microscopia eletrônica prof. josé lino neto – ufv

Microscopia EletrônicaMicroscopia Eletrônica

Prof. José Lino Neto – UFV

Microscópio de Luz

- Cortes -

Microscópio de Luz

- superfície -

Microscópio de Luz - ML

Microscópio Eletrônico de Transmissão - MET

Microscópio Eletrônico de Varredura - MEV

ML:

1.000x

0,2 µm

MET:

500.000x

0,0002 µm

MEV:

10 a 150.000x

0,02 µm

MET MEV

Epitélio da mucosa intestinal

Filamento

Canhão de elétrons

Lentes magnéticas

Câmara

Câmara e porta-amostra

Porta amostra - stubs

Formação da imagem

Análise da imagem

Preparo do material

Fixação

Desidratação

Secagem ao ponto crítico

Montagem nos suportes - Stubs

Sputter coat

MEV

Protocolo

1- Fixar em solução de glutaraldeído e/ou paraformaldeído em tampão cacodilato de sódio (ou fosfato) a 0,1M (animal) ou 0,05M (vegetal)

em pH 7,2. Tempo: 2 a 24 hs.

2- Lavar por 1-2 hs em vários banhos do tampão;

3- Pós-fixar em tetróxido de ósmio por 1 h ao abrigo da luz;

4- Lavar em 2 banhos de 15 min em tampão caco, ou água destilada;

5- Desidratar as peças, mantendo-as submergidas, em serie crescente de etanol ou acetona (50% 70% 80% 95% 100%). Cada

etapa deve ser feita em dois banhos de 15 min cada;

6- Ponto crítico;

7- Montar as peças secas nos stubs;

8- Sputter coat para proceder a cobertura com ouro.

Ponto-crítico

Sputter coat

“slide show”

“slide show”

Organelas celulares

“slide show”

Dinoflagelados

“slide show”

Cultura de células

“slide show”

Superfície foliar de Corymbia citriodora

Espinha de ouriço

“slide show”

Espermatozóides de hamster

“slide show”

Ammoplanops moenkopi (Sphecidae Pemphredoninae)

“slide show”

Dryudella montana (Sphecidae: Astatinae)

Eucerceris superba (Sphecidae Philanthinae)

microscopia eletrônica prof. josé lino neto – ufv

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