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125 Atividade antiulcerogênica e mecanismo de ação de alimento fermentado à base de trigo e soja utilizado como alimento funcional ANA POSSENTI 1 , JOÃO ERNESTO DE CARVALHO 2 , KARIN MAIA MONTEIRO 3 , ISABELA MÁRCIA GIBRIM DIAS 4 , NÁDIA FÁTIMA GIBRIM 5 , HELAINE BEATRIZ JACOBUCCI 6 Artigo Original Resumo Objetivo: Estudar o mecanismo de ação e avaliar a proteção da mucosa do estômago de ratos Wistar pela atividade de um alimento com propriedades funcio- nais à base de trigo e soja fermentado, a fim de reduzir o processo ulcerativo induzido por etanol. Métodos: Nesse estudo foram utilizados os modelos de indução de úlcera por etanol absoluto em ratos Wistar tratados previamente com Indometacina (5mg/kg de peso), N-etilmaleimida (10mg/kg de peso) e L-NAME (5mg/kg de peso). No mesmo modelo de indução de úlcera foi realizada a administração de solução salina (10mL/kg de peso) como controle negativo, Carbenoxolona (200mg/ kg) como controle positivo e o produto fermentado na dose de 2000mg/kg de peso animal. Resultados: Na verificação da atividade antiulcerogênica do fermentado em pó, o Índice de Lesões Ulcerativas (ILU) foi inibido em 29,9%, enquanto a Carbenoxolona utilizada como controle positivo foi capaz de inibir o ILU em 83,7%. No modelo de indução de úlcera por etanol absoluto, com a administração prévia de L-NAME, N-etilmaleimida e da Indometacina, constatou-se que, nos dois primeiros trata- mentos, o fermentado apresentou atividade antiulcerogê- nica de 50,9% e 28,3%, respectivamente e no tratamento com Indometacina, o produto não apresentou atividade antiulcerogênica, o que sugere que seu mecanismo de ação ocorre pela síntese ou redução da degradação de prostaglandinas que são uma das responsáveis pela cito- proteção gástrica. Conclusão: Com base nos dados obtidos nesse experimento com ratos para avaliação da atividade antiulcerogênica e mecanismo de ação do produto fermentado, concluiu-se que este provavelmente promove a citoproteção gástrica especialmente através dos níveis de prostaglandinas. Unitermos: Úlcera Gástrica, Ratos Wistar, Prostaglan- dinas e Suplementação Alimentar. Summary Objective: To study the mechanism of action and evaluate the protection of the stomach mucosa of Wistar rats due to the activity of a fermented soy and wheat-based food product with functional properties in order to reduce the ethanol-induced ulcerative process. Methods: In this study, ulcer induction models by absolute ethanol were used in Wistar rats previously treated with Indomethacin (5mg/kg of body weight), N-ethylmaleimide (10mg/kg of body weight), and L-NAME (5mg/kg of body weight). Within the same ulcer induction model, the adminis- tration of the following was performed: saline solution (10 mL/kg of body weight) as a negative control, Carbe- noxolone (200mg/kg) as a positive control, and the fermented product at a dose of 2,000mg/kg of body weight. Results: When verifying the antiulcerogenic 1. Bióloga da Divisão de Farmacologia do CPQBA da UNICAMP. 2. Biomédico, Doutor em Farmacologia e Coordenador da Divisão de Farmacologia do CPQBA da UNICAMP. 3. Veterinária, Mestre e Pesquisadora da Divisão de Farmacologia do CPQBA da UNICAMP. 4. Licenciada em Educação Física e graduanda em Nutrição, ambas pela UNICAMP. 5. Economista Doméstico, Doutora em Alimentos e Nutrição pela UNICAMP. 6. Nutricionista, Doutora em Alimentos e Nutrição pela UNICAMP. Endereço para correspondência: CPQBA / UNICAMP. Caixa Postal: 6171 - CEP 13081-970 - Campinas – SP - e-mail: anap@cpqba. unicamp.br. Recebido em: 10/08/2011. Aprovação em: 14/10/2011. Antiulcer activity and mechanism of action of fermented food based on wheat and soy beans used as functional food 30(4):125-131 GED gastroenterol. endosc.dig. 2011: 30(4):125-131

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Atividade antiulcerogênica e mecanismo de ação de alimento fermentado à base de trigo e soja utilizado comoalimento funcional

ANA POSSENTI1, JOÃO ERNESTO DE CARVALHO

2, KARIN MAIA MONTEIRO3, ISABELA MÁRCIA GIBRIM DIAS

4, NÁDIA FÁTIMA GIBRIM5,

HELAINE BEATRIZ JACOBUCCI6

Artigo Original

Resumo

Objetivo: Estudar o mecanismo de ação e avaliar a

proteção da mucosa do estômago de ratos Wistar pela

atividade de um alimento com propriedades funcio-

nais à base de trigo e soja fermentado, a fi m de reduzir

o processo ulcerativo induzido por etanol. Métodos: Nesse estudo foram utilizados os modelos de indução

de úlcera por etanol absoluto em ratos Wistar tratados

previamente com Indometacina (5mg/kg de peso),

N-etilmaleimida (10mg/kg de peso) e L-NAME (5mg/kg

de peso). No mesmo modelo de indução de úlcera foi

realizada a administração de solução salina (10mL/kg de

peso) como controle negativo, Carbenoxolona (200mg/

kg) como controle positivo e o produto fermentado na

dose de 2000mg/kg de peso animal. Resultados: Na

verifi cação da atividade antiulcerogênica do fermentado

em pó, o Índice de Lesões Ulcerativas (ILU) foi inibido

em 29,9%, enquanto a Carbenoxolona utilizada como

controle positivo foi capaz de inibir o ILU em 83,7%. No

modelo de indução de úlcera por etanol absoluto, com a

administração prévia de L-NAME, N-etilmaleimida e da

Indometacina, constatou-se que, nos dois primeiros trata-

mentos, o fermentado apresentou atividade antiulcerogê-

nica de 50,9% e 28,3%, respectivamente e no tratamento

com Indometacina, o produto não apresentou atividade

antiulcerogênica, o que sugere que seu mecanismo de

ação ocorre pela síntese ou redução da degradação de

prostaglandinas que são uma das responsáveis pela cito-

proteção gástrica. Conclusão: Com base nos dados

obtidos nesse experimento com ratos para avaliação

da atividade antiulcerogênica e mecanismo de ação do

produto fermentado, concluiu-se que este provavelmente

promove a citoproteção gástrica especialmente através

dos níveis de prostaglandinas.

Unitermos: Úlcera Gástrica, Ratos Wistar, Prostaglan-

dinas e Suplementação Alimentar.

Summary

Objective: To study the mechanism of action and evaluate

the protection of the stomach mucosa of Wistar rats due

to the activity of a fermented soy and wheat-based food

product with functional properties in order to reduce the

ethanol-induced ulcerative process. Methods: In this

study, ulcer induction models by absolute ethanol were

used in Wistar rats previously treated with Indomethacin

(5mg/kg of body weight), N-ethylmaleimide (10mg/kg of

body weight), and L-NAME (5mg/kg of body weight).

Within the same ulcer induction model, the adminis-

tration of the following was performed: saline solution

(10 mL/kg of body weight) as a negative control, Carbe-

noxolone (200mg/kg) as a positive control, and the

fermented product at a dose of 2,000mg/kg of body

weight. Results: When verifying the antiulcerogenic

1. Bióloga da Divisão de Farmacologia do CPQBA da UNICAMP. 2. Biomédico, Doutor em Farmacologia e Coordenador da Divisão de Farmacologia do CPQBA da UNICAMP. 3. Veterinária, Mestre e Pesquisadora da Divisão de Farmacologia do CPQBA da UNICAMP. 4. Licenciada em Educação Física e graduanda em Nutrição, ambas pela UNICAMP. 5. Economista Doméstico, Doutora em Alimentos e Nutrição pela UNICAMP. 6. Nutricionista, Doutora em Alimentos e Nutrição pela UNICAMP. Endereço para correspondência: CPQBA / UNICAMP. Caixa Postal: 6171 - CEP 13081-970 - Campinas – SP - e-mail: [email protected]. Recebido em: 10/08/2011. Aprovação em: 14/10/2011.

Antiulcer activity and mechanism of action of fermented food based on

wheat and soy beans used as functional food

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Atividade Antiulcerogênica e Mecanismo de Ação de Alimento Fermentadoà Base de Trigo e Soja Utilizado Como Alimento Funcional

activity of the fermented powder, the Ulcerative Lesion Index

(ULI) was inhibited by 29.9%, while the Carbenoxolone used

as a positive control was able to inhibit the ULI by 83.7%. In

the ulcer induction model by absolute ethanol, with previous

administration of L-NAME, N-ethylmaleimide, and Indome-

thacin, it was verifi ed that with the fi rst two treatments the

fermented powder showed 50.9% and 28.3% antiulcerogenic

activity, respectively, and no antiulcerogenic activity with the

Indomethacin treatment, which suggests that its mechanism

of action occurs through the synthesis or degradation reduc-

tion of prostaglandins responsible, along with other factors,

for the gastric cytoprotection. Conclusion: Based on the

data from this trial with rats to evaluate the antiulcerogenic

activity and mechanism of action of the fermented product, it

was concluded that it probably promotes gastric cytoprotec-

tion, mainly through prostaglandin levels.

Keywords: Gastric Ulcer, Wistar Rats, Prostaglandins, Food

Supplement.

Introdução

A úlcera péptica é um agravo que afeta entre 8 e 10% da

população dos países industrializados, alcançando apro-

ximadamente de 11 a 20% dos homens e 8 a 11% das

mulheres e causando elevadas perdas econômicas e gastos

com a saúde1. Esse tipo de úlcera é uma patologia carac-

terizada pelo aparecimento de lesões ulcerosas agudas ou

crônicas que expõe a mucosa gástrica à ação agressiva do

suco ácido-péptico2.

A patogênese das lesões gástricas pode ser causada por

vários mecanismos que agem sinergicamente ou não. Desta

forma, fatores intrínsecos como o aumento da secreção

gástrica e da pepsina, diminuição do fl uxo sanguíneo,

supressão de prostaglandinas endógenas, inibição do cres-

cimento e proliferação celular da mucosa, bem como altera-

ções na motilidade gástrica podem ocasionar esta doença.

As lesões gástricas também podem ser provocadas por

outros fatores agressivos endógenos, em associação aos

exógenos predisponentes, relacionados às condições de

vida como estresse, fumo, álcool, uso contínuo de drogas

anti-infl amatórias não-esteroidais, ingestão de determi-

nados alimentos, infecção por Helicobacter pylori e predis-

posição genética3-7.

As úlceras gástricas também podem ser desencadeadas por

fatores não infecciosos e a conduta terapêutica deve asso-

ciar mudanças no estilo de vida relacionadas aos hábitos

alimentares, abandono do tabagismo e não ingestão de

bebidas alcoólicas8.

Um destes agravantes é o etanol, um agente irritante da

mucosa gástrica devido à capacidade de destruição da

camada de muco e do bicarbonato, que protegem a mucosa

gástrica contra o ácido clorídrico e outros agentes agres-

sores. Ele atua bloqueando a citoproteção gástrica por preci-

pitação das proteínas, liberação de radicais livres e redução

da concentração de compostos sulfi drilas nas células da

mucosa9,10.

Substâncias como histamina, acetilcolina e gastrina atuam

como feedback positivo na produção de ácido clorídrico pelas

células parietais do estômago no momento de distensão da

parede gástrica, modifi cando assim o pH intraluminal11.

A presença do conteúdo alimentar também atua como estí-

mulo de mecanismos de proteção da barreira mucosa, assim

como a secreção do muco e do bicarbonato pela mucosa,

além da liberação sanguínea de prostaglandinas. Quando há

um desequilíbrio entre os fatores de defesa e agressão, pode

haver o aparecimento de úlceras10.

Com a fi nalidade de conscientizar a população sobre a

importância da ingestão de grãos integrais e fermentados e

também de proteínas de origem vegetal, e a fi m de minimizar

o grande número de casos de úlcera péptica que é respon-

sável por elevadas perdas econômicas e gastos com a saúde,

conforme mencionado acima, utilizou-se um suplemento

nutricional fermentado em pó.

Os alimentos fermentados podem ser uma opção positiva

de nutrição. Sua utilização seja em forma líquida ou sólida,

como o missô, tempeh, shoyo, iogurtes e o gérmen de trigo

fermentado12, contribuem para uma alimentação mais natural,

saudável e funcional, visto que a fermentação melhora o perfi l

nutricional dos alimentos através da hidrólise enzimática de

proteínas para peptídeos e aminoácidos, assim como de

carboidratos para dissacarídeos e monossacarídeos, favore-

cendo a sua digestibilidade e absorção.

O produto é um complexo de substâncias biologicamente

ativas, derivadas da soja, trigo e gérmen de trigo integrais

orgânicos e potencializados pela ação da fermentação.

Outro fator importante atribuído ao processo de fermentação

deste produto é a síntese de vitamina B12 (0,26mcg/16g),

uma maior quantidade de selênio (14,40mcg/16g) e da fi bra

betaglucana (0,72g/16g). O produto possui Registro na

ANVISA, Aprovação da Associação Brasileira de Nutrologia

(ABRAN) como Alimento Saudável e da Federação Brasileira

de Gastroenterologia (FBG) como alimento seguro e indi-

cado para o aparelho digestório, é fonte de proteínas e fi bras,

contendo 19 aminoácidos, sendo oito essenciais.

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A. POSSENTI, J. E. CARVALHO, K. M. MONTEIRO, I. M. G. DIAS, N. F. GIBRIM, H. B. JACOBUCCI

O consumo diário de oito gramas do suplemento fermentado

exerceu efeito positivo na constipação intestinal causada pelo

uso do carbonato de cálcio por pacientes em hemodiálise13.

Outro estudo clínico, realizado em pacientes com HIV/AIDS,

verifi cou que a satisfação com a saúde e com o funciona-

mento intestinal destas pessoas passou de 31% para 80%

antes e após o consumo do fermentado14.

O presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade do

produto fermentado na proteção do epitélio da mucosa do

estômago de ratos Wistar machos contra o processo ulcera-

tivo induzido por etanol e seu mecanismo de ação.

Métodos

Ensaio biológico

O estudo foi realizado pelo Centro Pluridisciplinar de

Pesquisas Químicas, Biológicas e Agrícolas da Universi-

dade Estadual de Campinas-SP (Unicamp). Para a reali-

zação do experimento foram utilizados ratos machos da

linhagem Wistar, com peso corporal entre 200 e 250g,

fornecidos pelo Centro de Bioterismo (CEMIB) da Univer-

sidade Estadual de Campinas-SP (Unicamp) e utilizados

nos experimentos após período mínimo de sete dias de

adaptação ao biotério, com ciclo de claro e escuro de 12

horas e temperatura ambiente de 20ºC, com água e ração

para animais de laboratório (Nuvilab CR-1 autoclavável).

Teste farmacológico

Utilizaram-se grupos de seis animais para os diferentes

modelos de indução de úlcera. Após um período de 16 horas

em jejum, com acesso livre à água, cada grupo de animais

recebeu por via oral os tratamentos correspondentes, ou

seja, solução salina 0,9% (10mL/kg) e o fermentado na dose

de 2000mg/kg de peso corporal do animal, administrado

previamente em três doses consecutivas, divididas em um

período de 72 horas.

Decorridos 30 minutos da última dose, foi feita a adminis-

tração oral de 1 mL de etanol absoluto, de acordo com a

metodologia descrita por Robert15, sendo mortos após uma

hora por deslocamento cervical.

Os estômagos foram retirados, abertos ao longo da maior

curvatura e lavados em solução salina 0,9% para posterior

contagem e avaliação das lesões ulcerativas. O índice de

lesões ulcerativas (ILU) foi calculado por meio da somatória

dos parâmetros a seguir16.

Para a determinação da porcentagem de inibição do ILU

apresentada pelos grupos tratados em relação ao grupo

controle, foi utilizada a seguinte fórmula:

Indução de úlcera por etanol

Utilizaram-se grupos de seis animais para os diferentes

modelos de indução de úlcera.

Após um período de 16 horas em jejum, com acesso

livre à água, os animais receberam uma dose de solução

salina (10mL/kg) como controle negativo, Carbenoxolona

(200mg/kg) como controle positivo e o produto fermen-

tado na dose de 2000mg/kg de peso animal, administrado

previamente em três doses consecutivas, divididas em um

período de 72 horas, conforme procedimento descrito

anteriormente.

Após 30 minutos da última administração, foi feita a admi-

nistração oral de 1mL de etanol absoluto, de acordo com

a metodologia descrita por Robert15 e uma hora depois os

animais foram sacrifi cados por deslocamento cervical.

Os estômagos foram retirados, abertos ao longo da maior

curvatura e lavados em solução salina 0,9% para posterior

contagem e avaliação das lesões ulcerativas.

Parâmetros avaliados Pontuação

Perda de pregas da mucosa 1 ponto

Descoloração da mucosa 1 ponto

Edema 1 ponto

Hemorragias 1 ponto

Petéquias 2 pontos

- Até 10

- Mais que 10

3 pontos

Úlceras até 1 mm Nx2 pontos

Úlceras maiores que 1 mm Nx3 pontos

Úlceras perfuradas Nx4 pontos

Parâmetros para estabelecimento do Índice de Lesões Ulcerativas (ILU)

N - Número de lesões observadas.

Médiacontrole – Médiatratado x 100

Médiacontrole

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Estudo da participação de prostaglandinas na cito-proteção gástrica ou modelos de indução de úlcera gástrica por anti-infl amatório (Indometacina)

O ensaio foi conduzido com grupos de seis animais subme-

tidos a diferentes tratamentos. Após o período de jejum de

16 horas, com livre acesso à água, os animais receberam a

administração intraperitoneal de Indometacina (5mg/kg).

Em seguida, o procedimento transcorreu conforme descrito

anteriormente.

Estudo da participação das substâncias sulfi drílicas não-proteicas sobre a citoproteção gástrica

Após o período de jejum, com livre acesso à água, os animais

de todos os grupos receberam a administração subcutânea

de N-etilmaleimida (10mg/kg). Em seguida, o procedimento

transcorreu conforme descrito anteriormente.

Estudo da participação do óxido nítrico sobre a cito-proteção gástrica

Após o período de jejum, com livre acesso à água, os animais

receberam a administração endovenosa de L-NAME na dose

de 5mg/kg. Em seguida, o tratamento transcorreu conforme

descrito anteriormente.

Quanto à análise estatística, todos os resultados foram sub-

metidos à análise de variância de uma única via (ANOVA),

considerando-se como nível crítico, p<0,05 para que fosse

considerada diferença signifi cativa entre os grupos controle

e tratados, seguida de Teste de Duncan, considerando-se o

mesmo nível crítico.

Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa

da Universidade Estadual de Campinas-SP sob Protocolo Nº

2353-1 de 23.02.2011.

Resultados

No modelo de úlcera induzida por etanol (gráfi co 1 e tabela 1),

o fermentado apresentou atividade antiulcerogênica, redu-

zindo em 29,9% o ILU, enquanto que a Carbenoxolona,

droga de referência para este modelo experimental, foi

capaz de reduzir o ILU em 83,7%. Os resultados obtidos

estão expressos no gráfi co 1 e tabela 1, como média ±

desvio padrão da média do índice de lesões ulcerativas

para cada grupo de tratamento.

Já no modelo de úlcera induzida por etanol absoluto com

administração prévia de Indometacina, o fermentado deixou

de apresentar atividade antiulcerogênica, conforme verifi cado

anteriormente, sem a administração prévia deste anti-infl a-

matório não-esteroidal.

Os resultados obtidos estão expressos no gráfi co 2 e tabela

2, como média ± desvio padrão da média do índice de lesões

ulcerativas para cada grupo de tratamento.

Atividade Antiulcerogênica e Mecanismo de Ação de Alimento Fermentadoà Base de Trigo e Soja Utilizado Como Alimento Funcional

Tratamento Dose(mg/kg) N ILU

(média ± epm)Inibição do

ILU (%)Salina 10 (mL/kg) 6 60,3 ± 14,6 -

Carbenoxolona 200 6 9,8 ± 2,4** 83,7

Fermentado 2000 6 42,3 ± 7,3* 29,9

Tabela 1: Efeito da administração oral do produto fermen-tado em modelo experimental de úlcera induzida por etanol em ratos.

ANOVA (F2,15): 42,89 p<0,001; Teste de Duncan: * p<0,05 ** p<0,001.

80

70

60

50

40

30

20

10

060,3 9,8 42,3

Salina

**

*

ILU

(m

édia

±dp

)

CarbenoxolonaTratamentos (mg/kg)

Fermentado

Gráfi co 1: Efeito da administração oral do produto fer-mentado em modelo experimental de úlcera induzida por etanol em ratos (ANOVA (F2,15): 42,89 p<0,001; Teste de Duncan: *p<0,05 ** p<0,001).

120

100

80

80

60

40

20

079,5 89,8 90,5

Salina

ILU

(m

édia

±dp

)

Salina + indometacinaTratamentos (mg/kg)

Fermentado +indometacina

Gráfi co 2: Efeito da administração oral do fermentado em modelo experimental de úlcera induzida por etanol em ratos pré-tratados com indometacina (ANOVA (F2,13): 0,4 p>0,05).

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A. POSSENTI, J. E. CARVALHO, K. M. MONTEIRO, I. M. G. DIAS, N. F. GIBRIM, H. B. JACOBUCCI

No modelo de úlcera induzida por etanol absoluto, com admi-

nistração prévia dos animais com N-etilmaleimida, o produto

manteve sua atividade antiulcerogênica, inibindo o ILU em

28,3%. Os resultados obtidos estão expressos no gráfi co 3 e

tabela 3, como média ± desvio padrão da média do índice de

lesões ulcerativas para cada grupo de tratamento.

No modelo de úlcera induzida por etanol absoluto em ratos,

com administração prévia de L-NAME, o fermentado manteve

sua atividade antiulcerogênica, inibindo o ILU em 50,9%. Os

resultados obtidos estão expressos no gráfi co 4 e tabela 4,

como média ± desvio padrão da média do índice de lesões

ulcerativas para cada grupo de tratamento.

Discussão

Existem basicamente dois mecanismos de ação para as

drogas antiulcerogênicas. O primeiro deles refere-se aos

mecanismos que controlam o processo de secreção ácida

gástrica e atuam como potentes antioxidantes. O segundo

refere-se àqueles mecanismos que aumentam a resistência

das células da mucosa gástrica aos fatores agressivos pelo

aumento da síntese de prostaglandinas e/ou estimulando a

secreção de muco e bicarbonato17,18,19.

O etanol é responsável pela diminuição da defesa fi siológica

da mucosa gástrica uma vez que provoca a diminuição da

produção de muco, do fl uxo sanguíneo local, da secreção

do bicarbonato e dos níveis de glutationa e prostaglandina

Tratamento Dose(mg/kg) N ILU

(média ± epm)Inibição do

ILU (%)Salina 10 (mL/kg) 6 72,5 ± 15,2 -

Salina +

N-etilmaleimida

10 6 82,8 ± 11,5 -

Fermentado +

N-etilmaleimida

2000 6 52,0 ± 20,3 28,3

Tabela 3: Efeito da administração oral do fermentado em modelo experimental de úlcera induzida por etanol em ratos pré-tratados com N-etilmaleimida.

ANOVA (F2,15): 10,16 p<0,001; Teste de Duncan *p<0,05

Tratamento Dose(mg/kg) N ILU

(média ± epm)Inibição do

ILU (%)Salina 10 (mL/kg) 6 79,5 ± 8,5 -

Salina +

L-NAME

5 6 77,3 ± 24,5 -

Fermentado +

L-NAME

2000 6 39,0 ± 23,1* 50,9

Tabela 4: Efeito da administração oral do produto fermentado em modelo experimental de úlcera induzida por etanol em ratos pré-tratados com L-NAME.

ANOVA (F2,12): 5,75 p<0,05; Teste de Duncan * p<0,05.

70

100

60

90

50

80

40

30

20

10

072,5 82,8 52,0

Salina

ILU

(m

édia

±dp

)

Salina + N-etilmaleimidaTratamentos (mg/kg)

Fermentado +N-etilmaleimida

*

Gráfi co 3: Efeito da administração oral do fermentado em modelo experimental de úlcera induzida por etanol em ratos pré-tratados com N-etilmaleimida (ANOVA (F2,15): 10,16 p<0,001; Teste de Duncan *p<0,05).

120

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80

80

60

40

20

079,5 77,3 39,0

Salina

ILU

(m

édia

±dp

)

Salina + NAMETratamentos (mg/kg)

Fermentado +L-NAME

*

Gráfi co 4: Efeito da administração oral do produto fermen-tado em modelo experimental de úlcera induzida por eta-nol em ratos pré-tratados com L-NAME (ANOVA (F2,12): 5,75 p<0,05; Teste de Duncan * p<0,05).

Tratamento Dose(mg/kg) N ILU

(média ± epm)Inibição do

ILU (%)Salina 10 (mL/kg) 6 79,5 ± 8,5 -

Salina +

Indometacina

5 6 89,8 ±22,8 -

Fermentado +

Indometacina

2000 6 90,5 ± 23,2 0,0

Tabela 2: Efeito da administração oral do produto fermentado em modelo experimental de úlcera induzida por etanol em ratos pré-tratados com Indometacina.

ANOVA (F2,13): 0,4 p>0,05

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endógena. O etanol também é capaz de ativar os meca-

nismos que são considerados fatores agressores que podem

ocasionar ulceração, além de aumentar a liberação de hista-

mina, o infl uxo de íons de cálcio, a geração de radicais livres

e a produção de leucotrienos20.

A atividade antiulcerogênica promovida pelo produto fermen-

tado no modelo de úlcera induzida por etanol em ratos sugere

o envolvimento de fatores citoprotetores da mucosa gástrica,

uma vez que, neste modelo, as drogas que agem por meca-

nismos antissecretórios não apresentam tal atividade21.

A carbenoxolona é uma droga que apresenta comprovada

atividade antiulcerogênica e seu mecanismo de ação consiste

em aumentar a síntese de prostaglandinas na mucosa gástrica

inibindo as enzimas que promovem seu catabolismo22,23. As

prostaglandinas apresentam efeito citoprotetor da mucosa

por inibição da secreção ácida e pela capacidade de aumentar

a quantidade de muco, além de serem consideradas subs-

tâncias vasodilatadoras que garantem o aporte nutricional

necessário para o bom funcionamento celular7,24.

A mucosa gástrica apresenta grandes concentrações de

glutationa reduzida, substância sulfi drílica não proteica, capaz

de promover citoproteção gástrica por impedir um aumento

de permeabilidade vascular e ainda por impedir a ação nociva

de radicais livres tóxicos para as células da mucosa25,26.

A solução salina mais N-etilmaleimida e o fermentado mais

N-etilmaleimida foram utilizados no tratamento prévio à

indução de úlcera por etanol absoluto, pois a N-etilmalei-

mida é capaz de promover a alquilação dos grupos sulfi -

drilas, inativando-os.

Desta forma, se o fermentado exercesse sua atividade antiul-

cerogênica por meio da interferência nesses grupamentos

sulfi drila, o tratamento com N-etilmaleimida bloquearia esta

atividade.

No tratamento em questão o fermentado apresentou ativi-

dade antiulcerogênica, diminuindo o ILU em 28,3%. Assim

fi ca descartada a hipótese de que o mecanismo de ação

antiulcerogênica do produto fermentado esteja relacionado

com as substâncias sulfi drílicas não proteicas.

A microvasculatura gástrica é outro alvo para o desenvolvi-

mento de drogas antiulcerogênicas. A NO-sintase é impor-

tante para manter a barreira protetora da mucosa gastrin-

testinal. Esses mecanismos citoprotetores são paralelos aos

efeitos das prostaglandinas e isso se deve à capacidade que

o NO apresenta na liberação do muco gástrico, na manu-

tenção da função da barreira epitelial e no aumento do fl uxo

sanguíneo da mucosa. Este aumento do fl uxo sanguíneo

acelera a retirada de íons de hidrogênio do contato direto

com a mucosa, além de aumentar a oferta de nutrientes para

esse tecido27,28.

A solução salina mais L-NAME e o fermentado mais L-NAME

foram utilizados no tratamento prévio à indução de úlcera

por etanol absoluto, o fermentado manteve sua atividade

antiulcerogênica, inibindo o índice de lesões ulcerativas em

50,9% descartando assim a hipótese de que os princípios

ativos antiulcerogênicos do produto interfi ram na síntese de

NO uma vez que a L-NAME é um inibidor do NO-sintase,

enzima responsável pelo processo de síntese do NO a partir

da L-arginina29,30,31.

Outra possibilidade seria que o produto fermentado conti-

vesse alguma substância capaz de estimular a síntese ou inibir

a degradação de prostaglandinas. Para avaliação da atividade

do produto sobre os níveis de prostaglandinas na mucosa

gástrica, foi administrado solução salina mais Indometacina e

o fermentado mais Indometacina antes da indução de úlcera

gástrica.

A Indometacina, que é um anti-infl amatório não-esteroidal,

quando administrado regularmente inibe a via das enzimas

ciclooxigenase (COX-1 e COX-2), responsáveis pela síntese

das prostaglandinas desencadeando, assim, um processo

ulceroso7,24,31. Na dose em que foi ministrado (5 mg/kg de

peso corpóreo), esse antibiótico não produz ulceração por si

próprio, mas potencializa aquelas causadas pelo etanol abso-

luto32.

Nessas condições, o fermentado perdeu a atividade antiulce-

rogênica observada no grupo de animais que não recebe o

tratamento prévio com indometacina. Este resultado sugere

que o mecanismo de ação antiulcerogênica deste produto

está relacionado com a síntese de prostaglandinas ou a

redução de sua degradação.

A confi rmação das prostaglandinas no mecanismo de ação

do fermentado poderá ser realizada através da quantifi cação

do muco gástrico em animais tratados com o produto, de

acordo com metodologia descrita por Corne33.

Conclusão

Com base nos dados obtidos nesse experimento com ratos

para avaliação da atividade antiulcerogênica e mecanismo de

ação do produto fermentado, concluiu-se que este prova-

velmente promove a citoproteção gástrica especialmente

através dos níveis de prostaglandinas.

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Atividade Antiulcerogênica e Mecanismo de Ação de Alimento Fermentadoà Base de Trigo e Soja Utilizado Como Alimento Funcional

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A. POSSENTI, J. E. CARVALHO, K. M. MONTEIRO, I. M. G. DIAS, N. F. GIBRIM, H. B. JACOBUCCI

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