TrichoXidil™ Material Técnico Identificação Grau: Farmacêutico ( ) Alimentício ( ) Cosmético (X) Reagente P.A. ( ) Uso: Interno ( ) Externo (X) Especificação Técnica / Denominação Botânica: Fitocomplexo formado por frações específicas de óleos essenciais. Equivalência: Não aplicável. Correção: Teor: Não aplicável. Umidade / perda por dessecação: Não aplicável. Avaliar o fator correspondente ao teor e/ou umidade de acordo com lote adquirido verificando no

certificado de análise e também sob avaliação farmacêutica da especificação e da prescrição.

Fórmula Molecular: Não aplicável. Peso Molecular: Não aplicável. DCB: Não aplicável. CAS: Não aplicável. INCI: Não aplicável. Sinonímia: Não aplicável. Aparência Física: Líquido viscoso e turvo de odor característico.

Composição: Frações de óleos essenciais.

Características Especiais

• Produto vegano

• Produto de origem natural

Aplicações

Propriedades:

• Estímulo do crescimento capilar.

• Conversão de fios da fase telógena para anágena. Indicações:

• Alopecia androgenética.

• Alopecia areata.

• Eflúvio telógeno.

• Eflúvio anágeno. Vias de Administração / Posologia ou Concentração: Uso tópico de 2,5% a 5%. Observações Gerais: Não aplicável.

Farmacologia Mecanismo de Ação: Estimula a expressão gênica dos fatores de crescimento IGF-1, KGF e VEGF, envolvidos na proliferação de células na matriz, da papila dérmica e sistema vascular, aumentando a quantidade de matriz extracelular na papila dérmica, mantendo o folículo na fase anágena.

IGF-1: Fator de Crescimento Insulínico 1 KGF: Fator de Crescimento de Queratinócito VEGF: Fator de Crescimento Endotelial Vascular

Efeitos Adversos: Não encontrado nas referências consultadas. Contraindicações / Precauções: Gestantes, lactantes e pacientes com sensibilidade aos óleos essenciais.

IGF-1

KGF

VEGF

Referências Científicas Estudo teve como objetivo avaliar a ação do fitocomplexo TrichoXidil™ em comparação ao minoxidil base no crescimento capilar, em voluntários diagnosticados com alopecia androgenética, por meio da análise dermatoscópica (com TrichoScan®), exames histológicos e quantificação de mRNA dos genes KGF, IGF-1 e VEGF. Estudo IN VITRO Citotoxicidade (Redução MTT) O teste de redução MTT ([3-(4,5-Dimetiltiazol-2-il)2,5-Difenil Brometo de Tetrazólio]) é usado para estimar o número de células viáveis em um screening inicial de fármacos. Sua interpretação serve de indicativo da atividade metabólica celular. Resultados: É possível observar (Figura 1) que o TrichoXidil™ não reduziu a viabilidade celular, sugerindo ausência de citotoxicidade nos fibroblastos testados. Além disso, de modo contrário, concentrações maiores indicaram capacidade de induzir proliferação nas células estudadas. Figura 1. Resultados da proliferação celular através do ensaio de redução do MTT após 24 horas de exposição com diferentes concentrações de TrichoXidil™. Antes do início dos testes, as células foram carenciadas de soro fetal bovino. (*) p<0,05 - significativo em relação ao controle.

Controle

TrichoXidil™

MTT - Fibroblastos

Via

bili

dade C

elu

lar

(%)

Expressão de mRNA (KGF, IGF-1 e VEGF) Através da reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR), quantificamos a expressão relativa de mRNA para os genes dos fatores de crescimento KGF, IGF-1 e VEGF. Resultados: É possível observar (Figura 2) o aumento da expressão de mRNA nos fibroblastos para cada um dos fatores de crescimento avaliados e um efeito sinérgico (Figura 3) com a associação. Figura 2: A concentração de 2,5% de TrichoXidil™ mostrou-se superior ao minoxidil na quantificação dos mRNA de IGF -1 e de KGF. No entanto, a quantificação de mRNA de VEGF mostrou superioridade do minoxidil em relação ao TrichoXidil™.

Figura 3: A associação de TrichoXidil™ e minoxidil mostrou efeito sinérgico de maneira significativa (p<0,05). A expressão de fatores de crescimento IGF-1, VEGF e em especial o KGF mostrou-se aumentada quando a associação foi realizada, indicando incrementos significativos na expressão destas proteínas fundamentais para a homeostase e manutenção do ciclo capilar. * Significativo em relação ao controle. # Significativo em relação ao controle e aos ingredientes isolados.

Controle

TrichoXidil™ (2,5%)

Minoxidil (2,5%)

Associação

Estudo IN VIVO Avaliação do Crescimento Capilar Foram avaliados 32 voluntários, diagnosticados com alopecia androgenética, homens e mulheres, com idades entre 25 e 50 anos. Os voluntários foram divididos em 7 grupos.

1. Grupo controle sem tratamento (n=4)

2. Grupo base hidroalcoólica sem ativo (n=4) 3. Grupo TrichoSol™ sem ativo (n=5)

4. Grupo base hidroalcoólica com 2,5% de minoxidil (n=5) 5. Grupo TrichoSol™ com 2,5% de minoxidil (n=5) 6. Grupo base hidroalcoólica com 2,5% de TrichoXidil™ (n=4) 7. Grupo TrichoSol™ com 2,5% de TrichoXidil™ (n=5)

Cada voluntário foi avaliado em 2 períodos diferentes ao longo do estudo, sendo o tempo 0 (T=0), a primeira avaliação e o tempo 90 (T=90), a segunda avaliação, ocorrida após 90 dias de tratamento com as formulações desenvolvidas para o estudo. Na primeira avaliação, T=0, foi realizada a tomada de dados e imagens pelo equipamento TrichoScan®, além da coleta do fragmento cilíndrico para extração do mRNA total e respectiva quantificação. O mesmo procedimento foi repetido no período T=90. Foram avaliados folículos anágenos e telógenos, unidades foliculares e densidade capilar. Resultados: É possível observar (Tabela 1) que, tanto o TrichoXidil™, quanto o minoxidil, foram capazes de aumentar todos os parâmetros avaliados. Contudo, em relação à densidade capilar, a presença do veículo TrichoSol™ associado ao TrichoXidil™, mostrou-se superior ao minoxidil, quando este foi veiculado à base alcoólica. É possível observar (Figura 4) a comparação entre o TrichoXidil™ e minoxidil, com os percentuais de unidades foliculares (Figura 4A) e percentuais de folículos anágenos (Figura 4B). Podemos observar que as formulações com TrichoXidil™ e minoxidil, que utilizaram como veículo o TrichoSol™, mostraram-se superiores ao veículo hidroalcoólico (* p<0,05), em relação ao percentual de unidades foliculares. Os maiores valores percentuais, tanto no aumento de folículos anágenos, quanto na redução de folículos telógenos, são maiores, quando comparados às formulações em veículo hidroalcoólico.

Dermoscopia por TrichoScan®

Grupo Tempo (Dias)

Folículos Anágenos

Folículos Telógenos

Unidades Foliculares

Densidade Folicular

Controle T = 00 55.6 + 3.7 54.4 + 2.4 59.3 + 5.1 89.3 + 2.2

T = 90 61.3 + 2.4 38.7 + 8.6 65.0 + 5.3 106.5 + 8.7

Álcool T = 00 67.0 + 2.5 32.9 + 5.5 116.6 + 1.5 201.6 + 10.2

T = 90 70.2 + 3.5 29.8 + 3.8 103.6 + 2.2* 193.8 + 6.1

TrichoSol™ T = 00 75.6 + 1.2 24.4 + 1.2 111.0 + 16.0 167.9 + 9.2

T = 90 82.9 + 2.5* 17.1 + 2.0* 119.1 + 16.4 222.9 + 12.8*

Minoxidil em Álcool

T = 00 56.8 + 3.8 43.2 + 6.8 106.6 + 5.2 198.5 + 6.0

T = 90 69.8 + 2.1* 30.2 + 3.1* 117.0 + 2.3* 201.8 + 4,5

Minoxidil em TrichoSol™

T = 00 56.2 + 1.3 43.8 + 2.3 79.6 + 3.5 106.2 + 5.1

T = 90 71.1 + 4.7* 29.9 + 2.1* 92.3 + 4.8* 234.0 + 19.8*

TrichoXidil™ em Álcool

T = 00 59.7 + 1.0 40.2 + 1.2 87.5 + 3.8 189.5 + 7.8

T = 90 72.1 + 2.6* 28,9 + 2.6* 97.0 + 2.7* 215.4 + 13.1*

TrichoXidil™ em TrichoSol™

T = 00 57.2 + 6.0 42.8 + 7.0 106.3 + 7.1 245.6 + 7.9

T = 90 73.2 + 5.9* 26.7 + 6.1* 121.3 + 1.3* 269.3 + 6.5*

Tabela 1: Parâmetros obtidos por dermoscopia através do TrichoScan®. Folículos anágenos e telógenos foram analisados, assim como as unidades foliculares e a densidade dos folículos. (*) p<0,05, significativo em relação ao T=0. Figura 4: Comparação entre TrichoXidil™ (2,5%) e minoxidil (2,5%). Comparação realizada entre o início do uso das formulações (T=0) e o final do uso (T=90). (A) Percentual de unidades foliculares. O período de tratamento foi de 90 dias. As formulações que utilizaram como veículo o TrichoSol™ mostraram-se superiores ao veículo álcool (*p<0,05). (B) Percentual de aumento de fase anágena e redução de fase telógena. O TrichoXidil™ em veículo TrichoSol™ promoveu maior aumento do percentual de folículos anágenos e a maior redução nos folículos telógenos, quando comparado à formulação contendo minoxidil em TrichoSol™.

Unidade Folicular

Álcool TrichoSol™

Anágena Telógena

Anágena Telógena

TrichoXidil™ em TrichoSol™

Minoxidil em TrichoSol™

TrichoXidil™ em álcool

Minoxidil em álcool

TrichoXidil™

Minoxidil

Imagens Registros representativos de fototricogramas e do momento antes (T=0) e depois (T=90) do uso das formulações pelos voluntários que participaram do estudo. TrichoXidil™ 2,5% em TrichoSol™ 21,5% 20,3% TrichoXidil™ 2,5% em álcool 19% 3,9%

Minoxidil 2,5% em TrichoSol™ 7,9% 10,7% Minoxidil 2,5% em álcool 13,5% 9,1%

Avaliação Histológica dos Fragmentos de Tecido Os fragmentos do couro cabeludo obtidos da região de vértice dos voluntários no T=0 e no T=90 dias foram fixados e corados para análise microscópica. Os parâmetros avaliados foram folículos totais, folículos vellus, folículos terminais e trato fibroso (Tabela 2). Resultados: É possível observar o percentual de folículos totais (Figura 5A) através das análises histológicas de fragmentos obtidos de voluntários que utilizaram TrichoXidil™ ou Minoxidil, formulados com veículo álcool ou com veículo TrichoSol™. O percentual de folículos totais dos voluntários que utilizaram a formulação com TrichoXidil™ associado ao veículo TrichoSol™, foi estatisticamente superior quando comparados às formulações contendo minoxidil e TrichoXidil™ associados ao veículo álcool. Em relação ao minoxidil formulado com TrichoSol™, o número de folículos totais foi menor que a formulação com TrichoXidil™, porém, sem significado estatístico. É possível observar a redução dos folículos vellus (Figura 5B). Neste sentido, a formulação contendo minoxidil com veículo TrichoSol™ foi a única capaz de promover redução estatisticamente significativa. É possível observar o aumento significativo de folículos terminais (Figura 5C) nos voluntários que utilizaram a formulação com TrichoXidil™ associado ao TrichoSol™ (*p<0,05). Os voluntários que utilizaram o minoxidil, com qualquer um dos veículos utilizados, mantiveram o ganho percentual de folículos terminais ao término dos 90 dias de utilização das formulações. Por fim, os resultados indicam que os voluntários que utilizaram as formulações com TrichoXidil™, tanto em veículo TrichoSol™, como no veículo álcool, foram capazes de reduzir estatisticamente o número de tratos fibrosos (Tabela 2).

Biópsia Punch

Grupo Tempo (Dias)

Folículos Totais

Folículos Vellus

Unidades Terminais

Trato Fibroso

Controle T = 00 29.6 + 7.5 5.3 + 0.8 8.1 + 2.8 5.4 + 1.7

T = 90 27.6 + 7.1 6.6 + 1.7 5.3 + 4.1 3.4 + 1.1

Álcool T = 00 26 + 8.0 8.0 + 1.3 4.8 + 3.2 6.0 + 1.5

T = 90 25 + 0.5 6.9 + 2.6 9.6 + 5.7 5.0 + 2.6

TrichoSol™ T = 00 28.6 + 1.4 9,8 + 4.0 3.6 + 3.2 4.6 + 0.8

T = 90 33.0 + 1.3* 8.7 + 4.8 7.6 + 1.7 5.0 + 3.1

Minoxidil em Álcool

T = 00 29.3 + 3.1 9.8 + 0.8 4.3 + 0.9 5.6 + 3.5

T = 90 37.1 + 4.5* 7.4 + 1.3* 5.6 + 2.7* 5.0 + 2.0

Minoxidil em TrichoSol™

T = 00 25.0 + 4.1 7.4 + 1.1 14 + 2.6 3.3 + 1.1

T = 90 35.3 + 5.7* 5.0 + 1.3* 18.2 + 0.6* 2.1 + 0.4

TrichoXidil™ em Álcool

T = 00 25.0 + 2.6 8.9 + 2.7 9.9 + 2.7 3.67 + 0.8

T = 90 33.3 + 7.1* 6.2 + 1.8* 12.7 + 1.1* 1.21 + 1.7*

TrichoXidil™ em TrichoSol™

T = 00 16.6 + 3.5 6.1 + 2.1 5.9 + 1.3 8.9 + 2.0

T = 90 23.9 + 2.7* 3.9 + 1.1* 7,9 + 0.6* 5.7 + 1.8*

Tabela 2: Parâmetros obtidos a partir dos fragmentos obtidos dos voluntários. O exame histológico avaliou folículos totais, folículos vellus, folículos terminais e trato fibroso. (*) p<0,05, significativo em relação ao T=0.

Figura 5: Comparação entre TrichoXidil™ (2,5%) e minoxidil (2,5%), realizada entre o início do uso das formulações (T=0) e o final do uso (T=90). (A) Percentual de folículos totais. A formulação TrichoXidil™ em veículo TrichoSol™ mostrou-se superior as demais formulações (*p<0,05). (B) Percentual de folículos vellus. Apenas a formulação de minoxidil em TrichoSol™ foi capaz de reduzir significativamente o percentual de folículos vellus nos voluntários (*p<0,05). (C) Percentual de folículos terminais. Apenas a formulação de TrichoXidil™ em TrichoSol™ foi capaz de aumentar significativamente o percentual de folículos terminais nos voluntários (*p<0,05).

Álcool TrichoSol™

Álcool TrichoSol™

Álcool TrichoSol™

Folículos Terminais

Folículos Vellus

Folículos Totais

Porc

enta

gem

(%

) P

orc

enta

gem

(%

) P

orc

enta

gem

(%

)

TrichoXidil™

Minoxidil

TrichoXidil™

Minoxidil

TrichoXidil™

Minoxidil

Expressão de mRNA (KGF, IGF-1 e VEGF) Após a obtenção dos fragmentos cilíndricos, os mesmos foram submetidos ao isolamento do RNA total e realizada a quantificação da expressão relativa dos mRNA dos fatores de crescimento IGF-1, KGF e VEGF (Figura 6). Resultados: A Figura 6A mostra a expressão relativa de mRNA do fator de crescimento IGF-1. É possível observar que as formulações utilizadas foram capazes de aumentar a expressão relativa dos mRNA de IGF-1 quando comparadas ao controle e ao grupo de voluntários que utilizou apenas o veículo álcool, mas em nenhuma outra situação, em especial entre as formulações, os valores aumentaram de maneira significativa. A Figura 6B mostra a superioridade das formulações contendo TrichoXidil™ em relação a expressão relativa do mRNA de KGF. A formulação de TrichoXidil™ em TrichoSol™ aumentou significativamente a expressão de mRNA do KGF em comparação a todas as situações avaliadas (p<0,05). Além disso, podemos observar que, mesmo na formulação de TrichoXidil™ com veículo álcool, a expressão relativa de KGF foi significativamente maior quando comparada as outras formulações de minoxidil (p<0,05). Por fim, a Figura 6C mostra a capacidade das formulações contendo minoxidil em aumentar significativamente, em comparação aos grupos controle, veículos e TrichoXidil™, a expressão relativa de mRNA de VEGF (*p<0,05). Figura 6: Expressão relativa de mRNA dos fatores de crescimento IGF-1, KGF e VEGF. Comparação entre TrichoXidil™ (2,5%) e minoxidil (2,5%). Comparação realizada entre o início do uso das formulações (T=0) e o final do uso (T=90). (A) Expressão relativa de mRNA de IGF-1. Embora exista a tendência de aumento entre as formulações contendo TrichoXidil™ e minoxidil, entre ela, em nenhuma situação, houve diferença significativa. Aumento significativo apenas em relação aos grupos controle, TrichoSol™ e álcool (*p<0,05). (B) Expressão relativa de mRNA de KGF. A formulação contendo TrichoXidil™ em veículo TrichoSol™, aumentou, de modo significativo, a expressão relativa (*p<0,05). Além disso, a formulação de TrichoXidil™ em veículo álcool também foi superior às formulações contendo o minoxidil (#p<0,05). (C) Expressão relativa de mRNA de VEGF. As formulações contendo Minoxidil aumentou significativamente a expressão relativa do mRNA de VEGF quando comparadas às formulações contendo TrichoXidil™ (*p<0,05).

Conclusões

• Com base nos testes realizados in vitro, podemos sugerir que o composto TrichoXidil™ não se mostrou citotóxico.

• O percentual de fase anágena mostrou-se aumentada na formulação contendo TrichoXidil™ em comparação a formulação contendo minoxidil.

• A redução de folículos em fase telógena foi maior na presença de formulações contendo TrichoXidil™ em TrichoSol™, superando as formulações contendo minoxidil.

• O percentual de folículos totais aumentou significativamente nos voluntários que utilizaram as formulações contendo TrichoXidil™.

• A formulação contendo TrichoXidil™ em veículo TrichoSol™ foi capaz de aumentar significativamente o percentual de folículos terminais nos voluntários.

• As formulações contendo TrichoXidil™ aumentaram significativamente a expressão relativa de mRNA de KGF, mostrando-se superior às formulações contendo minoxidil.

Farmacotécnica

Estabilidade (produto final): 30 dias em TrichoSol™. pH Estabilidade (produto final): Não encontrado nas referências consultadas. Solubilidade: Lipossolúvel. Excipiente / Veículo Sugerido / Tipo de Cápsula: TrichoSol™. Orientações Farmacotécnicas: TrichoXidil™ isolado:

• Ajustar o pH do TrichoSol™ para >4.

• Incorporar TrichoXidil™.

• Agitar até completa solubilização. TrichoXidil™ associado ao minoxidil base:

• Incorporar o minoxidil base no TrichoSol™.

• Agitar até completa solubilização.

• Incorporar o TrichoXidil™.

• Agitar até completa solubilização. Compatibilidades (para veículos): Não aplicável. Capacidade de Incorporação de Ingredientes Farmacêuticos (para veículos): Não aplicável. Incompatibilidades: Não encontrado nas referências consultadas. Conservação / Armazenamento do insumo farmacêutico definido pelo fabricante: Temperatura ambiente. Conservação / Armazenamento do produto final definido pelo farmacêutico RT da farmácia: De acordo o critério de conservação do insumo definido pelo fabricante, sugerimos em temperatura ambiente, porém cabe também avaliação farmacêutica conforme a formulação, sistema conservante e condições do produto.

Formulações Protocolo TrichoConcept™ Limpeza e Pré-Tratamento

1º TrichoOil™

TrichoOil™ qsp 5 mL

Posologia: Colocar o conteúdo da ampola em recipiente. Aplicar metade da quantidade de forma homogênea no couro cabeludo e massagear o por 3 a 5 minutos. Em seguida, aplicar o restante nos fios. Massagear os fios com movimentos suaves para que o produto seja distribuído homogeneamente por todo cabelo, sempre da raiz para as pontas. Enrolar e prender os cabelos (pode-se utilizar uma touca plástica) para diminuir a exposição ao ar e potencializar o efeito. Com os cabelos enrolados ou protegidos pela touca, deixe agir por 10 minutos.

2º TrichoWash™

TrichoWash™ qsp 200 mL

Posologia: Massagear por 2 minutos. Enxaguar e repetir.

3º TrichoCond™

TrichoCond™ qsp 100 mL

Posologia: Após lavar os cabelos com TrichoWash™, retirar o excesso de água e aplicar o TrichoCond™ uniformemente sobre os cabelos. Massagear mecha a mecha deixando atuar de 2 a 3 minutos. Enxaguar.

4º TrichoSerum™

TrichoSerum™ qsp 50 mL

Posologia: Após a lavagem capilar com o TrichoWash™ e TrichoCond™ retire bem o excesso de água com toalha e aplique pequena porção do TrichoSerum™, mecha a mecha no comprimento e pontas fixando sobre as hastes e evitando o couro cabeludo. Penteie para que o produto seja distribuído por todos os fios. Não enxague, aplique o secador de cabelos de acordo com o penteado e modelagem desejada.

TrichoXidil™

Opção 1: Estímulo Natural do Crescimento Capilar

TrichoXidil™ 2,5%

TrichoSol™ qsp 100 mL

Posologia: Aplicar nas áreas afetadas 2 vezes ao dia.

Opção2: Associação para Estímulo do Crescimento Capilar

TrichoXidil™ 2,5%

Minoxidil Base 2,5%

TrichoSol™ qsp 100 mL

Posologia: Aplicar nas áreas afetadas 2 vezes ao dia.

Referências Bibliográficas

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