IMUNO-HEMATOLOGIA
Doutoranda Débora Faria Silva
Prof. Drª Simone Aparecida Rezende
Maio/ 2016
UNIVERSIDADE FEDERAL DE OURO PRETO
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS
(CIPHARMA)
Produtos originados do sangue total
Hemocomponentes: gerados nos serviços de hemoterapia
Hemoderivados: gerados em escala industrial
Aférese
Transfusão de sangue de carneiro e “braço a braço”
• James Blundell (1818): 1a transfusão com sucesso
• Karl Landesteiner (1901): classificação das hemácias em quatro tipos:
A, B, AB e O
Atualmente....
•328 Ag eritrocitários descritos, 33 sistemas de grupos sanguíneos
• Ag eritrocitários são constituídos por açúcares ou proteínas; grande parte deles foi identificada pelo uso de anticorpos (ex: Ac anti-A)
Sistemas de grupos
sanguíneos e Ag mais
importantes
CLASSIFICAÇÃO DAS HEMO-AGLUTININAS (Ac contra Ag de grupos sanguíneos)
1 - de acordo com o estímulo
•Ac naturais (maioria são IgM): detectadosnaturalmente a partir de 3-6 meses de idade;resultam de estímulos “inaparentes”.
•Ac imunes (maioria são IgG): resultam deestímulos transfusionais ou gestacionais -Doença hemolítica do recém nascido oueritroblastose fetal.
2- de acordo com a origem do Ag que é reconhecido
•Aloanticorpos: reagem com um Ag estranho, não presentenas hemácias do indivíduo.• ex.: Ac anti-A e anti-B em indivíduos do grupo O
•Autoanticorpos: anticorpos do soro de indivíduos quereagem com seus próprios antígenos.• ex.: auto anticorpos contra Ag I das hemácias,
associados com anemia hemolítica autoimune
3- de acordo com a temperatura de reação
•Anticorpos frios (maioria são IgM)
- Reagem melhor em temperaturas baixas, cerca de 4°C.• ex.: anti-A, anti-B, anti-A,B; anti-M.
•Anticorpos quentes (maioria são IgG)
- Reagem melhor em temperaturas próximas a 37°C.• ex.: anti-D; anti-K; anti-C; anti-E; anti-Fya; anti-jka
4- de acordo com o comportamento em testes imunohematológicos
• Ac completos (aglutinantes): promovem aglutinação dehemácias em meio salino à temperatura ambiente.
• Ex: anticorpos IgM
• Ac incompletos (não aglutinantes): reagem com oantígeno, porém não provocam aglutinação das hemáciasem meio salino.
É necessário usar um substâncias potencializadoras ou
soro de Coombs (anti anticorpo) para sua detecção.
• Ex: anticorpos IgG
Potencial zeta
• Em solução salina, as hemácias apresentam carga negativa oque faz com que haja repulsão entre elas;
• O potencial zeta impede aglutinação espontânea das hemácias.
Fenômeno de hemo-aglutinação
Substâncias potencializadoras
Ligação de AcAlbumina
LISS
Sistemas de grupo sanguíneoH & ABO
Determinantes antigênicos (epitopos) são carboidratos
Expressão dos Ag H, A e B no tecido hematopoiético
SUBGRUPOS DE A
A1 (80% dos pacientes): 1 x 106 sítios antigênicos (quantidade de Ag na
superfície das hemácias)
A2 (19% dos pacientes): 2,5 x 105 sítios antigênicos
• E diferença qualitativa: indivíduos A2 podem apresentar Ac anti A1
Outros subgrupos de A (1% dos pacientes): A3, Ax e Am
N-acetilgalactosamina
Antígeno A2Antígeno A1
Pacientes do grupo A podem apresentar Ac anti A!!!
Especificidade Grupo Incidência
Ac anti A1 A2 1-8%
Ax A maioria
A2B 22-35%
Esses Ac provocam aglutinação de hemácias A1 na prova reversa
Raramente implicados em reações transfusionais e rejeição de órgãos sólidos
Os Ag do sistema ABO estão presentes em outros locais além das hemácias
• forma solúvel: secreções e outros fluidos (saliva, lágrimas, leite elíquido amniótico);
• membrana de tecidos epiteliais e órgãos como medula óssea erins;
• Os Ag do sistema ABO devem ser considerados quando se faz umtransplante de órgão.
FENÓTIPO BOMBAY OU BOMBAIN
tem 1 doador BOMBAY dentre 1 milhão de doadores!!!
SISTEMA Rh (Rhesus)
•Composto por mais de 45 Ag
•Ag mais imunogênicos do sistema Rh: D, C, E, c, e
•Rh+: presença do Ag D
•Ag D: mais de 30 epítopos (9 mais imunogênicos)
VARIAÇÕES DO ANTÍGENO D
• D fraco (99%): alteração quantitativa do Ag D (menos sítiosantigênicos).
• D parcial ou incompleto (1%): alteração qualitativa do Ag D,falta um ou mais epítopos de D.
• D parcial fraco: ambas alterações.
No laboratório, todos esses pacientes são classificados comoD fraco (não tem como distinguir pelo teste que é usado).
Variações do Ag D
Rh D variante= D fraco
Rh nulo
• ausência de Ags do sistema Rh (D, C, c, E, e) instabilidade
da membrana da hemácia anemia hemolítica
Agulha no palheiro
Doença hemolítica do recém-nascido (DHRN) ou eritroblastose fetal
Doença hemolítica do recém-nascido (DHRN) ou eritroblastose fetal
• Reação do sistema imune maternocontra Ag presentes nas hemáciasfetais e ausentes nas hemáciasmaternas.
• 98% dos casos: incompatibilidade no sistema Rh;
• outras causas: incompatibilidade nos sistema ABO, Lewis, e outros.
• incompatibilidade por ABO: deforma geral não é grave.
• Efeitos sobre o feto: anemia, bilirrubinemia, hidropsia fetal, insuficiênciacardíaca, kernicterus e morte
• Tratamento:• ex-sanguíneo-transfusão
• Fototerapia (para eliminação da bilirrubina)
Hidropsia: Edema
generalizado do feto
Doença hemolítica do recém-nascido (DHRN) ou eritroblastose fetal
Quando ocorre a imunização materna? transfusão incompatível, gestantes: aborto, procedimentos invasivos
(amniocentese), nascimento.
Maior transferência de células fetais: 3ºtrimestre de gestação e parto.
Doença hemolítica do recém-nascido (DHRN) ou eritroblastose fetal
Durante a gravidez:• determinação no soro materno do título de IgG contra Ag
presentes nas hemácias fetais (Coombs indireto)• Amniocentese: determinar concentração de pigmentos biliares
(derivados da lise das hemácias)
• se necessário fazer transfusão de hemácias O negativoApós o nascimento:
• determinar grupo sanguíneo do recém-nascido• Teste de Coombs direto do sangue do cordão umbilical
Doença hemolítica do recém-nascido (DHRN) ou eritroblastose fetal
Prevenção da DHRN
• Imunoglobulina anti D: doses intramuscularesde IgG anti-D induzem imunização materna
•Deve ser feito com 28-30 semanas degestação e até 72 h após o parto.
TESTES LABORATORIAIS NA IMUNO-HEMATOLOGIA
• 1- Gel centrifugação (cartão)• mais sensível, custo elevado
• necessidade de centrífuga especial
2- Microplaca
• Rapidez, custo mais baixo, necessidade de centrífuga demicroplaca;
• Ideal para serviços de hemoterapia (banco de sangue)
3 – Método convencional (em tubo)
•Determinação de grupo sanguíneo do sistema ABO
Causas de discrepância na classificação ABO
1- relacionadas a Ac (interferem na prova reversa):• ausência ou baixa atividade da aglutinina esperada
(pacientes idosos)• interferência dos Ac maternos presentes no sangue de
recém nascidos
• presença de auto anticorpos (Ac anti I)
2- relacionadas a Ag (interferem na prova direta):• baixa expressão de Ag do sistema ABO nas hemácias de
recém-nascidos (usar métodos mais sensíveis)
Teste da Antiglobulina direto – TAD (Coombs Direto)
• Pesquisa Ac e/ou complemento ligado in vivo nas hemácias do paciente• Anemia hemolítica autoimune, doença hemolítica perinatal
Pesquisa de Anticorpos Irregulares – PAI (Coombs Indireto)
• Pesquisa Ac livre no soro do paciente.• Pesquisa de Ac anti-D materno e de Ac irregulares antes da transfusão
Usa hemácias teste do grupo O / Triacel®: suspensão de hemácias do grupo O fenotipadaspara Ag dos sistemas Rh, Kell, Duffy, Kidd, Lewis, MNS, P e Lutheran.
Testes Pré Transfusionais
Recomendações para transfusão:
◦ Doador e receptor com mesmo grupo ABO (isogrupo)sempre que possível.
◦ Excepcionalmente, respeitar a regra transfusional:
Avaliação imuno-hematológica pré transfusão de hemácias
PROVA CRUZADA MAIOR (para transfusão deconcentrado de hemácias):
• soro/plasma do receptor + hemácias do possível doador + 4 condições.
• Se der reação, será necessário identificar o Ac irregular e selecionarhemácias compatíveis com o paciente.
PROVA CRUZADA MENOR (para transfusão deplasma):
• hemácias do receptor + soro/plasma do possível doador (4 condições).
Onde estudar
Obrigada!
UNIVERSIDADE FEDERAL DE OURO PRETO
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS
(CIPHARMA)