Efeito do estrogênio na Biogênese Mitocondrial

Mariana Nigro e Isabel Caetano

Estrogênio

Hormônio sexual (diversos efeitos) anorexigênico hipotálamo diminui a ingestão de comida

Regulação do gasto energético ? ? ? ? ? ? ? ?

MENOPAUSAGanho de peso e aumento da adiposidade

Resistência à insulina

Diabetes tipo 2

Doenças cardiovasculares

Aumento da expectativa de vida: mulheres passam aproximadamente 1/3 da vida na menopausa

Modelo animal: ovariectomia

Eficiência Alimentar

Rogers et al., 2009

Rogers et al., 2009

Gasto Energético

Ovariectomia-Inflamação no tecido adiposo

Rogers et al., 2009

Obesidade- Inflamação no tecido adiposo

Tilg e Moschen, 2006.

eNOS reduzida em modelos de obesidade

Tecido adiposo Branco

Perfil semelhante em BAT e músculo esquelético

Valerio et al, 2006.

↓eNOS→ ↓ biogênese mitocondrial

Valerio et al, 2006.

TNF-α→↓eNOS→ ↓ biogênese mitocondrial

Valerio et al, 2006.

Resumo

Ovariectomizado→↑eficiência alimentar →↑tecido adiposo branco →↑ TNF-α tecido adiposo branco

Modelos de obesidade →↑ TNF-α tecido adiposo branco e músculo → TNF-α ↓ expressão de eNOS no tecido adiposo branco, BAT e músculo→ ↓ fatores de transcrição para a biogênese mitocondrial → ↓ mitocôndrias

OBJETIVO GERAL

3 grupos: sham; ovariectomizado+ veículo; ovariectomizado tratado com 17-estradiol

Tratamento (subcutânea-0,7µg/100g p.c.): 15 ou 21 dias

Tecidos estudados: músculo esquelético, tecido adiposo marrom, tecido adiposo branco.

Investigar mecanismos pelos quais o estrogênio aumenta o gasto energético

Modelo animal

METODOLOGIA

Análise dos níveis de RNAm no tecido adiposo branco, marrom e músculo esquelético das seguintes moléculas por RT-PCR

-TNF- e HMGB1 (citocinas pró-inflamatórias);

- eNOS – NO eleva a biossíntese mitocondrial (Nisoli et. al, 2003)

- PGC1- , NRF-1

PGC1- + PPAR-γ adipogênese e mitocôndrias + NRF-1 genes codificantes para ptns mitocondriais

- COX IV e citocromo c

METODOLOGIA

Western blot de TNF-, HMGB1, eNOS, PGC1- , NRF-1, COX IV e citocromo c para corroborar os resultados do RNA mensageiro nos extratos de tecido adiposo branco e marrom e músculo esquelético

Microscopia eletrônica do tecido adiposo e músculo esquelético para avaliação do número e tamanho das mitocôndrias

Parâmetros respiratórios em mitocôndrias isoladas