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EXTRATOS VEGETAIS E FUNGOS ENTOMOPATOGÊNICOS NO MANEJO DE VETORES

DE VIROSES NO TOMATEIRO

por

VANDO MIOSSI RONDELLI

(Sob Orientação do Professor Dirceu Pratissoli – UFES)

RESUMO

O tomateiro tem grande importância econômica, contudo, os vetores de viroses limitam a

produção. Assim, este trabalho avaliou extratos de fumo, alho, pimenta-roxa, derivados da

mamona e formulações de fungos entomopatogênicos visando ao manejo de vetores de viroses no

tomateiro (VVT). Para isso, avaliou-se a mortalidade e a concentração letal (CL50 e CL90) dos

tratamentos mais eficientes sobre ninfas dos insetos. Em Frankliniella schultzei, Myzus persicae e

Bemisia tabaci, os extratos aquoso e etanólico de fumo causaram mortalidade entre 97,1 e 100%,

os de alho entre 13,0 e 66,0% e os de pimenta-roxa entre 26,5 e 95,0%. Também sobre as três

pragas, o óleo de mamona causou mortalidade entre 3,9 e 100%, a torta de mamona entre 5,9 e

96,5%, o ricinoleato de sódio entre 22,0 e 100% e o ácido ricinoleico entre 54,9 e 97,7%. Quanto

aos fungos entomopatogênicos, observou-se mortalidade confirmada sobre F. schultzei entre 27,0

e 71,8%, sobre M. persicae entre 23,0 e 98,2% e sobre B. tabaci entre 90,8 e 95,8%. O teste de

CL indicou que: os extratos aquoso e etanólico de fumo são os mais eficientes sobre os VVT;

entre os derivados da mamona, os extratos mais eficientes sobre M. persicae são o ricinoleato de

sódio, seguido pelo óleo e a torta de mamona e sobre B. tabaci o ricinoleato de sódio, seguido

pelo óleo de mamona; e entre os fungos entomopatogênicos, Metarhizium anisopliae (Metarril®

WP e Metarril® SC) é mais virulento para F. schultzei, Lecanicillium longisporum (Vertirril

® WP)

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para M. persicae e Beauveria bassiana (Boveril®

WP) e M. anisopliae (Metarril® WP) são

igualmente virulentos para B. tabaci. Portanto, esses tratamentos poderão implementar o manejo

de VVT, prevenindo o surgimento de populações de insetos-praga resistentes aos inseticidas

químicos, e poderão ser utilizados na agricultura orgânica.

PALAVRAS-CHAVE: Manejo fitossanitário de pragas, Solanum lycopersicum, controle

microbiano, tripes, pulgão-verde, mosca-branca

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VEGETABLE EXTRACTS AND ENTOMOPATHOGENIC FUNGI ON TOMATO VIROSIS

VECTORS MANAGEMENT

by

VANDO MIOSSI RONDELLI

(Under the Direction of Professor Dirceu Pratissoli)

ABSTRACT

Tomato has elevated economic importance, however, the virosis vectors limit its production.

This way, this work evaluated tobacco extracts, garlic, purple pepper, castor bean’s derivatives

and entomopathogenic fungi formulations aiming the tomato virosis vectors (TVV) management.

For this purpose, the mortality and lethal concentration (LC50 and LC90) of the most efficient

treatments on insect nymphs were evaluated. On Frankliniella schultzei, Myzus persicae and

Bemisia tabaci, the aqueous and ethanol extracts of tobacco caused mortality between 97.1 and

100%, the garlic extracts between 13.0 and 66.0% and the purple pepper ones between 26.5 and

95.0%. Also, on the three pests, castor bean oil caused mortality between 3.9 and 100%, castor

bean pie between 5.9 and 96.5%, sodium ricinoleate between 22.0 and 100% and ricinoleic acid

between 54.9 and 97.7%. Considering the entomopathogenic fungi, it was observed confirmed

mortality on F. schultzei between 27.0 and 71.8%, on M. persicae between 23.0 and 98.2% and on

B. tabaci between 90.8 and 95.8%. The LC test indicated that: the aqueous and ethanol extracts of

tobacco are the most efficient on the TVV; among the castor bean derivatives, the most efficient

extracts on M. persicae are sodium ricinoleate, followed by castor bean oil and pie and on B.

tabaci the most efficient is sodium ricinoleate, followed by castor bean oil; and among the

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entomopathogenic fungi Metarhizium anisopliae (Metarril® WP and Metarril

® SC) is the most

virulent for F. schultzei, Lecanicillium longisporum (Vertirril® WP) for M. persicae and

Beauveria bassiana (Boveril® WP) and M. anisopliae (Metarril

® WP) are equally virulent for B.

tabaci. However, these treatments may implement the TVV management, preventing the

appearance of insect-pests populations which are resistant to the chemical insecticides, and may

be used on organic agriculture.

KEY WORDS: Phytosanitary pest management, Solanum lycopersicum, microbial control,

thrips, green peach aphid, whitefly

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EXTRATOS VEGETAIS E FUNGOS ENTOMOPATOGÊNICOS NO MANEJO DE VETORES

DE VIROSES NO TOMATEIRO

por

VANDO MIOSSI RONDELLI

Tese apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Entomologia Agrícola, da Universidade

Federal Rural de Pernambuco, como parte dos requisitos para obtenção do grau de Doutor em

Entomologia Agrícola.

RECIFE - PE

Fevereiro – 2014

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EXTRATOS VEGETAIS E FUNGOS ENTOMOPATOGÊNICOS NO MANEJO DE VETORES

DE VIROSES NO TOMATEIRO

por

VANDO MIOSSI RONDELLI

Comitê de Orientação:

Dirceu Pratissoli – UFES

Edmilson Jacinto Marques – UFRPE

Hugo José Gonçalves dos Santos Junior – UFES

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EXTRATOS VEGETAIS E FUNGOS ENTOMOPATOGÊNICOS NO MANEJO DE VETORES

DE VIROSES NO TOMATEIRO

por

VANDO MIOSSI RONDELLI

Orientador:

Dirceu Pratissoli – UFES

Examinadores:

Edmilson Jacinto Marques – UFRPE

José Vargas de Oliveira – UFRPE

Patrik Luiz Pastori – UFC

Auristela Correia de Albuquerque – UFRPE

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DEDICATÓRIA

Aos meus pais, Antonio Rondelli e Davina Maria Miossi Rondelli, pelos ensinamentos,

apoio e incentivo.

À minha esposa, Patrícia de Sousa Vicente Rondelli, que sempre me apoiou, incentivou e

colaborou para que atingisse meu objetivo.

Aos meus irmãos, Wagner Miossi Rondelli, Viviane Miossi Rondelli e Vinício Miossi

Rondelli, pela amizade e ajuda.

À toda minha família, pelo apoio e incentivo.

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AGRADECIMENTOS

A Deus, por estar comigo em todos os momentos, me dando forças para alcançar os

objetivos desejados.

Ao Programa de Pós-graduação em Entomologia Agrícola da Universidade Federal Rural de

Pernambuco (PPGEA/UFRPE), pela oportunidade de realizar este curso.

Ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) e à Fundação

de Amparo a Pesquisa do Espírito Santo (FAPES), pelo apoio financeiro.

Ao Núcleo de Desenvolvimento Científico e Tecnológico em Manejo Fitossanitário

(NUDEMAFI), situado no Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal do Espírito Santo

(CCA/UFES), em Alegre-ES, por ter me fornecido todo o suporte para a realização deste trabalho.

À Reestruturação e Expansão das Universidades Federais/Coordenação de Aperfeiçoamento

de Pessoal de Nível Superior (REUNI/CAPES), pela concessão da bolsa de estudo.

Ao meu orientador, professor Dirceu Pratissoli, pela oportunidade de realizar este Curso de

Doutorado, com orientações precisas e esclarecedoras.

Aos meus co-orientadores, professores Edmilson Jacinto Marques e Hugo José Gonçalves

dos Santos Junior, pelo apoio e pelas valiosas sugestões.

Aos professores do Programa de Pós-Graduação em Entomologia Agrícola da UFRPE pela

competência e dedicação em passar seus conhecimentos profissionais aos seus alunos,

especialmente, aos professores Edmilson Jacinto Marques, Jorge Braz Torres, José Vargas de

Oliveira, Hebert A. A. de Siqueira, Reginaldo Barros, Valéria Wanderley Teixeira e Manoel G. C.

Gondim Junior, com os quais adquiri muitas experiências.

x

Aos professores Vagner Tebaldi de Queiroz, Adilson Vidal Costa, Patrícia Fontes Pinheiro,

Jorge Braz Torres e Hugo Bolsoni Zago, pelo apoio técnico neste trabalho.

À professora Zélia Gai, que colaborou com o fornecimento de sementes de feijão-de-porco

durante toda a realização da tese.

Aos discentes do PPGEA/UFRPE, em especial aos amigos e colegas Luziane Bestete,

Eduardo Barros, Maria Cleoneide da Silva (Cléo), Francieli Santos, Felipe Colares, Nicolle

Ribeiro, Tadeu Silva, Alicely Correia, Bruno Monteiro, Karjoene Cassimiro, Victor Zuim, Luan

Rocha, Lílian Ribeiro, Sérgio Alves, Aline Nascimento, Carla Assis, Agna Rodrigues, Alberto

Esteves, Alice Araújo, Ana Paula, Adauto Tavares, Cinthia Silva, Eliana Passos, Martin Oliveira,

Robério Neves, Flávia Born, Mário Jorge, Ligia Andrade, Mateus Campos, José Vagner, Cleiton

Domingos, Carolina Guedes, Ricardo Melo e Franklin Cunha, pela ajuda, troca de experiências e

pelos momentos de descontração.

Aos discentes do curso de Pós-Graduação em Produção Vegetal do CCA/UFES

(NUDEMAFI) Flávio Celestino, Carlos Magno, Débora Melo, José Romário, Eduardo Grecco,

Lauana Souza, João Paulo, Victor Pirovani e Vinícius Pereira, pela ajuda, troca de experiências e

pelos momentos de descontração.

Aos estagiários do Laboratório de Entomologia do NUDEMAFI, especialmente aos que de

alguma forma me auxiliaram no desenvolvimento desta tese, como Wilson Valbon, Wilker Lima,

Priscila Stinguel, Amanda Túler, Hígor Rodrigues, Lorena Machado, Marcel Tiburcio e Laura

Ribeiro.

Ao André Marins, pelo auxílio no preparo de soluções.

Ao Fábio Morais, pelas informações que auxiliaram na criação do tripes.

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Aos funcionários, Ariella Cahú da Secretaria de Fitossanidade do PPGEA/UFRPE e Carlos

Magno, Leonardo Mardgan e Maria Carlota do Laboratório de Entomologia do NUDEMAFI,

pelas inúmeras colaborações dispensadas durante os estudos.

À família Peixoto (esposa), pela ajuda, amizade e convívio fraterno.

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SUMÁRIO

Páginas

AGRADECIMENTOS .............................................................................................................. ix

CAPÍTULOS

1 INTRODUÇÃO ...................................................................................................... 01

LITERATURA CITADA........................................................................................09

2 EXTRATOS VEGETAIS VISANDO AO MANEJO DE VETORES DE VIROSES

NO TOMATEIRO............................................................................................... 16

RESUMO ............................................................................................................ 17

ABSTRACT ........................................................................................................ 18

INTRODUÇÃO .................................................................................................. 19

MATERIAL E MÉTODOS ................................................................................. 21

RESULTADOS E DISCUSSÃO ......................................................................... 25

AGRADECIMENTOS ........................................................................................ 31

LITERATURA CITADA .................................................................................... 32

3 DERIVADOS DA MAMONA VISANDO AO MANEJO DE VETORES DE

VIROSES NO TOMATEIRO.............................................................................. 46

RESUMO ............................................................................................................ 47

ABSTRACT ........................................................................................................ 48

INTRODUÇÃO .................................................................................................. 49

MATERIAL E MÉTODOS ................................................................................. 51

RESULTADOS E DISCUSSÃO ......................................................................... 56

xiii

AGRADECIMENTOS ........................................................................................ 60

LITERATURA CITADA .................................................................................... 60

4 FUNGOS ENTOMOPATOGÊNICOS VISANDO AO MANEJO DE VETORES

DE VIROSES NO TOMATEIRO ....................................................................... 69

RESUMO ............................................................................................................ 70

ABSTRACT ........................................................................................................ 71

INTRODUÇÃO .................................................................................................. 72

MATERIAL E MÉTODOS ................................................................................. 74

RESULTADOS E DISCUSSÃO ......................................................................... 78

AGRADECIMENTOS ........................................................................................ 82

LITERATURA CITADA .................................................................................... 83

CONSIDERAÇÕES FINAIS ................................................................................................... 92

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CAPÍTULO 1

INTRODUÇÃO

O tomateiro (Solanum lycopersicum L.) é uma hortaliça da família Solanaceae, sendo a mais

estudada e de maior consumo no mundo, pois é utilizada na alimentação humana para vários fins

(Barbosa et al. 2011, Guo et al. 2013). No Brasil, a área plantada de tomate em 2012 foi de 57.867

ha, com produção de 3.664.299 t e rendimento de 63.323 Kg/ha. Os Estados de Goiás e São Paulo

foram os maiores produtores, com áreas plantadas de 14.028 e 10.160 ha, respectivamente (IBGE

2013). A produção do tomate no Brasil poderia ser maior, não fossem os danos causados a cultura

por pragas e patógenos (Kurozawa & Pavan 2005, Fornazier et al. 2010).

Na cultura do tomateiro podem ocorrer muitos insetos-praga, os quais interferem e limitam

a produção. Entre eles, estão os vetores de viroses, tais como: Frankliniella schultzei (Trybom)

(Thysanoptera: Thripidae), Myzus persicae (Sulzer) (Hemiptera: Aphididae) e Bemisia tabaci

(Genn.) (Hemiptera: Aleyrodidae), que são vulgarmente conhecidos por tripes, pulgão-verde e

mosca-branca, respectivamente (Fornazier et al. 2010).

O tripes, F. schultzei, é de coloração variável medindo 1 a 3 mm de comprimento e tem por

hábito abrigar-se na face inferior das folhas novas, onde colocam seus ovos. Seu ciclo é de 11,5

dias em tomateiro a 25,4 ºC. Possui aparelho bucal raspador-sugador, assim, alimentam-se da

seiva das plantas, causando prateamento, necrose e deformação nas partes tenras da planta, como

flores, frutos e brotações (Pinent & Carvalho 1998, Fornazier et al. 2010).

O pulgão-verde, M. persicae, mede cerca de 2 mm de comprimento, é de coloração verde-

clara, sendo a forma alada de coloração verde, com cabeça, antenas e tórax pretos. O ciclo é de

5,9 dias em berinjela a 25 ºC. A reprodução se dá por partenogênese telítoca (sem a participação

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do macho). Alimentam-se da seiva de folhas e ramos novos, causando o enrolamento das folhas

(Chagas Filho et al. 2005, Fornazier et al. 2010).

A mosca-branca, B. tabaci, mede 1 mm de comprimento, é de coloração amarela clara e

apresenta quatro asas membranosas recobertas por uma pulverulência branca. Os ovos são

colocados na face inferior das folhas, ficando presos por um pedúnculo curto. As ninfas ao

eclodirem fixam-se na face inferior da folha. O ciclo de B. tabaci biótipo B é de 22,2 dias em

tomateiro da variedade “Santa Clara” a 23 ºC. Este biótipo deposita aproximadamente três vezes

mais ovos do que o biótipo A, além de adaptar-se mais facilmente a hospedeiros, condições

ambientais e inseticidas sintéticos. Esta espécie, devido à sucção de seiva, causa o aparecimento

da fumagina, o amadurecimento irregular dos frutos e isoporização da polpa (Villas Bôas et al.

1997, Gallo et al. 2002, Fornazier et al. 2010, Oriani et al. 2011).

Contudo, os principais danos causados pelos vetores de viroses no tomateiro estão

relacionados à transmissão de fitoviroses. O processo de transmisão de vírus ocorre da seguinte

forma: os insetos ao se alimentarem de plantas doentes e posteriormente de plantas sadias,

inoculam nestas o patógeno (Gallo et al. 2002).

F. schultzei transmite Tospovirus (vira-cabeça do tomateiro), Groundnut ring spot virus

(GRSV) e Tomato spotted wilt virus (TSWV). As ninfas deste tripes adquirem o vírus, que

somente é transmitido na fase adulta. A incidência de Tospovirus é de 50 a 90% e os sintomas são

folhas bronzeadas e frutos com manchas amareladas (Gallo et al. 2002, Borbón et al. 2006). M.

persicae transmite Potato virus Y (PVY) (vírus Y), Tomato yellow top virus (ToYTV) (topo

amarelo) e Tomato bottom yellow leaf virus (TBYLV) (amarelo baixeiro), apresentando os

sintomas: folíolos arqueados para baixo, clorose marginal das folhas e amarelecimento das folhas,

respectivamente. No Brasil, PVY causa perdas de 20 a 70% e ToYTV pode reduzir a produção de

flores e frutos em cerca de 85% (Kurozawa & Pavan 2005). B. tabaci transmite geminivírus, em

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que as plantas apresentam nanismo acentuado, enrugamento severo das folhas terminais e

amarelecimento da planta. Esta virose pode causar perdas de até 100% em algumas áreas. O

manejo destas fitoviroses geralmente é feito com o uso de variedades resistentes (Lima et al.

2001, Gallo et al. 2002).

Dentre as medidas utilizadas para reduzir ou minimizar os prejuízos causados por esses

insetos-praga no cultivo do tomateiro, o plantio de variedades resistentes, o controle cultural e o

controle químico com inseticidas sintéticos são adotados como principais alternativas (Gallo et al.

2002, Fornazier et al. 2010). Contudo, a aquisição destes produtos eleva o custo de produção e,

muitas vezes, o seu uso inadequado promove casos de intoxicação dos agricultores e

contaminação do ambiente e dos alimentos (Roel 2001).

Além disso, a adoção de medidas de manejo de pragas de ciclo curto, a exemplo dos vetores

de virose, M. persicae, B. tabaci e F. schultzei é mais difícil de ser implementada, pois essas

pragas desenvolvem-se rapidamente nas condições climáticas em que o tomateiro é cultivado,

possibilitando a multiplicação rápida das espécies (Pinent & Carvalho 1998, Chagas Filho et al.

2005, Oriani et al. 2011). Assim, os inseticidas sintéticos podem selecionar populações resistentes

devido à necessidade de aplicações frequentes, aumentando assim a pressão de seleção de

indivíduos resistentes (Nimbalkar et al. 2009). Desta forma, métodos alternativos visando o

manejo de pragas agrícolas que causam menos impacto ambiental têm sido estudados, objetivando

implementar o Manejo Fitossanitário de Pragas (MFP), que visa estabelecer uma estratégia de

controle com base no conhecimento do ciclo da cultura, das pragas e dos fatores ambientais

(Alves et al. 2007).

Entre as alternativas que vêm sendo estudadas, pode-se salientar o uso de produtos de

plantas que produzem compostos tóxicos aos herbívoros, os quais podem ser extraídos dos seus

tecidos e utilizados de forma alternativa para o manejo de insetos-praga (Torres et al. 2006,

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Vasconcelos et al. 2006, Santiago et al. 2008, Boiça Júnior et al. 2013, Costa et al. 2013). Assim,

os extratos de plantas têm sido estudados no mundo para o manejo de artrópodes-praga na

agricultura e pecuária (Venzon et al. 2007, Olivo et al. 2008, Bestete et al. 2011, Iqbal et al. 2011,

Attia et al. 2012, Costa et al. 2013). Esses extratos são obtidos de recursos renováveis e são

rapidamente degradáveis no ambiente. Além disso, o surgimento de populações resistentes dos

insetos aos extratos de plantas é um processo lento, pois são compostos da associação de várias

substâncias bioativas (Roel 2001).

A atividade inseticida de extratos de plantas da família Solanaceae, como o de fumo

(Nicotiana tabacum L.) e pimenta-roxa (Capsicum chinense Jacq.) sobre pragas é conhecida

(Lovatto et al. 2004, Dequech et al. 2008, Castillo-Sánchez et al. 2012). De acordo com Saito &

Lucchini (1998), o fumo já foi muito usado no controle de pragas. Atualmente, a toxicidade de

extratos de alho (Allium sativum L.) sobre insetos-praga também vem sendo estudada (Dutta et al.

2005, Fernandes et al. 2006, Chakravarthy et al. 2008).

A nicotina é o principal composto tóxico encontrado no fumo, contudo, a nornicotina e a

anabasina também são encontradas em menor concentração e também possuem atividade

inseticida. A nicotina age no sistema nervoso central dos insetos se ligando aos receptores da

acetilcolina (Saito & Lucchini 1998, Aguiar-Menezes 2005). Choudhary (2003) e Koppad &

Shivanna (2010) constataram que a nicotina afeta o comportamento, a fecundidade e causa efeitos

tóxicos a Drosophila melanogaster Meigen (Diptera: Drosophilidae).

Além disso, Lovatto et al. (2004) observaram que o extrato aquoso de fumo reduziu a

sobrevivência do pulgão-da-couve, Brevicoryne brassicae (L.) (Hemiptera: Aphididae). Em outro

estudo, constatou-se mortalidade de 100% das larvas de Plutella xylostella (L.) (Lepidoptera:

Plutellidae) que se alimentarem de folhas tratadas com extrato aquoso de fumo a 10% (Dequech et

al. 2009). Resultado semelhante foi obtido por Dequech et al. (2008), que observaram eficiência

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de controle de 100% de larvas de Microtheca ochroloma Stal (Coleoptera: Chrysomelidae). De

acordo com Rahuman et al. (2009), as CL50 e CL90 do extrato aquoso de fumo sobre Culex

quinquefasciatus Say (Diptera: Culicidae) foram de 76 e 334 ppm (0,0076 e 0,0334%),

respectivamente e as CL50 e CL90 do extrato metanólico de fumo também sobre C.

quinquefasciatus foram de 105 e 524 ppm (0,0105 e 0,0524%), respectivamente.

De acordo com Fernandes et al. (2006), os extratos aquosos de fumo e alho reduziram a

herbivoria e repeliram pragas, como Junonia evarete Cramer (Lepidoptera: Nymphalidae) e

gafanhotos, em tanchagem (ou transagem) (Plantago major L. e Plantago lanceolata L.). Estes

mesmos extratos causaram mortalidade de 57,9% de pulgões em trigo (Iqbal et al. 2011).

Chakravarthy et al. (2008) demostraram que o extrato de alho inibiu a infestação de Thrips palmi

Karny (Thysanoptera: Thripidae) em pepino. A alicina é o composto tóxico observado em bulbos

de alho e, segundo Iberl et al. (1990), o seu teor é de aproximadamente 0,4%. Este composto inibe

enzimas, como a acetilcolinesterase (Singh & Singh 1996).

Espécies de Capsicum metabolizam capsaicinoides (Cázares-Sánchez et al. 2005, Antonious

& Jarret 2006, Castillo-Sánchez et al. 2012). A atividade inseticida dos capsaicinoides foi

observada sobre M. persicae e a capsaicina a 0,2% em dieta retardou o crescimento de Earias

insulana (Boisd.) (Lepidoptera: Noctuidae) (Weissenberg et al. 1986, Edelson et al. 2002).

Castillo-Sánchez et al. (2012), avaliando o poder residual do extrato etanólico de C. chinense em

B. tabaci constataram CL50 de 29,4%.

Outra planta que sintetiza compostos com propriedade inseticida é a mamoneira, Ricinus

communis L. (Euphorbiaceae), sendo perene nativa de regiões tropicais e subtropicais do mundo

que produz até mesmo em ambientes com baixa precipitação pluviométrica (Hoffman et al. 2007,

Furtado et al. 2012). As sementes da mamona são submetidas à prensagem a elevadas

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temperaturas obtendo-se o óleo que é utilizado para a produção de biodiesel, e a torta como

subproduto (Melo et al. 2008, Pompeu et al. 2012).

De acordo com Paula Neto & Bleicher (2003), o óleo de mamona, na concentração de 2,0%,

causou mortalidade de 85,5% em ninfas de B. tabaci. Em outro estudo, o óleo de mamona

adicionado na dieta de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) na

concentração de 1,6% proporcionou mortalidade larval de 100% (Ramos-López et al. 2010).

Também já se constatou a atividade inseticida do óleo de mamona sobre P. xylostella,

Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera: Noctuidae) e Zabrotes subfasciatus (Boh.) (Coleoptera:

Bruchidae) (Mushobozy et al. 2009, Bestete et al. 2011, Rondelli et al. 2011).

Aproximadamente 90% do óleo de mamona é composto por triacilglicerol, e 80,5% deste

triacilglicerol é ricinoleína, que quando hidrolizada origina o ácido ricinoléico (Weiss 1983,

Moshkin 1986, Costa et al. 2004). Este ácido inibe a reprodução do carrapato Rhipicephalus

sanguineus (Latreille) (Acari: Ixodidae) (Arnosti et al. 2011, Sampieri et al. 2013). Assim, o

ácido ricinoléico pode ser um dos compostos do óleo de mamona com atividade tóxica aos

insetos.

A ricina, uma potente toxina, é encontrada na torta de mamona. Essa toxina possui duas

cadeias que atuam de forma conjunta, uma inibe a enzima alfa-amilase e a outra se liga aos

ribossomos, promovendo a morte da célula por inibição da síntese protéica (Moshkin 1986, Lord

et al. 1994, Olsnes & Kozlov 2001). Lins et al. (2013) constataram que a torta de mamona reduz a

população de Cosmopolites sordidus (Germar) (Coleoptera: Curculionidae) e o número de

galerias em bananeira pela aplicação em torno das plantas na concentração de 12 a 24 g por

planta.

Contudo, outra forma de se manejar insetos-praga, é pelo uso do controle biológico. Entre

os quais, os fungos entomopatogênicos são importantes agentes de controle biológico natural

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(Lopes et al. 2000). Estes agentes são responsáveis por aproximadamente 80% das doenças de

insetos, ocorrendo de forma enzoótica e epizoótica sobre pragas de importância agrícola. Existem

importantes programas de controle microbiano de pragas no Brasil com fungos

entomopatogênicos, destacando-se o uso de Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok. para o

manejo das cigarrinhas da cana-de-açúcar e das pastagens. Estes patógenos penetram no

hospedeiro geralmente via tegumento, colonizam o corpo dos insetos e secretam toxinas que

afetam as células e as reações do hospedeiro (Hajek & St. Leger 1994, Alves 1998a, Alves et al.

2008, Chen et al. 2008, Amnuaykanjanasin et al. 2013).

Os patógenos de insetos apresentam uma série de vantagens em relação aos inseticidas

químicos, como: facilidade de multiplicação e aplicação, a exemplo de Beauveria bassiana (Bals.)

Vuill e M. anisopliae; podem se multiplicar e se dispersar no ambiente afetando insetos não

atingidos diretamente pela aplicação; não poluem o ambiente e não são perigosos aos humanos e a

outros animais; os produtores comercializam os alimentos por preços mais elevados;

compatibilidade com inseticidas menos agressivos ao ambiente; e redução de custos com registros

de 80 a 90% (Alves 1998b, Lopes et al. 2000).

Assim, os fungos entomopatogênicos são utilizados no manejo de insetos-praga agrícolas de

muitas ordens e espécies (Medeiros et al. 2007, Alves et al. 2008). Lopes et al. (2000) utilizando

o isolado 1104 de M. anisopliae sobre o tripes F. occidentalis (Pergande) em cultivos de alface

hidropônico, observaram eficiência de controle de 60%. Em outro estudo, o isolado V275 de M.

anisopliae causou mortalidade de aproximadamente 80% deste inseto (Ansari et al. 2007).

Também sobre F. occidentalis, o isolado RSB de B. bassiana proporcionou mortalidade de 69 e

96% nas concentrações de 104 e 10

7 conídios/mL, respectivamente (Gao et al. 2012). Em

laboratório, o isolado SZ-26 de B. bassiana na concentração de 107 conídios/mL proporcionou

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mortalidade de 100% de T. tabaci e em casa de vegetação este isolado reduziu o número de

adultos e ninfas deste tripes (Wu et al. 2013).

Sobre ninfas de terceiro ínstar de M. persicae, os fungos Lecanicillium lecanii (Zimm.) Zare

& W. Gams, M. anisopliae e B. bassiana na concentração de 106 conídios/mL causaram

mortalidade de 100% dos insetos (Loureiro & Moino Jr. 2006). Michereff Filho et al. (2011)

observaram eficiência de controle de 56,7% do isolado PL-63 de B. bassiana sobre M. persicae

(adultos e ninfas). Contudo, o isolado J57 de B. bassiana na concentração de 107 conídios/mL

causou mortalidade de 100% a M. persicae (Vu et al. 2007).

Muitos trabalhos comprovam a importância de fungos no manejo de B. tabaci. O valor de

CL50 dos isolados Unioeste 47 e Unioeste 57 de B. bassiana sobre ninfas de terceiro ínstar deste

inseto foi de apenas 4,1 x 105 e 1,8 x 10

5 conídios/mL, respectivamente (Potrich et al. 2011). Em

outro trabalho, a CL50 do isolado EABb 01/110-Su de B. bassiana sobre ninfas de quarto ínstar de

B. tabaci foi de 6,5 x 105 conídios/mL (Quesada-Moraga et al. 2006). Já a CL50 dos isolados E9 e

Unioeste 43 de M. anisopliae sobre ninfas de terceiro ínstar de B. tabaci foi de 7,8 x 108 e 4,3 x

105 conídios/mL, respectivamente (Potrich et al. 2011).

Diante disso, os extratos botânicos e os fungos entomopatogênicos apresentam potencial de

uso no manejo de insetos vetores de viroses no tomateiro e a vantagem de serem menos

prejudiciais a organismos não-alvo e ao ambiente. Assim, a adoção dessas medidas de manejo

poderá evitar o surgimento de populações resistentes aos inseticidas químicos, sendo, portanto,

indicadas à agricultura orgânica, tendo em vista o rigoroso controle sobre o uso de agrotóxicos

nesse tipo de sistema de cultivo.

Portanto, este trabalho teve como objetivo avaliar extratos de fumo, alho, pimenta-roxa,

derivados da mamona e fungos entomopatogênicos no manejo de insetos vetores de viroses no

tomateiro.

9

Literatura Citada

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16

CAPÍTULO 2

EXTRATOS VEGETAIS VISANDO AO MANEJO DE VETORES DE VIROSES NO

TOMATEIRO1

VANDO M. RONDELLI2, DIRCEU PRATISSOLI

3, ADILSON V. COSTA

4, EDMILSON J. MARQUES

2 E

HUGO JOSÉ G. DOS SANTOS JUNIOR3

2Departamento de Agronomia – Entomologia, Universidade Federal Rural de Pernambuco, Av.

Dom Manoel de Medeiros s/n, Dois Irmãos, 52171-900 Recife, PE, Brasil.

3Departamento de Produção Vegetal – NUDEMAFI, Centro de Ciências Agrárias da

Universidade Federal do Espírito Santo, Alto Universitário, s/n, 29500-000 Alegre, ES, Brasil.

4Departamento de Química e Física, Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal do

Espírito Santo, Alto Universitário, s/n, 29500-000 Alegre, ES, Brasil.

1Rondelli, V.M., D. Pratissoli, A.V. Costa, E.J. Marques & H.J.G. dos Santos Junior. Extratos

vegetais visando ao manejo de vetores de viroses no tomateiro. A ser submetido.

17

RESUMO – O tomateiro, Solanum lycopersicum, é uma hortaliça de grande importância

econômica, contudo, a ocorrência dos vetores de viroses Frankliniella schultzei, Myzus persicae e

Bemisia tabaci causam problemas fitossanitários significativos. Diversos trabalhos comprovam a

importância de extratos de plantas, como o de fumo, pimenta e alho no manejo de alguns insetos-

praga. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar extratos aquosos e etanólicos de fumo, alho-

branco e roxo e pimenta-roxa visando ao manejo de vetores de viroses no tomateiro. Para isso,

soluções dos extratos aquosos na concentração de 10% e dos extratos etanólicos na concentração

de 1% foram aplicadas sobre ninfas dos três vetores de viroses. As concentrações letais (CL50 e

CL90) dos extratos que causaram mortalidade corrigida superior a 60% também foram estimadas.

Os extratos aquosos causaram mortalidade a F. schultzei entre 18,3 e 100%, a M. persicae entre

34,0 e 100% e a B. tabaci entre 44,1 e 97,1%. Os extratos etanólicos causaram mortalidade a F.

schultzei entre 18,9 e 100%, a M. persicae entre 39,5 e 100% e a B. tabaci entre 13,0 e 99,3%. O

teste de CL indicou que os extratos de fumo foram os mais tóxicos para F. schultzei, M. persicae e

B. tabaci. Assim, nas condições avaliadas, pode-se concluir que os extratos aquoso e etanólico de

fumo, ao contrário dos extratos de alho, causam maior mortalidade em todos os insetos-praga

testados e, o extrato etanólico de pimenta-roxa é eficiente apenas para M. persicae e B. tabaci.

PALAVRAS-CHAVE: Solanum lycopersicum, inseticidas botânicos, tripes, pulgão-verde, mosca-

branca

18

VEGETABLE EXTRACTS AIMING THE MANAGEMENT OF TOMATO VIROSIS

VECTORS

ABSTRACT – Tomato, Solanum lycopersicum, is a vegetable of elevated economic importance,

however, the occurrence of virosis vectors Frankliniella schultzei, Myzus persicae and Bemisia

tabaci causes significant phytossanitary problems. Several works confirm the importance of plant

extracts, as of tobacco, pepper and garlic on the management of some pest-insects. This way, the

objective of this work was to evaluate aqueous and ethanol extracts of tobacco, white and purple

garlic and purple pepper aiming the management of tomato virosis vectors. For this purpose,

aqueous extract solutions at the concentration of 10% and of ethanol extracts at the concentration

of 1% were applied on the nymphs of the three virosis vectors. The lethal concentrations (LC50

and LC90) of the extracts which caused corrected mortality superior to 60% were also estimated.

The aqueous extracts caused mortality to F. schultzei between 18.3 and 100%, to M. persicae

between 34.0 and 100% and to B. tabaci between 44.1 and 97.1%. The ethanol extracts caused

mortality to F. schultzei between 18.9 and 100%, to M. persicae between 39.5 and 100% and to B.

tabaci between 13.0 and 99.3%. The LC test indicated that the tobacco extracts were the most

toxic to F. schultzei, M. persicae and B. tabaci. This way, on the evaluated conditions, it may be

concluded that the aqueous and ethanol extracts of tobacco, unlike the garlic extracts, cause

higher mortality to all the tested pest-insects and the ethanol extract of purple pepper is only

efficient to M. persicae and B. tabaci.

KEY WORDS: Solanum lycopersicum, botanical insecticides, thrips, green peach aphid, whitefly

19

Introdução

O tomateiro, Solanum lycopersicum L. (Solanaceae), é uma hortaliça de grande importância

econômica (Barbosa et al. 2011, Guo et al. 2013). Em 2012 o Brasil produziu 3.664.299 t de

tomate (IBGE 2013). Essa produção seria maior se não houvesse a ocorrência de insetos-praga,

como os vetores de viroses Frankliniella schultzei (Trybom) (Thysanoptera: Thripidae), Myzus

persicae (Sulzer) (Hemiptera: Aphididae) e Bemisia tabaci (Genn.) (Hemiptera: Aleyrodidae),

que causam injúrias e transmitem várias fitoviroses, causando perdas que podem chegar a 100%

(Lima et al. 2001, Kurozawa & Pavan 2005, Fornazier et al. 2010). O controle dessas pragas

geralmente é feito com inseticidas sintéticos, elevando o custo de produção, além do risco de

causar intoxicação dos agricultores e contaminação do ambiente e dos alimentos, isto é, se não

forem adotadas as boas práticas agrícolas (Roel 2001, Fornazier et al. 2010).

Entre as alternativas aos inseticidas sintéticos, o uso dos extratos de plantas têm sido

estudados e implementados no mundo para o manejo de artrópodes-pragas na agricultura e

pecuária (Venzon et al. 2007, Olivo et al. 2008, Bestete et al. 2011, Iqbal et al. 2011, Attia et al.

2012, Costa et al. 2013). Estes extratos são obtidos de recursos renováveis e são rapidamente

degradáveis no ambiente. Além disso, o surgimento de populações resistentes de insetos aos

extratos de plantas é um processo lento, pois são compostos da associação de várias substâncias

bioativas (Roel 2001). Como exemplo, pode-se citar a atividade inseticida de extratos de plantas

como o de fumo (Nicotiana tabacum L.) e da pimenta-roxa (Capsicum chinense Jacq.) sobre

pragas (Lovatto et al. 2004, Dequech et al. 2008, Castillo-Sánchez et al. 2012). Semelhantemente,

a toxicidade de extratos de alho (Allium sativum L.) (Liliaceae) sobre insetos-praga também vem

sendo estudada em pragas como Thrips palmi Karny (Thysanoptera: Thripidae) e M. persicae

(Dutta et al. 2005, Fernandes et al. 2006, Chakravarthy et al. 2008).

20

Diversos trabalhos comprovam o potencial de extratos de fumo, pimenta e alho no manejo

de insetos-praga. Lovatto et al. (2004) observaram que o extrato aquoso de fumo reduziu a

sobrevivência do pulgão-da-couve, Brevicoryne brassicae (L.) (Hemiptera: Aphididae). Em outro

estudo, constatou-se mortalidade de 100% das larvas de Plutella xylostella (L.) (Lepidoptera,

Plutellidae) que se alimentaram de folhas tratadas com extrato aquoso de fumo a 10% (Dequech et

al. 2009). De acordo com Fernandes et al. (2006), os extratos aquosos de alho e fumo reduziram a

herbivoria de pragas, como Junonia evarete Cramer (Lepidoptera: Nymphalidae) e gafanhotos,

em tanchagem (ou transagem) (Plantago major L. e Plantago lanceolata L.). Chakravarthy et al.

(2008) demostraram que o extrato de alho teve efeito de deterrência alimentar em T. palmi. Além

disso, Castillo-Sánchez et al. (2012) avaliando o poder residual do extrato etanólico de C.

chinense em B. tabaci estimaram CL50 de 29,4%, comprovando a atividade inseticida destes

extratos no controle de insetos-praga. Diante disso, os extratos de fumo, alho e pimenta podem ser

opções no manejo dos vetores de viroses no tomateiro.

Estudos demostraram que a nicotina, um alcaloide, é o principal composto tóxico

encontrado em espécies de fumo e que a atividade inseticida de C. chinense, é atribuída a

capsaicinoides, da mesma forma que a alicina é o composto tóxico encontrado em bulbos de alho

(Weissenberg et al. 1986, Iberl et al. 1990, Singh & Singh 1996, Saito & Lucchini 1998, Edelson

et al. 2002, Castillo-Sánchez et al. 2012).

Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade inseticida dos extratos aquosos e

etanólicos de fumo, alho-branco e roxo e pimenta-roxa visando ao manejo de F. schultzei, M.

persicae e B. tabaci.

21

Material e Métodos

O experimento foi conduzido no Setor de Entomologia do Núcleo de Desenvolvimento

Científico e Tecnológico em Manejo Fitossanitário (NUDEMAFI), no Centro de Ciências

Agrárias da Universidade Federal do Espírito Santo (CCA/UFES), situado em Alegre-ES. Foram

executadas as seguintes etapas:

Obtenção e Criação dos Insetos. F. schultzei foi coletado em flores de plantas de feijão-de-porco

(Canavalia ensiformis L.) no CCA/UFES, M. persicae em plantios de couve-manteiga (Brassica

oleracea L. var. acephala) no município de Alegre-ES (20º 45' 50" S 41º 31' 58" O) e B. tabaci

em plantas de tomate no CCA/UFES.

A metodologia de criação de F. schultzei foi modificada de Morais et al. (2012). Os insetos

foram mantidos em câmara climatizada a 25 ± 1 ºC, umidade relativa de 70 ± 10% e fotofase de

12h, em gaiolas de acrílico de base quadrada de 121,0 cm2 e 3,2 cm de altura. Colocou-se papel

filtro umedecido no fundo da gaiola para manter a umidade. Para alimentação das ninfas ofereceu-

se a cada dois dias uma folha cotiledonar de feijão-de-porco com aproximadamente 18 cm de

altura. Estas folhas foram coletadas deixando-se aproximadamente 3 cm do pecíolo para a

inserção, primeiramente, em chumaço de algodão, e em seguida, em frascos anestésicos de 0,7 x

5,0 cm (diâmetro e altura) contendo água deionizada para manter sua turgescência. As plantas

foram cultivadas em bandejas de isopor de 72 células contendo mistura de solo e esterco bovino

na proporção de 6:1.

As gaiolas foram fechadas com filme plástico contendo pequenos furos feitos com um

alfinete entomológico. Após a cópula (48h após a emergência dos adultos), fêz-se a sexagem,

colocando-se 60 fêmeas em cada gaiola. Para alimentação ofereceu-se diariamente uma folha

cotiledonar de feijão-de-porco e pólen de mamona (Ricinus communis L.) para aumentar o

22

desempenho reprodutivo das fêmeas. Em seguida, as posturas foram coletadas diariamente e

transferidas para novas gaiolas (Morais et al. 2012).

A criação de M. persicae foi realizada em câmara climatizada a 25 ± 1 ºC, umidade relativa

de 70 ± 10% e fotofase de 12h, sobre discos foliares de couve-manteiga orgânica de 8,0 cm de

diâmetro, dentro de placas de Petri de 9,0 x 1,3 cm (diâmetro e altura) revestidas com papel filtro.

A cada dois dias, os insetos foram transferidos para placas esterilizadas, as quais continham novos

discos foliares (Pinheiro et al. 2013).

A criação de B. tabaci foi realizada dentro de gaiolas de metal (1,0 x 1,0 x 0,8 m) revestidas

com tela anti-afídeo. Os adultos foram mantidos em uma gaiola em sala climatizada a 25 ± 2 ºC,

umidade relativa de 70 ± 10% e fotofase de 12h e as ninfas em duas gaiolas em casa telada com

temperatura entre 16 e 41 ºC. Diariamente, uma planta de tomateiro da cultivar “Alambra F1”,

cultivada em vaso de dois litros contendo mistura de solo e esterco bovino na proporção de 6:1 foi

oferecida aos adultos para alimentação e postura (Baldin et al. 2007).

Obtenção dos Extratos. Foram usados fumo industrializado (N. tabacum), frutos maduros da

pimenta-roxa (C. chinense) (coletados na área do CCA/UFES, em Alegre-ES), alho-roxo

proveniente de áreas comerciais de São Gotardo-MG e alho-branco produzido na região serrana

do Espírito Santo (A. sativum), cujos bulbos foram descascados. O fumo, a pimenta e os alhos

foram cortados, secos em estufa de circulação de ar a 40 ºC por 72h e moídos em moinho de

facas, obtendo-se o pó destes materiais. Para a extração dos compostos secundários

hidrossolúveis, os pós foram misturados em água deionizada em erlenmeyer revestido com papel

alumínio, sendo mantido em agitador “shaker” por 24h a 200 rpm. Estas soluções foram filtradas

em tecido voal obtendo-se os extratos aquosos na concentração de 10% m/v. Na testemunha usou-

se água deionizada.

23

Os extratos etanólicos dos pós dos vegetais foram preparados por maceração em álcool

etílico 95% P.A., em erlenmeyer revestido com papel alumínio, mantido sob agitação a 200 rpm

por cinco horas, e seguido por filtração com papel filtro. A extração foi repetida por mais duas

vezes para ocorrer o esgotamento das substâncias solúveis em álcool. Os filtrados foram

armazenados em geladeira e, posteriormente, misturados. Em seguida, foram transferidos para

evaporador rotativo a 40 ºC sob vácuo para concentrá-los (Oliveira et al. 2008), os quais foram

utilizados na concentração de 1% m/v em Tween® 80 a 0,01% m/v e acetona a 2% v/v. Na

testemunha usou-se água deionizada mais Tween® 80 a 0,01% m/v e acetona a 2% v/v.

O inseticida lambda-cialotrina + tiametoxam (Platinum Neo®) (Syngenta) foi usado como

controle positivo na concentração máxima recomendada para o controle dos vetores de viroses no

tomateiro, ou seja, 0,075% v/v (75 mL/100L). Como a densidade do produto é de 1,066 m/v, este

foi diluído na proporção de 0,08 g em 100 mL de água deionizada, obtendo-se o produto na

concentração de 0,08% m/v. Na testemunha usou-se água deionizada.

Teste de Atividade Inseticida. Usou-se no bioensaio de F. schultzei ninfas entre 48 e 72h de

idade, no primeiro-segundo ínstares (Pinent & Carvalho 1998). Em placas de Petri (9,0 x 1,3 cm)

revestidas com papel filtro, dez ninfas de F. schultzei foram transferidas para a face abaxial de

folhas cotiledonares de feijão-de-porco (repetição) com o auxílio de um pincel de cerdas finas e

um funil branco com o bico cortado, devido à agilidade dos insetos. As soluções foram aplicadas

em ambos os lados das folhas. Um chumaço de algodão foi colocado no pecíolo da folha de

feijão-de-porco e este foi introduzido em frasco anestésico contendo água deionizada para manter

a turgescência da folha. As placas foram fechadas com filme plástico contendo seis furos feitos

com um alfinete entomológico para possibilitar trocas gasosas (Pinheiro et al. 2013).

No bioensaio com M. persicae foram usadas ninfas entre 24 e 48h de idade, no primeiro-

segundo ínstares (Chagas Filho et al. 2005). Dez insetos foram colocados na face abaxial de

24

discos foliares de couve orgânica medindo 4,5 cm de diâmetro (repetição) em placas de Petri (9,0

x 1,3 cm) revestidas com papel filtro. As soluções foram aplicadas em ambos os lados das folhas e

a placa de Petri foi fechada (Pinheiro et al. 2013).

Para a aplicação das soluções, as folhas contendo os insetos foram pulverizadas em sala

climatizada, usando torre de Potter com pressão de 15 lb/pol2 e 6 mL de solução para cada lado da

folha, tendo-se depositado um volume médio de 1,62 mg/cm2 (Rondelli et al. 2011). As placas

foram mantidas em câmara climatizada a 25 ± 1 ºC, umidade relativa de 70 ± 10% e fotofase de

12h. As folhas foram trocadas no segundo dia, e novamente quando necessário. A mortalidade foi

avaliada até o quinto dia, caracterizada pela total imobilidade dos insetos quando tocados com um

pincel de cerdas macias.

Para os experimentos com B. tabaci, plantas de tomateiro da cultivar “Alambra F1” com 30

dias de idade em vasos de um litro, contendo mistura de solo e esterco bovino na proporção de 6:1

foram mantidas por 48h na gaiola de adultos da praga para oviposição. As plantas foram levadas

para casa telada e quando as ninfas estavam no segundo ínstar, as soluções foram aplicadas em

sala climatizada, usando aerógrafo (Super Tool®

) com bico de 0,35 mm acoplado a um

compressor (Wraight et al. 2000). O bico do pulverizador foi posicionado à distância de 25 cm

das folhas e ambos os lados foram pulverizadas até o escorrimento. O experimento foi mantido

em sala climatizada a 25 ± 2 ºC, umidade relativa de 70 ± 10% e fotofase de 12h. A avaliação da

mortalidade foi efetivada no quinto dia, sendo avaliados quatro discos (2,8 cm2) de folíolos da

terceira e quarta folhas da planta (repetição). As ninfas vivas foram diferenciadas das mortas por

se manterem túrgidas e estarem em estádio de desenvolvimento mais avançado. Calculou-se a

média de ninfas mortas dos quatro discos foliares por repetição (Bleicher et al. 2007, Islam et al.

2010).

25

Para todos os bioensaios utilizou-se o delineamento experimental inteiramente casualizado,

com 10 repetições. A mortalidade corrigida foi calculada em relação a cada testemunha pela

fórmula de Abbott (1925). Os dados foram testados para normalidade e homogeneidade de

variância, sendo transformados para arcsen (x/100)1/2

. Posteriormente, foram submetidos à análise

de variância (ANOVA) e as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade,

utilizando o programa R (Ferreira et al. 2011).

Estimativa das Concentrações Letais (CL50 e CL90). A estimativa das CL50 e CL90 foi feita com

os extratos que causaram mortalidade corrigida superior a 60%. Esta etapa do bioensaio foi

realizada de acordo com os procedimentos descritos na etapa destinada ao teste de atividade

inseticida. A obtenção dos extratos foi realizada conforme descrito anteriormente. Para a

estimativa das concentrações letais foram utilizadas oito concentrações espaçadas em escala

logarítmica, sendo os limites inferior (concentração que causa a morte de aproximadamente 15%

dos insetos) e superior (concentração que causa a morte de aproximadamente 95% dos insetos)

determinados mediante ensaios preliminares, além das respectivas testemunhas (Tabela 1).

Utilizou-se o delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco repetições. As CL50

e CL90 foram estimadas usando a análise de Probit com auxílio do programa Polo-PC (Finney

1971, LeOra Software 1987).

Resultados e Discussão

Rendimento dos Extratos Etanólicos. Os extratos de fumo, alho-branco, alho-roxo e pimenta-

roxa tiverem rendimento de 1,42, 2,43, 3,20 e 5,16% m/m, respectivamente em relação ao pó seco

destes materiais. Contudo, Castillo-Sánchez et al. (2012) obtiveram rendimento superior do

extrato etanólico de C. chinense (22%). Bezerra et al. (2008) relataram que a época de colheita

influencia o rendimento do extrato etanólico. Sendo assim, esta variação no rendimento do extrato

26

etanólico de pimenta-roxa pode estar relacionada à época de colheita dos frutos, bem como a

outros fatores, com diferença nas condições edafoclimáticas de onde as plantas foram cultivadas

(Morais 2009).

Teste de Atividade Inseticida. O extrato aquoso de fumo e o lambda-cialotrina + tiametoxam

(controle positivo) foram os tratamentos mais eficientes contra F. schultzei, sendo observada

mortalidade de 100% das ninfas (F4, 45 = 279,86; P < 0,0001) (Tabela 2). Para M. persicae, o

extrato aquoso de fumo e o lambda-cialotrina + tiametoxam também foram mais eficientes,

causando mortalidade de 100% dos insetos (F4, 45 = 70,99; P < 0,0001) (Tabela 2). A mortalidade

proporcionada pelos extratos aquosos de pimenta-roxa e de alho-branco foi de 83,1 e 66,0%,

respectivamente. A maior mortalidade a B. tabaci também foi observada com o extrato aquoso de

fumo e o lambda-cialotrina + tiametoxam (97,1 e 96,9%, respectivamente) (F4, 45 = 143,75; P <

0,0001) (Tabela 2). O extrato aquoso de pimenta-roxa também causou considerável mortalidade a

B. tabaci (81,6%).

O extrato etanólico de fumo e o lambda-cialotrina + tiametoxam foram os tratamentos mais

eficientes a F. schultzei, proporcionando mortalidade de 100% das ninfas (F4, 45 = 598,98; P <

0,0001) (Tabela 3). Para M. persicae, os extratos etanólicos de fumo, pimenta-roxa e o lambda-

cialotrina + tiametoxam foram os tratamentos mais tóxicos, causando mortalidade de 100, 95,0 e

100%, respectivamente (F4, 45 = 81,49; P < 0,0001) (Tabela 3). A maior mortalidade a B. tabaci foi

observada com o extrato etanólico de fumo e o lambda-cialotrina + tiametoxam (99,3 e 96,9%,

respectivamente), contudo, a atividade inseticida do extrato etanólico de pimenta-roxa também foi

alta (90,7%) (F4, 45 = 171,99; P < 0,0001) (Tabela 3).

O alcaloide nicotina é o principal composto tóxico encontrado em espécies de fumo,

contudo, a nornicotina e a anabasina também são encontradas em menor concentração e também

possuem atividade inseticida (Saito & Lucchini 1998). A nicotina age no sistema nervoso central

27

dos insetos se ligando aos receptores da acetilcolina que, após o estímulo, é naturalmente

degradada pela enzima acetilcolinesterase, reação que não ocorre quando a nicotina se liga aos

receptores da acetilcolina. Assim, a nicotina permanece transmitindo impulsos nervosos,

ocasionando a morte do inseto por sobrecarga do sistema nervoso e, consequentemente, fadiga

muscular (Saito & Lucchini 1998, Aguiar-Menezes 2005). Desta forma, a nicotina provavelmente

foi o principal composto responsável pela atividade tóxica sobre os insetos estudados. Choudhary

(2003) e Koppad & Shivanna (2010) constataram também que a nicotina afeta o comportamento,

a fecundidade e causa efeitos tóxicos a Drosophila melanogaster Meigen (Diptera:

Drosophilidae).

O extrato aquoso de fumo causou mortalidade de 100% a F. schultzei e M. persicae, e de

97,1% a B. tabaci (Tabela 2). Em outro estudo, 100% das larvas de P. xylostella morreram ao se

alimentarem de folhas tratadas com extrato aquoso de fumo a 10%. Além disso, o extrato de fumo

a 10% reduziu a oviposição desta praga (Dequech et al. 2009, Medeiros et al. 2005). Dequech et

al. (2008) observaram eficiência de controle de 100% de larvas de Microtheca ochroloma Stal

(Coleoptera: Chrysomelidae) alimentadas com folha de couve-chinesa (Brassica chinensis L.)

previamente tratada com extrato aquoso de fumo a 10% e em adultos também foi observada

mortalidade satisfatória (74%). Além disso, Lovatto et al. (2004) observaram que o extrato

aquoso de fumo pode reduzir a sobrevivência do pulgão-da-couve, B. brassicae.

Extratos de plantas podem interferir no comportamento da população de alguns insetos. De

acordo com Fernandes et al. (2006), os extratos aquosos de alho e de fumo reduziram a herbivoria

e repeliram pragas (lagarta e gafanhotos) em tanchagem (ou transagem) (P. major e P.

lanceolata). Estes mesmos extratos proporcionaram mortalidade de pulgões na cultura do trigo em

campo de 57,9% (Iqbal et al. 2011). Outros trabalhos demostraram que o extrato de alho inibiu a

infestação de T. palmi em pepino (Chakravarthy et al. 2008), contudo, não foi eficaz sobre

28

mirídeos em maçã (Jaastad et al. 2009). A alicina é um composto tóxico encontrado em bulbos de

alho e, de acordo com Iberl et al. (1990), seu conteúdo é de aproximadamente 0,4%. Singh &

Singh (1996) observaram que a alicina inibe enzimas, como a acetilcolinesterase.

Espécies de Capsicum metabolizam capsaicinoides (Cázares-Sánchez et al. 2005). De

acordo com Castillo-Sánchez et al. (2012), a concentração de capsaicina, dihidrocapsaicina e

capsaicinoides totais em extrato etanólico de C. chinense foi de 679,4, 514,1 e 1193,6 mg/kg,

respectivamente. Contudo, Antonious & Jarret (2006) observaram que o conteúdo de capsaicina

em C. chinense foi de 2.900 mg/Kg. A atividade inseticida dos capsaicinoides foi observada sobre

M. persicae e a capsaicina a 0,2% em dieta retardou o crescimento de Earias insulana (Boisd.)

(Lepidoptera: Noctuidae) (Weissenberg et al. 1986, Edelson et al. 2002). Desta forma, o efeito

tóxico dos extratos de C. chinense pode ser associado aos capsaicinoides.

Neste trabalho, os extratos de alho não foram eficazes no controle dos vetores de viroses

(Tabelas 2 e 3). Esses resultados assemelham-se aos encontrados por Nali et al. (2004), que ao

avaliarem os produtos naturais observaram que uma formulação de alho (Bio alho) apresentou a

menor porcentagem média de controle de tripes em videira (23%). Apesar disso, outros métodos

de extração dos princípios ativos existentes nesta planta devem ser testados, visto que Roel et al.

(2000) observaram variação de mortalidade de Spodoptera frugiperda (J. E. Smith) (Lepidoptera:

Noctuidae) entre os diferentes solventes usados na extração de Trichilia pallida Swartz. Esses

mesmos autores também observaram que o uso de diferentes partes da planta alteram a

mortalidade da praga, pois podem conter diferentes proporções de princípios ativos.

Estimativa das Concentrações Letais (CL50 e CL90). As CL50 e CL90 do extrato aquoso de fumo

sobre F. schultzei foram baixas (0,68 e 1,19%, respectivamente). Contudo, a razão de toxicidade

do inseticida lambda-cialotrina + tiametoxam em relação ao extrato aquoso de fumo foi de 453

vezes. Apesar disso, a reta de concentração-mortalidade do extrato aquoso de fumo foi mais

29

inclinada (5,29) comparada a do lambda-cialotrina + tiametoxam (2,27), de acordo com o erro-

padrão (Tabela 4). Retas mais inclinadas proporcionam maior variação na mortalidade da praga

em função da variação da concentração do extrato.

O extrato aquoso de fumo foi o mais tóxico para M. persicae de acordo com o intervalo de

confiança a 95% de probabilidade (IC a 95%) (CL50 e CL90 de 0,3 e 0,68%, respectivamente),

sendo a razão de toxicidade em relação ao extrato aquoso de alho-branco de 28,1 vezes (Tabela

5). As CL50 dos extratos aquosos de alho-branco e de pimenta-roxa foram altas (8,42 e 7,08%,

respectivamente). No entanto, as CL50 e CL90 do lambda-cialotrina + tiametoxam sobre M.

persicae foram de apenas 0,00013 e 0,00040%, respectivamente. As retas de concentração-

mortalidade dos extratos aquosos de alho-branco, pimenta-roxa e fumo foram as mais inclinadas e

não diferiram (4,36, 3,86 e 3,62, respectivamente).

A CL50 do extrato aquoso de fumo sobre B. tabaci foi de 0,12% e a CL90 foi de 2,79%. Este

extrato foi 29,8 vezes mais tóxico do que o extrato aquoso de pimenta-roxa (Tabela 6). Entretanto,

o tratamento mais tóxico para B. tabaci foi o lambda-cialotrina + tiametoxam, apresentando CL50

e CL90 de 0,0015 e 0,0256%, respectivamente. A reta de concentração-mortalidade do extrato

aquoso de pimenta-roxa foi a mais inclinada (2,18).

As CL50 e CL90 do extrato etanólico de fumo sobre F. schultzei foram muito baixas (0,08 e

0,20%, respectivamente). Contudo, a razão de toxicidade do lambda-cialotrina + tiametoxam em

relação ao extrato etanólico de fumo foi de 53,3 vezes. De acordo com o erro-padrão, a reta de

concentração-mortalidade do extrato etanólico de fumo foi mais inclinada (3,18) comparada a do

lambda-cialotrina + tiametoxam (2,27) (Tabela 7).

O extrato etanólico de fumo foi 22 vezes mais tóxico para M. persicae do que o de pimenta-

roxa. A CL50 dos extratos etanólicos de fumo e de pimenta-roxa foi de 0,017 e 0,374%,

respectivamente, enquanto as CL90 dos extratos etanólicos de fumo e de pimenta-roxa foram de

30

0,047 e 0,789%, respectivamente (Tabela 8). No entanto, as CL50 e CL90 do lambda-cialotrina +

tiametoxam sobre M. persicae foram de apenas 0,00013 e 0,00040%, respectivamente. A reta de

concentração-mortalidade do extrato etanólico de pimenta-roxa foi a mais inclinada (3,95) e as

retas de concentração-mortalidade do extrato etanólico de fumo e a do lambda-cialotrina +

tiametoxam não diferiram (Tabela 8).

Para B. tabaci o extrato etanólico de fumo também foi mais tóxico do que o de pimenta-

roxa, sendo a razão de toxicidade destes dois extratos de 13,5 vezes (Tabela 9). As CL50 e CL90 do

extrato etanólico de fumo sobre B. tabaci foram de 0,015 e 0,124%, respectivamente, e a CL90 do

extrato etanólico de pimenta-roxa foi de 0,837%. A CL90 do lambda-cialotrina + tiametoxam

sobre B. tabaci foi de 0,0256%. As retas de concentração-mortalidade dos extratos etanólicos de

fumo e de pimenta-roxa foram as mais inclinadas (2,57 e 2,08, respectivamente).

Sobre F. schultzei, M. persicae e B. tabaci a CL50 do extrato aquoso de fumo variou de 0,12

a 0,68% e a CL90 de 0,68 a 2,79% (Tabelas 4, 5 e 6). Rahuman et al. (2009) constataram CL50 e

CL90 do extrato aquoso de fumo sobre o mosquito Culex quinquefasciatus Say (Diptera:

Culicidae) de 76 e 334 ppm (0,0076 e 0,0334%), respectivamente, e as CL50 e CL90 do extrato

metanólico de fumo sobre C. quinquefasciatus foram de 105 e 524 ppm (0,0105 e 0,0524%),

respectivamente.

Nesse trabalho foi constatado que o extrato etanólico de C. chinense sobre B. tabaci

porporcionou CL50 de 0,202% (Tabela 9), enquanto que Castillo-Sánchez et al. (2012), utilizando

o mesmo extrato sobre B. tabaci observaram CL50 de 29,4%. Esta diferença de resposta pode ser

devida, principalmente, à diferença na forma de exposição do inseto, visto que estes autores

avaliaram o poder residual do extrato.

A CL50 do extrato aquoso de alho-branco sobre M. persicae (8,42%) (Tabela 5) foi um

pouco maior em relação a um extrato comercial de alho, que apresentou CL50 de 6,78% sobre

31

larvas de segundo ínstar de Delia radicum L. (Diptera: Anthomyiidae) e de 4,45% sobre Musca

domestica L. (Diptera: Muscidae). Além disso, este extrato a 5% foi eficaz sobre adultos destas

duas moscas e inviabilizou aproximadamente 90% dos ovos (Prowse et al. 2006). Em outro

estudo, a imersão de grãos de feijão nas soluções de extratos aquosos e etanólicos de alho

proporcionou CL50 de 0,110 e 0,219 g/L sobre Callosobruchus maculatus F. (Coleoptera:

Bruchidae) (Denloye 2010). Outro trabalho que demonstra a atividade inseticida do alho, foi o

conduzido por Kalu et al. (2010), pois observaram que o extrato etanólico de alho sobre C.

quinquefasciatus proporcionou CL50 de 144, 165 e 184 ppm no primeiro, segundo e terceiro

ínstares, respectivamente.

De acordo com Roel (2001), as plantas com propriedades inseticidas, como o alho, fumo e a

pimenta-roxa são de fácil obtenção por agricultores, ou mesmo podem ser produzidas pelos

próprios agricultores. Além disso, os inseticidas naturais são obtidos de recursos renováveis e

geralmente são rapidamente degradáveis no ambiente, sendo uma alternativa de uso na agricultura

orgânica.

Os extratos aquoso e etanólico de fumo, ao contrário dos extratos de alho, causam maior

mortalidade aos vetores de viroses no tomateiro e o extrato etanólico de pimenta-roxa, é eficiente

apenas para M. persicae e B. tabaci.

Agradecimentos

À Reestruturação e Expansão das Universidades Federais/Coordenação de

Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (REUNI/CAPES) pela concessão de bolsa de

estudos ao primeiro autor; ao Programa de Pós-graduação em Entomologia Agrícola da

Universidade Federal Rural de Pernambuco (PPGEA/UFRPE) e ao Núcleo de Desenvolvimento

Científico e Tecnológico em Manejo Fitossanitário do Centro de Ciências Agrárias da

32

Universidade Federal do Espírito Santo (NUDEMAFI-CCA/UFES) por apoiarem o

desenvolvimento dessa pesquisa; ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e

Tecnológico (CNPq) e à Fundação de Amparo a Pesquisa do Espírito Santo (FAPES) pelo apoio

financeiro.

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37

Tabela 1. Limites inferior e superior das concentrações de extratos aquosos e etanólicos de plantas e do inseticida lambda-

cialotrina + tiametoxam (L-C + T) (Platinum Neo®) (controle positivo), em porcentagem (m/v), para estimativa das concentrações letais

(CL50 e CL90) sobre ninfas de Frankliniella schultzei, Myzus persicae e Bemisia tabaci.

Tratamentos F. schultzei M. persicae B. tabaci

Fumo (aquoso) 0,02 – 1,7 0,02 – 0,9 0,01 – 10,0

Fumo (etanólico) 0,0045 – 0,2 0,001 – 0,2 0,004 – 0,25

Alho-branco (aquoso) 1 1,3 – 10,0

1

Pimenta-roxa (aquoso) 1 1,8 – 15,0 1,0 – 17,0

Pimenta-roxa (etanólico) 1 0,2 – 1,3 0,13 – 1,7

L-C + T 0,00032 – 0,02132 0,00002 – 0,00069 0,00010 – 0,08000

1Não se avaliou.

38

Tabela 2. Mortalidade corrigida (%) de ninfas de Frankliniella schultzei, Myzus persicae e Bemisia tabaci causada por extratos

aquosos de plantas e o inseticida lambda-cialotrina + tiametoxam (L-C + T) (Platinum Neo®

), após cinco dias1, 2

.

Tratamentos Concentração (% m/v) F. schultzei M. persicae B. tabaci

Fumo 10 100,0 ± 0,00 a 100,0 ± 0,00 a 97,1 ± 0,54 a

Alho-roxo 10 18,3 ± 2,82 c 34,0 ± 4,36 d 45,4 ± 3,02 c

Alho-branco 10 33,0 ± 4,71 b 66,0 ± 4,78 c 44,1 ± 3,16 c

Pimenta-roxa 10 36,2 ± 3,76 b 83,1 ± 4,45 b 81,6 ± 2,01 b

L-C + T 0,083 100,0 ± 0,00 a 100,0 ± 0,00 a 96,9 ± 0,75 a

1Médias (± EP) (n = 10 repetições) seguidas pela mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade.

2Para análise, os dados foram transformados para arcsen (x/100)1/2.

30,08% m/v = 0,075% v/v = 75 mL/100L (controle positivo na concentração máxima recomendada para o controle dos vetores de viroses no tomateiro).

39

Tabela 3. Mortalidade corrigida (%) de ninfas de Frankliniella schultzei, Myzus persicae e Bemisia tabaci causada por extratos

etanólicos de plantas e o inseticida lambda-cialotrina + tiametoxam (L-C + T) (Platinum Neo®), após cinco dias

1, 2.

Tratamentos Concentração (% m/v) F. schultzei M. persicae B. tabaci

Fumo 1 100,0 ± 0,00 a 100,0 ± 0,00 a 99,3 ± 0,25 a

Alho-roxo 1 18,9 ± 2,12 c 39,5 ± 6,45 c 47,0 ± 1,92 c

Alho-branco 1 31,0 ± 2,14 b 56,1 ± 4,42 b 13,0 ± 2,41 d

Pimenta-roxa 1 26,5 ± 3,05 bc 95,0 ± 3,09 a 90,7 ± 3,00 b

L-C + T 0,083 100,0 ± 0,00 a 100,0 ± 0,00 a 96,9 ± 0,75 ab

1Médias (± EP) (n = 10 repetições) seguidas pela mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade.

2Para análise, os dados foram transformados para arcsen (x/100)1/2.

30,08% m/v = 0,075% v/v = 75 mL/100L (controle positivo na concentração máxima recomendada para o controle dos vetores de viroses no tomateiro).

40

Tabela 4. Toxicidade do extrato aquoso de fumo e do inseticida lambda-cialotrina + tiametoxam (L-C + T) (Platinum Neo®)

sobre ninfas de 48-72h de idade, primeiro-segundo ínstares, de Frankliniella schultzei, após cinco dias. Temp.: 25 ± 1 ºC, UR: 70 ±

10% e 12h de fotofase.

1Número de insetos usados no bioensaio.

2Erro-padrão (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo erro-padrão).

3Concentrações letais (CL50 e CL90) e intervalo de confiança das CL50 e CL90 a 95% de probabilidade (IC a 95%) (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não

diferem entre si pelo IC a 95%).

4Razão de toxicidade = maior CL50/menor CL50.

5Qui-quadrado e graus de liberdade.

6Controle positivo.

Tratamentos N1 Inclinação ± EP

2 CL50 (IC a 95%)

3 (% m/v) CL90 (IC a 95%)

3 (% m/v) RT50

4

2 (GL)

5

Fumo 339 5,29 ± 0,82 a 0,68 (0,58 – 0,77) b 1,19 (1,06 – 1,43) b – 4,59 (5)

L-C + T6 384 2,27 ± 0,22 b 0,0015 (0,0012 – 0,0019) a 0,0056 (0,0044 – 0,0076) a 453 2,63 (6)

41

Tabela 5. Toxicidade de extratos aquosos de plantas e do inseticida lambda-cialotrina + tiametoxam (L-C + T) (Platinum Neo®)

sobre ninfas de 24-48h de idade, primeiro-segundo ínstares, de Myzus persicae, após cinco dias. Temp.: 25 ± 1 ºC, UR: 70 ± 10% e 12h

de fotofase.

1Número de insetos usados no bioensaio.

2Erro-padrão (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo erro-padrão).

3Concentrações letais (CL50 e CL90) e intervalo de confiança das CL50 e CL90 a 95% de probabilidade (IC a 95%) (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não

diferem entre si pelo IC a 95%).

4Razão de toxicidade = maior CL50/outras CL50.

5Qui-quadrado e graus de liberdade.

6Controle positivo.

7A CL90 e o IC a 95% não puderam ser estimados devido à baixa atividade inseticida do extrato.

Tratamentos N1 Inclinação ± EP

2 CL50 (IC a 95%)

3 (% m/v) CL90 (IC a 95%)

3 (% m/v) RT50

4

2 (GL)

5

Fumo 299 3,62 ± 0,59 a 0,30 (0,23 – 0,36) b 0,68 (0,56 – 0,92) b 28,1 3,45 (4)

Alho-branco 301 4,36 ± 1,03 a 8,42 (7,29 – 10,12) c 7

– 1,32 (4)

Pimenta-roxa 370 3,86 ± 0,59 a 7,08 (5,89 – 8,04) c 7 1,2 4,36 (5)

L-C + T6 355 2,61 ± 0,28 b 0,00013 (0,00011 – 0,00015) a 0,00040 (0,00032 – 0,00054) a 64769 1,61 (5)

42

Tabela 6. Toxicidade de extratos aquosos de plantas e do inseticida lambda-cialotrina + tiametoxam (L-C + T) (Platinum Neo®)

sobre ninfas de segundo ínstar de Bemisia tabaci, após cinco dias. Temp.: 25 ± 2 ºC, UR: 70 ± 10% e 12h de fotofase.

1Número de insetos usados no bioensaio.

2Erro-padrão (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo erro-padrão).

3Concentrações letais (CL50 e CL90) e intervalo de confiança das CL50 e CL90 a 95% de probabilidade (IC a 95%) (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não

diferem entre si pelo IC a 95%).

4Razão de toxicidade = maior CL50/outras CL50.

5Qui-quadrado e graus de liberdade.

6Controle positivo.

Tratamentos N1 Inclinação ± EP

2 CL50 (IC a 95%)

3 (% m/v) CL90 (IC a 95%)

3 (% m/v) RT50

4

2 (GL)

5

Fumo 2165 0,94 ± 0,04 c 0,12 (0,09 – 0,16) b 2,79 (1,92 – 4,39) b 29,8 7,76 (5)

Pimenta-roxa 2140 2,18 ± 0,09 a 3,57 (3,31 – 3,84) c 13,86 (12,42 – 15,69) c – 3,14 (5)

L-C + T6 2629 1,05 ± 0,04 b 0,0015 (0,0013 – 0,0018) a 0,0256 (0,0211 – 0,0316) a 2380 5,43 (6)

43

Tabela 7. Toxicidade do extrato etanólico de fumo e do inseticida lambda-cialotrina + tiametoxam (L-C + T) (Platinum Neo®)

sobre ninfas de 48-72h de idade, primeiro-segundo ínstares, de Frankliniella schultzei, após cinco dias. Temp.: 25 ± 1 ºC, UR: 70 ±

10% e 12h de fotofase.

1Número de insetos usados no bioensaio.

2Erro-padrão (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo erro-padrão).

3Concentrações letais (CL50 e CL90) e intervalo de confiança das CL50 e CL90 a 95% de probabilidade (IC a 95%) (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não

diferem entre si pelo IC a 95%).

4Razão de toxicidade = maior CL50/menor CL50.

5Qui-quadrado e graus de liberdade.

6Controle positivo.

Tratamentos N1 Inclinação ± EP

2 CL50 (IC a 95%)

3 (% m/v) CL90 (IC a 95%)

3 (% m/v) RT50

4

2 (GL)

5

Fumo 373 3,18 ± 0,48 a 0,08 (0,06 – 0,09) b 0,20 (0,16 – 0,28) b – 1,34 (5)

L-C + T6 384 2,27 ± 0,22 b 0,0015 (0,0012 – 0,0019) a 0,0056 (0,0044 – 0,0076) a 53,3 2,63 (6)

44

Tabela 8. Toxicidade de extratos etanólicos de plantas e do inseticida lambda-cialotrina + tiametoxam (L-C + T) (Platinum Neo®)

sobre ninfas de 24-48h de idade, primeiro-segundo ínstares, de Myzus persicae, após cinco dias. Temp.: 25 ± 1 ºC, UR: 70 ± 10% e 12h

de fotofase.

1Número de insetos usados no bioensaio.

2Erro-padrão (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo erro-padrão).

3Concentrações letais (CL50 e CL90) e intervalo de confiança das CL50 e CL90 a 95% de probabilidade (IC a 95%) (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não

diferem entre si pelo IC a 95%).

4Razão de toxicidade = maior CL50/outras CL50.

5Qui-quadrado e graus de liberdade.

6Controle positivo.

Tratamentos N1 Inclinação ± EP

2 CL50 (IC a 95%)

3 (% m/v) CL90 (IC a 95%)

3 (% m/v) RT50

4

2 (GL)

5

Fumo 371 2,86 ± 0,28 b 0,017 (0,014 – 0,020) b 0,047 (0,038 – 0,062) b 22,0 2,02 (5)

Pimenta-roxa 426 3,95 ± 0,37 a 0,374 (0,331 – 0,416) c 0,789 (0,693 – 0,932) c – 3,32 (6)

L-C + T6 355 2,61 ± 0,28 b 0,00013 (0,00011 – 0,00015) a 0,00040 (0,00032 – 0,00054) a 2877 1,61 (5)

45

Tabela 9. Toxicidade de extratos etanólicos de plantas e do inseticida lambda-cialotrina + tiametoxam (L-C + T) (Platinum Neo®)

sobre ninfas de segundo ínstar de Bemisia tabaci, após cinco dias. Temp.: 25 ± 2 ºC, UR: 70 ± 10% e 12h de fotofase.

1Número de insetos usados no bioensaio.

2Erro-padrão (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo erro-padrão).

3Concentrações letais (CL50 e CL90) e intervalo de confiança das CL50 e CL90 a 95% de probabilidade (IC a 95%) (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não

diferem entre si pelo IC a 95%).

4Razão de toxicidade = maior CL50/outras CL50.

5Qui-quadrado e graus de liberdade.

6Controle positivo.

Tratamentos N1 Inclinação ± EP

2 CL50 (IC a 95%)

3 (% m/v) CL90 (IC a 95%)

3 (% m/v) RT50

4

2 (GL)

5

Fumo 2691 2,57 ± 0,96 a 0,015 (0,014 – 0,017) b 0,124 (0,106 – 0,148) b 13,5 4,42 (6)

Pimenta-roxa 1925 2,08 ± 0,10 a 0,203 (0,174 – 0,233) c 0,837 (0,714 – 1,015) c – 6,54 (5)

L-C + T6 2629 1,05 ± 0,04 b 0,0015 (0,0013 – 0,0018) a 0,0256 (0,0211 – 0,0316) a 135,3 5,43 (6)

46

CAPÍTULO 3

DERIVADOS DA MAMONA VISANDO AO MANEJO DE VETORES DE VIROSES NO

TOMATEIRO1

VANDO M. RONDELLI2, DIRCEU PRATISSOLI

3, VAGNER T. DE QUEIROZ

4, EDMILSON J.

MARQUES2 E HUGO JOSÉ G. DOS SANTOS JUNIOR

3

2Departamento de Agronomia – Entomologia, Universidade Federal Rural de Pernambuco, Av.

Dom Manoel de Medeiros s/n, Dois Irmãos, 52171-900 Recife, PE, Brasil.

3Departamento de Produção Vegetal – NUDEMAFI, Centro de Ciências Agrárias da

Universidade Federal do Espírito Santo, Alto Universitário, s/n, 29500-000 Alegre, ES, Brasil.

4Departamento de Química e Física, Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal do

Espírito Santo, Alto Universitário, s/n, 29500-000 Alegre, ES, Brasil.

1Rondelli, V.M., D. Pratissoli, V.T. de Queiroz, E.J. Marques & H.J.G. dos Santos Junior.

Derivados da mamona visando ao manejo de vetores de viroses no tomateiro. A ser submetido.

47

RESUMO – A busca por alternativas de manejo aos insetos-praga é uma constante, e a utilização

de compostos oriundos de plantas, é cada vez mais pesquisado e adotado em alguns sistemas

agrícolas. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar derivados da mamona visando ao manejo de

vetores de viroses no tomateiro, Frankliniella schultzei, Myzus persicae e Bemisia tabaci. Desta

forma, foram avaliados o óleo de mamona, a torta de mamona, o ricinoleato de sódio, o ácido

ricinoléico e o inseticida químico sintético lambda-cialotrina + tiametoxam (Platinum Neo®)

(controle positivo). Para isso, foram pulverizadas sobre ninfas dos três vetores de viroses soluções

na concentração de 5% para os compostos da mamona e, uma solução do inseticida químico

sintético de acordo com a recomendação do fabricante. As concentrações letais (CL50 e CL90) dos

extratos que causaram mortalidade corrigida superior a 60% também foram estimadas. Os

derivados da mamona causaram mortalidade a F. schultzei entre 3,9 e 54,9%, a M. persicae entre

90,3 e 100% e a B. tabaci entre 13,9 e 97,1%. O teste de CL indicou que os extratos mais

eficientes sobre M. persicae são o ricinoleato de sódio, seguido pelo óleo de mamona e o extrato

da torta de mamona em tampão e sobre B. tabaci são o ricinoleato de sódio, o óleo de mamona e o

ácido ricinoléico, respectivamente.

PALAVRAS-CHAVE: Solanum lycopersicum, inseticidas botânicos, Ricinus communis, tripes,

pulgão-verde, mosca-branca

48

CASTOR BEAN DERIVATIVES AIMING THE MANAGEMENT OF TOMATO VIROSIS

VECTORS

ABSTRACT – The search for alternate ways of management to the pest-insects is a constant, and

the use of compounds derived from plants is each time more researched and adopted in some

agricultural systems. This way, the objective of this work was to evaluate castor bean derivatives

aiming the management of tomato virosis vectors, Frankliniella schultzei, Myzus persicae and

Bemisia tabaci. Therefore, castor bean oil, castor bean pie, sodium ricinoleate, ricinoleic acid and

the chemical synthetic insecticide thiamethoxam + lambda-cyhalothrin (Platinum Neo®) (positive

control) were evaluated. For this purpose, solutions at the concentration of 5% for castor bean

compounds and one solution of the chemical synthetic insecticide, according to the fabricant

recommendations were sprayed on the three virosis vectors nymphs. The lethal concentrations

(LC50 and LC90) of the extracts which caused corrected mortality superior to 60% were also

estimated. The derivatives of castor bean caused mortality to F. schultzei between 3.9 and 54.9%,

to M. persicae between 90.3 and 100% and to B. tabaci between 13.9 and 97.1%. The LC test

indicated that the most efficient extracts on M. persicae are sodium ricinoleate, followed by castor

bean oil and the castor bean pie extract in buffer and on B. tabaci is sodium ricinoleate, the castor

bean oil and the ricinoleic acid, respectively.

KEY WORDS: Solanum lycopersicum, botanical insecticides, Ricinus communis, thrips, green

peach aphid, whitefly

49

Introdução

O tomateiro, Solanum lycopersicum L. (Solanaceae), é a hortaliça mais estudada e

consumida no mundo (Barbosa et al. 2011, Guo et al. 2013). No Brasil, em 2012 a produção foi

de 3.664.299 t (IBGE 2013). A produção do tomate no Brasil poderia ser maior, se não fosse os

danos causados a esta cultura por pragas e patógenos (Kurozawa & Pavan 2005, Fornazier et al.

2010). Entre os insetos-praga, estão os vetores de viroses Frankliniella schultzei (Trybom)

(Thysanoptera: Thripidae), Myzus persicae (Sulzer) (Hemiptera: Aphididae) e Bemisia tabaci

(Genn.) (Hemiptera: Aleyrodidae). As perdas ocasionadas por essas pragas são relacionadas à

sucção de seiva e a transmissão de fitoviroses (Kurozawa & Pavan 2005, Borbón et al. 2006,

Fornazier et al. 2010).

F. schultzei transmite Tospovirus (vira-cabeça do tomateiro), Groundnut ring spot virus

(GRSV) e Tomato spotted wilt virus (TSWV). A incidência de Tospovirus é de 50 a 90% (Borbón

et al. 2006, Fornazier et al. 2010). M. persicae transmite Potato virus Y (PVY) (vírus Y), Tomato

yellow top virus (ToYTV) (topo amarelo) e Tomato bottom yellow leaf virus (TBYLV) (amarelo

baixeiro). No Brasil, PVY causa perdas de 20 a 70% e ToYTV pode reduzir a produção de flores

e frutos em aproximadamente 85% (Kurozawa & Pavan 2005). B. tabaci transmite geminivírus.

Esta virose pode causar perdas de até 100% em algumas áreas (Lima et al. 2001, Fornazier et al.

2010).

Os inseticidas sintéticos geralmente são utilizados para reduzir o nível populacional de

vetores de viroses no tomateiro (Raetano et al. 2003, Fornazier et al. 2010). Contudo, a utilização

constante destes produtos pode selecionar populações resistentes, devido à necessidade de

aplicações frequentes, além de ocasionar inúmeros efeitos colaterais negativos (Nimbalkar et al.

2009). Desta forma, métodos alternativos visando o manejo de pragas agrícolas têm sido

estudados (Roel 2001, Santiago et al. 2008, Mushobozy et al. 2009).

50

As plantas produzem compostos tóxicos aos herbívoros que podem ser extraídos dos seus

tecidos e utilizados de forma alternativa para manejar insetos-praga (Torres et al. 2006,

Vasconcelos et al. 2006, Santiago et al. 2008, Boiça Júnior et al. 2013, Costa et al. 2013). A

mamona, Ricinus communis L. (Euphorbiaceae), é uma planta perene nativa de regiões tropicais e

subtropicais do mundo que produz sementes mesmo em ambientes com baixa precipitação

pluviométrica (Hoffman et al. 2007, Furtado et al. 2012). Suas sementes são submetidas à

prensagem obtendo-se o óleo que é utilizado para a produção de biodiesel, e a torta como

subproduto (Melo et al. 2008, Pompeu et al. 2012). A atividade inseticida do óleo de mamona já

foi constatada sobre B. tabaci, Plutella xylostella (L.) (Lepidoptera: Plutellidae), Helicoverpa zea

(Boddie) (Lepidoptera: Noctuidae) e Zabrotes subfasciatus (Boh.) (Coleoptera: Chrysomelidae)

(Paula Neto & Bleicher 2003, Mushobozy et al. 2009, Bestete et al. 2011, Rondelli et al. 2011).

Triacilglicerol compõe a maior proporção do óleo de mamona e 80,5% deste composto é

ricinoleína, que quando hidrolizada origina o ácido ricinoléico (Weiss 1983, Moshkin 1986, Costa

et al. 2004). Este ácido inibe a reprodução do carrapato Rhipicephalus sanguineus (Latreille)

(Acari: Ixodidae) e pode ser um dos compostos do óleo de mamona com propriedade inseticida

(Arnosti et al. 2011, Sampieri et al. 2013). Além disso, na torta de mamona é encontrada a ricina,

uma potente toxina (Moshkin 1986, Pinkerton et al. 1999). Diante disso, os extratos derivados da

mamona podem ser opções no manejo dos vetores de viroses no tomateiro e serem utilizados na

agricultura orgânica.

Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade inseticida do óleo de mamona, da

torta de mamona, do ricinoleato de sódio, do ácido ricinoléico e do inseticida sintético lambda-

cialotrina + tiametoxam (controle positivo), visando ao manejo dos insetos vetores de viroses no

tomateiro, F. schultzei, M. persicae e B. tabaci.

51

Material e Métodos

O experimento foi conduzido no Setor de Entomologia do Núcleo de Desenvolvimento

Científico e Tecnológico em Manejo Fitossanitário (NUDEMAFI), no Centro de Ciências

Agrárias da Universidade Federal do Espírito Santo (CCA/UFES), situado em Alegre-ES. Foram

executadas as seguintes etapas:

Obtenção e Criação dos Insetos. F. schultzei foi coletado em flores de plantas de feijão-de-porco

(Canavalia ensiformis L.) no CCA/UFES, M. persicae em plantios de couve-manteiga (Brassica

oleracea L. var. acephala) no município de Alegre-ES (20º 45' 50" S 41º 31' 58" O) e B. tabaci

em plantas de tomate no CCA/UFES.

A metodologia de criação de F. schultzei foi modificada de Morais et al. (2012). Os insetos

foram mantidos em câmara climatizada a 25 ± 1 ºC, umidade relativa de 70 ± 10% e fotofase de

12h, em gaiolas de acrílico de base quadrada de 121,0 cm2 e 3,2 cm de altura. Colocou-se papel

filtro umedecido no fundo da gaiola para manter a umidade. Para alimentação das ninfas ofereceu-

se a cada dois dias uma folha cotiledonar de feijão-de-porco com aproximadamente 18 cm de

altura. Estas folhas foram coletadas deixando-se aproximadamente 3 cm do pecíolo para a

inserção, primeiramente, em chumaço de algodão, e em seguida, em frascos anestésicos de 0,7 x

5,0 cm (diâmetro e altura) contendo água deionizada para manter sua turgescência. As plantas

foram cultivadas em bandejas de isopor de 72 células contendo mistura de solo e esterco bovino

na proporção de 6:1.

As gaiolas foram fechadas com filme plástico contendo pequenos furos feitos com um

alfinete entomológico. Após a cópula (48h após a emergência dos adultos), fêz-se a sexagem,

colocando-se 60 fêmeas em cada gaiola. Para alimentação ofereceu-se diariamente uma folha

cotiledonar de feijão-de-porco e pólen de mamona (Ricinus communis L.) para aumentar o

52

desempenho reprodutivo das fêmeas. Em seguida, as posturas foram coletadas diariamente e

transferidas para novas gaiolas (Morais et al. 2012).

A criação de M. persicae foi realizada em câmara climatizada a 25 ± 1 ºC, umidade relativa

de 70 ± 10% e fotofase de 12h, sobre discos foliares de couve-manteiga orgânica de 8,0 cm de

diâmetro, dentro de placas de Petri de 9,0 x 1,3 cm (diâmetro e altura) revestidas com papel filtro.

A cada dois dias, os insetos foram transferidos para placas esterilizadas, as quais continham novos

discos foliares (Pinheiro et al. 2013).

A criação de B. tabaci foi realizada dentro de gaiolas de metal (1,0 x 1,0 x 0,8 m) revestidas

com tela anti-afídeo. Os adultos foram mantidos em uma gaiola em sala climatizada a 25 ± 2 ºC,

umidade relativa de 70 ± 10% e fotofase de 12h e as ninfas em duas gaiolas em casa telada com

temperatura entre 16 e 41 ºC. Diariamente, uma planta de tomateiro da cultivar “Alambra F1”,

cultivada em vaso de dois litros contendo mistura de solo e esterco bovino na proporção de 6:1 foi

oferecida aos adultos para alimentação e postura (Baldin et al. 2007).

Obtenção dos Derivados da Mamona. Foram avaliados o óleo e a torta de mamona, o

ricinoleato de sódio, o ácido ricinoléico e o inseticida sintético lambda-cialotrina + tiametoxam

(Platinum Neo®

) (Syngenta), como controle positivo. Para a obtenção do óleo e da torta de

mamona, frutos maduros da mamoneira (R. communis) da variedade “IAC 80” foram coletados

em Irecê-BA, e expostos ao sol para secagem completa e desprendimento das sementes, que

foram, em seguida, submetidas à prensagem a frio.

O óleo de mamona foi utilizado na concentração de 5% m/v em Tween® 80 a 0,01% m/v e

acetona a 2% v/v. Na testemunha usou-se água deionizada mais Tween® 80 a 0,01% m/v e

acetona a 2% v/v. O extrato da torta de mamona foi obtido a partir de 20 g de torta moída em

cadinho. Em seguida, o material vegetal foi transferido para béquer contendo solução tampão

KH2PO4, NaCl e Na2HPO4, de massas respectivamente: 3,40; 0,88; e 3,55 g/L de água deionizada

53

(pH 6,0). A mistura foi mantida em agitador magnético por 30 min. e posteriormente foi filtrada

em tecido voal. O extrato obtido foi diluído em relação à massa da torta para a concentração de

5% m/v, usando a solução tamponada citada anteriormente. Na testemunha utilizou-se apenas

solução tamponada. O mesmo procedimento realizado para obtenção do extrato da torta de

mamona utilizando solução tampão também foi realizado utilizando água deionizada para

observar se a atividade inseticida deste extrato em água deionizada era menor. Neste caso, na

testemunha utilizou-se água deionizada.

O ricinoleato de sódio (Suíça produtos químicos, código 060109, Espírito Santo, Brasil) foi

utilizado na concentração de 5% m/v em água deionizada. Na testemunha usou-se água

deionizada. O ácido ricinoléico foi obtido a partir do ricinoleato de sódio (5% m/v), acrescentando

HCl até pH 7,0. Considerando que esta reação além de formar o ácido ricinoléico libera NaCl, a

testemunha foi preparada contendo a mesma quantidade de NaCl produzida na reação e o valor de

pH foi ajustado para 7,0.

O inseticida lambda-cialotrina + tiametoxam (Platinum Neo®) foi usado na concentração

máxima recomendada para o controle dos vetores de viroses no tomateiro, ou seja, 0,075% v/v

(75 mL/100L). Como a densidade do produto é de 1,066 m/v, este foi diluído na proporção de

0,08 g em 100 mL de água deionizada, obtendo-se o produto na concentração de 0,08% m/v. Na

testemunha usou-se água deionizada.

Teste de Atividade Inseticida. Usou-se no bioensaio de F. schultzei ninfas entre 48 e 72h de

idade, no primeiro-segundo ínstares (Pinent & Carvalho 1998). Em placas de Petri (9,0 x 1,3 cm)

revestidas com papel filtro, dez ninfas de F. schultzei foram transferidas para a face abaxial de

folhas cotiledonares de feijão-de-porco (repetição) com o auxílio de um pincel de cerdas finas e

um funil branco com o bico cortado, devido à agilidade dos insetos. As soluções foram aplicadas

em ambos os lados das folhas. Um chumaço de algodão foi colocado no pecíolo da folha de

54

feijão-de-porco e este foi introduzido em frasco anestésico contendo água deionizada para manter

a turgescência da folha. As placas foram fechadas com filme plástico contendo seis furos feitos

com um alfinete entomológico para possibilitar trocas gasosas (Pinheiro et al. 2013).

No bioensaio com M. persicae foram usadas ninfas entre 24 e 48h de idade, no primeiro-

segundo ínstares (Chagas Filho et al. 2005). Dez insetos foram colocados na face abaxial de

discos foliares de couve orgânica medindo 4,5 cm de diâmetro (repetição) em placas de Petri (9,0

x 1,3 cm) revestidas com papel filtro. As soluções foram aplicadas em ambos os lados das folhas e

a placa de Petri foi fechada (Pinheiro et al. 2013).

Para a aplicação das soluções, as folhas contendo os insetos foram pulverizadas em sala

climatizada, usando torre de Potter com pressão de 15 lb/pol2 e 6 mL de solução para cada lado da

folha, tendo-se depositado um volume médio de 1,62 mg/cm2 (Rondelli et al. 2011). As placas

foram mantidas em câmara climatizada a 25 ± 1 ºC, umidade relativa de 70 ± 10% e fotofase de

12h. As folhas foram trocadas no segundo dia, e novamente quando necessário. A mortalidade foi

avaliada até o quinto dia, caracterizada pela total imobilidade dos insetos quando tocados com um

pincel de cerdas macias.

Para os experimentos com B. tabaci, plantas de tomateiro da cultivar “Alambra F1” com 30

dias de vida em vasos de um litro, contendo mistura de solo e esterco bovino na proporção de 6:1

foram mantidas por 48h na gaiola de adultos da praga para oviposição. As plantas foram levadas

para casa telada e quando as ninfas estavam no segundo ínstar, as soluções foram aplicadas em

sala climatizada, usando aerógrafo (Super Tool®

) com bico de 0,35 mm acoplado a um

compressor (Wraight et al. 2000). O bico do pulverizador foi posicionado à distância de 25 cm

das folhas e ambos os lados foram pulverizadas até o escorrimento. O experimento foi mantido

em sala climatizada a 25 ± 2 ºC, umidade relativa de 70 ± 10% e fotofase de 12h. A avaliação da

mortalidade foi efetivada no quinto dia, sendo avaliados quatro discos (2,8 cm2) de folíolos da

55

terceira e quarta folhas da planta (repetição). As ninfas vivas foram diferenciadas das mortas por

se manterem túrgidas e estarem em estádio de desenvolvimento mais avançado. Calculou-se a

média de ninfas mortas dos quatro discos foliares por repetição (Bleicher et al. 2007, Islam et al.

2010).

Para todos os bioensaios utilizou-se o delineamento experimental inteiramente casualizado,

com 10 repetições. A mortalidade corrigida foi calculada em relação a cada testemunha pela

fórmula de Abbott (1925). Os dados foram testados para normalidade e homogeneidade de

variância, sendo transformados para arcsen (x/100)1/2

. Posteriormente, foram submetidos à análise

de variância (ANOVA) e as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade,

utilizando o programa R (Ferreira et al. 2011).

Estimativa das Concentrações Letais (CL50 e CL90). A estimativa das CL50 e CL90 foi feita com

os extratos que causaram mortalidade corrigida superior a 60%. Esta etapa do bioensaio foi

realizada de acordo com os procedimentos descritos na etapa destinada ao teste de atividade

inseticida. A obtenção dos extratos foi realizada conforme descrito anteriormente. Para a

estimativa das concentrações letais foram utilizadas oito concentrações espaçadas em escala

logarítmica, sendo os limites inferior (concentração que causa a morte de aproximadamente 15%

dos insetos) e superior (concentração que causa a morte de aproximadamente 95% dos insetos)

determinados mediante ensaios preliminares, além das respectivas testemunhas (Tabela 1).

Utilizou-se o delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco repetições. As CL50

e CL90 foram estimadas usando a análise de Probit com auxílio do programa Polo-PC (Finney

1971, LeOra Software 1987).

56

Resultados e Discussão

Rendimento do Óleo de Mamona. O rendimento do óleo de mamona da variedade “IAC 80” foi

de 21,5% m/m. Pompeu et al. (2012) relataram que o mesmo obtido por prensagem a quente entre

90 e 100 ºC, e sem a utilização de solvente, teve rendimento de 50%. Assim, essa diferença de

rendimento de óleo provavelmente está associada ao método utilizado na extração.

Teste de Atividade Inseticida. A maior mortalidade observada para F. schultzei foi causada pelo

lambda-cialotrina + tiametoxam (controle positivo) (F5, 54 = 129,84; P < 0,0001), o qual causou

mortalidade de 100%. Dentre os derivados da mamona, o ácido ricinoléico foi o mais tóxico,

provocando mortalidade de 54,9% e para os demais a mortalidade variou entre 22,0 e 3,9%

(Tabela 2).

O óleo de mamona, ricinoleato de sódio, lambda-cialotrina + tiametoxam, ácido ricinoléico

e o extrato da torta de mamona em tampão foram os tratamentos mais tóxicos para M. persicae

(F5, 54 = 7,66; P < 0,0001), onde observou-se mortalidade de 100% para os três primeiros

tratamentos, de 97,9% para o ácido ricinoléico e de 96,5% para a torta. Contudo, a mortalidade

causada pelo extrato da torta de mamona em água deionizada também foi elevada (90,3%)

(Tabela 2).

Os tratamentos que proporcionaram maior mortalidade a B. tabaci foram o ricinoleato de

sódio, o lambda-cialotrina + tiametoxam e o óleo de mamona (F5, 54 = 249,24; P < 0,0001), os

quais causaram mortalidade de 97,1, 96,9 e 96,7%, respectivamente. O ácido ricinoléico causou

mortalidade de 93,1% (Tabela 2).

A atividade inseticida do óleo de mamona já foi constatada sobre diversas espécies de

insetos. O extrato causou mortalidade de 53,9% a P. xylostella e de 44% a H. zea (Bestete et al.

2011, Rondelli et al. 2011). Também causou deterrência alimentar a Z. subfasciatus, reduzindo as

injúrias às sementes de feijão (Mushobozy et al. 2009).

57

Os óleos causam danos à camada de cera sobre a cutícula dos insetos, interferindo no

metabolismo e na respiração, além de causar repelência (Villas Bôas et al. 1997). De acordo com

Paula Neto & Bleicher (2003), vários óleos de origem vegetal têm atividade inseticida, como o

óleo de soja que causou mortalidade a B. tabaci, no entanto, os óleos de mamona e gergelim

foram mais eficientes.

A atividade inseticida do extrato da torta de mamona foi avaliada pelo fato da ricina estar

presente no endosperma das sementes e não ser extraída juntamente com o óleo da semente ou

solúvel nele (Pinkerton et al. 1999, Severino 2005). A ricina possui duas cadeias com diferentes

funções que atuam de forma conjunta, sendo uma das mais tóxicas estudadas pelo homem

(Moshkin 1986). Uma destas cadeias inibe a enzima alfa-amilase, impedindo a digestão e

absorção do amido, enquanto a outra se liga aos ribossomos promovendo a morte da célula por

inibição da síntese protéica (Lord et al. 1994, Olsnes & Kozlov 2001).

Observou-se que a mortalidade de F. schultzei ocasionada pelo extrato da torta de mamona

em tampão ou água deionizada foi inferior a 10% e não diferiu (Tabela 2). No entanto, sobre M.

persicae e B. tabaci observou-se que o extrato da torta de mamona em tampão foi mais tóxico

quando comparado ao extrato obtido utilizando água deionizada. Portanto, a solução tamponada

provavelmente assegurou que não ocorresse grandes variações no pH do meio e as toxinas não

perdessem a atividade inseticida. A atividade inseticida da torta de mamona também foi

constatada por Lins et al. (2013) pela aplicação ao redor de mudas de bananeira da cultivar

“Terra” em concentrações de 12 a 24 g por planta, sendo observada redução da população de

Cosmopolites sordidus (Germar) (Coleoptera: Curculionidae) e do número de galerias.

Em relação à toxicidade do ricinoleato de sódio sobre pragas, não foram encontrados dados

na literatura, contudo, Burdock et al. (2006) relataram que este composto é obtido pela

saponificação do óleo de mamona. Assim, o ricinoleato de sódio é considerado um sabão e sua

58

toxicidade sobre os insetos pode ser devido à dissolução de alguma estrutura vital, visto que Brito

et al. (2009) constataram que diferentes tipos de sabões são eficientes no controle do pulgão da

erva-doce, Hyadaphis foeniculi (Passerini) (Hemiptera: Aphididae).

Estimativa das Concentrações Letais (CL50 e CL90). O lambda-cialotrina + tiametoxam foi o

tratamento mais tóxico para M. persicae de acordo com o intervalo de confiança a 95% de

probabilidade (IC a 95%) (CL50 de 0,00013%), apresentando razão de toxicidade de 10.154 vezes

em relação ao ácido ricinoléico (Tabela 3). Entre os derivados da mamona, a menor CL50 foi

obtida pelo ricinoleato de sódio (0,29%), seguida pelo óleo de mamona e pelo extrato da torta de

mamona em tampão (0,44 e 0,46%, respectivamente). O extrato da torta de mamona em água

deionizada e o ácido ricinoléico foram os derivados da mamona menos tóxicos para M. persicae

(CL50 de 1,20 e 1,32%, respectivamente).

A menor CL90 para M. persicae também foi observada utilizando o lambda-cialotrina +

tiametoxam (0,00040%), seguida pelo ricinoleato de sódio (0,49%) (Tabela 3). As CL90 do óleo

de mamona e do extrato da torta de mamona em tampão não diferiram baseado no IC a 95% (1,21

e 1,82%, respectivamente). Contudo, a CL90 do óleo de mamona foi menor em comparação a do

ácido ricinoléico (2,30%). As retas de concentração-mortalidade do ricinoleato de sódio e do

ácido ricinoléico foram as mais inclinadas de acordo com o erro-padrão (5,62 e 5,28,

respectivamente) e a menos inclinada foi a do extrato da torta de mamona em água deionizada

(1,60). Retas mais inclinadas proporcionam maior variação na mortalidade da praga em função da

variação da concentração do extrato.

A menor CL50 para B. tabaci foi observada no tratamento lambda-cialotrina + tiametoxam

(0,0015%), apresentando razão de toxicidade de 953 vezes em comparação ao ácido ricinoléico

(Tabela 4). Considerando os derivados da mamona testados, a menor CL50 foi causada pelo

ricinoleato de sódio (0,21%), seguido pelo óleo de mamona e pelo ácido ricinoléico (0,30 e

59

1,43%, respectivamente). No tratamento lambda-cialotrina + tiametoxam a CL90 foi de 0,0256%.

Com o ricinoleato de sódio foi observada CL90 de 0,57%. A reta de concentração-mortalidade do

ricinoleato de sódio foi a mais inclinada de acordo com o erro-padrão (3,01) e a menos inclinada

foi a do lambda-cialotrina + tiametoxam (1,05).

A CL90 do óleo de mamona em B. tabaci foi de 1,95% (Tabela 4). Esse resultado

assemelha-se ao encontrado por Paula Neto & Bleicher (2003), que observaram eficiência de

controle de ninfas de B. tabaci de 85,5% com o óleo de mamona na concentração de 2,0% v/v.

Em outro estudo, o óleo de mamona adicionado na dieta de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith)

(Lepidoptera: Noctuidae) na concentração de 2.690 ppm (0,269%) causou mortalidade larval de

50% e na concentração de 16.000 ppm (1,6%) proporcionou mortalidade de 100%, sendo que em

concentrações inferiores a 1,6% este óleo aumentou a duração do período larval e pupal e reduziu

o peso de pupas (Ramos-López et al. 2010).

O óleo de mamona foi mais tóxico em relação ao ácido ricinoléico sobre M. persicae (três

vezes) (Tabela 3) e sobre B. tabaci (4,8 vezes) (Tabela 4). O ácido ricinoléico também tem efeito

sobre outros artrópodes, pois inibiu a reprodução do carrapato R. sanguineus (Arnosti et al. 2011,

Sampieri et al. 2013). Aproximadamente 90% do óleo de mamona é composto por triacilglicerol,

e 80,5% deste triacilglicerol é de ricinoleína, que quando hidrolizada origina o ácido ricinoléico

(Weiss 1983, Moshkin 1986, Costa et al. 2004). Isso sugere que parte da atividade inseticida do

óleo de mamona é atribuída ao ácido ricinoléico e que outros componentes deste óleo também têm

atividade inseticida, pois segundo Roel (2001), nos inseticidas botânicos ocorre a associação de

vários princípios ativos sobre as pragas. Além disso, o óleo de mamona é viscoso e pode ter

dificultado a locomoção e alimentação das ninfas, favorecendo a mortalidade.

Os derivados da mamona avaliados são mais tóxicos para M. persicae e B. tabaci em

comparação com F. schultzei. Baseado na CL50, os extratos mais eficientes sobre M. persicae são

60

o ricinoleato de sódio, seguido pelo óleo de mamona e o extrato da torta de mamona em tampão e

sobre B. tabaci são o ricinoleato de sódio, o óleo de mamona e o ácido ricinoléico,

respectivamente.

Agradecimentos

À Reestruturação e Expansão das Universidades Federais/Coordenação de

Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (REUNI/CAPES) pela concessão de bolsa de

estudos ao primeiro autor; ao Programa de Pós-graduação em Entomologia Agrícola da

Universidade Federal Rural de Pernambuco (PPGEA/UFRPE) e ao Núcleo de Desenvolvimento

Científico e Tecnológico em Manejo Fitossanitário do Centro de Ciências Agrárias da

Universidade Federal do Espírito Santo (NUDEMAFI-CCA/UFES) por apoiarem o

desenvolvimento dessa pesquisa; ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e

Tecnológico (CNPq) e à Fundação de Amparo a Pesquisa do Espírito Santo (FAPES) pelo apoio

financeiro.

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65

Tabela 1. Limites inferior e superior das concentrações de extratos derivados da mamona e do inseticida lambda-cialotrina +

tiametoxam (L-C + T) (Platinum Neo®) (controle positivo), em porcentagem (m/v), para estimativa das concentrações letais (CL50 e

CL90) sobre ninfas de Myzus persicae e Bemisia tabaci.

Tratamentos M. persicae B. tabaci

Óleo de mamona 0,15 – 3,03 0,055 – 5,0

Torta de mamona (Tampão)1 0,23 – 3,2

3

Torta de mamona (AD)2 0,13 – 5,0

3

Ricinoleato de sódio 0,1 – 0,6 0,1 – 0,75

Ácido ricinoléico

L-C + T

0,3 – 3,6

0,00002 – 0,00069

0,3 – 5,0

0,00010 – 0,08000

1Extrato da torta de mamona em tampão.

2Extrato da torta de mamona em água deionizada.

3Não se avaliou.

66

Tabela 2. Mortalidade corrigida (%) de ninfas de Frankliniella schultzei, Myzus persicae e Bemisia tabaci causada por extratos

derivados da mamona e o inseticida lambda-cialotrina + tiametoxam (L-C + T) (Platinum Neo®), após cinco dias

1, 2.

Tratamentos Concentração (% m/v) F. schultzei M. persicae B. tabaci

Óleo de mamona 5 3,9 ± 2,55 d 100,0 ± 0,00 a 96,7 ± 0,67 ab

Torta de mamona (Tampão)3 5 9,7 ± 1,52 cd 96,5 ± 1,81 a 32,6 ± 3,58 c

Torta de mamona (AD)4 5 5,9 ± 2,82 d 90,3 ± 2,45 b 13,9 ± 1,38 d

Ricinoleato de sódio 5 22,0 ± 4,92 c 100,0 ± 0,00 a 97,1 ± 1,21 a

Ácido ricinoléico 5 54,9 ± 3,43 b 97,9 ± 1,42 a

93,1 ± 0,81 b

L-C + T 0,085 100,0 ± 0,00 a 100,0 ± 0,00 a 96,9 ± 0,75 ab

1Médias (± EP) (n = 10 repetições) seguidas pela mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade.

2Para análise, os dados foram transformados para arcsen (x/100)1/2.

3Extrato da torta de mamona em tampão.

4Extrato da torta de mamona em água deionizada.

50,08% m/v = 0,075% v/v = 75 mL/100L (controle positivo na concentração máxima recomendada para o controle dos vetores de viroses no tomateiro).

67

Tabela 3. Toxicidade de extratos derivados da mamona e do inseticida lambda-cialotrina + tiametoxam (L-C + T) (Platinum

Neo®) sobre ninfas de 24-48h de idade, primeiro-segundo ínstares, de Myzus persicae, após cinco dias. Temp.: 25 ± 1 ºC, UR: 70 ±

10% e 12h de fotofase.

1Número de insetos usados no bioensaio.

2Erro-padrão (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo erro-padrão).

3Concentrações letais (CL50 e CL90) e intervalo de confiança das CL50 e CL90 a 95% de probabilidade (IC a 95%) (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não diferem entre si

pelo IC a 95%).

4Razão de toxicidade = maior CL50/outras CL50.

5Qui-quadrado e graus de liberdade.

6Extrato da torta de mamona em tampão.

7Extrato da torta de mamona em água deionizada.

8Controle positivo.

9A CL90 e o IC a 95% não puderam ser estimados devido à baixa atividade inseticida do extrato.

Tratamentos N1 Inclinação ± EP

2 CL50 (IC a 95%)

3 (% m/v) CL90 (IC a 95%)

3 (% m/v) RT50

4

2 (GL)

5

Óleo de mamona 395 2,92 ± 0,31 b 0,44 (0,37 – 0,52) c 1,21 (1,00 – 1,58) c 3,0 3,52 (6)

Torta de mamona (Tampão)6 410 2,15 ± 0,23 c 0,46 (0,37 – 0,56) c 1,82 (1,47 – 2,45) dc 2,9 2,85 (6)

Torta de mamona (AD)7 289 1,60 ± 0,28 d 1,20 (0,82 – 1,62) d

9 1,1 3,05 (4)

Ricinoleato de sódio 369 5,62 ± 0,78 a 0,29 (0,24 – 0,33) b 0,49 (0,43 – 0,63) b 4,6 5,45 (5)

Ácido ricinoléico 398 5,28 ± 0,62 a 1,32 (1,19 – 1,44) d 2,30 (2,06 – 2,70) d – 5,47 (6)

L-C + T8 355 2,61 ± 0,28 bc 0,00013 (0,00011 – 0,00015) a 0,00040 (0,00032 – 0,00054) a 10154 1,61 (5)

68

Tabela 4. Toxicidade de extratos derivados da mamona e do inseticida lambda-cialotrina + tiametoxam (L-C + T) (Platinum

Neo®) sobre ninfas de segundo ínstar de Bemisia tabaci, após cinco dias. Temp.: 25 ± 2 ºC, UR: 70 ± 10% e 12h de fotofase.

1Número de insetos usados no bioensaio.

2Erro-padrão (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo erro-padrão).

3Concentrações letais (CL50 e CL90) e intervalo de confiança das CL50 e CL90 a 95% de probabilidade (IC a 95%) (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não

diferem entre si pelo IC a 95%).

4Razão de toxicidade = maior CL50/outras CL50.

5Qui-quadrado e graus de liberdade.

6Controle positivo.

7A CL90 e o IC a 95% não puderam ser estimados devido à baixa atividade inseticida do extrato.

Tratamentos N1 Inclinação ± EP

2 CL50 (IC a 95%)

3 (% m/v) CL90 (IC a 95%)

3 (% m/v) RT50

4

2 (GL)

5

Óleo de mamona 2145 1,58 ± 0,06 c 0,30 (0,25 – 0,36) c 1,95 (1,54 – 2,60) c 4,8 4,58 (4)

Ricinoleato de sódio 1945 3,01 ± 0,14 a 0,21 (0,19 – 0,23) b 0,57 (0,50 – 0,67) b 6,8 5,94 (4)

Ácido ricinoléico 1722 2,27 ± 0,17 b 1,43 (1,21 – 1,65) d 7 – 6,90 (5)

L-C + T6 2629 1,05 ± 0,04 d 0,0015 (0,0013 – 0,0018) a 0,0256 (0,0211 – 0,0316) a 953 5,43 (6)

69

CAPÍTULO 4

FUNGOS ENTOMOPATOGÊNICOS VISANDO AO MANEJO DE VETORES DE VIROSES

NO TOMATEIRO1

VANDO M. RONDELLI2, HUGO JOSÉ G. DOS SANTOS JUNIOR

3, DIRCEU PRATISSOLI

3 E EDMILSON J.

MARQUES2

2Departamento de Agronomia – Entomologia, Universidade Federal Rural de Pernambuco, Av.

Dom Manoel de Medeiros s/n, Dois Irmãos, 52171-900 Recife, PE, Brasil.

3Departamento de Produção Vegetal – NUDEMAFI, Centro de Ciências Agrárias da

Universidade Federal do Espírito Santo, Alto Universitário, s/n, 29500-000 Alegre, ES, Brasil.

1Rondelli, V.M., H.J.G. dos Santos Junior, D. Pratissoli & E.J. Marques. Fungos

entomopatogênicos visando ao manejo de vetores de viroses no tomateiro. A ser submetido.

70

RESUMO – Os insetos vetores de viroses no tomateiro limitam a produção e normalmente são

controlados com inseticidas químicos. Contudo, os fungos entomopatogênicos apresentam-se

como alternativa ao manejo dessas pragas. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar

formulações de fungos entomopatogênicos visando ao manejo dos vetores de viroses no

tomateiro, Frankliniella schultzei, Myzus persicae e Bemisia tabaci. Dessa forma, foram avaliados

os fungos Beauveria bassiana (Boveril®

WP), Metarhizium anisopliae (Metarril® WP e Metarril

®

SC) e Lecanicillium longisporum (Vertirril®

WP). Para isso, verificou-se a patogenicidade,

aplicando-se suspensões na concentração de 107 conídios/mL sobre as ninfas dos insetos.

Posteriormente, as concentrações letais (CL50 e CL90) dos fungos mais eficientes foram estimadas.

A mortalidade confirmada sobre F. schultzei variou entre 27,0 e 71,8%, sobre M. persicae entre

23,0 e 98,2% e sobre B. tabaci entre 90,8 e 95,8%. Baseado na CL50, M. anisopliae (Metarril® WP

e Metarril® SC) é o fungo mais virulento para F. schultzei; L. longisporum (Vertirril

® WP) para

M. persicae; e B. bassiana (Boveril®

WP) e M. anisopliae (Metarril® WP) são igualmente

virulentos para B. tabaci.

PALAVRAS-CHAVE: Solanum lycopersicum, manejo fitossanitário de pragas, controle

microbiano, tripes, pulgão-verde, mosca-branca

71

ENTOMOPATHOGENIC FUNGI AIMING THE MANAGEMENT OF TOMATO VIROSIS

VECTORS

ABSTRACT – The insects which are tomato virosis vectors limit production and are usually

controlled by chemical insecticides. However, the entomopathogenic fungi are presented as an

alternate method of management of these pests. This way, the objective of this work was to

evaluate entomopathogenic fungi formulations aiming the management of tomato virosis vectors,

Frankliniella schultzei, Myzus persicae and Bemisia tabaci. Therefore, the fungi Beauveria

bassiana (Boveril® WP), Metarhizium anisopliae (Metarril

® WP and Metarril

® SC) and

Lecanicillium longisporum (Vertirril®

WP) were evaluated. For this purpose, the pathogenicity

was verified, with the application of suspensions at the concentration of 107 conidia/mL on the

insect nymphs. Later, the lethal concentrations (LC50 and LC90) of the most efficient fungi were

estimated. The confirmed mortality on F. schultzei varied between 27.0 and 71.8%, on M.

persicae between 23.0 and 98.2% and on B. tabaci between 90.8 and 95.8%. Based on LC50, M.

anisopliae (Metarril® WP and Metarril

® SC) is the most virulent fungus to F. schultzei; L.

longisporum (Vertirril® WP) to M. persicae; and B. bassiana (Boveril

® WP) and M. anisopliae

(Metarril® WP) are equally virulent to B. tabaci.

KEY WORDS: Solanum lycopersicum, phytosanitary pest management, microbial control, thrips,

green peach aphid, whitefly

72

Introdução

O tomateiro (Solanum lycopersicum L.) é uma hortaliça da família Solanaceae conhecida e

consumida em todo o mundo, sendo utilizada na alimentação humana para vários fins. No Brasil,

a área plantada de tomate em 2012 foi de 57.867 ha, com produção de 3.664.299 t e rendimento

de 63.323 Kg/ha, sendo os Estados de Goiás e São Paulo os maiores produtores, com áreas

plantadas de 14.028 e 10.160 ha, respectivamente (Barbosa et al. 2011, Guo et al. 2013, IBGE

2013).

Contudo, na cultura do tomateiro podem ocorrer muitos insetos-praga, os quais interferem e

limitam a produção. Entre eles, estão os vetores de viroses, tais como: Frankliniella schultzei

(Trybom) (Thysanoptera: Thripidae), Myzus persicae (Sulzer) (Hemiptera: Aphididae) e Bemisia

tabaci biótipo B (Genn.) (Hemiptera: Aleyrodidae). Os principais danos causados por essas

pragas estão relacionados à sucção de seiva e a transmissão de fitoviroses, as quais interferem no

desenvolvimento das plantas, bem como reduzem drasticamente a produção (Lima et al. 2001,

Kurozawa & Pavan 2005, Borbón et al. 2006, Fornazier et al. 2010).

Dentre as medidas utilizadas para reduzir ou minimizar as perdas causadas por esses

insetos-praga no cultivo do tomateiro, os inseticidas sintéticos são adotados como uma das

principais alternativas para manejar as populações (Raetano et al. 2003, Fornazier et al. 2010).

Cabe ressaltar que o manejo de pragas de ciclo curto, a exemplo das três espécies vetoras de

virose, é necessário, pois se desenvolvem rapidamente nas condições climáticas da maioria dos

locais de cultivo do tomateiro (Pinent & Carvalho 1998, Chagas Filho et al. 2005, Oriani et al.

2011). Mediante essa dinâmica populacional, além de outros fatores relacionados às técnicas de

manejo, o surgimento de populações resistentes aos inseticidas sintéticos é favorecido devido à

necessidade de aplicações frequentes (Nimbalkar et al. 2009).

73

O manejo fitossanitário de pragas é uma técnica para substituir ou reduzir o uso de

inseticidas sintéticos, propiciando uma agricultura sustentável e com potencial de exportação dos

produtos (Maniania et al. 2003). Dentre os métodos de manejo de pragas, tem-se o controle

biológico com fungos entomopatogênicos, os quais são importantes agentes de controle natural,

sendo que alguns, como Beauveria bassiana (Bals.) Vuill e Metarhizium anisopliae (Metsch.)

Sorok., apresentam, entre outras características, a facilidade de produção, aplicação e são atóxicos

aos humanos, possibilitando o seu uso em grandes áreas (Lopes et al. 2000). De acordo com

Medeiros et al. (2007) e Alves et al. (2008), atualmente estes agentes são utilizados no manejo de

insetos-praga agrícolas de muitas ordens e espécies.

O isolado RSB de B. bassiana nas concentrações de 1 x 104 e 1 x 10

7 conídios/mL

proporcionou mortalidade em F. occidentalis (Pergande) de 69 e 96%, respectivamente (Gao et

al. 2012). Loureiro & Moino Jr. (2006) constataram mortalidade de 100% de ninfas de M.

persicae utilizando isolados dos fungos Lecanicillium lecanii (Zimm.) Zare & Gams, M.

anisopliae e B. bassiana na concentração de 1 x 106 conídios/mL. Em outro estudo, foi observada

CL50 de 4,3 x 105 conídios/mL do isolado Unioeste 43 de M. anisopliae sobre ninfas de terceiro

ínstar de B. tabaci (Potrich et al. 2011). Contudo, além dos isolados, estudos avaliando

formulações comerciais de fungos entomopatogênicos também devem ser testadas, para validar o

uso desses bioinseticidas, e consequentemente favorecer a implementação de programas de

controle biológico de insetos-praga.

Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar bioinseticidas comerciais formulados com os

fungos entomopatogênicos B. bassiana (Boveril® WP), M. anisopliae (Metarril

® WP e Metarril

®

SC) e L. longisporum (Petch) Zare & Gams (Vertirril®

WP) visando ao manejo de insetos vetores

de viroses no tomateiro.

74

Material e Métodos

O experimento foi conduzido no Setor de Entomologia do Núcleo de Desenvolvimento

Científico e Tecnológico em Manejo Fitossanitário (NUDEMAFI), no Centro de Ciências

Agrárias da Universidade Federal do Espírito Santo (CCA/UFES), situado em Alegre-ES. Foram

executadas as seguintes etapas:

Obtenção e Criação dos Insetos. F. schultzei foi coletado em flores de plantas de feijão-de-porco

(Canavalia ensiformis L.) no CCA/UFES, M. persicae em plantios de couve-manteiga (Brassica

oleracea L. var. acephala) no município de Alegre-ES (20º 45' 50" S 41º 31' 58" O) e B. tabaci

em plantas de tomate no CCA/UFES.

A metodologia de criação de F. schultzei foi modificada de Morais et al. (2012). Os insetos

foram mantidos em câmara climatizada a 25 ± 1 ºC, umidade relativa de 70 ± 10% e fotofase de

12h, em gaiolas de acrílico de base quadrada de 121,0 cm2 e 3,2 cm de altura. Colocou-se papel

filtro umedecido no fundo da gaiola para manter a umidade. Para alimentação das ninfas ofereceu-

se a cada dois dias uma folha cotiledonar de feijão-de-porco com aproximadamente 18 cm de

altura. Estas folhas foram coletadas deixando-se aproximadamente 3 cm do pecíolo para a

inserção, primeiramente, em chumaço de algodão, e em seguida, em frascos anestésicos de 0,7 x

5,0 cm (diâmetro e altura) contendo água deionizada para manter sua turgescência. As plantas

foram cultivadas em bandejas de isopor de 72 células contendo mistura de solo e esterco bovino

na proporção de 6:1.

As gaiolas foram fechadas com filme plástico contendo pequenos furos feitos com um

alfinete entomológico. Após a cópula (48h após a emergência dos adultos), fêz-se a sexagem,

colocando-se 60 fêmeas em cada gaiola. Para alimentação ofereceu-se diariamente uma folha

cotiledonar de feijão-de-porco e pólen de mamona (Ricinus communis L.) para aumentar o

75

desempenho reprodutivo das fêmeas. Em seguida, as posturas foram coletadas diariamente e

transferidas para novas gaiolas (Morais et al. 2012).

A criação de M. persicae foi realizada em câmara climatizada a 25 ± 1 ºC, umidade relativa

de 70 ± 10% e fotofase de 12h, sobre discos foliares de couve-manteiga orgânica de 8,0 cm de

diâmetro, dentro de placas de Petri de 9,0 x 1,3 cm (diâmetro e altura) revestidas com papel filtro.

A cada dois dias, os insetos foram transferidos para placas esterilizadas, as quais continham novos

discos foliares (Pinheiro et al. 2013).

A criação de B. tabaci foi realizada dentro de gaiolas de metal (1,0 x 1,0 x 0,8 m) revestidas

com tela anti-afídeo. Os adultos foram mantidos em uma gaiola em sala climatizada a 25 ± 2 ºC,

umidade relativa de 70 ± 10% e fotofase de 12h e as ninfas em duas gaiolas em casa telada com

temperatura entre 16 e 41 ºC. Diariamente, uma planta de tomateiro da cultivar “Alambra F1”,

cultivada em vaso de dois litros contendo mistura de solo e esterco bovino na proporção de 6:1 foi

oferecida aos adultos para alimentação e postura (Baldin et al. 2007).

Obtenção dos Fungos Entomopatogênicos. Foram utilizados bioinseticidas comerciais

formulados com os fungos entomopatogênicos B. bassiana (Boveril® WP, isolado PL63), M.

anisopliae (Metarril® WP e Metarril

® SC, isolado E9) e L. longisporum (Vertirril

® WP, isolado

ESALQ-1300), os quais foram obtidos da empresa Itaforte/Koppert (Itapetininga-SP).

Avaliação da Patogenicidade. Para preparar as suspensões com as formulações, a massa dos

produtos foi pesada em balança de precisão. Para padronização das concentrações das suspensões

em 107 conídios/mL, foram pesados 20 g de Boveril

® WP e Vertirril

® WP (1 x 10

8 conídios/g) e

14,39 g de Metarril® WP (1,39 x 10

8 conídios/g) e foi adicionado água deionizada esterilizada

(ADE) mais espalhante adesivo Tween®

(E) 80 a 0,01% (ADE + E) até o volume de 200 mL. Para

o produto Metarril® SC (1 x 10

9 conídios/mL) foi pipetado 2 mL e adicionado ADE + E até o

volume de 200 mL (Zago 2008). Na testemunha utilizou-se ADE + E. A viabilidade dos conídios

76

foi quantificada pelo método da germinação, sendo considerados viáveis quando apresentaram

taxa de germinação de pelo menos 90% (Silva et al. 2003).

Usou-se no bioensaio de F. schultzei ninfas entre 48 e 72h de idade, no primeiro-segundo

ínstares (Pinent & Carvalho 1998). Em placas de Petri (9,0 x 1,3 cm) revestidas com papel filtro,

dez ninfas de F. schultzei foram transferidas para a face abaxial de folhas cotiledonares de feijão-

de-porco (repetição) com o auxílio de um pincel de cerdas finas e um funil branco com o bico

cortado, devido à agilidade dos insetos. As suspensões foram aplicadas em ambos os lados das

folhas. Um chumaço de algodão foi colocado no pecíolo da folha de feijão-de-porco e este foi

introduzido em frasco anestésico contendo água deionizada para manter a turgescência da folha.

As placas foram fechadas com filme plástico contendo seis furos feitos com um alfinete

entomológico para possibilitar trocas gasosas (Pinheiro et al. 2013).

No bioensaio com M. persicae foram usadas ninfas entre 24 e 48h de idade, no primeiro-

segundo ínstares (Chagas Filho et al. 2005). Dez insetos foram colocados na face abaxial dos

discos foliares de couve orgânica medindo 4,5 cm de diâmetro (repetição) em placas de Petri (9,0

x 1,3 cm) revestidas com papel filtro. As suspensões foram aplicadas em ambos os lados das

folhas e a placa de Petri foi fechada (Pinheiro et al. 2013).

Para a aplicação das suspensões, as folhas contendo os insetos foram pulverizadas em sala

climatizada, usando torre de Potter com pressão de 15 lb/pol2 e 6 mL de suspensão para cada lado

da folha, tendo-se depositado um volume médio de 1,62 mg/cm2 (Rondelli et al. 2011). As placas

foram mantidas em câmara climatizada a 25 ± 1 ºC, umidade relativa de 70 ± 10% e fotofase de

12h. As folhas foram trocadas no segundo dia, e novamente quando necessário. A mortalidade foi

avaliada até o sétimo dia, caracterizada pela total imobilidade dos insetos quando tocados com um

pincel de cerdas macias. As ninfas mortas foram transferidas para câmara úmida para confirmação

do agente causal.

77

Para os experimentos com B. tabaci, plantas de tomateiro da cultivar “Alambra F1” com 30

dias de idade em vasos de um litro, contendo mistura de solo e esterco bovino na proporção de 6:1

foram mantidas por 48h na gaiola de adultos da praga para oviposição. Estas plantas foram

levadas para casa telada e quando as ninfas estavam no segundo ínstar, as suspensões dos fungos

foram aplicadas em sala climatizada, usando aerógrafo (Super Tool®) com bico de 0,35 mm

acoplado a um compressor (Wraight et al. 2000). O bico do pulverizador foi posicionado à

distância de 25 cm das folhas e ambos os lados foram pulverizadas até o escorrimento. O

experimento foi mantido em sala climatizada a 25 ± 2 ºC, umidade relativa de 70 ± 10% e fotofase

de 12h. A avaliação da mortalidade foi efetivada no sétimo dia, sendo avaliados quatro discos (2,8

cm2) de folíolos da terceira e quarta folhas da planta (repetição). As ninfas vivas foram

diferenciadas das mortas por se manterem túrgidas e estarem em estádio de desenvolvimento mais

avançado. Calculou-se a média de ninfas mortas dos quatro discos foliares por repetição (Bleicher

et al. 2007, Islam et al. 2010). As ninfas mortas foram transferidas para câmara úmida para

confirmação do agente causal.

Para todos os bioensaios utilizou-se o delineamento experimental inteiramente casualizado,

com 10 repetições. A mortalidade corrigida foi calculada pela fórmula de Abbott (1925) e a

mortalidade confirmada pela porcentagem de insetos nos quais ocorreu conidiogênese. Os dados

foram transformados para arcsen (x/100)1/2

quando não apresentaram distribuição normal ou

homogeneidade de variância. Posteriormente, foram submetidos à análise de variância (ANOVA)

e, quando detectada diferença estatística, as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% de

probabilidade, utilizando o programa R (Ferreira et al. 2011).

Estimativa das Concentrações Letais (CL50 e CL90). A estimativa das CL50 e CL90 foi feita com

os fungos mais eficientes, baseando-se na mortalidade confirmada das pragas. Esta etapa do

bioensaio foi realizada de acordo com os procedimentos descritos na etapa destinada a avaliação

78

da patogenicidade. Para a estimativa das concentrações letais foram utilizadas oito concentrações

espaçadas em escala logarítmica, sendo os limites inferior (concentração que causa a morte de

aproximadamente 15% dos insetos) e superior (concentração que causa a morte de

aproximadamente 95% dos insetos) determinados mediante ensaios preliminares (Tabela 1). Na

testemunha foi utilizada ADE + E. Utilizou-se o delineamento experimental inteiramente

casualizado com cinco repetições. As CL50 e CL90 foram estimadas usando a análise de Probit

com auxílio do programa Polo-PC (Finney 1971, LeOra Software 1987).

Resultados e Discussão

Avaliação da Patogenicidade. Todos os fungos foram patogênicos aos três vetores de viroses

(Tabela 2). A maior mortalidade corrigida a F. schultzei foi proporcionada por M. anisopliae,

utilizando o produto Metarril®

WP (88,6%) (F3, 36 = 20,78; P < 0,0001), e a maior mortalidade

confirmada também foi proporcionada pelo fungo M. anisopliae, no entanto, utilizando os

produtos Metarril® WP e Metarril

® SC (71,8 e 60,6%, respectivamente) (F3, 36 = 12,35; P <

0,0001) (Tabela 2). Resultado semelhante foi observado por Lopes et al. (2000), utilizando o

isolado 1104 de M. anisopliae nas concentrações de 5,0 x 106 e 1,0 x 10

8 conídios/mL sobre o

tripes F. occidentalis em parcelas de cultivos de alface hidropônico, onde a eficiência de controle

alcançou 60% após seis dias da primeira aplicação, sendo que na testemunha observou-se um

aumento populacional da praga de 46,5%. Em outro estudo, o isolado V275 de M. anisopliae, na

concentração de 1,0 x 1010

conídios/L de composto para crescimento de plantas, foi mais eficiente

do que os ingredientes ativos imidacloprid e fipronil no controle de F. occidentalis. No tratamento

com o fungo observou-se mortalidade de aproximadamente 80%, enquanto que com os produtos

químicos a mortalidade foi de aproximadamente 40%. Também verificou-se que o fungo foi

compatível com estes inseticidas sintéticos (Ansari et al. 2007).

79

No Quênia, M. anisopliae e o inseticida químico dimetoato (Rogor®

50) foram avaliados

por três temporadas no manejo de Thrips tabaci Lind. (Thysanoptera: Thripidae) em cebola.

Maior rendimento dos bulbos foi obtido nos tratamentos com o fungo e o inseticida, no entanto,

com exceção de aranhas, as densidades de organismos não-alvo foram maiores nas parcelas

tratadas com M. anisopliae do que em parcelas tratadas com o inseticida. Assim, ao se utilizar este

fungo entomopatogênico no manejo da praga ocorre a vantagem da proteção da biodiversidade no

agroecossistema cebola (Maniania et al. 2003).

No tratamento com B. bassiana (Boveril® WP) sobre F. schultzei observou-se mortalidade

corrigida e confirmada de apenas 33,3 e 27,0%, respectivamente (Tabela 2). Niassy et al. 2012

também observaram baixa virulência do isolado ICIPE 620 de B. bassiana sobre ninfas de

segundo ínstar de F. occidentalis (CL50 de 1,44 x 109 conídios/mL). Contudo, o isolado RSB de B.

bassiana nas concentrações de 1 x 104 e 1 x 10

7 conídios/mL proporcionou mortalidade deste

inseto de 69 e 96%, respectivamente (Gao et al. 2012). Assim, a diferença na virulência de B.

bassiana provavelmente está relacionada ao isolado utilizado.

Em relação a M. persicae, L. longisporum, produto Vertirril®

WP e M. anisopliae, produtos

Metarril® WP e Metarril

® SC causaram maior mortalidade corrigida (100, 100 e 98,2%,

respectivamente) (F3, 36 = 171,36; P < 0,0001) e confirmada (98,2, 97,5 e 91,9%, respectivamente)

(F3, 36 = 93,55; P < 0,0001) (Tabela 2). A patogenicidade de fungos entomopatogênicos também

foi avaliada sobre ninfas de terceiro ínstar de M. persicae, onde L. lecanii, M. anisopliae e B.

bassiana na concentração de 1 x 106 conídios/mL causaram mortalidade de 100% dos insetos

(Loureiro & Moino Jr. 2006). A eficiência de controle de M. persicae por B. bassiana (isolado

CG 864) em suspensão aquosa (71,0%) não diferiu das dispersões em óleo Natur’l Oil ou em

adjuvante (87,1 e 84,9%, respectivamente) (Michereff Filho et al. 2011).

80

B. bassiana (Boveril®

WP) sobre M. persicae causou mortalidade corrigida de 51,9%

(Tabela 2). Este resultado assemelha-se aos encontrados por Michereff Filho et al. (2011), onde o

isolado PL63 de B. bassiana (isolado utilizado na formulação de Boveril® WP) apresentou

eficiência de controle de 56,7% sobre M. persicae (adultos e ninfas). Contudo, o isolado J57 de B.

bassiana na concentração de 1 x 107 conídios/mL foi mais eficiente, sendo observada mortalidade

de 100% deste inseto (Vu et al. 2007).

A mortalidade corrigida de B. tabaci não diferiu entre os dois produtos avaliados (F1, 18 =

1,00; P = 0,3306), sendo as mortalidades causadas por M. anisopliae (Metarril® WP) e B.

bassiana (Boveril® WP) de 100 e 99,6%, respectivamente. A mortalidade confirmada também não

diferiu (F1, 18 = 3,38; P = 0,0826). B. bassiana (Boveril® WP) causou mortalidade confirmada a B.

tabaci de 90,8% (Tabela 2), contudo, Potrich et al. (2011) observaram menor mortalidade

confirmada de ninfas de B. tabaci utilizando os isolados Unioeste 47 e Unioeste 57 de B. bassiana

(1,0 x 109 conídios/mL), sendo os valores de 84,1 e 76,8%, respectivamente. M. anisopliae

(Metarril® WP) causou mortalidade confirmada a B. tabaci de 95,8% (Tabela 2), no entanto,

Potrich et al. (2011) observaram valores inferiores de mortalidade confirmada de ninfas de B.

tabaci utilizando os isolados Unioeste 43 e E9 (isolado utilizado na formulação de Metarril® WP)

de M. anisopliae (71,0 e 23,2%, respectivamente). Estas diferenças de mortalidade podem ser

devido ao isolado, à formulação, a concentração do fungo, ao estádio de desenvolvimento do

inseto e ao seu hospedeiro, pois Potrich et al. (2011) fizeram o teste com insetos no terceiro ínstar

sobre plantas de couve, ao passo que nesse trabalho foram utilizados insetos no segundo ínstar em

tomateiro.

Estimativa das Concentrações Letais (CL50 e CL90). A CL50 de M. anisopliae, formulação

Metarril®

WP (9,13 x 105 conídios/mL) sobre F. schultzei foi 2,1 vezes menor comparada com a

formulação Metarril® SC (1,94 x 10

6 conídios/mL), contudo não diferiu de acordo com o intervalo

81

de confiança a 95% de probabilidade (IC a 95%) (Tabela 3). A reta de concentração-mortalidade

de M. anisopliae, formulação Metarril®

WP, foi mais inclinada (1,24) comparada à formulação

Metarril® SC (0,72), de acordo com o erro-padrão. Niassy et al. (2012), utilizando o isolado

ICIPE 69 de M. anisopliae sobre ninfas de segundo ínstar de F. occidentalis observaram valor de

CL50 de 1,0 x 107 conídios/mL, portanto mais alta do que a CL50 deste fungo (Metarril

® WP e

Metarril® SC) em F. schultzei (Tabela 3). Estes mesmos autores constataram que o valor de

inclinação da reta do isolado ICIPE 69 de M. anisopliae sobre F. occidentalis foi de 2,1, ou seja,

mais inclinada do que a deste fungo (Metarril® WP e Metarril

® SC) em F. schultzei (Tabela 3).

Retas mais inclinadas proporcionam maior variação na mortalidade da praga em função da

variação da concentração do fungo.

Considerando M. persicae, a menor CL50 foi proporcionada pelo fungo L. longisporum

(Vertirril® WP) (1,58 x 10

4 conídios/mL) e a razão de toxicidade em relação a M. anisopliae

(Metarril® SC) foi de 12,5 vezes. No entanto, a menor CL90 foi proporcionada pelos fungos L.

longisporum (Vertirril® WP) e M. anisopliae (Metarril

® WP) (6,34 x 10

5 e 6,24 x 10

5

conídios/mL, respectivamente) (Tabela 4). A reta de concentração-mortalidade mais inclinada foi

observada com M. anisopliae (Metarril®

WP) (1,69) e a menos inclinada com L. longisporum

(Vertirril® WP) (0,80) (Tabela 4). O isolado Ma 3619 de M. anisopliae sobre M. persicae

apresentou CL50 de 4 conídios/mm2 após oito dias, enquanto CL50 de 717 conídios/mm

2 foi

observada utilizando o isolado Mac 3391 (Shan & Feng 2010). De acordo com Roditakisa et al.

(2008), o fungo L. longisporum além de ser virulento para M. persicae, também afeta o

comportamento deste pulgão, diminuindo a excreção de “honeydew” (alimentação) dois dias após

a inoculação e a taxa de reprodução dois dias antes da morte. Também observaram o aumento da

movimentação no início da infecção (durante a germinação e penetração na cutícula), podendo

facilitar na disseminação do fungo na área de cultivo.

82

A CL50 de B. bassiana (Boveril® WP) (7,96 x 10

4 conídios/mL) e de M. anisopliae

(Metarril® WP) (7,49 x 10

4 conídios/mL) sobre B. tabaci não diferiu. A CL90 de B. bassiana

(Boveril® WP) (5,47 x 10

5 conídios/mL) e de M. anisopliae (Metarril

® WP) (7,62 x 10

5

conídios/mL) também não diferiu de acordo com o IC a 95% (Tabela 5). O valor de CL50 de B.

bassiana (Boveril® WP) foi menor do que a dos isolados Unioeste 47 e Unioeste 57 de B.

bassiana sobre ninfas de terceiro ínstar de B. tabaci (4,1 x 105 e 1,8 x 10

5 conídios/mL,

respectivamente) e do isolado EABb 01/110-Su de B. bassiana sobre ninfas de quarto ínstar de B.

tabaci (6,53 x 105 conídios/mL) (Quesada-Moraga et al. 2006, Potrich et al. 2011). A CL50 de M.

anisopliae (Metarril®

WP) (Tabela 5) também foi menor do que a dos isolados E9 e Unioeste 43

de M. anisopliae sobre em ninfas de terceiro ínstar de B. tabaci (7,8 x 108 e 4,3 x 10

5

conídios/mL, respectivamente) (Potrich et al. 2011). A reta de concentração-mortalidade de B.

bassiana (Boveril®

WP) foi mais inclinada (1,53) comparada a de M. anisopliae (Metarril®

WP)

(1,27), de acordo com o erro-padrão (Tabela 5). Ela também foi mais inclinada em relação a do

isolado EABb 01/110-Su (0,44) (Quesada-Moraga et al. 2006).

Pode-se concluir que, baseado na CL50, M. anisopliae (Metarril® WP e Metarril

® SC) é o

fungo mais virulento para F. schultzei; L. longisporum (Vertirril® WP) é mais virulento para M.

persicae; e B. bassiana (Boveril® WP) e M. anisopliae (Metarril

® WP) são igualmente virulentos

para B. tabaci.

Agradecimentos

À Reestruturação e Expansão das Universidades Federais/Coordenação de

Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (REUNI/CAPES) pela concessão de bolsa de

estudos ao primeiro autor; ao Programa de Pós-graduação em Entomologia Agrícola da

Universidade Federal Rural de Pernambuco (PPGEA/UFRPE) e ao Núcleo de Desenvolvimento

83

Científico e Tecnológico em Manejo Fitossanitário do Centro de Ciências Agrárias da

Universidade Federal do Espírito Santo (NUDEMAFI-CCA/UFES) por apoiarem o

desenvolvimento dessa pesquisa; ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e

Tecnológico (CNPq) e à Fundação de Amparo a Pesquisa do Espírito Santo (FAPES) pelo apoio

financeiro.

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87

Tabela 1. Limites inferior e superior das concentrações dos fungos entomopatogênicos Beauveria bassiana (Boveril® WP),

Metarhizium anisopliae (Metarril® WP e Metarril

® SC) e Lecanicillium longisporum (Vertirril

® WP), em conídios/mL, para estimativa

das concentrações letais (CL50 e CL90) sobre ninfas de Frankliniella schultzei, Myzus persicae e Bemisia tabaci.

Fungos F. schultzei M. persicae B. tabaci

B. bassiana (Boveril® WP)

1

1 1,0 x 10

4 – 1,0 x 10

7

L. longisporum (Vertirril® WP)

1 3,9 x 10

2 – 1,2 x 10

7

1

M. anisopliae (Metarril® WP) 1,0 x 10

4 – 3,2 x 10

7 1,0 x 10

3 – 3,2 x 10

6 3,2 x 10

3 – 3,2 x 10

7

M. anisopliae (Metarril® SC) 3,2 x 10

3 – 3,2 x 10

7 3,2 x 10

3 – 3,2 x 10

7

1

1Não se avaliou.

88

Tabela 2. Mortalidade corrigida (MCORR) e confirmada (MCONF) (%) de ninfas de Frankliniella schultzei, Myzus persicae e

Bemisia tabaci causada pelos fungos entomopatogênicos Beauveria bassiana (Boveril®

WP), Metarhizium anisopliae (Metarril® WP e

Metarril® SC) e Lecanicillium longisporum (Vertirril

® WP) (10

7 conídios/mL), após sete dias.

Fungos

F. schultzei M. persicae B. tabaci

MCORR1

MCONF1, 2

MCORR1, 2

MCONF1, 2

MCORR1, 2

MCONF1

B. bassiana (Boveril® WP) 33,3 ± 4,61 c 27,0 ± 3,59 b 51,9 ± 3,62 b 23,0 ± 3,69 b 99,6 ± 0,38 a 90,8 ± 2,23 a

L. longisporum (Vertirril® WP) 59,2 ± 3,56 b 34,1 ± 5,74 b 100,0 ± 0,00 a 98,2 ± 1,28 a

3 3

M. anisopliae (Metarril® WP) 88,6 ± 5,03 a 71,8 ± 7,08 a 100,0 ± 0,00 a 97,5 ± 1,28 a 100,0 ± 0,00 a 95,8 ± 1,53 a

M. anisopliae (Metarril® SC) 68,3 ± 6,50 b 60,6 ± 5,57 a 98,2 ± 1,82 a 91,9 ± 2,86 a

3 3

1Médias (± EP) (n = 10 repetições) seguidas por mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo teste F ou de Tukey a 5% de probabilidade.

2Para análise, os dados foram transformados para arcsen (x/100)1/2.

3Fabricação suspensa.

89

Tabela 3. Virulência do fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae (Metarril®

WP e Metarril® SC) sobre ninfas de 48-72h

de idade, primeiro-segundo ínstares, de Frankliniella schultzei, após sete dias. Temp.: 25 ± 1 ºC, UR: 70 ± 10% e 12h de fotofase.

1Número de insetos usados no bioensaio.

2Erro-padrão (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo erro-padrão).

3Concentrações letais (CL50 e CL90) e intervalo de confiança das CL50 e CL90 a 95% de probabilidade (IC a 95%) (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não

diferem entre si pelo IC a 95%).

4Razão de toxicidade = maior CL50/menor CL50.

5Qui-quadrado e graus de liberdade.

7A CL90 e o IC a 95% não puderam ser estimados devido à baixa virulência do fungo.

Fungo N1 Inclinação ± EP

2 CL50 (IC a 95%)

3 (conídios/mL) CL90 (IC a 95%)

3 (conídios/mL) RT50

4

2 (GL)

5

M. anisopliae

(Metarril® WP)

349 1,24 ± 0,22 a 9,13 x 105 (3,45 x 10

5 – 1,61 x 10

6) a 9,80 x 10

6 (6,13 x 10

6 – 1,94 x 10

7) 2,1 1,97 (5)

M. anisopliae

(Metarril® SC)

358 0,72 ± 0,13 b 1,94 x 106 (6,88 x 10

5 – 4,11 x 10

6) a

7 – 1,44 (5)

90

Tabela 4. Virulência dos fungos entomopatogênicos Lecanicillium longisporum (Vertirril® WP) e Metarhizium anisopliae

(Metarril®

WP e Metarril®

SC) sobre ninfas de 24-48h de idade, primeiro-segundo ínstares, de Myzus persicae, após sete dias. Temp.:

25 ± 1 ºC, UR: 70 ± 10% e 12h de fotofase.

1Número de insetos usados no bioensaio.

2Erro-padrão (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo erro-padrão).

3Concentrações letais (CL50 e CL90) e intervalo de confiança das CL50 e CL90 a 95% de probabilidade (IC a 95%) (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não

diferem entre si pelo IC a 95%).

4Razão de toxicidade = maior CL50/outras CL50.

5Qui-quadrado e graus de liberdade.

Fungos N1 Inclinação ± EP

2 CL50 (IC a 95%)

3 (conídios/mL) CL90 (IC a 95%)

3 (conídios/mL) RT50

4

2 (GL)

5

L. longisporum

(Vertirril® WP)

407 0,80 ± 0,09 c 1,58 x 104 (7,77 x 10

3 – 2,80 x 10

4) a 6,34 x 10

5 (3,29 x 10

5 – 1,52 x 10

6) a 12,5 5,51 (6)

M. anisopliae

(Metarril® WP)

413 1,69 ± 0,24 a 1,09 x 105 (6,98 x 10

4 – 1,52 x 10

5) b 6,24 x 10

5 (4,29 x 10

5 – 1,09 x 10

6) a 1,8 1,92 (6)

M. anisopliae

(Metarril® SC)

399 1,14 ± 0,15 b 1,97 x 105 (9,67 x 10

4 – 3,32 x 10

5) b 2,64 x 10

6 (1,59 x 10

6 – 5,20 x 10

6) b – 2,35 (6)

91

Tabela 5. Virulência dos fungos entomopatogênicos Beauveria bassiana (Boveril®

WP) e Metarhizium anisopliae (Metarril®

WP) sobre ninfas de segundo ínstar, de Bemisia tabaci, após sete dias. Temp.: 25 ± 2 ºC, UR: 70 ± 10% e 12h de fotofase.

1Número de insetos usados no bioensaio.

2Erro-padrão (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não diferem entre si pelo erro-padrão).

3Concentrações letais (CL50 e CL90) e intervalo de confiança das CL50 e CL90 a 95% de probabilidade (IC a 95%) (médias seguidas por mesma letra, na coluna, não

diferem entre si pelo IC a 95%).

4Razão de toxicidade = maior CL50/menor CL50.

5Qui-quadrado e graus de liberdade.

Fungos N1 Inclinação ± EP

2 CL50 (IC a 95%)

3 (conídios/mL) CL90 (IC a 95%)

3 (conídios/mL) RT50

4

2 (GL)

5

B. bassiana

(Boveril® WP)

2118 1,53 ± 0,06 a 7,96 x 104 (6,61 x 10

4 – 9,59 x 10

4) a 5,47 x 10

5 (4,21 x 10

5 – 7,46 x 10

5) a – 4,65 (4)

M. anisopliae

(Metarril® WP)

2482 1,27 ± 0,05 b 7,49 x 104 (6,42 x 10

4 – 8,71 x 10

4) a 7,62 x 10

5 (6,23 x 10

5 – 9,53 x 10

5) a 1,06 2,27 (5)

92

CONSIDERAÇÕES FINAIS

Os resultados demonstram que os extratos botânicos, com destaque para o de fumo,

possuem potencial de uso no manejo de insetos vetores de viroses no tomateiro. No entanto, o

principal composto tóxico presente no extrato de fumo, a nicotina, é inclusive, prejudicial aos

mamíferos. Assim, o uso de equipamentos de proteção individual (EPI) são necessários, inclusive

quando outros extratos botânicos são manuseados. Vale ressaltar que os extratos etanólicos são de

difícil preparo e onerosos, em relação aos extratos aquosos. O ácido ricinoléico (derivado da

mamona) também apresenta essas desvantagens.

Considerando os fungos entomopatogênicos, os dados confirmam o potencial de uso no

manejo de insetos vetores de viroses no tomateiro, e apresentam a vantagem de serem patogênicos

apenas a insetos e ácaros.

No entanto, os resultados mais promissores devem ser estudados em estufa e no campo para

confirmar a importância desses tratamentos no manejo fitossanitário dos vetores de viroses no

tomateiro, contribuindo para evitar o surgimento de populações resistentes aos inseticidas

químicos (método geralmente adotado), e aprimorar as formas de manejo desses insetos-praga,

baseando principalmente em cultivos que adotem as boas práticas agrícolas e tenham como base a

agricultura orgânica.


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