microscopia e o estudo da cÉlula -...

Citologia e Histologia

PROFESSORA: Fernanda Guimarães

E-MAIL: [email protected]

MICROSCOPIA E O ESTUDO DA CÉLULA

NÍVEIS DE ORGANIZAÇÃO BIOLÓGICA

Estruturasmicroscópicas

Invisíveisa olho nu

Estruturasmacroscópicas

Visíveisa olho nu

MICROSCOPIAO olho humano só forma

imagens de objetos maiores que 0,1mm

Para observar objetos menores é necessário a utilização de aparelhos que garantam aumento da imagem

Hans e Zacharias Jansen(Século XVI)

Conjunto de lentes com

capacidade de ampliar imagens

Inventores do primeiromicroscópio

www.cerebromente.org.br

UM BREVE HISTÓRICO

Leeuwenhoek(Século XVII)

www.ndpteachers.org

Inventor do primeiro microscópio

com finalidade científica

Considerado o Pai da Microbiologia

UM BREVE HISTÓRICO

Robert Hooke(Século XVII)

ww

w.u

cmp.

berk

eley

.edu

http://kmoddl.library.cornell.edu

Primeiro microscópiocomposto

UM BREVE HISTÓRICO

www.cerebromente.org.br

Observação de

pedaços de cortiça

Descoberta da célula

Do latim cellula diminutivo de cellapequeno compartimento

Robert Hooke(Século XVII)

UM BREVE HISTÓRICO

Schleiden e Schwann(Século XIX)

Teoria celular

http://docencia.udea.edu.co

http://docencia.udea.edu.co

Todo organismo vivo é

formado por células

Célula Unidade fundamental da vida

UM BREVE HISTÓRICO

BIOLOGIA ESTRUTURAL

Reduzidas dimensões celulares

Ausência de contraste entre estruturas

Grande espessura dos materias biológicos

Limitações para o estudo da biologia estrutural

BIOLOGIA ESTRUTURAL

Aparelhos ideiais microscópios

Técnicas especiais para obtenção e

processamento de materiais biológicos

Soluções para o estudo da biologia estrutural

MICROSCÓPIO

Aparelho capaz de

reproduzir para o olho

humano imagens aumentadas

de estruturas pequenas

tais como as células

TIPOS DE MICROSCÓPIOS

MICROSCÓPIO DE LUZ

Permite a vizualização da morfologia das

células

Requer coloração para

facilitar a vizualização

Obtenção de imagens

coloridas

MICROSCÓPIO ELETRÔNICO

Permite a vizualização da morfologia das

organelas citoplasmáticas

Requer contratação

Obtenção de imagens

em preto e branco

MICROSCÓPIO ELETRÔNICO

MICROSCÓPIO DE LUZ

PREPARO DE MATERIAIS PARA ESTUDO DE MICROSCOPIA DE LUZ

Esfregaço

Decalque

Esmagamento

Lâminas permanentes

ESFREGAÇO

Utilizado para materiais líquidos (exemplos:

sangue e esperma)

Espalha-se uma fina camada do material

sobre a lâmina uniformemente

ESFREGAÇO

www.wcs.org

DECALQUE

Comprimir a superfície de um material

biológico sobre a lâmina

As células superficiais

ficarão aderidas

à lâmina

ESMAGAMENTO

Esmagar um pequeno pedaço de material

biológico entre a lâmina e a lamínula

Lamínula

Lâmina

Material biológico

LÂMINAS PERMANENTES

São preparações duráveis para microscopia

Requerem técnicas especiais para

conservar e corar o material

biológico a ser observado

posteriormente

ETAPAS PARA OBTENÇÃO DE LÂMINAS PERMANETES

1. Obtenção do material biológico

2. Fixação

3. Desidratação

4. Inclusão

5. Microtomia

6. Coloração

7. Montagem

1. OBTENÇÃO DO MATERIAL BIOLÓGICO

Escolha do material

Extração do material do organismo

Lavagem do material em solução fisiológica

para retirada de sangue e fluidos

2. FIXAÇÃO

Utilização de solução fixadora para

estabilizar as estruturas celulares

Garante que o tecido fique o mais próximo

possível da sua condição “in vivo”

Exemplo: Formol e etanol

3. DESIDRATAÇÃO

Utilização de séries alcoólicas para retirar

toda a água do material

Necessário pois a etapa seguinte requer

ausência de água

4. INCLUSÃO

Todo local que possuía água será

preenchido por parafina ou resina

Garante que o material fique resistente aos

cortes que sofrerá na próxima etapa

5. MICROTOMIA

O material será cortado em fatias finas e

colocados sobre as lâminas

Utiliza-se o micrótomo aparelho que

garante cortes de espessura definidas

MICRÓTOMO

6. COLORAÇÃO

Utiliza-se corantes específicos para cada

tipo de material

O material será corado para facilitar a

visualização ao microscópio

7. MONTAGEM

Os corte, já corados, serão cobertos por

lamínulas e colados com resina

A lâmina permanente está pronta

ETAPAS DE MONTAGEM DE LÂMINAS PERMANETES

INTERPRETAÇÃO DE CORTES

Imagem ao microscópio é apenas uma

seção do material biológico

Imagem é bidimensional mas devemos ter

a idéia de algo tridimensional


Corte transversal Corte no menor eixo do objeto

A B C


Corte Longitudinal Corte no maior eixo do objeto


Tomemos como exemplo uma estrutura

semelhante a um ovo, com clara e gema

Corte 1

Corte 2Corte 3

1 2 3Alguns tipos de cortes

4

5

Corte 4Corte 5

Alguns tipos de cortes

MICROSCOPIO DE LUZ

1 = ocular 2 = objetivas e revólver 3 = platina 4 = charriot5 = macrométrico 6 = micrométrico 7 = diafragma no condensador 8 = condensador 9 = botão do condensador

10 = dois parafusos do condensador 11 = fonte de luz 12 = controle de iluminação 13 = diafragma de campo 14 = dois parafusos de ajuste da luz15 = focalizadora da lâmpada

LENTES DO MICROSCÓPIO DE LUZ

Ocular

Objetivas

Material

FORMAÇÃO DA IMAGEM NA MICROSCOPIA

Objeto na lâmina

Imagem formada pela objetiva(real, maior e invertida)

Imagem final do objeto(virtual, ampliada e invertida)

AUMENTO DO MICROSCÓPIO

Combinação das lentes oculares e

objetivas

Ocular8x

Objetiva10x

Aumento total80xx =

Exemplo

PODER DE RESOLUÇÃO MICROSCÓPIO

Esta relacionada ao comprimento de onda

da luz e à abertura numérica da objetiva

Limite de resolução: Menor distância que deve

existir entre dois pontos para que eles apareçam

individualizados

LIMITES DE RESOLUÇÃO

100µm0,25µm0,0003µm

1mm 1000µm

Microscópioeletrônico

Microscópiode luz

Olho humano

PROFUNDIDADE DE CAMPO

É a distância compreendida entre as

regiões imediatamente acima e abaixo do

plano que está em foco

As objetivas de menor aumento garantem

uma maior profundidade de campo

MICROSCOPIA X CÉLULA

A microscopia de luz garante visualização

da morfologia das células

Microscopia eletrônica garante visualização

da morfologia das organelas citoplasmáticas

CÉLULA PROCARIONTE X EUCARIONTE

Não possui envoltório

nuclear

Não possui organelas

membranosas

Possui envoltório

nuclear

Possui organelas

membranosas

CÉLULA PROCARIONTE CÉLULA EUCARIONTE

CÉLULA PROCARIONTE

Parede celular Membrana

Citoplasma Nucleóide Ribossomos

faculty.abe.ufl.edu

CÉLULA PROCARIONTE

facu

lty.a

be.u

fl.ed

u

facu

lty.a

be.u

fl.ed

u

FORMAÇÃO DAS ENDOMEMBRANAS

Mitocôndria com membrana dupla

TEORIA SIMBIÔNTICA

Teoria de origem

da mitocôndria

Mitocôndria era

uma bactéria que foi

fagocitada por uma

célula eucariota

CÉLULA EUCARIONTE

enfenix.webcindario.comif

“Para que o mal triumfe,

basta que os bons não

façam nada”.

Edmund Burke

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