estudo fitoquímico, avaliação da toxicidade oral aguda e da

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  • UNIVERSIDADE FEDERAL DO PAR

    INSTITUTO DE CINCIAS DA SADE

    PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM CINCIAS

    FARMACUTICAS

    ESTUDO FITOQUMICO, AVALIAO DA TOXICIDADE ORAL AGUDA E DA ATIVIDADE ANTIMALRICA IN VITRO

    E IN VIVO DAS CASCAS DE PARAHANCORNIA FASCICULATA (POIR.) BENOIST (APOCYNACEAE)

    Adreanne Oliveira da Silva

    Belm-PA 2013

  • UNIVERSIDADE FEDERAL DO PAR INSTITUTO DE CIENCIAS DA SADE

    PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM CINCIAS

    FARMACUTICAS

    ESTUDO FITOQUMICO, AVALIAO DA TOXICIDADE

    ORAL AGUDA E DA ATIVIDADE ANTIMALRICA IN VITRO

    E IN VIVO DAS CASCAS DE PARAHANCORNIA

    FASCICULATA (POIR.) BENOIST (APOCYNACEAE)

    Autor: Adreanne Oliveira da Silva

    Orientadora: Prof. Dr. Maria Fani Dolabela

    Co-Orientadora: Prof. Dr.a Alade Braga de Oliveira

    Dissertao apresentada ao Programa de Ps-graduao em Cincias Farmacuticas, rea de concentrao Frmacos e Medicamentos, do Instituto de Cincias da Sade da Universidade Federal do Par como requisito para obteno de Ttulo de Mestre em Cincias Farmacuticas.

    Belm-PA 2013

  • FOLHA DE APROVAO

    Adreanne Oliveira da Silva

    ESTUDO FITOQUMICO, AVALIAO DA TOXICIDADE ORAL

    AGUDA E DA ATIVIDADE ANTIMALRICA IN VITRO E IN VIVO DAS

    CASCAS DE PARAHANCORNIA FASCICULATA (POIR.) BENOIST

    (APOCYNACEAE)

    Dissertao apresentada Faculdade de Farmcia da Universidade Federal do Par para obteno do ttulo de mestre do PPGCF. rea de concentrao: Frmacos e Medicamentos.

    Aprovado em:

    Banca Examinadora

    Profa. Dra. Maria Fni Dolabela Instituio: Faculdade de Farmcia, Universidade Federal do Par.

    Orientadora Ass:_______________________

    Profa. Dra Alade Braga de Oliveira

    Instituio: Faculdade de Farmcia, Universidade Federal de Minas Gerais. Ass:_______________________

    Prof. Dr. Sandro Percrio Instituio: Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Par.

    Ass:_______________________

    Prof. Dr. Flvio de Vasconcelos (suplente) Instituio: Faculdade de Farmcia, Universidade Federal do Par.

    Ass:_______________________

    Belm- PA 2013

  • DEDICATRIA

    Aos meus pais Ludilcio Serro da Silva e Carmem do Socorro Oliveira da

    Silva, minhas irms Andra Oliveira da Silva e Amanda Oliveira da Silva e ao meu

    namorado e amigo Jorge Valentim Monteiro Abdelnor, com amor, admirao e

    gratido por seu apoio, pacincia, carinho, incentivo e amor incondicional. Muito

    obrigada por tudo, sem vocs no seria nada.

    No existem palavras que expressem a gratido e o amor que sinto por todos

    vocs. Espero ser sempre motivo de orgulho e alegria para vocs. Dedico-lhes esta

    conquista com muita gratido e amor.

  • AGRADECIMENTOS

    Em primeiro lugar e acima de tudo agradeo a Deus por tudo de bom que me concede na vida, pela companhia, sabedoria e fora constante em todos os momentos deste mestrado e da minha vida. Sem Ele, nada existiria. No haveria razo e nem motivo. Obrigado meu Deus por estar sempre comigo no s neste trabalho, mas em todas as situaes que acontecem em minha vida, me aconselhando e ensinando.

    minha orientadora Profa. Dra. Maria Fni Dolabela pela sua orientao, fora, sabedoria, ajuda, confiana e pacincia durante a trajetria deste trabalho. Alm das sugestes durante a realizao e redao do mesmo. minha co-orientadora Profa. Dra Alade Braga de Oliveira pela sua orientao, sabedoria, fora, incentivo, apoio, confiana, carinho e pacincia pelos trs meses em que fiquei realizando a parte experimental deste trabalho em Belo Horizonte, alm das sugestes durante a realizao e redao deste trabalho. aluna de Doutorado Renata Cristina de Paula e Mestra Maria Fernanda do Nascimento, Faculdade de Farmcia/UFMG, pela ajuda, pacincia e competncia no ensinamento da parte experimental dos ensaios de atividade antimalrica in vitro e in vivo. Aos meus queridos colegas Doutores Clio Brando, Guilherme Pereira e Rodrigo de Pdua, Faculdade de Farmcia/UFMG, pela ajuda, apoio, compreenso, pacincia e carinho nos testes fitoqumicos. Aos colegas do Laboratrio de Fitoqumica da UFMG, Marina Barbosa, Raquel Isidorio, Juliana de Oliveira, Keylla Ribeiro, Sarah Assis, Karla Evangelista, Bruna Malagoli, Ana Brbara Dias, Tatiane Borgati e Marina Schiavo pela ajuda, apoio, parceria, carinho e maravilhoso acolhimento que todos tiveram comigo no perodo em que estive em Belo Horizonte. Aos meus queridos amigos do Laboratrio de Famacologia da UFPA, Dayse Brando, Michel Martins, Andreza Veiga, Edinilza Borges, Cynthia Quaresma, Amanda Almeida, Diele Magno, Natasha Costa, Raimundo Miranda, Guilherme Carvalho, Rosana Volpato, Camila Santos que sempre estiveram ao meu lado nos momentos bons ou ruins, por toda ajuda, apoio, carinho, compreenso, dedicao e ateno. Obrigada queridos por tudo. Ao Laboratrio de Toxicologia da UFPA na pessoa do professor Flvio Vasconcelos por nos liberar o laboratrio para a realizao de alguns experimentos e aos meus colegas Thyago Vilhena, Thiago Leite e Adriana Veiga pelo carinho, ajuda e apoio na realizao dos ensaios. Ao Laboratrio de Fitoqumica da UFPA na pessoa do Prof. Dr. Wagner Barbosa por nos liberar o laboratrio para a realizao de alguns experimentos e aos seus colaboradores Jailton Nascimento, Jos Gomes, Amiraldo Perez e Myrth Soares pelo carinho, ajuda e apoio na realizao dos ensaios.

  • A Central de Extrao da UFPA por permitir que realizasse a o processo de moagem das cascas de Parahancornia fasciculata. Aos meus pais Ludilcio Serro da Silva e Carmem do Socorro Oliveira da Silva, irms Amanda Oliveira da Silva e Andra Oliveira da Silva e ao meu namorado e amigo Jorge Valentim Monteiro Abdelnor, pela compreenso, pacincia, carinho, dedicao, amor, respeito e apoio incondicional em toda a minha vida. A Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior CAPES pela bolsa concedida. Ao Ministrio da Cincia e Tecnologia (MCT), Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq), Ministrio da Sade (MS), Secretaria de Cincia, Tecnologia e Insusmos Estratgicos (SCTIE), Departamento de Cincia e Tecnologia (DECIT), Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG), Fundao de Amparo Pesquisa do Estado do Par (FAPESPA) pelo apoio financeiro para realizao do trabalho. A Universidade Federal do Par pela Ps-graduao em Cincias Farmacuticas. Aos professores do Programa de Ps-Graduao em Cincias Farmacuticas da Faculdade de Farmcia da Universidade Federal do Par pelos ensinamentos de tantos anos. As minhas queridas amigas Karla Fabiana Barroso e Mayara Sousa pelo apoio, carinho e amizade durante esse perodo de curso. Aos funcionrios da Ps-graduao em Cincias Farmacuticas pela ajuda sempre dispensada. E a todos aqueles que contriburam de modo direto ou indireto, na realizao desta dissertao.

  • A presente dissertao faz parte do PRONEX- Rede malria. Processo no 555655/2009-1-Rede de produtos naturais para a quimioterapia antimalrica, coordenado pela Profa. Alade Braga de Oliveira, Faculdade de Farmcia/UFMG e com apoio das seguintes agncias na UFPA: Ministrio da Cincia e Tecnologia (MCT), Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq), Ministrio da Sade (MS), Secretaria de Cincia, Tecnologia e Insumos Estratgicos (SCTIE), Departamento de Cincia e Tecnologia (DECIT), Fundao de Amparo Pesquisa do Estado do Amazonas (FAPEAM), Fundao de Amparo Pesquisa do Estado do Maranho (FAPEMA), Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de Mato Grosso (FAPEMAT), Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG), Fundao de Amparo Pesquisa do Estado do Par (FAPESPA), Fundao de Amparo Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (FAPERJ) e Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP). Parte do trabalho de Fitoqumica e a avaliao da atividade antimalrica in vitro e in vivo foram desenvolvidos na forma de Mestrado Sanduche no laboratrio de Fitoqumica, Faculdade de Farmcia, Universidade Federal de Minas Gerais, sob a orientao da Profa. Dra. Alade Braga de Oliveira, com a colaborao do Dr. Geraldo Clio Brando, da Doutoranda Renata Cristina de Paula, e da Bolsista CNPq/DTI2 MSc Maria Fernanda Alves do Nascimento. O perodo de realizao do estgio do mestrado sanduche foi de Setembro a Dezembro de 2011.

  • RESUMO

    SILVA, A. O. Estudo fitoqumico, avaliao da toxicidade oral aguda e da atividade antimalrica in vitro e in vivo das cascas de Parahancornia fasciculata (Poir.) Benoist (Apocynaceae). 2013. 137f. Dissertao de Mestrado, Faculdade de Farmcia, Universidade Federal do Par, Belm-PA, 2013. Parahancornia fasciculata (Poir.) Benoist (Apocynaceae), tambm conhecida como Parahancornia amapa (Hub.) Ducke, uma espcie vegetal empregada popularmente no tratamento da malria, infeces no tero, gastrite, anemia, problemas respiratrios, entre outros. Os objetivos do presente trabalho foram realizar o estudo fitoqumico, avaliar a toxicidade oral aguda e a atividade antimalrica in vitro e in vivo de extratos, fraes e substncia isolada obtidas a partir de cascas do caule de P. fasciculata. Foram realizados dois tipos de extraes com o p das cascas de P. fasciculata, por macerao / percolao, com etanol 96GL e diclorometano, esta ltima tendo sido realizada a com o p das cascas alcalinizado com hidrxido de amnio, obtendo-se os extratos secos EEPF e EDAPF, respectivamente. Uma terceira extrao foi realizada a partir do EEPF por aquecimento sob refluxo, sucessivamente, com Hex:DCM (1:1), AcOEt:DCM (1:1) e AcOEt. EEPF foi, tambm, submetido a fracionamento por extraes cido-base resultando nas fraes de neutros (EEPFN) e de alcalides (EEPFA). A prospeco fitoqumica realizada com o EEPF foi desenvolvida por CCD em cromatoplacas de slica gel tendo sido detectada a presena de triterpenos, esterides, heterosdeos flavnicos, saponinas, polifenis, taninos, hete

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