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OBSERVAO DE CLULAS HUMANAS EM ESFREGAO DE MUCOSA BUCAL

Azul de

Metilen

o

GUA

gua

Com um palito de fsforo raspar, levemente, a parte interna da bochecha.

Fazer um esfregao espalhando sobre uma lmina de vidro o material raspado da bochecha.

Fixar o material mergulhando a lmina com o esfregao em lcool 70%. Aguardar 2 minutos.

Retirar a lmina do alcool e escorrer o excesso de lquido em um pedao de papel ltro.

Colocar a lmina sobre a bancada e pingar, sobre a regio do esfregao, uma gota de azul de metileno. Aguardar 2 minutos.

Com o auxlio de uma pisseta, remover o excesso de azul de metileno, jogando sobre a lmina um jato de gua.

Com o auxlio do frasco conta-gotas pingar uma gota de gua sobre a regio do esfregao. Cobrir a preparao com uma lamnula.

Retirar as bolhas de ar pressionando levemente a lamnula com a pina.

Colocar a preparao dentro de um pedao de papel ltro dobrado. Pressionar levemente para retirar o excesso de lquido.

Aguardar 2 minutos

Aguardar 2 minutos

Observar ao microscpio o material, usando a objetiva de 10x e em seguida a de 40x. Girar vagarosamente o micromtrico para obter o melhor foco. Fazer um desenho das clulas observadas.

Organizao: Eliana Maria Beluzzo Dessen e Jorge Oyakawa Diagramao: Regina de Siqueira Bueno

Etapas prEparatrias:

Material suficiente para uma classe com 8 grupos de 5 estudantes.

8 frascos com lminas de vidro para microscopia 8 frascos para o descarte das lminas de vidro usadas 8 placas de Petri com lamnulas 8 placas de Petri com palitos de fsforo 8 recipientes para descarte dos palitos usados8 pinas de ponta fina 8 rolos de papel higinico fino e macio8 frascos conta-gotas com azul de metileno 0,5%*8 frascos conta-gotas com gua8 pissetas com gua 8 recipientes com lcool 70% (tamanho suficiente para a lmina mergulhada em p)8 pacotes de papel de filtro cortado em tiras de aproximadamente 7 cm x 25 cm.8 pedaos de papel ( 60 x 40 cm) para cobrir a bancada8 microscpios8 conjuntos de protocolos para os grupos de alunos.8 lpis e folhas de papel para desenho

*O azul de metileno um composto aromtico heterocclico solvel em gua, com a frmula molecular C16H18CIN3S. Usado como corante e indicador, um remdio de cor azul, vendido em farmcias comuns.

Observao: Qualquer tipo de frasco pode ser utilizado para conter as lminas e lamnulas, como copinhos de iogurte, vidros de gelia, etc. Existem frascos apropriados, padronizados e baratos a venda em lojas especializadas de materiais para cosmticos e para laboratrio (Praa da S)

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antes da aula:

Familiarizar os alunos com o uso do microscpio. Para tanto poder recorrer aula sobre microscopia, disponvel nesta pgina.

Providenciar a soluo de azul de metileno 0,5%*.

se voc professor e deseja aplicar esse protocolo em sala de aula siga as seguintes etapas preparatrias:

aNEXO 1

sugestes de atividades correlatas

Existem outros experimentos sobre observao de clulas humanas que podem ser encontrados 1.em: Temas de Biologia. Ed. Moderna. http://www.moderna.com.br/moderna/didaticos/em/biologia/temasbio/Observar um esquema de clula animal (em um livro didtico ou em outra fonte) e solicitar aos 2.alunos que localizem, no esquema, as estruturas visualizadas na preparao. Solicitar uma explicao para o fato de no terem visualizado as demais estruturas da clula eucaritica.Aplicar, em sala de aula, o jogo Cara a cara com a clula, disponvel em: 3. http://www.genoma.ib.usp.br/educacao/materiais_didaticos.phpSolicitar aos alunos uma comparao das estruturas internas de uma clula animal (eucaritica) 4.com as de uma bactria (procaritica). Pedir uma lista das estruturas comuns e no comuns aos dois tipos de clulas.

Utilizar esta aula de laboratrio para iniciar o estudo das funes das diferentes estruturas celulares. Aps este estudo, voltar ao jogo Cara a Cara com as clulas e solicitar que as perguntas sejam feitas apenas com relao s funes das estruturas celulares. Trata-se de um exerccio de motivao e de avaliao do aprendizado sobre o tema clula.

sugesto de questes para serem respondidas por grupos de estudantes aps a visualizao do esfregao de bochecha.

Ao raspar a parte interna da bochecha, que tipo de tecido foi coletado? 1.

Sugerir uma explicao para o tratamento do esfregao com lcool 70%.2.

Se possvel, faa uma nova preparao 3. sem colocar o azul de metileno, observe ao microscpio e compare o resultado com o do material corado. Este procedimento poder ajudar a responder pergunta: - Qual a funo do azul de metileno?

Que estruturas voc pode observar nas clulas da bochecha?4.

Por que as clulas da bochecha aparecem isoladas umas das outras e no unidas como em 5.outros tecidos?

Voc observou alguns pontos mais escuros na superfcie das clulas? provvel que 6.sejam algumas bactrias que existem normalmente na nossa boca e que ficam aderidas na mucosa. O tamanho destes microrganismos em torno de 1 m de dimetro de forma que, para observ-las temos que usar a objetiva de 100x (objetiva de imerso) usando o leo de imerso. Se no conhece esta prtica, pea ajuda ao professor.

respostas para as questes:

O epitlio de revestimento, ou seja, o tecido epitelial. 1.O lcool 70% um fixador de materiais biolgicos, isto , ele preserva os componentes estruturais 2.dos tecidos, preparando o material para a colorao.

O azul de metileno, sendo um corante bsico, auxilia na visualizao das clulas corando o 3.citoplasma em azul claro e o ncleo em azul escuro.

Apenas o citoplasma e o ncleo. No podemos observar nitidamente, mas sabemos que a 4.membrana citoplasmtica que est delimitando o citoplasma.

As clulas da bochecha aparecem isoladas, pois o processo de raspagem com o palito rompeu a 5.associao que existe entre elas.

Sim pontos mais escuros podem ser observados sobre o citoplasma e o ncleo das clulas e 6.tambm claro em regies da preparao que no apresentam clulas eucariticas. Ao utilizar o aumento de 1000x (objetiva de 100x e ocular de 10x), observa-se que algumas apresentam a forma esfrica (cocos), outras cilndricas (bacilos) e outras filamentosas que so as formas mais comuns das bactrias.

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