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Estrutura geral e replicação.

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Cocos Bacilo Vibrião

Estrutura geral e replicação.

Espirilo Espiroqueta

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-> Sexuada (conjugação ou transdução)

-> Assexuada (fissão binária)

Estrutura geral e replicação.

f(x) = 2x

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Microbiota normal do corpo humano.

-> Conjunto de microrganismos colonizadores de um

órgão ou tecido. (bactérias, vírus, fungos...)

-> Colonização permanente ou residente.

-> Colonização transitória.

-> Processo patológico.

-> Patógeno estrito.

-> Patógeno oportunista.

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Microbiota normal do corpo humano.

-> Quando se forma?

-> Varia em qualidade e quantidade (idade, higiene,

estado emocional, alimentação, qualidade de vida,

etc.)

-> Importâncias benéficas.

-> Responsável por diversas doenças.

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Microbiota normal do corpo humano.

-> Importâncias benéficas:

- Produção de vitaminas K e do complexo B.

- Proteção contra infecções intestinais (infecções por

Salmonella; colite pseudomembranosa por Clostridium

difficile)

- Proteção da mucosa e da pele (infecções microbianas).

- Desenvolvimento do sistema imunológico.

-> Responsável por diversas infecções.

- Infecções endógenas.

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Microbiota normal do corpo humano.

(distribuição corporal)

-> PELE

- quantidade de m.o. transitórios.

- Streptococcus (nascimento).

- Corynebacterium xerosis.

- Propionibacterium acnes.

- Staphylococcus epidermidis. (90%)

- Staphylococcus aureus.

- Peptococcus niger, Peptostreptococcus,

Micrococcus.

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Microbiota normal do corpo humano.

(distribuição corporal)

-> VIAS AÉREAS SUPERIORES

- Streptococcus viridans (4 – 12h de vida).

- Nariz e Nasofaringe:

* Staphylococcus spp, Corynebacterium,

Streptococcus spp.

- Faringe e Traquéia:

* Streptococcus alfa-hemolíticos e não

hemolíticos, Neisseria, Bacilos difterióides,

Haemophilus.

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Microbiota normal do corpo humano.

(distribuição corporal)

-> VIAS AÉREAS INFERIORES

- Brônquios e alvéolos:

* Estéreis.

-> BOCA (numerosa: 108 bactérias/ml)

- Streptococcus viridans (4 – 12h de vida).

- Neisseria bacilliformis e gonorrhoeae, Bacterioides

fragilis, Veillonella parvula, Lactobacillus,

Fusobacterium nucleatum e necrophorum,

Actinomyces, Corynebacterium.

- Grande importância clínica.

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Microbiota normal do corpo humano.

(distribuição corporal)

-> CONJUNTIVA

- Normalmente estéril.

- Em alguns casos: Staphylococcus epidermidis,

Corynebacterium xerosis.

-> TRATO GASTROINTESTINAL

- Introduzidos pela alimentação.

- Lactentes amamentados: Streptococcus e

Lactobacillus.

- Esôfago: comensais provenientes da boca.

- Estômago: número reduzido pelo pH ácido.

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Microbiota normal do corpo humano.

(distribuição corporal)

- 1 aeróbia : 1.000 anaeróbias. (96 – 99%)

- Mais importantes agentes de infecções endógenas.

- Vitamina K2, conversão de pigmentos e ácidos

biliares, absorção de nutrientes.

- Duodeno: Staphylococcus, Streptococcus

Lactobacillus. (101 – 103 UFC/ml)

- Jejuno e íleo: Lactobacillus, Bacteroides,

Enterobacteriaceae, Bifidobacterium, Streptococcus,

Fusobacterium, Klebsiella, Citrobacter, Difterióides.

(104 – 108 UFC/ml)

- UFC/mL = unidade formadora de colônia/ mL.

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Microbiota normal do corpo humano.

(distribuição corporal)

- Cólons: Bacteroides fragilis, Clostridium perfringes,

Bifidobacterium, Pseudomona aeruginosa,

Streptococcus, Lactobacillus, Fusobacterium,

Enterobacteriaceae, Staphylococcus. (1010 – 1012

UFC/ml)

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Microbiota normal do corpo humano.

(distribuição corporal)

-> VAGINA

- Varia com a idade, pH e secreção hormonal.

- 1º mês (pH ácido): Lactobacillus de Döderlein.

- infância (pH neutro): Corynebacterium vaginale,

Staphylococcus epidermidis, Escherichia coli,

Peptococcus, Streptococcus agalactiae.

- puberdade – menopausa (pH ácido): Lactobacillus

de Döderlein.

- pós menopausa (pH neutro): Mesma flora que

coloniza na infância.

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Microbiota normal do corpo humano.

(distribuição corporal)

-> URETRA

- Enterococcus faecalis.

- Corynebacterium xerosis

- Staphylococcus epidermidis.

- Escherichia coli

- Staphylococcus coagulase negativos.

-> Ouvido médio e interno, seios nasais, vísceras,

aparelho cardiovascular, trato urinário superior,

sistema nervoso central, gônadas, aparelho

locomotor e glândulas são estéreis.

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Microbiota normal do corpo humano.

(Alguns dos patógenos estritos)

-> Listeria monocytogenes (Meningite)

-> Helicobacter pylori (Gastrite)

-> Mycobacterium tuberculosis (Tuberculose)

-> Tropheryma whipplei (Doença de Whipple)

-> Burkholderia pseudomallei (Melioidose)

-> Fusobacterium necrophorum (Síndrome de Lemierre)

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Patogenicidade e Virulência.

-> Patogenicidade: capacidade do m.o. de causar um

processo patológico diante de toda a defesa do

organismo.

-> Virulência: Nível que mede a intensidade da

patogenicidade.

- Pode aumentar (números de m.o. infectantes, rota

de entrada, mecanismos de entrada...).

- Pode diminuir (mecanismos de defesa).

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Métodos de Invasão e Escape.

-> Cápsulas

- Polímeros orgânicos.

- Aumento da virulência. (Streptococcus

pneumoniae, Klebsiella pneumoniae...)

-> Componentes da parede celular

- Proteína M de Streptococcus pyogenes, resistente

ao calor e ao ácido.

- Ácido micólico de Mycobacterium tuberculosis.

- Proteína Opa da membrana externa de de

Neisseria gonorrhoeae.

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-> Enzimas

-Coagulase (Staphylococcus aureus) -Quinase (Streptococcus) -Hialuronidase (Streptococcus) -Colagenase (Clostridium)

-> Variação antigênica

- Alteração na superfície celular.

- Neisseria gonorrhoeae (proteína Opa).

-> Penetração no citoesqueleto de células hospedeiras

- Invasinas (proteínas de superfície)

- Rearranjo estrutural do citoesqueleto.

Métodos de Invasão e Escape.

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-> Uso de nutrientes do hospedeiro.

- Sideróforos: proteínas de patógenos que induzem

o sequestro do ferro de transportadores naturais.

-> Lesão direta.

- Patógenos intracelulares.

-> Produção de toxinas

- Causadoras de vários distúrbios fisiológicos.

- Exotoxinas.

- Endotoxinas.

Métodos de Lesão celular.

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Métodos de coloração.

-> Introdução *Microscópio óptico muito utilizado, mas necessita coloração.

-> Preparo do esfregaço *Microorganismos podem ser cultivados

-Meio sólido

-Meio liquido

-> Fixação pelo calor

-> Coloração diferencial *Ziehl Neelsen

*Schaeffer-Fulton e de Wirtz

*Coloração de Gram

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-> Coloração de GRAM.

1 – Acender o bico de Bunsen.

2 – Preparar o esfregaço. Com o auxílio de um swab pegar a amostra biológica e

espalhar sobre a lâmina de vidro.

3 – Aguardar a secagem da lâmina em temperatura ambiente.

4 – Fixar o esfregaço passando a lâmina 3 a 5 vezes sobre a chama (passar

rapidamente sobre a chama).

5 – Colocar a lâmina no suporte de coloração.

6 – Cobrir o esfregaço com cristal violeta e aguardar 1 minuto.

7 – Após, lavar a lâmina em água corrente e cobrir o esfregaço com solução de

lugol durante 1 minuto.

8 – Lavar o esfregaço em água corrente.

9 – Descorar com álcool-acetona durante 3 a 5 segundos. Imediatamente, após 3

a 5 segundos, lavar o esfregaço em água corrente.

10 – Cobrir o esfregaço com safranina ou fucsina durante 30 segundos.

11 – Lavar o esfregaço em água corrente.

12 – Secar o esfregaço.

13 – Observar o material em microscópio no aumento de 1.000 vezes (objetiva de

100 vezes com óleo de imersão).

Métodos de coloração.

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-> Morfologia Bacteriana.

*Parede Celular

- Peptideoglicano.

*De acordo com a composição química da PC das bactérias elas são

classificadas em:

- GRAM +

- GRAM –

- Bactérias Álcool-Ácido Resistentes.

Métodos de coloração.

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GRAM +

Staphylococcus Streptococcus

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GRAM +

Staphylococcus

-São patógenos humanos e de outros mamíferos.

-São divididos em 2 grupos com base em sua habilidade de coagular

o plasma:

*Coagulase + : S. aureus(São os patógenos mais encontrados

em infecções humanas).

*Coagulase - : Foram descritas 30 espécies até hoje.

->Morfologia.

-Células esféricas que se dispõem em cachos irregulares, aos

pares, em tétrades.

-São imóveis.

-Não formam esporos.

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GRAM +

->Morfologia

-Cultura

*Crescimento rápido em condições aeróbicas ou microaerófilas.

Em meios sólidos, as colônias são redondas, lisas, elevadas e

brilhantes.

*As colônias de S. aureus são acinzentadas, amarelo dourado

intenso.

-Características de Crescimento

*Produtores de catalase (diferenciação com os estreptococos)

*Fermentam carboidratos produzindo ácido láctico, não gás.

*São relativamente resistentes ao ressecamento e ao calor.

*Apresentam sensibilidade variável a muitos agentes

antimicrobianos

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GRAM + ->Estruturas Antigênicas.

*Polissacarídeo capsular: função ainda não definida, pode estar

relacionada com resistência a fagocitose.

*Proteina-A: sugerem que essa proteína aumenta a virulência da

bactéria.

*Leucocidina: toxina que age especificamente sobre os leucócitos.

->Toxinas e Enzimas.

*Catalase - Conversão do peróxido de hidrogênio em água e oxigênio.

*Coagulase - Impede a cascata normal da coagulação do plasma,

Deposição de fibrina na superfície dos estafilococos.

*Hialuronidase ou fator de propagação.

*Proteinases, Lipases, B-lactamases.

*Exotoxinas.

*Leucocidina (pode destruir leucócitos).

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GRAM +

->Patogenia.

- Os estafilococos são membros da microbiota normal da pele,

via respiratórias e trato gastrointestinal. - Capacidade patogênica – varia desde a intoxicação alimentar a

bacteremia e abscessos em vários órgãos. ->Diagnóstico.

- Cultura semeados em placa de ágar-sangue a 37ºC.

- Teste da catalase H2O2 + cresc. Bacteriano formação de bolhas

(teste positivo).

- Teste da coagulase em plasma.

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GRAM +

-> Epidemiologia.

- Principais fontes: lesões humanas, fômites contaminados, vias

respiratórias e pele humana.

- Nos hospitais, as áreas de maior risco de infecções estafilocócicas

são berçários, U.T.I., centro cirúrgico e enfermarias de

imunossuprimidos.

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GRAM +

Streptococcus - Possui ampla significância na medicina humana. Entre as doenças

humanas atribuídas aos estreptococos estão a escarlatina, a febre reumática, a glomerulonefrite e a pneumonia pneumocócica.

-> Morfologia

- Cocos esféricos se dispõem em cadeias ou duplas (diplococos) - São GRAM +. - Apresentam polissacarideos capsular (a maioria das cepas A, B e

C).

- Parede celular composta de proteínas (Ag. M,T,R), carboidratos

(grupo específicos) e peptidoglicano.

- Fímbrias constituídos de proteína M e recobertos de ácido

lipoteicóico.

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GRAM +

-> Morfologia.

-Cultura.

*Crescimento com a utilização de açúcares. *Colônias discóides. -Característica de crescimento. *Crescimento deficiente em meios sólidos ou em caldo; *Necessita de sangue ou líquidos teciduais para

enriquecimento.

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GRAM +

-> Estrutura Antigênica.

- Antígeno de parede celular grupo-específico (A-U de Lancefield);

- Proteína M: S. pyogenes do grupo A;

-> Toxinas e Enzimas.

- Exotoxinas pirogênicas: A, B e C (provocam a erupção cutânea da escarlatina).

- Difosfopiridina – nucleotidase.

- Hemolisinas.

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GRAM +

->Classificação

-Hemólise

-Substância grupo-específico

-Polissacarídeos capsulares

-Reações bioquímicas

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GRAM +

->Classificação. - S.pyogenes: Beta hemolíticos de grupo A (erisipela, febre puerperal e

sepse). - S.agalactiae: Estreptococos do grupo B (são membros da microbiota

normal do trato genital feminino; importante causa de sepse e meningite neonatal).

- Grupos C e G (podem causar sinusite, bacteremia ou Endocardite).

- Enterococcus faecalis e E. faecium: compõem o grupo D.

- S. viridans: (membros mais prevalentes da microbiota das vias aéreas superiores).

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GRAM +

->Diagnóstico.

-Amostras: dependente da natureza da infecção estreptocócica.

-Cultura.

-Testes para detecção de antígenos.

-Provas sorológicas: ASO, anti-Dnase, anti- hialuronidase, anti-estreptoquinase.

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GRAM +

-> Epidemiologia, Prevenção e Controle.

- Erradicação de estreptococos do grupo A dos portadores;

- Controle da poeira, ventilação, filtração do ar e aerossóis;

- Profilaxia medicamentosa na mãe com culturas positivas em caso

de parto prematuro ou ruptura prolongada das membranas.

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GRAM -

-> Morfologia.

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GRAM -

-> Bacilos Gram – não fermentadores.

- São aeróbios, não esporulados.

- Não utilizam carboidratos como fonte de energia ou os degradam através de vias que não a fermentação.

- Podem crescer ou não em ágar.

- Dentre as mais importantes temos Pseudomonas e o Acynetobacter.

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GRAM -

Pseudomona Aeruginosa

- Bastonetes gram-negativos, móveis.

- Apresentam-se como bactérias isoladas,

em pares ou em cadeias curtas.

- Aeróbios obrigatórios.

- Forma colônias redondas e lisas de

coloração esverdeadas e fluorescentes.

- Catalase positiva.

- Não fermenta carboidratos.

- Ambiente terrestre, água doce, ambiente marinho, plantas e animais.

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GRAM -

-> Estrutura antigênica e toxinas.

- Pili (fímbrias)

- Lipopolissacarídeo: responsável por muitas das propriedades endotóxicas

(febre, choque, oligúria, leucocitose e leucopenia)

- Cápsula Polissacarídica (glicocálice), ancora as bactérias às células

epiteliais, protége da fagocitose e da atividade de antibióticos como os

aminoglicosídeos.

- Enzimas extracelulares: elastases, proteases, hemolisinas (fosfolipase C

Termolábil e um glicolipídio termoestável)

- Exotoxina A: provoca necrose dos tecidos e tem ação idêntica ao da toxina

diftérica (bloqueia a síntese de proteína)

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GRAM -

-> Patogenia

- Bacteria oportunista*

- Resistente a varios antibióticos

-> Epidemiologia e controle

- Patógeno hospitalar

- Crescem em ambientes úmidos

- A vacina em pacientes de risco protegem contra a sepse por

Pseudomonas.

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GRAM -

-> Diagnóstico

- Amostras: dependente do local da infecção Esfregaços: bastonetes

gram-negativos. Não existe nenhuma característica morfológica capaz de

diferenciá-la das enterobactérias.

- Cultura: cresce facilmente nos meios utilizados para o crescimento de

enterobactérias, porém não fermenta a lactose.

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GRAM -

Acinetobacter

- Gram – aeróbias

- Distribuição ampla na água e

no solo.

- Em geral, apresentam-se na forma

de cocobacilos ou cocos

(semelhante a Neisseria) e bastonetes.

- São freqüentemente comensais, porém podem provocar infecção

hospitalar.

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GRAM -

Acinetobacter

- O A .baumannii é a espécie mais importante na clínica.

- Infecção associada a dispositivos (cateteres intravenosos, tubo

orotraqueal...)

- As cepas de Acinetobacter são freqüentemente resistentes a agentes

microbianos.

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Conceitos Gerais.

-> Incapazes de crescerem na presença de O2

-> Realizam respiração anaeróbia ou fermentação.

- Fermentação alcoólica ou lática.

-> O2 é bactericida para algumas e bacteriostáticos

para outras

-> Oxigênio possui um mecanismo tóxico em diversas

formas

- H2O2, ânion superóxido, OH, NO, ânion

peroxinitrito (...)

-> A maioria não é consideradas patogênicas.

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Anaeróbias Esporuladas.

(Clostridium)

-> Bacilos Gram +, anaeróbios estritos,

desencapsulados (com excessão da espécie

perfringes).

-> Classificados de acordo com a sua toxicidade.

- Neurotóxicos.

* (espécies: tetani, botulinum).

- Histotóxicos em lesões prévias.

* (espécies: perfringes, histolyticum).

- Enterotóxicos.

* (espécies: difficile, perfringes).

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Anaeróbias Esporuladas.

(Clostridium)

-> Clostridium tetani

- ‘Baqueta de tambor’.

- Causador do tétano.

*Paralisia espástica.

- Neurotóxicos (3 toxinas).

-> Clostridium botulinum

- Bacilos em forma de cotonete.

- Botulismo e Botox.

*Paralisia flácida.

- Neurotóxicos.

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Anaeróbias Esporuladas.

(Clostridium)

-> Clostridium perfringes

- Formato de bastão simples.

- Histotóxicos.

*Gangrena gasosa.

- Enterotóxicos.

* Carne contaminada.

* Tipo A – Diarréia leve.

* Tipo C – Enterite necrotizante.

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Anaeróbias Não Esporuladas.

-> Bacilos G+

- Lactobacillus, Propionibacterium, Bifidubacterium.

-> Bacilos G-

- Bacterioides (oportunista), Fusobacterium

(nucleatum é oportunista no aparelho respiratório e

genital feminino)

-> Cocos G+

- Peptococcus, Peptostreptococcus.

-> Cocos G-

- Veillonella spp.