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PERGUNTAS DE GENTICA
Que tipo de mutaes causa o 5-bromouracilo? Transies
Imprinting genmico regulao epigentica
Genes reprter genes que permitem detectar promotores
Enhancer cadeias de DNA no codificantes
RNA guias - RNA editing
FALSA: necessria hidrlise de GTP no final da traduo
Anel deslizante - processividade da enzima
FALSA: na cadeia de DNA as bases azotadas esto para fora
Mutaes que criam codo stop - nonsense
Chromossome walking refere -se a Isolamento de fragmentos de DNAadjacentes
Para a identificao de um gene com anticorpos - necessrio que ele esteja
clonado num vector de expresso
No opero do triptofano - ocorre atenuao quando os ribossomas sintetizam
completamente um pptido leader
FALSA: A enzima RecA participa no mismatch repair
Imunoglobulinas - variabilidade por causa dos arranjos do DNA
FALSA: oncogenes precisam de ter os dois alelos activados para causar
tumores
FALSA: basta um gene supressor de tumores defeituoso para causar cancro
Inverso DNA recombinao especfica entre sequncias repetidas
Transposes bacterianos regulao por molculas de RNA
FALSA: hepnavirus tem RNA de dupla hlice
Letalidade sinttica 2 mutaes que quando ocorrem ao mesmo tempo so
letais para o ser vivo
cII provoca a lisogenizao do fago lambda porque activa cI
Yeast two hybrid system detectar interaces entre protenas
Heteroduplex resulta do fenmeno de migrao dos ramos
Pergunta de RNA riboswitch e outra RNAi
PRTICA
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I. Pergunta sobre caractersticas dos plasmdeos (indicar a falsa) Tm grande peso
molecular
II. Alnea certa: 0,5 ml em 1 hora
III. 2 enzimas. A: 4, 3, 3 kb. B: 2.5 e 7.5 kb
a. Mapa de restrio: 2.5/1.5/3/3
b. Ligase unia o DNA (ficava circular) e depois usava-se novamente as enzimas de
retrio. Indicar os fragmentos obtidos: 1.5, 3 e 5.5 kb
IV. Pergunta escolha mltipla sobre o PCR: alnea sobre os oligonucletidos
V. Pergunta sobre trabalho de 2-AP. 2 estirpes mutadas no opero lacZ (original CTA)
no conseguem fazer metabolismo de lactose. So tratados com 2-AP (mutagneo),para tentar que ela reconverta os genes mutados para a forma original. Depois as
estirpes so colocadas num meio com lactose para ver se ocorreu mutao de volta ao
normal
a. Calcular a taxa de reverso para as 2 estirpes
ESTIRPE A: 2 colnias
ESTIRPE B: 35 colnias
Concentrao: 108 UFC/ml
Volume: 0.1 ml
A: 2/(108 x 0.1) = 2 x 10-7
B: 35/(108 x 0.1) = 3.5 x 10-6
b. GENE ORIGINAL: CTA
GENE POSSVEL PARA A: CGA (ou uma transverso equivalente)
GENE POSSVEL PARA B: CCA (ou uma transcrio equivalente)
2-AP s reverte transies. Como a estirpe B tem mais colnias, significa que
houve mais reverses, ou seja a estirpe B tem um gene que sofreu transio
em relao ao original. Estirpe A tem poucas colnias, isto significa que a 2-AP
no conseguiu reverter, logo o gene de A sofreu uma transverso (ou
adio/deleco de pares de bases, ) em relao ao gene original (NUNCA
UMA TRANSCRIO). As 2 colnias que aparecem foram devidas a mutaes
espontneas.
c. Taxa de resistncia rifampicina (antibitico) igual ou diferente nas 2
estirpes? igual. Estirpes so iguais excepto no gene que metaboliza a lactose(lacZ). Como os genes que conferem resistncia rifampicina no esto no
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gene lacZ, a probabilidade de ocorrer uma mutao espontnea que confira
resistncia ao antibitico igual nas 2 estirpes.
VI. Tem a ver com o trabalho prtico n 6 TRANSFORMAO DE CLULAS BACTERIANAS
COM DNA PLASMDICO(aconselho a ver o trabalho e os clculos efectuados na aula,
porque esta parte est incompleta)
a. Calcular a eficincia de transformao: 1.4 x 106
b. (Pergunta incompleta) Houve uns que foram colocados num meio com 1
antibitico (cresceram 700) e outros que foram colocados num meio com 2
antibiticos (cresceram 250). 700 corresponde ao nr total e 250 ao nmero de
transformados (que so resistentes ao s 2 antibiticos). Era para calcular uma
taxa: 250/700 = 36%