Гельминты-igg – ИФА –...

24
НАБОР РЕАГЕНТОВ D-3354 Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТ Набор реагентов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов класса G к антигенам описторхисов, трихинелл, токсокар и эхинококков ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ

Upload: others

Post on 04-Aug-2020

4 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

1D-3354 НА

БО

Р РЕ

АГЕ

НТО

В

D-3

354

Гель

мин

ты

-IgG

– И

ФА

– Б

ЕСТ

Набор реагентов для иммуноферментного выявления

иммуноглобулинов класса G к антигенам описторхисов, трихинелл,

токсокар и эхинококков

ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ

Page 2: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

2 D-3354

Page 3: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

3D-3354

1. НАЗНАЧЕНИЕНабор реагентов «Гельминты-IgG – ИФА –

БЕСТ» (далее по тексту – набор) предназначен для выявления иммуноглобулинов класса G к антиге-нам описторхисов, трихинелл, токсокар и эхинокок-ков в сыворотке (плазме) крови человека методом твердофазного иммуноферментного анализа.

Набор рассчитан на проведение анализов в дублях 88 неизвестных, 8 контрольных образ-цов, всего 192 определений при использовании всех стрипов планшетов.

Выявление иммуноглобулинов класса G к антигенам описторхисов, трихинелл, токсокар и эхинококков может быть использовано для серо-логической диагностики данных паразитарных инвазий, контроля эффективности лечения и диагностики рецидива, а также для научных ис-следований при гельминтозах.

2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА2.1. Принцип метода

Метод определения иммуноглобулинов класса G к антигенам описторхисов, трихи-нелл, токсокар и эхинококков представляет собой твердофазный иммуноферментный ана-лиз, в ходе которого при взаимодействии ис-следуемых образцов сывороток (плазмы) крови в лунках стрипов с иммобилизованными анти-генами Opisthorchis felineus, Trichinella spiralis, Tocsocara canis, Echinococcus granulosus проис-

Page 4: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

4 D-3354

ходит связывание специфических антител и образование комплекса «антиген–антитело» на поверхности лунок. После добавления в лунки планшета конъюгата пероксидазы хрена с анти-телами к IgG человека происходит включение ферментной метки в иммунный комплекс

Комплекс «антиген–антитело–конъюгат» вы- являют цветной реакцией с использованием суб-страта пероксидазы – перекиси водорода и хро-могена – тетраметилбензидина. Интенсивность окрашивания пропорциональна концентрации IgG к антигенам гельминтов в анализируемом образце сыворотки (плазмы) крови.

2.2. Состав набора• планшеты разборные с иммобилизованными на

внутренней поверхности лунок антигенами опистор-хисов, трихинелл, токсокар и эхинококков (по 6 вось-милуночных стрипов) – 2 шт.;

• положительный контрольный образец, содержащий иммуноглобулины класса G к антигенам описторхи-сов, трихинелл, токсокар и эхинококков (К+) – 1 фл., 2,5 мл;

• отрицательный контрольный образец, не содержа-щий иммуноглобулины класса G к антигенам опи-сторхисов, трихинелл, токсокар и эхинококков (К–) – 2 фл. по 2,5 мл;

• конъюгат, концентрат (моноклональные специфи-ческие антитела к IgG человека, меченные перок-сидазой хрена) – 1 фл., 2,5 мл;

Page 5: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

5D-3354

• концентрат фосфатно-солевого буферного раствора с твином (ФСБ-Т×25) – 2 фл. по 28 мл;

• раствор для предварительного разведения сыворо-ток (РПРС) – 2 фл. по 10 мл;

• раствор для разведения сывороток (РРС) – 1 фл., 28 мл;

• субстратный буферный раствор (СБР) – 2 фл. по 13 мл;

• тетраметилбензидин, концентрат (ТМБ) – 2 фл. по 1,0 мл;

• стоп-реагент – 2 фл. по 12 мл;• инструкция по применению – 1 шт.;• пленка для заклеивания планшета – 4 шт.;• пластиковая ванночка для реагентов – 2 шт.;• наконечники для пипетки – 16 шт.

2.3. Аналитические и диагностические характеристики

В ряде случаев возможен перекрест имму-нологических реакций и возникновение лож-ноположительных результатов реакции в ИФА в гетерологичной системе антиген–антитело за счет наличия общих антигенных компонентов у различных видов гельминтов. При наличии положительных результатов анализа с несколь-кими антигенами проводят дополнительные исследования в раститровке. Истинно положи-тельным считают результат ИФА с превышаю-щим титром.

Page 6: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

6 D-3354

3. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ3.1. Обеспечение безопасности персонала

Обращение с компонентами набораВсе компоненты набора являются неток-

сичными.Стоп-реагент обладает раздражающим дей-

ствием. Избегать разбрызгивания и попадания на кожу и слизистые. В случае попадания стоп-реагента на кожу и слизистые необходимо пораженный участок промыть большим коли-чеством проточной воды.

Обращение с исследуемыми образцамиПри работе с исследуемыми образцами

следует соблюдать меры предосторожности, принятые при работе с потенциально инфекци-онным материалом. Основные правила работы изложены в «ИНСТРУКЦИИ ПО МЕРАМ ПРО-ФИЛАКТИКИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ИНФЕК-ЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПРИ РАБОТЕ В КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ЛАБОРА-ТОРИЯХ ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ УЧРЕЖДЕНИЙ», утвержденной Минздравом СССР 17 февраля 1991 г.

Обращение с материалами, контактирующими с исследуемыми образцами

Материалы, контактирующие с исследу-емыми образцами, следует дезинфицировать в соответствии п. 3.2. настоящей инструкции

Page 7: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

7D-3354

и согласно МУ-287-113 «МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ДЕЗИНФЕКЦИИ, ПРЕД-СТЕРИЛИЗАЦИОННОЙ ОЧИСТКЕ И СТЕ-РИЛИЗАЦИИ ИЗДЕЛИЙ МЕДИЦИНСКОГО НАЗНАЧЕНИЯ» (утв. департаментом госсанэ-пиднадзора МИНЗДРАВА РФ ОТ 30.12.1998).

3.2. Обеспечение получения правильных результатов анализа

Потенциальный риск применения набора – класс 2а (ГОСТР51609-2000).

Достоверность и воспроизводимость результатов анализа зависят от выполне-ния следующих основных правил:

• для дезинфекции исследуемых образцов, посуды и материалов, контактирующих с иссле-дуемыми и контрольными образцами, следует использовать дезинфицирующие средства, не ока-зывающие негативного воздействия на качество ИФА, например, комбинированные средства на основе ЧАС (четвертичных аммониевых соедине-ний), спиртов, третичных аминов. Использование дезинфицирующих средств, содержащих актив-ный кислород и хлор (перекись водорода, деохлор, хлорамин), в помещениях, где проводят ИФА, приводит к серьезному искажению результатов;

• не проводите ИФА в присутствии паров кислот, щелочей, альдегидов или пыли, кото-рые могут менять ферментативную активность конъюгатов;

Page 8: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

8 D-3354

• ферментативная реакция чувствительна к присутствию ионов металлов, поэтому не допу-скайте контактов каких-либо металлических пред-метов с конъюгатом и рабочим раствором ТМБ;

• избегайте загрязнения компонентов на-бора микроорганизмами и химическими при-месями, для этого используйте в работе чистую посуду и чистые одноразовые наконечники для каждого реагента, контроля, образца;

• рабочие поверхности столов, оборудова-ния следует обрабатывать 70% этиловым спир-том (не допускается использование перекиси водорода, хлорсодержащих растворов);

• никогда не используйте одну и ту же ем-кость для конъюгата и рабочего раствора ТМБ;

• перед отбором ТМБ из флакона необхо-димо обработать конус пипетки (внутреннюю и внешнюю поверхности) 70% этиловым спиртом, так как малейшее загрязнение пипеток конъю-гатом может привести к контаминации всего со-держимого флаконов с СБР и ТМБ;

• если допущена ошибка при внесении анализируемых образцов, нельзя, опорожнив эту лунку, вносить в нее новый образец; такая лунка бракуется.

Качество промывки лунок планшета играет важную роль для получения пра-вильных результатов анализа:

• Для аспирации анализируемых образ-цов и последующей промывки рекомендуется

Page 9: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

9D-3354

использовать автоматическое или ручное про-мывочное устройство.

• Не допускайте высыхания лунок план-шета в перерыве между завершением промывки и внесением реагентов.

• Добивайтесь полного заполнения и опо-рожнения всех лунок планшета в процессе про-мывки, т.к. недостаточная аспирация жидкости из лунок может привести к понижению чувстви-тельности и специфичности анализа.

• Регулярно (не реже 1 раза в неделю) обрабатывайте промывочное устройство дезин-фицирующим раствором. Для этого заполните промывочную систему (шланги, иглы промыва-теля) 70% раствором этилового спирта, оставьте на ночь. Затем проведите 4–5 циклов отмывки системы дистиллированной водой.

• Для предотвращения засорения игл промывочного устройства в конце рабочего дня обязательно выполните процедуру ополаскива-ния системы подачи жидкости дистиллирован-ной водой.

Page 10: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

10 D-3354

4. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫДля работы с набором необходимо следу-

ющее дополнительное оборудование и мате-риалы:• спектрофотометр, позволяющий проводить измере-

ния оптической плотности растворов в лунках план-шета в двухволновом режиме: при основной длине волны 450 нм и длине волны сравнения в диапазо-не 620–655 нм; или при длине волны 450 нм;

• термостат, поддерживающий температуру (37±1)°С;• дозаторы полуавтоматические одноканальные и

многоканальные с переменным или фиксированным объемом со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы жидкости от 5 до 5000 мкл;

• промыватель ручной или автоматический;• флаконы стеклянные вместимостью 15 и 30 мл;• бумага фильтровальная лабораторная;• цилиндр мерный 2-го класса точности вместимо-

стью 100 мл и 1000 мл;• колба вместимостью 1000 мл;• вода дистиллированная.

5. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫНа один анализ для скрининга требуется

10 мкл сыворотки (плазмы) крови человека.

Требования к образцамДля проведения анализа не следует ис-

пользовать гемолизированную, мутную сыво-ротку крови.

Page 11: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

11D-3354

Образцы сыворотки (плазмы) крови можно хранить при температуре от 2 до 8°С не более 5 суток при условии отсутствия микробной кон-таминации или при температуре минус 20°С (и ниже) не более 3 мес. Следует избегать много-кратного замораживания / оттаивания, так как это может привести к получению неправильных результатов. После размораживания образцы следует тщательно перемешать.

Образцы сывороток крови, содержащие взвешенные частицы, необходимо очистить цен-трифугированием при 5000–10000 об/мин в те-чение 5 мин при температуре от 18 до 25°С.

6. ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВПеред проведением анализа вскрыть упа-

ковку набора, извлечь все компоненты, в том числе и запечатанный пакет с планшетом. Вы-держать все компоненты набора и анализируе-мые образцы при температуре от 18 до 25°С не менее 60 мин.

При дробном использовании набора после отбора части содержимого флаконы сразу плот-но закрыть завинчивающимися крышками, по-местить в холодильник и хранить при 2–8°С в течение всего срока годности набора

Контрольные образцы и стоп-реагент гото-вы к использованию и не требуют дополнитель-ного разведения.

Page 12: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

12 D-3354

6.1. Подготовка планшетаВскрыть пакет выше замка и установить на

рамку необходимое для проведения анализа ко-личество стрипов. Оставшиеся неиспользованные стрипы немедленно поместить вновь в пакет с влагопоглотителем, удалить из него воздух, плот-но закрыть замок и поместить в холодильник.

Хранение: при температуре от 2 до 8°С в течение всего срока годности набора.

6.2. Подготовка исследуемых образцовИсследуемые образцы развести в 10 раз

раствором для предварительного разведения сывороток. Для этого внести в лунки вспомога-тельного планшета по 90 мкл РПРС и добавить по 10 мкл цельного образца сыворотки (плаз-мы), тщательно перемешать. При разведении сыворотки красный цвет должен измениться на желтый. Если изменения цвета не произошло, анализ образца сыворотки может дать непра-вильный результат. При разведении плазмы цвет раствора в лунке меняется незначительно.

Хранение: до 3 часов при 18–25°С.

6.3. Приготовление рабочего буферного раствора

Рабочий буферный раствор приготовить раз-ведением исходного концентрата ФСБ-Т в 25 раз. Для этого в соответствии с числом используемых стрипов (см. таблицу расхода компонентов на-

Page 13: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

13D-3354

Таблица расхода компонентов набора реагентовКо

личе

ство

од

новр

емен

но

испо

льзу

емы

х ст

рипо

вРабочий буферный

растворРабочий раствор

конъюгатаРабочий

раствор ТМБФ

СБ-

Т,

конц

ентр

ат

мл

Вод

а ди

стил

ли

рова

нная

, м

л

Конъ

юга

т,

конц

ентр

ат,

мл

Рабо

чий

буф

ерны

й ра

ство

р,

мл

ТМБ,

ко

нцен

трат

, м

л

СБР

, м

л

1 2,0 до 50 0,1 1,0 0.05 1,02 4,0 до 100 0,2 2,0 0.10 2,03 6,0 до 150 0,3 3,0 0.15 3,04 8,0 до 200 0,4 4,0 0.20 4,05 10,0 до 250 0,5 5,0 0.25 5,06 12,0 до 300 0,6 6,0 0.30 6,07 14,0 до 350 0,7 7,0 0.35 7,08 16,0 до 400 0,8 8,0 0.40 8,09 18,0 до 450 0,9 9,0 0.45 9,0

10 20,0 до 500 1,0 10,0 0.50 10,011 22,0 до 550 1,1 11,0 0.55 11,012 24,0 до 600 1,2 12,0 0.60 12,013 26,0 до 650 1,3 13,0 0.65 13,014 28,0 до 700 1,4 14,0 0.70 14,015 30,0 до 750 1,5 15,0 0.75 15,016 32,0 до 800 1,6 16,0 0.80 16,017 34,0 до 850 1,7 17,0 0.85 17,018 36,0 до 900 1,8 18,0 0.90 18,019 38,0 до 950 1,9 19,0 0.95 19,020 40,0 до 1000 2,0 20,0 1.00 20,021 42,0 до 1050 2,1 21,0 1.05 21,022 44,0 до 1100 2,2 22,0 1.10 22,023 46,0 до 1150 2,3 23,0 1.15 23,024 48,0 до 1200 2,4 24,0 1.20 24,0

Page 14: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

14 D-3354

бора реагентов) внести в мерный цилиндр не-обходимое количество концентрата ФСБ-Т и довести до соответствующего объема дистилли-рованной водой.

При выпадении осадка солей в концентра-те необходимо прогреть его при температуре от 30 до 40°С до полного растворения осадка.

Хранение: не более 5 суток при 2–8°С.

6.4. Подготовка конъюгатаВ соответствии с числом используемых стри-

пов (см. таблицу) отобрать в чистый флакон или в пластиковую ванночку для реагента необхо-димое количество рабочего буферного раствора, добавить соответствующее количество концен-трата конъюгата, тщательно перемешать.

Хранение: до 3 часов при 18–25°С.

6.5. Приготовление рабочего раствора тетраметилбензидина

В соответствии с числом используемых стрипов (см. таблицу расхода компонентов) в отдельный чистый флакон или в пластиковую ванночку для реагента внести необходимое количество СБР, добавить соответствующее количество концентрата ТМБ, тщательно пе-ремешать.

Допустимо голубое окрашивание рабочего раствора ТМБ, которое не оказывает влияния на результаты анализа.

Page 15: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

15D-3354

Внимание! Рекомендуется выделить на-конечники для пипеток, которые использовать только для работы с тетраметилбензидином. Посуду и наконечники для пипетки, контакти-рующие с раствором ТМБ, нельзя отмывать с применением синтетических моющих средств, поскольку даже их следы ведут к неконтроли-руемому окислению ТМБ в ходе реакции. После работы посуду и наконечники ополоснуть во-дой, промыть 70% этиловым спиртом и тща-тельно отмыть дистиллированной водой.

Хранение: не более 3 часов при 18–25°С в темноте.

7. ПРОВЕДЕНИЕ ИФА7.1. Внесение образцов

Внести контрольные образцы:• 2 лунки – по 100 мкл К+;• 2 лунки – по 100 мкл К–.

Например, в лунки А-1 и В-1 внести по 100 мкл К–, в лунку С-1 и D-1 внести по 100 мкл К+.

Внести исследуемые образцы:Для скрининга в остальные лунки внести

в дублях по 90 мкл раствора для разведения сы-вороток и по 10 мкл предварительно разведен-ных исследуемых образцов (п. 6.2.), тщательно перемешать.

Для определения титра в лунки гори-зонтального ряда А внести по 180 мкл РРС и по

Page 16: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

16 D-3354

20 мкл предварительно разведенных исследуе-мых сывороток (п. 6.2.). В лунки рядов B-H внести по 100 мкл РРС. Каждый образец титровать, пере-нося по 100 мкл раствора из лунок предыдущего ряда в лунки последующего от A до H, тщательно перемешивая пипетированием. После раститров-ки из каждой лунки последнего ряда H удалить в сосуд с дезинфицирующим раствором по 100 мкл раствора, оставляя в лунках по 100 мкл. Таким об-разом, в вертикальных рядах получаются после-довательные 2-кратные разведения исследуемых образцов в интервале от 1:100 до 1:12800.

Время внесения образцов не должно пре-вышать 10 мин при использовании всех лунок планшета.

7.2. ИнкубацияПланшет заклеить пленкой и инкубиро-

вать в термостате в течение 30 мин при темпе-ратуре 37°С.

7.3. ПромывкаПо окончании инкубации снять липкую

пленку и поместить ее в сосуд с дезинфицирую-щим раствором. С помощью промывочного устрой-ства промыть лунки планшета 5 раз рабочим буферным раствором (п. 6.3.), чередуя аспирацию и немедленное заполнение лунок каждого стри-па. В каждую лунку вносить не менее 400 мкл жидкости в процессе каждого цикла промывки.

Page 17: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

17D-3354

Время между заполнением и опорожнением лу-нок должно быть не менее 30 сек. Необходимо добиваться полного опорожнения лунок после каждого их заполнения. По окончании промыв-ки остатки влаги из лунок тщательно удалить, постукивая перевернутым планшетом по филь-тровальной бумаге.

7.4. Внесение коньюгатаВ лунки планшета внести по 100 мкл рабо-

чего раствора конъюгата (п. 6.4.).Для внесения рабочего раствора конъю-

гата использовать пластиковую ванночку и одноразовые наконечники, входящие в состав набора.

7.5. ИнкубацияПланшет заклеить пленкой и инкубиро-

вать в термостате в течение 30 мин при темпе-ратуре 37°С.

7.6. ПромывкаПо окончании инкубации промыть план-

шет как описано выше.

7.7. Внесение ТМБВнести во все лунки по 100 мкл рабочего

раствора ТМБ (п. 6.5.).Для внесения рабочего раствора тетра-

метилбензидина использовать пластиковую

Page 18: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

18 D-3354

ванночку и одноразовые наконечники, входящие в состав набора.

7.8. ИнкубацияПланшет выдержать в защищенном от

света месте в течение 25 мин при температуре 18–25°С.

7.9. Внесение стоп-реагентаВнести во все лунки по 100 мкл стоп-

реагента с той же скоростью и в той же по-следовательности, как и рабочий раствор тетраметилбензидина.

Краткая схема проведения ИФА приведена в приложении 1 в конце настоящей инструкции.

7.10. Проведение измеренийИзмерить оптическую плотность с помощью

спектрофотометра в двухволновом режиме: ос-новной фильтр – 450 нм, референс-фильтр – в диапазоне 620–655 нм. Допускается измерение только с фильтром 450 нм.

Время между остановкой реакции и изме-рением оптической плотности не должно превы-шать 5 мин.

Page 19: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

19D-3354

8. УСЛОВИЯ ПРАВИЛЬНОСТИ РАБОТЫ НАБОРАРезультаты анализа исследуемых образцов

учитывать, если будут выполнены следующие условия:

• среднее значение оптической плотности в лунках с отрицательным контрольным образцом не должно превышать 0,25 ед. опт. плотн. (о.е.);

• среднее значение оптической плотности в лунке с положительным контрольным образ-цом должно быть не менее 0,8 о.е.

9. РАСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ АНАЛИЗАВыявление образцов, содержащих и не

содержащих IgG к к антигенам описторхисов, трихинелл, токсокар и эхинококков

Вычислить диагностическое значение оп-тической плотности (ОПД) по формулам (1–4):

ОПД описторхисов = ОПср. К– + 0,28 (1) ОПД трихинелл = ОПср. К– + 0,37 (2) ОПД токсокар = ОПср. К– + 0,32 (3) ОПД эхинококков = ОПср. К– + 0,35 (4)

где ОПср.К– среднее значение оптической плотности в лунках с отрицательным контрольным образцом (стрипы с иммобилизованными соответствующими антигенами).

Результат анализа считать положитель-ным, если ОПобр. ≥ ОПД, где ОПобр. – оптическая плотность исследуемого образца.

Page 20: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

20 D-3354

Результат анализа считать отрицатель-ным, если ОПобр. ≤ 0,8 × ОПД.

Если оптическая плотность исследуемой сыворотки находится в диапазоне от 0,85 × ОПД до ОПД, то результат следует считать неопреде-ленным и через 2–4 недели необходим повтор-ный анализ вновь взятого образца сыворотки крови данного человека.

10. ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

Диагноз токсокароз может быть поставлен у больных с титром антител к антигенам токсокар 1:800 и выше, с эозинофилией более 10% и при наличии характерных клинических признаков.

При титрах антител 1:100–1:400 и уров-ню эозинофилии до 10% можно предположить глазной токсокароз или токсокароносительство, которое не обязательно приводит к развитию заболевания. Исследование сывороток людей с подозрением на токсокароносительство следует повторить через 3 мес.

Интерпретацию результатов анализа про-водит лечащий врач с учетом клинических при-знаков, эпиданамнеза и данных о содержании эозинофилов в крови обследуемых лиц.

Титр анализируемого образца сыворотки (плазмы) крови – наибольшее разведение ана-лизируемого образца, при котором его оптиче-ская плотность больше либо равна величине

Page 21: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

21D-3354

диагностического значения оптической плотно-сти (ОПобр. ≥ ОПД).

При динамическом наблюдении пациента для получения результатов, адекватно отражаю-щих изменение концентрации IgG к антигенам гельминтов в крови, необходимо использовать наборы реагентов одного наименования (одного предприятия-изготовителя).

11. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРАНабор реагентов следует хранить и транс-

портировать в упаковке предприятия-изготови-теля при температуре 2–8°С в течение всего срока годности (9 мес). Допускается транспортирование набора при температуре до 25°С не более 10 сут.

По окончанию срока годности набор не ис-пользовать.

Замораживание набора не допускается.Дробное использование набора может

быть реализовано в течение всего срока годности.При постановке ИФА нельзя использовать

компоненты из наборов разных серий или сме-шивать их при приготовлении растворов, кроме неспецифических компонентов (ФСБ-Т, РПРС, стоп-реагент), которые взаимозаменяемы во всех наборах ЗАО «Вектор-Бест».

Нельзя использовать реагенты из наборов других фирм-производителей.

Для получения надежных результатов не-обходимо строгое соблюдение настоящей ин-струкции по применению набора.

Page 22: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

22 D-3354

12. КОНТАКТНАЯ ИНФОРМАЦИЯПо вопросам, касающимся качества набора,

обращаться в ЗАО «Вектор-Бест» по адресу:630559, Новосибирская обл., Новосибирский район, п. Кольцово, а/я 121,тел. /факс (383) 363-13-46, E-mail: [email protected]

Консультацию специалиста по работе с на-бором можно получить по тел.: (383) 363-35-56

Page 23: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

23D-3354

Приложение 1Краткая схема проведения ИФА

для набора реагентов «Гельминты-IgG–ИФА–БЕСТ»

Использовать только после внимательного ознакомления с инструкцией!

Внести: по 100 мкл К+ и К– в дублях; по 90 мкл РРС и по 10 мкл пред-

варительно разведенных ана-лизируемых образцов в дублях.

Инкубировать: 30 мин, 37°С.Промыть: рабочим буферным раствором,

400 мкл, 5 раз.Внести: по 100 мкл рабочего раствора

конъюгата.Инкубировать: 30 мин, 37°С.Промыть: рабочим буферным раствором,

400 мкл, 5 раз.Внести: по 100 мкл рабочего раствора

тетраметилбензидина.Инкубировать: 25 мин, 18–25°С, в темноте.Внести: по 100 мкл стоп-реагента.Измерить: ОП при 450 нм / референсная

длина волны 620–655 нм.

20.02.12

Page 24: Гельминты-IgG – ИФА – БЕСТdias-plus.com/wp-content/uploads/2016/05/3354.pdfНабор рассчитан на проведение анализов в дублях

ЗАКРЫТОЕ АКЦИОНЕРНОЕ ОБЩЕСТВО «ВЕКТОР-БЕСТ»

Международные сертификатыISO 9001 и ISO 13485

НАБОРЫ РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ИФАВирусные гепатиты А, В, С, D, E, G, TT;

ВИЧ-инфекция; ИППП; TORCH-инфекции;герпесвирусные инфекции; беременность; аутоиммунные, системные, паразитарные,

желудочно-кишечные заболевания; гормоны; опухолевые и кардиомаркеры;

цитокины, аллергены и др.

Точная диагностика – эффективное лечение!

Наш адрес: 630117, Новосибирск-117, а/я 492Тел./факс: (383) 227-73-60 (многоканальный)

Тел.: (383) 332-37-10, 332-37-58, 332-36-34,332-67-49, 332-67-52

E-mail: [email protected]: www.vector-best.ru