tÍtulo: avaliaÇÃo do comportameto de anfÍpodes...

11
TÍTULO: AVALIAÇÃO DO COMPORTAMETO DE ANFÍPODES EPIBENTÔNICOS MARINHOS (HYALE SP) EXPOSTOS AO CLORETO DE CÁDMIO TÍTULO: CATEGORIA: CONCLUÍDO CATEGORIA: ÁREA: CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E SAÚDE ÁREA: SUBÁREA: ECOLOGIA SUBÁREA: INSTITUIÇÃO: UNIVERSIDADE SANTA CECÍLIA INSTITUIÇÃO: AUTOR(ES): PEDRO HENRIQUE CAVAZIN DAVID AUTOR(ES): ORIENTADOR(ES): AUGUSTO CESAR ORIENTADOR(ES):

Upload: lamtuyen

Post on 02-Dec-2018

214 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: TÍTULO: AVALIAÇÃO DO COMPORTAMETO DE ANFÍPODES ...conic-semesp.org.br/anais/files/2014/trabalho-1000016466.pdf · youngi em ensaios de toxicidade e observou as alterações que

TÍTULO: AVALIAÇÃO DO COMPORTAMETO DE ANFÍPODES EPIBENTÔNICOS MARINHOS (HYALESP) EXPOSTOS AO CLORETO DE CÁDMIOTÍTULO:

CATEGORIA: CONCLUÍDOCATEGORIA:

ÁREA: CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E SAÚDEÁREA:

SUBÁREA: ECOLOGIASUBÁREA:

INSTITUIÇÃO: UNIVERSIDADE SANTA CECÍLIAINSTITUIÇÃO:

AUTOR(ES): PEDRO HENRIQUE CAVAZIN DAVIDAUTOR(ES):

ORIENTADOR(ES): AUGUSTO CESARORIENTADOR(ES):

Page 2: TÍTULO: AVALIAÇÃO DO COMPORTAMETO DE ANFÍPODES ...conic-semesp.org.br/anais/files/2014/trabalho-1000016466.pdf · youngi em ensaios de toxicidade e observou as alterações que

UNIVERSIDADE SANTA CECÍLIA

RELATÓRIO FINAL

AVALIAÇÃO DO COMPORTAMETO DE ANFÍPODES EPIBENTÔNICOS MARINHOS (Hyale sp) EXPOSTOS AO CLORETO DE CÁDMIO

Aluno: Pedro Henrique Cavazin David Orientador: Prof. Dr. Augusto Cesar

Coorientadora: Marina Cunha Passarelli

Santos

2014

Page 3: TÍTULO: AVALIAÇÃO DO COMPORTAMETO DE ANFÍPODES ...conic-semesp.org.br/anais/files/2014/trabalho-1000016466.pdf · youngi em ensaios de toxicidade e observou as alterações que

RESUMO

O processo de industrialização, o crescimento das áreas urbanas e da população, além de outras

atividades humanas, tem como consequência a geração de resíduos que podem, por meio de

lançamentos pontuais ou de maneira difusa, atingir direta ou indiretamente os corpos hídricos. O

monitoramento das características físico-químicas juntamente com análises ecotoxicológicas constituem

uma importante abordagem para diagnosticar a qualidade ambiental e estabelecer medidas de controle e

mitigação da poluição hídrica. Os efeitos biológicos gerados por meio de métodos ecotoxicológicos,

especialmente pelos ensaios de toxicidade, contribuem entre outras questões, no estabelecimento de

valores orientadores na legislação ambiental. Os parâmetros estabelecidos na legislação brasileira, em

sua maioria, são baseados em estudos ecotoxicológicos com organismos-teste que não são

representativos de nossa fauna, fato que pode gerar dados não confiáveis para nossa realidade

ambiental. Um dos organismos mais utilizados em ensaios de toxicidade, tanto internacionalmente como

em âmbito nacional são os anfípodes. Contudo, a ABNT NBR 15638/2008 contempla a utilização de

apenas uma espécie nativa, a Tiburonella viscana. Nesse contexto, além do desenvolvimento de ensaios

de toxicidade com outras espécies nativas, é importante também a análise de outras respostas

biológicas, tais como comportamento de natação. Sendo assim foi avaliado a sensibilidade do anfípode

Hyale youngi a substancia toxica de referencia cloreto de cadmio (CdCl2), realizando ensaios para avaliar

tanto efeitos agudos como efeitos crônicos. Com os resultados obtidos nos ensaios para avaliar os efeitos

agudos ao anfipode H. youngi, foi possível observar um valor médio da CL5096h de 0,73 mg. L-1 (0,51 –

1,04), para a substancia de referencia CdCl2. Já nos resultados obtidos para avaliar os efeitos crônicos

nos organismos-teste com relação ao comportamento de natação foi observado uma queda na

mobilidade dos organismos expostos conforme o valor das concentrações aumentaram, tanto para a

natação horizontal, como também para a natação vertical. Assim, foi possível avaliar a viabilidade de

aplicação do anfípode Hyale youngi em ensaios de toxidade, uma vez que a espécie demonstrou

sensibilidade em ambos os ensaios, agudos e crônicos. Além disso, os resultados obtidos foram

correlatos com outras espécies de anfípodes encontradas na literatura.

Palavras-chaves: Ensaios de toxicidade; Avaliação comportamental; Anfípodes; Hyale youngi

Page 4: TÍTULO: AVALIAÇÃO DO COMPORTAMETO DE ANFÍPODES ...conic-semesp.org.br/anais/files/2014/trabalho-1000016466.pdf · youngi em ensaios de toxicidade e observou as alterações que

1. INTRODUÇÃO

Em várias regiões do mundo, é possível observar que os ecossistemas sofrem alterações que podem ser

associadas à atividade humana decorrente do processo de desenvolvimento industrial, essas, que por

sua vez, geram problemas como a poluição orgânica, poluição química, explorações dos recursos

naturais promovendo efeitos adversos ao homem, como ás biocenoses dos ecossistemas aquáticos ou

terrestres (BOHRER, 1995; MEYBECK et. al. 1990).

O ambiente aquático é um dos mais afetados com a poluição contínua de efluentes líquidos domésticos e

industriais que são lançados ao meio ambiente sem o devido tratamento. Tendo em vista a complexidade

causada pela interação de agentes químicos, os efeitos biológicos desses efluentes não devem ser

caracterizados somente com análises tradicionais (Bertoletti, 1990; Costan et al., 1993). Além disso, uma

importância maior é voltada aos sedimentos, pois estes podem atuar tanto como depósito de

contaminantes, acumulando agentes tóxicos em concentrações muito superiores àquelas encontradas na

coluna d’água (Petrovic e Barceló, 2004), como fonte secundária de poluentes para a água intersticial e

coluna d’água e, desta forma, seguir impactando a qualidade da água e a biota mesmo em casos em que

a descarga direta de efluentes tenha cessado (Araújo et al., 2006).

Várias ferramentas são utilizadas para avaliar a extensão da contaminação e determinar seus efeitos

sobre a biota, incluir estudos de bioacumulação, biomarcadores, avaliação da estrutura de comunidades

bentônicas, medidas de concentrações químicas de contaminantes e ensaios de toxicidade. Juntas,

essas medidas fornecem uma avaliação integrada da qualidade dos sedimentos (ANDERSON et al.,

1996).

Os testes de toxicidade consagram como uma importante ferramenta de controle e monitoramento

ambiental proporciona uma evidência direta das conseqüências da contaminação, pode ser utilizada para

medir a toxicidade de misturas complexas de contaminantes tanto em fase líquida, como na fase sólida

do sedimento (Cesar et al., 2002).

Os anfípodes são rotineiramente selecionados e mundialmente utilizados como organismo-teste em

ensaios de toxicidade para avaliação da contaminação de sedimentos, pois estão entre os taxa mais

sensíveis, sendo as primeiras espécies a desaparecer de comunidades marinhas bentônicas em locais

contaminados (MELO & NIPPER, 2007). Porém, entre as espécies de anfípodes já padronizadas como

organismos-teste em métodos de ensaios ecotoxicológicos com sedimento integral, em âmbito nacional e

internacional, somente a Tiburonella viscana e Grandidierella bonnieroides (ABNT NBR 15638/2008;

ABESSA et al., 1998; MELO, 1993; MELO & ABESSA, 2002; MOLISANI et al., 2013) são nativas de

ecossistemas brasileiros. Neste sentido, a implantação de novas espécies nativas em busca de testes

ecologicamente mais realistas, é de suma importância para a validação de resultados adequados em

escala nacional (NIPPER, 1998).

Segundo USEPA (1994), para um organismo ser selecionado para aplicação em ensaios de toxicidade é

necessário que se conheça a distribuição da espécie, sua localização dentro da estrutura trófica, sua

biologia, seus hábitos nutricionais e fisiologia, que possuam sensibilidade constante, e por fim, que sejam

desenvolvidas técnicas de manutenção de cultivo destes organismos em laboratório.

Embora a letalidade seja na maioria das vezes o “endpoint” avaliado em ensaios de toxicidade, analisar

efeitos subletais como, por exemplo, alterações na produção de descendência ou no comportamento,

podem ser mais vantajosos, pois nem sempre ocorre a mortalidade em organismos expostos a

Page 5: TÍTULO: AVALIAÇÃO DO COMPORTAMETO DE ANFÍPODES ...conic-semesp.org.br/anais/files/2014/trabalho-1000016466.pdf · youngi em ensaios de toxicidade e observou as alterações que

contaminantes sob ambientes naturais (FAY et al., 2000; ROAST et al., 2001; PEREZ & WALLACE,

2004).

Neste contexto, o presente estudo avaliou a viabilidade de aplicação do anfípode epibentônico Hyale

youngi em ensaios de toxicidade e observou as alterações que a substância tóxica de referência cloreto

de cádmio (CdCl2) possa causar nesses organismos.

Com os resultados obtidos foi possível avaliar a viabilidade de aplicação do anfípode Hyale youngi em

ensaios de toxidade, uma vez que a espécie demonstrou sensibilidade ao CdCl2 tanto nos ensaios

agudos, como também nos ensaios crônicos correlatas com outras espécies de anfípodes encontrada na

literatura.

2. OBJETIVOS

O presente estudo teve como objetivo geral avaliar a sensibilidade dos anfípodes epibentônicos marinhos

Hyale youngi a substância de referência cloreto de cádmio (CdCl2), observando o efeito agudo e crônico

deste contaminante.

2.1 Objetivos específicos

Avaliar o efeito agudo do cloreto de cádmio ao anfípode Hyale youngi, avaliando sua sensibilidade por meio de ensaios de toxicidade;

Avaliar efeitos crônicos do cloreto de cádmio ao anfípode Hyale youngi observando possíveis

alterações no comportamento de natação desses organismos;

Avaliar a natação horizontal e vertical dos anfípodes da espécie Hyale youngi, através de monitoramento por vídeo;

Interpretar os resultados obtidos, buscando entender o efeito deste contaminante (CdCl2) a

Hyale youngi;

Realizar comparações entre os dados de mortalidade e alteração no comportamento de natação, obtidos no presente estudo;

Estabelecer gradientes de efeitos para a substância tóxica de referência CdCl2 e, assim gerar

subsídios para estudos mais aprofundados, que possibilitem a padronização de procedimentos de ensaios de toxicidade com o anfípode Hyale youngi.

Page 6: TÍTULO: AVALIAÇÃO DO COMPORTAMETO DE ANFÍPODES ...conic-semesp.org.br/anais/files/2014/trabalho-1000016466.pdf · youngi em ensaios de toxicidade e observou as alterações que

3. METODOLOGIA

3.1 Organismo-teste

A espécie Hyale youngi é um crustáceo, anfípode, pertencente à família Hyalidea BULYCHEVA, 1957.

Esses anfípodes destacam-se por sua abundancia e riqueza de espécies em comunidades de macrófitas

(MUKAI, 1971; EDGAR, 1983; GUNNILL, 1985) e possui um elo importante na alimentação de varias

espécies de peixes (ZAMPROGNO, 1989; DUBIASKI-SILVA, 1999). Os anfípodes pertencentes a essa

família Hyalidea apresentam grande facilidade de adaptação às adversidades ambientais (LEITE et al.,

2000). Esses organismos comem qualquer alimento oferecido, variando de acordo com as estações do

ano.

Normalmente são encontrados abrigados em costões rochosos de regiões entre – marés, marinhas

predominantemente associada a algas Ulva sp. Este organismo apresenta dimorfismo sexual e encontra-

se fértil durante todo o ano.

3.2 Coletas, triagem e seleção dos organismos

Os organismos foram coletados nos bancos de algas presentes nas praias de Santos e Guarujá,

preferencialmente na Ilha das Palmas, Santos – SP. Foram coletadas as algas presentes na zona entre-

marés do costão rochoso e posteriormente transportadas em caixa térmica com água do mar e aeração

até o laboratório (ABNT NBR 15638/2008).

No laboratório foi realizado a triagem do material coletado e os organismos separados de acordo com sua

espécie. A principal espécie encontrada nos locais de coleta foi a Hyale youngi (Fig. 1).

Figura 1. Principal espécie encontrada nas coleta s- Hyale youngi.

3.3 Manutenção e aclimatação

Após a triagem do material coletado os organismos permanecem em cubas de vidro contendo 1,5L de

água do mar filtrada e livre de contaminações. Os parâmetros físico-químicos da água do mar foram

ajustados de acordo com os ótimos de sobrevivência encontrados para a espécie em Passarelli (2013),

são eles: 20°C-25°C de temperatura, salinidade 35±2 e pH entre 7,5 e 8,5. Durante o período de

aclimatação os organismos são alimentados com uma ração de peixe (Tetra-Min®) concentrada e talos

Page 7: TÍTULO: AVALIAÇÃO DO COMPORTAMETO DE ANFÍPODES ...conic-semesp.org.br/anais/files/2014/trabalho-1000016466.pdf · youngi em ensaios de toxicidade e observou as alterações que

de algas Ulva sp. Foi adicionada redes tipo nylon como substrato artificial para os organismos-teste,

conforme estabelecido na ABNT NBR (15470/2007).

3.4 Sensibilidade dos organismos-teste

Segundo Environment Canada (1990; 1995), os ensaios com substância de referência são úteis para

avaliar a sensibilidade relativa da população dos organismos que se pretende utilizar para estudar a

toxicidade de substâncias-testes, além da precisão e da confiabilidade dos dados produzidos pelo

laboratório. Dessa forma, no presente estudo será para avaliada a sensibilidade dos organismos-teste ao

cloreto de cádmio (CdCl2) observando o efeito agudo e crônico desse contaminante.

Sendo assim, os ensaios empregando os anfípodes Hyale youngi foram realizados em 2 etapas. Na

primeira etapa avaliamos o efeito agudo tirando a porcentagem de mortalidade dos organismos, já na

segunda etapa avaliamos o efeito crônico analisando o comportamento de natação dos organismos.

3.4.1 Substância tóxica de referência

O CdCl2 é uma substância tóxica padrão de referência, recomendado por guias padronizados e

empregados mundialmente para avaliar a sensibilidade de organismos-testes (ABNT NBR 15638/2008;

Environment Canadá, 1995; USEPA, 1994; GOLDING, 2011; GIUSTO et al., 2012). Este metal pode ser

encontrado de forma natural nos ambientes aquáticos, porém, dependendo de sua concentração pode

comprometer a integridade metabólica de organismos bentônicos, ocorrendo danos como bioacumulação

crônica, além da transferência trófica (SCHLEKAT et al., 1999).

3.5 Análise estatística

Os resultados obtidos nos ensaios em fase aguda foram analisados pelo método estatístico Trimmed

Spearman-Karber, dessa forma, foi estimadas as respectivas CL50 (concentração letal mediana a 50%

dos organismos) para o CdCl2, após 96h de exposição.

Os dados de toxicidade obtidos nos ensaios de avaliação do comportamento de natação dos organismos-

teste são analisados estatisticamente com o auxílio do Software TOXSTAT 3.5 (1996). Foi analisadas a

normalidade e homocedasticidade dos dados aplicando o teste de Chi-quadrado e Bartlet,

respectivamente. Para a comparação dos resultados obtidos entre as diferentes concentrações testadas

e o controle serão aplicados os testes de Dunnets e T test.

4. Resultados

4.1 Avaliação da sensibilidade (Ensaios Agudos)

O valor médio encontrado nas CL5096h obtidas nos ensaios de toxicidade para a espécie H. youngi foi

estimado em 0,73 mg. L-1 (0,51 – 1,04), para a substância tóxica de referência (CdCl2), conforme pode ser

observado na Tabela 1.

Page 8: TÍTULO: AVALIAÇÃO DO COMPORTAMETO DE ANFÍPODES ...conic-semesp.org.br/anais/files/2014/trabalho-1000016466.pdf · youngi em ensaios de toxicidade e observou as alterações que

Tabela 1. Resultados dos ensaios com a espécie Hyale youngi

(média e limites de confiança - mg.L-1).

Substância de referência: Cloreto de Cádmio (CdCl2)

Teste Data CL50 -96h Lim. Inf. (95%) Lim. Sup. (95%)

01 15/10/2013 0.74 0.49 1.13

02

03

17/12/2013

20/01/2014

0.72

0.73

0.54

0.51

0.96

1.04

MÉDIA 0.73 0.51 1.04

4.2 Avaliação do comportamento de natação (Ensaios crônicos)

Os resultados obtidos nos ensaios para avaliar o comportamento de natação dos anfípodes da espécie H.

youngi demonstraram uma queda na natação dos organismos-teste conforme as concentrações de CdCl2

aumentaram, sendo possível observar diferenças significativas entre os resultados de todas as

concentrações utilizadas quando comparado com o controle.

No ensaio 1, por exemplo, foi observado uma queda de 81,25% na mobilidade horizontal e 93,33% na

mobilidade vertical dos organismos-teste expostos na maior concentração empregada nos ensaios

crônicos (1,60 mg.L-1). Já no ensaio 2 foi observado uma diminuição de 82,26% e 91,18% de mobilidade

horizontal e vertical, respectivamente.

5. Discussão

5.1 Sensibilidade dos organismos-teste (Ensaio agudo)

Ensaios empregando substâncias de referência são úteis para avaliar a sensibilidade relativa de uma

população de organismos que se pretende utilizar em ensaios de toxicidade (ENVIRONMENT CANADA,

1990 e 1995). Além disso, para a validação de espécies para serem empregadas em ensaios de

toxicidade para avaliar a qualidade dos sedimentos é interessante conhecer a sensibilidade desses

organismos a contaminantes presentes nesta matriz ambiental, uma vez que estes estarão sendo

aplicados com esta finalidade nos ensaios.

Dessa forma, os resultados obtidos no presente estudo demonstraram que as espécies de anfípodes

Hyale youngi apresentaram sensibilidade ao Cloreto de Cádmio, próximos aos resultados reportados na

literatura para outras espécies de anfípodes (CESAR, 2003; TSVETNENKO, 2000; TRORP and LAKE,

1974; AHSANULLAH, 1976, WILIAMS et al., 1985).

5.2 Natação (Ensaio Crônico)

Avaliar alterações no comportamento de natação de organismos aquáticos pode auxiliar na compreensão

do efeito que um contaminante possa estar causando neste ainda em nível fisiológico, e não observando

Page 9: TÍTULO: AVALIAÇÃO DO COMPORTAMETO DE ANFÍPODES ...conic-semesp.org.br/anais/files/2014/trabalho-1000016466.pdf · youngi em ensaios de toxicidade e observou as alterações que

diretamente a mortalidade, onde a situação muitas vezes é irreversível. Segundo Boudrias (1991),

mudanças no comportamento de natação vertical e horizontal dos organismos estão relacionadas com a

sensibilidade na dinâmica de fluidos e gastos energéticos.

Com os resultados obtidos foi possível observar que os organismos expostos na maior concentração testada (1,60 mg.L-1) demonstraram menor mobilidade do que os expostos no controle e nas demais concentrações. Tais resultados são correlatos ao reportado por Wallace & Estephan, (2004), para o anfípode Gamarus lawrencianus, onde foi observado uma queda nos movimentos de natação horizontal e vertical dos organismos-teste conforme as concentrações de cádmio presentes nos tecidos dos organismos foram aumentando.

6. CONCLUSÃO

Os resultados obtidos no presente estudo demonstraram que a espécie de anfípode Hyale

youngi, apresenta sensibilidade ao Cloreto de Cádmio similar aos resultados reportados na

literatura para outras espécies de anfípodes, o que evidencia o potencial de aplicação deste

organismo-teste em ensaios de toxicidade.

Nos resultados obtidos nos ensaios crônicos, a fim de avaliar o comportamento dos organismos

com relação à natação, foi possivel observar uma diminuição nos movimentos de natação

horizontal e vertical conforme as concentrações de cádmio foram aumentando. Esses resultados

obtidos corroboram com o resultado encontrado para o anfipode Gamarus lawrencianus que

também demonstrou uma queda nos movimentos de natação horizontal e vertical conforme as

concentrações de cádmio nos tecidos dos organismos foram aumentando.

Page 10: TÍTULO: AVALIAÇÃO DO COMPORTAMETO DE ANFÍPODES ...conic-semesp.org.br/anais/files/2014/trabalho-1000016466.pdf · youngi em ensaios de toxicidade e observou as alterações que

REFERENCIAS BILIOGRÁFICAS ABESSA, D. M. S. (2002). Avaliação da qualidade de sedimentos do sistema estuarino de Santos, SP, Brasil. Tese (Doutorado). Instituto Oceanográfico da Universidade de São Paulo, São Paulo. ABESSA, D.M.S. Avaliação da qualidade de sedimentos do sistema estuarino de Santos, SP, Brasil. São Paulo: USP, 2002. Tese (Doutorado). Instituto Oceanográfico da Universidade de São Paulo, São Paulo. 2002. ABNT (Associação Brasileira de Normas Técnicas), (2007). Ecotoxicologia Aquática – Toxicidade em sedimento – Método de ensaio com Hyalella spp (Amphipoda). ABNT NBR 15470:2007, 20p. ABNT (Associação Brasileira de Normas Técnicas), (2008). Qualidade da água – Determinação da toxicidade aguda de sedimentos marinhos ou estuarino com anfípodes. ABNT NBR 15638:2008, 19p. ABNT (Associação Brasileira de Normas Técnicas). Ecotoxicologia Aquática – Toxicidade crônica de curta duração – Método de ensaio com ouriço-do-mar (Echinodermata: Echinoide). ABNT/NBR 15350:2011. 2011 BERTOLETTI, E. 1990 Toxidade e concentração de agentes tóxicos em efluentes industriais na grande São Paulo. Ciência e Cultiura, 42 (3/4): 271-277 CESAR, A.; MARÍN-GUIRAO, L.; VITA, R.; MARÍN, A. (2002). Sensibilidad de anfípodos y erizos del Mar Mediterráneo a substancias tóxicas de referencia. Ciencias Marinas. 28(4): 407-417p. COONEY, J.D. Sediment Tests. In: RAND, G. M. (1995). Fundamentals of Aquatic Toxicology: Effects, Environmental Fate and Risk Assessment. Ecological Services Inc. North Palm Beach, Florida. DUBIASKI-SILVA, J. O fital de Sargassum cymosum C. Agardh, 1820 (Phaeophyta - Fucales) e seu papel na dieta de peixes e braquiúros na ponta das Garoupas, Bombinhas, Santa Catarina. Curitiba: UFPR, 1999. Tese de Doutorado. Universidade Federal do Paraná. Curitiba, PR. 1999. EDGAR, G. J., (1983). The ecology of south-east Tasmanian phytal animal communities. II. Seasonal change in plant and animal populations. Journal of Experimental Marine Biology and Ecology, 70:159-179. ENVIRONMENT CANADA (1990). Guidance documento n controlo f toxicity test precision using reference toxicants. Report EPS 1/RM/12, Conservation and Protection, Ottawa, ON. ENVIRONMENT CANADA (1995). Guidance document on measurenment of toxicity test precision using control sediment spiked with a reference toxicant. Report EPS 1/RM/5. Environmental Technology Centre, Ottawa, ON. LEITE, F. P. P.; JACOBUCCI, G. B. & GÜTH, A. Z. (2000). Temporal comparison of gammaridean amphipods of Sargassum cymosum on two rocky shores in southeastern Brazil. Nauplius, 8(2): 227-236. MELO, S. L. R. Testes de toxicidade com sedimentos marinhos: adequação de metodologia para o anfípodo escavador Tiburonella viscana. Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo, São Carlos, Brasil. 1993. MELO, S. L. R.; NIPPER, M. (2007). Sediment toxicity tests using the burrowing amphipod Tiburonella viscana (Amphipoda: Platyischnopidae). Ecotoxicology and Environmental Safety, 66, 412 – 420p. MUKAI, H. (1971). The phytal animals on the thalli of Sargassum serratifolium in the Sargassum region, with reference to their seasonal fluctuations. Marine Biology, 8:.170-182.

Page 11: TÍTULO: AVALIAÇÃO DO COMPORTAMETO DE ANFÍPODES ...conic-semesp.org.br/anais/files/2014/trabalho-1000016466.pdf · youngi em ensaios de toxicidade e observou as alterações que

NIPPER, M. (1998). The development and application of sediment toxicity tests for regulatory purposes. In: Wells. P. G., Lee, K., Blaise, C. (Eds), Microscale Aquatic Toxicology – Advances, Techniques and Practice. CRC Press, Inc., Boca Rotan, FL. PP. 631 – 643. PASSARELLI, M. C. (2013). Avaliação e validação de anfípodes epibentônicos para aplicação em ensaios de toxicidade. Sustentabilidade em Ecossistemas Costeiros, Santos,SP,2013. RAND, G. M.; WELLS, P. G.; McCARTY, L. S. (1995). Introduction to Aquatic Ecotoxicology.in: Fundamentals of Aquatic Toxicology: Effects, Environmental Fate and Risk Assessment. Ecological Services Inc. North Palm Beach, Florida. USEPA (1994). Methods for assessing the toxicity of sediment – associated contaminants with estuarine and marine amphipods. EPA/600/R-94/025. USEPA (2001). Methods for Collection, Storage and Manipulation of Sediments for Chemical and Toxicological Analyses: Technical Manual. U.S. Environmental Protection Agency, Office of Water, Washington, DC. EPA-823-B-01-002. WALLACE, W.G.; ESTEPHAN, A. Differential susceptibility of horizontal and vertical swimming activity to cadmium exposure in a gammaridean amphipod Gammarus lawrencianus. Aquatic Toxicology 69: 289 – 297. 2004. ZAMPROGNO, C. Distribuição e hábitos alimentares dos peixes da zona entre - marés de recifes rochosos da praia de Manguinhos, Espírito Santo. Dissertação de Mestrado. Instituto de Biologia. Universidade Estadual de Campinas, Campinas, SP. 1989