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23º Congresso Brasileiro de Engenharia Sanitária e Ambiental

I-161 – AVALIAÇÃO COMPARATIVA DA OCORRÊNCIA DE PROTOZOÁRIOS EM DOIS SISTEMAS DE ABASTECIMENTO DE ÁGUA: UM ESTUDO EM

UMA CIDADE DE PORTE MÉDIO DO ESTADO DE MINAS GERAIS. Patrícia Maria Ribeiro Machado(1)

Mestranda do Programa de Pós-graduação em Saneamento, Meio Ambiente e Recursos Hídricos da UFMG; Bióloga, Bacharelado em Parasitologia pela Universidade Federal de Minas Gerais; Especialização em Engenharia Sanitária Ambiental (UFMG); Parasitologista Ambiental contratada pela COPASA para o projeto Cryptosporidium e Giardia. Daniel Adolpho Cerqueira Doutorando do Programa de Pós-graduação em Saneamento, Meio Ambiente e Recursos Hídricos da UFMG; Mestre em Microbiologia pela Universidade Federal de Minas Gerais; Biólogo da Divisão de Laboratórios da Metropolitana – COPASA. Léo Heller Engenheiro Civil. Doutor em Epidemiologia. Professor Adjunto do Departamento de Engenharia Sanitária e Ambiental da Universidade Federal de Minas Gerais Endereço(1): Rua Raposos, 428 – Pompéia – Belo Horizonte – MG – CEP:30280-530 – Brasil – Tel (31)34617246 – (31) 32502382 (COPASA) – Fax: (31) 32502355 – email: [email protected] RESUMO

Cryptosporidium spp. e Giardia sp. são parasitos protozoários cosmopolitas, que têm causado muitos surtos de doenças gastrointestinais associados ao consumo de água. O Cryptosporidium parvum tem sido reconhecido como um patógeno humano desde 1976 e, na última década, como um importante agente patogênico de veiculação hídrica. A Portaria 518/2004 do Ministério da Saúde do Brasil recomenda a pesquisa de (oo) cistos de Cryptosporidium e Giardia e de enterovírus, enfatizando a importância da redução da turbidez em níveis inferiores a 0,5 UNT como forma de otimizar o controle microbiológico da água potável. O presente trabalho busca avaliar o risco microbiológico para oocistos de Cryptosporidium spp. e cistos de Giardia sp. a partir do estudo dos padrões de ocorrência em mananciais e da eficiência em sua remoção por sistemas de tratamento de água. Foi selecionada a cidade de Divinópolis (cerca de 200.000 habitantes), do Estado de Minas Gerais, com dois sistemas de tratamento de água de ciclo completo (sistema produtor Itapecerica e sistema produtor Pará), sendo que cada sistema apresentou diferentes níveis de poluição fecal e vazões de operação. Foram realizadas coletas mensais da água bruta e da água tratada de cada tipo de água nos sistemas em estudo, no período de setembro de 2004 a janeiro de 2005 para avaliação da frequência de ocorrência de Cryptosporidium spp. e Giardia sp. e para avaliação dos parâmetros de qualidade de água. Avaliação da presença dos protozoários nos esgotos gerados nas áreas de influência dos dois sistemas também foi realizada. Os dados epidemiológicos foram levantados no mês de dezembro de 2004 e janeiro de 2005 para a verificação de giardíase em uma fração da população. Será aplicada a metodologia de avaliação de risco para estimar numericamente as conseqüências de exposição a esses microrganismos patogênicos. PALAVRAS-CHAVE: Risco microbiológico, protozoários, qualidade de água, Cryptosporidium, Giardia. INTRODUÇÃO

Cryptosporidium spp. e Giardia sp. são parasitos protozoários cosmopolitas, que têm causado muitos surtos de doenças gastrointestinais associados ao consumo de água. O Cryptosporidium parvum tem sido reconhecido como um patógeno humano desde 1976 e, na última década, como um importante agente patogênico de veiculação hídrica. Até o início da década de 1980, a criptosporidiose era mais estreitamente associada a indivíduos imunodeficientes, mas hoje se reconhece sua importância epidemiológica entre indivíduos imunocompetentes. O aumento significante no interesse das pesquisas relacionadas ao Cryptosporidium foi dado a partir do surto de Milwaukee (EUA), onde cerca de 403.000 pessoas ficaram doentes, tendo havido 4.000 hospitalizações e

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23º Congresso Brasileiro de Engenharia Sanitária e Ambiental 100 óbitos, devido à deficiência operacional do sistema de abastecimento daquela cidade (SMITH & ROSE, 1998). No Brasil, Heller et al (2004), em um estudo da demanda laboratorial em Viçosa-MG, avaliando 3.463 exames parasitológicos de fezes, encontraram 10,6% de exames positivos para Giardia intestinalis, resultando em uma prevalência de 2,8%. A prevalência de enteroparasitas concentrou-se na faixa etária de 1 a 14 anos e em bairros com precária qualidade de vida e de infraestrutura de saneamento, logo, na população de mais baixa renda de Viçosa. Comparando a prevalência de exames positivos para protozoários intestinais segundo diferentes condições de saneamento, verificou-se que demonstram maior proteção os indivíduos que residem em casas com reservatório tampado domiciliar de água para consumo em relação aos que possuem ligação direta da rede, e os que residem em casas que dispõem seus esgotos em rede ou córrego em relação aos que utilizam fossas. Um estudo epidemiológico realizado em favelas de Belo Horizonte, que comparou três áreas com diferentes condições de saneamento, segundo indicadores de saúde de crianças entre um e cinco anos, mostrou prevalência total da criptosporidiose e da giardíase de 25%, revelando o risco de exposição da população amostrada em função das condições precárias de saneamento (AZEVEDO, 2003). A persistência ambiental dos (oo) cistos de Cryptosporidium e Giardia e sua resistência aos desinfetantes utilizados nos processos de tratamentos convencionais para o abastecimento de água são reconhecidamente elevadas, embora tenha sido relatado que em altas concentrações de cloro e ozônio os cistos de Giardia são menos resistentes do que os oocistos de Cryptosporidium. A Portaria 518/2004 do Ministério da Saúde do Brasil recomenda a pesquisa de (oo) cistos de Cryptosporidium e Giardia e de enterovírus, enfatizando a importância da redução da turbidez em níveis inferiores a 0,5 UNT como forma de otimizar o controle microbiológico da água potável, embora não exista nenhuma regulamentação nacional que estabeleça o monitoramento desses protozoários ou de quaisquer outros microrganismos patogênicos em águas a serem destinadas ao consumo humano. A avaliação de risco não é usada de forma isolada, mas faz parte do que é conhecido atualmente como análise de risco, que engloba além da avaliação de risco, o gerenciamento de risco e a comunicação de risco. A avaliação de risco pode ser definida como sendo uma caracterização e estimativa, qualitativa e quantitativa, dos potenciais efeitos adversos à saúde associados à exposição de indivíduos ou populações a fatores de risco. A avaliação quantitativa do risco microbiológico tem sido aplicada para estimar numericamente as conseqüências de exposição ambiental a microrganismos patogênicos baseadas na identificação dos efeitos adversos a saúde, na avaliação da dose-resposta e da exposição e na caracterização do risco, a partir dos paradigmas da avaliação de risco químico (HAAS & EISENBERG., 2001; COVELLO., 1993; HAAS et al., 1999). MATERIAL E MÉTODOS

Amostragem

Foi selecionada a cidade de Divinópolis, com cerca de 200.000 habitantes, localizada no Médio São Francisco, Minas Gerais. A cidade dispõe de dois sistemas produtores de água, ambos com estação de tratamento de ciclo completo (aqui denominados sub-sistema produtor Itapecerica e sub-sistema produtor Pará), sendo que cada sistema apresenta diferentes níveis de poluição fecal nos mananciais. O sub-sistema produtor Itapecerica, cujo manancial apresenta maior poluição fecal, abastece cerca de 70% da população da cidade estudada e está operando com uma vazão acima da sua capacidade projetada, enquanto que o sub-sistema Pará abastece cerca de 30% da população e está dentro do seu limite de operação. A caracterização dos sub-sistemas produtores está apresentada na Tabela 1.

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TABELA 1-

Caracterização dos sub-sistemas Itapecerica e Pará, Divinópolis/MG.

Sistema Manancial Vazão

(nominal/operacional) L/s

Tempo funcionamento

Tipo de tratamento

Itapecerica

Rio Itapecerica

450 / 500

23 h/dia

ciclo completo

Pará

Rio Pará

150 / 125

16 h/dia

ciclo completo

Coleta de amostras sobre a qualidade da água Determinação de coliformes totais, E. coli, Enterococcus sp. e bactérias esporogênicas (aeróbias)

As técnicas de coleta, preservação e transporte são aquelas propostas nos Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater (APHA, 1998). Foram coletados semanalmente de cada sistema produtor (A e B) 400 mL de água (bruta e tratada) para a análise dos coliformes, E. coli, Enterococcus sp. e bactérias esporogênicas (aeróbias), em frascos de polipropileno esterilizados e mantidos sob refrigeração durante o transporte até o laboratório. Para a neutralização do cloro das amostras de água tratada, foi adicionada solução de tiossulfato de sódio. Pesquisa de (oo) cistos de Cryptosporidium spp. e Giardia sp. nas amostras de água

Para detecção dos protozoários Cryptosporidium e Giardia, foram realizadas coleta mensais de água bruta e tratada nas respectivas ETAs em estudo, no período de setembro de 2004 a janeiro de 2005. Foram coletados 10 L de água bruta e 100 L de água tratada, em galões plásticos com capacidade para 10 L e 50 L, previamente esterilizados, sendo que para a água tratada a coleta foi realizada por filtração em espuma (Filta-Max – IDEXX/USA) segundo Método 1623 da USEPA (USEPA, 2001 a). Coleta de amostras de esgoto doméstico Foram coletados 10 L do esgoto lançado nos respectivos sistemas, em galões plásticos com capacidade para 10 L, previamente esterilizados. Análises da qualidade da água Pesquisa de (oo) cistos de Cryptosporidium spp. e Giardia sp. nas amostras de água

A detecção e identificação de (oo) cistos de Cryptosporidium e Giardia foi realizada segundo o Método 1623 da USEPA através do processo de filtração de amostras em módulos de filtro (Filta-Max – IDEXX/USA), eluição com processamento em Stomacher, seguido de centrifugação a 1500 g (2700 rpm) por 15 minutos, separação imunomagnética com dissociação térmica a 800C para purificação da amostra e identificação e confirmação por microscopia de Epifluorescência (FITC), coloração por DAPI (4',6-diamidino-2-fenilindol) e Contraste de Interferência Diferencial (CID). Determinação de coliformes totais e E. coli

As determinações de coliformes e de E. coli foram realizadas através da técnica do substrato enzimático segundo o Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater (APHA, 1998). Determinação de Enterococcus sp.

Os Enterococus spp. foram determinados pela técnica da membrana filtrante (m. Enterococcus) descrita nos Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater (APHA, 1998). Determinação de bactérias esporogênicas (aeróbias)

As determinações das bactérias esporogênicas (aeróbias) foram feitas de acordo com as técnicas adotadas por Nieminski et al (2000).

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23º Congresso Brasileiro de Engenharia Sanitária e Ambiental Análise de parâmetros físico-químicos

Os parâmetros turbidez e pH foram analisados segundo os Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater (APHA, 1998). Análise do esgoto doméstico A detecção e identificação dos (oo) cistos de Cryptosporidium e Giardia foram realizadas segundo o Método 1623 da USEPA. Instalações As análises da qualidade da água foram realizadas no Laboratório Central da Companhia de Saneamento de Minas Gerais – COPASA, em Belo Horizonte/MG. Coleta de dados epidemiológicos Os dados epidemiológicos da giardíase, referentes ao período de outubro de 2003 a dezembro de 2004, foram recolhidos no mês de janeiro de 2005 através dos prontuários médicos enviados à Secretaria Municipal de Saúde de Divinopólis (SEMUSA). Foram obtidas informações relativas aos resultados dos exames parasitológicos de fezes quanto a presença de Giardia na fração da população usúaria dos serviços municipais de saúde. Através desse levantamento de dados será possível determinar a prevalência da giardíase na população. Tratamento dos dados Análise descritiva dos dados

Está sendo feita uma análise descritiva dos dados, tornando-os de fácil compreensão e interpretação. Estão sendo aplicados ainda métodos estatísticos adequados às informações colhidas no estudo comparativo entre os diversos sistemas de abastecimento. Avaliação quantitativa do risco microbiológico

A avaliação quantitativa do risco microbiológico (AQRM) está sendo utilizada para a verificação do significado das ocorrências de (oo) cistos de Cryptosporidium e Giardia nos mananciais e da capacidade dos sistemas de tratamento em removê-los. Esta avaliação irá proporcionar a definição do risco que as densidades de (oo) cistos de Cryptosporidium e Giardia encontradas no estudo implicaram para a população usuária. Para isto serão aplicados os princípios da AQRM:

- identificação dos riscos: identificar a distribuição dos microrganismos na água e a sensibilidade da população a esses microrganismos;

- avaliação da exposição: ingestão diária de aproximadamente 2 L de água; - análise dose-resposta: verificar quanto a população usuária estaria sujeita à infecção. Isto será

feito através da aplicação de modelos teóricos (Modelo de beta-Poisson e Modelo Exponencial) porque ambos estimam o risco de infecção associado a uma única exposição, representada pela ingestão de microrganismo através da água;

- caracterização do risco: estimativa da magnitude do problema da saúde pública. RESULTADOS

Oocistos de Cryptosporidium spp. e Giardia sp. nas amostras de água As amostras de água bruta e tratada analisadas dos sub-sistemas Itapecerica e Pará da cidade de Divinopólis, relativas a ocorrência de (oo) cistos de Cryptosporidium e Giardia, podem ser observados na Tabela 2 e na Tabela 3.

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23º Congresso Brasileiro de Engenharia Sanitária e Ambiental TABELA 2: Concentração de (oo) cistos de Cryptosporidium spp. e Giardia sp. em amostras de água bruta e

tratada do sub-sistema Itapecerica, Divinópolis – MG, em (oo) cistos/10L

Água Bruta Água Tratada Amostra Cryptosporidium spp. Giardia sp. Cryptosporidium spp. Giardia sp.

01 2 250 * * 02 1 93 0 0,1

03 1 26 0 0 04 0 3 0 0 05 3 56 0 0 06 0 53 0 0 07 0 4 0 0 08 1 2 0 0,1

09 0 9 0 0 10 0 130 0 0

11 2 3 0 0 12 0 41 0 0

Os dados revelam que o Rio Itapecerica apresentou concentrações de 0 a 3 oocistos de Cryptosporidium /10L e de 3 a 250 cistos de Giardia/10L na água bruta. Essas ocorrências mesmo em baixas concentrações, como observadas, podem sugerir risco à população uma vez que a dose infecciosa desses protozoários é relativamente baixa. Na água tratada, os dados sugerem uma boa eficiência de remoção desses protozoários, embora tenha sido observada uma ocorrência de Giardia na amostra 02 e na amostra 08. Essas ocorrências não devem conferir risco microbiológico à população considerando que uma pessoa deveria consumir cerca de 100L de água tratada/dia para se infectar.

TABELA 3: Concentração de (oo) cistos de Cryptosporidium spp. e Giardia sp. em amostras de água

bruta e tratada do sistema Pará, Divinópolis – MG , em (oo) cistos/10L

Água Bruta Água Tratada Amostra Cryptosporidium spp. Giardia sp. Cryptosporidium spp. Giardia sp.

01 0 7 * * 02 0 0 0 0 03 0 0 0 0 04 0 1 0 0 05 0 0 0 0 06 0 0 0 0 07 0 10 0 0 08 0 0 0 0 09 0 0 0 0 10 0 0 0 0 11 0 0 0 0 12 0 23 0 0

A Tabela 3 mostra que a concentração de oocistos de Cryptosporidium no Rio Pará foi sistematicamente nula e a de Giardia foi da ordem de 0 a 10 cistos/10L. Esses dados revelaram baixa pressão desses protozoários no manancial captado e por sua vez boa eficiência de sua remoção no tratamento da água. Os dados bacteriológicos, observados nas Tabelas 4 e 5, mostraram um alto nível poluição fecal no manancial Rio Itapecerica, enquanto que no manancial Rio Pará esse nível de poluição fecal foi baixo. Preliminarmente, não se observou relação entre os níveis de ocorrência dos indicadores com os dos protozoários.

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23º Congresso Brasileiro de Engenharia Sanitária e Ambiental TABELA 4: Concentração de (oo) cistos de Cryptosporidium spp. e Giardia sp. e dos indicadores de poluição fecal em amostras de água bruta do sub-sistema Itapecerica, Divinópolis – MG.

Indicadores de poluição fecal Risco microbiológico Amostra E. coli

(NMP/100 ml) Enterococcus spp

(UFC/100 ml) Cryptosporidium (oocistos /10L)

Giardia (cistos /10L)

01 33000 1 2 250 02 120 0 1 93 03 73 0 1 26 04 P 0 0 3 05 - 1 3 56 06 110 28 0 53 07 0 70 0 4 08 428 51 1 2 09 2419 102 0 9 10 812 752 0 130 11 4840 62 2 3 12 1000 367 0 41

TABELA 5: Concentração de (oo) cistos de Cryptosporidium spp. e Giardia sp. e dos indicadores de poluição fecal em amostras de água bruta do sub-sistema Pará, Divinópolis – MG.

Indicadores de poluição fecal Risco microbiológico

Amostra E. coli (NMP/100 ml)

Enterococcus spp (UFC/100 ml)

Cryptosporidium (oocisto/10L)

Giardia (cisto/10L)

01 - - 0 7 02 25 0 0 0 03 325 0 0 0 04 P 0 0 1 05 24 0 0 0 06 52 0 0 0 07 66 2 0 10 08 - 6 0 0 09 50 72 0 0 10 10 2 0 0 11 4840 0 0 0 12 252 - 0 23

As Tabelas 6 e 7 apresentam a ocorrência dos protozoários e dos indicadores na águas bruta e tratada de ambos os sub-sistemas.

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TABELA 6: Concentração de (oo) cistos de Cryptosporidium spp. e Giardia sp. e dos indicadores de avaliação de eficiência em amostras de água bruta e tratada do sub-sistema Itapecerica, Divinópolis – MG.

Indicadores de avaliação de eficiência Risco microbiológico

Coliformes (NMP/100 ml)

Bactérias esporogênicas

(UFC /100 mL)

Cryptosporidium (oocistos/10L)

Giardia (cistos/10L) Amostra

água bruta

água tratada

água bruta

água tratada

água bruta

água tratada

água bruta

água tratada

01 69000 0 - - 2 - 250 - 02 1000 0 - - 1 0 93 0,1 03 325 0 - - 1 0 26 0 04 P 0 - 0 0 3 0 05 - - 229 1 3 0 56 0 06 - 3870 5 0 0 53 0 07 0 - 458 1 0 0 4 0 08 483 0 968 3 1 0 2 0,1 09 - 0 918 2 0 0 9 0 10 4820 0 816 10 0 0 130 0 11 4840 0 282 7 2 0 3 0 12 4840 0 255 28 0 0 41 0

TABELA 7: Concentração de (oo) cistos de Cryptosporidium spp. e Giardia sp. e dos indicadores de avaliação de eficiência em amostras de água bruta e tratada do sub-sistema Pará, Divinópolis – MG.

Indicadores de avaliação de eficiência Risco microbiológico

Coliformes (NMP/100 ml)

Bactérias esporogênicas

(UFC /100 mL)

Cryptosporidium (oocistos/10L)

Giardia (cistos/10L) Amostra

água bruta

água tratada

água bruta

água tratada

água bruta

água tratada

água bruta

água tratada

01 - - - - 0 - 7 - 02 165 0 - - 0 0 0 0 03 325 0 - - 0 0 0 0 04 P A 2340 0 0 0 1 0 05 1930 0 459 0 0 0 0 0 06 582 0 51 0 0 0 0 0 07 358 0 714 1 0 0 10 0 08 - 0 593 18 0 0 0 0 09 164 0 357 5 0 0 0 0 10 30 0 122 6 0 0 0 0 11 4840 0 122 15 0 0 0 0 12 4840 0 1580 433 0 0 23 0

Em uma observação inicial da Tabela 6, o susb-sistema Itapecerica removeu 100% dos níveis de coliformes registrados na água bruta. Por outro lado, a remoção das bactérias esporogênicas foi da ordem de 1 a 2 log, o que provavelmente poderá significar um padrão maior de resistência desses microrganismos ao tratamento e uma maior proximidade como parâmetro de avaliação na remoção de protozoários. Quanto aos protozoários observou-se maior remoção para os oocistos que para os cistos, embora os níveis de Cryptosporidium na água bruta estivessem reduzidos dificultando avaliação de sua remoção. Uma avaliação de risco poderá acrescentar mais informações sobre a eficiência real dos processos de remoção e o risco microbiológico das ocorrências desses microrganismos no manancial. A tabela 7 apresenta os dados de remoção de indicadores e de (oo)cistos no sub-sistema Pará. Observa-se que, da mesma forma que no sub-sistema Itapecerica, houve remoção total de colifornes e remoção relativa de

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23º Congresso Brasileiro de Engenharia Sanitária e Ambiental bactérias esporogênicas. Muito provavelmente devido à menor pressão microbiológica sobre o sistema, não se observam deficiências na remoção dos reduzidos níveis de protozoários. Não foi observada (Tabela 8) diferença nítida nas concentrações de (oo)cistos de Cryptosporidium spp. e Giardia sp. em amostras de esgoto doméstico lançados na área de abastecimento dos sub-sistemas Itapecerica e Pará que pudesse explicar uma maior prevalência desses protozoários na população abastecida pelos sub-sistema Itapecerica.

TABELA 8: Concentração de (oo) cistos de Cryptosporidium spp. e Giardia sp. em amostras de esgoto doméstico lançados na área de abastecimento dos sub-sistemas Itapecerica e Pará/ Divinópolis – MG

Sistema Itapecerica Sistema Pará Amostra

Cryptosporidium spp. Giardia sp. Cryptosporidium spp. Giardia sp. 01 138 9082 12 6275 02 45 420 130 29690 03 5 60 2 55 04 0 130 31 260

Os dados físico-químicos de turbidez e pH estão sendo incorporados junto a informações operacionais e serão tratados estatisticamente até o final deste trabalho. Os dados epidemiológicos de giardíase, até então, mostram que: • 534 exames, referentes ao período de outubro de 2003 a dezembro de 2004, constaram resultados

positivos para Giardia; • o total de exames positivos para Giardia referentes aos centros e postos de saúde abastecido pelo sistema

Itapecerica foi de 413; • o total de exames positivos para Giardia referentes aos centros e postos de saúde abastecido pelo sistema

Pará foi de 121. Serão ainda incluídos os dados referentes ao número de amostras totais enviadas aos postos de saúde e a localização desses postos no mapa de distribuição de água em Divinópolis para que se possa realizar tratamento estatístico de verificação de possíveis correlações entre a prevalência de Giardia na população e o tipo de sub-sistema de abastecimento de água. CONCLUSÕES PRELIMINARES

Com base no trabalho realizado, conclui-se que:

• os dois sub-sistemas (Itapecerica e Pará) parecem ter revelado boa eficiência na remoção dos protozoários Cryptosporidium e Giardia devendo ser melhor investigado o comportamento da Giardia no sistema Itapecerica;

• os níveis de remoção citados na literatura para Cryptosporidium e Giardia, entre 2 e 3 log, não

puderam ser avaliados integralmente, uma vez que as densidades desses protozoários no manancial estiveram na ordem de 100 e 101;

• os dados bacteriológicos confirmaram o maior comprometimento do Rio Itapecerica quanto à

poluição fecal e consequentemente uma maior pressão de (oo) cistos de Cryptosporidium e de Giardia ;

• um tratamento estatístico, com base na avaliação de riscos, poderá revelar se o índice de resultados

positivos para Giardia na população estudada tem significado epidemiológico e se existe uma relação desse índice com o abastecimento de água;

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• os níveis de remoção de bactérias esporogênicas parecem indicar que esses microrganismos podem ser utilizados como parâmetros de avaliação da eficiência de tratamento considerando terem demonstrado resistência superior aos coliformes nos dois sub-sistemas estudados;

• não foi observada diferença nítida entre as densidades de (oo) cistos detectados nas amostras do

esgoto lançado nas redes coletoras das áreas abrangidas pelos dois sub-sistemas de abastecimento. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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2. AZEVEDO, E.A. Exclusão sanitária em Belo Horizonte: Caracterização e associação com indicadores de saúde.[Dissertação de Mestrado]. Belo Horizonte: Universidade Federal de Minas Gerais. (Saneamento, Meio Ambiente e Recursos Hídricos); 2003.

3. BRASIL. Ministério da Saúde. Portaria n.0 518 de 25 de março de 2004. Estabelece os procedimentos e responsabilidades relativos ao controle e vigilância da qualidade da água para consumo humano e seu padrão de potabilidade, e dá outras providências. Diário Oficial, Poder Executivo, Brasília, DF, 2004.

4. HAAS, C & EISENBERG, J.N.S. Risk Assessment. World Health Organization (WHO). Water quality: Guidelines, standards and health. Edited by Lorna Fewtrell and Jamie Bartram. Published by IWA Publishing, London, UK. ISBN 1-900222-28-0. 161-182p., 2001.

5. ENVIRONMENTAL PROTECTION AGENCY. Method 1623 : Cryptosporidium and Giardia in Water by Filtration/IMS/FA. Washington, DC, April, 2001 (EPA-821-R-01-025).

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