microbiologia geral - introdução e histórico
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História da microbiologia Microscópios
Robert Hooke - Inglaterra
Matemático e historiador natural
1635 - 1703
1665
http://archive.nlm.nih.gov/proj/ttp/fla
sh/hooke/hooke.html
Descrição da estrutura dos bolores
Considerada a primeira descrição de
micro-organismos
Bolor azulado crescendo
em uma superfície de couro
Esporângios contendo
os esporos
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Antoni van Leeuwenhoek – Holanda
Construtor amador de lentes e microscópios
1632 - 1723
http://www.ucmp.berkeley.edu/history/leeuwenhoek.html
http://ebiomedia.com/prod/LC/LCcellunit.html
Primeiro a
visualizar
bactérias
Lente
Placa de
bronze
Amostra
Parafuso
de ajuste
de foco
http://www.fop.unicamp.br/microbiologia/aulas/introducao.pdf
“animáculos”
Pai da bacteriologia e
protozoologia
• Placa dental
• Material vegetal em
decomposição
• Água
1684 – Sociedade Real de
Londres
1676
150 anos – progresso lento
Ferdinand Cohn – Polônia
1828 – 1898
Botânico
Bacteriologia – técnicas simples – ex. Bucha de algodão para
evitar contaminação dos meios de cultura
Algas unicelulares e bactérias fotossintetizantes
Beggiatoa (oxida sulfeto – grânulos de S) (brock p. 12 –
desenho 1866)
Descreveu o ciclo de Bacillus – formadora de endósporos
(resistentes à água em ebulição)
Século XIX – avanço dos microscópios
Micro-organismos são ubíquos
Ar, solo, água, dentro (endofíticos) e na superfície de plantas e
animais (incluindo os humanos)
Uma colher de chá de solo superficial pode conter 1 bilhão de
células bacterianas
A nossa boca pode conter 500 diferentes espécies de
bactérias.
Nossa pele pode ter 100 mil bactérias por centímetro quadrado
Segunda metade do Século XIX – duas questões
1 – Geração expontânea
2 – Doenças infecciosas
Biogênese x Abiogênese (geração espontânea)
Médico Jean Baptiste Van Helmont
- Até início século XIX – pais ou geração espontânea – Thales, Platão,
Demócrito, São Tomás de Aquino, Goethe, Copérnico, Galileu, Francis Bacon,
Descartes etc.
- Material em putrefação – geração de vida – “receitas”
Pensamentos: Científico x Religioso / filosófico
Primeira grande contribuição dos microrganismos
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Declínio da Abiogênese
Médico e biólogo Francesco Redi - 1866
Microrganismos em toda parte – microscópio – geração espontânea
Luis Joblot
Difícil reprodução – crescimento posterior – contaminação –
erros técnicos
X
- Dois padres
John Needham Lazzaro Spallanzani
1 – Mesmo com aquecimento
e uso de frascos de gargalo
estreito, microrganismos
continuam aparecendo
3 – Destruição do “princípio
vital” e da “qualidade do ar”
2 – Não aqueceu o suficiente
para tornar estéril
Origem da vida? – panspermia – astrobiologia
Pasteur
Louis
Pasteur
- Processo de pasteurização
- Demonstrou a existência da vida sem ar (“la vie sans air”)
- Cada tipo de fermentação é desempenhada por um
organismo
- Princípios da imunização
- Pai da microbiologia
Pasteurização
- Aquecimento do alimento a uma determinada temperatura por um
determinado período de tempo
- Elimina alguns microrganismos (quais?)
- Em seguida o alimento é selado hermeticamente (por que?)
- Pasteurização = esterilização? (= controle de crescimento?)
- Melhora da qualidade de vida (por que?)
- Pasteurização lenta – 65 graus 30 segundos
- Pasteurização rápida – 75 graus alguns segundos
- Pasteurização muito rápida – 130 a 150 graus 3 a 5 segundos (Ultra High
Temperature – UHT) – B. subtilis e B. estearothermophilus – termotolerantes
- UHT é “comercialmente estério” – longa vida
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- Importância médica – desenvolvimento da microbiologia
Koch
http://www.nobel.se/medicine/laureates/1905/koch-bio.html
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/1/19/M
anWithPetriDishes.jpg/200px-ManWithPetriDishes.jpg
Koch – meios
de cultura
(1881)
-Estudo da forma e estrutura
-Identificação
-Patologias, transformações da MO, fermentação
-Reprodução, fisiologia, metabolismo, genética (micro-organismos
como modelos)
Bacillus anthracis
carbúnculo
- Época de ouro da microbiologia
Segunda grande contribuição dos micro-organismos
Penicilina – Alexander Fleming
Sergei Winogradsky - Microbiologia do Solo
http://www.pasteur.fr/infosci/archives/win0.html
Microbiologia
http://helios.bto.ed.ac.uk/bto/microbes/winograd.htm
Watson e Crick –
DNA (1953)
http://www.time.com/time/time100/scientist/profile/watsoncrick.html
Rosalind Franklin e
Maurice Wilkins
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Kary Mullis – PCR (1985)
http://www.karymullis.com/
P C R
(Polimerase Chain Raction)
(Reação em cadeia da polimerase)
Multiplicação in vitro de fragmentos de DNA
- DNA genômico
- cDNA
- Produtos de PCR (amplicons)
- Fragmentos de DNA clonados em vetores
http://www.med.uni-jena.de/klinikmagazin/archiv/km698/kmonline/pcr.jpg
- DNTPs – A T C G
- DNA Polimerase – Taq DNA Polimerase – Thermus
aquaticus
- Tampão – PCR Buffer
- MgCl – cofator da Taq
http://polaris.bioch.ox.ac.uk/dnaseq/images/photo_9700_1.jpg
Reação de PCR - Reagentes
- DNA-molde – amostra de DNA genômico contendo a sequência-alvo
conservada
- Iniciadores (“primers”) – Forward e Reverse
Ex.
BA338F – 5’ ACGGACTCCTACGGGAGGCAGCAG 3'
UN518r - 5' ATTACCGCGGCTGCTGG 3'
Arch21F - 5' TTCYGGTTGATCCYGCCIGA 3'
Arch958R - 5' YCCGGCGTTGA(I/C)TCCAA TT 3'
* Definição dos iniciadores (“primers”)