Último paper – 19/11/2013Prof. Marcos Túlio Oliveira

TALEN

(Transcription activator-like effector nuclease)

• Clivagem sítio-específica de qualquer sequência nucleotídica do DNA de qualquer organismo

• Criação de knockouts, knock-ins e edições (reparo) de um único par de base

Gaj et al. (2013)TiBT 31: 397-405.

TALEN

• Repetição de módulos (33-35 aa) que reconhecem um único par de base através de dois resíduos hipervariáveis (RVD)

Gaj et al. (2013)TiBT 31: 397-405.

TALEN

• Edição por sistemas de reparo no núcleo

Gaj et al. (2013) TiBT 31: 397-405.

O genoma mitocondrial

McKinney & Oliveira (2013) GMB 36: 308-315.

Greaves & Taylor, 2006. IUBMB Life 58:143-51.

O genoma mitocondrial

centenas a milhares de cópias!

só 2 cópias!

O genoma mitocondrial

mitos

célula

Heteroplasmia e gargalo

A deleção comum do DNAmt

A deleção comum do DNAmt

A deleção comum do DNAmt

14459G>A – síndrome de Leigh

14459G>A – síndrome de Leigh

Conclusões

• DNAmt carregando mutações podem ser clivados especificamente por mitoTALENs.

• O nível de heteroplasmia é alterado no sentido de acumular DNAmt tipo selvagem.

• Células tratadas recuperam atividade da cadeia respiratória.

• Perspectivas muito promissoras para tratamento de doenças mitocondriais causadas por mutações no DNAmt.