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Biossíntese e Genética de Imunoglobulinas e Receptor para
Ags em Linfócitos T (TCR):-
BCR e Acs / TCR e Linfs. T
1
Prof. Helio José [email protected]
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Imunoglobulinas, BCR (Acs) e TCR
Moléculas Receptoras p/ o reconhecimento de Antígenos
Ligação (Ag-Ac) Específica(BCR-Ag / TCR-Ag+MHC)Marcadores Celulares
BCR-Ig Linf. B
TCR Linf. T2
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A superfície do sítio
combinatório do Ac,
especialmente ao nível das
CDRs de VH e de VL são as
partes mais importantes
para conferir especificidade
na interação específica com
cada epítopo de um Ag
•A forma e as cargas elétricas e/ou sítios para estabelecer forças eletrostáticas,
pontes de hidrogênio, interações hidrofóbicas e de Var der Waals das CDRs de VH
e de VL que constituem o sítio combinatório de um dado Ac, determinam qual o
epítopo que será ligado pelo mesmo.
•A forma e as cargas elétricas dependem das sequências de Aminoácidos que
compõem cada CDR para interagir com aminoácidos ou monossacarídeos que
compõem os epítopos de Ags.
• Teoricamente cerca de 1013 especificidades (sítios combinatórios) diferentes de
Acs para se combinar com cerca de 1013 epítopos diferentes de Ags;
Bases da Especificidade do Sítio Combinatório dos Anticorpos
3
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Epítopo do AntígenoParátopo do Anticorpo /BCR
Regiões VH / VL
Forças
Eletrostáticas
Pontes de
Hidrogênio
Interações
Hidrofóbicas
Forças de Van der Waals
Forças
Eletrostáticas
O que confere Especificidade nas Interações entre Antígenos e Anticorpos / BCR
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• Nos domínios variáveis de cadeia leve (VL) e pesada (VH) existem 3 regiões
hipervariáveis (HV), que formam as regiões determinantes de
complementariedade (CDR ou RDC) e são apresentados na superfície de uma
molécula de anticorpo.
• Estas CDRs formam a superfície de ligação para o antígeno.
• As CDRs são ladeadas por seqüências de aminoácidos mais conservados,
chamadas de regiões “Framework”, responsáveis pela estabilidade estrutural do
domínio de ligação do antígeno
Bases da Especificidade do Sítio Combinatório dos Anticorpos
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Fig. - Existem determinadas
áreas de hipervariabilidade
(CDRs) nos domínios
variáveis das cadeias H e L
das Igs (VH e VL).
6
Regiões mais conservadas –
Frameworks – ladeando as regiões
hipervariáveis
CDRs / HVs
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7
1013 diferentes especificidades de Acs em um vertebrado.
- Muito espaço no genoma seria utilizado se cada Ac fosse
codificado por um gene contínuo.
- Na verdade existem menos de 1000 genes codificando esse nº de
Acs com diferentes especificidades.
Diversidade dos Anticorpos (Acs)
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8
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9
Fluxo da Informação Gênica em Células
Eucariotas
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10
Fluxo da Informação Gênica em Células
Eucariotas
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RESUMINDO:- Conceitos Básicos para Entender
as Bases Genéticas da Diversidade dos BCRs e
dos Anticorpos
• Regiões variáveis e constantes coexistem nas cadeias leves (L) e
pesadas (H) de uma mesma molécula proteica de Imunoglobulina /
Anticorpo / BCR e são codificadas por diferentes regiões gênicas (exons).
•Genes das cadeias pesadas (H) estão localizadas em cromossomos
diferentes daqueles onde estão localizados os genes codificadores das
cadeias leves (L).
•Ocorrem rearranjos (recombinações somáticas) para reunir as regiões
gênicas codificadoras (exons) dos genes codificadores das cadeias H e
L dos BCRs / Anticorpos.
•As cadeias polipeptídicas H e L dos Anticorpos devem ser
sintetizadas, nos ribossomos dos linfócitos B separadamente e depois
agrupadas por pontes dissulfeto.11
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12
Estrutura dos genes/Ig
• Cadeias leves L
• Cadeias pesadas H
• Genes
– as regiões V e C e as cadeias L e H são
codificadas por genes diferentes
Região variável – V
Região constante – C
L
V; J; C
V; J; C
H VH ;DH; JH; CH
C - IgA
C - IgM
C - IgG
C - IgD
C - IgE
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Organização dos loci das Ig
13
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Organização dos genes de imunoglobulinas na linhagem germinativa
1- Múltiplos genes: V, D, J e C para cadeia H e genes V e J para cadeia L, que
estão separadas por regiões gênicas não codificadoras (Introns)
2- Diversidade combinatória: aleatória V-D-J para cadeia H e V-J para
cadeia L
3- Diversidade juncional: gera códons diferentes
Rearranjo impreciso DNA: exonucleases.
Diversidade região N: TT (dioxiribonucleotidil transferase terminal)
4 – Combinação de diferentes cadeias leves e cadeias pesadas das Igs
5- Mutação somática: ocorre no momento da duplicação do DNA em respostas
imunes humorais secndárias
14
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Recombinação V(D)J – Gene Cadeia H• Recombinação ao acaso
• Rearranjos de DNA tornam os genes V, D e J contíguos
• Quebra na dupla hélice do DNA
– Adição ou remoção de nucleotídeos
15
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16
Resumo – Organização dos Genes de Imunoglobulinas
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17
Recombinação e expressão dos genes da cadeia L e H das Ig
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Recombinação e expressão dos
genes da cadeia L e H das Ig
18
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19
Relação entre Principais Genes Codificadores de cadeias H e L de
Imunoglobulinas e as Regiões dessas Cadeias Polipeptídicas
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“Switching” / Mudança de Isótipo / Classe de Ig / Ac
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21
Indução da Produção e da Troca de Classes de Anticorpos
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Fig. - Troca de classes (isótipos) de Igs depende de recombinação entre sinais específicos.
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Fig. 8.9. Isotype switching is preceded by transcriptional activation of CH genes.
Resting naive B cells transcribe the m and d loci at a low rate, giving rise to surface IgM and IgD. Bacterial lipopolysaccharide
(LPS), which can activate B cells independently of antigen (see Section 8-10), induces IgM secretion. In the presence of IL-4,
however, Cg1 and Ce are transcribed at a low rate, presaging switches to IgG1 and IgE production. The transcripts originate 5¢ of
the region to which switching occurs, and do not code for protein. Similarly, TGF-b gives rise to Cg2b and Ca transcripts, and
drives switching to IgG2b and IgA. It is not known what determines which of the two transcriptionally activated CH gene
segments undergoes switching. Arrows indicate transcription.
23
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TCR –
Receptor para Reconhecimento de Ags
em Células T
24
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Estrutura de um receptor de célula T
25
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O receptor de célula T é semelhante a um fragmento Fab de imunoglobulina associado a membrana celular
O receptor de célula T se assemelha aum fragmento Fab ligado a membrana
26
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Estrutura de um receptor de célula T
27
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Ag
28
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29
![Page 30: Biossíntese e Genética de Imunoglobulinas e Receptor para ... · Slide 7/54 Major ... Somente gêmeos monozigóticos humanos têm idênticos HLA A população humana é extensivamente](https://reader031.vdocuments.com.br/reader031/viewer/2022022111/5c22b69209d3f280688c56fa/html5/thumbnails/30.jpg)
30
Genes das Cadeias α e β do TCR
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31
![Page 32: Biossíntese e Genética de Imunoglobulinas e Receptor para ... · Slide 7/54 Major ... Somente gêmeos monozigóticos humanos têm idênticos HLA A população humana é extensivamente](https://reader031.vdocuments.com.br/reader031/viewer/2022022111/5c22b69209d3f280688c56fa/html5/thumbnails/32.jpg)
32
Números dos segmentos gênicos do receptor de célula T e suas fontes de
diversidade em comparação aos receptores BCR de imunoglobulinas nos
seres humanos.
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Complexo Principal de Histocompatibilidade – CPH /
MHC
33
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Complexo Principal de Histocompatibilidade –MHC
• Descoberta
• Histórico
34
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© [email protected] 2000. Slide 7/54
Major Histocompatibility Complex – MHC
Complexo Principal de Histocompatibilidade
Em humanos o MHC é chamado Antígeno de Leucócitos Humanos
- HLA
Somente gêmeos monozigóticos humanos têm idênticos HLA
A população humana é extensivamente heterozigota
A genética do MHC em humanos é extremamente complexa
Em camundongos o MHC é chamado H-2
Animais (Receptor e Doador) de Linhagens identicas em H-2
não desenvolvem reação de rejeição de enxertos de pele, enquanto que
Animais de Linhagens diferentes em H-2 desenvolvem reação de rejeição
de enxertos de pele.
41
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Os Genes no loci MHC codificam a maioria das proteinas que fazem parte da maquinária do processamento e apresentação de Ags.
Os genes do locus MHC
42
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43
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Fig. - Estrutura Molecular do MHC de Classe I
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Fig. - Estrutura Molecular do MHC de Classe II49
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A EXPRESSÃO DAS MOLÉCULAS DO MHC DIFERE ENTRE OS TECIDOS.
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Células Apresentadoras Profissionais de Ags
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Patógenos e seus Ags podem ser encontrados nos Compartimentos
Citosólico (Patógeno Endógeno) ou Vesicular (Patógenos
Exógenos) das Células Apresentadoras de Ags
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© [email protected] 2000. Slide 53/54
•Transplant rejection occurs as a result of anti MHC immune responses
•The MHC was discovered using inbred strains of mice
•T cells recognise antigens in the context of MHC molecules
•MHC molecules bind to peptide antigens
•The structure of MHC molecules is directly related to their function in
antigen presentation
•Polymorphism and polygenism in the MHC protects the population from
pathogens evading the immune system
Summary:
• A rejeição a transplantes ocorre como resultado de respostas imunes anti-
MHC.
• O MHC foi descoberto em experimentos com linhagens isogênicas de
camundongos.
• As Cels. T reconhecem antígenos no contexto das moléculas do MHC.
• As moléculas de MHC se ligam a antígenos peptídicos.
•A estrutura das moléculas de MHC está diretamente relacionada a suas
funções na apresentação de antígenos para o TCR dos Linfócitos T.
•Polimorfismo e poligenismo nos genes e moléculas do MHC garante uma
grande diversidade e uma maior capacidade de resistência / sobrevivência entre
a população de organismos hospedeiros contra os mecanismos de virulência ou
de evasão de um grande diversidade de agentes infecciosos.
RESUMO - MHC
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