EXTRACÇÃO DE DNA
PROBLEMA:
Como isolar a molécula de DNA?
EXTRACÇÃO DE DNA
MATERIAL:
Gobelés
Funil
Papel de filtro
Água
Sal
Etanol (96%)
Vareta de vidro
Kiwi
Varinha mágica
Um copo alto
Detergente de louça
um bisturi
EXTRACÇÃO DE DNA
PROCEDIMENTO:
1 - Preparar a solução de extracção: detergente 8%; sal de cozinha 3%.
2 - Descascar e cortar o kiwi em pedaços.
3 - Triturar o Kiwi com a solução de extracção. (3 segundos, 3 vezes)
4 - Filtrar utilizando um filtro de café.
5 - Com cuidado, adicionar etanol frio, tendo o cuidado de não misturar o etanol com o filtrado.
EXTRACÇÃO DE DNA
RESULTADOS:
Formação de duas fases distintas.
O DNA precipita formando filamentos visíveis.
EXTRACÇÃO DE DNA
EXTRAÇÃO de DNA de CÉLULAS DO EPITÉLIO BUCAL
PROCEDIMENTO:
Preparar uma solução salina muito concentrada.
Colocar uma porção dessa solução salina na boca e bochechar vigorosamente durante 2 minutos.
Colocar o obtido num gobelé e filtrar em seguida.
Marcar duas linhas num tubo de ensaio, uma ao meio do tubo e outra perto do bordo.
Transferir o filtrado para um tubo de ensaio até à primeira linha. Adicionar, cuidadosamente, etanol até à segunda linha.
Observar com atenção e registar.
EXTRACÇÃO DE DNA
EXTRAÇÃO de DNA de CÉLULAS DO EPITÉLIO BUCAL
EXTRACÇÃO DE DNACONCEPTUALIZAÇÃO METODOLOGIA
PROBLEMA
Isolar ao molécula de
DNA
TEORIA:
Teoria celular – organização celular e função dos organitos
CONCEITOS:
Membrana plasmática
Citoplasma
Ribossomas
Aparelho de Golgi
Retículo Endoplasmático liso
Retículo Endoplasmático rugoso
Mitocôndria
Cloroplasto
Núcleo
Membrana Nuclear
Lisossomas …
ACTIVIDADE LABORATORIAL
Extracção de DNA das células de
kiwi /Clélulas do epitélio bucal
RESULTADOS:
Formação de duas fases distintas.
O DNA precipita formando filamentos visíveis.
CONCLUSÃO
O DNA existe quer em células animais quer em células vegetais
Tópicos para discussão
1. Quais são as estruturas celulares e qual a sua composição?
EXTRACÇÃO DE DNA
As membranas, celular e nuclear são compostas principalmente por lípidos. As proteínas encontram-se aprisionadas na bicamada lipídica.
Os organitos celulares são compostos por proteínas, ácidos nucleicos ( DNA e RNA ), envolvidos por uma membrana.
EXTRACÇÃO DE DNA
EXTRACÇÃO DE DNA
2. Qual a função do sal?
EXTRACÇÃO DE DNA
O sal proporciona um ambiente favorável
para o processo
de extração pois contribui com íons positivos
(NA+) que neutralizam a carga negativa do
DNA.
EXTRACÇÃO DE DNA
3. Porque utilizamos um liquidificador?
O liquidificador ajuda a quebrar mecanicamente as membranas da célula
EXTRACÇÃO DE DNA
EXTRACÇÃO DE DNA
4. Porque utilizamos um liquidificador?
EXTRACÇÃO DE DNA
O liquidificador ajuda a quebrar mecanicamente as membranas da célula
EXTRACÇÃO DE DNA
5. O que acontece quando se adiciona o detergente?
EXTRACÇÃO DE DNA
As enzimas presentes no detergente desestruturam as moléculas de lipídios presentes nas membranas celulares
EXTRACÇÃO DE DNA
6. Qual o papel do álcool?
EXTRACÇÃO DE DNA
O DNA é insolúvel em álcool e deste modo se separa da solução.
O DNA é menos denso que a água e os restantes elementos celulares, por isso surge à superfície da solução
EXTRACÇÃO DE DNA
7. Por que não podemos observar a dupla hélice?
EXTRACÇÃO DE DNA
A estrutura de dupla hélice só pode ser visualizada de modo indireto e através de aparelhos sofisticados. O obsrvamos são milhares de moléculas de DNA.
EXTRACÇÃO DE DNA
8. Onde se encontra o DNA?
Cerca de 99% do DNA encontra-se no núcleo da célula. O restante DNA encontra-se em locais específicos, como por exemplo organitos ( as mitocôndria e os cloroplastos possuem o seu próprio DNA ). Apesar desses organitos terem o seu próprio cromossoma eles não podem contar com a sua informação. As mitocôndrias e cloroplastos necessitam de genes especiais situados noutros organitos. Para a maioria das funções, estes organitos utilizam os cromossomas nucleares.
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