tema 3 organizaciÓn del material hereditario en .20/12/2010 1 tema 3 organizaciÓn del material

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  • 20/12/2010

    1

    TEMA 3ORGANIZACIN DEL MATERIAL HEREDITARIO EN PROCARIOTAS

    GENFORO DE LOS VIRUS-Virus ARN-Virus ADN-fago

    GENFORO BACTERIANO-Cromosoma bacteriano-ADN extracromosmico: PLSMIDOS

    -clasificacin-utilizacin tecnologa ADN recombinante

    GENFOROS VIRALES CON ARN

    Especie a la que afectan:-vegetalvegetal-animal-bacterias (fagos)

    Tipo de ARN: -sencillo o doble-enteros o segmentados

    Muy empaquetados y plegados (protenas similares a histonas)

    Gran variacin peso molecular

  • 20/12/2010

    2

    VIRUSARN

    TipodeMolcula

    TipodeHlice

    Tipodevirussegnhusped.

    Familiadevirus

    Sencilla

    Fago MS2,f2,Q

    Animal

    Picornavirus(polio)Togavirus

    Rhabdovirus (estomatitis,rabia)Myxovirus (gripe)

    ( )Lineal Paramyxovirus(Sendai,paperas)

    Vegetal Virusmosaicotabaco(TMV)

    Doble

    Fago 6

    Animal Reovirus

    Vegetal Tumordelasheridas

    Circular Sencilla Vegetal Viroide(PSTV)

    VIRUS TMV

    GENFOROS VIRALES CON ADN

    Especie a la que afectan:animal-animal

    -bacterias

    Tipo de ADN: -sencillo o dobleli l i l-lineal o circular

    -con/sin extremos cohesivos (fago )

    Gran variacin peso molecular

  • 20/12/2010

    3

    VIRUSADN

    TipodeMolcula

    TipodeHlice

    Tipodevirussegn

    husped.Familiadevirus

    SencillaFago

    X174M13

    Animal Parvovirus

    Circular

    Animal Parvovirus

    Doble Animal

    Papovavirus (SV40,polioma)Adenovirus

    Herpetovirus (Herpes)Poxvirus(viruela)

    Iridovirus(pesteporcina)

    Lineal Doble FagoExtremoscohesivos:Fago (80,434,P2,186)Redundanciaterminal:serie Tpar,T3yT7

    FAGO M13

    FAGO

    lisis bacteria ciclo lisognico

    infecta E. coli

    cpside icosadrica, DNA doble hlice lineal con ~ 48.000 pb

    extremos cohesivos: extremos 5 monocatenarios (12nucletidos de secuencia complemenaria)

    lisis bacteria ciclo lisognico

  • 20/12/2010

    4

    VIRUS ARN-ADN

    Tipo de Molcula

    Tipo de Hlice

    Tipo de virus segn husped. Familia de virus

    Lineal Sencilla Animal

    Retrovirus (Ribodesoxivirus) - Sarcoma de Rous (Pollo)

    - Leucemia de Rauscher (ratn) - HIV (virus de inmunodeficiencia humana

    causante del SIDA)

    VIRUS ARN-ADN

    Tipo de Molcula

    Tipo de Hlice

    Tipo de virus segn husped. Familia de virus

    Circular Doble (gap) Animal Hepatitis B

    VIRUS HIV

    VIRUS HEP. B

  • 20/12/2010

    5

    GENFORO BACTERIANO

    ADN doble hlice circular tamao variable (0 1 a 8 x109 dalton) tamao variable (0,1 a 8 x109 dalton) E. coli (1.100 m longitud, 3,2 x105 pares nucletidos)

    Material gentico NUCLEOIDE

    ARN (30%)

    ADN (60%)

    LPIDOS (1%)

    PROTENA (5-10%)

    ( )

    ADN altamente organizadoPlegamiento formando DOMINIOS SUPERENRROLLAMIENTO

    GENFORO BACTERIANO

    Plegamiento formando DOMINIOS SUPERENRROLLAMIENTO

  • 20/12/2010

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    N dominios en E. coli variable (12 a 80 dominios)Composicin: ADN dplex condensado + protenas bsicas

    GENFORO BACTERIANO

    PROTENAS BSICAS DETECTADAS EN BACTERIAS

    Protena Composicin Contenido por clulas Semejanza con eucariontes

    GENFORO BACTERIANO

    HU Dmero subunidades y de 9.000 d.40.000 dmeros Histona H2A

    HDmero subunidades

    idnticas de 28.000 d.

    30.000 dmero Histona H2B

    IHF

    Subunidad de 10.500 d.

    Subunidad de 9 500 d

    Desconocido Desconocida

    9.500 d.

    H1 Subunidad de 15.000 d.10.000 copias Desconocida

    HLP1 Monmero de 15.000 d.20.000 copias Desconocida

    P Sububnidad de 3.000 d. Desconocido Protaminas

  • 20/12/2010

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    -Fis-Dan (DNA-binding protein under anaerobic conditions) = YgiP(Nucleic Acids Research, 2010, Vol. 38, No. 11 36053618)

    ADN EXTRACROMOSMICOPLSMIDOS

    ADN doble y circular

    Replicacin autnoma; informacin no vital

    Posibilidad de integracin en cromosoma principal bacteriano EPISOMA

    i i i t- secuencias insercin y transposones

    Tamao variable: 2.000 a 100.000 pb ADN bacterianoplsmidos

  • 20/12/2010

    8

    FUNCIN PLSMIDOS

    TRANSFERENCIA FACTOR FERTILIDAD (F)ENTRE BACTERIAS CONJUGACIN

    F+

    F-

    FUNCIN PLSMIDOS

    Hfrf t F i t d factor F integrado en genforo bacteriano

    transferencia de marcadores cromosmicos a F- con elevada frecuencia

    transferencia desde punto fijo y en un orden determinado (integracin especfica factor F)

  • 20/12/2010

    9

    FUNCIN PLSMIDOS

    plsmido E. coli resistente a ampicilina (ampr) y tetraciclina (tetr)

    ESTIRPE A ESTIRPE B

    cys+, leu+, thr+ cys-, leu-, thr--

    di i medio mnimo con leucina y treonina

    medio mnimo con:

    -treonina

    -leucina

    -sin suplementos

  • 20/12/2010

    10

    A.- Medio mnimo con leucina y treonina:

    -cys+, leu+, thr+-cys+, leu-, thr-

    B.- Medio mnimo con:

    - TREONINA: cys+, leu+, thr+ Y cys+, leu+, thr-- LEUCINA: cys+, leu+, thr+ Y cys+, leu-, thr+- MEDIO MNIMO: cys+, leu+, thr+

    TECNOLOGA ADN RECOMBINANTE

    comparacin secuencias ADN de genes evolucin

    -rasgos caractersticos gen (n intrones, posicin)

    -estructura producto proteico gen FUNCIN

    modificacin parte de secuencia ADN de un gen y reinserciny

    CONSTRUCCIN ADN RECOMBINANTE

  • 20/12/2010

    11

    TECNOLOGA ADN RECOMBINANTE

    TECNOLOGA ADN RECOMBINANTE

    DIGESTIN ADN

    (enzimas de restriccin)

    corte ADN en fragmentos para su clonacin

    cortes escalonados ADN recombinante

  • 20/12/2010

    12

    TECNOLOGA ADN RECOMBINANTE

    clonacin gen especfico

    TECNOLOGA ADN RECOMBINANTE

    diseo plsmidos

    como vectores de clonacin de ADN