INFLUÊNCIA DA LUZ NA DETERMINAÇÃO DA BILIRRUBINA TOTAL EM BOVINOS

INFLUENCE OF LIGHT ON THE DETERMINATION OF TOTAL BILIRUBIN IN

CATTLE

Thaísa Apetitto Sanches Tosta1, Luis Gustavo Narciso

1, Renata Nogueira Figueiredo

1,

Vanessa Borges Costa Ferreira2, Acácio José Lustosa Mendes

1, Jucilene Conceição de Souza

3,

Mauricio Deschk2, Suely Regina Mogami Bomfim

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RESUMO A bilirrubina é um subproduto do metabolismo da hemoglobina. Seu aumento pode ocorrer

por causas pré hepáticas, hepáticas ou pós hepáticas. Na espécie bovina, essa substância

apresenta algumas particularidades, como um discreto aumento em caso de hepatopatia severa

ou jejum. A análise de bilirrubina deve ser realizada em amostras adequadamente protegidas

da luz, pois é considerada uma substância fotossensível. O objetivo deste trabalho foi

comparar a concentração de bilirrubina total de amostras protegidas e não protegidas da luz,

de dez bovinos, fêmeas, adultas, onde a média dos resultados obtidos foi 9,46 (±2,89) para

amostras protegidas e 9,89 (±1,83) para amostras não protegidas da luz, não havendo

diferenças estatísticas significativas.

Palavras-chave: bilirrubina, luz, bovino

SUMMARY Bilirubin is a byproduct of the hemoglobin´s metabolism. It’s increase may occur due to pre

hepatic, hepatic or post hepatic conditions. In bovine species, this substance has some

peculiarities, such as a slight increase in case of severe liver disease or fasting. The analysis of

bilirubin is done if the sample is adequately protected from light, for be considered a

photosensitive substance. The objective of this study was to compare the concentration of

total bilirrubin of samples protected and unprotected from light, of ten cattle, female, adult,

where the average of the results was 9.46 (± 2.89) for protected samples and 9,89 (± 1.83) for

samples unprotected from light, with no significative statistic differences.

Keywords: bilirubin, light, cattle

TEXTO Quando as hemácias atingem o final de sua meia vida, são fagocitadas pelas células

do sistema fagocítico mononuclear, que ocorre principalmente no baço e em menor grau no

fígado e medula óssea. Essas hemácias fagocitadas são destruídas e a hemoglobina é

metabolizada, onde um dos produtos finais é a bilirrubina (LASSEN, 2007).

As determinações dessa substância têm valor na classificação de icterícia em animal

enfermo (EMBERT e COLES, 1984). A hiperbilirrubinemia, ou seja, o aumento da

concentração sérica de bilirrubina, pode derivar do aumento de hemoglobina devido ao maior

grau de hemólise, da menor taxa de absorção ou conjugação de bilirrubina pelos hepatócitos e

do prejuízo do fluxo biliar (LASSEN, 2007).

_______________________ 1 Medico Veterinário (Residente), Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba da Univ. Estadual Paulista.

2 Pós graduando do Departamento de Apoio e Produção e Saúde Animal (DAPSA), Faculdade de Medicina

Veterinária de Araçatuba, Univ. Estadual Paulista. 3 Farmacêutico Bioquímico, Profissional autônomo

4 Professor do Departamento de Clínica, Cirurgia e Reprodução Animal, Faculdade de Odontologia de

Araçatuba, Univ. Estadual Paulista.

Rua Clóvis Pestana, 793 16050-680 Araçatuba – SP, (18)36361460, thaisatosta@gmail.com

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Em ruminantes, a concentração de bilirrubina não aumenta de modo consistente em

animais com doença hepática (LASSEN, 2007). Em episódios de hepatopatia severa em

bovinos, os níveis séricos de bilirrubina estão apenas ligeiramente aumentados (EMBERT e

COLES, 1984). Bovinos doentes com anorexia e estase ruminal podem ter

hiperbilirrubinemia, pelo aumento de bilirrubina não conjugada, não associada à doença

hemolítica ou hepática. Bovinos sadios em jejum também desenvolvem uma discreta

hiperbilirrubinemia (STOCKHAM e SCOTT, 2011).

Para dosagem de bilirrubina, os tubos com as amostras de sangue devem ser

protegidos da luz com papel alumínio ou devem ser acondicionadas em frasco âmbar. Deve-se

evitar a exposição a qualquer tipo de luz, artificial ou natural, durante o período pré-analítico

(FISCHBACH, 2002). Assim, sob luz solar direta, a bilirrubina total pode diminuir até 50%

em uma hora (STOCKHAM e SCOTT, 2011).

O presente trabalho teve por objetivo avaliar influência da luz no valor da bilirrubina

total de bovinos.

Foram colhidos 10 mL de sangue venoso, através de venopunção jugular, com agulha

40x12 de dez bovinos adultos, fêmeas, provenientes da Faculdade de Medicina Veterinária

(FMVA), UNESP, campus de Araçatuba, SP. As amostras foram acondicionadas em dois tubos

de vidro sem anticoagulante, 5 mL em cada, onde apenas um dos tubos era envolvido com

papel alumínio para proteção da incidência de luz e encaminhadas ao Laboratório Clínico

Veterinário, mantidas em repouso por uma hora em iluminação artificial e temperatura

ambiente, para a formação de coágulo. Posteriormente, foram centrifugadas (Centribio®,

modelo TDL80-2B) por 10 minutos a 1207,2 G para separação e armazenamento do soro em

microtubos, utilizando a mesma metodologia dos tubos anteriores. As mensurações de

bilirrubina total foram realizadas conforme o procedimento descrito pelo fabricante do kit

comercial (Labtest®) utilizado pelo ensaio colorimétrico através da metodologia Sims-Horn

em espectrofotometria (Celm SB-190).

Para a comparação dos dois métodos utilizados, foi utilizado programa estatístico

computacional (GraphPad Instat v.3.0), por meio do Teste T Pareado.

Os valores médios e desvios-padrão de bilirrubina total obtidos foram 9,46(±2,89) e

9,89(±1,83) µmol/L para tubos protegidos e não protegidos, respectivamente. Na análise

estatística não foi observada diferença significativa (p>0,05). Contrariando o que foi

observado por Melo & Pereira (1985), que constataram diferenças significativas em trabalho

semelhante, que avaliou a interferência da luz nas dosagens de bilirrubina total, direta e

indireta em 20 amostras de soro da espécie humana.

De acordo com os resultados obtidos, a variação da concentração de bilirrubina total

submetidas aos testes não foi representativa. O que torna as amostras desprotegidas da luz,

desde que em um curto período de tempo, não ultrapassando uma hora de exposição, ser

devidamente analisadas, sem prejuízo na obtenção de resultados confiáveis. Poucos trabalhos

foram realizados com a finalidade de avaliar a fotossensibilidade da bilirrubina, sugerindo que

essa possível degradação deva ser profundamente estudada.

REFERÊNCIAS

EMBERT, H.; COLES, M.A. Função Hepática. In: ________. Patologia Clínica Veterinária.

3. ed. São Paulo: Manole, 1984. cap. 7, p. 187-190.

FISCHBACH, F. Exames Diagnósticos Especiais, Coleta de Amostra Especial e Exames Post

Mortem. In: ________. Manual de Enfermagem – Exames Laboratoriais e Diagnóstico. Rio

de Janeiro: Guanabara Koogan, 2002. cap. 16, p.580.

LASSEN, E.D. Avaliação laboratorial do fígado. In: THRALL, M.A. Hematologia e

Bioquímica Clínica Veterinária. São Paulo: Roca, 2007. cap. 23, p.343-347.

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MELO, E.M. C.; PEREIRA, J. V. Influência da luz na determinação da bilirrubina. CCS,

Paraíba, v. 7(1), p. 37-40, 1985.

STOCKHAM, S. L; SCOTT, D.V.M. Função Hepática. In: ________. Fundamentos de

Patologia Clínica Veterinária. 2. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2011. cap. 13, p.

562-589.