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UNIVERSIDADE DE CRUZ ALTA UNIVERSIDADE REGIONAL DO NOROESTE DO

ESTADO DO RIO GRANDE DO SUL

PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO STRICTO SENSU EM ATENÇÃO INTEGRAL À SAÚDE

Efeitos do ácido gálico e ácido clorogênico, isolados ou em associação, no perfil lipídico, endotelial e

oxidativo de ratos Wistar tratados com dieta hipercolesterolêmica.

DISSERTAÇÃO DE MESTRADO

Fernando Garcez Porto

Cruz Alta-RS, Brasil

2016

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Efeitos do ácido gálico e ácido clorogênico, isolados ou em associação, no perfil lipídico, endotelial e

oxidativo de ratos Wistar tratados com dieta hipercolesterolêmica.

Por

Fernando Garcez Porto

Dissertação apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Atenção Integral à Saúde, da Universidade de Cruz Alta (UNICRUZ, RS), em associação ampla à Universidade Regional do Noroeste do Estado do Rio Grande do Sul (UNIJUI, RS), como requisito parcial para obtenção do grau de Mestre em Atenção Integral a Saúde.

Orientador: Prof. Dr. Jonatas Zeni Klafke.

Co-orientador: Prof. Dr. Paulo Ricardo Nazário Viecili.

Cruz Alta-RS, Brasil

2016

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P853e Porto, Fernando Garcez Efeitos do ácido gálico e ácido clorogênico, isolados ou em

associação, no perfil lipídico, endotelial e oxidativo de ratos Wistar tratados com dieta hipercolesterolêmica / Fernando Garcez Porto. – 2016.

50 f.

Dissertação (mestrado) – Universidade de Cruz Alta - UNICRUZ/RS.

Universidade Regional do Noroeste do Estado do Rio Grande do Sul -

UNIJUI/RS, Programa de pós-graduação stricto sensu em atenção integral

à saúde.

Mestrado em atenção integral à saúde.

Orientador: Prof. Dr. Jonatas Zeni Klafke. Coorientador: Prof. Dr. Paulo Ricardo Nazário Viecili.

1. Arteriosclerose. I. Klafke, Jonatas Zeni. II. Viecili, Paulo Ricardo

Nazário. III. Título.

CDU 616.13-004.6

Catalogação na fonte: Bibliotecária Eliane C. Reck da Rosa CRB-10/2404.

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Dedico este trabalho a todos que de alguma forma contribuíram e me deram forças para chegar até aqui, em especial aos meus pais Pedro e Viviane e a minha

companheira Brenda da Silva por sempre me darem todo apoio que precisei.

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Agradecimentos

Agradeço ao meu Orientador Dr. Jonatas Zeni Klafke, primeiramente pela paciência, pelas muitas tardes de reuniões produtivas, por todos os ensinamentos e experiência transmitida, que com toda certeza levarei comigo a onde for. Agradeço ao meu Coorientador Dr. Paulo Ricardo Nazário Viecili, por todas as oportunidades a mim oferecidas, fazendo com que me aprimorasse a cada nova tarefa, amadurecendo assim meu lado pesquisador. Agradeço aos meus pais Pedro e Viviane que me apoiaram durante toda a minha vida, assim como presenciaram cada passo na construção da minha carreira acadêmica, investindo e acreditando no meu potencial. Obrigado pai e mãe, vocês são a minha base. Amo vocês. Agradeço a minha companheira Brenda, que sempre me ajudou a “segurar a barra”, quando a situação não estava fácil, noites e mais noites na frente do computador estressado com prazos, e ela sempre ali presente acolhendo e dividindo comigo as preocupações do dia a dia, assim como comemorando cada uma das conquistas. Amo você. Agradeço a todos que de alguma forma contribuíram para a construção desse trabalho, em especial aos grupos de pesquisa do qual faço parte Grupo Multidisciplinar de Saúde (GMS) e Grupo Interdisciplinar de Saúde (GIS). Agradeço a Prof. Dr. Patrícia Wolkmer por sua contribuição neste trabalho, assim como pela atenção e paciência em passar seus conhecimentos que foram de grande importância. Agradeço ao bioterista Henrique Beutler, por todo o auxílio para manutenção dos experimentos envolvendo animais e suas demais contribuições no estudo. Agradeço a todos os Discentes e Docentes do Programa de Pós-Graduação em Atenção Integral a Saúde. Agradeço aos Professores que compõe a banca deste trabalho, por todas as contribuições significativas que com certeza farão. E por último, mas não menos importante, agradeço a cada pessoa que de alguma forma contribuiu para que eu chegasse até aqui, agradeço a minha família, amigos e colegas.

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LISTA DE ABREVIATURAS LDL: Lipoproteína de baixa densidade.

HDL: Lipoproteína de alta densidade.

CT: Colesterol Total

ON: Óxido Nítrico

AG: Ácido gálico

AC: Ácido clorogênico

AFs: Ácidos fenólicos

HDL: Lipoproteína de alta densidade.

HMG-CoAr: 3-hidroxi-3-metil glutaril CoA redutase.

VLDL: Lipoproteína de muito baixa densidade.

IDL: Lipoproteína de densidade intermediária.

CLAE: Cromatografia Líquida de Alta Eficiência.

CEUA/UNICRUZ: Comitê de Ética no Uso de Animais da Universidade de Cruz Alta.

CTA: Capacidade total antioxidante.

LCAT: Lecitina-colesterol aciltransferase.

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LISTA DE FIGURAS Dissertação Figura 1 - Mecanismos de transferência de ésteres de colesterol..........................pg.13 Figura 2 - Estrutura química dos ácidos fenólicos presentes em C. xanthocarpa, ácido gálico e ácido clorogênico.......................................................................................pg.17 Manuscrito Figura 1- (A) Níveis de CT, (B) níveis de HDL e (C) níveis de CTA nos diferentes grupos experimentais após cinco dias de tratamento com AFs e veículo...............pg.27 LISTA DE TABELAS Manuscrito Tabela I - Níveis de LDL e triglicerídeos nos diferentes grupos experimentais após cinco dias de tratamento com AFs......................................................................... pg.27

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SUMÁRIO LISTA DE ABREVIATURAS ............................................................................................

LISTA DE FIGURAS.........................................................................................................

LISTA DE TABELAS.........................................................................................................

1. INTRODUÇÃO ...........................................................................................................9

2. REVISÃO BIBLIOGRÁFICA ....................................................................................10

2.1 Biomarcadores lipídicos, oxidativo e endotelial da aterosclerose.........................10

2.2 Metabolismo das lipoproteínas plasmáticas...........................................................12

2.3 Terapia medicamentosa convencional para hipercolesterolemia...........................13

2.4 Medicina alternativa e complementar para dislipidemias.......................................15

2.5 Uso de Ácidos fenólicos como estratégia alternativa para dislipidemias...............16

3. OBJETIVOS..............................................................................................................18

3.1 Objetivo Geral.........................................................................................................18

3.2 Objetivos Específicos.............................................................................................18

4. MANUSCRITO..........................................................................................................19

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1. INTRODUÇÃO

Os ácidos fenólicos possuem um vasto potencial terapêutico, sendo muitas

vezes considerados como princípio ativo de plantas medicinais. Dentre estes

compostos, o ácido gálico e o ácido clorogênico vêm sendo amplamente estudados

de maneira isolada ou em extratos de plantas, sendo capazes promover melhora do

perfil lipídico com mecanismo semelhante às estatinas, por inibirem a 3-hidroxi-3-

metil-glutaril CoA redutase (HMGCoAr), enzima passo limitante na síntese do

colesterol endógeno (1, 2).

O ácido gálico, por exemplo, está presente em uma gama de compostos

naturais, os quais possuem efeito de redução de colesterol associado à elevação

dos níveis de lipoproteína de alta densidade (HDL) (3, 4). Além disso, possui efeito

antioxidante inibindo a peroxidação lipídica e é capaz de inibir a agregação

plaquetária in vitro (5, 6). O ácido clorogênico, por sua vez, possui efeito

antidiabético, reduzindo a glicemia, atua ainda reduzindo a liberação de P-selectinas

e interleucina 1β o que confere seu caráter anti-inflamatório (7, 8).

Isoladamente, tanto AG quanto AC são potentes antioxidantes envolvidos na

absorção e neutralização de radicais livres, além de atuarem como anti-inflamatórios

anti-hipertensivos e reduzirem os níveis de óxido nítrico (ON) in vitro (9-12). Ainda

são capazes de melhorar o perfil lipídico reduzindo o colesterol total (CT),

triglicerídeos e elevando os níveis de HDL (13, 14). Todavia, são escassos os