Bruno Rafael A. da Silva Bruno Rafael A. da Silva –– Especialista em Soluções EnzimáticasEspecialista em Soluções Enzimáticas

DETERGENTES ENZIMÁTICOS PARA O DETERGENTES ENZIMÁTICOS PARA O PROCESSAMENTO DE ARTIGOS HOSPITALARESPROCESSAMENTO DE ARTIGOS HOSPITALARES

1. ENZIMAS1. ENZIMAS

O QUE SÃO? COMO AGEM? O QUE SÃO? COMO AGEM?

2. LIMPEZA2. LIMPEZA

O QUE É?; ÁGUA; DETERGENTES;O QUE É?; ÁGUA; DETERGENTES;

TópicosTópicos

O QUE É?; ÁGUA; DETERGENTES;O QUE É?; ÁGUA; DETERGENTES;

3. DETERGENTES ENZIMÁTICOS3. DETERGENTES ENZIMÁTICOS

AÇÃO; QUALIDADE OU QUANTIDADE? AÇÃO; QUALIDADE OU QUANTIDADE?

4. CONSIDERAÇÕES FINAIS4. CONSIDERAÇÕES FINAIS

5. DÚVIDAS5. DÚVIDAS

Enzimas são....Enzimas são....

•• SubstânciasSubstâncias naturaisnaturais envolvidasenvolvidas emem todostodos osos processosprocessosbioquímicosbioquímicos queque ocorremocorrem nasnas célulascélulas vivasvivas convertendoconvertendonutrientesnutrientes emem energia,energia, criandocriando novasnovas estruturasestruturas celularescelulares..

NÃO SÃO VIVAS!!!NÃO SÃO VIVAS!!!

�� São proteínas.São proteínas.

�� São específicas... São específicas...

�� São TOTALMENTE BIODEGRADÁVEISSão TOTALMENTE BIODEGRADÁVEIS

GENERICAMENTE....GENERICAMENTE....

�� São catalisadoresSão catalisadores

BiodegradávelBiodegradável

�� Obtidas por processos biológicosObtidas por processos biológicos

Principal capacidade que lhe confere aplicação comercial !!!Principal capacidade que lhe confere aplicação comercial !!!

Normalmente fermentação de microorganismos.Normalmente fermentação de microorganismos.

�� Enzimas são EXTREMAMENTE EFICIENTES...Enzimas são EXTREMAMENTE EFICIENTES...

…se tratadas corretamente ! …se tratadas corretamente !

�� São TOTALMENTE BIODEGRADÁVEISSão TOTALMENTE BIODEGRADÁVEIS BiodegradávelBiodegradávelSubstância que se decompõe pela ação de microorganismos.Substância que se decompõe pela ação de microorganismos.

Mais detalhes a seguir...Mais detalhes a seguir...

�� Possuem condições brandas para aplicaçãoPossuem condições brandas para aplicação

� Polímeros de aminoácidos ligados entre si por ligações peptídicas

PROTEÍNASPROTEÍNAS

� Aumentando o número de aminoácidos na seqüência – formam-se estruturas

complexas.

Aminoácidos – Compostos químicos que apresentam em sua formula um grupo amino e um carboxilíco.

� Estrutura primária: Seqüência dos aminoácidos;

� Estrutura secundária: Organização espacial dos aminoácidos

(Interações de curta distância);

� Estrutura terciária: Enrolamento das cadeias, devido interações internas como

pontes de ‘H’ ou de ‘S’. (Interações de longa distância).

Esta estrutura traz propriedades biológicas.

PROTEÍNASPROTEÍNAS

� Estrutura quaternária: A junção de 2 ou mais cadeias polipeptídicas traz um

desenho tridimensional específico para cada enzima.

Esta estrutura é guiada e estabilizada pela estrutura terciária.

DESNATURAÇÃO DE PROTEÍNASDESNATURAÇÃO DE PROTEÍNAS

• Interações estruturais espaciais das proteínas são muito sensíveis.

• Alterações bruscas do meio como temperatura, força iônica e pH podem

proporcionar alteração deste equilíbrio, ocasionando rompimento das

estruturas tridimensionais da Proteína, precipitando-a.

• A precipitação forma um composto de característica sólida.

Exemplo: Ovo Frito. Exemplo: Ovo Frito.

Diminui a energia de ativação para ocorrência de uma reação química,

aumentando assim a velocidade desta reação, sem ser consumido durante

o processo.

ENZIMASENZIMAS têm a capacidade de catalisar a reação de degradação de

matéria orgânica.

CATALISADORCATALISADOR

matéria orgânica.

...Ilustração da diminuição de energia de ativação para ocorrência de uma reação,

a qual é conseguida pela inclusão de um catalisador

• De acordo com o tipo de reação em que catalisam:

Oxidorredutases; Transferases, Hidrolases*; Liases; Isomerases e Ligases

*Hidrolase é a classe das enzimas utilizadas em detergentes. Refere

a toda enzima que catalisa uma ligação de hidrólise.

CLASSIFICAÇÃO DAS ENZIMASCLASSIFICAÇÃO DAS ENZIMAS

a toda enzima que catalisa uma ligação de hidrólise.

Hidrólise – Quebra de uma ligação química com a inclusão de uma molécula de água.

• Nomenclatura:

O substrato preferente + o tipo de reação catalizada + terminação “ase”

Ex: Proteína Hidrolase = Protease

...Exemplo de uma reação de hidrólise.

ESPECIFICIDADEESPECIFICIDADE•• CapacidadeCapacidade catalisarcatalisar somentesomente umum tipotipo dede reaçãoreação..

•• DeveDeve--sese aa umauma regiãoregião emem suasua superfíciesuperfície conhecidaconhecida comocomo sítiosítio dede ligaçãoligação aoao

substrato,substrato, ouou ‘Sítio‘Sítio Ativo’Ativo’..

SítioSítio ativoativo:: RegiãoRegião nana enzimaenzima queque ageage atravésatravés dede interaçõesinterações iônicasiônicas // eletrostáticaseletrostáticas

comcom oo substratosubstrato promovendopromovendo aa açãoação catalíticacatalítica.. AA indicaçãoindicação maismais simplessimples parapara oo

sítiosítio ativoativo éé aa dodo sistemasistema chavechave fechadurafechadura.. AssimAssim comocomo aa fechadurafechadura ‘reconhece’‘reconhece’

aa chavechave correta,correta, aa enzimaenzima tambémtambém oo fazfaz comcom seuseu substratosubstrato..

AA integridadeintegridade dada moléculamolécula enzimáticaenzimática éé essencialessencial àà atividadeatividade catalíticacatalítica..

SubstratoSubstratoS

SubstratoSS

CLASSE CLASSE ENZIMÁTICAENZIMÁTICA

PEPTIDASESPEPTIDASES

NO DIANO DIA--AA--DIA:DIA:

SangueSangue ((HemoglobinaHemoglobina e e FibrinaFibrina), ), pelepele

REMOÇÃO DEREMOÇÃO DE

ProteínaProteína

ENZIMASENZIMAS

PROTEASESPROTEASES((SavinaseSavinase e e LiquanaseLiquanase))

Como é a ação específica das Enzimas?Como é a ação específica das Enzimas?

GLICOSIDASESGLICOSIDASES(CARBOHIDRASES)(CARBOHIDRASES)

ESTEARASESESTEARASES

MucoMuco, , SecreçõesSecreções

FezesFezes / bolo fecal, bolo / bolo fecal, bolo alimentaralimentar

GordurasGorduras

AmidoAmido

CeluloseCelulose

LipídeosLipídeos

AMILASESAMILASES((TermamylTermamyl e e DuramylDuramyl) )

CELULASESCELULASES((EndolaseEndolase))

LIPASELIPASE

Enzimas Enzimas –– Carbohidrases (Slide especial)Carbohidrases (Slide especial)

AMILASES / CELULASES

Hidrolise de Carbohidratos

CARBOHIDRASES

Amilase

Amido Monossacarídeos solúveis em água

Celulose (insolúvel em água)

CelulaseCelulose (solúvel em água)

•• AsAs enzimasenzimas trabalhamtrabalham emem condiçõescondições brandasbrandas ee bastantebastante abrangenteabrangente dede pHpH

ee temperaturatemperatura::

TemperaturaTemperatura ~~ 1010 àà 6060ºCºC pH ~ 5 à 11

APLICAÇÃOAPLICAÇÃO

Variação da atividade enzimática x pHVariação da atividade enzimática x temperatura

CUIDADOSCUIDADOS

Os aminoácidos em Os aminoácidos em azulazul estão localizados perto uns dos outros na forma ativa, estão localizados perto uns dos outros na forma ativa, porém não estão assim na forma desnaturadaporém não estão assim na forma desnaturada

Os aminoácidos em Os aminoácidos em azulazul estão localizados perto uns dos outros na forma ativa, estão localizados perto uns dos outros na forma ativa, porém não estão assim na forma desnaturadaporém não estão assim na forma desnaturada

SubstratoSubstratoS

SubstratoSS

Alta Alta temperaturtemperaturaaAlta Alta temperaturtemperaturaa

Se alterar a estrutura, perde sua função.... Se alterar a estrutura, perde sua função.... ((ovoovo fritofrito) ) Se alterar a estrutura, perde sua função.... Se alterar a estrutura, perde sua função.... ((ovoovo fritofrito) )

SSSAlta Alta temperaturtemperaturaa

AtaqueAtaque químicoquímico (PH, (PH, oxidaçãooxidação,…),…)

Alta Alta temperaturtemperaturaa

AtaqueAtaque químicoquímico (PH, (PH, oxidaçãooxidação,…),…)

AÇÃOAÇÃO

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P = Componentes de uma cadeia protéica.P = Componentes de uma cadeia protéica.

E = Enzimas (Proteases) agindoE = Enzimas (Proteases) agindo

LimpezaLimpeza

Primeira e mais importante etapa para a eficácia dos procedimentosde desinfecção e esterilização.

Obtida através da lavação* dos artigos / instrumentais.

*Lavação: Limpar banhando, tirar com água as impurezas de....*Lavação: Limpar banhando, tirar com água as impurezas de....

*Fonte: (http://michaelis.uol.com.br/moderno/portugues/)

LimpezaLimpeza

POR QUÊ NÃO LAVAR O INSTRUMENTALUSANDO SOMENTE ÁGUA?

Por causa da tensão superficial !

Gota de água (líquido de alta tensão superficial)

O

O

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O O

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OO

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Superfície do líquido

Moléculas da superfície são atraídas para dentro da solução

Força resultante para o interior do líquido.

Aumentar a

Ar

Tensão SuperficialTensão Superficial

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O OOO

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Moléculas do interior sofrem atração de todos os lados

Aumentar a superfície do líquido vai contra esta força.

Tensão superficial.Água

Média tensão superficial

Alta tensão superficial

Baixa umectação

Tensão SuperficialTensão Superficial

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Média tensão superficial

Média umectação

Baixa tensão superficial

Alta umectação

ÁguaÁgua + + SujeiraSujeira

DetergenteDetergenteTensoativo

Apolar PolarH2O

Micela

1.1. TensoativasTensoativas::

Tensoativos AniônicosTensoativos Aniônicos

Tensoativos Não IônicosTensoativos Não Iônicos

Tensoativos CatiônicosTensoativos Catiônicos

Matérias Primas de um DetergenteMatérias Primas de um Detergente

2. Coadjuvantes:2. Coadjuvantes:

EspessantesEspessantes

SequestrantesSequestrantesTensoativos CatiônicosTensoativos Catiônicos SequestrantesSequestrantes

EstabilizantesEstabilizantes

ConservantesConservantes

AditivosAditivos

SolventesSolventes

EnzimasEnzimas

Corantes, EssênciaCorantes, Essência

Detergentes....Detergentes....

DetergenteDetergente comumcomum –– AçãoAção

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DetergenteDetergente comumcomum –– AçãoAção

�� OO sanguesangue éé compostocomposto porpor proteínasproteínasdede altoalto pesopeso molecular,molecular, garantindogarantindoforteforte atraçãoatração aoao instrumental,instrumental,dificultandodificultando aa formaçãoformação dede umaumadificultandodificultando aa formaçãoformação dede umaumamicelamicela completacompleta pelospelos tensoativostensoativos e,e,conseqüentemente,conseqüentemente, comprometendocomprometendoaa suasua remoçãoremoção dodo instrumentalinstrumental

Detergentes EnzimáticosDetergentes Enzimáticos

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! OU SEJA, INSTRUMENTAL TOTALMENTE LIMPO!

Detergentes Enzimáticos Detergentes Enzimáticos -- AçãoAção

27

E AS ENZIMAS CONTINUAM ATIVAS

QUANTIDADEQUANTIDADEOU OU

Detergentes EnzimáticosDetergentes Enzimáticos

2 Enzimas

20% de Enzimas

50% de Enzimas

OU OU QUALIDADEQUALIDADE

5 Enzimas

1 Enzimas3 Enzimas4 Enzimas

10% de Enzimas

60% de Enzimas

• Boa procedência das matérias-primas;

Produção de acordo com legislações Pertinentes;

• Quanto maior o desenvolvimento tecnológico, melhor o resultado prático;

• Atividade da enzima pura conhecida e QuantidadeQuantidade

QualidadeQualidade

• Atividade da enzima pura conhecida e documentada.

• Testes de comprovação de estabilidade e manutenção de atividade enzimática.

• A quantidade usada na formulação vai depender da “qualidade” da enzima utilizada. Do respeito aos procedimentos indicados.

• O maior teor adicionado não garante maior qualidade.

QuantidadeQuantidade

•• MATÉRIA ORGÂNICA PRESENTE EM INSTRUMENTAISMATÉRIA ORGÂNICA PRESENTE EM INSTRUMENTAIS

A MAIOR QUANTIDADE DE MATÉRIA A MAIOR QUANTIDADE DE MATÉRIA ORGÂNICA É ORIUNDA DE SANGUE ORGÂNICA É ORIUNDA DE SANGUE ––PROTEÍNA.PROTEÍNA.

PROTEÍNAPROTEÍNA SANGUE / PELE / SANGUE / PELE / TECIDOSTECIDOS

Quantas enzimas usar?Quantas enzimas usar?

AMIDOAMIDO SECREÇÕES / SECREÇÕES / MUCOMUCO

O SANGUE É COMPOSTO POR O SANGUE É COMPOSTO POR DIFERENTES TIPOS DE PROTEÍNAS DIFERENTES TIPOS DE PROTEÍNAS ––FIBRINA E HEMOGLOBINAFIBRINA E HEMOGLOBINA

CELULOSECELULOSE BOLO ALIMENTAR BOLO ALIMENTAR / BOLO FECAL/ BOLO FECAL

LIPÍDEOSLIPÍDEOS GORDURASGORDURAS

CADA PROTEASE TEM AÇÃO CADA PROTEASE TEM AÇÃO MELHOR SOBRE UMA MELHOR SOBRE UMA PROTEÍNA.PROTEÍNA.

DESTE MODO INDICADESTE MODO INDICA--SE A SE A CONJUGAÇÃO DAS PROTEASES CONJUGAÇÃO DAS PROTEASES

PROTEASE 1

PROTEASE 2

Diferentes proteases...Diferentes proteases...

CONJUGAÇÃO DAS PROTEASES CONJUGAÇÃO DAS PROTEASES VISANDO REMOÇÃO MAIS VISANDO REMOÇÃO MAIS EFICAZ DE TODO O SANGUE.EFICAZ DE TODO O SANGUE.

DifferentDifferent NovozymesNovozymes proteasesproteases werewere testedtested atat roomroom temperaturetemperature ((2222C)C) forfor bloodblood removalremoval efficiencyefficiency usingusing thethe TOSITOSI testtest.. TheThe testtest waswas carriedcarried outout inin bufferedbuffered waterwater

atat pHpH88 andand detergentdetergent pHpH88.. AfterAfter 3030 minutesminutes thethe testtest waswas stoppedstopped asas thethe timetime forfor removalremoval ofof bloodblood waswas consideredconsidered tootoo longlong.. TheThe testtest waswas carriedcarried outout underunder

acceleratedaccelerated conditionsconditions withwith aa inin useuse concentrationconcentration ofof proteasesproteases ofof 1010%% FibrinFibrin andand hemoglobinhemoglobin removalremoval waswas assessedassessed byby HemocheckHemocheck testtest..

PROTEASE 3

PROTEASE 4

• É necessária utilização de detergente profissional, desenvolvido especificamente para opropósito;

• Limpeza ineficaz acarreta em contaminação do instrumental. (Não há desinfecção deinstrumental sujo)

• Tensoativos não conseguem emulsionar (solubilizar) eficazmente matéria orgânica comoproteína, gordura e polissacarídeos.

• ENZIMAS DEGRADADAS = ENZIMAS INATIVAS = DETERGENTE COMUM. (Lembrar doOvo Frito !);

• Enzimas são facilitadores do processo de limpeza, degradam a matéria orgânica que é

Recordar é viver.....Recordar é viver.....

• Enzimas são facilitadores do processo de limpeza, degradam a matéria orgânica que émais facilmente removida pelo detergente.

• A quantidade de enzima expressa (%), não corresponde a atividade da enzima nasolução (Atividade Enzimática);

• A conjugação de duas proteases pode trazer incremento na remoção de sangue (fibrinae hemoglobina);

• O número de diferentes enzimas e a quantidade de cada enzima depende da finalidade eda formulação de cada detergente. Mito: ‘Mais do que três enzimas é apenas apelo demarketing’;

PERGUNTAS ???PERGUNTAS ???

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MUITO OBRIGADO !!!MUITO OBRIGADO !!!

Bruno Rafael A. da Silva Bruno Rafael A. da Silva –– Especialista em Soluções EnzimáticasEspecialista em Soluções EnzimáticasContato: bruno.silva@quimisa.com.brContato: bruno.silva@quimisa.com.br

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