Protenas totais e sricasBianca R. Orlando Bioqumica Mdica 2007

Protenas totais e sricas

Protenas totais Albumina Globulinas

Protenas totaisExistem mais de 300 protenas diferentes j identificadas no plasma sanguneo. Apenas algumas so avaliadas rotineiramente Amostras mais usadas: sangue, urina, LCR, lquido amnitico, peritonial, pleural ou sinovial, saliva ou fezes.

Protenas totais

Funes: - transporte - manuteno da presso coloidosmtica - tamponamento de pH - imunidade humoral - atividade enzimtica - coagulao - resposta da fase aguda

Protenas totais

A concentrao das protenas plasmticas determinada por trs fatores: - Velocidade de sntese: A maioria produzida no fgado. Cerca de 25g/dia num indivduo de 70kgs - Volume de lquido: Cerca de 250g de protenas so encontradas no compartimento vascular de um homem de 70kgs, dando uma concentrao ao redor de 7,0g/dl

Protenas totais- Velocidade do catabolismo: As protenas totais so degradadas, liberando aminocidos para a sntese de protenas celulares.

Protenas totais

Determinao das protenas totais: - Mtodo do Biureto: O cobre, em meio alcalino, reage com a ligao peptdica. O produto apresenta bandas de absoro. Interferentes: Substncias que possam reagir com o on cprico. Ex: Bilirrubina aumentada, triglicerdeos acima de 500mg/dl VR soro: 6,0 8,0g/dl

Protenas totaisOutros mtodos: - Mtodo de Lowry - Mtodo de Bradford - Mtodo de Smith Paciente: Jejum de 8 horas Amostra: soro sem hemlise e no lipmico

Protenas totais

Hiperproteinemia - Desidratao (vmito, diarria ou acidose diabtica) - Mieloma mltiplo - Cirrose heptica - Hepatite ativa crnica - Lupus eritematoso sistmico - Infeces bacteriana crnica

Hipoproteinemia - Hemodiluio - Perda renal de protenas - Queimaduras severas -Desnutrio (Kwashiorkor) -Hipertireoidismo -Hemorragia grave

AlbuminaRepresenta cerca de 60% das protenas do plasma humano. Meia vida de 15-19 dias Velocidade de sntese depende da ingesto protica e regulada por feedback negativo pelo teor de albumina circulante Produo de cerca de 15g/ dia

Albumina

Funes - Regulao osmtica - Transporte e armazenamento : cidos graxos e esterides; bilirrubina; frmacos Sntese : no fgado, na forma de proalbumina. Degradao: mecanismo desconhecido, degradadas aleatoriamente (novas e velhas), provavelmente pelos endotlio dos capilares, medula ssea e sinusides hepticos.

Albumina

Determinao da albumina - Mtodos de corantes: Metil orange, HABA, verde de bromo cresol(VBC) e prpura de bromocresol VR: 3,5 a 5,5g/dl - Eletroforese - Fracionamento salino

AlbuminaPaciente : No consumir dieta rica em gordura por 48hr antes da prova Amostra: soro, observar postura dos pacientes, pois em pacientes ambulatoriais o teor de albumina cerca de 0,3g/dL maior que em pacientes hospitalizados. Interferncias: Elevao ACO, agentes citotxicos. Reduo Paracetamol, aspirina, ACO, ampicilina

Albumina

Hiperalbuminemia - rara - Encontrada em casos de carcinomatose metasttica, desidratao aguda, diarria, estresse, febre reumtica, meningite, osteomielites, traumatismo, tuberculose, hemoconcentrao, entre outros.

Albumina

Hipoalbuminemia - Reduo da sntese: Cirrose - Ingesto inadequada de protenas: A sntese reduzida a um tero durante um jejum de 24hr - Perda protica extravascular: Sndrome nefrtica (proteinria massiva) e enteropatia perdedora de protenas

Albumina- Queimaduras extensas : a pele o maior local de armazenamento extravascular da albumina. - Hemodiluio: Ascites, ICC -Estresse - Analbuminemia - Bisalbuminemia

Albumina

Conseqncias da hipoalbuminemia - Edema facial, macroglossia, ictercia conjuntival - Bradicardia, hipotenso, cardiomegalia - Hepato-esplenomegalia, ascites - Encefalopatias - Atrofia testicular - Ginecomastia, hipotermia

Fracionamento eletrofortico

A eletroforese de protenas (EFP) no soro uma tcnica simples para separar as protenas do soro. o teste de triagem mais utilizado para investigao de anormalidades das protenas sricas. Em condies normais, so separadas cinco bandas do soro: albumina, alfa-1, alfa-2, beta e gamaglobulinas. Eventualmente, pode ser observada a presena da pralbumina.

Fracionamento eletrofortico

Eletroforese

Fracionamento eletrofortico

Globulinas

Regio 1 -Alfa1-antitripsina (AAT) Tem como funo a inibio de vrias proteases provenientes dos neutrfilos. Proteo contra destruio da parede alveolar VR: 20 - 60mol/L

Globulinas- Alfa1-glicoprotena cida(AAG) Tem como funo primria inativar a progesterona, alem de interagir com alguma drogas. Aumentada na artrite reumatide, Lpus, queimaduras e infarto. O papel exato da AAG no conhecido -Alfa1-Fetoprotena (AFP) Usada para detectar defeitos de tubo neural em fetos, examinado atravs do lquido amnitico VR lquido amnitico: 5 a 25mg/dl -Alfa 1- Lipoprotena Transportadora de lipdeos

Globulinas

Regio 2 -Haptoglobina (HAP) Transportadora de Hb para o retculo endotelial para ser degradada. Aumentada durante os processos inflamatrios e diminuda em sndromes hemolticas. - Alfa2-macroglobulinainibidora de proteases. Aumentada durante a infncia e na sndrome nefrtica e est diminuda em hepatopatias crnicas. - Ceruplasmina (CER) fixadora de cobre. Est diminuda nas anemias e aumentada em neoplasias malignas; protena de fase aguda tardia.

Globulinas

Regio 1 -Transferritina(TRF)Transporta o ferro do intestino at a medula ssea. Est aumentada na depleo de ferro e diminuda nas perdas proticas e hepatopatias crnicas. -Hemopexina (HX) Transporta o grupamento Heme at o fgado -Beta-lipoprotena Transportadora de lipdeos -Complemento C4 Resposta humoral, participa da via clssica do complemento. A deficincia resulta reduo da resposta a infeces.

Globulinas

Regio 2 - Fibrinognio Substrato da trombina, no encontrado em fracionamentos eletroforticos pois a amostra usada o soro -Complemento frao C3 Atua na resposta imunolgica humoral - Beta2- microglobulina (BMG) Protena usada para testar a funo tubular renal. Elevada em IR

Globulinas

Regio -Protena C reativa Marcador noespecfico de leso tecidual, infeco ou necrose celular associada com infarto ou malignidade VR: 80-800g/dl

Globulinas

Regio - ImunoglobulinasSintetizadas pelo sistema imune em resposta a uma partcula estranha. -Reconhecem,reagem,neutralizam bactrias, vrus e protenas estranhas. -Constitudas por protenas com estrutura em y. -4 cadeias: 2 leves(L) e 2 pesadas(H) - Antgeno se liga a regio varivel das cadeias. - IgG, IgM, IgA, IgD e IgE

Globulinas

Imunoglobulinas IgG (1,2,3,4)85% das Ig totais, atravessa a barreira placentria VR:800-1800mg/dl IgM 5-10% das Ig totais VR: 50-150mg/dl IgE importante papel na atopia e imunidade antiparasitria VR:0-0,2mg/dl

Globulinas

Hipogamaglobulinemia -Imunodeficincias hereditrias -Imunodeficincia adquirida: neoplasias linfides, IR, terapia imunossupressiva -Mieloma mltiplo, leucemia linfoctica crnica -Crianas prematuras -Frmacos: Fenitona, carbamazepina, c. Valprico

Globulinas

Gamopatias policlonais -Aumentos difusos das gamaglobulinemias -Causado por: lepra, tuberculose, cirrose biliar primria, cirrose portal, hepatite crnica ativa, doena de Crohn, lpus eritematoso sistmico

Gamopatias monoclonais -Encontrada em: Mieloma mltiplo, macroglobulinemia de Waldenstrm, doena da cadeia pesada (doena de Franklin)

Globulinas

Eletroforese de protenas sricas em gel de agarose, (1) hipergamaglo-bulinemia em processo inflamatrio; (2) e (3): fracionamento normal; (4) gama monoclonal no mieloma mltiplo.

Globulinas

Perfis eletroforticos patolgicos: -Mau fornecimento protico: albumina , 1 e 2, , -Perdas proticas Sndrome Nefrtica: albumina , 1, 2, , (varia) -Hepatite crnica: albumina, -Hepatite aguda: albumina ou normal, 1, 2 normal ou , e -Cirrose: albumina , 1,2 normal ou , , fuso das fraes e

Globulinas

Protenas totais e sricas

Palavras chave - protenas sricas - albumina - globulina - eletroforese - imunoglobulina

Key words - serum proteins - albumin - globulin - electrophoresis - immunoglobulin

Protenas totais e sricas

Bibliografia - Motta, Valter Bioqumica clnica para o laboratrio: princpios e interpretaes 4ed. Porto Alegre: Editora Mdica Missau;2003 -Ravel, Richard Laboratrio clnico- 6ed.Rio de Janeiro: Editora Guanabara Koogan; 1997 - Zaia,D.A.M et al Determinao de protenas totais via espectrofotometria: vantagens e desvantagens dos mtodos existentes. Qumica nova 21(6), 1998. -Laboratrio AutoLab. Disponvel em: www.laboratorioautolab.com Acesso em 25/07/2007 - LabTest. Disponvel em: www.labtest.com.br Acesso em 23/08/2007