmn047 271plusmn005 2925plusmn078 1093 2929plusmn042 293plusmn008 2990plusmn123 4162plusmn062 265plusmn005 2945plusmn096 1243 2911plusmn031 283plusmn008 2603plusmn078 4175plusmn042 258plusmn004 2733plusmn063 1393 2912plusmn046 295plusmn008 2920plusmn086 4172plusmn062 273plusmn003 3008plusmn117 1543 2983plusmn031 293plusmn009 2877plusmn068 4269plusmn039 275plusmn002 2897plusmn038

CV 313 690 712 306 377 701 Regressatildeo ns ns ns Ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- ----- ----- 081 -----

21 dias

0943 5001plusmn056 594plusmn019 10198plusmn294 7128plusmn141 526plusmn012 9621plusmn202 1093 5064plusmn036 632plusmn015 10928plusmn175 7197plusmn086 576plusmn008 10720plusmn182 1243 4937plusmn065 574plusmn013 9956plusmn396 6911plusmn094 514plusmn023 9899plusmn357 1393 5002plusmn062 569plusmn011 9822plusmn346 6912plusmn123 512plusmn009 9537plusmn341 1543 5035plusmn026 613plusmn020 11288plusmn337 7005plusmn135 535plusmn011 10928plusmn339

CV 252 657 747 411 635 711 Regressatildeo ns ns ns Ns ns ns R2 ----- ----- ----- ----- ----- -----

ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

80

Tabela 12 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Paracircmetros oacutesseos Fecircmur Tiacutebia

Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arginina () 7 dias 1300 3007plusmn042 309plusmn011 3194plusmn102 4260plusmn041 285plusmn012 3164plusmn122 1450 3022plusmn036 313plusmn007 3333plusmn098 4311plusmn055 293plusmn008 3202plusmn087 1600 3074plusmn023 321plusmn007 3435plusmn102 4352plusmn024 292plusmn004 3405plusmn101 1750 3098plusmn011 322plusmn007 3348plusmn089 4324plusmn044 293plusmn003 3315plusmn114 1900 3058plusmn015 322plusmn012 3540plusmn140 4350plusmn019 305plusmn005 3503plusmn108 CV 225 712 781 220 608 789 Regressatildeo Linear1 ns Linear2 Ns Linear3 Linear4 R2 023 ----- 020 ----- 030 045

21 dias 1300 1300 1450 1600 1750 553plusmn016 9974plusmn408 1450 5032plusmn031 595plusmn015 9973plusmn343 7122plusmn058 533plusmn019 9675plusmn313 1600 5062plusmn068 614plusmn009 10623plusmn306 7102plusmn041 566plusmn015 10453plusmn286 1750 5134plusmn043 597plusmn013 10024plusmn226 7341plusmn180 548plusmn007 9577plusmn168 1900 5111plusmn044 615plusmn013 10942plusmn185 7145plusmn064 562plusmn008 10751plusmn333 CV 231 567 732 333 619 757 Regressatildeo ns ns Linear5 Ns ns ns R2 ----- ----- 030 ----- ---- -----

NS = natildeo significativo 1 Y = 301662+000117500X 2 Y = 322856+000471280X 3 Y = 285333+0000799183X 4 Y = 315921+000526700X 5 Y = 983310+00149518X

255

26

265

27

275

28

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Diacirc

met

ro d

a Tiacute

bia

(mm

)

Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados encontrados para essa idade estatildeo de acordo com os encontrados

por Fernandes (2007) que encontrou efeito linear crescente para o iacutendice de Seedor

quando as aves foram alimentadas com Arg na dieta Aos 21 dias de idade apenas o

iacutendice de Seedor foi afetado de forma linear (Plt005) crescente com o aumento dos

niacuteveis de Arg (Figura 9) O comportamento positivo da suplementaccedilatildeo de arginina sobre

a morfologia do fecircmur e da tiacutebia pressupotildee melhor densidade desses ossos Segundo

Sekine et al (1994) os aminoaacutecidos no o crescimento transverso do osso e essa accedilatildeo

facilita a formaccedilatildeo da matriz e a calcificaccedilatildeo oacutessea

Aleacutem da accedilatildeo da Arg sobre os ossos indiretamente via IGF-I esta tambeacutem eacute

conhecida como precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo pelo qual ela poderia exercer os

seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo Hukkanem et al (1999) sugerem que o

NO pode participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento

298

30

302

304

306

308

31

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Com

prim

ento

- Fecirc

mur

(mm

)

30531

31532

32533

33534

34535

355

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - F

ecircmur

Y = 301662+000117500X R2 = 023 Y = 322856+000471280X R2 = 020

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

Arginina dig ()

82

26

27

28

29

3

31

32

33

34

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Diacirc

met

ro -

Tiacutebi

a (m

m)

30305

31315

32325

33335

34345

35

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - T

iacutebia

Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada ou natildeo com Arg avaliados em

conjunto mostraram que a suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg melhorou o comprimento do

fecircmur e a espessura da tiacutebia Este resultado pode contribuir para melhorar a qualidade

dos ossos dos frangos uma vez que esse eacute um dos maiores problemas enfrentados na

atualidade na avicultura comercial

Tabela 13 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

FC (mm)

FE (mm) FSEE TC

(mm) TE

(mm) TSEE

7 dias Progecircnie

(ssuplementaccedilatildeo)

2933plusmn016

290plusmn003

2838plusmn042

4186plusmn023

268plusmn002

2902plusmn038

Progecircnie (suplementada)

3052plusmn013

317plusmn004

3369plusmn049

4319plusmn017

293plusmn003

3317plusmn050

CV () 014 004 042 021 0026 043 21 dias

Progecircnie (ssuplementaccedil

atildeo)

5008plusmn023b

596plusmn008

10438plusmn170

7031plusmn053

533plusmn007b

10141plusmn162

Progecircnie (suplementada)

5079plusmn021ordf

607plusmn006

10282plusmn150

7157plusmn044

552plusmn006ordf

10086plusmn154

CV () 016 007 140 048 006 136 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Y = 315921+000526700X R2 = 045 Y = 285333+0000799183X R2 = 030

83

96597

97598

98599

995100

1005101

1015102

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig

Iacutendi

ce d

e Se

edor

- Fecirc

mur

Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade

Conclusatildeo

De acordo com os resultados observados conclui-se que os niacuteveis dieteacuteticos de

Arg na dieta das matrizes de corte foram suficientes para melhorar o desempenho da

progecircnie somente na fase inicial de crescimento (1-21 dias de idade) Quando a dieta da

progecircnie tambeacutem foi suplementada com Arg os paracircmetros de desempenho

rendimento de carcaccedila e qualidade oacutessea satildeo melhorados em ambas as fases de criaccedilatildeo

(1-21 dias e 22 a 42 dias de idade) com melhorias imprescindiacuteveis para a qualidade de

carne como a reduccedilatildeo da gordura abdominal

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89

V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos sete dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavra-chave arginina ELISA fitohemaglutinina sistema imune

V - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

humoral and cellular immunity response of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level being considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses

Key words arginine ELISA phytohemagglutinin immune system

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Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo da matriz afeta o desempenho dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias de

vida portanto a necessidade da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos O sistema imune das aves difere dos mamiacuteferos em algumas

caracteriacutesticas particularmente nos aspectos de estrutura e de diferenciaccedilatildeo dos oacutergatildeos

linfoides (Jeurissen et al 1994) cujo desenvolvimento se inicia durante a vida

embrionaacuteria e se prolonga apoacutes a eclosatildeo ou nascimento

As uacuteltimas horas de incubaccedilatildeo e os primeiros dias de vida poacutes-eclosatildeo satildeo

fundamentais para que este desenvolvimento se complete Somente apoacutes a segunda

semana de vida a ave seraacute capaz de produzir suas proacuteprias imunoglobulinas Ateacute laacute a

imunidade herdada da matildee pela absorccedilatildeo das imunoglobulinas presentes no ovo eacute o

uacutenico mecanismo de defesa do neonato contra as agressotildees do meio externo apoacutes a

eclosatildeo (Maiorka et al 2006)

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas A arginina (Arg) eacute

considerada um aminoaacutecido essencial para aves sobretudo na fase inicial por que o

ciclo bioquiacutemico da ureia natildeo eacute funcional em aves Assim estas natildeo podem sintetizar

Arg e satildeo portanto dependentes do fornecimento deste aminoaacutecido nas dietas Dentre

as espeacutecies animais estudadas as aves tecircm a mais alta exigecircncia de Arg (Ball et al

2007) que se deve tambeacutem agrave alta taxa de deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento

das atuais linhagens de corte e o antagonismo com a Lys

A Arg eacute necessaacuteria para siacutentese de vaacuterias compostos tais como ornitina

poliaminas prolina creatina de proteiacutenas oacutexido niacutetrico (NO) e citrulina aleacutem de

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glutamato e agmatina em mamiacuteferos A Arg eacute tambeacutem considerada um potente

secretagogo aumentando a liberaccedilatildeo na corrente sanguiacutenea da insulina hormocircnio do

crescimento (GH) e fator de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I) (Newsholme et

al 2005) Esta accedilatildeo eacute em consequecircncia da raacutepida despolarizaccedilatildeo da membrana

plasmaacutetica ligada ao transporte de aminoaacutecidos com a cadeia lateral positiva

De acordo com Le Flocrsquoh et al (2004) os animais estimulados

imunologicamente podem ter suas necessidades de Arg aumentadas Duas rotas do

metabolismo da Arg satildeo identificadas e conhecidas por ter efeitos imunomodulatoacuterios

diretos A primeira na qual a Arg eacute convertida a ornitina gerando poliaminas que tecircm

papel chave na divisatildeo celular siacutentese de DNA e regulaccedilatildeo do ciclo celular A segunda

corresponde agrave siacutentese do NO induzida por vaacuterios de estiacutemulos inflamatoacuterios como as

endotoxinas bacterianas e as citocinas Essa rota eacute essencial para a atividade citotoacutexica

de macroacutefagos O NO tambeacutem estimula a vasodilataccedilatildeo local e favorece ainda a

reparaccedilatildeo tecidual (Bredt amp Snyder 1994)

Com este trabalho objetivou-se avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina na

dieta das matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie

suplementadas ou natildeo

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

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dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

em um delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-

Arginina incluiacutedos na dieta materna (0 150 300 450 e 600 mgkg da dieta materna)

que equivaleram aos niacuteveis de 0 9431093 12431393 e 1 543 de Arg

digestiacutevel com seis repeticcedilotildees com 35 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo estes substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada boxe foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado um

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

durante todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as aves e as sobras de raccedilatildeo do boxe foram pesadas

ao mesmo tempo para ajustar o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 1) As

dietas experimentais agrave base de milho e farelo de soja foram formuladas de acordo com

os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e recomendaccedilotildees nutricionais de

Rostagno et al (2005) As aves receberam uma uacutenica raccedilatildeo sem suplementaccedilatildeo de

arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz sobre o desempenho

da progecircnie

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Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 018 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 18500 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

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Experimento 2 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes atraveacutes de um delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na

dieta materna de 0 a 600 mgkg da dieta de Arg digestiacutevel acima da recomendaccedilatildeo dos

frangos de corte e seis repeticcedilotildees com 32 aves cada totalizando 30 unidades

experimentais

O manejo realizado nesse experimento foi conduzido conforme descrito no

experimento anterior com diferenccedila com relaccedilatildeo ao tipo de dieta utilizada

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg da dieta acima da exigecircncia dos frangos de corte agrave raccedilatildeo

basal inicial em substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial

corresponderam a 1300 1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela

2) A partir dos 22 dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300

1450 1600 e 1750 de Arg digestiacutevel (Tabela 3)

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Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900 Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6457 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 130 145 160 175 190 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

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Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 075 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 1000 1000 1000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI

VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

Colheita de Sangue e Anaacutelise de Tiacutetulos vacinais

No 7ordm dia de vida antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm foram coletadas

amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo As aves foram vacinadas contra a

doenccedila de New Castle (Fort-Dodgereg) via ocular na dose de 003 mL por ave aos sete e

21 dias de idade A venopunccedilatildeo foi realizada mediante contenccedilatildeo fiacutesica manual dos

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animais preferencialmente na veia jugular direita com seringa de 3 mL e agulha 13x45

e uma quantia de sangue coletada em torno de 1 do peso corporal dos animais O

sangue foi acondicionado em tubos de vidro identificados sem anticoagulante para

obtenccedilatildeo de soro sanguiacuteneo No soro foi avaliada a titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais

contra o viacuterus de Doenccedila Newcastle pelo teste imunoenzimaacutetico (ELISA-teste) As

anaacutelises foram processadas em kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent

Assay) do Laboratoacuterio Idexxreg e os dados obtidos foram expressos em absorbacircncia Os

dados de titulaccedilatildeo de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Anaacutelise Histomorfomeacutetrica

No 7ordm e 21ordm dia de idade o timo a bolsa cloacal o baccedilo e o fiacutegado de duas aves

por repeticcedilatildeo foram coletados totalizando doze aves por tratamento Para a realizaccedilatildeo

dessa coleta as aves foram submetidas ao atordoamento por choque e posterior sangria

Apoacutes o sacrifiacutecio as aves foram pesadas individualmente e as carcaccedilas dessecadas para

remoccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides (Timo Baccedilo e Bolsa de Fabricius) O peso dos oacutergatildeos

linfoides foi obtido imediatamente apoacutes a dessecaccedilatildeo e remoccedilatildeo dos tecidos exoacutegenos

Os oacutergatildeos coletados foram pesados em balanccedila de precisatildeo e o peso da ave foi

devidamente anotado

O peso relativo de cada oacutergatildeo foi obtido pela foacutermula

Peso relativo = (peso oacutergatildeopeso vivo) x 100

Para a medida histomorfomeacutetrica dos foliacuteculos linfoides as bolsas cloacais e o

fiacutegado foram acondicionadas em frascos contendo soluccedilatildeo de formol tamponado a 10

(De Tolosa et al 2003) com finalidade de manter a integridade dos tecidos apoacutes a

morte preservando a arquitetura celular As peccedilas foram incluiacutedas em parafina e levadas

ao microacutetomo rotativo para a realizaccedilatildeo dos cortes transversais no centro do oacutergatildeo com

sete microcircmetros de espessura e corados pelo meacutetodo da hematoxilina e eosina (HE) As

lacircminas foram escaneadas usando-se um ldquoscaner HP ScanJet II v25rdquo sendo o

ldquosoftwarerdquo utilizado para o tratamento das imagens o ldquoPaint Shop Pro v50rdquo A

imagem foi digitalizada brilho (variaacutevel entre 125 e 145) contraste 185 e escala de

800 As imagens foram gravadas com extensatildeo jpg e levadas ao analisador de

imagens Para a leitura das imagens foi utilizado um analisador de imagem

computadorizado IMAGE PROPLUS 52 da Miacutedia Cibertecnics Foi mensurada a

altura de trecircs dobras do tecido linfoide de cada repeticcedilatildeo (12 aves por tratamento) e

destes valores foi obtida a meacutedia

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Nas amostras de fiacutegado foi analisada a presenccedila de aglomerados linfoides As

lacircminas com porccedilotildees do fiacutegado foram analisadas em toda sua extensatildeo e os

aglomerados linfoides foram quantificados atraveacutes de microscopia de luz com aumento

de 10X (Olympus BH2 Olympus America INC NY USA)

Fitohemaglutinina (PHA)

Aos 35 dias de idade duas aves por repeticcedilatildeo totalizando 12 aves por tratamento

foram marcadas com anilhas numeradas e utilizadas para avaliar a imunidade mediada

por ceacutelulas in vivo (Corrier amp DeLoach 1990) Cada ave foi inoculada

intradermicamente no espaccedilo interdigital entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata direita com 01

mL de uma soluccedilatildeo fitohemaglutinina PHA-Mreg (1057601 - Invitrogen) Como controle

negativo 01 mL de soro fisioloacutegico esteacuteril foi inoculado entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata

esquerda O espessamento da pele de ambas as patas foi aferido em miliacutemetros

utilizando-se um paquiacutemetro digital antes da inoculaccedilatildeo e apoacutes trecircs seis 12 e 24 horas

apoacutes a inoculaccedilatildeo O caacutelculo (Corrier amp DeLoach 1990) apresentou-se da seguinte

forma Reaccedilatildeo = resposta a fitohemaglutinina ndash resposta do controle na qual a resposta

a fitohemaglutinina eacute medida pela espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo menos

a espessura no tempo zero (antes da inoculaccedilatildeo) A resposta do controle eacute medida pela

espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo (Soro) menos a espessura no tempo zero

(antes da inoculaccedilatildeo)

Avaliaccedilatildeo da Atividade Fagociacutetica de Macroacutefagos

Para avaliaccedilatildeo da atividade fagociacutetica de macroacutefagos foram utilizadas duas aves

por repeticcedilatildeo totalizando quatro aves por tratamento As aves foram inoculadas no 35ordm

dia de vida atraveacutes de injeccedilatildeo intra-abdominal de Sephadex G-50reg (Sigma) a 3 (10

mL100g de peso vivo) (Qureshi et al 1986 Gore amp Qureshi 1997 Konjufca 2004)

Utilizaram-se para esse procedimento cateteres intravasculares G-14 Apoacutes 42

horas as aves foram submetidas a atordoamento por eletronarcose e sacrificadas atraveacutes

de desligamento cervical Foram lavadas (detergente neutro) e sanitizadas (aacutelcool 70)

As aves foram transportadas ao laboratoacuterio onde se procedeu a abertura da cavidade

abdominal que foi posteriormente lavada com 20 mL de soluccedilatildeo de PBS esteacuteril

heparinizada contendo 05 UIL (Liqueminereg 25000 UI5mL ndash Roche)

Coletaram-se aproximadamente 15 mL de liacutequido abdominal com auxiacutelio de

pipetas Pasteur que foi imediatamente acondicionado em tubos Falcon em banho de

100

gelo O material foi centrifugado a 1500 rpm10 minutos sendo o ldquopelletrdquo

ressuspendido em 2 mL de meio RPMI 1640reg (Sigma) Adicionou-se 150 μL dessa

suspensatildeo a cada well da placa de cultura (24 poccedilos) contendo lamiacutenula de 13 mm de

diacircmetro Incubou-se a temperatura ambiente por uma hora Lavou-se a placa com PBS

esteacuteril gelado para remover as ceacutelulas natildeo aderentes Em seguida adicionou-se 150 μL

de suspensatildeo a 3 de eritroacutecitos de carneiros em meio RPMI 1640reg (Sigma)

incubando-se em temperatura ambiente em concentraccedilatildeo de 5 de gaacutes carbocircnico por

uma hora Lavou-se com PBS esteacuteril gelado para remover os eritroacutecitos que natildeo

aderiram Em seguida realizou-se a coloraccedilatildeo utilizando-se kit comercial (Panoacutetico

Raacutepido LBreg - Laborclin)

Apoacutes 24 horas as lacircminas foram montadas utilizando-se Permountreg Foram

contados em cada lamiacutenula 300 macroacutefagos e verificado o nuacutemero destas ceacutelulas que

continham hemaacuteceas fagocitadas A atividade fagociacutetica foi calculada considerando-se o

nuacutemero de macroacutefagos contendo hemaacuteceas fagocitadas dividido pelo nuacutemero total de

macroacutefagos contados

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

101

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Resultados e Discussatildeo

Os dados meacutedios dos pesos relativos de oacutergatildeos linfoides de frangos de corte

alimentados com dietas natildeo suplementadas estatildeo na Tabela 5 A suplementaccedilatildeo das

matrizes de corte natildeo influenciou o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie

natildeo suplementada com Arg (Pgt005) Da mesma maneira quando houve a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg para a progecircnie tambeacutem natildeo foi verificado (Pgt005)

efeito sobre o peso relativo dos oacutergatildeos linfoides dessas aves (Tabela 6)

102

Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg das Matrizes () 7 dias 21 dias

0943 058plusmn003 054plusmn004 1093 055plusmn003 056plusmn005 1243 056plusmn003 057plusmn003 1393 052plusmn004 057plusmn004 1543 052plusmn003 051plusmn005 CV 1410 1840

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

0943 006plusmn0005 011plusmn001 1093 008plusmn0007 011plusmn001 1243 012plusmn0036 009plusmn001 1393 007plusmn0007 010plusmn001 1543 009plusmn0007 010plusmn001 CV 4968 2463

Regressatildeo ns ns Baccedilo()

0943 015plusmn001 024plusmn001 1093 017plusmn001 022plusmn002 1243 016plusmn001 021plusmn001 1393 015plusmn001 022plusmn003 1543 013plusmn001 021plusmn001 CV 1885 1868

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

O timo e a bolsa cloacal satildeo oacutergatildeos linfoides primaacuterios que representam siacutetios

de maturaccedilatildeo de linfoacutecitos T e B respectivamente Estes oacutergatildeos tecircm fundamental

importacircncia no periacuteodo poacutes-eclosatildeo poreacutem agrave medida que as aves se desenvolvem e se

aproximam da maturidade sexual sofrem involuccedilatildeo fisioloacutegica (Morgullis 2002)

No contexto do desenvolvimento e maturaccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides trabalhos

desenvolvidos com mamiacuteferos demonstram que as respostas imunes podem ser

influenciadas pela Arg dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al 1998 Lewis amp

Langkamp-Henken 2000) Experimentos desenvolvidos com animais jovens

demonstraram efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina como o aumento

do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos tiacutemicos Os efeitos

imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais estressados ou

imunossupremidos

103

Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias

1300 053plusmn005 056plusmn004 1450 057plusmn004 057plusmn003 1600 059plusmn004 059plusmn003 1750 051plusmn003 048plusmn005 1900 058plusmn004 053plusmn004 CV 1910 1790

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

1300 016plusmn0011 025plusmn002 1450 015plusmn0012 020plusmn001 1600 018plusmn0007 022plusmn002 1750 019plusmn0016 026plusmn003 1900 015plusmn0007 023plusmn001 CV 1621 2021

Regressatildeo ns ns Baccedilo ()

1300 007plusmn0009 008plusmn001 1450 009plusmn0008 010plusmn001 1600 008plusmn0006 009plusmn001 1750 008plusmn0005 011plusmn001 1900 007plusmn0007 010plusmn001 CV 2227 2151

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

Para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de Arg foram

observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

nutricionais estabelecidas Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de

Arg plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular (Kidd 2004)

Ao contraacuterio dos resultados observados nesse experimento Jahanian (2009)

observou que animais na fase inicial com dietas suplementadas com Arg e com baixo

niacutevel proteico apresentaram aumento do peso relativo do timo indicando assim que a

Arg eacute necessaacuteria para a resposta oacutetima da imunidade celular

Quando se contrastam os dados do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (Tabela 7)

verificou-se a influencia da suplementaccedilatildeo de Arg no peso da bolsa cloacal (Plt005) no

periacuteodo inicial de criaccedilatildeo Esse aumento eacute de grande importacircncia uma vez que a bolsa

cloacal eacute o principal siacutetio de maturaccedilatildeo dos linfoacutecitos B que satildeo essenciais ao sistema

imune das aves Na fase de 1 a 7 dias de idade esse incremento pode refletir a melhoria

104

das condiccedilotildees imunitaacuterias jaacute que nesse periacuteodo os desafios sanitaacuterios podem

comprometer todo desempenho dessa ave ateacute o final de sua criaccedilatildeo

Tabela 7 ndash Meacutedias e erro padratildeo do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

7 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada) 054plusmn001 015plusmn0005b 0085plusmn0008

Progecircnie (suplementada) 056plusmn002 017plusmn0006ordf 0079plusmn0003

CV () 002 0005 0006 21 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada)

055plusmn001 022plusmn0007 011plusmn0005

Progecircnie (suplementada)

054plusmn002 023plusmn0009 009plusmn0004

CV () 002 008 0004 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

A anaacutelise histomorfomeacutetrica do fiacutegado natildeo mostrou influecircncia (Pgt005) das

dietas das matrizes nos aglomerados linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo (Tabela

8) Da mesma maneira as dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal natildeo foram

influenciadas (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo ou natildeo de Arg na dieta (Tabela 8)

Existe relaccedilatildeo direta entre o fiacutegado e a bolsa cloacal Nas aves os linfoacutecitos B

responsaacuteveis pela produccedilatildeo de anticorpos envolvidos na resposta imunoloacutegica humoral

satildeo produzidos no fiacutegado do embriatildeo no saco viteliacutenico e na medula oacutessea na fase

inicial da incubaccedilatildeo Apoacutes isso migram para a bolsa cloacal e sofrem amadurecimento

e diferenciaccedilatildeo por ateacute dez semanas Daiacute partem para colonizar outros oacutergatildeos como o

baccedilo e a glacircndula de Harder (Butcher amp Miles 2003) A bolsa cloacal eacute constituiacuteda de

linfoacutecitos incrustados em tecido epitelial cujas dobras se estendem no interior do

luacutemen onde se espalham os foliacuteculos linfoides Seus foliacuteculos contecircm mais de 90 de

ceacutelulas B (Tizard 1998)

105

Tabela 8 - Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg

Aglomerados Linfoacuteides Comprimento das dobras Progecircnie natildeo Suplementada Progecircnie natildeo Suplementada

Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 0943 105plusmn010 196plusmn041 1443plusmn097 3247plusmn198 1093 098plusmn028 137plusmn021 1394plusmn225 3066plusmn240 1243 077plusmn004 178plusmn029 1503plusmn060 3042plusmn109 1393 080plusmn015 170plusmn043 1449plusmn068 3112plusmn187 1543 096plusmn018 232plusmn037 1464plusmn149 3222plusmn195 CV() 4398 4708 563 915 Regressatildeo ns ns ns ns Progecircnie Suplementada Progecircnie Suplementada 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 1300 076plusmn010 168plusmn035 1936plusmn206 3535plusmn191 1450 049plusmn015 216plusmn041 1865plusmn022 4027plusmn1244 1600 072plusmn024 189plusmn022 2035plusmn064 3331plusmn036 1750 053plusmn005 192plusmn036 2195plusmn139 4487plusmn1540 1900 053plusmn012 213plusmn025 1905plusmn128 2562plusmn111 CV() 5807 4141 473 5359 Regressatildeo ns ns ns ns

Assim a progecircnie que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg natildeo

apresentou produccedilatildeo de linfoacutecitos B aumentada nem a aacuterea de desenvolvimento e

diferenciaccedilatildeo dos linfoacutecitos B prejudicada ou melhorada pela Arg (Pgt005)

Na Tabela 9 estatildeo agraves meacutedias obtidas da resposta imune celular da progecircnie com

dieta suplementada medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) para estiacutemulo de

proliferaccedilatildeo celular Dentro desse contexto observou-se que 12 horas apoacutes a injeccedilatildeo de

PHA foi possiacutevel verificar efeito quadraacutetico com aumento (Plt005) na resposta celular

das aves alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg em que a maior

resposta foi obtida com 1574 de Arg dig (Figura 1)

Segundo Corrier amp DeLoach (1990) a aplicaccedilatildeo desse teste permite a raacutepida

avaliaccedilatildeo da competecircncia imunoloacutegica celular Os basoacutefilos ceacutelulas comumente

associadas a esses processos apresentam heparina e proteases na composiccedilatildeo de seus

gracircnulos agindo intensamente nos processos de hipersensibilidade Aleacutem disso

produzem citocinas cuja participaccedilatildeo estaacute ligada aos processos inflamatoacuterios (Abbas et

al 2007)

106

Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Arginina 3 horas 6 horas 12 horas 24 horas

1300 1010plusmn0062 0793plusmn0041 0549plusmn0097 0506plusmn0036 1450 0853plusmn0077 0639plusmn0065 0631plusmn0051 0450plusmn0133 1600 0918plusmn0053 0738plusmn0040 0702plusmn0052 0543plusmn0065 1750 0797plusmn0074 0783plusmn0058 0597plusmn0061 0552plusmn0066 1900 0933plusmn0044 0777plusmn0038 0499plusmn0059 0453plusmn0062 CV 1715 1630 2724 3875 Regresatildeo ns ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- 093 -----

ns = Natildeo significativo 1 Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2 R2 = 093

Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Quando se avaliou a atividade fagociacutetica dos macroacutefagos da progecircnie

suplementada e natildeo suplementada verificou-se que os niacuteveis crescentes de Arg na dieta

natildeo afetaram (Pgt005) essa funccedilatildeo (Tabela 10) Os macroacutefagos satildeo ceacutelulas do sistema

mononuclear fagocitaacuterio (McCorkle 1998) integrantes da imunidade inata das aves

importantes tambeacutem para a imunidade adaptativa (Abbas et al 2008) atuando nos

processos de defesa do organismo destruindo agentes estranhos e tambeacutem secretando

citocinas que atuam no processo inflamatoacuterio As principais funccedilotildees executadas por essa

ceacutelula satildeo a fagocitose destruiccedilatildeo de bacteacuterias (Qureshi et al 1986) secreccedilatildeo de

prostaglandinas e citocinas e apresentaccedilatildeo de antiacutegeno para desenvolvimento da

resposta imune celular (Abbas et al 2008)

Segundo Johaniam (2009) satildeo identificadas duas vias de accedilatildeo

imunomodulatoacuteria da Arg in vivo A primeira ocorre atraveacutes da accedilatildeo da arginase que

converte a Arg em ureia e ornitina Neste processo ocorre a produccedilatildeo de poliaminas

pela accedilatildeo da ornitina decarboxilase Esta rota da siacutentese de poliaminas pode ser o

Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2R2 = 093

1574

107

caminho pelo qual a Arg aumenta a mitogecircnese dos linfoacutecitos (Klein amp Morris 1978)

A segunda via ocorre pela siacutentese de NO a partir da a partir da Arg pela accedilatildeo do oacutexido

niacutetrico sintetase resultando na formaccedilatildeo de oacutexido niacutetrico e citrulina Essa rota eacute

essencial para atividade citotoacutexica dos macroacutefagos

Tabela 10 ndash Meacutedias e erros padrotildees da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Macroacutefagos com eritroacutecitosmacroacutefagos contados Arginina Progecircnie Suplementada

1300 1570plusmn529 1450 2030plusmn480 1600 1650plusmn359 1750 2150plusmn500 1900 1830plusmn250 CV 545 Regresatildeo ns ns = Natildeo significativo

Quando avaliados os tiacutetulos de anticorpos da progecircnie verificou-se que a

alimentaccedilatildeo das matrizes com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg natildeo influenciou

os tiacutetulos de anticorpos (Pgt005) da progecircnie natildeo suplementada (Tabela 11) Para as

aves suplementadas verifica-se um efeito linear decrescente (Plt005) aos sete dias de

idade e efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade em que o niacutevel de 1674 de

Arg dig proporcionou o maior tiacutetulo de anticorpos (Tabela 12)

Os resultados observados na progecircnie suplementada mostraram-se compatiacuteveis

com as respostas das aves a campo nas quais inicialmente satildeo observados maiores

tiacutetulos de anticorpos decorrentes da imunidade materna seguido de uma queda que nas

condiccedilotildees experimentais eacute resultado da neutralizaccedilatildeo desses anticorpos pelos antiacutegenos

vacinais e por fim uma nova elevaccedilatildeo dos tiacutetulos

Este resultado concorda com o observado por outros autores Tayade et al

(2006) demonstraram que a resposta vacinal contra o viacuterus da doenccedila de Gumboro de

frangos suplementados com 2 de Arg foi 20 mais eficiente que a resposta induzida

apenas pela vacina A elevada resposta humoral e a proteccedilatildeo observada no grupo de

aves vacinado e com dieta suplementada com Arg segundo estes autores pode ser

atribuiacuteda ao nuacutemero de funccedilotildees imunorregulatoacuterias da Arg sobre o sistema

imunoloacutegico A Arg eacute necessaacuteria para a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas B e tambeacutem estaacute

envolvida na liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da bolsa ou da medula oacutessea (De Jonge et al

108

2002) Ainda segundo Abdukalykova e Ruiz-Feria (2006) niacuteveis adicionais de Arg

podem acelerar a produccedilatildeo de anticorpos em frangos de corte

29

295

3

305

31

315

32

325

33

335

34

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s(7

dia

s)

0

05

1

15

2

25

3

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s (2

8 di

as)

Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

1674

109

Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Niacuteveis de Arginina na dieta materna ()

Idade 0943 1093 1243 1393 1543 CV() Regressatildeo R2

07 dias 317plusmn099 323plusmn011 301plusmn008 324plusmn007 316plusmn015 831 ns -----

14 dias 262plusmn009 257plusmn003 242plusmn011 262plusmn011 257plusmn003 792 ns -----

21 dias 232plusmn010 247plusmn005 211plusmn010 228plusmn011 241plusmn007 941 ns -----

28 dias 241plusmn028 186plusmn014 248plusmn022 231plusmn019 214plusmn024 2378 ns -----

35 dias 275plusmn017 284plusmn015 271plusmn013 286plusmn020 291plusmn011 1361 ns -----

Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades

Niacuteveis de Arginina ()

Idade 1300 1450 1600 1750 1900 CV() Regressatildeo R2

07 dias 331plusmn012 336plusmn010 301plusmn012 329plusmn009 299plusmn009 798 Linear1 012

14 dias 226plusmn008 218plusmn019 219plusmn023 207plusmn014 245plusmn009 1715 ns -----

21 dias 232plusmn007 239plusmn006 236plusmn006 246plusmn012 240plusmn009 829 ns -----

Niacuteveis de Arginina ()

1150 1300 1450 1600 1750 CV() Regressatildeo R2

28 dias 171plusmn035 279plusmn009 298plusmn006 278plusmn019 240plusmn012 1961 Quadraacutetica2 026

35 dias 268plusmn023 299plusmn012 296plusmn018 280plusmn023 313plusmn011 1535 ns -----

110

Conclusatildeo

As dietas suplementadas com Arg mostraram-se necessaacuterias para o oacutetimo

desempenho do sistema imune celular e humoral da progecircnie natildeo bastando somente agrave

suplementaccedilatildeo das matrizes de corte

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111

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vii

BIOGRAFIA

LUCIANA MARIA GARCIA DE SOUZA DA SILVA filha de Vera Luacutecia

Aparecida Garcia de Souza e Joatildeo Gusman de Souza nasceu em Maringaacute Paranaacute no dia

18 de maio de 1981

Em marccedilo de 2005 conclui o curso de Zootecnia pela Universidade Estadual de

Maringaacute

Em marccedilo de 2005 iniciou no curso de Poacutes- graduaccedilatildeo em Zootecnia em niacutevel de

mestrado aacuterea de concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal na Universidade Estadual de Maringaacute e

no dia 3 de marccedilo de 2007 submeteu-se a banca para defesa de Dissertaccedilatildeo

Em marccedilo de 2007 iniciou no curso de Poacutes-graduaccedilatildeo em Zootecnia em niacutevel de

doutorado aacuterea de concentraccedilatildeo Produccedilatildeo Animal na Universidade Estadual de Maringaacute

realizando estudos na aacuterea de nutriccedilatildeo de frangos de corte No dia 17 de novembro de

2010 submeteu-se a banca para defesa da Tese

viii

IacuteNDICE

Paacutegina

LISTA DE TABELAS ix LISTA DE FIGURAS xi I - INTRODUCcedilAtildeO 17 11 REVISAtildeO DA LITERATURA 19

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie 19 112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves 20 REFEREcircNCIAS 32

II - OBJETIVOS GERAIS 39 21 Objetivos Especiacuteficos 39

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo 40

Resumo 40 Introduccedilatildeo 42 Material e meacutetodos 43 Resultados e Discussatildeo 47 Conclusatildeo 52 Referecircncias 53

IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie 57

Resumo 57 Introduccedilatildeo 59 Material e Meacutetodos 60 Resultados e discussatildeo 67 Conclusatildeo 83 Referecircncias 83

V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie 89

Resumo 89 Introduccedilatildeo 91 Material e Meacutetodos 92 Resultados e Discussatildeo 101 Conclusatildeo 110 Referecircncias 110

VI - CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 113

ix

LISTA DE TABELAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental 45 Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 48 Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 50 Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico 51 Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 52

Capiacutetulo IV Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg48 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)50 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)51 Tabela 4 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg55 Tabela 5 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg56 Tabela 6 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg60 Tabela 7 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementadas provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg64 Tabela 8 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento da progecircnie suplementada com dietas suplementadas contendo niacuteveis de Arg64

x

Tabela 9 ndash Meacutedias de porcentagem de carcaccedila (CARC) porcentagem de peito (PEITO) porcentagem de coxa (COXA) porcentagem de asa (ASA) porcentagem de gordura abdominal (GORDURA) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg65 Tabela 10 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de arginina67 Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg69 Tabela 12 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade72

Capiacutetulo V Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das dietas experimentais das matrizes de frangos de corte no periacuteodo experimental83 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg85 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)86 Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (21-42 dias)86 Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de arginina89 Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg90 Tabela 7 ndash Meacutedias do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade91 Tabela 8 ndash Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg92 Tabela 10 ndash Meacutedias e erro padratildeo da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg94 Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades94

xi

LISTA DE FIGURAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel33 Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg34 Capiacutetulo IV Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 70 Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 71 Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 72 Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 72 Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 75 Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 77 Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 81 Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade 82 Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade 83

xii

Capiacutetulo IV Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 106 Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 108

RESUMO

Foram realizados trecircs experimentos com o objetivo de avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na nutriccedilatildeo de matrizes de corte e a modulaccedilatildeo da resposta imune e do desenvolvimento esqueleacutetico na progecircnie No primeiro experimento avaliou-se o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e qualidade de ovos Para tanto foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se um aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve uma queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arginina respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo O segundo experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo

xiv

suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos O terceiro experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos 7 dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavras-chave desempenho produtivo qualidade de ovos qualidade oacutessea sistema imune

ABSTRACT

Three experiments were conducted to evaluate the effect of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder nutrition and modulation of the immune systems and skeletal development in the progeny In the first experiment the effect of Arg supplementation on heavy breed henrsquos productive performance and egg quality was evaluated ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance In the second experiment the effects of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder hens diet on performance carcass yield and bone parameters was evaluated in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units The body weight gain feed intake and feed gain ratio was calculated to evaluate the performance The carcass yield was evaluated by the carcass percentage leg breast and wing yield and abdominal fat The bone quality was assessed by the analysis of the femur and tibia lengths diameters and Seedor index In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that

16

just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) In third experiment the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses was evaluated in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by the diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses According to the results it is possible to conclude that supplementation with Arg provided improvements in the eggs weight of broilers and evaluations in the progeny demonstrated that there is a need to supplement the diet with Arg in order to get the best performance index bone quality and humoral and cellular immunity

Key-words bone quality egg quality productive performance immune system

17

I - INTRODUCcedilAtildeO

Vaacuterios fatores afetam o desempenho de frangos de corte como a geneacutetica

nutriccedilatildeo sanidade manejo e ambiecircncia Entretanto fatores estabelecidos antes mesmo da

incubaccedilatildeo e da eclosatildeo como a idade das matrizes e o peso dos ovos satildeo preponderantes

para o desenvolvimento inicial das aves tendo consequecircncia em todo o crescimento

(Pedroso et al 2005)

As exigecircncias nutricionais de uma reprodutora leve ou pesada devem atender agraves

necessidades do embriatildeo em desenvolvimento fora do organismo materno (Campos

2003) O ovo eacute formado basicamente pela casca (10) clara (60) e gema (30) Desse

modo os niacuteveis nutricionais da matriz devem ser dirigidos para formaccedilatildeo desses

componentes porque estes satildeo responsaacuteveis pela nutriccedilatildeo do embriatildeo

O ovo tem aacutegua proteiacutena gordura e cinza na sua composiccedilatildeo quiacutemica A gema

apresenta papel importante no desenvolvimento do embriatildeo visto que este formaraacute o saco

vitelino apoacutes o quarto dia de vida O saco vitelino constitui a uacutenica fonte fornecedora de

energia para o desenvolvimento do embriatildeo Deste satildeo absorvidos todos os nutrientes pelo

embriatildeo como partiacuteculas lipoproteicas e proteicas Estas uacuteltimas podem ser absorvidas

intactas porque a produccedilatildeo de proteinases pelo embriatildeo aumenta de acordo com o seu

desenvolvimento Aleacutem disso parte da absorccedilatildeo de proteiacutenas ocorre na forma de

aminoaacutecidos (Campos 2003) O saco viteliacutenico tambeacutem eacute a uacutenica fonte de

18

imunoglobulinas produzidas pelo organismo materno capazes de manter certa imunidade

ao pintinho no periacuteodo inicial de sua vida

Os aminoaacutecidos presentes na gema podem ser suficientes durante o processo de

eclosatildeo apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

processo de crescimento (Ohta et al 2004)

Logo apoacutes a eclosatildeo a maior parte da demanda de energia e de proteiacutena das aves eacute

direcionada para o desenvolvimento do trato digestoacuterio principalmente intestinos (Fisher

da Silva 2001) Este crescimento preferencial ocorre tanto na presenccedila quanto na ausecircncia

do alimento (Laurentiz et al 2001) Quando estes nutrientes natildeo satildeo fornecidos pela

raccedilatildeo os neonatos utilizam o saco vitelino como suplemento energeacutetico e como fonte

proteica para o crescimento intestinal Entretanto segundo Dibner et al (1998) 20 da

proteiacutena residual do saco vitelino satildeo representadas pelas imunoglobulinas maternais e

que a gordura bruta residual eacute constituiacuteda basicamente de trigliceacuterides fosfoliacutepides e

colesterol

Assim a nutriccedilatildeo das matrizes de corte pode enriquecer a gema e produzir pintos

de alta qualidade Entretanto com o passar dos anos natildeo houve muita diferenccedila nos niacuteveis

nutricionais propostos para nutriccedilatildeo das matrizes de corte o que ocorre principalmente em

razatildeo das grandes diferenccedilas existentes entre as linhagens comerciais existentes Segundo

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) para matrizes pesadas existe uma pausa nas pesquisas orientadas

para a determinaccedilatildeo das exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos essenciais

Dentre os aminoaacutecidos utilizados na formulaccedilatildeo de raccedilotildees principalmente as

voltadas para o conceito de proteiacutena ideal a arginina (Arg) pode exercer efeitos positivos

pois este aleacutem de ser constituintes de proteiacutenas ainda estaacute envolvido na siacutentese de creatina

e de poliaminas de prolina como substrato para a siacutentese de colaacutegeno e do oacutexido niacutetrico

(NO) e na secreccedilatildeo do hormocircnio de crescimento (GH) e dos fatores de crescimento

19

semelhantes agrave insulina (IGF) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave (Harvey et

al 2001)

Como as aves natildeo apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem

exclusivamente da Arg sinteacutetica principalmente no periacuteodo inicial de produccedilatildeo (Allen amp

Baker 1972) Aleacutem disso em dietas agrave base de milho e de farelo de soja a Arg eacute

considerada o quinto aminoaacutecido limitante para frangos de corte apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Vaacuterios autores tecircm proposto que a nutriccedilatildeo das matrizes afeta o desempenho dos

pintos (Uni amp Ferket 2004) Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem

nos primeiros dias de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com

funccedilatildeo imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade

materna e na resposta imune dos pintos

11 REVISAtildeO DA LITERATURA

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie

O sistema imune das aves eacute complexo e compreende uma seacuterie de funccedilotildees

celulares e fatores soluacuteveis que trabalham juntos para produzir uma resposta imune

protetora Os oacutergatildeos linfoides primaacuterios das aves satildeo a bolsa cloacal e o timo Os oacutergatildeos

como medula oacutessea baccedilo glacircndula Harderiana placas de Payer e tonsilas cecais satildeo

considerados oacutergatildeos linfoides secundaacuterios

Com base nesses componentes as aves podem apresentar respostas a vaacuterios

antiacutegenos divididas em dois tipos a imunidade passiva e a ativa A imunidade passiva eacute

transferida para a progecircnie pelas reprodutoras via saco viteliacutenico Atraveacutes da imunidade

passiva eacute possiacutevel desenvolver a resposta imune especiacutefica sem que haja um envolvimento

do organismo pela transferecircncia de ceacutelulas ou de anticorpos de outro indiviacuteduo jaacute

20

imunizado A imunidade ativa por sua vez eacute decorrente da exposiccedilatildeo das aves a um

antiacutegeno estranho que pode ser de origem vacinal ou um agente patoacutegeno

Nas aves a imunidade passiva eacute passada da matriz ateacute o pintinho pelo do ovo no

processo de produccedilatildeo de ovo imunoglobulinas (Ig) Y presentes no sangue das matrizes

chega ateacute o oviduto e se deposita na gema do ovo enquanto durante a secreccedilatildeo do

albuacutemen que ocorre na porccedilatildeo magnum do oviduto secreta tambeacutem IgA e IgM Eacute essa

imunidade enviada pela matildee que protege esses pintos nos primeiros dias de vida contra

vaacuterios agentes que estatildeo presentes no campo (Santin 2009) Haacute relaccedilatildeo direta entre os

tiacutetulos de seacutericos de Ig da matildee e a quantidade repassada ao ovo Assim eacute de extrema

importacircncia que o pintinho absorva adequadamente e rapidamente essa gema para que ele

tenha acesso a estas Ig (Santin 2009) Maiorka (2002) demonstrou que jejum de aacutegua e de

alimento por 12 horas apoacutes a eclosatildeo diminui a absorccedilatildeo da gema e afetam o

desenvolvimento da mucosa intestinal de frangos de corte Vargas et al (2009) mostraram

que os tiacutetulos seacutericos de anticorpos contra a vacina de doenccedila de Newcastle (NDV) foram

mais baixos em pintos submetidos a 12 horas de jejum poacutes eclosatildeo quando comparados

agravequeles que consumiram aacutegua e alimento logo apoacutes a eclosatildeo De fato o atraso no

consumo de alimento dos animais pode diminuir a absorccedilatildeo da gema e consequentemente

a passagem da imunidade passiva da matildee para o pintinho Dibner et al(1998) sugerem que

quando o pintinho natildeo recebe rapidamente aacutegua e alimento apoacutes a eclosatildeo acaba utilizando

as Ig e os fosfolipiacutedios da gema como alimento diminuindo assim sua funccedilatildeo na proteccedilatildeo

animal

112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves

A Arg eacute um aminoaacutecido essencial em aves principalmente na fase inicial Isso

ocorre porque as aves diferentemente dos mamiacuteferos natildeo possuem o ciclo da ureia

funcional necessitando da fonte exoacutegena de suplementaccedilatildeo Evoy et al (1998) em seu

21

trabalho relataram o papel da Arg como essencial na estimulaccedilatildeo do sistema imune do

hospedeiro

As vias metaboacutelicas que envolvem a Arg satildeo complexas e demonstradas

resumidamente a seguir

Adaptado de Duff amp Daly (2002)

Juntamente com a complexidade dessas vias soma-se a variada localizaccedilatildeo das

enzimas envolvidas no meio intracelular como nos tecidos Com exceccedilatildeo dos enteroacutecitos

22

em receacutem-nascidos nenhum outro tipo de ceacutelula conteacutem todas as enzimas necessaacuterias para

a siacutentese de Arg (Wu amp Morris 1998)

A Arg eacute ativamente absorvida pelo intestino pelo sistema de transporte soacutedio-

dependente A alta atividade da arginase no enteroacutecito converte cerca de 40 da dieta de

Arg em citrulina a qual eacute liberada na circulaccedilatildeo (Castillo et al 1993) Quando a Arg cai

na corrente sanguiacutenea cerca de 15 eacute eliminada pelo fiacutegado e o restante entra na

circulaccedilatildeo sistecircmica (OrsquoSullivan et al 1998) A Arginina eacute sintetizada a partir da

citrulina principalmente nos rins e eacute entatildeo liberada na circulaccedilatildeo para ser utilizada pelos

demais tecidos

O oacutexido niacutetrico (NO) constitui uma das menores e mais simples moleacuteculas

biossintetizadas (Morris et al 1994) O NO eacute um radical livre gasoso inorgacircnico e

identificado como mensageiro molecular extremamente laacutebil (meia vida bioloacutegica em

torno de segundos) O NO media vaacuterios fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente

do endoteacutelio citotoxicidade mediada por macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria Eacute produzido pelas ceacutelulas endoteliais neurocircnios macroacutefagos e

tecidos entre eles a hipoacutefise que age paracrinamente exercendo efeitos intra e

extracelulares em vaacuterios sistemas fisioloacutegicos (Kutchai 1998)

Palmer et al (1988) demonstraram que a L-Arg eacute o precursor fisioloacutegico do NO

nas ceacutelulas endoteliais Com base nesta informaccedilatildeo vaacuterios grupos de investigadores

suspeitaram que o NO fosse o provaacutevel precursor da siacutentese de NO3- e NO2

- pelos

macroacutefagos Subsequentemente esta hipoacutetese foi comprovada e ficou demonstrado que o

NO eacute o principal mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a

mais importante moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al 1988 e Marletta

et al 1988 citados por Dusse et al 2003)

23

Este composto eacute produzido a partir da oxidaccedilatildeo da L-arginina pela accedilatildeo da enzima

oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) uma enzima Ca++-calmodulina-dependente Por este

mecanismo eacute gerado citrulina como produto final (Kiechele amp Malinski 1993)

O surgimento do NO como agente da sinalizaccedilatildeo celular eacute uma importante

descoberta da fisiologia humana e animal nos uacuteltimos anos O NO participa de vaacuterios

fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente do endoteacutelio citotoxicidade mediada por

macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O NO eacute o principal

mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a mais importante

moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al1988 e Marletta et al 1988 citados

por Dusse et al 2003)

Existem trecircs formas de NOS sendo a NOS induzida (iNOS) e duas NOS

constitutivas (cNOS) O NO eacute sintetizado pela ativaccedilatildeo da cNOS basal (em ceacutelulas

endoteliais vasculares e neurocircnios) segundos a minutos apoacutes o aumento na concentraccedilatildeo

de caacutelcio em resposta agrave ativaccedilatildeo de receptores da superfiacutecie celular e mecanismos de

transduccedilatildeo de sinal (Adams 1996)

Ao contraacuterio a iNOS natildeo depende de caacutelcio para ativaccedilatildeo mas a siacutentese de

mRNA da iNOS eacute necessaacuteria para sua atividade A NOS induzida natildeo eacute detectaacutevel em

condiccedilotildees basais As LPS ou endotoxinas bacterianas junto com citocinas como TNFα

IL-1β ou IF-γ induzem a siacutentese de iNOS de duas a quatro horas apoacutes a exposiccedilatildeo ao

agente A iNOS requer siacutentese proteica para sua expressatildeo e sua atividade persiste por

mais de 24 horas e sintetiza NO em concentraccedilotildees nanomolares 1000 vezes maior que

cNOS (Davies et al 1995)

A expressatildeo da iNOS eacute o resultado da resposta inflamatoacuteria localizada ou difusa

resultante da infecccedilatildeo ou dano tecidual Segundo Salvemini et al (1996) o NO eacute potente

vasodilatador e seu envolvimento na resposta inflamatoacuteria pode ter relaccedilatildeo com sua

24

habilidade em aumentar a permeabilidade vascular e o edema atraveacutes de mudanccedilas no

fluxo sanguiacuteneo local e do aumento na produccedilatildeo de prostaglandinas proinflamatoacuterias

A expressatildeo de iNOS em endotoxemia eacute citoprotetoacuteria inibindo microtrombose

pela prevenccedilatildeo de adesatildeo plaquetaacuteria e danos mediados por radicais Por outro lado a

citotoxidade do NO resulta da sua accedilatildeo direta ou da sua reaccedilatildeo com outros compostos

liberados durante o processo inflamatoacuterio A base bioquiacutemica para a accedilatildeo direta do NO

consiste na sua reaccedilatildeo com metais (especialmente o ferro) presentes nas enzimas do seu

alvo (Moncada 1991 James 1995) Desta forma satildeo inativadas enzimas cruciais para o

ciclo de Krebs para a cadeia de transporte de eleacutetrons para a siacutentese de DNA e para o

mecanismo de proliferaccedilatildeo celular Em processos infecciosos ceacutelulas ativadas como

macroacutefagos neutroacutefilos e ceacutelulas endoteliais secretam simultaneamente NO e

intermediaacuterios reativos do oxigecircnio a accedilatildeo citotoacutexica indireta do NO consiste

principalmente na sua reaccedilatildeo com esses intermediaacuterios do oxigecircnio

Durante a resposta imune mediada por ceacutelulas a maioria das ceacutelulas adquire a

capacidade de expressar a forma de NO induzida (Nathan amp Xie 1994) A accedilatildeo do NO

depende da ceacutelula T reconhecer um antiacutegeno especiacutefico embora sua accedilatildeo na resposta

imune mediada por ceacutelulas natildeo seja especiacutefica (Schmidt amp Walter 2004)

Costa et al (2003) corroboram com o fato de que a fagocitose por si soacute natildeo induz a

siacutentese de NO A fagocitose de partiacuteculas inertes por macroacutefagos peritoniais em cultura

ou por macroacutefagos murinos estimulados por citocinas natildeo satildeo estiacutemulos suficientes para

a induccedilatildeo expressiva de iONS No entanto a fagocitose de agentes bioloacutegicos nas

mesmas condiccedilotildees induz altos niacuteveis de NO sugerindo que a produccedilatildeo de NO seja

dependente de estiacutemulo imunoloacutegico e que faccedila parte dos mecanismos de defesa do

organismo

25

Todas estas investigaccedilotildees estabeleceram de forma definitiva uma associaccedilatildeo entre

arginina oacutexido niacutetrico e resposta imune Por isso nas uacuteltimas duas deacutecadas a arginina tem

sido o foco de estudos como regulador de muitos processos imunoloacutegicos e fisioloacutegicos

(Tayade et al 2006)

Trabalhos desenvolvidos com mamiacuteferos demonstraram que as respostas imunes

podem ser influenciadas pela arginina dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al

1998 Lewis amp Langkamp-Henken 2000) Em experimentos desenvolvidos com animais

jovens os efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina foram demonstrados

como o aumento do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos

tiacutemicos Os efeitos imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais

estressados ou imunossupremidos

Os efeitos beneacuteficos da arginina natildeo se limitam agrave imunidade celular Segundo

LeBien (2002) em mamiacuteferos geneticamente modificados a arginina eacute utilizada para

diferenciaccedilatildeo de proacute-linfoacutecitos B para preacute-linfoacutecitos B na medula oacutessea e estaacute envolvida na

liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da medula

Por outro lado Deng et al (2005) relatam que relevantes pesquisas em espeacutecies

aviaacuterias satildeo esparsas Estas pesquisas apontaram o aumento da produccedilatildeo de oacutexido niacutetrico

por macroacutefagos de aves suplementadas com arginina (Sung et al 1991) aumento do peso

dos oacutergatildeos linfoides (Kwak et al 1999) melhora da relaccedilatildeo heteroacutefilolinfoacutecito em pintos

suplementados e desafiados com o agente viral da bronquite infecciosa e maior percentual

de ceacutelulas CD8+ (Lee et al 2002)

Entretanto para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de arginina

foram observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

estabelecidos Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de arginina

plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular

26

Outros autores obtiveram respostas positivas com a suplementaccedilatildeo de arginina na

reduccedilatildeo na mortalidade de frangos desafiados com Eimeria acervulina Eimeria tenella e

Eimeria maacutexima alterando a relaccedilatildeo argininalisina de 09 para 13 (Kidd et al 2002) e na

siacutendrome da hipertensatildeo pulmonar (Wideman et al 1995) Tambeacutem Corzo et al (2003)

observaram reduccedilatildeo linear de arranhotildees infectados em carcaccedilas de frangos alimentados

com niacuteveis crescentes de arginina (08 a 125 da dieta) Embora esses paracircmetros sejam

indicativos indiretos da imunidade mas apontam a importacircncia da arginina na melhora da

imunidade e no restabelecimento do status sanitaacuterio dos planteacuteis aviacutecolas

Tayade et al (2006) demonstraram recentemente que frangos vacinados com uma

vacina intermediaacuteria atenuada contra a doenccedila de Gumboro e suplementados com 2 de

arginina mostraram 100 de proteccedilatildeo apoacutes desafio com o viacuterus da doenccedila de Gumboro

comparado com 80 de proteccedilatildeo induzido apenas pela vacina sem adiccedilatildeo de arginina

suplementar na dieta

Aleacutem disso Deng et al (2005) verificaram aumento no niacutevel de anticorpos contra

eritroacutecitos de carneiro em frangas de postura somente na oitova semana de idade quando

estas aves foram suplementadas com niacuteveis de arginina em 150 acima do recomendado

pelo NRC do primeiro dia ateacute a quarta semana de vida Os autores concluiacuteram que a

suplementaccedilatildeo com arginina por um periacuteodo curto de tempo tem pouco efeito sobre a

imunidade e que a imunocompetecircncia pode ser permanentemente moldada pelo status

nutricional nos estaacutegios mais precoces do desenvolvimento

Para a melhora da resposta imune deve-se garantir que as matrizes desenvolvam

tiacutetulos elevados de anticorpos e assim buscar atingir o controle contra surtos de doenccedilas

via imunidade materna como meio de prevenccedilatildeo na progecircnie Kidd et al (1993)

observaram que a diferenccedila no niacutevel de anticorpos contra eritroacutecitos de carneiro em

27

matrizes pesadas recebendo dietas compostas por gratildeos de vaacuterias origens foi detectada na

progecircnie recebendo a mesma dieta

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo dos

niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes Segundo Kidd (2004) trabalhos desenvolvidos a

cerca das exigecircncias nutricionais das matrizes estatildeo focados apenas na questatildeo produtiva

Brake (1997) mostrou que a suplementaccedilatildeo de dietas para matrizes com vitaminas E e C

promoveu melhoria na transferecircncia de imunidade materna e na resposta imune dos pintos

pela proteccedilatildeo aos anticorpos no ovo durante a incubaccedilatildeo

Segundo Gore amp Qureshi (1997) um dos mecanismos pelo qual a vitamina E atua

nesta fase de crescimento embrionaacuterio pode estar relacionado a uma maior produccedilatildeo de

oacutexido niacutetrico nitritos e nitratos pelo fato de que a Vitamina E pode aumentar a afinidade

dos receptores de membrana dos macroacutefagos para a ativaccedilatildeo dos estiacutemulos tais como os

lipopolissacariacutedeos o que resulta em maior atividade da oacutexido niacutetrico sintetase

Na literatura consultada natildeo existem relatos da suplementaccedilatildeo das dietas das

matrizes com arginina e o efeito na resposta imune da progecircnie

A produccedilatildeo de NO pelos macroacutefagos das aves eacute arginina dependente de forma

similar aos macroacutefagos de mamiacuteferos (Dietert amp Golemboski 1998) Entretanto ao

contraacuterio dos mamiacuteferos as aves natildeo podem sintetizar arginina As aves por natildeo

apresentarem o ciclo da ureia funcional dependem exclusivamente da arginina dieteacutetica

(Allen amp Baker 1972) O quadro eacute ainda mais grave nas aves uma vez que dependem de

arginina suplementar tambeacutem para a para a formaccedilatildeo de ornitina que em mamiacuteferos eacute

obtida atraveacutes do aacutecido glutacircmico A siacutentese de ornitina eacute fundamental pois estaacute envolvida

na obtenccedilatildeo de prolina e eacute utilizada tambeacutem na formaccedilatildeo de poliaminas (espermidina

espermina e putrescina) que satildeo moleacuteculas associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

28

Desta forma a arginina eacute um aminoaacutecido essencial para as aves na fase inicial A

dieta eacute um fator particularmente sensiacutevel na disponibilidade de arginina e

consequentemente de NO considerando ainda que a arginina eacute um aminoaacutecido dos mais

limitantes em dietas agrave base milho e farelo de soja (Edmonds et al 1985)

A suplementaccedilatildeo adicional de Arg nas dietas de aves imunocomprometidas

poderia aumentar ainda mais a atividade da arginase e com isso menos Arg seria

disponiacutevel para a siacutentese de NO (Kepka-Lenhart et al 2000) Alternativamente Bansal et

al (2004) sugerem como estrateacutegia dieteacutetica para restaurar as concentraccedilotildees plasmaacuteticas

de Arg a suplementaccedilatildeo de citrulina principalmente em condiccedilotildees de imunodeficiecircncia

associadas com elevada atividade plasmaacutetica da arginase Nas espeacutecies uricoteacutelicas o ciclo

Arg-citrulina eacute funcional A citrulina eacute um aminoaacutecido que natildeo eacute encontrado em nenhuma

proteiacutena corporal aleacutem da inabilidade das aves na siacutentese endoacutegena de citrulina a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica se constitui na uacutenica fonte de Arg para os macroacutefagos via ciclo

NO-citrulina (Wiesinger 2001)

A suplementaccedilatildeo de aminoaacutecidos sinteacuteticos tem propiciado facilidades no ajuste

das foacutermulas de raccedilatildeo possibilitando a obtenccedilatildeo dos niacuteveis exigidos de aminoaacutecidos

essenciais A utilizaccedilatildeo de niacuteveis elevados de lisina proporciona um maior crescimento

muscular principalmente o incremento no rendimento de peito e coxas dos frangos de

corte Entretanto esse aumento da taxa de crescimento pode alterar o equiliacutebrio

metaboacutelico ideal entre os aminoaacutecidos especialmente a relaccedilatildeo argininalisina

O antagonismo entre arginina e lisina envolve a diminuiccedilatildeo da siacutentese de

creatinina compromete a siacutentese de prolina ornitina promove o aumento da atividade da

arginase renal e da excreccedilatildeo de ureia aleacutem de que quando os niacuteveis de lisina satildeo

excessivamente altos tambeacutem ocorre a excreccedilatildeo renal de arginina (Austic amp Scott 1975)

29

Os sinais claacutessicos da deficiecircncia de Arg satildeo fraqueza e paralisia das pernas penas

deformadas e ericcediladas sobre o dorso e asa das aves reduccedilatildeo do ganho de peso lesotildees

histoloacutegicas na medula oacutessea e desenvolvimento oacutesseo afetado (Jungherr et al 1958

Newbern et al 1960) A arginina aleacutem de servir como substrato para a siacutentese de NO

estaacute envolvida na secreccedilatildeo do GH

Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram um aumento na

concentraccedilatildeo plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez

secretado pela hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio

receptor e indiretamente via IGF-I e II (insulin-like growth factor ou somatomedina C)

sobre os tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos do GH ocorre em niacutevel do

disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no

crescimento dos ossos longos (Isaksson et al 1987)

Os efeitos dos aminoaacutecidos essenciais no tecido oacutesseo em crescimento satildeo

provavelmente mediados pelo IGF-I (Baylink et al1993) De fato Chevalley et al (1998)

demonstraram que arginina e lisina aumentaram a produccedilatildeo in vitro de IGF-I por

osteoblastos mantidos em cultura Aleacutem disso Conconi et al (2001) trabalhando com

cultura de osteoblastos enriquecida com soluccedilatildeo de aminoaacutecidos essenciais (Arg Lis Met

Thr e Trp) encontraram niacuteveis significativamente aumentados de fosfatase alcalina e

siacutentese de colaacutegeno Estes resultados segundo os autores sugerem que os aminoaacutecidos

podem atuar diretamente na formaccedilatildeo da matriz oacutessea e podem tambeacutem modular o

crescimento e a diferenciaccedilatildeo de osteoblastos

Por outro lado eacute conhecido que a arginina eacute precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo

pelo qual ela poderia exercer os seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo O NO pode

participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento (Hukkanem et

30

al 1999) Estes autores demonstraram a expressatildeo do mRNA da cNOS basal (oacutexido

niacutetrico sintetase endotelial) em condroacutecitos hipertroacuteficos de placas de crescimento de ratos

neonatos

Na placa de crescimento o NO poderia facilitar a vascularizaccedilatildeo e a formaccedilatildeo

oacutessea (Rath et al 2000) a exemplo de sua accedilatildeo na cartilagem articular em que induz

respostas bioloacutegicas que levam a degradaccedilatildeo irreversiacutevel (Pelletier et al1998) Segundo

Amin amp Abramson (1998) nas osteoartrites o NO induz a apoptose dos condroacutecitos

Teixeira et al (2005) comprovaram que o NO tem duas funccedilotildees distintas nos

condroacutecitos da placa de crescimento Uma vez iniciado o processo de maturaccedilatildeo o NO

estimula a hipertrofia por meio do aumento da expressatildeo da fosfatase alcalina e colaacutegeno

tipo X sendo conhecido que a expressatildeo de ambas proteiacutenas eacute um requerimento para a

completa hipertrofia dos condroacutecitos Aleacutem disso o NO estaacute associado ao estaacutegio mais

tardio do processo de maturaccedilatildeo Condroacutecitos totalmente diferenciados tratados com

ativadores da apoptose sofrem morte celular a inibiccedilatildeo da siacutentese de NO bloqueia a

apoptose enquanto a exposiccedilatildeo aos doadores de NO estimula a apoptose Estes autores

concluiacuteram que os sistemas NOS ndash NO atuam como promotores da maturaccedilatildeo dos

condroacutecitos

Por outro lado Vanacutet amp Ralston (2001) advertem que o efeito do NO na atividade

dos osteoblastos pode ser bifaacutesico Estudos in vitro tecircm indicado que pequenas

quantidades de NO que satildeo produzidas constitutivamente pelos osteoblastos podem agir

como um estimulador autoacutecrino do crescimento oacutesseo Entretanto altas concentraccedilotildees de

NO tais como aquelas observadas apoacutes estimulaccedilatildeo das citocinas inflamatoacuterias em que a

iNOS eacute a isoforma envolvida tecircm efeito inibitoacuterio no crescimento e diferenciaccedilatildeo

osteoblaacutestica

31

O crescimento e a remodelaccedilatildeo dos tecidos satildeo regulados por complexas interaccedilotildees

entre potencial geneacutetico fatores de crescimento influecircncias ambientais e nutriccedilatildeo

(Gonzales amp Sartori 2002) A resposta imune e a inflamaccedilatildeo podem modificar as

necessidades de alguns nutrientes

As alteraccedilotildees metaboacutelicas decorrentes podem interromper os eventos envolvidos

no processo de condrogecircnese e osteogecircnese e desencadear o processo de formaccedilatildeo das

lesotildees no tecido oacutesseo que levam a dificuldade locomotora deformaccedilatildeo oacutessea predispotildeem

agraves infecccedilotildees e agraves desordens esqueleacuteticas tais como a discondroplasia tibial (Thorp 1994)

Aleacutem das perdas econocircmicas eacute clara a percepccedilatildeo que as disfunccedilotildees do aparelho locomotor

comprometem o bem-estar das aves

Aleacutem de interagirem com o sistema imune os processos que modulam o

crescimento oacutesseo satildeo complexos e muacuteltiplos e mais estudos satildeo necessaacuterios para elucidar

estes mecanismos

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II - OBJETIVOS GERAIS

Essa pesquisa foi desenvolvida com a finalidade de estudar o efeito da

suplementaccedilatildeo de Arg na dieta de fecircmeas reprodutoras de frangos de corte na qualidade

dos ovos e nas caracteriacutesticas produtivas na qualidade oacutessea no desenvolvimento dos

oacutergatildeos linfoide e do sistema imune da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo

niacuteveis crescentes de Arg

21 Objetivos Especiacuteficos Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis

crescentes de Arg no desempenho produtivo e na qualidade dos ovos

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg no desempenho no

rendimento de carcaccedila e na qualidade oacutessea da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas

contendo niacuteveis crescentes de Arg

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg nas respostas imune e

celular da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo

Resumo ndash Este estudo avaliou o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e reprodutivo e qualidade de ovos Foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e reprodutivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo

Palavras-chave embriodiagnoacutestico incubaccedilatildeo qualidade de ovos

III - Effect of arginine supplementation on productive performance and egg quality of broiler breeder hens

Abstract - This study investigated the effect of arginine (Arg) supplementation on broiler breeder productive performance and egg quality ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance Supplementation of broiler diets with increasing levels of Arg provided an increase in the egg production and eggs with higher weights in the levels of 1262 and 1543 respectively The increased levels of Arg did not influence the reproduction variables studied suggesting that it may be used without any harmful risk

Key words embryo diagnosis hatching egg quality

42

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo e alimentaccedilatildeo animal estatildeo direcionadas para garantir oacutetimo aporte de

nutrientes para os animais de acordo com sua finalidade comercial e fase fisioloacutegica

Na produccedilatildeo de frangos de corte a taxa de crescimento acelerada imposta pela seleccedilatildeo

geneacutetica os vaacuterios fatores estressantes (ambientais e de manejo) e de desafio

imunoloacutegico (vacinaccedilatildeo e infecccedilatildeo) nas condiccedilotildees de produccedilatildeo comercial fazem com

que as exigecircncias das matrizes de corte para alguns nutrientes sejam maiores para que a

progecircnie possa expressar seu potencial geneacutetico

O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo dependem completamente dos

nutrientes contidos no ovo e estes satildeo originados da dieta e do metabolismo das

matrizes O ovo eacute um sistema fechado assim todos os nutrientes necessaacuterios para o

desenvolvimento do embriatildeo devem ser fornecidos pela matriz quando o ovo eacute formado

(Oviedo-Roacutendon amp Murakami 1998)

Aleacutem disso existe correlaccedilatildeo positiva entre peso do ovo e peso do pinto ao

nascer e deste com o peso do frango ao abate (Lara et al 2005) De fato Whiting amp

Pesti (1984) verificaram que para cada grama a mais no peso do ovo correspondia a

107 e 60g adicionais para o peso final de machos e fecircmeas respectivamente

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas No ovo os aminoaacutecidos

presentes na gema satildeo suficientes durante o processo de eclosatildeo poreacutem apoacutes o

nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o processo de

crescimento (Otha et al 2004) Nos uacuteltimos anos o impacto da nutriccedilatildeo das matrizes

no estado nutricional e desempenho da progecircnie bem como a melhora do estado

imunoloacutegico tem recebido especial atenccedilatildeo (Pappas et al 2006)

43

A nutriccedilatildeo das matrizes com dietas com arginina seria uma alternativa para o

enriquecimento da gema dos ovos com esse aminoaacutecido A Arg eacute um aminoaacutecido

baacutesico que pode influenciar a reposta imune e a resistecircncia agraves doenccedilas A Arg ainda eacute

conhecida pela funccedilatildeo estimuladora sobre o processo de ovulaccedilatildeo atraveacutes do aumento

da liberaccedilatildeo de hormocircnio luteinizante (LH) (Basiouni et al 2006) e como parte do

hormocircnio arginina vasotocina envolvido com a contraccedilatildeo uterina e a oviposiccedilatildeo

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias

de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo

dos niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes De acordo com Kidd (2004) os trabalhos

desenvolvidos em relaccedilatildeo agraves exigecircncias nutricionais das matrizes para melhorar o

sistema imune da progecircnie satildeo poucos quando comparados a questatildeo produtiva das

aves

Com isso objetivou-se com o trabalho avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de

arginina sobre o desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte

Material e meacutetodos

O experimento foi conduzido no aviaacuterio experimental da Universidade Federal

do Paranaacute ndash Campus Palotina constituiacutedo de 32 boxes com dimensotildees de 25 x 15 m

com cama de maravalha (plusmn10 cm) sobre o piso Foram utilizados boxes telados e

providos de um bebedouro pendular e de dois comedouros um deles com grade de

restriccedilatildeo aos machos e outro instalado mais alto natildeo permitindo somente o acesso das

fecircmeas Em cada boxe experimental foram utilizados ninhos convencionais de um

andar com quatro bocas de madeira com dimensotildees de 030 m x 030 m x 030 m a

030 m acima do niacutevel do piso sendo uma boca para cada quatro fecircmeas

Foram utilizados 390 reprodutores de frangos de corte sendo 360 fecircmeas e 30

machos da linhagem Ross As aves foram selecionadas na 18ordf semana de idade a partir

de um plantel de reprodutores dentro da faixa de peso de 1850 a 1950 g para as

fecircmeas e de 2450 a 2550 g para os machos O delineamento experimental utilizado foi

o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 e

1543 de Arg digestiacutevel) seis repeticcedilotildees e 12 fecircmeas e um macho por unidade

44

experimental O acasalamento foi realizado na 18ordf semana de idade das aves na

proporccedilatildeo de um macho para cada 12 fecircmeas

O periacuteodo experimental iniciou na 25ordf semana quando o plantel alcanccedilou 5 de

produccedilatildeo e finalizou na 56ordf semana de idade das aves O programa de iluminaccedilatildeo

iniciou na 19ordf semana de idade com fornecimento inicial de 14 horas de luz diaacuteria e

aplicados aumentos semanais de 30 minutos de luz ateacute o fornecimento de 17 horas de

luz diaacuteria na 25ordf semana de idade das aves

O fornecimento de raccedilatildeo foi limitado e controlado diariamente enquanto o de

aacutegua foi ad libitum As exigecircncias nutricionais utilizadas para formulaccedilatildeo das dietas das

fecircmeas e dos machos foram baseadas nas recomendaccedilotildees contidas no manual da

linhagem

A partir da 23ordf semana de idade as fecircmeas passaram a receber as dietas

experimentais constituiacutedas da dieta basal suplementada com cinco niacuteveis de L ndash

Arginina variando de 0 a 600 mgkg na dieta basal em substituiccedilatildeo ao caulin que

corresponderam aos niacuteveis de 0943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg

digestiacutevel (Tabela 1) Os machos receberam uma uacutenica dieta durante todo o periacuteodo

experimental O periacuteodo experimental teve iniacutecio na 25ordf semana Para determinaccedilatildeo da

produccedilatildeo de ovos os mesmos foram coletados diariamente e a produccedilatildeo diaacuteria anotada

em planilhas por repeticcedilatildeo Semanalmente foi obtida a produccedilatildeo total de ovos e a

porcentagem de postura de cada unidade experimental Na 30ordf 34ordf e 38ordf semana de

idade foram coletados todos os ovos produzidos em um dia para avaliaccedilatildeo da qualidade

(peso meacutedio gravidade especiacutefica porcentagem de albuacutemen e gema porcentagem e

espessura da casca)

A quantidade de raccedilatildeo oferecida para as fecircmeas foi calculada de acordo com a

produccedilatildeo de ovos e do peso corporal Para os machos forneceu-se raccedilatildeo em funccedilatildeo do

peso corporal (conforme manual da linhagem) O peso foi controlado semanalmente ateacute

a 35ordf semana e quinzenalmente a partir da 36ordf semana de idade das aves ateacute o final do

experimento

A avaliaccedilatildeo do rendimento de incubaccedilatildeo foi realizada na 40ordf semana de idade

das aves Foram incubados 80 ovos de cada tratamento totalizando 400 ovos Os ovos

foram pesados e incubados em cada idade avaliada de acordo com o tratamento e

repeticcedilatildeo e avaliadas as seguintes caracteriacutesticas peso meacutedio do ovo incubado peso

meacutedio dos pintos ao nascer percentual do peso da progecircnie ao nascer em relaccedilatildeo ao

peso do ovo e taxa de eclosatildeo Apoacutes a eclosatildeo foi realizado o embriodiagnoacutestico dos

45

ovos que natildeo eclodiram os quais foram classificados em mortalidade por fase (inicial

intermediaacuteria e final) ovos contaminados bicados vivos e bicados mortos

Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental

Ingredientes () Raccedilatildeo postura I Milho 6072 Farelo de Trigo 420 Oacuteleo de Soja 200 Farelo de Soja 2260 Sal Comum 032 Caulim 050 Calcaacutereo 38 647 Fosfato Bicaacutelcico 131 Bicarbonato de Soacutedio 010 DL-Metionina 98 014 Colina 60 016 Milbond 010 Mycofix 015 Carbonato Potaacutessio 99 021 Premix vit e mineral1 050 Hy D2 005 Eur Bactiguard L 020 Valores Calculados Proteiacutena 1551 EM Kcalkg 2815 Gordura 477 AcLinoleico 248 Caacutelcio 295 Foacutesforo disponiacutevel 044 Lisina dig 071 Met + cistina dig 060 Treonina dig 051 Arginina dig 094 Soacutedio 019 Cloro 026 Potaacutessio 080 Mongin Meq100g 21388

1 Conteuacutedo por kg de premix Vit A 8000000 UI Vit D3 2200000 UI Vit E 6200 mg Vit K 3 2000 mg Vit B 1 2000 mg Vit B2 3000 mg Vit B6 6000 mg Vit B12 10000 mcg Pantotenato de caacutelcio 6000 mg Niacina 25000 mg Aacutec foacutelico 400 mg Se 100 mg Mn 65000 mg Fe40000 mg Cu 10000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg 2 Rovimix Hy D ndash DSM Nutritional Products

Para gravidade especiacutefica foi utilizado o meacutetodo da imersatildeo dos ovos em

soluccedilatildeo salina Foram preparadas seis soluccedilotildees (aacutegua e sal comum) com densidades que

variaram de 1070 a 1090 com variaccedilatildeo de 0004 para cada soluccedilatildeo As gravidades

foram aferidas com utilizaccedilatildeo de densiacutemetro de Petroacuteleo

46

O peso meacutedio do albuacutemen de cada repeticcedilatildeo foi obtido pela diferenccedila entre o

peso meacutedio do ovo e o peso meacutedio da gema somados ao peso meacutedio da casca de cada

repeticcedilatildeo Apoacutes a pesagem das cascas a espessura das mesmas foi medida com auxiacutelio

de um microcircmetro digital (Mitutoyoreg) em quatro pontos na regiatildeo central de cada casca

Para a medida de peso da casca os ovos foram quebrados e as cascas lavadas e secas agrave

temperatura ambiente por 48 horas em seguida foram pesadas em balanccedila analiacutetica e os

pesos anotados

Anaacutelise Estatiacutestica

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados de acordo com o seguinte modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243 4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os dados de embriodiagnoacutestico natildeo apresentaram distribuiccedilatildeo normal e foram

analisados pela anaacutelise Bayesiana assumindo que a porcentagem observada ri a cada

niacutevel de concentraccedilatildeo de Arg xi segue distribuiccedilatildeo Binomial com paracircmetros ni

(tamanho de amostra) e pi (taxa de eclosatildeo) pi = en1+en com funccedilatildeo de ligaccedilatildeo logit

ii

i

plog it(p ) log1 p⎛ ⎞

equiv = μ⎜ ⎟minus⎝ ⎠ nas formas linear e quadraacutetica dadas respectivamente por

n=α+ β1xi e n = α + β1xi + β2x2i Para a modelagem foram considerados um conhecimento

vago a priori sobre os paracircmetros de regressatildeo isto eacute com distribuiccedilotildees natildeo

informativas 3~ (010 )Nα e 3~ (010 )k Nβ k=12

A obtenccedilatildeo das distribuiccedilotildees marginais a posteriori para os paracircmetros foi por

meio do pacote BRugs do programa R (R Development Core Team 2007)

Para cada paracircmetro foram gerados 510000 valores em um processo MCMC

(Monte Carlo Markov Chain) considerando um periacuteodo de descarte amostral de 10000

47

valores iniciais A amostra final tomada com saltos de tamanho 20 conteacutem 25000

valores gerados A convergecircncia das cadeias foi verificada por meio do pacote CODA

(Best et al 1995) do programa R pelos criteacuterios de Geweke (1992) e de Heidelberger amp

Welch (1983)

Resultados e Discussatildeo

Os resultados de produccedilatildeo e de qualidade dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg estatildeo apresentados na Tabela 2 Os niacuteveis de

Arg digestiacutevel utilizados nas dietas das matrizes de corte influenciaram de forma

quadraacutetica (Plt005) a porcentagem de postura em que o niacutevel de 1262 de Arg

proporcionou a maior porcentagem de postura para as matrizes de corte (Figura 1)

Outros autores tambeacutem encontraram resultados semelhantes em relaccedilatildeo ao

aumento da taxa de postura em funccedilatildeo da suplementaccedilatildeo de Arg Segundo Najib amp

Basiouni (2004) a produccedilatildeo de ovos de matrizes elevou de 52 para 6786 quando

utilizaram niacuteveis de Arg e Lys na dieta de 15 e 12 respectivamente Adicionalmente

Basiouni et al (2006) observaram aumento no peso de foliacuteculos F1 em poedeiras que

receberam dietas com 205 Arg comparado com dietas que continham 154 de Arg

Esse efeito sugere que o aumento na produccedilatildeo de ovos possa ser atribuiacutedo do efeito

estimulatoacuterio especiacutefico da Arg na secreccedilatildeo de LH (Hormocircnio Luteinizante) o qual tem

accedilatildeo direta sobre o ovaacuterio e seus foliacuteculos (Basiouni 2009)

O comportamento observado na curva de produccedilatildeo de ovos demonstra aumento

da produccedilatildeo ateacute o niacutevel de 1262 de Arg e posterior queda ateacute o niacutevel de 1543 o

que provavelmente pode estar associado ao desequiliacutebrio aminoaciacutedico das dietas nos

niacuteveis extremos de Arg na raccedilatildeo Os altos niacuteveis de Arg utilizados podem ter afetado a

produccedilatildeo de ovos principalmente pelo antagonismo existente entre Arg e Lisina (Lys)

Baixas relaccedilotildees ArgLys em dietas de matrizes reduzem o consumo de raccedilatildeo e

deprimem a produccedilatildeo de ovos (Basiouni et al 2006) Altos niacuteveis de Lys associados a

baixos niacuteveis de Arg satildeo deleteacuterios agraves aves pois niacuteveis elevados de Lys promovem

expressiva elevaccedilatildeo da atividade da arginase renal e consequentemente induz agrave

degradaccedilatildeo da Arg (Austic amp Scott 1975) causando sintomas de deficiecircncia de Arg em

virtude das aves natildeo possuiacuterem o ciclo da ureia funcional (Drsquo Mello 2003) Esse

antagonismo ainda leva agrave diminuiccedilatildeo da atividade da glicina-amidinotransferase no

fiacutegado enzima que utiliza Arg e glicina como substratos juntamente com a metionina na

siacutentese da creatina muscular (Jones et al 1967 Andriguetto et al 1999)

48

Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg

()

Postura

()

Peso

Ovo

(g)

Gema

()

Clara

()

Casca

()

Casca

(mm)

Gravidade

Especiacutefica

(gml)

0943 7741plusmn460 6046plusmn048 2998plusmn035 5955plusmn045 876plusmn015 0577plusmn0004 1082plusmn0001

1093 8101plusmn544 6081plusmn052 2972plusmn042 5974plusmn040 902plusmn014 0584plusmn0005 1082plusmn0001

1243 8240plusmn370 6086plusmn051 2971plusmn043 6035plusmn031 875plusmn011 0569plusmn0004 1081plusmn0001

1393 8158plusmn368 6133plusmn057 2986plusmn041 5984plusmn043 880plusmn009 0571plusmn0003 1080plusmn0001

1543 7855plusmn600 6167plusmn046 2964plusmn030 6015plusmn038 876plusmn010 0573plusmn0004 1081plusmn0001

CV() 664 183 195 116 351 198 0133

Anaacutelise Variacircncia

Arg Quadratico1 Linear2 ns ns ns ns Linear3

R2 043 096 ----- ----- ----- ----- 066 1 Y= 421330+01239X-00004908X2 2 Y = 585813+000196527X 3 Y = 108413-000000249943X ns ndash natildeo significativo

77

78

79

80

81

82

83

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Pro

duccedilatilde

o de

ovo

s (

)

Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel

Ao avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arg no peso dos ovos das matrizes de

corte verificou-se aumento linear (Plt005) no peso dos ovos com o aumento de Arg

digestiacutevel nas raccedilotildees por outro lado houve queda linear (Plt005) na gravidade

especiacutefica dos ovos dessas matrizes (Figura 1)

Basiouni et al (2006) encontraram efeito dos niacuteveis de Arg e de Lys sobre na

gravidade especiacutefica dos ovos Estes autores observaram que baixos niacuteveis de Arg e

altos niacuteveis de Lys proporcionaram a melhor gravidade especifica dos ovos e quando a

1262

Arginina dig ()

Y = 421330+011239X-00004908X2 R2=043

49

relaccedilatildeo ArgLys era alta a gravidade especiacutefica piora significativamente Por outro lado

Lima amp Silva (2007) natildeo verificaram efeito das diferentes relaccedilotildees ArgLys digestiacutevel

nos paracircmetros de qualidade de ovos

O aumento do peso do ovo e a queda na gravidade especiacutefica desses ovos

possuem relaccedilatildeo direta Isso ocorre porque segundo Basiouni et al (2006) a siacutentese da

quantidade de casca dos ovos nas galinhas eacute constante Aleacutem disso com o aumento da

idade das galinhas ocorre aumento no tamanho dos ovos Do iniacutecio ateacute o final do ciclo

de postura o ovo chega a aumentar ateacute 40 do seu tamanho e por isso haveraacute menos

caacutelcio na superfiacutecie da casca o que reduz a espessura da casca (Baiatildeo amp Aguilar 2001)

e consequentemente a gravidade especiacutefica dos ovos

Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados de rendimento da incubaccedilatildeo dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel estatildeo apresentados na Tabela 3 Os

niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis de

incubaccedilatildeo Demonstra-se portanto que a Arg pode ser utilizada na dieta das matrizes

sem trazer prejuiacutezos agrave reproduccedilatildeo

A fertilidade e a eclosatildeo dos ovos das matrizes satildeo dois paracircmetros importantes

na incubaccedilatildeo dos ovos Valores proacuteximos de 96 para fertilidade e 88 para eclosatildeo

satildeo indicativos de bom manejo de reprodutoras (Rosa amp Aacutevila 2000) Segundo Rosa amp

Aacutevila (2000) o rendimento da incubaccedilatildeo estaacute diretamente relacionado com a

mortalidade embrionaacuteria a qual sofre influecircncia da gravidade especiacutefica e da

capacidade do ovo em perder umidade No presente trabalho observou-se que a

utilizaccedilatildeo de dietas suplementadas com Arg natildeo afetou nenhuma dessas variaacuteveis

apesar de ter interferido na gravidade especiacutefica dos ovos conforme demonstrado em

tabelas anteriores

10795

108

10805

1081

10815

1082

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Gra

vida

de e

spec

iacutefica

(gm

l)

59860

602604606608

61612614616618

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Peso

(g)

Y = 108413-000000249943X R2=066 Y = 585813+000196527X R2=096

50

O peso do pinto natildeo foi influenciado pelos niacuteveis de Arg na dieta das matrizes

de corte eacute considerado muito importante na cadeia de produccedilatildeo por estar diretamente

relacionado ao desempenho produtivo do frango A variaccedilatildeo de peso do pinto no

momento da eclosatildeo pode ser causada por fatores como linhagem idade da matriz peso

e niacuteveis de nutrientes do ovo (Vieira amp Moran Jr 1999) Okada (1994) e Castro (1996)

ressaltam que pintos de corte com mais de 40g no primeiro dia de vida devem ser

considerados de boa qualidade Os pintos desse experimento podem ser considerados de

boa qualidade jaacute que o menor peso dos pintos ao nascer foi de 439g Embora neste

estudo os niacuteveis de Arg na dieta das matrizes natildeo tenham afetado o peso dos pintos esse

aminoaacutecido eacute essencial para o bom desenvolvimento da progecircnie Kita et al (2002)

relatam que dietas com alta proteiacutena suplementadas com aminoaacutecidos essenciais (Arg

metionina+cistina) aumentam os niacuteveis plasmaacuteticos do fator de crescimento semelhante

agrave insulina (IGF-I) e o ganho de peso em aves jovens

Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Variaacuteveis Niacuteveis de Arginina

()

Fertilidade ()

Eclosatildeo ()

Peso ovo (g)

Peso Pinto (g)

Relaccedilatildeo Peso OvoPeso Pinto

0943 9750plusmn218 7875plusmn450 6269plusmn042 4507plusmn053 7168plusmn045 1093 9513plusmn212 8038plusmn459 6212plusmn033 4390plusmn045 7115plusmn054 1243 9250plusmn206 8125plusmn464 6200plusmn047 4487plusmn066 7234plusmn047 1393 9750plusmn218 8000plusmn457 6314plusmn072 4514plusmn086 7173plusmn082 1543 9625plusmn215 7750plusmn443 6351plusmn055 4529plusmn039 7127plusmn045 Meacutedia 9578 7958 6269 4486 7163

CV () 656 1641 231 374 222 Anaacutelise de Variacircncia Arginina ns ns ns ns ns

R2 ------ ------ ----- ------- ------- ns = natildeo significativo

O peso dos ovos eacute outra caracteriacutestica de grande importacircncia relacionada com a

idade da matriz os quais satildeo preponderantes para o desenvolvimento inicial das aves e

tem consequecircncias em todo o crescimento (Pedroso et al 2005) Essa influecircncia eacute bem

conhecida e o peso do pinto representa entre 66 e 71 do peso do ovo (Fiuacuteza et al

2006 Marinho et al 2006 Pappas et al 2006) Segundo North amp Bell (1990) cada

51

grama a mais no peso do pinto representa 13 gramas no peso do frango ao abate por

isso a nutriccedilatildeo das matrizes eacute de grande importacircncia jaacute que a Arg tem relaccedilatildeo positiva

com o hormocircnio de crescimento (GH) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave

(Harvey et al 2001)

Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico

Estimativas Bayesianas

Ligaccedilatildeo Ligaccedilatildeo Meacutedias Desvio Padratildeo P25 P975 DIC

Embriodiagnoacutestico

Linear α β

-07512 -25980

2078 1798

-4811 -6367

3426 0784 4783 Mortalidade

Embrionaacuteria (1 a 5 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-8444 10690 -5607

10610 18020 7538

-3015 -2406 -2104

11790 47550 8874

4813

Linear α β

2259 -6267

3790 3615

-4602 -14470

10570 -

01174 3137

Mortalidade (11 a 17 dias)

Quadraacutetica α β1 β2

5057 -11090 1958

12960 22430 9632

-2027 -5093 -1714

3112 3253 2052

3167

Linear α β

-3726 1274

10390 07968

-58110 -02681

-1730 2882 1079

Mortalidade (18 a 21 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-1634 -2195 1387

6330 10280 4084

-14020 -22380 -6539

10690 17840 9441

1095

Linear α β

-1927 -2266

2562 2359

-7233 -7321

2739 1993 0070

Bicado Vivo Quadraacutetica

α β1 β2

-1451 -1692 -2019

2749 2821 2539

-7044 -7313 -7290

3755 3682 2565

0057

Linear α β

-2564 -1628

2860 2418

-8103 -6479

2823 2755 3417

Bicado Morto Quadraacutetica

α β1 β2

3692 -12350 4412

11930 19920 8139

-1936 -5206 -1148

2739 2609 2054

3428

Linear α β

-513600 -004923

3798 3023

-13000 -6154

2041 5809 2522

Morte por Contaminaccedilatildeo Quadraacutetica

α β1 β2

-009106 -71940 28920

13200 21610 8744

-2704 -4965 -1428

2480 3473 2016

2555

Na Tabela 4 satildeo apresentadas as estimativas Bayesianas para as equaccedilotildees de

regressatildeo ajustadas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos provenientes das

matrizes de corte alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg Natildeo foi verificado efeito da

dieta das matrizes sobre nenhuma das variaacuteveis paracircmetros avaliadas (Pgt005)

52

Contudo no periacuteodo final do desenvolvimento embrionaacuterio (18 a 21 dias) haacute maior

mortalidade (Tabela 5) Nesse periacuteodo haacute mudanccedila draacutestica do meio aquoso protegido

para o meio aeroacutebio totalmente diferente Nas aves essa fase final de desenvolvimento

inclui absorccedilatildeo de aacutegua retraccedilatildeo do saco vitelino maturaccedilatildeo funcional do pulmatildeo

transiccedilatildeo da respiraccedilatildeo coacuterio-alantoide para pulmonar bicagem e nascimento Ocorre

ao mesmo tempo o desenvolvimento da resposta homeoteacutermica (Oviedo-Roacutendon amp

Murakami 1998) Aleacutem disso nesse periacuteodo ocorre a mudanccedila pronunciada em

hormocircnios tireoideanos corticosteroideos hormocircnios do eixo somatotroacutepico

prolactina vasotocina e melatonina

Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg Morte

Embrionaacuteria (1 a 5 dias)

Morte (11 a 17 dias)

Morte (18 a 21

dias)

Bicado Morto

Morte por Contaminaccedilatildeo

Arg () 0943 264 416 889 264 125 1093 514 000 764 125 000 1243 250 000 836 000 125 1393 000 125 1514 125 000 1543 125 000 1406 125 125 CV () 20962 50785 9999 27439 36515 (Pgt005)

Conclusatildeo

A suplementaccedilatildeo das dietas de matrizes de corte com niacuteveis crescentes de

Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o

niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os

niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas

podendo ser utilizado o menor niacutevel de suplementaccedilatildeo ou seja 0943 de Arg

digestiacutevel sem prejuiacutezos

53

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IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e

paracircmetros oacutesseos da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos

Palavras-chave avaliaccedilatildeo de carcaccedila desempenho produtivo osso

58

IV - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

performance carcass yield and bone parameters of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine

(Arg) supplementation in broiler breeder henrsquos diet on performance carcass yield and bone parameters in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) These results indicate that it is necessary to feed the progeny with an Arg-supplemented diet to obtained better performance and bone quality Key words bone carcass evaluation productive performance

59

Introduccedilatildeo

As exigecircncias nutricionais para a maioria dos nutrientes satildeo estabelecidas com

base nas respostas produtivas mas em alguns casos a sauacutede eacute o criteacuterio principal A

nutriccedilatildeo de reprodutoras pesadas deve atender as exigecircncias da ave alcanccedilando bom

desempenho produtivo e ainda suprir as necessidades dos embriotildees e dos pintos

neonatos originados de seus ovos O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo

dependem completamente dos nutrientes contidos no ovo os quais satildeo originados da

dieta e do metabolismo das galinhas (Baiatildeo amp Lucio 2005) Assim a concentraccedilatildeo de

nutrientes disponiacuteveis no ovo para o desenvolvimento do embriatildeo eacute criacutetico e pode

influenciar o potencial de ganho de peso da progecircnie e caracteriacutesticas importantes de

desenvolvimento imunitaacuterio oacutesseo e muscular

O crescimento precoce no periacuteodo poacutes-eclosatildeo eacute influenciado por vaacuterios

fatores entre eles o conteuacutedo de resiacuteduos do saco viteliacutenico a ingestatildeo de alimento e de

aacutegua os niacuteveis de enzimas pancreaacuteticas e intestinais a aacuterea de superfiacutecie intestinal e a

digestibilidade global de nutrientes (Dibner 1996) As reservas contidas no saco

vitelino satildeo as primeiras fontes de nutrientes utilizadas pelo pintainho ao nascer Desse

modo quanto maior o tempo decorrido entre a eclosatildeo e o iniacutecio da ingestatildeo de

alimento e aacutegua maior a dependecircncia que o pintainho teraacute dessas reservas (Vieira amp

Pophal 2000) a dieta materna eacute a origem dos nutrientes para o embriatildeo (Vieira 2007)

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) afirmam que para matrizes pesadas existe uma pausa nas

pesquisas que visam determinar as exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos Embora os

aminoaacutecidos presentes na gema possam ser suficientes durante o processo de eclosatildeo

apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

desenvolvimento inicial (Otha et al 2004)

Os aminoaacutecidos sinteacuteticos disponiacuteveis no mercado proporcionam o atendimento

das exigecircncias nutricionais das aves principalmente em relaccedilatildeo aos aminoaacutecidos

60

limitantes Dentre esses aminoaacutecidos a arginina (Arg) eacute considerada o quinto

aminoaacutecido limitante para frangos de corte em dietas agrave base de milho e de farelo de

soja apoacutes metionina+cistina lisina treonina e valina (Corzo 2007) Como as aves natildeo

apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem exclusivamente da Arg sinteacutetica

principalmente no periacuteodo inicial de criaccedilatildeo (Allen amp Baker 1972) A suplementaccedilatildeo

da Arg eacute necessaacuteria para a formaccedilatildeo da ornitina a qual estaacute envolvida na siacutentese da

prolina que eacute utilizada para a formaccedilatildeo das poliaminas (espermidina espermina e

putrescina) Estas moleacuteculas estatildeo associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

A Arg aleacutem de serem constituintes de proteiacutenas participa como coadjuvante na

secreccedilatildeo de insulina pelas ceacutelulas β do pacircncreas (Bolea et al 1997) e na secreccedilatildeo do

hormocircnio de crescimento (GH) (Ghigo et al 1994) Os efeitos do GH satildeo mediados

pelos fatores de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Le Roith et al 2001) O

IGF-I eacute conhecido por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo

esqueleacutetico como a proliferaccedilatildeo e diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelite (Florini et al 1996)

e a agregaccedilatildeo de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos sobre a siacutentese e a

degradaccedilatildeo proteica (Duclos et al 1991 Coleman et al 1995 Duclos et al2005)

Outro efeito do GH ocorre em niacutevel do disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de

IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no crescimento dos ossos longos (Isaksson et

al 1987)

O enriquecimento dos ovos das matrizes com Arg bem como sua suplementaccedilatildeo

logo apoacutes a eclosatildeo pode trazer inuacutemeros benefiacutecios sobre o desenvolvimento da

progecircnie jaacute que o GH influenciado pela Arg tem sua siacutentese iniciada na fase

embrionaacuteria da ave (Harvey et al 2001)

Diante do exposto com este estudo objetivou-se testar a influecircncia da

suplementaccedilatildeo com L-Arginina na dieta das matrizes de corte sobre a progecircnie com

dieta suplementada ou natildeo suplementada com L-Arginina sobre o desempenho

paracircmetros oacutesseos e rendimento de carcaccedila dos frangos de corte

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

61

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

no delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina

incluiacutedos na dieta materna variando de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal (0

943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 35

aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada box foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado o

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

em todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as sobras de raccedilatildeo dos boxes foram pesadas para

ajustar o consumo de raccedilatildeo e da conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 2) As

dietas experimentais agrave base de milho e de farelo de soja foram formuladas de acordo

com os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e as recomendaccedilotildees nutricionais

62

propostas por Rostagno et al (2005) As aves controle receberam dieta sem

suplementaccedilatildeo de arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz

sobre o desempenho da progecircnie

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais basais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 017 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 1000 10000 Valores calculados PB () 2000 1850 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

63

Experimento 3 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina digestiacutevel na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes utilizando o delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina e seis repeticcedilotildees

com 32 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal inicial e de crescimento em

substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial corresponderam a 1300

1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela 2) A partir dos 22

dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300 1450 1600

e 1750 de arginina digestiacutevel (Tabela 3) O manejo realizado nesse experimento foi

conduzido conforme descrito no experimento anterior

Desempenho

Para ambos os experimentos com a progecircnie foram avaliados o desempenho

zooteacutecnico (ganho de peso consumo de raccedilatildeo e conversatildeo alimentar) Para avaliaccedilatildeo do

desempenho as raccedilotildees e as aves foram pesadas no iniacutecio do experimento aos 7 21 e 42

dias de idade

Paracircmetros oacutesseos

Os paracircmetros oacutesseos avaliados foram comprimento diacircmetro peso e calculado

o Iacutendice de Seedor Para avaliaccedilatildeo dos paracircmetros oacutesseos em ambos os experimentos

com a progecircnie apoacutes o sacrifiacutecio por meio de atordoamento seguido de sangria foram

coletados os fecircmures e as tiacutebias esquerdas de duas avesrepeticcedilatildeo aos 7 e 21 dias de

idade As amostras ficaram congeladas (-18ordmC) ateacute o iniacutecio das anaacutelises dos paracircmetros

oacutesseos que foram executadas conforme descrito a seguir

Apoacutes o descongelamento dos ossos foram retirados os tecidos envolventes

(tecido muscular aderido) com auxiacutelio de tesouras e pinccedilas Os ossos descongelados

foram pesados em balanccedila analiacutetica (g plusmn 00001) e o comprimento e o diacircmetro (na

64

porccedilatildeo meacutedia do osso) foram medidos usando paquiacutemetro eletrocircnico digital (capacidade

de 0 a 150 mm e resoluccedilatildeo de 001 mm)

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900

Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6456 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl Vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 1300 1450 1600 1750 1900 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

65

A partir do peso do osso e do seu comprimento foi calculado o Iacutendice de Seedor

(Seedor et al 1993) de acordo com a seguinte foacutermula Iacutendice de Seedor = Peso do

osso (mg)comprimento do osso (mm)

Este iacutendice eacute utilizado como indicativo da densidade oacutessea Quanto maior o

Iacutendice de Seedor maior a densidade da peccedila oacutessea e vice-versa

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000

mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

66

Rendimento de carcaccedila

Para determinaccedilatildeo do rendimento de carcaccedila foram utilizadas trecircs aves por

unidade experimental (15 avestratamento) identificadas com anilhas numeradas e

submetidas ao jejum por seis horas atordoadas com eletricidade (220W) e com

posterior sangria no final de cada experimento realizado com a progecircnie

Para caacutelculo do rendimento de carcaccedila foi considerado o peso da carcaccedila

eviscerada quente sem os peacutes cabeccedila e gordura abdominal em relaccedilatildeo ao peso vivo

que foi obtido individualmente antes do abate das aves Para rendimento dos cortes

nobres foi considerado o rendimento do peito inteiro com pele e ossos das pernas

(coxa e sobrecoxa) e das asas que foi calculado em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila

eviscerada

Para caacutelculo da gordura abdominal foi considerada a gordura presente ao redor da

cloaca da bolsa cloacal moela proventriacuteculo e dos muacutesculos abdominais adjacentes foi

retirada conforme descrito por Smith (1993) Em seguida foi pesada e tambeacutem

calculada em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila eviscerada

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

67

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

Resultados e discussatildeo

Os valores meacutedios de desempenho de frangos de corte provenientes de matrizes

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg com dieta suplementada e natildeo suplementada

com Arg estatildeo demonstrados nas Tabelas 5 e 6 respectivamente

No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) os frangos que receberam dietas

suplementadas com Arg apresentaram efeito linear positivo (Plt005) dos niacuteveis

crescentes de suplementaccedilatildeo com Arg sobre o ganho de peso O consumo de raccedilatildeo e a

conversatildeo alimentar foram influenciados de forma quadraacutetica (Plt005) e o niacutevel de

1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649

proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente (Figura 2)

Esses niacuteveis satildeo superiores aos encontrados por Atencio et al (2004) que apresentaram

os niacuteveis de 127 e 128 de Arg digestiacutevel para ganho de peso e conversatildeo

alimentar respectivamente Mendes et al (1997) e Brake et al (1998) observaram

melhor conversatildeo alimentar agrave medida que a Arg foi adicionada agraves dietas dos frangos de

corte

68Tabela 5 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito

0943 1093 1243 1393 1543

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 68749plusmn651 69813plusmn1553 69498plusmn876 71393plusmn2071 71148plusmn1009 466 ns

Consumo de raccedilatildeo g 108937plusmn973 108077plusmn2506 106938plusmn1143 108570plusmn2584 109617plusmn1424 420 ns

Conversatildeo alimentar gg 1585plusmn0015 1548plusmn0006 1539plusmn0014 1523plusmn0023 1541plusmn0004 224 Quadraacutetico1

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 182410plusmn1786 178280plusmn1963 183209plusmn2355 170699plusmn3272 177743plusmn3493 366 ns

Consumo de raccedilatildeo g 339169plusmn2597 332944plusmn4420 334432plusmn4460 328563plusmn5011 335512plusmn4351 311 ns

Conversatildeo alimentar gg 1859plusmn0017 1868plusmn0017 1825plusmn0008 1926plusmn0027 1889plusmn0014 230 ns

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 251160plusmn2118 248093plusmn2721 252708plusmn2327 242092plusmn4528 248891plusmn3614 314 ns

Consumo de raccedilatildeo g 448106plusmn3333 441022plusmn6500 441370plusmn5178 437133plusmn7327 445129plusmn4655 309 ns

Conversatildeo alimentar gg 1784plusmn0013 1777plusmn0011 1746plusmn0005 1807plusmn0021 1789plusmn0008 177 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 15844-0000270801X+0000000325260X2 R2 = 070

69Tabela 6 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito

1300 1450 1600 1750 1900

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 75785plusmn402 77320plusmn1073 78103plusmn635 79648plusmn670 80151plusmn344 212 Linear1

Consumo de raccedilatildeo g 89299plusmn1140 92124plusmn2246 103470plusmn4037 104782plusmn562 96677plusmn1665 557 Quadraacutetico2

Conversatildeo alimentar gg 1179plusmn0007 1192plusmn0031 1326plusmn0055 1316plusmn0012 1207plusmn0026 613 Quadraacutetico3

1150 1300 1450 1600 1750

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 177261plusmn2817 177088plusmn2760 180666plusmn2220 182398plusmn3067 177484plusmn2109 359 ns

Consumo de raccedilatildeo g 358840plusmn5051 353952plusmn5112 356084plusmn2723 358440plusmn6584 354362plusmn2670 322 ns

Conversatildeo alimentar gg 2025plusmn0013 1999plusmn0017 1972plusmn0016 1965plusmn0006 1997plusmn0013 165 Quadraacutetico4

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 253047plusmn2782 254408plusmn3313 258769plusmn2443 262046plusmn3324 257635plusmn2041 269 Linear5

Consumo de raccedilatildeo g 448139plusmn5104 446076plusmn6429 459554plusmn4864 463275plusmn6840 451039plusmn3651 297 ns

Conversatildeo alimentar gg 1771plusmn0009 1754plusmn0015 1777plusmn0022 1768plusmn0005 1751plusmn0012 192 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 759898+00737276X R2 = 081 2 Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=085 3 Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 = 096 4 Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031 5 Y = 253818+0112096X R2 = 017

70

149150151152153154155156157158159

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo A

limen

tar

Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Na progecircnie natildeo suplementada com dieta contendo Arg verificou-se efeito

quadraacutetico (Plt005) da nutriccedilatildeo das matrizes na conversatildeo alimentar (CA) (Figura 1)

sendo que 1359 de Arg dig proporcionou o melhor iacutendice Jaacute o consumo de raccedilatildeo e o

ganho de peso natildeo foram afetados (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo da matriz

O efeito observado da suplementaccedilatildeo com Arg das matrizes na CA de frangos de

corte natildeo suplementados com Arg ser atribuiacuteda ao aumento na concentraccedilatildeo desse

aminoaacutecido na gema a qual eacute responsaacutevel pela nutriccedilatildeo dos pintos durante o seu

desenvolvimento embrionaacuterio e nas primeiras horas de vida poacutes-eclosatildeo Esse aumento

pode ter efeito positivo no desenvolvimento muscular dos pintos uma vez que esse

aminoaacutecido tem accedilatildeo indireta na formaccedilatildeo muscular atraveacutes da siacutentese do hormocircnio de

crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO) Aleacutem disso a Arg ainda estaacute envolvida na

siacutentese da creatina e de poliaminas As poliaminas satildeo consideradas de importacircncia

nutricional no crescimento e desenvolvimento do intestino do neonato (Quinn et al

2002) Segundo Foye et al(2005) o acesso do embriatildeo a nutrientes pode melhorar o

desenvolvimento do sistema digestoacuterio a eclodibilidade e o desempenho dos frangos

Quando o comportamento da curva do consumo de raccedilatildeo dos frangos de corte

que receberam dietas suplementadas com Arg foi analisada verifica-se que apoacutes o

ponto de maior consumo de raccedilatildeo ocorre uma queda na curva (Figura 2) Esse efeito

pode ter sido ocasionado por um desequiliacutebrio dos aminoaacutecidos na dieta afetando

principalmente a relaccedilatildeo LysArg O antagonismo entre esses aminoaacutecidos prejudica a

absorccedilatildeo desses uma vez que ambos competem pelo mesmo siacutetio de absorccedilatildeo

Segundo Fernandes et al (2009) o efeito negativo da suplementaccedilatildeo de Arg

pode estar associado agrave incapacidade funcional dos rins em eliminar o excesso de ureia

formado pela degradaccedilatildeo da Arg Niacuteveis elevados de Arg promovem aumento na

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 070

1359

71

atividade da arginase renal produzindo ornitina e ureia (Stuz et al 1971) Este aumento

pode comprometer a siacutentese de NO visto que a Arg eacute a uacutenica via fisioloacutegica de

produccedilatildeo deste composto Adicionalmente a isso a elevaccedilatildeo da ureia plasmaacutetica de

acordo com Prabhakar et al (1997) pode inibir a accedilatildeo da oacutexido niacutetrico sintetase (NOS)

enzima que cataliza a reaccedilatildeo que converte Arg em NO O NO aleacutem de

neurotransmissor tambeacutem modula a liberaccedilatildeo de outros neurotransmissores (Estrada amp

Murilo-Carretero 2005) cujo envolvimento destas moleacuteculas na regulaccedilatildeo do apetite

vem sendo discutido (Denbow 1999)

750

800

850

900

950

1000

1050

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

sum

o de

raccedilatilde

o (g

)

730

740

750

760

770

780

790

800

810

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Gan

ho d

e pe

so (g

)

105

11

115

12

125

13

135

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo das matrizes com dietas com Arg natildeo afetou as variaacuteveis de

desempenho da progecircnie natildeo suplementada com Arg no periacuteodo de 21 a 42 dias de

idade (Pgt005) Poreacutem quando a progecircnie recebeu dieta com Arg verificou-se efeito

quadraacutetico para conversatildeo alimentar (Plt005) e o melhor resultado foi alcanccedilado com

1669 de Arg (Figura 3)

Sabe-se que a conversatildeo alimentar indica a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo da dieta para

o crescimento e deposiccedilatildeo muscular Assim o crescimento consiste em parte do

resultado da siacutentese proteica e a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo dependem da quantidade de

aminoaacutecidos que estatildeo sendo catabolizados (Sklan amp Noy 2004) Este processo

depende de energia para a biotransformaccedilatildeo e a eliminaccedilatildeo com custo metaboacutelico para

Y = 759898+00737276X R2 = 085

Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 =0 96

Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=081

1690

1649

72

incorporar um aminoaacutecido na cadeia proteica de 4 mol de ATP e de 6 mol de ATPg de

N para eliminaacute-lo (Mc Leoad 1997)

194195196197198199

2201202203204

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo de Arg durante todo o periacuteodo de criaccedilatildeo eacute essencial para que

a ave expresse todo o seu potencial geneacutetico principalmente em relaccedilatildeo ao ganho de

peso Para a progecircnie suplementada no periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade)

observou-se efeito linear positivo (Pgt005) no ganho de peso e para a progecircnie que natildeo

recebeu suplementaccedilatildeo natildeo foi observado efeito(Pgt005) da suplementaccedilatildeo das

matrizes nas variaacuteveis de desempenho (Figura 4)

2500

2520

2540

2560

2580

2600

2620

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Gan

ho d

e Pe

so (g

)

Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

De fato segundo Fernandes et al (2009) a suplementaccedilatildeo de Arg acima das

exigecircncias nas raccedilotildees iniciais (1 a 21 dias) dos frangos melhora o desempenho

produtivo das aves entretanto esse efeito eacute transiente natildeo havendo diferenccedila nestas

caracteriacutesticas na idade de abate

Na fase inicial de criaccedilatildeo a Arg eacute considerada um aminoaacutecido essencial na dieta

das aves visto que o ciclo da ureia natildeo eacute funcional nas aves Assim a incapacidade

desses animais em sintetizar Arg implica na necessidade do fornecimento desse

aminoaacutecido na dieta Aleacutem disso a Arg eacute considerada o quinto aminoaacutecido limitante

Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031

1669

Y = 253818+0112096X R2 = 017

73

para frangos em dietas agrave base de milho e de farelo de soja apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Segundo Ball et al (2007) a exigecircncia de Arg pelas aves eacute a mais alta entre as

espeacutecies de animais estudadas isso porque aleacutem da falta da siacutentese endoacutegena a taxa de

deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento das atuais linhagens de corte eacute muito alta

Os valores meacutedios de desempenho (Tabelas 5 e 6) apresentados durante o

periacuteodo experimental total (1 a 42 dias) satildeo muito proacuteximos Assim foi realizada a

anaacutelise conjunta de ambos os experimentos para confirmar a necessidade ou natildeo de

suplementaccedilatildeo da progecircnie com Arg na dieta No periacuteodo total de 1 a 42 dias (Tabela

7) a CA foi melhor na progecircnie que recebeu dieta suplementada apesar do CR ter sido

superior nessas aves demonstrando assim que a progecircnie suplementada com Arg

converte mais eficientemente a raccedilatildeo em massa muscular

Tabela 7 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg

1 a 21 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 70120plusmn585 108428plusmn789 1547plusmn0007

Progecircnie (suplementada) 78202plusmn406 97271plusmn1456 1243plusmn0018

CV () 473 913 0011 22 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 178468plusmn1380 334124plusmn1877 1874plusmn010

Progecircnie (suplementada) 178979plusmn1160 356346plusmn1981 1992plusmn0007

CV () 1182 1999 0007 1 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 248588plusmn1487 442552plusmn2419b 1781plusmn0006b

Progecircnie (suplementada) 257181plusmn1315 453617plusmn2597a 1764plusmn0006a

CV () 1347 2477 0006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Dentre os paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada

apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis

suplementares de Arg recebidos pelas matrizes (Figura 5)

74

Tabela 8 ndash Meacutedias e erro padratildeo de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito Paracircmetros 0943 1093 1243 1393 1543

de Carcaccedila 6944plusmn025 6863plusmn044 6987plusmn033 6953plusmn028 7009plusmn029 115 Linear1

de Peito 3587plusmn028 3519plusmn017 3662plusmn032 3639plusmn041 3618plusmn042 228 ns

de Coxa 3041plusmn032 3085plusmn019 2970plusmn033 2999plusmn032 3021plusmn022 229 ns

de Asa 1142plusmn016 1129plusmn014 1118plusmn006 1104plusmn020 1110plusmn014 329 ns

de Dorso 2279plusmn020 2352plusmn026 2267plusmn014 2287plusmn030 2262plusmn030 266 ns

de Gordura abdominal 295plusmn015 325plusmn014 292plusmn016 367plusmn019 290plusmn011 1220 ns ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 690720+000146984X R2 = 081 Tabela 9 ndash Meacutedias e erros padratildeo de rendimento da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito Paracircmetros 1150 1300 1450 1600 1750

de Carcaccedila 6993plusmn029 7022plusmn028 7138plusmn033 7128plusmn020 7160plusmn031 099 Linear1

de Peito 3579plusmn030 3584plusmn077 3690plusmn021 3651plusmn028 3698plusmn019 277 Linear2

de Coxa 3126plusmn030 3108plusmn066 3027plusmn025 3026plusmn023 3045plusmn020 295 Linear3

de Asa 1137plusmn022 1123plusmn015 1105plusmn017 1095plusmn015 1096plusmn021 398 Linear4

de Dorso 2272plusmn033 2286plusmn057 2263plusmn028 2273plusmn028 2260plusmn048 436 ns

de Gordura abdominal 314plusmn013 311plusmn013 238plusmn007 279plusmn014 285plusmn007 964 Quadraacutetico5 1 Y = 700017+000293620X R2= 045 2 Y = 357918+000203737X R2 = 027 3 Y = 311542-000163610X R2=021 4 Y = 113323-000072978X R2 = 085 5 Y = 322863-000316200X+000000424975X2R2=030 ns = natildeo significativo

75

686

688

69

692

694

696

698

70

702

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

d

e C

arca

ccedila

Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Al-Murrani (1982) demonstrou que injetando uma mistura de aminoaacutecidos nos

embriotildees em crescimento nos ovos de matrizes de corte resultam em aumento no peso

do pinto e no ganho de peso dos frangos de corte aos 56 dias de idade quando estes

foram comparados com os natildeo tratados De fato o peso do embriatildeo e dos pintos eacute

influenciado pelo perfil nutricional da gema por sua utilizaccedilatildeo pelo pintos apoacutes o

nascimento (Otha et al 1999)

Quando os frangos receberam dietas suplementadas com Arg houve aumento

linear positivo (Plt005) da porcentagem de carcaccedila e de peito poreacutem as porcentagens

de pernas e de asa apresentaram queda linear (Plt005) (Figura 6) Esses efeitos

provavelmente ocorreram pela accedilatildeo indireta da Arg pela formaccedilatildeo muscular atraveacutes da

siacutentese do hormocircnio do crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO)

A Arg eacute constituinte de proteiacutenas e estaacute envolvida na secreccedilatildeo de insulina pelo

pacircncreas (Bolea et al 1997) e do GH pela hipoacutefise (Merimee et al 1969) Os efeitos

desses hormocircnios se manifestam por meio da secreccedilatildeo secundaacuteria dos fatores de

crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Roith et al 2001) O IGF-I eacute conhecido

por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo esqueleacutetico como

a proliferaccedilatildeo e a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelites (Florini et al 1996) e a agregaccedilatildeo

de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos na siacutentese e na degradaccedilatildeo proteica

(Duclos et al 2005)

Outro mecanismo de accedilatildeo da Arg nas fibras musculares estaacute relacionada com agrave

accedilatildeo do oacutexido niacutetrico O NO eacute sintetizado pela oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) a qual eacute

expressada pelas fibras do muacutesculo esqueleacutetico (Reid 2001) A atividade da NOS

variam nos diferentes tipos de muacutesculos sendo que nos muacutesculos de contraccedilatildeo raacutepida

verifica-se maior accedilatildeo desta do que nos muacutesculos de contraccedilatildeo lenta (Reid 2001)

Y = 690720+000146984X R2 = 081

76

Assim o efeito observado nos diferentes cortes provavelmente ocorreu em virtude da

predominacircncia de fibras brancas ou Fast Glycolytic (FG) no peito Em contrapartida os

muacutesculos da coxa sobrecoxa e da asa possuem predominacircncia de fibras vermelhas ou

Slow Oxidative (SO) que satildeo de contraccedilatildeo lenta (Sartori amp Gonzaacuteles 2002) e pouco

afetada pela accedilatildeo da NOS

O teor de gordura abdominal presente na carcaccedila de frangos eacute um dos melhores

indicativos de qualidade da carcaccedila Quando os frangos foram suplementados com

niacuteveis de Arg verificou-se efeito quadraacutetico (Plt005) para essa caracteriacutestica em que o

menor teor de gordura abdominal foi obtido com 1672 de Arg dig (Figura 6) A

queda observada ateacute esse niacutevel pode ser explicada pela accedilatildeo do GH via IGF-I que induz

a siacutentese de proteiacutenas por estimular a captaccedilatildeo de aminoaacutecidos e a transcriccedilatildeo e a

traduccedilatildeo do mRNA em vaacuterios tecidos-alvo Diminui o catabolismo de proteiacutenas por

atuar diretamente na liberaccedilatildeo de aacutecidos graxos do tecido adiposo aumentando a sua

conversatildeo em acetil-CoA fonte de energia para os tecidos perifeacutericos A partir desse

ponto onde verifica-se o menor acuacutemulo de gordura ocorre novamente o aumento na

deposiccedilatildeo de gordura abdominal Isso provavelmente se deve ao excesso de aminoaacutecido

na dieta A degradaccedilatildeo desse excesso leva a excreccedilatildeo de nitrogecircnio na urina na forma

de amocircnia e a produccedilatildeo de moleacuteculas com esqueleto carbocircnico que satildeo usadas na

gliconeogecircnese e na lipogecircnese

Segundo Shutte amp Pack (1995) e Leclerq (1998) a suplementaccedilatildeo e o

balanceamento dos aminoaacutecidos das dietas podem promover aumento no ganho de

carcaccedila principalmente em relaccedilatildeo ao peito (Pophal et al 2004) e reduccedilatildeo de gordura

abdominal (Vieira et al 2004)

Mendes et al (1997) verificaram que o aumento da relaccedilatildeo ArgLys melhorou o

rendimento de carcaccedila e reduziu a gordura abdominal em frangos de corte Costa et al

(2001) observaram que agrave medida em que se aumentou a relaccedilatildeo ArgLys houve efeito

linear crescente para o rendimento de perna e decrescente para a gordura abdominal Jaacute

Fernandes et al (2009) natildeo observaram efeito da suplementaccedilatildeo de Arg nas variaacuteveis de

rendimento de carcaccedila analisadas o que provavelmente ocorreu porque diferentemente

do presente trabalho a suplementaccedilatildeo de Arg foi realizada apenas na fase inicial de

criaccedilatildeo (1 a 21 dias de idade)

77

69

695

70

705

71

715

72

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

arca

ccedila

35352354356358

36362364366368

37372

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

P

eito

296298

30302304306308

31312314

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

oxa

106

107

108

109

11

111

112

113

114

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

A

sa

2

22

24

26

28

3

32

34

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

G

ordu

ra a

bdom

inal

Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Outra possibilidade eacute que essas caracteriacutesticas de rendimento de carcaccedila foram

influenciadas pelos niacuteveis dieteacuteticos de Arg que estatildeo acima da exigecircncia das aves

Resultado contraacuterio foi obtido por Atencio et al (2004) que trabalhando com niacuteveis

crescentes de Arg natildeo verificaram efeito no rendimento de carcaccedila e de cortes

avaliados e estes concluiacuteram que os niacuteveis estudados estavam dentro da exigecircncia das

aves

Na anaacutelise conjunta do rendimento de carcaccedila dos experimentos da progecircnie

que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg (Tabela 10) demonstrou-se que a

presenccedila de Arg na dieta promove maior deposiccedilatildeo muscular na coxa e menor acuacutemulo

de gordura abdominal na carcaccedila

Y = 322863-000316200X+000000424975X2 R2 = 030

1672

Y = 700017+000293620X R2 = 045 Y = 357918+000203737X R2 = 027

Y = 113323-000072978X R2 = 085 Y = 311542-000163610X R2 = 021

Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

78

Tabela 10 ndash Meacutedias de percentagem de carcaccedila (CARC) percentagem de peito (PEITO) percentagem de coxa (COXA) percentagem de asa (ASA) percentagem de gordura abdominal (GORDURA) das progecircnies suplementadas ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

CARC PEITO COXA ASA GORDURAProgecircnie

(ssuplementaccedilatildeo) 6951plusmn016 3605plusmn017 3023plusmn014b 1121plusmn007 307plusmn007ordf

Progecircnie (suplementada) 7088plusmn017 3640plusmn020 3066plusmn017ordf 1111plusmn008 285plusmn007b

CV () 014 017 015 007 006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Com relaccedilatildeo aos paracircmetros oacutesseos dos frangos de corte que receberam dietas

sem suplementaccedilatildeo de Arg (Tabela 11) apenas o diacircmetro de tiacutebia aos sete dias de

idade foi afetado de forma quadraacutetica (Plt005) pela suplementaccedilatildeo das matrizes a

partir do niacutevel 1196 de Arg (Figura 7) demonstrando assim que inclusotildees de Arg

acima da exigecircncia promove a melhora dessa caracteriacutestica Segundo Wu amp Morris

(1998) a suplementaccedilatildeo de Arg em niacuteveis elevados promove aumento na atividade da

arginase renal eleva os niacuteveis de ornitina que participa da biossiacutentese das poliaminas

envolvidas no processo de multiplicaccedilatildeo celular melhorando desta forma o suporte

oacutesseo Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram aumento na concentraccedilatildeo

plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez secretado pela

hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio receptor e

indiretamente via IGF-I e II nos tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos

do GH ocorre no disco epifisaacuterio em que atua estimulando a siacutentese de IGF-I o qual

atua paracrinamente induzindo mitogecircnese o que resulta no crescimento dos ossos

longos (Isaksson et al 1987)

Para os paracircmetros morfoloacutegicos dos ossos dos frangos que receberam dietas

contendo suplementaccedilatildeo de Arg verifica-se efeito linear crescente (Plt005) dos niacuteveis

de arginina para o comprimento e diacircmetro do fecircmur e da tiacutebia O mesmo

comportamento foi observado para o iacutendice de Seedor medida indireta da densidade

oacutessea para ambos os ossos aos 7 dias de idade (Figura 8)

79

Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Fecircmur Tiacutebia Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arg na dieta materna

()

7 dias

0943 2930plusmn034 286plusmn008 2803plusmn027 4154plusmn047 271plusmn005 2925plusmn078 1093 2929plusmn042 293plusmn008 2990plusmn123 4162plusmn062 265plusmn005 2945plusmn096 1243 2911plusmn031 283plusmn008 2603plusmn078 4175plusmn042 258plusmn004 2733plusmn063 1393 2912plusmn046 295plusmn008 2920plusmn086 4172plusmn062 273plusmn003 3008plusmn117 1543 2983plusmn031 293plusmn009 2877plusmn068 4269plusmn039 275plusmn002 2897plusmn038

CV 313 690 712 306 377 701 Regressatildeo ns ns ns Ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- ----- ----- 081 -----

21 dias

0943 5001plusmn056 594plusmn019 10198plusmn294 7128plusmn141 526plusmn012 9621plusmn202 1093 5064plusmn036 632plusmn015 10928plusmn175 7197plusmn086 576plusmn008 10720plusmn182 1243 4937plusmn065 574plusmn013 9956plusmn396 6911plusmn094 514plusmn023 9899plusmn357 1393 5002plusmn062 569plusmn011 9822plusmn346 6912plusmn123 512plusmn009 9537plusmn341 1543 5035plusmn026 613plusmn020 11288plusmn337 7005plusmn135 535plusmn011 10928plusmn339

CV 252 657 747 411 635 711 Regressatildeo ns ns ns Ns ns ns R2 ----- ----- ----- ----- ----- -----

ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

80

Tabela 12 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Paracircmetros oacutesseos Fecircmur Tiacutebia

Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arginina () 7 dias 1300 3007plusmn042 309plusmn011 3194plusmn102 4260plusmn041 285plusmn012 3164plusmn122 1450 3022plusmn036 313plusmn007 3333plusmn098 4311plusmn055 293plusmn008 3202plusmn087 1600 3074plusmn023 321plusmn007 3435plusmn102 4352plusmn024 292plusmn004 3405plusmn101 1750 3098plusmn011 322plusmn007 3348plusmn089 4324plusmn044 293plusmn003 3315plusmn114 1900 3058plusmn015 322plusmn012 3540plusmn140 4350plusmn019 305plusmn005 3503plusmn108 CV 225 712 781 220 608 789 Regressatildeo Linear1 ns Linear2 Ns Linear3 Linear4 R2 023 ----- 020 ----- 030 045

21 dias 1300 1300 1450 1600 1750 553plusmn016 9974plusmn408 1450 5032plusmn031 595plusmn015 9973plusmn343 7122plusmn058 533plusmn019 9675plusmn313 1600 5062plusmn068 614plusmn009 10623plusmn306 7102plusmn041 566plusmn015 10453plusmn286 1750 5134plusmn043 597plusmn013 10024plusmn226 7341plusmn180 548plusmn007 9577plusmn168 1900 5111plusmn044 615plusmn013 10942plusmn185 7145plusmn064 562plusmn008 10751plusmn333 CV 231 567 732 333 619 757 Regressatildeo ns ns Linear5 Ns ns ns R2 ----- ----- 030 ----- ---- -----

NS = natildeo significativo 1 Y = 301662+000117500X 2 Y = 322856+000471280X 3 Y = 285333+0000799183X 4 Y = 315921+000526700X 5 Y = 983310+00149518X

255

26

265

27

275

28

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Diacirc

met

ro d

a Tiacute

bia

(mm

)

Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados encontrados para essa idade estatildeo de acordo com os encontrados

por Fernandes (2007) que encontrou efeito linear crescente para o iacutendice de Seedor

quando as aves foram alimentadas com Arg na dieta Aos 21 dias de idade apenas o

iacutendice de Seedor foi afetado de forma linear (Plt005) crescente com o aumento dos

niacuteveis de Arg (Figura 9) O comportamento positivo da suplementaccedilatildeo de arginina sobre

a morfologia do fecircmur e da tiacutebia pressupotildee melhor densidade desses ossos Segundo

Sekine et al (1994) os aminoaacutecidos no o crescimento transverso do osso e essa accedilatildeo

facilita a formaccedilatildeo da matriz e a calcificaccedilatildeo oacutessea

Aleacutem da accedilatildeo da Arg sobre os ossos indiretamente via IGF-I esta tambeacutem eacute

conhecida como precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo pelo qual ela poderia exercer os

seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo Hukkanem et al (1999) sugerem que o

NO pode participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento

298

30

302

304

306

308

31

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Com

prim

ento

- Fecirc

mur

(mm

)

30531

31532

32533

33534

34535

355

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - F

ecircmur

Y = 301662+000117500X R2 = 023 Y = 322856+000471280X R2 = 020

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

Arginina dig ()

82

26

27

28

29

3

31

32

33

34

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Diacirc

met

ro -

Tiacutebi

a (m

m)

30305

31315

32325

33335

34345

35

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - T

iacutebia

Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada ou natildeo com Arg avaliados em

conjunto mostraram que a suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg melhorou o comprimento do

fecircmur e a espessura da tiacutebia Este resultado pode contribuir para melhorar a qualidade

dos ossos dos frangos uma vez que esse eacute um dos maiores problemas enfrentados na

atualidade na avicultura comercial

Tabela 13 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

FC (mm)

FE (mm) FSEE TC

(mm) TE

(mm) TSEE

7 dias Progecircnie

(ssuplementaccedilatildeo)

2933plusmn016

290plusmn003

2838plusmn042

4186plusmn023

268plusmn002

2902plusmn038

Progecircnie (suplementada)

3052plusmn013

317plusmn004

3369plusmn049

4319plusmn017

293plusmn003

3317plusmn050

CV () 014 004 042 021 0026 043 21 dias

Progecircnie (ssuplementaccedil

atildeo)

5008plusmn023b

596plusmn008

10438plusmn170

7031plusmn053

533plusmn007b

10141plusmn162

Progecircnie (suplementada)

5079plusmn021ordf

607plusmn006

10282plusmn150

7157plusmn044

552plusmn006ordf

10086plusmn154

CV () 016 007 140 048 006 136 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Y = 315921+000526700X R2 = 045 Y = 285333+0000799183X R2 = 030

83

96597

97598

98599

995100

1005101

1015102

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig

Iacutendi

ce d

e Se

edor

- Fecirc

mur

Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade

Conclusatildeo

De acordo com os resultados observados conclui-se que os niacuteveis dieteacuteticos de

Arg na dieta das matrizes de corte foram suficientes para melhorar o desempenho da

progecircnie somente na fase inicial de crescimento (1-21 dias de idade) Quando a dieta da

progecircnie tambeacutem foi suplementada com Arg os paracircmetros de desempenho

rendimento de carcaccedila e qualidade oacutessea satildeo melhorados em ambas as fases de criaccedilatildeo

(1-21 dias e 22 a 42 dias de idade) com melhorias imprescindiacuteveis para a qualidade de

carne como a reduccedilatildeo da gordura abdominal

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V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos sete dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavra-chave arginina ELISA fitohemaglutinina sistema imune

V - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

humoral and cellular immunity response of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level being considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses

Key words arginine ELISA phytohemagglutinin immune system

91

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo da matriz afeta o desempenho dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias de

vida portanto a necessidade da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos O sistema imune das aves difere dos mamiacuteferos em algumas

caracteriacutesticas particularmente nos aspectos de estrutura e de diferenciaccedilatildeo dos oacutergatildeos

linfoides (Jeurissen et al 1994) cujo desenvolvimento se inicia durante a vida

embrionaacuteria e se prolonga apoacutes a eclosatildeo ou nascimento

As uacuteltimas horas de incubaccedilatildeo e os primeiros dias de vida poacutes-eclosatildeo satildeo

fundamentais para que este desenvolvimento se complete Somente apoacutes a segunda

semana de vida a ave seraacute capaz de produzir suas proacuteprias imunoglobulinas Ateacute laacute a

imunidade herdada da matildee pela absorccedilatildeo das imunoglobulinas presentes no ovo eacute o

uacutenico mecanismo de defesa do neonato contra as agressotildees do meio externo apoacutes a

eclosatildeo (Maiorka et al 2006)

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas A arginina (Arg) eacute

considerada um aminoaacutecido essencial para aves sobretudo na fase inicial por que o

ciclo bioquiacutemico da ureia natildeo eacute funcional em aves Assim estas natildeo podem sintetizar

Arg e satildeo portanto dependentes do fornecimento deste aminoaacutecido nas dietas Dentre

as espeacutecies animais estudadas as aves tecircm a mais alta exigecircncia de Arg (Ball et al

2007) que se deve tambeacutem agrave alta taxa de deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento

das atuais linhagens de corte e o antagonismo com a Lys

A Arg eacute necessaacuteria para siacutentese de vaacuterias compostos tais como ornitina

poliaminas prolina creatina de proteiacutenas oacutexido niacutetrico (NO) e citrulina aleacutem de

92

glutamato e agmatina em mamiacuteferos A Arg eacute tambeacutem considerada um potente

secretagogo aumentando a liberaccedilatildeo na corrente sanguiacutenea da insulina hormocircnio do

crescimento (GH) e fator de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I) (Newsholme et

al 2005) Esta accedilatildeo eacute em consequecircncia da raacutepida despolarizaccedilatildeo da membrana

plasmaacutetica ligada ao transporte de aminoaacutecidos com a cadeia lateral positiva

De acordo com Le Flocrsquoh et al (2004) os animais estimulados

imunologicamente podem ter suas necessidades de Arg aumentadas Duas rotas do

metabolismo da Arg satildeo identificadas e conhecidas por ter efeitos imunomodulatoacuterios

diretos A primeira na qual a Arg eacute convertida a ornitina gerando poliaminas que tecircm

papel chave na divisatildeo celular siacutentese de DNA e regulaccedilatildeo do ciclo celular A segunda

corresponde agrave siacutentese do NO induzida por vaacuterios de estiacutemulos inflamatoacuterios como as

endotoxinas bacterianas e as citocinas Essa rota eacute essencial para a atividade citotoacutexica

de macroacutefagos O NO tambeacutem estimula a vasodilataccedilatildeo local e favorece ainda a

reparaccedilatildeo tecidual (Bredt amp Snyder 1994)

Com este trabalho objetivou-se avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina na

dieta das matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie

suplementadas ou natildeo

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

93

dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

em um delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-

Arginina incluiacutedos na dieta materna (0 150 300 450 e 600 mgkg da dieta materna)

que equivaleram aos niacuteveis de 0 9431093 12431393 e 1 543 de Arg

digestiacutevel com seis repeticcedilotildees com 35 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo estes substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada boxe foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado um

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

durante todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as aves e as sobras de raccedilatildeo do boxe foram pesadas

ao mesmo tempo para ajustar o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 1) As

dietas experimentais agrave base de milho e farelo de soja foram formuladas de acordo com

os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e recomendaccedilotildees nutricionais de

Rostagno et al (2005) As aves receberam uma uacutenica raccedilatildeo sem suplementaccedilatildeo de

arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz sobre o desempenho

da progecircnie

94

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 018 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 18500 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

95

Experimento 2 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes atraveacutes de um delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na

dieta materna de 0 a 600 mgkg da dieta de Arg digestiacutevel acima da recomendaccedilatildeo dos

frangos de corte e seis repeticcedilotildees com 32 aves cada totalizando 30 unidades

experimentais

O manejo realizado nesse experimento foi conduzido conforme descrito no

experimento anterior com diferenccedila com relaccedilatildeo ao tipo de dieta utilizada

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg da dieta acima da exigecircncia dos frangos de corte agrave raccedilatildeo

basal inicial em substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial

corresponderam a 1300 1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela

2) A partir dos 22 dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300

1450 1600 e 1750 de Arg digestiacutevel (Tabela 3)

96

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900 Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6457 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 130 145 160 175 190 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

97

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 075 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 1000 1000 1000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI

VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

Colheita de Sangue e Anaacutelise de Tiacutetulos vacinais

No 7ordm dia de vida antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm foram coletadas

amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo As aves foram vacinadas contra a

doenccedila de New Castle (Fort-Dodgereg) via ocular na dose de 003 mL por ave aos sete e

21 dias de idade A venopunccedilatildeo foi realizada mediante contenccedilatildeo fiacutesica manual dos

98

animais preferencialmente na veia jugular direita com seringa de 3 mL e agulha 13x45

e uma quantia de sangue coletada em torno de 1 do peso corporal dos animais O

sangue foi acondicionado em tubos de vidro identificados sem anticoagulante para

obtenccedilatildeo de soro sanguiacuteneo No soro foi avaliada a titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais

contra o viacuterus de Doenccedila Newcastle pelo teste imunoenzimaacutetico (ELISA-teste) As

anaacutelises foram processadas em kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent

Assay) do Laboratoacuterio Idexxreg e os dados obtidos foram expressos em absorbacircncia Os

dados de titulaccedilatildeo de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Anaacutelise Histomorfomeacutetrica

No 7ordm e 21ordm dia de idade o timo a bolsa cloacal o baccedilo e o fiacutegado de duas aves

por repeticcedilatildeo foram coletados totalizando doze aves por tratamento Para a realizaccedilatildeo

dessa coleta as aves foram submetidas ao atordoamento por choque e posterior sangria

Apoacutes o sacrifiacutecio as aves foram pesadas individualmente e as carcaccedilas dessecadas para

remoccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides (Timo Baccedilo e Bolsa de Fabricius) O peso dos oacutergatildeos

linfoides foi obtido imediatamente apoacutes a dessecaccedilatildeo e remoccedilatildeo dos tecidos exoacutegenos

Os oacutergatildeos coletados foram pesados em balanccedila de precisatildeo e o peso da ave foi

devidamente anotado

O peso relativo de cada oacutergatildeo foi obtido pela foacutermula

Peso relativo = (peso oacutergatildeopeso vivo) x 100

Para a medida histomorfomeacutetrica dos foliacuteculos linfoides as bolsas cloacais e o

fiacutegado foram acondicionadas em frascos contendo soluccedilatildeo de formol tamponado a 10

(De Tolosa et al 2003) com finalidade de manter a integridade dos tecidos apoacutes a

morte preservando a arquitetura celular As peccedilas foram incluiacutedas em parafina e levadas

ao microacutetomo rotativo para a realizaccedilatildeo dos cortes transversais no centro do oacutergatildeo com

sete microcircmetros de espessura e corados pelo meacutetodo da hematoxilina e eosina (HE) As

lacircminas foram escaneadas usando-se um ldquoscaner HP ScanJet II v25rdquo sendo o

ldquosoftwarerdquo utilizado para o tratamento das imagens o ldquoPaint Shop Pro v50rdquo A

imagem foi digitalizada brilho (variaacutevel entre 125 e 145) contraste 185 e escala de

800 As imagens foram gravadas com extensatildeo jpg e levadas ao analisador de

imagens Para a leitura das imagens foi utilizado um analisador de imagem

computadorizado IMAGE PROPLUS 52 da Miacutedia Cibertecnics Foi mensurada a

altura de trecircs dobras do tecido linfoide de cada repeticcedilatildeo (12 aves por tratamento) e

destes valores foi obtida a meacutedia

99

Nas amostras de fiacutegado foi analisada a presenccedila de aglomerados linfoides As

lacircminas com porccedilotildees do fiacutegado foram analisadas em toda sua extensatildeo e os

aglomerados linfoides foram quantificados atraveacutes de microscopia de luz com aumento

de 10X (Olympus BH2 Olympus America INC NY USA)

Fitohemaglutinina (PHA)

Aos 35 dias de idade duas aves por repeticcedilatildeo totalizando 12 aves por tratamento

foram marcadas com anilhas numeradas e utilizadas para avaliar a imunidade mediada

por ceacutelulas in vivo (Corrier amp DeLoach 1990) Cada ave foi inoculada

intradermicamente no espaccedilo interdigital entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata direita com 01

mL de uma soluccedilatildeo fitohemaglutinina PHA-Mreg (1057601 - Invitrogen) Como controle

negativo 01 mL de soro fisioloacutegico esteacuteril foi inoculado entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata

esquerda O espessamento da pele de ambas as patas foi aferido em miliacutemetros

utilizando-se um paquiacutemetro digital antes da inoculaccedilatildeo e apoacutes trecircs seis 12 e 24 horas

apoacutes a inoculaccedilatildeo O caacutelculo (Corrier amp DeLoach 1990) apresentou-se da seguinte

forma Reaccedilatildeo = resposta a fitohemaglutinina ndash resposta do controle na qual a resposta

a fitohemaglutinina eacute medida pela espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo menos

a espessura no tempo zero (antes da inoculaccedilatildeo) A resposta do controle eacute medida pela

espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo (Soro) menos a espessura no tempo zero

(antes da inoculaccedilatildeo)

Avaliaccedilatildeo da Atividade Fagociacutetica de Macroacutefagos

Para avaliaccedilatildeo da atividade fagociacutetica de macroacutefagos foram utilizadas duas aves

por repeticcedilatildeo totalizando quatro aves por tratamento As aves foram inoculadas no 35ordm

dia de vida atraveacutes de injeccedilatildeo intra-abdominal de Sephadex G-50reg (Sigma) a 3 (10

mL100g de peso vivo) (Qureshi et al 1986 Gore amp Qureshi 1997 Konjufca 2004)

Utilizaram-se para esse procedimento cateteres intravasculares G-14 Apoacutes 42

horas as aves foram submetidas a atordoamento por eletronarcose e sacrificadas atraveacutes

de desligamento cervical Foram lavadas (detergente neutro) e sanitizadas (aacutelcool 70)

As aves foram transportadas ao laboratoacuterio onde se procedeu a abertura da cavidade

abdominal que foi posteriormente lavada com 20 mL de soluccedilatildeo de PBS esteacuteril

heparinizada contendo 05 UIL (Liqueminereg 25000 UI5mL ndash Roche)

Coletaram-se aproximadamente 15 mL de liacutequido abdominal com auxiacutelio de

pipetas Pasteur que foi imediatamente acondicionado em tubos Falcon em banho de

100

gelo O material foi centrifugado a 1500 rpm10 minutos sendo o ldquopelletrdquo

ressuspendido em 2 mL de meio RPMI 1640reg (Sigma) Adicionou-se 150 μL dessa

suspensatildeo a cada well da placa de cultura (24 poccedilos) contendo lamiacutenula de 13 mm de

diacircmetro Incubou-se a temperatura ambiente por uma hora Lavou-se a placa com PBS

esteacuteril gelado para remover as ceacutelulas natildeo aderentes Em seguida adicionou-se 150 μL

de suspensatildeo a 3 de eritroacutecitos de carneiros em meio RPMI 1640reg (Sigma)

incubando-se em temperatura ambiente em concentraccedilatildeo de 5 de gaacutes carbocircnico por

uma hora Lavou-se com PBS esteacuteril gelado para remover os eritroacutecitos que natildeo

aderiram Em seguida realizou-se a coloraccedilatildeo utilizando-se kit comercial (Panoacutetico

Raacutepido LBreg - Laborclin)

Apoacutes 24 horas as lacircminas foram montadas utilizando-se Permountreg Foram

contados em cada lamiacutenula 300 macroacutefagos e verificado o nuacutemero destas ceacutelulas que

continham hemaacuteceas fagocitadas A atividade fagociacutetica foi calculada considerando-se o

nuacutemero de macroacutefagos contendo hemaacuteceas fagocitadas dividido pelo nuacutemero total de

macroacutefagos contados

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

101

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Resultados e Discussatildeo

Os dados meacutedios dos pesos relativos de oacutergatildeos linfoides de frangos de corte

alimentados com dietas natildeo suplementadas estatildeo na Tabela 5 A suplementaccedilatildeo das

matrizes de corte natildeo influenciou o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie

natildeo suplementada com Arg (Pgt005) Da mesma maneira quando houve a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg para a progecircnie tambeacutem natildeo foi verificado (Pgt005)

efeito sobre o peso relativo dos oacutergatildeos linfoides dessas aves (Tabela 6)

102

Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg das Matrizes () 7 dias 21 dias

0943 058plusmn003 054plusmn004 1093 055plusmn003 056plusmn005 1243 056plusmn003 057plusmn003 1393 052plusmn004 057plusmn004 1543 052plusmn003 051plusmn005 CV 1410 1840

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

0943 006plusmn0005 011plusmn001 1093 008plusmn0007 011plusmn001 1243 012plusmn0036 009plusmn001 1393 007plusmn0007 010plusmn001 1543 009plusmn0007 010plusmn001 CV 4968 2463

Regressatildeo ns ns Baccedilo()

0943 015plusmn001 024plusmn001 1093 017plusmn001 022plusmn002 1243 016plusmn001 021plusmn001 1393 015plusmn001 022plusmn003 1543 013plusmn001 021plusmn001 CV 1885 1868

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

O timo e a bolsa cloacal satildeo oacutergatildeos linfoides primaacuterios que representam siacutetios

de maturaccedilatildeo de linfoacutecitos T e B respectivamente Estes oacutergatildeos tecircm fundamental

importacircncia no periacuteodo poacutes-eclosatildeo poreacutem agrave medida que as aves se desenvolvem e se

aproximam da maturidade sexual sofrem involuccedilatildeo fisioloacutegica (Morgullis 2002)

No contexto do desenvolvimento e maturaccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides trabalhos

desenvolvidos com mamiacuteferos demonstram que as respostas imunes podem ser

influenciadas pela Arg dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al 1998 Lewis amp

Langkamp-Henken 2000) Experimentos desenvolvidos com animais jovens

demonstraram efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina como o aumento

do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos tiacutemicos Os efeitos

imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais estressados ou

imunossupremidos

103

Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias

1300 053plusmn005 056plusmn004 1450 057plusmn004 057plusmn003 1600 059plusmn004 059plusmn003 1750 051plusmn003 048plusmn005 1900 058plusmn004 053plusmn004 CV 1910 1790

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

1300 016plusmn0011 025plusmn002 1450 015plusmn0012 020plusmn001 1600 018plusmn0007 022plusmn002 1750 019plusmn0016 026plusmn003 1900 015plusmn0007 023plusmn001 CV 1621 2021

Regressatildeo ns ns Baccedilo ()

1300 007plusmn0009 008plusmn001 1450 009plusmn0008 010plusmn001 1600 008plusmn0006 009plusmn001 1750 008plusmn0005 011plusmn001 1900 007plusmn0007 010plusmn001 CV 2227 2151

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

Para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de Arg foram

observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

nutricionais estabelecidas Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de

Arg plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular (Kidd 2004)

Ao contraacuterio dos resultados observados nesse experimento Jahanian (2009)

observou que animais na fase inicial com dietas suplementadas com Arg e com baixo

niacutevel proteico apresentaram aumento do peso relativo do timo indicando assim que a

Arg eacute necessaacuteria para a resposta oacutetima da imunidade celular

Quando se contrastam os dados do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (Tabela 7)

verificou-se a influencia da suplementaccedilatildeo de Arg no peso da bolsa cloacal (Plt005) no

periacuteodo inicial de criaccedilatildeo Esse aumento eacute de grande importacircncia uma vez que a bolsa

cloacal eacute o principal siacutetio de maturaccedilatildeo dos linfoacutecitos B que satildeo essenciais ao sistema

imune das aves Na fase de 1 a 7 dias de idade esse incremento pode refletir a melhoria

104

das condiccedilotildees imunitaacuterias jaacute que nesse periacuteodo os desafios sanitaacuterios podem

comprometer todo desempenho dessa ave ateacute o final de sua criaccedilatildeo

Tabela 7 ndash Meacutedias e erro padratildeo do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

7 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada) 054plusmn001 015plusmn0005b 0085plusmn0008

Progecircnie (suplementada) 056plusmn002 017plusmn0006ordf 0079plusmn0003

CV () 002 0005 0006 21 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada)

055plusmn001 022plusmn0007 011plusmn0005

Progecircnie (suplementada)

054plusmn002 023plusmn0009 009plusmn0004

CV () 002 008 0004 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

A anaacutelise histomorfomeacutetrica do fiacutegado natildeo mostrou influecircncia (Pgt005) das

dietas das matrizes nos aglomerados linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo (Tabela

8) Da mesma maneira as dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal natildeo foram

influenciadas (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo ou natildeo de Arg na dieta (Tabela 8)

Existe relaccedilatildeo direta entre o fiacutegado e a bolsa cloacal Nas aves os linfoacutecitos B

responsaacuteveis pela produccedilatildeo de anticorpos envolvidos na resposta imunoloacutegica humoral

satildeo produzidos no fiacutegado do embriatildeo no saco viteliacutenico e na medula oacutessea na fase

inicial da incubaccedilatildeo Apoacutes isso migram para a bolsa cloacal e sofrem amadurecimento

e diferenciaccedilatildeo por ateacute dez semanas Daiacute partem para colonizar outros oacutergatildeos como o

baccedilo e a glacircndula de Harder (Butcher amp Miles 2003) A bolsa cloacal eacute constituiacuteda de

linfoacutecitos incrustados em tecido epitelial cujas dobras se estendem no interior do

luacutemen onde se espalham os foliacuteculos linfoides Seus foliacuteculos contecircm mais de 90 de

ceacutelulas B (Tizard 1998)

105

Tabela 8 - Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg

Aglomerados Linfoacuteides Comprimento das dobras Progecircnie natildeo Suplementada Progecircnie natildeo Suplementada

Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 0943 105plusmn010 196plusmn041 1443plusmn097 3247plusmn198 1093 098plusmn028 137plusmn021 1394plusmn225 3066plusmn240 1243 077plusmn004 178plusmn029 1503plusmn060 3042plusmn109 1393 080plusmn015 170plusmn043 1449plusmn068 3112plusmn187 1543 096plusmn018 232plusmn037 1464plusmn149 3222plusmn195 CV() 4398 4708 563 915 Regressatildeo ns ns ns ns Progecircnie Suplementada Progecircnie Suplementada 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 1300 076plusmn010 168plusmn035 1936plusmn206 3535plusmn191 1450 049plusmn015 216plusmn041 1865plusmn022 4027plusmn1244 1600 072plusmn024 189plusmn022 2035plusmn064 3331plusmn036 1750 053plusmn005 192plusmn036 2195plusmn139 4487plusmn1540 1900 053plusmn012 213plusmn025 1905plusmn128 2562plusmn111 CV() 5807 4141 473 5359 Regressatildeo ns ns ns ns

Assim a progecircnie que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg natildeo

apresentou produccedilatildeo de linfoacutecitos B aumentada nem a aacuterea de desenvolvimento e

diferenciaccedilatildeo dos linfoacutecitos B prejudicada ou melhorada pela Arg (Pgt005)

Na Tabela 9 estatildeo agraves meacutedias obtidas da resposta imune celular da progecircnie com

dieta suplementada medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) para estiacutemulo de

proliferaccedilatildeo celular Dentro desse contexto observou-se que 12 horas apoacutes a injeccedilatildeo de

PHA foi possiacutevel verificar efeito quadraacutetico com aumento (Plt005) na resposta celular

das aves alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg em que a maior

resposta foi obtida com 1574 de Arg dig (Figura 1)

Segundo Corrier amp DeLoach (1990) a aplicaccedilatildeo desse teste permite a raacutepida

avaliaccedilatildeo da competecircncia imunoloacutegica celular Os basoacutefilos ceacutelulas comumente

associadas a esses processos apresentam heparina e proteases na composiccedilatildeo de seus

gracircnulos agindo intensamente nos processos de hipersensibilidade Aleacutem disso

produzem citocinas cuja participaccedilatildeo estaacute ligada aos processos inflamatoacuterios (Abbas et

al 2007)

106

Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Arginina 3 horas 6 horas 12 horas 24 horas

1300 1010plusmn0062 0793plusmn0041 0549plusmn0097 0506plusmn0036 1450 0853plusmn0077 0639plusmn0065 0631plusmn0051 0450plusmn0133 1600 0918plusmn0053 0738plusmn0040 0702plusmn0052 0543plusmn0065 1750 0797plusmn0074 0783plusmn0058 0597plusmn0061 0552plusmn0066 1900 0933plusmn0044 0777plusmn0038 0499plusmn0059 0453plusmn0062 CV 1715 1630 2724 3875 Regresatildeo ns ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- 093 -----

ns = Natildeo significativo 1 Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2 R2 = 093

Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Quando se avaliou a atividade fagociacutetica dos macroacutefagos da progecircnie

suplementada e natildeo suplementada verificou-se que os niacuteveis crescentes de Arg na dieta

natildeo afetaram (Pgt005) essa funccedilatildeo (Tabela 10) Os macroacutefagos satildeo ceacutelulas do sistema

mononuclear fagocitaacuterio (McCorkle 1998) integrantes da imunidade inata das aves

importantes tambeacutem para a imunidade adaptativa (Abbas et al 2008) atuando nos

processos de defesa do organismo destruindo agentes estranhos e tambeacutem secretando

citocinas que atuam no processo inflamatoacuterio As principais funccedilotildees executadas por essa

ceacutelula satildeo a fagocitose destruiccedilatildeo de bacteacuterias (Qureshi et al 1986) secreccedilatildeo de

prostaglandinas e citocinas e apresentaccedilatildeo de antiacutegeno para desenvolvimento da

resposta imune celular (Abbas et al 2008)

Segundo Johaniam (2009) satildeo identificadas duas vias de accedilatildeo

imunomodulatoacuteria da Arg in vivo A primeira ocorre atraveacutes da accedilatildeo da arginase que

converte a Arg em ureia e ornitina Neste processo ocorre a produccedilatildeo de poliaminas

pela accedilatildeo da ornitina decarboxilase Esta rota da siacutentese de poliaminas pode ser o

Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2R2 = 093

1574

107

caminho pelo qual a Arg aumenta a mitogecircnese dos linfoacutecitos (Klein amp Morris 1978)

A segunda via ocorre pela siacutentese de NO a partir da a partir da Arg pela accedilatildeo do oacutexido

niacutetrico sintetase resultando na formaccedilatildeo de oacutexido niacutetrico e citrulina Essa rota eacute

essencial para atividade citotoacutexica dos macroacutefagos

Tabela 10 ndash Meacutedias e erros padrotildees da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Macroacutefagos com eritroacutecitosmacroacutefagos contados Arginina Progecircnie Suplementada

1300 1570plusmn529 1450 2030plusmn480 1600 1650plusmn359 1750 2150plusmn500 1900 1830plusmn250 CV 545 Regresatildeo ns ns = Natildeo significativo

Quando avaliados os tiacutetulos de anticorpos da progecircnie verificou-se que a

alimentaccedilatildeo das matrizes com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg natildeo influenciou

os tiacutetulos de anticorpos (Pgt005) da progecircnie natildeo suplementada (Tabela 11) Para as

aves suplementadas verifica-se um efeito linear decrescente (Plt005) aos sete dias de

idade e efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade em que o niacutevel de 1674 de

Arg dig proporcionou o maior tiacutetulo de anticorpos (Tabela 12)

Os resultados observados na progecircnie suplementada mostraram-se compatiacuteveis

com as respostas das aves a campo nas quais inicialmente satildeo observados maiores

tiacutetulos de anticorpos decorrentes da imunidade materna seguido de uma queda que nas

condiccedilotildees experimentais eacute resultado da neutralizaccedilatildeo desses anticorpos pelos antiacutegenos

vacinais e por fim uma nova elevaccedilatildeo dos tiacutetulos

Este resultado concorda com o observado por outros autores Tayade et al

(2006) demonstraram que a resposta vacinal contra o viacuterus da doenccedila de Gumboro de

frangos suplementados com 2 de Arg foi 20 mais eficiente que a resposta induzida

apenas pela vacina A elevada resposta humoral e a proteccedilatildeo observada no grupo de

aves vacinado e com dieta suplementada com Arg segundo estes autores pode ser

atribuiacuteda ao nuacutemero de funccedilotildees imunorregulatoacuterias da Arg sobre o sistema

imunoloacutegico A Arg eacute necessaacuteria para a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas B e tambeacutem estaacute

envolvida na liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da bolsa ou da medula oacutessea (De Jonge et al

108

2002) Ainda segundo Abdukalykova e Ruiz-Feria (2006) niacuteveis adicionais de Arg

podem acelerar a produccedilatildeo de anticorpos em frangos de corte

29

295

3

305

31

315

32

325

33

335

34

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s(7

dia

s)

0

05

1

15

2

25

3

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s (2

8 di

as)

Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

1674

109

Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Niacuteveis de Arginina na dieta materna ()

Idade 0943 1093 1243 1393 1543 CV() Regressatildeo R2

07 dias 317plusmn099 323plusmn011 301plusmn008 324plusmn007 316plusmn015 831 ns -----

14 dias 262plusmn009 257plusmn003 242plusmn011 262plusmn011 257plusmn003 792 ns -----

21 dias 232plusmn010 247plusmn005 211plusmn010 228plusmn011 241plusmn007 941 ns -----

28 dias 241plusmn028 186plusmn014 248plusmn022 231plusmn019 214plusmn024 2378 ns -----

35 dias 275plusmn017 284plusmn015 271plusmn013 286plusmn020 291plusmn011 1361 ns -----

Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades

Niacuteveis de Arginina ()

Idade 1300 1450 1600 1750 1900 CV() Regressatildeo R2

07 dias 331plusmn012 336plusmn010 301plusmn012 329plusmn009 299plusmn009 798 Linear1 012

14 dias 226plusmn008 218plusmn019 219plusmn023 207plusmn014 245plusmn009 1715 ns -----

21 dias 232plusmn007 239plusmn006 236plusmn006 246plusmn012 240plusmn009 829 ns -----

Niacuteveis de Arginina ()

1150 1300 1450 1600 1750 CV() Regressatildeo R2

28 dias 171plusmn035 279plusmn009 298plusmn006 278plusmn019 240plusmn012 1961 Quadraacutetica2 026

35 dias 268plusmn023 299plusmn012 296plusmn018 280plusmn023 313plusmn011 1535 ns -----

110

Conclusatildeo

As dietas suplementadas com Arg mostraram-se necessaacuterias para o oacutetimo

desempenho do sistema imune celular e humoral da progecircnie natildeo bastando somente agrave

suplementaccedilatildeo das matrizes de corte

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viii

IacuteNDICE

Paacutegina

LISTA DE TABELAS ix LISTA DE FIGURAS xi I - INTRODUCcedilAtildeO 17 11 REVISAtildeO DA LITERATURA 19

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie 19 112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves 20 REFEREcircNCIAS 32

II - OBJETIVOS GERAIS 39 21 Objetivos Especiacuteficos 39

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo 40

Resumo 40 Introduccedilatildeo 42 Material e meacutetodos 43 Resultados e Discussatildeo 47 Conclusatildeo 52 Referecircncias 53

IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie 57

Resumo 57 Introduccedilatildeo 59 Material e Meacutetodos 60 Resultados e discussatildeo 67 Conclusatildeo 83 Referecircncias 83

V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie 89

Resumo 89 Introduccedilatildeo 91 Material e Meacutetodos 92 Resultados e Discussatildeo 101 Conclusatildeo 110 Referecircncias 110

VI - CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 113

ix

LISTA DE TABELAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental 45 Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 48 Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 50 Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico 51 Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 52

Capiacutetulo IV Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg48 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)50 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)51 Tabela 4 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg55 Tabela 5 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg56 Tabela 6 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg60 Tabela 7 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementadas provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg64 Tabela 8 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento da progecircnie suplementada com dietas suplementadas contendo niacuteveis de Arg64

x

Tabela 9 ndash Meacutedias de porcentagem de carcaccedila (CARC) porcentagem de peito (PEITO) porcentagem de coxa (COXA) porcentagem de asa (ASA) porcentagem de gordura abdominal (GORDURA) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg65 Tabela 10 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de arginina67 Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg69 Tabela 12 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade72

Capiacutetulo V Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das dietas experimentais das matrizes de frangos de corte no periacuteodo experimental83 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg85 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)86 Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (21-42 dias)86 Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de arginina89 Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg90 Tabela 7 ndash Meacutedias do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade91 Tabela 8 ndash Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg92 Tabela 10 ndash Meacutedias e erro padratildeo da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg94 Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades94

xi

LISTA DE FIGURAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel33 Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg34 Capiacutetulo IV Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 70 Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 71 Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 72 Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 72 Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 75 Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 77 Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 81 Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade 82 Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade 83

xii

Capiacutetulo IV Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 106 Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 108

RESUMO

Foram realizados trecircs experimentos com o objetivo de avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na nutriccedilatildeo de matrizes de corte e a modulaccedilatildeo da resposta imune e do desenvolvimento esqueleacutetico na progecircnie No primeiro experimento avaliou-se o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e qualidade de ovos Para tanto foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se um aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve uma queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arginina respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo O segundo experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo

xiv

suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos O terceiro experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos 7 dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavras-chave desempenho produtivo qualidade de ovos qualidade oacutessea sistema imune

ABSTRACT

Three experiments were conducted to evaluate the effect of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder nutrition and modulation of the immune systems and skeletal development in the progeny In the first experiment the effect of Arg supplementation on heavy breed henrsquos productive performance and egg quality was evaluated ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance In the second experiment the effects of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder hens diet on performance carcass yield and bone parameters was evaluated in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units The body weight gain feed intake and feed gain ratio was calculated to evaluate the performance The carcass yield was evaluated by the carcass percentage leg breast and wing yield and abdominal fat The bone quality was assessed by the analysis of the femur and tibia lengths diameters and Seedor index In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that

16

just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) In third experiment the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses was evaluated in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by the diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses According to the results it is possible to conclude that supplementation with Arg provided improvements in the eggs weight of broilers and evaluations in the progeny demonstrated that there is a need to supplement the diet with Arg in order to get the best performance index bone quality and humoral and cellular immunity

Key-words bone quality egg quality productive performance immune system

17

I - INTRODUCcedilAtildeO

Vaacuterios fatores afetam o desempenho de frangos de corte como a geneacutetica

nutriccedilatildeo sanidade manejo e ambiecircncia Entretanto fatores estabelecidos antes mesmo da

incubaccedilatildeo e da eclosatildeo como a idade das matrizes e o peso dos ovos satildeo preponderantes

para o desenvolvimento inicial das aves tendo consequecircncia em todo o crescimento

(Pedroso et al 2005)

As exigecircncias nutricionais de uma reprodutora leve ou pesada devem atender agraves

necessidades do embriatildeo em desenvolvimento fora do organismo materno (Campos

2003) O ovo eacute formado basicamente pela casca (10) clara (60) e gema (30) Desse

modo os niacuteveis nutricionais da matriz devem ser dirigidos para formaccedilatildeo desses

componentes porque estes satildeo responsaacuteveis pela nutriccedilatildeo do embriatildeo

O ovo tem aacutegua proteiacutena gordura e cinza na sua composiccedilatildeo quiacutemica A gema

apresenta papel importante no desenvolvimento do embriatildeo visto que este formaraacute o saco

vitelino apoacutes o quarto dia de vida O saco vitelino constitui a uacutenica fonte fornecedora de

energia para o desenvolvimento do embriatildeo Deste satildeo absorvidos todos os nutrientes pelo

embriatildeo como partiacuteculas lipoproteicas e proteicas Estas uacuteltimas podem ser absorvidas

intactas porque a produccedilatildeo de proteinases pelo embriatildeo aumenta de acordo com o seu

desenvolvimento Aleacutem disso parte da absorccedilatildeo de proteiacutenas ocorre na forma de

aminoaacutecidos (Campos 2003) O saco viteliacutenico tambeacutem eacute a uacutenica fonte de

18

imunoglobulinas produzidas pelo organismo materno capazes de manter certa imunidade

ao pintinho no periacuteodo inicial de sua vida

Os aminoaacutecidos presentes na gema podem ser suficientes durante o processo de

eclosatildeo apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

processo de crescimento (Ohta et al 2004)

Logo apoacutes a eclosatildeo a maior parte da demanda de energia e de proteiacutena das aves eacute

direcionada para o desenvolvimento do trato digestoacuterio principalmente intestinos (Fisher

da Silva 2001) Este crescimento preferencial ocorre tanto na presenccedila quanto na ausecircncia

do alimento (Laurentiz et al 2001) Quando estes nutrientes natildeo satildeo fornecidos pela

raccedilatildeo os neonatos utilizam o saco vitelino como suplemento energeacutetico e como fonte

proteica para o crescimento intestinal Entretanto segundo Dibner et al (1998) 20 da

proteiacutena residual do saco vitelino satildeo representadas pelas imunoglobulinas maternais e

que a gordura bruta residual eacute constituiacuteda basicamente de trigliceacuterides fosfoliacutepides e

colesterol

Assim a nutriccedilatildeo das matrizes de corte pode enriquecer a gema e produzir pintos

de alta qualidade Entretanto com o passar dos anos natildeo houve muita diferenccedila nos niacuteveis

nutricionais propostos para nutriccedilatildeo das matrizes de corte o que ocorre principalmente em

razatildeo das grandes diferenccedilas existentes entre as linhagens comerciais existentes Segundo

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) para matrizes pesadas existe uma pausa nas pesquisas orientadas

para a determinaccedilatildeo das exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos essenciais

Dentre os aminoaacutecidos utilizados na formulaccedilatildeo de raccedilotildees principalmente as

voltadas para o conceito de proteiacutena ideal a arginina (Arg) pode exercer efeitos positivos

pois este aleacutem de ser constituintes de proteiacutenas ainda estaacute envolvido na siacutentese de creatina

e de poliaminas de prolina como substrato para a siacutentese de colaacutegeno e do oacutexido niacutetrico

(NO) e na secreccedilatildeo do hormocircnio de crescimento (GH) e dos fatores de crescimento

19

semelhantes agrave insulina (IGF) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave (Harvey et

al 2001)

Como as aves natildeo apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem

exclusivamente da Arg sinteacutetica principalmente no periacuteodo inicial de produccedilatildeo (Allen amp

Baker 1972) Aleacutem disso em dietas agrave base de milho e de farelo de soja a Arg eacute

considerada o quinto aminoaacutecido limitante para frangos de corte apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Vaacuterios autores tecircm proposto que a nutriccedilatildeo das matrizes afeta o desempenho dos

pintos (Uni amp Ferket 2004) Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem

nos primeiros dias de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com

funccedilatildeo imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade

materna e na resposta imune dos pintos

11 REVISAtildeO DA LITERATURA

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie

O sistema imune das aves eacute complexo e compreende uma seacuterie de funccedilotildees

celulares e fatores soluacuteveis que trabalham juntos para produzir uma resposta imune

protetora Os oacutergatildeos linfoides primaacuterios das aves satildeo a bolsa cloacal e o timo Os oacutergatildeos

como medula oacutessea baccedilo glacircndula Harderiana placas de Payer e tonsilas cecais satildeo

considerados oacutergatildeos linfoides secundaacuterios

Com base nesses componentes as aves podem apresentar respostas a vaacuterios

antiacutegenos divididas em dois tipos a imunidade passiva e a ativa A imunidade passiva eacute

transferida para a progecircnie pelas reprodutoras via saco viteliacutenico Atraveacutes da imunidade

passiva eacute possiacutevel desenvolver a resposta imune especiacutefica sem que haja um envolvimento

do organismo pela transferecircncia de ceacutelulas ou de anticorpos de outro indiviacuteduo jaacute

20

imunizado A imunidade ativa por sua vez eacute decorrente da exposiccedilatildeo das aves a um

antiacutegeno estranho que pode ser de origem vacinal ou um agente patoacutegeno

Nas aves a imunidade passiva eacute passada da matriz ateacute o pintinho pelo do ovo no

processo de produccedilatildeo de ovo imunoglobulinas (Ig) Y presentes no sangue das matrizes

chega ateacute o oviduto e se deposita na gema do ovo enquanto durante a secreccedilatildeo do

albuacutemen que ocorre na porccedilatildeo magnum do oviduto secreta tambeacutem IgA e IgM Eacute essa

imunidade enviada pela matildee que protege esses pintos nos primeiros dias de vida contra

vaacuterios agentes que estatildeo presentes no campo (Santin 2009) Haacute relaccedilatildeo direta entre os

tiacutetulos de seacutericos de Ig da matildee e a quantidade repassada ao ovo Assim eacute de extrema

importacircncia que o pintinho absorva adequadamente e rapidamente essa gema para que ele

tenha acesso a estas Ig (Santin 2009) Maiorka (2002) demonstrou que jejum de aacutegua e de

alimento por 12 horas apoacutes a eclosatildeo diminui a absorccedilatildeo da gema e afetam o

desenvolvimento da mucosa intestinal de frangos de corte Vargas et al (2009) mostraram

que os tiacutetulos seacutericos de anticorpos contra a vacina de doenccedila de Newcastle (NDV) foram

mais baixos em pintos submetidos a 12 horas de jejum poacutes eclosatildeo quando comparados

agravequeles que consumiram aacutegua e alimento logo apoacutes a eclosatildeo De fato o atraso no

consumo de alimento dos animais pode diminuir a absorccedilatildeo da gema e consequentemente

a passagem da imunidade passiva da matildee para o pintinho Dibner et al(1998) sugerem que

quando o pintinho natildeo recebe rapidamente aacutegua e alimento apoacutes a eclosatildeo acaba utilizando

as Ig e os fosfolipiacutedios da gema como alimento diminuindo assim sua funccedilatildeo na proteccedilatildeo

animal

112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves

A Arg eacute um aminoaacutecido essencial em aves principalmente na fase inicial Isso

ocorre porque as aves diferentemente dos mamiacuteferos natildeo possuem o ciclo da ureia

funcional necessitando da fonte exoacutegena de suplementaccedilatildeo Evoy et al (1998) em seu

21

trabalho relataram o papel da Arg como essencial na estimulaccedilatildeo do sistema imune do

hospedeiro

As vias metaboacutelicas que envolvem a Arg satildeo complexas e demonstradas

resumidamente a seguir

Adaptado de Duff amp Daly (2002)

Juntamente com a complexidade dessas vias soma-se a variada localizaccedilatildeo das

enzimas envolvidas no meio intracelular como nos tecidos Com exceccedilatildeo dos enteroacutecitos

22

em receacutem-nascidos nenhum outro tipo de ceacutelula conteacutem todas as enzimas necessaacuterias para

a siacutentese de Arg (Wu amp Morris 1998)

A Arg eacute ativamente absorvida pelo intestino pelo sistema de transporte soacutedio-

dependente A alta atividade da arginase no enteroacutecito converte cerca de 40 da dieta de

Arg em citrulina a qual eacute liberada na circulaccedilatildeo (Castillo et al 1993) Quando a Arg cai

na corrente sanguiacutenea cerca de 15 eacute eliminada pelo fiacutegado e o restante entra na

circulaccedilatildeo sistecircmica (OrsquoSullivan et al 1998) A Arginina eacute sintetizada a partir da

citrulina principalmente nos rins e eacute entatildeo liberada na circulaccedilatildeo para ser utilizada pelos

demais tecidos

O oacutexido niacutetrico (NO) constitui uma das menores e mais simples moleacuteculas

biossintetizadas (Morris et al 1994) O NO eacute um radical livre gasoso inorgacircnico e

identificado como mensageiro molecular extremamente laacutebil (meia vida bioloacutegica em

torno de segundos) O NO media vaacuterios fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente

do endoteacutelio citotoxicidade mediada por macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria Eacute produzido pelas ceacutelulas endoteliais neurocircnios macroacutefagos e

tecidos entre eles a hipoacutefise que age paracrinamente exercendo efeitos intra e

extracelulares em vaacuterios sistemas fisioloacutegicos (Kutchai 1998)

Palmer et al (1988) demonstraram que a L-Arg eacute o precursor fisioloacutegico do NO

nas ceacutelulas endoteliais Com base nesta informaccedilatildeo vaacuterios grupos de investigadores

suspeitaram que o NO fosse o provaacutevel precursor da siacutentese de NO3- e NO2

- pelos

macroacutefagos Subsequentemente esta hipoacutetese foi comprovada e ficou demonstrado que o

NO eacute o principal mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a

mais importante moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al 1988 e Marletta

et al 1988 citados por Dusse et al 2003)

23

Este composto eacute produzido a partir da oxidaccedilatildeo da L-arginina pela accedilatildeo da enzima

oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) uma enzima Ca++-calmodulina-dependente Por este

mecanismo eacute gerado citrulina como produto final (Kiechele amp Malinski 1993)

O surgimento do NO como agente da sinalizaccedilatildeo celular eacute uma importante

descoberta da fisiologia humana e animal nos uacuteltimos anos O NO participa de vaacuterios

fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente do endoteacutelio citotoxicidade mediada por

macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O NO eacute o principal

mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a mais importante

moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al1988 e Marletta et al 1988 citados

por Dusse et al 2003)

Existem trecircs formas de NOS sendo a NOS induzida (iNOS) e duas NOS

constitutivas (cNOS) O NO eacute sintetizado pela ativaccedilatildeo da cNOS basal (em ceacutelulas

endoteliais vasculares e neurocircnios) segundos a minutos apoacutes o aumento na concentraccedilatildeo

de caacutelcio em resposta agrave ativaccedilatildeo de receptores da superfiacutecie celular e mecanismos de

transduccedilatildeo de sinal (Adams 1996)

Ao contraacuterio a iNOS natildeo depende de caacutelcio para ativaccedilatildeo mas a siacutentese de

mRNA da iNOS eacute necessaacuteria para sua atividade A NOS induzida natildeo eacute detectaacutevel em

condiccedilotildees basais As LPS ou endotoxinas bacterianas junto com citocinas como TNFα

IL-1β ou IF-γ induzem a siacutentese de iNOS de duas a quatro horas apoacutes a exposiccedilatildeo ao

agente A iNOS requer siacutentese proteica para sua expressatildeo e sua atividade persiste por

mais de 24 horas e sintetiza NO em concentraccedilotildees nanomolares 1000 vezes maior que

cNOS (Davies et al 1995)

A expressatildeo da iNOS eacute o resultado da resposta inflamatoacuteria localizada ou difusa

resultante da infecccedilatildeo ou dano tecidual Segundo Salvemini et al (1996) o NO eacute potente

vasodilatador e seu envolvimento na resposta inflamatoacuteria pode ter relaccedilatildeo com sua

24

habilidade em aumentar a permeabilidade vascular e o edema atraveacutes de mudanccedilas no

fluxo sanguiacuteneo local e do aumento na produccedilatildeo de prostaglandinas proinflamatoacuterias

A expressatildeo de iNOS em endotoxemia eacute citoprotetoacuteria inibindo microtrombose

pela prevenccedilatildeo de adesatildeo plaquetaacuteria e danos mediados por radicais Por outro lado a

citotoxidade do NO resulta da sua accedilatildeo direta ou da sua reaccedilatildeo com outros compostos

liberados durante o processo inflamatoacuterio A base bioquiacutemica para a accedilatildeo direta do NO

consiste na sua reaccedilatildeo com metais (especialmente o ferro) presentes nas enzimas do seu

alvo (Moncada 1991 James 1995) Desta forma satildeo inativadas enzimas cruciais para o

ciclo de Krebs para a cadeia de transporte de eleacutetrons para a siacutentese de DNA e para o

mecanismo de proliferaccedilatildeo celular Em processos infecciosos ceacutelulas ativadas como

macroacutefagos neutroacutefilos e ceacutelulas endoteliais secretam simultaneamente NO e

intermediaacuterios reativos do oxigecircnio a accedilatildeo citotoacutexica indireta do NO consiste

principalmente na sua reaccedilatildeo com esses intermediaacuterios do oxigecircnio

Durante a resposta imune mediada por ceacutelulas a maioria das ceacutelulas adquire a

capacidade de expressar a forma de NO induzida (Nathan amp Xie 1994) A accedilatildeo do NO

depende da ceacutelula T reconhecer um antiacutegeno especiacutefico embora sua accedilatildeo na resposta

imune mediada por ceacutelulas natildeo seja especiacutefica (Schmidt amp Walter 2004)

Costa et al (2003) corroboram com o fato de que a fagocitose por si soacute natildeo induz a

siacutentese de NO A fagocitose de partiacuteculas inertes por macroacutefagos peritoniais em cultura

ou por macroacutefagos murinos estimulados por citocinas natildeo satildeo estiacutemulos suficientes para

a induccedilatildeo expressiva de iONS No entanto a fagocitose de agentes bioloacutegicos nas

mesmas condiccedilotildees induz altos niacuteveis de NO sugerindo que a produccedilatildeo de NO seja

dependente de estiacutemulo imunoloacutegico e que faccedila parte dos mecanismos de defesa do

organismo

25

Todas estas investigaccedilotildees estabeleceram de forma definitiva uma associaccedilatildeo entre

arginina oacutexido niacutetrico e resposta imune Por isso nas uacuteltimas duas deacutecadas a arginina tem

sido o foco de estudos como regulador de muitos processos imunoloacutegicos e fisioloacutegicos

(Tayade et al 2006)

Trabalhos desenvolvidos com mamiacuteferos demonstraram que as respostas imunes

podem ser influenciadas pela arginina dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al

1998 Lewis amp Langkamp-Henken 2000) Em experimentos desenvolvidos com animais

jovens os efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina foram demonstrados

como o aumento do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos

tiacutemicos Os efeitos imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais

estressados ou imunossupremidos

Os efeitos beneacuteficos da arginina natildeo se limitam agrave imunidade celular Segundo

LeBien (2002) em mamiacuteferos geneticamente modificados a arginina eacute utilizada para

diferenciaccedilatildeo de proacute-linfoacutecitos B para preacute-linfoacutecitos B na medula oacutessea e estaacute envolvida na

liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da medula

Por outro lado Deng et al (2005) relatam que relevantes pesquisas em espeacutecies

aviaacuterias satildeo esparsas Estas pesquisas apontaram o aumento da produccedilatildeo de oacutexido niacutetrico

por macroacutefagos de aves suplementadas com arginina (Sung et al 1991) aumento do peso

dos oacutergatildeos linfoides (Kwak et al 1999) melhora da relaccedilatildeo heteroacutefilolinfoacutecito em pintos

suplementados e desafiados com o agente viral da bronquite infecciosa e maior percentual

de ceacutelulas CD8+ (Lee et al 2002)

Entretanto para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de arginina

foram observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

estabelecidos Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de arginina

plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular

26

Outros autores obtiveram respostas positivas com a suplementaccedilatildeo de arginina na

reduccedilatildeo na mortalidade de frangos desafiados com Eimeria acervulina Eimeria tenella e

Eimeria maacutexima alterando a relaccedilatildeo argininalisina de 09 para 13 (Kidd et al 2002) e na

siacutendrome da hipertensatildeo pulmonar (Wideman et al 1995) Tambeacutem Corzo et al (2003)

observaram reduccedilatildeo linear de arranhotildees infectados em carcaccedilas de frangos alimentados

com niacuteveis crescentes de arginina (08 a 125 da dieta) Embora esses paracircmetros sejam

indicativos indiretos da imunidade mas apontam a importacircncia da arginina na melhora da

imunidade e no restabelecimento do status sanitaacuterio dos planteacuteis aviacutecolas

Tayade et al (2006) demonstraram recentemente que frangos vacinados com uma

vacina intermediaacuteria atenuada contra a doenccedila de Gumboro e suplementados com 2 de

arginina mostraram 100 de proteccedilatildeo apoacutes desafio com o viacuterus da doenccedila de Gumboro

comparado com 80 de proteccedilatildeo induzido apenas pela vacina sem adiccedilatildeo de arginina

suplementar na dieta

Aleacutem disso Deng et al (2005) verificaram aumento no niacutevel de anticorpos contra

eritroacutecitos de carneiro em frangas de postura somente na oitova semana de idade quando

estas aves foram suplementadas com niacuteveis de arginina em 150 acima do recomendado

pelo NRC do primeiro dia ateacute a quarta semana de vida Os autores concluiacuteram que a

suplementaccedilatildeo com arginina por um periacuteodo curto de tempo tem pouco efeito sobre a

imunidade e que a imunocompetecircncia pode ser permanentemente moldada pelo status

nutricional nos estaacutegios mais precoces do desenvolvimento

Para a melhora da resposta imune deve-se garantir que as matrizes desenvolvam

tiacutetulos elevados de anticorpos e assim buscar atingir o controle contra surtos de doenccedilas

via imunidade materna como meio de prevenccedilatildeo na progecircnie Kidd et al (1993)

observaram que a diferenccedila no niacutevel de anticorpos contra eritroacutecitos de carneiro em

27

matrizes pesadas recebendo dietas compostas por gratildeos de vaacuterias origens foi detectada na

progecircnie recebendo a mesma dieta

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo dos

niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes Segundo Kidd (2004) trabalhos desenvolvidos a

cerca das exigecircncias nutricionais das matrizes estatildeo focados apenas na questatildeo produtiva

Brake (1997) mostrou que a suplementaccedilatildeo de dietas para matrizes com vitaminas E e C

promoveu melhoria na transferecircncia de imunidade materna e na resposta imune dos pintos

pela proteccedilatildeo aos anticorpos no ovo durante a incubaccedilatildeo

Segundo Gore amp Qureshi (1997) um dos mecanismos pelo qual a vitamina E atua

nesta fase de crescimento embrionaacuterio pode estar relacionado a uma maior produccedilatildeo de

oacutexido niacutetrico nitritos e nitratos pelo fato de que a Vitamina E pode aumentar a afinidade

dos receptores de membrana dos macroacutefagos para a ativaccedilatildeo dos estiacutemulos tais como os

lipopolissacariacutedeos o que resulta em maior atividade da oacutexido niacutetrico sintetase

Na literatura consultada natildeo existem relatos da suplementaccedilatildeo das dietas das

matrizes com arginina e o efeito na resposta imune da progecircnie

A produccedilatildeo de NO pelos macroacutefagos das aves eacute arginina dependente de forma

similar aos macroacutefagos de mamiacuteferos (Dietert amp Golemboski 1998) Entretanto ao

contraacuterio dos mamiacuteferos as aves natildeo podem sintetizar arginina As aves por natildeo

apresentarem o ciclo da ureia funcional dependem exclusivamente da arginina dieteacutetica

(Allen amp Baker 1972) O quadro eacute ainda mais grave nas aves uma vez que dependem de

arginina suplementar tambeacutem para a para a formaccedilatildeo de ornitina que em mamiacuteferos eacute

obtida atraveacutes do aacutecido glutacircmico A siacutentese de ornitina eacute fundamental pois estaacute envolvida

na obtenccedilatildeo de prolina e eacute utilizada tambeacutem na formaccedilatildeo de poliaminas (espermidina

espermina e putrescina) que satildeo moleacuteculas associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

28

Desta forma a arginina eacute um aminoaacutecido essencial para as aves na fase inicial A

dieta eacute um fator particularmente sensiacutevel na disponibilidade de arginina e

consequentemente de NO considerando ainda que a arginina eacute um aminoaacutecido dos mais

limitantes em dietas agrave base milho e farelo de soja (Edmonds et al 1985)

A suplementaccedilatildeo adicional de Arg nas dietas de aves imunocomprometidas

poderia aumentar ainda mais a atividade da arginase e com isso menos Arg seria

disponiacutevel para a siacutentese de NO (Kepka-Lenhart et al 2000) Alternativamente Bansal et

al (2004) sugerem como estrateacutegia dieteacutetica para restaurar as concentraccedilotildees plasmaacuteticas

de Arg a suplementaccedilatildeo de citrulina principalmente em condiccedilotildees de imunodeficiecircncia

associadas com elevada atividade plasmaacutetica da arginase Nas espeacutecies uricoteacutelicas o ciclo

Arg-citrulina eacute funcional A citrulina eacute um aminoaacutecido que natildeo eacute encontrado em nenhuma

proteiacutena corporal aleacutem da inabilidade das aves na siacutentese endoacutegena de citrulina a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica se constitui na uacutenica fonte de Arg para os macroacutefagos via ciclo

NO-citrulina (Wiesinger 2001)

A suplementaccedilatildeo de aminoaacutecidos sinteacuteticos tem propiciado facilidades no ajuste

das foacutermulas de raccedilatildeo possibilitando a obtenccedilatildeo dos niacuteveis exigidos de aminoaacutecidos

essenciais A utilizaccedilatildeo de niacuteveis elevados de lisina proporciona um maior crescimento

muscular principalmente o incremento no rendimento de peito e coxas dos frangos de

corte Entretanto esse aumento da taxa de crescimento pode alterar o equiliacutebrio

metaboacutelico ideal entre os aminoaacutecidos especialmente a relaccedilatildeo argininalisina

O antagonismo entre arginina e lisina envolve a diminuiccedilatildeo da siacutentese de

creatinina compromete a siacutentese de prolina ornitina promove o aumento da atividade da

arginase renal e da excreccedilatildeo de ureia aleacutem de que quando os niacuteveis de lisina satildeo

excessivamente altos tambeacutem ocorre a excreccedilatildeo renal de arginina (Austic amp Scott 1975)

29

Os sinais claacutessicos da deficiecircncia de Arg satildeo fraqueza e paralisia das pernas penas

deformadas e ericcediladas sobre o dorso e asa das aves reduccedilatildeo do ganho de peso lesotildees

histoloacutegicas na medula oacutessea e desenvolvimento oacutesseo afetado (Jungherr et al 1958

Newbern et al 1960) A arginina aleacutem de servir como substrato para a siacutentese de NO

estaacute envolvida na secreccedilatildeo do GH

Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram um aumento na

concentraccedilatildeo plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez

secretado pela hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio

receptor e indiretamente via IGF-I e II (insulin-like growth factor ou somatomedina C)

sobre os tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos do GH ocorre em niacutevel do

disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no

crescimento dos ossos longos (Isaksson et al 1987)

Os efeitos dos aminoaacutecidos essenciais no tecido oacutesseo em crescimento satildeo

provavelmente mediados pelo IGF-I (Baylink et al1993) De fato Chevalley et al (1998)

demonstraram que arginina e lisina aumentaram a produccedilatildeo in vitro de IGF-I por

osteoblastos mantidos em cultura Aleacutem disso Conconi et al (2001) trabalhando com

cultura de osteoblastos enriquecida com soluccedilatildeo de aminoaacutecidos essenciais (Arg Lis Met

Thr e Trp) encontraram niacuteveis significativamente aumentados de fosfatase alcalina e

siacutentese de colaacutegeno Estes resultados segundo os autores sugerem que os aminoaacutecidos

podem atuar diretamente na formaccedilatildeo da matriz oacutessea e podem tambeacutem modular o

crescimento e a diferenciaccedilatildeo de osteoblastos

Por outro lado eacute conhecido que a arginina eacute precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo

pelo qual ela poderia exercer os seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo O NO pode

participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento (Hukkanem et

30

al 1999) Estes autores demonstraram a expressatildeo do mRNA da cNOS basal (oacutexido

niacutetrico sintetase endotelial) em condroacutecitos hipertroacuteficos de placas de crescimento de ratos

neonatos

Na placa de crescimento o NO poderia facilitar a vascularizaccedilatildeo e a formaccedilatildeo

oacutessea (Rath et al 2000) a exemplo de sua accedilatildeo na cartilagem articular em que induz

respostas bioloacutegicas que levam a degradaccedilatildeo irreversiacutevel (Pelletier et al1998) Segundo

Amin amp Abramson (1998) nas osteoartrites o NO induz a apoptose dos condroacutecitos

Teixeira et al (2005) comprovaram que o NO tem duas funccedilotildees distintas nos

condroacutecitos da placa de crescimento Uma vez iniciado o processo de maturaccedilatildeo o NO

estimula a hipertrofia por meio do aumento da expressatildeo da fosfatase alcalina e colaacutegeno

tipo X sendo conhecido que a expressatildeo de ambas proteiacutenas eacute um requerimento para a

completa hipertrofia dos condroacutecitos Aleacutem disso o NO estaacute associado ao estaacutegio mais

tardio do processo de maturaccedilatildeo Condroacutecitos totalmente diferenciados tratados com

ativadores da apoptose sofrem morte celular a inibiccedilatildeo da siacutentese de NO bloqueia a

apoptose enquanto a exposiccedilatildeo aos doadores de NO estimula a apoptose Estes autores

concluiacuteram que os sistemas NOS ndash NO atuam como promotores da maturaccedilatildeo dos

condroacutecitos

Por outro lado Vanacutet amp Ralston (2001) advertem que o efeito do NO na atividade

dos osteoblastos pode ser bifaacutesico Estudos in vitro tecircm indicado que pequenas

quantidades de NO que satildeo produzidas constitutivamente pelos osteoblastos podem agir

como um estimulador autoacutecrino do crescimento oacutesseo Entretanto altas concentraccedilotildees de

NO tais como aquelas observadas apoacutes estimulaccedilatildeo das citocinas inflamatoacuterias em que a

iNOS eacute a isoforma envolvida tecircm efeito inibitoacuterio no crescimento e diferenciaccedilatildeo

osteoblaacutestica

31

O crescimento e a remodelaccedilatildeo dos tecidos satildeo regulados por complexas interaccedilotildees

entre potencial geneacutetico fatores de crescimento influecircncias ambientais e nutriccedilatildeo

(Gonzales amp Sartori 2002) A resposta imune e a inflamaccedilatildeo podem modificar as

necessidades de alguns nutrientes

As alteraccedilotildees metaboacutelicas decorrentes podem interromper os eventos envolvidos

no processo de condrogecircnese e osteogecircnese e desencadear o processo de formaccedilatildeo das

lesotildees no tecido oacutesseo que levam a dificuldade locomotora deformaccedilatildeo oacutessea predispotildeem

agraves infecccedilotildees e agraves desordens esqueleacuteticas tais como a discondroplasia tibial (Thorp 1994)

Aleacutem das perdas econocircmicas eacute clara a percepccedilatildeo que as disfunccedilotildees do aparelho locomotor

comprometem o bem-estar das aves

Aleacutem de interagirem com o sistema imune os processos que modulam o

crescimento oacutesseo satildeo complexos e muacuteltiplos e mais estudos satildeo necessaacuterios para elucidar

estes mecanismos

32

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II - OBJETIVOS GERAIS

Essa pesquisa foi desenvolvida com a finalidade de estudar o efeito da

suplementaccedilatildeo de Arg na dieta de fecircmeas reprodutoras de frangos de corte na qualidade

dos ovos e nas caracteriacutesticas produtivas na qualidade oacutessea no desenvolvimento dos

oacutergatildeos linfoide e do sistema imune da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo

niacuteveis crescentes de Arg

21 Objetivos Especiacuteficos Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis

crescentes de Arg no desempenho produtivo e na qualidade dos ovos

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg no desempenho no

rendimento de carcaccedila e na qualidade oacutessea da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas

contendo niacuteveis crescentes de Arg

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg nas respostas imune e

celular da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo

Resumo ndash Este estudo avaliou o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e reprodutivo e qualidade de ovos Foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e reprodutivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo

Palavras-chave embriodiagnoacutestico incubaccedilatildeo qualidade de ovos

III - Effect of arginine supplementation on productive performance and egg quality of broiler breeder hens

Abstract - This study investigated the effect of arginine (Arg) supplementation on broiler breeder productive performance and egg quality ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance Supplementation of broiler diets with increasing levels of Arg provided an increase in the egg production and eggs with higher weights in the levels of 1262 and 1543 respectively The increased levels of Arg did not influence the reproduction variables studied suggesting that it may be used without any harmful risk

Key words embryo diagnosis hatching egg quality

42

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo e alimentaccedilatildeo animal estatildeo direcionadas para garantir oacutetimo aporte de

nutrientes para os animais de acordo com sua finalidade comercial e fase fisioloacutegica

Na produccedilatildeo de frangos de corte a taxa de crescimento acelerada imposta pela seleccedilatildeo

geneacutetica os vaacuterios fatores estressantes (ambientais e de manejo) e de desafio

imunoloacutegico (vacinaccedilatildeo e infecccedilatildeo) nas condiccedilotildees de produccedilatildeo comercial fazem com

que as exigecircncias das matrizes de corte para alguns nutrientes sejam maiores para que a

progecircnie possa expressar seu potencial geneacutetico

O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo dependem completamente dos

nutrientes contidos no ovo e estes satildeo originados da dieta e do metabolismo das

matrizes O ovo eacute um sistema fechado assim todos os nutrientes necessaacuterios para o

desenvolvimento do embriatildeo devem ser fornecidos pela matriz quando o ovo eacute formado

(Oviedo-Roacutendon amp Murakami 1998)

Aleacutem disso existe correlaccedilatildeo positiva entre peso do ovo e peso do pinto ao

nascer e deste com o peso do frango ao abate (Lara et al 2005) De fato Whiting amp

Pesti (1984) verificaram que para cada grama a mais no peso do ovo correspondia a

107 e 60g adicionais para o peso final de machos e fecircmeas respectivamente

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas No ovo os aminoaacutecidos

presentes na gema satildeo suficientes durante o processo de eclosatildeo poreacutem apoacutes o

nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o processo de

crescimento (Otha et al 2004) Nos uacuteltimos anos o impacto da nutriccedilatildeo das matrizes

no estado nutricional e desempenho da progecircnie bem como a melhora do estado

imunoloacutegico tem recebido especial atenccedilatildeo (Pappas et al 2006)

43

A nutriccedilatildeo das matrizes com dietas com arginina seria uma alternativa para o

enriquecimento da gema dos ovos com esse aminoaacutecido A Arg eacute um aminoaacutecido

baacutesico que pode influenciar a reposta imune e a resistecircncia agraves doenccedilas A Arg ainda eacute

conhecida pela funccedilatildeo estimuladora sobre o processo de ovulaccedilatildeo atraveacutes do aumento

da liberaccedilatildeo de hormocircnio luteinizante (LH) (Basiouni et al 2006) e como parte do

hormocircnio arginina vasotocina envolvido com a contraccedilatildeo uterina e a oviposiccedilatildeo

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias

de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo

dos niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes De acordo com Kidd (2004) os trabalhos

desenvolvidos em relaccedilatildeo agraves exigecircncias nutricionais das matrizes para melhorar o

sistema imune da progecircnie satildeo poucos quando comparados a questatildeo produtiva das

aves

Com isso objetivou-se com o trabalho avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de

arginina sobre o desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte

Material e meacutetodos

O experimento foi conduzido no aviaacuterio experimental da Universidade Federal

do Paranaacute ndash Campus Palotina constituiacutedo de 32 boxes com dimensotildees de 25 x 15 m

com cama de maravalha (plusmn10 cm) sobre o piso Foram utilizados boxes telados e

providos de um bebedouro pendular e de dois comedouros um deles com grade de

restriccedilatildeo aos machos e outro instalado mais alto natildeo permitindo somente o acesso das

fecircmeas Em cada boxe experimental foram utilizados ninhos convencionais de um

andar com quatro bocas de madeira com dimensotildees de 030 m x 030 m x 030 m a

030 m acima do niacutevel do piso sendo uma boca para cada quatro fecircmeas

Foram utilizados 390 reprodutores de frangos de corte sendo 360 fecircmeas e 30

machos da linhagem Ross As aves foram selecionadas na 18ordf semana de idade a partir

de um plantel de reprodutores dentro da faixa de peso de 1850 a 1950 g para as

fecircmeas e de 2450 a 2550 g para os machos O delineamento experimental utilizado foi

o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 e

1543 de Arg digestiacutevel) seis repeticcedilotildees e 12 fecircmeas e um macho por unidade

44

experimental O acasalamento foi realizado na 18ordf semana de idade das aves na

proporccedilatildeo de um macho para cada 12 fecircmeas

O periacuteodo experimental iniciou na 25ordf semana quando o plantel alcanccedilou 5 de

produccedilatildeo e finalizou na 56ordf semana de idade das aves O programa de iluminaccedilatildeo

iniciou na 19ordf semana de idade com fornecimento inicial de 14 horas de luz diaacuteria e

aplicados aumentos semanais de 30 minutos de luz ateacute o fornecimento de 17 horas de

luz diaacuteria na 25ordf semana de idade das aves

O fornecimento de raccedilatildeo foi limitado e controlado diariamente enquanto o de

aacutegua foi ad libitum As exigecircncias nutricionais utilizadas para formulaccedilatildeo das dietas das

fecircmeas e dos machos foram baseadas nas recomendaccedilotildees contidas no manual da

linhagem

A partir da 23ordf semana de idade as fecircmeas passaram a receber as dietas

experimentais constituiacutedas da dieta basal suplementada com cinco niacuteveis de L ndash

Arginina variando de 0 a 600 mgkg na dieta basal em substituiccedilatildeo ao caulin que

corresponderam aos niacuteveis de 0943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg

digestiacutevel (Tabela 1) Os machos receberam uma uacutenica dieta durante todo o periacuteodo

experimental O periacuteodo experimental teve iniacutecio na 25ordf semana Para determinaccedilatildeo da

produccedilatildeo de ovos os mesmos foram coletados diariamente e a produccedilatildeo diaacuteria anotada

em planilhas por repeticcedilatildeo Semanalmente foi obtida a produccedilatildeo total de ovos e a

porcentagem de postura de cada unidade experimental Na 30ordf 34ordf e 38ordf semana de

idade foram coletados todos os ovos produzidos em um dia para avaliaccedilatildeo da qualidade

(peso meacutedio gravidade especiacutefica porcentagem de albuacutemen e gema porcentagem e

espessura da casca)

A quantidade de raccedilatildeo oferecida para as fecircmeas foi calculada de acordo com a

produccedilatildeo de ovos e do peso corporal Para os machos forneceu-se raccedilatildeo em funccedilatildeo do

peso corporal (conforme manual da linhagem) O peso foi controlado semanalmente ateacute

a 35ordf semana e quinzenalmente a partir da 36ordf semana de idade das aves ateacute o final do

experimento

A avaliaccedilatildeo do rendimento de incubaccedilatildeo foi realizada na 40ordf semana de idade

das aves Foram incubados 80 ovos de cada tratamento totalizando 400 ovos Os ovos

foram pesados e incubados em cada idade avaliada de acordo com o tratamento e

repeticcedilatildeo e avaliadas as seguintes caracteriacutesticas peso meacutedio do ovo incubado peso

meacutedio dos pintos ao nascer percentual do peso da progecircnie ao nascer em relaccedilatildeo ao

peso do ovo e taxa de eclosatildeo Apoacutes a eclosatildeo foi realizado o embriodiagnoacutestico dos

45

ovos que natildeo eclodiram os quais foram classificados em mortalidade por fase (inicial

intermediaacuteria e final) ovos contaminados bicados vivos e bicados mortos

Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental

Ingredientes () Raccedilatildeo postura I Milho 6072 Farelo de Trigo 420 Oacuteleo de Soja 200 Farelo de Soja 2260 Sal Comum 032 Caulim 050 Calcaacutereo 38 647 Fosfato Bicaacutelcico 131 Bicarbonato de Soacutedio 010 DL-Metionina 98 014 Colina 60 016 Milbond 010 Mycofix 015 Carbonato Potaacutessio 99 021 Premix vit e mineral1 050 Hy D2 005 Eur Bactiguard L 020 Valores Calculados Proteiacutena 1551 EM Kcalkg 2815 Gordura 477 AcLinoleico 248 Caacutelcio 295 Foacutesforo disponiacutevel 044 Lisina dig 071 Met + cistina dig 060 Treonina dig 051 Arginina dig 094 Soacutedio 019 Cloro 026 Potaacutessio 080 Mongin Meq100g 21388

1 Conteuacutedo por kg de premix Vit A 8000000 UI Vit D3 2200000 UI Vit E 6200 mg Vit K 3 2000 mg Vit B 1 2000 mg Vit B2 3000 mg Vit B6 6000 mg Vit B12 10000 mcg Pantotenato de caacutelcio 6000 mg Niacina 25000 mg Aacutec foacutelico 400 mg Se 100 mg Mn 65000 mg Fe40000 mg Cu 10000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg 2 Rovimix Hy D ndash DSM Nutritional Products

Para gravidade especiacutefica foi utilizado o meacutetodo da imersatildeo dos ovos em

soluccedilatildeo salina Foram preparadas seis soluccedilotildees (aacutegua e sal comum) com densidades que

variaram de 1070 a 1090 com variaccedilatildeo de 0004 para cada soluccedilatildeo As gravidades

foram aferidas com utilizaccedilatildeo de densiacutemetro de Petroacuteleo

46

O peso meacutedio do albuacutemen de cada repeticcedilatildeo foi obtido pela diferenccedila entre o

peso meacutedio do ovo e o peso meacutedio da gema somados ao peso meacutedio da casca de cada

repeticcedilatildeo Apoacutes a pesagem das cascas a espessura das mesmas foi medida com auxiacutelio

de um microcircmetro digital (Mitutoyoreg) em quatro pontos na regiatildeo central de cada casca

Para a medida de peso da casca os ovos foram quebrados e as cascas lavadas e secas agrave

temperatura ambiente por 48 horas em seguida foram pesadas em balanccedila analiacutetica e os

pesos anotados

Anaacutelise Estatiacutestica

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados de acordo com o seguinte modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243 4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os dados de embriodiagnoacutestico natildeo apresentaram distribuiccedilatildeo normal e foram

analisados pela anaacutelise Bayesiana assumindo que a porcentagem observada ri a cada

niacutevel de concentraccedilatildeo de Arg xi segue distribuiccedilatildeo Binomial com paracircmetros ni

(tamanho de amostra) e pi (taxa de eclosatildeo) pi = en1+en com funccedilatildeo de ligaccedilatildeo logit

ii

i

plog it(p ) log1 p⎛ ⎞

equiv = μ⎜ ⎟minus⎝ ⎠ nas formas linear e quadraacutetica dadas respectivamente por

n=α+ β1xi e n = α + β1xi + β2x2i Para a modelagem foram considerados um conhecimento

vago a priori sobre os paracircmetros de regressatildeo isto eacute com distribuiccedilotildees natildeo

informativas 3~ (010 )Nα e 3~ (010 )k Nβ k=12

A obtenccedilatildeo das distribuiccedilotildees marginais a posteriori para os paracircmetros foi por

meio do pacote BRugs do programa R (R Development Core Team 2007)

Para cada paracircmetro foram gerados 510000 valores em um processo MCMC

(Monte Carlo Markov Chain) considerando um periacuteodo de descarte amostral de 10000

47

valores iniciais A amostra final tomada com saltos de tamanho 20 conteacutem 25000

valores gerados A convergecircncia das cadeias foi verificada por meio do pacote CODA

(Best et al 1995) do programa R pelos criteacuterios de Geweke (1992) e de Heidelberger amp

Welch (1983)

Resultados e Discussatildeo

Os resultados de produccedilatildeo e de qualidade dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg estatildeo apresentados na Tabela 2 Os niacuteveis de

Arg digestiacutevel utilizados nas dietas das matrizes de corte influenciaram de forma

quadraacutetica (Plt005) a porcentagem de postura em que o niacutevel de 1262 de Arg

proporcionou a maior porcentagem de postura para as matrizes de corte (Figura 1)

Outros autores tambeacutem encontraram resultados semelhantes em relaccedilatildeo ao

aumento da taxa de postura em funccedilatildeo da suplementaccedilatildeo de Arg Segundo Najib amp

Basiouni (2004) a produccedilatildeo de ovos de matrizes elevou de 52 para 6786 quando

utilizaram niacuteveis de Arg e Lys na dieta de 15 e 12 respectivamente Adicionalmente

Basiouni et al (2006) observaram aumento no peso de foliacuteculos F1 em poedeiras que

receberam dietas com 205 Arg comparado com dietas que continham 154 de Arg

Esse efeito sugere que o aumento na produccedilatildeo de ovos possa ser atribuiacutedo do efeito

estimulatoacuterio especiacutefico da Arg na secreccedilatildeo de LH (Hormocircnio Luteinizante) o qual tem

accedilatildeo direta sobre o ovaacuterio e seus foliacuteculos (Basiouni 2009)

O comportamento observado na curva de produccedilatildeo de ovos demonstra aumento

da produccedilatildeo ateacute o niacutevel de 1262 de Arg e posterior queda ateacute o niacutevel de 1543 o

que provavelmente pode estar associado ao desequiliacutebrio aminoaciacutedico das dietas nos

niacuteveis extremos de Arg na raccedilatildeo Os altos niacuteveis de Arg utilizados podem ter afetado a

produccedilatildeo de ovos principalmente pelo antagonismo existente entre Arg e Lisina (Lys)

Baixas relaccedilotildees ArgLys em dietas de matrizes reduzem o consumo de raccedilatildeo e

deprimem a produccedilatildeo de ovos (Basiouni et al 2006) Altos niacuteveis de Lys associados a

baixos niacuteveis de Arg satildeo deleteacuterios agraves aves pois niacuteveis elevados de Lys promovem

expressiva elevaccedilatildeo da atividade da arginase renal e consequentemente induz agrave

degradaccedilatildeo da Arg (Austic amp Scott 1975) causando sintomas de deficiecircncia de Arg em

virtude das aves natildeo possuiacuterem o ciclo da ureia funcional (Drsquo Mello 2003) Esse

antagonismo ainda leva agrave diminuiccedilatildeo da atividade da glicina-amidinotransferase no

fiacutegado enzima que utiliza Arg e glicina como substratos juntamente com a metionina na

siacutentese da creatina muscular (Jones et al 1967 Andriguetto et al 1999)

48

Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg

()

Postura

()

Peso

Ovo

(g)

Gema

()

Clara

()

Casca

()

Casca

(mm)

Gravidade

Especiacutefica

(gml)

0943 7741plusmn460 6046plusmn048 2998plusmn035 5955plusmn045 876plusmn015 0577plusmn0004 1082plusmn0001

1093 8101plusmn544 6081plusmn052 2972plusmn042 5974plusmn040 902plusmn014 0584plusmn0005 1082plusmn0001

1243 8240plusmn370 6086plusmn051 2971plusmn043 6035plusmn031 875plusmn011 0569plusmn0004 1081plusmn0001

1393 8158plusmn368 6133plusmn057 2986plusmn041 5984plusmn043 880plusmn009 0571plusmn0003 1080plusmn0001

1543 7855plusmn600 6167plusmn046 2964plusmn030 6015plusmn038 876plusmn010 0573plusmn0004 1081plusmn0001

CV() 664 183 195 116 351 198 0133

Anaacutelise Variacircncia

Arg Quadratico1 Linear2 ns ns ns ns Linear3

R2 043 096 ----- ----- ----- ----- 066 1 Y= 421330+01239X-00004908X2 2 Y = 585813+000196527X 3 Y = 108413-000000249943X ns ndash natildeo significativo

77

78

79

80

81

82

83

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Pro

duccedilatilde

o de

ovo

s (

)

Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel

Ao avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arg no peso dos ovos das matrizes de

corte verificou-se aumento linear (Plt005) no peso dos ovos com o aumento de Arg

digestiacutevel nas raccedilotildees por outro lado houve queda linear (Plt005) na gravidade

especiacutefica dos ovos dessas matrizes (Figura 1)

Basiouni et al (2006) encontraram efeito dos niacuteveis de Arg e de Lys sobre na

gravidade especiacutefica dos ovos Estes autores observaram que baixos niacuteveis de Arg e

altos niacuteveis de Lys proporcionaram a melhor gravidade especifica dos ovos e quando a

1262

Arginina dig ()

Y = 421330+011239X-00004908X2 R2=043

49

relaccedilatildeo ArgLys era alta a gravidade especiacutefica piora significativamente Por outro lado

Lima amp Silva (2007) natildeo verificaram efeito das diferentes relaccedilotildees ArgLys digestiacutevel

nos paracircmetros de qualidade de ovos

O aumento do peso do ovo e a queda na gravidade especiacutefica desses ovos

possuem relaccedilatildeo direta Isso ocorre porque segundo Basiouni et al (2006) a siacutentese da

quantidade de casca dos ovos nas galinhas eacute constante Aleacutem disso com o aumento da

idade das galinhas ocorre aumento no tamanho dos ovos Do iniacutecio ateacute o final do ciclo

de postura o ovo chega a aumentar ateacute 40 do seu tamanho e por isso haveraacute menos

caacutelcio na superfiacutecie da casca o que reduz a espessura da casca (Baiatildeo amp Aguilar 2001)

e consequentemente a gravidade especiacutefica dos ovos

Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados de rendimento da incubaccedilatildeo dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel estatildeo apresentados na Tabela 3 Os

niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis de

incubaccedilatildeo Demonstra-se portanto que a Arg pode ser utilizada na dieta das matrizes

sem trazer prejuiacutezos agrave reproduccedilatildeo

A fertilidade e a eclosatildeo dos ovos das matrizes satildeo dois paracircmetros importantes

na incubaccedilatildeo dos ovos Valores proacuteximos de 96 para fertilidade e 88 para eclosatildeo

satildeo indicativos de bom manejo de reprodutoras (Rosa amp Aacutevila 2000) Segundo Rosa amp

Aacutevila (2000) o rendimento da incubaccedilatildeo estaacute diretamente relacionado com a

mortalidade embrionaacuteria a qual sofre influecircncia da gravidade especiacutefica e da

capacidade do ovo em perder umidade No presente trabalho observou-se que a

utilizaccedilatildeo de dietas suplementadas com Arg natildeo afetou nenhuma dessas variaacuteveis

apesar de ter interferido na gravidade especiacutefica dos ovos conforme demonstrado em

tabelas anteriores

10795

108

10805

1081

10815

1082

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Gra

vida

de e

spec

iacutefica

(gm

l)

59860

602604606608

61612614616618

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Peso

(g)

Y = 108413-000000249943X R2=066 Y = 585813+000196527X R2=096

50

O peso do pinto natildeo foi influenciado pelos niacuteveis de Arg na dieta das matrizes

de corte eacute considerado muito importante na cadeia de produccedilatildeo por estar diretamente

relacionado ao desempenho produtivo do frango A variaccedilatildeo de peso do pinto no

momento da eclosatildeo pode ser causada por fatores como linhagem idade da matriz peso

e niacuteveis de nutrientes do ovo (Vieira amp Moran Jr 1999) Okada (1994) e Castro (1996)

ressaltam que pintos de corte com mais de 40g no primeiro dia de vida devem ser

considerados de boa qualidade Os pintos desse experimento podem ser considerados de

boa qualidade jaacute que o menor peso dos pintos ao nascer foi de 439g Embora neste

estudo os niacuteveis de Arg na dieta das matrizes natildeo tenham afetado o peso dos pintos esse

aminoaacutecido eacute essencial para o bom desenvolvimento da progecircnie Kita et al (2002)

relatam que dietas com alta proteiacutena suplementadas com aminoaacutecidos essenciais (Arg

metionina+cistina) aumentam os niacuteveis plasmaacuteticos do fator de crescimento semelhante

agrave insulina (IGF-I) e o ganho de peso em aves jovens

Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Variaacuteveis Niacuteveis de Arginina

()

Fertilidade ()

Eclosatildeo ()

Peso ovo (g)

Peso Pinto (g)

Relaccedilatildeo Peso OvoPeso Pinto

0943 9750plusmn218 7875plusmn450 6269plusmn042 4507plusmn053 7168plusmn045 1093 9513plusmn212 8038plusmn459 6212plusmn033 4390plusmn045 7115plusmn054 1243 9250plusmn206 8125plusmn464 6200plusmn047 4487plusmn066 7234plusmn047 1393 9750plusmn218 8000plusmn457 6314plusmn072 4514plusmn086 7173plusmn082 1543 9625plusmn215 7750plusmn443 6351plusmn055 4529plusmn039 7127plusmn045 Meacutedia 9578 7958 6269 4486 7163

CV () 656 1641 231 374 222 Anaacutelise de Variacircncia Arginina ns ns ns ns ns

R2 ------ ------ ----- ------- ------- ns = natildeo significativo

O peso dos ovos eacute outra caracteriacutestica de grande importacircncia relacionada com a

idade da matriz os quais satildeo preponderantes para o desenvolvimento inicial das aves e

tem consequecircncias em todo o crescimento (Pedroso et al 2005) Essa influecircncia eacute bem

conhecida e o peso do pinto representa entre 66 e 71 do peso do ovo (Fiuacuteza et al

2006 Marinho et al 2006 Pappas et al 2006) Segundo North amp Bell (1990) cada

51

grama a mais no peso do pinto representa 13 gramas no peso do frango ao abate por

isso a nutriccedilatildeo das matrizes eacute de grande importacircncia jaacute que a Arg tem relaccedilatildeo positiva

com o hormocircnio de crescimento (GH) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave

(Harvey et al 2001)

Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico

Estimativas Bayesianas

Ligaccedilatildeo Ligaccedilatildeo Meacutedias Desvio Padratildeo P25 P975 DIC

Embriodiagnoacutestico

Linear α β

-07512 -25980

2078 1798

-4811 -6367

3426 0784 4783 Mortalidade

Embrionaacuteria (1 a 5 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-8444 10690 -5607

10610 18020 7538

-3015 -2406 -2104

11790 47550 8874

4813

Linear α β

2259 -6267

3790 3615

-4602 -14470

10570 -

01174 3137

Mortalidade (11 a 17 dias)

Quadraacutetica α β1 β2

5057 -11090 1958

12960 22430 9632

-2027 -5093 -1714

3112 3253 2052

3167

Linear α β

-3726 1274

10390 07968

-58110 -02681

-1730 2882 1079

Mortalidade (18 a 21 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-1634 -2195 1387

6330 10280 4084

-14020 -22380 -6539

10690 17840 9441

1095

Linear α β

-1927 -2266

2562 2359

-7233 -7321

2739 1993 0070

Bicado Vivo Quadraacutetica

α β1 β2

-1451 -1692 -2019

2749 2821 2539

-7044 -7313 -7290

3755 3682 2565

0057

Linear α β

-2564 -1628

2860 2418

-8103 -6479

2823 2755 3417

Bicado Morto Quadraacutetica

α β1 β2

3692 -12350 4412

11930 19920 8139

-1936 -5206 -1148

2739 2609 2054

3428

Linear α β

-513600 -004923

3798 3023

-13000 -6154

2041 5809 2522

Morte por Contaminaccedilatildeo Quadraacutetica

α β1 β2

-009106 -71940 28920

13200 21610 8744

-2704 -4965 -1428

2480 3473 2016

2555

Na Tabela 4 satildeo apresentadas as estimativas Bayesianas para as equaccedilotildees de

regressatildeo ajustadas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos provenientes das

matrizes de corte alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg Natildeo foi verificado efeito da

dieta das matrizes sobre nenhuma das variaacuteveis paracircmetros avaliadas (Pgt005)

52

Contudo no periacuteodo final do desenvolvimento embrionaacuterio (18 a 21 dias) haacute maior

mortalidade (Tabela 5) Nesse periacuteodo haacute mudanccedila draacutestica do meio aquoso protegido

para o meio aeroacutebio totalmente diferente Nas aves essa fase final de desenvolvimento

inclui absorccedilatildeo de aacutegua retraccedilatildeo do saco vitelino maturaccedilatildeo funcional do pulmatildeo

transiccedilatildeo da respiraccedilatildeo coacuterio-alantoide para pulmonar bicagem e nascimento Ocorre

ao mesmo tempo o desenvolvimento da resposta homeoteacutermica (Oviedo-Roacutendon amp

Murakami 1998) Aleacutem disso nesse periacuteodo ocorre a mudanccedila pronunciada em

hormocircnios tireoideanos corticosteroideos hormocircnios do eixo somatotroacutepico

prolactina vasotocina e melatonina

Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg Morte

Embrionaacuteria (1 a 5 dias)

Morte (11 a 17 dias)

Morte (18 a 21

dias)

Bicado Morto

Morte por Contaminaccedilatildeo

Arg () 0943 264 416 889 264 125 1093 514 000 764 125 000 1243 250 000 836 000 125 1393 000 125 1514 125 000 1543 125 000 1406 125 125 CV () 20962 50785 9999 27439 36515 (Pgt005)

Conclusatildeo

A suplementaccedilatildeo das dietas de matrizes de corte com niacuteveis crescentes de

Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o

niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os

niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas

podendo ser utilizado o menor niacutevel de suplementaccedilatildeo ou seja 0943 de Arg

digestiacutevel sem prejuiacutezos

53

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IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e

paracircmetros oacutesseos da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos

Palavras-chave avaliaccedilatildeo de carcaccedila desempenho produtivo osso

58

IV - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

performance carcass yield and bone parameters of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine

(Arg) supplementation in broiler breeder henrsquos diet on performance carcass yield and bone parameters in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) These results indicate that it is necessary to feed the progeny with an Arg-supplemented diet to obtained better performance and bone quality Key words bone carcass evaluation productive performance

59

Introduccedilatildeo

As exigecircncias nutricionais para a maioria dos nutrientes satildeo estabelecidas com

base nas respostas produtivas mas em alguns casos a sauacutede eacute o criteacuterio principal A

nutriccedilatildeo de reprodutoras pesadas deve atender as exigecircncias da ave alcanccedilando bom

desempenho produtivo e ainda suprir as necessidades dos embriotildees e dos pintos

neonatos originados de seus ovos O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo

dependem completamente dos nutrientes contidos no ovo os quais satildeo originados da

dieta e do metabolismo das galinhas (Baiatildeo amp Lucio 2005) Assim a concentraccedilatildeo de

nutrientes disponiacuteveis no ovo para o desenvolvimento do embriatildeo eacute criacutetico e pode

influenciar o potencial de ganho de peso da progecircnie e caracteriacutesticas importantes de

desenvolvimento imunitaacuterio oacutesseo e muscular

O crescimento precoce no periacuteodo poacutes-eclosatildeo eacute influenciado por vaacuterios

fatores entre eles o conteuacutedo de resiacuteduos do saco viteliacutenico a ingestatildeo de alimento e de

aacutegua os niacuteveis de enzimas pancreaacuteticas e intestinais a aacuterea de superfiacutecie intestinal e a

digestibilidade global de nutrientes (Dibner 1996) As reservas contidas no saco

vitelino satildeo as primeiras fontes de nutrientes utilizadas pelo pintainho ao nascer Desse

modo quanto maior o tempo decorrido entre a eclosatildeo e o iniacutecio da ingestatildeo de

alimento e aacutegua maior a dependecircncia que o pintainho teraacute dessas reservas (Vieira amp

Pophal 2000) a dieta materna eacute a origem dos nutrientes para o embriatildeo (Vieira 2007)

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) afirmam que para matrizes pesadas existe uma pausa nas

pesquisas que visam determinar as exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos Embora os

aminoaacutecidos presentes na gema possam ser suficientes durante o processo de eclosatildeo

apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

desenvolvimento inicial (Otha et al 2004)

Os aminoaacutecidos sinteacuteticos disponiacuteveis no mercado proporcionam o atendimento

das exigecircncias nutricionais das aves principalmente em relaccedilatildeo aos aminoaacutecidos

60

limitantes Dentre esses aminoaacutecidos a arginina (Arg) eacute considerada o quinto

aminoaacutecido limitante para frangos de corte em dietas agrave base de milho e de farelo de

soja apoacutes metionina+cistina lisina treonina e valina (Corzo 2007) Como as aves natildeo

apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem exclusivamente da Arg sinteacutetica

principalmente no periacuteodo inicial de criaccedilatildeo (Allen amp Baker 1972) A suplementaccedilatildeo

da Arg eacute necessaacuteria para a formaccedilatildeo da ornitina a qual estaacute envolvida na siacutentese da

prolina que eacute utilizada para a formaccedilatildeo das poliaminas (espermidina espermina e

putrescina) Estas moleacuteculas estatildeo associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

A Arg aleacutem de serem constituintes de proteiacutenas participa como coadjuvante na

secreccedilatildeo de insulina pelas ceacutelulas β do pacircncreas (Bolea et al 1997) e na secreccedilatildeo do

hormocircnio de crescimento (GH) (Ghigo et al 1994) Os efeitos do GH satildeo mediados

pelos fatores de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Le Roith et al 2001) O

IGF-I eacute conhecido por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo

esqueleacutetico como a proliferaccedilatildeo e diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelite (Florini et al 1996)

e a agregaccedilatildeo de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos sobre a siacutentese e a

degradaccedilatildeo proteica (Duclos et al 1991 Coleman et al 1995 Duclos et al2005)

Outro efeito do GH ocorre em niacutevel do disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de

IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no crescimento dos ossos longos (Isaksson et

al 1987)

O enriquecimento dos ovos das matrizes com Arg bem como sua suplementaccedilatildeo

logo apoacutes a eclosatildeo pode trazer inuacutemeros benefiacutecios sobre o desenvolvimento da

progecircnie jaacute que o GH influenciado pela Arg tem sua siacutentese iniciada na fase

embrionaacuteria da ave (Harvey et al 2001)

Diante do exposto com este estudo objetivou-se testar a influecircncia da

suplementaccedilatildeo com L-Arginina na dieta das matrizes de corte sobre a progecircnie com

dieta suplementada ou natildeo suplementada com L-Arginina sobre o desempenho

paracircmetros oacutesseos e rendimento de carcaccedila dos frangos de corte

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

61

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

no delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina

incluiacutedos na dieta materna variando de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal (0

943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 35

aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada box foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado o

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

em todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as sobras de raccedilatildeo dos boxes foram pesadas para

ajustar o consumo de raccedilatildeo e da conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 2) As

dietas experimentais agrave base de milho e de farelo de soja foram formuladas de acordo

com os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e as recomendaccedilotildees nutricionais

62

propostas por Rostagno et al (2005) As aves controle receberam dieta sem

suplementaccedilatildeo de arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz

sobre o desempenho da progecircnie

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais basais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 017 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 1000 10000 Valores calculados PB () 2000 1850 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

63

Experimento 3 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina digestiacutevel na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes utilizando o delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina e seis repeticcedilotildees

com 32 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal inicial e de crescimento em

substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial corresponderam a 1300

1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela 2) A partir dos 22

dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300 1450 1600

e 1750 de arginina digestiacutevel (Tabela 3) O manejo realizado nesse experimento foi

conduzido conforme descrito no experimento anterior

Desempenho

Para ambos os experimentos com a progecircnie foram avaliados o desempenho

zooteacutecnico (ganho de peso consumo de raccedilatildeo e conversatildeo alimentar) Para avaliaccedilatildeo do

desempenho as raccedilotildees e as aves foram pesadas no iniacutecio do experimento aos 7 21 e 42

dias de idade

Paracircmetros oacutesseos

Os paracircmetros oacutesseos avaliados foram comprimento diacircmetro peso e calculado

o Iacutendice de Seedor Para avaliaccedilatildeo dos paracircmetros oacutesseos em ambos os experimentos

com a progecircnie apoacutes o sacrifiacutecio por meio de atordoamento seguido de sangria foram

coletados os fecircmures e as tiacutebias esquerdas de duas avesrepeticcedilatildeo aos 7 e 21 dias de

idade As amostras ficaram congeladas (-18ordmC) ateacute o iniacutecio das anaacutelises dos paracircmetros

oacutesseos que foram executadas conforme descrito a seguir

Apoacutes o descongelamento dos ossos foram retirados os tecidos envolventes

(tecido muscular aderido) com auxiacutelio de tesouras e pinccedilas Os ossos descongelados

foram pesados em balanccedila analiacutetica (g plusmn 00001) e o comprimento e o diacircmetro (na

64

porccedilatildeo meacutedia do osso) foram medidos usando paquiacutemetro eletrocircnico digital (capacidade

de 0 a 150 mm e resoluccedilatildeo de 001 mm)

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900

Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6456 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl Vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 1300 1450 1600 1750 1900 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

65

A partir do peso do osso e do seu comprimento foi calculado o Iacutendice de Seedor

(Seedor et al 1993) de acordo com a seguinte foacutermula Iacutendice de Seedor = Peso do

osso (mg)comprimento do osso (mm)

Este iacutendice eacute utilizado como indicativo da densidade oacutessea Quanto maior o

Iacutendice de Seedor maior a densidade da peccedila oacutessea e vice-versa

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000

mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

66

Rendimento de carcaccedila

Para determinaccedilatildeo do rendimento de carcaccedila foram utilizadas trecircs aves por

unidade experimental (15 avestratamento) identificadas com anilhas numeradas e

submetidas ao jejum por seis horas atordoadas com eletricidade (220W) e com

posterior sangria no final de cada experimento realizado com a progecircnie

Para caacutelculo do rendimento de carcaccedila foi considerado o peso da carcaccedila

eviscerada quente sem os peacutes cabeccedila e gordura abdominal em relaccedilatildeo ao peso vivo

que foi obtido individualmente antes do abate das aves Para rendimento dos cortes

nobres foi considerado o rendimento do peito inteiro com pele e ossos das pernas

(coxa e sobrecoxa) e das asas que foi calculado em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila

eviscerada

Para caacutelculo da gordura abdominal foi considerada a gordura presente ao redor da

cloaca da bolsa cloacal moela proventriacuteculo e dos muacutesculos abdominais adjacentes foi

retirada conforme descrito por Smith (1993) Em seguida foi pesada e tambeacutem

calculada em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila eviscerada

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

67

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

Resultados e discussatildeo

Os valores meacutedios de desempenho de frangos de corte provenientes de matrizes

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg com dieta suplementada e natildeo suplementada

com Arg estatildeo demonstrados nas Tabelas 5 e 6 respectivamente

No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) os frangos que receberam dietas

suplementadas com Arg apresentaram efeito linear positivo (Plt005) dos niacuteveis

crescentes de suplementaccedilatildeo com Arg sobre o ganho de peso O consumo de raccedilatildeo e a

conversatildeo alimentar foram influenciados de forma quadraacutetica (Plt005) e o niacutevel de

1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649

proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente (Figura 2)

Esses niacuteveis satildeo superiores aos encontrados por Atencio et al (2004) que apresentaram

os niacuteveis de 127 e 128 de Arg digestiacutevel para ganho de peso e conversatildeo

alimentar respectivamente Mendes et al (1997) e Brake et al (1998) observaram

melhor conversatildeo alimentar agrave medida que a Arg foi adicionada agraves dietas dos frangos de

corte

68Tabela 5 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito

0943 1093 1243 1393 1543

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 68749plusmn651 69813plusmn1553 69498plusmn876 71393plusmn2071 71148plusmn1009 466 ns

Consumo de raccedilatildeo g 108937plusmn973 108077plusmn2506 106938plusmn1143 108570plusmn2584 109617plusmn1424 420 ns

Conversatildeo alimentar gg 1585plusmn0015 1548plusmn0006 1539plusmn0014 1523plusmn0023 1541plusmn0004 224 Quadraacutetico1

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 182410plusmn1786 178280plusmn1963 183209plusmn2355 170699plusmn3272 177743plusmn3493 366 ns

Consumo de raccedilatildeo g 339169plusmn2597 332944plusmn4420 334432plusmn4460 328563plusmn5011 335512plusmn4351 311 ns

Conversatildeo alimentar gg 1859plusmn0017 1868plusmn0017 1825plusmn0008 1926plusmn0027 1889plusmn0014 230 ns

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 251160plusmn2118 248093plusmn2721 252708plusmn2327 242092plusmn4528 248891plusmn3614 314 ns

Consumo de raccedilatildeo g 448106plusmn3333 441022plusmn6500 441370plusmn5178 437133plusmn7327 445129plusmn4655 309 ns

Conversatildeo alimentar gg 1784plusmn0013 1777plusmn0011 1746plusmn0005 1807plusmn0021 1789plusmn0008 177 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 15844-0000270801X+0000000325260X2 R2 = 070

69Tabela 6 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito

1300 1450 1600 1750 1900

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 75785plusmn402 77320plusmn1073 78103plusmn635 79648plusmn670 80151plusmn344 212 Linear1

Consumo de raccedilatildeo g 89299plusmn1140 92124plusmn2246 103470plusmn4037 104782plusmn562 96677plusmn1665 557 Quadraacutetico2

Conversatildeo alimentar gg 1179plusmn0007 1192plusmn0031 1326plusmn0055 1316plusmn0012 1207plusmn0026 613 Quadraacutetico3

1150 1300 1450 1600 1750

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 177261plusmn2817 177088plusmn2760 180666plusmn2220 182398plusmn3067 177484plusmn2109 359 ns

Consumo de raccedilatildeo g 358840plusmn5051 353952plusmn5112 356084plusmn2723 358440plusmn6584 354362plusmn2670 322 ns

Conversatildeo alimentar gg 2025plusmn0013 1999plusmn0017 1972plusmn0016 1965plusmn0006 1997plusmn0013 165 Quadraacutetico4

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 253047plusmn2782 254408plusmn3313 258769plusmn2443 262046plusmn3324 257635plusmn2041 269 Linear5

Consumo de raccedilatildeo g 448139plusmn5104 446076plusmn6429 459554plusmn4864 463275plusmn6840 451039plusmn3651 297 ns

Conversatildeo alimentar gg 1771plusmn0009 1754plusmn0015 1777plusmn0022 1768plusmn0005 1751plusmn0012 192 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 759898+00737276X R2 = 081 2 Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=085 3 Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 = 096 4 Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031 5 Y = 253818+0112096X R2 = 017

70

149150151152153154155156157158159

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo A

limen

tar

Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Na progecircnie natildeo suplementada com dieta contendo Arg verificou-se efeito

quadraacutetico (Plt005) da nutriccedilatildeo das matrizes na conversatildeo alimentar (CA) (Figura 1)

sendo que 1359 de Arg dig proporcionou o melhor iacutendice Jaacute o consumo de raccedilatildeo e o

ganho de peso natildeo foram afetados (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo da matriz

O efeito observado da suplementaccedilatildeo com Arg das matrizes na CA de frangos de

corte natildeo suplementados com Arg ser atribuiacuteda ao aumento na concentraccedilatildeo desse

aminoaacutecido na gema a qual eacute responsaacutevel pela nutriccedilatildeo dos pintos durante o seu

desenvolvimento embrionaacuterio e nas primeiras horas de vida poacutes-eclosatildeo Esse aumento

pode ter efeito positivo no desenvolvimento muscular dos pintos uma vez que esse

aminoaacutecido tem accedilatildeo indireta na formaccedilatildeo muscular atraveacutes da siacutentese do hormocircnio de

crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO) Aleacutem disso a Arg ainda estaacute envolvida na

siacutentese da creatina e de poliaminas As poliaminas satildeo consideradas de importacircncia

nutricional no crescimento e desenvolvimento do intestino do neonato (Quinn et al

2002) Segundo Foye et al(2005) o acesso do embriatildeo a nutrientes pode melhorar o

desenvolvimento do sistema digestoacuterio a eclodibilidade e o desempenho dos frangos

Quando o comportamento da curva do consumo de raccedilatildeo dos frangos de corte

que receberam dietas suplementadas com Arg foi analisada verifica-se que apoacutes o

ponto de maior consumo de raccedilatildeo ocorre uma queda na curva (Figura 2) Esse efeito

pode ter sido ocasionado por um desequiliacutebrio dos aminoaacutecidos na dieta afetando

principalmente a relaccedilatildeo LysArg O antagonismo entre esses aminoaacutecidos prejudica a

absorccedilatildeo desses uma vez que ambos competem pelo mesmo siacutetio de absorccedilatildeo

Segundo Fernandes et al (2009) o efeito negativo da suplementaccedilatildeo de Arg

pode estar associado agrave incapacidade funcional dos rins em eliminar o excesso de ureia

formado pela degradaccedilatildeo da Arg Niacuteveis elevados de Arg promovem aumento na

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 070

1359

71

atividade da arginase renal produzindo ornitina e ureia (Stuz et al 1971) Este aumento

pode comprometer a siacutentese de NO visto que a Arg eacute a uacutenica via fisioloacutegica de

produccedilatildeo deste composto Adicionalmente a isso a elevaccedilatildeo da ureia plasmaacutetica de

acordo com Prabhakar et al (1997) pode inibir a accedilatildeo da oacutexido niacutetrico sintetase (NOS)

enzima que cataliza a reaccedilatildeo que converte Arg em NO O NO aleacutem de

neurotransmissor tambeacutem modula a liberaccedilatildeo de outros neurotransmissores (Estrada amp

Murilo-Carretero 2005) cujo envolvimento destas moleacuteculas na regulaccedilatildeo do apetite

vem sendo discutido (Denbow 1999)

750

800

850

900

950

1000

1050

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

sum

o de

raccedilatilde

o (g

)

730

740

750

760

770

780

790

800

810

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Gan

ho d

e pe

so (g

)

105

11

115

12

125

13

135

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo das matrizes com dietas com Arg natildeo afetou as variaacuteveis de

desempenho da progecircnie natildeo suplementada com Arg no periacuteodo de 21 a 42 dias de

idade (Pgt005) Poreacutem quando a progecircnie recebeu dieta com Arg verificou-se efeito

quadraacutetico para conversatildeo alimentar (Plt005) e o melhor resultado foi alcanccedilado com

1669 de Arg (Figura 3)

Sabe-se que a conversatildeo alimentar indica a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo da dieta para

o crescimento e deposiccedilatildeo muscular Assim o crescimento consiste em parte do

resultado da siacutentese proteica e a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo dependem da quantidade de

aminoaacutecidos que estatildeo sendo catabolizados (Sklan amp Noy 2004) Este processo

depende de energia para a biotransformaccedilatildeo e a eliminaccedilatildeo com custo metaboacutelico para

Y = 759898+00737276X R2 = 085

Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 =0 96

Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=081

1690

1649

72

incorporar um aminoaacutecido na cadeia proteica de 4 mol de ATP e de 6 mol de ATPg de

N para eliminaacute-lo (Mc Leoad 1997)

194195196197198199

2201202203204

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo de Arg durante todo o periacuteodo de criaccedilatildeo eacute essencial para que

a ave expresse todo o seu potencial geneacutetico principalmente em relaccedilatildeo ao ganho de

peso Para a progecircnie suplementada no periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade)

observou-se efeito linear positivo (Pgt005) no ganho de peso e para a progecircnie que natildeo

recebeu suplementaccedilatildeo natildeo foi observado efeito(Pgt005) da suplementaccedilatildeo das

matrizes nas variaacuteveis de desempenho (Figura 4)

2500

2520

2540

2560

2580

2600

2620

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Gan

ho d

e Pe

so (g

)

Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

De fato segundo Fernandes et al (2009) a suplementaccedilatildeo de Arg acima das

exigecircncias nas raccedilotildees iniciais (1 a 21 dias) dos frangos melhora o desempenho

produtivo das aves entretanto esse efeito eacute transiente natildeo havendo diferenccedila nestas

caracteriacutesticas na idade de abate

Na fase inicial de criaccedilatildeo a Arg eacute considerada um aminoaacutecido essencial na dieta

das aves visto que o ciclo da ureia natildeo eacute funcional nas aves Assim a incapacidade

desses animais em sintetizar Arg implica na necessidade do fornecimento desse

aminoaacutecido na dieta Aleacutem disso a Arg eacute considerada o quinto aminoaacutecido limitante

Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031

1669

Y = 253818+0112096X R2 = 017

73

para frangos em dietas agrave base de milho e de farelo de soja apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Segundo Ball et al (2007) a exigecircncia de Arg pelas aves eacute a mais alta entre as

espeacutecies de animais estudadas isso porque aleacutem da falta da siacutentese endoacutegena a taxa de

deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento das atuais linhagens de corte eacute muito alta

Os valores meacutedios de desempenho (Tabelas 5 e 6) apresentados durante o

periacuteodo experimental total (1 a 42 dias) satildeo muito proacuteximos Assim foi realizada a

anaacutelise conjunta de ambos os experimentos para confirmar a necessidade ou natildeo de

suplementaccedilatildeo da progecircnie com Arg na dieta No periacuteodo total de 1 a 42 dias (Tabela

7) a CA foi melhor na progecircnie que recebeu dieta suplementada apesar do CR ter sido

superior nessas aves demonstrando assim que a progecircnie suplementada com Arg

converte mais eficientemente a raccedilatildeo em massa muscular

Tabela 7 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg

1 a 21 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 70120plusmn585 108428plusmn789 1547plusmn0007

Progecircnie (suplementada) 78202plusmn406 97271plusmn1456 1243plusmn0018

CV () 473 913 0011 22 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 178468plusmn1380 334124plusmn1877 1874plusmn010

Progecircnie (suplementada) 178979plusmn1160 356346plusmn1981 1992plusmn0007

CV () 1182 1999 0007 1 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 248588plusmn1487 442552plusmn2419b 1781plusmn0006b

Progecircnie (suplementada) 257181plusmn1315 453617plusmn2597a 1764plusmn0006a

CV () 1347 2477 0006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Dentre os paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada

apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis

suplementares de Arg recebidos pelas matrizes (Figura 5)

74

Tabela 8 ndash Meacutedias e erro padratildeo de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito Paracircmetros 0943 1093 1243 1393 1543

de Carcaccedila 6944plusmn025 6863plusmn044 6987plusmn033 6953plusmn028 7009plusmn029 115 Linear1

de Peito 3587plusmn028 3519plusmn017 3662plusmn032 3639plusmn041 3618plusmn042 228 ns

de Coxa 3041plusmn032 3085plusmn019 2970plusmn033 2999plusmn032 3021plusmn022 229 ns

de Asa 1142plusmn016 1129plusmn014 1118plusmn006 1104plusmn020 1110plusmn014 329 ns

de Dorso 2279plusmn020 2352plusmn026 2267plusmn014 2287plusmn030 2262plusmn030 266 ns

de Gordura abdominal 295plusmn015 325plusmn014 292plusmn016 367plusmn019 290plusmn011 1220 ns ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 690720+000146984X R2 = 081 Tabela 9 ndash Meacutedias e erros padratildeo de rendimento da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito Paracircmetros 1150 1300 1450 1600 1750

de Carcaccedila 6993plusmn029 7022plusmn028 7138plusmn033 7128plusmn020 7160plusmn031 099 Linear1

de Peito 3579plusmn030 3584plusmn077 3690plusmn021 3651plusmn028 3698plusmn019 277 Linear2

de Coxa 3126plusmn030 3108plusmn066 3027plusmn025 3026plusmn023 3045plusmn020 295 Linear3

de Asa 1137plusmn022 1123plusmn015 1105plusmn017 1095plusmn015 1096plusmn021 398 Linear4

de Dorso 2272plusmn033 2286plusmn057 2263plusmn028 2273plusmn028 2260plusmn048 436 ns

de Gordura abdominal 314plusmn013 311plusmn013 238plusmn007 279plusmn014 285plusmn007 964 Quadraacutetico5 1 Y = 700017+000293620X R2= 045 2 Y = 357918+000203737X R2 = 027 3 Y = 311542-000163610X R2=021 4 Y = 113323-000072978X R2 = 085 5 Y = 322863-000316200X+000000424975X2R2=030 ns = natildeo significativo

75

686

688

69

692

694

696

698

70

702

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

d

e C

arca

ccedila

Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Al-Murrani (1982) demonstrou que injetando uma mistura de aminoaacutecidos nos

embriotildees em crescimento nos ovos de matrizes de corte resultam em aumento no peso

do pinto e no ganho de peso dos frangos de corte aos 56 dias de idade quando estes

foram comparados com os natildeo tratados De fato o peso do embriatildeo e dos pintos eacute

influenciado pelo perfil nutricional da gema por sua utilizaccedilatildeo pelo pintos apoacutes o

nascimento (Otha et al 1999)

Quando os frangos receberam dietas suplementadas com Arg houve aumento

linear positivo (Plt005) da porcentagem de carcaccedila e de peito poreacutem as porcentagens

de pernas e de asa apresentaram queda linear (Plt005) (Figura 6) Esses efeitos

provavelmente ocorreram pela accedilatildeo indireta da Arg pela formaccedilatildeo muscular atraveacutes da

siacutentese do hormocircnio do crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO)

A Arg eacute constituinte de proteiacutenas e estaacute envolvida na secreccedilatildeo de insulina pelo

pacircncreas (Bolea et al 1997) e do GH pela hipoacutefise (Merimee et al 1969) Os efeitos

desses hormocircnios se manifestam por meio da secreccedilatildeo secundaacuteria dos fatores de

crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Roith et al 2001) O IGF-I eacute conhecido

por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo esqueleacutetico como

a proliferaccedilatildeo e a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelites (Florini et al 1996) e a agregaccedilatildeo

de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos na siacutentese e na degradaccedilatildeo proteica

(Duclos et al 2005)

Outro mecanismo de accedilatildeo da Arg nas fibras musculares estaacute relacionada com agrave

accedilatildeo do oacutexido niacutetrico O NO eacute sintetizado pela oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) a qual eacute

expressada pelas fibras do muacutesculo esqueleacutetico (Reid 2001) A atividade da NOS

variam nos diferentes tipos de muacutesculos sendo que nos muacutesculos de contraccedilatildeo raacutepida

verifica-se maior accedilatildeo desta do que nos muacutesculos de contraccedilatildeo lenta (Reid 2001)

Y = 690720+000146984X R2 = 081

76

Assim o efeito observado nos diferentes cortes provavelmente ocorreu em virtude da

predominacircncia de fibras brancas ou Fast Glycolytic (FG) no peito Em contrapartida os

muacutesculos da coxa sobrecoxa e da asa possuem predominacircncia de fibras vermelhas ou

Slow Oxidative (SO) que satildeo de contraccedilatildeo lenta (Sartori amp Gonzaacuteles 2002) e pouco

afetada pela accedilatildeo da NOS

O teor de gordura abdominal presente na carcaccedila de frangos eacute um dos melhores

indicativos de qualidade da carcaccedila Quando os frangos foram suplementados com

niacuteveis de Arg verificou-se efeito quadraacutetico (Plt005) para essa caracteriacutestica em que o

menor teor de gordura abdominal foi obtido com 1672 de Arg dig (Figura 6) A

queda observada ateacute esse niacutevel pode ser explicada pela accedilatildeo do GH via IGF-I que induz

a siacutentese de proteiacutenas por estimular a captaccedilatildeo de aminoaacutecidos e a transcriccedilatildeo e a

traduccedilatildeo do mRNA em vaacuterios tecidos-alvo Diminui o catabolismo de proteiacutenas por

atuar diretamente na liberaccedilatildeo de aacutecidos graxos do tecido adiposo aumentando a sua

conversatildeo em acetil-CoA fonte de energia para os tecidos perifeacutericos A partir desse

ponto onde verifica-se o menor acuacutemulo de gordura ocorre novamente o aumento na

deposiccedilatildeo de gordura abdominal Isso provavelmente se deve ao excesso de aminoaacutecido

na dieta A degradaccedilatildeo desse excesso leva a excreccedilatildeo de nitrogecircnio na urina na forma

de amocircnia e a produccedilatildeo de moleacuteculas com esqueleto carbocircnico que satildeo usadas na

gliconeogecircnese e na lipogecircnese

Segundo Shutte amp Pack (1995) e Leclerq (1998) a suplementaccedilatildeo e o

balanceamento dos aminoaacutecidos das dietas podem promover aumento no ganho de

carcaccedila principalmente em relaccedilatildeo ao peito (Pophal et al 2004) e reduccedilatildeo de gordura

abdominal (Vieira et al 2004)

Mendes et al (1997) verificaram que o aumento da relaccedilatildeo ArgLys melhorou o

rendimento de carcaccedila e reduziu a gordura abdominal em frangos de corte Costa et al

(2001) observaram que agrave medida em que se aumentou a relaccedilatildeo ArgLys houve efeito

linear crescente para o rendimento de perna e decrescente para a gordura abdominal Jaacute

Fernandes et al (2009) natildeo observaram efeito da suplementaccedilatildeo de Arg nas variaacuteveis de

rendimento de carcaccedila analisadas o que provavelmente ocorreu porque diferentemente

do presente trabalho a suplementaccedilatildeo de Arg foi realizada apenas na fase inicial de

criaccedilatildeo (1 a 21 dias de idade)

77

69

695

70

705

71

715

72

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

arca

ccedila

35352354356358

36362364366368

37372

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

P

eito

296298

30302304306308

31312314

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

oxa

106

107

108

109

11

111

112

113

114

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

A

sa

2

22

24

26

28

3

32

34

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

G

ordu

ra a

bdom

inal

Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Outra possibilidade eacute que essas caracteriacutesticas de rendimento de carcaccedila foram

influenciadas pelos niacuteveis dieteacuteticos de Arg que estatildeo acima da exigecircncia das aves

Resultado contraacuterio foi obtido por Atencio et al (2004) que trabalhando com niacuteveis

crescentes de Arg natildeo verificaram efeito no rendimento de carcaccedila e de cortes

avaliados e estes concluiacuteram que os niacuteveis estudados estavam dentro da exigecircncia das

aves

Na anaacutelise conjunta do rendimento de carcaccedila dos experimentos da progecircnie

que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg (Tabela 10) demonstrou-se que a

presenccedila de Arg na dieta promove maior deposiccedilatildeo muscular na coxa e menor acuacutemulo

de gordura abdominal na carcaccedila

Y = 322863-000316200X+000000424975X2 R2 = 030

1672

Y = 700017+000293620X R2 = 045 Y = 357918+000203737X R2 = 027

Y = 113323-000072978X R2 = 085 Y = 311542-000163610X R2 = 021

Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

78

Tabela 10 ndash Meacutedias de percentagem de carcaccedila (CARC) percentagem de peito (PEITO) percentagem de coxa (COXA) percentagem de asa (ASA) percentagem de gordura abdominal (GORDURA) das progecircnies suplementadas ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

CARC PEITO COXA ASA GORDURAProgecircnie

(ssuplementaccedilatildeo) 6951plusmn016 3605plusmn017 3023plusmn014b 1121plusmn007 307plusmn007ordf

Progecircnie (suplementada) 7088plusmn017 3640plusmn020 3066plusmn017ordf 1111plusmn008 285plusmn007b

CV () 014 017 015 007 006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Com relaccedilatildeo aos paracircmetros oacutesseos dos frangos de corte que receberam dietas

sem suplementaccedilatildeo de Arg (Tabela 11) apenas o diacircmetro de tiacutebia aos sete dias de

idade foi afetado de forma quadraacutetica (Plt005) pela suplementaccedilatildeo das matrizes a

partir do niacutevel 1196 de Arg (Figura 7) demonstrando assim que inclusotildees de Arg

acima da exigecircncia promove a melhora dessa caracteriacutestica Segundo Wu amp Morris

(1998) a suplementaccedilatildeo de Arg em niacuteveis elevados promove aumento na atividade da

arginase renal eleva os niacuteveis de ornitina que participa da biossiacutentese das poliaminas

envolvidas no processo de multiplicaccedilatildeo celular melhorando desta forma o suporte

oacutesseo Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram aumento na concentraccedilatildeo

plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez secretado pela

hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio receptor e

indiretamente via IGF-I e II nos tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos

do GH ocorre no disco epifisaacuterio em que atua estimulando a siacutentese de IGF-I o qual

atua paracrinamente induzindo mitogecircnese o que resulta no crescimento dos ossos

longos (Isaksson et al 1987)

Para os paracircmetros morfoloacutegicos dos ossos dos frangos que receberam dietas

contendo suplementaccedilatildeo de Arg verifica-se efeito linear crescente (Plt005) dos niacuteveis

de arginina para o comprimento e diacircmetro do fecircmur e da tiacutebia O mesmo

comportamento foi observado para o iacutendice de Seedor medida indireta da densidade

oacutessea para ambos os ossos aos 7 dias de idade (Figura 8)

79

Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Fecircmur Tiacutebia Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arg na dieta materna

()

7 dias

0943 2930plusmn034 286plusmn008 2803plusmn027 4154plusmn047 271plusmn005 2925plusmn078 1093 2929plusmn042 293plusmn008 2990plusmn123 4162plusmn062 265plusmn005 2945plusmn096 1243 2911plusmn031 283plusmn008 2603plusmn078 4175plusmn042 258plusmn004 2733plusmn063 1393 2912plusmn046 295plusmn008 2920plusmn086 4172plusmn062 273plusmn003 3008plusmn117 1543 2983plusmn031 293plusmn009 2877plusmn068 4269plusmn039 275plusmn002 2897plusmn038

CV 313 690 712 306 377 701 Regressatildeo ns ns ns Ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- ----- ----- 081 -----

21 dias

0943 5001plusmn056 594plusmn019 10198plusmn294 7128plusmn141 526plusmn012 9621plusmn202 1093 5064plusmn036 632plusmn015 10928plusmn175 7197plusmn086 576plusmn008 10720plusmn182 1243 4937plusmn065 574plusmn013 9956plusmn396 6911plusmn094 514plusmn023 9899plusmn357 1393 5002plusmn062 569plusmn011 9822plusmn346 6912plusmn123 512plusmn009 9537plusmn341 1543 5035plusmn026 613plusmn020 11288plusmn337 7005plusmn135 535plusmn011 10928plusmn339

CV 252 657 747 411 635 711 Regressatildeo ns ns ns Ns ns ns R2 ----- ----- ----- ----- ----- -----

ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

80

Tabela 12 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Paracircmetros oacutesseos Fecircmur Tiacutebia

Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arginina () 7 dias 1300 3007plusmn042 309plusmn011 3194plusmn102 4260plusmn041 285plusmn012 3164plusmn122 1450 3022plusmn036 313plusmn007 3333plusmn098 4311plusmn055 293plusmn008 3202plusmn087 1600 3074plusmn023 321plusmn007 3435plusmn102 4352plusmn024 292plusmn004 3405plusmn101 1750 3098plusmn011 322plusmn007 3348plusmn089 4324plusmn044 293plusmn003 3315plusmn114 1900 3058plusmn015 322plusmn012 3540plusmn140 4350plusmn019 305plusmn005 3503plusmn108 CV 225 712 781 220 608 789 Regressatildeo Linear1 ns Linear2 Ns Linear3 Linear4 R2 023 ----- 020 ----- 030 045

21 dias 1300 1300 1450 1600 1750 553plusmn016 9974plusmn408 1450 5032plusmn031 595plusmn015 9973plusmn343 7122plusmn058 533plusmn019 9675plusmn313 1600 5062plusmn068 614plusmn009 10623plusmn306 7102plusmn041 566plusmn015 10453plusmn286 1750 5134plusmn043 597plusmn013 10024plusmn226 7341plusmn180 548plusmn007 9577plusmn168 1900 5111plusmn044 615plusmn013 10942plusmn185 7145plusmn064 562plusmn008 10751plusmn333 CV 231 567 732 333 619 757 Regressatildeo ns ns Linear5 Ns ns ns R2 ----- ----- 030 ----- ---- -----

NS = natildeo significativo 1 Y = 301662+000117500X 2 Y = 322856+000471280X 3 Y = 285333+0000799183X 4 Y = 315921+000526700X 5 Y = 983310+00149518X

255

26

265

27

275

28

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Diacirc

met

ro d

a Tiacute

bia

(mm

)

Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados encontrados para essa idade estatildeo de acordo com os encontrados

por Fernandes (2007) que encontrou efeito linear crescente para o iacutendice de Seedor

quando as aves foram alimentadas com Arg na dieta Aos 21 dias de idade apenas o

iacutendice de Seedor foi afetado de forma linear (Plt005) crescente com o aumento dos

niacuteveis de Arg (Figura 9) O comportamento positivo da suplementaccedilatildeo de arginina sobre

a morfologia do fecircmur e da tiacutebia pressupotildee melhor densidade desses ossos Segundo

Sekine et al (1994) os aminoaacutecidos no o crescimento transverso do osso e essa accedilatildeo

facilita a formaccedilatildeo da matriz e a calcificaccedilatildeo oacutessea

Aleacutem da accedilatildeo da Arg sobre os ossos indiretamente via IGF-I esta tambeacutem eacute

conhecida como precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo pelo qual ela poderia exercer os

seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo Hukkanem et al (1999) sugerem que o

NO pode participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento

298

30

302

304

306

308

31

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Com

prim

ento

- Fecirc

mur

(mm

)

30531

31532

32533

33534

34535

355

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - F

ecircmur

Y = 301662+000117500X R2 = 023 Y = 322856+000471280X R2 = 020

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

Arginina dig ()

82

26

27

28

29

3

31

32

33

34

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Diacirc

met

ro -

Tiacutebi

a (m

m)

30305

31315

32325

33335

34345

35

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - T

iacutebia

Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada ou natildeo com Arg avaliados em

conjunto mostraram que a suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg melhorou o comprimento do

fecircmur e a espessura da tiacutebia Este resultado pode contribuir para melhorar a qualidade

dos ossos dos frangos uma vez que esse eacute um dos maiores problemas enfrentados na

atualidade na avicultura comercial

Tabela 13 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

FC (mm)

FE (mm) FSEE TC

(mm) TE

(mm) TSEE

7 dias Progecircnie

(ssuplementaccedilatildeo)

2933plusmn016

290plusmn003

2838plusmn042

4186plusmn023

268plusmn002

2902plusmn038

Progecircnie (suplementada)

3052plusmn013

317plusmn004

3369plusmn049

4319plusmn017

293plusmn003

3317plusmn050

CV () 014 004 042 021 0026 043 21 dias

Progecircnie (ssuplementaccedil

atildeo)

5008plusmn023b

596plusmn008

10438plusmn170

7031plusmn053

533plusmn007b

10141plusmn162

Progecircnie (suplementada)

5079plusmn021ordf

607plusmn006

10282plusmn150

7157plusmn044

552plusmn006ordf

10086plusmn154

CV () 016 007 140 048 006 136 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Y = 315921+000526700X R2 = 045 Y = 285333+0000799183X R2 = 030

83

96597

97598

98599

995100

1005101

1015102

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig

Iacutendi

ce d

e Se

edor

- Fecirc

mur

Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade

Conclusatildeo

De acordo com os resultados observados conclui-se que os niacuteveis dieteacuteticos de

Arg na dieta das matrizes de corte foram suficientes para melhorar o desempenho da

progecircnie somente na fase inicial de crescimento (1-21 dias de idade) Quando a dieta da

progecircnie tambeacutem foi suplementada com Arg os paracircmetros de desempenho

rendimento de carcaccedila e qualidade oacutessea satildeo melhorados em ambas as fases de criaccedilatildeo

(1-21 dias e 22 a 42 dias de idade) com melhorias imprescindiacuteveis para a qualidade de

carne como a reduccedilatildeo da gordura abdominal

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V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos sete dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavra-chave arginina ELISA fitohemaglutinina sistema imune

V - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

humoral and cellular immunity response of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level being considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses

Key words arginine ELISA phytohemagglutinin immune system

91

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo da matriz afeta o desempenho dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias de

vida portanto a necessidade da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos O sistema imune das aves difere dos mamiacuteferos em algumas

caracteriacutesticas particularmente nos aspectos de estrutura e de diferenciaccedilatildeo dos oacutergatildeos

linfoides (Jeurissen et al 1994) cujo desenvolvimento se inicia durante a vida

embrionaacuteria e se prolonga apoacutes a eclosatildeo ou nascimento

As uacuteltimas horas de incubaccedilatildeo e os primeiros dias de vida poacutes-eclosatildeo satildeo

fundamentais para que este desenvolvimento se complete Somente apoacutes a segunda

semana de vida a ave seraacute capaz de produzir suas proacuteprias imunoglobulinas Ateacute laacute a

imunidade herdada da matildee pela absorccedilatildeo das imunoglobulinas presentes no ovo eacute o

uacutenico mecanismo de defesa do neonato contra as agressotildees do meio externo apoacutes a

eclosatildeo (Maiorka et al 2006)

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas A arginina (Arg) eacute

considerada um aminoaacutecido essencial para aves sobretudo na fase inicial por que o

ciclo bioquiacutemico da ureia natildeo eacute funcional em aves Assim estas natildeo podem sintetizar

Arg e satildeo portanto dependentes do fornecimento deste aminoaacutecido nas dietas Dentre

as espeacutecies animais estudadas as aves tecircm a mais alta exigecircncia de Arg (Ball et al

2007) que se deve tambeacutem agrave alta taxa de deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento

das atuais linhagens de corte e o antagonismo com a Lys

A Arg eacute necessaacuteria para siacutentese de vaacuterias compostos tais como ornitina

poliaminas prolina creatina de proteiacutenas oacutexido niacutetrico (NO) e citrulina aleacutem de

92

glutamato e agmatina em mamiacuteferos A Arg eacute tambeacutem considerada um potente

secretagogo aumentando a liberaccedilatildeo na corrente sanguiacutenea da insulina hormocircnio do

crescimento (GH) e fator de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I) (Newsholme et

al 2005) Esta accedilatildeo eacute em consequecircncia da raacutepida despolarizaccedilatildeo da membrana

plasmaacutetica ligada ao transporte de aminoaacutecidos com a cadeia lateral positiva

De acordo com Le Flocrsquoh et al (2004) os animais estimulados

imunologicamente podem ter suas necessidades de Arg aumentadas Duas rotas do

metabolismo da Arg satildeo identificadas e conhecidas por ter efeitos imunomodulatoacuterios

diretos A primeira na qual a Arg eacute convertida a ornitina gerando poliaminas que tecircm

papel chave na divisatildeo celular siacutentese de DNA e regulaccedilatildeo do ciclo celular A segunda

corresponde agrave siacutentese do NO induzida por vaacuterios de estiacutemulos inflamatoacuterios como as

endotoxinas bacterianas e as citocinas Essa rota eacute essencial para a atividade citotoacutexica

de macroacutefagos O NO tambeacutem estimula a vasodilataccedilatildeo local e favorece ainda a

reparaccedilatildeo tecidual (Bredt amp Snyder 1994)

Com este trabalho objetivou-se avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina na

dieta das matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie

suplementadas ou natildeo

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

93

dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

em um delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-

Arginina incluiacutedos na dieta materna (0 150 300 450 e 600 mgkg da dieta materna)

que equivaleram aos niacuteveis de 0 9431093 12431393 e 1 543 de Arg

digestiacutevel com seis repeticcedilotildees com 35 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo estes substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada boxe foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado um

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

durante todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as aves e as sobras de raccedilatildeo do boxe foram pesadas

ao mesmo tempo para ajustar o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 1) As

dietas experimentais agrave base de milho e farelo de soja foram formuladas de acordo com

os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e recomendaccedilotildees nutricionais de

Rostagno et al (2005) As aves receberam uma uacutenica raccedilatildeo sem suplementaccedilatildeo de

arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz sobre o desempenho

da progecircnie

94

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 018 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 18500 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

95

Experimento 2 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes atraveacutes de um delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na

dieta materna de 0 a 600 mgkg da dieta de Arg digestiacutevel acima da recomendaccedilatildeo dos

frangos de corte e seis repeticcedilotildees com 32 aves cada totalizando 30 unidades

experimentais

O manejo realizado nesse experimento foi conduzido conforme descrito no

experimento anterior com diferenccedila com relaccedilatildeo ao tipo de dieta utilizada

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg da dieta acima da exigecircncia dos frangos de corte agrave raccedilatildeo

basal inicial em substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial

corresponderam a 1300 1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela

2) A partir dos 22 dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300

1450 1600 e 1750 de Arg digestiacutevel (Tabela 3)

96

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900 Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6457 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 130 145 160 175 190 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

97

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 075 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 1000 1000 1000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI

VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

Colheita de Sangue e Anaacutelise de Tiacutetulos vacinais

No 7ordm dia de vida antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm foram coletadas

amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo As aves foram vacinadas contra a

doenccedila de New Castle (Fort-Dodgereg) via ocular na dose de 003 mL por ave aos sete e

21 dias de idade A venopunccedilatildeo foi realizada mediante contenccedilatildeo fiacutesica manual dos

98

animais preferencialmente na veia jugular direita com seringa de 3 mL e agulha 13x45

e uma quantia de sangue coletada em torno de 1 do peso corporal dos animais O

sangue foi acondicionado em tubos de vidro identificados sem anticoagulante para

obtenccedilatildeo de soro sanguiacuteneo No soro foi avaliada a titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais

contra o viacuterus de Doenccedila Newcastle pelo teste imunoenzimaacutetico (ELISA-teste) As

anaacutelises foram processadas em kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent

Assay) do Laboratoacuterio Idexxreg e os dados obtidos foram expressos em absorbacircncia Os

dados de titulaccedilatildeo de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Anaacutelise Histomorfomeacutetrica

No 7ordm e 21ordm dia de idade o timo a bolsa cloacal o baccedilo e o fiacutegado de duas aves

por repeticcedilatildeo foram coletados totalizando doze aves por tratamento Para a realizaccedilatildeo

dessa coleta as aves foram submetidas ao atordoamento por choque e posterior sangria

Apoacutes o sacrifiacutecio as aves foram pesadas individualmente e as carcaccedilas dessecadas para

remoccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides (Timo Baccedilo e Bolsa de Fabricius) O peso dos oacutergatildeos

linfoides foi obtido imediatamente apoacutes a dessecaccedilatildeo e remoccedilatildeo dos tecidos exoacutegenos

Os oacutergatildeos coletados foram pesados em balanccedila de precisatildeo e o peso da ave foi

devidamente anotado

O peso relativo de cada oacutergatildeo foi obtido pela foacutermula

Peso relativo = (peso oacutergatildeopeso vivo) x 100

Para a medida histomorfomeacutetrica dos foliacuteculos linfoides as bolsas cloacais e o

fiacutegado foram acondicionadas em frascos contendo soluccedilatildeo de formol tamponado a 10

(De Tolosa et al 2003) com finalidade de manter a integridade dos tecidos apoacutes a

morte preservando a arquitetura celular As peccedilas foram incluiacutedas em parafina e levadas

ao microacutetomo rotativo para a realizaccedilatildeo dos cortes transversais no centro do oacutergatildeo com

sete microcircmetros de espessura e corados pelo meacutetodo da hematoxilina e eosina (HE) As

lacircminas foram escaneadas usando-se um ldquoscaner HP ScanJet II v25rdquo sendo o

ldquosoftwarerdquo utilizado para o tratamento das imagens o ldquoPaint Shop Pro v50rdquo A

imagem foi digitalizada brilho (variaacutevel entre 125 e 145) contraste 185 e escala de

800 As imagens foram gravadas com extensatildeo jpg e levadas ao analisador de

imagens Para a leitura das imagens foi utilizado um analisador de imagem

computadorizado IMAGE PROPLUS 52 da Miacutedia Cibertecnics Foi mensurada a

altura de trecircs dobras do tecido linfoide de cada repeticcedilatildeo (12 aves por tratamento) e

destes valores foi obtida a meacutedia

99

Nas amostras de fiacutegado foi analisada a presenccedila de aglomerados linfoides As

lacircminas com porccedilotildees do fiacutegado foram analisadas em toda sua extensatildeo e os

aglomerados linfoides foram quantificados atraveacutes de microscopia de luz com aumento

de 10X (Olympus BH2 Olympus America INC NY USA)

Fitohemaglutinina (PHA)

Aos 35 dias de idade duas aves por repeticcedilatildeo totalizando 12 aves por tratamento

foram marcadas com anilhas numeradas e utilizadas para avaliar a imunidade mediada

por ceacutelulas in vivo (Corrier amp DeLoach 1990) Cada ave foi inoculada

intradermicamente no espaccedilo interdigital entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata direita com 01

mL de uma soluccedilatildeo fitohemaglutinina PHA-Mreg (1057601 - Invitrogen) Como controle

negativo 01 mL de soro fisioloacutegico esteacuteril foi inoculado entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata

esquerda O espessamento da pele de ambas as patas foi aferido em miliacutemetros

utilizando-se um paquiacutemetro digital antes da inoculaccedilatildeo e apoacutes trecircs seis 12 e 24 horas

apoacutes a inoculaccedilatildeo O caacutelculo (Corrier amp DeLoach 1990) apresentou-se da seguinte

forma Reaccedilatildeo = resposta a fitohemaglutinina ndash resposta do controle na qual a resposta

a fitohemaglutinina eacute medida pela espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo menos

a espessura no tempo zero (antes da inoculaccedilatildeo) A resposta do controle eacute medida pela

espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo (Soro) menos a espessura no tempo zero

(antes da inoculaccedilatildeo)

Avaliaccedilatildeo da Atividade Fagociacutetica de Macroacutefagos

Para avaliaccedilatildeo da atividade fagociacutetica de macroacutefagos foram utilizadas duas aves

por repeticcedilatildeo totalizando quatro aves por tratamento As aves foram inoculadas no 35ordm

dia de vida atraveacutes de injeccedilatildeo intra-abdominal de Sephadex G-50reg (Sigma) a 3 (10

mL100g de peso vivo) (Qureshi et al 1986 Gore amp Qureshi 1997 Konjufca 2004)

Utilizaram-se para esse procedimento cateteres intravasculares G-14 Apoacutes 42

horas as aves foram submetidas a atordoamento por eletronarcose e sacrificadas atraveacutes

de desligamento cervical Foram lavadas (detergente neutro) e sanitizadas (aacutelcool 70)

As aves foram transportadas ao laboratoacuterio onde se procedeu a abertura da cavidade

abdominal que foi posteriormente lavada com 20 mL de soluccedilatildeo de PBS esteacuteril

heparinizada contendo 05 UIL (Liqueminereg 25000 UI5mL ndash Roche)

Coletaram-se aproximadamente 15 mL de liacutequido abdominal com auxiacutelio de

pipetas Pasteur que foi imediatamente acondicionado em tubos Falcon em banho de

100

gelo O material foi centrifugado a 1500 rpm10 minutos sendo o ldquopelletrdquo

ressuspendido em 2 mL de meio RPMI 1640reg (Sigma) Adicionou-se 150 μL dessa

suspensatildeo a cada well da placa de cultura (24 poccedilos) contendo lamiacutenula de 13 mm de

diacircmetro Incubou-se a temperatura ambiente por uma hora Lavou-se a placa com PBS

esteacuteril gelado para remover as ceacutelulas natildeo aderentes Em seguida adicionou-se 150 μL

de suspensatildeo a 3 de eritroacutecitos de carneiros em meio RPMI 1640reg (Sigma)

incubando-se em temperatura ambiente em concentraccedilatildeo de 5 de gaacutes carbocircnico por

uma hora Lavou-se com PBS esteacuteril gelado para remover os eritroacutecitos que natildeo

aderiram Em seguida realizou-se a coloraccedilatildeo utilizando-se kit comercial (Panoacutetico

Raacutepido LBreg - Laborclin)

Apoacutes 24 horas as lacircminas foram montadas utilizando-se Permountreg Foram

contados em cada lamiacutenula 300 macroacutefagos e verificado o nuacutemero destas ceacutelulas que

continham hemaacuteceas fagocitadas A atividade fagociacutetica foi calculada considerando-se o

nuacutemero de macroacutefagos contendo hemaacuteceas fagocitadas dividido pelo nuacutemero total de

macroacutefagos contados

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

101

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Resultados e Discussatildeo

Os dados meacutedios dos pesos relativos de oacutergatildeos linfoides de frangos de corte

alimentados com dietas natildeo suplementadas estatildeo na Tabela 5 A suplementaccedilatildeo das

matrizes de corte natildeo influenciou o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie

natildeo suplementada com Arg (Pgt005) Da mesma maneira quando houve a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg para a progecircnie tambeacutem natildeo foi verificado (Pgt005)

efeito sobre o peso relativo dos oacutergatildeos linfoides dessas aves (Tabela 6)

102

Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg das Matrizes () 7 dias 21 dias

0943 058plusmn003 054plusmn004 1093 055plusmn003 056plusmn005 1243 056plusmn003 057plusmn003 1393 052plusmn004 057plusmn004 1543 052plusmn003 051plusmn005 CV 1410 1840

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

0943 006plusmn0005 011plusmn001 1093 008plusmn0007 011plusmn001 1243 012plusmn0036 009plusmn001 1393 007plusmn0007 010plusmn001 1543 009plusmn0007 010plusmn001 CV 4968 2463

Regressatildeo ns ns Baccedilo()

0943 015plusmn001 024plusmn001 1093 017plusmn001 022plusmn002 1243 016plusmn001 021plusmn001 1393 015plusmn001 022plusmn003 1543 013plusmn001 021plusmn001 CV 1885 1868

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

O timo e a bolsa cloacal satildeo oacutergatildeos linfoides primaacuterios que representam siacutetios

de maturaccedilatildeo de linfoacutecitos T e B respectivamente Estes oacutergatildeos tecircm fundamental

importacircncia no periacuteodo poacutes-eclosatildeo poreacutem agrave medida que as aves se desenvolvem e se

aproximam da maturidade sexual sofrem involuccedilatildeo fisioloacutegica (Morgullis 2002)

No contexto do desenvolvimento e maturaccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides trabalhos

desenvolvidos com mamiacuteferos demonstram que as respostas imunes podem ser

influenciadas pela Arg dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al 1998 Lewis amp

Langkamp-Henken 2000) Experimentos desenvolvidos com animais jovens

demonstraram efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina como o aumento

do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos tiacutemicos Os efeitos

imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais estressados ou

imunossupremidos

103

Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias

1300 053plusmn005 056plusmn004 1450 057plusmn004 057plusmn003 1600 059plusmn004 059plusmn003 1750 051plusmn003 048plusmn005 1900 058plusmn004 053plusmn004 CV 1910 1790

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

1300 016plusmn0011 025plusmn002 1450 015plusmn0012 020plusmn001 1600 018plusmn0007 022plusmn002 1750 019plusmn0016 026plusmn003 1900 015plusmn0007 023plusmn001 CV 1621 2021

Regressatildeo ns ns Baccedilo ()

1300 007plusmn0009 008plusmn001 1450 009plusmn0008 010plusmn001 1600 008plusmn0006 009plusmn001 1750 008plusmn0005 011plusmn001 1900 007plusmn0007 010plusmn001 CV 2227 2151

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

Para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de Arg foram

observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

nutricionais estabelecidas Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de

Arg plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular (Kidd 2004)

Ao contraacuterio dos resultados observados nesse experimento Jahanian (2009)

observou que animais na fase inicial com dietas suplementadas com Arg e com baixo

niacutevel proteico apresentaram aumento do peso relativo do timo indicando assim que a

Arg eacute necessaacuteria para a resposta oacutetima da imunidade celular

Quando se contrastam os dados do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (Tabela 7)

verificou-se a influencia da suplementaccedilatildeo de Arg no peso da bolsa cloacal (Plt005) no

periacuteodo inicial de criaccedilatildeo Esse aumento eacute de grande importacircncia uma vez que a bolsa

cloacal eacute o principal siacutetio de maturaccedilatildeo dos linfoacutecitos B que satildeo essenciais ao sistema

imune das aves Na fase de 1 a 7 dias de idade esse incremento pode refletir a melhoria

104

das condiccedilotildees imunitaacuterias jaacute que nesse periacuteodo os desafios sanitaacuterios podem

comprometer todo desempenho dessa ave ateacute o final de sua criaccedilatildeo

Tabela 7 ndash Meacutedias e erro padratildeo do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

7 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada) 054plusmn001 015plusmn0005b 0085plusmn0008

Progecircnie (suplementada) 056plusmn002 017plusmn0006ordf 0079plusmn0003

CV () 002 0005 0006 21 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada)

055plusmn001 022plusmn0007 011plusmn0005

Progecircnie (suplementada)

054plusmn002 023plusmn0009 009plusmn0004

CV () 002 008 0004 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

A anaacutelise histomorfomeacutetrica do fiacutegado natildeo mostrou influecircncia (Pgt005) das

dietas das matrizes nos aglomerados linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo (Tabela

8) Da mesma maneira as dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal natildeo foram

influenciadas (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo ou natildeo de Arg na dieta (Tabela 8)

Existe relaccedilatildeo direta entre o fiacutegado e a bolsa cloacal Nas aves os linfoacutecitos B

responsaacuteveis pela produccedilatildeo de anticorpos envolvidos na resposta imunoloacutegica humoral

satildeo produzidos no fiacutegado do embriatildeo no saco viteliacutenico e na medula oacutessea na fase

inicial da incubaccedilatildeo Apoacutes isso migram para a bolsa cloacal e sofrem amadurecimento

e diferenciaccedilatildeo por ateacute dez semanas Daiacute partem para colonizar outros oacutergatildeos como o

baccedilo e a glacircndula de Harder (Butcher amp Miles 2003) A bolsa cloacal eacute constituiacuteda de

linfoacutecitos incrustados em tecido epitelial cujas dobras se estendem no interior do

luacutemen onde se espalham os foliacuteculos linfoides Seus foliacuteculos contecircm mais de 90 de

ceacutelulas B (Tizard 1998)

105

Tabela 8 - Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg

Aglomerados Linfoacuteides Comprimento das dobras Progecircnie natildeo Suplementada Progecircnie natildeo Suplementada

Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 0943 105plusmn010 196plusmn041 1443plusmn097 3247plusmn198 1093 098plusmn028 137plusmn021 1394plusmn225 3066plusmn240 1243 077plusmn004 178plusmn029 1503plusmn060 3042plusmn109 1393 080plusmn015 170plusmn043 1449plusmn068 3112plusmn187 1543 096plusmn018 232plusmn037 1464plusmn149 3222plusmn195 CV() 4398 4708 563 915 Regressatildeo ns ns ns ns Progecircnie Suplementada Progecircnie Suplementada 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 1300 076plusmn010 168plusmn035 1936plusmn206 3535plusmn191 1450 049plusmn015 216plusmn041 1865plusmn022 4027plusmn1244 1600 072plusmn024 189plusmn022 2035plusmn064 3331plusmn036 1750 053plusmn005 192plusmn036 2195plusmn139 4487plusmn1540 1900 053plusmn012 213plusmn025 1905plusmn128 2562plusmn111 CV() 5807 4141 473 5359 Regressatildeo ns ns ns ns

Assim a progecircnie que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg natildeo

apresentou produccedilatildeo de linfoacutecitos B aumentada nem a aacuterea de desenvolvimento e

diferenciaccedilatildeo dos linfoacutecitos B prejudicada ou melhorada pela Arg (Pgt005)

Na Tabela 9 estatildeo agraves meacutedias obtidas da resposta imune celular da progecircnie com

dieta suplementada medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) para estiacutemulo de

proliferaccedilatildeo celular Dentro desse contexto observou-se que 12 horas apoacutes a injeccedilatildeo de

PHA foi possiacutevel verificar efeito quadraacutetico com aumento (Plt005) na resposta celular

das aves alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg em que a maior

resposta foi obtida com 1574 de Arg dig (Figura 1)

Segundo Corrier amp DeLoach (1990) a aplicaccedilatildeo desse teste permite a raacutepida

avaliaccedilatildeo da competecircncia imunoloacutegica celular Os basoacutefilos ceacutelulas comumente

associadas a esses processos apresentam heparina e proteases na composiccedilatildeo de seus

gracircnulos agindo intensamente nos processos de hipersensibilidade Aleacutem disso

produzem citocinas cuja participaccedilatildeo estaacute ligada aos processos inflamatoacuterios (Abbas et

al 2007)

106

Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Arginina 3 horas 6 horas 12 horas 24 horas

1300 1010plusmn0062 0793plusmn0041 0549plusmn0097 0506plusmn0036 1450 0853plusmn0077 0639plusmn0065 0631plusmn0051 0450plusmn0133 1600 0918plusmn0053 0738plusmn0040 0702plusmn0052 0543plusmn0065 1750 0797plusmn0074 0783plusmn0058 0597plusmn0061 0552plusmn0066 1900 0933plusmn0044 0777plusmn0038 0499plusmn0059 0453plusmn0062 CV 1715 1630 2724 3875 Regresatildeo ns ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- 093 -----

ns = Natildeo significativo 1 Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2 R2 = 093

Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Quando se avaliou a atividade fagociacutetica dos macroacutefagos da progecircnie

suplementada e natildeo suplementada verificou-se que os niacuteveis crescentes de Arg na dieta

natildeo afetaram (Pgt005) essa funccedilatildeo (Tabela 10) Os macroacutefagos satildeo ceacutelulas do sistema

mononuclear fagocitaacuterio (McCorkle 1998) integrantes da imunidade inata das aves

importantes tambeacutem para a imunidade adaptativa (Abbas et al 2008) atuando nos

processos de defesa do organismo destruindo agentes estranhos e tambeacutem secretando

citocinas que atuam no processo inflamatoacuterio As principais funccedilotildees executadas por essa

ceacutelula satildeo a fagocitose destruiccedilatildeo de bacteacuterias (Qureshi et al 1986) secreccedilatildeo de

prostaglandinas e citocinas e apresentaccedilatildeo de antiacutegeno para desenvolvimento da

resposta imune celular (Abbas et al 2008)

Segundo Johaniam (2009) satildeo identificadas duas vias de accedilatildeo

imunomodulatoacuteria da Arg in vivo A primeira ocorre atraveacutes da accedilatildeo da arginase que

converte a Arg em ureia e ornitina Neste processo ocorre a produccedilatildeo de poliaminas

pela accedilatildeo da ornitina decarboxilase Esta rota da siacutentese de poliaminas pode ser o

Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2R2 = 093

1574

107

caminho pelo qual a Arg aumenta a mitogecircnese dos linfoacutecitos (Klein amp Morris 1978)

A segunda via ocorre pela siacutentese de NO a partir da a partir da Arg pela accedilatildeo do oacutexido

niacutetrico sintetase resultando na formaccedilatildeo de oacutexido niacutetrico e citrulina Essa rota eacute

essencial para atividade citotoacutexica dos macroacutefagos

Tabela 10 ndash Meacutedias e erros padrotildees da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Macroacutefagos com eritroacutecitosmacroacutefagos contados Arginina Progecircnie Suplementada

1300 1570plusmn529 1450 2030plusmn480 1600 1650plusmn359 1750 2150plusmn500 1900 1830plusmn250 CV 545 Regresatildeo ns ns = Natildeo significativo

Quando avaliados os tiacutetulos de anticorpos da progecircnie verificou-se que a

alimentaccedilatildeo das matrizes com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg natildeo influenciou

os tiacutetulos de anticorpos (Pgt005) da progecircnie natildeo suplementada (Tabela 11) Para as

aves suplementadas verifica-se um efeito linear decrescente (Plt005) aos sete dias de

idade e efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade em que o niacutevel de 1674 de

Arg dig proporcionou o maior tiacutetulo de anticorpos (Tabela 12)

Os resultados observados na progecircnie suplementada mostraram-se compatiacuteveis

com as respostas das aves a campo nas quais inicialmente satildeo observados maiores

tiacutetulos de anticorpos decorrentes da imunidade materna seguido de uma queda que nas

condiccedilotildees experimentais eacute resultado da neutralizaccedilatildeo desses anticorpos pelos antiacutegenos

vacinais e por fim uma nova elevaccedilatildeo dos tiacutetulos

Este resultado concorda com o observado por outros autores Tayade et al

(2006) demonstraram que a resposta vacinal contra o viacuterus da doenccedila de Gumboro de

frangos suplementados com 2 de Arg foi 20 mais eficiente que a resposta induzida

apenas pela vacina A elevada resposta humoral e a proteccedilatildeo observada no grupo de

aves vacinado e com dieta suplementada com Arg segundo estes autores pode ser

atribuiacuteda ao nuacutemero de funccedilotildees imunorregulatoacuterias da Arg sobre o sistema

imunoloacutegico A Arg eacute necessaacuteria para a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas B e tambeacutem estaacute

envolvida na liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da bolsa ou da medula oacutessea (De Jonge et al

108

2002) Ainda segundo Abdukalykova e Ruiz-Feria (2006) niacuteveis adicionais de Arg

podem acelerar a produccedilatildeo de anticorpos em frangos de corte

29

295

3

305

31

315

32

325

33

335

34

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s(7

dia

s)

0

05

1

15

2

25

3

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s (2

8 di

as)

Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

1674

109

Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Niacuteveis de Arginina na dieta materna ()

Idade 0943 1093 1243 1393 1543 CV() Regressatildeo R2

07 dias 317plusmn099 323plusmn011 301plusmn008 324plusmn007 316plusmn015 831 ns -----

14 dias 262plusmn009 257plusmn003 242plusmn011 262plusmn011 257plusmn003 792 ns -----

21 dias 232plusmn010 247plusmn005 211plusmn010 228plusmn011 241plusmn007 941 ns -----

28 dias 241plusmn028 186plusmn014 248plusmn022 231plusmn019 214plusmn024 2378 ns -----

35 dias 275plusmn017 284plusmn015 271plusmn013 286plusmn020 291plusmn011 1361 ns -----

Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades

Niacuteveis de Arginina ()

Idade 1300 1450 1600 1750 1900 CV() Regressatildeo R2

07 dias 331plusmn012 336plusmn010 301plusmn012 329plusmn009 299plusmn009 798 Linear1 012

14 dias 226plusmn008 218plusmn019 219plusmn023 207plusmn014 245plusmn009 1715 ns -----

21 dias 232plusmn007 239plusmn006 236plusmn006 246plusmn012 240plusmn009 829 ns -----

Niacuteveis de Arginina ()

1150 1300 1450 1600 1750 CV() Regressatildeo R2

28 dias 171plusmn035 279plusmn009 298plusmn006 278plusmn019 240plusmn012 1961 Quadraacutetica2 026

35 dias 268plusmn023 299plusmn012 296plusmn018 280plusmn023 313plusmn011 1535 ns -----

110

Conclusatildeo

As dietas suplementadas com Arg mostraram-se necessaacuterias para o oacutetimo

desempenho do sistema imune celular e humoral da progecircnie natildeo bastando somente agrave

suplementaccedilatildeo das matrizes de corte

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ix

LISTA DE TABELAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental 45 Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 48 Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 50 Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico 51 Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 52

Capiacutetulo IV Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg48 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)50 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)51 Tabela 4 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg55 Tabela 5 ndash Meacutedias e estimativas da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg56 Tabela 6 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg60 Tabela 7 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementadas provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg64 Tabela 8 ndash Meacutedias e estimativas de rendimento da progecircnie suplementada com dietas suplementadas contendo niacuteveis de Arg64

x

Tabela 9 ndash Meacutedias de porcentagem de carcaccedila (CARC) porcentagem de peito (PEITO) porcentagem de coxa (COXA) porcentagem de asa (ASA) porcentagem de gordura abdominal (GORDURA) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg65 Tabela 10 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de arginina67 Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg69 Tabela 12 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade72

Capiacutetulo V Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das dietas experimentais das matrizes de frangos de corte no periacuteodo experimental83 Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg85 Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)86 Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (21-42 dias)86 Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de arginina89 Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg90 Tabela 7 ndash Meacutedias do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg aos 7 e 21 dias de idade91 Tabela 8 ndash Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg92 Tabela 10 ndash Meacutedias e erro padratildeo da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg92 Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg94 Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades94

xi

LISTA DE FIGURAS

Paacutegina

Capiacutetulo III Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel33 Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg34 Capiacutetulo IV Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 70 Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 71 Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 72 Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 72 Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 75 Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 77 Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg 81 Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade 82 Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade 83

xii

Capiacutetulo IV Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 106 Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg 108

RESUMO

Foram realizados trecircs experimentos com o objetivo de avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na nutriccedilatildeo de matrizes de corte e a modulaccedilatildeo da resposta imune e do desenvolvimento esqueleacutetico na progecircnie No primeiro experimento avaliou-se o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e qualidade de ovos Para tanto foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se um aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve uma queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arginina respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo O segundo experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo

xiv

suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos O terceiro experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos 7 dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavras-chave desempenho produtivo qualidade de ovos qualidade oacutessea sistema imune

ABSTRACT

Three experiments were conducted to evaluate the effect of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder nutrition and modulation of the immune systems and skeletal development in the progeny In the first experiment the effect of Arg supplementation on heavy breed henrsquos productive performance and egg quality was evaluated ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance In the second experiment the effects of arginine (Arg) supplementation in broiler breeder hens diet on performance carcass yield and bone parameters was evaluated in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units The body weight gain feed intake and feed gain ratio was calculated to evaluate the performance The carcass yield was evaluated by the carcass percentage leg breast and wing yield and abdominal fat The bone quality was assessed by the analysis of the femur and tibia lengths diameters and Seedor index In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that

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just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) In third experiment the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses was evaluated in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by the diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses According to the results it is possible to conclude that supplementation with Arg provided improvements in the eggs weight of broilers and evaluations in the progeny demonstrated that there is a need to supplement the diet with Arg in order to get the best performance index bone quality and humoral and cellular immunity

Key-words bone quality egg quality productive performance immune system

17

I - INTRODUCcedilAtildeO

Vaacuterios fatores afetam o desempenho de frangos de corte como a geneacutetica

nutriccedilatildeo sanidade manejo e ambiecircncia Entretanto fatores estabelecidos antes mesmo da

incubaccedilatildeo e da eclosatildeo como a idade das matrizes e o peso dos ovos satildeo preponderantes

para o desenvolvimento inicial das aves tendo consequecircncia em todo o crescimento

(Pedroso et al 2005)

As exigecircncias nutricionais de uma reprodutora leve ou pesada devem atender agraves

necessidades do embriatildeo em desenvolvimento fora do organismo materno (Campos

2003) O ovo eacute formado basicamente pela casca (10) clara (60) e gema (30) Desse

modo os niacuteveis nutricionais da matriz devem ser dirigidos para formaccedilatildeo desses

componentes porque estes satildeo responsaacuteveis pela nutriccedilatildeo do embriatildeo

O ovo tem aacutegua proteiacutena gordura e cinza na sua composiccedilatildeo quiacutemica A gema

apresenta papel importante no desenvolvimento do embriatildeo visto que este formaraacute o saco

vitelino apoacutes o quarto dia de vida O saco vitelino constitui a uacutenica fonte fornecedora de

energia para o desenvolvimento do embriatildeo Deste satildeo absorvidos todos os nutrientes pelo

embriatildeo como partiacuteculas lipoproteicas e proteicas Estas uacuteltimas podem ser absorvidas

intactas porque a produccedilatildeo de proteinases pelo embriatildeo aumenta de acordo com o seu

desenvolvimento Aleacutem disso parte da absorccedilatildeo de proteiacutenas ocorre na forma de

aminoaacutecidos (Campos 2003) O saco viteliacutenico tambeacutem eacute a uacutenica fonte de

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imunoglobulinas produzidas pelo organismo materno capazes de manter certa imunidade

ao pintinho no periacuteodo inicial de sua vida

Os aminoaacutecidos presentes na gema podem ser suficientes durante o processo de

eclosatildeo apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

processo de crescimento (Ohta et al 2004)

Logo apoacutes a eclosatildeo a maior parte da demanda de energia e de proteiacutena das aves eacute

direcionada para o desenvolvimento do trato digestoacuterio principalmente intestinos (Fisher

da Silva 2001) Este crescimento preferencial ocorre tanto na presenccedila quanto na ausecircncia

do alimento (Laurentiz et al 2001) Quando estes nutrientes natildeo satildeo fornecidos pela

raccedilatildeo os neonatos utilizam o saco vitelino como suplemento energeacutetico e como fonte

proteica para o crescimento intestinal Entretanto segundo Dibner et al (1998) 20 da

proteiacutena residual do saco vitelino satildeo representadas pelas imunoglobulinas maternais e

que a gordura bruta residual eacute constituiacuteda basicamente de trigliceacuterides fosfoliacutepides e

colesterol

Assim a nutriccedilatildeo das matrizes de corte pode enriquecer a gema e produzir pintos

de alta qualidade Entretanto com o passar dos anos natildeo houve muita diferenccedila nos niacuteveis

nutricionais propostos para nutriccedilatildeo das matrizes de corte o que ocorre principalmente em

razatildeo das grandes diferenccedilas existentes entre as linhagens comerciais existentes Segundo

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) para matrizes pesadas existe uma pausa nas pesquisas orientadas

para a determinaccedilatildeo das exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos essenciais

Dentre os aminoaacutecidos utilizados na formulaccedilatildeo de raccedilotildees principalmente as

voltadas para o conceito de proteiacutena ideal a arginina (Arg) pode exercer efeitos positivos

pois este aleacutem de ser constituintes de proteiacutenas ainda estaacute envolvido na siacutentese de creatina

e de poliaminas de prolina como substrato para a siacutentese de colaacutegeno e do oacutexido niacutetrico

(NO) e na secreccedilatildeo do hormocircnio de crescimento (GH) e dos fatores de crescimento

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semelhantes agrave insulina (IGF) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave (Harvey et

al 2001)

Como as aves natildeo apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem

exclusivamente da Arg sinteacutetica principalmente no periacuteodo inicial de produccedilatildeo (Allen amp

Baker 1972) Aleacutem disso em dietas agrave base de milho e de farelo de soja a Arg eacute

considerada o quinto aminoaacutecido limitante para frangos de corte apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Vaacuterios autores tecircm proposto que a nutriccedilatildeo das matrizes afeta o desempenho dos

pintos (Uni amp Ferket 2004) Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem

nos primeiros dias de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com

funccedilatildeo imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade

materna e na resposta imune dos pintos

11 REVISAtildeO DA LITERATURA

111 Matriz e o Sistema imune da Progecircnie

O sistema imune das aves eacute complexo e compreende uma seacuterie de funccedilotildees

celulares e fatores soluacuteveis que trabalham juntos para produzir uma resposta imune

protetora Os oacutergatildeos linfoides primaacuterios das aves satildeo a bolsa cloacal e o timo Os oacutergatildeos

como medula oacutessea baccedilo glacircndula Harderiana placas de Payer e tonsilas cecais satildeo

considerados oacutergatildeos linfoides secundaacuterios

Com base nesses componentes as aves podem apresentar respostas a vaacuterios

antiacutegenos divididas em dois tipos a imunidade passiva e a ativa A imunidade passiva eacute

transferida para a progecircnie pelas reprodutoras via saco viteliacutenico Atraveacutes da imunidade

passiva eacute possiacutevel desenvolver a resposta imune especiacutefica sem que haja um envolvimento

do organismo pela transferecircncia de ceacutelulas ou de anticorpos de outro indiviacuteduo jaacute

20

imunizado A imunidade ativa por sua vez eacute decorrente da exposiccedilatildeo das aves a um

antiacutegeno estranho que pode ser de origem vacinal ou um agente patoacutegeno

Nas aves a imunidade passiva eacute passada da matriz ateacute o pintinho pelo do ovo no

processo de produccedilatildeo de ovo imunoglobulinas (Ig) Y presentes no sangue das matrizes

chega ateacute o oviduto e se deposita na gema do ovo enquanto durante a secreccedilatildeo do

albuacutemen que ocorre na porccedilatildeo magnum do oviduto secreta tambeacutem IgA e IgM Eacute essa

imunidade enviada pela matildee que protege esses pintos nos primeiros dias de vida contra

vaacuterios agentes que estatildeo presentes no campo (Santin 2009) Haacute relaccedilatildeo direta entre os

tiacutetulos de seacutericos de Ig da matildee e a quantidade repassada ao ovo Assim eacute de extrema

importacircncia que o pintinho absorva adequadamente e rapidamente essa gema para que ele

tenha acesso a estas Ig (Santin 2009) Maiorka (2002) demonstrou que jejum de aacutegua e de

alimento por 12 horas apoacutes a eclosatildeo diminui a absorccedilatildeo da gema e afetam o

desenvolvimento da mucosa intestinal de frangos de corte Vargas et al (2009) mostraram

que os tiacutetulos seacutericos de anticorpos contra a vacina de doenccedila de Newcastle (NDV) foram

mais baixos em pintos submetidos a 12 horas de jejum poacutes eclosatildeo quando comparados

agravequeles que consumiram aacutegua e alimento logo apoacutes a eclosatildeo De fato o atraso no

consumo de alimento dos animais pode diminuir a absorccedilatildeo da gema e consequentemente

a passagem da imunidade passiva da matildee para o pintinho Dibner et al(1998) sugerem que

quando o pintinho natildeo recebe rapidamente aacutegua e alimento apoacutes a eclosatildeo acaba utilizando

as Ig e os fosfolipiacutedios da gema como alimento diminuindo assim sua funccedilatildeo na proteccedilatildeo

animal

112 Influecircncia da Arginina no Sistema Imune e na Formaccedilatildeo Oacutessea das Aves

A Arg eacute um aminoaacutecido essencial em aves principalmente na fase inicial Isso

ocorre porque as aves diferentemente dos mamiacuteferos natildeo possuem o ciclo da ureia

funcional necessitando da fonte exoacutegena de suplementaccedilatildeo Evoy et al (1998) em seu

21

trabalho relataram o papel da Arg como essencial na estimulaccedilatildeo do sistema imune do

hospedeiro

As vias metaboacutelicas que envolvem a Arg satildeo complexas e demonstradas

resumidamente a seguir

Adaptado de Duff amp Daly (2002)

Juntamente com a complexidade dessas vias soma-se a variada localizaccedilatildeo das

enzimas envolvidas no meio intracelular como nos tecidos Com exceccedilatildeo dos enteroacutecitos

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em receacutem-nascidos nenhum outro tipo de ceacutelula conteacutem todas as enzimas necessaacuterias para

a siacutentese de Arg (Wu amp Morris 1998)

A Arg eacute ativamente absorvida pelo intestino pelo sistema de transporte soacutedio-

dependente A alta atividade da arginase no enteroacutecito converte cerca de 40 da dieta de

Arg em citrulina a qual eacute liberada na circulaccedilatildeo (Castillo et al 1993) Quando a Arg cai

na corrente sanguiacutenea cerca de 15 eacute eliminada pelo fiacutegado e o restante entra na

circulaccedilatildeo sistecircmica (OrsquoSullivan et al 1998) A Arginina eacute sintetizada a partir da

citrulina principalmente nos rins e eacute entatildeo liberada na circulaccedilatildeo para ser utilizada pelos

demais tecidos

O oacutexido niacutetrico (NO) constitui uma das menores e mais simples moleacuteculas

biossintetizadas (Morris et al 1994) O NO eacute um radical livre gasoso inorgacircnico e

identificado como mensageiro molecular extremamente laacutebil (meia vida bioloacutegica em

torno de segundos) O NO media vaacuterios fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente

do endoteacutelio citotoxicidade mediada por macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria Eacute produzido pelas ceacutelulas endoteliais neurocircnios macroacutefagos e

tecidos entre eles a hipoacutefise que age paracrinamente exercendo efeitos intra e

extracelulares em vaacuterios sistemas fisioloacutegicos (Kutchai 1998)

Palmer et al (1988) demonstraram que a L-Arg eacute o precursor fisioloacutegico do NO

nas ceacutelulas endoteliais Com base nesta informaccedilatildeo vaacuterios grupos de investigadores

suspeitaram que o NO fosse o provaacutevel precursor da siacutentese de NO3- e NO2

- pelos

macroacutefagos Subsequentemente esta hipoacutetese foi comprovada e ficou demonstrado que o

NO eacute o principal mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a

mais importante moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al 1988 e Marletta

et al 1988 citados por Dusse et al 2003)

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Este composto eacute produzido a partir da oxidaccedilatildeo da L-arginina pela accedilatildeo da enzima

oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) uma enzima Ca++-calmodulina-dependente Por este

mecanismo eacute gerado citrulina como produto final (Kiechele amp Malinski 1993)

O surgimento do NO como agente da sinalizaccedilatildeo celular eacute uma importante

descoberta da fisiologia humana e animal nos uacuteltimos anos O NO participa de vaacuterios

fenocircmenos como vasorrelaxamento dependente do endoteacutelio citotoxicidade mediada por

macroacutefagos inibiccedilatildeo da ativaccedilatildeo adesatildeo e agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O NO eacute o principal

mediador citotoacutexico de ceacutelulas imunes efetoras ativadas e constitui a mais importante

moleacutecula reguladora do sistema imune (Hibbs Jr et al1988 e Marletta et al 1988 citados

por Dusse et al 2003)

Existem trecircs formas de NOS sendo a NOS induzida (iNOS) e duas NOS

constitutivas (cNOS) O NO eacute sintetizado pela ativaccedilatildeo da cNOS basal (em ceacutelulas

endoteliais vasculares e neurocircnios) segundos a minutos apoacutes o aumento na concentraccedilatildeo

de caacutelcio em resposta agrave ativaccedilatildeo de receptores da superfiacutecie celular e mecanismos de

transduccedilatildeo de sinal (Adams 1996)

Ao contraacuterio a iNOS natildeo depende de caacutelcio para ativaccedilatildeo mas a siacutentese de

mRNA da iNOS eacute necessaacuteria para sua atividade A NOS induzida natildeo eacute detectaacutevel em

condiccedilotildees basais As LPS ou endotoxinas bacterianas junto com citocinas como TNFα

IL-1β ou IF-γ induzem a siacutentese de iNOS de duas a quatro horas apoacutes a exposiccedilatildeo ao

agente A iNOS requer siacutentese proteica para sua expressatildeo e sua atividade persiste por

mais de 24 horas e sintetiza NO em concentraccedilotildees nanomolares 1000 vezes maior que

cNOS (Davies et al 1995)

A expressatildeo da iNOS eacute o resultado da resposta inflamatoacuteria localizada ou difusa

resultante da infecccedilatildeo ou dano tecidual Segundo Salvemini et al (1996) o NO eacute potente

vasodilatador e seu envolvimento na resposta inflamatoacuteria pode ter relaccedilatildeo com sua

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habilidade em aumentar a permeabilidade vascular e o edema atraveacutes de mudanccedilas no

fluxo sanguiacuteneo local e do aumento na produccedilatildeo de prostaglandinas proinflamatoacuterias

A expressatildeo de iNOS em endotoxemia eacute citoprotetoacuteria inibindo microtrombose

pela prevenccedilatildeo de adesatildeo plaquetaacuteria e danos mediados por radicais Por outro lado a

citotoxidade do NO resulta da sua accedilatildeo direta ou da sua reaccedilatildeo com outros compostos

liberados durante o processo inflamatoacuterio A base bioquiacutemica para a accedilatildeo direta do NO

consiste na sua reaccedilatildeo com metais (especialmente o ferro) presentes nas enzimas do seu

alvo (Moncada 1991 James 1995) Desta forma satildeo inativadas enzimas cruciais para o

ciclo de Krebs para a cadeia de transporte de eleacutetrons para a siacutentese de DNA e para o

mecanismo de proliferaccedilatildeo celular Em processos infecciosos ceacutelulas ativadas como

macroacutefagos neutroacutefilos e ceacutelulas endoteliais secretam simultaneamente NO e

intermediaacuterios reativos do oxigecircnio a accedilatildeo citotoacutexica indireta do NO consiste

principalmente na sua reaccedilatildeo com esses intermediaacuterios do oxigecircnio

Durante a resposta imune mediada por ceacutelulas a maioria das ceacutelulas adquire a

capacidade de expressar a forma de NO induzida (Nathan amp Xie 1994) A accedilatildeo do NO

depende da ceacutelula T reconhecer um antiacutegeno especiacutefico embora sua accedilatildeo na resposta

imune mediada por ceacutelulas natildeo seja especiacutefica (Schmidt amp Walter 2004)

Costa et al (2003) corroboram com o fato de que a fagocitose por si soacute natildeo induz a

siacutentese de NO A fagocitose de partiacuteculas inertes por macroacutefagos peritoniais em cultura

ou por macroacutefagos murinos estimulados por citocinas natildeo satildeo estiacutemulos suficientes para

a induccedilatildeo expressiva de iONS No entanto a fagocitose de agentes bioloacutegicos nas

mesmas condiccedilotildees induz altos niacuteveis de NO sugerindo que a produccedilatildeo de NO seja

dependente de estiacutemulo imunoloacutegico e que faccedila parte dos mecanismos de defesa do

organismo

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Todas estas investigaccedilotildees estabeleceram de forma definitiva uma associaccedilatildeo entre

arginina oacutexido niacutetrico e resposta imune Por isso nas uacuteltimas duas deacutecadas a arginina tem

sido o foco de estudos como regulador de muitos processos imunoloacutegicos e fisioloacutegicos

(Tayade et al 2006)

Trabalhos desenvolvidos com mamiacuteferos demonstraram que as respostas imunes

podem ser influenciadas pela arginina dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al

1998 Lewis amp Langkamp-Henken 2000) Em experimentos desenvolvidos com animais

jovens os efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina foram demonstrados

como o aumento do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos

tiacutemicos Os efeitos imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais

estressados ou imunossupremidos

Os efeitos beneacuteficos da arginina natildeo se limitam agrave imunidade celular Segundo

LeBien (2002) em mamiacuteferos geneticamente modificados a arginina eacute utilizada para

diferenciaccedilatildeo de proacute-linfoacutecitos B para preacute-linfoacutecitos B na medula oacutessea e estaacute envolvida na

liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da medula

Por outro lado Deng et al (2005) relatam que relevantes pesquisas em espeacutecies

aviaacuterias satildeo esparsas Estas pesquisas apontaram o aumento da produccedilatildeo de oacutexido niacutetrico

por macroacutefagos de aves suplementadas com arginina (Sung et al 1991) aumento do peso

dos oacutergatildeos linfoides (Kwak et al 1999) melhora da relaccedilatildeo heteroacutefilolinfoacutecito em pintos

suplementados e desafiados com o agente viral da bronquite infecciosa e maior percentual

de ceacutelulas CD8+ (Lee et al 2002)

Entretanto para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de arginina

foram observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

estabelecidos Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de arginina

plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular

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Outros autores obtiveram respostas positivas com a suplementaccedilatildeo de arginina na

reduccedilatildeo na mortalidade de frangos desafiados com Eimeria acervulina Eimeria tenella e

Eimeria maacutexima alterando a relaccedilatildeo argininalisina de 09 para 13 (Kidd et al 2002) e na

siacutendrome da hipertensatildeo pulmonar (Wideman et al 1995) Tambeacutem Corzo et al (2003)

observaram reduccedilatildeo linear de arranhotildees infectados em carcaccedilas de frangos alimentados

com niacuteveis crescentes de arginina (08 a 125 da dieta) Embora esses paracircmetros sejam

indicativos indiretos da imunidade mas apontam a importacircncia da arginina na melhora da

imunidade e no restabelecimento do status sanitaacuterio dos planteacuteis aviacutecolas

Tayade et al (2006) demonstraram recentemente que frangos vacinados com uma

vacina intermediaacuteria atenuada contra a doenccedila de Gumboro e suplementados com 2 de

arginina mostraram 100 de proteccedilatildeo apoacutes desafio com o viacuterus da doenccedila de Gumboro

comparado com 80 de proteccedilatildeo induzido apenas pela vacina sem adiccedilatildeo de arginina

suplementar na dieta

Aleacutem disso Deng et al (2005) verificaram aumento no niacutevel de anticorpos contra

eritroacutecitos de carneiro em frangas de postura somente na oitova semana de idade quando

estas aves foram suplementadas com niacuteveis de arginina em 150 acima do recomendado

pelo NRC do primeiro dia ateacute a quarta semana de vida Os autores concluiacuteram que a

suplementaccedilatildeo com arginina por um periacuteodo curto de tempo tem pouco efeito sobre a

imunidade e que a imunocompetecircncia pode ser permanentemente moldada pelo status

nutricional nos estaacutegios mais precoces do desenvolvimento

Para a melhora da resposta imune deve-se garantir que as matrizes desenvolvam

tiacutetulos elevados de anticorpos e assim buscar atingir o controle contra surtos de doenccedilas

via imunidade materna como meio de prevenccedilatildeo na progecircnie Kidd et al (1993)

observaram que a diferenccedila no niacutevel de anticorpos contra eritroacutecitos de carneiro em

27

matrizes pesadas recebendo dietas compostas por gratildeos de vaacuterias origens foi detectada na

progecircnie recebendo a mesma dieta

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo dos

niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes Segundo Kidd (2004) trabalhos desenvolvidos a

cerca das exigecircncias nutricionais das matrizes estatildeo focados apenas na questatildeo produtiva

Brake (1997) mostrou que a suplementaccedilatildeo de dietas para matrizes com vitaminas E e C

promoveu melhoria na transferecircncia de imunidade materna e na resposta imune dos pintos

pela proteccedilatildeo aos anticorpos no ovo durante a incubaccedilatildeo

Segundo Gore amp Qureshi (1997) um dos mecanismos pelo qual a vitamina E atua

nesta fase de crescimento embrionaacuterio pode estar relacionado a uma maior produccedilatildeo de

oacutexido niacutetrico nitritos e nitratos pelo fato de que a Vitamina E pode aumentar a afinidade

dos receptores de membrana dos macroacutefagos para a ativaccedilatildeo dos estiacutemulos tais como os

lipopolissacariacutedeos o que resulta em maior atividade da oacutexido niacutetrico sintetase

Na literatura consultada natildeo existem relatos da suplementaccedilatildeo das dietas das

matrizes com arginina e o efeito na resposta imune da progecircnie

A produccedilatildeo de NO pelos macroacutefagos das aves eacute arginina dependente de forma

similar aos macroacutefagos de mamiacuteferos (Dietert amp Golemboski 1998) Entretanto ao

contraacuterio dos mamiacuteferos as aves natildeo podem sintetizar arginina As aves por natildeo

apresentarem o ciclo da ureia funcional dependem exclusivamente da arginina dieteacutetica

(Allen amp Baker 1972) O quadro eacute ainda mais grave nas aves uma vez que dependem de

arginina suplementar tambeacutem para a para a formaccedilatildeo de ornitina que em mamiacuteferos eacute

obtida atraveacutes do aacutecido glutacircmico A siacutentese de ornitina eacute fundamental pois estaacute envolvida

na obtenccedilatildeo de prolina e eacute utilizada tambeacutem na formaccedilatildeo de poliaminas (espermidina

espermina e putrescina) que satildeo moleacuteculas associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

28

Desta forma a arginina eacute um aminoaacutecido essencial para as aves na fase inicial A

dieta eacute um fator particularmente sensiacutevel na disponibilidade de arginina e

consequentemente de NO considerando ainda que a arginina eacute um aminoaacutecido dos mais

limitantes em dietas agrave base milho e farelo de soja (Edmonds et al 1985)

A suplementaccedilatildeo adicional de Arg nas dietas de aves imunocomprometidas

poderia aumentar ainda mais a atividade da arginase e com isso menos Arg seria

disponiacutevel para a siacutentese de NO (Kepka-Lenhart et al 2000) Alternativamente Bansal et

al (2004) sugerem como estrateacutegia dieteacutetica para restaurar as concentraccedilotildees plasmaacuteticas

de Arg a suplementaccedilatildeo de citrulina principalmente em condiccedilotildees de imunodeficiecircncia

associadas com elevada atividade plasmaacutetica da arginase Nas espeacutecies uricoteacutelicas o ciclo

Arg-citrulina eacute funcional A citrulina eacute um aminoaacutecido que natildeo eacute encontrado em nenhuma

proteiacutena corporal aleacutem da inabilidade das aves na siacutentese endoacutegena de citrulina a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica se constitui na uacutenica fonte de Arg para os macroacutefagos via ciclo

NO-citrulina (Wiesinger 2001)

A suplementaccedilatildeo de aminoaacutecidos sinteacuteticos tem propiciado facilidades no ajuste

das foacutermulas de raccedilatildeo possibilitando a obtenccedilatildeo dos niacuteveis exigidos de aminoaacutecidos

essenciais A utilizaccedilatildeo de niacuteveis elevados de lisina proporciona um maior crescimento

muscular principalmente o incremento no rendimento de peito e coxas dos frangos de

corte Entretanto esse aumento da taxa de crescimento pode alterar o equiliacutebrio

metaboacutelico ideal entre os aminoaacutecidos especialmente a relaccedilatildeo argininalisina

O antagonismo entre arginina e lisina envolve a diminuiccedilatildeo da siacutentese de

creatinina compromete a siacutentese de prolina ornitina promove o aumento da atividade da

arginase renal e da excreccedilatildeo de ureia aleacutem de que quando os niacuteveis de lisina satildeo

excessivamente altos tambeacutem ocorre a excreccedilatildeo renal de arginina (Austic amp Scott 1975)

29

Os sinais claacutessicos da deficiecircncia de Arg satildeo fraqueza e paralisia das pernas penas

deformadas e ericcediladas sobre o dorso e asa das aves reduccedilatildeo do ganho de peso lesotildees

histoloacutegicas na medula oacutessea e desenvolvimento oacutesseo afetado (Jungherr et al 1958

Newbern et al 1960) A arginina aleacutem de servir como substrato para a siacutentese de NO

estaacute envolvida na secreccedilatildeo do GH

Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram um aumento na

concentraccedilatildeo plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez

secretado pela hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio

receptor e indiretamente via IGF-I e II (insulin-like growth factor ou somatomedina C)

sobre os tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos do GH ocorre em niacutevel do

disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no

crescimento dos ossos longos (Isaksson et al 1987)

Os efeitos dos aminoaacutecidos essenciais no tecido oacutesseo em crescimento satildeo

provavelmente mediados pelo IGF-I (Baylink et al1993) De fato Chevalley et al (1998)

demonstraram que arginina e lisina aumentaram a produccedilatildeo in vitro de IGF-I por

osteoblastos mantidos em cultura Aleacutem disso Conconi et al (2001) trabalhando com

cultura de osteoblastos enriquecida com soluccedilatildeo de aminoaacutecidos essenciais (Arg Lis Met

Thr e Trp) encontraram niacuteveis significativamente aumentados de fosfatase alcalina e

siacutentese de colaacutegeno Estes resultados segundo os autores sugerem que os aminoaacutecidos

podem atuar diretamente na formaccedilatildeo da matriz oacutessea e podem tambeacutem modular o

crescimento e a diferenciaccedilatildeo de osteoblastos

Por outro lado eacute conhecido que a arginina eacute precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo

pelo qual ela poderia exercer os seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo O NO pode

participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento (Hukkanem et

30

al 1999) Estes autores demonstraram a expressatildeo do mRNA da cNOS basal (oacutexido

niacutetrico sintetase endotelial) em condroacutecitos hipertroacuteficos de placas de crescimento de ratos

neonatos

Na placa de crescimento o NO poderia facilitar a vascularizaccedilatildeo e a formaccedilatildeo

oacutessea (Rath et al 2000) a exemplo de sua accedilatildeo na cartilagem articular em que induz

respostas bioloacutegicas que levam a degradaccedilatildeo irreversiacutevel (Pelletier et al1998) Segundo

Amin amp Abramson (1998) nas osteoartrites o NO induz a apoptose dos condroacutecitos

Teixeira et al (2005) comprovaram que o NO tem duas funccedilotildees distintas nos

condroacutecitos da placa de crescimento Uma vez iniciado o processo de maturaccedilatildeo o NO

estimula a hipertrofia por meio do aumento da expressatildeo da fosfatase alcalina e colaacutegeno

tipo X sendo conhecido que a expressatildeo de ambas proteiacutenas eacute um requerimento para a

completa hipertrofia dos condroacutecitos Aleacutem disso o NO estaacute associado ao estaacutegio mais

tardio do processo de maturaccedilatildeo Condroacutecitos totalmente diferenciados tratados com

ativadores da apoptose sofrem morte celular a inibiccedilatildeo da siacutentese de NO bloqueia a

apoptose enquanto a exposiccedilatildeo aos doadores de NO estimula a apoptose Estes autores

concluiacuteram que os sistemas NOS ndash NO atuam como promotores da maturaccedilatildeo dos

condroacutecitos

Por outro lado Vanacutet amp Ralston (2001) advertem que o efeito do NO na atividade

dos osteoblastos pode ser bifaacutesico Estudos in vitro tecircm indicado que pequenas

quantidades de NO que satildeo produzidas constitutivamente pelos osteoblastos podem agir

como um estimulador autoacutecrino do crescimento oacutesseo Entretanto altas concentraccedilotildees de

NO tais como aquelas observadas apoacutes estimulaccedilatildeo das citocinas inflamatoacuterias em que a

iNOS eacute a isoforma envolvida tecircm efeito inibitoacuterio no crescimento e diferenciaccedilatildeo

osteoblaacutestica

31

O crescimento e a remodelaccedilatildeo dos tecidos satildeo regulados por complexas interaccedilotildees

entre potencial geneacutetico fatores de crescimento influecircncias ambientais e nutriccedilatildeo

(Gonzales amp Sartori 2002) A resposta imune e a inflamaccedilatildeo podem modificar as

necessidades de alguns nutrientes

As alteraccedilotildees metaboacutelicas decorrentes podem interromper os eventos envolvidos

no processo de condrogecircnese e osteogecircnese e desencadear o processo de formaccedilatildeo das

lesotildees no tecido oacutesseo que levam a dificuldade locomotora deformaccedilatildeo oacutessea predispotildeem

agraves infecccedilotildees e agraves desordens esqueleacuteticas tais como a discondroplasia tibial (Thorp 1994)

Aleacutem das perdas econocircmicas eacute clara a percepccedilatildeo que as disfunccedilotildees do aparelho locomotor

comprometem o bem-estar das aves

Aleacutem de interagirem com o sistema imune os processos que modulam o

crescimento oacutesseo satildeo complexos e muacuteltiplos e mais estudos satildeo necessaacuterios para elucidar

estes mecanismos

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II - OBJETIVOS GERAIS

Essa pesquisa foi desenvolvida com a finalidade de estudar o efeito da

suplementaccedilatildeo de Arg na dieta de fecircmeas reprodutoras de frangos de corte na qualidade

dos ovos e nas caracteriacutesticas produtivas na qualidade oacutessea no desenvolvimento dos

oacutergatildeos linfoide e do sistema imune da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo

niacuteveis crescentes de Arg

21 Objetivos Especiacuteficos Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis

crescentes de Arg no desempenho produtivo e na qualidade dos ovos

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg no desempenho no

rendimento de carcaccedila e na qualidade oacutessea da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas

contendo niacuteveis crescentes de Arg

Avaliar o efeito da nutriccedilatildeo das matrizes de corte com Arg nas respostas imune e

celular da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

III - Desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte suplementadas com niacuteveis crescentes de arginina na raccedilatildeo

Resumo ndash Este estudo avaliou o efeito da suplementaccedilatildeo de arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho produtivo e reprodutivo e qualidade de ovos Foram utilizados 416 reprodutores da linhagem ldquoRossrdquo sendo 360 fecircmeas e 30 machos O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 12 fecircmeas e 1 macho por unidade experimental Para determinaccedilatildeo do desempenho produtivo e reprodutivo e da qualidade de ovos foram avaliadas a porcentagem de postura de albuacutemen e de gema o peso meacutedio a gravidade especiacutefica a porcentagem e espessura de casca o rendimento de incubaccedilatildeo e o embriodiagnoacutestico Os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados afetaram de forma quadraacutetica (Plt005) o percentual de postura (Plt005) em que a maior taxa de postura foi obtida com a suplementaccedilatildeo de 1262 de Arg digestiacutevel Verificou-se aumento linear crescente (Plt005) no peso dos ovos das matrizes poreacutem agrave medida que os niacuteveis de Arg digestiacutevel na dieta foram aumentando houve queda linear (Plt005) na gravidade especiacutefica dos ovos Para o rendimento da incubaccedilatildeo verificou-se que os niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis avaliadas A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arginina proporcionou maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas podendo esta ser utilizada sem prejuiacutezo

Palavras-chave embriodiagnoacutestico incubaccedilatildeo qualidade de ovos

III - Effect of arginine supplementation on productive performance and egg quality of broiler breeder hens

Abstract - This study investigated the effect of arginine (Arg) supplementation on broiler breeder productive performance and egg quality ldquoRoss linerdquo broiler breeders were used in a total number of 416 (360 females and 30 males) The complete randomized design used five levels of digestible Arg (0943 1093 1243 1393 1543) and was performed in 8 experimental replicate units each with 12 females and 1 male Laying albumen and yolk percentage egg weight specific gravity shell percentage and thickness hatching performance and embryo diagnosis were evaluated to assess productive performance and egg quality The digestible Arg levels of 1262 provided the higher laying percentage and affected this parameter quadratically (P lt005) Despite of that with the increase of the Arg supplementation level a linear increase in egg weights and a linear decrease in the specific gravity were observed The levels of digestible Arg did not affect hatching performance Supplementation of broiler diets with increasing levels of Arg provided an increase in the egg production and eggs with higher weights in the levels of 1262 and 1543 respectively The increased levels of Arg did not influence the reproduction variables studied suggesting that it may be used without any harmful risk

Key words embryo diagnosis hatching egg quality

42

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo e alimentaccedilatildeo animal estatildeo direcionadas para garantir oacutetimo aporte de

nutrientes para os animais de acordo com sua finalidade comercial e fase fisioloacutegica

Na produccedilatildeo de frangos de corte a taxa de crescimento acelerada imposta pela seleccedilatildeo

geneacutetica os vaacuterios fatores estressantes (ambientais e de manejo) e de desafio

imunoloacutegico (vacinaccedilatildeo e infecccedilatildeo) nas condiccedilotildees de produccedilatildeo comercial fazem com

que as exigecircncias das matrizes de corte para alguns nutrientes sejam maiores para que a

progecircnie possa expressar seu potencial geneacutetico

O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo dependem completamente dos

nutrientes contidos no ovo e estes satildeo originados da dieta e do metabolismo das

matrizes O ovo eacute um sistema fechado assim todos os nutrientes necessaacuterios para o

desenvolvimento do embriatildeo devem ser fornecidos pela matriz quando o ovo eacute formado

(Oviedo-Roacutendon amp Murakami 1998)

Aleacutem disso existe correlaccedilatildeo positiva entre peso do ovo e peso do pinto ao

nascer e deste com o peso do frango ao abate (Lara et al 2005) De fato Whiting amp

Pesti (1984) verificaram que para cada grama a mais no peso do ovo correspondia a

107 e 60g adicionais para o peso final de machos e fecircmeas respectivamente

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas No ovo os aminoaacutecidos

presentes na gema satildeo suficientes durante o processo de eclosatildeo poreacutem apoacutes o

nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o processo de

crescimento (Otha et al 2004) Nos uacuteltimos anos o impacto da nutriccedilatildeo das matrizes

no estado nutricional e desempenho da progecircnie bem como a melhora do estado

imunoloacutegico tem recebido especial atenccedilatildeo (Pappas et al 2006)

43

A nutriccedilatildeo das matrizes com dietas com arginina seria uma alternativa para o

enriquecimento da gema dos ovos com esse aminoaacutecido A Arg eacute um aminoaacutecido

baacutesico que pode influenciar a reposta imune e a resistecircncia agraves doenccedilas A Arg ainda eacute

conhecida pela funccedilatildeo estimuladora sobre o processo de ovulaccedilatildeo atraveacutes do aumento

da liberaccedilatildeo de hormocircnio luteinizante (LH) (Basiouni et al 2006) e como parte do

hormocircnio arginina vasotocina envolvido com a contraccedilatildeo uterina e a oviposiccedilatildeo

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias

de vida portanto a exigecircncia da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

A imunidade e a resistecircncia agraves doenccedilas da progecircnie satildeo afetadas pela alteraccedilatildeo

dos niacuteveis nutricionais da dieta das matrizes De acordo com Kidd (2004) os trabalhos

desenvolvidos em relaccedilatildeo agraves exigecircncias nutricionais das matrizes para melhorar o

sistema imune da progecircnie satildeo poucos quando comparados a questatildeo produtiva das

aves

Com isso objetivou-se com o trabalho avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de

arginina sobre o desempenho produtivo e reprodutivo de aves reprodutoras de corte

Material e meacutetodos

O experimento foi conduzido no aviaacuterio experimental da Universidade Federal

do Paranaacute ndash Campus Palotina constituiacutedo de 32 boxes com dimensotildees de 25 x 15 m

com cama de maravalha (plusmn10 cm) sobre o piso Foram utilizados boxes telados e

providos de um bebedouro pendular e de dois comedouros um deles com grade de

restriccedilatildeo aos machos e outro instalado mais alto natildeo permitindo somente o acesso das

fecircmeas Em cada boxe experimental foram utilizados ninhos convencionais de um

andar com quatro bocas de madeira com dimensotildees de 030 m x 030 m x 030 m a

030 m acima do niacutevel do piso sendo uma boca para cada quatro fecircmeas

Foram utilizados 390 reprodutores de frangos de corte sendo 360 fecircmeas e 30

machos da linhagem Ross As aves foram selecionadas na 18ordf semana de idade a partir

de um plantel de reprodutores dentro da faixa de peso de 1850 a 1950 g para as

fecircmeas e de 2450 a 2550 g para os machos O delineamento experimental utilizado foi

o inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de Arg (0943 1093 1243 1393 e

1543 de Arg digestiacutevel) seis repeticcedilotildees e 12 fecircmeas e um macho por unidade

44

experimental O acasalamento foi realizado na 18ordf semana de idade das aves na

proporccedilatildeo de um macho para cada 12 fecircmeas

O periacuteodo experimental iniciou na 25ordf semana quando o plantel alcanccedilou 5 de

produccedilatildeo e finalizou na 56ordf semana de idade das aves O programa de iluminaccedilatildeo

iniciou na 19ordf semana de idade com fornecimento inicial de 14 horas de luz diaacuteria e

aplicados aumentos semanais de 30 minutos de luz ateacute o fornecimento de 17 horas de

luz diaacuteria na 25ordf semana de idade das aves

O fornecimento de raccedilatildeo foi limitado e controlado diariamente enquanto o de

aacutegua foi ad libitum As exigecircncias nutricionais utilizadas para formulaccedilatildeo das dietas das

fecircmeas e dos machos foram baseadas nas recomendaccedilotildees contidas no manual da

linhagem

A partir da 23ordf semana de idade as fecircmeas passaram a receber as dietas

experimentais constituiacutedas da dieta basal suplementada com cinco niacuteveis de L ndash

Arginina variando de 0 a 600 mgkg na dieta basal em substituiccedilatildeo ao caulin que

corresponderam aos niacuteveis de 0943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg

digestiacutevel (Tabela 1) Os machos receberam uma uacutenica dieta durante todo o periacuteodo

experimental O periacuteodo experimental teve iniacutecio na 25ordf semana Para determinaccedilatildeo da

produccedilatildeo de ovos os mesmos foram coletados diariamente e a produccedilatildeo diaacuteria anotada

em planilhas por repeticcedilatildeo Semanalmente foi obtida a produccedilatildeo total de ovos e a

porcentagem de postura de cada unidade experimental Na 30ordf 34ordf e 38ordf semana de

idade foram coletados todos os ovos produzidos em um dia para avaliaccedilatildeo da qualidade

(peso meacutedio gravidade especiacutefica porcentagem de albuacutemen e gema porcentagem e

espessura da casca)

A quantidade de raccedilatildeo oferecida para as fecircmeas foi calculada de acordo com a

produccedilatildeo de ovos e do peso corporal Para os machos forneceu-se raccedilatildeo em funccedilatildeo do

peso corporal (conforme manual da linhagem) O peso foi controlado semanalmente ateacute

a 35ordf semana e quinzenalmente a partir da 36ordf semana de idade das aves ateacute o final do

experimento

A avaliaccedilatildeo do rendimento de incubaccedilatildeo foi realizada na 40ordf semana de idade

das aves Foram incubados 80 ovos de cada tratamento totalizando 400 ovos Os ovos

foram pesados e incubados em cada idade avaliada de acordo com o tratamento e

repeticcedilatildeo e avaliadas as seguintes caracteriacutesticas peso meacutedio do ovo incubado peso

meacutedio dos pintos ao nascer percentual do peso da progecircnie ao nascer em relaccedilatildeo ao

peso do ovo e taxa de eclosatildeo Apoacutes a eclosatildeo foi realizado o embriodiagnoacutestico dos

45

ovos que natildeo eclodiram os quais foram classificados em mortalidade por fase (inicial

intermediaacuteria e final) ovos contaminados bicados vivos e bicados mortos

Tabela 1 - Composiccedilatildeo percentual e calculada da dieta experimental basal das matrizes de corte no periacuteodo experimental

Ingredientes () Raccedilatildeo postura I Milho 6072 Farelo de Trigo 420 Oacuteleo de Soja 200 Farelo de Soja 2260 Sal Comum 032 Caulim 050 Calcaacutereo 38 647 Fosfato Bicaacutelcico 131 Bicarbonato de Soacutedio 010 DL-Metionina 98 014 Colina 60 016 Milbond 010 Mycofix 015 Carbonato Potaacutessio 99 021 Premix vit e mineral1 050 Hy D2 005 Eur Bactiguard L 020 Valores Calculados Proteiacutena 1551 EM Kcalkg 2815 Gordura 477 AcLinoleico 248 Caacutelcio 295 Foacutesforo disponiacutevel 044 Lisina dig 071 Met + cistina dig 060 Treonina dig 051 Arginina dig 094 Soacutedio 019 Cloro 026 Potaacutessio 080 Mongin Meq100g 21388

1 Conteuacutedo por kg de premix Vit A 8000000 UI Vit D3 2200000 UI Vit E 6200 mg Vit K 3 2000 mg Vit B 1 2000 mg Vit B2 3000 mg Vit B6 6000 mg Vit B12 10000 mcg Pantotenato de caacutelcio 6000 mg Niacina 25000 mg Aacutec foacutelico 400 mg Se 100 mg Mn 65000 mg Fe40000 mg Cu 10000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg Zn 50000 mg I 1000 mg 2 Rovimix Hy D ndash DSM Nutritional Products

Para gravidade especiacutefica foi utilizado o meacutetodo da imersatildeo dos ovos em

soluccedilatildeo salina Foram preparadas seis soluccedilotildees (aacutegua e sal comum) com densidades que

variaram de 1070 a 1090 com variaccedilatildeo de 0004 para cada soluccedilatildeo As gravidades

foram aferidas com utilizaccedilatildeo de densiacutemetro de Petroacuteleo

46

O peso meacutedio do albuacutemen de cada repeticcedilatildeo foi obtido pela diferenccedila entre o

peso meacutedio do ovo e o peso meacutedio da gema somados ao peso meacutedio da casca de cada

repeticcedilatildeo Apoacutes a pesagem das cascas a espessura das mesmas foi medida com auxiacutelio

de um microcircmetro digital (Mitutoyoreg) em quatro pontos na regiatildeo central de cada casca

Para a medida de peso da casca os ovos foram quebrados e as cascas lavadas e secas agrave

temperatura ambiente por 48 horas em seguida foram pesadas em balanccedila analiacutetica e os

pesos anotados

Anaacutelise Estatiacutestica

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados de acordo com o seguinte modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243 4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os dados de embriodiagnoacutestico natildeo apresentaram distribuiccedilatildeo normal e foram

analisados pela anaacutelise Bayesiana assumindo que a porcentagem observada ri a cada

niacutevel de concentraccedilatildeo de Arg xi segue distribuiccedilatildeo Binomial com paracircmetros ni

(tamanho de amostra) e pi (taxa de eclosatildeo) pi = en1+en com funccedilatildeo de ligaccedilatildeo logit

ii

i

plog it(p ) log1 p⎛ ⎞

equiv = μ⎜ ⎟minus⎝ ⎠ nas formas linear e quadraacutetica dadas respectivamente por

n=α+ β1xi e n = α + β1xi + β2x2i Para a modelagem foram considerados um conhecimento

vago a priori sobre os paracircmetros de regressatildeo isto eacute com distribuiccedilotildees natildeo

informativas 3~ (010 )Nα e 3~ (010 )k Nβ k=12

A obtenccedilatildeo das distribuiccedilotildees marginais a posteriori para os paracircmetros foi por

meio do pacote BRugs do programa R (R Development Core Team 2007)

Para cada paracircmetro foram gerados 510000 valores em um processo MCMC

(Monte Carlo Markov Chain) considerando um periacuteodo de descarte amostral de 10000

47

valores iniciais A amostra final tomada com saltos de tamanho 20 conteacutem 25000

valores gerados A convergecircncia das cadeias foi verificada por meio do pacote CODA

(Best et al 1995) do programa R pelos criteacuterios de Geweke (1992) e de Heidelberger amp

Welch (1983)

Resultados e Discussatildeo

Os resultados de produccedilatildeo e de qualidade dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg estatildeo apresentados na Tabela 2 Os niacuteveis de

Arg digestiacutevel utilizados nas dietas das matrizes de corte influenciaram de forma

quadraacutetica (Plt005) a porcentagem de postura em que o niacutevel de 1262 de Arg

proporcionou a maior porcentagem de postura para as matrizes de corte (Figura 1)

Outros autores tambeacutem encontraram resultados semelhantes em relaccedilatildeo ao

aumento da taxa de postura em funccedilatildeo da suplementaccedilatildeo de Arg Segundo Najib amp

Basiouni (2004) a produccedilatildeo de ovos de matrizes elevou de 52 para 6786 quando

utilizaram niacuteveis de Arg e Lys na dieta de 15 e 12 respectivamente Adicionalmente

Basiouni et al (2006) observaram aumento no peso de foliacuteculos F1 em poedeiras que

receberam dietas com 205 Arg comparado com dietas que continham 154 de Arg

Esse efeito sugere que o aumento na produccedilatildeo de ovos possa ser atribuiacutedo do efeito

estimulatoacuterio especiacutefico da Arg na secreccedilatildeo de LH (Hormocircnio Luteinizante) o qual tem

accedilatildeo direta sobre o ovaacuterio e seus foliacuteculos (Basiouni 2009)

O comportamento observado na curva de produccedilatildeo de ovos demonstra aumento

da produccedilatildeo ateacute o niacutevel de 1262 de Arg e posterior queda ateacute o niacutevel de 1543 o

que provavelmente pode estar associado ao desequiliacutebrio aminoaciacutedico das dietas nos

niacuteveis extremos de Arg na raccedilatildeo Os altos niacuteveis de Arg utilizados podem ter afetado a

produccedilatildeo de ovos principalmente pelo antagonismo existente entre Arg e Lisina (Lys)

Baixas relaccedilotildees ArgLys em dietas de matrizes reduzem o consumo de raccedilatildeo e

deprimem a produccedilatildeo de ovos (Basiouni et al 2006) Altos niacuteveis de Lys associados a

baixos niacuteveis de Arg satildeo deleteacuterios agraves aves pois niacuteveis elevados de Lys promovem

expressiva elevaccedilatildeo da atividade da arginase renal e consequentemente induz agrave

degradaccedilatildeo da Arg (Austic amp Scott 1975) causando sintomas de deficiecircncia de Arg em

virtude das aves natildeo possuiacuterem o ciclo da ureia funcional (Drsquo Mello 2003) Esse

antagonismo ainda leva agrave diminuiccedilatildeo da atividade da glicina-amidinotransferase no

fiacutegado enzima que utiliza Arg e glicina como substratos juntamente com a metionina na

siacutentese da creatina muscular (Jones et al 1967 Andriguetto et al 1999)

48

Tabela 2 ndash Meacutedias e erro padratildeo das variaacuteveis de produccedilatildeo e qualidade de ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg

()

Postura

()

Peso

Ovo

(g)

Gema

()

Clara

()

Casca

()

Casca

(mm)

Gravidade

Especiacutefica

(gml)

0943 7741plusmn460 6046plusmn048 2998plusmn035 5955plusmn045 876plusmn015 0577plusmn0004 1082plusmn0001

1093 8101plusmn544 6081plusmn052 2972plusmn042 5974plusmn040 902plusmn014 0584plusmn0005 1082plusmn0001

1243 8240plusmn370 6086plusmn051 2971plusmn043 6035plusmn031 875plusmn011 0569plusmn0004 1081plusmn0001

1393 8158plusmn368 6133plusmn057 2986plusmn041 5984plusmn043 880plusmn009 0571plusmn0003 1080plusmn0001

1543 7855plusmn600 6167plusmn046 2964plusmn030 6015plusmn038 876plusmn010 0573plusmn0004 1081plusmn0001

CV() 664 183 195 116 351 198 0133

Anaacutelise Variacircncia

Arg Quadratico1 Linear2 ns ns ns ns Linear3

R2 043 096 ----- ----- ----- ----- 066 1 Y= 421330+01239X-00004908X2 2 Y = 585813+000196527X 3 Y = 108413-000000249943X ns ndash natildeo significativo

77

78

79

80

81

82

83

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Pro

duccedilatilde

o de

ovo

s (

)

Figura 1 - Porcentagem de postura de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel

Ao avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arg no peso dos ovos das matrizes de

corte verificou-se aumento linear (Plt005) no peso dos ovos com o aumento de Arg

digestiacutevel nas raccedilotildees por outro lado houve queda linear (Plt005) na gravidade

especiacutefica dos ovos dessas matrizes (Figura 1)

Basiouni et al (2006) encontraram efeito dos niacuteveis de Arg e de Lys sobre na

gravidade especiacutefica dos ovos Estes autores observaram que baixos niacuteveis de Arg e

altos niacuteveis de Lys proporcionaram a melhor gravidade especifica dos ovos e quando a

1262

Arginina dig ()

Y = 421330+011239X-00004908X2 R2=043

49

relaccedilatildeo ArgLys era alta a gravidade especiacutefica piora significativamente Por outro lado

Lima amp Silva (2007) natildeo verificaram efeito das diferentes relaccedilotildees ArgLys digestiacutevel

nos paracircmetros de qualidade de ovos

O aumento do peso do ovo e a queda na gravidade especiacutefica desses ovos

possuem relaccedilatildeo direta Isso ocorre porque segundo Basiouni et al (2006) a siacutentese da

quantidade de casca dos ovos nas galinhas eacute constante Aleacutem disso com o aumento da

idade das galinhas ocorre aumento no tamanho dos ovos Do iniacutecio ateacute o final do ciclo

de postura o ovo chega a aumentar ateacute 40 do seu tamanho e por isso haveraacute menos

caacutelcio na superfiacutecie da casca o que reduz a espessura da casca (Baiatildeo amp Aguilar 2001)

e consequentemente a gravidade especiacutefica dos ovos

Figura 2 ndash Peso e gravidade especiacutefica dos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados de rendimento da incubaccedilatildeo dos ovos de matrizes de corte

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg digestiacutevel estatildeo apresentados na Tabela 3 Os

niacuteveis de Arg digestiacutevel utilizados natildeo afetaram (Pgt005) nenhuma das variaacuteveis de

incubaccedilatildeo Demonstra-se portanto que a Arg pode ser utilizada na dieta das matrizes

sem trazer prejuiacutezos agrave reproduccedilatildeo

A fertilidade e a eclosatildeo dos ovos das matrizes satildeo dois paracircmetros importantes

na incubaccedilatildeo dos ovos Valores proacuteximos de 96 para fertilidade e 88 para eclosatildeo

satildeo indicativos de bom manejo de reprodutoras (Rosa amp Aacutevila 2000) Segundo Rosa amp

Aacutevila (2000) o rendimento da incubaccedilatildeo estaacute diretamente relacionado com a

mortalidade embrionaacuteria a qual sofre influecircncia da gravidade especiacutefica e da

capacidade do ovo em perder umidade No presente trabalho observou-se que a

utilizaccedilatildeo de dietas suplementadas com Arg natildeo afetou nenhuma dessas variaacuteveis

apesar de ter interferido na gravidade especiacutefica dos ovos conforme demonstrado em

tabelas anteriores

10795

108

10805

1081

10815

1082

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Gra

vida

de e

spec

iacutefica

(gm

l)

59860

602604606608

61612614616618

0943 1093 1243 1393 1543

Arg dig ()

Peso

(g)

Y = 108413-000000249943X R2=066 Y = 585813+000196527X R2=096

50

O peso do pinto natildeo foi influenciado pelos niacuteveis de Arg na dieta das matrizes

de corte eacute considerado muito importante na cadeia de produccedilatildeo por estar diretamente

relacionado ao desempenho produtivo do frango A variaccedilatildeo de peso do pinto no

momento da eclosatildeo pode ser causada por fatores como linhagem idade da matriz peso

e niacuteveis de nutrientes do ovo (Vieira amp Moran Jr 1999) Okada (1994) e Castro (1996)

ressaltam que pintos de corte com mais de 40g no primeiro dia de vida devem ser

considerados de boa qualidade Os pintos desse experimento podem ser considerados de

boa qualidade jaacute que o menor peso dos pintos ao nascer foi de 439g Embora neste

estudo os niacuteveis de Arg na dieta das matrizes natildeo tenham afetado o peso dos pintos esse

aminoaacutecido eacute essencial para o bom desenvolvimento da progecircnie Kita et al (2002)

relatam que dietas com alta proteiacutena suplementadas com aminoaacutecidos essenciais (Arg

metionina+cistina) aumentam os niacuteveis plasmaacuteticos do fator de crescimento semelhante

agrave insulina (IGF-I) e o ganho de peso em aves jovens

Tabela 3 - Valores meacutedios reprodutivos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Variaacuteveis Niacuteveis de Arginina

()

Fertilidade ()

Eclosatildeo ()

Peso ovo (g)

Peso Pinto (g)

Relaccedilatildeo Peso OvoPeso Pinto

0943 9750plusmn218 7875plusmn450 6269plusmn042 4507plusmn053 7168plusmn045 1093 9513plusmn212 8038plusmn459 6212plusmn033 4390plusmn045 7115plusmn054 1243 9250plusmn206 8125plusmn464 6200plusmn047 4487plusmn066 7234plusmn047 1393 9750plusmn218 8000plusmn457 6314plusmn072 4514plusmn086 7173plusmn082 1543 9625plusmn215 7750plusmn443 6351plusmn055 4529plusmn039 7127plusmn045 Meacutedia 9578 7958 6269 4486 7163

CV () 656 1641 231 374 222 Anaacutelise de Variacircncia Arginina ns ns ns ns ns

R2 ------ ------ ----- ------- ------- ns = natildeo significativo

O peso dos ovos eacute outra caracteriacutestica de grande importacircncia relacionada com a

idade da matriz os quais satildeo preponderantes para o desenvolvimento inicial das aves e

tem consequecircncias em todo o crescimento (Pedroso et al 2005) Essa influecircncia eacute bem

conhecida e o peso do pinto representa entre 66 e 71 do peso do ovo (Fiuacuteza et al

2006 Marinho et al 2006 Pappas et al 2006) Segundo North amp Bell (1990) cada

51

grama a mais no peso do pinto representa 13 gramas no peso do frango ao abate por

isso a nutriccedilatildeo das matrizes eacute de grande importacircncia jaacute que a Arg tem relaccedilatildeo positiva

com o hormocircnio de crescimento (GH) cuja siacutentese se inicia na fase embrionaacuteria da ave

(Harvey et al 2001)

Tabela 4 - Estimativas Bayesianas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg considerando os modelos linear e quadraacutetico

Estimativas Bayesianas

Ligaccedilatildeo Ligaccedilatildeo Meacutedias Desvio Padratildeo P25 P975 DIC

Embriodiagnoacutestico

Linear α β

-07512 -25980

2078 1798

-4811 -6367

3426 0784 4783 Mortalidade

Embrionaacuteria (1 a 5 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-8444 10690 -5607

10610 18020 7538

-3015 -2406 -2104

11790 47550 8874

4813

Linear α β

2259 -6267

3790 3615

-4602 -14470

10570 -

01174 3137

Mortalidade (11 a 17 dias)

Quadraacutetica α β1 β2

5057 -11090 1958

12960 22430 9632

-2027 -5093 -1714

3112 3253 2052

3167

Linear α β

-3726 1274

10390 07968

-58110 -02681

-1730 2882 1079

Mortalidade (18 a 21 dias) Quadraacutetica

α β1 β2

-1634 -2195 1387

6330 10280 4084

-14020 -22380 -6539

10690 17840 9441

1095

Linear α β

-1927 -2266

2562 2359

-7233 -7321

2739 1993 0070

Bicado Vivo Quadraacutetica

α β1 β2

-1451 -1692 -2019

2749 2821 2539

-7044 -7313 -7290

3755 3682 2565

0057

Linear α β

-2564 -1628

2860 2418

-8103 -6479

2823 2755 3417

Bicado Morto Quadraacutetica

α β1 β2

3692 -12350 4412

11930 19920 8139

-1936 -5206 -1148

2739 2609 2054

3428

Linear α β

-513600 -004923

3798 3023

-13000 -6154

2041 5809 2522

Morte por Contaminaccedilatildeo Quadraacutetica

α β1 β2

-009106 -71940 28920

13200 21610 8744

-2704 -4965 -1428

2480 3473 2016

2555

Na Tabela 4 satildeo apresentadas as estimativas Bayesianas para as equaccedilotildees de

regressatildeo ajustadas para o embriodiagnoacutestico realizado nos ovos provenientes das

matrizes de corte alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg Natildeo foi verificado efeito da

dieta das matrizes sobre nenhuma das variaacuteveis paracircmetros avaliadas (Pgt005)

52

Contudo no periacuteodo final do desenvolvimento embrionaacuterio (18 a 21 dias) haacute maior

mortalidade (Tabela 5) Nesse periacuteodo haacute mudanccedila draacutestica do meio aquoso protegido

para o meio aeroacutebio totalmente diferente Nas aves essa fase final de desenvolvimento

inclui absorccedilatildeo de aacutegua retraccedilatildeo do saco vitelino maturaccedilatildeo funcional do pulmatildeo

transiccedilatildeo da respiraccedilatildeo coacuterio-alantoide para pulmonar bicagem e nascimento Ocorre

ao mesmo tempo o desenvolvimento da resposta homeoteacutermica (Oviedo-Roacutendon amp

Murakami 1998) Aleacutem disso nesse periacuteodo ocorre a mudanccedila pronunciada em

hormocircnios tireoideanos corticosteroideos hormocircnios do eixo somatotroacutepico

prolactina vasotocina e melatonina

Tabela 5 - Valores meacutedios de embriodiagnoacutestico de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg Morte

Embrionaacuteria (1 a 5 dias)

Morte (11 a 17 dias)

Morte (18 a 21

dias)

Bicado Morto

Morte por Contaminaccedilatildeo

Arg () 0943 264 416 889 264 125 1093 514 000 764 125 000 1243 250 000 836 000 125 1393 000 125 1514 125 000 1543 125 000 1406 125 125 CV () 20962 50785 9999 27439 36515 (Pgt005)

Conclusatildeo

A suplementaccedilatildeo das dietas de matrizes de corte com niacuteveis crescentes de

Arginina proporcionou uma maior produccedilatildeo de ovos e um ovo com maior peso com o

niacutevel de 1262 e 1543 de Arg digestiacutevel respectivamente Para a reproduccedilatildeo os

niacuteveis crescentes de Arginina natildeo influenciaram nenhuma das variaacuteveis estudadas

podendo ser utilizado o menor niacutevel de suplementaccedilatildeo ou seja 0943 de Arg

digestiacutevel sem prejuiacutezos

53

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IV - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina na dieta de matrizes de frangos de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e

paracircmetros oacutesseos da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre o desempenho rendimento de carcaccedila e paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada com Arg ou natildeo A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 mgkg de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) a suplementaccedilatildeo das matrizes com Arg afetou quadraacuteticamente (Plt005) a conversatildeo alimentar da progecircnie natildeo suplementada com melhor conversatildeo ao niacutevel de 1359 de Arg A progecircnie suplementada teve o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar afetados quadraticamente (Plt005) pelos niacuteveis de Arg da dieta O niacutevel de suplementaccedilatildeo 1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649 proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente O ganho de peso apresentou um aumento linear (Plt005) de acordo com os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de Arg No periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade) o ganho de peso da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com Arg aumentou linearmente (Plt005) enquanto a progecircnie natildeo suplementada natildeo foi afetada (Pgt005) Para progecircnie natildeo suplementada apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis suplementares de Arg recebidos pelas matrizes Para progecircnie suplementada com Arg a porcentagem de carcaccedila e de peito aumentou linearmente (Plt005) No entanto a porcentagem de coxa e sobrecoxa e asa diminuiu linearmente (Plt005) A gordura abdominal destes animais foi influenciada quadraticamente (Plt005) com menor porcentagem de gordura abdominal ao niacutevel de 1672 Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie natildeo suplementada apenas o diacircmetro de tiacutebia aos 7 dias de idade foi afetado quadraticamente (Plt005) pela suplementaccedilatildeo de Arg na dieta das matrizes a partir do niacutevel 1196 Na progecircnie suplementada o comprimento do fecircmur diacircmetro da tiacutebia e iacutendice de Seedor de ambos aumentaram linearmente (Plt005)Estes resultados indicam que eacute necessaacuterio suplementar a dieta da progecircnie com Arg para se obter os melhores iacutendices de desempenho rendimento de carcaccedila e qualidade de ossos

Palavras-chave avaliaccedilatildeo de carcaccedila desempenho produtivo osso

58

IV - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

performance carcass yield and bone parameters of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine

(Arg) supplementation in broiler breeder henrsquos diet on performance carcass yield and bone parameters in progeny fed with or without the Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 mgkg above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units In the initial phase (from 1 to 21 days old) the feed gain ratio in the non-supplemented progeny was affected quadractily (Plt005) and the 1359 level was considered the best The supplemented progeny showed the feed intake and feed gain ratio quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet The level of 1690 provided the highest feed intake and the level of 1300 and 1649 provided the best and worst feed gain ratio respectively The body weight gain presented a linear increase (Plt005) according to the Arg supplementation levels During the entire study (from 1 to 42 days old) the body weight gain of the progeny fed with the Arg-supplemented diet showed a linear increase (Plt005) whereas the progeny fed with the non-supplemented diet was not affected (Pgt005) Only the carcass percentage was linearly influenced (Plt005) by the Arg supplemented diet in the progeny without supplementation The carcass and breast percentage linearly increased (Plt005) in the supplemented progeny However the leg and wing percentage linearly decreased (Pgt005) The abdominal fat was quadractily influenced (Plt005) with the lowest abdominal fat percentage observed in the 1672 level The bone parameters in the non-supplemented progeny at 7 days old showed that just the tibia diameter was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplemented diet in the 1196 level In the supplemented progeny the femur length tibia diameter and Seedor index of both bones linearly increased (Plt005) These results indicate that it is necessary to feed the progeny with an Arg-supplemented diet to obtained better performance and bone quality Key words bone carcass evaluation productive performance

59

Introduccedilatildeo

As exigecircncias nutricionais para a maioria dos nutrientes satildeo estabelecidas com

base nas respostas produtivas mas em alguns casos a sauacutede eacute o criteacuterio principal A

nutriccedilatildeo de reprodutoras pesadas deve atender as exigecircncias da ave alcanccedilando bom

desempenho produtivo e ainda suprir as necessidades dos embriotildees e dos pintos

neonatos originados de seus ovos O desenvolvimento e a vitalidade do embriatildeo

dependem completamente dos nutrientes contidos no ovo os quais satildeo originados da

dieta e do metabolismo das galinhas (Baiatildeo amp Lucio 2005) Assim a concentraccedilatildeo de

nutrientes disponiacuteveis no ovo para o desenvolvimento do embriatildeo eacute criacutetico e pode

influenciar o potencial de ganho de peso da progecircnie e caracteriacutesticas importantes de

desenvolvimento imunitaacuterio oacutesseo e muscular

O crescimento precoce no periacuteodo poacutes-eclosatildeo eacute influenciado por vaacuterios

fatores entre eles o conteuacutedo de resiacuteduos do saco viteliacutenico a ingestatildeo de alimento e de

aacutegua os niacuteveis de enzimas pancreaacuteticas e intestinais a aacuterea de superfiacutecie intestinal e a

digestibilidade global de nutrientes (Dibner 1996) As reservas contidas no saco

vitelino satildeo as primeiras fontes de nutrientes utilizadas pelo pintainho ao nascer Desse

modo quanto maior o tempo decorrido entre a eclosatildeo e o iniacutecio da ingestatildeo de

alimento e aacutegua maior a dependecircncia que o pintainho teraacute dessas reservas (Vieira amp

Pophal 2000) a dieta materna eacute a origem dos nutrientes para o embriatildeo (Vieira 2007)

Baiatildeo amp Luacutecio (2005) afirmam que para matrizes pesadas existe uma pausa nas

pesquisas que visam determinar as exigecircncias especiacuteficas de aminoaacutecidos Embora os

aminoaacutecidos presentes na gema possam ser suficientes durante o processo de eclosatildeo

apoacutes o nascimento as reservas do saco vitelino da ave satildeo insuficientes para o

desenvolvimento inicial (Otha et al 2004)

Os aminoaacutecidos sinteacuteticos disponiacuteveis no mercado proporcionam o atendimento

das exigecircncias nutricionais das aves principalmente em relaccedilatildeo aos aminoaacutecidos

60

limitantes Dentre esses aminoaacutecidos a arginina (Arg) eacute considerada o quinto

aminoaacutecido limitante para frangos de corte em dietas agrave base de milho e de farelo de

soja apoacutes metionina+cistina lisina treonina e valina (Corzo 2007) Como as aves natildeo

apresentam o ciclo da ureia funcional estas dependem exclusivamente da Arg sinteacutetica

principalmente no periacuteodo inicial de criaccedilatildeo (Allen amp Baker 1972) A suplementaccedilatildeo

da Arg eacute necessaacuteria para a formaccedilatildeo da ornitina a qual estaacute envolvida na siacutentese da

prolina que eacute utilizada para a formaccedilatildeo das poliaminas (espermidina espermina e

putrescina) Estas moleacuteculas estatildeo associadas diretamente ao crescimento e a

diferenciaccedilatildeo celular (Buttery amp DrsquoMello 1994)

A Arg aleacutem de serem constituintes de proteiacutenas participa como coadjuvante na

secreccedilatildeo de insulina pelas ceacutelulas β do pacircncreas (Bolea et al 1997) e na secreccedilatildeo do

hormocircnio de crescimento (GH) (Ghigo et al 1994) Os efeitos do GH satildeo mediados

pelos fatores de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Le Roith et al 2001) O

IGF-I eacute conhecido por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo

esqueleacutetico como a proliferaccedilatildeo e diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelite (Florini et al 1996)

e a agregaccedilatildeo de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos sobre a siacutentese e a

degradaccedilatildeo proteica (Duclos et al 1991 Coleman et al 1995 Duclos et al2005)

Outro efeito do GH ocorre em niacutevel do disco epifisaacuterio no qual estimula a siacutentese de

IGF-I que induza mitogecircnese que resulta no crescimento dos ossos longos (Isaksson et

al 1987)

O enriquecimento dos ovos das matrizes com Arg bem como sua suplementaccedilatildeo

logo apoacutes a eclosatildeo pode trazer inuacutemeros benefiacutecios sobre o desenvolvimento da

progecircnie jaacute que o GH influenciado pela Arg tem sua siacutentese iniciada na fase

embrionaacuteria da ave (Harvey et al 2001)

Diante do exposto com este estudo objetivou-se testar a influecircncia da

suplementaccedilatildeo com L-Arginina na dieta das matrizes de corte sobre a progecircnie com

dieta suplementada ou natildeo suplementada com L-Arginina sobre o desempenho

paracircmetros oacutesseos e rendimento de carcaccedila dos frangos de corte

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

61

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

no delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina

incluiacutedos na dieta materna variando de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal (0

943 1093 1243 1393 e 1543 de Arg digestiacutevel) e seis repeticcedilotildees com 35

aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada box foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado o

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

em todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as sobras de raccedilatildeo dos boxes foram pesadas para

ajustar o consumo de raccedilatildeo e da conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 2) As

dietas experimentais agrave base de milho e de farelo de soja foram formuladas de acordo

com os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e as recomendaccedilotildees nutricionais

62

propostas por Rostagno et al (2005) As aves controle receberam dieta sem

suplementaccedilatildeo de arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz

sobre o desempenho da progecircnie

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais basais da progecircnie natildeo suplementada com dietas com niacuteveis de Arg Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 017 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 1000 10000 Valores calculados PB () 2000 1850 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

63

Experimento 3 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina digestiacutevel na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes utilizando o delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina e seis repeticcedilotildees

com 32 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg em relaccedilatildeo agrave dieta basal inicial e de crescimento em

substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial corresponderam a 1300

1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela 2) A partir dos 22

dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300 1450 1600

e 1750 de arginina digestiacutevel (Tabela 3) O manejo realizado nesse experimento foi

conduzido conforme descrito no experimento anterior

Desempenho

Para ambos os experimentos com a progecircnie foram avaliados o desempenho

zooteacutecnico (ganho de peso consumo de raccedilatildeo e conversatildeo alimentar) Para avaliaccedilatildeo do

desempenho as raccedilotildees e as aves foram pesadas no iniacutecio do experimento aos 7 21 e 42

dias de idade

Paracircmetros oacutesseos

Os paracircmetros oacutesseos avaliados foram comprimento diacircmetro peso e calculado

o Iacutendice de Seedor Para avaliaccedilatildeo dos paracircmetros oacutesseos em ambos os experimentos

com a progecircnie apoacutes o sacrifiacutecio por meio de atordoamento seguido de sangria foram

coletados os fecircmures e as tiacutebias esquerdas de duas avesrepeticcedilatildeo aos 7 e 21 dias de

idade As amostras ficaram congeladas (-18ordmC) ateacute o iniacutecio das anaacutelises dos paracircmetros

oacutesseos que foram executadas conforme descrito a seguir

Apoacutes o descongelamento dos ossos foram retirados os tecidos envolventes

(tecido muscular aderido) com auxiacutelio de tesouras e pinccedilas Os ossos descongelados

foram pesados em balanccedila analiacutetica (g plusmn 00001) e o comprimento e o diacircmetro (na

64

porccedilatildeo meacutedia do osso) foram medidos usando paquiacutemetro eletrocircnico digital (capacidade

de 0 a 150 mm e resoluccedilatildeo de 001 mm)

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900

Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6456 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl Vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 1300 1450 1600 1750 1900 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE 11000 mg

Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

65

A partir do peso do osso e do seu comprimento foi calculado o Iacutendice de Seedor

(Seedor et al 1993) de acordo com a seguinte foacutermula Iacutendice de Seedor = Peso do

osso (mg)comprimento do osso (mm)

Este iacutendice eacute utilizado como indicativo da densidade oacutessea Quanto maior o

Iacutendice de Seedor maior a densidade da peccedila oacutessea e vice-versa

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dieta contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Total 10000 10000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco 100000 mg

Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000

mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

66

Rendimento de carcaccedila

Para determinaccedilatildeo do rendimento de carcaccedila foram utilizadas trecircs aves por

unidade experimental (15 avestratamento) identificadas com anilhas numeradas e

submetidas ao jejum por seis horas atordoadas com eletricidade (220W) e com

posterior sangria no final de cada experimento realizado com a progecircnie

Para caacutelculo do rendimento de carcaccedila foi considerado o peso da carcaccedila

eviscerada quente sem os peacutes cabeccedila e gordura abdominal em relaccedilatildeo ao peso vivo

que foi obtido individualmente antes do abate das aves Para rendimento dos cortes

nobres foi considerado o rendimento do peito inteiro com pele e ossos das pernas

(coxa e sobrecoxa) e das asas que foi calculado em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila

eviscerada

Para caacutelculo da gordura abdominal foi considerada a gordura presente ao redor da

cloaca da bolsa cloacal moela proventriacuteculo e dos muacutesculos abdominais adjacentes foi

retirada conforme descrito por Smith (1993) Em seguida foi pesada e tambeacutem

calculada em relaccedilatildeo ao peso da carcaccedila eviscerada

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

67

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total

Resultados e discussatildeo

Os valores meacutedios de desempenho de frangos de corte provenientes de matrizes

alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg com dieta suplementada e natildeo suplementada

com Arg estatildeo demonstrados nas Tabelas 5 e 6 respectivamente

No periacuteodo inicial (1 a 21 dias de idade) os frangos que receberam dietas

suplementadas com Arg apresentaram efeito linear positivo (Plt005) dos niacuteveis

crescentes de suplementaccedilatildeo com Arg sobre o ganho de peso O consumo de raccedilatildeo e a

conversatildeo alimentar foram influenciados de forma quadraacutetica (Plt005) e o niacutevel de

1690 promoveu o maior consumo de raccedilatildeo e os niacuteveis de 1300 e 1649

proporcionaram a melhor e a pior conversatildeo alimentar respectivamente (Figura 2)

Esses niacuteveis satildeo superiores aos encontrados por Atencio et al (2004) que apresentaram

os niacuteveis de 127 e 128 de Arg digestiacutevel para ganho de peso e conversatildeo

alimentar respectivamente Mendes et al (1997) e Brake et al (1998) observaram

melhor conversatildeo alimentar agrave medida que a Arg foi adicionada agraves dietas dos frangos de

corte

68Tabela 5 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito

0943 1093 1243 1393 1543

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 68749plusmn651 69813plusmn1553 69498plusmn876 71393plusmn2071 71148plusmn1009 466 ns

Consumo de raccedilatildeo g 108937plusmn973 108077plusmn2506 106938plusmn1143 108570plusmn2584 109617plusmn1424 420 ns

Conversatildeo alimentar gg 1585plusmn0015 1548plusmn0006 1539plusmn0014 1523plusmn0023 1541plusmn0004 224 Quadraacutetico1

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 182410plusmn1786 178280plusmn1963 183209plusmn2355 170699plusmn3272 177743plusmn3493 366 ns

Consumo de raccedilatildeo g 339169plusmn2597 332944plusmn4420 334432plusmn4460 328563plusmn5011 335512plusmn4351 311 ns

Conversatildeo alimentar gg 1859plusmn0017 1868plusmn0017 1825plusmn0008 1926plusmn0027 1889plusmn0014 230 ns

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 251160plusmn2118 248093plusmn2721 252708plusmn2327 242092plusmn4528 248891plusmn3614 314 ns

Consumo de raccedilatildeo g 448106plusmn3333 441022plusmn6500 441370plusmn5178 437133plusmn7327 445129plusmn4655 309 ns

Conversatildeo alimentar gg 1784plusmn0013 1777plusmn0011 1746plusmn0005 1807plusmn0021 1789plusmn0008 177 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 15844-0000270801X+0000000325260X2 R2 = 070

69Tabela 6 ndash Meacutedias e erro padratildeo da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito

1300 1450 1600 1750 1900

Periacuteodo de 1 a 21 dias

Ganho de peso g 75785plusmn402 77320plusmn1073 78103plusmn635 79648plusmn670 80151plusmn344 212 Linear1

Consumo de raccedilatildeo g 89299plusmn1140 92124plusmn2246 103470plusmn4037 104782plusmn562 96677plusmn1665 557 Quadraacutetico2

Conversatildeo alimentar gg 1179plusmn0007 1192plusmn0031 1326plusmn0055 1316plusmn0012 1207plusmn0026 613 Quadraacutetico3

1150 1300 1450 1600 1750

Periacuteodo de 21 a 42 dias

Ganho de peso g 177261plusmn2817 177088plusmn2760 180666plusmn2220 182398plusmn3067 177484plusmn2109 359 ns

Consumo de raccedilatildeo g 358840plusmn5051 353952plusmn5112 356084plusmn2723 358440plusmn6584 354362plusmn2670 322 ns

Conversatildeo alimentar gg 2025plusmn0013 1999plusmn0017 1972plusmn0016 1965plusmn0006 1997plusmn0013 165 Quadraacutetico4

Periacuteodo de 1 a 42 dias

Ganho de peso g 253047plusmn2782 254408plusmn3313 258769plusmn2443 262046plusmn3324 257635plusmn2041 269 Linear5

Consumo de raccedilatildeo g 448139plusmn5104 446076plusmn6429 459554plusmn4864 463275plusmn6840 451039plusmn3651 297 ns

Conversatildeo alimentar gg 1771plusmn0009 1754plusmn0015 1777plusmn0022 1768plusmn0005 1751plusmn0012 192 ns ns = natildeo significativo (Pgt005)1 Y = 759898+00737276X R2 = 081 2 Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=085 3 Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 = 096 4 Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031 5 Y = 253818+0112096X R2 = 017

70

149150151152153154155156157158159

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo A

limen

tar

Figura 1 - Conversatildeo alimentar (1 a 21 dias) da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Na progecircnie natildeo suplementada com dieta contendo Arg verificou-se efeito

quadraacutetico (Plt005) da nutriccedilatildeo das matrizes na conversatildeo alimentar (CA) (Figura 1)

sendo que 1359 de Arg dig proporcionou o melhor iacutendice Jaacute o consumo de raccedilatildeo e o

ganho de peso natildeo foram afetados (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo da matriz

O efeito observado da suplementaccedilatildeo com Arg das matrizes na CA de frangos de

corte natildeo suplementados com Arg ser atribuiacuteda ao aumento na concentraccedilatildeo desse

aminoaacutecido na gema a qual eacute responsaacutevel pela nutriccedilatildeo dos pintos durante o seu

desenvolvimento embrionaacuterio e nas primeiras horas de vida poacutes-eclosatildeo Esse aumento

pode ter efeito positivo no desenvolvimento muscular dos pintos uma vez que esse

aminoaacutecido tem accedilatildeo indireta na formaccedilatildeo muscular atraveacutes da siacutentese do hormocircnio de

crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO) Aleacutem disso a Arg ainda estaacute envolvida na

siacutentese da creatina e de poliaminas As poliaminas satildeo consideradas de importacircncia

nutricional no crescimento e desenvolvimento do intestino do neonato (Quinn et al

2002) Segundo Foye et al(2005) o acesso do embriatildeo a nutrientes pode melhorar o

desenvolvimento do sistema digestoacuterio a eclodibilidade e o desempenho dos frangos

Quando o comportamento da curva do consumo de raccedilatildeo dos frangos de corte

que receberam dietas suplementadas com Arg foi analisada verifica-se que apoacutes o

ponto de maior consumo de raccedilatildeo ocorre uma queda na curva (Figura 2) Esse efeito

pode ter sido ocasionado por um desequiliacutebrio dos aminoaacutecidos na dieta afetando

principalmente a relaccedilatildeo LysArg O antagonismo entre esses aminoaacutecidos prejudica a

absorccedilatildeo desses uma vez que ambos competem pelo mesmo siacutetio de absorccedilatildeo

Segundo Fernandes et al (2009) o efeito negativo da suplementaccedilatildeo de Arg

pode estar associado agrave incapacidade funcional dos rins em eliminar o excesso de ureia

formado pela degradaccedilatildeo da Arg Niacuteveis elevados de Arg promovem aumento na

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 070

1359

71

atividade da arginase renal produzindo ornitina e ureia (Stuz et al 1971) Este aumento

pode comprometer a siacutentese de NO visto que a Arg eacute a uacutenica via fisioloacutegica de

produccedilatildeo deste composto Adicionalmente a isso a elevaccedilatildeo da ureia plasmaacutetica de

acordo com Prabhakar et al (1997) pode inibir a accedilatildeo da oacutexido niacutetrico sintetase (NOS)

enzima que cataliza a reaccedilatildeo que converte Arg em NO O NO aleacutem de

neurotransmissor tambeacutem modula a liberaccedilatildeo de outros neurotransmissores (Estrada amp

Murilo-Carretero 2005) cujo envolvimento destas moleacuteculas na regulaccedilatildeo do apetite

vem sendo discutido (Denbow 1999)

750

800

850

900

950

1000

1050

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

sum

o de

raccedilatilde

o (g

)

730

740

750

760

770

780

790

800

810

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Gan

ho d

e pe

so (g

)

105

11

115

12

125

13

135

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 2 - Consumo de raccedilatildeo ganho de peso e conversatildeo alimentar de 1 a 21 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo das matrizes com dietas com Arg natildeo afetou as variaacuteveis de

desempenho da progecircnie natildeo suplementada com Arg no periacuteodo de 21 a 42 dias de

idade (Pgt005) Poreacutem quando a progecircnie recebeu dieta com Arg verificou-se efeito

quadraacutetico para conversatildeo alimentar (Plt005) e o melhor resultado foi alcanccedilado com

1669 de Arg (Figura 3)

Sabe-se que a conversatildeo alimentar indica a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo da dieta para

o crescimento e deposiccedilatildeo muscular Assim o crescimento consiste em parte do

resultado da siacutentese proteica e a eficiecircncia de utilizaccedilatildeo dependem da quantidade de

aminoaacutecidos que estatildeo sendo catabolizados (Sklan amp Noy 2004) Este processo

depende de energia para a biotransformaccedilatildeo e a eliminaccedilatildeo com custo metaboacutelico para

Y = 759898+00737276X R2 = 085

Y = 115219+0000861079X-000000123489X2 R2 =0 96

Y = 872315+0790263X-000101251X2 R2=081

1690

1649

72

incorporar um aminoaacutecido na cadeia proteica de 4 mol de ATP e de 6 mol de ATPg de

N para eliminaacute-lo (Mc Leoad 1997)

194195196197198199

2201202203204

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Con

vers

atildeo a

limen

tar

Figura 3 - Conversatildeo alimentar de 21 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

A suplementaccedilatildeo de Arg durante todo o periacuteodo de criaccedilatildeo eacute essencial para que

a ave expresse todo o seu potencial geneacutetico principalmente em relaccedilatildeo ao ganho de

peso Para a progecircnie suplementada no periacuteodo total de criaccedilatildeo (1 a 42 dias de idade)

observou-se efeito linear positivo (Pgt005) no ganho de peso e para a progecircnie que natildeo

recebeu suplementaccedilatildeo natildeo foi observado efeito(Pgt005) da suplementaccedilatildeo das

matrizes nas variaacuteveis de desempenho (Figura 4)

2500

2520

2540

2560

2580

2600

2620

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina dig ()

Gan

ho d

e Pe

so (g

)

Figura 4 - Ganho de peso de 1 a 42 dias de idade da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

De fato segundo Fernandes et al (2009) a suplementaccedilatildeo de Arg acima das

exigecircncias nas raccedilotildees iniciais (1 a 21 dias) dos frangos melhora o desempenho

produtivo das aves entretanto esse efeito eacute transiente natildeo havendo diferenccedila nestas

caracteriacutesticas na idade de abate

Na fase inicial de criaccedilatildeo a Arg eacute considerada um aminoaacutecido essencial na dieta

das aves visto que o ciclo da ureia natildeo eacute funcional nas aves Assim a incapacidade

desses animais em sintetizar Arg implica na necessidade do fornecimento desse

aminoaacutecido na dieta Aleacutem disso a Arg eacute considerada o quinto aminoaacutecido limitante

Y = 202897-0000319117X+0000000432666X2 R2 = 031

1669

Y = 253818+0112096X R2 = 017

73

para frangos em dietas agrave base de milho e de farelo de soja apoacutes metionina+cistina

lisina treonina e valina (Corzo 2007)

Segundo Ball et al (2007) a exigecircncia de Arg pelas aves eacute a mais alta entre as

espeacutecies de animais estudadas isso porque aleacutem da falta da siacutentese endoacutegena a taxa de

deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento das atuais linhagens de corte eacute muito alta

Os valores meacutedios de desempenho (Tabelas 5 e 6) apresentados durante o

periacuteodo experimental total (1 a 42 dias) satildeo muito proacuteximos Assim foi realizada a

anaacutelise conjunta de ambos os experimentos para confirmar a necessidade ou natildeo de

suplementaccedilatildeo da progecircnie com Arg na dieta No periacuteodo total de 1 a 42 dias (Tabela

7) a CA foi melhor na progecircnie que recebeu dieta suplementada apesar do CR ter sido

superior nessas aves demonstrando assim que a progecircnie suplementada com Arg

converte mais eficientemente a raccedilatildeo em massa muscular

Tabela 7 - Meacutedias de ganho de peso (GP) consumo de raccedilatildeo (CR) e conversatildeo alimentar (CA) dos experimentos realizados com a progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis de Arg

1 a 21 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 70120plusmn585 108428plusmn789 1547plusmn0007

Progecircnie (suplementada) 78202plusmn406 97271plusmn1456 1243plusmn0018

CV () 473 913 0011 22 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 178468plusmn1380 334124plusmn1877 1874plusmn010

Progecircnie (suplementada) 178979plusmn1160 356346plusmn1981 1992plusmn0007

CV () 1182 1999 0007 1 a 42 dias GP CR CA

Progecircnie (natildeo suplementada) 248588plusmn1487 442552plusmn2419b 1781plusmn0006b

Progecircnie (suplementada) 257181plusmn1315 453617plusmn2597a 1764plusmn0006a

CV () 1347 2477 0006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Dentre os paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada

apenas a porcentagem de carcaccedila foi influenciada linearmente (Plt005) pelos niacuteveis

suplementares de Arg recebidos pelas matrizes (Figura 5)

74

Tabela 8 ndash Meacutedias e erro padratildeo de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel na dieta materna CV () Efeito Paracircmetros 0943 1093 1243 1393 1543

de Carcaccedila 6944plusmn025 6863plusmn044 6987plusmn033 6953plusmn028 7009plusmn029 115 Linear1

de Peito 3587plusmn028 3519plusmn017 3662plusmn032 3639plusmn041 3618plusmn042 228 ns

de Coxa 3041plusmn032 3085plusmn019 2970plusmn033 2999plusmn032 3021plusmn022 229 ns

de Asa 1142plusmn016 1129plusmn014 1118plusmn006 1104plusmn020 1110plusmn014 329 ns

de Dorso 2279plusmn020 2352plusmn026 2267plusmn014 2287plusmn030 2262plusmn030 266 ns

de Gordura abdominal 295plusmn015 325plusmn014 292plusmn016 367plusmn019 290plusmn011 1220 ns ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 690720+000146984X R2 = 081 Tabela 9 ndash Meacutedias e erros padratildeo de rendimento da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Arg digestiacutevel CV () Efeito Paracircmetros 1150 1300 1450 1600 1750

de Carcaccedila 6993plusmn029 7022plusmn028 7138plusmn033 7128plusmn020 7160plusmn031 099 Linear1

de Peito 3579plusmn030 3584plusmn077 3690plusmn021 3651plusmn028 3698plusmn019 277 Linear2

de Coxa 3126plusmn030 3108plusmn066 3027plusmn025 3026plusmn023 3045plusmn020 295 Linear3

de Asa 1137plusmn022 1123plusmn015 1105plusmn017 1095plusmn015 1096plusmn021 398 Linear4

de Dorso 2272plusmn033 2286plusmn057 2263plusmn028 2273plusmn028 2260plusmn048 436 ns

de Gordura abdominal 314plusmn013 311plusmn013 238plusmn007 279plusmn014 285plusmn007 964 Quadraacutetico5 1 Y = 700017+000293620X R2= 045 2 Y = 357918+000203737X R2 = 027 3 Y = 311542-000163610X R2=021 4 Y = 113323-000072978X R2 = 085 5 Y = 322863-000316200X+000000424975X2R2=030 ns = natildeo significativo

75

686

688

69

692

694

696

698

70

702

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina dig ()

d

e C

arca

ccedila

Figura 5 - Porcentagem de carcaccedila da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Al-Murrani (1982) demonstrou que injetando uma mistura de aminoaacutecidos nos

embriotildees em crescimento nos ovos de matrizes de corte resultam em aumento no peso

do pinto e no ganho de peso dos frangos de corte aos 56 dias de idade quando estes

foram comparados com os natildeo tratados De fato o peso do embriatildeo e dos pintos eacute

influenciado pelo perfil nutricional da gema por sua utilizaccedilatildeo pelo pintos apoacutes o

nascimento (Otha et al 1999)

Quando os frangos receberam dietas suplementadas com Arg houve aumento

linear positivo (Plt005) da porcentagem de carcaccedila e de peito poreacutem as porcentagens

de pernas e de asa apresentaram queda linear (Plt005) (Figura 6) Esses efeitos

provavelmente ocorreram pela accedilatildeo indireta da Arg pela formaccedilatildeo muscular atraveacutes da

siacutentese do hormocircnio do crescimento (GH) e do oacutexido niacutetrico (NO)

A Arg eacute constituinte de proteiacutenas e estaacute envolvida na secreccedilatildeo de insulina pelo

pacircncreas (Bolea et al 1997) e do GH pela hipoacutefise (Merimee et al 1969) Os efeitos

desses hormocircnios se manifestam por meio da secreccedilatildeo secundaacuteria dos fatores de

crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I e II) (Roith et al 2001) O IGF-I eacute conhecido

por incitar numerosos efeitos anaboacutelicos no metabolismo do muacutesculo esqueleacutetico como

a proliferaccedilatildeo e a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas sateacutelites (Florini et al 1996) e a agregaccedilatildeo

de proteiacutena miofibrilar pela combinaccedilatildeo dos efeitos na siacutentese e na degradaccedilatildeo proteica

(Duclos et al 2005)

Outro mecanismo de accedilatildeo da Arg nas fibras musculares estaacute relacionada com agrave

accedilatildeo do oacutexido niacutetrico O NO eacute sintetizado pela oacutexido niacutetrico sintetase (NOS) a qual eacute

expressada pelas fibras do muacutesculo esqueleacutetico (Reid 2001) A atividade da NOS

variam nos diferentes tipos de muacutesculos sendo que nos muacutesculos de contraccedilatildeo raacutepida

verifica-se maior accedilatildeo desta do que nos muacutesculos de contraccedilatildeo lenta (Reid 2001)

Y = 690720+000146984X R2 = 081

76

Assim o efeito observado nos diferentes cortes provavelmente ocorreu em virtude da

predominacircncia de fibras brancas ou Fast Glycolytic (FG) no peito Em contrapartida os

muacutesculos da coxa sobrecoxa e da asa possuem predominacircncia de fibras vermelhas ou

Slow Oxidative (SO) que satildeo de contraccedilatildeo lenta (Sartori amp Gonzaacuteles 2002) e pouco

afetada pela accedilatildeo da NOS

O teor de gordura abdominal presente na carcaccedila de frangos eacute um dos melhores

indicativos de qualidade da carcaccedila Quando os frangos foram suplementados com

niacuteveis de Arg verificou-se efeito quadraacutetico (Plt005) para essa caracteriacutestica em que o

menor teor de gordura abdominal foi obtido com 1672 de Arg dig (Figura 6) A

queda observada ateacute esse niacutevel pode ser explicada pela accedilatildeo do GH via IGF-I que induz

a siacutentese de proteiacutenas por estimular a captaccedilatildeo de aminoaacutecidos e a transcriccedilatildeo e a

traduccedilatildeo do mRNA em vaacuterios tecidos-alvo Diminui o catabolismo de proteiacutenas por

atuar diretamente na liberaccedilatildeo de aacutecidos graxos do tecido adiposo aumentando a sua

conversatildeo em acetil-CoA fonte de energia para os tecidos perifeacutericos A partir desse

ponto onde verifica-se o menor acuacutemulo de gordura ocorre novamente o aumento na

deposiccedilatildeo de gordura abdominal Isso provavelmente se deve ao excesso de aminoaacutecido

na dieta A degradaccedilatildeo desse excesso leva a excreccedilatildeo de nitrogecircnio na urina na forma

de amocircnia e a produccedilatildeo de moleacuteculas com esqueleto carbocircnico que satildeo usadas na

gliconeogecircnese e na lipogecircnese

Segundo Shutte amp Pack (1995) e Leclerq (1998) a suplementaccedilatildeo e o

balanceamento dos aminoaacutecidos das dietas podem promover aumento no ganho de

carcaccedila principalmente em relaccedilatildeo ao peito (Pophal et al 2004) e reduccedilatildeo de gordura

abdominal (Vieira et al 2004)

Mendes et al (1997) verificaram que o aumento da relaccedilatildeo ArgLys melhorou o

rendimento de carcaccedila e reduziu a gordura abdominal em frangos de corte Costa et al

(2001) observaram que agrave medida em que se aumentou a relaccedilatildeo ArgLys houve efeito

linear crescente para o rendimento de perna e decrescente para a gordura abdominal Jaacute

Fernandes et al (2009) natildeo observaram efeito da suplementaccedilatildeo de Arg nas variaacuteveis de

rendimento de carcaccedila analisadas o que provavelmente ocorreu porque diferentemente

do presente trabalho a suplementaccedilatildeo de Arg foi realizada apenas na fase inicial de

criaccedilatildeo (1 a 21 dias de idade)

77

69

695

70

705

71

715

72

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

arca

ccedila

35352354356358

36362364366368

37372

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

P

eito

296298

30302304306308

31312314

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

C

oxa

106

107

108

109

11

111

112

113

114

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

A

sa

2

22

24

26

28

3

32

34

1150 1300 1450 1600 1750

Arginina ()

G

ordu

ra a

bdom

inal

Figura 6 - Paracircmetros de rendimento de carcaccedila da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Outra possibilidade eacute que essas caracteriacutesticas de rendimento de carcaccedila foram

influenciadas pelos niacuteveis dieteacuteticos de Arg que estatildeo acima da exigecircncia das aves

Resultado contraacuterio foi obtido por Atencio et al (2004) que trabalhando com niacuteveis

crescentes de Arg natildeo verificaram efeito no rendimento de carcaccedila e de cortes

avaliados e estes concluiacuteram que os niacuteveis estudados estavam dentro da exigecircncia das

aves

Na anaacutelise conjunta do rendimento de carcaccedila dos experimentos da progecircnie

que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg (Tabela 10) demonstrou-se que a

presenccedila de Arg na dieta promove maior deposiccedilatildeo muscular na coxa e menor acuacutemulo

de gordura abdominal na carcaccedila

Y = 322863-000316200X+000000424975X2 R2 = 030

1672

Y = 700017+000293620X R2 = 045 Y = 357918+000203737X R2 = 027

Y = 113323-000072978X R2 = 085 Y = 311542-000163610X R2 = 021

Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

Arginina dig () Arginina dig ()

78

Tabela 10 ndash Meacutedias de percentagem de carcaccedila (CARC) percentagem de peito (PEITO) percentagem de coxa (COXA) percentagem de asa (ASA) percentagem de gordura abdominal (GORDURA) das progecircnies suplementadas ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

CARC PEITO COXA ASA GORDURAProgecircnie

(ssuplementaccedilatildeo) 6951plusmn016 3605plusmn017 3023plusmn014b 1121plusmn007 307plusmn007ordf

Progecircnie (suplementada) 7088plusmn017 3640plusmn020 3066plusmn017ordf 1111plusmn008 285plusmn007b

CV () 014 017 015 007 006 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Com relaccedilatildeo aos paracircmetros oacutesseos dos frangos de corte que receberam dietas

sem suplementaccedilatildeo de Arg (Tabela 11) apenas o diacircmetro de tiacutebia aos sete dias de

idade foi afetado de forma quadraacutetica (Plt005) pela suplementaccedilatildeo das matrizes a

partir do niacutevel 1196 de Arg (Figura 7) demonstrando assim que inclusotildees de Arg

acima da exigecircncia promove a melhora dessa caracteriacutestica Segundo Wu amp Morris

(1998) a suplementaccedilatildeo de Arg em niacuteveis elevados promove aumento na atividade da

arginase renal eleva os niacuteveis de ornitina que participa da biossiacutentese das poliaminas

envolvidas no processo de multiplicaccedilatildeo celular melhorando desta forma o suporte

oacutesseo Alba-Roth et al (1988) estudando o papel da arginina sobre a secreccedilatildeo do

hormocircnio do crescimento em indiviacuteduos normais verificaram aumento na concentraccedilatildeo

plasmaacutetica de GH quando esse aminoaacutecido foi administrado Uma vez secretado pela

hipoacutefise anterior para a circulaccedilatildeo o GH age diretamente no seu proacuteprio receptor e

indiretamente via IGF-I e II nos tecidos perifeacutericos Um dos efeitos mais conhecidos

do GH ocorre no disco epifisaacuterio em que atua estimulando a siacutentese de IGF-I o qual

atua paracrinamente induzindo mitogecircnese o que resulta no crescimento dos ossos

longos (Isaksson et al 1987)

Para os paracircmetros morfoloacutegicos dos ossos dos frangos que receberam dietas

contendo suplementaccedilatildeo de Arg verifica-se efeito linear crescente (Plt005) dos niacuteveis

de arginina para o comprimento e diacircmetro do fecircmur e da tiacutebia O mesmo

comportamento foi observado para o iacutendice de Seedor medida indireta da densidade

oacutessea para ambos os ossos aos 7 dias de idade (Figura 8)

79

Tabela 11 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Fecircmur Tiacutebia Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arg na dieta materna

()

7 dias

0943 2930plusmn034 286plusmn008 2803plusmn027 4154plusmn047 271plusmn005 2925plusmn078 1093 2929plusmn042 293plusmn008 2990plusmn123 4162plusmn062 265plusmn005 2945plusmn096 1243 2911plusmn031 283plusmn008 2603plusmn078 4175plusmn042 258plusmn004 2733plusmn063 1393 2912plusmn046 295plusmn008 2920plusmn086 4172plusmn062 273plusmn003 3008plusmn117 1543 2983plusmn031 293plusmn009 2877plusmn068 4269plusmn039 275plusmn002 2897plusmn038

CV 313 690 712 306 377 701 Regressatildeo ns ns ns Ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- ----- ----- 081 -----

21 dias

0943 5001plusmn056 594plusmn019 10198plusmn294 7128plusmn141 526plusmn012 9621plusmn202 1093 5064plusmn036 632plusmn015 10928plusmn175 7197plusmn086 576plusmn008 10720plusmn182 1243 4937plusmn065 574plusmn013 9956plusmn396 6911plusmn094 514plusmn023 9899plusmn357 1393 5002plusmn062 569plusmn011 9822plusmn346 6912plusmn123 512plusmn009 9537plusmn341 1543 5035plusmn026 613plusmn020 11288plusmn337 7005plusmn135 535plusmn011 10928plusmn339

CV 252 657 747 411 635 711 Regressatildeo ns ns ns Ns ns ns R2 ----- ----- ----- ----- ----- -----

ns = natildeo significativo (Pgt005) 1 Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

80

Tabela 12 ndash Paracircmetros morfoloacutegicos do fecircmur e da tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Paracircmetros oacutesseos Fecircmur Tiacutebia

Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor Comprimento mm Diacircmetro mm Iacutendice de Seedor

Arginina () 7 dias 1300 3007plusmn042 309plusmn011 3194plusmn102 4260plusmn041 285plusmn012 3164plusmn122 1450 3022plusmn036 313plusmn007 3333plusmn098 4311plusmn055 293plusmn008 3202plusmn087 1600 3074plusmn023 321plusmn007 3435plusmn102 4352plusmn024 292plusmn004 3405plusmn101 1750 3098plusmn011 322plusmn007 3348plusmn089 4324plusmn044 293plusmn003 3315plusmn114 1900 3058plusmn015 322plusmn012 3540plusmn140 4350plusmn019 305plusmn005 3503plusmn108 CV 225 712 781 220 608 789 Regressatildeo Linear1 ns Linear2 Ns Linear3 Linear4 R2 023 ----- 020 ----- 030 045

21 dias 1300 1300 1450 1600 1750 553plusmn016 9974plusmn408 1450 5032plusmn031 595plusmn015 9973plusmn343 7122plusmn058 533plusmn019 9675plusmn313 1600 5062plusmn068 614plusmn009 10623plusmn306 7102plusmn041 566plusmn015 10453plusmn286 1750 5134plusmn043 597plusmn013 10024plusmn226 7341plusmn180 548plusmn007 9577plusmn168 1900 5111plusmn044 615plusmn013 10942plusmn185 7145plusmn064 562plusmn008 10751plusmn333 CV 231 567 732 333 619 757 Regressatildeo ns ns Linear5 Ns ns ns R2 ----- ----- 030 ----- ---- -----

NS = natildeo significativo 1 Y = 301662+000117500X 2 Y = 322856+000471280X 3 Y = 285333+0000799183X 4 Y = 315921+000526700X 5 Y = 983310+00149518X

255

26

265

27

275

28

0943 1093 1243 1393 1543

Arginina ()

Diacirc

met

ro d

a Tiacute

bia

(mm

)

Figura 7 - Diacircmetro de tiacutebia da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Os resultados encontrados para essa idade estatildeo de acordo com os encontrados

por Fernandes (2007) que encontrou efeito linear crescente para o iacutendice de Seedor

quando as aves foram alimentadas com Arg na dieta Aos 21 dias de idade apenas o

iacutendice de Seedor foi afetado de forma linear (Plt005) crescente com o aumento dos

niacuteveis de Arg (Figura 9) O comportamento positivo da suplementaccedilatildeo de arginina sobre

a morfologia do fecircmur e da tiacutebia pressupotildee melhor densidade desses ossos Segundo

Sekine et al (1994) os aminoaacutecidos no o crescimento transverso do osso e essa accedilatildeo

facilita a formaccedilatildeo da matriz e a calcificaccedilatildeo oacutessea

Aleacutem da accedilatildeo da Arg sobre os ossos indiretamente via IGF-I esta tambeacutem eacute

conhecida como precursor do oacutexido niacutetrico mecanismo pelo qual ela poderia exercer os

seus efeitos bioloacutegicos no crescimento oacutesseo Hukkanem et al (1999) sugerem que o

NO pode participar da regulaccedilatildeo do turnover de condroacutecitos da placa de crescimento

298

30

302

304

306

308

31

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Com

prim

ento

- Fecirc

mur

(mm

)

30531

31532

32533

33534

34535

355

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - F

ecircmur

Y = 301662+000117500X R2 = 023 Y = 322856+000471280X R2 = 020

Y = 270240-0000584291X+000000115345X2 R2 = 081

Arginina dig ()

82

26

27

28

29

3

31

32

33

34

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Diacirc

met

ro -

Tiacutebi

a (m

m)

30305

31315

32325

33335

34345

35

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig ()

Iacutendi

ce S

eedo

r - T

iacutebia

Figura 8 - Comprimento diacircmetro e iacutendice de Seedor de fecircmur e tiacutebia da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 7 dias de idade Os paracircmetros oacutesseos da progecircnie suplementada ou natildeo com Arg avaliados em

conjunto mostraram que a suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg melhorou o comprimento do

fecircmur e a espessura da tiacutebia Este resultado pode contribuir para melhorar a qualidade

dos ossos dos frangos uma vez que esse eacute um dos maiores problemas enfrentados na

atualidade na avicultura comercial

Tabela 13 ndash Meacutedias de comprimento do fecircmur (FC) espessura do fecircmur (FE) iacutendice de seedor do fecircmur (FSEE) comprimento da tiacutebia (TC) espessura da tiacutebia (TE) iacutendice de seedor da tiacutebia (TSEE) dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

FC (mm)

FE (mm) FSEE TC

(mm) TE

(mm) TSEE

7 dias Progecircnie

(ssuplementaccedilatildeo)

2933plusmn016

290plusmn003

2838plusmn042

4186plusmn023

268plusmn002

2902plusmn038

Progecircnie (suplementada)

3052plusmn013

317plusmn004

3369plusmn049

4319plusmn017

293plusmn003

3317plusmn050

CV () 014 004 042 021 0026 043 21 dias

Progecircnie (ssuplementaccedil

atildeo)

5008plusmn023b

596plusmn008

10438plusmn170

7031plusmn053

533plusmn007b

10141plusmn162

Progecircnie (suplementada)

5079plusmn021ordf

607plusmn006

10282plusmn150

7157plusmn044

552plusmn006ordf

10086plusmn154

CV () 016 007 140 048 006 136 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

Y = 315921+000526700X R2 = 045 Y = 285333+0000799183X R2 = 030

83

96597

97598

98599

995100

1005101

1015102

1300 1450 1600 1750 1900

Arginina dig

Iacutendi

ce d

e Se

edor

- Fecirc

mur

Figura 9 - Iacutendice de Seedor do fecircmur da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg aos 21 dias de idade

Conclusatildeo

De acordo com os resultados observados conclui-se que os niacuteveis dieteacuteticos de

Arg na dieta das matrizes de corte foram suficientes para melhorar o desempenho da

progecircnie somente na fase inicial de crescimento (1-21 dias de idade) Quando a dieta da

progecircnie tambeacutem foi suplementada com Arg os paracircmetros de desempenho

rendimento de carcaccedila e qualidade oacutessea satildeo melhorados em ambas as fases de criaccedilatildeo

(1-21 dias e 22 a 42 dias de idade) com melhorias imprescindiacuteveis para a qualidade de

carne como a reduccedilatildeo da gordura abdominal

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V - Efeito da suplementaccedilatildeo de arginina em matrizes de corte sobre a resposta imune humoral e celular da progecircnie

Resumo ndash O experimento foi conduzido para determinar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina (Arg) na dieta de matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie suplementada ou natildeo com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg A progecircnie foi alojada de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arg incluiacutedos na dieta da matriz de 0 a 600 de Arg digestiacutevel acima da exigecircncia e seis repeticcedilotildees totalizando 30 unidades experimentais A resposta imune humoral foi avaliada pela titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle No 7ordm dia de idade antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm apoacutes a vacinaccedilatildeo foram coletadas amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo e o soro foi avaliado atraveacutes de kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) A resposta imune celular foi medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) aos 35 dias de idade O peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (bolsa cloacal baccedilo e timo) foram calculados como porcentagem do peso corporal vivo A suplementaccedilatildeo das matrizes de corte natildeo influenciou (Pgt005) o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo A resposta imune celular foi afetada de forma quadraacutetica (Plt005) pelos niacuteveis de Arg Esta resposta foi observada somente 12 horas apoacutes a inoculaccedilatildeo com maior espessamento do espaccedilo interdigital no niacutevel de 1574 de Arg na progecircnie suplementadaO tiacutetulo de anticorpos vacinais contra Doenccedila de Newcastle na progecircnie natildeo suplementada natildeo foi influenciado (Pgt005) pela dieta da matriz A progecircnie alimentada com dietas suplementadas mostrou uma diminuiccedilatildeo linear no titulo de anticorpos (Plt005) aos sete dias de idade e um efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade com 1674 o melhor niacutevel de suplementaccedilatildeo Este estudo concluiu que a suplementaccedilatildeo de arginina na dieta das matrizes natildeo eacute suficiente para melhorar a resposta imune humoral e celular sendo necessaacuterio suplementar com Arg a dieta da progecircnie

Palavra-chave arginina ELISA fitohemaglutinina sistema imune

V - Effect of arginine supplementation in broiler breeder hens diet on

humoral and cellular immunity response of the progeny

Abstract ndash An experiment was carried out to determine the effects of arginine supplementation in broiler breeder henrsquos diet on humoral and cellular immune responses in progeny fed with or without an Arg supplemented diet The progeny was housed according to the henrsquos treatments A complete randomized design used five levels of digestible L-Arg from 0 to 600 above of the required levels and was performed in six replicates totaling 30 experimental units Humoral immune response was measured as antibody titers for the Newcastle Disease vaccine On the 7th and 14th days of age before the vaccination and on the 21th 28th and 35th days of age after vaccination samples of blood and serum from two birds per pen were evaluated using a commercial ELISA kit (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) Cell-mediated immune response was assessed by the cutaneous basophil phytohemagglutinin (PHA) hypersensitivity test at 35 days of age The percentage ratio of lymphoid organs (bursa of Fabricius spleen and thymus) was calculated as percentage of live body weight The Arg supplemented diet did not influence (Pgt005) in the relative weight of the progeny lymphoid organs The cellular immune response was quadractily affected (Plt005) by the Arg supplementation This response was only observed 12 hours after the phytohemaglutinin-P injection with a higher inter-digital thickness observed with the 1574 level of Arg supplementation The antibody titers for the Newcastle Disease vaccine in the non-supplemented progeny were not influenced by diet The progeny fed with the arginine-supplemented diet showed a linear decrease (Plt005) in the antibody titers at 7 days old and a quadratic effect (Plt005) at 28 days old with the 1674 level being considered the best for this parameter This study concluded that the arginine supplementation in the broiler breeder henrsquos diet is not sufficient to improve humoral and cellular immune responses

Key words arginine ELISA phytohemagglutinin immune system

91

Introduccedilatildeo

A nutriccedilatildeo da matriz afeta o desempenho dos pintos (Uni amp Ferket 2004)

Muitos desafios de agentes patogecircnicos e vacinais acontecem nos primeiros dias de

vida portanto a necessidade da matriz em nutrientes especiacuteficos com funccedilatildeo

imunomoduladora assume importante papel na transferecircncia de imunidade materna e na

resposta imune dos pintos O sistema imune das aves difere dos mamiacuteferos em algumas

caracteriacutesticas particularmente nos aspectos de estrutura e de diferenciaccedilatildeo dos oacutergatildeos

linfoides (Jeurissen et al 1994) cujo desenvolvimento se inicia durante a vida

embrionaacuteria e se prolonga apoacutes a eclosatildeo ou nascimento

As uacuteltimas horas de incubaccedilatildeo e os primeiros dias de vida poacutes-eclosatildeo satildeo

fundamentais para que este desenvolvimento se complete Somente apoacutes a segunda

semana de vida a ave seraacute capaz de produzir suas proacuteprias imunoglobulinas Ateacute laacute a

imunidade herdada da matildee pela absorccedilatildeo das imunoglobulinas presentes no ovo eacute o

uacutenico mecanismo de defesa do neonato contra as agressotildees do meio externo apoacutes a

eclosatildeo (Maiorka et al 2006)

Os aminoaacutecidos aleacutem de serem biomoleacuteculas constituintes de proteiacutenas e

peptiacutedeos em todos os organismos vivos satildeo precursores de muitos compostos

nitrogenados que possuem importantes funccedilotildees fisioloacutegicas A arginina (Arg) eacute

considerada um aminoaacutecido essencial para aves sobretudo na fase inicial por que o

ciclo bioquiacutemico da ureia natildeo eacute funcional em aves Assim estas natildeo podem sintetizar

Arg e satildeo portanto dependentes do fornecimento deste aminoaacutecido nas dietas Dentre

as espeacutecies animais estudadas as aves tecircm a mais alta exigecircncia de Arg (Ball et al

2007) que se deve tambeacutem agrave alta taxa de deposiccedilatildeo proteica pelo raacutepido crescimento

das atuais linhagens de corte e o antagonismo com a Lys

A Arg eacute necessaacuteria para siacutentese de vaacuterias compostos tais como ornitina

poliaminas prolina creatina de proteiacutenas oacutexido niacutetrico (NO) e citrulina aleacutem de

92

glutamato e agmatina em mamiacuteferos A Arg eacute tambeacutem considerada um potente

secretagogo aumentando a liberaccedilatildeo na corrente sanguiacutenea da insulina hormocircnio do

crescimento (GH) e fator de crescimento semelhante agrave insulina (IGF-I) (Newsholme et

al 2005) Esta accedilatildeo eacute em consequecircncia da raacutepida despolarizaccedilatildeo da membrana

plasmaacutetica ligada ao transporte de aminoaacutecidos com a cadeia lateral positiva

De acordo com Le Flocrsquoh et al (2004) os animais estimulados

imunologicamente podem ter suas necessidades de Arg aumentadas Duas rotas do

metabolismo da Arg satildeo identificadas e conhecidas por ter efeitos imunomodulatoacuterios

diretos A primeira na qual a Arg eacute convertida a ornitina gerando poliaminas que tecircm

papel chave na divisatildeo celular siacutentese de DNA e regulaccedilatildeo do ciclo celular A segunda

corresponde agrave siacutentese do NO induzida por vaacuterios de estiacutemulos inflamatoacuterios como as

endotoxinas bacterianas e as citocinas Essa rota eacute essencial para a atividade citotoacutexica

de macroacutefagos O NO tambeacutem estimula a vasodilataccedilatildeo local e favorece ainda a

reparaccedilatildeo tecidual (Bredt amp Snyder 1994)

Com este trabalho objetivou-se avaliar o efeito da suplementaccedilatildeo de Arginina na

dieta das matrizes de corte sobre a resposta imune celular e humoral da progecircnie

suplementadas ou natildeo

Material e Meacutetodos

Foram realizados trecircs experimentos um utilizando dietas suplementadas com L-

Arginina para as matrizes para obtenccedilatildeo da progecircnie e dois com a suplementaccedilatildeo ou natildeo

da dieta da progecircnie

Para obtenccedilatildeo da progecircnie durante a 31ordf semana foram armazenados todos os

ovos postos para a incubaccedilatildeo Foram obtidos cerca de 265 ovos por tratamento

totalizando 1325 ovos os quais foram transportados ateacute um incubatoacuterio comercial onde

foram incubados Apoacutes o nascimento os pintinhos foram selecionados e transportados

para a Fazenda Experimental de Iguatemi na Universidade Estadual de Maringaacute

Experimento 1 ndash Progecircnie sem suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Iguatemi da

Universidade Estadual de Maringaacute ndash UEM

Foram utilizados 1050 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg

com peso meacutedio inicial de 4122 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com

93

dietas suplementadas com niacuteveis crescentes de L-Arginina As aves foram alojadas em

um galpatildeo convencional de 30 m de comprimento e 8 m de largura dividido em boxes

de 63 m2 com cobertura de telha de barro piso de concreto e paredes laterais de

alvenaria com 030 cm de altura completadas com tela de arame ateacute o telhado providas

de cortinas laterais Foi utilizada cama do tipo palha de arroz sobre o piso

Os pintos foram alojados de acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes

em um delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-

Arginina incluiacutedos na dieta materna (0 150 300 450 e 600 mgkg da dieta materna)

que equivaleram aos niacuteveis de 0 9431093 12431393 e 1 543 de Arg

digestiacutevel com seis repeticcedilotildees com 35 aves cada totalizando 30 unidades experimentais

Na fase inicial foram utilizados comedouros e bebedouros infantis ateacute o quinto

dia de idade sendo estes substituiacutedos gradativamente pelos comedouros tubulares e

bebedouros automaacuteticos do tipo pendular Em cada boxe foram utilizados um ciacuterculo de

proteccedilatildeo e uma campacircnula como fonte de aquecimento para os pintos Foi adotado um

programa de luz contiacutenuo durante os primeiros dez dias e o restante do periacuteodo

experimental com 23 horas de luzdia A raccedilatildeo e a aacutegua foram fornecidas ldquoad libitumrdquo

durante todo o periacuteodo experimental

A mortalidade foi registrada e as aves e as sobras de raccedilatildeo do boxe foram pesadas

ao mesmo tempo para ajustar o consumo de raccedilatildeo e a conversatildeo alimentar

O programa nutricional utilizado foi dividido em duas fases uma inicial (1 a 21

dias de idade) e outra de crescimento e final (22 a 42 dias de idade) (Tabela 1) As

dietas experimentais agrave base de milho e farelo de soja foram formuladas de acordo com

os valores de composiccedilatildeo quiacutemica dos alimentos e recomendaccedilotildees nutricionais de

Rostagno et al (2005) As aves receberam uma uacutenica raccedilatildeo sem suplementaccedilatildeo de

arginina para verificar apenas o efeito da suplementaccedilatildeo da matriz sobre o desempenho

da progecircnie

94

Tabela 2 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie natildeo suplementada proveniente de matrizes de corte suplementadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Ingredientes 1 ndash 21 dias 22 ndash 42 dias Milho gratildeo 6456 6567 Farelo de soja 45 3007 2695 Fosfato bicaacutelcico 185 149 Calcaacuterio 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 000 Inerte (caulin) 070 070 Oacuteleo de soja 019 320 Sal comum 030 030 Dl-Metionina 98 035 028 L-Lisina HCl 78 045 037 L-Treonina 98 018 012 L-Triptofano 98 002 000 L-Arginina 99 000 000 Suplemento mineral1 005 005 Supl Vitamiacutenico23 010 010 Total 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 18500 EMA (kcalkg) 2947 3170 Met + Cis dig () 0890 0790 Lisina dig () 1240 1100 Triptofano dig () 0230 0193 Treonina dig () 0810 0710 Arginina dig () 130 1150 Caacutelcio () 0870 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0380 Soacutedio () 0270 0157 Cloro () 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

3 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

95

Experimento 2 ndash Progecircnie com suplementaccedilatildeo de Arginina na dieta

Foram utilizados 960 pintos de um dia de idade machos da linhagem Rossreg com

peso meacutedio inicial de 4152 g provenientes de matrizes de corte alimentadas com dietas

suplementadas com niacuteveis crescentes de L- Arginina Os pintos foram alojados de

acordo com os tratamentos recebidos pelas matrizes atraveacutes de um delineamento

experimental inteiramente casualizado com cinco niacuteveis de L-Arginina incluiacutedos na

dieta materna de 0 a 600 mgkg da dieta de Arg digestiacutevel acima da recomendaccedilatildeo dos

frangos de corte e seis repeticcedilotildees com 32 aves cada totalizando 30 unidades

experimentais

O manejo realizado nesse experimento foi conduzido conforme descrito no

experimento anterior com diferenccedila com relaccedilatildeo ao tipo de dieta utilizada

Para obtenccedilatildeo dos niacuteveis crescentes de arginina suplementar foi adicionado L-

Arginina de 0 a 600 mgkg da dieta acima da exigecircncia dos frangos de corte agrave raccedilatildeo

basal inicial em substituiccedilatildeo ao inerte Os niacuteveis dieteacuteticos na fase inicial

corresponderam a 1300 1450 1600 1750 e 1900 de arginina digestiacutevel (Tabela

2) A partir dos 22 dias de idade os niacuteveis dieteacuteticos corresponderam a 1150 1300

1450 1600 e 1750 de Arg digestiacutevel (Tabela 3)

96

Tabela 3 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (1-21 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1300 1450 1600 1750 1900 Milho gratildeo 6456 6456 6456 6456 6457 Farelo de soja 45 3007 3007 3007 3007 3007 Fosfato bicaacutelcico 185 185 185 185 185 Calcaacuterio 077 077 077 077 077 Bicarbonato de Soacutedio 041 041 041 041 041 Oacuteleo de soja 019 019 019 019 019 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 035 035 035 035 035 L-Lisina HCl 78 045 045 045 045 045 L-Treonina 98 018 018 018 018 018 L-Triptofano 98 002 002 002 002 002 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 10000 10000 10000 Valores calculados PB () 2000 2000 2000 2000 2000 EMA (kcalkg) 2947 2947 2947 2947 2947 Met + Cis dig () 0890 0890 0890 0890 0890 Lisina dig () 1240 1240 1240 1240 1240 Triptofano dig () 0230 0230 0230 0230 0230 Treonina dig () 0810 0810 0810 0810 0810 Arginina dig () 130 145 160 175 190 Caacutelcio () 0870 0870 0870 0870 0870 Foacutesforo disponiacutevel() 0450 0450 0450 0450 0450 Soacutedio () 0270 0270 0270 0270 0270 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Inicial reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 7000000 UI Vit D3 2200000 UI VitE

11000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 2000 mg Vit B2 5000 mg Vit B12 12000 mcg Vit B6 3000 mg Niacina 35000 mg Aacutecido Pantotecircnico 13000 mg Aacutecido Foacutelico 800 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000g

97

Tabela 4 - Composiccedilatildeo percentual e calculada das raccedilotildees experimentais da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg (22-42 dias)

Niacuteveis de Arginina Digestiacutevel () Ingredientes 1150 1300 1450 1600 1750

Milho gratildeo 6567 6567 6567 6567 6567 Farelo de soja 45 2695 2695 2695 2695 2695 Fosfato bicaacutelcico 149 149 149 149 149 Calcaacuterio 077 077 077 077 075 Oacuteleo de soja 320 320 320 320 320 Sal comum 030 030 030 030 030 Inerte (caulin) 070 055 040 025 010 Dl-Metionina 98 028 028 028 028 028 L-Lisina HCl 78 037 037 037 037 037 L-Treonina 98 012 012 012 012 012 L-Arginina 99 000 015 030 045 060 Suplemento mineral1 005 005 005 005 005 Supl vitamiacutenico2 010 010 010 010 010 Total 1000 1000 1000 1000 1000 Valores calculados PB () 1850 1850 1850 1850 1850 EMA (kcalkg) 3170 3170 3170 3170 3170 Met + Cis dig () 0790 0790 0790 0790 0790 Lisina dig () 1100 1100 1100 1100 1100 Triptofano dig () 0193 0193 0193 0193 0193 Treonina dig () 0710 0710 0710 0710 0710 Arginina dig () 0150 1300 1450 1600 1750 Caacutelcio () 0770 0770 0770 0770 0770 Foacutesforo disponiacutevel() 0380 0380 0380 0380 0380 Soacutedio () 0157 0157 0157 0157 0157 Cloro () 0214 0214 0214 0214 0214 1 Suplemento mineral reg (Conteuacutedo por kg de premix) Ferro 100000 mg Cobre 16000 mg Iodo 2400 mg Zinco

100000 mg Manganecircs 140000 mg Selecircnio 400 mg Veiacuteculo qsp 1000 g 2 Suplemento Vitamiacutenico Crescimento reg (Conteuacutedo por kg de premix) Vit A 6000000 UI Vit D3 2000000 UI

VitE 10000 mg Vit K3 1600 mg Vit B1 1400 mg Vit B2 4000 mg Vit B12 10000 mcg Vit B6 2000 mg Niacina 30000 mg Aacutecido Pantotecircnico 11000 mg Aacutecido Foacutelico 600 mg Antioxidante 100000 mg Veiacuteculo qsp 1000 g

Colheita de Sangue e Anaacutelise de Tiacutetulos vacinais

No 7ordm dia de vida antes da vacinaccedilatildeo e no 14ordm 21ordm 28ordm e no 35ordm foram coletadas

amostras de sangue de duas aves por repeticcedilatildeo As aves foram vacinadas contra a

doenccedila de New Castle (Fort-Dodgereg) via ocular na dose de 003 mL por ave aos sete e

21 dias de idade A venopunccedilatildeo foi realizada mediante contenccedilatildeo fiacutesica manual dos

98

animais preferencialmente na veia jugular direita com seringa de 3 mL e agulha 13x45

e uma quantia de sangue coletada em torno de 1 do peso corporal dos animais O

sangue foi acondicionado em tubos de vidro identificados sem anticoagulante para

obtenccedilatildeo de soro sanguiacuteneo No soro foi avaliada a titulaccedilatildeo de anticorpos vacinais

contra o viacuterus de Doenccedila Newcastle pelo teste imunoenzimaacutetico (ELISA-teste) As

anaacutelises foram processadas em kit comercial ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent

Assay) do Laboratoacuterio Idexxreg e os dados obtidos foram expressos em absorbacircncia Os

dados de titulaccedilatildeo de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Anaacutelise Histomorfomeacutetrica

No 7ordm e 21ordm dia de idade o timo a bolsa cloacal o baccedilo e o fiacutegado de duas aves

por repeticcedilatildeo foram coletados totalizando doze aves por tratamento Para a realizaccedilatildeo

dessa coleta as aves foram submetidas ao atordoamento por choque e posterior sangria

Apoacutes o sacrifiacutecio as aves foram pesadas individualmente e as carcaccedilas dessecadas para

remoccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides (Timo Baccedilo e Bolsa de Fabricius) O peso dos oacutergatildeos

linfoides foi obtido imediatamente apoacutes a dessecaccedilatildeo e remoccedilatildeo dos tecidos exoacutegenos

Os oacutergatildeos coletados foram pesados em balanccedila de precisatildeo e o peso da ave foi

devidamente anotado

O peso relativo de cada oacutergatildeo foi obtido pela foacutermula

Peso relativo = (peso oacutergatildeopeso vivo) x 100

Para a medida histomorfomeacutetrica dos foliacuteculos linfoides as bolsas cloacais e o

fiacutegado foram acondicionadas em frascos contendo soluccedilatildeo de formol tamponado a 10

(De Tolosa et al 2003) com finalidade de manter a integridade dos tecidos apoacutes a

morte preservando a arquitetura celular As peccedilas foram incluiacutedas em parafina e levadas

ao microacutetomo rotativo para a realizaccedilatildeo dos cortes transversais no centro do oacutergatildeo com

sete microcircmetros de espessura e corados pelo meacutetodo da hematoxilina e eosina (HE) As

lacircminas foram escaneadas usando-se um ldquoscaner HP ScanJet II v25rdquo sendo o

ldquosoftwarerdquo utilizado para o tratamento das imagens o ldquoPaint Shop Pro v50rdquo A

imagem foi digitalizada brilho (variaacutevel entre 125 e 145) contraste 185 e escala de

800 As imagens foram gravadas com extensatildeo jpg e levadas ao analisador de

imagens Para a leitura das imagens foi utilizado um analisador de imagem

computadorizado IMAGE PROPLUS 52 da Miacutedia Cibertecnics Foi mensurada a

altura de trecircs dobras do tecido linfoide de cada repeticcedilatildeo (12 aves por tratamento) e

destes valores foi obtida a meacutedia

99

Nas amostras de fiacutegado foi analisada a presenccedila de aglomerados linfoides As

lacircminas com porccedilotildees do fiacutegado foram analisadas em toda sua extensatildeo e os

aglomerados linfoides foram quantificados atraveacutes de microscopia de luz com aumento

de 10X (Olympus BH2 Olympus America INC NY USA)

Fitohemaglutinina (PHA)

Aos 35 dias de idade duas aves por repeticcedilatildeo totalizando 12 aves por tratamento

foram marcadas com anilhas numeradas e utilizadas para avaliar a imunidade mediada

por ceacutelulas in vivo (Corrier amp DeLoach 1990) Cada ave foi inoculada

intradermicamente no espaccedilo interdigital entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata direita com 01

mL de uma soluccedilatildeo fitohemaglutinina PHA-Mreg (1057601 - Invitrogen) Como controle

negativo 01 mL de soro fisioloacutegico esteacuteril foi inoculado entre o 3ordm e 4ordm dedo da pata

esquerda O espessamento da pele de ambas as patas foi aferido em miliacutemetros

utilizando-se um paquiacutemetro digital antes da inoculaccedilatildeo e apoacutes trecircs seis 12 e 24 horas

apoacutes a inoculaccedilatildeo O caacutelculo (Corrier amp DeLoach 1990) apresentou-se da seguinte

forma Reaccedilatildeo = resposta a fitohemaglutinina ndash resposta do controle na qual a resposta

a fitohemaglutinina eacute medida pela espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo menos

a espessura no tempo zero (antes da inoculaccedilatildeo) A resposta do controle eacute medida pela

espessura da pele apoacutes o tempo de inoculaccedilatildeo (Soro) menos a espessura no tempo zero

(antes da inoculaccedilatildeo)

Avaliaccedilatildeo da Atividade Fagociacutetica de Macroacutefagos

Para avaliaccedilatildeo da atividade fagociacutetica de macroacutefagos foram utilizadas duas aves

por repeticcedilatildeo totalizando quatro aves por tratamento As aves foram inoculadas no 35ordm

dia de vida atraveacutes de injeccedilatildeo intra-abdominal de Sephadex G-50reg (Sigma) a 3 (10

mL100g de peso vivo) (Qureshi et al 1986 Gore amp Qureshi 1997 Konjufca 2004)

Utilizaram-se para esse procedimento cateteres intravasculares G-14 Apoacutes 42

horas as aves foram submetidas a atordoamento por eletronarcose e sacrificadas atraveacutes

de desligamento cervical Foram lavadas (detergente neutro) e sanitizadas (aacutelcool 70)

As aves foram transportadas ao laboratoacuterio onde se procedeu a abertura da cavidade

abdominal que foi posteriormente lavada com 20 mL de soluccedilatildeo de PBS esteacuteril

heparinizada contendo 05 UIL (Liqueminereg 25000 UI5mL ndash Roche)

Coletaram-se aproximadamente 15 mL de liacutequido abdominal com auxiacutelio de

pipetas Pasteur que foi imediatamente acondicionado em tubos Falcon em banho de

100

gelo O material foi centrifugado a 1500 rpm10 minutos sendo o ldquopelletrdquo

ressuspendido em 2 mL de meio RPMI 1640reg (Sigma) Adicionou-se 150 μL dessa

suspensatildeo a cada well da placa de cultura (24 poccedilos) contendo lamiacutenula de 13 mm de

diacircmetro Incubou-se a temperatura ambiente por uma hora Lavou-se a placa com PBS

esteacuteril gelado para remover as ceacutelulas natildeo aderentes Em seguida adicionou-se 150 μL

de suspensatildeo a 3 de eritroacutecitos de carneiros em meio RPMI 1640reg (Sigma)

incubando-se em temperatura ambiente em concentraccedilatildeo de 5 de gaacutes carbocircnico por

uma hora Lavou-se com PBS esteacuteril gelado para remover os eritroacutecitos que natildeo

aderiram Em seguida realizou-se a coloraccedilatildeo utilizando-se kit comercial (Panoacutetico

Raacutepido LBreg - Laborclin)

Apoacutes 24 horas as lacircminas foram montadas utilizando-se Permountreg Foram

contados em cada lamiacutenula 300 macroacutefagos e verificado o nuacutemero destas ceacutelulas que

continham hemaacuteceas fagocitadas A atividade fagociacutetica foi calculada considerando-se o

nuacutemero de macroacutefagos contendo hemaacuteceas fagocitadas dividido pelo nuacutemero total de

macroacutefagos contados

Anaacutelise estatiacutestica

Experimento 1

Os dados obtidos de cada paracircmetro foram desdobrados em polinocircmios ortogonais

de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees

utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg adicionada na dieta materna i 12345 (1= 0943 2= 1093 3= 1243

4= 1393 e 5= 1543)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

101

Experimento 2

Os dados obtidos de cada paracircmetro que apresentaram distribuiccedilatildeo normal foram

desdobrados em polinocircmios ortogonais de forma a permitir a anaacutelise de variacircncia e

regressatildeo de acordo com suas distribuiccedilotildees utilizando o programa estatiacutestico SAEGreg

Os dados foram analisados segundo o modelo estatiacutestico

Yij = b0 + b1Ai + b2Ai + b3Ai + eij

em que

Yij observaccedilatildeo da variaacutevel dependente na unidade experimental j submetida ao niacutevel i

de Arg i 12345 (1= 1300 2= 1450 3= 1600 4= 1750 e 5= 1900 no periacuteodo de

1 a 21 dias de idade 1= 1150 2= 1300 3= 1450 4= 1600 e 5= 1750 no periacuteodo de

1 a 42 dias de idade)

b0 constante

b1 b2 e b3 satildeo respectivamente coeficientes linear quadraacutetico e cuacutebico de regressatildeo da

variaacutevel dependente em funccedilatildeo dos niacuteveis de Arg

eij erro aleatoacuterio associado a cada observaccedilatildeo Yij

Os coeficientes de determinaccedilatildeo foram calculados como percentagem da soma

de quadrados do modelo em relaccedilatildeo agrave soma de quadrados total Os dados de Titulaccedilatildeo

de anticorpos avaliados por ELISA foram transformados em log10

Resultados e Discussatildeo

Os dados meacutedios dos pesos relativos de oacutergatildeos linfoides de frangos de corte

alimentados com dietas natildeo suplementadas estatildeo na Tabela 5 A suplementaccedilatildeo das

matrizes de corte natildeo influenciou o desenvolvimento dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie

natildeo suplementada com Arg (Pgt005) Da mesma maneira quando houve a

suplementaccedilatildeo dieteacutetica de Arg para a progecircnie tambeacutem natildeo foi verificado (Pgt005)

efeito sobre o peso relativo dos oacutergatildeos linfoides dessas aves (Tabela 6)

102

Tabela 5 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie natildeo suplementada provenientes de matrizes alimentadas com niacuteveis crescentes de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg das Matrizes () 7 dias 21 dias

0943 058plusmn003 054plusmn004 1093 055plusmn003 056plusmn005 1243 056plusmn003 057plusmn003 1393 052plusmn004 057plusmn004 1543 052plusmn003 051plusmn005 CV 1410 1840

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

0943 006plusmn0005 011plusmn001 1093 008plusmn0007 011plusmn001 1243 012plusmn0036 009plusmn001 1393 007plusmn0007 010plusmn001 1543 009plusmn0007 010plusmn001 CV 4968 2463

Regressatildeo ns ns Baccedilo()

0943 015plusmn001 024plusmn001 1093 017plusmn001 022plusmn002 1243 016plusmn001 021plusmn001 1393 015plusmn001 022plusmn003 1543 013plusmn001 021plusmn001 CV 1885 1868

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

O timo e a bolsa cloacal satildeo oacutergatildeos linfoides primaacuterios que representam siacutetios

de maturaccedilatildeo de linfoacutecitos T e B respectivamente Estes oacutergatildeos tecircm fundamental

importacircncia no periacuteodo poacutes-eclosatildeo poreacutem agrave medida que as aves se desenvolvem e se

aproximam da maturidade sexual sofrem involuccedilatildeo fisioloacutegica (Morgullis 2002)

No contexto do desenvolvimento e maturaccedilatildeo dos oacutergatildeos linfoides trabalhos

desenvolvidos com mamiacuteferos demonstram que as respostas imunes podem ser

influenciadas pela Arg dieteacutetica (Kennedy et al 1994 Kobayashi et al 1998 Lewis amp

Langkamp-Henken 2000) Experimentos desenvolvidos com animais jovens

demonstraram efeitos timotroacuteficos da suplementaccedilatildeo com L-arginina como o aumento

do peso do timo do nuacutemero e a reatividade funcional dos linfoacutecitos tiacutemicos Os efeitos

imunoestimulatoacuterios foram ainda mais expressivos em animais estressados ou

imunossupremidos

103

Tabela 6 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos pesos relativos () dos oacutergatildeos linfoides da progecircnie alimentadas com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg

Timo () Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias

1300 053plusmn005 056plusmn004 1450 057plusmn004 057plusmn003 1600 059plusmn004 059plusmn003 1750 051plusmn003 048plusmn005 1900 058plusmn004 053plusmn004 CV 1910 1790

Regressatildeo ns ns Bolsa Cloacal ()

1300 016plusmn0011 025plusmn002 1450 015plusmn0012 020plusmn001 1600 018plusmn0007 022plusmn002 1750 019plusmn0016 026plusmn003 1900 015plusmn0007 023plusmn001 CV 1621 2021

Regressatildeo ns ns Baccedilo ()

1300 007plusmn0009 008plusmn001 1450 009plusmn0008 010plusmn001 1600 008plusmn0006 009plusmn001 1750 008plusmn0005 011plusmn001 1900 007plusmn0007 010plusmn001 CV 2227 2151

Regressatildeo ns ns ns = natildeo significativo (Pgt005)

Para Kidd (2004) os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo de Arg foram

observados quando os niacuteveis empregados foram de 25 a 50 das exigecircncias

nutricionais estabelecidas Niacuteveis proacuteximos ao recomendado apesar de elevar o niacutevel de

Arg plasmaacutetica natildeo melhoraram a resposta imune humoral ou celular (Kidd 2004)

Ao contraacuterio dos resultados observados nesse experimento Jahanian (2009)

observou que animais na fase inicial com dietas suplementadas com Arg e com baixo

niacutevel proteico apresentaram aumento do peso relativo do timo indicando assim que a

Arg eacute necessaacuteria para a resposta oacutetima da imunidade celular

Quando se contrastam os dados do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides (Tabela 7)

verificou-se a influencia da suplementaccedilatildeo de Arg no peso da bolsa cloacal (Plt005) no

periacuteodo inicial de criaccedilatildeo Esse aumento eacute de grande importacircncia uma vez que a bolsa

cloacal eacute o principal siacutetio de maturaccedilatildeo dos linfoacutecitos B que satildeo essenciais ao sistema

imune das aves Na fase de 1 a 7 dias de idade esse incremento pode refletir a melhoria

104

das condiccedilotildees imunitaacuterias jaacute que nesse periacuteodo os desafios sanitaacuterios podem

comprometer todo desempenho dessa ave ateacute o final de sua criaccedilatildeo

Tabela 7 ndash Meacutedias e erro padratildeo do peso relativo dos oacutergatildeos linfoides () timo baccedilo e bolsa de cloacal dos experimentos realizados com progecircnie suplementada ou natildeo com dietas com niacuteveis crescentes de Arg aos 7 e 21 dias de idade

7 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada) 054plusmn001 015plusmn0005b 0085plusmn0008

Progecircnie (suplementada) 056plusmn002 017plusmn0006ordf 0079plusmn0003

CV () 002 0005 0006 21 dias Timo Bolsa cloacal Baccedilo

Progecircnie (natildeo suplementada)

055plusmn001 022plusmn0007 011plusmn0005

Progecircnie (suplementada)

054plusmn002 023plusmn0009 009plusmn0004

CV () 002 008 0004 abLetras diferentes nas colunas diferem entre si pelo teste de F

A anaacutelise histomorfomeacutetrica do fiacutegado natildeo mostrou influecircncia (Pgt005) das

dietas das matrizes nos aglomerados linfoides da progecircnie suplementada ou natildeo (Tabela

8) Da mesma maneira as dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal natildeo foram

influenciadas (Pgt005) pela suplementaccedilatildeo ou natildeo de Arg na dieta (Tabela 8)

Existe relaccedilatildeo direta entre o fiacutegado e a bolsa cloacal Nas aves os linfoacutecitos B

responsaacuteveis pela produccedilatildeo de anticorpos envolvidos na resposta imunoloacutegica humoral

satildeo produzidos no fiacutegado do embriatildeo no saco viteliacutenico e na medula oacutessea na fase

inicial da incubaccedilatildeo Apoacutes isso migram para a bolsa cloacal e sofrem amadurecimento

e diferenciaccedilatildeo por ateacute dez semanas Daiacute partem para colonizar outros oacutergatildeos como o

baccedilo e a glacircndula de Harder (Butcher amp Miles 2003) A bolsa cloacal eacute constituiacuteda de

linfoacutecitos incrustados em tecido epitelial cujas dobras se estendem no interior do

luacutemen onde se espalham os foliacuteculos linfoides Seus foliacuteculos contecircm mais de 90 de

ceacutelulas B (Tizard 1998)

105

Tabela 8 - Aglomerados linfoides e comprimento das dobras do tecido linfoide da bolsa cloacal (mm) da progecircnie suplementada ou natildeo provenientes de matrizes alimentadas com dietas com niacuteveis crescentes de Arg

Aglomerados Linfoacuteides Comprimento das dobras Progecircnie natildeo Suplementada Progecircnie natildeo Suplementada

Niacuteveis de Arg () 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 0943 105plusmn010 196plusmn041 1443plusmn097 3247plusmn198 1093 098plusmn028 137plusmn021 1394plusmn225 3066plusmn240 1243 077plusmn004 178plusmn029 1503plusmn060 3042plusmn109 1393 080plusmn015 170plusmn043 1449plusmn068 3112plusmn187 1543 096plusmn018 232plusmn037 1464plusmn149 3222plusmn195 CV() 4398 4708 563 915 Regressatildeo ns ns ns ns Progecircnie Suplementada Progecircnie Suplementada 7 dias 21 dias 7 dias 21 dias 1300 076plusmn010 168plusmn035 1936plusmn206 3535plusmn191 1450 049plusmn015 216plusmn041 1865plusmn022 4027plusmn1244 1600 072plusmn024 189plusmn022 2035plusmn064 3331plusmn036 1750 053plusmn005 192plusmn036 2195plusmn139 4487plusmn1540 1900 053plusmn012 213plusmn025 1905plusmn128 2562plusmn111 CV() 5807 4141 473 5359 Regressatildeo ns ns ns ns

Assim a progecircnie que recebeu dieta suplementada ou natildeo com Arg natildeo

apresentou produccedilatildeo de linfoacutecitos B aumentada nem a aacuterea de desenvolvimento e

diferenciaccedilatildeo dos linfoacutecitos B prejudicada ou melhorada pela Arg (Pgt005)

Na Tabela 9 estatildeo agraves meacutedias obtidas da resposta imune celular da progecircnie com

dieta suplementada medida pela injeccedilatildeo de fitohemaglutinina (PHA) para estiacutemulo de

proliferaccedilatildeo celular Dentro desse contexto observou-se que 12 horas apoacutes a injeccedilatildeo de

PHA foi possiacutevel verificar efeito quadraacutetico com aumento (Plt005) na resposta celular

das aves alimentadas com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg em que a maior

resposta foi obtida com 1574 de Arg dig (Figura 1)

Segundo Corrier amp DeLoach (1990) a aplicaccedilatildeo desse teste permite a raacutepida

avaliaccedilatildeo da competecircncia imunoloacutegica celular Os basoacutefilos ceacutelulas comumente

associadas a esses processos apresentam heparina e proteases na composiccedilatildeo de seus

gracircnulos agindo intensamente nos processos de hipersensibilidade Aleacutem disso

produzem citocinas cuja participaccedilatildeo estaacute ligada aos processos inflamatoacuterios (Abbas et

al 2007)

106

Tabela 9 ndash Meacutedia e erro padratildeo da reaccedilatildeo interdigital a fitohemaglutinina (mm) na progecircnie alimentada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Arginina 3 horas 6 horas 12 horas 24 horas

1300 1010plusmn0062 0793plusmn0041 0549plusmn0097 0506plusmn0036 1450 0853plusmn0077 0639plusmn0065 0631plusmn0051 0450plusmn0133 1600 0918plusmn0053 0738plusmn0040 0702plusmn0052 0543plusmn0065 1750 0797plusmn0074 0783plusmn0058 0597plusmn0061 0552plusmn0066 1900 0933plusmn0044 0777plusmn0038 0499plusmn0059 0453plusmn0062 CV 1715 1630 2724 3875 Regresatildeo ns ns Quadraacutetico1 ns R2 ----- ----- 093 -----

ns = Natildeo significativo 1 Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2 R2 = 093

Figura 1 - Reaccedilatildeo do espaccedilo interdigital apoacutes 12 horas da inoculaccedilatildeo de fitohemaglutinina da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

Quando se avaliou a atividade fagociacutetica dos macroacutefagos da progecircnie

suplementada e natildeo suplementada verificou-se que os niacuteveis crescentes de Arg na dieta

natildeo afetaram (Pgt005) essa funccedilatildeo (Tabela 10) Os macroacutefagos satildeo ceacutelulas do sistema

mononuclear fagocitaacuterio (McCorkle 1998) integrantes da imunidade inata das aves

importantes tambeacutem para a imunidade adaptativa (Abbas et al 2008) atuando nos

processos de defesa do organismo destruindo agentes estranhos e tambeacutem secretando

citocinas que atuam no processo inflamatoacuterio As principais funccedilotildees executadas por essa

ceacutelula satildeo a fagocitose destruiccedilatildeo de bacteacuterias (Qureshi et al 1986) secreccedilatildeo de

prostaglandinas e citocinas e apresentaccedilatildeo de antiacutegeno para desenvolvimento da

resposta imune celular (Abbas et al 2008)

Segundo Johaniam (2009) satildeo identificadas duas vias de accedilatildeo

imunomodulatoacuteria da Arg in vivo A primeira ocorre atraveacutes da accedilatildeo da arginase que

converte a Arg em ureia e ornitina Neste processo ocorre a produccedilatildeo de poliaminas

pela accedilatildeo da ornitina decarboxilase Esta rota da siacutentese de poliaminas pode ser o

Y = 0546023+0000928024X-000000169578X2R2 = 093

1574

107

caminho pelo qual a Arg aumenta a mitogecircnese dos linfoacutecitos (Klein amp Morris 1978)

A segunda via ocorre pela siacutentese de NO a partir da a partir da Arg pela accedilatildeo do oacutexido

niacutetrico sintetase resultando na formaccedilatildeo de oacutexido niacutetrico e citrulina Essa rota eacute

essencial para atividade citotoacutexica dos macroacutefagos

Tabela 10 ndash Meacutedias e erros padrotildees da atividade fagociacutetica dos macroacutefagos dos frangos de corte suplementados e natildeo suplementados com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg

Macroacutefagos com eritroacutecitosmacroacutefagos contados Arginina Progecircnie Suplementada

1300 1570plusmn529 1450 2030plusmn480 1600 1650plusmn359 1750 2150plusmn500 1900 1830plusmn250 CV 545 Regresatildeo ns ns = Natildeo significativo

Quando avaliados os tiacutetulos de anticorpos da progecircnie verificou-se que a

alimentaccedilatildeo das matrizes com dietas contendo niacuteveis crescentes de Arg natildeo influenciou

os tiacutetulos de anticorpos (Pgt005) da progecircnie natildeo suplementada (Tabela 11) Para as

aves suplementadas verifica-se um efeito linear decrescente (Plt005) aos sete dias de

idade e efeito quadraacutetico (Plt005) aos 28 dias de idade em que o niacutevel de 1674 de

Arg dig proporcionou o maior tiacutetulo de anticorpos (Tabela 12)

Os resultados observados na progecircnie suplementada mostraram-se compatiacuteveis

com as respostas das aves a campo nas quais inicialmente satildeo observados maiores

tiacutetulos de anticorpos decorrentes da imunidade materna seguido de uma queda que nas

condiccedilotildees experimentais eacute resultado da neutralizaccedilatildeo desses anticorpos pelos antiacutegenos

vacinais e por fim uma nova elevaccedilatildeo dos tiacutetulos

Este resultado concorda com o observado por outros autores Tayade et al

(2006) demonstraram que a resposta vacinal contra o viacuterus da doenccedila de Gumboro de

frangos suplementados com 2 de Arg foi 20 mais eficiente que a resposta induzida

apenas pela vacina A elevada resposta humoral e a proteccedilatildeo observada no grupo de

aves vacinado e com dieta suplementada com Arg segundo estes autores pode ser

atribuiacuteda ao nuacutemero de funccedilotildees imunorregulatoacuterias da Arg sobre o sistema

imunoloacutegico A Arg eacute necessaacuteria para a diferenciaccedilatildeo das ceacutelulas B e tambeacutem estaacute

envolvida na liberaccedilatildeo destas ceacutelulas da bolsa ou da medula oacutessea (De Jonge et al

108

2002) Ainda segundo Abdukalykova e Ruiz-Feria (2006) niacuteveis adicionais de Arg

podem acelerar a produccedilatildeo de anticorpos em frangos de corte

29

295

3

305

31

315

32

325

33

335

34

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s(7

dia

s)

0

05

1

15

2

25

3

130 145 160 175 190

Arginina ()

Tiacutetu

los

de A

ntic

orpo

s (2

8 di

as)

Figura 2 - Tiacutetulo de anticorpos da progecircnie suplementada com dietas contendo niacuteveis de Arg

1674

109

Tabela 11 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie natildeo suplementada em diferentes idades provenientes de matrizes alimentadas com dietas contendo niacuteveis de Arg

Niacuteveis de Arginina na dieta materna ()

Idade 0943 1093 1243 1393 1543 CV() Regressatildeo R2

07 dias 317plusmn099 323plusmn011 301plusmn008 324plusmn007 316plusmn015 831 ns -----

14 dias 262plusmn009 257plusmn003 242plusmn011 262plusmn011 257plusmn003 792 ns -----

21 dias 232plusmn010 247plusmn005 211plusmn010 228plusmn011 241plusmn007 941 ns -----

28 dias 241plusmn028 186plusmn014 248plusmn022 231plusmn019 214plusmn024 2378 ns -----

35 dias 275plusmn017 284plusmn015 271plusmn013 286plusmn020 291plusmn011 1361 ns -----

Tabela 12 ndash Meacutedias e erros padratildeo dos tiacutetulos de anticorpos da progecircnie alimentada com dietas suplementadas com niacuteveis de Arg em diferentes idades

Niacuteveis de Arginina ()

Idade 1300 1450 1600 1750 1900 CV() Regressatildeo R2

07 dias 331plusmn012 336plusmn010 301plusmn012 329plusmn009 299plusmn009 798 Linear1 012

14 dias 226plusmn008 218plusmn019 219plusmn023 207plusmn014 245plusmn009 1715 ns -----

21 dias 232plusmn007 239plusmn006 236plusmn006 246plusmn012 240plusmn009 829 ns -----

Niacuteveis de Arginina ()

1150 1300 1450 1600 1750 CV() Regressatildeo R2

28 dias 171plusmn035 279plusmn009 298plusmn006 278plusmn019 240plusmn012 1961 Quadraacutetica2 026

35 dias 268plusmn023 299plusmn012 296plusmn018 280plusmn023 313plusmn011 1535 ns -----

110

Conclusatildeo

As dietas suplementadas com Arg mostraram-se necessaacuterias para o oacutetimo

desempenho do sistema imune celular e humoral da progecircnie natildeo bastando somente agrave

suplementaccedilatildeo das matrizes de corte

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